MXPA01008883A - Vacunas y composiciones para terapia de genes y metodos para fabricar y usar los mismos. - Google Patents

Abstract

Se describen métodos para inducir una respuesta inmune contra un inmunógeno en un individuo. Los métodos comprenden administrar al individuo una o más moléculas deácido nucleico, que comprendan una secuencia de nucleótidos que codifique un inmunógeno, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. Las secuencias de nucleótidos que codifican al inmunógeno y al antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal se expresan cuando las toman las células del individuo, y se induce en el individuo una respuesta inmune contra el inmunógeno. Se describen métodos para reducir el rechazo de células, tejido uórgano donadoresen un individuo que experimente trasplante de células, tejido uórgano. Los métodos comprenden administrar al individuo una o más moléculas deácido nucleico, que comprendan una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, que se compara con las células, tejido uórgano donadores. Las secuencias de nucleótidos que codifican el antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan cuando las toman las células del individuo. La muerte de células T a través de la interacción con la señal de muerte o toxina da como resultado una reducción del rechazo de células, tejido uórgano donadores no compatibles. También se describen métodos para reducir una respuesta inmune dominante en un individuo, y métodos para expandir una subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune específica. Se describen plásmidos y composiciones que comprenden plásmidosútiles para practicar el méto

Description

VACUNAS Y COMPOSICIONES PARA TERAPIA DE GENES Y METODOS PARA FABRICAR Y USAR LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se relaciona con vacunas y métodos para inducir respuestas inmunes profilácticas y/o terapéuticas en los individuos. La presente invención se relaciona con composiciones para y métodos para tratar pacientes que se someten a procedimientos de transplante de células, tejidos y/u órganos. La presente invención se relaciona con composiciones para y métodos de modulación de respuestas inmunes.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Las vacunas son útiles para inmunizar a los individuos contra antigenos objetivo tales como antigenos patógenos o antígenos que se asocian con las células involucradas en las enfermedades humanas. Los antigenos que se asocian con las células involucradas en enfermedades humanas incluyen el tumor asociado con cáncer y los jgenos y antigenos que se asocian con las células involucradas en las enfermedades autoinmunes. Al diseñar estas vacunas, se ha reconocido que las vacunas que producen el antigeno objetivo en la célula del individuo que se vacunó son efectivas para inducir el brazo celular del sistema inmune. De manera especifica, las vacunas atenuadas vivas, las vacunas recombinantes que usan vectores no virulentos, y las vacunas de ADN llevan todas a la producción de antigenos en la célula del individuo que se vacunó que da como resultado la inducción del brazo celular del sistema inmune. Por otro lado, las vacunas de subunidades que comprenden solamente proteínas y vacunas eliminadas o desactivadas, las cuales sí inducen una respuesta humoral, no inducen respuestas inmunes celulares buenas. Frecuentemente es necesaria una respuesta inmune celular para proporcionar protección contra la infección patógena y para proporcionar la terapia mediada inmune para el tratamiento de la infección patógena, el cáncer o enfermedades autoinmunes. De conformidad con lo anterior, se prefieren las vacunas que producen el antígeno objetivo en las células del individuo que se vacunó, tales como vacunas atenuadas vivas, vacunas recombinantes que usan vectores no virulentos y vacunas de ADN. Aunque se ha reportado algunas vacunas son efectivas para inmunizar a los individuos de manera profiláctica o terapéutica contra infecciones patógenas o enfermedades humanas, existe una necesidad por vacunas mejoradas. Existe una necesidad por composiciones y métodos que produzcan una respuesta inmune mejorada. Las respuestas inmunes también están incluidas en el rechazo de células, tejidos, y órganos y en el injerto en comparación con la enfermedad huésped que experimentan los pacientes de transplantes. Frecuentemente, las células, tejidos y órganos del donador tienen diferentes subtipos o antigenos de clase I del complejo de histocompatibilidad principal (MHC I) de aquellos de las células del receptor. El sistema inmune del receptor detecta la diferencia en el subtipo MHC I y dirige una respuesta inmune contra las células, tejidos u órganos del donador. De manera similar, en los pacientes que reciben transplantes de médula ósea, las diferencias en los subtipos de los antigenos MHC II puede dar como resultado el rechazo de las células del donador que expresan los antigenos MHC II.

Existe una necesidad por composiciones y métodos que puedan evitar o reducir la severidad del rechazo al transplante .

COMPENDIO DE LA INVENCION La presente invención se relaciona con métodos para inducir una respuesta inmune contra un inmunógeno en un individuo. Los métodos comprenden el paso de administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, una moléculas de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladors necesarios para la expresión en el individuo de una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. Se toma la molécula de ácido nucleico mediante una célula del individuo. Allí, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunogeno y el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y se induce una respuesta inmune contra el inmunogeno en el individuo. De manera alternativa, o concurrente, los métodos comprenden el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunogeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La primera y segunda moléculas de ácido nucleico se captan mediante una célula del individuo, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunogeno y el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo. En algunas modalidades, la molécula o moléculas de ácido nucleico comprenden además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. La presente invención se relaciona adicionalmente con plásmidos que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y, de manera opcional, una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y con composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos. La presente invención se relaciona adicionalmente con composiciones que comprenden un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido es un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina El.2. La presente invención se relaciona además con un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores . La presente invención se relaciona adicionalmente con composiciones que comprenden un primer plásmido y un segundo plásmido. El primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. Cualesquiera de los plásmidos puede comprender adicionalmente una secuencia de nucleótidos que codifique la B7.2. De manera opcional, la composición puede comprende un tercer plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2. La presente invención se relaciona además con el método para reducir el rechazo de las células, tejidos u órganos no coincidentes del donador en un individuo que se somete al transplante de células, tejidos u órganos. Los métodos comprenden el paso de administrar al individuo en un sitio del cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que ¦ se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. Se iguala el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal con las células, tejidos u órganos del donador. Se toma la molécula de ácido nucleico mediante una célula del individuo, en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina . Un receptor de célula T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa la célula. La célula T muere después de la formación del complejo por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina . Mediante lo mismo se reduce el rechazo de las células, tejidos u órganos no coincidentes del donador en el individuo. De manera alternativa, o concurrente, los métodos comprenden el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. Se iguala el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal con las células, tejidos u órganos del donador. La primera y segunda moléculas de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina . Un receptor de célula T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa la célula. La célula T muere después de la formación del complejo por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina , y se reduce el rechazo de las células, tejidos u órganos no coincidentes del donador. En algunas modalidades, la molécula o moléculas de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina El.2. La presente invención se relaciona además con plásmidos que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores y, de manera opcional, una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y las composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos. La presente invención se relaciona además con composiciones que comprende una primer plásmido y un segundo plásmido. El primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores. El segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. La presente invención se relaciona además con plásmidos que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina . La presente invención se relaciona adicionalmente con la composición que comprende un primer plásmido y un segundo plásmido. El primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina , y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal . La presente invención se relaciona además con métodos para reducir una respuesta inmune dominante en un individuo. Los métodos comprenden la identificación de un subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que forma complejos con una subpoblación de células T que se asocian con la respuesta inmune dominante. En un sitio del cuerpo del individuo, se le administra al individuo una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La molécula de ácido nucleico se capta mediante una célula del individuo, en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina . Un receptor de célula T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa la célula. La célula T muere después de la formación del complejo por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina , y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo. De manera alternativa o concurrente, se le administra al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La primera y segunda moléculas de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo, en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina . Un receptor de célula T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa la célula, la célula T muere después de la formación del complejo por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina , y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo .

La presente invención se relaciona además con un método para expandir una subpoblación de células T que se asocia con una respuesta inmune especifica. El método comprende la identificación de un subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que forma complejos con una subpoblación de células T asociada con la respuesta inmune especifica. Se le administra al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo. La molécula de ácido nucleico se toma mediante una célula del individuo en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2. Un receptor de célula T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa la célula y la célula T prolifera después de la formación del complejo por medio. de interactuar con la B7.2. La subpoblación de células T que se asocia con una respuesta inmune especifica se expande. De manera alternativa o concurrente, se le administra al individuo en un sito en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores para la expresión en el individuo. Las moléculas de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2. Un receptor de célula T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa la célula, la célula T prolifera después de la formación del complejo por medio de interactuar con la B7.2, y se expande la subpoblación de células T que se asocia con una respuesta inmune especifica.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra los datos que se generaron en la determinación de la quimerización mediante citometria de flujo. Se verificó la generación de ratones quiméricos por medio de analizar la expresión de la clase I del MHC de post-transplantes de tres meses sobre células mononucleares de sangre periférica (PBMC, por sus siglas en inglés) mediante manchado por inmunofluorescencia . Las PBMC de los ratones P2m" /_ - P2m+/+ no tuvieron expresión significativa de la molécula de clase I del MHC, mientras que las PBMC de los ratones quiméricos P2m+/ - im' ' tuvieron expresión de la clase I del MHC. Las Figuras 2A y 2B muestran las respuestas de CTL directa especifica de (vM 462) (Figura 2A) e indirecta (Figura 2B) del virus Vaccinia en los ratones p2m+/+, 2m~/~ , p2m+/+ - Psm 1 , y P?m ' - Pam+/+ . Se analizaron las respuestas CTL especificas al vaccinia directas, 7 días después de la inmunización del vaccinia sin estimulación in vitro de las células efectoras. El ensayo CTL especifico del vaccinia indirecto se condujo 4 semanas después de la inmunización con vaccinia con la estimulación in vitro de las células efectoras. Para calcular la destrucción por acción de las lisinas especifica de los objetivos, se sustrajo el porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos no específicos (no infectados) del porcentaje de destrucción por acción de las Usinas de los objetivos específicos (infectados con vM 462) . Se han repetido estos experimentos con resultados similares. La Figura 3 muestra las respuestas CTL específicas a la envoltura del VIH-1 en los ratones P2m , quimeras 2t?+/* -?S??G7-, y P2m_/" - 2t? /+, que se inmunizaron con pCDNA3( pCEnv, pCEnv + pCD80, ó pCEnv + pCD86 (cuatro ratones por grupo) . Se analizaron las respuestas CTL específicas a Env del VIH-1 contra los objetivos infectados con vaccinia después de la estimulación in vitro de las células efectoras. Para calcular la destrucción por acción de las lisinas específica de los objetivos, se sustrajo el porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos no específicos (infectados con WR) del porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos específicos (infectados con vM 462) . Se han repetido estos experimentos dos veces con resultados similares. La Figura 4 muestra los datos que demuestran las respuestas CTL específicas a la envoltura del VIH-1 en ratones quiméricos ?m ' - P2m+ + que se inmunizaron con pCDNA3, pCEnv, pCEnv + pCD80, ó pCEnv + pCD86. Se analizaron las respuestas CTL especificas a env del VIH-1 contra los objetivos infectados con vaccinia sin estimulación in vitro de las células efectoras. En estos experimentos, el nivel máximo de destrucción por acción de las lisinas no específica fue menor del 5 por ciento. La Figura 5 muestra los datos que demuestran la expresión de las citocinas mediante las células efectoras estimuladas. Los sobrenadantes a partir de los efectores que se estimularon para el ensayo de CTL, se recolectaron en el día 6 y se probaron para el perfil de citocina usando equipos de ensayo inmunosorbente enlazado con enzima para IFN-Y e IL-4 (los dos equipos de Biosource International, Inc., Camarillo, CA) . Estos experimentos se han repetido dos veces con resultados similares. La Figura 6 muestra los datos que demuestran la presencia de células CD4+ y CD8+T en el músculo. Las células de infiltración en el músculo después de la coinmunización con pCEnv + pCD86 se mancharon adicionalmente con anticuerpos anti-CD4 o anti-CD8. Se contaron las células CD4+ y CD8+T a partir de los portaobjetos manchados.

DESCRIPCION DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS Como se usa en la presente, el término "construcción genética" se refiere a las moléculas de ADN que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína y la cual incluye las señales de iniciación y terminación que se enlazan de manera operable a los elementos reguladores que incluyen un promotor y la señal de poliadenilación que pueden dirigir la expresión en las células del individuo.

Como se usa en la presente, el término "forma expresable" se refiere a las construcciones de genes que contienen los elementos reguladores necesarios que se enlazan de manera operable con una secuencia de codificación que codifica una proteina, de manera que cuando está presente en la célula del individuo, se expresará la secuencia de codificación . Como se usa en la presente, los términos "respuesta inmune protectora" y "respuesta inmune profiláctica" se usan de manera intercambiable y se pretende que hagan referencia a una respuesta inmune que hace blanco en un inmunógeno al cual todavía no se ha expuesto al individuo tal como un antígeno patógeno en un individuo no infectado, o una proteína asociada con la célula de la enfermedad en un individuo quien no tienen la enfermedad, tal como una proteína que se asocia con el tumor en un paciente quien no tiene un tumor. Como se usa en la presente, se pretende que el término "respuesta inmune terapéutica" se refiere a una respuesta inmune que tiene como objetivo un inmunógeno al cual todavía no se ha expuesto al individuo, tal como un antígeno patógeno en un individuo infectado, o una proteína asociada con la célula de la enfermedad en un individuo quien tiene la enfermedad, tal como una proteína asociada con el tumor en un paciente quien tiene un tumor. Como se usa en la presente, se pretende que el término "cantidad profilácticamente efectiva" se refiere a la cantidad necesaria para, en el caso de los agentes infecciosos, evitar que un ' individuo desarrolle una infección, y en el caso de las enfermedades especificas de las células, evitar que un individuo desarrolle una enfermedd especifica de la célula. Como se usa en la presente, se pretende que el término "cantidad terapéuticamente efectiva" hace referencia a la cantidad necesaria para, en el caso de los agentes infecciosos, reducir el nivel de la infección en un individuo infectado a fin de reducir los síntomas o eliminar la infección y en el caso de las enfermedades específicas de las células, reducir el número de células de la enfermedad específica de la célula en un individuo con una enfermedad específica de la célula, con el objetivo de reducir los síntomas o curar al individuo. Como se usa en la presente, se pretende que el término "enfermedad específica de la célula" se refiere a las enfermedades autoin unes y las enfermedades que se caracterizan por células hiperproliferativas tal como el cáncer . Como se usan en la presente, los términos " inmunógeno" , "antígeno", "antígeno objetivo" y "proteína objetivo" se usan de manera intercambiable y se pretende que incluyan péptidos, polipéptidos y proteínas que codificaron las construcciones de genes de la presente invención, las cuales actúan como los objetivos contra los cuales se induce una respuesta inmune. Como se usa en la presente, se pretende que el término "que induce una respuesta inmune contra un inmunógeno" se refiera a la inducción de una respuesta inmune en un individuo sin afectación y la inducción de una respuesta inmune en un individuo que se expuso previamente a un inmunógeno, en donde se mejora la respuesta inmune contra el inmunógeno. De conformidad con lo anterior, un individuo quien está sufriendo, por ejemplo, de una infección patógena, se puede tratar mediante los métodos de la presente invención para inducir una respuesta inmune contra un antigeno patógeno. Se inducirá una respuesta inmune terapéutica en el individuo infectado, que se dirigirá contra el patógeno. Como se usa en la presente, el término "elementos reguladores necesarios para la expresión" se refiere a los elementos reguladores que necesita una secuencia de codificación de una construcción de genes para que esté en la forma expresable. Como se usa en la presente, se pretende que el término "subtipo de antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal" haga referencia al producto de la proteina ya del alelo del antigeno de Clase I de MHC o a un alelo del antigeno de Clase II de MHC.

Como se usa en la presente, el término "coincidencia", "igualar" e "igualando" cuando se está haciendo referencia al subtipo de antigeno de Histocompatibilidad Principal que coincide, hace referencia a aquellos antigenos del Complejo de Histocompatibilidad Principal del mismo grupo y subtipo. Como se usa en la presente, se pretende que el término "sin coincidencia", cuando se está haciendo referencia al subtipo de antigeno de histocompatibilidad Principal de las células, tejidos u órganos del donador, haga referencia a aquellos antigenos del Complejo de Histocompatibilidad Principal de grupo y subtipo diferente. Las células, tejidos u órganos sin coincidencia de un donador, expresan un subtipo de antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal diferente al del individuo receptor. También se hace referencia a un donador sin coincidencia como un donador alogénico. Como se usa en la presente, se pretende que el término "interacciones de célula T con la señal de muerte o toxina" haga referencia a las interacciones que una célula T tiene con la señal de muerte o toxina que expresan las células del individuo, lo cual da como resultado la muerte de la célula T. Por ejemplo, cuando el receptor fas/fas es el sistema de señal de muerte que se usa, la interacción de la señal de muerte fas (ligando fas- fas-1) con el receptor fas en la célula T, da como resultado la muerte de la célula T. Como se usa en la presente, se prende que el término "respuesta inmune dominante" haga referencia a una respuesta inmune, que incluye los componentes celulares y humorales, contra un antigeno que excede las respuestas inmunes que se dirigen en cualquier otro antigeno. Como se usa en la presente, se pretende que el término "expandiendo una subpoblación de células T" se refiera a la proliferación de un clon de célula T especifico.

Como se usa en la presente, se pretende que el término "una respuesta inmune especifica" haga referencia a una respuesta inmune celular o humoral que se dirige en contra de un epitope especifico de un antigeno después de la presentación del epitope por parte de un MHC hacia una célula T a través de la formación de un complejo entre el MHC, antigeno y el receptor de célula T (TCR) de la célula T. La célula T especifica que se incluye en la formación del complejo expresa un TCR que interactúa de manera especifica con el complejo MHC/antigeno . Los antigenos del Complejo de Histocompatibilidad Principal (MHC) actualmente son una familia de heterodimeros de proteina que son miembros de la superfamilia de la inmunoglobulina . Estos antigenos son proteínas celulares que se emplean en el sistema inmune, principalmente como presentadores del antígeno. El MHC forma un complejo con un antigeno, y el complejo MHC/antigeno se presenta a los receptores de la célula T que son específicos para el complejo MHC/antigeno en el cual el antígeno tiene un epítope especifico. De esta manera, los receptores de la célula T no solamente reconocen epítopes específicos, sino solamente aquellos epítopes específicos que se presentan en un MHC específico. La interacción entre el complejo MHC/antigeno y el receptor de la célula T, es esencial en la inducción, mantenimiento y memoria de las respuestas inmunes en contra de un antígeno. Los antígenos de MHC, que incluyen sus estructuras y funciones, se describen en Stites, D.P. y colaboradores, Basic and Clinical Immunology, sexta edición, 19867, Appleton and Lange, Norwalk, CT, y Roitt, I.M. y colaboradores, Immunology, 1985, C.V. Moseby Co. St. Louis MO, Toronto, Gower Medical Publishing, Londres RU, Nueva York, NY, los cuales se incorporan a la presente como referencia. Las proteínas del MHC se dividen generalmente en dos grupos amplios, los antígenos de Clase Uno del Complejo de Histocompatibilidad Principal (MHC I) y los antígenos de Clase Dos del Complejo de Histocompatibilidad Principal (MHC II) . Las dos clases tienen diferentes funciones de presentación del antígeno dentro del sistema inmune. Las dos, sin embargo, se codifican mediante genes altamente polimórficos, que proporcionan una variedad de alelos que permiten de este modo los varios subtipos de MHC diferentes que se pueden fijar a los diferentes epitopes de los antigenos que va a detectar el sistema inmune. Los antigenos del MHC I y los antigenos del MHC II presentan los antigenos a diferentes células T: los antigenos del MHC I presentan antigenos a células T citotóxicas mientras que los antigenos del MHC II presentan antigenos a las células T ayudantes y las células T supresoras. También se hace referencia a los antigenos del MHC como antigenos de leucocito humano (HLA> por sus siglas en inglés) . Dentro de cada una de la Clase I o Clase II, existen diferentes subgrupos que incluyen cada uno diferentes subtipos que codifican los diferentes alelos. Los antigenos del MHC I se refieren a los antigenos HLA-A, HLA-B y HLA-C de los subgrupos de HLA. Estos tres subgrupos se encuentran en virtualmente cada célula humana. La estructura de los antigenos de la Clase I consiste de un complejo de proteínas de dos cadenas que incluye una glicoproteína polimórfica con un peso molecular de 44,000. Existen cuando menos 23 alelos distintos para el lugar del HLA-A (por tanto cuando menos 23 subtipos de HLA-A) , cuando menos 47 alelos distintos para el lugar HLA-B (que codifica cuando menos 47 subtipos de HLA-B) , y cuando menos 8 alelos distintos para el lugar HLA-C (que codifica cuando menos 8 subtipos de HLA-C) . Los seres humanos individuales expresan diferentes agrupamientos de diferentes alelos. Esto es, los individuos expresan conjuntos diferentes de subtipos. De conformidad con lo anterior, los seres humanos individuales se pueden simbolizar a fin de determinar cuál combinación de los subtipos de HLA-A, HLA-B y HLA-C están presentes en sus células. La escritura' del HLA de l'os antigenos de Clase I es un método al que se hace referencia como un ensayo de microtoxicidad de linfocitos. Brevemente, los múltiples antisueros contra los antigenos de HLA-A, -B y -C se colocan en micropozos de una charola de escritura. Se agrega de mil a dos mil linfocitos de sangre periférica a cada micropozo. Después de la incubación, se agrega el complemento y se resume la incubación. Después se agrega una tinta vital, tal como la eosina. Usando microscopía de fases, las células vivas se distinguen de las células muertas basándose en el hecho de que las células destruidas por acción de las lisinas captarán la tinta mientras que las células vivas excluyen el resto sin manchar. Después se asigna el fenotipo de HLA-A, -B y -C del individuo dado sobre la base de los patrones de la reacción. Los antígenos de Clase II de MHC se refieren a los subtipos HLA-D, HAL-DR, HLA-DQ y HLA-DP de HLA. Los antígenos de Clase II se encuentran principalmente en la superficie de las células inmunocompetentes tales como células macrófagas, monocitos, linfocitos T, y linfocitos B. Los antígenos DP son distintos de los otros antígenos de Clase II en que producen respuestas proliferas secundarias fuertes y actúan como antigenos objetivo para las CTLs . Existen cuando menos 19 alelos HLA-D (que codifican cuando menos 19 subtipos de HLA-D) , cuando menos 126 alelos HLA-DR (que codifican cuando menos 16 subtipos de HLA-DR) , cuando menos 3 alelos HLA-DQ (que codifican cuando menos 3 subtipos de HLA-DQ) y cuando menos 6 alelos HLA-DP (que codifican cuando menos 6 subtipos de HLA-DP) . Se pueden simbolizar el HLA-DR y -DQ de una manera similar a la manera en la cual se simbolizaron los antigenos de Clase I de HLA, excepto que se usa una población purificada de linfocitos B en lugar de los linfocitos de sangre periférica. Los antigenos HLA-D se simbolizan usando una reacción de linfocitos mezclados. Los antigenos HLA-DP se simbolizan usando un procedimiento de escritura de linfocitos primaria . La B7.2 se describió primero en Azuma, M. Y colaboradores 1993 Nature 366:76-69, la cual se incorpora a la presente como referencia. La Figura 2B de esa publicación describe el nucleótido y la secuencia de aminoácidos predicha de la proteina B7.2. La información de la secuencia también está disponible en la base de datos del Genbank como U04343, la cual se incorpora a la presente como referencia. Los receptores del dominio de muerte incluyen, pero no se limitan, a los siguientes, para los cuales se incorporan como referencia a la presente las referencias y las secuencias del Genbank; Apo-1 (Oehm y colaboradores, J. Biol. Chem., 1992, 267(15), 10709-15; Número de Acceso X63717); Fas (Itoh y colaboradores, Cell, 1991, 6682), 233-43; Número de Acceso M67454); TNFR-1 (Nophar y colaboradores, EMBO J., 1990, 9(10), 3269-78; Numero de Acceso M67454); p55 (Loetscher y colaboradores, Cell, 1990, 61, 351-359; Número de Acceso M58286, M33480); SL-1 (Kitson y colaboradores, Nature, 1996, 384(6607), 372-5; Número de Acceso Y09392); DR3 (Chinnaiyan y colaboradores, Science, 1996, 274(5829), 990-2; Número de Acceso U72763); TRAMP (Bodmer y colaboradores, Immunity, 1997, 6(1), 79-88; Número de Acceso U75381); apo-3 (Marsters y colaboradores, Curr. Biol., 1996, 6(12), 1669-76; Número de Acceso U74611); AIR (Degli-Esposti y colaboradores, presentación directa, Número de Acceso U78029); LARD (Screaton y colaboradores. Proc. Nati. Acad. Sci., USA, 1997, 94(9), 4615-19; Número de Acceso U94512) ; NGRF (Johnson y colaboradores, Cell, 1986, 47(4), 545-554; Número de Acceso M14764); DR4 (Pan y colaboradores, Science, 1997, 276(5309), 111-113; Número de Acceso U90875) ; DR5 (Sheridan y colaboradores, Science, 1997, 277(5327), 818-821; Número de Acceso AF012535) ; KILLER (Wu y colaboradores, Nature Genetics, en prensa, ; TRAIL-R2 (MacFarlane y colaboradores, J. Biol. Chem., 1997, en prensa; Número de Acceso AF020501) ; TRICK2 (Screaton y colaboradores, Curr. Biol., 1997, en prensa; Número de Acceso AF018657); DR6 (Pan y colaboradores, sin publicar; Número de Acceso AF068868) . Las señales de muerte, es decir, las proteínas que interactúan con los receptores del dominio de muerte incluyen, pero no se limitan a los siguientes, para los cuales se incorporan como referencia a la presente las referencias y las secuencias del Genbank; FADD (Chinnaiyan y colaboradores, Cell, 1995, 81(4), 505-21; Número de Acceso U24231); FAP-1 (Sato y colaboradores, Science, 1995, 268 (5209), 411-15; Número de Acceso L34583); TRADD (Hsu y colaboradores, Cell, 1995, 81(4), 495-504; Número de Acceso L41690); RIP (Stanger y colaboradores, Cell, 1995, 81(4), 513-23; Número de Acceso U25994) ; y FLICE (Muzio y colaboradores, Cell, 1996, 85(6), 817-27; Número de Acceso U58143); RAIDD (Lennon y colaboradores, Genomics, 1996, 33(1), 151-2; Número de Acceso U79115) . Las señales de muerte también incluyen los ligandos que fijan los receptores del dominio e inician la apoptosis incluyen, pero no se limitan a los siguientes, para los cuales se incorporan a la presente como referencia las referencias y las secuencias del Genbank; FAS-L (Alderson y colaboradores, J. Exp . Med., 1995, 181(1), 71-7; Número de Acceso U08137), y TNF, y los mediadores que interactúan con los receptores del dominio de muerte incluyen, pero no se limitan a los siguientes, para los cuales se incorporan a la presente como referencia las referencias y las secuencias del Genbank; FADD (Chinnaiyan y colaboradores, Cell, 1995, 81(4), -505-12; Número de Acceso U24231); MORT1 (Boldin y colaboradores, J. Biol. Chem. , 1995, 270(14), 7795-8; Número de Acceso X84709) ; CRADD (Ahmad y colaboradores, Cáncer Res., 1997, 57(4), 615-9; Número de Acceso U84388); y MyD88 (Bonnert y colaboradores, FEBS Lett . , 1997, 402(1), 81-4; Número de Acceso U84408) . Las toxinas incluyen proteínas que eliminan las células. Las toxinas incluyen pero no se limitan a, venenos de insectos y víboras, endotoxinas bacterianas tales como la endotoxina de Pseudomoneus , proteínas desactivadoras del ribosoma de cadena doble tales como la ricina que incluye la toxina de una sola cadena, y la gelonina. Se ha descubierto que la respuesta inmune en contra del inmunogeno que codificó una vacuna, se mejora cuando, además del inmunogeno, se proporciona a la vacuna adicionalmente con una forma expresable de secuencias de nucleótidos que codifican un antígeno de MHC . El antígeno de HC que se expresa de esta manera presentará el inmunogeno a las células T y dará como resultado una respuesta inmune mejorada. La presente invención proporciona los métodos para inducir o mejorar de cualquier otra manera una respuesta inmune en contra de un inmunogeno en un individuo. En algunas modalidades, los métodos comprenden el paso de administrar a un individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende tanto la secuencia de nucleótidos que codifica un inmunogeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo, como una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La molécula de ácido nucleico se toma mediante las células del individuo en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunogeno y el MHC, respectivamente. El MHC que se produce presenta epitopes del in unógeno a las células T del sistema inmune del individuo y se induce una respuesta inmune mejorada en contra del inmunógeno en el individuo. En algunas modalidades, los métodos comprenden el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, cuando menos dos moléculas de ácido nucleico diferentes. Una primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. Una segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La primera y segunda moléculas de ácido nucleico se toman mediante las células del individuo en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunógeno y el antigeno de MHC, respectivamente. El MHC que se produce presenta los epitopes del inmunógeno a las células T del sistema inmune del individuo y se induce una respuesta inmune mejorada en contra del inmunógeno en el individuo. En algunas modalidades, se incluyen las secuencias de nucleótidos que codifican los antigenos de MHC I en la molécula de ácido nucleico que se administra al individuo. En algunas modalidades, el antigeno del MHC II coincide con el alelo del antigeno de MHC II que expresa el individuo. Como se describió anteriormente, la escritura de un individuo para el fenotipo de MHC se puede realizar de manera rutinaria. Una vez que se averigua la identidad de los alelos de MHC II que expresa el individuo, se pueden preparar las construcciones de genes que incluyen las secuencias de nucleótidos que codifican un subtipo que expresa el individuo o se pueden seleccionar a partir de construcciones de genes preparadas para, asegurarse de que se le administre al individuo un MHC II igualado. • Un aspecto de la invención se relaciona con las composiciones y los métodos que usan material genético que codifica la proteina de MHC I y un inmunógeno. Otro aspecto de la invención se relaciona con las composiciones y los métodos que usan material genético que codifica la proteina de MHC II y un inmunógeno. Los métodos se relacionan con métodos mejorados para inducir respuestas inmunes profilácticas o terapéuticas en contra de objetivos inmunogénicos . De conformidad con lo anterior, algunas modalidades de la presente invención proporcionan vacunas mejoradas por medio de proporcionar una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC I y/o un antigeno de MHC II que se enlaza de manera operable a las secuencias reguladoras necesarias para la expresión y una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con las secuencias reguladoras necesarias para la expresión en las vacunas. Las composiciones pueden ser vacunas tales como vacunas de ADN, vacunas de vectores recombinantes no virulentos, y vacunas vivas, atenuadas. Se ha descubierto adicionalmente que se mejora la respuesta inmune en contra del inmunógeno que codifica una vacuna cuando, además del inmunógeno, se proporciona la vacuna adicionalmente con formas expresables de secuencias de nucleótidos que codifican tanto la proteina B7.2 como el antigeno de MHC. La proteina B7.2 y el antigeno de MHC se producen conjuntamente mediante lo mismo en las células de un individuo vacunado que están expresando los antigenos objetivo. De conformidad con este aspecto de la invención, se proporcionan las composiciones y los métodos que usan material genético que codifica un inmunógeno, proteina B7.2, antigeno de MHC y/o antigeno de MHC II. Los métodos se relacionan con métodos mejorados para inducir respuestas inmunes profilácticas o terapéuticas en contra de los objetivos inmunogénicos . De conformidad con lo anterior, algunas modalidades de la presente invención proporcionan vacunas mejoradas por medio de proveer una secuencia de nucleótidos que codifica la B .2 que se enlaza de manera operable a las secuencias reguladoras necesarias para la expresión en las vacunas, una secuencia de nucleótidos que codifica el antigeno de MHC y/o el antigeno de MHC II que se enlaza de manera operable con las secuencias reguladoras necesarias para la expresión, y una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con las secuencias reguladoras necesarias para la expresión en las vacunas. Las composiciones pueden ser vacunas tales como vacunas de ADN, vacunas de vectores recombinantes no virulentos, y vacunas vivas, atenuadas. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno, una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC I y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. Cada una de estas secuencias de nucleótidos se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo.

De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B .2. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC I que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC I y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico, una segunda molécula de ácido nucleico y una tercera molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC I que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno, una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC II y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. Cada una de las secuencias de nucleótidos se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo . De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC II que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC II y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC II. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo. De conformidad con algunas modalidades de la invención, el material genético que se administra al individuo comprende una primera molécula de ácido nucleico, una segunda molécula de ácido nucleico y una tercera molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de HC II que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. El material genético se expresa mediante las células del individuo y sirve como un objetivo inmunogénico en contra del cual se produce una respuesta inmune. La respuesta inmune que resulta está basada ampliamente: además de la respuesta inmune humoral, se producen los dos brazos de la respuesta inmune celular. Los métodos de la presente invención son útiles para conferir inmunidad profiláctica y terapéutica. De esta manera, un método para inmunizar incluye los dos métodos de inmunización en contra de inmunógenos y de esta manera por ejemplo, para proteger a un individuo contra la agresión de patógenos, o la ocurrencia o la proliferación de células específicas, así como métodos para tratar a un individuo que está sufriendo de una infección por patógenos, enfermedad hiperproliferativaprolífica o enfermedad autoinmune. La proteína objetivo es de preferencia una proteína inmunogénica que comparte cuando menos un epítope con una proteína a partir del patógeno o tipo de célula indeseable tal como una célula de cáncer o una célula involucrada en la enfermedad autoinmune en contra de la cual se requiere inmunización. La respuesta inmune que se dirige en contra de la proteína objetivo protegerá al individuo contra y/o tratará al individuo para la infección o enfermedad específica con la cual se asocia la proteína objetivo. La presente invención es útil para producir respuestas inmunes amplias en contra de una proteína objetivo, es decir, proteínas que se asocian de manera específica con los patógenos, alérgenos o las propias células "anormales" del individuo. La presente invención es útil para inmunizar a los individuos en contra de agentes y organismos Patogénicos de manera que una respuesta inmune en contra de una protema patógena proporcione inmunidad protectora en contra del patógeno. La presente invención es útil para combatir enfermedades y desórdenes hiperproliferativosprolificos tales como el cáncer, por medio de producir una respuesta inmune en contra de una proteina objetivo que se asocie de manera especifica con las células hiperproliferativas . La presente invención es útil para combatir enfermedades y desórdenes autoinmunes por medio de producir una respuesta inmune en contra de una proteina objetivo que se asocie de manera especifica con las células involucradas en la condición autoinmune. Las moléculas de ácido nucleico que se administran a las células de conformidad con la invención, pueden servir como plantillas genéticas para los inmunógenos que funcionan como agentes de inmunización profilácticos y/o terapéuticos. Se puede usar la presente invención para inmunizar a un individuo en contra de todos los patógenos tales como virus, procariotes, y organismos eucarióticos patogénicos tales como organismos patogénicos unicelulares y parásitos multicelulares. La presente invención es particularmente útil para inmunizar a un individuo en contra de aquellos patógenos que infectan las células y los cuales no son encapsulados tales como los virus, y el procariote tal como la gonorrea, listeria y la shigela. Además, la presente invención también es útil para inmunizar a un individuo en contra de patógenos protozoarios, los cuales incluyen una etapa en el ciclo de vida en donde son patógenos intracelulares . Como se usa en la presente, se pretende que el término "patógeno intracelular" se refiera a un virus u organismo patogénico que, durante cuando menos parte de su ciclo reproductivo o de vida, existe dentro de una célula anfitriona y produce dentro de la misma o hace que se produzcan, proteínas patógenas. La Tabla 2 proporciona un listado de algunas de las familias y géneros virales para los cuales se pueden fabricar vacunas de conformidad con la presente invención. Las construcciones de ADN que comprenden secuencias de ADN que codifican los péptidos que comprenden cuando menos un epítope idéntico o sustancialmente similar a un epítope que se despliega sobre un antígeno patógeno tal como aquellos antígenos que se alistan en las tablas, son útiles en las vacunas. Adicionalmente, la presente invención también es útil para inmunizar a un individuo en contra de otros patógenos que incluyen patógenos protozoarios procarioticos y eucarióticos, así como parásitos multicelulares tales como aquellos que se alistan en la Tabla 3. A fin de producir una vacuna genética para proteger en contra de una infección patógena, se deberá incluir el material genético que codifica las proteínas inmunogénicas en contra de las cuales se puede montar una respuesta inmune protectora en una construcción genética como la secuencia de codificación para el objetivo. Ya sea que el patógeno infecta de manera intracelular, para lo cual la presente invención es particularmente útil, o de manera extracelular , no es probable que todos los antigenos patógenos produzcan una respuesta protectora. Debido a que tanto el ADN como el ARN son relativamente pequeños y se pueden producir de manera relativamente sencilla, la presente invención proporciona la ventaja adicional de permitir la vacunación con múltiples antigenos patógenos. La construcción genética que se usa en la vacuna genética puede incluir el material genético que codifica muchos antigenos patógenos. Por ejemplo, se pueden incluir muchos genes virales en una sola construcción, proporcionando mediante lo mismo múltiples objetivos. Las Tablas 2 y 3 incluyen listas de algunos de los agentes y organismos patogénicos para los cuales se pueden preparar las vacunas genéticas para proteger a un individuo de la infección mediante los mismos. En algunas modalidades preferidas, los métodos para inmunizar a un individuo en contra de un patógeno se dirigen en contra del VIH, HTVL, o HBV. Otro aspecto de la presente invención proporciona un método para conferir una respuesta inmune protectora basada ampliamente en contra de células hiperproliferativas que son características en las enfermedades hiperproliferativas y a un método para tratar individuos que sufren de enfermedades hiperproliferativas . Como se usa en la presente, el término "enfermedades hiperproliferativas" hace referencia a aquellas enfermedades y desórdenes que se caracterizan por la hiperproliferación de células. Los ejemplos de enfermedades hiperproliferativas incluyen todas las formas de cáncer y la psoriasis . La introducción de una construcción genética que incluye una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína asociada a la "célula hiperproliferativa" inmunogénica dentro de la célula de un individuos, da como resultado la producción de esas proteínas en la célula del individuo vacunado. Como se usa en la presente, se pretende que el término "proteína asociada hiperproliferativa" haga referencia a las proteínas que se asocian con una enfermedad hiperproliferativa . Para inmunizar en contra de las enfermedades hiperproliferativas, se administra al individuo una construcción genética que incluya una secuencia de nucleótidos que codifica una proteína que se asocia con una enfermedad hiperproliferativa . Con el objetivo de que la proteína asociada hiperproliferativa sea un objetivo ihmunogénico efectivo, deberá ser una proteína que se produzca de manera exclusiva o a niveles elevados en las células hiperproliferativas , en comparación con las células normales. Los antígenos objetivo incluyen estas proteínas, fragmentos de las mismas y péptidos que comprenden cuando menos un epitope que se encuentra en esas proteínas. En algunos casos, una proteína asociada hiperproliferativa es el producto de una mutación de un gen que codifica una proteína. El gen mutado codifica una proteína que es casi idéntica a la proteína normal, excepte porque tiene una secuencia de aminoácidos ligeramente diferente, lo cual da como resultado un epitope diferente que no se encuentra en la proteína normal. Estas proteínas objetivo incluyen aquellas que son proteínas que se codifican mediante oncogenes tales como myb, myc, fyn, y los genes de translocación bcr/abl, ras, src, P53, neu, trk y EGFR. Además de los productos de los oncogenes como antígenos objetivo, las proteínas objetivo para los tratamiento en contra del cáncer y los regímenes protectores, incluyen regiones variables de anticuerpos que fabrican los linfomas de las células B y regiones variables de los receptores de célula T de los linfomas de célula T los cuales, en algunas modalidades, también se usan como antígenos objetivo para la enfermedad autoinmune. Se pueden usar otras proteínas asociadas con tumores como proteínas objetivo, tales como las proteínas que se encuentran a niveles más elevados en las células de tumores que incluyen la proteína que reconoce el anticuerpo monoclonal 17-1A y las proteínas de fijación de folato . Aunque la presente invención se puede usar para inmunizar a un individuo en contra de una o más formas de cáncer, la presente invención es particularmente útil para inmunizar de manera profiláctica a un individuo que está predispuesto a desarrollar un cáncer en particular o quien ha tenido cáncer y por lo tanto es susceptible a una recaída. Los desarrollos en genética y tecnología, así como en epidemiología, permiten la determinación de la probabilidad y evaluaciones de riesgo para el desarrollo de cáncer en el individuo. El uso del rastreo genético y/o las historias de salud de la familia, hacen posible predecir la probabilidad que tiene un individuo particular para desarrollar cualesquiera de muchos tipos de cáncer. De manera similar, aquellos individuos que ya han desarrollado el cáncer y a quienes se ha tratado para remover el cáncer o que están en remisión de alguna otra manera, son particularmente susceptibles a un recaída o recurrencia. Como parte de un régimen de tratamiento, se puede inmunizar a estos individuos contra el cáncer que se les ha diagnosticado, a fin de combatir una recurrencia. De este modo, una vez que se sabe que un individuo ha tenido un tipo de cáncer y que está en un riesgo de recaída, se le puede inmunizar a fin de preparar su sistema inmune para combatir cualquier otra aparición del cáncer. La presente invención proporciona un método para tratar a individuos que sufren de enfermedades hiperproliferativas . En estos métodos, la introducción de construcciones genéticas sirve como una inmunoterapia, que dirige y promueve al sistema inmune del individuo para combatir las células hiperproliferativas que producen la proteina objetivo. La presente invención proporciona un método para tratar a un individuo que sufre de enfermedades y desórdenes autoinmunes por medio de conferir una respuesta inmune protectora ampliamente basada contra los objetivos que se asocian con la autoinmunidad, incluyendo los receptores de células y las células que producen anticuerpos "auto" dirigidos . Las enfermedades autoinmunes mediadas por células T incluyen la artritis reumatoide (RA) , esclerosis múltiple (MS), síndrome de Sjogren, sarcoidosis, diabetes •mellitus dependiente de insulina (IDD ), tiroiditis autoinmune, artritis reactiva, espondilitis anquilosante, escleroderma, polimiositis, dermatomiositis, psoriasis, vasculitis, granulomatosis de Wegener, enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa. Cada una de estas enfermedades se caracterizan por los receptores de células T que se fijan a los antígenos endógenos e inician la región variable de las células T, producirían una respuesta inmune que incluyen CTLs para eliminar aquellas células T. En la RA, se han caracterizado varias regiones variables especificas de los receptores de células T (TCRs), que están involucradas en la enfermedad. Estos TCRs incluyen ?ß-3", vP-14, ?ß-17 y Va-17. De esta manera, la vacunación con una construcción de ADN que codifica cuando menos una de estas proteínas producirá una respuesta inmune que tendrá como objetivo las células T involucradas en la RA. Vea: Ho ell, M.D. y colaboradores, 1991 Proc. Nati. Acad. Sci. USA 88:10921-10925; Paliard, X., y colaboradores, 1991 Science 253:325-329; Williams, W.V. y colaboradores, 1992 J. Clin. Invest. 90:326-333; cada una de las cuales se incorpora a la presente como referencia. En la S, se han caracterizado varias regiones variables específicas de TCRs que están involucradas en la enfermedad. Estos TCRs incluyen ?ß-7 y V -10. De este modo, la vacunación con una construcción de ADN que codifica cuando menos una d3 estas proteínas producirá una respuesta inmune que tendrá como objetivo las células T que se incluyen en la MS. Vea: Wucherpfenning, K.W. y colaboradores, 1990 Science 248:1016-1019; Oksenberg, J.R. y colaboradores, 1990 Nature 345:344-346; cada una de las cuales se incorpora a la presente como referencia. En la escleroderma, se han caracterizado varias regiones variables específicas de TCRs que están involucradas en la enfermedad. Estos TCRs incluyen vP-6, vP-8, vP-14, y V«-16, V«-3C, V«-7, Va-14, V«-15, Va-16, Va-28 y Va-12. De esta manera. La vacunación con una construcción de ADN que codifica cuando menos una de estas proteínas producirá una respuesta inmune que tendrá como objetivo las células T involucradas en la escleroderma . A fin de tratar a los pacientes que sufren de una enfermedad autoinmune mediada por células T, particularmente aquellas para las cuales todavía no se ha caracterizado la región variable del TCR, se puede realizar una biopsia sinovial. Se pueden tomar muestras de las células T presentes y la región variable de aquellos TCRs que se identificaron usando las técnicas estándares. Las vacunas genéticas se pueden preparar usando esta información. Las enfermedades autoinmunes mediadas por células B incluyen Lupus (SLE) , enfermedad de Grave, miastenia grave, anemia hemolítica autoinmune, trombocitopenia autoinmune, asma, crioglobulinemia, esclerosis biliar primaria y anemia perniciosa. Cada una de estas enfermedades se caracteriza por los anticuerpos que se fijan a los antígenos endógenos e inician la cascada inflamatoria que se asocia con las enfermedades autoinmunes. La vacunación en contra de la región variable de los anticuerpos producirá una respuesta inmune que incluye las CTLs para eliminar aquellas células B que producen el anticuerpo. Con el objetivo de tratar a los pacientes que sufren de una enfermedad autoinmune mediada por células B, se debe identificar la región variable de los anticuerpos que están involucrados en la actividad autoinmune. Se puede realizar una biopsia y se pueden tomar muestras de los anticuerpos presentes en un sitio de inflamación. Se puede identificar la región variable de estos anticuerpos usando las técnicas estándares. Las vacunas genéticas se pueden preparar usando esta información. En el caso del LSE, se cree que un antigeno es ADN. Por tanto, en los pacientes que se van a inmunizar contra el LSE, se pueden rastrear sus sueros por anticuerpos anti-ADN y se puede preparar una vacuna que incluya construcciones de ADN que codifiquen la región variable de estos anticuerpos anti-ADN que se encuentran en los sueros. Las características estructurales comunes entre las regiones variables tanto de los TCRs como de los anticuerpos, son bien conocidos. La secuencia de ADN que codifica un TCR o anticuerpo particular se puede encontrar generalmente siguiendo métodos bien conocidos tales como aquellos que se describen en Kabat y colaboradores, 1987 Sequence of Proteins of Immunological Interest, Departamento de Salud y Servicios Humanos de los Estados Unidos de Norteamérica, Bethesda MD, la cual se incorpora a la presente como referencia. Además, se puede encontrar un método general para clonar las regiones variables funcionales a partir de los anticuerpos en Chaudhary, V.K. y colaboradores, 1990 Proc. Nati. Acad. Sci.

USA 87:1066, la cual se incorpora a la presente como referencia . La presente invención es particularmente útil para mejorar las respuestas inmunes en individuos que estén inmunosuprimidos o inmunocomprometidos . Estos pacientes son particularmente vulnerables a la infección y son menos capaces de montar respuestas inmunes efectivas. La presente invención es también particularmente útil para tratar pacientes que tienen cáncer. En algunos de estos pacientes, las células cancerosas no presentan de manera efectiva los antigenos asociados al cáncer y por tanto el individuo monta una respuesta inmune efectiva menos que óptima. En algunas modalidades preferidas, se proporciona un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC I y/o antigeno de MHC II que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores. En algunas modalidades preferidas, se proporciona una composición que comprende un primer plásmido y un segundo plásmido. ?1 primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una antigeno de MHC I y/o antigeno de MHC II. En algunas modalidades preferidas, el inmunógeno es el antigeno patógeno, una proteína que se asocia con una enfermedad hiperproliferativa o una proteina que se asocia con la enfermedad autoinmune . En algunas modalidades, los plásmidos pueden comprender además de manera opcional una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores. Las modalidades preferidas incluyen composiciones farmacéuticas que incluyen composiciones que se pueden inyectar, que comprenden plásmidos que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno de MHC I y/o antígeno de MHC II que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores. En algunas modalidades, el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores. El segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno de MHC I y/o antígeno de MHC II que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores. En algunas modalidades, el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y el segundo plásmido comprende una tejidos y órganos de donador igualadas con el subtipo que no son de MHC I, se pueden eliminar o reducir por medio de administrar composiciones que comprenden formas expresables de secuencias de nucleótidos que codifican la proteina de MHC I del subtipo del donador y una señal de muerte o toxina. Los métodos se relacionan con métodos mejorados para eliminar las células inmunes que están involucradas en el rechazo de células, tejidos y órganos singenéicos tales como aquellos que se implantan en pacientes de transplantes. De conformidad con la invención, la expresión en una célula tanto de un antigeno de MHC I que corresponde a un antigeno de MHC I de un donador el cual es alogénico con respecto al receptor, como de una señal de muerte o toxina, dará como resultado la reducción en las respuestas inmunes en contra de las células, tejidos y órganos que despliega el antigeno de MHC I del donador alogénico. Se ha descubierto que la coproducción de una toxina o señal de muerte y el antigeno de MHC I del subtipo que coincide con el subtipo de MHC I de las células, tejidos y órganos singenéicos en las células de un paciente de transplante da como resultado la eliminación de las células T que ponen como objetivo las células, tejidos y órganos singenéicos y eliminan mediante lo mismo la respuesta inmune en contra de las células, tejidos y órganos singenéicos. Las células T que están involucradas en las respuestas inmunes en contra del antigeno de MHC I alogénico se eliminan mediante la interacción con la señal de muerte o toxina. Esencialmente, el antigeno de MHC I alogénico se vuelve invisible mediante la eliminación de las células que están involucradas en las respuestas inmunes que se dirigen en contra del antigeno de MHC I alogénico. El rechazo al transplante se reduce mediante lo mismo mediante la reducción en el número de las células T que están involucradas en la respuesta inmune en contra de las células, tejidos u órganos que se transplantan . De conformidad con la invención, se determinan el individuo que es el receptor y el donador. Una comparación de los patrones de expresión de los alelos de MHC I indica cuáles antigenos de MHC I del donador serán os objetivos para las respuestas inmunes que dan como resultado el rechazo del material del donador. La eliminación de las células T que responden a los antigenos de MHC I del donador alogénico, reduce el rechazo. En las modalidades preferidas, la eliminación de las células T precede al protocolo del transplante para minimizar el rechazo. Se pueden preparar múltiples construcciones de genes para poner como objetivo múltiples antigenos de MHC I del donador alogénico. En el caso del transplante de células que incluyan células que expresan MHC II, tales como transplantes de médula ósea, se pueden identificar los antigenos de MHC II del donador alogénico por medio de simbolizar el donador y el recipiente. Las construcciones de genes que codifican los antigenos de MHC II del donador alogénico se pueden administrar en conjunción con las señales de muerte o toxinas, para eliminar las células T que responden a los antigenos de MHC II del donador alogénico. La presente invención proporciona para esto métodos para reducir el rechazo de células de donadores sin coincidencia, tejidos de donadores sin coincidencia o el órgano de un donador sin coincidencia en un individuo que se somete al transplante de células, tejidos u órganos. En algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo de ese individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifica un MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. El MHC se iguala con las células del donador, tejidos del donador u órganos del donador, y alogénicos para el receptor. La molécula de ácido nucleico se toma mediante una célula del individuo en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno del MHC y la señal de muerte o toxina. Una célula T forma un complejo con la célula que está expresando el antigeno del MHC alogénico. Esa célula también está expresando la señal de muerte o toxina. La célula T muere después de la formación del complejo, reduciéndose las células que expresa el antigeno de MHC alogénico y la señal de muerte o toxina y el rechazo de las células del donador sin coincidencia, el tejido del donador sin coincidencia o un órgano del donador sin coincidencia en un individuo que se está sometiendo a un transplante de células, tejidos u órganos. En algunas modalidades, se administran una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico al individuo en un sitio en el cuerpo de ese individuo. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica el antigeno de MHC alogénico que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo . En algunas modalidades, también se administra una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo, al individuo con la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina y la secuencia de nucleótidos que codifica el antigeno de MHC alogénico. En algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio del cuerpo de ese individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, una secuencia de nucleótidos que codifica el antigeno del MHC alogénico y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. Cada secuencia de nucleótidos se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. En algunas modalidades el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio del cuerpo de ese individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2, las cuales se enlazan de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del MHC alogénico que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo. En algunas modalidades el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio del cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del MHC alogénico y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2, las cuales se enlazan de manera operable los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo. En algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC alogénico, las cuales se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en ese individuo. En algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico, una segunda molécula de ácido nucleico y una tercera molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requiere para la expresión en ese individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requiere para la expresión en ese individuo. La tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requiere para la expresión en ese individuo. La presente invención proporciona plásmidos que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. El antigeno de MHC puede ser un antigeno de MHC I y/o un antigeno de MHC II. En algunas modalidades, el plásmido comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B .2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. La presente invención proporciona la composición farmacéutica, que incluye composiciones que se pueden inyectar que comprenden un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. La presente invención proporciona plásmidos que comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores y un secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina. En algunas modalidades, se proporcionan composiciones que comprenden un primer plásmido y un segundo plásmido. El primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno de MHC. El antígeno de MHC puede ser un antígeno de MHC I y/o un antígeno de MHC II. En algunas modalidades, el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. El segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. En algunas modalidades, el plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores . En algunas modalidades, el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. En algunas modalidades, se proporcionan composiciones que comprenden un primer plásmido, un segundo plásmido y un tercer plásmido. El primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina. El segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC. El antigeno de MHC puede ser un antigeno de MHC I y/o un antigeno de MHC II. El tercer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores.

Otro aspecto de la presente invención se relaciona con las composiciones para, y los métodos para reducir una respuesta inmune dominante en un individuo. Una respuesta inmune dominante se caracteriza por una proporción mayor de anticuerpos y/o CTLs que se dirigen hacia un antigeno especifico. En una respuesta inmune dominante, los complejos de MHC/Ag/TCR que se forman usando el "antigeno objetivo dominante" median la respuesta inmune dominante. De esta manera, la eliminación de las células T especificas para el complejo de MHC/antigeno dominante, reducirá la respuesta inmune que se dirige al antigeno dominante y mediante los mismo se incrementarán las respuestas inmunes en contra de los antigenos no dominantes. De conformidad con algunas modalidades de la invención, se identifica el subtipo del MHC el cual forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo MHC/antigeno dominante/TCR. Después se le administra al individuo en un sitio de su cuerpo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, y una secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del MHC el cual forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo MHC/antigeno dominante/TCR. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La molécula de ácido nucleico se toma mediante una célula del individuo, en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el MHC y la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina. Una célula T de la subpoblación de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antigeno dominante, forma un complejo con la célula, La célula T muere después de la formación del complejo con la célula que expresa la señal de muerte o toxina. Se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo sometido. De conformidad con otras modalidades de la invención, se identifica el subtipo del MHC que forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo MHC/antigeno dominante/TCR y se le administra al individuo en un sitio en su cuerpo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un MHC que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. El MHC que se codificó mediante la secuencia de nucleótidos de la segunda molécula de ácido nucleico coincide con el subtipo de MHC que se identificó como el subtipo que forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo MHC/antígeno dominante/TCR . La primera y segunda moléculas de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican la señal de muerte o toxina y el MHC, y una célula T de la subpoblacion de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antígeno dominante, forma un complejo con la célula. La célula T muere después de la formación del complejo con la célula que expresa la señal de muerte o toxina. Se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo sometido. En algunas modalidades, el MHC es un antígeno de MHC I. En algunas modalidades, el MHC es un antígeno de MHC II. En algunas modalidades, se coadministra al individuo una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B .2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. •En algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2. Cada una de estas tres secuencias de nucleótidos se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. El MHC que se codificó mediante la secuencia de nucleótidos coincide con el subtipo de MHC que se identificó como el subtipo que forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo MHC/ antigeno dominante/TCR. La molécula de ácido nucleico se toma mediante una célula del individuo en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina y el MHC y la B .2. Una célula T de la subpoblación de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antigeno dominante, forma un complejo con la célula. La célula T muere después de la formación del complejo con la célula que expresa la señal de muerte o toxina. Se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo sometido. De conformidad con algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. En algunas modalidades, la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina y una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2, estando ligada cada secuencia de nucleótidos de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. En algunas modalidades, la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC y una secuencia de nucleótidos que codifica a proteina B7.2, estando ligada cada secuencia de nucleótidos de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. En algunas modalidades, la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC, estando ligada cada secuencia de nucleótidos de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. En cada una de estas modalidades, el MHC que se codificó mediante la secuencia de nucleótidos puede ser un MHC I o un MHC II. El MHC coincide con el subtipo del MHC que se identificó como el subtipo que forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo MHC/antigeno dominante/TCR. La primera y la segunda molécula de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican la señal de muerte o toxina, el MHC y la B7.2. Una célula T de la subpoblación de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antigeno dominante, forma un complejo con la célula. La célula T muere después de la formación del complejo con la célula que expresa la señal de muerte o toxina. Se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo sometido. De conformidad con algunas modalidades, el método comprende el paso de administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico, una segunda molécula de ácido nucleico, y una tercera molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. La tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno de MHC. Cada una se las secuencias de nucleótidos se enlaza de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. EL MHC que se codificó mediante la secuencia de nucleótidos, puede ser un MHC I o un MHC II. El MHC coincide con el subtipo de MHC que se identificó como el subtipo que forma complejos con el antigeno dominante para formar el complejo HC/antigeno dominante/TCR. La primera, segunda y tercera moléculas de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo en donde se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican la señal de muerte o toxina, el MHC y la B7.2. Una célula T de la subpoblación de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antigeno dominante, forma un complejo con la célula. La célula T muere después de la formación del complejo con la célula que expresa la señal de muerte o toxina. Mediante lo mismo se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo sometido. De acuerdo con algunas modalidades, la invención se relaciona con composiciones para, y métodos para expandir la subpoblación deseada de células T. La subpoblación deseada de células T de preferencia forma complejos con un complejo MHC/ antigeno, el cual comprende un antigeno en contra del cual se desea una respuesta inmune mejorada. Se identifica el subtipo de MHC que forma el complejo MHC/Ag/TCR que incluye el TCR que expresan las células T que se van a expandir. Se le administra al individuo en un sitio en su cuerpo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de MHC que forma el complejo MHC/Ag/TCR que incluye el TCR que expresaron las células T que se van a expandir, y una secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2. Las dos secuencias de nucleótidos se enlazan de manera operable con los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La molécula de ácido nucleico se toma mediante una célula en el individuo en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el MHC y la secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2. Una célula T de la subpoblación de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antigeno dominante, forma un complejo con la célula. La célula T prolifera en respuesta a la B7.2 después de la formación del complejo con la célula que expresa la B7.2. De conformidad con otras modalidades de la invención, se le administra al individuo en un sitio de su cuerpo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico. La primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo de MHC que forma el complejo MHC/Ag/TCR que incluye el TCR que expresaron las células T que se van a expandir. La segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2. Las dos secuencia de nucleótidos se enlazan de manera operable a los elementos reguladores que se requieren para la expresión en el individuo. La primera y la segunda moléculas de ácido nucleico se toman mediante una célula del individuo en donde se expresan la secuencia de nucleótidos que codifica el MHC y la secuencia de nucleótidos que codifica la B .2. Una célula T de la subpoblacion de células T que forma un complejo con el complejo MHC/antigeno dominante, forma un complejo con la célula. La célula T prolifera en respuesta a la B7.2 después de la formación del complejo con la célula que expresa la B7.2. En algunas modalidades, el MHC es un antigeno de MHC I. En algunas modalidades, el MHC es un antigeno de MHC II. Se han reportado las composiciones y los métodos para administrar proteínas a las células mediante la administración directa de ADN, que se incluyen para el uso como vacunas y terapéuticos, usando una variedad de protocolos. En la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,593,972, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,739,118, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,580,859, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,589,466, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,703,055, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,622,712, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,459,127, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,676,954, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,614,503 y la Solicitud PCT PCT/US95/12502, las cuales se incorporan a la presente como referencia, se describen los ejemplos de estos métodos. También se describen las composiciones y los métodos para administrar proteínas a las células mediante la administración directa de ADN en PCT/US90/01515, PCT/US93/02338, PCT/US93/048131, y PCT/US94/00899, las cuales se incorporan a la presente como referencia. Además de los protocolos de administración que se describen en esas solicitudes, en las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Números 4,945,050 y 5,036,006, las cuales se incorporan a la presente como referencia, se describen métodos alternativos para administrar el ADN. En la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,756,283 y la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,707,618, las cuales se incorporan a la presente como referencia, se describen los ejemplos de vectores adenovirales recombinantes útiles para administrar las secuencias de ácido nucleico. También se pueden administrar las moléculas de ácido nucleico usando la transferencia de ADN mediada con liposoma, tal como aquella que se describe en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 4,235,871, la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 4,241,046 y la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 4,394,448, las cuales se incorporan a la presente como referencia. De conformidad con algunos métodos de la invención, las moléculas de ácido nucleico se pueden administrar a un individuo en un sitio en el cuerpo de ese individuo, mediante una ruta de administración que se selecciona a partir del grupo que consiste de: manera intramuscular, intranasal, intraperitoneal, subcutánea, intradérmica, o tópica o mediante lavado al tejido mucoso que se selecciona a partir del grupo que consiste de vaginal, rectal, uretral, bucal y sublingual. Algunas rutas preferidas de administración incluyen la intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intramuscular y oral. De conformidad con algunos métodos de la invención, el ADN es un plásmido de AD . De conformidad con algunas modalidades de la invención, el promotor se selecciona a partir del grupo que consiste de Virus de Simio 40 (SV40) , promotor de Virus de Tumor Mamario de Ratón (MMTV) , Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) tal como el promotor de Repetición de Terminal Larga (LTR) del VIH, virus de Moloney, ALV, Citomegalovirus (CMV) , tal como el promotor temprano inmediato de CMV, Virus de Epstein Barr (EBV) , Virus del Sarcoma de Rous (RSV) , asi como los promotores a partir de genes humanos tales como Actina humana, Miosina humana, Hemoglobina humana, creatina de músculo humano y metalotioneina humana. De conformidad con algunas modalidades de la invención, la señal de poliadenilación se selecciona a partir del grupo que consiste de una señal de poliadenilación SV40 y señal de poliadenilación de hormona de crecimiento bovina.

De conformidad con algunos métodos de la invención, la molécula de ADN se administra con una composición que facilita la captación de moléculas de ADN por parte de una célula. En algunas modalidades, la molécula de ácido nucleico se envía a las células en conjunción con la administración de un coagente. Los ejemplos de coagentes se describen en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,593,972, la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,739,118, y el Número de Serie de Solicitud Internacional PCT/US94/00899, presentada el 26 de enero de 1994, las cuales están incorporadas a la presente como referencia, los coagentes que se administran en conjunción con las moléculas de ácido nucleico se pueden administrar como una mezcla con la molécula de ácido nucleico, o se pueden administrar por separado simultáneamente, antes o después de la administración de las moléculas de ácido nucleico. En algunas modalidades, los coagentes pueden ser lípidos catiónicos, incluyendo pero ni limitados a, aquellos descritos en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número 5,703,055. Los ejemplos de otros coagentes incluyen factores de crecimiento, citocinas, y linfocinas tales como a interferón, gama - interferón, factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) , TNF, factor de crecimiento epidérmico (EGF) , IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10 e IL-12, así como el factor de crecimiento de fibroblastos, agentes activos superficiales tales como complejos inmuno -estimulantes (ISCOMS) , adyuvante de Freund incompleto, análogo de LPS incluyendo Lipido A de monofosforilo ( PL) , toxina de cólera, toxina de cobra, saponinas, péptidos de muramilo, análogos de quinona, y vesículas tales como escualeno y escualeno, y ácido hialurónico. En algunas modalidades, se puede usar una proteína inmunomoduladora como un coagente. Las composiciones preferidas que facilitan la captación de la molécula de ADN por parte de una célula, se seleccionan a partir del grupo que consiste de: lípidos catiónicos, liposomas y anestésicos locales. En algunas modalidades preferidas, la molécula de ADN se administra con bupivacaína. En algunas modalidades se usan múltiples coagentes. Los coagentes que se administran en conjunción con las moléculas de ácido nucleico se pueden administrar como una mezcla con la molécula de ácido nucleico, o se, pueden administrar por separado simultáneamente, antes o después de la administración de las moléculas de ácido nucleico. En adición al uso de formas expresablés de secuencias de codificación MHC, y secuencias de codificación para inmunógenos y/o señales de codificación para señales de muerte o toxinas y/o la secuencia de codificación B7.2 en los protocolos de transferencia basados en plásmidos, la presente invención proporciona otras metodologías de transferencia de genes, tales como aquellas que se usan en vacunas vivas atenuadas y vacunas que usan vectores recombinantes para enviar genes extranjeros que codifican antigenos. En las Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Números 4,722,848; 5,017,487; 5,077,044; 5,110,587, 5,112,749; 5,174,993; 5,223,424; 5,225,336; 5,240,703; 5,242,829; 5,294,441; 5,294,548; 5,310,668; 5,387,744; 5,389,368; 5,424,065; 5,451,499; 5,453,364; 5,462,734; 5,470,734; y 5,482,713 se describen ejemplos de vacunas vivas atenuadas, y aquellas que usan vectores recombinantes para enviar genes extranjeros, las cuales están incorporadas cada una a la presente como referencia. Las construcciones de genes de conformidad con la presente invención, pueden estar incorporadas en las vacunas vivas atenuadas y en las vacunas recombinantes, para producir vacunas mejoradas de conformidad con la invención. Un aspecto de la presente invención se relaciona con composiciones farmacéuticas útiles en los métodos de la presente invención. Las composiciones farmacéuticas comprenden una molécula de ADN que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica proteínas operablemente enlazadas a elementos reguladores necesarios para expresión en las células del individuo, incluyendo un promotor mitocondrial . Las composiciones farmacéuticas comprenden además un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. El término "farmacéutico" es bien conocido y ampliamente entendido por aquellos expertos en la técnica. Como se usa en la presente, se pretende que los términos "composiciones farmacéuticas" y "composiciones farmacéuticas inyectables" tengan su significado ordinario como lo entienden aquellos expertos en la técnica. Se requiere que las composiciones farmacéuticas satisfagan ciertos estándares específicos respecto a esterilidad, pirógenos, materia en partículas, así como isotonicidad y pH. Por ejemplo, los productos farmacéuticos inyectables son estériles y están libres de pirógenos. Las composiciones farmacéuticas de conformidad con la ,. presente invención comprenden de aproximadamente 1 ng a aproximadamente 10, 000 f^g de ADN. En algunas modalidades preferidas, las composiciones farmacéuticas contienen aproximadamente 2000 ^g, 3000 Hg, 4000 ^g ó 5000 de ADN. En algunas modalidades preferidas las composiciones farmacéuticas contienen aproximadamente 1000 f^g de ADN. En algunas modalidades preferidas las composiciones farmacéuticas contienen de aproximadamente 10 ng a aproximadamente 800 -g de ADN. En algunas modalidades preferidas las composiciones farmacéuticas contienen de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 500 l j de ADN. En algunas modalidades preferidas las composiciones farmacéuticas contienen de aproximadamente 1 a aproximadamente 350 g de ADN. En algunas modalidades preferidas las composiciones farmacéuticas contienen de aproximadamente 25 a aproximadamente 250 de ADN. En algunas modalidades preferidas las composiciones farmacéuticas contienen aproximadamente 100 ^g de ADN. Las composiciones farmacéuticas de conformidad con la presente invención se formulan de conformidad con el modo de administración que se vaya a usar. Uno que tenga experiencia ordinaria en la técnica puede formular rápidamente una vacuna que comprenda una construcción genética. En casos en donde la inyección intramuscular es el modo de administración elegido, de preferencia se usa una formulación isotónica. Generalmente, los aditivos para isotonicidad pueden incluir cloruro de sodio, dextrosa, manitol, sorbitol y lactosa. En algunos casos, se prefieren las soluciones isotónicas tales como la solución salina regulada en el pH por fosfato. Los estabilizadores incluyen gelatina y albúmina. En algunas modalidades se añade un agente vasoconstrictor a la formulación. Las preparaciones farmacéuticas de conformidad con la presente invención se proporcionan estériles y libres de pirógenos . En una modalidad preferida, el ADN se administra mediante inyección intramuscular. La bupivacaina, un compuesto farmacéutico bien conocido y comercialmente disponible, se administra antes de, simultáneamente con, o subsecuente a la construcción genética. La bupivacaina y la construcción genética se pueden formular en la misma composición. La bupivacaina es particularmente útil en vista de sus muchas propiedades y actividades cuando se administra al tejido. La bupivacaina está química y farmacológicamente relacionada con los anestésicos locales de aminoacilo. Esta es un homólogo de la mepivacaína, y está relacionada con la lidocaína. La bupivacaína hace al voltaje del tejido muscular sensible a la agresión con sodio, y efectúa la concentración de iones adentro de las células. Se puede encontrar una descripción completa de las actividades farmacológicas de la bupivacaína en Ritchie, J.M., y N.M. Greene, The Pharmacological Basis of Therapeutics , Eds . : Gilman, A.G. y colaboradores, 8o Edición, Capítulo 15:3111, que está incorporado a la presente como referencia. En el método de la presente invención se prefieren la bupivacaína y los compuestos que muestran una similitud funcional con la bupivacaína. La bupivacaína - HC1 se designa químicamente como monohidrato de monoclorhidrato de 2-piperidincarboxamida, 1-butil-N- (2, 6-dimetilfenilo) y está ampliamente disponible comercialmente para usos farmacéuticos de muchas fuentes, incluyendo Astra Pharmaceutical Products Inc. (Westboro, Mass.) y Sanofi inthrop Pharmaceuticals (Nueva York, N.Y.). la bupivacaína está comercialmente formulada con y sin metilparabeno, y con o sin epinefrina. Se puede usar cualquiera de esas formulaciones. Esta está comercialmente disponible para uso farmacéutico en concentraciones de 0.25 por ciento, 0.5 por ciento, y 0.75 por ciento, las cuales se pueden usar en la invención. Si se desea se pueden preparar concentraciones alternativas que produzcan efectos deseables. De conformidad con la presente invención, se administran de aproximadamente 250 Mg a aproximadamente 10 miligramos de bupivacaina. En algunas modalidades se administran de aproximadamente 250 Mg a aproximadamente 7.5 miligramos. En algunas modalidades se administran de aproximadamente 0.50 miligramos a aproximadamente 5.0 miligramos. En algunas modalidades se administran de aproximadamente 1.0 miligramo a aproximadamente 3.0 miligramos. En algunas modalidades se administran aproximadamente 5.0 miligramos. Por ejemplo, en algunas modalidades se administran de aproximadamente 50 Mi a aproximadamente 2 mililitros, de preferencia de 50 i a aproximadamente 1500 i, y de más preferencia aproximadamente 1 mililitro de bupivacaina - HC1 al 0.5 por ciento y metilparabeno al 0.1 por ciento en un portador farmacéutico isotónico, en el mismo sitio que la vacuna, antes de, simultáneamente con, o después de que se administra la vacuna. De manera similar, en algunas modalidades, se administran de aproximadamente 50 Mi a aproximadamente 2 mililitros, de preferencia de 50 M-l a aproximadamente 1500 Mi, y de más preferencia aproximadamente 1 mililitro de bupivacaina - HC1 al 0.5 por ciento en un portador farmacéutico isotónico, en el mismo sitio que la vacuna, antes de, simultáneamente con, o después de que se administra la vacuna. La bupivacaina y cualesquier otros compuestos que actúen de manera similar, particularmente aquellos de la familia relacionada de anestésicos locales, se pueden administrar a concentraciones que proporcionen la facilitación de captación deseada, por parte de las células, de las construcciones genéticas. En algunas modalidades de la invención, primero se somete al individuo a la inyección de bupivacaina, antes de la vacunación genética mediante inyección intramuscular. Esto es, por ejemplo, hasta aproximadamente una semana a diez días antes de la vacunación, se inyecta primeramente al individuo con la bupivacaina. En algunas modalidades, antes de la vacunación, se inyecta al individuo con bupivacaina aproximadamente de 1 a 5 días antes de la administración de la construcción genética. En algunas modalidades, antes de la vacunación, se inyecta al individuo con bupivacaina aproximadamente 24 horas antes de la administración de la construcción genética. Alternativamente, la bupivacaina se puede inyectar simultáneamente, minutos antes o después de la vacunación . De conformidad con lo anterior, la bupivacaina y la construcción genética se pueden combinar e inyectar simultáneamente como una mezcla. En algunas modalidades, la bupivacaina se administra después de la administración de la construcción genética. Por ejemplo, hasta aproximadamente una semana a diez días después de la administración de la construcción genética, se inyecta al individuo con bupivacaína. En algunas modalidades, al individuo se le inyecta la bupivacaína aproximadamente 24 horas después de la vacunación. En algunas modalidades, al individuo se le inyecta la bupivacaína aproximadamente de 1 a 5 días después de la vacunación. En algunas modalidades, al individuo se le administra la bupivacaína hasta aproximadamente una semana a diez días después de la vacunación. La presente invención se puede realizar usando anestésicos locales como facilitadores. En adición a la bupivacaína, mepivacaína, lidocaína, procaína, carbocaína y metilbupivacaína, se pueden usar otros compuestos que actúen de manera similar.

EJEMPLO Construcción de ratón quimérico de choque 210. Se compraron cuatro ratones hembras de cuatro semanas de edad C57B1/6J (P2m+ +) y C57B1/6J-P2mtra 1Unc (P2m_ ~) con Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME) . Se usaron tanto P2m+/+ como P2m 1 para trasplante recíproco de médula ósea. La preparación de quimeras de médula ósea se describe en detalle en Sobel y colaboradores, J. Exp . Med., 1991, 173:1441, el cual está incorporado a la presente como referencia en su totalidad. Brevemente, se disminuyeron las células NK de los ratones receptores (tanto P2irt+ + como P?m 1 ) con inyecciones intraperitoneales de 200 g/mililitro ¦ de anticuerpos monoclonales PK136 (anti-NKl.l) en los días (-2) y (-1). Este tratamiento previo evita el rechazo de las células de médula ósea que se originan de los ratones C57B1/6J-P2m m 1 Unc mediante las células NK radiorresistentes en los ratones C57B1/6J. El dia del trasplante reciproco de médula ósea, se irradiaron letalmente a los ratones receptores con un total de 1050 rad, dados en dos dosis igualmente divididas, con tres horas de diferencia. Se sacrificaron los ratones donantes, y se cosechó la médula ósea por separado por medio de lavar tibias y fémures. Se disminuyeron las células de médula ósea de las células T maduras mediante la incubación de las células (37°C, 1 hora) con el complemento de conejo Low-Tox-M (Cederlane Labs) después de la incubación (4°C, 45 minutos) con una concentración de saturación de una mezcla de anticuerpos monoclonales anti-CD4 (172.4), anti-CD8 (31M) , y anti-Thyl .2 (mmt 1). Se reconstituyeron los ratones receptores con células de médula ósea reciprocas con una inyección intravenosa de 107 células (0.3 mililitros). Se alojó a todos los animales en una instalación de temperatura controlada, con ciclos de luz.

Inmunización de los ratones Se preparó una construcción de vacuna de ADN que codifica para la proteina de envoltura del VIH-IMN (pCEnv) , como se describe en Boyer y colaboradores, J. ed. Primatol., 1996, 25:342; Wang y colaboradores, AIDS, 1995, 9:S159, que están incorporados a la presente como referencia en su totalidad. Se prepararon cartuchos de expresión CD80 y CD86 como se describe en Kim y colaboradores, Nat . Biotech., 1997, 15:641, que está incorporado a la presente como referencia en su totalidad. Cada ratón recibió tres inyecciones intramusculares (dos semanas de separación) con 50 -g de cada construcción de ADN de interés, formuladas en solución salina regulada en el pH por fosfato (PBS) y bupivacaina - HC1 al 0.25 por ciento (Sigma, St. Louis, MO) como se describe en Kim y colaboradores, Nat. Biotech., 1997, 15:641, y Kim y colaboradores, J. Immunol., 1997, 158:816, que están incorporados a la presente como referencia en su totalidad. Cincuenta M-g de pCEnv administrados en un régimen descrito anteriormente, han mostrado que inducen respuestas inmunes moderadas pero positivas en ratones. Se seleccionó esta dosis para demostrar el mejoramiento de las respuestas inmunes con la coaplicación de genes coestimulantes. También se inyectó a los animales con virus de vacuna recombinante que expresan la proteina de envoltura del VIH-1 (vMN462) (NIH AIDS Research and Reference Reagent Program) . Se inyectó a los ratones intravenosamente con vMN462 (5xl06 unidades de formación de placa (PFU) por ratón) . Siete días después, se removieron los bazos y se usaron para la detección del ensayo de CTL directo. También se analizaron los ratones para CTL indirecto después de 4 semanas de inmunización con la misma dosis de vM 462.

Citómetria de flujo Se confirmó la generación de ratones quiméricos mediante el análisis FACS, usando anticuerpos monoclonales al dominio a3 de la molécula H-2D . Se añadió un ug/mililitro de anticuerpos monoclonales de ratón 28-14-8s (isotipo IgG2a) , que reconocieron un dominio a-3 de la molécula H-2D (Cortesía del Doctor J. Frelinger, Chapel Hill, NC) , a PBMC aislado de ratones individuales. Se analizaron los datos mediante MR FACScan con adquisición de datos y software CELLQuest (Becton Dickinson Immunocytometry Systems, San José, CA) .

Ensayos inmunohistoguimicos en células musculares Se examinó inmunohistoquímicamente músculo de pierna inmunizado para ver la expresión in vivo de CD80, CD86, y proteínas de envoltura. Se inoculó el músculo de cuadríceps de ratón con 50 miligramos de pCEnv + pCD80, pCEnv + pCD86, o vector de control. Siete días después de la inoculación se sacrificaron los ratones, y se removieron músculos de los cuadríceps. Después se congeló el tejido del músculo fresco en compuesto O.C.T. (Sakura Finetek USA, Inc., Deerfield, IL) . Se colocaron las secciones sobre portaobjetos ProbeOn Plus (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) . Se fijaron los portaobjetos en acetona, y se bloquearon con suero de cabra al 1.5 por ciento (Vector Labs, Burlingame, CA) . Para detectar la coexpresión, se incubaron los portaobjetos con anticuerpos bioteñidos-a-gp 120 (Inmuno Diagnostics, Bedford MA) diluidos al 1:20, junto con ya sea anticuerpos anti-CD80 o anti-CD86 conjugados con FITC (PharMingen, San Diego, CA) diluidos al 1:5, a 28°C, durante 12 horas. Después se incubaron los portaobjetos con estreptavidina Texas Red (NEN Life Sciences, Boston, MA) al 1:400 en PBS, durante 30 minutos, a la temperatura ambiente. Para detectar la presencia de linfocitos en el músculo, se tiñeron los portaobjetos con solución colorante de hematoxilina y eosina (H&E) . Se vieron los portaobjetos con un microscopio fluorescente OPTIPHOT de Nikon (Nikon Inc., Tokio, JAPON), usando un lente de 40X (Nikon Fluo 40X Ph3D2) . Se obtuvieron fotografías de los portaobjetos usando una cámara Nikon FX35DX con control de exposición por medio de película de portaobjetos UFX-II de Nikon y Ektachrome 160T de Kodak. Se analizó la infiltración de linfocitos en el músculo mediante la preparación de secciones del músculo congeladas de animales inyectados con ADN, y teñida con solución colorante de hematoxilina y eosina (H&E) (Vector Labs) . Los portaobjetos se tiñeron también con anticuerpos anti-CD4 ó anti-CD8 (PharMingen) ELISA Se adsorbieron cincuenta microlitros de gp 120 recombinante (ImmunoDiagnostics, Inc., Bedford, MA) diluido en 0.1M de regulador del pH de carbonato - bicarbonato (pH de 9.5) a una concentración de 2 Mg/mililitro, sobre pozos de microtítulo, durante la noche, a 4°C. Se lavaron las placas con PBS- Tween-20 al 0.05 por ciento, y se bloquearon con BSA al 3 por ciento en PBS, con Tween-20 al 0.05 por ciento, durante una hora, a 37 °C. Se diluyeron antisueros de ratón con Tween-20 al 0.05 por ciento, y se incubaron durante una hora a 37°C, después se incubaron con IgG anti - ratón de cabra conjugado con HRP (Sigma, St . Louis, MO) . Se lavaron las placas y se revelaron con solución reguladora del pH 3''3'5'5r T B (Sigma). Se leyeron las placas en un lector de placas Dynatech MR5000 con la densidad óptica a 450 nm. Se definió el titulo del anticuerpo como la dilución más alta de suero en la cual la absorbencia de un pozo experimental excedió el valor inmune previo promedio en cuando menos dos desviaciones estándares.

Ensayo de linfocitos T citotoxicos Se realizó un ensayo CTL de liberación 51Cr de cinco horas, como se describe en Kim y colaboradores, Nat.

Biotech., 1997, 15:641, y Kim y colaboradores, J. Immunol., 1997, 158:816. Se analizaron células EL-4 normales e infectadas con vacunas (linfoma de célula T H-2 ) mediante FACS, para ver su habilidad para expresar las moléculas MHC clase II. Como se esperaba, las células EL-4 no expresaron moléculas MHC clase II en ningún caso. Se estimularon los efectores no específicamente durante dos días con medio de cultivo CTL que consistía de RPMI 1640 (Gibco-BRL, Grand Island, NY) , suero de becerro fetal (Gibco-BRL) al 10 por ciento, y RAT-T-STIM al 10 por ciento, sin Con A (Becton Dickinson Lab are, Bedford, MA) a 5 x 106 células por mililitro. También se estimularon los efectores específicamente durante cuatro días adicionales, con células EL-4 fijadas con glutaraldehído al 0.1 por ciento, infectadas con vM 462. La preparación de objetivos específicos para todos los experimentos CTL se hizo mediante la infección de las células EL-4 con vMN462. Como un control no específico para los experimentos de virus de vacuna e inmunización con ADN, se usaron las células EL-4 no infectadas y las células EL-4 infectadas con virus de vacuna WR (NIH AIDS Research and Reference Reagent Program) , respectivamente. Se realizó un ensayo de liberación de cromo estándar, en el cual se etiquetaron las células objetivo con 100 -Ci/mililitro de Na251CrC , durante 2 horas, y se usaron para incubación con las células efectoras durante 5 horas a 37°C. Se determinó la destrucción por acción de las lisinas de CTL a proporciones de efector : objetivo (E:T) que variaron de 50:1 a 12.5:1. Se cosecharon los sobrenadantes y se contaron en un gama - contador LKB CliniGamma. Se determinó el porcentaje de la destrucción especifica por acción de las Usinas a partir de la fórmula: 100 x liberación experimental - liberación espontánea liberación máxima - liberación espontánea Se determinó la liberación máxima por la destrucción por acción de las Usinas de las células objetivo en medio que contenia Tritón X-100 al 10 por ciento. No se consideraba válido un ensayo si el valor para los conteos de ^liberación espontánea' eran en exceso del 20 por ciento de la liberación máxima' . Para calcular la destrucción especifica por acción de las lisinas de los objetivos, se restó el porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos no específicos (infectados con WR) , del porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos específicos (infectados con vMN462) . Se realizó el ensayo CTL directo como se describió anteriormente, excepto sin la estimulación in vivo de las células efectoras (ni específicas ni no específicas) .

Resultados Identificación de moléculas MHC clase I funcionales en ratones quiméricos de choque p2m rec procos Se requiere la expresión de 2m para la expresión superficial en la célula de las moléculas MHC clase I, las cuales juegan un papel importante en la generación de respuestas inmunes citotóxicas protectoras contra patógenos infecciosos. Estas moléculas presentan fragmentos de péptido cortos, derivados a partir de antigenos extraños sintetizados en el citosol a linfocitos citotóxicos CD8+. Utilizamos ratones C57B1/6J-B2mtm Unc, homocigoto para el gen de choque ?S?? ( 2m" _) , junto con animales normales C57B1/6J (P2m+/+) , para la generación de quimeras de médula ósea reciprocas del mismo haplotipo (H-2b) . Se usaron animales tanto &2m+ + como P2m~ _ para trasplante de médula ósea reciproco. Los ratones p2m_/~ - p2m+ + tendrían APCs derivadas de médula ósea, sin la expresión de la molécula MHC clase I, y células musculares con la expresión de la molécula MHC clase I. Los ratones quiméricos P2m+ + - P2m_ tendrían APCs derivadas de médula ósea positivos para MHC clase I, y células musculares negativas para MHC clase I. Cada ratón recibió tres inyecciones intramusculares (dos semanas de separación) con 50 -g de cada construcción de ADN (pCEnv, pCD80, ó pCD86) formulada en solución salina regulada en el pH por fosfato (PBS) y bupivacaína - HC1 al 0.25 por ciento. Después del trasplante de médula ósea, se confirmó la generación de ratones quiméricos mediante el análisis FACS, usando anticuerpos monoclonales al dominio a3 de la molécula H-2Db. La quimerización de estos animales se completó a los tres meses. Los ratones quiméricos resultantes desplegaron una expresión diferencial de moléculas MHC clase I en la superficie de las células musculares y APCs (Figura 1) . Los ratones 2m_ /" - P2m+/+ poseían APCs (donadoras) derivadas de médula ósea sin la expresión de la molécula MHC clase I, y células musculares (receptoras) con la expresión de la molécula MHC clase I. En contraste, los ratones quiméricos 2Ta /+ - Pam" - poseían APCs derivadas de médula ósea positivas para MHC clase I, y células musculares negativas para MHC clase I. Muchos reportes han sugerido que un nivel bajo de cadenas a — debajo del nivel de la sensibilidad de FACS - puede expresarse de hecho en la superficie de las células P2m~ /_ , y que estas cadenas a pueden a su vez fijar P2m libre y presentar de manera cognada péptidos extraños a las células T CD8+. Por otra parte, los ratones quiméricos P2in+/+ - P2m_ ~ , los cuales no tienen células epiteliales tímicas MHC Clase I+, pudieran no generar CTLs CD8+ funcionales durante la diferenciación de las células T. Hasta se ha demostrado la selección positiva de estos linfocitos mediante las células de médula ósea MHC Clase I+. De hecho, se ha mostrado que las quimeras tanto P2m" /_ - P2in+/+ como P2in+ /+ - P?m / generaron números significativos de células CD4 y CD8. Sin embargo, se decidió investigar la habilidad de los ratones quiméricos recíprocos para generar respuestas inmunes de CTL CD8+ antivirales. Se inmunizaron los ratones de choque normales C57B1/6 ( 2m+ +) y P2rrf /_ , así como los ratones quiméricos P2m_ ~ - P?m+ + y P2m+ /+ - P2irf/_ , con el virus de vacuna recombinante (vM 462) . Subsecuentemente, se analizó la respuesta inmune de CTL CD8+ antiviral generada en estos animales. Como se muestra en la Figura 2, los ratones tanto C57B1/6 y 2m+/* - P?m 1 generaron respuestas de CTL CD8+ tanto primaria (directa) como secundaria (indirecta) . Las respuestas de CTL en los ratones C57B1/6 fueron más potentes que en las quimeras P?m+/+ - P2irf/_ , y estos resultados concuerdan con observaciones anteriores. En contraste, no se observaron respuestas de CTL CD8+ antivirales en los ratones de choque P2m"/~, ni en los ratones quiméricos P2irf/_ - P2m+/+ . Por lo tanto, estos resultados demuestran que las quimeras entre ratones normales y ratones de choque P2m proporcionan un modelo claro para examinar el papel de las células musculares en las respuestas de las células T restringidas de MHC clase I después de la inmunización con ADN.

Coexpresión de moléculas coes imulantes con proteína viral sobre células musculares La inyección intramuscular de ratones con plásmidos que codifican para las moléculas coestimulantes CD80 y CD86 dio como resultado la expresión de las moléculas CD80 y CD86 en el músculo con eficiencias de transfección similares. También investigamos si la coaplicación de dos construcciones de expresión (una que codifique para la proteina de envoltura de VIH-1, y una que codifique para una molécula coestimulante) da como resultado la coexpresión de estas proteínas en la misma célula. Se coinmunizaron ratones P2m+/+ con una vacuna de ADN que expresaba la proteína de envoltura de VIH-IMN (pCEnv) y plásmidos que codificaban los genes CD80 ó CD86 (pCD80 ó pCD86) ó el plásmido de control (pCDNA3) . Se examinó inmunohistoquímicamente La expresión de CD80, CD86, y las proteínas de envoltura en los músculos de la pierna inyectada. Se prepararon secciones de músculo congelado a partir de animales inyectados con ADN, y se tiñeron con anticuerpos anti - CD80 ó anti - CD86 etiquetados con FITC (verde) , y anticuerpos anti - gpl20 etiquetados con Texas Red (rojo) . Se tiñó una rebanada de una pierna inmunizada con pCEnv + pCD80 con anticuerpos anti - CD80 ó anti - CD80 y anti - gpl20. Se tiñó una rebanada de una pierna inmunizada con pCEnv + pCD86 con anticuerpos anti - CD86 ó anti - CD86 y anti - gpl20. Se tiñó una rebanada de una pierna inmunizada con pCDNA3 (control de vector) con anticuerpos anti - CD80 y anti - CD86, o con anti - CD80, anti - CD86, y anti - gpl20. La coinmunización con pCEnv + pCD80 ó pCEnv + pCD86 dio como resultado la coexpresión de estas proteínas en las células musculares. Los niveles de coexpresión de la envoltura y CD80, o la envoltura y CD86 de los ratones inyectados con pCEnv + pCD80 y pCEnv + pCD86, respectivamente, fueron similares. En contraste, las piernas del control no mostraron la expresión de estas proteínas.

Se pueden diseñar células no hematopoyéticas positivas para H-2Db, para activar precursores de CTLs restringidos HC clase I Se analizaron las respuestas inmunes tanto humorales como celulares, en ratones quiméricos y de control inmunizados con plásmidos que codifican el antígeno viral y las moléculas coestimulantes. Se analizaron las respuestas inmunes humorales en el suero recolectado de ratones experimentales, antes y después de la inmunización. Se analizaron estas muestras de suero para ver su reactividad contra la proteína de envoltura (gp 120) mediante ELISA. Como se muestra en la Tabla I, se generaron respuestas humorales específicas de la envoltura VIH-1 en ambos tipos de quimeras. Las respuestas inmunes humorales de los ratones p2irf - fueron similares a aquellas de los ratones quiméricos. Estos resultados demuestran que se podrían generar respuestas inmunes humorales específicas al antígeno en los ratones de choque P?m después de la inmunización con ADN del plásmido, y concuerdan con los resultados reportados previamente en este sistema modelo, después de la inmunización con la proteina (Raulet, Advances in Immunology, 1993, 55:381-421, que está incorporado a la presente como referencia en su totalidad) . Además, estos resultados indican que la coinmunización de quimeras reciprocas ya sea con pCD80 o con pCD86 tuvo poco efecto sobre el titulo de punto final de anticuerpo especifico, inducido por las inmunizaciones con pCEnv, como se observó previamente en los ratones BALB/c normales (Kim y colaboradores, Nature Biot . , 1997, 15:641-645, que está incorporado a la presente como referencia en su totalidad.

Tabla 1. Respuesta de anticuerpos específicos a la envoltura de VIH-1 después de la coinmunización con . pCD80 ó pCD86 (cuatro ratones por grupo) . Se probó el suero de los ratones para ver la respuesta de anticuerpos específicos a la envoltura, usando el ELISA usando la proteína gp 120 de VIH-1. Las diluciones en serie fueron 1:64, 1:128, 1:256, 1:512, 1:1024, 1:2048, y 1:4096. El nivel de densidad óptica de fondo para ELISA era de <0.015. Se han repetido dos veces estos experimentos con resultados similares. También se evaluó la generación de respuestas CTL en quimeras reciprocas y animales P2m _ . Anteriormente se demostró que la coinmunización con genes CD86, y no CD80, dio como resultado el mejoramiento dramático de CTLs antivirales restringidos MHC - clase I en animales normales MHC (Kim y colaboradores, Nature Biot., 1997, 15:641-645, que está incorporado a la presente como referencia en su totalidad) . Usando las células de linfoma T EL-4 como objetivo que no expresan las moléculas MHC - clase II, se analizaron las respuestas de CTL CD8+ restringidas por MHC clase I. Para calcular la destrucción especifica por acción de las lisinas de los objetivos, se restó el porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos no específicos (infectados por R) , del porcentaje de destrucción por acción de las lisinas de los objetivos específicos (infectados por vMN462) . Se observó un nivel de fondo de la eliminación específica del control P2irf ~ y los ratones quiméricos P2m+ + -?2m 1 inmunizados con el plásmido de control, pCEnv, pCEnv + pCD80 ó pCEnv + pCD86 (Figura 3) . Sin embargo, los ratones P2m - P2m+/+ coinmunizados con pCEnv + pCD86, pero no pCEnv ni pCEnv + pCD80, dieron como resultado un nivel alto deCTL específicas a la envoltura (37 por ciento a una proporción de E:T de 50:1) . Para examinar adicionalmente la potencia de la inducción de CTL, se analizó la habilidad para inducir respuestas CTL directas, no estimuladas en los ratones quiméricos P2m - ß2??+ + (Figura 4) . Los ratones inmunizados con pCEnv no indujeron eliminación especifica. En contraste, se observó una destrucción especifica por acción de las lisinas del 23 por ciento del grupo de inmunización de pCEnv + pCD86 a una proporción de E:T de 50:1, y se tituló al 11 por ciento a la proporción de E:T de 12.5:1. Puesto que las células derivadas de médula ósea en los ratones P2nf _ - p2in+/+ no podrían generar CTLs CD8+ antivirales sustanciales (Figura 2), estos resultados sugieren que la coexpresión de la envoltura de VIH y las moléculas CD86 en células no hematopoyéticas puede habilitarlas para cebar respuestas CTL específicas al VIH-1. En adición, los resultados de las quimeras P2m+ + - P2irf ~ inmunológicamente normales (Figura 2) indican que el efecto de mejoramiento de las moléculas CD86 sobre la expansión CTL no se observa a través de la conversión del número pequeño de APCs, sino que más bien es más generalizado en las células no hematopoyéticas . El nivel de diversas citocinas liberadas por las células inmunes refleja la dirección y magnitud de la respuesta inmune. Se produjeron las citocinas IFN-Y e IL-4 no únicamente mediante las células T CD4+, sino también las CD8+. La IFN-Y está intrincadamente envuelta en la regulación de las respuestas inmunes citotóxicas mediadas por células T, mientras que la IL-4 juega un papel dominante en las respuestas inmunes mediadas por células B. Por lo tanto, en adición a nuestro análisis CTL, se recolectó el sobrenadante de las células efectoras estimuladas in vitro para el ensayo CTL, y se les probó para ver la liberación de IFN-Y e IL-4. Como se muestra en la Figura 5, el nivel de liberación de IFN-T correspondió con el nivel de respuesta CTL que se ve en la Figura 3. De hecho, el nivel de IFN-Y liberada de los ratones P?m /_ - P2in+/+ inmunizados con pCEnv + pCD86 (45 ng/mililitro) fue cuando menos tres veces aquellos de los otros grupos. Por otra parte, el nivel de IL-4 liberada de todos los grupos fue similar. Por lo tanto, los datos de liberación de IFN-Y apoyan que la expresión de CD86 sobre células no hematopoyéticas puede cebar la inducción de citocina, principalmente en el contexto de la expresión de MHC clase I, apoyando la coligación TCR directa mediante APCs no profesionales.

Expresión de infiltración inducida de CD86 de linfocitos dentro de los músculos de animales inmunizados Con el propósito de esclarecer adicionalmente la habilidad de las células no de médula ósea transíectadas con CD86 para activar directamente las células T, buscamos evidencia directa de la ligación de las células T a las células musculares transfectadas in vivo. Se observó mucha más infiltración de linfocitos dentro del músculo de los ratones inmunizados con pCEnv + pCD86, que en el músculo de ratones de control o inmunizados con pCEnv + pCD80 a los 7 dias posteriores a la inmunización. Se observaron numerosos linfocitos de infiltración en el sitio del antigeno, y la expresión de CD86, y parece que atacaron las células musculares presentadoras. Cuando se tiñeron los portaobjetos inmunohistoquimicamente para las células T, se observó que las células T de infiltración incluían células T tanto CD4+ como CD8+ (Figura 6) . Se observó que la infiltración de linfocitos en el músculo inmunizado se despeja dentro de un mes, correlacionándose con la duración de la expresión del antígeno después de la expresión del ADNc. Los animales no exhibieron ningún efecto fenotípico claro de esta invasión, en comparación con los animales no vacunados. El examen de las secciones de músculo en puntos de tiempo posteriores demostraron un fenotipo de músculo normal sin invasión de linfocitos. Es interesante que hasta durante la fase temprana de la infiltración de linfocitos, los ratones se comportaron normalmente. Estos resultados sugieren que las células musculares que se diseñan para expresar el antígeno viral junto con moléculas MHC clase I y CD86, pero no CD80, pueden atraer de manera efectiva los linfocitos, e interactuar directamente con ellos. Estos datos distinguen de manera clara que la atracción per se no es la función de CD80.

Tabla 2 Familia Picornavirus Géneros: Rinovirus: (Médico) responsable de ~50 por ciento de casos del resfriado común . Enterovirus: (Médico) incluye poliovirus, Coxsackievirus, ecovirus, y enterovirus humanos tales como el virus de hepatitis A. Aftovirus: (Veterinario) estos son los virus de enfermedades de los pies y la boca. Antigenos objetivo: VP1, VP2, VP3, VP , VPG Familia Calcivirus Géneros: Grupo Norwalk de Virus: (Médico) estos virus son un agente causativo importante de gastroenteritis epidémica . Familia Togavirus Géneros: Alfavirus: (Médico y Veterinario) los ejemplos incluyen los virus Sindbis, virus RossRiver, y encefalitis Equina de Este y Oeste.

Rubivirus: (Médico) Virus de rubéola.

Familia Flariviridue Los ejemplos incluyen: (Médico) los virus de dengue, fiebre amarilla, encefalitis japonesa, * encefalitis de St . Louis, y encefalitis originada por garrapata. Virus de Hepatitis C (Médico) estos virus no están colocados en una familia todavía, pero se cree que son ya sea un togavirus o un flavivirus. La mayor similitud es con la familia togavirus . Familia Coronavirus (Médico y Veterinario) Virus de bronquitis infecciosa (aves de corral) Virus gastroentérico transmisible porcino (cerdo) Virus de encefalomielitis hemaglutinante porcino (cerdo) . Virus de peritonitis infecciosa felino (gatos) . Coronavirus entérico felino (gato) Coronavirus canino (perro) Los coronavirus respiratorios humanos provocan ~40 casos de resfriado común. EX. 224E, 0C43 Nota - los coronavirus pueden provocar hepatitis no A, B ni C Antígenos objetivo El - también llamado M o proteína matriz E2 - también llamado S o proteína Spike E3 - también llamado HE o glucoproteína de hemaglutinina elterosa (no presente en todos los coronavirus) N - nucleocápsido Familia Rabdovirus Géneros : Vesiculovirus : Virus de Estomatitis Vesicular Lisavirus: (médico y veterinario) rabias Antígenos objetivo: proteína G Proteína N Familia Filoviridue: (Médico) Virus de fiebre hemorrágica tales como los virus Marburg y Ebola Familia Paramixovirus Géneros : Virus de Parainfluenza Tipo 1 Virus de Parainfluenza Tipo 3 Virus de Parainfluenza Bovino Tipo 3 Rubulavirus: (Médico y Veterinario) Virus de parotiditis, Virus de Parainfluenza Tipo 2, Virus de Parainfluenza Tipo 4, virus de la enfermedad de NewCastle (patógeno importante en pollos) Morbilivirus : (Médico y Veterinario) Sarampión, moquillo canino Neumonvirus : (Médico y Veterinario) Virus sincitial respiratorio Familia Ortomixovirus (Médico) .El virus de Influenza Familia Bunyavirus Géneros: Bunyavirus: (Médico) encefalitis de California, La Crosse Flebovirus : (Médico) Fiebre del Valle de Rift Hantavirus: El Puremala es un virus de fiebre hemahagin Nairovirus (Veterinario) enfermedad de ovejas de Nairobi También muchos bungavirus no asignados Familia Arenavirus (Médico) LCM, virus de fiebre de Lassa Familia Reovirus Géneros : Reovirus: un posible patógeno humano Rotavirus : gastroenteritis aguda en niños Orbivirus: (Médico y Veterinario) Cultivirus: fiebre de garrapata de Colorado, encefalosis equina de Lebombo (humanos) , lengua azul Familia Retrovirus Subfamilia : Oncorivirinal : (Veterinario) (Médico) virus de leucemia felino, HTLV1 y HTLVII Lentivirinal : (Médico y Veterinario) VIH, virus de inmunodeficiencia felino, infecciones equinas, virus de anemia Espumavirinal Familia Papovavirus Subfamilia : Poliomavirus : (Médico) virus BKü y JCU Subfamilia : Papilomavirus : (Médico) muchos tipos virales asociados con cánceres o el progreso maligno del papiloma Adenovirus (Médico) EX AD7, ARD provocan enfermedad respiratoria - algunos adenovirus tales como 275 provocan enteritis Familia Parvovirus (Veterinario) Parvovirus felino: provoca enteritis felina Panleucopeniavirus felino Parvovirus canino Parvovirus porcino Familia Herpesvirus Subfamil alfaherpesviridue Géneros : Simplexvirus (Médico) HSVI, HSVII Varicelovirus : (Médico - Veterinario) seudorrabias - varicela zóster Subfamilia : betaherpesviridue Géneros : Citomegalovirus (Médico) HCMV Muromegalovirus Subfamilia : Gamaherpesviridue Géneros : Linfocriptovirus (Médico) EBV - (linfo de Burkitts) Radinovirus Familia Poxvirus Subfamilia: Cordopoxviridue (Médico-Veterinario) Géneros : Ortopoxvirus Varióla (viruela) Vaccinia (cowpox) Parapoxivirus - Veterinario Auipoxvirus - Veterinario Capripoxvirus Leporipoxvirus Suipoxvirus Subfamilia: Entemopoxviridue Familia Hepadnavirus : Virus de hepatitis B No clasificado: Virus delta de hepatitis Tabla 3 Patógenos Bacterianos Los cocos grampositivos patogénicos incluyen: neumocócico; estafilocócico; y estreptocócico . Los cocos gramnegativos incluyen: meningocócico; y gonocócico. Los bacilos gramnegativos entéricos patogénicos incluyen: enterobacteriáceas ; seudomonas, acinetobacteria y eiquenela melioidosis; salmonela; shigelosis; hemofilus; moraxela; chancrela; brucelosis; tularemia; yersinia (pasteurella) ; estreptobacilo moniliformis y espirilum; monocitogenes de listeria; erysipelothrix rhusiopathiae; difteria; cólera; carbunco; donovanosis (granuloma inguinal) ; y bartonelosis . Las bacterias anaerobias patogénicas incluyen: tétanos; botulismo; otros clostridios; tuberculosis; lepra; y otras micobacterias . Las enfermedades espiroquetales patogénicas incluyen: sífilis; treponematosis; yaws; sífilis pinta y endémica; y leptospirosis . Otras infecciones provocadas por bacteria patógena superior y hongos patogénicos incluyen: actinomicosis ; nocardiosis; criptococosis, blastomicosis , histoplasmosis , y coccidioidomicosis; candidiasis, aspergilosis , y mucormi-cosis; esporotricosis ; paracoccidiodomicosis , petrielidiosis , torulopsosis , micetoma y cromomicosis; y dermatofitosis . Las infecciones Rickettsiales incluyen rickettsia y rickettsiasis . Los ejemplos de infecciones por micoplasma y clamidia incluyen: neumonías por micoplasma; linfogranuloma venéreo; psitacosis; e infecciones por clamidia perinatal.

Eucariotes patogénicos Los protozoarios y helmintos patogénicos y las infecciones mediante los mismos incluyen: amibiasis; malaria; leishmaniasis ; tripanosomiasis; toxoplasmosis ; neumocistis carini; babesiosis; giardiasis; triquinosis; filariasis; esquistosomiasis ; nematodos; tremátodos o duelas; e infecciones por cestodo (tenia) .

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para inducir una respuesta inmune contra un inmunógeno en un individuo, que comprende los pasos de : administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores, necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunógeno y el antigeno de Histocompatibilidad Principal se expresan, y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo; y/o administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica el antigeno del Complejo de Histocompatibxlidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde la primera y segunda moléculas de ácido nucleico las capta una célula del individuo, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican dicho inmunógeno y el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo. 2. El método de la reivindicación 1, en donde el inmunógeno es un antigeno patógeno, una proteina asociada con una enfermedad hiperproliferativa, o una proteina asociada con enfermedades autoinmunes . 3. El método de la reivindicación 1, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 4. El método de la reivindicación 3, en donde la proteina de Clase de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase I de Histocompatibilidad Principal, que es un subtipo que se compara con un subtipo del antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicho individuo . 5. El método de la reivindicación 1, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 6. El método de la reivindicación 5, en donde la proteina Clase II de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase I de Histocompatibilidad Principal que es un subtipo que se compara con un subtipo del antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa el individuo . 7. El método de la reivindicación 1, en donde se administra al individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 8. El método de la reivindicación 7, en donde la molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. 9. El método de la reivindicación 1, en donde se administran al individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 10. El método de la reivindicación 9, en donde: la primera molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 y/o dicha segunda molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. 11. El método de la reivindicación 9, caracterizado porque también comprende administrar una tercera molécula de ácido nucleico, en donde esa tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. 12. El método de la reivindicación 1, que comprende el paso de: administrar a dicho individuo mediante administración intramuscular, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunógeno y el antigeno de Histocompatibilidad Principal se expresan, y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo; y/o administrar al individuo, mediante administración intramuscular, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para" la expresión en el individuo, en donde la primera y segunda moléculas de ácido nucleico las capta una célula del individuo, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican dicho inmunógeno y el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo. 13. El método de la reivindicación 1, que comprende el paso de : administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, un plásmido que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el plásmido lo toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunógeno y el antígeno de Histocompatibilidad Principal se expresan, y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo; y/o administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el primero y segundo plásmidos los capta una célula del individuo, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el inmunógeno y el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y se induce una respuesta inmune contra el inmunógeno en el individuo . 14. El método de la reivindicación 1, en donde el individuo está inmunocomprometido . 15. El método de la reivindicación 1, en donde el individuo está inmunosuprimido . 16. El método de la reivindicación 1, en donde el individuo tiene cáncer. 17. El método de la reivindicación 1, en donde la respuesta inmune es profiláctica. 18. El método de la reivindicación 1, en donde la respuesta inmune es terapéutica. 19. Un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno que se enlaza de manera operable a elementos reguladores, y una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a elementos reguladores. 20. El plásmido de la reivindicación 19, en donde dicho inmunógeno es un antigeno patógeno, una proteina asociada con una enfermedad hiperproliferativa, o una proteina asociada con una enfermedad autoinmune. 21. El plásmido de la reivindicación 19, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 22. El plásmido de la reivindicación 19, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 23. El plásmido de la reivindicación 19, caracterizado porque también comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a elementos reguladores. 24. Una composición farmacéutica que comprende el plásmido de la reivindicación 19. 25. Una composición que comprende un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido es un plásmido de conformidad con la reivindicación 19, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. 26. Un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2 que se enlaza de manera operable a elementos reguladores, y una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a elementos reguladores. 27. El plásmido de la reivindicación 26, en donde el antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antígeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 28. El plásmido de la reivindicación 26, en donde el antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antígeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. ? 114 29. Una composición que comprende un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un inmunógeno, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 30. La composición de la reivindicación 29, en donde el inmunógeno es un antigeno patógeno, una proteina asociada con una enfermedad hiperproliferativa, o una proteina asociada con enfermedades autoinmunes. 31. La composición de la reivindicación 29, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un -antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 32. La composición de la reivindicación 29, en donde dicho antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 33. La composición de la reivindicación 29, en donde : el primer plásmido comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a elementos reguladores; y/o . el segundo plásmido comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina E7.2 que se enlaza de manera operable a elementos reguladores; y/o la composición comprende además un tercer plásmido, el tercer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2 que se enlaza de manera operable a elementos reguladores. 34. Un método para reducir el rechazo de células, tejido u órgano donadores no compatibles, en un individuo que experimenta trasplante de células, tejido u órgano, que comprende el paso de: administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antígeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células, tejido u órgano donadores, la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el antígeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende dicho antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de las células, tejido u órgano donadores no compatibles en el individuo; y/o administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células, tejido u órgano donadores, una célula del individuo toma la primera y segunda moléculas de ácido nucleico, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con esa señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de células, tejido u órgano donadores no compatibles en el individuo. 35. El método de la reivindicación 34, en donde la señal de muerte o toxina se selecciona a partir del grupo que consiste de FADD, FAP-1, TRADD, RIP, RAIDD, FAS-L TNF, M0RT1, CRADD, MyD88, ponzoña de insecto, ponzoña de víbora, endotoxinas bacterianas, proteínas de inactivación de ribosoma de cadena doble, y gelonina. 36. El método de la reivindicación 34, en donde se administra al individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleotidos que codifique una señal de muerte o toxina, y una secuencia de nucleotidos que codifique un antígeno Clase I del Complejo. de Histocompatibilidad Principal. 37. El método de la reivindicación 34, en donde la molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteína B7.2. 38. El método de la reivindicación 34, en donde se administra a dicho individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica una señal de muerte o toxina, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 39. El método de la reivindicación 38, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2; y/o la segunda molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2. 40. El método de la reivindicación 38, caracterizado porque también comprende administrar una tercera molécula de ácido nucleico, en donde esa tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2. 41. El método de la reivindicación 34, que comprende el paso de: administrar al individuo mediante administración intramuscular, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleotidos que codifique una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de nucleotidos que codifique un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células, tejido u órgano donadores, la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende ese antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de las células, tejido u órgano donadores no compatibles en el individuo; y/o administrar al individuo, por medio de administración intramuscular, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células, tejido u órgano donadores, una célula del individuo toma la primera y segunda moléculas de ácido nucleico, las secuencias de nucleotidos que codifican el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con esa señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de células, tejido u órgano donadores que no son compatibles en el individuo. 42. El método de la reivindicación 34, que comprende el paso de: administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, un plásmido que comprenda una secuencia de nucleotidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y una secuencia de nucleotidos que codifique un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células, tejido u órgano donadores, la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende ese antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de las células, tejido u órgano donadores no compatibles en el individuo; y/o administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células, tejido u órgano donadores, una célula del individuo toma el primero y segundo plásmidos, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con esa señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de células, tejido u órgano donadores que no son compatibles en el individuo. 43. Un método para reducir el rechazo de células donadoras no compatibles en un individuo que experimente trasplante de células, que comprende el paso de: administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, en donde el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células donadoras, la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de las células donadoras no compatibles en el individuo; y/o administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido - nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células donadoras, una célula del individuo toma la primera y segunda moléculas de ácido nucleico, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende dicho antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con esa señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de células donadoras que no son compatibles en el individuo. 44. El método de la reivindicación 43, en donde la señal de muerte o toxina es FADD, FAP-1, TRADD, RIP, RAIDD, FAS-L TNF, M0RT1, CRADD, MyD88, ponzoña de insecto, ponzoña de víbora, endotoxinas bacterianas, proteínas de inactivación de ribosoma de cadena doble, y gelonina. 45. El método de la reivindicación 43, en donde se administra al individuo, en un sitio en el cuerpo de dicho individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antígeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 46. El método de la reivindicación 43, en donde la molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2. 47. El método de la reivindicación 43, en donde se administra a dicho individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica una señal de muerte o toxina, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 48. El método de la reivindicación 47, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2; y/o la segunda molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2. 49. El método de la reivindicación 47, caracterizado porque también comprende administrar una tercera molécula de ácido nucleico, en donde dicha tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2. 50. El método de la reivindicación 43, que comprende el paso de: administrar al individuo mediante administración intramuscular, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleotidos que codifique una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de nucleotidos que codifique un antigeno Cía- se II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células donadoras, la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende ese antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con dicha señal de muerte o toxina, y se reduce el. rechazo de las células donadoras no compatibles en el individuo; ylo administrar al individuo, por medio de administración intramuscular, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera 7 127 operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células donadoras, una célula del individuo toma la primera y 5 segunda moléculas de ácido nucleico, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno Clase II del 10 Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con esa señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de células donadoras que no son compatibles en el individuo. 15 51. El método de la reivindicación 43, que comprende el paso de: administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, un plásmido que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina que se 20 enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expre- 25 sión en el individuo, en donde el antigeno Clase II del Com-piejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células donadoras, la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibili-dad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende ese antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interac-tuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de las células donadoras no compatibles en el individuo; y/o administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal se compara con las células donadoras, una célula del individuo toma el primero y segundo plásmidos, las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con esa señal de muerte o toxina, y se reduce el rechazo de células donadoras que no son compatibles en el individuo. 52. Un plásmido que comprende una secuencia de nucleótido.s que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores, y una secuencia de nucleótidos que codifica un antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. 53. El plásmido de la reivindicación 52, en donde la señal de muerte o toxina es FADD, FAP-1, TRADD, RIP, RAIDD, FAS-L TNF, MORT1, CRADD, MyD88, ponzoña de insecto, ponzoña de víbora, endotoxinas bacterianas, proteínas de inactivación de ribosoma de cadena doble, y gelonina. 54. El plásmido de la reivindicación 52, en donde el antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antígeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 55. El plásmido de la reivindicación 52, en donde el antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 56. El plásmido de la reivindicación 52, caracterizado porque también comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. 57. Una composición farmacéutica que comprende el plásmido de la reivindicación 52. 58. Una composición que comprende un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido es un plásmido de conformidad con la reivindicación 52, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2. 59. Un plásmido que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a elementos reguladores, y una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina. 60. El plásmido de la reivindicación 59, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal . 61. El plásmido de la reivindicación 59, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 62. Una composición que comprende un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleotidos que codifica una señal de muerte o toxina, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleotidos que codifica un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 63. La composición de la reivindicación 62, en donde la señal de muerte o toxina es ... 64. La composición de la reivindicación 62, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 65. La composición de la reivindicación 62, en donde el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 66. La composición de la reivindicación 62, en donde dicho primer plásmido comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores; o, dicho segundo plásmido comprende además una secuencia de nucleotidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores; o, dicha composición comprende además un tercer plásmido, dicho tercer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores. 6 . Un método para reducir una respuesta inmune dominante en un individuo, que comprende el paso de: a) identificar un subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que forme complejos con una subpoblación de células T asociada con la respuesta inmune dominante; b) administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma la molécula de ácido nucleico, la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo; yl administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica al subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma la primera y segunda moléculas de ácido nucleico, la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la secuencia de nucleótidos que codifica la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo. r 134 68. El método de la reivindicación 67, en donde la señal de muerte o toxina es FADD, FAP-1, TRADD, RIP, RAIDD, FAS-L TNF, M0RT1, CRADD, MyD88, ponzoña de insecto, ponzoña de víbora, endotoxinas bacterianas, proteínas de inactivación de ribosoma de cadena doble, y gelonina. 69. El método de la reivindicación 67, en donde el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un subtipo del antígeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 70. El método de la reivindicación 67, en donde el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un subtipo del antígeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 71. El método de la reivindicación 67, en donde se administra al individuo, en un sitio en el cuerpo de ese individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, y una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 72. El método de la reivindicación 67, en donde se administran al individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 74. El método de la reivindicación 73, en donde: la primera molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteina B7.2 ; y/o la segunda molécula de ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2. 75. El método de la reivindicación 73, caracterizado porque también comprende administrar una tercera molécula de ácido nucleico, en donde esa tercera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la proteína B7.2. 76. El método de la reivindicación 67, que comprende el paso de: administrar al individuo mediante administración intramuscular, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique un subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde la molécula de ácido nucleico la toma una célula del individuo, las secuencias de nucleótidos que codifican el subtipo del antigeno de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo; y/o administrar al individuo, mediante administración intramuscular, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde la primera y segunda moléculas de ácido nucleico las capta una célula del individuo, se expresan las secuencias de nucleótidos que codifican el subtipo del antigeno del Complejo de X 137 Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la 5 célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo. 77. El método de la reivindicación 67, que comprende el paso de: 10 administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, un plásmido que comprenda una secuencia de nu- cleótidos que codifique una señal de muerte o toxina que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en dicho individuo, y una secuencia de 15 nucleótidos que codifique un subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde una célula del individuo toma dicho plásmido, las secuencias de nucleótidos que codi- 20 fican el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, que expresa esa célula, la 25 célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo; ylo administrar al individuo en un sitio en el cuerpo del individuo, un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una señal de muerte o toxina, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, en donde en donde una célula del individuo toma el primero y segundo plásmidos, las secuencias de nucleótidos que codifican el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, que expresa esa célula, dicha célula T muere después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la señal de muerte o toxina, y se reduce la respuesta inmune dominante en el individuo. 78. Un método para expandir una subpoblación de células T, asociada con una respuesta inmune especifica, que comprende los pasos de: a) identificar un subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que forme complejos con una subpoblación de células T asociada con la respuesta inmune dominante ; b) administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo del individuo, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una proteina B7.2, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable a elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma la molécula de ácido nucleico, la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la secuencia de nucleótidos que codifica a B7.2 se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T prolifera después de la formación del complejo, por medio de interactuar con B7.2, y se expande la subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune especifica; y/o administrar al individuo, en un sitio sobre el cuerpo de dicho individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica una proteina B7.2, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleotidos que codifica al subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma las moléculas de ácido nucleico, la secuencia de nucleotidos que codifica el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la secuencia de nucleotidos que codifica la B7.2 se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que expresa dicha célula, esa célula T prolifera después de la formación del complejo, por medio de interactuar con B7.2, y se expande la subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune especifica. 79. El método de la reivindicación 77, en donde el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un subtipo del antigeno Clase I del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 80. El método de la reivindicación 77, en donde el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal es un subtipo del antigeno Clase II del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 81. El método de la reivindicación 77, en donde se administra al individuo, en un sitio en el cuerpo de dicho individuo, una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una B7.2, y una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 82. El método de la reivindicación 77, en donde se administran al individuo, en un sitio en el cuerpo del individuo, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una B7.2, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. 83. El método de la reivindicación 77, que comprende el paso de: administrar al individuo mediante administración intramuscular, una molécula de ácido nucleico que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma la molécula de ácido nucleico, la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2 se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende ese subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T prolifera después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la B7.2, y se expande la subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune especifica; y/o administrar al individuo, por medio de administración intramuscular, una primera molécula de ácido nucleico y una segunda molécula de ácido nucleico, en donde la primera molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una proteina B7.2, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expre-sión en ese individuo, y la segunda molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica dicho subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma las moléculas de ácido nucleico, la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la secuencia de nucleótidos que codifica la B2.7 se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T prolifera después de la formación del complejo, . por medio de interactuar con la B7.2, y se expande la subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune específica. 84. El método de la reivindicación 77, que comprende el paso de: b) administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, un plásmido que comprenda una secuencia de nucleótidos que codifique una proteina B7.2 que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y una secuencia de nucleótidos que codifique dicho subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma el plásmido, la secuencia de nucleótidos que codifica el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la secuencia de nucleótidos que codifica la B7.2 se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T prolifera después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la B7.2, y se expande la subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune especifica; y/o administrar al individuo en un sitio sobre el cuerpo del individuo, un primer plásmido y un segundo plásmido, en donde el primer plásmido comprende una secuencia de nucleotidos que codifica una proteina B7.2, que se enlaza de manera operable a los elementos reguladores necesarios para la expresión en ese individuo, y el segundo plásmido comprende una secuencia de nucleotidos que codifica el subtipo del antígeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal que se enlaza de manera operable con los elementos reguladores necesarios para la expresión en el individuo, una célula del individuo toma el primero y segundo plásmidos, la secuencia de nucleotidos que codifica el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal, y la secuencia de nucleotidos que codifica la B2.7 se expresan, un receptor de células T de una célula T forma un complejo que comprende el subtipo del antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal expresado por esa célula, la célula T prolifera después de la formación del complejo, por medio de interactuar con la B7.2, y se expande la subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune especifica. xr-~ 145 RESUMEN Se describen métodos para inducir una respuesta inmune contra un inmunógeno en un individuo. Los métodos 5 comprenden administrar al individuo una o más moléculas de ácido nucleico, que comprendan una secuencia de nucleótidos que codifique un inmunógeno, y una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal. Las secuencias de nucleótidos que codifica-' al 10 inmunógeno y al antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal se expresan cuando las toman las células del individuo, y se induce en el individuo una respuesta inmune contra el inmunógeno. Se describen métodos para reducir el rechazo de células, tejido u órgano donadores en un individuo 15 que experimente trasplante de células, tejido u órgano. Los métodos comprenden administrar al individuo una o más moléculas de ácido nucleico, que comprendan una secuencia de nucleótidos que codifique una señal de muerte o toxina, ;· una secuencia de nucleótidos que codifique un antigeno del 20 Complejo de Histocompatibilidad Principal, que se compara - on las células, tejido u órgano donadores. Las secuencias de nucleótidos que codifican el antigeno del Complejo de Histocompatibilidad Principal y la señal de muerte o toxina se expresan cuando las toman las células del individuo. La 25 muerte de células T a través de la interacción con la señal de muerte o toxina da como resultado una reducción del rechazo de células, tejido u órgano donadores no compatibles. También se describen métodos para reducir una respuesta inmune dominante en un individuo, y métodos para expandir una 30 subpoblación de células T asociada con una respuesta inmune especifica. Se describen plásmidos y composiciones que comprenden plásmidos útiles para practicar el método.