KR100455252B1 - 항생제제조방법 - Google Patents

항생제제조방법 Download PDF

Info

Publication number
KR100455252B1
KR100455252B1 KR10-1998-0704287A KR19980704287A KR100455252B1 KR 100455252 B1 KR100455252 B1 KR 100455252B1 KR 19980704287 A KR19980704287 A KR 19980704287A KR 100455252 B1 KR100455252 B1 KR 100455252B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
acid
acylating
glycine
prepared
lactam
Prior art date
Application number
KR10-1998-0704287A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20000064370A (ko
Inventor
빌헬무스 후버투스 요제프 보에스텐
덴 트벨 빌헬무스 요하네스 요제프 반
로쿠스 마리누스 데케르스
Original Assignee
디에스엠 기스트 베.파우.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 디에스엠 기스트 베.파우. filed Critical 디에스엠 기스트 베.파우.
Publication of KR20000064370A publication Critical patent/KR20000064370A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100455252B1 publication Critical patent/KR100455252B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D501/02—Preparation
    • C07D501/12—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P37/00—Preparation of compounds having a 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring system, e.g. penicillin
    • C12P37/06—Preparation of compounds having a 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring system, e.g. penicillin by desacylation of the substituent in the 6 position
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P35/00—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin
    • C12P35/02—Preparation of compounds having a 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring system, e.g. cephalosporin by desacylation of the substituent in the 7 position

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)

Abstract

본 발명은 항생제, 특히 세팔렉신, 암피실린, 아목시실린, 세파클로르, 세프라딘, 세파드록실, 세포탁심 등의 제조방법에 있어서, β-락탐 코어를 아실화하고, 항생제를 반응 혼합물로부터 회수하고, 남아있는 모액을 가수분해 반응시켜 모액에 존재하는 항생제를 그것의 초기 화합물, 특히 β-락탐 코어로 분해하고 아실화제를 가수분해시키는 방법에 관한 것이다. 그후 β-락탐 코어는 실질적으로 정량적으로 회수되거나 또는 아실화 반응으로 재순환될 수 있다. 이것은 β-락탐 코어의 용해도가 비교적 고농도의 아실화제 및 항생제에서 예기치 않게 높다는 것을 발견하였기 때문이다.

Description

항생제 제조방법{PROCESS FOR THE PREPARATION OF AN ANTIBIOTIC}
아실화제, 예를들면 D-페닐 글리신 유도체로 β-락탐 코어를 아실화하는 것을 포함하는 항생제 제조에 있어서, 항생제의 회수 및 반응 혼합물의 워크업은 일반적으로 어렵다. 따라서 예를들면 WO-A-93/12250에는, 존재하는 일부 다른 성분(US-A-4003896에 기재된 세팔렉신 제조의 경우에는 특히 7-ADCA 및 페닐글리신)의 산/염기 특성 및 용해도가 최종 생성물의 것과 거의 다르지 않기 때문에 아실화 반응이 결코 종결되지 않으며 최종 생성물의 궁극적 정제가 방해된다고 기술되어 있다. 결과적으로, 공침전이 발생하여 불순한 항생제인 세팔렉신이 얻어진다. WO-A-93/12250 및 US-A-4003896에는 나프톨과 같은 착화제의 사용이 제안되어 있다. 그러나 이것은 이 방법에 맞지 않는 추가의 성분이 첨가되어야 하는 단점을 수반한다.
본 발명은 β-락탐 코어를 아실화하고 항생제를 반응 혼합물로부터 회수한후 남아있는 모액을 워크업하는 항생제 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 목적은 항생제 제조방법에 맞지 않는 그러한 유기 화합물을 사용하지 않으며 비싼 (출발) 물질인 β-락탐 코어의 많은 손실없이 항생제를 순수하게회수할 수 있는 간단하고 일반적이며 널리 이용가능한 방법을 제공하는 것이다.
이것은 워크업단계에서 여전히 비교적 고농도의 항생제를 함유하고 있는 모액을 가수분해 반응시킨후 β-락탐 코어를 예를들면 아실화 반응에서 적어도 부분적으로 재사용하는 본 발명에 따라 달성된다.
아실화 반응은 화학적으로 또는 효소적으로 실행될 수 있다. 화학적으로 아실화한 후 워크업하는 경우에 있어서는 일반적으로 라세미화에 의해 잘못된 측쇄 거울상이성질체를 갖는 매우 소량의 아실화 생성물도 또한 형성될 것이다. 모액중의 아실화 생성물이 재순환된다면, 이러한 부 생성물의 많은 축적이 발생할 수 있다. 아실화 생성물 및 아실화제(측쇄)가 다시 가수분해되는 본 발명에 따른 방법은 이 문제를 회피하는 이점을 더 제공한다.
본 발명에 따른 방법은 바람직하게는 효소적 아실화 반응과 조합하여 수행된다. 최신 기술의 방법에 있어서 β-락탐 코어에 대한 항생제의 고수율을 확보하기 위해서는 과량의 아실화제가 효소적 아실화 반응에 사용되어야 한다. 이 방법은 가수분해의 결과로서 아실화제의 많은 손실이 발생하거나 또는 다량의 반응 혼합물(고체상태의 항생제 회수후에 남아있는 것)이 워크업되어야만 하는 단점을 수반한다.
바야흐로, 본 출원인은 β-락탐 코어의 회수 또는 재순환 능력으로써, 모액을 가수분해 반응시켜 여전히 모액에 존재하는 항생제를 그것의 초기 화합물로 분해하고 아실화제도 가수분해시킴으로써 아실화 반응동안 과량의 아실화제의 사용을 불필요하게 하면서도 β-락탐 코어 손실을 제한하는 방법을 발견하였다. 실제로 본발명에 따른 방법이 β-락탐 코어의 충분한 전환을 요구하지 않으면서도 β-락탐 코어의 단지 소량의 손실만이 발생하는 간단한 방법을 실현가능하게 할 수 있다는 것이 명백해졌다.
놀랍게도, β-락탐 코어의 용해도가 비교적 고농도의 아실화제 및 항생제에서 예기치 않게 높다는 면에서, β-락탐 코어의 용해도는 반응 혼합물중의 남아있는 아실화제 및 항생제의 존재에 의해 영향을 받음이 발견되었다. 결과적으로, 항생제를 분리한 후에 얻어지는 모액을 가수분해하여 항생제와 아실화제의 가수분해를 초래함으로써 고체상태의 β-락탐 코어를 실질적으로 정량적으로 회수하는 것이 가능함을 발견하였다. 더욱이, 고체 상태의 β-락탐 코어는 모액의 가수분해가 실행되지 않았던 방법에서보다 더 순수한 형태로 회수됨을 발견하였다. 특히 β-락탐 코어에서 α-치환 아세트산의 함량이 크게 감소된 것으로 나타났는데, 이것은 이어서 놀랍게도 아실화 반응 속도에 큰 영향을 미쳤다. 특히, 7-ADCA중의 페닐아세트산의 함량 및 6-APA중의 페닐 또는 페닐옥시 아세트산의 함량이 크게 감소되는 것으로 나타났다. 게다가, β-락탐 코어 결정이 부착 수분을 거의 함유하지 않는 것으로 나타났는데, 이것은 불순물의 양이 적음을 뜻한다. 낮은 용해도 때문에 β-락탐 코어 결정은 또한 큰 손실없이 세척될 수 있다는 추가적 이점이 나타난다. 이것은 이어서 재순환에서 항생제에 혹시 축적될지 모르는 불순물의 형성이 적음을 의미한다.
가수분해 반응후에 얻어지는 β-락탐 코어는 β-락탐 항생제의 효소적 제조에 특히 이로운 신규한 조성을 이룬다. 출원인은 가수분해후에 회수되는 β-락탐코어중의 유리 페닐 또는 페녹시 아세트산 함량이 β-락탐 코어 출발 물질의 것보다 상당히 낮은 것을 발견하였는데, 특히 7-ADCA 출발 물질의 유리 페닐아세트산 함량이 120ppm인 7-ADCA β-락탐 코어에 관하여, 가수분해후에 얻어지는 7-ADCA의 유리 페닐아세트산 함량은 69ppm이고, 6-APA에 대해 이러한 특징은 각각 30ppm과 <15ppm인 것으로 나타났다(β-락탐 코어의 양에 대해 계산된 ppm임). 따라서, 본 발명은 또한 100ppm미만, 특히 80ppm미만, 바람직하게는 70ppm미만의 페닐아세트산을 갖는 7-ADCA 및 20ppm미만, 바람직하게는 15ppm미만의 α-아릴- 또는 아릴옥시 아세트산, 특히 α-페닐- 또는 α-페닐옥시아세트산을 갖는 6-APA에 관한 것이다.
본 발명에 따른 방법의 다른 이점은 일반적으로 유용한 가수분해된 아실화제가 효과적으로 회수될 수 있다는 것이다.
선택적으로, β-락탐 코어는 가수분해 반응후에 아실화 반응으로 용액으로 재순환될 수 있다. 그러나, 바람직하게는, β-락탐 코어는 예를들면 pH를 낮춤으로써 고체상태로 침전되는 β-락탐 코어를 분리함으로써 회수된다. 가수분해된 아실화제는 전체 공정중 여러 곳에서, 예를들면, 가수분해 반응후에, β-락탐 코어의 회수후에 또는 축합 반응후에 회수될 수 있다.
가수분해는 바람직하게는 적당한 효소의 존재하에서 수행된다. 효소적 가수분해 반응을 위한 적당한 효소는 예를들면 β-락탐 코어의 제조 및 효소적 아실화 반응에 사용되는 효소로서, 예를들면 아미다제 또는 아실라제, 특히 페니실린 아미다제 또는 아실라제이다. 이러한 효소는 예를들면 J. G. Shewale 등, Process Biochemistry, August 1989, pp. 146-154, 및 Process BiochemistryInternational, June 1990, pp. 97-103에 기술되어 있다. 적당한 효소의 예는Acetobacter, 특히Acetobacter pasteurianum,Aeromones,Alcaligenes, 특히Alcaligenes faecalis,Aphanocladium,Bacillus sp., 특히Bacillus megaterium,Cephalosporium,Escherichia, 특히Escherichia coli,Flavobacterium,Kluyvera,Mycoplana,Protaminobacter,Pseudomonas및Xanthomonas, 특히,Xanthomonas citrii로부터 유래된 효소이다.
바람직하게는 고정화된 효소가 사용되는데 이러한 효소가 쉽게 분리되고 그후 재사용될 수 있기 때문이다. 적당한 고정화 기법은 예를들면 EP-A-222462에 기술되어 있다. 다른 적당한 기법은 겔화제, 예를들면 젤라틴, 및 유리 아미노기를 갖는 중합체, 예를들면 알기네이트 아민, 키토산 또는 폴리에틸렌 이민을 함유하는 담체상에 페니실린 G 아실라제를 고정화하는 것으로 구성된다. 고정화된 효소외에 다른 고체 물질이 또한 존재한다면, 분리는 예를들면 WO-A-9212782에 기재된 방법으로 실행하여 양호한 결과를 얻을 수 있다. 고정화된 효소는 그 자체로 공지되어 있으며 시중구입가능하다.
효소적 가수분해 반응에 적당한 효소는 예를들면 EP-A-453047에 기재된Bacillus megaterium또는Alcaligenes faecalis로부터의 페니실린 G 아실라제인 것으로 나타났다. 또한 상표명 'EnzygelR'로 시중구입가능한 Boehringer Mannheim GmbH로부터의Escherichia coli효소, 상기 언급된 기법에 의해 고정화된Escherichia coli로부터의 페니실린 G 아실라제 및 Recordati로부터의 고정화된 페니실린 G 아실라제가 적당하다.
항생제를 회수하는 적당한 방법은 예를들면, 아실화 반응후에 얻어지는 반응 혼합물의 pH를 5 내지 10, 특히 6 내지 10, 바람직하게는 6 내지 9, 특히 7 내지 8.5의 pH를 갖게 낮춤으로써, 항생제의 선택적 침전을 일으키는데; 선택적으로, 먼저 반응 혼합물의 pH를 5 내지 10, 특히 6 내지 10, 바람직하게는 6 내지 9, 특히 7 내지 8.5의 값이 되게 하고/하거나 고체를 제거한다.
항생제가 회수되는 최적 pH는 혼합물의 조성에 의존하고 β-락탐 코어와 항생제의 최적 분리가 달성되도록 선택된다. 실제로 최적 pH는 한편으로 항생제가 비교적 높은 pH에서 회수되어 항생제가 용액중에 여전히 부분적으로 존재하고 β-락탐 코어가 여전히 용액에 완전히 존재할 때 달성되는 회수되는 항생제의 고순도와, 다른 한편으로 항생제가 회수되는 pH가 비교적 낮아서 항생제가 실질적으로 완전히 침전됨과 동시에 β-락탐 코어의 일부도 또한 침전되는 경우에 달성되는 고수율 사이의 절충값이다. 본 분야의 당업자에게 있어서, 주어진 상황에서 최적 pH를 결정하는 것은 쉽다.
본 발명의 구성에서 pH는 여러 방법으로 낮출 수 있는데, 예를들면 이것은 무기산 또는 카르복실산, 특히 황산, 염산, 질산, 아세트산 또는 포름산과 같은 산을 첨가함으로써 화학적으로 행해질 수 있다. 예를들면, D-페닐 글리신 아미드(PGA)가 아실화 반응에서 아실화제로 사용되거나 또는 D-페닐 글리신의 에스테르(PGM)가 사용되고 pH가 아실화 반응동안 암모니아로 적정함으로써 일정하게 유지된다면 다른 가능성이 이용될 수 있다. 이러한 경우에 pH는 암모니아를 물리적으로제거함으로써 낮출 수 있다. 적당한 물리적 제거 방법은 예를들면 증기 또는 불활성 기체에 의한 스트리핑; 감압하 (증기) 증류, 특히 박막 증발; 분무탑에서의 증발; 기체막 분리 또는 전기투석을 포함한다.
가수분해 반응이 수행되는 온도는 특별히 중요하지 않으며 바람직하게는 0 내지 50℃, 특히 5 내지 40℃, 바람직하게는 15 내지 30℃ 이다.
가수분해 반응이 수행되는 pH는 특별히 중요하지 않으며 바람직하게는 6 내지 9, 특히 7 내지 8 이다.
본 발명에 따른 방법은 β-락탐 항생제, 예를들면 세팔렉신, 아목시실린, 암피실린, 세파클로르, 세프라딘, 세파드록실 및 세포탁심, 세파졸린 등의 제조에 적당하게 적용될 수 있다.
본 발명에 따라 사용될 수 있는 β-락탐 코어의 적당한 예로는 다양한 페니실란산 유도체, 예를들면 6-아미노페니실란산(6-APA) 및 세팔로스포란산 유도체, 예를들면 3-부위에 치환기를 가지거나 또는 가지지 않는 7-아미노세팔로스포란산(7-ACA), 예를들면 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산(7-ADCA) 및 7-아미노-3-클로로세팔로스포란산(7-ACCA)이 있다.
(효소적) 아실화 반응에서, 아실화제는 예를들면 활성화된 형태의 페닐 글리신, 바람직하게는 아미드 또는 에스테르, 예를들면 메틸 에스테르일 수 있다. 적당한 페닐 글리신은 예를들면 치환 또는 비치환 페닐 글리신, 특히 페닐 글리신, p-히드록시페닐 글리신, 디히드로페닐 글리신이다.
효소적 아실화 반응은 주로 40℃ 미만, 바람직하게는 0 내지 35℃의 온도에서 수행된다. 효소적 아실화 반응이 수행되는 pH는 주로 5 내지 10, 특히 6 내지 10, 바람직하게는 6 내지 9, 특히 6.5 내지 9이다.
실제로 (효소적) 아실화 반응 및 반응 혼합물의 추가 워크업은 주로 물에서 수행된다. 선택적으로, 반응 혼합물은 또한 유기 용매 또는 유기 용매의 혼합물을 바람직하게는 30부피%미만으로 함유할 수 있다. 사용될 수 있는 유기 용매의 예는 1-7 탄소원자의 알코올, 예를들면 모노알코올, 특히 메탄올 또는 에탄올; 디올, 특히 에틸렌 글리콜 또는 트리올, 특히 글리세롤이다.
본 발명에 따른 방법의 구체예가 7-ADCA 및 D-페닐 글리신 아미드(PGA)로부터 세팔렉신의 제조에 관하여 이하에 상세히 실시된다. 본 구체예에서 pH 8 내지 10의 효소적 아실화 반응후에 얻어지고 세팔렉신, 7-ADCA, PGA 및 D-페닐 글리신(PG)을 함유하는 반응 혼합물을 이것이 함유하고 있는 고체를 분리하기 위해서 처리하는데, 이 고체는 주로 고정화된 효소 및 혹은 PG로 구성된다. 그후 남아있는 액체 혼합물의 pH를 6-8, 특히 6.5-7.5로 낮추어, 주로 세팔렉신을 함유하는 침전물을 형성시키고, 그후 고체 세팔렉신을 회수한다. 본 바람직한 구체예에서는 그후 남아있는 액체 혼합물을 효소적 가수분해하여 특히 남아있는 용해된 세팔렉신의 7-ADCA와 PG로의 가수분해 및 남아 있는 PGA의 PG로의 가수분해를 각각 일으킨다. PG는 실질적으로 완전히 침전되고 예를들면 여과에 의해 분리될 수 있다. 원한다면 PG는 반응기 밖의 필터상으로 현탁액을 순환시킴으로써 가수분해 반응동안 이미 제거될 수 있다(전부 또는 부분적으로). 다음에, 7-ADCA는 예를들면 더욱 pH를 낮추어 7-ADCA를 침전시킨후 남아있는 혼합물로부터 분리할 수 있다. 즉, 그후 이것은예를들면 여과 또는 원심분리에 의해 분리될 수 있고 아실화 반응에 다시 사용될 수 있다.
본 발명의 구성에서는 다양한 성분이 유리 형태로 또는 염으로서 반응 혼합물에 존재할 수 있다. 언급된 pH값은 모든 경우에 실온에서 검정한 pH 전극으로 측정된 pH값이다.
본 발명을 다음 실시예로 더 설명하나, 본 발명이 여기에 제한되는 것은 아니다.
약어:
AMOX = 아목시실린 삼수화물
AMPI = 암피실린 삼수화물
CEX = 세팔렉신
CEX.H2O = 세팔렉신 일수화물
6-APA = 6-아미노페니실란산
7-ADCA = 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산
PGA = D-페닐 글리신 아미드
PG = D-페닐 글리신
HPGA = D-p-히드록시페닐 글리신 아미드
HPG = D-p-히드록시페닐 글리신
HPG-Me = D-p-히드록시페닐 글리신 메틸 에스테르
실시예 I
7-ADCA의 용해도에 대한 PGA 및 PEX의 효과
다음 합성 혼합물을 최종 pH 4.5로 제조하였다.
혼합물 1:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA
혼합물 2:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA 및 0.4%(m/m) PG
혼합물 3:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA, 0.4%(m/m) PG 및 1.5%(m/m) PGA
혼합물 4:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA, 0.4%(m/m) PG, 1.5%(m/m) PGA 및 3.0%(m/m) CEX.H2O
혼합물 5:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA 및 3.0%(m/m) CEX.H2O
쉐이커 배양기(20℃)에서 2시간 배양후에 시료를 녹이고 이들 성분 각각의 용해된 농도를 측정하였다.
결과 용해된 농도 [% (m/m)]
혼합물 PG ADCA PGA CEX
1 - 0.03 - -
2 0.40 0.03 - -
3 0.40 0.03 1.5 -
4 0.40 0.13 1.5 2.0
5 - 0.03 - 2.0
이 표는 PG, PGA 및 CEX의 조합만이 7-ADCA의 용해도에 대해 어떤 상당한 효과 미침을 보여준다.
실시예 II
6-APA의 용해도상에 대한 PGA 및 AMPI의 효과
다음 합성 혼합물을 최종 pH 4.5로 제조하였다.
혼합물 1:
물중의 3%(m/m) 6-APA
혼합물 2:
물중의 3%(m/m) 6-APA 및 0.4%(m/m) PG
혼합물 3:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.4%(m/m) PG 및 1.5%(m/m) PGA
혼합물 4:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.4%(m/m) PG, 1.5%(m/m) PGA 및 3.0%(m/m) AMPI
쉐이커 배양기(20℃)에서 2시간 배양후에 시료를 녹이고 이들 성분 각각의 용해된 농도를 측정하였다. 결과:
PG 6-APA PGA AMPI
혼합물 1 - 0.35 - -
혼합물 2 0.4 0.40 - -
혼합물 3 0.4 0.40 1.5 -
혼합물 4 0.4 0.90 1.5 0.7
여기서는 혼합물 4만이 6-APA의 용해도에 대해 어떤 상당한 효과를 나타낸다.
실시예 III
6-APA의 용해도에 대한 HPGA/HPG-Me 및 AMOX의 효과
다음 합성 혼합물을 최종 pH 4.5로 제조하였다.
혼합물 1:
물중의 3%(m/m) 6-APA
혼합물 2:
물중의 3%(m/m) 6-APA 및 0.5%(m/m) HPG
혼합물 3:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG 및 1.5%(m/m) HPGA
혼합물 4:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG 및 2.0% HPG-Me
혼합물 5:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG, 1.5%(m/m) HPGA 및 3.0%(m/m) AMOX
혼합물 6:
물중의 3.0%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG, 2.0%(m/m) HPG-Me 및 3.0%(m/m) AMOX
쉐이커 배양기(20℃)에서 2시간 배양후에 시료를 녹이고 이들 성분 각각의 용해된 농도를 측정하였다.
결과 용해된 농도[% (m/m)]
혼합물 HPG HPGA 6-APA HPG-Me AMOX
1 - - 0.35 - -
2 0.5 - 0.35 - -
3 0.5 1.5 0.40 - -
4 0.5 - 0.50 2.0 -
5 0.5 1.5 1.40 - 0.8
6 0.5 - 2.15 2.0 0.8
여기서는 혼합물 5와 6만이 6-APA의 용해도에 대해 어떤 상당한 효과를 나타냈다.
비교실험 A
산성화를 통한 CEX 모액으로부터 7-ADCA의 회수
7-ADCA 12.0%(m/m) 및 PGA 7.2%(m/m)를 함유하는 슬러리 1850g을 EnzygelR150g을 함유하는 체 바닥 반응기(구멍 크기 40μm)로 공급하였다. 7-ADCA중의 페닐 아세트산의 함량은 120ppm에 달했다. 초기 pH는 7.8이었고 온도는 5℃로 유지하였다(반응기: N2로 연속적으로 플러싱, 교반 속도 500r.p.m).
3시간 배양후에 반응 혼합물(최종 pH 8.4)을 체 바닥을 통해 분리하고 그 뒤의 남아있는 효소를 물 185g으로 세척하였다.
두 유출물을 합하여 11.5% CEX.H2O, 4.5% 7-ADCA, 1.5% PGA 및 0.6% PG를 함유하는 맑은 용액을 얻었다. 다음에, CEX.H2O를 선택적 결정화를 통해 회수하였다. 이러한 취지로 H2SO4(25% (m/m))와 상기 용액을 동시에 결정화 용기(pH 7.0, 30℃)로 공급하였다. 30분간 재결정후에 CEX.H2O 결정을 원심분리로 분리하고 물로 세척한후 아세톤/물(80:20) 혼합물로 세척하였다. 건조시킨 후에 CEX.H2O 168g을 얻었다. CEX.H2O 세척수와 함께 모액 용액은 다음 조성을 나타냈다: CEX.H2O 2.6%(m/m), 7-ADCA 4.2%(m/m), PGA 1.4%(m/m), PG 0.5%(m/m).
이 용액을 다시 25% H2SO4를 사용하여 더욱 pH 4.5로 산성화하였을 때, 대부분의 유용한 β-락탐 성분이 결정화되고, 분리되고 재순환될 수 있었다. 생성된 모액은 다음 조성을 나타냈다: 1.8%(m/m) CEX.H2O, 0.28%(m/m) 7-ADCA, 1.4%(m/m) PGA 및 0.5%(m/m) PG.
실시예 IV
CEX 모액의 효소적 가수분해후 산성화에 의한 CEX 모액으로부터 7-ADCA의 회수
CEX.H2O 세척액과 함께 CEX.H2O 모액(비교실험 A에서 기술된 바와 같이 얻음)을 NH4OH로 pH 7.6, 온도 30℃가 되게 하였다. 그후 이 용액을 Recordati로부터의 고정화된 페니실린-G 아실라제 200g을 함유하고 있는 체 바닥 반응기(구멍 크기 40μm)로 공급하였다. 3시간 반응(500 r.p.m)시킨 후에, 고체 형태의 PG를 함유하고 있는 반응 혼합물을 배수시키고 효소 및 고체형태의 PG를 β-락탐 손실을 감소시키기 위해서 물로 세척하였다. 두 용액을 합하여 PC 결정을 여과로 분리하였다. 결과의 여액은 다음 조성을 나타냈다: 4.2%(m/m) 7-ADCA, 0.04%(m/m) CEX.H2O, 0.01%(m/m) PGA 및 0.54%(m/m) PG.
이 모액을 H2SO4(25%)로 pH 4.5로 산성화하여 7-ADCA를 결정화시켰다. 7-ADCA 결정을 원심분리로 분리한후에, 매우 낮은 β-락탐 함량을 갖는 모액을 얻었다: 0.04%(m/m) CEX.H2O 및 0.08%(m/m) 7-ADCA.
얻은 7-ADCA중의 페닐아세트산의 함량은 69ppm이었다.
실시예 V
효소적 아실화 반응에서 가수분해 반응후에 얻어지는 7-ADCA의 사용
사용되는 7-ADCA중 반은 실시예 IV에서와 동일하고 나머지 반은 실시예 IV의 가수분해후에 다시 얻어지는 7-ADCA로 구성된다는 사실과 배양시간이 2시간이라는 사실을 제외하고는 아실화 반응을 실시예 IV(또는 비교실험 A)와 동일한 방법으로 수행하였다. 본질적으로 생성된 공정 유출물의 조성 및 세팔렉신 수율은 동일하였다.

Claims (14)

  1. 6-아미노페니실란산, 3-부위에 치환기를 가지거나 또는 가지지 않는 7-아미노세팔로스포란산, 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산 및 7-아미노-3-클로로세팔로스포란산으로 구성된 군으로부터 선택되는 β-락탐 코어를 아실화하고 항생제를 반응 혼합물로부터 회수한 후 남아있는 모액을 워크업하는 항생제 제조방법에 있어서, 워크업 단계에서 모액을 효소적 가수분해 반응시킨후 β-락탐 코어를 적어도 부분적으로 재사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 아실화는 효소적 아실화 반응으로 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 가수분해는Alcaligenes faecalis,Escherichia coli,Bacillus megaterium및Xanthomonas citrii로 이루어지는 군으로부터 선택된 효소의 존재하에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 고정화된 형태의 효소를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 가수분해 반응은 pH 6 내지 8.5에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세팔렉신은 D-페닐 글리신 아미드 또는 D-페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 아목시실린은 D-p-히드록시페닐 글리신 아미드 또는 D-p-히드록시페닐 글리신의 에스테르로 6-아미노페니실란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 암피실린은 D-페닐 글리신 아미드 또는 D-페닐 글리신의 에스테르로 6-아미노페니실란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
  9. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세파클로르는 D-페닐 글리신 아미드 또는 D-페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노-3-클로로세팔로스포란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
  10. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세프라딘은 D-디히드로페닐 글리신 아미드 또는 D-디히드로페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산을아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
  11. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세파드록실은 D-p-히드록시페닐 글리신 아미드 또는 D-p-히드록시페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 100ppm미만의 유리 페닐아세트산을 갖는 것을 특징으로 하는 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산.
  13. 70ppm미만의 유리 페닐아세트산을 갖는 것을 특징으로 하는 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산.
  14. 20ppm미만의 유리 페닐아세트산 또는 페녹시아세트산을 갖는 것을 특징으로 하는 6-아미노페니실란산.
KR10-1998-0704287A 1995-12-08 1996-12-06 항생제제조방법 KR100455252B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BE9501015 1995-12-08
BE9501015 1995-12-08
PCT/NL1996/000479 WO1997022610A1 (en) 1995-12-08 1996-12-06 Process for the preparation of an antibiotic

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20000064370A KR20000064370A (ko) 2000-11-06
KR100455252B1 true KR100455252B1 (ko) 2005-01-15

Family

ID=3889338

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR10-1998-0704287A KR100455252B1 (ko) 1995-12-08 1996-12-06 항생제제조방법

Country Status (10)

Country Link
US (1) US6503727B1 (ko)
EP (1) EP0865443B1 (ko)
KR (1) KR100455252B1 (ko)
CN (1) CN1107070C (ko)
AT (1) ATE234846T1 (ko)
AU (1) AU7711496A (ko)
DE (1) DE69626842D1 (ko)
ES (1) ES2195024T3 (ko)
PL (1) PL327134A1 (ko)
WO (1) WO1997022610A1 (ko)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998000382A1 (fr) 1996-07-02 1998-01-08 Toray Industries, Inc. Procedes de preparation de cetones optiquement actives
EP0918879A1 (en) * 1997-04-22 1999-06-02 Gist-Brocades B.V. A METHOD FOR PREPARING A $g(b)-LACTAM ANTIBIOTIC
NL1007077C2 (nl) * 1997-09-19 1999-03-22 Dsm Nv Werkwijze voor de winning van een ß-lactam antibioticum.
NL1007076C2 (nl) * 1997-09-19 1999-03-22 Dsm Nv Werkwijze voor de winning van een ß-lactam antibioticum.
NL1007302C2 (nl) 1997-10-17 1999-04-20 Dsm Nv Werkwijze voor de bereiding van een ß-lactam antibioticum.
NL1010506C2 (nl) * 1998-11-06 2000-05-09 Dsm Nv Werkwijze voor de bereiding van bêta-lactam antibiotica.
CN101448842A (zh) 2006-05-19 2009-06-03 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 一种用于结晶头孢羟氨苄的方法
CN102392060B (zh) * 2011-09-16 2013-07-31 石药集团中润制药(内蒙古)有限公司 一种利用纳滤回收酶法阿莫西林母液中有效成份的方法
CN103193800B (zh) * 2013-04-08 2016-03-02 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 一种从头孢克洛酶促反应液中分离纯化各组分的方法
CN103805672B (zh) * 2014-02-25 2016-05-25 华北制药集团先泰药业有限公司 一种酶法制备氨苄西林的工艺
CN104628587B (zh) * 2015-02-12 2016-06-22 艾美科健（中国）生物医药有限公司 一种回收阿莫西林生产废液中d-对羟基苯甘氨酸的方法
CN105294734B (zh) * 2015-10-16 2018-02-13 华北制药河北华民药业有限责任公司 一种制备头孢尼西二苄基乙二胺盐的方法
CN105603037B (zh) * 2015-12-24 2020-07-31 天津大学 一种酶催化酰化制备头孢菌素的方法
CN105567777A (zh) * 2016-03-07 2016-05-11 内蒙古常盛制药有限公司 一种循环利用阿莫西林母液的方法
CN111269076A (zh) * 2020-03-12 2020-06-12 山东钧睿科技服务有限公司 一种酶法合成β-内酰胺类抗生素离心母液回收处理工艺

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4003896A (en) * 1974-12-17 1977-01-18 Novo Industri A/S Method of preparing a sparingly soluble complex of cephalexin
JPS5645196A (en) * 1979-09-19 1981-04-24 Shionogi & Co Ltd Enzymatic synthesis of beta-lactam antibacterial agent
CA2086250C (en) * 1990-07-04 2001-05-29 Svend Gunnar Kaasgaard Process for preparation of beta-lactams
PL170842B1 (pl) * 1991-12-19 1997-01-31 Gist Brocades Bv Sposób wytwarzania antybiotyków ß -laktamowych PL PL PL
ES2163002T3 (es) * 1995-02-02 2002-01-16 Dsm Nv Procedimiento para la recuperacion de cefalexina.

Also Published As

Publication number Publication date
WO1997022610A1 (en) 1997-06-26
CN1207742A (zh) 1999-02-10
EP0865443A1 (en) 1998-09-23
ES2195024T3 (es) 2003-12-01
US6503727B1 (en) 2003-01-07
PL327134A1 (en) 1998-11-23
ATE234846T1 (de) 2003-04-15
DE69626842D1 (de) 2003-04-24
KR20000064370A (ko) 2000-11-06
CN1107070C (zh) 2003-04-30
AU7711496A (en) 1997-07-14
EP0865443B1 (en) 2003-03-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100455252B1 (ko) 항생제제조방법
EP0537255B1 (en) Process for preparation of beta-lactams
US6048708A (en) Process for preparation of β-lactams at constantly high concentration of reactants
EP0977883B1 (en) Improved process for the fermentative production of penicillin
EP1023454B1 (en) Process for the preparation of a (beta)-lactam antibiotic
EP0869961B1 (en) Process for the recovery of cephalexin
EP0730036B1 (en) Process for the enzymatic synthesis of beta-lactam antibiotics in the presence of an enzyme inhibitor
US6319684B1 (en) Process for the fermentative production of cephalosporin
WO1999015531A1 (en) PROCEDE FOR RECOVERY OF A β-LACTAM ANTIBIOTIC
EP1416054B1 (en) Simple enzymatic process for preparing cefazolin
WO1999031109A1 (en) COMPLEXES OF ss-LACTAM ANTIBIOTICS AND 1-NAPHTHOL
BE1009070A3 (nl) Werkwijze voor de winning van een beta-lactam antibioticum.
WO1998056944A1 (en) APPLICATION OF REDUCING SULPHUR COMPOUNDS DURING ENZYMATIC PREPARATION OF β-LACTAM COMPOUNDS
EP0640014A1 (en) Separation method
WO1998048037A1 (en) A METHOD FOR CONTROLLING THE SOLUBILITY OF A β-LACTAM NUCLEUS
MXPA00010537A (en) A METHOD FOR CRYSTALLIZING A&amp;bgr;-LACTAM ANTIBIOTIC

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20091015

Year of fee payment: 6

LAPS Lapse due to unpaid annual fee