NL1019705C2 - Method for assessing the effectiveness of a treatment of a crude drug to enhance the anti-tumor activity, and method for assessing the anti-tumor effectiveness of a raw drug. - Google Patents

Description

I»I »

WERKWIJZE TER BEOORDELING VAN DE EFFECTIVITEIT VAN EEN BEHANDELING VAN EEN RUW GENEESMIDDEL TER VERSTERKING VAN DE ANTITUMORACTIVITEIT, EN WERKWIJZE TER BEOORDELING VAN DE 5 ANTITUMOREFFECTIVITEIT VAN EEN RUW GENEESMIDDELMETHOD OF ASSESSING THE EFFECTIVITY OF A TREATMENT OF A RAW MEDICINAL FOR STRENGTHENING ANTI-TUMOR ACTIVITY, AND METHOD OF ASSESSING THE ANTITUMORE EFFECTIVITY OF A RAW MEDICINAL

ACHTERGROND VAN DE UITVINDINGBACKGROUND OF THE INVENTION

Deze uitvinding heeft betrekking op technieken zoals een werkwijze ter beoordeling en dergelijke van de antitumoractiviteit van ruwe geneesmiddelen zoals padde-10 stoelen die polysacchariden met antitumoractiviteit bevatten, in het bijzonder op technieken voor het versterken van het tot uiting komen van antitumoreffecten bij inwendige toediening, of voor het voorspellen van de effectiviteit van de antitumoractiviteit bij inwendige toediening en 15 dergelijke.This invention relates to techniques such as a method for evaluating and the like of the anti-tumor activity of raw drugs such as mushrooms containing polysaccharides with anti-tumor activity, in particular to techniques for enhancing the expression of anti-tumor effects upon internal administration, or for predicting the effectiveness of anti-tumor activity with internal administration and the like.

Tot nu toe zijn diverse soorten paddestoelen gebruikt op het gebied van de Chinese geneesmiddelen, gezondheidsvoedsel of dergelijke. Zo is bijvoorbeeld bekend dat paddestoelen zoals Ganoderma (Fomes), Poria, maitake 20 (Grifola frondosu Dickson) en dergelijke antitumoractiviteit hebben zoals carcinostatische activiteit etc. Veel onderzoeken hebben zich bezig gehouden met effectieve bestanddelen van paddestoelen die antitumoractiviteit vertonen, en algemeen wordt gesteld dat in paddestoelen 25 aanwezige polysacchariden effectieve antitumoractiviteit laten zien.To date, various types of mushrooms have been used in the field of Chinese medicines, health foods or the like. For example, it is known that mushrooms such as Ganoderma (Fomes), Poria, maitake (Grifola frondosu Dickson) and the like have anti-tumor activity such as carcinostatic activity etc. Many studies have been concerned with effective components of mushrooms that exhibit anti-tumor activity, and it is generally stated that polysaccharides present in mushrooms demonstrate effective anti-tumor activity.

Op het gebied van Chinese geneesmiddelen worden gedroogde paddestoelen afgekookt en inwendig gebruikt door het afkooksel te drinken.In the field of Chinese medicines, dried mushrooms are boiled off and used internally by drinking the decoction.

' ·.’ v 2"·." V 2

Tot nu toe zijn diverse soorten Chinese geneesmiddelen als natuurlijke geneesmiddelen gebruikt omdat ze minder bijwerkingen hebben dan synthetische geneesmiddelen. In de Japanse farmacopee is een aantal Chinese genees-5 middelen beschreven als ruwe geneesmiddelen.Up to now, various types of Chinese medicines have been used as natural medicines because they have fewer side effects than synthetic medicines. In the Japanese pharmacopoeia, a number of Chinese drugs have been described as raw drugs.

Wat de antitumoractiviteiten van dergelijke paddestoelen betreft worden afkooksels of extracten daarvan aan proefdieren zoals muizen toegediend door ze te verwerken in het voer, en muizen van een controlegroep waaraan 10 geen Chinees geneesmiddel wordt toegediend en muizen van een groep waaraan het wel wordt toegediend worden vergeleken en geobserveerd om bijvoorbeeld de verdwijning, de uitzaaiing van kanker, of het levensvatbaarheidspercentage van de muizen te onderzoeken en zo de effectiviteit van het 15 geneesmiddel te onderzoeken.With regard to the antitumor activities of such mushrooms, decoctions or extracts thereof are administered to test animals such as mice by incorporating them into the feed, and mice from a control group to which no Chinese drug is administered and mice from a group to which it is administered are compared and observed to investigate, for example, the disappearance, spread of cancer, or the viability rate of the mice, and thus to investigate the effectiveness of the drug.

Bovendien wordt bij dergelijke proefdieren ook de toxiciteit en de effectiviteit onderzocht, en nadat bevestigd is dat deze geneesmiddelen voldoende veilig zijn voor toepassing bij de mens, worden ze daadwerkelijk inwendig 20 toegediend en wordt de effectiviteit van de antitumoracti-viteit bij de mens uiteindelijk bevestigd met klinische tests.In addition, toxicity and effectiveness are also investigated in such test animals, and once these drugs are confirmed to be sufficiently safe for use in humans, they are actually administered internally and the effectiveness of antitumor activity in humans is ultimately confirmed with clinical tests.

SAMENVATTING VAN DE UITVINDINGSUMMARY OF THE INVENTION

Zoals boven vermeld zijn de antitumoractiviteiten 25 zoals carcinostatisch effect, kankeruitzaaiingsremmend effect etc. van paddestoelen reeds bekend. Paddestoelen worden gebruikt door een gedroogd product ervan af te koken en het afkooksel te drinken, of een met een alcohol etc. geëxtraheerd effectief bestanddeel te mengen met andere 3 0 componenten zoals een vitaminepreparaat om een vorm zoals een gezondheidsdrank, gezondheidsvoedsel of geneeskrachtig middel te maken.As mentioned above, the anti-tumor activities such as carcinostatic effect, cancer metastasis inhibiting effect etc. of mushrooms are already known. Mushrooms are used by boiling a dried product from it and drinking the decoction, or mixing an effective ingredient extracted with an alcohol etc. with other components such as a vitamin preparation to make a form such as a health drink, health food or medicinal agent .

Bij de inwendige toediening zoals het doorgaans uitgevoerde drinken van een afkooksel is het aantal geval-35 len waarin zodanige geneeskrachtige effecten worden verkre- 3 gen dat de therapeutische effecten duidelijk tot uiting komen, onverwacht gering. Bij de agaricus, die onlangs de aandacht heeft getrokken door het bezit van een groot geneeskrachtig effect, kan dezelfde tendens worden waarge-5 nomen. Ook bij de maitake (Grifola frondosu Dickson) die onlangs de aandacht heeft getrokken, zijn weinig voorbeelden als bewijs van zijn geneeskrachtige effecten.In the case of internal administration, such as the usually performed drinking of a decoction, the number of cases in which such medicinal effects are obtained that the therapeutic effects are clearly expressed is unexpectedly small. The same tendency can be observed with the agaricus, which has recently attracted attention by possessing a great medicinal effect. Also with the maitake (Grifola frondosu Dickson) that has recently attracted attention, there are few examples as proof of its medicinal effects.

Weliswaar worden hierbij nooit geneeskrachtige effecten gevonden, maar er is een geval waarin een duide-10 lijk effectieve antitumoractiviteit wordt getoond, zij het in een uiterst beperkt aantal voorbeelden.It is true that medicinal effects are never found, but there is a case where a clearly effective anti-tumor activity is shown, albeit in an extremely limited number of examples.

De uitvinder overwoog dus of er een effectieve manier is om de antitumoractiviteiten van paddestoelen voor iedereen beschikbaar te krijgen door opheldering van het 15 mechanisme waardoor verschillen in uiting van de door de paddestoelen verschafte antitumoreffecten ontstaan.The inventor thus considered whether there is an effective way to make the anti-tumor activities of mushrooms available to everyone by clarifying the mechanism that causes differences in expression of the anti-tumor effects provided by the mushrooms.

Zelfs wanneer de effectiviteit van paddestoelen met antitumoractiviteit worden bevestigd bij proefdieren zoals boven vermeld, kunnen de verwachte effecten in 20 vrijwel geen enkel geval worden aangetoond wanneer de paddestoelen feitelijk inwendig aan de mens worden toegediend. Om die effecten te bevestigen door feitelijke en inwendige toediening in klinische experimenten is het nodig de inwendige toediening een bepaalde tijd voort te zetten 25 met een gecontroleerd toedieningssysteem onder constante omstandigheden en de effecten voortdurend te observeren. Er is dus een aanzienlijke tijd nodig om vast te stellen of de effecten van de paddestoelen al of niet tot uiting komen bij inwendige toediening aan een patiënt.Even when the effectiveness of anti-tumor activity mushrooms is confirmed in experimental animals as mentioned above, the expected effects in virtually no case can be demonstrated when the mushrooms are actually administered internally to humans. To confirm those effects by actual and internal administration in clinical experiments, it is necessary to continue the internal administration for a certain time with a controlled administration system under constant conditions and to constantly monitor the effects. Thus, a considerable time is needed to determine whether or not the effects of the mushrooms are reflected when administered internally to a patient.

30 Een dergelijke werkwijze is zeker effectief, maar om bijvoorbeeld een stof met een effectieve antitumoractiviteit te zoeken door het screenen van een aantal natuurlijke producten is een uitzonderlijk groot aantal dagen nodig zodat het nodig is een techniek te ontwikkelen 35 waarmee antitumoractiviteit binnen kortere tijd kan worden beoordeeld.Such a method is certainly effective, but to search for, for example, a substance with an effective anti-tumor activity by screening a number of natural products, an exceptionally large number of days is required, so that it is necessary to develop a technique with which anti-tumor activity can be achieved in a shorter time. assessed.

44

Wanneer zich. bovendien bij een patiënt die aan een klinische test deelneemt plotseling een complicatie voordoet en er inderhaast een buiten de controle vallende behandeling op de patiënt wordt toegepast, kan met betrek-5 king tot deze patiënt geen bevestiging van effectiviteit worden verkregen. In een klinische test die een lange tijd in beslag neemt, komt een groot aantal gevallen voor waarin bevestiging van effectiviteit niet kan worden verkregen, zodat het niet altijd gemakkelijk is een klinische test 10 lange tijd uit te voeren onder behoud van effectiviteit van de test zelf.When himself. moreover, when a patient taking part in a clinical test suddenly develops a complication and an out-of-control treatment is applied to the patient, no confirmation of effectiveness can be obtained with regard to this patient. In a clinical test that takes a long time, a large number of cases occur where confirmation of effectiveness cannot be obtained, so that it is not always easy to carry out a clinical test for a long time while maintaining the effectiveness of the test itself .

De uitvinder overwoog dus dat het noodzakelijk is een werkwijze te ontwikkelen waarmee bij toediening van een monster aan de mens de uiting van een antitumoreffeet tot 15 op zekere hoogte kan worden voorspeld zonder een dergelijke klinische test uit te voeren.The inventor thus considered that it is necessary to develop a method by which the expression of an anti-tumor effect can be predicted to a certain extent when a sample is administered to humans without performing such a clinical test.

Bovendien zijn als stoffen met antitumoractiviteit in de Chinese geneeskunde behalve paddestoelen een groot aantal materialen bekend als ruwe geneesmiddelen, en het 2 0 heeft meer voorkeur als de oplossing van de bovengenoemde problemen met betrekking tot paddestoelen zich zou kunnen uitstrekken tot alle ruwe geneesmiddelen.In addition, as anti-tumor activity substances in Chinese medicine, a large number of materials are known as raw drugs in addition to mushrooms, and it is more preferable if the solution of the above mushroom problems could extend to all raw drugs.

Een doel van de onderhavige uitvinding is de antitumoractiviteiten van ruwe geneesmiddelen zoals padde-25 stoelen en dergelijke bij toediening aan de mens te kunnen voorspellen zonder klinische tests te hoeven uitvoeren.An object of the present invention is to be able to predict the anti-tumor activities of raw drugs such as mushrooms and the like when administered to humans without having to perform clinical tests.

De bovengenoemde en andere doelen en nieuwe kenmerken van de onderhavige uitvinding worden in detail beschreven in de volgende beschrijving.The above and other objects and novel features of the present invention are described in detail in the following description.

30 De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van een op een ruw< geneesmiddel dat polysacchariden met antitumoractiviteit bevat, toe te passen behandeling op de antitumoractiviteit, waarbij men het ruwe geneesmiddel waarop de 3 5 behandeling is toegepast, toevoegt aan een systeem dat lipideperoxiden vormt door bestraling van een onverzadigd vetzuur zoals docosahexaeenzuur met ultraviolet licht, en 4' 5 het effect van de behandeling ter versterking van de antitumoractiviteit van het bovengenoemde ruwe geneesmiddel als groot beoordeelt als de stijging van de gevormde hoeveelheid van het bovengenoemde lipideperoxide gebaseerd 5 op de stijging van de concentratie van het bovengenoemde ruwe geneesmiddel als gevolg van de behandeling groot is.The present invention relates to a method for assessing the effectiveness of a treatment to be applied to an anti-tumor activity to a crude drug containing polysaccharides with anti-tumor activity, wherein the raw drug to which the treatment is applied is added to a system that forms lipid peroxides by irradiating an unsaturated fatty acid such as docosahexaenoic acid with ultraviolet light, and 4 'considers the effect of the treatment to enhance the anti-tumor activity of the aforementioned crude drug as high as the increase in the amount of the aforementioned lipid peroxide based on the increase in the concentration of the aforementioned crude drug due to the treatment.

De werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit die wordt toegepast op een ruw geneesmiddel dat polysacchariden met antitumoractiviteit bevat is met name 10 een werkwijze, omvattende een roosterstap waarbij het bovengenoemde ruwe geneesmiddel wordt geroosterd met ver-infraroodstralen, en een fermentatiestap waarbij fermentatie plaatsvindt door toevoeging van micro-organismen, ter versterking van de antitumoractiviteit van het bovengenoem-15 de ruwe geneesmiddel ten opzichte van het geval waarin het roosteren en de fermentatie niet worden uitgevoerd.The method for enhancing the anti-tumor activity applied to a crude drug containing polysaccharides with anti-tumor activity is in particular a method comprising a grating step wherein the above-mentioned crude drug is roasted with far-infrared rays, and a fermentation step where fermentation takes place by adding microorganisms, to enhance the anti-tumor activity of the above-mentioned crude drug relative to the case where roasting and fermentation are not performed.

Volgend op de bovengenoemde fermentatiestap omvat bovengenoemde werkwijze eventueel een stap waarbij een olieachtig middel wordt gemaakt, waarbij de bovengenoemde 20 gefermenteerde ruwe geneesmiddelen worden omsloten met een oliecomponent verkregen uit planten zoals met ver-infra-roodstralen geroosterde sesam of iets dergelijks.Following the above-mentioned fermentation step, the above-mentioned method optionally comprises a step in which an oily agent is made, wherein the above-mentioned fermented crude drugs are enclosed with an oil component obtained from plants such as sesame roasted with infra-red rays or the like.

Bij voorkeur wordt bij bovengenoemde werkwijze gebruik gemaakt van een paddestoel die /3-glucan bevat, in 25 het bijzonder ten minste één paddestoel gekozen uit de groep bestaande uit agaricus (Agaricus blazei), maitake (Grifola frondosu), shi-itake (Cortinellus shiitake), matsutake (Tricholoma matsutake), shimejitake (Lyophyllum decastes) en enokitake (Flammulina velutipes).The above-mentioned method preferably uses a mushroom containing 3-glucan, in particular at least one mushroom selected from the group consisting of agaricus (Agaricus blazei), maitake (Grifola frondosu), shi-itake (Cortinellus shiitake ), matsutake (Tricholoma matsutake), shimejitake (Lyophyllum decastes) and enokitake (Flammulina velutipes).

30 Wanneer de bovengenoemde agaricus wordt gebruikt, omvat bovengenoemde werkwijze het met ver-infraroordstralen roosteren van de rauwe agaricus.When the above-mentioned agaricus is used, the above-mentioned method comprises roasting the raw agaricus with far-infrared rays.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de 35 antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel dat polysacchariden met antitumoractiviteit bevat, zonder klinische tests uit te voeren, waarbij men het ruwe geneesmiddel 6 toevoegt aan het systeem dat lipideperoxiden vormt door bestraling van een onverzadigd vetzuur zoals docosahexaeen-zuur met ultraviolet licht, en het effect van de antitumor-activiteit door inwendige toediening van het bovengenoemde 5 ruwe geneesmiddel als groot beoordeelt en voorspelt als de stijging van de gevormde hoeveelheid van het bovengenoemde lipideperoxide gebaseerd op de stijging van de concentratie van het bovengenoemde ruwe geneesmiddel groot is.The present invention relates to a method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a crude drug containing anti-tumor activity polysaccharides, without conducting clinical tests, adding the raw drug 6 to the system that forms lipid peroxides by irradiating an unsaturated fatty acid such as docosahexaenoic acid with ultraviolet light, and appreciates the effect of anti-tumor activity by internal administration of the aforementioned crude drug as large and predicts the increase in the amount of the aforementioned lipid peroxide based on the increase in the concentration of the above crude drug is high.

De uitvinder heeft diverse onderzoeken uitgevoerd 10 aan een remmende stof tegen actieve zuurstof in Chinese geneesmiddelen en via dergelijke onderzoeken heeft hij bevestigd dat actieve zuurstof of lipideperoxiden opmerkelijke effecten hebben op het menselijk lichaam en dat deze stoffen verband houden met afbraak van weefsels in het 15 menselijk lichaam waardoor ze de oorzaak worden van het optreden van verschillende infectieziekten.The inventor has conducted various studies on an inhibitory agent against active oxygen in Chinese drugs and through such studies has confirmed that active oxygen or lipid peroxides have remarkable effects on the human body and that these substances are related to tissue degradation in the human body, making them the cause of various infectious diseases.

In de weefsels van het menselijk lichaam komt een enzym genaamd SOD (superoxidedismutase) voor dat de weefsels van het menselijk lichaam beschermt tegen dergelijke 20 actieve zuurstof en dat de actieve zuurstof verwijdert. De hoeveelheid SOD neemt af met de leeftijd waardoor verwijdering van de actieve zuurstof in het lichaam niet langer kan worden uitgevoerd. Het afnemen van SOD is met name aanzienlijk bij een leeftijd van 40 jaar of ouder, waardoor 25 verwijdering van de actieve zuurstof in het lichaam niet langer in voldoende mate kan worden uitgevoerd. In de afgelopen jaren is opgehelderd dat dit de oorzaak is van diverse ziekten bij volwassenen.In the tissues of the human body there is an enzyme called SOD (superoxide dismutase) that protects the tissues of the human body against such active oxygen and that removes the active oxygen. The amount of SOD decreases with age so that removal of the active oxygen in the body can no longer be performed. The reduction of SOD is particularly significant at the age of 40 or older, as a result of which removal of the active oxygen in the body can no longer be carried out to a sufficient extent. It has been clarified in recent years that this is the cause of various diseases in adults.

Wanneer bovendien een overmatige hoeveelheid 30 actieve zuurstof in het lichaam wordt gevormd door chronische of acute stimulering of als gevolg van een chemische stof etc., kan de actieve zuurstof met de vanaf het begin in het lichaam voorkomende hoeveelheid SOD niet in voldoende mate worden verwijderd, zodat de persoon in kwestie aan 35 verschillende ziekten lijdt.Moreover, when an excessive amount of active oxygen in the body is formed by chronic or acute stimulation or as a result of a chemical, etc., the active oxygen with the amount of SOD occurring in the body from the outset cannot be sufficiently removed, so that the person in question suffers from 35 different diseases.

Voor verschillende ziekten die worden veroorzaakt door onvoldoende verwijdering van de actieve zuurstof als ' V..'· : j) 7 gevolg van een gebrek aan SOD is een behandeling door toediening van SOD óverwogen om het gebrek aan SOD aan te vullen. Bij een dergelijke behandelingsmethode kunnen echter effecten worden verwacht in het geval van een 5 geneesmiddel voor injectie, maar kunnen geen aanzienlijke effecten worden verwacht in het geval van een inwendig geneesmiddel, zodat de huidige toestand is dat de effecten nog niet zijn bewezen.For various diseases caused by inadequate removal of the active oxygen as 'V ..' ·: j) 7 due to a lack of SOD, treatment by administering SOD is considered to make up for the lack of SOD. However, with such a treatment method, effects can be expected in the case of a drug for injection, but no significant effects can be expected in the case of an internal drug, so that the current state is that the effects have not yet been proven.

Met betrekking tot het punt dat de effecten als 10 inwendig geneesmiddel niet tot uiting komen, heeft de uitvinder gevonden dat SOD niet bestand is tegen maagsap en dat het molecuulgewicht van SOD 30.000 of meer is en dat het daarom als zodanig niet uit de spijsverteringsorganen kan worden geabsorbeerd. Ook heeft hij gevonden dat de 15 werking aan beperkingen onderhevig is en dat SOD van de bestaande vier soorten actieve zuurstof alleen werkt op superoxide (02') .With regard to the point that the effects as internal medicine are not expressed, the inventor has found that SOD is not resistant to gastric juice and that the molecular weight of SOD is 30,000 or more and therefore cannot be extracted as such from the digestive organs absorbed. He has also found that the operation is restricted and that SOD of the existing four types of active oxygen only works on superoxide (02 ').

De uitvinder heeft onderzoek verricht naar een stof die een overmaat actieve zuurstof in het menselijk 20 lichaam kan verwijderen en die inwendig kan worden toegediend, en als resultaat heeft hij gevonden dat een preparaat dat plantaardige olie bevat die is verkregen van een geroosterde plant en die wordt toegevoegd aan een stof verkregen door plantenzaden of hun kiemen onder geschikte 25 omstandigheden te roosteren en daarna te fermenteren door het toevoegen van micro-organismen, kan worden gebruikt als een middel ter verwijdering van actieve zuurstof dat effectief is bij inwendig gebruik (zie Japans octrooischrift 2135887) .The inventor has investigated a substance that can remove an excess of active oxygen in the human body and can be administered internally, and as a result has found that a preparation containing vegetable oil obtained from a roasted plant and which is added to a substance obtained by roasting plant seeds or their germs under suitable conditions and then fermenting by adding microorganisms, can be used as an agent for removing active oxygen which is effective for internal use (see Japanese patent 2135887 ).

30 In de bovengenoemde plantenzaden of hun kiemen komen inherent laagmoleculaire stoffen tegen actieve zuurstof voor zoals flavonoïden, polyfenolen, tannine, tocoferol, vitamine B2, etc. De uitvinder heeft gevonden dat dergelijke laagmoleculaire stoffen tegen actieve 35 zuurstof chemisch onderling of met de andere componenten binden, een moleculaire verbinding genereren of een ingewikkeld complex of een macromoleculaire verbinding vormen 8 door adsorptie of insluiting, en dat wanneer ze in een dergelijke toestand worden ingenomen geen actieve-zuurstof onderdrukkende werking kan worden verkregen die te verwachten is van een laagmoleculaire stof tegen actieve zuurstof.The above-mentioned plant seeds or their germs inherently contain low-molecular substances against active oxygen such as flavonoids, polyphenols, tannin, tocopherol, vitamin B2, etc. The inventor has found that such low-molecular substances against active oxygen bind chemically with each other or with the other components. , generate a molecular compound or form a complex complex or macromolecular compound 8 by adsorption or containment, and that when taken in such a state no active oxygen-suppressing action can be obtained that can be expected from a low-molecular substance against active oxygen .

5 Dat betekent dat wanneer een stof tegen actieve zuurstof in een dergelijke toestand wordt ingenomen, de meeste mensen heden ten dage niet in staat zijn die met behulp van het maagsap af te breken tot een laagmoleculaire stof, zodat de actieve-zuurstof onderdrukkende werking niet 10 kan worden verkregen. De uitvinder heeft dit uiteengezet in "Food Industry", vol. 35, no. 14, "Development and Improvement of DDS, SOD-like Function Foods from Natural Plants and Seeds and Their Pharmacological and Biochemical Consideration" .This means that when an active oxygen substance is taken in such a state, most people today are unable to break it down to a low-molecular substance with the help of gastric juice, so that the active oxygen-suppressing effect is not 10 can be obtained. The inventor explained this in "Food Industry", vol. 35, no. 14, "Development and Improvement of DDS, SOD-like Function Foods from Natural Plants and Seeds and Their Pharmacological and Biochemical Consideration".

15 De uitvinder heeft onderzoek verricht naar de effectieve toepassing van de bovengenoemde in plantenzaden of hun kiemen voorkomende stof tegen actieve zuurstof voor de behandeling of preventie van ziekten, en hoe de stoffen tegen actieve zuurstof in de bovengenoemde toestand kunnen 20 worden geactiveerd.The inventor has carried out research into the effective use of the above-mentioned substance present in plant seeds or their germs against active oxygen for the treatment or prevention of diseases, and how the substances against active oxygen can be activated in the above-mentioned state.

Als resultaat heeft hij gevonden dat door het verwarmen en roosteren van plantenzaden of kiemen onder milde omstandigheden de in de plantenzaden of hun kiemen voorkomende stof tegen actieve zuurstof gedeeltelijk uit 25 het bovengenoemde complex wordt vrijgemaakt en een oorspronkelijke laag moleculaire stof wordt gevormd, of gedeeltelijk wordt geactiveerd door als gevolg van een chemische verandering een actieve functionele groep te genereren. Door dergelijke behandelingen uit te voeren 30 wordt de werking tegen actieve zuurstof aanzienlijk versterkt vergeleken met de toestand voorafgaand aan het roosteren.As a result, he has found that by heating and roasting plant seeds or germs under mild conditions, the active oxygen substance present in the plant seeds or their germs is partially released from the above-mentioned complex and an original layer of molecular substance is formed, or partially formed. activated by generating an active functional group as a result of a chemical change. By performing such treatments, the activity against active oxygen is considerably enhanced compared to the condition prior to roasting.

Anderzijds worden veel van de actieve antitumor-functies van paddestoelen zoals carcinostatische werking of 35 remming van uitzaaiingen beschouwd als in het algemeen gebaseerd op polysacchariden zoals β-glucan etc., maar dit /3-glucan verschilt van de bovengenoemde in de plantenzaden . ' J If' ·,·;On the other hand, many of the active anti-tumor functions of mushrooms such as carcinostatic action or inhibition of metastases are generally considered to be based on polysaccharides such as β-glucan etc., but this / 3-glucan differs from the above in the plant seeds. "J If" ·, ·;

'J"J

9 of kiemen voorkomende laagmoleculaire stof tegen actieve zuurstof en valt buiten het doel van de bovengenoemde reeks onderzoeken aan actieve zuurstof door de uitvinder.9 or germs occurring low-molecular substance against active oxygen and falls outside the scope of the above-mentioned series of active oxygen studies by the inventor.

De uitvinder overwoog of het feit dat paddestoelen 5 bij inwendige toediening door het drinken van het afkooksel zoals boven vermeld, bij de ene persoon opmerkelijke antitumoreffecten lieten zien terwijl die effecten bij veel anderen nooit konden worden verkregen, zou kunnen worden verklaard uit eenzelfde gedachte als de laagmoleculaire 10 toestand van de bovengenoemde stof tegen actieve zuurstof.The inventor considered whether the fact that mushrooms, when administered internally by drinking the decoction as mentioned above, showed remarkable anti-tumor effects in one person while those effects could never be obtained in many others, could be explained by the same idea as the low molecular state of the above-mentioned substance against active oxygen.

Dat betekent dat, hoewel de werking en het mechanisme van de antitumoractiviteit van /3-glucan nog niet voldoende zijn opgehelderd zoals boven vermeld, het feit dat er verschillen zijn in het tot uiting komen van antitu-15 moreffecten bij inwendige inname van paddestoelen, betekent dat er patiënten zijn bij wie het effectieve bestanddeel dat de antitumoractiviteit van paddestoelen teweegbrengt, gemakkelijk zijn werking uitoefent en dat er patiënten zijn bij wie dit nauwelijks werkt.That means that although the action and mechanism of anti-tumor activity of β-glucan have not been sufficiently elucidated as mentioned above, the fact that there are differences in the manifestation of anti-morbid effects upon internal ingestion of mushrooms, means that there are patients in whom the effective component that induces the anti-tumor activity of mushrooms easily exerts its effect and that there are patients in whom this hardly works.

20 Bij inwendige toediening worden de ingenomen paddestoelen vroeg of laat behandeld met maagsap. De overweging was nu dat de vraag of het effectieve bestanddeel dat de antitumoractiviteit van de bovengenoemde paddestoelen teweegbrengt, effectief werkt of niet, nauw 25 verband houdt met een dergelijke maagsapbehandeling. Dat wil zeggen dat de uitvinder van mening is dat er individuele verschillen zijn in maagsapbehandeling en dat deze individuele verschillen veranderingen zouden kunnen veroorzaken in het tot uiting komen van de antitumoreffecten.With internal administration, the mushrooms taken are treated sooner or later with gastric juice. It was now considered that the question whether the effective ingredient that induces the anti-tumor activity of the above-mentioned mushrooms works effectively or not is closely related to such gastric juice treatment. That is, the inventor believes that there are individual differences in gastric juice treatment and that these individual differences could cause changes in the expression of the anti-tumor effects.

30 Zo heeft de uitvinder de volgende hypothese opgesteld over het verband tussen het gemak waarmee de antitumorwerking bij inwendig gebruik tot uiting komt en de maagsapbehandeling, gezien het klinische feit dat er individuele verschillen in sterkte van het maagsap zijn.Thus, the inventor has formulated the following hypothesis about the relationship between the ease with which the anti-tumor action in internal use is expressed and the gastric juice treatment, given the clinical fact that there are individual differences in the strength of the gastric juice.

35 Het in paddestoelen voorkomende effectieve be standdeel dat de antitumoractiviteit teweegbrengt en dat het voorwerp van de maagsapbehandeling wordt, bevindt zich 10 in een toestand waarin de effecten moeilijk tot uiting komen, en wordt zoals boven vermeld als gevolg van de maagsapbehandeling overgebracht in de toestand waarin de effecten gemakkelijk tot uiting komen. Hierin bestaan 5 individuele verschillen. Als dus iemand van nature een sterk maagsap heeft, komt het in ingenomen paddestoelen aanwezige bestanddeel met effecten op de antitumoractivi-teit in de toestand waarin de werking gemakkelijk aan te tonen is, zodat de antitumoreffecten tot uiting komen.The effective ingredient occurring in mushrooms that induces anti-tumor activity and becomes the subject of gastric juice treatment is in a state in which the effects are difficult to express, and as mentioned above is transferred to the state in which, as mentioned above, due to gastric juice treatment the effects are easily expressed. There are 5 individual differences here. Thus, if a person has naturally strong gastric juice, the ingredient present in ingested mushrooms with anti-tumor activity effects will be in a state in which the effect is easy to demonstrate, so that anti-tumor effects are reflected.

10 Bij iemand die echter van nature een zwak maagsap heeft, komt het bestanddeel met effecten op de antitumorac-tiviteit niet in de toestand waarin de werking gemakkelijk aan te tonen is, zodat de antitumoreffecten niet zo duidelijk tot uiting komen.However, in a person who naturally has weak gastric juice, the component with anti-tumor activity effects does not reach the state in which the effect is easy to demonstrate, so that the anti-tumor effects are not so clearly expressed.

15 Veel personen hebben heden ten dage geen sterk maagsap dat het effectieve bestanddeel dat de antitumorac-tiviteit van paddestoelen vertoont in zodanige mate kan veranderen dat de werking daarvan gemakkelijk tot uiting komt, en als gevolg daarvan kan worden gezegd dat het 20 aantal voorbeelden dat tot op zekere hoogte kan dienen als bevestiging van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van paddestoelen bij inwendige toediening uiterst klein is.Many people today do not have a strong gastric juice that the effective ingredient exhibiting the anti-tumor activity of mushrooms can change to such an extent that their effect is easily expressed, and as a result, the number of examples that lead to can serve to some extent as confirmation of the effectiveness of the anti-tumor activity of mushrooms when administered internally is extremely small.

Een mogelijke verklaring hiervoor is dat de componenten die effectief zijn voor de in paddestoelen aanwezige 25 antitumoractiviteit als een keten aan elkaar zitten door middel van bijvoorbeeld polymerisatie en voorkomen in een onbeweeglijke toestand, dat wil zeggen in de niet-actieve toestand waarin ze niet kunnen worden geactiveerd. In het geval van iemand die van nature een sterk maagsap heeft 30 worden de componenten door het maagsap losgeknipt en veranderen in effectieve componenten in vrije geactiveerde toestand, waardoor de antitumoractiviteit in het lichaam zichtbaar wordt.A possible explanation for this is that the components that are effective for the anti-tumor activity present in mushrooms are connected together as a chain by, for example, polymerization and occur in an immobile state, that is, in the non-active state in which they cannot be activated. In the case of someone who naturally has a strong gastric juice, the components are cut loose by the gastric juice and change into effective components in the free activated state, thus showing the anti-tumor activity in the body.

Men kan stellen dat veel personen heden ten dage 35 niet in staat zijn de keten in de geïnactiveerde toestand waarin de effectieve bestanddelen die effectief zijn tegen kanker als een keten met elkaar verbonden zijn, zoals boven 11 vermeld met maagsap te knippen. Als gevolg daarvan worden de voor kanker effectieve bestanddelen door de darmen in een zodanige niet-geactiveerde toestand geabsorbeerd dat ze aan elkaar gebonden zijn zodat ze hun effecten in het 5 lichaam niet kunnen laten zien.It can be said that many people today are unable to cut the chain in the inactivated state in which the effective components that are effective against cancer are linked together as a chain, as mentioned above 11, with gastric juice. As a result, the cancer-effective components are absorbed by the intestines in such a non-activated state that they are bound to each other so that they cannot show their effects in the body.

De uitvinder overwoog daarom dat als een behandeling die de effectieve bestanddelen die zich in de niet-geactiveerde toestand bevinden vooraf kan activeren, gemakkelijk op paddestoelen zou kunnen worden toegepast, de 10 bovengenoemde problemen opgelost zouden zijn.The inventor therefore considered that if a treatment that could pre-activate the effective components contained in the non-activated state could easily be applied to mushrooms, the above problems would be solved.

De uitvinder heeft verschillende technieken geprobeerd voor het activeren van de effectieve bestanddelen van dergelijke paddestoelen in een niet-actieve toestand, maar was niet in staat een effectieve techniek te 15 vinden. Dit komt doordat er niet voldoende kennis beschikbaar is omtrent de toestand van de effectieve bestanddelen en hoe ze zich in de niet-actieve toestand bevinden, omdat het feitelijke systeem te complex is om te onderzoeken.The inventor has tried various techniques for activating the effective components of such mushrooms in an inactive state, but was unable to find an effective technique. This is because there is not enough knowledge available about the state of the effective components and how they are in the inactive state, because the actual system is too complex to investigate.

De uitvinder heeft verschillende experimenten 20 uitgevoerd zoals boven vermeld, en als laatste experiment trachtte hij de bovengenoemde methode toe te passen die door hem zelf was uitgevonden als manier voor het activeren van actieve zuurstofonderdrukkende stoffen zoals flavono-iden, polyfenolen etc., hoewel de samenstelling daarvan 25 aanzienlijk verschilt van die van /3-glucan.The inventor has carried out various experiments as mentioned above, and as a final experiment he tried to use the above-mentioned method that he himself invented as a way of activating active oxygen suppressants such as flavonoid, polyphenols etc., although the composition thereof differs considerably from that of β-glucan.

Wanneer die werkwijze wordt toegepast, wordt een techniek gebruikt die is bedoeld voor het activeren van flavonoïden en waarvan het te activeren doel aanzienlijk verschilt van /3-glucan, zodat de niet-geactiveerde toestand 30 daarvan natuurlijk ook sterk verschilt van die van β-glucan, zodat aanpassing van de werkwijze voor het activeren van /3-glucan aanvankelijk als moeilijk werd beschouwd.When that method is applied, a technique is used which is intended for activating flavonoids and whose target to be activated differs considerably from β-glucan, so that the non-activated state thereof naturally also differs greatly from that of β-glucan so that modification of the method for activating β-glucan was initially considered difficult.

De experimentele resultaten verschilden echter aanzienlijk van de verwachtingen van de uitvinder en lieten 35 zien dat de activeringstechniek voor de actieve zuurstof onderdrukkende stof ook effectief is voor het veranderen van /3-glucan met een andere structuur dan die van de > y i y 12 actieve zuurstof onderdrukkende stoffen zoals flavonoïden, etc., en dat /3-glucan zo gemakkelijk kan worden geactiveerd.The experimental results, however, differed considerably from the inventors' expectations and showed that the activation technique for the active oxygen suppressant is also effective for changing β-glucan with a structure other than that of the> yiy 12 active oxygen suppressant substances such as flavonoids, etc., and that 3-glucan can be activated so easily.

Dat wil zeggen dat de uitvinder heeft gevonden dat 5 wanneer paddestoelen die vooraf met ver-infraroodstralen zijn geroosterd, in het experiment worden gebruikt, de antitumoreffecten bij inwendige toediening zijn verbeterd vergeleken met het geval waarin paddestoelen worden gebruikt die niet met ver-infraroodstralen zijn geroosterd. 10 Bovendien is gevonden dat wanneer de met ver-infraroodstralen geroosterde paddestoelen worden gefermenteerd door toevoeging van micro-organismen, in het bijzonder "Koji" (Aspergillus oryzae) of gist, de antitumoreffecten nog meer worden verbeterd.That is, the inventor has found that when mushrooms previously roasted with far infrared rays are used in the experiment, the antitumor effects with internal administration are improved compared to the case where mushrooms are not roasted with far infrared rays . Moreover, it has been found that when the mushrooms roasted with far infrared rays are fermented by adding microorganisms, in particular "Koji" (Aspergillus oryzae) or yeast, the anti-tumor effects are further improved.

15 Als de paddestoelen kunnen paddestoelen worden gebruikt die polysacchariden met antitumoractiviteit bevatten, bijvoorbeeld paddestoelen zoals de agaricus die onlangs in bijzonder de aandacht heeft getrokken wegens zijn geneeskrachtige effecten. Bovendien kunnen zonder 20 probleem paddestoelen worden gebruikt waarvan tot nog toe werd gesteld dat ze krachtige antitumoractiviteit hebben, zoals Forties, Poria etc.As the mushrooms, there can be used mushrooms containing polysaccharides with anti-tumor activity, for example mushrooms such as the agaricus which has recently attracted particular attention because of its medicinal effects. In addition, mushrooms can be used without any problems that have previously been said to have strong anti-tumor activity, such as Forties, Poria etc.

Overigens kan met betrekking tot de agaricus worden gevonden dat zelfs wanneer het roosteren met ver-25 infraroodstralen en de fermentatiebehandeling onder diverse omstandigheden na oogsten en drogen worden uitgevoerd, er geen voldoende effect kan worden verkregen. Daarom wordt deze behandeling bij voorkeur onder niet-gedroogde omstandigheden uitgevoerd, dat wil zeggen in rauwe toestand, 30 bijvoorbeeld zonder de paddestoel na de oogst lang te laten liggen.Incidentally, with regard to the agaricus, it can be found that even when roasting with far infrared rays and the fermentation treatment are carried out under various conditions after harvesting and drying, a sufficient effect cannot be obtained. Therefore, this treatment is preferably carried out under non-dried conditions, i.e. in the raw state, for example without letting the mushroom lie for a long time after harvest.

Bovendien bederft de agaricus snel, en als het lang duurt voordat de roosterbehandeling met ver-infraroodstralen wordt uitgevoerd, moet men hem niet lange tijd in 35 rauwe toestand laten liggen. In een dergelijk geval heeft het daarom de voorkeur de paddestoel bij lage temperatuur in een koelkast te bewaren en de behandeling zoals het 13 roosteren met ver-infraroodstralen etc. binnen 3 dagen na de oogst uit te voeren.Moreover, the agaricus decays quickly, and if it takes a long time before the grating treatment with far-infrared rays is carried out, it should not be left in the raw state for a long time. In such a case, it is therefore preferable to store the mushroom in a refrigerator at a low temperature and to carry out the treatment such as roasting with far infrared rays etc. within 3 days after harvesting.

Bovendien wordt na het bovengenoemde roosteren met ver-infraroodstralen en de fermentatiebehandeling gevonden 5 dat de antitumoreffecten sterker verbeterd zijn wanneer het verkregen materiaal wordt behandeld met een olie. Er wordt bijvoorbeeld een oliecomponent verkregen uit met ver-infraroodstralen geroosterde planten zoals sesam etc. aan toegevoegd om het na fermentatie verkregen materiaal te 10 bedekken met de oliecomponent.Moreover, after the above-mentioned roasting with far infrared rays and the fermentation treatment, it is found that the anti-tumor effects are more strongly improved when the resulting material is treated with an oil. For example, an oil component obtained from plants roasted by far infrared rays such as sesame etc. is added to cover the material obtained after fermentation with the oil component.

Zoals boven beschreven werd aanvankelijk niet verwacht dat de techniek voor het overbrengen van de in plantenzaden of kiemen aanwezige stof tegen actieve zuurstof in een laagmoleculair verbinding, ook effectief zou 15 kunnen worden toegepast op het tot uiting komen van de antitumoractiviteit van paddestoelen die polysacchariden met antitumoractiviteit bevatten die een geheel andere structuur hebben dan de stof tegen actieve zuurstof. Significante effecten kunnen echter worden verkregen door 20 het materiaal de beschreven experimenten te laten ondergaan, waarmee de onderhavige uitvinding is verwezenlijkt.As described above, it was not initially expected that the technique for transferring the substance present in plant seeds or germs against active oxygen into a low molecular weight compound could also be effectively applied to the expression of anti-tumor activity of mushrooms containing anti-tumor activity polysaccharides which have a completely different structure than the active oxygen substance. However, significant effects can be obtained by having the material undergo the described experiments, thereby realizing the present invention.

De uitvinder heeft ook gevonden dat. er zelfs een vermeldenswaardig antitumoreffeet kan worden verkregen door de bovengenoemde behandeling uit te voeren met paddestoelen 25 die tot nog toe geen specifieke aandacht hadden getrokken wegens hun antitumoractiviteit. Zo werd bijvoorbeeld gevonden dat wanneer de maitake (Grifola frondosu Dickson) e.a. werden geroosterd met ver-infraroodstralen en werden gefermenteerd door micro-organismen, een antitumoreffeet 30 kon worden verkregen dat vergelijkbaar was met of beter was dan dat van de agaricus.The inventor has also found that. even a noteworthy anti-tumor effect can be achieved by performing the above treatment with mushrooms that up to now had not received specific attention due to their anti-tumor activity. For example, it was found that when the maitake (Grifola frondosu Dickson) and others were roasted with far infrared rays and fermented by microorganisms, an anti-tumor effect could be obtained that was comparable to or better than that of the agaricus.

Het antitumoreffeet van paddestoelen zoals de maitake (Grifola frondosu Dickson) was reeds bekend, maar in het algemeen werd niet gedacht dat dit effect vergelijk-3 5 baar zou zijn met dat van de agaricus die nu de aandacht heeft getrokken. Door de bovengenoemde behandelingen van de onderhavige uitvinding toe te passen op paddestoelen, komen 14 de met paddestoelen zoals de maitake (Grifola frondosu Dickson) inherent verbonden antitumoreffecten in voldoende mate tot uiting, waarbij de antitumoractiviteit vergelijkbaar is met die van de agaricus.The anti-tumor effect of mushrooms such as the maitake (Grifola frondosu Dickson) was already known, but in general it was not thought that this effect would be comparable to that of the agaricus who has now attracted attention. By applying the above treatments of the present invention to mushrooms, the anti-tumor effects inherently associated with mushrooms such as the maitake (Grifola frondosu Dickson) are sufficiently expressed, the anti-tumor activity being comparable to that of the agaricus.

5 Tot op heden kon de potentiële antitumoractiviteit van paddestoelen niet in voldoende mate tot uiting worden gebracht en kon de effectiviteit ervan niet duidelijk worden bevestigd. Door echter de bovengenoemde behandeling ter versterking van de antitumoractiviteit op paddestoelen 10 toe te passen wordt hun antitumoractiviteit duidelijk aangetoond en kan de antitumoractiviteit tot uiting worden gebracht in een mate die niet te verwachten was.To date, the potential anti-tumor activity of mushrooms has not been sufficiently expressed and its effectiveness has not been clearly confirmed. However, by applying the aforementioned treatment to enhance the anti-tumor activity on mushrooms, their anti-tumor activity is clearly demonstrated and the anti-tumor activity can be expressed to an extent that was not expected.

In alle paddestoelen is meer of minder jS-glucan aanwezig en de bovenstaande behandeling wordt beschouwd als 15 een werkwijze waarmee de werking en manifestatie daarvan sterk kan worden bevorderd. Zo wordt de bovengenoemde behandeling ter versterking van de antitumoractiviteit behalve op de maitake (Grifola frondosu Dickson) toegepast op paddestoelen die doorgaans worden gebruikt als pitgangs-20 materialen voor maaltijden zoals shi-itake (Lentinus edodes), matsutake (Tricholoma matsutake), shimejitake (Lyophyllum decastes), enokitake (Flammulina velutipes), etc. Zo werd gevonden dat met de werkwijze de aanwezige potentiële antitumoractiviteit sterk kan worden ontwikkeld. 25 Wanneer de bovengenoemde werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit van paddestoelen wordt toegepast, kan het /3-glucan van paddestoelen die gewoonlijk eenvoudig en goedkoop te verkrijgen zijn in plaats van dat van dure en zeldzame paddestoelen worden geactiveerd, en 3 0 zelfs wanneer de hoeveelheid jS-glucan minder is dan in zeldzame paddestoelen, kan een significant effectieve antitumoractiviteit worden ontwikkeld vergeleken met het geval waarin zeldzame paddestoelen worden gebruikt met de werkwijze uit de stand der techniek. Dit leidt tot een 35 kostenbesparing voor de patiënt.More or less S-glucan is present in all mushrooms and the above treatment is regarded as a method by which the action and manifestation thereof can be strongly promoted. For example, the above-mentioned treatment for enhancing anti-tumor activity is applied except for the maitake (Grifola frondosu Dickson) to mushrooms commonly used as pitgang materials for meals such as shi-itake (Lentinus edodes), matsutake (Tricholoma matsutake), shimejitake ( Lyophyllum decastes), enokitake (Flammulina velutipes), etc. Thus, it was found that the potential anti-tumor activity present can be strongly developed with the method. When the above-mentioned method for enhancing the anti-tumor activity of mushrooms is applied, the β-glucan of mushrooms that are usually simple and inexpensive to obtain instead of that of expensive and rare mushrooms can be activated, and even when the amount If β-glucan is less than in rare mushrooms, a significant effective anti-tumor activity can be developed compared to the case where rare mushrooms are used with the prior art method. This leads to a cost saving for the patient.

Ook het preparaat dat paddestoelen bevat waarop de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit isAlso the preparation containing mushrooms on which the method for enhancing anti-tumor activity is

'V"V

15 toegepast, heeft een significant sterkere antitumoractivi-teit dan het gebruikelijke preparaat waarin paddestoelen waarvan wordt gesteld dat ze antitumoractiviteit hebben, worden gedroogd en verpoederd en eenvoudig gemengd.15 has a significantly stronger anti-tumor activity than the usual preparation in which mushrooms that are said to have anti-tumor activity are dried and powdered and simply mixed.

5 Bij het uitvoeren van de bovengenoemde reeks onderzoeken aan paddestoelen werden paddestoelen in stapsgewijs toenemende concentratie toegevoegd aan een systeem waarin lipideperoxiden werden gevormd door een onverzadigd vetzuur zoals docosahexaeenzuur etc te bestralen met 10 ultraviolet licht. Hierbij werd de gevormde hoeveelheid lipideperoxiden onderzocht met de respectieve paddestoelen in allerlei concentraties. Als resultaat kon worden gevonden dat hoe sterker de stijging van de door de paddestoelen gevormde hoeveelheid lipideperoxide is, hoe sterker de 15 antitumorwerking bij inwendige toediening tot uiting komt.In carrying out the above-mentioned series of tests on mushrooms, mushrooms were added in stepwise increasing concentration to a system in which lipid peroxides were formed by irradiating an unsaturated fatty acid such as docosahexaenoic acid etc. with ultraviolet light. The amount of lipid peroxides formed was investigated with the respective mushrooms in various concentrations. As a result, it could be found that the greater the increase in the amount of lipid peroxide formed by the mushrooms, the greater the antitumor effect when administered internally.

Zo werden verschillende soorten paddestoelen in dezelfde concentratie toegevoegd aan het systeem dat het bovengenoemde lipideperoxide vormt, en de gevormde hoeveelheden van de respectieve lipideperoxiden werden gemeten. 20 Wanneer de gevormde hoeveelheid lipideperoxide groter is, dan kunnen de antitumoreffecten krachtiger tot uiting komen bij daadwerkelijke inwendige toediening.Thus, different types of mushrooms were added in the same concentration to the system that forms the aforementioned lipid peroxide, and the amounts formed of the respective lipid peroxides were measured. If the amount of lipid peroxide formed is greater, then the anti-tumor effects may be more pronounced with actual internal administration.

Bij gebruik van een dergelijke werkwijze kan zonder daadwerkelijke inwendige toediening worden nagegaan 2 5 of er wel of geen antitumoref f ecten te verwachten zijn wanneer de paddestoelen inwendig worden gebruikt. Zelfs zonder klinische test op een patiënt voor experimentele inwendige toediening, kan de werkwijze worden gebruikt als een werkwijze ter beoordeling van de antitumoreffectiviteit 30 bij inwendige toediening.When using such a method, it can be checked without actual internal administration whether or not anti-tumor effects can be expected when the mushrooms are used internally. Even without a clinical test on a patient for experimental internal administration, the method can be used as a method for assessing anti-tumor effectiveness with internal administration.

Bovendien worden allerlei behandelingen op de paddestoelen toegepast en worden de hoeveelheden lipideperoxide vergeleken die worden gevormd door toevoeging van de paddestoelen waarop de respectieve behandelingen zijn 3 5 uitgevoerd. Zo kan de effectiviteit van de respectieve behandelingen worden beoordeeld.Moreover, all kinds of treatments are applied to the mushrooms and the amounts of lipid peroxide are compared which are formed by adding the mushrooms on which the respective treatments have been carried out. In this way the effectiveness of the respective treatments can be assessed.

) 16) 16

Hoewel bij de bovengenoemde verklaring wordt uitgegaan van paddestoelen, kan de werkwijze worden toegepast op een ander ruw geneesmiddel dan paddestoelen dat polysacchariden met antitumoractiviteit bevat. Althans 5 wanneer het ruwe geneesmiddel /3-glucan bevat, is de toepassing effectief.Although the above statement is based on mushrooms, the method can be applied to a crude drug other than mushrooms containing polysaccharides with anti-tumor activity. At least 5 when the crude drug contains 3-glucan, the application is effective.

De werkwij ze kan worden toegepast op andere ruwe geneesmiddelen dan paddestoelen zoals natuurlijke ruwe geneesmiddelen waaronder ruwe geneesmiddelen afgeleid van 10 planten, ruwe geneesmiddelen afgeleid van dieren en ruwe geneesmiddelen afgeleid van mineralen. In veel Chinese geneesmiddelen worden op natuurlijke wijze gegroeide ruwe geneesmiddelen gebruikt, dit kunnen onder geschikte omstandigheden op een boerderij geoogste ruwe geneesmiddelen zijn 15 of ze kunnen met een kunstmatige kweek gekweekt zijn zoals een waterkweek etc.The method can be applied to raw drugs other than mushrooms such as natural raw drugs including raw drugs derived from plants, raw drugs derived from animals, and raw drugs derived from minerals. In many Chinese medicines, naturally grown raw medicines are used, these can be raw medicines harvested on a farm under suitable conditions or they can be grown with an artificial culture such as a water culture etc.

Behalve de in bijvoorbeeld de Japanse farmacopee etc. beschreven ruwe geneesmiddelen kunnen dergelijke natuurlijke producten of kweekgewassen, wanneer ze bij 20 toepassing van de onderhavige uitvinding effectieve antitumoractiviteit vertonen, worden gebruikt als in de onderhavige beschrijving genoemde ruwe geneesmiddelen.In addition to the raw drugs described in, for example, the Japanese pharmacopoeia, such natural products or culture crops, when they exhibit effective anti-tumor activity when applying the present invention, can be used as the raw drugs mentioned in the present specification.

BESCHRIJVING VAN DE VOORKEURSUITVOERINGSVORMENDESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS

Hierna worden uitvoeringsvormen van de onderhavige 25 uitvinding in detail beschreven aan de hand van voorbeelden .In the following, embodiments of the present invention are described in detail with reference to examples.

Met betrekking tot de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit van ruwe geneesmiddelen, het preparaat dat ruwe geneesmiddelen met versterkte antitumor-30 activiteit bevat, de werkwijze ter beoordeling van de antitumoreffectiviteit van de behandeling van ruwe geneesmiddelen, en de werkwijze ter beoordeling van de antitumoref f ectiviteit van ruwe geneesmiddelen, zal de uitvinding worden toegelicht aan de hand van paddestoelen die algemeen 17 bekend zijn als ruwe geneesmiddelen die β-glucan bevatten, een polysaccharide met antitumoractiviteit.With regard to the method for enhancing the anti-tumor activity of raw drugs, the preparation containing raw drugs with enhanced anti-tumor activity, the method for assessing the anti-tumor effectiveness of the treatment of raw drugs, and the method for assessing the anti-tumor effect f activity of crude drugs, the invention will be elucidated on the basis of mushrooms generally known as crude drugs containing β-glucan, a polysaccharide with anti-tumor activity.

VERSTERKING VAN DE ANTITUMORACTIVITEITSTRENGTHENING ANTI-TUMORACTIVITY

Hieronder worden een werkwij ze ter versterking van 5 de antitumoractiviteit van ruwe geneesmiddelen en een preparaat dat een ruw geneesmiddel met versterkte antitumoractiviteit bevat, beschreven.A method for enhancing the anti-tumor activity of crude drugs and a preparation containing a crude drug with enhanced anti-tumor activity are described below.

In de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit van ruwe geneesmiddelen worden paddestoelen die 10 /3-glucan bevatten, eerst geroosterd met ver-infraroodstra-len, waarna er micro-organismen zoals "Koji" etc. aan worden toegevoegd en een fermentatie wordt uitgevoerd bij een vooraf bepaalde vochtigheidsgraad en een vooraf bepaalde temperatuur. Na afloop van de fermentatiestap wordt het 15 verkregen materiaal tot een geschikt fijn poeder gevormd, en het fijne poeder wordt ter bereiding van een olieachtig middel bekleed met een oliecomponent die is verkregen door het uitpersen van sesam dat met ver-infraroodstralen is geroosterd.In the method for enhancing the anti-tumor activity of raw drugs, mushrooms containing 10/3 glucan are first roasted with far-infrared rays, after which microorganisms such as "Koji" etc. are added and a fermentation is carried out at a predetermined humidity level and a predetermined temperature. At the end of the fermentation step, the resulting material is formed into a suitable fine powder, and the fine powder is coated to prepare an oily agent with an oil component obtained by pressing sesame roasted with far-infrared rays.

2 0 Zo wordt uit het materiaal dat is verkregen door paddestoelen die /3-glucan bevatten de bovengenoemde roos-terstap met ver-infraroodstralen, de fermentatiestap met micro-organismen en de stap voor het maken van een olieachtig middel te laten ondergaan, een preparaat verkregen dat 25 bij inwendige toediening een effectieve antitumoractiviteit vertoont en dat paddestoelen bevat waarop de werkwij ze ter versterking van de antitumoractiviteit is toegepast.Thus, from the material obtained by having mushrooms containing 3-glucan undergo the aforementioned roasting step with far infrared rays, the fermentation step with microorganisms and the step of making an oily agent, a preparation obtained that exhibits effective anti-tumor activity when administered internally and that contains mushrooms to which the method for enhancing anti-tumor activity has been applied.

VOORBEELDENEXAMPLES

Als te gebruiken paddestoelen werden paddestoelen 30 gebruikt die /3-glucan bevatten. In het bijzonder bij gebruik van paddestoelen die grote hoeveelheden /3-glucan bevatten en die in het algemeen antitumoreffecten hebben.As mushrooms to be used, mushrooms were used containing 3-glucan. In particular when using mushrooms that contain large amounts of 3-glucan and which generally have anti-tumor effects.

18 komen de antitumoreffecten sterk tot uiting, zodat die de voorkeur hebben.18 the anti-tumor effects are strongly expressed, so that they are preferred.

Hier werden de paddestoelen Poria, agaricus, Polyporus, (Polyporus umbellatus Fries), maitake (zwart, 5 Grifola frondosu Dickson), matsutake (Tricholoma matsutake) en shi-itake (Cortinellus Shiitake) gebruikt. Met betrekking tot de agaricus werd bij de experimenten van de uitvinder gevonden dat deze een krachtiger antitumoractivi-teit vertoont bij gebruik in rauwe toestand dan bij gebruik 10 na drogen, zodat hij na de oogst bij lage temperatuur (4°C) in een koelkast werd opgeslagen en binnen 3 dagen na de oogst werd gebruikt.Here the mushrooms Poria, agaricus, Polyporus, (Polyporus umbellatus Fries), maitake (black, 5 Grifola frondosu Dickson), matsutake (Tricholoma matsutake) and shi-itake (Cortinellus Shiitake) were used. With regard to the agaricus, it was found in the experiments of the inventor that it exhibits a more powerful anti-tumor activity when used in the raw state than when used after drying, so that it was harvested in a refrigerator after harvesting at low temperature (4 ° C) stored and used within 3 days after harvest.

Met betrekking tot de andere paddestoelen werden niet zulke significante verschillen in effectiviteit 15 waargenomen tussen het gebruik in rauwe toestand en het gebruik in gedroogde toestand, de toestand waarin ze tot nu toe werden gebruikt in Chinese geneesmiddelen waarop de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit van de onderhavige uitvinding werd toegepast, zodat in het onder-20 havige voorbeeld gedroogde materialen werden gebruikt van Poria, Polyporus, (Polyporus umbellatus Fries), maitake (zwart, Grifola frondosu Dickson), matsutake (Tricholoma matsutake) en shi-itake (Cortinellus Shiitake).With regard to the other mushrooms, not such significant differences in effectiveness were observed between the use in the raw state and the use in the dried state, the state in which they have hitherto been used in Chinese drugs to which the method to enhance the anti-tumor activity of the The present invention was applied so that in the present example dried materials were used from Poria, Polyporus, (Polyporus umbellatus Fries), maitake (black, Grifola frondosu Dickson), matsutake (Tricholoma matsutake) and shi-itake (Cortinellus Shiitake) .

Overigens werden twee soorten maitake gebruikt. De 25 in Japan geproduceerde variant wordt hoofdzakelijk gekweekt in de Niigata prefectuur, een sneeuwlandschap. Deze variëteit wordt formeel de sneeuwlandschap-maitake of zwarte maitake genoemd, en in de onderhavige beschrijving wordt deze variëteit aangeduid als maitake (zwart).Two types of maitake were used. The 25 variety produced in Japan is mainly cultivated in the Niigata prefecture, a snow landscape. This variety is formally referred to as the snow landscape maitake or black maitake, and in the present description this variety is referred to as maitake (black).

30 Anderzijds wordt de in China verkregen maitake (Grifola frondosu Dickson) in de onderhavige beschrijving aangeduid als Polyporus (Polyporus umbellatus Fries) en zonodig van de bovengenoemde maitake (zwart) onderscheiden. In het bijzonder wordt van Polyporus (Polyporus umbellatus 35 Fries) hoofdzakelijk de wortel gebruikt.On the other hand, the maitake obtained in China (Grifola frondosu Dickson) is referred to in the present description as Polyporus (Polyporus umbellatus Fries) and, if necessary, distinguished from the above-mentioned maitake (black). In particular, the root of Polyporus (Polyporus umbellatus 35 Fries) is mainly used.

De eerste stap van de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit is een roosterstap met ver- Λ ~"i) 19 infraroodstralen, waarbij de bovengenoemde soorten paddestoelen worden geroosterd met ver-infraroodstralen. De bij een dergelijke roosterstap te gebruiken ver-infraroodstralen hebben bij voorkeur een golflengte van ongeveer 4 tot 5 14 μπι. De paddestoelen worden geroosterd onder gebruik van een inrichting zoals een pan, een oven etc., waarvan het binnenoppervlak is bekleed met een keramiek dat ver-infraroodstralen uit zendt met een golflengte in dit bereik. De inrichting zoals een pan, een oven etc. wordt vervaardigd 10 door keramiekpoeder dat ver-infraroodstralen uitzendt te mengen met steen, grind, zand etc. of metaaloxiden.The first step of the method for enhancing anti-tumor activity is a grating step with infrared rays, wherein the above-mentioned types of mushrooms are roasted with far-infrared rays. The far-infrared rays to be used in such a grating step preferably have The mushroom is roasted using a device such as a pan, an oven, etc., the inner surface of which is coated with a ceramic that emits far-infrared rays with a wavelength in this range. device such as a pan, an oven etc. is manufactured by mixing ceramic powder emitting far infrared rays with stone, gravel, sand etc. or metal oxides.

Voor dit roosteren worden, afgezien van de agari-cus, paddestoelen gebruikt die gedroogd zijn zoals ze in de gebruikelijke Chinese geneesmiddelen worden gebruikt. De 15 agaricus wordt zoals boven vermeld in de rauwe toestand gebruikt.For this roasting, apart from the agaric, mushrooms are used which have been dried as they are used in the usual Chinese medicines. The agaricus is used in the raw state as stated above.

De bovengenoemde paddestoelen worden in de bovengenoemde inrichting, bijvoorbeeld in een aarden pot gemaakt uit stoffen die ver-infraroodstralen uitzenden zoals 20 graniet, keramiek, Tenshouseki steen etc. en die ver- infraroodstralen uitzenden met een golflengte van 4 tot 14 μτη, gedurende 3 0 tot 9 0 minuten onder langzaam en goed roeren geroosterd, zodanig dat ze niet verbranden.The above-mentioned mushrooms are made in the above-mentioned device, for example in an earthen pot made of substances which emit far-infrared rays such as granite, ceramics, Tenshouseki stone etc. and which emit far-infrared rays with a wavelength of 4 to 14 μτη, during 30 roast for 9 minutes with slow and good stirring, so that they do not burn.

De roostermethode is niet beperkt tot de bovenge-25 noemde methode en kan elke methode zijn, zo lang die het vrijkomen van /S-glucan van paddestoelen bevordert. Zo kunnen bijvoorbeeld als voor het roosteren te gebruiken bron van ver-infraroodstralen, in aanvulling op de bovengenoemde inrichtingen, andere worden gebruikt zo lang ze een 30 materiaal omvatten dat ver-infraroodstralen met een golflengte van 4 tot 14 μτη uitzendt, zoals platinavezel voor elektromagnetische golven etc.The roasting method is not limited to the above-mentioned method and can be any method, so long as it promotes the release of S-glucan from mushrooms. For example, as a source of far-infrared rays to be used for roasting, in addition to the above-mentioned devices, others can be used as long as they comprise a material which emits far-infrared rays with a wavelength of 4 to 14 μτη, such as platinum fiber for electromagnetic waves etc.

Na deze roosterstap met ver-infraroodstralen volgt als tweede stap een fermentatiestap. Na de bovengenoemde 35 roosterbehandeling met ver-infraroodstralen wordt met fermentatiebacteriën zoals "Koji" of gist 48 tot 72 uur een fermentatie uitgevoerd in een vochtige kamer van 30 tot 20 36°C. Om de fermentatietijd te bekorten kan hiervoor een fermentatie-inrichting worden gebruikt.After this grating step with far infrared rays, a fermentation step follows as a second step. After the aforementioned grating treatment with far-infrared rays, fermentation bacteria such as "Koji" or yeast are used for 48 to 72 hours for a fermentation in a humid chamber of 30 to 36 ° C. A fermenter can be used to shorten the fermentation time.

Als de voor de fermentatie te gebruiken micro-organismen kunnen ook andere micro-organismen dan "Koji" 5 worden gebruikt.As the microorganisms to be used for the fermentation, microorganisms other than "Koji" may also be used.

Ook kunnen voor het uitvoeren van de fermentatie behalve "Koji" stoffen met fermenterend vermogen zoals rijpe papaya, ananassap, vijgenschillen, druivenschillen, jonge bamboebast etc. gebruikt worden. Ook kunnen spijsver-10 teringsenzymen zoals diastase, pancreatine etc., van micro-organismen afkomstige proteolytische enzymen zoals protease, pepsine, trypsine, etc., lytische enzymen voor polysac-chariden zoals hemicellulase of een voorloper waaruit de bovengenoemde spijsverteringsenzymen of proteolytische 15 enzymen etc. worden gevormd, voor de fermentatie gebruikt worden.In addition to "Koji", substances with fermenting capacity such as ripe papaya, pineapple juice, fig skins, grape skins, young bamboo bark etc. can also be used for carrying out the fermentation. Also, digestive enzymes such as diastase, pancreatin etc., microorganism-derived proteolytic enzymes such as protease, pepsin, trypsin, etc., lytic enzymes for polysaccharides such as hemicellulase or a precursor from which the aforementioned digestive enzymes or proteolytic enzymes etc are used for fermentation.

Blijkens de experimenten van de uitvinder echter kunnen betere resultaten worden verkregen wanneer de fermentatie wordt uitgevöerd met behulp van micro-organis-20 men, en met name met "Koji", ter versterking van de antitu-moractiviteit Na afloop van deze fermentatiestap worden de uitgangsmaterialen verpoederd.However, according to the experiments of the inventor, better results can be obtained if the fermentation is carried out with the aid of micro-organisms, and in particular with "Koji", in order to enhance the anti-tumor activity. After this fermentation step the starting materials are powdered.

Voor het verpoederen kan een commercieel verkrijgbare verpoederaar worden gebruikt, maar een machine die bij 25 het verpoederen een hoge temperatuur genereert, dient bij voorkeur te worden vermeden. De verpoedering kan worden uitgevoerd met een verpoedermethode die geen hoge temperatuur genereert zoals een maalgang.A commercially available powderer can be used for pulverizing, but a machine that generates a high temperature during pulverizing should preferably be avoided. The pulverizing can be carried out with a pulverizing method that does not generate a high temperature such as a milling pass.

Het uitgangspaddestoelmateriaal waarop de rooster-30 stap met ver-infraroodstralen en fermentatiestap zijn toegepast, wordt verder onderworpen aan een stap voor het maken van een olieachtig middel. Deze procedure voor het maken van een olieachtig middel dient om het bovengenoemde fijne poeder van het uitgangsmateriaal na fermentatie te 35 omsluiten met een oliecomponent afkomstig van sesam dat is geroosterd met ver-infraroodstralen.The starting mushroom material to which the far-infrared ray grating step and fermentation step are applied is further subjected to an oily agent-making step. This procedure for making an oily agent serves to enclose the aforementioned fine powder from the starting material after fermentation with an oil component derived from sesame roasted with far infrared rays.

2121

Als de voor het maken van een olieachtig middel te gebruiken oliecomponent kan gebruik worden gemaakt van een olie (hierna aangeduid als sesampastaolie) verzameld uit geroosterde sesam. De sesampastaolie is een olie verkregen 5 door rauwe sesam bij een temperatuur niet hoger dan 100°C langzaam en gedurende lange tijd te roosteren, en de sesam na het roosteren te malen en uit te persen. In een dergelijke sesampastaolie blijven door het malen van de sesam gevormde fijne vaste materialen aanwezig, zodat deze olie 10 een pasta-achtig uiterlijk heeft.As the oil component to be used for making an oily agent, use can be made of an oil (hereinafter referred to as sesame paste oil) collected from roasted sesame. The sesame paste oil is an oil obtained by roasting raw sesame slowly and for a long time at a temperature not higher than 100 ° C, and grinding and pressing the sesame after roasting. Fine solid materials formed by grinding the sesame paste oil remain present in such a sesame paste oil, so that this oil has a pasty appearance.

Aan een dergelijke sesampastaolie worden de bovengenoemde verpoederde paddestoelen na fermentatie toegevoegd om de fijn verpoederde paddestoelen te omsluiten met de oliecomponent uit de sesam. Door de paddestoelen zo 15 te omsluiten kan het doordringensvermogen daarvan naar de cellen van het aangetaste lichaamsdeel worden versterkt vergeleken met het geval waarin een dergelijke omsluiting met pastaolie niet wordt uitgevoerd. Een dergelijke stap voor het maken van een olieachtig middel is een belangrijke 2 0 stap om te voorzien in de effectieve doelgerichtheid van geneesmiddelafgiftesystemen ("drug delivery systems", DDS) waarvoor de laatste jaren veel belangstelling bestaat.To such a sesame paste oil the aforementioned powdered mushrooms are added after fermentation to enclose the finely powdered mushrooms with the oil component from the sesame. By enclosing the mushrooms in this way, their penetration ability to the cells of the affected body part can be enhanced compared to the case where such encapsulation with pasta oil is not performed. Such an step for making an oily agent is an important step to provide the effective targeting of drug delivery systems (DDS) for which there has been much interest in recent years.

Weliswaar is de stap voor het maken van een olieachtig middel zoals boven genoemd een belangrijke stap 25 en heeft het zeker de voorkeur een dergelijke stap uit te voeren, maar als het door één of ander probleem niet goed mogelijk is een olieachtig middel te maken, kan een dergelijke stap worden weggelaten. De reden waarom dit mogelijk is, is dat zoals hierna vermeld uit de test blijkt dat als 30 de roosterstap met ver-infraroodstralen en de fermentatie-stap worden uitgevoerd, de antitumoractiviteit al aanzienlijk wordt versterkt ook als de stap voor het maken van een olieachtig middel niet wordt uitgevoerd.It is true that the step of making an oily agent as mentioned above is an important step and it is certainly preferred to carry out such a step, but if it is not possible to make an oily agent due to some problem, such a step may be omitted. The reason why this is possible is that, as stated below, the test shows that if the far-infrared ray roasting step and the fermentation step are carried out, the anti-tumor activity is already considerably enhanced, even if the step of making an oily agent is not being executed.

Bovendien kunnen voor het maken, van een olieachtig 35 middel betere resultaten worden verkregen wanneer een gemengde olie wordt gebruikt waarin de bovengenoemde <. f · · H ; ' » 22 sesampastaolie en een uit rauwe sesam verzamelde olie in een geschikte verhouding worden gemengd.Moreover, for making an oily agent, better results can be obtained when using a mixed oil in which the above mentioned. H · H; 22 sesame paste oil and an oil collected from raw sesame are mixed in an appropriate ratio.

Door de uit rauwe sesam verzamelde olie bij te mengen kan de druppelgrootte van de olie klein gemaakt 5 worden, waardoor het penetrerend vermogen naar de doelcel-len aanzienlijk groter kan worden dan wanneer de paddestoelen worden omsloten met de sesampastaolie, die een hoge viscositeit en een grote druppelgrootte heeft.By admixing the oil collected from raw sesame, the droplet size of the oil can be made small, whereby the penetrating power to the target cells can become considerably greater than when the mushrooms are enclosed with the sesame paste oil, which has a high viscosity and a high viscosity. has a large drop size.

Uit rauwe sesam verzamelde olie betekent een olie 10 die is verkregen door rauwe sesam als zodanig te malen en het verkregen materiaal uit te persen en daarna het vaste materiaal te verwijderen, overeenkomend met een commercieel verkrijgbare sesamolie.Oil collected from raw sesame means an oil obtained by grinding raw sesame as such and squeezing the resulting material and then removing the solid material corresponding to a commercially available sesame oil.

De verhouding waarin de sesampastaolie en de 15 bovengenoemde uit rauwe sesam verkregen sesamolie worden gemengd, kan variëren afhankelijk van de toe te voegen hoeveelheid van het fijne uitgangspoeder, en kan goed variëren van 1 tot 3 gewichtsdelen sesamolie op 1 deel sesampastaolie. De mengverhouding van de gemengde olie en 20 het fijne uitgangspoeder kan bijvoorbeeld ongeveer 4 tot 5 gewichtsdelen fijn uitgangspoeder op ongeveer 1 gewichts-deel gemengde olie zijn.The ratio in which the sesame paste oil and the aforementioned raw sesame oil obtained from raw sesame oil are mixed may vary depending on the amount of the fine starting powder to be added, and may well range from 1 to 3 parts by weight of sesame oil to 1 part of sesame paste oil. The mixing ratio of the mixed oil and the fine starting powder can be, for example, about 4 to 5 parts by weight of fine starting powder to about 1 part by weight of mixed oil.

De paddestoelen waarvan de antitumoractiviteiten op de bovengenoemde wijze waren versterkt, werden toege-25 voegd aan het systeem dat lipideperoxide vormt door docosa-hexaeenzuur te bestralen met ultraviolet licht en de hoeveelheid gevormd lipideperoxide werd onderzocht. Daarnaast werden hun antitumoreffecten bij inwendige toediening ook gemeten met klinische tests.The mushrooms whose antitumor activities were enhanced in the above-mentioned manner were added to the lipid peroxide system by irradiating docosa-hexaenoic acid with ultraviolet light and the amount of lipid peroxide formed was investigated. In addition, their anti-tumor effects with internal administration were also measured by clinical tests.

30 Om de werkwijze ter versterking van de antitumor- activiteit met de bovengenoemde uitleg te vergelijken, werden de gevormde hoeveelheid van het bovengenoemde lipideperoxide en de effectiviteit in de klinische tests onderzocht voor respectievelijk het geval dat alleen het 35 roosteren met ver-infraroodstralen op de bovengenoemde paddestoelen werd toegepast, het geval dat alleen een fermentatie met het voor polysacchariden lytisch enzym 23 daarop werd toegepast, het geval dat alleen de fermentatie met "Koji" daarop werd toegepast, het geval dat zowel het roosteren met ver-infraroodstralen als de fermentatie met "Koji" daarop werd toegepast, en het onbehandelde geval 5 waarin geen behandeling werd toegepast.To compare the method for enhancing anti-tumor activity with the above-mentioned explanation, the amount of the above-mentioned lipid peroxide and the effectiveness in the clinical tests were investigated for the case that only the roasting with far-infrared rays on the above-mentioned mushrooms was used, the case where only a fermentation with the polysaccharide lytic enzyme 23 was applied thereto, the case that only the fermentation with "Koji" was applied thereto, the case that both roasting with far-infrared rays and fermentation with " Koji "was applied thereto, and the untreated case in which no treatment was applied.

Voor het uitvoeren van de bovengenoemde fermentatie met een voor polysacchariden lytisch enzym kunnen diverse voor polysacchariden lytische enzymen worden gebruikt, maar in het onderhavige voorbeeld werd hemicellu-10 lase gebruikt dat een vertegenwoordiger daarvan is.Various polysaccharide lytic enzymes can be used to carry out the above fermentation with a polysaccharide lytic enzyme, but hemicellulose, which is a representative thereof, was used in the present example.

In het geval dat alleen het roosteren met ver-inf raroodstralen op de paddestoelen werd toegepast, het geval dat alleen de fermentatie met het voor polysaccharide lytisch enzym daarop werd toegepast, het geval waarin 15 alleen de fermentatie met "Koji" daarop werd toegepast, en het geval waarin zowel het roosteren met ver-infraroodstralen als de fermentatie met "Koji" daarop werd toegepast, werd op het tijdstip dat de respectieve behandelingen werden uitgevoerd het materiaal met de bovengenoemde 2 0 werkwijze tot een fijn poeder gemaakt en in de volgende experimenten gebruikt.In the case that only far-infrared ray roasting was applied to the mushrooms, the case where only the fermentation with the polysaccharide lytic enzyme was applied thereto, the case where only the "Koji" fermentation was applied thereto, and In the case where both far-infrared ray roasting and "Koji" fermentation were applied thereto, at the time of the respective treatments, the material was made into a fine powder by the above-mentioned method and used in the following experiments .

De verpoederingsgraad van de respectieve monsters werd zo ingesteld dat de gemiddelde deeltjesgrootte van de poeders bij alle monsters gelijk was om een effect van de 25 deeltjesgrootte van het poeder uit te sluiten. In het geval zonder behandeling werd de agaricus in rauwe toestand en fijngehakt gebruikt, en werden de andere paddestoelen gebruikt door ze na drogen te verpoederen.The degree of pulverization of the respective samples was adjusted such that the average particle size of the powders was the same for all samples to exclude an effect of the particle size of the powder. In the case without treatment, the agaricus was used in raw state and minced, and the other mushrooms were used by pulverizing them after drying.

De gevormde hoeveelheid van de bovengenoemde 30 lipideperoxiden werd gemeten zoals hierna beschreven. In een aantal reageerbuizen werd een vooraf bepaalde hoeveelheid docosahexaeenzuur gebracht en de bovengenoemde paddestoelen werden vooraf afgewogen en in verschillende hoeveelheden aan het docosahexaeenzuur toegevoegd en gemengd. 35 De inhoud van de respectieve reageerbuizen werd vervolgens bestraald met ultraviolet licht en de gevormde hoeveelheid lipideperoxiden werd gemeten.The amount formed of the aforementioned lipid peroxides was measured as described below. A predetermined amount of docosahexaenoic acid was introduced into a number of test tubes and the above mushrooms were weighed in advance and added and mixed in different amounts to the docosahexaenoic acid. The contents of the respective test tubes were then irradiated with ultraviolet light and the amount of lipid peroxides formed was measured.

2424

Docosahexaeenzuur werd gebruikt door eerst een verdunde oplossing te bereiden waarbij de uitgangsvloeistof met ethanol 10 maal werd verdund, waarna de verdunde oplossing· verder tot 200 maal werd verdund, dit was de 5 uiteindelijke verdunde concentratie.Docosahexaenoic acid was used by first preparing a diluted solution in which the starting liquid was diluted 10 times with ethanol, after which the diluted solution was further diluted to 200 times, this was the final diluted concentration.

De monsters van de paddestoelen waarop de bovengenoemde behandelingen waren toegepast (inclusief zonder behandeling) werden toegevoegd aan een vooraf bepaalde hoeveelheid ethanol zodat de paddestoelconcentratie 60 10 mg/ml was, waarna men de ethanol 2 tot 6 weken bij normale temperatuur liet staan, zodat een extractie met ethanol werd uitgevoerd. Om het monster in de test te gebruiken werd het extract verdund tot een eindconcentratie van 0,6 mg/ml.The samples of the mushrooms to which the above treatments were applied (including without treatment) were added to a predetermined amount of ethanol so that the mushroom concentration was 60 10 mg / ml, after which the ethanol was allowed to stand for 2 to 6 weeks at normal temperature, so that a extraction with ethanol was performed. To use the sample in the test, the extract was diluted to a final concentration of 0.6 mg / ml.

15 0,05 ml van de op de boven beschreven wijze bereide oplossing van docosahexaeenzuur, 0,1 ml van een paddestoelmonster en 0,85 ml ethanol werden in een rea geerbuis gemengd, zodat het totale volume 1 ml was. Deze reageerbuis werd 3 uur bestraald met ultraviolet licht om 20 lipideperoxide te vormen. Het gevormde lipideperoxide werd gemeten met de TBA-reactie (thiobarbituurzuur-reactie).0.05 ml of the docosahexaenoic acid solution prepared as described above, 0.1 ml of a mushroom sample and 0.85 ml of ethanol were mixed in a test tube so that the total volume was 1 ml. This test tube was irradiated with ultraviolet light for 3 hours to form lipid peroxide. The lipid peroxide formed was measured by the TBA reaction (thiobarbituric acid reaction).

Door het gevormde lipideperoxide onder zure omstandigheden te verhitten liet men het vrijgekomen malondialdehyde (MDA) reageren met thiobarbituurzuur (TBA) 2 5 en de gevormde stof met absorptiemaximum werd bepaald, waarmee de gevormde hoeveelheid lipideperoxide indirect werd verkregen.By heating the formed lipid peroxide under acidic conditions, the released malondialdehyde (MDA) was reacted with thiobarbituric acid (TBA) and the substance formed with absorption maximum was determined, whereby the amount of lipid peroxide formed was indirectly obtained.

Voor het uitvoeren van de TBA-reactie werd 0,2 ml 7% natriumdodecylsulfaat, 2 ml 0,1 N zoutzuur, 0,3 ml 30 fosfowolfraamzuur en 1 ml van het reagens, bereid door 1:1 mengen van 0,67% TBA en azijnzuur, toegevoegd aan de respectieve reageerbuizen die waren bestraald met ultraviolet licht, en de TBA-reactie werd uitgevoerd door het geheel 12 minuten na toevoeging op 95°C te houden.To perform the TBA reaction, 0.2 ml of 7% sodium dodecyl sulfate, 2 ml of 0.1 N hydrochloric acid, 0.3 ml of phosphoric tungstic acid and 1 ml of the reagent were prepared by mixing 1: 1 of 0.67% TBA and acetic acid added to the respective test tubes that were irradiated with ultraviolet light, and the TBA reaction was carried out by maintaining the whole at 95 ° C for 12 minutes after addition.

35 Daarna werd het mengsel afgekoeld tot kamertempe ratuur, de TBA-reactielaag werd geëxtraheerd met N-butylal-cohol en voor de meting van de bovengenoemde hoeveelheid . . . · 'S k,, "i. V ' ' 25 MDA werd op de n-butylalcohollaag een fluorospectrofotome-trische methode toegepast. Voor het uitvoeren van de meting werd licht met een golflengte van 515 nm als excitatielicht gebruikt en werd fluormetrie uitgevoerd bij een golflengte 5 van 535 nm. De gebruikte f luorospectrof otometer was een F2000 vervaardigd door Hitachi Ltd. onder gebruik van een 40 0 V fotomultiplicator en de meting werd uitgevoerd met een bandbreedte voor de bestraling met excitatielicht van 20 nm en een bandbreedte van de fluorescentiemeting van 20 10 nm.The mixture was then cooled to room temperature, the TBA reaction layer was extracted with N-butyl alcohol and for the measurement of the above amount. . . A fluorospectrophotometric method was applied to the n-butyl alcohol layer on the n-butyl alcohol layer. To perform the measurement, light with a wavelength of 515 nm was used as the excitation light and fluorometry was performed at a wavelength 5 of 535 nm The fluorospectrophotometer used was an F2000 made by Hitachi Ltd. using a 40 0 V photo multiplier and the measurement was carried out with a bandwidth for the irradiation with excitation light of 20 nm and a bandwidth of the fluorescence measurement of 10 nm.

De effecten van docosahexaeenzuur op de paddestoelen waarop de bovengenoemde respectieve behandelingen waren toegepast door bestraling met ultraviolet licht in het lipideperoxidevormend systeem werden onderzocht in relatie 15 met de MDA-waarde (die hetzelfde is als de hoeveelheid MDA, getoond als absorptie) die op de bovenstaande wijze werd gemeten. De resultaten worden getoond in Tabel 1.The effects of docosahexaenoic acid on the mushrooms to which the aforementioned respective treatments were applied by irradiation with ultraviolet light in the lipid peroxide-forming system were investigated in relation to the MDA value (which is the same as the amount of MDA shown as absorption) that is on the above measured. The results are shown in Table 1.

Daarnaast werden met de bovengenoemde paddestoelen, te weten Poria, agaricus, maitake (respectievelijk 20 zwarte maitake en Polyporus (Polyporus umbellatus Fries)), klinische tests uitgevoerd met patiënten met borstkanker, maagkanker en longkanker, respectievelijk zonder behandeling, met fermentatiebehandeling met voor polysacchariden lytisch enzym, met fermentatiebehandeling met "Koji", met 25 roosterbehandeling met ver-infraroodstralen + fermentatiebehandeling met "Koji", met roosterbehandeling met ver-infraroodstralen + fermentatiebehandeling met "Koji" + behandeling voor het maken van een olieachtig middel. De resultaten worden getoond in Tabel 2, 3 en 4.In addition, with the above-mentioned mushrooms, namely Poria, agaricus, maitake (respectively 20 black maitake and Polyporus (Polyporus umbellatus Fries)), clinical tests were carried out on patients with breast cancer, stomach cancer and lung cancer, respectively without treatment, with fermentation treatment with polysaccharides lytic enzyme, with fermentation treatment with "Koji", with lattice treatment with far-infrared rays + fermentation treatment with "Koji", with lattice treatment with far-infrared rays + fermentation treatment with "Koji" + treatment for making an oily agent. The results are shown in Tables 2, 3 and 4.

30 In Tabel 2 worden de behandelingseffecten van de bovengenoemde paddestoelen waarop diverse behandelingen zijn toegepast op borstkankerpatiënten getoond. Tabel 3 en 4 laten behandelingseffecten op maagkankerpatiënten en longkankerpatiënten zien van de diverse paddestoelen waarop 35 dezelfde behandelingen werden uitgevoerd als in Tabel 2. In de Tabellen 2 tot 4 worden ook effectiviteitspercentages getoond berekend met de volgende formule: 26In Table 2, the treatment effects of the above-mentioned mushrooms to which various treatments have been applied to breast cancer patients are shown. Tables 3 and 4 show treatment effects on gastric cancer patients and lung cancer patients of the various mushrooms on which the same treatments were performed as in Table 2. Tables 2 to 4 also show effectiveness percentages calculated with the following formula: 26

Effectiviteitspercentage = (effectief aantal + enigszins effectief aantal) x 100/(effectief aantal + enigszins effectief aantal + niet-effectief aantal) 27Effectiveness rate = (effective number + somewhat effective number) x 100 / (effective number + somewhat effective number + ineffective number) 27

Tabel 1 Effectief van verschillende paddestoelen op MDA-productieTable 1 Effective of different mushrooms on MDA production

Soort Te testen onderwerp en soort MDA-waarde volgor- behandeling (gemiddeld) deType of subject to be tested and type of MDA value follow-up treatment (average)

Controle (geen paddestoel toegevoegd) 115 5 Geen behandeling Poria 269 4Control (no mushroom added) 115 5 No treatment for Poria 269 4

Agaricus 283 3Agaricus 283 3

Polyporus umbellatus Fries 439 1Polyporus umbellatus Fries 439 1

Maitake (zwart) 398 2Maitake (black) 398 2

Matsutake 218 5Matsutake 218 5

Shi-itake 189 6Shi-itake 189 6

Roosteren met Poria 288 4 ver-infrarood- Agaricus 341 3 stralen Polyporus umbellatus Fries 536 1Toasting with Poria 288 4 far-infrared Agaricus 341 3 rays Polyporus umbellatus Fries 536 1

Haitake (zwart) 490 2Haitake (black) 490 2

Matsutake 271 5Matsutake 271 5

Shi-itake 233 6Shi-itake 233 6

Fermentatie met Poria ' 284 5 10 voor polysaccha- Agaricus 375 3 ride lytisch en- Polyporus umbellatus Fries 551 1 zym Maitake (zwart) 525 2Fermentation with Poria '284 5 10 for polysaccha-agaricus 375 3 ride lytic and Polyporus umbellatus Fries 551 1 enzyme Maitake (black) 525 2

Matsutake 304 4Matsutake 304 4

Shi-itake 265 6Shi-itake 265 6

Fermentatie met Poria 296 5 "Koji" Agaricus 399 3Fermentation with Poria 296 5 "Koji" Agaricus 399 3

Polyporus umbellatus Fries 594 1Polyporus umbellatus Fries 594 1

Maitake (zwart) 528 2Maitake (black) 528 2

Matsutake 302 4Matsutake 302 4

Shi-itake 280 6 15 Roosteren met Poria 334 6 ver-infrarood- Agaricus 489 3 stralen + fermen- Polyporus umbellatus Fries 799 1 tatie met "Koji" Maitake (zwart) 768 2Shi-itake 280 6 15 Toasting with Poria 334 6 far-infrared- Agaricus 489 3 rays + fermen- Polyporus umbellatus Fries 799 1 tation with "Koji" Maitake (black) 768 2

Matsutake 412 4Matsutake 412 4

Shi-itake 381 5Shi-itake 381 5

Roosteren met Poria 362 6 2 0 ver-infrarood- Agaricus 509 3 stralen + fermen- Polyporus umbellatus Fries 827 1 tatie met "Koji" Maitake (zwart) 792 2 + maken van olie- Matsutake 430 4 achtig middel Shi-itake 397 5 25 Respectieve paddestoelen werden toegevoegd in een hoeveelheid van 6 mg/ml 1 . ’>#· oV> <υ S’ ο .υ οToasting with Poria 362 6 2 0 far-infrared - Agaricus 509 3 rays + fermen - Polyporus umbellatus Fries 827 1 tation with "Koji" Maitake (black) 792 2 + making oil - Matsutake 430 4 like agent Shi-itake 397 5 25 Respective mushrooms were added in an amount of 6 mg / ml 1. ’> # · OV> <υ S’ ο .υ ο

<D<D

υυ

* X* X

ri ω " M Q.ri ω "M Q.

Q) to t! -η C a) :fl) -u •H > (flQ) to t! -η C a): fl) -u • H> (fl

W HW H

id o <Did o <D

Qj <1) O LTIOLD ooo o o in O o Jj Γ* m-i «* - * o csofNj inmui in in h o inQj <1) O LTIOLD ooo o o in O o Yy Γ * m-i «* - * o csofNj inmui in in h o in

(D a·—' r-r^iH rHCNCN rHCNCN Η (N ^ M mfl C(D a · - 'r-r ^ iH rHCNCN rHCNCN Η (N ^ M mfl C

-M ____:_____ 0-M ____: _____ 0

Π BΠ B

n3 iw M *h 4J ^ (Ö ω u jj lj J-) D —4 H d) IM »-» Ο λ ·Η 0-4 r-- Γ" vr> lil OJ H Ο O ^OH (N 10 F- g g Ï3<ü m m m m m m m m n co m m n ts H ^n3 iw M * h 4J ^ (Ö ω u yy lj J-) D - 4 H d) IM »-» Ο λ · Η 0-4 r-- Γ "fr> lil OJ H Ο O ^ OH (N 10 Fgg Ï3 <ü mmmmmmmmn co mmn ts H ^

Ï-------- MM -------- M

ft 0 ω iw · — lHft 0 ω iw · - 1H

O “ βΐ (L) *4-1 CL) 53 -π -η ö φ jj C o. 513 ο -η ra 0) o Cn 0) CQ JJ c H ° c ΐ1 M U 0O “βΐ (L) * 4-1 CL) 53 -π -η ö φ yy C o. 513 ο -η ra 0) o Cn 0) CQ YJ c H ° c ΐ1 M U 0

Φ ü W ai rooirn^vDLrtinr--!D^!Dt~-incocn (D Φ BΦ ü W ai rooirn ^ vDLrtinr -! D ^! Dt ~ -incocn (D Φ B

0 ______ft M-l0 ______ft M-1

4J ft M-l rH4 µ ft M -1 rH

W Jj i„ Φ Φ id O) a a) jj jj U J* Ü m to ö 'Ö jj o a) G fd rt ÏÏ £ jj -H rdW Yy i Φ Φ id O) a a) yy yy U J * Ü m to ö 'Ö yy o a) G fd rt ÏÏ £ yy -H rd

_ ft o I m-ι oj I ^ II (U Nft o m m ι ((((U N

^ CQ W O H t—I Γ-Ι fsj Η Π Ti og t—( n VD H {yj [ƒ} ,—( 05 a) ------- cn fd 'Ö I—I -Η (d cl rd ö jj <d jj <u o^ CQ WOH t — I Γ-Ι fsj Η Π Ti og t— (n VD H {yj [ƒ}, - (05 a) ------- cn fd 'Ö I-I -Η (d cl rd ö yy <d yy <uo

H Ö HH Ö H

H rd + *H fdH rd + * H fd

A >WA> W

υ rH Φ m td ή M fd jj 0) JJ u > O <L>υ rH Φ m td ή M fd yy 0) YY u> O <L>

JJ U-JJJ U-J

^ co to to w co ^ .^ co to w co ^.

(0 Ga>3a>3a)Go)30)jJ pi] P(0 Ga> 3a> 3a) Go) 30) p

i> OJJUJJOJJOJJUJJfl) (I) ~ 4-) fd -Η 1¾ π! ·Η (fl n) -ri Πί fl -H ti Λ) ·Η HJ Z1 w U -H J-i aJ ·Η M jj *H MU *h U xJ *H Mi) Ah m 0 OOwii OtJlifl OtJ)(i OOlid ODlid rni> OJJUJJOJJOJJUJJfl) (I) ~ 4-) fd -Η 1¾ π! · Η (fl n) -ri Πί fl -H ti Λ) · Η HJ Z1 w U -H Ji aJ · Η M yy * H MU * h U xJ * H Mi) Ah m 0 OOwii OtJlifl OtJ) (i OOlid ODlid rn

w PM < ε CM fC E CM rtj 2 ft < 2 ft < 2 Ww PM <ε CM fC E CM rtj 2 ft <2 ft <2 W

-P_____;__-Η II rH-P _____; __- Η II rH

υ ο) Q) , c = m ai n ΜΗ rt ·Η -H a) IT) (d o o' 0 ι-h 'i~> fO Η 0) υ i « I W ο) Λί jjυ ο) Q), c = m a n n ΜΗ rt · Η -H a) IT) (d o o '0 ι-h' i ~> fO Η 0) υ i «I W ο) Λί yy

m S Ήr 1= ? 5 Ö Wm S Ήr 1 =? 5 Ö W

01 >, o jj O J-H (d D O01>, o yy O J-H (d D O

Ö ri Ma)H(U6_r! Π OÖ ri Ma) H (U6_r! Π O

-rH 0 «Ε «Ê H ς Π wp> H -rfli-IUlMD-Mrl (1) fl) M 'n C -Η β -H jj -. λ .-rH 0 «Ε« Ê H ς Π wp> H -rfli-IUlMD-Mrl (1) fl) M 'n C -Η β -H yy -. λ.

Ό opw irtiiBUCQ CQ ΌΌ up irtiiBUCQ CQ Ό

^ CH = MJJM-lJfllrn i\ _I^ CH = MJJM-1Jfllrn i \ _I

be 01 N (UfiaJÖCUÏÏ ^ •O-H C 4JÖJJ >D)J»IU-Hp -Η φ r)r4 -H 0)0)0) B grljj fl) fT) bj Ο) ΓΗ B B JJMJJMO-*^ “· U‘be 01 N (UfiaJÖCUÏ ^ • OH C 4JÖJJ> D) J »IU-Hp -Η) r) r4 -H 0) 0) 0) B grljj fl) fT) bj Ο) ΓΗ BB YYMYYMO - * ^“ · U "

® T3 0) Jj 0)0)0)0) HJ® T3 0) Yy 0) 0) 0) 0) HJ

pq C T) 0)00) E'wp'wfirH -H Q)pq C T) 0) 00) E'wp'wfirH -H Q)

(0 Π-ΗΙ0-Η i0_{ L r-H(0 Π-ΗΙ0-Η i0_ {L r-H

Λ ns jj-hjj G+C + >t0 F* PS ns yy-hyy G + C +> t0 F * P

OO 0) GrtJJrtaiO) JJ -Η MHOO 0) GrtJJrtaiO) YJ -Η MH

J3 0) jJNJJ MfiHRGfl) jj -.J3 0) yYNYY MfiHRGfl) yy -.

_i Λ GrHG 0)0)0)0)0)>ii 7; 'Z!GrHG 0) 0) 0) 0) 0)> ii 7; "Z!

rH -u 0) 0) JJ rH JJ rH JJ tJ) O <UrH -u 0) 0) YY rH YY rH YY tJ) O <U

fl)M G B id B mrttnratd A) kj Ο0 Ο) ΜΌΜ Ο Μ 0 Μ E , . .* ,,fl) M G B id B mrttnratd A) kj Ο0 Ο) ΜΌΜ Ο Μ 0 Μ E,. . * ,,

rMO 0) 0)-M0) 04J04-) HJ ft ArMO 0) 0) -M0) 04J04-) HJ ft A

(dw U h u h Kmploi+Q) M-J Q) Η ιί------- » -_- .....I__________ 1 1 'I ÏU ω trj(dw U h u h Kmploi + Q) M-J Q) ι ιί ------- »-_- ..... I__________ 1 1 'I ÏU ω trj

ID O LDID O LD

rH HrH H

<υ tn m<υ tn m

XJXJ

GG

d) Ü k <u _ ft C w 0) Ü *P d> d ü =<u > Η -η X> o CÖ 0) or'O oor- mt^o o» t- r- **, 4-t — r- r- r- ^ - - - - - - - *. * ·>d) Ü k <u _ ft C w 0) Ü * P d> d ü = <u> Η -η X> o CÖ 0) or'O due ^ oo »t- r- **, 4- t - r- r- r ^ - - - - - - - *. * ·>

Mi 4-1 éf ^ . V O VD O OOVO n U3 O VDVDVDMi 4-1 or ^. V O VD O OOVO n U3 O VDVDVD

H W'-' VDVDVD Η Η N H 05 05 H OJ rf Hm** 0) ________H W '-' VDVDVD Η Η N H 05 05 H OJ rf Hm ** 0) ________

MM

G Ή nt 2 Μ ΐ 01 oG Ή nt 2 ΐ ΐ 01 o

zi U (Isee U (I

>0 0)0-1> 0 0) 0-1

f(J ·Η 4-1 DO CX) CD r- ΙΛ ^ > ** OJ VO (N CO LOiTiVDf (J · Η 4-1 DO CX) CD r- ΙΛ ^> ** OJ VO (N CO LOiTiVD

g ___ 2d) (N 05 05 OJ 05 05 05 05 05 05 05 H 05 Η Hg ___ 2d) (N 05 05 OJ 05 05 05 05 05 05 05 H 05 Η H

P* S m ^ Ö ° 8 |ï g ö « 3¾ oP * S m ^ Ö ° 8 | ï g ö «3¾ o

Φ Dl « CQΦ Dl «CQ

H o 'c tj UH o 'c tj U

O) 2 WO) Μ π H Hnn co ut route·* -j* r* co (15 O -______αO) 2 WO) Μ π H Hnn co ut route · * -j * r * co (15 O -______ α

4J4J

W s M-, 05 Q) X (U 4-) s S ï ® Ό Ji ü 05 nj σι o; μ Z ra <w m (¾ ra iw 05 u* 2 ω O O r-i 05 05 m H 05 η Η Π l/) H ** V£) fy» ™ <d _______W s M -, 05 Q) X (U 4-) s S ï Ό Ji ü 05 nj σι o; μ Z ra <w m (¾ ra iw 05 h * 2 ω O R-i 05 05 m H 05 η Η Π l /) H ** V £) fy »™ <d _______

Ό HΌ H

G nJG nJ

05 4-> H ö H (005 4-> H δ H (0

H (CH (C

Aa

O i-5O i-5

W (OW (O

M (ÖM (Ö

05 4J05 4J

> O> O

4-> P ω ra ra m ω (U 30) DO) 30) 30 3 0) 4-5 >> 0Λ UJi ÜJd OX U 40 fl) r JJ fÖ-HrO nJ-H ni fÖ -Η (0 Πί ·Η (O (Τί·Ηίΰ Zl μ ·η μ jj -η μ jj -η μ jj -μ μ jj -η μ *j Λ η ο μ ίο ·η μ ra -η μ π! -μ μ π! -η μ ra -η Ε; ο obtra oenra oenra ο σι ra o m ra rn 0) tn CUiiSftrtEOirtEftrtEftfïE ω4-> P ω ra ra m ω (U 30) DO) 30) 30 3 0) 4-5 >> 0 UJi ÜJd OX U 40 fl) r JJ fÖ-HrO nJ-H ni fÖ -Η (0 ·ί · Η (O (Τί · Ηίΰ Zl μ · η μ yy -η μ yy -η μ yy -μ μ yy -η μ * j Λ η ο μ ίο · η μ ra -η μ π! -Μ μ π! - η μ ra -η Ε; ο obtra oenra oenra ο σι ra om ra rn 0) tn CUiiSftrtEOirtEftrtEftfïE ω

4-)______-H4 -) ______- H

UYOU

05 | C E (O05 | C E (O

H4 ra -η ·μ 05 ui Λ ·η ·π ^ υ o om f-t 0) o i Ui i Μ ο) Λί rn <o Oe'Oe'dfrt zL ra o o tj 2 ü) >1 O J-> O J-> *H (ü H H k Φ k d> E r! 5 O rt 6 πί E ^ a « u k en _ r—I *<H 4-5 d) 4-5 d) Ή ÖH4 ra -η · μ 05 ui Λ · η · π ^ υ o om ft 0) oi Ui i Μ ο) Λί rn <o Oe'Oe'dfrt zL ra oo tj 2 ü)> 1 O J-> O J -> * H (ü HH k Φ kd> E r! 5 O rt 6 πί E ^ a «uk and _ r — I * <H 4-5 d) 4-5 d) Ή Ö

m U ·η Ö -H G -H 4Jm U · η Ö -H G -H 4J

O o -H JJ ·Η 1) i ^ Τί OEM i<öinJUC/3 h en >>ιε k j-> k xJ cd rn 2 G tj) n <υ G d) G d) IjO o -H JJ · Η 1) i ^ Τί OEM i <öinJUC / 3 h and >> ιε k j-> k xJ cd rn 2 G tj) n <υ G d) G d) Ij

flj *r4 C JJÖ X) > Q) >d)*H iJflj * r4 C JJÖ X)> Q)> d) * H iJ

rjr-5 -H 0)0)0) E E rH I)rjr-5-H 0) 0) 0) E E rH I)

't? <U Η E 6 JJM0JMOit? <U Η E 6 YYM0YMO

0)¾ <u x 0) 0) 0) 0)0) ¾ <u x 0) 0) 0) 0)

m C T3 0) ü 0) E 4-1 £ 4-5 e rHm C T3 0) 0 0) E 4-1 £ 4-5 e rH

Π3 C *H (0 *H fi «4 Λ rö xJ *H 4-J CJ+ fi + > lüΠ3 C * H (0 * H fi «4 Λ rö xJ * H 4-J CJ + fi +> lü

ΓΛΦ rC rtJ4Jrt 0) 0) 4-JC rC rtJ4Jrt 0) 0) 4-J

Λ 0) jj>,4J kö k ö ö Al , 43 C rH C Q)<ü0)d)0)ziΛ 0) yy>, 4J kök ö ö Al, 43 C rH C Q) <ü0) d) 0) zi

rH XJ 0) Φ XJ rH xl H Ai UIrH XJ 0) J XJ rH x1 H Ai UI

ni k C Ed) E tore mnJrt Z. O 4) kTJ k Ok 0 k £ . .ni k C Ed) E tore mnJrt Z. O 4) kTJ k Ok 0 k £. .

rM O d) d)*H(U O J-l 0 X-> 4-Jr M O d) d) * H (U O J-10 X-> 4-J

ffl ü) LD Ci4 k t, ΟίΜ ftJW+ (1) η IL 11 ..... 1 1 -J -_-^=J w m offl ü) LD C14 k t, ΟίΜ ftJW + (1) η IL 11 ..... 1 1 -J -_- ^ = Y w m o

rHrH

0) cn fÖ0) cn fÖ

4J4J

CC.

0) u μ 4) w ft ü w « η JJ 0) Ö £ :Q) >0) u μ 4) w ft ü w «η YY 0) Ö £: Q)>

-H -H-H -H

4J t; (ri OJ oo ooo ooo o o o o o o 0 OH O - - - - - - - - - > - ---4J; (ri OJ oo ooo ooo o o o o o o 0 OH O - - - - - - - - -> - ---

Mi «w <*» -OO OLTlin LD O O LD O LD O ΙΓ! OMi «w <*» -OO OLTlin LD O O LD O LD O ΙΓ! O

Η W »— Lil Η Η Η Η n rH CN rH CN ΓΝ r> Ifi 0) ________Η W »- Lil Η Η Η Η n rH CN rH CN ΓΝ r> Ifi 0) ________

MM

Ö «Η rt « Λ! ί tn υÖ «Η rt« Λ! ί tn υ

ίί 4J <U4J <U

Μ 0) ΙΜ Ο -η u-ι chcooo οογ-γλ r* u> cn r- ιΗ vd η ο ^ I ^ 3d) Η Η Η Η Η Η rH rH W Η Η Η Η ι—I Η (¾ ο raiH Ö 0 8 |ΐ g G gSS Ο Ü) Ρ< tn ω ω Η ο ’25 Μ Φ ο Η 0) I Η (Ν η Η Ν (ΝΠΙ/Ί Η Π ID CN*J»tn 0 Ο ~______ft 4J .Μ 0) ΙΜ η -η u-ι chcooo οογ-γλ r * u> cn r- ιΗ vd η ο ^ I ^ 3d) Η Η Η Η Η Η rH rH W Η Η Η Η ι — I Η (¾ ο raiH Ö 0 8 | ΐ g G gSS Ο Ü) t <tn ω ω Η ο '25 Μ Φ ο Η 0) I Η (Ν η Η Ν (ΝΠΙ / Ί Η Π ID CN * J »tn 0 Ο ~ ______ ft 4J.

W 5 ΙΗ <υW 5 ΙΗ <υ

ω λ a 4-Ja λ a 4-J

S S υ “ 'Ö Λί υ 0 Φ S1 ίί -υ p4 0 iï 0 ω Ο Ο rH Η Η η Η Η Μ CN ΓΟ ^ Μ η 1/1 \J) (1) _I______ »0 τΗ d röS S υ “'Ö Λί υ 0 Φ S1 ίί -υ p4 0 iï 0 ω Ο Ο rH Η Η η Η Η Μ CN ΓΟ ^ Μ η 1/1 \ J) (1) _I______» 0 τΗ d rö

Φ -UΦ -U

η d γΗ I rd •Η rd Λ ϋ Η w fd Μ td Φ 4-> ϊ> ο 4-) ^ ω w w ra w (0 ί <υ ία) ί <υ ία) ί «) ϋ »> U Λί L) Λί OM VX Λ) ^ JJ nj-rlnj f0 -Η Π3 Γΰ·Ηί0 (Ö *Η lö (Ö ·Η Π3 Ζ, μ ·Η k D ·Η kjj -Η μ 4-) ‘Η Μ 4-1 ·Η Μ 4-) Λ rj ο μ ra -η μ « -η μ <α ·η μ γο ·η μ <α ·η Ρ ο ο m ns ο σι ra odifc ocnai ο cn cö rnη d γΗ I rd • Η rd Λ ϋ Η w fd Μ td Φ 4-> ϊ> ο 4-) ^ ω ww ra w (0 ί <υ ία) ί <υ ία) ί «) ϋ»> U Λί L) OMί OM VX Λ) ^ YY nj-rlnj f0 -Η Π3 Γΰ · Ηί0 (Ö * Η lö (Ö · Η Π3 Ζ, μ · Η k D · Η kjj -Η μ 4-) 'Η Μ 4- 1 · Η Μ 4-) j rj ο μ ra -η μ «-η μ <α · η μ γο · η μ <α · η Ρ ο ο m ns ο σι ra odifc ocnai ο cn cö rn

O' co ft < S ft < S ft S ft < Σ ft rtj Σ WO 'co ft <S ft <S ft S ft <Σ ft rtj Σ W

4J______-H4J ______- H

υυ

Φ , s * WΦ, s * W

m m *H -H QJm m * H -H QJ

Ml Λ *n -m .M1 * n -m.

^ u o o h «7 Φ U i ^ 0) ^ m Λ Ό c Ό c Ό μ J2. W O O T3 2 ö) >i 04J0JJ-r4fd rj rH μ qj μ a) E r< 5 o ra e re ε •π a = u μ cn _ r-i -η M-4 o «μ a) -η ö sit μ T~» ö *H ö -H 4J Λ» _5 O O -H 4J Ή 4J Λ ^^ u o o h «7 Φ U i ^ 0) ^ m Λ c Ό c Ό μ J2. WOO T3 2 ö)> i 04J0JJ-r4fd rj rH μ qj μ a) E r <5 o r a re ε • π a = u μ cn _ ri -η M-4 o «μ a) -η ö sit μ T ~ »ö * H ö -H 4J Λ» _5 OO -H 4J Ή 4J Λ ^

Td OÊ!a4 i fd ι m u COTd OÊ! A4 i fd ι m u CO

Öcn >Sc μ u μυ (ö Γλ q cd n a> q <υ q a) ziÖcn> Sc μ u μυ (ö Γλ q cd n a> q <υ q a) zi

Π3 *h q 4jq 4_) >a) ><d*h PΠ3 * h q 4jq 4_)> a)> <d * h P

rH -H Q)0)<D É 6 H ijr H -H Q) 0) <D 6 H ij

Pia> »h £ e-μμ-μμο Φτ3 a> Λ a)a)a)a) pQ q O <uu φ £ ^ E UH q h ai q -μ ω -η rt ^ Λ m 4J*h ij q+ q + > ίυ 0) Λ ra U aj 0) <ü 4-) Λ o; jj>,4_) μβ μ q q λι , Λ β ιΗ β φφ 0)0)0) 2iPia> »h £ e-μμ-μμο Φτ3 a> Λ a) a) a) a) pQ q O <uu φ £ ^ E UH qh ai q -μ ω -η rt ^ Λ m 4J * h ij q + q +> ίυ 0) Λ ra U aj 0) <ü 4-) Λ o; yy>, 4_) μβ μ q q λι, Λ β ιΗ β φφ 0) 0) 0) 2i

Hj-J 0) 0) 4J H 4-) ι—1 Ο» ηιμ q ë o) e was wrarc J:o o) μό μ ομ ome ,, Λο 0) 0) Ή 0) Ο 4J Ο 4J 4-) (dw ü fe μ tfw ccjw+ ο; Η 1L··· ·· Π 1 . 1 ,___ !„ 1 -JI Κ , ιη ο I—i 31Hj-J 0) 0) 4J H 4-) ι-1 Ο »ηιμ q ë o) e was wrarc J: oo) μό μ ομ ome ,, Λο 0) 0) Ή 0) Ο 4J Ο 4J 4-) (dw ü fe μ tfw ccjw + ο; Η 1L · ·· ·· Π 1. 1, ___! '1 -JI Κ, ιη ο I-i 31

Uit voorgaande Tabel 1 blijkt dat bij dezelfde soort paddestoelen de MDA-waarde, een index voor de gevormde hoeveelheid lipideperoxide, wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen wordt toegepast groter wordt dan bij 5 het geval zonder behandeling, wanneer de fermentatie met voor polysaccharide lytisch enzym wordt toegepast groter wordt dan wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen wordt toegepast, wanneer de fermentatie met "Koji" wordt toegepast groter wordt dan bij de fermentatie met voor 10 polysaccharide lytisch enzym, wanneer zowel het roosteren met ver-infraroodstralen als de fermentatie met "Koji" wordt toegepast groter wordt dan wanneer de fermentatie met "Koji" wordt toegepast, en wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen, de fermentatie met "Koji" en het maken 15 van een olieachtig middel alle drie worden toegepast groter wordt dan wanneer zowel het roosteren met ver-infraroodstralen als de fermentatie met "Koji" wordt toegepast.From previous Table 1 it appears that for the same type of mushrooms, the MDA value, an index for the amount of lipid peroxide formed, when roasting with far infrared rays is used, becomes greater than in the case without treatment, when the fermentation with polysaccharide lytic enzyme is used becomes larger than when far-infrared ray roasting is used, when "Koji" fermentation is applied becomes larger than in fermentation with polysaccharide lytic enzyme, when both far-infrared ray roasting and fermentation with " Koji "is applied becomes larger than when the fermentation with" Koji "is applied, and when roasting with far infrared rays, the fermentation with" Koji "and making an oily agent all three are applied becomes greater than when both the roasting with far infrared rays when "Koji" fermentation is used.

Deze tendens geldt algemeen, ongeacht de voor de tests gebruikte soort paddestoelen, behalve voor Poria bij 20 de vergelijking tussen het roosteren met ver-infraroodstralen en de fermentatie met voor polysaccharide lytisch enzym, en voor de matsutake (Tricholoma matsutake) bij de vergelijking tussen de fermentatie met voor polysaccharide lytische enzym en de fermentatie met "Koji".This tendency applies generally, regardless of the type of mushrooms used for the tests, except for Poria in the comparison between roasting with far infrared rays and fermentation with polysaccharide lytic enzyme, and for the matsutake (Tricholoma matsutake) in the comparison between the fermentation with polysaccharide lytic enzyme and fermentation with "Koji".

25 Vrijwel dezelfde MDA-waarde (om precies te zijn is de waarde van de ene behandeling ongeveer 1% groter dan die van de andere behandeling) kan worden verkregen wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen wordt toegepast en wanneer de fermentatie met voor polysaccharide lytisch 30 enzym wordt toegepast op Poria, en wanneer de fermentatie met voor polysaccharide lytisch enzym wordt toegepast en wanneer de fermentatie met "Koji" wordt toegepast op de matsutake (Tricholoma matsutake).Virtually the same MDA value (to be precise, the value of one treatment is about 1% greater than that of the other treatment) can be obtained when roasting with far infrared rays is used and when fermentation with polysaccharide lytic enzyme is applied to Poria, and when the fermentation with polysaccharide lytic enzyme is used and when the fermentation with "Koji" is applied to the matsutake (Tricholoma matsutake).

Uit de Tabellen 2 tot 4, waarin de resultaten 35 worden getoond van de klinische test met het toedienen van Poria, agaricus, maitake (zwarte maitake, Polyporus (Poly-porus umbellatus Fries)) waarop de bovengenoemde respectie- 32 ve behandelingen werden toegepast, aan borstkankerpati-enten, maagkankerpatiënten en longkankerpatiënten, blijkt dat de effectiviteitspercentages in de respectieve gevallen van borstkankerpatiënten, maagkankerpatiënten en longkan-5 kerpatiënten, bij dezelfde soort paddestoelen, wanneer de fermentatie met voor polysaccharide lytisch enzym wordt toegepast hoger worden dan in het geval zonder behandeling, wanneer fermentatie met "Koji" wordt toegepast hoger worden dan wanneer de fermentatie met voor polysaccharide lytisch 10 enzym wordt toegepast, wanneer zowel het roosteren met ver-infraroodstralen als de fermentatie met "Koji" worden toegepast groter wordt. dan wanneer de fermentatie met "Koji" wordt toegepast, en wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen, de fermentatie met "Koji" en het maken 15 van een olieachtig middel alle drie worden toegepast hoger wordt dan wanneer zowel het roosteren met ver-infraroodstralen als fermentatie met "Koji" worden toegepast.From Tables 2 to 4, which shows the results of the clinical trial with administration of Poria, agaricus, maitake (black maitake, Polyporus (Poly-porus umbellatus Fries)) to which the above-mentioned respective treatments were applied, for breast cancer patients, gastric cancer patients and lung cancer patients, it appears that the effectiveness percentages in the respective cases of breast cancer patients, gastric cancer patients and lung cancer patients, for the same type of mushrooms, when the fermentation with polysaccharide lytic enzyme is applied is higher than in the case without treatment when fermentation with "Koji" is used, it becomes higher than when fermentation with polysaccharide lytic enzyme is used, when both roasting with far infrared rays and fermentation with "Koji" becomes larger. than when the fermentation with "Koji" is applied, and when roasting with far-infrared rays, fermentation with "Koji" and making an oily agent all three are applied higher than when both roasting with far-infrared rays and fermentation with "Koji" can be used.

Uit Tabel 2 blijkt voor bijvoorbeeld Poria dat het effectiviteitspercentage bij toepassing van het roosteren 20 met ver-infraroodstralen + fermentatie met "Koji" + het maken van een olieachtig middel in vergelijking met het onbehandelde geval stijgt van 7,5 tot 20,0%, ofwel ongeveer driemaal. Bij de agaricus stijgt het effectiviteitspercentage van 7,5 tot 35%, ofwel 4,9 maal. Bij de maitake stijgt 25 het effectiviteitspercentage wat betreft het tot uiting komen van een antitumoreffeet verbazingwekkend van 10,0 tot 57,5%, ofwel 5,75 maal. Deze tendens is hetzelfde in Tabel 3 en 4 .Table 2 shows, for example for Poria, that the percentage of effectiveness when applying roasting with far-infrared rays + fermentation with "Koji" + making an oily agent compared to the untreated case increases from 7.5 to 20.0%, or about three times. For the agaricus, the effectiveness percentage increases from 7.5 to 35%, or 4.9 times. With the maitake, the effectiveness percentage with regard to the expression of an anti-tumor efficiency rises surprisingly from 10.0 to 57.5%, or 5.75 times. This trend is the same in Tables 3 and 4.

Uit de bovenstaande resultaten blijkt dat de 30 behandelingsmethode waarbij de roosterstap met ver-infraroodstralen, de fermentatiestap met "Koji" en de stap voor het maken van olieachtig middel achtereenvolgens worden gecombineerd, effectief kan worden gebruikt als werkwijze voor het vergroten van het tot uiting komen van de antitu-35 moractiviteit van paddestoelen, ofwel als de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit.From the above results, it appears that the treatment method in which the far-infrared ray roasting step, the "Koji" fermentation step and the oily-making step are successively combined, can be effectively used as an expression enhancing method of the anti-tumor activity of mushrooms, or as the method for enhancing anti-tumor activity.

3333

Tabel 5 Hoeveelheid vrij /3-glucan in de respectieve soorten onbehandelde paddestoelen en paddestoelen waarop de roos-terbehandeling met ver-infraroodstralen en de fermenta-tiebehandeling met "Koji" zijn toegepast 5 Soort behandeling Soort Hoeveelheid β- glucanTable 5 Quantity of free / 3-glucan in the respective types of untreated mushrooms and mushrooms to which the roaster treatment with far infrared rays and fermentation treatment with "Koji" have been applied 5 Type of treatment Type Quantity β-glucan

Onbehandeld Agaricus 9,0 g/100 gUntreated Agaricus 9.0 g / 100 g

Maitake (zwart) 24,4 g/100 gMaitake (black) 24.4 g / 100 g

Roosterstap met ver- Agaricus 14,2 g/100 g infraroodstralen + Maitake (zwart) fermentatiestap met 30,4 g/100 g 10 "Koji"Grating step with ver Agaricus 14.2 g / 100 g infrared rays + Maitake (black) fermentation step with 30.4 g / 100 g 10 "Koji"

Ook werd de hoeveelheid /3-glucan als effectief bestanddeel met antitumoractiviteit gemeten in het geval van de behandeling ter vergroting van het tot uiting komen van het bovengenoemde antitumoreffeet en het geval zonder 15 behandeling. De gebruikte paddestoelen waren de agaricus en maitake (zwart) die in Tabel 2 tot 4 hoge effectiviteits-percentages lieten zien. De analyses werden overigens uitgevoerd op het Food Analysis Center in Suita, Osaka, Japan. De resultaten worden getoond in Tabel 5.Also, the amount of 3-glucan as an effective component with anti-tumor activity was measured in the case of the treatment to increase the expression of the above-mentioned anti-tumor effect and the case without treatment. The mushrooms used were the agaricus and maitake (black) that showed high efficacy percentages in Tables 2 to 4. The analyzes were conducted at the Food Analysis Center in Suita, Osaka, Japan. The results are shown in Table 5.

2 0 Uit de resultaten van Tabel 5 blijkt dat de hoeveelheid vrij jS-glu.can toenam wanneer de roosterbehande-ling met ver-infraroodstralen + de fermentatie met "Koji" werden toegepast, zowel bij de agaricus als de maitake. Wat de maitake betreft kunnen behalve bij de zwarte maitake 25 dezelfde effecten ook worden verkregen bij de Polyporus (Polyporus umbellatus Fries). Uit de resultaten van de klinische tests in Tabel 2 tot 4 blijkt dat de antitumoref-fecten groter zijn bij toepassing van de roosterbehandeling met ver-infraroodstralen + de fermentatie met "Koji" dan in 30 het geval zonder behandeling.From the results of Table 5, it appears that the amount of free S-glucan increased when the far-infrared ray grating treatment + the "Koji" fermentation were used in both the agaricus and the maitake. With regard to the maitake, in addition to the black maitake, the same effects can also be obtained with the Polyporus (Polyporus umbellatus Fries). The results of the clinical tests in Tables 2 to 4 show that the anti-tumor effects are greater when applying the lattice treatment with far-infrared rays + the fermentation with "Koji" than in the case without treatment.

Door de resultaten van Tabel 2 tot 4 en die van Tabel 5 te combineren kan dus worden gezegd dat de antitu-moreffecten van /3-glucan met name opmerkelijk tot uiting komen wanneer de hoeveelheid vrij /3-glucan groot is.Thus, by combining the results of Tables 2 to 4 and those of Table 5, it can be said that the anti-tumor effects of β-glucan are particularly noticeable when the amount of free β-glucan is large.

3434

De uitvinder zette de bovengenoemde reeks onderzoeken voort door de bovengenoemde hypothese op te stellen dat bij niet-behandelde paddestoelen β-glucanen met antitu-moractiviteit zich in een onbeweeglijke toestand bevinden 5 doordat ze aan elkaar gebonden zijn tot een keten, wat de niet-geactiveerde toestand kan worden genoemd, en dat bij inwendige toediening van de paddestoelen de keten door het maagsap van een gemiddelde persoon niet kan worden doorgeknipt, waardoor de antitumorwerking niet zoals verwacht tot 10 uiting komt. Zoals echter boven vermeld kan worden gevonden dat een stijging van de hoeveelheid vrij β-glucan een opmerkelijk effect heeft op het tot uiting komen van de antitumorwerking en dat de resultaten die volgens de hypothese van de uitvinder te verwachten zijn, kunnen 15 worden verkregen.The inventor continued the aforementioned series of investigations by establishing the aforementioned hypothesis that β-glucans with anti-morbid activity in untreated mushrooms are in a motionless state because they are bound together to form a chain, which is the non-activated state, and that when the mushrooms are administered internally, the chain cannot be severed by the gastric juice of an average person, so that the anti-tumor effect is not expressed as expected. However, as stated above, it can be found that an increase in the amount of free β-glucan has a remarkable effect on the expression of the anti-tumor activity and that the results that can be expected according to the inventor's hypothesis can be obtained.

Het preparaat geproduceerd met de roosterstap met ver-infraroodstralen, de fermentatiestap en de stap voor het maken van het olieachtige middel, die de als boven beschreven werkwijze ter versterking van de antitumoracti-20 viteit vormen, is zoals uit Tabel 5 etc. blijkt een preparaat waarin de hoeveelheid vrij /3-glucan is toegenomen en toont bij inwendige toediening effectief de antitumorac-tiviteit. In vergelijking met het preparaat dat onbehandelde paddestoelen bevat waarop de bovengenoemde werkwijze 2 5 ter versterking van de antitumoractiviteit niet is toegepast, is de antitumoractiviteit aanzienlijk versterkt.The preparation produced by the far-infrared ray roasting step, the fermentation step, and the oily-making step forming the anti-tumor activity enhancing method described above is as shown in Table 5, etc. wherein the amount of free / 3-glucan is increased and shows the anti-tumor activity when administered internally. In comparison with the preparation containing untreated mushrooms to which the above-mentioned method for enhancing anti-tumor activity has not been applied, the anti-tumor activity is considerably enhanced.

Ook blijkt uit Tabel 1 dat de volgorde van de hoogte van de MDA-waarde van de paddestoelen door verschillende behandelingen inclusief het ontbreken van een 30 behandeling, kan veranderen. In de in Tabel 1 getoonde volgorde blijkt met betrekking tot de drie soorten Poria, matsutake en shi-itake dat de volgorde, dat wil zeggen de effectiviteit van de antitumoractiviteit, kan veranderen bij de drie behandelingsmethoden, te weten het ontbreken 35 van behandeling, fermentatie met "Koji" en roosteren met ver-infraroodstraling + fermentatie met "Koji".It also appears from Table 1 that the order of the height of the MDA value of the mushrooms can change due to different treatments, including the lack of treatment. In the order shown in Table 1, with regard to the three types of Poria, matsutake and shi-itake, it appears that the order, i.e. the effectiveness of the anti-tumor activity, can change in the three treatment methods, namely the lack of treatment, fermentation with "Koji" and roasting with far infrared radiation + fermentation with "Koji".

0 ? 1 350? 1 35

Zo blijkt bijvoorbeeld dat in het geval van het ontbreken van een behandeling de antitumoractiviteit in stijgende volgorde is: Shi-itake, Matsutake en Poria, terwijl wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen en 5 de fermentatie met "Koji" worden toegepast, de antitumoractiviteit in stijgende volgorde is: Poria, Matsutake en Shi-itake. Het blijkt dat het bij toepassing van de bovengenoemde werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit van de onderhavige uitvinding mogelijk is paddestoelen die 10 in onbehandelde toestand waren beoordeeld als hebbende weinig antitumoractiviteit, in de volgorde te doen stijgen.For example, it appears that in the absence of treatment the anti-tumor activity is in ascending order: Shi-itake, Matsutake and Poria, while when roasting with far-infrared rays and fermentation with "Koji" are used, anti-tumor activity in ascending order is: Poria, Matsutake and Shi-itake. It appears that using the above-mentioned method to enhance the anti-tumor activity of the present invention, it is possible to increase the order of mushrooms that had been assessed as untreated as having little anti-tumor activity.

Op het gebied van de Chinese geneesmiddelen waarbij een natuurlijk ruw geneesmiddel wordt gebruikt, komen zeldzame soorten voor waarbij geen stabiele opbrengst 15 kan worden gegarandeerd, ook al zijn het paddestoelen met een hoge antitumoractiviteit. Wanneer echter de bovengenoemde werkwijze van de onderhavige uitvinding wordt gebruikt, is het mogelijk in plaats van een dergelijke zeldzame soort paddestoelen te gebruiken of te kweken 20 waarbij een voldoende opbrengst kan worden gegarandeerd. Zo kan een stabiele aanvoer en een lage prijs van het product worden verkregen zodat velen effectief profijt kunnen hebben van de antitumoractiviteit van paddestoelen.In the field of Chinese medicines using a natural raw medicine, rare species occur where stable yield cannot be guaranteed, even if they are mushrooms with a high anti-tumor activity. However, when the above-mentioned method of the present invention is used, it is possible to use or cultivate such a rare type of mushroom in which a sufficient yield can be guaranteed. In this way a stable supply and a low price of the product can be obtained so that many can effectively benefit from the anti-tumor activity of mushrooms.

Overigens wordt in de bovenstaande toelichting als 25 beste uitvoeringsvorm alleen de behandeling vermeld waarbij alle drie behandelingen, te weten de roosterbehandeling met ver-infraroodstralen, de fermentatiebehandeling en de behandeling voor het maken van een olieachtig middel, worden toegepast. Wanneer echter alleen de roosterbehande-30 ling met ver-infraroodstralen wordt toegepast, of wanneer alleen de fermentatiebehandeling met een voor polysaccharide lytisch enzym zoals hemicellulase etc. wordt toegepast, of wanneer alleen de fermentatiebehandeling met micro-organismen zoals "Koji" etc. wordt toegepast, of wanneer 35 alleen het roosteren met ver-infraroodstralen en de fermentatiebehandeling worden toegepast, worden de antitumoref- 36 fecten reeds versterkt vergeleken met het geval zonder behandeling.Incidentally, in the above explanation, the best embodiment only mentions the treatment in which all three treatments, namely the lattice treatment with far-infrared rays, the fermentation treatment and the treatment for making an oily agent, are used. However, when only the far infrared ray grating treatment is used, or when only the fermentation treatment with a polysaccharide lytic enzyme such as hemicellulase etc. is used, or when only the fermentation treatment with microorganisms such as "Koji" etc. is used or, if only the roasting with far-infrared rays and the fermentation treatment are used, the anti-tumor effects are already enhanced compared to the case without treatment.

Wanneer dus om één of andere redenen zoals de toestand van apparatuur het maken van een olieachtig middel 5 niet goed kan worden uitgevoerd, kunnen de roosterbehande-ling met ver-infraroodstralen en de fermentatiebehandeling met micro-organismen gecombineerd uitgevoerd worden, en kan zo de antitumoractiviteit aanzienlijk worden versterkt vergeleken met het geval zonder behandeling.Thus, if for some reasons such as the condition of equipment, the making of an oily agent cannot be properly performed, the lattice treatment with far-infrared rays and the fermentation treatment with microorganisms can be carried out in combination, and thus the anti-tumor activity can be be considerably strengthened compared to the case without treatment.

10 Bovendien kan bij de behandeling waarbij op de bovengenoemde paddestoelen de drie behandelingen worden toegepast, te weten het roosteren met ver-infraroodstralen, de fermentatiebehandeling en de behandeling voor het maken van een olieachtig middel, of wanneer op de paddestoelen 15 het roosteren met ver-infraroodstralen en de fermentatiebehandeling worden toegepast, behalve de fermentatiebehandeling met micro-organismen zoals "Koji" of gisten of bacteriën, een fermentatiebehandeling worden gebruikt waarbij een voor polysaccharide lytisch enzym wordt gebruikt.Moreover, in the treatment in which the above-mentioned mushrooms are applied the three treatments, namely roasting with far-infrared rays, fermentation treatment and the treatment for making an oily agent, or when roasting with mushrooms infrared rays and the fermentation treatment are used, apart from the fermentation treatment with microorganisms such as "Koji" or yeasts or bacteria, a fermentation treatment is used in which a polysaccharide lytic enzyme is used.

2 0 Bij de stap voor het maken van een olieachtig middel in de bovengenoemde werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit wordt een sesampastaolie verkregen uit geroosterde sesam gebruikt, maar behalve sesam kunnen ook plantenoliën gebruikt worden verkregen door het roosteren 25 van soja, maïs, saffloer, teunisbloem, rijstzemelen, raapzaad etc. met ver-infraroodstralen gevolgd door uitpersen .In the step of making an oily agent in the above-mentioned method for enhancing anti-tumor activity, a sesame paste oil obtained from roasted sesame is used, but in addition to sesame, plant oils can also be used obtained by roasting soy, maize, safflower, evening primrose, rice bran, rapeseed etc. with far infrared rays followed by pressing.

Ook kan aan het preparaat dat paddestoelen bevat waarop de bovengenoemde werkwijze ter versterking van de 30 antitumoractiviteit is toegepast, in aanvulling op de materialen verkregen door behandeling van paddestoelen met de bovengenoemde werkwijze, elke willekeurige component worden toegevoegd die geen nadelige effecten heeft op de antitumoractiviteit, zoals vitaminen.etc.Also, to the preparation containing mushrooms to which the above-mentioned method for enhancing the anti-tumor activity has been applied, in addition to the materials obtained by treating mushrooms with the above-mentioned method, any component can be added which has no adverse effects on the anti-tumor activity, such as vitamins.etc.

35 Met een dergelijke samenstelling kan een door de uitvinder ontwikkeld preparaat worden geformuleerd dat een onderdrukkend effect op actieve zuurstof heeft. Het prepa- 37 raat dat een ruw geneesmiddel met versterkte antitumoracti-viteit bevat en dat een dergelijke samenstelling heeft, kan worden verschaft in de vorm van een middel dat gemakkelijk inwendig kan worden toegediend door het in te kapselen in 5 een gelatinecapsule etc.With such a composition, a preparation developed by the inventor can be formulated which has a suppressing effect on active oxygen. The composition containing a crude drug with enhanced anti-tumor activity and having such a composition can be provided in the form of an agent that can be easily administered internally by encapsulating it in a gelatin capsule, etc.

Door gebruik van een geschikte excipiënt, een bindmiddel etc. kan door middel van tabletteren een tablet worden gemaakt, of kan goed een preparaatvorm zoals een korrel of een pil worden gemaakt. Hoewel de onderhavige 10 uitvinding een werkwijze ter versterking van de antitumor-activiteit bij inwendige toediening is, kan worden gezegd dat bij een injectiepreparaat dat is bereid onder gebruik van paddestoelen waarop de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit is toegepast, naar verwachting als 15 effect een vergroting van het tot uiting komen van het antitumoreffect zal optreden vergeleken met het geval waarin de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit niet is toegepast.By using a suitable excipient, a binder, etc., a tablet can be made by tableting, or a preparation form such as a pellet or a pill can be made well. Although the present invention is a method for enhancing antitumor activity when administered internally, it can be said that with an injection preparation prepared using mushrooms to which the antitumor activity enhancement method has been applied, the effect is expected to be an effect. enhancement of antitumor effect manifestation will occur compared to the case where the antitumor activity enhancement method has not been applied.

Overigens werd de bovenstaande toelichting gegeven 20 aan de hand van het gebruik van paddestoelen zoals agari-cus, maar de paddestoelen zijn niet noodzakelijkerwijs beperkt tot de bovengenoemde, en elke andere paddestoel kan worden gebruikt zo lang hij (3-glucan bevat. Dit kunnen bijvoorbeeld shimejitake (Lyophyllum decastes), enokitake 25 (Flammulina velutipes) etc. zijn.Incidentally, the above explanation was provided by the use of mushrooms such as agaricus, but the mushrooms are not necessarily limited to the above, and any other mushroom can be used as long as it contains (3-glucan. This can be for example shimejitake (Lyophyllum decastes), enokitake (Flammulina velutipes) etc.

Bovendien kan een ruw geneesmiddel met een ander polysaccharide met antitumoractiviteit dan (3-glucan worden gebruikt. Verder kan de werkwijze worden gebruikt als werkwijze ter versterking van het tot uiting komen van het 30 antitumoreffect van een polysaccharide met antitumoractivi-' teit zoals (3-glucan in natuurlijke of gekweekte producten die afkomstig zijn van allerlei planten waaronder paddestoelen .In addition, a crude drug with an anti-tumor activity polysaccharide other than (3-glucan can be used. Furthermore, the method can be used as a method to enhance the anti-tumor effect of an anti-tumor activity polysaccharide such as (3- glucan in natural or cultivated products that come from all kinds of plants including mushrooms.

< s' i ^ $-v<s' i ^ $ -v

: J· P: J · P

3838

UITVOERINGSVORMEMBODIMENT

In de onderhavige uitvoeringsvorm worden een werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel, en een 5 werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van een behandeling van een ruw geneesmiddel op de.antitumoractiviteit uiteengezet.In the present embodiment, a method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a raw drug, and a method for assessing the effectiveness of a treatment of a raw drug on the anti-tumor activity are set forth.

Aan het hiervoor onder VERSTERKING VAN DE ANTITUMORACTIVITEIT uiteengezette experimentele systeem waarin 10 lipideperoxiden worden gevormd door bestraling met ultraviolet licht, wordt een ruw geneesmiddel toegevoegd ter beoordeling van de antitumoractiviteit, bijvoorbeeld paddestoelen, en de gevormde hoeveelheid lipideperoxide wordt onderzocht. Wanneer de paddestoelen met stijgende 15 hoeveelheden worden toegevoegd, vertoont een paddestoel die een tendens laat zien de gevormde hoeveelheid lipideperoxide aanzienlijk te doen stijgen, bij toediening een krachtige antitumoractiviteit.To the experimental system set forth above under STRENGTHENING ANTI-TUMORACTIVITY in which lipid peroxides are formed by irradiation with ultraviolet light, a crude drug is added to evaluate the anti-tumor activity, for example mushrooms, and the amount of lipid peroxide formed is examined. When the mushrooms are added with increasing amounts, a mushroom showing a tendency to significantly increase the amount of lipid peroxide formed upon administration exhibits vigorous anti-tumor activity.

Dat wil zeggen, wanneer de stijging van de gevorm-20 de hoeveelheid lipideperoxide groot is op basis van de stijging van de concentratie van de toegevoegde paddestoel, kan de paddestoel worden geacht een krachtig antitumoref-fect te vertonen bij inwendige toediening. Zo worden meerdere soorten paddestoelen in het bovengenoemde experi-25 mentele systeem ingebracht, en wanneer de stijging van de gevormde hoeveelheid lipideperoxide op basis van de stijging van de concentratie van de toegevoegde paddestoel voor de verschillende paddestoelen wordt vergeleken, kan de volgorde worden vastgesteld van de effectiviteit voor het 30 vertonen van een antitumoreffeet bij inwendige toediening van de meerdere soorten paddestoelen.That is, when the increase in the amount of lipid peroxide formed is large based on the increase in the concentration of the added mushroom, the mushroom can be considered to exhibit a powerful anti-tumor effect upon internal administration. Thus, several types of mushrooms are introduced into the above-mentioned experimental system, and when the increase in the amount of lipid peroxide formed is compared on the basis of the increase in the concentration of the added mushroom for the different mushrooms, the order of the effectiveness for exhibiting an anti-tumor rate when administered internally of the multiple types of mushrooms.

Hierna worden de bovengenoemde beoordelingswerk-wijzen van deze uitvoeringsvorm van de uitvinding beide uiteengezet gebaseerd op de bovengenoemde voorbeelden. 35 Wanneer de MDA-waarden met betrekking tot de respectieve behandelingswerkwijzen in bovengenoemde Tabel 1 met elkaar .· ί .In the following, the aforementioned evaluation methods of this embodiment of the invention are both set out based on the aforementioned examples. When the MDA values with respect to the respective treatment methods in Table 1 above mentioned with each other.

39 worden vergeleken, blijkt dat alle gevallen waarin een behandeling zoals roosteren met ver-infraroodstralen etc. is toegepast, een grotere MDA-waarde vertoonden dan wanneer geen behandeling werd toegepast.39 compared, it appears that all cases in which a treatment such as roasting with far-infrared rays etc. was applied, exhibited a greater MDA value than when no treatment was applied.

5 Wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen of de fermentatie met "Koji" wordt toegepast, is de MDA-waarde groter bij de paddestoelen waarop de fermentatie met "Koji" is toegepast. Wanneer de fermentatie met "Koji" en het roosteren met ver-infraroodstralen in combinatie worden 10 toegepast, is de MDA-waarde groter dan wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen of de fermentatie met "Koji" alleen wordt toegepast. Bovendien is de MDA-waarde bij toepassing van drie behandelingen, te weten het roosteren met ver-infraroodstralen, de fermentatie met "Koji" en het 15 maken van een olieachtig middel, groter dan wanneer het roosteren met ver-infraroodstralen en de fermentatie met "Koji" worden toegepast.When roasting with far infrared rays or fermentation with "Koji" is used, the MDA value is higher for the mushrooms to which fermentation with "Koji" has been applied. When the fermentation with "Koji" and the roasting with far infrared rays are used in combination, the MDA value is greater than when the roasting with far infrared rays or the fermentation with "Koji" is used alone. Moreover, the MDA value when three treatments are used, namely roasting with far infrared rays, fermentation with "Koji" and making an oily agent, is greater than when roasting with far infrared rays and fermentation with " Koji "are applied.

Anderzijds blijkt uit de bovengenoemde Tabellen 2, 3 en 4, waarin klinische tests werden uitgevoerd met 20 betrekking tot borstkanker, maagkanker, en longkanker, bij het onbehandelde geval, de fermentatiebehandeling met voor polysaccharide lytisch enzym, de fermentatiebehandeling met "Koji", de roosterbehandeling met ver-infraroodstralen + de fermentatiebehandeling met "Koji", en de roosterbehandeling 25 met ver-infraroodstralen + de fermentatiebehandeling met "Koji" + de behandeling voor het maken van een olieachtig middel, met betrekking tot Poria, agaricus, maitake (zwarte maitake en Polyporus (Polyporus umbellatus Fries)), dat bij dezelfde paddestoel het klinische effect groter wordt 30 naarmate een behandeling met een hogere in Tabel 1 getoonde MDA-waarde wordt toegepast.On the other hand, from the aforementioned Tables 2, 3 and 4, in which clinical tests were performed with respect to breast cancer, stomach cancer, and lung cancer, in the untreated case, the fermentation treatment for polysaccharide lytic enzyme, the fermentation treatment with "Koji", the lattice treatment with far-infrared rays + the fermentation treatment with "Koji", and the lattice treatment with far-infrared rays + the fermentation treatment with "Koji" + the treatment for making an oily agent, with regard to Poria, agaricus, maitake (black maitake and Polyporus (Polyporus umbellatus Fries)), that the clinical effect increases with the same mushroom as treatment with a higher MDA value shown in Table 1 is applied.

Uit deze resultaten blijkt dat de omvang van het klinische effect, dus de effectiviteit van het antitumoref-fect, kan worden beoordeeld aan de hand van de MDA-waarde 35 als index, en gesteld kan worden dat de behandeling die de hoogste MDA-waarde tot gevolg heeft, het meest effectieve antitumoreffect vertoont.These results show that the extent of the clinical effect, that is, the effectiveness of the anti-tumor effect, can be assessed on the basis of the MDA value 35 as an index, and that the treatment that reaches the highest MDA value can be said to be has the most effective anti-tumor effect.

4040

Dit betekent dat wanneer de MDA-waarde groot is, wat betekent dat er bij bestraling van docosahexaeenzuur met ultraviolet licht een grote hoeveelheid lipideperoxide is gevormd, er kan worden gesteld dat de effectiviteit van 5 de behandeling op de antitumoractiviteit van de paddestoelen groot is.This means that if the MDA value is large, meaning that a large amount of lipid peroxide is formed when irradiating docosahexaenoic acid with ultraviolet light, it can be said that the effectiveness of the treatment on the anti-tumor activity of the mushrooms is high.

Wanneer de resultaten van Tabel 1 en die van Tabel 2 tot 4 worden vergeleken bij dezelfde behandelingswerkwij-ze van de paddestoelen, blijkt de volgorde van de hoogte 10 van de MDA-waarde in overeenstemming te zijn met de volgor de van de hoogte van het effectiviteitspercentage bij de klinische effecten. Wanneer dus aan het systeem dat lipideperoxide vormt door bestraling van het bovengenoemde docosahexaeenzuur met ultraviolet licht, een andere padde-15 stoel waarop dezelfde behandeling is toegepast in dezelfde concentratie wordt toegevoegd, en de gevormde hoeveelheid lipideperoxide wordt getoond als de MDA-waarde op dezelfde wijze als in de bovengenoemde uitvoeringsvorm, dan kan worden gezegd dat een paddestoel die een grote hoeveelheid 20 MDA vormt, een effectief antitumoreffect zal vertonen.When the results of Table 1 and those of Tables 2 to 4 are compared with the same treatment method of the mushrooms, the order of the height 10 of the MDA value appears to be in accordance with the order of the height of the effectiveness percentage in the clinical effects. Thus, when irradiating the aforementioned docosahexaenoic acid with ultraviolet light by adding the above-mentioned docosahexaenoic acid, another mushroom to which the same treatment has been applied is added at the same concentration, and the amount of lipid peroxide formed is shown as the MDA value in the same manner as in the above-mentioned embodiment, it can be said that a mushroom that forms a large amount of 20 MDA will exhibit an effective anti-tumor effect.

Van de respectieve soorten paddestoelen kan dus een antitumoreffect bij inwendige toediening worden verwacht als de paddestoelen een grote MDA-waarde hebben, wijzend op een grote hoeveelheid lipideperoxide gevormd 25 door bestraling van docosahexaeenzuur met ultraviolet licht. Dat betekent dat zonder het uitvoeren van klinische tests de effectiviteit van de antitumoractiviteit van de respectieve soorten paddestoelen bij inwendige toediening kan worden voorspeld.Thus, an anti-tumor effect on internal administration of the respective mushroom types can be expected if the mushrooms have a large MDA value, indicating a large amount of lipid peroxide formed by irradiation of docosahexaenoic acid with ultraviolet light. This means that without conducting clinical tests, the effectiveness of the anti-tumor activity of the respective mushroom species when applied internally can be predicted.

30 Overigens is de bovenstaande uiteenzetting gegeven aan de hand van het gebruik van paddestoelen zoals de agaricus etc.,· maar de paddestoelen zijn niet alleen beperkt tot de bovengenoemde paddestoelen. De onderhavige uitvinding kan worden toegepast op andere paddestoelen dan 3 5 de bovengenoemde zo lang ze maar /3-glucan bevatten.Moreover, the above explanation is given on the basis of the use of mushrooms such as the agaricus, etc., but the mushrooms are not only limited to the above-mentioned mushrooms. The present invention can be applied to mushrooms other than the above as long as they contain only 3-glucan.

Bovendien kan de onderhavige uitvinding worden toegepast op paddestoelen die andere polysacchariden met & > ^·· 41 antitumoractiviteit bevatten dan jS-glucan. Verder kan de onderhavige uitvinding worden toegepast op allerlei ruwe geneesmiddelen zoals natuurlijke of gekweekte producten afkomstig van andere planten dan paddestoelen die polysac-5 chariden met antitumoractiviteit zoals jö-glucan bevatten.In addition, the present invention can be applied to mushrooms that contain polysaccharides with anti-tumor activity other than β-glucan. Furthermore, the present invention can be applied to all kinds of raw drugs such as natural or cultured products from plants other than mushrooms that contain polysaccharides with anti-tumor activity such as β-glucan.

Ook werd in de bovenstaande uiteenzetting docosa-hexaeenzuur gebruikt, maar ook een ander vetzuur dan docosahexaeenzuur kan gebruikt worden, bijvoorbeeld een onverzadigd vetzuur waarbij bij bestraling met ultraviolet 10 licht door toevoeging van de bovengenoemde paddestoelen een hoeveelheid lipideperoxiden wordt gevormd. Verder kunnen deze onverzadigde vetzuren waarbij door bestraling met ultraviolet licht door toevoeging van de bovengenoemde paddestoelen een hoeveelheid lipideperoxide wordt gevormd 15 voor de bovengenoemde beoordelingswerkwijze afkomstig zijn van een levend lichaam, maar ook kan een niet van een levend lichaam afkomstig vetzuur worden gebruikt, dat wil zeggen een synthetisch vetzuur.Docosa-hexaenoic acid was also used in the above explanation, but a fatty acid other than docosahexaenoic acid can also be used, for example an unsaturated fatty acid in which an amount of lipid peroxides is formed when irradiated with ultraviolet light by adding the above-mentioned mushrooms. Furthermore, these unsaturated fatty acids in which an amount of lipid peroxide is formed by irradiation with ultraviolet light by adding the above-mentioned mushrooms for the above-mentioned evaluation method can come from a living body, but it is also possible to use a non-living fatty acid, i.e. say a synthetic fatty acid.

Door paddestoelen met een carcinostatisch polysac-20 charide in verschillende concentraties toe te voegen aan het systeem dat lipideperoxiden vormt door bestraling van docosahexaeenzuur met ultraviolet licht zoals boven uiteengezet, en door bij de respectieve concentraties de hoeveelheid gevormde lipideperoxiden te bepalen, kan eenvoudig de 25 gemiddelde geschikte toedieningsdosis in overeenstemming met het stadium van voortschrijding van de kwaadaardige tumor zoals kanker worden voorspeld zonder met de respectieve te 'gebruiken paddestoelen klinische tests uit te voeren.By adding mushrooms with a carcinostatic polysaccharide in different concentrations to the system that forms lipid peroxides by irradiating docosahexaenoic acid with ultraviolet light as explained above, and by determining the amount of lipid peroxides formed at the respective concentrations, Appropriate administration doses corresponding to the stage of progression of the malignant tumor such as cancer are predicted without conducting clinical tests with the respective mushrooms to be used.

30 Het verband tussen de concentratie van de padde stoel en de MDA-waarde is namelijk op de boven beschreven wijze vast te stellen, en het verband tussen de MDA-waarde en de effectiviteit daarvan in het desbetreffende voort -schrijdingsstadium van kanker wordt vooraf voor een bepaald 35 soort paddestoel bevestigd met een klinische test. Wanneer door zo te werk te gaan de concentratie van die paddestoel wordt teruggerekend naar een MDA-waarde waarvan was beves- 42 tigd dat die effectief is in het desbetreffende voort-schrijdingsstadium van een tumor zoals kanker etc., dan is eenvoudig een gemiddelde dosis voor inwendige toediening te voorspellen uit de concentratie van de paddestoel.The relationship between the concentration of the mushroom and the MDA value can in fact be determined in the manner described above, and the relationship between the MDA value and its effectiveness at the relevant cancer stage of progression is predetermined for a determined type of mushroom confirmed with a clinical test. If, by proceeding in this way, the concentration of that mushroom is calculated back to an MDA value that was confirmed to be effective at the relevant stage of progress of a tumor such as cancer, etc., then an average dose is simply predict internal administration from the mushroom concentration.

5 Bovendien kan met de onderhavige uitvinding de antitumoractiviteit van ruwe geneesmiddelen worden vergeleken via een gemeenschappelijke index zoals de MDA-waarde, zodat de antitumoractiviteiten van de verschillende soorten ruwe geneesmiddelen die tot nu toe werden vergeleken door 10 klinische tests uit te voeren, met elkaar kunnen worden vergeleken zonder klinische tests uit te voeren, dat wil zeggen zonder de patiënt aan enig risico bloot te stellen.Moreover, with the present invention, the anti-tumor activity of raw drugs can be compared via a common index such as the MDA value, so that the anti-tumor activities of the different types of raw drugs that have been compared so far by conducting clinical tests can be mutually related be compared without conducting clinical tests, that is, without exposing the patient to any risk.

De betekenis van de onderhavige uitvinding is dus dat de MDA-waarde is ontdekt als parameter die als gemeen-15 schappelijke maat kan worden gebruikt voor de respectieve soorten ruwe geneesmiddelen, en dat antitumoractiviteiten onderling kunnen worden beoordeeld doordat een hoge MDA-waarde kan worden gecorreleerd aan een hoge antitumoractiviteit, zodat een aantal ruwe geneesmiddelen eenvoudig met 20 elkaar kunnen worden vergeleken.The significance of the present invention is therefore that the MDA value has been discovered as a parameter that can be used as a common measure for the respective types of raw drugs, and that anti-tumor activities can be mutually assessed because a high MDA value can be correlated with a high anti-tumor activity, so that a number of raw drugs can easily be compared with each other.

Volgens de werkwijze ter beoordeling van de antitumoractiviteit van de behandeling van de ruwe geneesmiddelen volgens de onderhavige uitvinding kan de effectiviteit met betrekking tot de antitumoractiviteit van de 25 verschillende soorten op de ruwe geneesmiddelen toegepaste behandelingsmethoden eenvoudig binnen korte tijd worden beoordeeld.According to the method for assessing the anti-tumor activity of the treatment of the raw drugs according to the present invention, the effectiveness with regard to the anti-tumor activity of the different types of treatment methods applied to the raw drugs can easily be assessed within a short time.

Volgens de werkwij ze ter beoordeling van de antitumoreffectiviteit van de ruwe geneesmiddelen volgens 30 de onderhavige uitvinding, kan de effectiviteit van de ruwe geneesmiddelen bij inwendige toediening worden voorspeld zonder klinische tests uit te voeren. In vergelijking met de gebruikelijke werkwijze waarbij de resultaten kunnen worden verkregen door een lange reeks dierexperimenten of 35 klinische tests uit te voeren, is het zoeken van een antitumoreffectieve stof door screening van een uiterst 43 groot aantal natuurlijke producten eenvoudig uit te voeren.According to the method for evaluating the anti-tumor effectiveness of the crude drugs of the present invention, the effectiveness of the raw drugs on internal administration can be predicted without conducting clinical tests. In comparison with the usual method in which the results can be obtained by carrying out a long series of animal experiments or clinical tests, the search for an anti-tumor effective substance by screening an extremely large number of natural products is easy to carry out.

Claims (13)

1. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van een op een ruw geneesmiddel dat polysacchariden met antitumoractiviteit bevat, toe te passen behandeling op die 5 antitumoractiviteit, waarbij men het ruwe geneesmiddel waarop de behandeling is toegepast, toevoegt aan een systeem dat lipideperoxiden vormt door een onverzadigd vetzuur zoals docosahexaeenzuur te bestralen met ultraviolet licht, en het effect van de behandeling ter versterking 10 van de antitumoractiviteit van het ruwe geneesmiddel beoordeelt als groot als de stijging van de gevormde hoeveelheid lipideperoxide gebaseerd op de stijging van de concentratie van het ruwe geneesmiddel als gevolg van de behandeling groot is.1. A method for assessing the effectiveness of a treatment to be applied to a raw drug containing polysaccharides with anti-tumor activity on said anti-tumor activity, wherein the raw drug to which the treatment has been applied is added to a system that forms lipid peroxides by an unsaturated irradiate fatty acid such as docosahexaenoic acid with ultraviolet light, and consider the effect of treatment to enhance the anti-tumor activity of the crude drug as large as the increase in the amount of lipid peroxide formed based on the increase in the concentration of the crude drug due to the treatment is great. 2. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van een op een ruw geneesmiddel toe te passen behandeling op de antitumoractiviteit volgens conclusie 1, waarbij een paddestoel die /3-glucan bevat als dat ruwe geneesmiddel wordt gebruikt.A method for assessing the effectiveness of anti-tumor activity treatment to be applied to a crude drug according to claim 1, wherein a mushroom containing 3-glucan is used as said raw drug. 3. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van een op een ruw geneesmiddel toe te passen behandeling op de antitumoractiviteit volgens conclusie 2, waarbij ten minste één paddestoel gekozen uit de groep bestaande uit agaricus, maitake (Grifola frondosu), shi-25 itake (Cortinellus shiitake), matsutake (Tricholoma matsu-ttake), shimejitake (Lyophyllum decastes) en enokitake (Flammulina velutipes) als de paddestoel wordt gebruikt.Method for assessing the effectiveness of anti-tumor activity treatment to be applied to a raw drug according to claim 2, wherein at least one mushroom selected from the group consisting of agaricus, maitake (Grifola frondosu), shi-itake (Cortinellus shiitake), matsutake (Tricholoma matsu-ttake), shimejitake (Lyophyllum decastes) and enokitake (Flammulina velutipes) when the mushroom is used. 4. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van een op een ruw geneesmiddel toe te passen behandeling op de antitumoractiviteit volgens conclusie 3, waarbij de agaricus wordt gebruikt en de rauwe agaricus 5 met ver-infraroodstralen wordt geroosterd.Method for assessing the effectiveness of anti-tumor activity treatment to be applied to a crude drug according to claim 3, wherein the agaricus is used and the raw agaricus is roasted with far-infrared rays. 5. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel dat polysacchariden met antitumoractiviteit bevat, zonder klinische tests uit te voeren, waarbij men het ruwe genees- 10 middel toevoegt aan een systeem dat lipideperoxiden vormt door een onverzadigd vetzuur zoals docosahexaeenzuur te bestralen met ultraviolet licht, en het effect van de antitumoractiviteit van het ruwe geneesmiddel bij inwendige toediening beoordeelt en als groot voorspelt als de stij-15 ging van de gevormde hoeveelheid lipideperoxide gebaseerd op de stijging van de concentratie van het ruwe geneesmiddel groot is.5. Method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a crude drug containing anti-tumor activity polysaccharides, without conducting clinical tests, adding the crude drug to a system that forms lipid peroxides by applying an unsaturated fatty acid such as docosahexaenoic acid irradiation with ultraviolet light, and assessing the effect of the anti-tumor activity of the crude drug on internal administration and predicting large if the increase in the amount of lipid peroxide formed based on the increase in the concentration of the crude drug is large. 6. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens 20 conclusie 5, waarbij op dat ruwe geneesmiddel de werkwijze ter versterking van de antitumoractiviteit omvattende een roosterstap waarbij het ruwe geneesmiddel met ver-infraroodstralen wordt geroosterd en een fermentatiestap waarbij wordt 25 gefermenteerd door toevoeging van micro-organismen is toegepast, waardoor de antitumoractiviteit van dat ruwe geneesmiddel is versterkt in vergelijking met het geval dat het roosteren en de fermentatie niet worden uitgevoerd.6. A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a crude drug according to claim 5, wherein on said raw drug the method for enhancing the anti-tumor activity comprising a grating step wherein the crude drug is roasted with far infrared rays and a fermentation step wherein Fermented by addition of microorganisms has been used, thereby enhancing the anti-tumor activity of that crude drug as compared to the case where roasting and fermentation are not performed. 7. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit 30 van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 6, waarbij een paddestoel die /3-glucan bevat als het ruwe geneesmiddel wordt gebruikt.7. A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a raw drug according to claim 6, wherein a mushroom containing 3-glucan is used as the raw drug. 8. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit 35 van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 7, waarbij ten minste één paddestoel gekozen uit de groep bestaande uit agaricus, maitake (Grifola frondosu), shiitake (Cortinellus shiitake), matsutake (Tricholoma matsu-take), shimejitake (Lyophyllum decastes) en enokitake 5 (Flammulina velutipes) als de paddestoel wordt gebruikt.A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a raw drug according to claim 7, wherein at least one mushroom selected from the group consisting of agaricus, maitake (Grifola frondosu), shiitake (Cortinellus shiitake), matsutake (Tricholoma matsu take), shimejitake (Lyophyllum decastes) and enokitake 5 (Flammulina velutipes) when the mushroom is used. 9. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 8, waarbij de agaricus wordt gebruikt en de rauwe agaricus 10 met ver-infraroodstralen wordt geroosterd.The method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a crude drug according to claim 8, wherein the agaricus is used and the raw agaricus is roasted with far infrared rays. 10. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 5, waarbij op dat ruwe geneesmiddel de werkwijze ter verster-15 king van de antitumoractiviteit is toegepast, omvattende na de fermentatiestap een stap waarbij een olieachtig middel wordt gemaakt waarbij het gefermenteerde ruwe geneesmiddel wordt omsloten met een oliecomponent verkregen uit met ver-inf raroodstralen geroosterde planten zoals sesam, waardoor 2 0 de antitumoractiviteit van het ruwe geneesmiddel wordt versterkt vergeleken met het geval waarin de roosterstap, de f ermentatiestap en de stap voor het maken van een olieachtig middel niet worden toegepast.10. A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a crude drug according to claim 5, wherein said crude drug is subjected to the anti-tumor activity enhancing method, comprising after the fermentation step a step in which an oily agent is made wherein the fermented crude drug is enclosed with an oil component obtained from infra-red rays roasted plants such as sesame, thereby enhancing the anti-tumor activity of the crude drug compared to the case where the grating step, the fermentation step and the step of making an oily agent cannot be used. 11. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit 25 van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 10, waarbij een paddestoel die /3-glucan bevat als het ruwe geneesmiddel wordt gebruikt.11. A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a raw drug according to claim 10, wherein a mushroom containing 3-glucan is used as the raw drug. 12. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit 30 van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 11, waarbij ten minste één paddestoel gekozen uit de groep bestaande uit agaricus, maitake (Grifola frondosu), shiitake (Cortinellus shiitake) , matsutake (Tricholoma matsu-35 take), shimejitake (Lyophyllum decastes) en enokitake (Flammulina velutipes) als de paddestoel wordt gebruikt. r i. 1 / :j12. A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a raw drug according to claim 11, wherein at least one mushroom selected from the group consisting of agaricus, maitake (Grifola frondosu), shiitake (Cortinellus shiitake), matsutake (Tricholoma matsu- 35 take), shimejitake (Lyophyllum decastes) and enokitake (Flammulina velutipes) when the mushroom is used. r i. 1 /: j 13. Werkwijze ter beoordeling van de effectiviteit van de antitumoractiviteit van een ruw geneesmiddel volgens conclusie 12, waarbij de agaricus wordt gebruikt en de rauwe agaricus 5 met ver-infraroodstralen wordt geroosterd. * * *A method for assessing the effectiveness of the anti-tumor activity of a crude drug according to claim 12, wherein the agaricus is used and the raw agaricus is roasted with far infrared rays. * * *