MX2010002818A - Procedimientos de separacion de proteinas recombinantes en sistemas acuosos de dos fases. - Google Patents

Procedimientos de separacion de proteinas recombinantes en sistemas acuosos de dos fases.

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Rodriguez Miguel Arevalo
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Abstract

El objeto de la presente invención es un procedimiento para el reparto, separación y purificación en solución acuosa de proteínas recombinantes, basado en la utilización de polipéptidos con afinidad por colina. La invención se fundamenta en un fenómeno consistente en que dos soluciones acuosas con determinados componentes pueden ser mezcladas repartiéndose finalmente en dos fases con distinta densidad. Las proteínas fusionadas a dichos polipéptidos con afinidad por colina se localizan preferentemente en una de las fases, mientras que la mayoría de las proteínas de un extracto celular tienden a irse a la fase contraria. Tras una serie de lavados para eliminar el resto de material no deseado, esta localización puede invertirse mediante la adición de una molécula soluble con afinidad por el polipéptido fusionado a la proteína de interés. Este procedimiento permite modular a conveniencia la presencia de la proteína o polipéptido de interés en una fase u otra, posibilitando su purificación con un alto rendimiento y grado de pureza. La invención representa una forma económica y escalable de separación de proteínas recombinantes etiquetadas preferentemente con dominios de unión a colina.
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