MX2011003259A - Compuesto de peptido y metodo para producir el mismo. - Google Patents

Abstract

Se proporciona un método de producción eficiente el cual se diseña para un proceso de producción industrial y es superior en la operatividad, pureza, etc. Como un resultado de conducir el estudio con respecto a un método de producción eficiente que está diseñado para un proceso de producción industrial, y que es superior en operatividad, y con el cual puede obtenerse un intermediario de alta pureza, se encontró que un método con el cual puede reducirse el número de etapas (de eliminación de ácido diamino), la purificación mediante cromatografía no es necesaria, y un intermediario puede obtenerse en una alta pureza, y se encontró un método para producir un compuesto de péptido cíclico conocido que tiene una actividad anti-VHC, un intermediario de péptido útil para la producción, y un método para producir el intermediario, que son relevantes para la presente invención. En el método, no es necesario repetir la degradación de Edman, para hacer posible el suministro de una gran cantidad del intermediario de péptido y del compuesto péptido cíclico sin realizar la etapa de cromatografía asociada con la reacción.

Description

COMPUESTO DE PEPTIDO Y METODO PARA PRODUCIR EL MISMO Campo de la Invención La presente invención se refiere a un método para producir u n compuesto de péptido cíclico útil como ingrediente activo para una composición farmacéutica , particularmente una composición farmacéutica para el tratamiento del virus de la hepatitis C (HCV po r sus sig las en i nglés) , que se conoce como un in hibidor contra la replicación del ARN de réplicas del virus de la hepatitis C , u n intermediario útil para la producción del compuesto de péptido cíclico, y método para producir el mismo.

Antecedentes de la Invención Se reportó que un compuesto de péptido cíclico de la siguiente fórmula (A) o una sal del mimo es útil como un ingrediente activo de una composición farmacéutica para el tratamiento de HCV, basado en su actividad inh ibidora contra la replicación del ARN de réplicas del virus de la hepatitis C (Cita de Patente 1 ) .

[Pa ra los símbolos en la fórmula, referirse a la Cita de Patente La Cita de Patente 1 describe que el compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo puede producirse utilizando una sustancia FR901459 (Cita de Patente 2) que es un producto de fermentación como materia prima vía el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo. Específicamente, se realiza vía las etapas < 1 > a <6> a continuación . <1 > Producción del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo por la transposición de N-0 y después la abertu ra del a nillo de la sustancia F R901459 o u na sal del mismo. <2> Prod ucción del compuesto de fórmula (A2-2) o u na sal del mismo condensando la treonina en una terminal C del compuesto de fórmula ( I) o una sal del mismo. <3> Producción del compuesto de fórmula (A3) o una sal del mismo realizando la deg radación de Edman tres veces en el compuesto de fórmu la (A2-2) o u na sal del mismo. <4> Producción del compuesto de fórmula (A4-4) o una sal del mismo condensando un ácido diamino en la terminal N del compuesto de fórmula (A3) o una sal del mismo. <5> Producción del compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo ciclizando el compuesto de fórmula (A4-4) o una sal del mismo. <6> Producción del compuesto de fórmu la (Ab) o u na sal del mismo reduciendo el compuesto de fórmula (Aa) o una sal del mismo.

Cada una de las etapas se describirá detalladamente a continuación. <1> Esta etapa es una etapa para producir el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de una sustancia FR901459 representada por la fórmula (A1-1) o una sal del mismo. Específicamente, el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo es producido sometiendo la sustancia FR901459 a una reacción de transposición de N-O bajo condiciones ácidas débiles, y después hidrólisis del compuesto de fórmula (A1-2) o una sal del mismo obtenido mediante protección de un grupo amino para efectuar la abertura del anillo. 1 ) transposición (A1-2) 2) Prolección 3) Hidrólisis [en donde Prot0 significa un grupo protector. Para los otros símbolos en la fórmula, referirse a la Cita de Patente 1.] <2> Esta etapa es una etapa para producir el compuesto de fórmula (A2-2) o una sal del mismo del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo. El compuesto de fórmula (A2-2) o una sal del mismo es producido condensando el compuesto de fórmula (A2-1) al compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo.

[Compuesto Químico 3] (A2-2) [en donde Prot0 significa un grupo protector. Para los otros símbolos, referirse a la Cita de Patente 1.] <3> Esta etapa es u na etapa para prod ucir el compuesto de fórmula (A3) o una sal del mismo del compuesto de fórmula (A2-2) o una sal del mismo . El compuesto de fórmula (A3) o una sal del mismo es producido sometiendo el compuesto de fórmu la (A2-2) o una sal del mismo a deg radación de Edman tres veces, es decir, eliminación de aminoácidos secuencialmente de terminal N del compuesto de fórmula (A2-2) o u na sal del mismo.

Degradación de Edman <3 veces) (A3) [Para los símbolos en la fórmula , referirse a la Cita de Patente 1 ] <4> Esta etapa es una etapa para prod ucir el compuesto de fórmula (A4-4) o u na sal del mismo del compuesto de fórmula (A3) o una sal del mismo. El compuesto de fórmula (A4-4) o una sal del mismo es producido condensando el aminoácido protegido de fórmula (A4-3) al compuesto de fórmu la (A4-2) o una sal del mismo, que se ha obtenido sometiendo el compuesto de fórmula (A3) o u na sal del mismo para la introducción de un aminoácido al termi nal N y desprotección . [en donde cada u no de Prot3 y Prot4 significan un g rupo protector. Para los otros símbolos , referirse a Cita de Patente 1 .] <5> Esta etapa es una etapa para producir el compuesto de fórmula (Aa) o una sal del mismo del compuesto de fórmula (A4-4) o una sal del mismo. El compuesto de fórmula (Aa) o una sal del mismo es producido sometiendo el compuesto de fórmu la (A4-4) o una sal del mismo a desprotección y después a macrolactamización .

[Para los símbolos en la fórmula , referirse a la Cita de Patente 1 ] <6> Esta etapa es una etapa para producir el compuesto de fórmula (Ab) o una sal del mismo del compuesto de fórmula (Aa) o una sal del mismo. El compuesto de fórmula (Ab) o u na sal del mismo es producido mediante reducción catalítica general .

[Para los símbolos en la fórmula, referirse a la Cita de Patente 1 ] Este es un proceso repetidamente realizar la degradación de Edman q ue puede causar u n problema cuando la producción del compuesto de fórmula (A) de una sal del mismo en el método de producción descrito anteriormente se aumenta hasta un nivel industrial . Puesto q ue los subprod uctos obtenidos por degradación de Edman potencialmente hacen el siguiente complejo de reacción , se requiere purificación . Es particularmente preferible no realizar la cromatografía en columna que req u iere operaciones complicadas cuando se aumenta hasta el nivel industrial .

En la Cita de Patente 1 (por ejemplo, Preparación 3) , una etapa de purificación por medio de cromatografía en columna es incluida entre las etapas.

Cita de la Técnica Anterior Cita de Patente [Cita de Patente 1 ] WO 2007/049803 [Cita de Patente 2] J P-A-5-271 267 Breve Descripción de la Invención Problema a Solucionarse por la I nvención Se proporciona u n método eficiente para producir el compuesto de fórmula (A), q ue se diseña para un proceso de prod ucción industrial y es superior en operabilidad, pureza, y similares , un intermediario útil para la producción , y un método para produci r el intermediario.

Medios para Solucionar el Problema Los presentes inventores han hecho estudios extensos en un método de prod ucción eficiente q ue se diseña para un proceso de producción industrial y es superior en operabilidad , pureza , y similares . Como u n resultado, han encontrado una reacción con la cual el número de etapas puede reducirse, y han encontrado as í u n método para producir un compuesto de fórmula (A) con miras a la producción industrial , en la cual el compuesto puede obtenerse en una alta pureza incluso sin purificación por la cual requiere operaciones, u n intermediario útil para la producción, y un método para producir el intermediario, para de tal modo completar la presente invención.

De acuerdo con la presente invención , la degradación de Edman puede realizarse una vez, e incluso sin purificación por medio de cromatog rafía en columna que sig ue como tratamiento posterior, el compuesto de fórmula (A) y un intermediario útil para producción del mismo pueden proporcionarse en una alta pureza. [1] Un método para producir un compuesto de fórmula (III) o sal del mismo: (en donde R* significa -H o un grupo protector, iBu significa isobutilo, ¡Pr significa isopropilo, y Me significa metilo), ! que comprende la eliminación de un ácido diamino de un compuesto de fórmula (II) o una sal del mismo: en una sola etapa. [2] Un método para producir un compuesto de fórmula (VI) sal del mismo: , (en donde Rx significa -H o un grupo protector, iBu significan isobutilo, iPr significa isopropilo, Me significa metilo, y Prot0 y Prot1 significan grupos protectores), que comprende someter un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo: a una reacción de desprotección para obtener un compuesto de fórmula (II) o una sal del mismo, e introducir un grupo protector al compuesto de fórmula (III) o una sal del mismo obtenido por el etapa descrita en [1]. [3] Un método para producir un compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo: (en donde X es R1 es -H, o un alquilo inferior; R2 es -H, arilo, o alquilo inferior, en donde el alquilo inferior puede sustituirse con un sustituyente adecuado seleccionado del grupo que consiste de hidroxi, cicloalquilo, alcoxi inferior, arilo, aralcoxi, carbamoiloxi que puede sustituirse, y amino que puede sustituirse; es un heterociclo que contiene nitrógeno; e Y es O -Ó R3 es cicloalquilo, arilo, un heterociclo el cual puede sustituirse, o alquilo inferior, en donde el alquilo inferior puede sustituirse con un sustituyente adecuado seleccionado del grupo que consiste de hidroxi, cicloalquilo, alcoxi inferior, arilo, aralcoxi, alcoxi inferior-alquileno inferior-O-, amino que puede sustituirse, y -OC(0)NR6R7, (en donde R6 y R7 cada uno representa independientemente -H o alquilo inferior, o R6 y R7, junto con un átomo de nitrógeno al cual se unen, representan un heterociclo que contiene nitrógeno, que puede sustituirse con alquilo inferior); R4 y R5 cada uno representan independiente -H o alquilo inferior; representa un solo enlace o un enlace doble. (a condición de que si es Rz -H, R3 es cicloalquilo, arilo, un heterociclo que puede sustituirse, alcoximetilo inferior, aralquilo, n t-butilo, sec-butilo, cicloalquilo, o etilo, en donde el etilo puede sustituirse con un sustituyente adecuado seleccionado del grupo que consiste de alquilo inferior, o hidroxi, alquilo inferior-O-, arilo-alquileno inferior-O-, alquilo inferior-alquileno inferior-O-, amino que puede sustituirse, y -OC(0)NR6R7)), del compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo obtenido del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo por el método de producción de [2] . [4] Un método para producir un compuesto de fórmula (VI I I) o u na sal del mismo: (en donde Prot2 sign ifica u n grupo protector) , que comprende someter el compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo obtenido del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con el método de prod ucción de [2] a condensación con una treonina protegida en la terminal del ácido carboxílico, y desproteger la term inal ami no. [5] Un método para producir un compuesto de fórmula (A) o u na sal del mismo, que comprende someter el compuesto de fórmula (VI I I ) o u na sal del mismo obtenido del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con el método descrito adentro de [3] a condensación con un ácido diamino en la terminal amino, realizando la desprotección, y después realizando la ciclización. [6] Un compuesto o una sal del mismo seleccionado del grupo que consiste de: [Tabla 1] El intermediario obtenido por el método de producción de la presente invención es útil desde los puntos de vista mostrados a continuación. (1) El compuesto de fórmula (VIII) o una sal del mismo obtenido por el método de producción descrito antes [4] es útil como un intermediario para la producción puesto que se somete a condensación de un ácido diamino al terminal N, desprotección, y después ciclización, el compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo pueden producirse, que se reporta para ser útil como un ingrediente activo de una composición farmacéutica anti-HCV para tratamiento. (2) El compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo obtenido por el método de producción descrito antes [2] es útil como un intermediario para la producción puesto que se somete a condensación de una treonina protegida al terminal C y desprotección de terminal N, el compuesto de fórmula (VIII) o una sal del mismo puede producirse, y el compuesto de fórmula (VIII) o una sal del mismo obtenido así permite la producción del compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo, que se reporta para ser útil como un ingrediente activo de una composición farmacéutica anti-HCV para tratamiento, por el método de acuerdo con lo descrito en (1) antes. (3) El compuesto de fórmula (III) o una sal del mismo obtenido por el método de producción descrito antes [1] es útil como un intermediario para la producción puesto que se somete a degradación de Edman una vez y después protección de terminal N, el compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo puede producirse, y el compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo así obtenido permite la producción del compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo, que se reporta para ser útil como un ingrediente activo de una composición farmacéutica anti-HCV para tratamiento, por los métodos como se descrito en (1) y (2) antes.

Además, a menos que se describa específicamente de otra manera, en el caso donde los símbolos en las fórmulas en la presente especificación también se utilizan en otras fórmulas, los mismos símbolos indican los mismos significados.

Efectos de la Invención El presente método de producción es superior en operabilidad de los puntos de vista que un ácido diamino puede eliminarse en una sola etapa. De acuerdo con el presente método de producción, por ejemplo, puesto que el compuesto de fórmula (III) o una sal del mismo de la presente invención no causa la producción secundaria de tiohidantoinas o similares en una etapa en la cual una reacción de degradación de Edman puede omitirse, incluso sin purificación por medio de cromatografía, el compuesto de fórmula (A), un intermediario para producir el mismo, o una sal de cada uno del mismo puede obtenerse en una mayor pureza mediante cristalización. Por consiguiente, puede aumentarse hasta el nivel industrial.

Mejor Modo para Realizar la Invención A continuación, la presente invención se describirá detalladamente.

En la presente especificación, el "grupo protector" es un grupo que no tiene ningún efecto en un grupo funcional incluso durante la desprotección mientras que no interfiera con la reacción. Los ejemplos del mismo incluyen grupos protectores descritos en "Greene's Protective Groups in Organic Synthesis (4a edición, 2006)", editado por P.G. . Wuts y T.W. Greene, y similares, y el grupo protector pueden seleccionarse apropiadamente de acuerdo con las condiciones de reacción y utilizarse.

En cuanto a "terminal N" o "terminal C", en el péptido lineal, un grupo amino o un grupo carboxilo existe en ambas terminales, pero la "terminal N" significa que un lado en el cual un grupo amino existe y la "terminal C" significa un lado en el cual un grupo carboxilo existe.

La expresión "que puede sustituirse" significa que no se sustituye o que tiene 1 a 5 sustituyentes. Además, si tiene una pluralidad de sustituyentes, tales sustituyentes pueden ser iguales o diferentes entre sí.

A menos que se indique de otra manera específicamente, el término "inferior" significa un grupo que tiene 1 a 6 átomos de carbón (más adelante designado simplemente como C1-4 átomos de carbono, y preferiblemente de 1 a 4 átomos de carbono.

El "alquilo inferior" es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono lineal o ramificado, y es, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, tere-butilo, n-pentilo, n-hexilo, o similares, en otra modalidad, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y en una otro modalidad, metilo, etilo, o propilo.

El "alq u ileno inferior" es un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono lineal o ramificado, y es, por ejemplo, metileno, etileno , trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, propileno, metilmetileno, etiletileno, o similares, y en otra modalidad , alquileno de 1 a 4 átomos de carbono.

El "alcoxi inferior" es u n gru po alquilalcoxi de 1 a 6 átomos de carbono lineal o ramificado tal como metoxi , etoxi, propoxi , isopropoxi, butoxi, isobutoxi, terc-butoxi, pentiloxi , terc-pentiloxi , neopentiloxi, hexiloxi , isohexiloxi , y similares. En otra modalidad , es metoxi , etoxi , o propoxi .

El "cicloalquilo" es alquilo alq uilcíclico de 3 a 6 átomos de carbono tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo , y similares.

El "arilo" es fen ilo, naftilo, antrilo, o similares.

El "aralquilo" es un alqu ilo inferior sustituido con 1 a 5 g ru pos arilo , tal como fenilpropilo, fenetilo, bencilo, y similares.

El "aralcoxi" es alcoxi inferior sustituido con 1 a 5 g rupos arilo, tal como fenilpropoxi , fenetiloxi , benciloxi , y similares.

Los ejemplos adecuados del "amino que puede sustituirse" incluyen amino que puede sustituirse con 1 ó 2 sustituyentes adecuados , tal como alquilo inferior, un grupo protector amino (por ejemplo, benciloxicarbonilo, Boc, y similares) , etc.

Los ejemplos adecuados del "carbamoiloxi que puede sustituirse" incluyen carbamoiloxi que puede sustituirse con 1 ó 2 sustituyentes adecuados, tal como alq uilo inferior, un grupo protector para un grupo amino (por ejemplo, benciloxicarbonilo, Boc, y similares), etc.

El "heterociclo" es como sigue: (1) heteromonociclo de 3 a 8 miembros insaturado (más preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 a 4 átomos de nitrógeno, tal como pirrolilo, pirrolinilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, dihidropiridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, triazolilo (por ejemplo: 4H-1 ,2,4-triazolilo, 1 H-1 ,2,3-triazolilo, 2H-1,2,3-triazolilo, y similares), tetrazolilo (por ejemplo 1 H-tetrazolilo, 2H-tetrazolilo, y similares), azepinilo, y similares; (2) heteromonociclo de 3 a 8 miembros saturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 a 4 átomos de nitrógeno, tal como aziridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo, piperidilo, piperazinilo, 2,5-metanopiperazinilo, hexahidroazepinilo, y similares; (3) un heterociclo condensado insaturado que contiene 1 a 4 átomos de nitrógeno, tal como indolilo, isoindolilo, indolinilo, indolizinilo, bencimidazolilo, quinolilo, isoquinolilo, indazolilo, benzotriazolilo, tetrahidroquinolilo, tetrahidroisoquinolilo, tetrahidroindolilo, dihidroindazolilo, y similares; (4) heteromonociclo de 3 a 8 miembros insaturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 ó 2 átomos de oxígeno y 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como oxazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo (por ejemplo: 1 ,2,4-oxadiazolilo, 1 ,3,4-oxadiazolilo, 1 ,2,5-oxadiazolilo, y similares), y similares; (5) heteromonociclo 3 a 8 miembros saturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 ó 2 átomos de oxígeno y 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como morfolinilo, sidnonilo, y similares; (6) un heterociclo condensado insaturado que contiene 1 ó 2 átomos de oxígeno y 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como benzoxazolilo, benzoxadiazolilo, y similares; (7) heteromonociclo de 3 a 8 miembros insaturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 ó 2 átomos de azufre y 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como tiazolilo, isotiazolilo, tiadiazolilo (por ejemplo: 1 ,2,3-tiadiazolilo, 1 ,2,4-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, 1 ,2,5-tiadiazolilo, y similares), dihidrotiazinilo, y similares; (8) heteromonociclo 3 a 8 miembros saturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) contiene 1 ó 2 átomos de azufre y 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como tiazolidinilo, y similares; (9) heteromonociclo 3 a 8 miembros insaturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 ó 2 átomos de azufre, tal como tienilo, dihidroditiinilo, dihidroditionilo, y similares; (10) un heterociclo condensado insaturado que contiene 1 ó 2 átomos de azufre y 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, imidazotiadiazolilo, y similares; (11) heteromonociclo de 3 a 8 miembros insaturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene un átomo de oxígeno, tal como furilo y similares; (12) heteromonociclo de 3 a 8 miembros saturado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) que contiene 1 ó 2 átomos de oxígeno, tal como oxiranilo, 1 ,3-d ioxolanilo , tetrahidrofura nilo, tetrahidropiran ilo, y similares; ( 1 3) heteromonociclo de 3 a 8 miembros insatu rado (preferiblemente 5 ó 6 miembros) q ue contiene un átomo de oxígeno y 1 ó 2 átomos de azufre, tal como dihidroxatiinilo, y similares ; (14) un heterociclo condensado insatu rado que contiene 1 ó 2 átomos de azufre, tal como benzotien ilo, benzoditiinilo, y similares; ( 1 5) un heterociclo condensado insaturado que contiene un átomo de oxígeno y 1 ó 2 átomos de azufre, tal como benzoxatiiniló y similares; ( 1 6) un heteromonociclo condensado saturado que contiene 1 a 3 átomos de nitrógeno, tal como tetrahidropiridopirrolidinilo y similares; etc.

Los ejemplos adecuados del "heterociclo que contiene nitrógeno" son aquellos en ( 1 ) a (7) como se describe anteriormente , y en otra modalidad , son heterociclos que contienen por lo menos un átomo de nitrógeno, tal como pirrolidinilo, piperidilo, morfolini lo , tiazolilo, oxazolilo, y similares.

Ejemplos adecuados del "heterociclo" que pueden sustituirse son los heterociclos descritos anteriormente, que pueden sustitu irse con por lo menos u n sustituyente apropiado, tal como alquilo inferior, alcoxi inferior, arilo, ami no, alcoxicarbonilo inferior, y similares .

El "halógeno" sig nifica flúor, cloro, bromo, o yodo.

En la presente especificación , las abreviaturas sigu ientes pueden utilizarse en algunos casos.

C PM E = ciclopentilmetiléter, dicarbonato de DI BOC=d i-terc- butilo, DME=1 ,2-dimetoxietano, DMF=N,N-dimetilformamida, DMI = 1,3-dimetil-2-¡midazolidinona, DMSO=dimetilsulfóxido, DIPEA=diisopropiletilamina, DPPA=difenilfosforilazida, acetato de EtOAc=etilo, Ex=Ejemplo No., HOBt=1-hidroxibenzotriazolo, alcohol de IPA-isopropilo, dihidrógenfosfato de KH2P04-potasio, NMP = N-metilpirrolidona, carbonato de Na2C03=sodio, hidrógenfosfato de Na2HP04=disod¡o, TEA=trietilamina, ácido TFA=trifluoroacético, de WSC=1 -etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida, tBuOH = butanol terciario, LR-ESIMS=baja resolución-ESIMS, HR-ESIMS-alta resolución-ESIMS, Me=metilo, iBu = isobutilo, iPr=isopropilo, Boc=butoxicarbonilo terciario, Ph-fenilo, No. = número.

El compuesto de la presente invención puede existir en la forma de isómeros geométricos. En la presente especificación, el compuesto de la presente invención será descrito en solamente una forma de isómero, pero la presente invención incluye tal isómero, formas aisladas de los isómeros, o una mezcla de los mismos.

Además, el compuesto de la presente invención tiene átomos de carbono asimétricos, y correspondientemente, existe en forma de isómeros ópticos. La presente invención incluye una forma aislada de estos isómeros ópticos del compuesto de la presente invención, o una mezcla de los mismos.

Además, el compuesto de la presente invención puede formar una sal con un ácido o una base, dependiendo de la clase de sustituyentes, en algunos casos. Específicamente, los ejemplos de las sales incluye sales de adición de ácido con ácidos inorgánicos tal como ácido clorh íd rico, ácido bromh íd rico, ácido hidroyódico, ácido sulfú rico, ácido n ítrico, ácido fosfórico, y similares, y con ácidos orgánicos tal como ácido fórmico, ácido acético , ácido propiónico , ácido oxálico, ácido malónico, ácido succíníco, ácido fumárico , ácido maleico, ácido láctico, ácido málico, ácido mandélico, ácido tartárico , ácido dibenzoilta rtárico, ácido ditoliltartárico, ácido cítrico , ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluensu lfónico, ácido aspártico, ácido glutámico, y similares, y sales con bases inorgán icas tal como sodio, potasio, mag nesio, calcio , aluminio, y similares o bases orgánicas tal como metilamina , etilamina, etanolam ina , lisina , ornitina , y similares, sales con varios aminoácidos o derivados del aminoácido tal como acetilleucina y similares , sales de amonio, etc.

Además, la presente invención también incluye varios hidratos o solvatos, y sustancias cristalinas polimórficas del compuesto de la presente invención y una sal de los mismos. También , la presente invención incluye compuestos marcados con varios isótopos radiactivos o no rad iactivos.

(Métodos de Producción) A continuación , los métodos de producción representativos para los compuestos de fórmula (I ) a (VI I I) se describirán.

(Primera etapa) [en donde Prot0 significa un grupo protector].

La presente etapa es una etapa en el cual la terminal N desprotegida, y después un ácido diamino se elimina en una sola etapa bajo condición de calentamiento.

Cuando Rx es un grupo protector, los ejemplos del mismo incluyen alquilo inferior que puede sustituirse con fenilo, alq uilo inferior que puede sustituirse con arilo, y similares. En otra modalidad , los ejemplos del mismo incluyen alquilo inferior, bencilo, y tere-butilo.

Ejemplos de Prot0 incluyen carbamato, toluensulfonilo, nitrobencensulfonilo, y similares. En otra modalidad , los ejemplos del mismo incluyen Boc, benciloxicarbonilo , 9-fluorenilmetiloxicarbonilo , 2 ,2,2-tricloroetoxicarbonilo, y aliloxicarbonilo.

Para la desprotección , puede hacerse referencia a , por ejemplo, una reacción de desprotección para cada grupo protector como se descrine en "Greene's Protective Groups ¡n Organic Synthesis (4a edición , 2006)", editado por P .G . M . Wuts y T.W. Greene , y la desprotección puede selecciona rse apropiadamente y utilizarse de acuerdo con estas condiciones de reacción .

Entibiando el intermediario de materia prima en un solvente, se elimina el ácido diamino. Como una temperatura de reacción, las condiciones del calentamiento a reflujo son preferibles. El solvente no está limitado mientras no altere la reacción. Como el solvente, por ejemplo, CPME, dioxano, THF, DMSO, DMF, IPA, tBuOH, NMP, DMI, DME, agua, o similares, los solventes basados en éter o agua es preferible, y los solventes acuosos de CPME son particularmente preferibles. La reacción puede ser u homogénea o bifásica, pero bifásica es particularmente preferidas. Puede ser ventajoso realizar la reacción en presencia de un ácido o de una base, o sales. Generalmente, a la reacción se agrega líquido una solución amortiguadora, y así, la reacción se realiza en el sistema que contiene agua. Los ejemplos de la solución amortiguadora incluyen amortiguadores de fosfato, amortiguadores de Tris, y similares, pero los amortiguadores de fosfato son preferidos. La temperatura varía dependiendo del solvente, y la reacción se realiza a una temperatura de 30°C a una temperatura de reflujo del solvente, por ejemplo, de 30°C a 180°C. Una temperatura de 50°C a 120°C es preferida, y una temperatura de 60°C a 85°C es particularmente preferida. Como en la descripción en Ejemplos como se describe más adelante, el producto puede obtenerse como un cristal incluso sin un cristal sembrado, pero cuando el cristal sembrado se agrega para precipitar el cristal, el cristal puede precipitarse fácilmente en algunos casos.

(Segunda Etapa) La presente etapa es la deg radación de Edman , que etapa para eliminar un aminoácido del péptido de terminal N .

Incluye dos etapas de someter isotiocianato de fenilo en la terminal N bajo condiciones débilmente básicas, y eliminar el aminoácido bajo condiciones ácidas como 3-fenil-2-tiohidantoina. En cuanto al solvente, la reacción se realiza generalmente en un solvente común tal como un solvente orgánico que no da un efecto nocivo sobre la reacción, tal como acetonitrilo, acetona, alcoholes tal como MeOH, EtOH, y similares, THF, dioxano, tolueno, cloruro de metileno, cloroformo, EtOAc, DMF, y similares, o un solvente mezclado del mismo, y similares. La temperatura de reacción no es limitada, y la reacción se realiza generalmente bajo condiciones de enfriamiento a calentamiento. La presente reacción puede realizarse cerca, por ejemplo, el método descrito en M. K. Eberle y colaboradores, J, Org. Chem. 59, 7249-7258 (1994) o similares, o un método equivalente.

(Tercera Etapa) (B2) Condensaci Desprotección [en donde cada uno de Prot1 y Prot2 significa un grupo protector].

La presente etapa es una etapa en la cual el terminal N de un péptido encadenado como un intermediario se protege, una treonina protegida se condensa a terminal C, y después la terminal N es desprotegida.

Los ejemplos de Prot2 incluyen alquilo inferior que puede sustituirse con fenilo, alquilo inferior que puede sustituirse con arilo, y similares. En otra modalidad, los ejemplos de los mismos incluyen alquilo inferior, bencilo, y tere-butilo.

Ejemplos de Prot1 incluyen carbamato, toluensulfonilo, nitrobencensulfonilo, y similares. En otra modalidad, los ejemplos del mismo incluyen Boc, benciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetiloxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, aliloxicarbonilo.

Para condensar una treonina protegida al terminal C del péptido encadenado del sustrato, la condensación puede realizarse de la misma amanera como una reacción de amidación así llamada.

Específicamente, el compuesto de fórmula (VII) o una sal del mismo puede obtenerse haciendo reaccionar el compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo con la treonina protegida de fórmula (B2). En esta reacción, el compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo y la treonina protegida de fórmula (B2) se utilizan en cantidades iguales o una cantidad excesiva de cualquiera, y la mezcla se agitó bajo cualquier condición de temperatura de enfriamiento a calentamiento en un solvente que sea inerte a la reacción, preferiblemente de -20°C a 60°C, generalmente durante 0.1 horas a 5 días. Los ejemplos del solvente usado en la presente no son particularmente limitados, sino que los ejemplos incluyen hidrocarburos aromáticos tal como tolueno, xileno, y similares, hidrocarburos halogenados tal como diclorometano, 1 ,2-dicloroetano, cloroformo, y similares, éteres tal como dietiléter, THF, dioxano, dimetoxietano, y similares, DMF, DMSO, EtOAc, MeCN, agua, y una mezcla de los mismos. Los ejemplos del agente de condensación incluyen, pero no se limitan a, WSC, DPPA, y oxicloruro fosforado. Puede ser preferible para la reacción utilizar un aditivo (por ejemplo, HOBt) en algunos casos. Puede ser ventajoso en algunos casos para el progreso de alisado de la reacción se realice la reacción en presencia de bases orgánicas tal como TEA, DIPEA, N-metilmorfolina, y similares, o bases inorgánicas tal como K2C03, Na2C03, KOH, y similares.

Además, puede utilizarse un método en el cual el compuesto de fórmula (VII) o una sal del mismo se convierte a su derivado reactivo, seguido por realizar una reacción con la treonina protegida de fórmula (B2) . Los ejemplos del derivado reactivo del ácido carboxílico incluyen halu ros ácidos que pueden obtenerse por la reacción de u n agente de halogenación tal como oxicloruro de fósforo, cloruro de tion ilo, y similares, anhídridos ácidos mezclados obtenidos por la reacción de cloroformiato isobutilo o similares , ésteres activos obtenidos por la condensación con HOBt o similares , etc. La reacción del derivado reactivo y la treonina protegida de fórmula (B2) puede realizarse a una temperatura de bajo enfriamiento a calentamiento, preferiblemente de -20°C a 60°C , en un solvente q ue sea inerte a la reacción , tal como hidrocarburos halogenados, h idrocarburos aromáticos, éteres, y similares.

[Cita] "Organic Functional Group Preparations", S. R. Sandler and W. Karo 2a edición , vol . 1 , Academic Press I nc. , 1 991 "Courses in Experimental Chemistry (5a edición)" , editado por la The Chemical Society of Japan , vol. 16 (2005) (Maruzen Com pany, Limited).

(Cuarta etapa) El compuesto de fórmu la (I I I) o una sal del mismo, el compuesto de fórmula (V) o una sal del mismo, o el compuesto de fórmula (VI I I ) o u na sal del mismo puede protegerse o desprotegerse utilizando un g ru po protector adecuado en un proceso adecuado, y condensarse con un aminoácido o un péptido, de tal modo produciendo el compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo . La reacción de ciclización es amidación, y así, puede realizarse de acuerdo con el método como en la tercera etapa descrita antes, y por consiguiente, puede hacerse referencia a la tercera etapa para las condiciones del reactivo y reacción usadas (por ejemplo, un solvente, una temperatura de reacción, y similares).

(Síntesis de la Materia Prima) Como se describe anteriormente, el compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo puede producirse utilizando una sustancia FR901459 como materia prima de acuerdo con la Cita de Patente 1.

La sustancia FR901459 puede obtenerse mediante, por ejemplo, el método descrito en la Cita de Patente 2 de un cultivo de microorganismo Stachybotrys spp. (Stachybotrys chartarum No. 19292), depositado en International Patent Organism Depositary National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, Tsulcuba Central 6, 1-1-1, Higashi, Tsukuba-shi, Ibaraki-ken, (código postal) 305-8566, JAPON el 16 de abril de 1991 con depósito No. PERM BP-3364.

Los Compuestos de Ejemplo se aislan y purifican como compuestos libres, sales del mismo, hidratos, solvatos, o sustancias cristalinas polimórficas de los mismos. La sal de los Compuestos de Ejemplo puede también producirse de acuerdo con un método convencional para una reacción de formación de sal. El aislamiento y purificación son realizados utilizando extracción o cristalización fraccionaria.

Ejemplos A continuación, los métodos para producir los compuestos de fórmulas (I) a (VIII) serán descritos detalladamente con referencia a los Ejemplos. Las estructuras de los Compuestos de Ejemplo se muestran en la tabla 4.

Ejemplo 1 (Producción del compuesto de fórmula (I), en donde Prot° es Boc) 93.8 mg de ácido (6S,12S,15S,18S,21S,24R,27S,30S,33S,36S)-6-[(1R)-1-hidroxiet¡l]-36-[(1R,2R,4E)-1-hidroxi-2-metil-4-hexen-1-il]-12,15,18,27,30-pentaisobutil-33-isopropil-2,2,8,11,17,21,24,26,32,35-decametil- 4.7.10.13.16.19.22.25.28.31.34- undecaoxo-3-oxa- 5.8.11.14.17.20.23.26.29.32.35- undecaazaheptatriacontan-37-oico se obtuvo de acuerdo con el método descrito en la Cita de Patente 1.

El ejemplo 2 (producción del compuesto de fórmula (II)) Se disolvieron 50.0 g del Compuesto de Ejemplo 1 en 500 mi de cloruro de metileno, siguiendo enfriando a 5°C, y se agregaron 213.2 g de TFA gota a gota al mismo, seguido por agitación durante 4 horas. Posteriormente, se agregaron 500 mi de agua corriente enfriada al mismo, seguido por el ajuste a pH 6.5 con 10% (p/v) de solución de Na2C03 acuosa. Después de la separación del líquido, se agregaron a la capa orgánica 500 mi de agua corriente enfriada de nuevo, seguido por el ajuste de pH 6.5 a 7 con 10% (p/v) de solución de Na2C03 acuosa. Después de la separación del líquido, se recolectó la capa orgánica mediante separación, y se concentró la capa inferior a aproximadamente 250 mi, seguido por la adición de 500 mi de CPME y concentración a aproximadamente 250 mi de nuevo. Se agregaron 500 mi de CPME al mismo, seguido por concentración bajo presión reducida a aproximadamente 250 mi. Aproximadamente se obtuvieron 250 mi de una solución del Compuesto de Ejemplo 2 en CPM E.

H R-ESIMS Encontrado m/z 1 236.8547 (M + H)+ Calculado para C62H 1 14N 1 1 014, 1236.8546 Ejemplo 3 (producción del compuesto de fórmula (I I I )) A aproximadamente 250 mi de la solución del Compuesto de Ejemplo 2 en CPME se agregaron 500 mi de CPM E y 500 mi de una solución amortiguadora de fosfato acuosa a pH 7.6 (la solución de Na2HP04 acuosa se ajustó a pH 7.6 con una solución de KH2P04 acuosa; la solución de Na2H P04 acuosa se preparó disolviendo 6.26 g de Na2HPCv 1 2H20 en 522 mi de ag ua; se preparó la solución de KH2P04 acuosa disolviendo 0.377 g de KH2P04 en 81 mi de agua), seguido elevando la temperatura de 80 a 85°C, agitando durante 5 horas, y después enfriando a 25°C. Se lavó la capa orgánica obtenida mediante separación de l íquido con 500 mi de agua corriente dos veces. Se concentró la capa orgánica a aproximadamente 1 05 mi, y después se agregaron 1 1 5 mi de acetonitrilo gota a gota a la misma. Posteriormente, se agregaron 75 mg del cristal sembrado del Compuesto de Ejemplo 3 a la misma a una tem peratura interna de 22°C, y se agregaron adicionalmente 345 mi de acetonitrilo gota a gota a la misma . Se recolectó el l íq uido de cristal precipitado mediante filtración y después se secó bajo presión reducida para obtener ácido (2S,3R,4R,6E)-3-hidroxi-4-metil-2-[metil(N-metil-L-leucyl-L-leucil-N-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-N-metil-L-leucil-L-leucil-N-metil-L-valil)amino]octa-6-enoico como un polvo de color blanco. Cantidad : 22.7 g, Rendimiento: 56.9% 13C-RMN (125 MHz, CDCI3, d): 175.7 (s), 174.1 (s), 173.1 (s), 172.8 (s), 172.3 (s), 171.6 (s), 171.0 (s), 170.6 (s), 168.1 (s), 129.0 (d), 126.9 (d), 75.5 (d), 61.2 (d), 60.2 (d), 58.4 (d), 55.3 (d), 54.4 (d), 48.1 (d), 47.8 (d), 47.2 (d), 45.5 (d), 41.3 (t), 41.1 (t), 38.6 (t), 36.1 (t), 36.1 (d), 36.0 (t), 35.9 (t), 34.3 (q), 31.2 (q), 30.8 (q), 30.2 (q), 30.1 (q), 27.0 (d), 25.1 (d), 25.1 (d), 24.9 (d), 24.8 (d), 24.8 (d), 23.6 (q), 23.4 (q), 23.3 (q), 22.9 (q), 22.9 (q), 22.4 (q), 21.9 (q), 21.6 (q), 21.4 (q), 21.3 (q), 19.5 (q), 18.1 (q), 18.0 (q), 16.8 (q), 16.2 (q), 15.4 (q). (confórmeros principales) HR-ESI S Encontrado m/z 1064.7697 (M + H)+ Calculado para C55H102N9O11 , 1064.7698 Además, se recolectó una parte del líquido de reacción del Ejemplo 3, y por los siguientes resultados de análisis, se confirmó que se produjo 3-(1-hidroxietil)-L-metilpiperazina-2,5-diona.

Columna: Columna de sílice de Waters Atlantis HILIC, 2.1x50 mm, 3 µ??; Gradiente: CH3CN-HCOOH = 1000-1?CH3CN-H20-HCOOH = 500-500-1(0 min?5 min), CH3CN-H2O-HCOOH = 500-500-1 (5 min?7 min), CH3CN-H2O-HCOOH = 500-500-1 )?CH3CN-HCOOH = 1000-1(7 min?7.1 min), CH3CN-HCOOH=1000: 1 (7.1 min-?10 min), velocidad de flujo: 0.5 ml/min, Detector: arreglo de diodo (210 nm a 600 nm), Tiempo de Retención: 1.51. 13C-RMN (100MHz, DMSO-d6): 166.3, 166.2, 68.5, 60.6, 51.2, 32.9, 19.8 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6): 1.08 (3H, d, J=6.6 Hz), 2.82 (3H, s), 3.52 (1H, s amplio), 3.66 (1H, d, J = 16.8 Hz), 3.96 (1H, d, J = 16.8 Hz), 3.99 a 4.04 (1H, m), 8.26 (1H, s amplio), MS: ESI ( + )/TOF-MS, Encontrado 173.0922 (M + H)+, Calculado Ejemplo 3-1 (Método para Producir la Sustancia Amorfa) A una solución del Compuesto de Ejemplo 2 en CPME (que corresponde a 40.0 g/800 mi) se agregaron 400 mi de una solución amortiguadora de fosfato acuosa a pH 7.6 (el pH de la solución Na2HP04 acuosa se ajustó a pH 7.6 con la solución KH2P04 acuosa; se preparó la solución de Na2HP04 acuosa disolviendo 6.26 g de Na2HP0 - 12H20 en 522 mi de agua; se preparó la solución acuosa KH2P04 disolviendo 0.377 g de KH2P04 en 81 mi de agua), siguiendo elevando la temperatura de 80 a 85°C, agitando durante 5 horas y 30 minutos, y después enfriando a temperatura ambiente. Se lavó la capa orgánica obtenida mediante separación de líquido secuencialmente con 400 mi de agua corriente y 400 mi de 20% (p/v) de salmuera. Se concentró la capa orgánica a aproximadamente 280 mi, y después se agregaron 1800 mi de n-heptano gota a gota a la misma. Se recolectó el polvo precipitado mediante filtración y después se secó bajo presión reducida para obtener ácido (2S,3R,4R,6E)-3-hidroxi-4-metil-2-[metil(N-metil-L-leucil-L-leucil-N-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-N-metil-L-leucil-L-leucil-N-metil-L-valil)amino]octa-6-enoico como polvo. Cantidad: 32,17 g, Rendimiento: 93.4%.

(Método para Prod ucir el Cristal Sembrado) Se disolvieron 25.0 g del polvo del Compuesto de Ejemplo 3 en un solvente mezclado de 40 mi de C P M E y 160 mi de acetonitrilo de 25 a 45°C. Posteriormente, se enfrió la mezcla lentamente a 20°C durante 1 hora, y agitó a 20°C du rante 1 8 horas. Se recolectó el cristal precipitado mediante filtración y después se secó bajo presión red ucida para obtener ácido (2S,3R,4R,6E)-3-hidroxi-4-metil-2-[metil(N-metil-L-leucil-L-leucil-N-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-N-metil-L-leucil-L-leucil-N-metil-L-valil)amino]octa-6-enoico como un cristal . Cantidad: 13.02 g, Rendimiento: 52.1 %.

Ejemplo 4 (Producción del Compuesto de Fórmula (IV)) Se disolvieron 1 0.0 g del Compuesto de Ejemplo 3 en 1 50 mi de EtOAc, y después 50 mi de un amortiguador de fosfato a pH 7.6 (el pH de la solución de Na2HP0 acuosa se ajustó a pH 7.6 con la solución de KH2P04 acuosa; se preparó la solución de Na2HP04 acuosa disolviendo 1 .04 g de Na2HP04- 12H20 en 87.5 I de agua ; se preparó la solución de KH2P04 acuosa disolviendo 0.568 g de KH2P04 en 1 2.5 I de agua) y se agregaron 7.54 g de fenilisotiocianato a la misma, seguido por agitación durante 4 horas. Posteriormente, se ajustó el pH a 2.3 con 1 M de ácido clorh ídrico. Después de la separación de líquido, se recolectó la capa orgánica mediante separación, lavó con 100 mi de 20% (p/v) de salmuera, y después concentró a aproximadamente 40 mi . Así , se obtuvieron aproximadamente 40 mi de una solución del Compuesto de Ejemplo 4 en EtOAc.

LR-ESI MS: 1222.0 (M + Naf , 1 1 98.1 (M-H)" Ejemplo 5 (Producción del compuesto de fórmula (V)) A aproximadamente 40 mi del Compuesto de Ejemplo 4 en EtOAc se agregaron adicionalmente gota a gota 200 mi de n-heptano. Se recolectó el polvo precipitado mediante filtración, y después se disolvió en 100 mi de acetonitrilo, y se agregaron 94 mi de ácido clorhídrico de 1 M adicionalmente, seguido por agitación a 20°C durante 3 horas y 15 minutos. Se confirmó que el Compuesto de Ejemplo 5 se obtenga.

HR-ESIMS Encontrado m/z 937.6712 (M + H)+ Calculado para C48H89N8O10, 937.67011 Ejemplo 6 (Producción del compuesto de fórmula (VI), en donde Prot1 es Boc) A 10% (p/v) de solución de Na2C03 acuosa se agregaron adicionalmente al líquido de reacción del Compuesto de Ejemplo 5 para ajustar el pH a aproximadamente 7. Se agregaron 2.25 g de DIBOC adicionalmente, seguido por agitación a 25°C durante 3 horas y 20 minutos, y después de ajustar a pM 2.5 con 1 M de ácido clorhídrico. Se recolectó la capa orgánica mediante separación y se agregaron 100 mi de 20% (p/v) de salmuera adicionalmente, seguido por extracción con 100 mi de EtOAc. Se recolectó la capa orgánica mediante separación y después se concentró a aproximadamente 40 mi y se agregaron 150 mi de EtOAc de nuevo a la misma, seguido por concentración a aproximadamente 40 mi. Se agregaron a este líquido concentrado de nuevo 150 mi de EtOAc, seguido por concentración a aproximadamente 40 mi. Después, se enfrió la mezcla a 5°C y agregó gota a gota a 40 mi de n-heptano que se había enfriado a 5°C por adelantado. Se filtró el polvo precipitado y después secó bajo presión reducida para obtener ácido (25,3R,4R,6E)-2-{[N-(terc-butoxicarbonil)-L-leticil-N-metil-L-leucil-L-ala ni l-D-alanil-N -metí l-L-leucil-L-le ucil-N-metil- L- alí l](metil)am ino}-3-hidroxi-4-metilocta-6-enoico como un polvo de color blanco. Cantidad: 7.6 g, Rendimiento: 77.9%. 13C-RMN (125 MHz, CDCI3, d) 175.2 (s), 174.4 (s), 173.3 (s), 173.2 (s), 172.8 172.1 (s), 170.7 (s), 169.9 (s), 155.7 (s), 128.8 (d), 127.1 (d), 79.6 (s), 75.3 (d), 59.2 57. (d), 55.2 (d), 54.6 (d), 49.1 (d), 48.5 (d), 48.2 (d), 45.8 (d), 41.7 (t), 41.1 (t), 36.636.4 (d), 36.0 (t), 36.0 (t), 34.7 (q), 30.8 (q), 30.7 (q), 29.9 (q), 28.2 (q)x3, 27.2 (d), 25.0 (d), 24.9 (d), 24.8 (d), 24.6 (d), 23.4 (q), 23.4 (q), 23.2 (q), 23.0 (q), 22.0 (q), 21.7 (q), 21. (q), 21.4 (q), 19.1 (q), 18.2 (q), 18.0 (q), 17. (q), 16.8 (q), 15.3 (q). (confórmeros principales) HR-ESIMS Encontrado m/z 1037.7219 (M + H) + Calculado para C53H97N8012, 1037.7225 El ejemplo 7 (Producción del compuesto de fórmula (VII) en donde Prot1 es Boc y Prot2 es metilo) Se disolvieron 7.5 g del Compuesto de Ejemplo 6 en 75 mi de cloruro de metileno, y 1.47 g de metiletilclorhidrato de L-treonina y se agregaron 1.47 de HOBt»monohidrato adicionalmente, siguiendo enfriando de 0 a 10°C. Además, se agregaron 1.12 g de WSC al mismo, seguido por agitación a 5°C por aproximadamente 20 horas, y después se lavó la capa orgánica con 75 mi de agua corriente. Se volvió a extraer la capa acuosa con 38 mi de cloruro de metileno y se combinó la capa orgánica. Se lavó la capa orgánica con 68 mi de 0.3 M de ácido clorhídrico y se volvió a extraer la capa acuosa con 38 mi de cloruro de metileno de nuevo. Se combinó la capa orgánica, después se lavó secuencialmente con 76 mi de 5% (p/v) de solución de NaHC03 acuosa y 55 mi de 20% (p/v) de salmuera, y concentró a aproximadamente 30 mi. Se agregó el líquido concentrado gota a gota a 300 mi de heptano. Se recolectó el polvo precipitado mediante filtración y después secó bajo presión reducida para obtener (N-[(2S,3R,4R,6E)-2-{[N-(terc-butoxicarbonil)-L-leucil-N-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-N-metil-L-leucil-L-leucil-N-inethil-L-valíl](metil)amino}-3-hidroxi-4-metilocta-6-enoil]-L-treoninmetiléster como un polvo de color blanco. Cantidad: 7.12 g, Rendimiento: 85.5%. 13C-RMN (125 MHz, CDCI3, 5): 174.1 (s), 174.0 (s), 173.5 (s), 172.5 (s), 172.4 (s), 171.4 (s), 171.2 (s), 170.8 (s), 170.4 (s), 155.7 (s), 128.5 (d), 127.3 (d), 79.5 (s), 74.5 (d), 67.7 (d), 58.3 (d), 58.3 (d), 57.3 (d), 55.1 (d), 54.9 (d), 52.6 (q), 49.1 (d), 48.0 (d), 47.7 (d), 45.8 (d), 42.0 (t), 40.8 (t), 36.4 (t), 36.1 (t), 35.5 (t), 35.4 (d), 34.6 (q), 30.9 (q), 30.7 (q), 30.3 (q), 28.3 (q) x3, 27.0 (d), 25.0 (d), 25.0 (d), 24.9 (d), 24.7 (d), 23.4 (q), 23.4 (q), 23.3 (q), 23.1 (q), 22.1 (q)! 21.8 (q), 21.4 (q), 21.3 (q), 20.2 (q), 19.4 (q), 18.1 (q), 18.0 (q), 17.0 (q), 17.0 (q), 15.7 (q). (confórmeros principales) HR-ESIMS Encontrado m/z 1152.7864 (M + H)+ Calculado para C58H106N9O14, 1152.7859.

Ejemplo 8 (Producción del compuesto de fórmula (VI I I) , en donde Prot2 es metilo) Se disolvieron 20.0 g del Compuesto de Ejemplo 7 en 1 20 ml de cloruro de metileno, siguiendo enfriando a -5°C. Se agregaron 98.9 g de TFA gota a gota al mismo, siguiendo agitando durante 2 horas y 40 minutes y después lavaron con 200 ml de agua corriente enfriada . La capa orgánica obtenida me separación de l íquido se lavó adicionalmente con 200 ml de agua corriente enfriada. Se agregaron a la capa orgánica 200 ml de agua corriente enfriada , seguido por ajuste adicional a pH 6.5 a 7 utilizando 1 0% (p/v) de solución de Na2C03 acuosa. Se agregaron a la capa orgánica obtenida mediante separación de líquido 200 ml de agua corriente enfriada de nuevo, seguido por ajuste a pH 6.5 a 7 con 10% (p/v) de solución de Na2C03 acuosa. La capa orgánica obten ida mediante separación de l íquido se agregó a 200 ml de agua corriente enfriada de nuevo, seguido por ajuste a pH 6.5 a 7 con a 1 0% (p/v) de solución de Na2C03 acuosa. Se concentró la capa orgánica obtenida mediante separación de líquido bajo presión reducida a aproximadamente 50 ml. Se agregó el l íquido concentrado gota a gota a 1 500 ml de heptano. Se recolectó el polvo precipitado mediante filtración y después se secó bajo presión reducida para obtener N-{(25, 3R,4R,6E)-3-hidroxi-2-[(L-leucil-N-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-N-metil-L-leucil-L-leucil-N-metil-L-valil)(metil)amino]-4-metilocta-6-enoil l-L-treoninemetiléster como un polvo de color blanco. Cantidad: 16.82 g , Rendimiento: 92. 1 %.

Como un resultado de la comparación del Compuesto de Ejemplo 8 obtenido con el compuesto de Preparación 3 de la Cita de Patente 1 en términos de datos de RMN y MS, se confirmó que tienen las mismas estructuras.

HR-ESIMS Encontrado m/z 1052.7347 (M + H)+ Calculado para 1052.7335.

[Tabla 2] Aplicabilidad industrial El presente método de producción es superior en operabilidad de los puntos de vista que un ácido diamino puede eliminarse en una sola etapa. De acuerdo con el presente método de producción, por ejemplo, puesto que el compuesto de fórmula (III) o una sal del mismo de la presente invención no causado por producción de tiohidantoínas o similares en una etapa en la cual una reacción de degradación de Edman puede omitirse, incluso sin purificación por medio de cromatografía, el compuesto de fórmula (A), un intermediario para producir el mismo, o una sal de cada uno del mismo puede obtenerse en una alta pureza mediante cristalización. Por consiguiente, puede aumentarse hasta el nivel industrial.

Claims (6)

REIVINDICACIONES

1. Un método para producir un compuesto de fórmula (III) o una sal del mismo: (en donde R significa -H o un grupo protector, ¡Bu significa isobutilo, iPr significa isopropilo, y Me significa metilo), que comprende la eliminación de un ácido diamino de un compuesto de fórmula (ii) o una sal del mismo: en una sola etapa.

2. Un método para producir un compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo: (en donde Rx significa -H o un grupo protector, ¡Bu significa isobutilo, iPr significa isopropilo, Me significa metilo, y Prot0 y Prot1 significa grupos protectores), que comprende someter un compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo: a una reacción de desprotección para obtener un compuesto de fórmula (II) o una sal del mismo, e introducir un grupo protector al compuesto de fórmula (III) o una sal del mismo obtenido por la etapa descrita en la reivindicación 1.

3. Un método para producir un compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo: en donde X es R1 es -H, o un alquilo inferior; R2 es -H, arilo, o alquilo inferior, en donde el alquilo inferior puede sustituirse con un sustituyente adecuado seleccionado del grupo que consiste de hidroxi, cicloalquilo, alcoxi inferior, arilo, aralcoxi, carbamoiloxi que puede sustituirse, y amino que puede sustituirse; es un heterociclo que contiene nitrógeno; e Y es O R3 es cicloalquilo, arilo, un heterociclo el cual puede sustituirse, o alquilo inferior, en donde el alquilo inferior puede sustituirse con un sustituyente adecuado seleccionado del grupo que consiste de hidroxi, cicloalquilo, alcoxi inferior, arilo, aralcoxi, alcoxi inferior-alquileno inferior-O-, amino que puede sustituirse, y -OC(0)NR6R7, (en donde R6 y R7 cada uno representa independientemente -H o alquilo inferior, o R6 y R7, junto con un átomo de nitrógeno al cual se unen, representan un heterociclo que contiene nitrógeno, que puede sustituirse con alquilo inferior); R4 y R5 cada uno representan independientemente -H o alquilo inferior; representa un solo enlace o un enlace doble. (a condición de que si R2 es -H, R3 es cicloalquilo, arilo, un heterociclo que puede sustituirse, alcoximetilo inferior, aralquilo, t-butilo, sec-butilo, cicloalquilo, o etilo, en donde el etilo puede sustituirse con un sustituyente adecuado seleccionado del grupo que consiste de alquilo inferior, o hidroxi, alquilo inferior-O-, arilo-alquileno inferior-O-, alquilo inferior- alquileno ¡nferior-O-, amino que puede sustituirse, y -OC(0)NR6R7)), del compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo obtenido del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo por el método de producción de la reivindicación 2.

4. Un método para producir un compuesto de fórmula (VIII) o una sal del mismo: (en donde iBu significa isobutilo, ¡Pr significa isopropilo, Me significa metilo, y Prot2 significa un grupo protector), que comprende someter el compuesto de fórmula (VI) o una sal del mismo obtenido del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con el método de producción de la reivindicación 2 a condensación con una treonina protegida en la terminal del ácido carboxílico, y desproteger la terminal amino.

5. Un método para producir un compuesto de fórmula (A) o una sal del mismo, que comprende someter el compuesto de fórmula (VIII) o una sal del mismo obtenido del compuesto de fórmula (I) o una sal del mismo de acuerdo con el método descrito en la reivindicación 3 a condensación con un ácido diamino en la terminal amino, realizar la desprotección, y después realizar la ciclización.

6. U n compuesto o una sal del mismo seleccionado del grupo que consiste de: [Tabla 3] (en donde iBu significa isobutilo, iPr significa isopropilo, Boc significa butoxicarbonilo, Me significa metilo, y Ph significa fenilo) .