NL1002818C2 - Werkwijze voor de bereiding van beta-lactam antibiotica. - Google Patents

Description

- 1 -

WERKWIJZE VOOR DE BEREIDING VAN fi-LACTAM ANTIBIOTICA

5 De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor de bereiding van β-lactam antibiotica. Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op de opwerking van de bij de enzymatische bereiding van β-lactam antibiotica ontstane produktstromen.

10 β-lactam antibiotica zoals cefalosporines en penicillines kunnen bereid worden door een enzymatische koppeling van een aminozuurderivaat en een amino-β-lactamverbinding. De enzymatische koppeling vindt veelal plaats bij een pH waar het gewenste produkt goed 15 oplosbaar is. Door de pH van de oplossing, veelal door het toevoegen van een zuur, te wijzigen kan het gewenste produkt bijvoorbeeld na precipitatie gewonnen worden. Voor de economie van het proces is het van belang, dat uit de produktstroom tevens voor hergebruik 20 geschikte componenten teruggewonnen worden. Bij voorkeur wordt de stroom dusdanig gezuiverd, dat het resterende waterige mengsel teruggevoerd kan worden naar de reactor. Hiertoe is het noodzakelijk dat anorganische zouten en organische zuren voor een groot 25 deel verwijderd worden. Hoewel er verschillende zuiveringstechnieken bekend zijn, is de efficiency van zuivering voor dergelijke complexe produktstromen niet goed te voorspellen.

Het is aanvraagster gebleken, dat de 30 produktstroom die ontstaat bij de enzymatische produktie van β-lactam antibiotica uitgaande van een aminozuurderivaat en een amino^-lactamverbinding, na precipitatie van het gewenste β-lactam antibioticum door pH verandering op eenvoudige wijze efficient 35 gezuiverd kan worden door na afscheiding van het gewenste produkt, het overblijvende waterige mengsel te onderwerpen aan electrodialyse bij een pH tussen 2 en 1002618 - 2 - 8. De aldus gezuiverde stroom kan terug worden gevoerd naar de reactor.

β-lactam antibiotica zijn bekende antibiotica, waarvoor het belangrijk is om enzymatische 5 syntheseroutes te ontwikkelen. Voorbeelden van β-lactam antibiotica waarvoor de werkwijze volgens de uitvinding zeer goede resultaten geeft zijn penicillines en cefalosporines zoals bijvoorbeeld ampicilline, amoxicilline, cefalexine, cefadroxil, cefaclor, en 10 cefradine.

Deze β-lactam antibiotica kunnen worden vervaardigd door de enzymatische koppeling van een aminozuurderivaat met een amino-^-lactamverbinding. Als aminozuurderivaat is bijvoorbeeld het amide, esters of 15 anorganische zouten daarvan, in het bijzonder de methylester, de ethylester, en het methylester-HCl zout van een gewenst aminozuur zeer geschikt.

Voor de bovengenoemde β-lactam antibiotica zijn fenylglycine, para-hydroxy-fenylglycine en 2,4-20 dihydrofenylglycine de geschikte aminozuren.

Als amino^-lactamverbindingen zijn bijvoorbeeld penicillinezuurderivaten, zoals bijvoorbeeld 6-aminopenicillinezuur (6-APA), en cefalosporinezuurderivaten, zoals bijvoorbeeld 7-25 aminocefalosporinezuur (7-ACA), 7-amino- desacetoxycefalosporinezuur (7-ADCA) en 7-amino-3-chloorcefalosporinezuur (7-ACCA) zeer geschikt. De koppeling van het aminozuurderivaat en de amino-β-lactamverbinding vindt op op zich bekende wijze plaats 30 in een bij voorkeur waterige oplossing onder toepassing van een geschikt enzym.

Als enzym kan in principe elk enzym worden toegepast dat geschikt is als katalysator in de koppelingsreaktie. Dergelijke enzymen zijn bijvoorbeeld 35 de enzymen die bekend zijn onder de algemene aanduiding penicilline amidase of penicilline acylase. Voorbeelden van geschikte enzymen zijn enzymen afgeleid van 100281« - 3 -

Acetobacter. Aeromonas. Alcaliaenes. Aphanocladium. Bacillus. Cephalosporium. Escherichia. Flavobacterium. Kluvvera. Mvcoplana. Protaminobacter. Pseudomonas en Xanthomonas. in het bijzonder Acetobacter pasteurianum.

5 Alicaliaenes faecal is. Bacillus meaaterium. Escherichia coli en Xanthomonas citrii.

Bij voorkeur wordt een geïmmobiliseerd enzym toegepast, aangezien het enzym dan eenvoudig hergebruikt kan worden. Geïmmobiliseerde enzymen zijn 10 op zich bekend en commercieel verkrijgbaar. Voorbeelden van geschikte enzymen zijn het Escherichia coli enzym van Boehringer Mannheim GmbH dat onder de naam Enzygel® commerciêel verkrijgbaar is, het geïmmobiliseerde Penicilline-G acylase van Recordati, het 15 geïmmobiliseerde Penicilline-G acylase van Pharma Biotechnology Hannover, en een Escherichia coli penicilline acylase geïsoleerd zoals beschreven in WO-A-92/12782 en geïmmobilizeerd zoals beschreven in EP-A-222462.

20 De temperatuur waarbij de koppeling (de enzymatische acyleringsreaktie) wordt uitgevoerd ligt meestal tussen -5 en 35°C, in het bijzonder tussen 0 en 20°C, met de meeste voorkeur tussen 5 en 15°C.

De koppeling vindt bij voorkeur plaats bij 25 een pH waarbij het enzym een goede activiteit vertoont en waarbij het gewenste β-lactam antibioticum een goede oplosbaarheid heeft. Bij voorkeur is de pH dusdanig, dat de oplosbaarheid van het β-lactam antibioticum groter is dan 2 gew.%, meer in het bijzonder groter is 30 dan 4 gew.% in het bijzonder groter dan 5 gew.%. De vakman zal de door hem te kiezen pH echter niet alleen laten afhangen van de oplosbaarheid van het β-lactam antibioticum, maar ook van de stabiliteit van de reactiecomponenten, de stabiliteit en effectiviteit van 35 het enzym en andere bij de vakman bekende factoren.

De pH waarbij de acyleringsreaktie plaatsvindt ligt meestal tussen 6 en 8,5. De optimale 1002818 - 4 - pH is ondermeer afhankelijk van het antibioticum aangezien de stabiliteit en de oplosbaarheid van zowel het β-lactam antibioticum als van de amino-β-lactamverbinding afhankelijk is van de pH. Wanneer als 5 aminozuurderivaat een fenylglycinederivaat wordt toegepast ligt de pH bij voorkeur tussen 6,2 en 8,5, met de meeste voorkeur tussen 7 en 8; wanneer een p-hydroxyfenylglycinederivaat als aminozuurderivaat wordt gebruikt, ligt de pH bij voorkeur tussen 6 en 7,5, met 10 de meeste voorkeur tussen 6 en 7. Daarnaast is ook de enzymaktiviteit pH-afhankelijk.

De koppelingsreaktie wordt in de praktijk meestal uitgevoerd in water. Desgewenst kan het reaktiemengsel ook een organisch oplosmiddel of een 15 mengsel van organische oplosmiddelen bevatten, bij voorkeur minder dan 30 vol.%. Voorbeelden van organische oplosmiddelen die kunnen worden toegepast zijn alcoholen met 1-7 C-atomen, bijvoorbeeld een monoalcohol, in het bijzonder methanol of ethanol; een 20 diol, in het bijzonder ethyleenglycol of een triol, in het bijzonder glycerol.

De concentratie van het β-lactam antibioticum en de concentratie van de amino^-lactamverbinding worden bij voorkeur zodanig gekozen dat de som van 25 beide concentraties ligt tussen 200 en 800 mM. Bij voorkeur worden de concentraties zodanig gekozen dat de som van beide concentraties ligt tussen 300 mM en 700 mM.

De molaire verhouding aminozuurderivaat tot 30 amino^-lactamverbinding ligt tussen 0,5:1 en 2:1; bij voorkeur tussen 0,7:1 en 1,3:1, met de meeste voorkeur tussen 0,8:1 en 1,2:1.

Na de enzymatische koppeling wordt de produktstroom afgescheiden van de enzymmassa, en de 35 produktstroom wordt met een base of een zuur op een gschikte pH gebracht, zodat de oplosbaarheid van het β-lactam antibioticum ten minste 1 gew.% kleiner wordt, 1002818 - 5 - bij voorkeur meer dan 2 gew.% kleiner wordt dan de oplosbaarheid van het β-lactam antibioticum in de produkstroom vóór de pH verandering.

Bij voorkeur worden de reactiecondities zo 5 gekozen, dat de produktstroom moet worden aangezuurd om het gewenste β-lactam antibioticum te precipiteren. Geschikte zuren hiervoor zijn bijvoorbeeld zoutzuur, zwavelzuur, fosforzuur, salpeterzuur, zwaveligzuur, salpeterigzuur en fosforigzuur. Geschikte basen zijn 10 bijvoorbeeld ammoniak, natriumhydroxide, kaliumhydroxide en calciumhydroxide.

Na precipitatie van het gewenste β-lactam antibioticum wordt dit afgescheiden, bijvoorbeeld door filtratie of middels een centrifuge.

15 De overblijvende produktstroom wordt volgens de werkwijze volgens de uitvinding gezuiverd door toepassing van ten minste electrodialyse. Naast electrodialyse kunnen ook andere zuiveringsmethoden worden toegepast zoals bijvoorbeeld precipitatie en 20 afscheiding van een of meer van de uitgangsstoffen.

Onverwachterwijze blijkt dat carbonzuren zoals met name fenylazijnzuur met grote effectiviteit kunnen worden verwijderd, terwijl het nog aanwezige β-lactam antibioticum, de amino^-lactamverbinding en het 25 aminozuurderivaat geheel, of voor het grootste deel in de produktstroom blijven.

Daarnaast blijkt het anorganische zout met een efficiëntie van meer dan 80% te kunnen worden verwijderd, ook indien de stroom in een recycle 30 meerdere keren aan electrodialyse onderworpen wordt.

De electrodialyse wordt in zijn algemeenheid uitgevoerd in een inrichting met meerdere celparen, waarbij de electroden zijn gescheiden door meerdere anion resp. kation wisselende membranen.

35 Als membranen zijn ionenwisselende membranen geschikt. De membranen zijn bijvoorbeeld opgebouwd uit polymeren met geladen groepen. Als polymeer kan u o ?.8 1 8 - 6 - bijvoorbeeld polytetrafluorethyleen, polyethyleen, polystyreen en polypropeen worden toegepast. Het polymere materiaal is bij voorkeur enigermate vernet, zodat het membraan niet te veel zwelt in het waterige 5 medium. Het polymere materiaal is voorzien van negatief geladen groepen in geval van kation-wisselende membranen. Geschikte groepen zijn bijvoorbeeld S03", C00“, P03“, HP02-, As032- en Se03”. In geval van anion wisselende membranen is het polymere materiaal voorzien 10 van positief geladen groepen, zoals bijvoorbeeld NH3+, RNH2+, R3N+, =R2N+, R3P+ en R2S+. Geschikte membranen zijn commercieel verkrijgbaar, zoals bijvoorbeeld AMX, CMX membranen van Tokuyama Soda eventueel van het type "SB" (onder de merknaam NEOSEPTA®).

15 De pH van de te zuiveren stroom is bij voorkeur hoger dan 2, in het bijzonder hoger dan 4,5.

De pH is bij voorkeur lager dan 8, in het bijzonder kleiner dan 7 en meer in het bijzonder kleiner dan 5,5. Een te lage pH heeft als nadelig effect een verlies aan 20 bijvoorbeeld phenylglycineamide, en een minder goede afscheiding van organische zuren. Een te hoge pH veroorzaakt een afname in de zoutafscheidings-efficiëntie.

De temperatuur tijdens de electrodialyse is 25 bij voorkeur 0-40°C, in het bijzonder 4-25°C. Bij een te hoge temperatuur treedt afbraak op van de gewenste produkten en/of grondstoffen, een te lage temperatuur is nadelig voor de werking van de electrodialyse.

De stroomdichtheid is bij voorkeur 60-90% van 30 de grensstroomdichtheid. De grensstroomdichtheid is die stroom, bij een zeker voltage, waarbij water ontleedt aan het membraanoppervlak in H+ en OH-.

Als oplosmiddel voor de te zuiveren produktstroom wordt in hoofdzaak water toegepast.

35 Echter, ondergeschikte hoeveelheden organische oplosmiddelen (bijvoorbeeld minder dan 30 gew.%) zoals bijvoorbeeld methanol, ethanol, tetrahydrofuran, 1 o o 1 e c - 7 - aceton, isopropylalcohol, methylisobutylketon, butylacetaat, ethyleenglycol en glycerol kunnen ook aanwezig zijn.

De te zuiveren produktstroom bevat in het 5 algemeen 0,5-10 gew.% ionen of zouten. Als anionen kunnen bijvoorbeeld sulfaat, fosfaat, chloride, chloraat, sulfiet, fosfiet, nitraat en nitriet, aanwezig zijn. Daarnaast bevat de produktstroom veelal het anion van fenylazijnzuur, en kan de stroom andere 10 carbonzuuranionen bevatten zoals bijvoorbeeld acetaat, triflaat en formiaat. Als kation kunnen bijvoorbeeld de ionen van natrium, ammonium en kalium en H* aanwezig zijn.

In de werkwijze volgens de uitvinding worden 15 deze ionen op efficiënte wijze verwijderd uit de produktstroom. Het is hierbij van belang dat fenylazijnzuur in voldoende mate verwijderd wordt, omdat deze verbinding een negatieve invloed heeft op de enzymactiviteit.

20 De te zuiveren produktstroom bevat in het algemeen tussen 0,5 en 10 gew.% aminozuur(derivaten), β-lactam antibiotica en amino-p-lactamverbindingen die in de produktstroom aanwezig blijven. Voorbeelden hiervan zijn fenylglycine, hydroxyfenylglycinemethyl 25 ester, fenylglycine-amide, 7-ADCA, 6-APA, 7-ACCA en de β-lactam antibiotica.

De gezuiverde produktstroom kan in zijn geheel teruggevoerd worden naar de synthesesectie. Het is echter ook mogelijk een deel van de produkten te 30 winnen, bijvoorbeeld middels kristallisatie. Tevens kan het nuttig zijn - ter voorkoming van ophoping van ongewenste stoffen (andere dan zouten en carbonzuren) -om een deel van de produktstroom niet terug te voeren.

De electrodialyse wordt bij voorkeur 35 uitgevoerd met ompoling, dit is op een dusdanige wijze, dat de compartimenten beurtelings worden gebruikt voor de produktstroom en voor de zuiveringsstroom. De 1 0 0 r ft - 8 - electroden worden bij een wisseling van de stromen ook omgepoold. Hierdoor wordt de efficiëntie van de electrodialyse verhoogd met name bij lange duur syntheses, en de vervuiling van de membranen 5 tegengegaan.

De werkwijze wordt nader toegelicht in Figuur 1.

In Figuur 1 is A de synthesesectie, B de produktprecipitatiesectie en C de zuiveringssectie. De 10 synthesesectie wordt gevoed door grondstoffen aan te voeren via (1). De pH wordt door toevoeging van een zuur of een base, bijvoorbeeld ammoniak of zwavelzuur op een gewenste pH gehouden via (2). De gezuiverde produktstroom wordt gerecirculeerd via (3). Het 15 produkt, vervaardigd in A, wordt via (4) naar sectie B gevoerd. Daar wordt via (5) zuur aan de oplossing toegevoegd zodat het gewenste β-lactam antibioticum precipiteert en kan worden gewonnen via (6). De dan overblijvende stroom wordt via (7) naar de 20 zuiveringssectie gevoerd, alwaar de stroom gezuiverd wordt onder andere middels electrodialyse. Het kan hier tevens zinvol zijn om aminozuren en/of amino-^-lactam verbindingen af te scheiden. De zoutoplossing (concentraat) wordt via (8) afgevoerd. De gezuiverde 25 produktstroom (diluaat) wordt via (3) weer teruggevoerd naar de reactor, waarbij via (9) een gedeelte van die stroom kan worden gespuid. De werkwijze volgens Fig.1 is een voorbeeld, de vakman kan de werkwijze volgens de uitvinding ook op andere wijzen uitvoeren.

30 De uitvinding wordt nader toegelicht in de volgende niet beperkende voorbeelden.

Voorbeelden I-IV

Cefalexine werd bereid uit fenylglycine-amide 35 en 7-ADCA.

Als enzym werd in de voorbeelden I t/m IV steeds geïmmobiliseerd Pen-G acylase van Recordati 10 0· r' 1 2 - 9 - (Milaan) gebruikt. Dit enzym is commercieel verkrijgbaar in een mengsel van water en glycerol ("nat enzym"), en werd voor gebruik 3x gewassen met water.

De reactanten werden gemengd in een geroerd vat. Een 5 slurrie met 500 mM 7-ADCA en 500 mM fenylglycineamide werd vanuit dit vat aan een reactor toegevoerd waar het geïmmobiliseerde enzym, in aanwezig was. De reactor was voorzien van een metalen zeef. De pH was bij aanvang van de reactie 7,6, en aan het eind 8,6. Een 10 hoeveelheid fenylglycine kristalliseerde tijdens de reactie en werd afgefiltreerd. De resulterende produktstroom werd in een precipitatievat gevoerd, waar de pH met behulp van een zwavelzuuroplossing op pH 7 werd gebracht. Cefalexine kristalliseerde bij deze pH, 15 en werd afgefiltreerd. Het zo verkregen cefalexine-filtraat werd naar een zuiveringssectie gevoerd, waar deze in een vat de pH op 4,5 werd gebracht met een zwavelzuuroplossing. Hierdoor kristalliseerde voornamelijk 7-ADCA, met wat cefalexine. Deze stoffen 20 werden afgefiltreerd, gewassen en hergebruikt in de reactie. Het overblijvende 7-ADCA-filtraat werd geconcentreerd door verdamping van water in een filmverdamper. Hierbij kristalliseerde 7-ADCA, fenylglycine en cefalexine uit, dat na wassen met water 25 terug werd gevoerd naar de synthesereactor.

Het cefalexine-filtraat, 7-ADCA-filtraat en de ingedampte oplossing werden middels electrodialyse ontdaan van zouten.

De electrodialyse werd uitgevoerd in een 30 electrodialyse inrichting (een Electrodialyse-

Pilotanlage, Type BEA-I van de firma Berghof) met 10 celparen. Als membranen werden AMX-SB en CMX-SB membranen toegepast van Tokuyama Soda, met een specifiek membraan oppervlak van 9,4 m2. De 35 stroomdichtheid was ongeveer 80% van de grensstroomdichtheid. De stroom was 10-35 A, de stroomdichtheid 300-1000 A/m2.

10 0 Z 8 1 8 - 10 -

Gegevens staan in tabel 1; de pH werd zonodig aangepast met ammoniak of zwavelzuur.

TABEL 1 5

Voorbeeld I__II__III__IV_ start^ Cefa- 7-ADCA 7-ADCA inge- materiaal lexine filtraat2 filtraat2 dampte filtraat1 oplos- 10 sing3 pH_ 6,5_ 8,0_ 5,5_ 7,0_ percentage verwijdering van_ zout 98 94 98 98 15 (NH4)2S04 fenyl- 76 56 80 74 azijnzuur 20 cefalexine 0 0,5 1,6 0,3 7-ADCA 11 14 13 16 fenyl- 446 5 25 glycine fenyl- 21 23 48 37 glycine- amlde 30 1 50 1 filtraat, verdund met 10 1 water 2 25 1 filtraat, verdund met 25 1 water 3 30 1 oplossing, verdund met 10 1 water 35 Voorbeelden V-a t/m V-d

Analoog aan voorbeelden I-IV werd cefalexine bereid. Het filtraat dat resulteerde na afscheiding van 7-ADCA werd niet ingedampt, maar alleen door middel van electrodialyse gezuiverd. De electrodialyse werd 40 uitgevoerd in een laboratoriuminstallatie van

Electroliet Project, met 10 celparen. Als membranen werden AMX en CMX membranen toegepast van Tokoyama Soda, met een specifiek membraanoppervlak van 0,03 m2. De stroom bedroeg 1-5 A afhankelijk van de weerstand, 1002818 - 11 - de stroomdichtheid 35-170 A/m. Het diluaat werd daarna voor 75% teruggevoerd naar het reactanten-mengvat en voor 25% gespuid.

De resultaten van de electrodialyse staan in tabel 2.

5 TABEL 2

Voorbeeld V-a V-b V-c V-d pH 7,3 7,3 7,3 7,0 10 Temp (°C) 14 14 15 14 initieel gew.% zout1) 2,35 2,13 2,31 eind gew.% zout 0,22 0,33 0,30 0,94 ontzouting (%) 86 86 59 rendement (%) 79 82 90 15 het zout was voornamelijk (NH4)2S04 Voorbeelden Vl-a t/m Vl-h 20 Analoog aan voorbeeld V werden experimenten uitgevoerd, waarbij een spui van 50% werd toegepast; resultaten staan in tabel 3.

TABEL 3 25

Voorbeeld__VI»__VIb VIC VId VI» Vit VI q Vlh pH 6,6 6,6 6,6 6,9 6,8 7,0 6,9·» 5,7 5,7 ^ Temp (»C) 31 29 29 30 29 28 27 27 l»lti»»l gew.% 2,36 2,31 2,69 3,07 2,9« 3,21 3,28 3,14 »out ^ eind gew.% sout 0,26 0,42 0,42 0,59 0,77 0,64 1,19 0,94 |

Iontsouting (%) 88 62 64 61 74 74 6« 70 |

rendement (%) 60 60 66 82 63 77 71 61 U

40

Van voorbeelden Vl-e en Vl-h werd tevens onderzocht of waardevolle componenten in het diluaat bleven, in tabel 1C 0 2 8 1 δ - 12 - 4 staan de gemeten hoeveelheden in het diluaat en concentraat in gew.%.

Voorbeeld Vl-e Vl-h 5 pH 6,8 5,7 in uit concen- in uit concen-diluaat traat diluaat traat fenylglycine 0,96 0,94 <0,01 0,82 0,84 0,01 7-ADCA 0,61 0,58 0,01 0,33 0,31 0,01 fenylglycine 1,89 1,59 0,24 2,12 1,74 0,27 10 -amide cefalexine 2,26 2,23 0,01 1,92 1,97 0,01

Voorbeeld VII

15 Ampiciline werd bereid door 6-amino- penicillinezuur (6-APA) een phenylglycine (PG) enzymatisch te koppelen. Na winning van Ampicilline en van een deel van 6-APA werd het moederloog op een pH gebracht van 6, en onderworpen aan electrodialyse. De 20 electrodialyse vond plaats analoog aan voorbeeld V, waarbij de zoutconcentratie ongeveer 1 gew.% Na2S04 was. Aan de concentraatzijde werd gestart met een 1 gew.% NH4Cl-oplossing. Het ontzoutingspercentage bedroeg 92% terwijl er geen verliezen optraden van 6-APA of PG.

25 10 0 2 8 1 ft

Claims (12)

1. Werkwijze voor de bereiding van een β-lactam 5 antibioticum door een enzymatische koppeling van een aminozuur-derivaat en een amino-β-lactamverbinding bij een pH waar het β-lactara antibioticum goed oplosbaar is, met het kenmerk, dat uit de na de koppeling resulterende 10 produktstroom -middels een verandering van de pH- het β-lactam antibioticum wordt geprecipiteerd en afgescheiden en het overblijvende waterige mengsel wordt onderworpen aan electrodialyse bij een pH tussen 2 en 8.

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de koppeling wordt uitgevoerd bij een pH waarbij de oplosbaarheid groter is dan 2 gew.%, en de precipitatie wordt uitgevoerd bij een pH waarbij de oplosbaarheid ten minste 1 gew.% minder 20 is dan de pH waarbij de koppeling is uitgevoerd.

3. Werkwijze volgens een der conclusies 1-2, met het kenmerk, dat de pH tijdens de koppeling groter is dan 6, en de pH tijdens de precipitatie kleiner is dan 7.

4. Werkwijze volgens een der conclusies 1-3, met het kenmerk, dat de pH tijdens de electrodialyse hoger is dan 4,5.

5. Werkwijze volgens een der conclusies 1-4, met het kenmerk, dat de pH tijdens de electrodialyse 30 kleiner is dan 5,5.

6. Werkwijze volgens een der conclusies 1-5, met het kenmerk, dat de electrodialyse wordt uitgevoerd bij een temperatuur tussen -5 en 35°C.

7. Werkwijze volgens een der conclusies 1-6, met het 35 kenmerk, dat de produktstroom die aan de dialyserichting wordt toegevoerd 0,5-10 gew,% ionen bevat en 0,5-10 gew.% aminozuurderivaten, 10 0 < : e O - 14- ami ηο-β-l act amver bindingen en β-lactam antibiotica.

8. Werkwijze volgens een der conclusies 1-7, met het kenmerk, dat de gezuiverde produktstroom geheel of 5 gedeeltelijk wordt teruggevoerd naar de synthesesectie.

9. Werkwijze volgens een der conclusies 1-8, met het kenmerk, dat de electrodialyse wordt uitgevoerd in een inrichting waarbij de compartimenten 10 beurtelings worden gebruikt voor de produktstroom en een zuiveringsstroom, waarbij de electroden worden omgepoold.

10. Werkwijze volgens een der conclusies 1-9, met het kenmerk, dat naast electrodialyse tevens een 15 andere zuiveringsmethode wordt toegepast.

11. Werkwijze zoals in hoofdzaak is beschreven in de beschrijving, figuur en voorbeelden.

1 C' 0 ? 8 < 0