KR100455252B1 - 항생제제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 항생제, 특히 세팔렉신, 암피실린, 아목시실린, 세파클로르, 세프라딘, 세파드록실, 세포탁심 등의 제조방법에 있어서, β-락탐 코어를 아실화하고, 항생제를 반응 혼합물로부터 회수하고, 남아있는 모액을 가수분해 반응시켜 모액에 존재하는 항생제를 그것의 초기 화합물, 특히 β-락탐 코어로 분해하고 아실화제를 가수분해시키는 방법에 관한 것이다. 그후 β-락탐 코어는 실질적으로 정량적으로 회수되거나 또는 아실화 반응으로 재순환될 수 있다. 이것은 β-락탐 코어의 용해도가 비교적 고농도의 아실화제 및 항생제에서 예기치 않게 높다는 것을 발견하였기 때문이다.
Description
아실화제, 예를들면 D-페닐 글리신 유도체로 β-락탐 코어를 아실화하는 것을 포함하는 항생제 제조에 있어서, 항생제의 회수 및 반응 혼합물의 워크업은 일반적으로 어렵다. 따라서 예를들면 WO-A-93/12250에는, 존재하는 일부 다른 성분(US-A-4003896에 기재된 세팔렉신 제조의 경우에는 특히 7-ADCA 및 페닐글리신)의 산/염기 특성 및 용해도가 최종 생성물의 것과 거의 다르지 않기 때문에 아실화 반응이 결코 종결되지 않으며 최종 생성물의 궁극적 정제가 방해된다고 기술되어 있다. 결과적으로, 공침전이 발생하여 불순한 항생제인 세팔렉신이 얻어진다. WO-A-93/12250 및 US-A-4003896에는 나프톨과 같은 착화제의 사용이 제안되어 있다. 그러나 이것은 이 방법에 맞지 않는 추가의 성분이 첨가되어야 하는 단점을 수반한다.
본 발명은 β-락탐 코어를 아실화하고 항생제를 반응 혼합물로부터 회수한후 남아있는 모액을 워크업하는 항생제 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 목적은 항생제 제조방법에 맞지 않는 그러한 유기 화합물을 사용하지 않으며 비싼 (출발) 물질인 β-락탐 코어의 많은 손실없이 항생제를 순수하게회수할 수 있는 간단하고 일반적이며 널리 이용가능한 방법을 제공하는 것이다.
이것은 워크업단계에서 여전히 비교적 고농도의 항생제를 함유하고 있는 모액을 가수분해 반응시킨후 β-락탐 코어를 예를들면 아실화 반응에서 적어도 부분적으로 재사용하는 본 발명에 따라 달성된다.
아실화 반응은 화학적으로 또는 효소적으로 실행될 수 있다. 화학적으로 아실화한 후 워크업하는 경우에 있어서는 일반적으로 라세미화에 의해 잘못된 측쇄 거울상이성질체를 갖는 매우 소량의 아실화 생성물도 또한 형성될 것이다. 모액중의 아실화 생성물이 재순환된다면, 이러한 부 생성물의 많은 축적이 발생할 수 있다. 아실화 생성물 및 아실화제(측쇄)가 다시 가수분해되는 본 발명에 따른 방법은 이 문제를 회피하는 이점을 더 제공한다.
본 발명에 따른 방법은 바람직하게는 효소적 아실화 반응과 조합하여 수행된다. 최신 기술의 방법에 있어서 β-락탐 코어에 대한 항생제의 고수율을 확보하기 위해서는 과량의 아실화제가 효소적 아실화 반응에 사용되어야 한다. 이 방법은 가수분해의 결과로서 아실화제의 많은 손실이 발생하거나 또는 다량의 반응 혼합물(고체상태의 항생제 회수후에 남아있는 것)이 워크업되어야만 하는 단점을 수반한다.
바야흐로, 본 출원인은 β-락탐 코어의 회수 또는 재순환 능력으로써, 모액을 가수분해 반응시켜 여전히 모액에 존재하는 항생제를 그것의 초기 화합물로 분해하고 아실화제도 가수분해시킴으로써 아실화 반응동안 과량의 아실화제의 사용을 불필요하게 하면서도 β-락탐 코어 손실을 제한하는 방법을 발견하였다. 실제로 본발명에 따른 방법이 β-락탐 코어의 충분한 전환을 요구하지 않으면서도 β-락탐 코어의 단지 소량의 손실만이 발생하는 간단한 방법을 실현가능하게 할 수 있다는 것이 명백해졌다.
놀랍게도, β-락탐 코어의 용해도가 비교적 고농도의 아실화제 및 항생제에서 예기치 않게 높다는 면에서, β-락탐 코어의 용해도는 반응 혼합물중의 남아있는 아실화제 및 항생제의 존재에 의해 영향을 받음이 발견되었다. 결과적으로, 항생제를 분리한 후에 얻어지는 모액을 가수분해하여 항생제와 아실화제의 가수분해를 초래함으로써 고체상태의 β-락탐 코어를 실질적으로 정량적으로 회수하는 것이 가능함을 발견하였다. 더욱이, 고체 상태의 β-락탐 코어는 모액의 가수분해가 실행되지 않았던 방법에서보다 더 순수한 형태로 회수됨을 발견하였다. 특히 β-락탐 코어에서 α-치환 아세트산의 함량이 크게 감소된 것으로 나타났는데, 이것은 이어서 놀랍게도 아실화 반응 속도에 큰 영향을 미쳤다. 특히, 7-ADCA중의 페닐아세트산의 함량 및 6-APA중의 페닐 또는 페닐옥시 아세트산의 함량이 크게 감소되는 것으로 나타났다. 게다가, β-락탐 코어 결정이 부착 수분을 거의 함유하지 않는 것으로 나타났는데, 이것은 불순물의 양이 적음을 뜻한다. 낮은 용해도 때문에 β-락탐 코어 결정은 또한 큰 손실없이 세척될 수 있다는 추가적 이점이 나타난다. 이것은 이어서 재순환에서 항생제에 혹시 축적될지 모르는 불순물의 형성이 적음을 의미한다.
가수분해 반응후에 얻어지는 β-락탐 코어는 β-락탐 항생제의 효소적 제조에 특히 이로운 신규한 조성을 이룬다. 출원인은 가수분해후에 회수되는 β-락탐코어중의 유리 페닐 또는 페녹시 아세트산 함량이 β-락탐 코어 출발 물질의 것보다 상당히 낮은 것을 발견하였는데, 특히 7-ADCA 출발 물질의 유리 페닐아세트산 함량이 120ppm인 7-ADCA β-락탐 코어에 관하여, 가수분해후에 얻어지는 7-ADCA의 유리 페닐아세트산 함량은 69ppm이고, 6-APA에 대해 이러한 특징은 각각 30ppm과 <15ppm인 것으로 나타났다(β-락탐 코어의 양에 대해 계산된 ppm임). 따라서, 본 발명은 또한 100ppm미만, 특히 80ppm미만, 바람직하게는 70ppm미만의 페닐아세트산을 갖는 7-ADCA 및 20ppm미만, 바람직하게는 15ppm미만의 α-아릴- 또는 아릴옥시 아세트산, 특히 α-페닐- 또는 α-페닐옥시아세트산을 갖는 6-APA에 관한 것이다.
본 발명에 따른 방법의 다른 이점은 일반적으로 유용한 가수분해된 아실화제가 효과적으로 회수될 수 있다는 것이다.
선택적으로, β-락탐 코어는 가수분해 반응후에 아실화 반응으로 용액으로 재순환될 수 있다. 그러나, 바람직하게는, β-락탐 코어는 예를들면 pH를 낮춤으로써 고체상태로 침전되는 β-락탐 코어를 분리함으로써 회수된다. 가수분해된 아실화제는 전체 공정중 여러 곳에서, 예를들면, 가수분해 반응후에, β-락탐 코어의 회수후에 또는 축합 반응후에 회수될 수 있다.
가수분해는 바람직하게는 적당한 효소의 존재하에서 수행된다. 효소적 가수분해 반응을 위한 적당한 효소는 예를들면 β-락탐 코어의 제조 및 효소적 아실화 반응에 사용되는 효소로서, 예를들면 아미다제 또는 아실라제, 특히 페니실린 아미다제 또는 아실라제이다. 이러한 효소는 예를들면 J. G. Shewale 등, Process Biochemistry, August 1989, pp. 146-154, 및 Process BiochemistryInternational, June 1990, pp. 97-103에 기술되어 있다. 적당한 효소의 예는Acetobacter, 특히Acetobacter pasteurianum,Aeromones,Alcaligenes, 특히Alcaligenes faecalis,Aphanocladium,Bacillus sp., 특히Bacillus megaterium,Cephalosporium,Escherichia, 특히Escherichia coli,Flavobacterium,Kluyvera,Mycoplana,Protaminobacter,Pseudomonas및Xanthomonas, 특히,Xanthomonas citrii로부터 유래된 효소이다.
바람직하게는 고정화된 효소가 사용되는데 이러한 효소가 쉽게 분리되고 그후 재사용될 수 있기 때문이다. 적당한 고정화 기법은 예를들면 EP-A-222462에 기술되어 있다. 다른 적당한 기법은 겔화제, 예를들면 젤라틴, 및 유리 아미노기를 갖는 중합체, 예를들면 알기네이트 아민, 키토산 또는 폴리에틸렌 이민을 함유하는 담체상에 페니실린 G 아실라제를 고정화하는 것으로 구성된다. 고정화된 효소외에 다른 고체 물질이 또한 존재한다면, 분리는 예를들면 WO-A-9212782에 기재된 방법으로 실행하여 양호한 결과를 얻을 수 있다. 고정화된 효소는 그 자체로 공지되어 있으며 시중구입가능하다.
효소적 가수분해 반응에 적당한 효소는 예를들면 EP-A-453047에 기재된Bacillus megaterium또는Alcaligenes faecalis로부터의 페니실린 G 아실라제인 것으로 나타났다. 또한 상표명 'EnzygelR'로 시중구입가능한 Boehringer Mannheim GmbH로부터의Escherichia coli효소, 상기 언급된 기법에 의해 고정화된Escherichia coli로부터의 페니실린 G 아실라제 및 Recordati로부터의 고정화된 페니실린 G 아실라제가 적당하다.
항생제를 회수하는 적당한 방법은 예를들면, 아실화 반응후에 얻어지는 반응 혼합물의 pH를 5 내지 10, 특히 6 내지 10, 바람직하게는 6 내지 9, 특히 7 내지 8.5의 pH를 갖게 낮춤으로써, 항생제의 선택적 침전을 일으키는데; 선택적으로, 먼저 반응 혼합물의 pH를 5 내지 10, 특히 6 내지 10, 바람직하게는 6 내지 9, 특히 7 내지 8.5의 값이 되게 하고/하거나 고체를 제거한다.
항생제가 회수되는 최적 pH는 혼합물의 조성에 의존하고 β-락탐 코어와 항생제의 최적 분리가 달성되도록 선택된다. 실제로 최적 pH는 한편으로 항생제가 비교적 높은 pH에서 회수되어 항생제가 용액중에 여전히 부분적으로 존재하고 β-락탐 코어가 여전히 용액에 완전히 존재할 때 달성되는 회수되는 항생제의 고순도와, 다른 한편으로 항생제가 회수되는 pH가 비교적 낮아서 항생제가 실질적으로 완전히 침전됨과 동시에 β-락탐 코어의 일부도 또한 침전되는 경우에 달성되는 고수율 사이의 절충값이다. 본 분야의 당업자에게 있어서, 주어진 상황에서 최적 pH를 결정하는 것은 쉽다.
본 발명의 구성에서 pH는 여러 방법으로 낮출 수 있는데, 예를들면 이것은 무기산 또는 카르복실산, 특히 황산, 염산, 질산, 아세트산 또는 포름산과 같은 산을 첨가함으로써 화학적으로 행해질 수 있다. 예를들면, D-페닐 글리신 아미드(PGA)가 아실화 반응에서 아실화제로 사용되거나 또는 D-페닐 글리신의 에스테르(PGM)가 사용되고 pH가 아실화 반응동안 암모니아로 적정함으로써 일정하게 유지된다면 다른 가능성이 이용될 수 있다. 이러한 경우에 pH는 암모니아를 물리적으로제거함으로써 낮출 수 있다. 적당한 물리적 제거 방법은 예를들면 증기 또는 불활성 기체에 의한 스트리핑; 감압하 (증기) 증류, 특히 박막 증발; 분무탑에서의 증발; 기체막 분리 또는 전기투석을 포함한다.
가수분해 반응이 수행되는 온도는 특별히 중요하지 않으며 바람직하게는 0 내지 50℃, 특히 5 내지 40℃, 바람직하게는 15 내지 30℃ 이다.
가수분해 반응이 수행되는 pH는 특별히 중요하지 않으며 바람직하게는 6 내지 9, 특히 7 내지 8 이다.
본 발명에 따른 방법은 β-락탐 항생제, 예를들면 세팔렉신, 아목시실린, 암피실린, 세파클로르, 세프라딘, 세파드록실 및 세포탁심, 세파졸린 등의 제조에 적당하게 적용될 수 있다.
본 발명에 따라 사용될 수 있는 β-락탐 코어의 적당한 예로는 다양한 페니실란산 유도체, 예를들면 6-아미노페니실란산(6-APA) 및 세팔로스포란산 유도체, 예를들면 3-부위에 치환기를 가지거나 또는 가지지 않는 7-아미노세팔로스포란산(7-ACA), 예를들면 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산(7-ADCA) 및 7-아미노-3-클로로세팔로스포란산(7-ACCA)이 있다.
(효소적) 아실화 반응에서, 아실화제는 예를들면 활성화된 형태의 페닐 글리신, 바람직하게는 아미드 또는 에스테르, 예를들면 메틸 에스테르일 수 있다. 적당한 페닐 글리신은 예를들면 치환 또는 비치환 페닐 글리신, 특히 페닐 글리신, p-히드록시페닐 글리신, 디히드로페닐 글리신이다.
효소적 아실화 반응은 주로 40℃ 미만, 바람직하게는 0 내지 35℃의 온도에서 수행된다. 효소적 아실화 반응이 수행되는 pH는 주로 5 내지 10, 특히 6 내지 10, 바람직하게는 6 내지 9, 특히 6.5 내지 9이다.
실제로 (효소적) 아실화 반응 및 반응 혼합물의 추가 워크업은 주로 물에서 수행된다. 선택적으로, 반응 혼합물은 또한 유기 용매 또는 유기 용매의 혼합물을 바람직하게는 30부피%미만으로 함유할 수 있다. 사용될 수 있는 유기 용매의 예는 1-7 탄소원자의 알코올, 예를들면 모노알코올, 특히 메탄올 또는 에탄올; 디올, 특히 에틸렌 글리콜 또는 트리올, 특히 글리세롤이다.
본 발명에 따른 방법의 구체예가 7-ADCA 및 D-페닐 글리신 아미드(PGA)로부터 세팔렉신의 제조에 관하여 이하에 상세히 실시된다. 본 구체예에서 pH 8 내지 10의 효소적 아실화 반응후에 얻어지고 세팔렉신, 7-ADCA, PGA 및 D-페닐 글리신(PG)을 함유하는 반응 혼합물을 이것이 함유하고 있는 고체를 분리하기 위해서 처리하는데, 이 고체는 주로 고정화된 효소 및 혹은 PG로 구성된다. 그후 남아있는 액체 혼합물의 pH를 6-8, 특히 6.5-7.5로 낮추어, 주로 세팔렉신을 함유하는 침전물을 형성시키고, 그후 고체 세팔렉신을 회수한다. 본 바람직한 구체예에서는 그후 남아있는 액체 혼합물을 효소적 가수분해하여 특히 남아있는 용해된 세팔렉신의 7-ADCA와 PG로의 가수분해 및 남아 있는 PGA의 PG로의 가수분해를 각각 일으킨다. PG는 실질적으로 완전히 침전되고 예를들면 여과에 의해 분리될 수 있다. 원한다면 PG는 반응기 밖의 필터상으로 현탁액을 순환시킴으로써 가수분해 반응동안 이미 제거될 수 있다(전부 또는 부분적으로). 다음에, 7-ADCA는 예를들면 더욱 pH를 낮추어 7-ADCA를 침전시킨후 남아있는 혼합물로부터 분리할 수 있다. 즉, 그후 이것은예를들면 여과 또는 원심분리에 의해 분리될 수 있고 아실화 반응에 다시 사용될 수 있다.
본 발명의 구성에서는 다양한 성분이 유리 형태로 또는 염으로서 반응 혼합물에 존재할 수 있다. 언급된 pH값은 모든 경우에 실온에서 검정한 pH 전극으로 측정된 pH값이다.
본 발명을 다음 실시예로 더 설명하나, 본 발명이 여기에 제한되는 것은 아니다.
약어:
AMOX = 아목시실린 삼수화물
AMPI = 암피실린 삼수화물
CEX = 세팔렉신
CEX.H2O = 세팔렉신 일수화물
6-APA = 6-아미노페니실란산
7-ADCA = 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산
PGA = D-페닐 글리신 아미드
PG = D-페닐 글리신
HPGA = D-p-히드록시페닐 글리신 아미드
HPG = D-p-히드록시페닐 글리신
HPG-Me = D-p-히드록시페닐 글리신 메틸 에스테르
실시예 I
7-ADCA의 용해도에 대한 PGA 및 PEX의 효과
다음 합성 혼합물을 최종 pH 4.5로 제조하였다.
혼합물 1:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA
혼합물 2:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA 및 0.4%(m/m) PG
혼합물 3:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA, 0.4%(m/m) PG 및 1.5%(m/m) PGA
혼합물 4:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA, 0.4%(m/m) PG, 1.5%(m/m) PGA 및 3.0%(m/m) CEX.H2O
혼합물 5:
물중의 3%(m/m) 7-ADCA 및 3.0%(m/m) CEX.H2O
쉐이커 배양기(20℃)에서 2시간 배양후에 시료를 녹이고 이들 성분 각각의 용해된 농도를 측정하였다.
결과 | 용해된 농도 [% (m/m)] | |||
혼합물 | PG | ADCA | PGA | CEX |
1 | - | 0.03 | - | - |
2 | 0.40 | 0.03 | - | - |
3 | 0.40 | 0.03 | 1.5 | - |
4 | 0.40 | 0.13 | 1.5 | 2.0 |
5 | - | 0.03 | - | 2.0 |
이 표는 PG, PGA 및 CEX의 조합만이 7-ADCA의 용해도에 대해 어떤 상당한 효과 미침을 보여준다.
실시예 II
6-APA의 용해도상에 대한 PGA 및 AMPI의 효과
다음 합성 혼합물을 최종 pH 4.5로 제조하였다.
혼합물 1:
물중의 3%(m/m) 6-APA
혼합물 2:
물중의 3%(m/m) 6-APA 및 0.4%(m/m) PG
혼합물 3:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.4%(m/m) PG 및 1.5%(m/m) PGA
혼합물 4:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.4%(m/m) PG, 1.5%(m/m) PGA 및 3.0%(m/m) AMPI
쉐이커 배양기(20℃)에서 2시간 배양후에 시료를 녹이고 이들 성분 각각의 용해된 농도를 측정하였다. 결과:
PG | 6-APA | PGA | AMPI | |
혼합물 1 | - | 0.35 | - | - |
혼합물 2 | 0.4 | 0.40 | - | - |
혼합물 3 | 0.4 | 0.40 | 1.5 | - |
혼합물 4 | 0.4 | 0.90 | 1.5 | 0.7 |
여기서는 혼합물 4만이 6-APA의 용해도에 대해 어떤 상당한 효과를 나타낸다.
실시예 III
6-APA의 용해도에 대한 HPGA/HPG-Me 및 AMOX의 효과
다음 합성 혼합물을 최종 pH 4.5로 제조하였다.
혼합물 1:
물중의 3%(m/m) 6-APA
혼합물 2:
물중의 3%(m/m) 6-APA 및 0.5%(m/m) HPG
혼합물 3:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG 및 1.5%(m/m) HPGA
혼합물 4:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG 및 2.0% HPG-Me
혼합물 5:
물중의 3%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG, 1.5%(m/m) HPGA 및 3.0%(m/m) AMOX
혼합물 6:
물중의 3.0%(m/m) 6-APA, 0.5%(m/m) HPG, 2.0%(m/m) HPG-Me 및 3.0%(m/m) AMOX
쉐이커 배양기(20℃)에서 2시간 배양후에 시료를 녹이고 이들 성분 각각의 용해된 농도를 측정하였다.
결과 | 용해된 농도[% (m/m)] | ||||
혼합물 | HPG | HPGA | 6-APA | HPG-Me | AMOX |
1 | - | - | 0.35 | - | - |
2 | 0.5 | - | 0.35 | - | - |
3 | 0.5 | 1.5 | 0.40 | - | - |
4 | 0.5 | - | 0.50 | 2.0 | - |
5 | 0.5 | 1.5 | 1.40 | - | 0.8 |
6 | 0.5 | - | 2.15 | 2.0 | 0.8 |
여기서는 혼합물 5와 6만이 6-APA의 용해도에 대해 어떤 상당한 효과를 나타냈다.
비교실험 A
산성화를 통한 CEX 모액으로부터 7-ADCA의 회수
7-ADCA 12.0%(m/m) 및 PGA 7.2%(m/m)를 함유하는 슬러리 1850g을 EnzygelR150g을 함유하는 체 바닥 반응기(구멍 크기 40μm)로 공급하였다. 7-ADCA중의 페닐 아세트산의 함량은 120ppm에 달했다. 초기 pH는 7.8이었고 온도는 5℃로 유지하였다(반응기: N2로 연속적으로 플러싱, 교반 속도 500r.p.m).
3시간 배양후에 반응 혼합물(최종 pH 8.4)을 체 바닥을 통해 분리하고 그 뒤의 남아있는 효소를 물 185g으로 세척하였다.
두 유출물을 합하여 11.5% CEX.H2O, 4.5% 7-ADCA, 1.5% PGA 및 0.6% PG를 함유하는 맑은 용액을 얻었다. 다음에, CEX.H2O를 선택적 결정화를 통해 회수하였다. 이러한 취지로 H2SO4(25% (m/m))와 상기 용액을 동시에 결정화 용기(pH 7.0, 30℃)로 공급하였다. 30분간 재결정후에 CEX.H2O 결정을 원심분리로 분리하고 물로 세척한후 아세톤/물(80:20) 혼합물로 세척하였다. 건조시킨 후에 CEX.H2O 168g을 얻었다. CEX.H2O 세척수와 함께 모액 용액은 다음 조성을 나타냈다: CEX.H2O 2.6%(m/m), 7-ADCA 4.2%(m/m), PGA 1.4%(m/m), PG 0.5%(m/m).
이 용액을 다시 25% H2SO4를 사용하여 더욱 pH 4.5로 산성화하였을 때, 대부분의 유용한 β-락탐 성분이 결정화되고, 분리되고 재순환될 수 있었다. 생성된 모액은 다음 조성을 나타냈다: 1.8%(m/m) CEX.H2O, 0.28%(m/m) 7-ADCA, 1.4%(m/m) PGA 및 0.5%(m/m) PG.
실시예 IV
CEX 모액의 효소적 가수분해후 산성화에 의한 CEX 모액으로부터 7-ADCA의 회수
CEX.H2O 세척액과 함께 CEX.H2O 모액(비교실험 A에서 기술된 바와 같이 얻음)을 NH4OH로 pH 7.6, 온도 30℃가 되게 하였다. 그후 이 용액을 Recordati로부터의 고정화된 페니실린-G 아실라제 200g을 함유하고 있는 체 바닥 반응기(구멍 크기 40μm)로 공급하였다. 3시간 반응(500 r.p.m)시킨 후에, 고체 형태의 PG를 함유하고 있는 반응 혼합물을 배수시키고 효소 및 고체형태의 PG를 β-락탐 손실을 감소시키기 위해서 물로 세척하였다. 두 용액을 합하여 PC 결정을 여과로 분리하였다. 결과의 여액은 다음 조성을 나타냈다: 4.2%(m/m) 7-ADCA, 0.04%(m/m) CEX.H2O, 0.01%(m/m) PGA 및 0.54%(m/m) PG.
이 모액을 H2SO4(25%)로 pH 4.5로 산성화하여 7-ADCA를 결정화시켰다. 7-ADCA 결정을 원심분리로 분리한후에, 매우 낮은 β-락탐 함량을 갖는 모액을 얻었다: 0.04%(m/m) CEX.H2O 및 0.08%(m/m) 7-ADCA.
얻은 7-ADCA중의 페닐아세트산의 함량은 69ppm이었다.
실시예 V
효소적 아실화 반응에서 가수분해 반응후에 얻어지는 7-ADCA의 사용
사용되는 7-ADCA중 반은 실시예 IV에서와 동일하고 나머지 반은 실시예 IV의 가수분해후에 다시 얻어지는 7-ADCA로 구성된다는 사실과 배양시간이 2시간이라는 사실을 제외하고는 아실화 반응을 실시예 IV(또는 비교실험 A)와 동일한 방법으로 수행하였다. 본질적으로 생성된 공정 유출물의 조성 및 세팔렉신 수율은 동일하였다.
Claims (14)
- 6-아미노페니실란산, 3-부위에 치환기를 가지거나 또는 가지지 않는 7-아미노세팔로스포란산, 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산 및 7-아미노-3-클로로세팔로스포란산으로 구성된 군으로부터 선택되는 β-락탐 코어를 아실화하고 항생제를 반응 혼합물로부터 회수한 후 남아있는 모액을 워크업하는 항생제 제조방법에 있어서, 워크업 단계에서 모액을 효소적 가수분해 반응시킨후 β-락탐 코어를 적어도 부분적으로 재사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항에 있어서, 아실화는 효소적 아실화 반응으로 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 가수분해는Alcaligenes faecalis,Escherichia coli,Bacillus megaterium및Xanthomonas citrii로 이루어지는 군으로부터 선택된 효소의 존재하에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 고정화된 형태의 효소를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 가수분해 반응은 pH 6 내지 8.5에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세팔렉신은 D-페닐 글리신 아미드 또는 D-페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 아목시실린은 D-p-히드록시페닐 글리신 아미드 또는 D-p-히드록시페닐 글리신의 에스테르로 6-아미노페니실란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 암피실린은 D-페닐 글리신 아미드 또는 D-페닐 글리신의 에스테르로 6-아미노페니실란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세파클로르는 D-페닐 글리신 아미드 또는 D-페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노-3-클로로세팔로스포란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세프라딘은 D-디히드로페닐 글리신 아미드 또는 D-디히드로페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산을아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 세파드록실은 D-p-히드록시페닐 글리신 아미드 또는 D-p-히드록시페닐 글리신의 에스테르로 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산을 아실화함으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 100ppm미만의 유리 페닐아세트산을 갖는 것을 특징으로 하는 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산.
- 70ppm미만의 유리 페닐아세트산을 갖는 것을 특징으로 하는 7-아미노데스아세톡시세팔로스포란산.
- 20ppm미만의 유리 페닐아세트산 또는 페녹시아세트산을 갖는 것을 특징으로 하는 6-아미노페니실란산.
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