MX2014015717A

MX2014015717A - Preparacion de una composicion que comprende microburbujas de gas.

Info

Publication number: MX2014015717A
Application number: MX2014015717A
Authority: MX
Inventors: Ole Johannes Tokerud; Svein Kvaale
Original assignee: Ge Healthcare As
Priority date: 2012-06-26
Filing date: 2013-06-25
Publication date: 2015-08-05
Also published as: WO2014001297A3; CN104519989B; KR102139393B1; RU2640078C2; JP6420761B2; AU2017216553A1; US10350314B2; AU2013283409B2; JP2015524792A; HK1209381A1; US20150250904A1; DK2864033T3; KR20150024420A; CA2876950C; AU2013283409A1; RU2014150473A; WO2014001297A2; MX354719B; IN2014DN10714A; EP2864033A2

Abstract

La presente invención se refiere a un procedimiento para la preparación de medios de contraste de ultrasonido, particularmente a composiciones que comprenden microburbujas de gas, y más particularmente a microburbujas encapsuladas por proteínas. Las microburbujas producidas por el procedimiento de la invención tendrán una estrecha distribución de tamaño. La invención además se refiere a un aparato útil en el procedimiento de la invención.

Description

PREPARACION DE UNA COMPOSICION QUE COMPRENDE MICROBURBUJAS DE GAS Campo de la invención La presente invención se refiere a medios de contraste de ultrasonido. De manera más particular, se refiere a un proceso para la preparación de medios de contraste de ultrasonido, en particular a composiciones comprendiendo microburbujas de gas y más particularmente a microburbujas encapsuladas por proteínas preparadas usando energía mecánica.

Antecedentes de la invención Es bien conocido que la imagenología ultrasónica comprende una herramienta diagnóstica valiosa, por ejemplo, en estudios del sistema vascular, en particular en cardiografía, y de microvasculatura de tejido. Una variedad de medios de contraste de ultrasonido ha sido propuesta para mejorar las imágenes acústicas así obtenidas, incluyendo suspensiones de partículas sólidas, gotitas líquidas emulsificadas, burbujas de gas y gases o líquidos encapsulados. Los medios de contraste de ultrasonido más exitosos han consistido generalmente en dispersiones de pequeñas burbujas de gas que pueden ser inyectadas de manera intravenosa. Por ejemplo, WO 97/29783 y WO93/05819 describen tales dispersiones de microburbujas. Si se establece apropiadamente, las microburbujas pueden permitir visualización de ultrasonido altamente efectiva de, por ejemplo, el sistema vascular y microvasculatura de tejido, con frecuencia a dosis ventajosamente bajas. Tales medios de contraste normalmente incluyen un material estabilizador que estabiliza el gas, por ejemplo, emulsificantes, aceites, espesantes o azúcares, o al atrapar o encapsular el gas en una variedad de sistemas, por ejemplo, como micropartículas porosas conteniendo gas o como microburbujas de gas encapsulado. Las microburbujas incluyen un gas que es esencial para el desempeño del agente de contraste de ultrasonido, y una variedad de gases ha sido encontrada por mejorar propiedades tales como la estabilidad de microburbujas y la duración del efecto ecogenico. Un grupo de medios de contraste de ultrasonido es preparado y entregado como una preparación lista para hacerse comprendiendo una composición líquida de microburbujas de gas encapsulado.

Varios procesos pueden ser usados para preparar microburbujas. Tales microburbujas conteniendo gas pueden ser producidas al agitar o sonicar un líquido conteniendo un material formador de membrana en la presencia de un gas o mezcla de gases adecuados. Otros procesos incluyen secado por aspersión. Sin embargo, las microburbujas producidas por tales téenicas tienen una amplia distribución de tamaño, la cual puede variar de lote a lote y más aún el rendimiento, es decir, el porcentaje de material formador de membrana, el cual termina en microburbujas de tamaño apropiado, también puede variar de lote a lote. US5,552,133 describe un proceso para hacer microesferas de gas encapsulado comprendiendo una proteína desnaturalizadle con calor que encapsula un gas, usando un molino coloidal. Una solución acuosa de una proteína desnaturalizare con calor es combinada con un gas, y se mezcla al aplicar fuerzas mecánicas de corte a la mezcla para formar una suspensión de microburbujas de gas, en donde la proteína se vuelve desnaturalizada y depositada en la interfase de gas-solución.

Cuando se preparan microburbujas, es importante tener un proceso fuerte que proporcione repetidamente un producto de acuerdo con las especificaciones de productos. De manera deseable, las microburbujas producidas tendrán una distribución de tamaño estrecha alrededor del tamaño de mciroburbuja deseado, generalmente 1 a 7 pm, por ejemplo, 3-5 pm. De manera deseable, el porcentaje de las microburbujas grandes, tales como por arriba de 7 mm, debería ser mínimo y bien limitado. Para lograr esto, la desviación estándar de los tamaños de microburbuja debería ser pequeña. Esto no se ha logrado cuando se usan los procesos de la téenica anterior. Un reto es producir microburbujas reproducibles teniendo una distribución de tamaño estrecho a lo largo del ciclo de proceso y cada vez que el proceso es corrido. Se ha buscado un proceso fuerte para preparar medios de contraste, tal como para preparar una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas por una proteína desnaturalizada.

Breve descripción de la invención En vista de las necesidades de la técnica, la presente invención proporciona un proceso fuerte para preparar un medio de contraste, tal como para preparar una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas por una proteína desnaturalizada. Se ha identificado y desarrollado ahora un proceso en donde el rendimiento puede ser mejorado y la producción indebida de microburbujas sobredimensionadas y subdimensionadas es evitado. En el proceso de la invención, una solución acuosa de una proteína desnaturalizable con calor es combinada con un gas, y estos son mezclados mecánicamente usando altas fuerzas de corte. De manera sorprendente, se ha encontrado que antes de mezclar la proteína y el gas, tanto la proteína como el gas deberían calentarse, proporcionando un proceso fuerte, en donde las microburbujas generadas tienen una distribución de tamaño estrecha.

De acuerdo con esto, en un primer aspecto, la presente invención proporciona un proceso para preparar una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsulado, que comprende los pasos secuenciales de i) proporcionar una solución acuosa de proteína de una proteína desnaturalizable con calor a una temperatura necesaria para lograr la desnaturalización incipiente; ii) calentar un gas al usar calor a partir de la solución de proteína calentada; ¡ii) mezclar el gas calentado y la solución de proteína calentada para obtener una mezcla de gas/líquido; iv) dispersar el gas en la solución de proteína al someter la mezcla de gas/líquido a fuerzas mecánicas de corte para formar una composición de microburbujas de gas encapsuladas por proteína desnaturalizada.

En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una tubería de alimentación útil en la preparación de una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas, en donde la tubería de alimentación comprende i) una primera entrada y una segunda entrada que proporciona las aberturas respectivas de dos trayectorias, ii) una sección de transferencia de calor que comprende una pared longitudinal que separa las dos trayectorias, ¡ii) una salida conectable a una entrada de un dispositivo de mezclado.

En un tercer aspecto, la presente invención proporciona un aparato que comprende la tubería de alimentación de la presente invención. El aparato de acuerdo con este aspecto puede comprender: i) un dispositivo de mezclado que genera altas fuerzas mecánicas de corte, y que tiene una entrada y una salida; ii) una tubería de alimentación que comprende una primera entrada y una segunda entrada que proporcionan las aberturas respectivas de dos trayectorias, una sección de transferencia comprendiendo una pared longitudinal que separa las dos trayectorias, una salida conectada a la entrada del dispositivo de mezclado; ¡ii) un tanque de alimentación para una composición líquida conectada a la primera entrada de la tubería de alimentación; iv) un tanque de gas conectado a la segunda entrada de la tubería de alimentación.

Breve descripción de las figuras La Figura 1 muestra esquemáticamente un aparato útil en la preparación de una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas por una proteína desnaturalizada.

Las Figuras 2a, 2b y 2c muestran esquemáticamente una tubería de alimentación de acuerdo con la invención comprendiendo dos trayectorias, una para transportar gas y una para la solución de proteína.

Las Figuras 3a, 3b y 3c muestran esquemáticamente una tubería de alimentación alternativa de acuerdo con la invención.

Descripción detallada de la invención En un primer aspecto, la invención proporciona un proceso para preparar una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsulado, comprendiendo los pasos secuenciales de i) proporcionar una solución acuosa de proteína de una proteína desnaturalizare con calor a una temperatura necesaria para lograr desnaturalización incipiente; ii) calentar un gas al usar calor a partir de la solución de proteína calentada; iii) mezclar el gas calentado y la solución de proteína calentada para obtener una mezcla de gas/líquido; iv) dispersar el gas hacia la solución de proteína al someter la mezcla de gas/líquido para fuerzas mecánicas de corte para formar una composición de microburbujas de gas encapsuladas mediante proteína desnaturalizada.

Usando el proceso de la invención, calentar tanto la solución de proteína como el gas antes de entrar al dispositivo de mezclado usado en el paso iv), se evita que el gas se expanda cuando es alimentado hacia el dispositivo de mezclado. Se ha encontrado que esto es un factor clave para proporcionar un proceso estable y microburbujas de una distribución de tamaño estrecha. El proceso usa calor a partir de la solución de proteína para calentar el gas, antes de que éstos se combinen. De ahí, tanto la solución de proteína como el gas a ser encapsulado son precalentados antes de ser introducidos en el dispositivo de mezclado. La proteína es calentada a la temperatura donde ocurre la desnaturalización incipiente de la proteína. La temperatura de desnaturalización es la temperatura en la cual el material insoluble es observado primero. La temperatura de desnaturalización puede ser obtenida a partir de tablas de desnaturalización de proteína térmica en la literatura, o experimentalmente mediante cualquier método conocido. La temperatura de desnaturalización de la proteína en solución normalmente estará en el rango de 50-100°C, variando por diferentes proteínas, pureza y fuente etc. En el proceso de la invención, la albúmina es una proteína preferida para proporcionar microburbujas encapsuladas. Cuando se usa una solución de albúmina, ésta es calentada a 60-80°C, más preferiblemente 65-75°C y muy preferiblemente a 65-75°C, y muy preferiblemente a 68-72°C. La temperatura exacta necesaria depende de varios parámetros, también debería tomarse en consideración que la temperatura puede aumentar ligeramente cuando la mezcla de gas/solución de proteína ha entrado en el dispositivo de mezclado como un resultado de ser expuesto a energía mecánica. Cuando los componentes son introducidos en el dispositivo de mezclado, el calor ha sido transferido de la solución de proteína al gas, asegurando que el gas tiene una temperatura que está cercana a la temperatura en el dispositivo de mezclado, de manera que el gas no se expande significativamente cuando entra al dispositivo de mezclado. De ahí, el gas debería ser calentado a una temperatura cercana a la temperatura de la proteína calentada, tal como a al menos una temperatura de la temperatura de desnaturalización menos 20°C, más preferiblemente a la temperatura de desnaturalización menos 15°C, y más preferiblemente a la temperatura de desnaturalización menos 10°C. Muy preferiblemente, la solución de proteína y el gas tienen aproximadamente la misma temperatura cuando entran al dispositivo de mezclado. La proteína es calentada, por ejemplo, al usar un intercambiador de calor. La transferencia de calor a partir de la solución de proteína al gas puede lograrse al transportar el gas y la proteína calentada en trayectorias en estrecha proximidad unas con otras e ir en paralelo antes de que las dos corrientes separadas sean combinadas e introducidas en el dispositivo de mezclado. De ahí, el calor es transferido desde la solución de proteína a la corriente de gas, de preferencia a traves de paredes conductoras de calor que separan las diferentes trayectorias de una tubería.

En una modalidad adicional de la invención, la mezcla del gas calentado y la solución de proteína calentada tiene lugar en, o muy cerca de, la entrada del dispositivo de mezclado. De ahí, el gas y la solución de proteína son premezclados justo antes de que tenga lugar el paso de dispersión. Se ha encontrado que si el gas y la solución de proteína son combinados a una larga distancia desde la entrada del dispositivo de mezclado, se genera un flujo de tapón y esto crea variación en la distribución de tamaño de las microburbujas producidas. Cuando se combinan los dos componentes en la entrada del dispositivo de mezclado, se logra un mucho mejor control del proceso de mezclado. Así, la solución de proteína y el gas se combinan justo antes o a la entrada del dispositivo de mezclado. Esto es logrado al transportar la solución de proteína y el gas en trayectorias que están en estrecho contacto unas con otras y las cuales van a estar en paralelo antes de que dos corrientes calentadas se combinen cerca de la entrada del dispositivo de mezclado. Al hacerlo así, la corriente de gas y la corriente de solución de proteína entrarán al dispositivo de mezclado como una mezcla uniforme igualmente distribuidas, sin flujo de tapón alguno, y esta es sometida entonces al mezclado mecánico produciendo las microburbujas. Como la fabricación de las burbujas en el dispositivo de mezclado, tal como en un molino, es muy rápida, se ha encontrado importante que el gas y la proteína encapsulante sean distribuidos de manera uniforme, teniendo una concentración estable a lo largo de un ciclo de producción cuando entra al dispositivo de mezclado.

Además, en lugar de bombear la solución de proteína, por ejemplo, al usar una bomba peristáltica, en el aparato de mezclado, se ha encontrado que proporcionar la solución de proteína bajo una presión de alimentación estable, por ejemplo, combinada con una válvula de control que controla la velocidad de flujo, afecta positivamente la distribución de tamaño de las microburbujas generadas. Se experimentó que cuando se prepara una línea de producción incluyendo bombear la solución de proteína calentada en el dispositivo de mezclado, tal como en un molino coloide, la bomba generó pulsos que ensancharon la distribución de tamaño de las microburbujas generadas en el dispositivo de mezclado. De ahí, en una modalidad adicional de la invención, el proceso incluye un paso de alimentar la solución de proteína bajo una presión estable, sin generación de pulso de presión alguno, antes de que esta solución de proteína sea calentada y mezclada con el gas. Tal presión de alimentación estable es lograda mediante el uso de tanque de alimentación presurizado. De ahí, el proceso de preferencia usa una presión estable de la corriente de alimentación de solución de proteína y esto proporciona una velocidad de flujo estable, tal como una velocidad de 0.5-3.0 litros por minuto, por ejemplo, 1 -2 litros por minuto. El flujo de la solución de proteína a partir del tanque de alimentación y la velocidad de flujo de esto es controlado y regulado de manera opcional, de preferencia antes de que inicie el calentamiento.

En una modalidad, el proceso incluye todos los elementos de calentamiento de la corriente de gas y la corriente de solución de proteína, la combinación del gas calentado y la solución de proteína calentada en la entrada del dispositivo de mezclado y alimentación de la solución de proteína bajo una presión estable.

En el proceso de la invención, la mezcla del gas y la solución de proteína se mezclan profundamente al someterla a fuerzas mecánicas de corte. Las fuerzas mecánicas de corte empleadas preparan microburbujas del tamaño requerido.

Esto se logró al usar un dispositivo de mezclado en el cual altas fuerzas mecánicas de corte son producidas, tal como un mezclador de alta velocidad, un molino, un estator de rotor, un fluidificador y similares. En una modalidad preferida de la invención, un molino, tal como un molino coloidal o un molino de cono, es usado en el paso (iv) para dispersar la solución de proteína y el gas. Tal molino comprende un rotor de alta velocidad y un estator acompañante teniendo caras opuestas. Los mezcladores que utilizan un rotor y un estator estacionario normalmente operan a velocidades rotacionales considerablemente altas que producen altas velocidades de punta de rotor. La velocidad diferencial entre el rotor y el estator imparte corte extremadamente alto y energía turbulenta en el orificio entre el rotor y estator. Por lo tanto, la velocidad de punta es un factor muy importante cuando se considera la cantidad de entrada de corte hacia el producto. En el proceso de la invención, la velocidad relativa de las superficies de rotor y estator debería ser al menos 20 m/s. Si el rotor es cónico, como se prefiere, la velocidad en la superficie dependerá del diámetro y de ahí variar sobre el cono desde la punta hasta la base. Así, la mezcla calentada de gas y solución de proteína es pasada a través de una zona en la cual es sometida a fuerzas de corte ejercidas por superficies que se mueven en relación unas a otras a una velocidad de al menos 20 m/s, de preferencia al menos 25 m/s, especialmente de preferencia al menos 30 m/s, y más especialmente de preferencia al menos 35 m/s, por ejemplo, hasta 100 m/s, más particularmente hasta 60 m/s, y en especial hasta 50 m/s, en la punta.

En una modalidad de la invención, el proceso incluye un paso adicional, después del paso iv, transferir la composición preparada en recipientes de granel o directamente en un tanque de llenado. El recipiente de granel es, por ejemplo, una bolsa flexible grande, por ejemplo, de un volumen de 10 - 100 litros. Antes de transferir el producto preparado, es decir, la composición comprendiendo microburbujas de gas encapsulado, a partir del dispositivo de mezclado al recipiente de granel o tanque de llenado, la temperatura de la composición es reducida, por ejemplo, mediante el uso de un intercambiador e calor. La temperatura del flujo de producto fuera del dispositivo de mezclado es, por ejemplo, reducida a una temperatura de 20-30°C, tal como 25-28°C.

Usando el proceso de la invención se logra una distribución de tamaño estrecha de las microburbujas generadas, y el proceso proporciona repetidamente un producto de acuerdo con las especificaciones de producto. Esto es importante con el fin de proporcionar un proceso económicamente viable, en particular cuando los ingredientes usados son costosos, y la pérdida de material debido a la producción de microburbujas no cumple los requerimientos de especificación son evitados por este proceso. Además de las mejoras del proceso reclamado, los parámetros como el flujo del gas y el flujo de la solución de proteína, y la proporción entre éstos, la temperatura de la solución de proteína y la velocidad del mezclador (velocidad de rotor) afectan las características del producto y necesitan optimizarse. Para cualquier producto dado, sus características son definidas clínicamente. Por ejemplo, para OptisonMR el rango de diámetro promedio es 3.0-4.5 pm, en donde 95% son menos de 10 pm. La especificación de concentración es 5.0-8.0 x 108 microburbujas/ml. Las microburbujas preparadas por el proceso de la invención tienen una distribución de tamaño estrecha y un tamaño de partícula promedio bien definido teniendo una baja desviación estándar. Las microburbujas producidas tendrán una distribución de tamaño estrecha aproximadamente el tamaño de microburbuja deseado, generalmente 1 a 7 mm, por ejemplo 3-5 pm, y la desviación estándar es pequeña. En un rango de ejemplos de corrida, como se muestra en el Ejemplo 1 , el tamaño de partícula promedio logrado fue muy estable y varió entre 2.8 y 4.3 pm. Al usar el proceso de la invención, tal como cuando se producen microburbujas de albúmina de suero humano y un gas perfluorado, se logró una desviación estándar en tamaño de partícula de 0.18-0.25 pm. Dado en porcentaje, una desviación estándar para el tamaño de partícula de menos de 20%, tal como menos de 10% es logrado por el proceso. Cuando se preparan partículas teniendo un tamaño de partícula promedio dentro del rango de 3.0-4.5 pm, se logra una desviación estándar de 7.3% o menor. Además, una concentración bien definida de microburbujas (partículas/volumen) es lograda teniendo una desviación estándar baja. Una concentración que varía desde 3.1 a 1 1.8 x 108 microburbujas/ml fue lograda, como se reporta en el ejemplo 1 , con una mayoría de las corridas proporcionando una concentración entre 5.0 y 8.0 x 108 microburbujas/ml. La desviación estándar en concentración es, por ejemplo, entre 0.40 y 0.70 x 108 microburbujas/ml. Dado en porcentaje, una desviación estándar para la concentración obtenida es menor que 15% y más preferiblemente menor que 12%. De ahí, los requerimientos de acuerdo con la especificación de producto con respecto a concentració y tamaño de partículas son logrados por el proceso reclamado.

Las microburbujas de gas preparadas de acuerdo con el proceso de la invención son estabilizadas por un agente estabilizante, el cual encierra las microburbujas de gas, retardando la difusión del gas hacia el líquido circundante y previniendo la fusión entre microburbujas. Para el proceso de la invención, tal agente estabilizante es sensible al calor, de manera que puede volverse parcialmente insolubilizado al cantar durante el proceso de producción. El material preferido para formar las microburbujas es un polímero de aminoácido. Tales polímeros son biodegradables mediante acción de enzimas proteolíticas. Polímeros de aminoácidos utilizables incluyen aminoácidos naturales (proteínas) y polímeros de aminoácidos sinteticos. La proteína preferida es albúmina, la cual puede ser albúmina animal o humana, pero muy preferiblemente albúmina de suero humano. Otras proteínas solubles en agua, tal como hemoglobina, pueden ser substituidas para albúmina, de preferencia hemoglobina humana. Los polímeros de aminoácidos sintéticos utilizables incluyen poli-L-lisina y ácido poli-L-glutámico. Por ejemplo, una poM-L-lisina o ácido poli-L-glutámico en el rango de peso molecular de 20,000-50,000 puede usarse solo o en combinación con otro polímero, tal como albúmina. Los derivados de proteína o fracciones de proteínas tambien están dentro del alcance de la invención. La temperatura de desnaturalización real está en un rango dependiendo de la proteína o derivados de proteína usados.

Los gases biocompatibles pueden ser empleados en las microburbujas de las composiciones, apreciándose que el término “gas”, incluye cualquier substancia (incluyendo mezclas) substancial o completamente en forma gaseosa (incluyendo vapor) a la temperatura corporal humana normal de 37°C. Así, el gas puede comprender, por ejemplo, aire, nitrógeno, oxígeno, dióxido de carbono, hidrógeno, óxido nitroso, un gas inerte, tal como helio, argón, xenón o criptón; un fluoruro de azufre, tal como hexafluoruro de azufre, decafluoruro de diazufre o pentafluoruro de trifluorometilazufre; hexafluoruro de selenio; un silano opcionalmente halogenado, tal como tetrametilsilano; un hidrocarburo de bajo peso molecular (por ejemplo, conteniendo hasta 7 átomos de carbono), por ejemplo, un alcano tal como metano, etano, un propano, un butano o un pentano, un cicloalcano, tal como ciclobutano o ciclopentano, un alqueno, tal como propeno o un buteno, o un alqumo, tal como acetileno; un éter; una cetona; un éster; un hidrocarburo de bajo peso molecular halogenado (por ejemplo, conteniendo hasta 7 átomos de carbono); o una mezcla de cualquiera de los anteriores.

Las composiciones comprendiendo un hidrocarburo de bajo peso molecular halogenado son preferidas. Al menos algunos de los átomos de halógeno en gases halogenados ventajosamente son átomos de flúor. Así, los gases de hidrocarburo halogenado biocompatibles pueden ser seleccionados, por ejemplo, de bromoclorodifluorometano, clorodifluorometano, diclorodifluorometano, bromotrifluorometano, clorotrifluorometano, cloropentafluoroetano, diclorotetrafluoroetano y perfluorocarburos, por ejemplo, perfluoroalcanos, tales como perfluorometano, perfluoroetano, perfluoropropanos, perfluorobutanos (por ejemplo, perfluoro-n-butano, opcionalmente en mezcla con otros isómeros, tal como perfluoroisobutano), perfluoropentanos, perflurohexanos y perfluoroheptanos; perfluoroalquenos, tal como perfluoropropeno, perfluorobutenos (por ejemplo, perfluorobut-2-eno) y perfluorobutadieno; perfluoroalqumos, tal como perfluorobut-2-ino; y perfluorocicloalcanos, tal como perfluorociclobutano, perfluorometilciclobutano, perfluorodimetilciclobutanos, perfluorotrimetilciclobutanos, perfluorociclopentano, perfluorometi Iciclo pe ntano, perfluorodimetilciclopentanos, perfluorociclohexano, perfluorometilciclohexano y perfluorocicloheptano. Otros gases halogenados incluyen cetonas fluoradas, por ejemplo, perfluoradas, tal como perfluoroacetona y éteres fluorados, por ejemplo, perfluorados, tal como perfluorodietil éter. Además, puede ser ventajoso usar el proceso de la invención para composiciones comprendiendo gases fluorados, tales como fluoruros de azufre o fluorocarburos (por ejemplo, perfluorocarburos), los cuales son conocidos por formar suspensiones de microburbujas particularmente estables, en donde SF6, perfluoropropano y perfluorobutano son preferidos, y el perfluoropropano es particularmente preferido.

Muy preferiblemente, el proceso de la invención es para la preparación de una composición comprendiendo microburbujas comprendiendo proteínas, muy preferiblemente comprendiendo albúmina, encapsulando un gas de perfluorocarburo, muy preferiblemente perfluoropropano, tambien llamado octafluoropropano (OFP) o perflutreno. En una modalidad preferida, el producto OptisonMR es producido de acuerdo con el proceso reclamado.

En un segundo aspecto, la invención proporciona una composición preparada de acuerdo con el proceso del primer aspecto. La composición puede ser para fines terapéuticos o diagnósticos, o combinados, y es de preferencia para uso diagnóstico como un medio de contraste de ultrasonido. La composición es de preferencia una preparación ya hecha, es decir, la composición es de preferencia una dispersión de microburbujas de gas en un portador acuoso fisiológicamente aceptable, tal como en agua para inyección. Después de llenar en recipientes más pequeños, tal como en viales o botellas, y taponar, puede ser necesaria la re-suspensión mediante agitación suave para proporcionar una suspensión homogénea antes de inyectar a un paciente. De ahí, la composición está lista para ser inyectada en un paciente, siendo un ser humano o animal. Los medios de contraste de ultrasonido, en donde la microburbuja comprende un vector teniendo afinidad para un objetivo biológico también son abarcados. Pueden emplearse una variedad de téenicas de imagenología en aplicaciones de ultrasonido, por ejemplo, incluyendo una imagenología de modo B armónica y fundamental y imagenología de Doppler armónica y fundamental; si se desea, pueden usarse técnicas de imagenología tridimensionales.

En un tercer aspecto, la invención proporciona una tubería de alimentación útil en la preparación de una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas, en donde la tubería de alimentación comprende i) una primera entrada y una segunda entrada que proporcionan las aberturas respectivas de dos trayectorias, ii) una sección de transferencia de calor comprendiendo una pared longitudinal que separa las dos trayectorias, iii) una salida conectable a una entrada de un dispositivo de mezclado.

Las dos entradas son diseñadas para ser conectadas con líneas o tubos de transferencia, por ejemplo, al usar abrazaderas, tal como abrazaderas de árbol, que proporcionan conexiones a prueba de fugas. De preferencia, una entrada es conectable con un tubo que transporta una composición líquida, tal como una solución acuosa de una proteína desnaturalízale por calor, y la otra entrada es conectable con un tubo que transporta un gas, tal como un gas de perfluorocarburo. Las dos entradas son separadas, proporcionando aberturas de dos secciones de tubería, que son combinadas, visto desde el exterior, en el inicio de la sección de transferencia de calor.

La sección de transferencia de calor de preferencia forma una parte predominante de la tubería, en donde las dos trayectorias van en paralelo y el calor puede ser transferido desde una corriente transportada en una trayectoria a la corriente de la otra trayectoria. De preferencia, la tubería tiene, al menos en la sección de transferencia de calor, una superficie cilindrica exterior que proporciona dos trayectorias separadas en una tubería cilindrica, en donde las trayectorias son separadas por una pared interior longitudinal que previene la mezcla de las corrientes que corre en las trayectorias. En una modalidad, el volumen cilindrico interior es dividido en dos mitades por una pared longitudinal que proporciona dos mitades de tuberías, una para cada trayectoria. En otra modalidad, las dos trayectorias son separadas al tener una tubería interior que corre dentro de la tubería exterior. De ahí, en esta modalidad la pared longitudinal forma una tubería interior cilindrica, de manera que una trayectoria corre dentro de la otra trayectoria, en donde las dos tuberías de preferencia tienen la misma línea central. De preferencia, la corriente de gas corre en la trayectoria interior y la composición líquida corre en la trayectoria exterior. Cuando existe una diferencia de temperatura entre las corrientes en las dos trayectorias, esta diferencia disminuirá conforme las corrientes se mueven en paralelo hacia la salida. La longitud de la tubería debería ser suficientemente larga para permitir suficiente transferencia de calor desde la corriente de una trayectoria a la otra. La longitud de la sección de transferencia de calor es suficientemente larga para asegurar el intercambio de calor deseado y es, por ejemplo, 10-100 cm, tal como 15-50 cm, de preferencia 20-40 cm. Un tamaño de diámetro interior apropiado para la entrada para la composición líquida es 5 - 40 mm, tal como 15-25 mm. Un tamaño de diámetro apropiado para la entrada para el gas es 0.5-40 mm. En la modalidad, en donde la tubería es dividida en dos mitades de tubería, la entrada de gas puede tener las mismas dimensiones que la entrada para la solución de proteína. En una modalidad, en donde la corriente de gas corre en una tubería interior, el diámetro de la tubería de gas es de preferencia considerablemente menor que el diámetro de la tubería para la solución de proteína, por ejemplo, son 0.5-3.0 mm. Para la sección de transferencia de calor, el diámetro exterior es de preferencia aproximadamente el mismo que el diámetro exterior de la primera sección de tubería para la solución de proteína, por ejemplo, 10-45 mm.

La salida de la tubería de alimentación es conectable con una entrada de un dispositivo de mezclado, usando por ejemplo, una abrazadera, tal como una abrazadera de árbol, proporcionando una conexión a prueba de fugas. En, o cerca de, la salida de la tubería, la pared interior longitudinal termina y las dos trayectorias de la tubería son combinadas, de manera que las corrientes que corren en estas se mezclarán, proporcionando una composición uniforme la cual es continuamente la misma a lo largo del proceso. De acuerdo con esto, cuando la tubería de alimentación es conectada a un dispositivo de mezclado ya sea una composición recién mezclada entrará a ésta o la composición líquida y el gas se mezclarán en la entrada o justo después de entrar en ésta. En la modalidad, en donde el gas corre en una tubería interior, esta tubería puede tener, y tener la salida, en el mismo lugar que la salida de la solución de proteína. De ahí, la tubería interior y exterior tiene entonces la misma longitud. De manera alternativa, la tubería interior puede terminar ligeramente antes que la salida de la tubería exterior, asegurando que los dos componentes se mezclan antes de entrar al dispositivo de mezclado. Todavía en otra modalidad, la tubería interior puede ser más larga que la tubería exterior y extenderse fuera de la salida de la tubería exterior. En esta alternativa, cuando la tubería de alimentación es acoplada al dispositivo de mezclado, la tubería interior se extenderá al dispositivo de mezclado. En la modalidad en donde la sección de transferencia de calor de la tubería es dividida en dos mitades de tubería por una pared longitudinal, esta pared puede terminar a la salida de la tubería o de manera alternativa, ligeramente antes de la salida, asegurando que los componentes son mezclados antes de entrar al dispositivo de mezclado.

La tubería de alimentación puede ser de cualquier material conveniente o combinación de materiales, pero deseablemente será de metal o cerámica, en particular de un metal tal como acero, de preferencia acero inoxidable.

En otro aspecto, la invención proporciona un aparato para la preparación de una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsulado, el aparato comprende una tubería de alimentación como se describe en el tercer aspecto de la invención.

El aparato de la invención comprende, de ahí i) un dispositivo de mezclado generador de altas fuerzas mecánicas de corte, y teniendo una entrada y una salida; ii) una tubería de alimentación que comprende una primera entrada y una segunda entrada que proporciona las aberturas respectivas de dos trayectorias, una sección de transferencia de calor que comprende una pared longitudinal que separa las dos trayectorias, una salida conectada a la entrada del dispositivo de mezclado; iii) un tanque de alimentación para composición líquida conectado a la primera entrada de la tubería de alimentación; iv) un tanque de gas conectado a la segunda entrada de la tubería de alimentación.

El dispositivo de mezclado es un dispositivo en el cual se producen altas fuerzas mecánicas de corte, tal como un mezclador de alta velocidad, un molino, un rotor estator, un fluidificador o similar. En una modalidad preferida de la invención, el dispositivo de mezclado es un molino, tal como un molino coloidal o un molino de cono, y este es usado en la dispersión de la solución de proteína y el gas. Tal molino comprende un rotor de alta velocidad y un estator acompañante que tiene caras opuestas, es decir, un mezclador en el cual la mezcla inicial es pasada a través de una zona en la cual las fuerzas de corte son ejercidas sobre ella mediante rotación relativa de dos superficies, una en un elemento referido como rotor y la otra en un elemento referido como un estator. Los mezcladores que utilizan un rotor y un estator estacionario normalmente operan a velocidades rotacionales considerablemente altas que producen altas velocidades de punta de rotor. La velocidad diferencial entre el rotor y el estator imparte corte extremadamente alto y energía turbulenta en la abertura entre el rotor y el estator. En el dispositivo de mezclado del aparato de la invención, las superficies que se mueven relativamente una a otra para crear las zonas de fuerza de corte están deseablemente separadas unas de otras por menos de 2 mm, de preferencia menos de 1 mm, especialmente de preferencia menos de 600 mm, por ejemplo, 300 a 500 pm. La distancia entre el rotor y el estator es de preferencia ajustable, por ejemplo, entre 0.2-0.6 mm. La separación óptima dependerá de la viscosidad de la mezcla que pasa a través de las zonas de fuerza de corte y la separación mínima puede ser impuesta por restricciones de fabricación. La mezcla de solución de proteína/gas es dispersada y cavita entre las superficies del rotor y estator. El dispositivo de mezclado de preferencia comprende además una cámara de mezclado dispuesta con un rotor y medios impulsores para el mismo, incluyendo un motor y cojinetes. El mezclador tiene en relación enfrentada al rotor de un estator, el estator y el rotor pueden tener superficies suaves o pueden tener, en una modalidad, crestas y surcos de enclavamiento que se extienden axialmente provistos con medios de tránsito de fluido que se extienden radialmente, por lo cual definen una pluralidad de zonas de fuerza de corte para pasar fluido radialmente entre el rotor y el estator desde la entrada. En el aparato mezclador de la invención, la invención es ubicada de preferencia radialmente hacía adentro de las zonas de fuerza de corte, de preferencia en o cerca del eje de rotación del rotor.

Deseablemente, la entrada del dispositivo de mezclado es adyacente a la flecha impulsora para el rotor, de manera que la mezcla de gas y solución de proteína de la salida de tubería de alimentación puede ser premezclada adicionalmente si es necesario, en la cámara de premezclado antes de entrar a las zonas de fuerza de corte.

Para asegurar que el mezclado adecuado ocurre, un segundo rotor, y si se desea rotores adicionales, por ejemplo, hasta 5 rotores, pueden ser provistos, impulsado por los mismos medios impulsores, de preferencia una flecha impulsora rotatoria. Donde se proporciona un segundo rotor, el mezclador deseablemente tendrá una segunda cámara de mezclado teniendo un puerto de entrada que comunica con el puerto de salida de la primera cámara y teniendo su propio puerto de salida.

Los rotores y estatores pueden ser de cualquier material conveniente o combinación de materiales, pero deseablemente será de metal o cerámica, en particular de un metal, tal como acero. Más aún, si se desea, las superficies de rotor y estator pueden ser recubiertas o tratadas para proporcionar rendimiento óptimo o características para el producto final. La dimensiones de los componentes de rotor y estator dependerán del material a partir del cual el rotor es hecho, los límites de tamaño superior de vesícula pretendidos, velocidades de rotación, diámetros de rotación de 5000 a 12000 rpm, y mezclas acuosas, diámetros de rotor de hasta 25 cm, por ejemplo 7.5 a 15 cm, pueden usarse. Sin embargo, estos parámetros no son limitantes y pueden producirse dispositivos de mezclado útiles en el aparato de la invención con otras dimensiones, materiales y velocidades de operación.

Como el dispositivo de mezclado del aparato de la invención puede generar un efecto de calentamiento notable y como el tamaño y estabilidad de microburbuja pueden ser afectados por la temperatura, es particularmente deseable proporcionar el dispositivo de mezclado con medios de control de temperatura, por ejemplo, calentamiento de termostato controlado o medios de enfriamiento, tal como una chaqueta de enfriamiento que rodea la cámara de mezclado o de manera alternativa, un elemento de enfriamiento, tal como un intercambiador de calor dentro o en conexión térmica con el estator o el rotor, o de manera alternativa o adicional, un elemento de enfriamiento dentro o en conexión térmica con la flecha impulsora de rotor o el sello mecánico que rodea la flecha impulsora de rotor. La temperatura de la mezcla puede ser monitoreada a la salida de cada cámara de mezclado o en el borde del rotor y esto puede ser usado para controlar tal medio de control de temperatura. Además, es deseable proporcionar el dispositivo de mezclado con un elemento de enfriamiento, tal como un intercambiador de calor, en conexión térmica con la corriente de producto a partir de la salida del dispositivo de mezclado, para reducir la temperatura del producto de corriente de producto que fluye fuera del dispositivo de mezclado, por ejemplo, a una temperatura de 20-30°C, tal como a 25-28°C. La salida es de preferencia posicionada hacia el fondo del molino.

La tubería de alimentación del aparato es descrita en el tercer aspecto.

El aparato incluye además un tanque de alimentación para una composición líquida, tal como una solución de proteína, conectada a la primera entrada de la tubería de alimentación, vía otras entidades como se describe a continuación. El tanque de alimentación es un tanque de alimentación presurizado que proporciona una presión de alimentación estable, y se ha encontrado que esto afecta positivamente la distribución de tamaño de las microburbujas generadas, proporcionan una distribución de tamaño estrecha. El tanque de alimentación es presurizado, por ejemplo, al soplar un gas inerte, tal como aire comprimido o gas de nitrógeno en el tanque de alimentación. De preferencia, este gas es adicionado a traves de un filtro estéril. La presión en el tanque de alimentación es, por ejemplo, 0.5-3.0 barG (igual a 1.5-4.0barA) y es de preferencia 1 -2 barG. Tal tanque de alimentación presurizado puede incluir además medios de mezclado, tal como un agitador, proporcionando que una mezcla homogénea sea calentada y entregada en el dispositivo de mezclado. El tanque de alimentación es, por ejemplo, 10-200 litros, tal como 50-150 litros, y proporciona una velocidad de flujo estable, tal como una velocidad de 0.5-3.0 litros por minuto, por ejemplo, 1 -2 litros por minuto. El flujo de la solución de proteína a partir del tanque de alimentación y la velocidad de flujo de ésta es controlado y opcionalmente regulado, de preferencia antes de que inicie el calentamiento. Esto puede hacerse al incluir un controlador de flujo y una válvula reguladora en la salida del tanque de alimentación. Además, entre el tanque de alimentación y la tubería de alimentación, la corriente de alimentación de solución de proteína es calentada a una temperatura necesaria para lograr desnaturalización incipiente de la proteína. Es deseable proporcionar la corriente de alimentación con medios de control de temperatura, por ejemplo, calentamiento controlado por termostato, tal como por un intercambiador de calor dentro o en conexión termica con la corriente de alimentación. La temperatura de la corriente de alimentación de solución de proteína puede ser monitoreada antes de introducirse en la tubería de alimentación, en donde el calor será transferido de la corriente de alimentación de solución de proteína al gas.

El aparato incluye además un tanque de gas conectado a la segunda entrada de la tubería de alimentación, vía otras entidades como se describe más adelante. El tanque de gas es la fuente del gas a ser encapsulado en las microburbujas. La velocidad de flujo de gas de éste es controlada y opcionalmente regulada, de preferencia antes de que el gas entre a la tubería de alimentación, en donde es calentado. Esta regulación puede hacerse al incluir un controlador d eflujo y una válvula reguladora a la salida del tanque de gas. El tanque de gas proporciona el gas bajo presión, por ejemplo, bajo una presión de 1 -4 barG. La velocidad de flujo de gas es, por ejemplo, 0.5-2.5 litros/minuto. Sin embargo, la presión del gas en el molino es fijada por el número de revoluciones por minuto y de la velocidad de flujo, y no puede ser regulada fácilmente por el gas.

Uno o más filtros estériles pueden ser incluidos en el aparato para eliminar o matar todas las formas de vida microbiana, incluyendo agentes transmisibles.

Modalidades preferidas de la invención serán ahora descritas a manera de ejemplo solamente y con referencia a los dibujos acompañantes, en los cuales la Figura 1 muestra esquemáticamente un aparato de acuerdo con la invención, y el cual es útil en la preparación de una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas por una proteína desnaturalizada. De ahí, la Figura 1 muestra un aparato 1 , en donde los componentes principales son un dispositivo de mezclado 20, una tubería de alimentación 30, un tanque de alimentación 40 para composición líquida y un tanque de gas 50. El tanque de alimentación 40 comprende una solución líquida 42, tal como, por ejemplo, una solución de albúmina de suero desnaturalizare. En el tanque de alimentación 40 se encuentran los componentes 41 , formando la solución que es alimentada. En una modalidad preferida, tales componentes son albúmina de suero 41 a, por ejemplo, provista en una solución al 5%, agua para inyección 41 b y NaCI 41 c, de preferencia en una solución al 0.9%, haciendo una solución de albúmina de suero humano al 1 % 42. Aire comprimido, o gas nitrógeno, es soplado hacia el tanque de alimentación 40 a traves de un filtro estéril 44, para presurizar el contenido. Además, una unidad de control de temperatura 47 es conectada al tanque de alimentación 40. Para proporcionar una solución homogénea 42, un agitador 46 es incluido adicionalmente en el tanque de alimentación 40. El flujo de la solución de proteína desde el tanque de alimentación 40 es controlado y opcionalmente regulado por un controlador de flujo 62 y una válvula reguladora 64 cerca de la salida del tanque de alimentación 40. La solución es de preferencia corrida entonces a través de un filtro estéril 66. Además, entre el tanque de alimentación 40 y la tubería de alimentación 30, la corriente de solución de proteína 42 es calentada a una temperatura necesaria para lograr la desnaturalización incipiente de la proteína usando un intercambiador de calor 68. Despues de haber sido calentada a la temperatura deseada, la solución de proteína entra a la tubería de alimentación 30, a través de una entrada 32.

El tanque de gas 50 proporciona el gas 52 a ser encapsulado en las microburbujas. El flujo del gas desde el tanque de gas 50 es controlado y regulado opcionalmente por un controlador de flujo 72 y una válvula reguladora 74 cerca de la salida del tanque de gas 50. Antes de entrar a la tubería de alimentación 30, el gas 52 de preferencia corre a través de un filtro estéril 76. El gas entra entonces a la tubería de alimentación 30 a través de una entrada 34, separada de la entrada 32 para la solución de proteína. En la tubería de alimentación 30, habrá una transferencia de temperatura desde la solución de proteína al gas, asegurando que el gas no se expanda de importancia cuando entra al dispositivo de mezclado 20. La solución de proteína 42 y el gas 52 fluyen fuera de una salida 36 de la tubería 30 y hacia el dispositivo de mezclado 20 a través de una entrada 24, como una composición mezclada. La salida 36 de la tubería de alimentación 30 y la entrada 24 del dispositivo de mezclado 20 pueden estar conectados, por ejemplo, por una abrazadera. El dispositivo de mezclado 20 comprende un molino 22 que comprende un rotor 25 y un estator 26, en donde el rotor 25 es impulsado por un motor 29 y un medio impulsor para lo mismo, incluyendo cojinetes 28 y sistemas de enfriamiento opcionales. El producto generado 80, es decir, de preferencia, una composición de microburbujas de gas encapsuladas por proteína desnaturalizada, es retirado del dispositivo de mezclado de preferencia al fondo del molino 22. La temperatura de la corriente de producto 80 es medida opcionalmente y regulada usando una unidad de control de temperatura 82, por ejemplo, comprendiendo un intercambiador de calor.

Las Figuras 2 y 3 muestran tuberías de alimentación alternativas de acuerdo con la invención. La Figura 2a muestra una tubería de alimentación 30 teniendo una primera entrada 32 que proporciona la abertura a una primera sección de tubería 33. La entrada 32, la cual es de preferencia para alimentar una solución de proteína, tiene una circunferencia 32a conectable con un tubo o línea de transferencia usando una abrazadera. Una segunda entrada 34, con una circunferencia 34a, proporciona la abertura a una segunda sección de tubería 35, de preferencia para para alimentar un gas. Las secciones de tubería 34 y 35 son fusionadas, visto desde el exterior, en un punto de combinación 37, proporcionando una tubería con una pared cilindrica exterior 38 y una pared longitudinal interior 31 que separa las dos corrientes. La sección de la tubería 30 desde el punto de combinación 37 al extremo de la pared longitudinal 31 cerca de la salida 36 proporciona la sección de transferencia de calor. Como se muestra, la pared longitudinal 31 termina ligeramente antes de la salida 36. En otras modalidades, la pared puede terminar más cercana a o en la salida 36. La salida 36 de la tubería 30 tiene una circunferencia 36a conectable con una entrada de un dispositivo de mezclado usando, por ejemplo, una abrazadera. La Figura 2b muestra la sección transversal de la sección de transferencia de calor de la tubería 30 teniendo una pared longitudinal 31 y una pared cilindrica exterior 38. La Figura 2c muestra la tubería 30 desde una vista lateral vista de la salida 36, teniendo una primera entrada 32 con una circunferencia 32a y una segunda entrada 34 con una circunferencia 34a, y teniendo una pared cilindrica exterior 38.

Las figuras 3a-c muestran una tubería de alimentación alternativa, en donde la figura 3a muestra la tubería de alimentación 30 que tiene una primera entrada 32 que proporciona la abertura a una primera sección de tubería 33. La entrada 32, la cual es de preferencia para alimentar una solución de proteína, tiene una circunferencia 32a. Una segunda entrada 34, con una circunferencia 34a, proporciona la abertura a una segunda sección de tubería 35, de preferencia para alimentar un gas. Las secciones de tubería 33 y 35 son fusionadas, vistas desde el exterior, en un punto de combinación 37, proporcionando una tubería con una pared cilindrica exterior 38 y que corre dentro de esta tubería interior 31 para la alimentación de gas. La sección de la tubería 30 desde el punto de combinación 37 a la salida 36 proporciona la sección de transferencia de calor. Como se muestra, la tubería interior 31 termina ligeramente fuera de la salida 36, teniendo una salida 39. En otras modalidades, la tubería puede terminar más cerca de o a la salida o ligeramente antes de la salida 36. La salida 36 de la tubería 30 tiene una circunferencia 36a conectable con una entrada de un dispositivo de mezclado usando, por ejemplo, una abrazadera. La figura 3b muestra la sección transversal de la sección de transferencia de calor de la tubería 30 teniendo una tubería interior 31 y una pared cilindrica exterior 38. La figura 3c muestra la tubería 30 vista desde la salida 36, teniendo una primera entrada 32 con una circunferencia 32a y una segunda entrada 34 con una circunferencia 34a, y teniendo una pared cilindrica exterior 38.

La invención será ilustrada ahora con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.

Ejemplos Ejemplo 1 : Preparación de OptisonMR Los lotes de OptisonMR fabricados de acuerdo con el proceso de la invención, han sido evaluados y comparados con respecto a la variabilidad y predictibilidad con un proceso de una tercera parte. El propósito fue comparar la predictibilidad de dos metodos de fabricación con el fin de entender la predictibilidad futura de calidad de producto.

Material y métodos Se fabricaron 25 experimentos que preparan lotes de OptisonMR por GE Healthcare de acuerdo con el proceso reclamado, y 19 experimentos que preparan lotes de OptisonMR fabricados por un proceso de tercera parte, han sido evaluados y comparados con respecto a variabilidad y predictibilidad.

El proceso de GE incluyó el uso de un aparato como se muestra en la Figura 1 incluyendo una tubería de alimentación, en donde el calor es transferido desde la solución de proteína (albúmina de suero humano) al gas (perfluoropropano = OFP) y en donde la solución de proteína y el gas se mezclan justo antes del paso de dispersión, usando un molino. Un tanque de alimentación presurizado fue usado para entrega de la solución de proteína al molino.

El proceso de la tercera parte incluyó un aparato en donde una solución de proteína calentada (albúmina de suero humana) fue mezclada con un gas no calentado (OFP) a una distancia de aproximadamente 1 metro antes de que entre al molino. Se usó una bomba peristáltica para entrega de la solución de proteína al molino.

Resultados Los datos brutos son dados en las Tablas 1 y 2, proporcionando los parámetros usados en los dos procesos. Los tamaños de partícula promedio y las concentraciones obtenidas fueron identificados.

Tabla 1. Datos a partir de proceso de tercera parte - para comparación Tabla 2. Datos del proceso de GE Se encontraron las desviaciones estándares (SD) (-raíz cuadrada promedio de error de calibración RMSEC) para el tamaño de partícula obtenido y para la concentración: Proceso de tercera parte Tamaño de partícula promedio: SD de 0.33 mm Concentración: SD de 1.19 x 10® microburbujas/ml Proceso reclamado: Tamaño de partícula: SD de 0.22 pm Concentración: SD de 0.55 x 10® microburbujas/ml Las desviaciones estándares indican una reproducibilidad de fabricación incrementada, y de ahí una predictibilidad incrementada de calidad de producto, al aplicar el nuevo y mejorado proceso de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un proceso para preparar una composición que comprende microburbujas de gas encapsulado, que comprende los pasos secuenciales de: i) proporciona una solución acuosa de proteína calentada de una proteína desnaturalizadle por calor a una temperatura necesaria para alcanzar una desnaturalización incipiente, donde dicha temperatura está en el rango de 50-100°C; ii) calentar un gas al usar calor a partir de dicha solución de proteína calentada, en donde el gas es calentado a una temperatura no menor que 20°C por abajo de la temperatura de dicha solución de proteína calentada; ¡ii) mezclar el gas calentado del paso (ii) y la solución de proteína calentada del paso (i) para obtener una mezcla calentada de gas/líquido; iv) dispersar el gas calentado en la solución de proteína al someter la mezcla calentada de gas/líquido del paso (iii) a fuerzas mecánicas de corte para formar una composición de microburbujas de gas encapsuladas por proteína desnaturalizada.

2. El proceso de la reivindicación 1 , en donde el mezclado del paso (iii) es realizado ya sea a, o en proximidad con, la entrada del dispositivo de mezclado usado para proporcionar las fuerzas mecánicas de corte de paso (iv).

3. El proceso como se reclama en la reivindicación 1 o reivindicación 2, en donde la solución de proteína es provista bajo una presión de alimentación estable.

4. El proceso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde las microburbujas de gas tienen un tamaño de partícula con una desviación estándar menor que 20% del tamaño de partícula promedio.

5. El proceso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteína es albúmina de suero humano.

6. El proceso de la reivindicación 5, donde la solución de proteína calentada es a una temperatura en el rango de 60-80°C.

7. Un aparato adecuado para realizar el método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, comprendiendo dicho aparato: i) un dispositivo de mezclado que genera altas fuerzas mecánicas de corte y que tiene una entrada y una salida; ii) una tubería de alimentación que comprende: una primera entrada y una segunda entrada que proporcionan las respectivas aberturas de dos trayectorias, una sección de transferencia de calor que comprende una pared longitudinal que separa las dos trayectorias, una salida conectada a la entrada del dispositivo de mezclado; iii) un tanque de alimentación para composición líquida conectado a la primera entrada de la tubería de alimentación; iv) un tanque de gas conectado a la segunda entrada de la tubería de alimentación.

8. El aparato de acuerdo con la reivindicación 7, en donde la pared longitudinal está presente en una sección de tubería de la tubería de alimentación, y en donde la pared longitudinal atraviesa el diámetro de la sección de tubería para crear dichas dos trayectorias.

9. Un aparato de acuerdo con la reivindicación 7 o reivindicación 8, en donde la pared longitudinal está presente en una sección de tubería de la tubería de alimentación, y en donde la sección de tubería comprende una tubería exterior con una pared cilindrica exterior, y una tubería interior, en donde dicha tubería interior corre dentro de la tubería exterior.

10. El uso de un aparato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9 para preparar una composición comprendiendo microburbujas de gas encapsuladas como se define en la reivindicación 1.