MX2012003286A

MX2012003286A - Nuevos compuestos y su uso terapeutico para inhibicion de proteina cinasa.

Info

Publication number: MX2012003286A
Application number: MX2012003286A
Authority: MX
Inventors: Zhanggui Wu
Original assignee: Zhanggui Wu
Priority date: 2009-09-18
Filing date: 2010-09-17
Publication date: 2012-06-19
Also published as: EP2477496B1; BR112012006062A2; AU2010295492A1; IN2012DN03127A; JP2013505254A; EP2826780A1; AU2016204867B2; EP2826780B1; AU2010295492B2; CA2774367A1; US20120232082A1; RU2012109220A; ES2481791T3; US20150072987A1; JP6155026B2; CN104628741A; NZ599453A; US8815863B2; WO2011035077A1; CN102711475A

Abstract

Se describen compuestos novedosos que tienen la siguiente fórmula (I) (ver fórmula (I)) en donde Y es N, O, o S. También se describen composiciones farmacéuticas que contienen los mismos, métodos para tratar el cáncer usando los mismos, y métodos para la síntesis de los mismos. Los compuestos novedosos de la presente invención son útiles para inhibir las proteínas cinasas, especialmente las cinasas reguladoras del ciclo celular Chk1/Chk2.

Description

NUEVOS COMPUESTOS Y SU USO TERAPÉUTICO PARA LA INHIBICIÓN DE PROTEÍNA QUINASA CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a los métodos y composiciones para la modulación de las actividades de la quinasa check point 1 (CHK1) y de la quinasa check point 2 (CHK2), y del receptor de tirosina quinasa y el no-receptor de la tirosina quinasa. Más específicamente, la presente invención se refiere a la preparación y uso de los inhibidores de las enzimas anteriores.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La etiología del cáncer es extremadamente compleja y continúa pobremente entendida. Lo que se sabe es que los cánceres están íntimamente relacionados tanto con factores ambientales como con factores internos del cuerpo humano. Cerca de las tres cuartas partes de los cánceres pueden ser atribuidos a causas externas medioambientales. Los cánceres continúan siendo una gran amenaza para la humanidad, en el mundo, al menos mueren de cáncer 5 millones de personas anualmente. Los métodos de tratamiento disponibles actualmente tales como la cirugía, radioterapia, quimioterapia, todos ellos tienen sus limitaciones.

De los métodos para tratamiento y prevención del cáncer disponibles, los agentes químicos continúan como los más s efectivos .

Una categoría de agentes para quimioterapia contra el cáncer son los inhibidores de antagonistas tanto del receptor de tirosina quinasas como de no-receptores de tirosina quinasas. Los objetivos específicos incluyen el receptor del factor de crecimiento vascular endotelial (RFCVE) , el receptor del factor de crecimiento epidermal (RFCE) , el RFCEH 2 (receptor del factor de crecimiento epidermal humano 2), SRC, JAK (quinasa de Janus) y TEK.

Se ha encontrado que ciertos compuestos de tieno- s piridazina tienen actividades antitumorales, por ejemplo, en el documento WO2005105808 se da a conocer un compuesto como inhibidor de la quinasa IKK: Adicionalmente, en se revelan compuestos que son inhibidores de l 8, un tipo de tirosina quinasa : Además, en O 03029241, WO 03028731 y O2005066163 se dan a conocer compuestos similares que son inhibidores de CHK1.

Sin embargo, hay una necesidad de más compuestos que sean inhibidores de tirosina quinasas, especialmente de CHK1/CHK2.

SUMARIO DE IA INVENCIÓN La presente invención ofrece nuevos inhibidores de ciertas proteina quinasas, especialmente de las quinasas celulares check point (CHK1 y CHK2), del receptor de la tirosina quinasa y el no-receptor de tirosina quinasas tales como el RFCVE (receptores del factor de crecimiento vascular endotelial), RFCE (receptor del factor de crecimiento epidermal) , el RFCEH 2 (receptor del factor de crecimiento epidermal humano 2), quinasas SRC, quinasa JAK y quinasas TEK; y serina/treonina quinasas tales como EK, JNK, c-MET, AKT, PIM, TIE y PLK.

La quinasa check point 1 es una proteina quinasa muy conservada evolutivamente y funciona como control de la progresión del ciclo celular en los puntos de control S y G2/M. Los daños al ADN activan la Chk 1 interrumpiendo el ciclo celular permitiendo que el ADN dañado sea reparado. Si los daños del ADN son demasiado extensos para reparar, la célula muere de tal manera que sean mantenidas la integridad y estabilidad del genoma. Las células cancerosas desprovistas de o con defectos en Chk 1 muestran muchos defectos en el control del ciclo celular que incluyen una disminución de la velocidad de división celular, ausencia de reacción de los puntos de control del ciclo celular y sensibilidad aumentada a los daños del ADN. Debido a sus funciones en >a reparación del daño, la Chk 1 juega un papel importante en la ontologia del cáncer, en la muerte de las células cancerosas y en la resistencia a los medicamentos contra el cáncer.

La investigación sobre los puntos de control de las regulaciones del ciclo celular reveló que la inhibición de la expresión de CHK 1 puede revertir la resistencia o la tolerancia de las células cancerosas a los medicamentos aumentando por lo tanto la sensibilidad de las células cancerosas a la terapia de daño al ADN e incrementando dramáticamente la actividad y efectividad de slos agentes anticancerosos. La mayoría de los tipos de cáncer tienen mutaciones en p53 que eliminan específicamente el punto de control Gl/S lo que también puede ser una base para la detección de agentes anticancerosos específicos. Los inhibidores de la Chk 1 quinasa pueden ser buenos candidatos para agentes anticancerosos específicos o para mejorar la actividad de otros agentes anticancerosos ya que la quinasa Chk 1 también regula al punto de control G2/M. Si bien los inhibidores de Chk 1 no pueden tener por si mismos fuerte actividad anticancerosa, éstos pueden aún ser capaces de mejorar la actividad anticancerosa de otros medicamentos si son usados en combinación.

La presente invención ofrece nuevos compuestos inhibidores de la proteina quinasa o sales o derivados farmacéuticamente aceptables de éstos que tienen actividad anticancerosa. Los compuestos de la presente invención son inhibidores de proteina quinasas relacionadas con el cáncer tales como la CHK 1 y la CHK 2, y también pueden aumentar o mejorar la actividad de otros agentes anticancerosos. La presente invención también ofrece métodos de preparación de los compuestos, de composiciones farmacéuticas que comprenden éstos compuestos y un método de uso de los compuestos en la preparación de las composiciones farmacéuticas para la inhibición de la multiplicación celular o de la proliferación celular en animales de sangre caliente como los humanos.

Las enfermedades asociadas con la detención del ciclo celular o con la proliferación celular que pueden ser tratadas con compuestos de la presente invención o las composiciones farmacéuticas que comprenden a los mismos incluyen el cáncer (incluyendo tumores sólidos y leucemia) , fibrosis y enfermedades relacionadas, psoriasis, artritis reumatoide, sarcoma de Kaposi, enfermedades renales agudas y crónicas, ateroma, ateroesclerosis, estenosis arterial, enfermedades autoinmunes, inflamación aguda y crónica, enfermedades óseas y enfermedades oculares causadas por la neo-angiogénesis retinal.

Los nuevos compuestos de la presente invención, generalmente tienen la fórmula I descrita a continuación. ( donde Y = NH, 0 ó S.

R1 = seleccionado de los siguientes grupos En donde X = CH2, NH, S u 0, R8 = -H, -NH2, -OH, -N (R4, R5) , -C (R4R5) i_7NR6R7, -(Í(R4R5) i_7OR6 o -N(R4)NR5R6, en donde R4, R5, R6, R7 = H, alquilos (Ci-C6) , cicloalquilos (C3-C8) con o sin heteroátomos nucleares tales como 0, S y N, arilos (ya sean aromáticos substituidos o sin substituir) o heteroaromáticos (ya sean heteroaromáticos substituidos o sin substituir) , R9, R10, R11, R12 y R13 = H, alquilos (Ci-C6) , cicloalquilos (C3-C8) con o sin heteroátomos nucleares tales como 0, S o N; arilos (ya sean aromáticos substituidos o sin substituir) o heteroaromáticos (ya sean heteroaromáticos substituidos o sin substituir) , R2 es seleccionado de un grupo que consiste de H, OH, NH2, 0R14, NR14R15, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, alquenilo y alquinilo, en donde R14, R15 = H, alquilos {Ci-C&) , cicloalquilos (C3-Cs) con o sin heteroátomos nucleares tales como 0, S y N, arilos (ya sean aromáticos substituidos o sin substituir) o heteroaromáticos (ya sean heteroaromáticos substituidos o sin substituir) , y R3 es seleccionado de un grupo que consiste de H, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, alquenilo y alquinilo. Específicamente R3 es seleccionado de los siguientes grupos: en donde R , R y R son seleccionados de los siguientes grupos: H; heteroátomos tales como F, Cl, Br, I; alquilos (Ci-C8) , cicloalquilos (C3-C8) , arilos, heteroarilos ; -OR19; -SR19; -NR19R20; -S(0)R19; -S(0)2R19; -S (0) 2NR19R20; N -C (0) NR19R20; -N(R19)C(0)R20; -N(R19)S(0)2R2°; -N (R19) C (0) N (R20R21) ; N (R19) C (0) OR20; arilo con o sin substitución, heteroarilo con o sin substitución, arialquilo con o sin substitución, heterociclilo con o sin substitución, heteterociclilalquilo con o sin substitución; alquenilo con o sin substitución y alquinilo con o sin substitución; en donde R19, R20 y R21 son elegidos independientemente de H, alquilo (Ci-Ce) , cicloalquilos (C3-C8) , arilo con o sin substitución, alquilarilo con o sin substituciones, heteroarilo con o sin substitución, o R16, R17 y R21 pueden ser parte ¾le un anillo fusionado que contiene de 0-3 heteroátomos seleccionados de , O y S.

Los siguientes compuestos pueden ser preparados como se ilustra en los siguientes esquemas generales: Esquema 1: Esquema 2 : Esquema 3: En una forma de realización preferida, los nuevos compuestos de la presente invención tienen una Fórmula donde X = CH2, NH, S u 0; R8 = -H, -NH2, -OH, -N(R ,R5), -C (R4R5) i-7NR6R7, -C (R4R5) i-7OR6, -N (R )NRR6 R4, R5, R6, R7 = H, alquilos (Ci-C6) , cicloalquilos (C3-C8) con o sin heteroátomos nucleares tales como O, S, N, arilos (seleccionados de aromáticos substituidos y no substituidos) o heteroaromáticos (seleccionados de heteroaromáticos substituidos y no substituidos), R9, R10, R11, R12, R13 = H, alquilos (Ci-C6) , cicloalquilos (C3-Cs) con o sin heteroátomos nucleares tales como O, S, N, arilos (seleccionados de aromáticos substituidos y no substituidos) o heteroaromáticos (seleccionados de heteroaromáticos substituidos y no substituidos), R2 es seleccionado de un grupo que consiste de H, OH, NH2, OR14, NR1 R15, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, alquenilo y alquinilo, en donde R14 y R15 son H, alquilo (Ci-Ce) ; cicloalquilo (C3-C8) con o sin substituciones con heteroátomos como O, S y N; o un anillo aromático substituido o no substituido .

R3 es seleccionado de un grupo que consiste de H, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, alquenilo y alquinilo; preferentemente R3 es seleccionado de los siguientes grupos: grupos: H, heteroátomo como F, Cl, Br, I; alquilo (Ci-C8) ; cicloalquilo (C3-Cs) con y sin substituciones; las substituciones son seleccionadas de alquilos (Ci-C8) , cicloalquilos (C3-C8) , arilos, y roarilos; -0R18; -SR19; -NR19R20, -S(0)R19; -S(0)2R19; -S (0) 2NR19R20; s -C (0) NR19R20; -N(R19)C(0)R20; -N(R19)S(0)2R2°; -N (R19) C (0) N (R20R21) ; N (R19) C (0) OR20; Arilo con o sin substitución, heteroarilo con o sin substitución, arialquilo con o sin substitución; heterociclilo con o sin substitución; heteterociclilalquilo con o sin substitución, alquenilo con o sin substitución y alquinilo con o sin substitución; donde R19, R20 y R21 elegidos de H, alquilo (Ci-C8) , cicloalquilos (C3-C8) , arilo con o sin substitución, alquilarilo con o sin substituciones y heteroarilo con o sin substitución; o R16, R17 y R18 pueden ser parte daJL anillo que es fusionado y que contiene de 0-3 heteroátomos seleccionados de N, 0 y S.

Los compuestos anteriores pueden ser preparados como se ilustra en el siguiente esquema general.

La síntesis de los nuevos compuestos, de conformidad con los esquemas anteriores, puede ser implementada utilizando procesos conocidos por aquellos con experiencia en el arte, por ejemplo, aquellos revelados en la Publicación de Patente de los Estados Unidos No. US2009-0275585A1 y WO2005105808 , los cuales se incorporan aquí por referencia en su totalidad.

Los nuevos compuestos de la presente invención son inhibidores de proteína quinasas, incluyendo las CHK1 y CHK2, que pueden impedir el mecanismo de reparación del daño al ADN deteniendo el ciclo celular en el punto de control G2/M. De ésta manera, estos compuestos tienen actividades anti-proliferativas (por ejemplo, anticancerosas) y también pueden ser usados en combinación con otros agentes anticancerosos para mejorar sus efectos anticancerosos. Así, los compuestos son útiles como agentes terapéuticos contra el cáncer para el tratamiento en humanos y animales. La presente invención incluye además métodos para la elaboración de los nuevos compuestos, de las composiciones farmacéuticas que comprenden éstos compuestos y el uso de los compuestos o sus sales o profármacos para la manufactura de composiciones farmacéuticas asi como métodos de tratamiento utilizando la composición farmacéutica.

En otra forma de realización, la presente invención ofrece una composición farmacéutica que comprende un compuesto descrito anteriormente y un excipiente o adyuvante farmacéuticamente aceptable y un método para el tratamiento del cáncer mediante la administración de una cantidad efectiva de la composición farmacéutica a un paciente que necesita de éste. La administración de una "cantidad efectiva" o de una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto de la presente invención significa una cantidad que es útil, a dosis y por periodos de tiempo necesarios, para obtener el resultado deseado. La cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto, de conformidad con la presente invención, puede variar de acuerdo a factores tales como el estado de enfermedad, edad, sexo y peso del sujeto. Los regímenes de dosificación en el paciente pueden ser ajustados para proporcionar una respuesta terapéutica ^óptima. Por ejemplo, pueden ser administradas diariamente varias dosis divididas o la dosis puede ser reducida proporcionalmente según sea indicado por las exigencias de la situación terapéutica. En el contexto de la presente invención, una "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a las sales preparadas a partir de ácidos no-tóxicos farmacéuticamente aceptables. N Las composiciones farmacéuticas, de conformidad con la invención, pueden presentarse y ser administradas como un medicamento en forma liquida, semi-sólida o sólida, por ejemplo, en forma de soluciones inyectables, gotas, jugos, jarabes, suspensiones, sprays, gránulos, tabletas, comprimidos, parches, cápsulas, emplastos, supositorios, ungüentos, cremas, lociones, geles, emulsiones, o aerosoles que comprenden un compuesto de la presente invención y substancias farmacéuticas auxiliares, de acuerdo a la forma galénica tal como, por ejemplo, vehículos des materiales, rellenos, solventes, diluyentes, substancias tensoactivas , colorantes, conservadores, agentes de desintegración, agentes anti-fricción, lubricantes, saborizantes y/o aglomerantes. Estas substancias auxiliares pueden ser, por ejemplo, agua, etanol, 2-propanol, glicerol, etilenglicol, propilenglicol , polietilenglicol, polipropilenglicol, glucosa, fructosa, lactosa, sucrosa, dextrosa, melaza, almidón, almidón modificado, gelatina, sorbitol, inositol, manitol, celulosa microcristalina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, acetato de celulosa, goma laca, alcohol cetílico, polivinil pirrolidona, parafinas, ceras, gomas naturales o sintéticas, goma de acacia, alginatos, dextran, ácidos grasos saturados e insaturados, ácido esteárico, estearato de magnesio, estearato de zinc, estearato de glicerilo, lauril sulfato de sodio, aceites comestibles, aceite de sésamo, aceite de coco, aceite de maní, aceite de soya, lecitina, lactato de sodio, -polioxietilen y -propilen ésteres de ácidos grasos, sorbitan ésteres de ácidos grasos, ácido sórbico, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido tánico, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de magnesio, cloruro de calcio, óxido de magnesio, óxido de zinc, dióxido de silicio, óxido de titanio, dióxido de titanio, sulfato de magnesio, sulfato de zinc, sulfato de calcio, potasa, fosfato de calcio, fosfato dicálcico, bromuro de potasio, ioduro de potasio, talco, caolín, pectina, crospovidona, agar y bentonita. La elección de los materiales auxiliares a ser empleados y las cantidades de éstos dependen de si el medicamento será administrado por vía oral, per-oral, subcutánea, parenteral, intravenosa, intraperitoneal , intradérmica, intramuscular, intranasal, bucal, rectal o local, por ejemplo, para infecciones en la piel, membranas mucosas y ojos. Las formulaciones en forma de tabletas, tabletas recubiertas, cápsulas, gránulos, gotas, jugos y jarabes son adecuadas, entre otras, para administración oral y las soluciones, suspensiones, formulaciones 1 secas fácilmente reconstituibles y los sprays son adecuados para administración parenteral, tópica y por inhalación. Un compuesto disuelto, de conformidad con la invención, en forma de depósito (depot) o en un parche, con la adición opcional de agentes que promueven la penetración a través de la piel, son formulaciones adecuadas para administración percutánea. s Las formas de formulaciones que pueden ser usadas por vía oral o percutánea pueden liberar el compuesto, de conformidad con la invención, de manera retardada o controlada.

Los medicamentos y composiciones farmacéuticas, de conformidad con la invención, son preparados con la ayuda de agentes, equipos, métodos y procesos que son bien conocidos en la técnica de formulación farmacéutica precedente como la que está descrita, por ejemplo, en Remington' s Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing Co., Easton, Pa . (1990), en particular la parte 8, secciones 76 a 93.

De ésta manera, para una formulación sólida, como una tableta, el compuesto activo del medicamento puede ser mezclado con un vehículo farmacéutico, por ejemplo, los constituyentes convencionales de las tabletas como el almidón de maíz, lactosa, sucrosa, sorbitol, talco, estearato de magnesio, fosfato dicálcico o goma y diluyentes farmacéuticos como, por ejemplo, agua, para formar una pre-formulación sólida de la composición que comprende, de conformidad con la invención, un compuesto o una sal de éste, farmacéuticamente aceptable y en distribución homogénea. Es entendido aquí que distribución homogénea significa que el compuesto activo es distribuido de manera uniforme en el total de la pre-formulación de la composición de forma que pueda ser fácilmente dividida en forma de dosis unitarias de la misma acción como las tabletas, pildoras o cápsulas. La pre-formulación sólida de la composición es entonces dividida en forma de dosis unitarias. Las tabletas o las pildoras del medicamento o de las composiciones, de conformidad con la invención, pueden ser recubiertas o compuestas de otra manera con el propósito de proporcionar una forma de dosificación con liberación retardada. Los recubrimientos adecuados de las composiciones son, entre otros, los ácidos poliméricos y las mezclas de ácidos poliméricos con materiales tales como, por ejemplo, goma laca, alcohol cetilico y/o acetato de celulosa.

La cantidad de compuesto activo que ha de ser administrado al paciente varía y depende del peso, edad y del historial de la enfermedad del paciente así como del modo de administración, la indicación y la severidad de la enfermedad. Usualmente es administrado un rango de, por ejemplo, 0.1 a 5, 000 mg/kg, en particular de 1 a 500 mg/kg, preferiblemente de 2 a 250 mg/kg de peso corporal de un compuesto, de conformidad con la invención.

La composición farmacéutica de la presente invención puede ser administrada enteralmente (tal como la administración oral o por vía rectal) , externamente o parenteralmente, por ejemplo, mediante una inyección. Las formulaciones apropiadas incluyen tabletas (tabletas convencionales, tabletas bucales, tabletas sublinguales, parche para cavidad oral, tableta masticable, tableta efervescente, tableta vaginal, tableta vaginal efervescente, tableta de liberación sostenida, tableta de liberación controlada, tableta con capa entérica, tableta bucal de liberación rápida), cápsulas (cápsulas duras, cápsulas blandas, cápsulas de liberación sostenida, cápsulas de liberación controlada, cápsulas con capa entérica, etc.), pildoras (perlas, pildoras recubiertas de azúcar, comprimidos) , liquido oral (solución oral, suspensión oral, emulsión oral, etc.), gránulos (gránulos en suspensión, gránulos solubles, gránulos efervescentes, gránulos gastro-resistentes, gránulos de liberación sostenida, gránulos de liberación controlada, etc.), infusión intravenosa, polvo para inyección, solución concentrada para inyección, implantes, etc. y otras formas de medicamentos como supositorios, aerosol, polvo en aerosol, spray, gel, películas, parches, etc.

Los compuestos de la presente invención pueden ser incorporados a polímeros biodegradables que permitan la s liberación sostenida del compuesto, los polímeros son implantados en la vecindad de donde se desea que el fármaco sea liberado, por ejemplo, en el sitio de un tumor o implantados de modo que el compuesto sea liberado lentamente.

Los polímeros biodegradables y su uso están descritos en detalle, por ejemplo, en Brem et al., J. Neurosurg. 74:441-446(1991) . También pueden ser usadas mini bombas osmóticas para proporcionar una liberación controlada.

La toxicidad y eficacia de tales compuestos pueden determinarse mediante procedimientos farmacéuticos estándar s en cultivos celulares o en animales de experimentación, por ejemplo, para la determinación de la LD50 (dosis letal para el 50% de la población) y la ED50 (dosis terapéuticamente efectiva en el 50% de la población) . La relación de la dosis entre los efectos tóxico y terapéutico es el índice terapéutico y éste puede ser expresado como la relación LD50/ED50. Son preferidos los compuestos que exhiben grandes índices terapéuticos. Los datos obtenidos de estos ensayos en cultivos celulares y de estudios en animales pueden ser usados en la formulación de un rango de dosificación para uso en humanos. La dosis de tales compuestos se encuentra de preferencia dentro de un rango de concentraciones circulantes que incluyen la ED50 con poca o ninguna toxicidad. La dosis puede variar dentro de este rango dependiendo de la forma de dosificación empleada y de la ruta de administración utilizada .

La composición farmacéutica de la presente sinvención es adecuada para el tratamiento de cánceres y enfermedades relacionadas y puede ser usada sola o en combinación con otros medicamentos anticancerosos. Una persona con experiencia ordinaria en el arte será capaz de determinar la dosis adecuada para el tratamiento, dependiendo de los tipos de enfermedad a ser tratada, de la formulación y de las condiciones del paciente.

Los compuestos de esta invención pueden ser usados para prevenir o tratar la proliferación celular anormal, especialmente aquella que se encuentra en tumoré^s o cánceres que incluyen el cáncer de pulmón, cáncer de hígado, leucemia, osteocarcinoma, cáncer de páncreas, cáncer de piel, melanoma, metrocarcinoma, ooforoma, carcinoma rectal, carcinoma gástrico, cáncer de colon, carcinoma de mama, salpingo carcinoma, carcinoma de endometrio, carcinoma cervical, carcinoma vaginal, carcinoma de vulva, carcinoma de esófago, carcinoma de intestino delgado, carcinoma de increción, sarcoma de tejido blando, carcinoma de uretra, cáncer prostético, linfocitoma, cáncer de vejiga, cáncer de nefridio, tumores de columna vertebral, tumores en el tejido neuroglial del cerebro y adenoma pituitario.

La composición farmacéutica de la presente invención también puede ser usada para la prevención o tratamiento de enfermedades autoinmunes, inflamación, enfermedades del sistema nervioso y enfermedades cardiovasculares.

N Especialmente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser utilizadas para tratar enfermedades relacionadas con el ciclo celular o con la proliferación celular .

DESCRIPCION DETALLADA DE LAS FIGURAS La figura 1 representa los efectos de XC608 y XC608-C1 combinados con Gemcitabina en el tratamiento del cáncer humano de ovario transplantado en ratones desnudos.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCIÓN EJEMPLOS Ejemplo 1 Síntesis de Componentes del Compuesto (S)-2-(3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-ilamino) ieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxamida .

El compuesto (S) -2- (3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-ilamino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxamida fue sintetizado tras seguir el esquema Etapa 1 El DAL (20 mmol) fue adicionado gota a gota a la' solución de tiofeno (5.34 g, 20 mmol) y dietil oxalato en THF (100 mi) a -78°C. Después de la adición, la mezcla resultante se dejó calentar a 0°C y se agitó a 0°C por 30 min. Se adicionó HC1 (1N) para atenuar la reacción y se extrajo con EtOAc . Los extractos orgánicos fueron secados y concentrados con Na2S04. El residuo fue purificado por columna, se obtuvo el producto como un sólido amarillento (7.07 g) . La HPLC-MS tg = 2.39 min (UV254 nm) la masa calculada por la fórmula Ci7H15F05S fue de 350.0, en la LCMS se observó m/z = 351.0 (M + H) . v Etapa 2 La cetona de la etapa 1 (7.07 g, 19.2 mmol) fue disuelta en etanol (50 mi) y se adicionó hidrazina (1 mi) . La mezcla fue calentada a 60°C y se agitó por 10 min. Entonces, la mezcla fue enfriada a temperatura ambiente y se agitó por otros 30 min. El sólido fue recolectado por filtración y lavado con una pequeña cantidad de etanol frío. El sólido fue secado con aire para obtener el producto puro (6.17 g) como sólido blanco. La HPLC-MS tg = 1.88 min (UV254 ?) ; la masa calculada por la fórmula C15H11 F 2O3S fue de 318.01, en la LCMS se observó m/z = 319.0 (M + H) .

Etapa 3 El compuesto heterociclico de la etapa 2 (2.28 g, 8.8 mmol) fue adicionado a P(0)C13 (20 mi) y la mezcla fue calentada a más de 90°C y agitada a ésta temperatura por 3 horas. El solvente fue removido bajo presión reducida y el residuo fue recogido con EtOAc. El sólido fue filtrado y los extractos orgánicos fueron concentrados y purificados por columna (gel de sílice), se obtuvo el producto (2.31 g) como un sólido amarillento. La HPLC-MS tg = 2.40 min s(UV254 nm) ; la masa calculada por la fórmula C15H10CIFN2O2S fue de 336.0, en la LCMS se observó m/z = 337.0 (M + H) .

Etapa 4 El compuesto de cloro (336 mg, 1 mmol) fue disuelto en N P (5 mi) y se adicionaron K2C03 (272 mg, 2.0 mmol) y (S)- N terbutil 3-aminopiperidina-l-carboxilato (200 mg, 1.0 mmol) . La mezcla fue calentada a más de 80°C y agitada por 3 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla fue diluida con EtOAc y lavada con agua, salmuera y fue secada con Na2S04. Después de la concentración, el crudo fue purificado por columna para obtener el producto (357 mg) . La HPLC-MS tg = 2.09 min (UV254 m,) ; la masa calculada por la fórmula C25H29F 404S fue de 500.2, en la LC S se observó m/z = 501.1 (M + H) .

Etapa 5 El (S)-etil 4- ( 1-ter-butoxicarbonil ) piperidin-3-ilamino) -2- (3-fluorofenil) tieno [2,3-d] piridazin -7-carboxilato (50 mg, 0.1 mmol) fue mezclado con amoniaco (4 mi) en un tubo sellado a temperatura ambiente. La mezcla fue calentada a más de 80°C y agitada toda la noche. Entonces, el solvente fue removido por concentración. El producto crudo (S) -ter-butil 3- (7-carbamoil-2- (3-fluorofenil) tieno [2,3-d] piridazin-4-ilamino) piperidin-l-carboxilato fue usado en la siguiente etapa directamente sin purificación adicional. La HPLC-MS tg = 1.75 min (UV254 nm) ; la masa calculada por la fórmula C23H26FN5O3S fue de 471.2, en la LCMS se observó m/z = 472.2 ( + H) .

Etapa 6 El producto crudo de la etapa 5 ( S) -ter-butil 3- (7-carbamoil-2- (3-fluorofenil) tieno [2, 3-d] piridazin-4-ilamino) piperidin-l-carboxilato fue tratado con HC1 (4N éri dioxano, 3 mi) a temperatura ambiente por 30 min. Entonces el solvente fue removido bajo presión reducida y el residuo fue purificado por HPLC para obtener el producto final (S)-2-(3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-ilamino) tieno [2, 3-d] piridazin-7-carboxamida. La HPLC-MS tg = 1.27 min (UV254 nm) ; la masa calculada por la fórmula Ci8Hi8FN5OS fue de 371.1, en la LCMS se observó m/z = 372.1 (M + H) .

Ejemplo 2 Síntesis del Compuesto 2- (3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-iloxi) ieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxamida . s El etil 4-cloro-2- (3-fluorofenil) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilato ha sido elaborado en el ejemplo 1 etapa 3.

Etapa 1 El ter-butil 3-hidroxipiperidin-l-carboxilato (100 mg, 0.5 mmol) fue disuelto en NMP seca (5 mi) y se adicionó cuidadosamente NaOH (20 mg, 60% en aceite, 0.5 mmol) . La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por 10 min. Entonces, se adicionó etil 4,-cloro-2- ( 3-fluorofenil ) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilato (130 mg, 0.5 mmol) . La mezcla fue calentada a más de 80°C y agitada por 30 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, se adicionó EtOAc para diluir la mezcla de reacción y se lavó con agua y salmuera. Los extractos orgánicos fueron secados con a2S04, filtrados y concentrados. El producto crudo fue purificado por columna (silica gel) para obtener el producto etil 4- (1 -ter- butoxicarbonil ) piperidin -3- iloxi) -2- (3-fluorofenil ) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilato (151 mg) . La HPLC-MS tg = 2.17 min (UV254 nm) ; la masa calculada por la fórmula C25H28 FN3O3S fue de 501.2, en la LCMS se observó m/z = 502.2 (M + H) .

Etapa 2 El compuesto ter-butil 3- (7-carbamoil-2- ( 3-fluorofenil ) tieno [2,3-d]piridazina-4-4iloxi) piperidin-1-carboxilato fue preparado con las mismas condiciones descritas en el ejemplo 1 etapa 5. La HPLC-MS tg = 1.88 min (UV254 nm) la masa calculada por la fórmula C23H25FN404S fue de 472.2, en la LC S se observó m/z = 473.1 (M + H) .

Etapa 3 El compuesto 2- ( 3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-iloxi) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxamida fue preparado con las mismas condiciones descritas en el ejemplo 1 etapa 6. La HPLC- S tg = 1.33 min (UV25 nm) ; la masa calculada por la fórmula C18H17 F O2S fue de 372.1, en la LCMS se observó m/z = 373.1 (M + H) .

Ejemplo 3 Síntesis del Compuesto 2- (3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-iltio) -txeno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxamida .

El compuesto 2- ( 3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-iltio) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxamida fue preparado habiendo seguido el mismo procedimiento descrito en el ejemplo 2. La HPLC-MS tg = 1.35 min (UV254 nm) ; la masa calculada por la fórmula C18H17 FN4OS2 fue de 388.1, en la LCMS se observó m/z = 389.0 (M + H) .

Ejemplo 4 Síntesis del compuesto 2- (3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-ilmetil) tieno [2 , 3-d]piridazina-7-carboxamida .

Etapa 1 El compuesto ter-butil 3-metilenpiperidin-l-carboxilato (600 mg, 3.0 mmol) fue disuelto, bajo atmósfera de Argón, en THF seco (15 mmol) y se adicionó 9-BBN (3.0 mmol) gota a gota. La mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por 2 horas. La solución fue adicionada a la mezcla del compuesto clorado 4-cloro-2- (3-fluorofenil) tieno [2,3-d] piridazina-7-carboxilato (260 mg, 1.0 mmol) y fue mezclada con Pd(dppt)Cl2 (40 mg, 0.05 mmol), K3PO4 (636 mg, 3.0 mmol) en dioxano (10 mi con lml de agua) bajo atmósfera de Ar. La mezcla resultante fue calentada a 90°C y agitada toda la noche. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla fue diluida con EtOAc (60 mi) y filtrada a través de celite. Después de la concentración, el crudo fue purificado por columna (gel de sílice, 0-30% EtOAc/Hexano) para obtener el producto etil 4-((l- (ter - butoxicarbonil) pipesidin -3- il) metil) -2- ( 3-fluorofenil) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilato (266 mg) . La HPLC-MS tg = 2.38 min (UV254 J; la masa calculada por la fórmula C26H30F 3O4 S fue de 499.2, en la LCMS se observó m/z = 500.3 ( + H) .

Etapa 2 El compuesto ter-butil 3- ( (7- (carbamoil-2- (3-fluorofenil) tieno [2, 3-d] piridazina-4-il) metil) piperidin-1-carboxilato fue preparado con las mismas condiciones descritas en el ejemplo 1 etapa 5. La HPLC-MS tg = 1.95 min (UV254 nm) ; la masa calculada por la fórmula C24H27-,F 403S fue de 470.2, en la LCMS se observó m/z = 471.2 (M + H) .

Etapa 3 El compuesto 2- (3-fluorofenil) -4- (piperidin-3-ilmetil ) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxamida fue preparado con las mismas condiciones descritas en el ejemplo 1 etapa 6. La HPLC-MS tg = 1.39 min (UV254 nm) ; l masa calculada por la fórmula Ci9H19FN4OS fue de 370.1, en la LCMS se observó m/z = 371.1 (M + H) .

Ejemplo 4 De manera similar, siguiendo el esquemas 3 descrito anteriormente, pueden ser sintetizados los siguientes compuestos .

Amida del Amida del ácido 2-(4-Cloro-fenil)-4-(piperidin-3- -tieno[2,3-rf)piridazina-7- carboxílico ilsulfanil)- tieno[2,3-d]piridazina-7-carboxilico Ejemplo 5 Síntesis de Compuestos de Fórmula II Los compuestos de la presente invención son sintetizados como sigue: En presencia de una base, un compuesto de Fórmula A es tratado con oxalato de dialquilo para obtener un compuesto de Fórmula B: El compuesto B es tratado con hidrazina para formar un compuesto de Fórmula C: C cual es tratado con tricloruro fosfórico (POCI3) ltando un compuesto de Fórmula D: El compuesto de Fórmula D se hace reaccionar entonces con amina NH2 1 para formar un compuesto de Fórmula E.

E el cual entonces se hace reaccionar con otra amina, NH2R2, seguido por la eliminación del grupo protector en R1 y el tratamiento con una base dando como resultado un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de éste.

En el esquema de síntesis anterior, R, R1, R2 y R3 son como se ha definido previamente. Preferentemente, R es un alquilo C1- : R1 es un anillo de 5 o 6 carbonos que contiene N, S, 0 o un estereoisómero de éste, R2 es independientemente un H o un alquilo Ci-4; R1 es un bencilo substituido de forma simple o doble con halógeno en el que la substitución se puede presentar en cualquier posición.

Los compuestos listados a continuación son sintetizados siguiendo el método anterior: 1. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- ( 3-piperidinamino) tieno[2,3-d] piridazina-7-carboxílico 2. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piperidinamino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 3. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-piperidinamino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 4. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino ) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 5. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 6. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 7. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino ) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 8. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahiolrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 9. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 10. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 11. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- (2-piperidin-amino) -tieno [2,3-•d] piridazina-7-¦carboxilico 12. Amida del ácido 2- (4-¦clorofenil ) · -4- (S-3-piperidin-amino) -tieno [2,3-¦d] piridazina -7-•carboxilico 13. Amida del ácido 2- (4-•clorofenil ) · -4- (R-3-piperidin-amino) -tieno[2,3--d] piridazina -7-¦carboxilico 14. Amida del ácido 2- (4--clorofenil)¦ -4- ( 3-piperidin-amino) -tieno [2,3--d] piridazina -7-¦N-meti1-carboxilico 15. Amida del ácido 2- (4-¦clorofenil )¦ -4- (3-piperidin-amino) -tieno [2,3--d] piridazina -7--?,?-dimetil· -carboxilico 16. Amida del ácido 2-¦(4· -clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7 -N-meti1-carboxilico 17. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico 18. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 19. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 20. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 21. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] pirida zina-7-N-meti1-carboxilico 22. Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 23. Amida del ácido 2- ( 4-fluorofenil ) -4- ( 3-tetrahidrofuran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 24. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tetKahidrofuran-araino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 25. Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran-amino ) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 26. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 27. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 28. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 29. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 30. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (S-3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 31. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (R-3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 32. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 33. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 34. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- ( 3-tetsahidrotieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 35. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2,3-d]piridazina-7-N, -dimetil-carboxílico 36. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 37. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 38. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 39. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-piridin-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 40. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-piridin-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 41. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-a-piran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 42. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-a-piran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 43. Amida del ácido 2- ( -bromofenil ) -4- (3-a-piran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 44. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 45. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 46. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 47. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 48. Amida del ácido 2- ( -clorofenil) -4- ( 4-piridin-amino) tieno [ 2 , 3-d] p ridazina-7-carboxilico 49. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- (S-3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico s 50. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- (R-3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 51. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 52. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2,3-d]piridazina-7-N, N-dimetil-carboxilico 53. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 54. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tiapiran-amino) tieno [2, 3-d]piridazina-7-N, -dimetil-carboxilico 55. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 56. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-piran-amino ) tieno [2, 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 57. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- ( 3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 58. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 59. Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 60. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-furan-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 61. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-furan-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 62. Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil ) -4- (3-furan-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 63. Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 64. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 65. Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil ) -4- (3-tieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 66. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 67. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (S-3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 68. Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (R-3-pirrol-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 69. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 70. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico 71. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) tieno[2,3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 72. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico 74. Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 75. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-piperidinamino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 76. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- (3-piperidinamino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 77. Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil ) -4- ( 3-pipé-ridinamino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 78. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 79. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 80. Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil ) -4- ( 3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 81. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrotia piran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 82. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 83. Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 84. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 85. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-pipe din-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 86. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 87. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (R-3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 88. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 89. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- ( 3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxílico 90. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahi-drotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 91. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2, 3-d]piridazina-7-N, N-dimetil-carboxilico 92. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 93. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 94. Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 95. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrá-hidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 96. Amida' del ácido 2- ( 3-bromofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 97. Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 98. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 99. Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran-amino ) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina- -carboxilico 100. Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 101. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 102. Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil) -4- ( 3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 103. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-tetrahidropirrol-amino) -tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 104. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-tetrahidro pirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 105. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (R-3-tetrahidro pirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 106. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 107. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-N, -dimetil-carbqxílico 108. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 109. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 110. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 111. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 112. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 113. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 114. Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 115. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico s 116. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 117. Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico 118. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- ( 3-a-tiapiran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 119. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 120. Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 121. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 122. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- ( 4-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 123. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico x 124. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- (R-3-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 125. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 126. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 127. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 128. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico s 129. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 130. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piran-amino) -tieno [2 , 3-d] pi idazina-7-?, -dimetil-carboxilico 131. Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 132. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 133. Amida del ácido 2- (3-bromofenil ) -4- ( 3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 134. Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil ) -4- ( 3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 135. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- ( 3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 136. Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil ) -4- ( 3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 137. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 138. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 139. Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 140. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 141. Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil) -4- (S-3-pirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico s 142. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (R-3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico 143. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 144. Amida del ácido 2- (3-clorofenil ) -4- ( 3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] pirida zina-7- , -dimet l-carboxilico X 145. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico 146. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico 147. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico 148. Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico Ejemplo 6. Formulaciones Las preparaciones farmacéuticas para liberación por varias rutas, son formuladas como se muestra a continuación. "Ingrediente activo" o "Compuesto activo" como es usado a continuación, significa uno o más de los compuestos de Fórmula I. 1. Inyección parenteral. Formulación: Ingrediente activo, 50 mg; Cloruro de sodio, 2250 g; Agua para inyección, añadir para 250,000 mi para elaborar 1,000 frascos.

Preparación: El ingrediente activo es disuelto en una porción de agua para inyección; entonces se adiciona suficiente cantidad de cloruro de sodio, con agitación, para elaborar la solución isotónica. Su pH es ajustado de 4.0 a 5.0. Se adiciona carbón activado (250 g) por 30 min y entonces es removido usando un cilindro de filtración. La mezcla es envasada a 250 mi después de la filtración con Titanium Rod hasta que la solución está clara y luego es esterilizada con vapor a 115°C por 30 min. 2. Comprimido. Formulación: Ingrediente activo, 50 g; Almidón, 160 g; Hidroxipropil celulosa, 39 g; Polividona K30, c.b.p.; carboximetil almidón sódico, 10.4 g; estearato de magnesio, 1.3 g; para elaborar 1000 comprimidos.

Preparación: El ingrediente activo, el almidón y la hidroxipropil celulosa son colocados en la tolva de un granulador de lecho fluido y son calentados a 38-60°C. La solución de polividona K30 en agua es nebulizada para granular la mezcla. La mezcla es secada entonces a 55-60°C s por 10 min y mezclada con carboximetil almidón sódico y estearato de magnesio para tabletear. 3. Cápsula. Formulación: Ingrediente activo, 50 g; lactosa, 194.4 g; carboximetil almidón sódico, 7.8 g; dióxido de silicio, 5.2 g y estearato de magnesio, 2.6 g.

Preparación: Se mezcla el ingrediente activo, lactosa, carboximetil almidón sódico y dióxido de silicio en un mezclador por 1 hora y entonces es adicionado el estearato de magnesio mezclando por otros 10 min antes del llenado en cápsulas de gelatina dura.

Ejemplo 7. Toxicidad y pruebas de efectividad ±n Vitro e in vivo.

Las actividades anticancerosas o antitumorales de algunos de los compuestos anteriores son probadas in vitro o in vivo asi como también los ensayos de toxicidad extracelular utilizando los métodos SRB y MTT. Los efectos anticancerosos in vitro en células de cáncer humano HT-29 y en células de cáncer de pulmón de ratón 3LL son resumidos en la Tabla 1 y los efectos en el tratamiento del cáncer de colon humano HT-99 trasplantado en ratones desnudos están resumidos en la Tabla 2.

Tabla 1 Actividades celulares anticancerosas in Vitro Tabla 2 Efectos en Cáncer de colon humano HT-99 Transplantado a Ratones Desnudos inyección intraperitoneal inyección intravenosa gemcitabina Los datos anteriores muestran que los compuestos de la presente invención tienen efectos antitumorales y también pueden mejorar los efectos antitumorales de otros compuestos tales como GCT, CPT-11 y ADR.

Ejemplo 5 Efectos anticancerosos de XC608 in vitro Materiales y Métodos Lineas celulares: cáncer humano de estómago de baja diferenciación BGC-823, cáncer humano de hígado QGY-7701 y cáncer de pulmón de ratón 3LL.

Medio de cultivo celular DMEM (GIBCO BRL) , suplementado con glutamina bovina al 10% y antibióticos.

Solución de tripsina al 0.25% (Invitrogen) Solución IT: elaborada utilizando solución buffer de fosfatos a 5 mg/ml.

Solución de disolución: DSS 10 g, isobutanol 5 mi y ácido sulfúrico concentrado 0.12 mi, añadidos a 100 mi de agua bidestilada.

Compuesto de prueba y método de preparación. El compuesto usado para ésta prueba es XC608 el cual es un polvo blanquecino y tiene la siguiente fórmula: XC608 Control: XC302, otro compuesto anticanceroso que es sometido a ensayo clínico. N Detalles experimentales: La citotoxicidad de XC608 es determinada utilizando el método TT. Específicamente: (1) Cultivo celular: (i) las células congeladas son retiradas del nitrógeno líquido, descongeladas rápidamente en un baño de agua a 37 °C; se les agregan 6 mi de medio de cultivo DMEM en tubos de centrífuga de 10 mi bajo condiciones de esterilidad, son centrifugadas a 1000 rpm por 5 min y se elimina el sobrenadante. Se adicionan al sedimento 5-6 mi de medio DMEM, se resuspenden y se cultivan toda la noche a 37°C. (ii) las células son centrifugadas, lavadas dos veces cbn SBF y se tratan con 3-4 gotas de solución de tripsina aproximadamente por 3 minutos a 37°C, se monitorean bajo el microscopio para asegurarse de que todas las células estén separadas de la pared del tubo de cultivo y se resuspenden en medio DMEM adicional. Las células son repartidas en recipientes de cultivo adicionales y se repite el proceso anterior para asegurar que las células adheridas a la pared no llegan a ser excesivamente densas y que las células suspendidas permanecen en estado de crecimiento logarítmico. (2) Preparación del compuesto de prueba: XC608 y XC302 son disueltos en SBF y diluidos serialmente a 1000, 100, 10, 1, 0.1 y 0.01 iq/ml. (3) La solución preparada del compuesto de prueba es dispensada en las cavidades de una placa de cultivo de 96 pozos, 10 µ?/???? con 2 cavidades por punto de concentración y 10 µ? de SBF como control. (4) Se prepara una suspensión de células en fase log con medio D E que contiene 10% de suero de ternera con una concentración de células de 2 x 105/ml. (5) Se adicionan 90 µ? de suspensión celular a cada una de las cavidades que contienen el compuesto de prueba o el control. (6) Se cultivan las células a 37°C bajo atmósfera de C02 al 5% por 48 horas. (7) Se añaden 20 µ? de solución MTT de 5 mg/ml y se continúa el cultivo por 3-4 horas. (8) Se añaden µ? de solución de disolución y se cultiva por toda la noche. Esto asegura que los cristales de formazan están completamente disueltos. (9) Se determina la DO570. ( 10 ) Se calcula la relación de sobrevivencia relativa mediante la fórmula: Sobrevivencia celular relativa = (DO del grupo en tratamiento - DO de fondo) / (DO del Grupo de Control en SBF - DO de fondo) x 100%.

Resultados: Los resultados son mostrados a continuación en la Tabla 3: Tabla 3. Efectos inhibidores de XC608 en la multiplicación de células cancerosas Ejemplo 6. XC608 combinado con Gemcitabina que inhibe más efectivamente el cáncer humano de ovario en ratones desnudos .

Objetivos: Probar el efecto de XC608, XC608-C1 y AZD7762 combinado con Gemcitabina en el tratamiento del cáncer utilizando el modelo de cáncer humano de ovario (BALB/c-un) en ratones desnudos.

Detalles experimentales: 1. Compuesto de prueba y método de preparación. El compuesto utilizado para esta prueba es XC608, mostrado anteriormente, XC608-C1 que es la sal clorada de XC608, 090208-1 también como polvo blanquecino y AZD7762 que es un polvo amarillo.

Todos los anteriores son disueltos en solución inyectable de glucosa al 5% diluidos a concentraciones apropiadas. Control: La gemcitabina es obtenida de Jiangsu Haosen Pharmaceuticals Co. Ltd., también disuelto a una concentración apropiada en solución salina.

Animales y Lineas celulares cancerosas: Animales de prueba: 30 ratones desnudos hembra BALB/c-un, con un peso corporal de 18-20 g suministrados por B&K Universal Group Limited, Shangai, China. Lineas celulares cancerosas: la linea celular de ovario humano proviene de una fuente comercial transplantada en ratones desnudos los cuales se mantuvieron por Shangai Pharmaceutical Industry Research Institute .

Métodos de Prueba: Los tumores de cáncer de ovario que llevan los ratones son aislados y cortados en piezas de 1 mm3 las cuales son implantadas subcutáneamente en los ratones de prueba. Después de 10 días, los tumores crecen hasta un tamaño de 0.1 cm3 aproximadamente. Los ratones de prueba son divididos al azar en 5 grupos de 6 animales.

Grupos de Tratamiento: Gemcitabina 25 mg/kg + XC608-F 50 mg/kg, Gemcitabina 25 mg/kg + AZD7762 10 mg/kg y control.

A partir de 11 días posteriores al implante del tumor, se les administran a los animales los compuestos de prueba por vía intravenosa. Los animales son pesados cada dos días y se mide el volumen del tumor. Después de 24 días a partir de la administración del compuesto de prueba, los animales son sacrificados y son aislados y pesados los tumores.

El volumen del tumor (VT) es medido y calculado.

El volumen relativo del tumor (VRT) es Vt/V0, en donde Vt es el volumen del tumor en el momento de la medición mientras que V0 es el volumen del tumor cuando se inició la administración del medicamento. s La actividad antitumoral de los compuestos es determinada mediante la tasa de incremento del VRT y la relación T/C (%) la cual es calculada como: T/C = VRT del grupo en tratamiento / VRT del grupo de control x 100%.

Si TC (%) es más de 60, el tratamiento es considerado como que no tiene efecto. Solamente cuando TC es menor a 60, y una diferencia es estadísticamente significativa, el tratamiento sería considerado como eficaz.

Otra medición es la tasa de inhibición del tumor que es IR (%) = (peso del tumor del grupo de controüs - peso del tumor del grupo en tratamiento) / peso del tumor del grupo de control x 100%.

Resultados: Los resultados están resumidos en las dos tablas siguientes: Tabla 4-1. Efectos de XC608 y XC608-C1 (i.v.) combinados con Gemcitabina en el tratamiento del cáncer humano de ovario transplantado en ratones desnudos (peso corporal) Tabla 4-2. Efectos de XC608 y XC608-C1 (i.v.) combinados con Gemcitabina en el tratamiento del cáncer humano de ovario transplantado en ratones desnudos (peso y volumen del tumor) Nota: *p<0.05; **p<0.01; i.v. = inyección intravenosa En la Figura 1 se muestra una representación gráfica de los resultados anteriores.

Ejemplo 7. Efectos anticancerosos de XC608 y su mecanismo de acción.

I . Sumario Los siguientes experimentos examinaron el mecanismo de acción y el efecto sensibilizante de XC608 en medicamentos antitumorales citotóxicos asi como sus efectos terapéuticos cuando se combinó con 5-fluorouracilo (5-Fu) y adriamicina (ADR) en ratones desnudos transplantados con cáncer humano de colon y cáncer de mama. 1. Mecanismo de Acción de XC608 XC508 inhibe claramente las actividades de Chk 1 y Chk 2 pero no tiene efecto aparente sobre c-met, HER2 o EGFR; elimina la fosforilación de ede2 inducida por la s topoisomerasa 1, impulsa a las células con daño en el ADN a continuar el ciclo celular completo; mejora claramente la reacción de las células a los medicamentos que causan daños en el ADN. Estos resultados, tomados en conjunto, demuestran que XC608 es un inhibidor especifico de Chk 1 y que sensibiliza otros medicamentos anticancerosos mediante la inhibición del proceso de reparación del ADN. 2. Efectos de XC608 en la sensibilización de medicamentos citotóxicos anticancerosos a nivel celular Son evaluados los efectos de XC608 y AZD7762 en un número de medicamentos citotóxicos anticancerosos utilizando cultivos celulares. Son estudiados los medicamentos antitumorales citotóxicos que incluyen el cisplatino (DDP) , paclitaxel, pemetrexed, 5-fluouracilo (5-fu), vinorelbina, oxaliplatino y gemcitabina. Los resultados muestran que XC608 tiene fuertes efectos sensibilizantes en la gemcitabina, DDP, s 5-fu y pemetrexed, siendo el más alto con la gemcitabina que llega a más de 20 veces. 3. Pruebas en animales que muestran los efectos de XC608 en la sensibilización a medicamentos anticancerosos citotóxicos .

Fueron probados ratones desnudos transplantados con cáncer humano de colon HT-29 y SW-620 y cáncer de mama MDA- MB-231 utilizando XC608 sólo y en combinación con ADR y 5-fu.

Los resultados muestran que XC608 tiene efectos sensibilizantes significativos sobre el efecto del s tratamiento con ADR y 5-fu en HT-29 y SW-620. 4. Conclusión XC608 es un inhibidor especifico de Chk 1, éste sensibiliza a las células cancerosas para mejorar los efectos de otros medicamentos anticancerosos citotóxicos mediante la inhibición de la reparación del ADN dañado. Tales efectos sensibilizantes de XC608 están fuertemente correlacionados con los tipos de medicamentos anticancerosos citotóxicos asi como también con los tipos de lineas celulares cancerosas.

II . Mecanismo de Acción de XC608 1. Sumario Son estudiados los efectos de XC608 en la actividad de las proteina quinasas Chk 1, Chk 2 y C-met, en las células que completan el ciclo celular después de los daños al ADN inducidos por medicamentos y las reacciones ante los daños al ADN. XC608 inhibe fuertemente las actividades de Chk 1 y Chk 2, reduce la fosforilación inducida por la topoisomerasa 1 en cdc-2 e impulsa a las células a continuar el ciclo celular completo. Al mismo tiempo, XC608 incrementa claramente la susceptibilidad celular a los daños del ADN. Estos resultados muestran que XC608 inhibe la reparación del daño al ADN. 2. Materiales y Métodos XC608 y AZD-7762 son polvos blanquecinos, con números de lote 090309-2 y 081107 respectivamente. Con buena disolución en solución madre de 10 rtiM de DMSO.

El kit K-LISA™ Chk l/Chk 2 Activity fue suministrado por Calibiochem (No. de catálogo CBA020) . Chk 1 y Chk 2 provienen de Upstate Biotechnology, Inc., y C-met, HER2 y EGFR provienen de Sigma. El péptido de Chk (KKKVSRSGLYRSPSMPENLNRPR) (SEQ ID NO: 1) proviene de Cell Signaling, Inc., (Beverly, MA, USA) y es almacenado a -70°C.

La linea celular HT-29 es adquirida de ATCC y cultivada a 37 °C con atmósfera de C02 al 5% en medio Mycoy' s 5A (GIBCO, Grand Island, NY, USA) que contiene 10% de suero bovino, L-glutamina, penicilina (100 Ul/ml) y estreptomicina (100 µg/ml) .

Determinaciones de actividad de quinasa: La enzima, muestra, péptido de Chk, ??? 5 pm y el buffer de reacción son dispensados en las cavidades de las placas de reacción con biotina. Después de que la reacción ha sido interrumpida con un buffer para detenerla, los contenidos se desechan y son remplazados con 100 µ?/???? de anticuerpos ^para serina quinasa para detectar la fosforilación, se añade IgG de cabra anti-conejo etiquetada con HRP y se incuba a temperatura ambiente por 1 hora. Se lleva a cabo una reacción con TMB para determinar la fosforilación del substrato con los controles apropiados. Se determina la DO450 utilizando un equipo VERSAmax (Sunnyvale, CA, USA) . La tasa de inhibición es calculada como sigue: Tasa de Inhibición (I) = (Valor de DO de la cavidad de reacción - Valor de DO del control libre de enzima) / (Valor de DO del control negativo - Valor de DO del control libre de enzima) x 100%. s 4. Resultados 4.1 Efectos de XC608 sobre Proteina Quinasas Estos resultados son mostrados en la Tabla 5, los cuales muestran que XC608 tiene un fuerte efecto inhibitorio sobre las proteina quinasas.

Tabla 5. Efectos de XC608 sobre las Actividades de Proteina Quinasas III. Efectos de XC608 sobre la Sensibilización de Células Cancerosas ante Medicamentos Anticancerosos Citotóxicos 1. Sumario Son evaluados los efectos de XC608 y AZD7762 sobre un número de medicamentos antitumorales citotóxicos. Son estudiados los medicamentos antitumorales citqtóxicos que incluyen el cisplatino (DDP) , paclitaxel, pemetrexed, 5-fluorouracilo (5-fu), vinorelbina, oxaliplatino y gemcitabina. Los resultados muestran que XC608 tiene fuertes efectos de sensibilización sobre la gemcitabina, DDP, 5-fu y pemetrexed, siendo el más alto con la gemcitabina que llega a más de 20 veces. 2. Objetivos Son evaluados los efectos de XC608 en la sensibilización de las células para un número de medicamentos antitumorales citotóxicos comparados con los de AZD7762 N que es un sensibilizador conocido. 3. Materiales y Métodos 3.1 Compuestos de Prueba: XC608 y AZD-7762 son polvos blanquecinos, con números de lote 090309-2 y 081107 respectivamente . 3.2 Lineas Celulares: Linea celular HT-29 (de ATCC) . 3.3 Equipo/Aparatos: McCoy' s 5A de Gibco BRL; suero fetal bovino de JRH; McCoy' s 5? de Gibco BRL; suero fetal bovino de JRH Biosciences, Australia, espectrofotómetro para microplacas SPECTRA MAX 190 de Molecular Device; SRB de Sigma . 4. Protocolo de Prueba: Los efectos de los compuestos sobre la multiplicación de células cancerosas fue determinado utilizando Sulforthodamina B (SRB) . Específicamente, las células en fase log son inoculadas en las cavidades de placas de cultivo de 96 pozos, se dejaron crecer u ilizando el procedimiento de adhesión a la pared a 37°C bajo atmósfera de C02 al 5% . Se adicionó el compuesto de prueba a 9 diferentes concentraciones, cada concentración por duplicado, con controles apropiados libres de células y solución salina. Las células son cultivadas durante otras 72 horas y son fijadas con TCA, se adiciona SRB para teñirlas, se lava y se seca al aire. Después de adicionar la solución Tris se determina el valor de DO a 510 nm utilizando un equipo Spectra Max 190. La tasa de inhibición es calculada de acuerdo a la siguiente fórmula: Tasa de Inhibición = (DOcontroi - DOmedicamento) / DOcontroi 100%.

La IC50 es calculada en base en las tasas anteriores. 5. Resultados Los efectos sensibilizantes de XCCS650(S) y AZD7762 son mostrados en la Tabla 6. Consistente con los resultados s precedentes, XC608 tiene fuertes efectos de sensibilización sobre la gemcitabina, DDP, 5-fu y pemetrexed, siendo el más alto con la gemcitabina que llega a más de 20 veces.

Tabla 6. Efectos sensibilizantes de XC608 en Medicamentos Antitumorales Citotóxicos Conclusión: XC608 es efectivo en la sensibilización de las células cancerosas ante los medicamentos anticancerosos citotóxicos DDP, 5-Fu, oxaliplatino y gemcitabina.

Ejemplo 8. Efectos anticancerosos de XC620 y su mecanismo Se diseñó y sintetizó el compuesto XC620 que es idéntico a XC608 excepto porque en la Fórmula I Y = 0. Fueron probados el mecanismo de acción y el efecto sensibilizante de XC620 sobre los medicamentos anticancerosos citotóxicos asi como también los efectos terapéuticos cuando se combina con 5- fluorouracilo (5-Fu) y con adriamicina (ADR) en ratones s desnudos con cáncer humano de colon y cáncer de mama transplantados, siguiendo los protocolos descritos con anterioridad. Los resultados muestran que XC620 también inhibe claramente las actividades de Chkl y Chk2 y es un inhibidor especifico de Chkl y sensibiliza otros medicamentos anticancerosos mediante la inhibición del proceso de reparación del ADN.

Los efectos de XC620 en la sensibilización de medicamentos anticancerosos citotóxicos a nivel celular son comparables con XC608. También tiene un efecto similar, aunque no tan efectivo, en la sensibilización de lineas de células tumorales ante medicamentos antitumorales citotóxicos que son estudiados e incluyen el cisplatino (DDP) , paclitaxel, pemetrexed, 5-fluorouracilo (5-fu) , vinorelbina, oxaliplatino y gemcitabina.

De ésta manera, XC620 también es un inhibidor especifico de Chkl; sensibiliza las células cancerosas para mejorar los efectos de otros medicamentos anticancerosos citotóxicos mediante la inhibición de la reparación del daño al ADN.

Ejemplo 9. Efectos anticancerosos de XC655 y su mecanismo Se diseñó y sintetizó el compuesto XC655 que es idéntico a XC608 excepto porque en la Fórmula I Y = S. Fueron probados el mecanismo de acción y el efecto sensibilizante de XC655 sobre los medicamentos anticancerosos citotóxicos asi como también los efectos terapéuticos cuando se combina con 5-fluorouracilo (5-Fu) y con adriamicina (ADR) en ratones desnudos con cáncer humano de colon y cáncer de mama transplantados, siguiendo los protocolos descritos con anterioridad. Los resultados muestran que XC655 también inhibe claramente las actividades de Chkl y Chk2 y es un inhibidor especifico de Chkl y sensibiliza otros ^medicamentos anticancerosos mediante la inhibición del proceso de reparación del ADN.

Los efectos de XC655 en la sensibilización de medicamentos anticancerosos citotóxicos a nivel celular son comparables con XC608. También tiene un efecto similar, aunque no tan efectivo, en la sensibilización de lineas de células tumorales ante medicamentos antitumorales citotóxicos que son estudiados e incluyen el cisplatino (DDP) , paclitaxel, pemetrexed, 5-fluorouracilo (5-fu) , vinorelbina, oxaliplatino y gemcitabina.

Por lo tanto, XC655 también es un inhibidor especifico de Chkl; sensibiliza las células cancerosas para mejorar los efectos de otros medicamentos an icancerosos citotóxicos mediante la inhibición de la reparación del daño al ADN.

La descripción y los ejemplos precedentes se han establecido solamente para ilustrar la invención y no se pretende que sean limitativos. Puesto que pueden producirse modificaciones, por las personas expertas en la técnica, de las formas de realización descritas y que incorporan el espíritu y la sustancia de la invención, la invención debe ser interpretada ampliamente para incluir todas las variaciones que caen dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas y sus equivalentes. Todas las referencias citadas y/o que se enumeran anteriormente o a continuación, se incorporan expresamente por referencia.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito el presente invento, se considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula I: ( donde Y = NH, 0 ó S. R1 = seleccionado de los siguientes grupos En donde X = CH2, NH, S u 0, R8 = -H, -NH2, -OH, -N (R\ R5) , -C ( R4R5 ) I_7NR6R7 , -C (R R5) i-7OR6 o -N (R4) NR5R6, en donde R4, R5, R6, R7 = H, alquilos (Ci-C6) , cicloalquilos (C3-C8) con o sin heteroátomos nucleares tales como 0, S y N, arilos (ya sean aromáticos substituidos o sin substituir) o heteroaromáticos (ya sean heteroaromáticos substituidos o sin substituir) , R9, R10, R11, R12 y R13 = H, alquilos (??-?e) , cicloalquilos (C3-C8) con o sin heteroátomos nucleares tales como 0, S o N; arilos (ya sean aromáticos substituidos o sin substituir) o heteroaromáticos (ya sean heteroaromáticos substituidos o sin substituir) , R2 es seleccionado de un grupo que consiste de H, OH, NH2, 0R14, NR1 R15, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, alquenilo y alquinilo, en donde R14, R15 = H, alquilos (Ci-C6) , cicloalquilos (C3-C8) con o sin heteroátomos nucleares tales como 0, S y N, arilos (ya sean aromáticos substituidos o sin substituir) o heteroaromáticos (ya sean heteroaromáticos substituidos o sin substituir) , y R3 es seleccionado de un grupo que consiste de H, alquilo, arilo, heteroarilo, cicloalquilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, alquenilo y alquinilo. Específicamente R3 es seleccionado de los siguientes grupos: en donde R16, R17 y R18 son seleccionados de los siguientes grupos: H; heteroátomos tales como F, Cl, Br, I; alquilo (Ci- CQ) , cicloalquilo (C3-C8) con o sin substitución en donde el s sustituyente es seleccionado del grupo constituido por alquilos (Ci-Ce) , cicloalquilos (C5-C8) ; arilos, heteroarilos; -0R19; -SR19; -NR19R20; -S(0)R19; -S(0)2R19; -S (0) 2NR19R20; - C(0)NR19R20; -N(R19)C(0)R20; -N (R19) S (0) 2R20; N(R19)C(O)N(R20R21) ; N (R19) C (0) OR20; arilo con o sin substitución, heteroarilo con o sin substitución, arialquilo con o sin substitución, heterociclilo con o sin substitución, heteterociclilalquilo con o sin substitución; alquenilo con o sin substitución y alquinilo con o sin substitución; en donde R19, R20 y R21 son elegidos independientemente de H, alquilo x (Ci-Ce) r cicloalquilos (C3-C8) / arilo con o sin substitución, alquilarilo con o sin substituciones, heteroarilo con o sin substitución, o R16, R17 y R21 pueden ser parte de un anillo fusionado que contiene de 0-3 heteroátomos seleccionados de N, 0 y S.

2. El compuesto de la reivindicación 1, donde Y = N.

3. El compuesto de la reivindicación 1, donde Y = S.

4. El compuesto de la reivindicación 1, donde Y = O.

5. El compuesto de la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste de: Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-piperidinamino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-piperidinamino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil) -4- ( 3-piperidinamino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidrdpiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidrotiapiran-amino ) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- ( S-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- (2-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (S-3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (R-3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piperidin-amino) -tieno [2 , 3-d] pirida zina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7 -N, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7 -N-meti1-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-fluorofenil ) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidropirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico 7Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidrofuran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico 7Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidroíuran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (S-3-tetrá*hidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (R-3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino ) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2, 3-d]piridazina-7-Nr N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- ( -clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- ( 3-piridin-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7 -carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7 -carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil ) -4- ( 3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-a-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3- -tiapiran-araino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (4-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (S-3-piridin-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (R-3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7 -carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7 -N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tiapiran-amino) tieno [2, 3-d]piridazina-7-N, -dimetil-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piran-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7 -N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-piran-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-fluorofenil) -4- ( 3-pirrol-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- ( 3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico N Amida del ácido 2- ( 4-bromofenil ) -4- ( 3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-fluorofenil) -4- (3-furan-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 4-fluorofenil) -4- (3-tieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico N Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-bromofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (2-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (S-3-pirrol-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (R-3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilICO -y Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil ) -4- ( 3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- ( 3-tieno-amino) tieno [2 , 3d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) tieno [2 , 3d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (4-clorofenil) -4- ( 3-furan-amino) tieno [2 , 3d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 4-clorofenil) -4- ( 3-furan-amino) tieno [2 , 3d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-piperidinamino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piperidinamino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-piperidinamino) ieno [ 2 , 3-d] iridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidropiran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil) -4- ( 3-tetrahidrotia piran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-piperidin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-piperidin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-piperidin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- (R-3-piperidin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piperidin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- ( 3-piperidin-amino) tieno [2, 3-d]piridazina-7-N, -dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran amino) -tieno [2 , 3-d] pi idazina-7-N-metil-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotiapiran amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropiran-amino) tieno [2 , 3-d] i idazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil) -4- ( 3-tetrahidropiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxílico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico x Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [ 2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- ( 2-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (R-3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidropirrol amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrotieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxí lico s Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tetrahidrofuran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico s Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-a-piran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico s Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil) -4- (3-a-tiapiran-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (4-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico s Amida del ácido 2- ( 3-clorofenil ) -4- (R-3-piridin-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piridin-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tiapiran-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico N Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piran-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-piran-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxílico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílico \ Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil ) -4- ( 3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- ( 3-fluorofenil) -4- (3-furan-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7 -carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- ( 3-bromofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-fluorofenil) -4- (3-tieno-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-bromofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2, 3 d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (2-pirrol-amino) tieno [2, 3-d] piridazina-7-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (S-3-pirrol-amino) tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxílice-Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (R-3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) -tieno [2, 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-pirrol-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico \ Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-tieno-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, -dimetil-carboxílico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-N-metil-carboxilico Amida del ácido 2- (3-clorofenil) -4- (3-furan-amino) -tieno [2 , 3-d] piridazina-7-?, N-dimetil-carboxilico

6. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la reivindicación 1 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

7. Un método para tratar el cáncer que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición farmacéutica de la reivindicación 5 a un paciente que necesita de ésta.