MX2008009125A - Composiciones farmaceuticas con estabilidad mejorada. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a composiciones poliméricas biodegradables estabilizadas empleadas como un sistema de suministro de liberación controlada para agentes peptídicos. Las composiciones de la presente invención comprende a) una sal benéfica de un agente peptídico formada con un ácido fuerte que minimiza o previene la interacción/reacción entre el agente peptídico y el polímero en solución orgánica; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable; y d) opcionalmente uno o más excipientes. La presente invención también se refiere a un método de manufactura y un método de uso del mismo.

Description

COMPOSICIONES FARMACEUTICAS CON ESTABILIDAD MEJORADA CAMPO DE LA INVENCIÓN En años recientes, un gran número y variedad de agentes peptidicos tales como péptidos, oligopéptidos, polipéptidos , y proteínas, han sido descubiertos y han recibido mucha atención como candidatos de fármacos. Sin embargo, muchos agentes peptidicos no son estables conforme son fácilmente hidrolizados o degradados in vivo por enzimas que resultan en una vida media de circulación muy corta. Por lo tanto, la mayoría de las medicinas peptídicas han sido administradas por inyección, típicamente múltiples veces por día .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La administración de inyección, sin embargo, es dolorosa, muy costosa e inconveniente. A menudo, el acatamiento del paciente es muy cambiante. Para muchos agentes peptidicos, particularmente hormonas, se requiere que el fármaco sea suministrado continuamente a una velocidad controlada durante un periodo prolongado de tiempo, y de este modo, un sistema de suministro de liberación controlada es deseable. Tales sistemas pueden ser proporcionados incorporando los agentes peptidicos en matrices poliméricas biodegradables y biocompatibles . En un procedimiento, el REF. : 194915 polímero es disuelto en un solvente orgánico y después mezclado con los agentes peptídicos que se fabrican en las formas de microcápsulas , microgránulos o varillas implantables removiendo el solvente orgánico. El agente peptídico es atrapado dentro de las matrices poliméricas. Varios productos han sido exitosamente desarrollados usando polímeros biodegradables en formas de micropartículas e implantes de varillas sólidas, tales como Lupron, Zoladex, Trioptorelina , etc. Aunque estos productos parecen ser efectivos, pero tienen desventajas y limitaciones, tales como el volumen grande de fluidos de suspensión para micropartículas o inserción quirúrgica de implantes sólidos. Estos productos no son muy convenientes para el paciente. Además, los procesos de manufacturación para producir productos estables y reproducibles son complicados, resultando en alto costo de manufacturación. Es altamente deseable que una composición pueda ser manufacturada y usada fácilmente. En otro procedimiento, el polímero biodegradable y los agentes peptídicos son disueltos en un solvente orgánico biocompatible para proporcionar una composición líquida. Cuando la composición líquida es inyectada en el cuerpo, el solvente se disipa en el ambiente acuoso circundante, y el polímero forma un depósito de gel o sólido a partir del cual el agente bioactivo es liberado durante un periodo largo de tiempo. Las siguientes referencias de Patentes Estadounidenses Nos. 6,565,874; 6,528,080; RE37, 950; 6,461,631; 6,395,293; 6,355,657; 6,261,583; 6,143,314; 5,990,194; 5,945,115; 5,792,469; 5,780,044; 5,759,563; 5,744,153; 5,739,176; 5,736,152; 5,733,950; 5,702,716; 5,681,873; 5,599,552; 5,487,897; 5,340,849; 5,324,519; 5,278,202; 5,278,201; y 4,938,763, se cree son representativas en esta área y son incorporadas aqui por referencia. No obstante algunos éxitos, estos métodos no han sido completamente satisfactorios para un gran número de agentes peptidicos que pueden ser efectivamente suministrados por tal procedimiento. Se reconoce bien en la técnica que los agentes bioactivos que contienen grupos funcionales básicos interactúan con polímeros biodegradables para catalizar (o expedir), la degradación del polímero y formar conjugados con el polímero y/o sus productos de degradación. La interacción/reacción entre los agentes bioactivos básicos y portadores poliméricos puede ocurrir: 1) durante la formulación cuando los agentes bioactivos básicos son incorporados en el portador polimérico, tal como microencapsulación, moldeo por inyección, moldeo por extrusión, mezclado con soluciones poliméricas en solvente orgánico, y similares; 2) durante el almacenaje y 3) durante el proceso de biodegradación y la liberación de los agentes bioactivos in vivo.

Se sabe que la degradación de los agentes peptídicos y polímeros biodegradables, y reacciones entre los dos, ocurren típicamente mucho más rápidas en solución que en estado sólido, seco. La interacción/reacción entre agentes bioactivos que contienen grupos funcionales básicos, es decir, aminas, y polímeros durante el proceso de formación de microparticula usando métodos de evaporación/extracción de solvente, en donde el agente bioactivo y el polímero son disueltos/dispersados en solventes orgánicos no polares, fueron descritas. [Krishnan M. and Flanagan DR., J Control Reléase. 2000 Nov 3; 69(2): 273-81]. Se formó cantidad significante de porciones amida. Se mostró claramente que solventes comúnmente usados para fabricación de sistemas de suministro de fármaco de polímero biodegradable, podrían permitir la reacción rápida entre agente bioactivo y polímero. En otra descripción, la degradación acelerada de polímeros por aminas orgánicas en solvente orgánico prótico polar (por ejemplo metanol) , también se reportó [Lin J, Flanagan DR, Linhardt RJ. Pharm Res. 1994 Jul; 11 (7):1030-4] . Puesto que el sistema de suministro de liberación controlada es comúnmente fabricado a través de una etapa que involucra agente peptídico de disolución/dispersión en solución polimérica biodegradable en un solvente orgánico, la estabilización de todos los componentes en la composición en esta etapa, representa un cambio de formulación muy significante. Un procedimiento común que ha sido usado para superar el cambio de manufacturación y estabilidad de almacenaje del agente peptidico y polímero biodegradable en solución o suspensión, es mantener el agente peptidico y la solución polimérica en dos recipientes separados y mezclarlos solo antes de usar. Esto asume que el solvente orgánico pueda ser separado de la matriz polimérica rápidamente a través de difusión, extracción o evaporación después que los agentes peptídicos y solución polimérica son mezclados. Un ejemplo se describe en la patente Estadounidense 6,565,874 y 6,773,714, que describen las formulaciones de suministro polimérico de acetato de leuprólido que es liberado a un producto comercial Eligard® para el tratamiento de cáncer de próstata. Para mantener la estabilidad de las formulaciones, este producto es suministrado en jeringas separadas y los contenidos en las jeringas son mezclados solo antes del uso. Sin embargo, debido a la naturaleza viscosa de las formulaciones poliméricas, es a menudo difícil mezclar los contenidos en dos jeringas separadas por usuarios finales. La uniformidad de las formulaciones preparadas por el usuario final puede variar significantemente en donde también puede ocurrir la contaminación y la calidad del tratamiento puede ser comprometida significantemente. Además, este procedimiento no prevendrá la interacción entre el agente peptidico y el polímero durante el mezclado y administración. Como se describe en el documento US20060034923 Al, cuando se combina acetato de octreótido con solución de poliláctido-co-glicólido en NMP, más de 40% de octreótido se aciló dentro de 5 horas. Esta modificación del péptido pude conducir a una pérdida significante de actividad o cambio de inmunogenicidad. El peso molecular del polímero también reduce significantemente dentro del mismo periodo de tiempo. Esta rápida degradación del péptido y polímero alterará el perfil de liberación del péptido y resultará en un resultado de tratamiento comprometido. Por lo tanto, el control preciso para el proceso de preparación y tiempo es crítico, y esto incrementa significantemente la dificultad para el usuario final. Además, la formación in vivo del implante a partir de la composición polimérica inyectable no es instantánea. Típicamente, el proceso de disipación de solvente puede tomar algunas horas hasta varios días, dependiendo de los solventes usados. Durante este periodo, la presencia de un solvente orgánico podría también promover la interacción/reacción entre los agentes peptídicos y el polímero. Por lo tanto, existe una necesidad para desarrollar una composición farmacéutica que minimizará o prevendrá la interacción/reacción entre el agente peptídico y el polímero en una solución orgánica. Existe una necesidad además, para desarrollar una composición farmacéutica que es estable con una vida de anaquel de almacenamiento satisfactoria en una configuración de producto listo para usar.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Se descubrió sorprendentemente, que las composiciones poliméricas biodegradables inyectables que comprenden agentes peptidicos en la forma de una sal formada con un ácido fuerte (por ejemplo, ácido clorhídrico) , exhiben estabilidad muy superior que aquellas en la forma de una sal formada con un ácido débil (por ejemplo, ácido acético) , o en la forma de la base libre. Tales sales benéficas de los agentes peptidicos pueden ser formadas a través de la neutralización de cualquiera de los grupos básicos de los agentes peptidicos con un ácido fuerte. Cuando tales sales benéficas de agentes peptidicos formados con un ácido, fuerte son formuladas en composiciones poliméricas biodegradables inyectables, las interacciones/reacciones entre los agentes peptidicos y el polímero son minimizadas o prevenidas. Usar tales sales benéficas de agentes peptidicos formados con un ácido fuerte, permite la preparación de una composición inyectable estabilizada pre-llenada en una jeringa única en una configuración lista para usar con estabilidad de almacenaje satisfactoria. El uso de la sal del agente peptídico formada con un ácido fuerte de la presente invención para mejorar la estabilidad de las composiciones poliméricas inyectables, no está contemplado por la técnica anterior . Por consiguiente, la presente invención proporciona una composición polimérica biodegradable inyectable estabilizada para formar un sistema de suministro de liberación controlada económico, práctico y eficiente, para agentes peptídicos. La presente invención también proporciona un método para manufacturación y un método de uso del mismo. De conformidad con la presente invención, el sistema de suministro de fármaco es producid fácilmente y suministrado convenientemente a un sujeto, tal como un mamífero o humano. Las composiciones suministran una cantidad terapéutica de agentes peptídicos durante un periodo de tiempo extendido, deseado, preferiblemente de varias semanas a un año. Las composiciones son tanto biocompatibles como biodegradables , y desaparecen inofensivamente después de suministrar la dosis de los agentes peptídicos. Las composiciones de conformidad con la presente invención comprenden a) una sal benéfica de un agente peptídico formado con un ácido fuerte que minimiza o previene la interacción/reacción entre el agente peptídico y el polímero en una solución orgánica; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable. De conformidad con la invención, la composición farmacéutica puede opcionalmente incluir excipientes para lograr el suministro óptimo del agente peptidico. La composición farmacéutica puede ser un liquido viscoso o no viscoso, gel o semisólido, que se mueve como un fluido, de manera que puede ser inyectado usando una jeringa. La composición farmacéutica puede ser pre-llenada en una jeringa para formar un producto en una configuración lista para uso. El agente peptidico de la presente invención, contiene al menos un grupo básico. El agente peptidico puede ser cualquier péptido, oligopéptido, polipéptido o proteina que es capaz de proporcionar un efecto biológico, fisiológico o terapéutico en un animal o humano. El agente peptidico puede ser cualquiera o más del péptido, oligopéptido, polipéptido, o proteina, biológicamente activos, reconocidos en cualquiera de los documentos citados en la presente o reconocidos de otro modo en la técnica. El agente peptidico puede también estimular o inhibir una actividad biológica o fisiológica deseada dentro del animal o humano, incluyendo sin limitación estimular una respuesta inmunogénica o inmunitaria . De conformidad con una modalidad de la presente invención, el agente peptidico tiene un N-término que no es una amina primaria (por ejemplo, agonistas LHRH, tales como leuprolerina , goserelina, antagonistas LHRH, tales como cetrorelix, enfuvirtido, timosina al, abarelix y similares). En otra modalidad de la presente invención, el agente peptidico tiene ya sea un grupo amina primaria de cadena lateral o amina primaria N-terminal, covalentemente modificado con porciones hidrofilicas/lipofilicas que pueden ser producidas a través de pegilación, acilación y similares. Además, tanto los grupos amina primara de cadena lateral como amina primaria N-terminales del agente peptidico, pueden también ser covalentemente modificados simultáneamente con porciones hidrofilicas y/o lipofilicas a través de pegilación, acilación y similares. El ácido fuerte puede ser cualquier ácido que tiene un pKa en agua de menos de 3, preferiblemente menos de 0, más preferiblemente menos de -3. Por ejemplo, un ácido fuerte puede ser seleccionado de, pero no limitado al, grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácidos sulfúricos orgánicos, ácidos alquilsulfúricos de 1-40 carbonos, ácido nítrico, ácido crómico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácidos sulfónicos orgánicos, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido perclórico, ácido fosfórico, yoduro de hidrógeno, y similares . El polímero biodegradable puede ser cualquiera de los polímeros biocompatibles y farmacéuticamente aceptables.

Los polímeros biodegradables pueden ser termoplásticos , los cuales fusionan después del calentamiento y solidifican después del enfriamiento. Los polímeros biodegradables de la invención, son sustancialmente insolubles en fluidos acuosos o corporales, pero son capaces de disolverse o dispersarse sustancialmente en un solvente orgánico miscible en agua para formar una solución o suspensión. Después del contacto con un fluido acuoso, el solvente orgánico miscible en agua se difunde/disipa de la composición inventiva, lo cual causa la coagulación del polímero para formar un gel, o matriz sólida que encapsula el agente peptídico. Ejemplos de los polímeros adecuados para la presente invención incluyen, poliláctidos , poliglicólidos, policaprolactonas , polianhídridos , poliuretanos , poliesteramidas , poliortoésteres , polidioxanonas , poliacetales , policetales, policarbonatos , poliortocarbonatos , polifosfacenos , polihidroxibutiratos , polihidroxivaleratos , polialquilen oxalatos, polialquilen succinatos, poli (ácido málico) , poli ( anhídrido maleico) , y copolímeros, terpolímeros , o combinaciones o mezclas ahí. Polímeros a base de ácido láctico, y copolímeros de ácido láctico y ácido glicólico (PLGA), que incluyen poli (D, L-láctido-co-glicólido) y poli (L-láctido-co-glicólido) , son preferiblemente usados en la presente invención. En algunas modalidades, los polímeros PLGA tienen pesos moleculares promedio ponderados de entre aproximadamente 2,000 hasta aproximadamente 100,000 y relaciones monoméricas de ácido láctico a ácido glicólico de entre aproximadamente 50:50 hasta aproximadamente 100:0. Los solventes orgánicos farmacéuticamente aceptables pueden ser seleccionados del grupo que consiste de N-metil-2-pirrolidona, metoxipolietilen glicol, alcoxipolietilen glicol, ésteres de polietilen glicol, glicofurol, glicerol formal, metil acetato, etil acetato, metil etil cetona, dimetilformamida , dimetil sulfóxido, tetrahidrofurano, caprolactama, decilmetilsulfóxido, benzoato de bencilo, benzoato de etilo, triacetina, diacetina, tributirina, trietil citrato, tributil citrato, acetil trietil citrato, acetil tributil citrato, trietilglicéridos , trietil fosfato, dietil ftalato, dietil tartrato, etil lactato, carbonato de propileno, carbonato de etileno, butirolactona , y l-dodecacilazaciclo-heptan-2-ona y combinaciones de los mismos. De conformidad con la presente invención, uno o más excipientes pueden ser incorporados en la composición inventiva para lograr el suministro óptimo del agente peptidico. Los excipientes adecuados pueden incluir agentes que modifican la velocidad de liberación, materiales que reducen el efecto de estallido, materiales amortiguadores, antioxidantes y similares. De conformidad con la presente invención, agentes que modifican la velocidad de liberación adecuados, incluyen pero no se limitan a, compuestos alifáticos o copolimeros, tales como ácido alcancarboxilico, ácido oleico, alcohol alquilo, lipidos polares, tensoactivos , copolimeros de polietilenglicol y poliláctido o poli ( láctido-co-glicólido) , poloxámeros, polivinilpirrolidona, polisorbatos y similares; ésteres de ácidos mono, di y tri-carboxilicos , tales como 2-etoxietil acetato, trietil citrato, acetil tributilcitrato, acetil trietilcitrato, glicerol triacetato, di(n-butil ) sebacato y similares; polihidroxi alcoholes, tales como polietilenglicol, sorbitol y similares; ácidos grasos; triésteres de glicerol, tales como triglicéridos , triglicéridos de cadena media tales como MIGLYOL 810, 812, 818, 829, 840, y similares. Mezclas de agentes que modifican la velocidad pueden también ser usadas en los sistemas poliméricos de la invención. De conformidad con la presente invención, agentes amortiguadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, sales orgánicas e inorgánicas que incluyen carbonato de calcio, hidróxido de calcio, miristato de calcio, oleato de calcio, palmitato de calcio, estearato de calcio, fosfato de calcio, carbonato de magnesio, hidróxido de magnesio, fosfato de magnesio, miristato de magnesio, oleato de magnesio, palmitato de magnesio, estearato de magnesio, carbonato de zinc, hidróxido de zinc, miristato de zinc, oleato de zinc, palmitato de zinc, estearato de zinc, fosfato de zinc y combinaciones de los mismos. De conformidad con la presente invención, los antioxidantes adecuados incluyen pero no se limitan a, acetato de d-alfa tocoferol, ascorbil palmitato, hidroxianidol butilado, hidroxianisol butilado, butiladohidroxiquinona , hidroxicomarina , hidroxitolueno butilado, galato de etilo, galato de propilo, galato de octilo, galato de laurilo, propilhidroxibenzoato, trihidroxibutilrofenona , vitamina E, vitamina E pegilada, o vitamina E-TPGS y similares. La presente invención además proporciona métodos para elaborar y usar tales composiciones. Por ejemplo, un método para elaborar tales composiciones que comprende la neutralización de grupos amina básicos de agentes peptidicos para formar una sal benéfica para minimizar o prevenir la interacción/reacción del grupo amina básica con el polímero; y la combinación de la sal benéfica con otros componentes y opcionalmente uno o más excipientes. Preferiblemente, la sal benéfica del agente peptídico es formada primero y después combinada con el polímero disuelto en un solvente orgánico. Tales composiciones son físico-químicamente estables antes de y durante el proceso de fabricación de un sistema de suministro controlado tal como formación de micropartículas u otra formación de matriz implantable. Preferiblemente, tales composiciones inyectables son fisico-quimicamente estables durante la preparación, almacenaje y subsecuente administración a un sujeto y forman implantes de liberación controlada y consistentes después de la administración aun sitio de tejido. La presente invención además proporciona un kit para administración de la composición inyectable para formar un sistema de depósito de liberación controlada y consistente, el kit comprende: un polímero biodegradable disuelto en un solvente farmacéuticamente aceptable; una sal benéfica de un agente peptídico que contiene al menos, un grupo amina básica formado con un ácido fuerte disuelto o dispersado en el vehículo polimérico; y opcionalmente uno o más excipientes. La mezcla uniforme de todos los componentes es envasada en un recipiente. Preferiblemente, el recipiente es una jeringa. Por consiguiente, la presente invención también proporciona un método que comprende una etapa de llenado de una jeringa con la composición para formar un producto estable en una configuración lista para uso. La presente invención además proporciona un método para formar in sítu un implante, capaz de funcionar como un sistema de suministro de liberación controlada del agente peptídico en un sujeto. El agente peptídico es preferiblemente incorporado en el implante formado in situ, y subsecuentemente liberado en los fluidos del tejido circundante y al tejido u órgano corporal pertinente conforme el polímero se degrada. El método comprende: administración de las composiciones inyectables de la presente invención, a un sitio de implante por cualquier método adecuado para aplicar un líquido, como por ejemplo, por medio de una jeringa, aguja, cánula, catéter, aplicador de presión, y similares .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Figura 1. Estabilidad de LA en las formulaciones a 4°C después de 16 meses. Figura 2. Peso molecular de PLGA en formulaciones a 4°C después de 16 meses. Figura 3. Efecto de tipo y concentración de PLGA en la liberación de leuprólido. Figura 4. Efecto de vitamina E sobre la liberación de LA a partir de composiciones inyectables. Figura 5. Efecto de Miglyol 812 sobre la liberación de LA a partir de composiciones inyectables. Figura 6. Perfil de liberación de LA a partir de composiciones poliméricas inyectables después del administración SC en ratas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona una composición polimérica biodegradable inyectable estabilizada para formar un sistema de suministro de liberación controlada económico, práctico y eficiente, para agentes peptidicos. La presente invención también proporciona un método para manufacturar y un método para usar el mismo. Las composiciones de la presente invención comprenden a) una sal benéfica de un agente peptidico formado con un ácido fuerte que minimiza o previene la interacción/reacción entre el agente peptidico y el polímero en una solución orgánica; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable. De conformidad con la invención, la composición farmacéutica puede opcionalmente incluir uno o más excipientes para lograr el suministro óptimo del agente peptidico. La composición farmacéutica puede ser un líquido viscoso o no viscoso, gel o semisólido, que se mueve como un fluido, de manera que puede ser inyectado usando una jeringa. La composición polimérica inyectable, puede ser pre-llenada en una jeringa para formar un kit de producto en una configuración lista para uso. El sistema de suministro de liberación controlada de la presente invención, puede ser formado como una matriz polimérica implantable in vitro, o alternativamente, puede ser formado in situ en la forma de un implante sólido o un gel. Cuando se administra a un sujeto, la liberación controlada del agente peptidico puede ser sostenida por un periodo deseado de tiempo, dependiendo de la composición del implante. Con las selecciones del polímero biodegradable y otros componentes, la duración de la liberación sostenida del agente peptídico puede ser controlada durante un periodo de tiempo desde varias semanas hasta un año. Los términos "un", "una" y "uno", como se usan en la presente, están significando ser interpretados como "uno o más" y "al menos uno". El término "estabilizado" como se usa en la presente, se refiere a un mejoramiento significante en la estabilidad de los componentes en la composición polimérica inyectable, lo cual es necesario para lograr un estado estable requerido para desarrollar un producto viable. El término "composición polimérica inyectable estabilizada", como se usa en. la presente, significa que los componentes, por ejemplo, el polímero y el agente peptídico de la composición, retienen al menos, 80%, preferiblemente al menos, 90% de su peso molecular original, estructura y/o actividad biológica durante la manufacturación y después del almacenaje por un periodo de tiempo extendido, por ejemplo, meses a años, preferiblemente más de 12 meses, bajo condiciones apropiadas. El término "suministro de liberación controlada"; como se define en la presente, se pretende para referirse al suministro de un agente peptídico in vivo, durante un periodo de tiempo extendido, deseado, después de la administración, preferiblemente desde al menso varias semanas hasta un año. El término "agente peptidico" como se usa en la presente, está en un sentido general para incluir poli (aminoácidos ) que son normalmente en general referido como "péptidos", "oligopéptidos" , y "polipéptidos" , o "proteínas", los cuales son usados intercambiablemente en la presente. El término también incluye análogos de agente peptidico, derivados, derivados acilados, derivados glicosilados , derivados pegilados, proteínas de fusión y similares. El "agente peptidico básico" es un péptido el cual es básico en naturaleza, originándose de la presencia de aminoácidos básico, por ejemplo, arginina o lisina, u originándose del N-término del agente peptidico, o simplemente un agente peptidico el cual contiene al menos, un grupo básico, opcionalmente en la presencia de uno o más grupos de aminoácidos acídicos. El término también incluye análogos sintéticos de péptidos, aminoácidos no naturales que tienen funcionalidad básica, o cualquier otra forma de basicidad introducida. El término "agente peptidico", significa incluir cualquiera de los agentes peptídicos que tienen propiedades de diagnóstico y/o terapéuticas que incluyen pero no se limitan a, propiedades antimetabólicas, antifúngicas, anti-inflamatorias, antitumorales, anti-infecciosas, antibióticas, nutrientes, agonistas y antagonistas. Específicamente, los agentes peptidicos de la invención pueden ser cualquier péptido capaz de formar una sal benéfica con un ácido fuerte, en particular, un agente peptídico que contiene un grupo base donador de electrón tal como un átomo de nitrógeno básico, por ejemplo, una amina, imina o nitrógeno en el anillo. Los agentes peptidicos preferiblemente contienen una o más funcionalidades amina protonables expuestas. Los agentes peptidicos empleados en la preparación de las composiciones de la presente invención incluyen pero no se limitan a, oxitocina, vasopresina, hormona adrenocorticotrópica (ACTH) , factor de crecimiento epidérmico (EGF) , factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), prolactina, hormona luteinizante, hormona de liberación de la hormona luteinizante (LHRH) , agonistas de LHRH, antagonistas de LHRH, hormonas de crecimiento (que incluyen humana, porcina y bovina) , factor de liberación de la hormona de crecimiento, insulina, eritropoyetina (que incluye todas las proteínas con actividad eritropoyética) , somatostatina, glucagón, interleucina (la cual incluye IL-2, IL-11, IL-12, etc.), interferón-alfa, interferón-beta, interferón-gama, gastrina, tetragastrina, pentagastrina , urogastrina, secretina, calcitonina, encefalinas, endorfinas, angiotensinas , hormona de liberación de tirotropina (TRH) , factor necrosis del tumor (TNF) , hormona paratiroidea (PTH), factor de crecimiento del nervio (NGF) , factor de estimulación de la colonia de granulocitos (G-CSF) , factor de estimulación de la colonia de macrófago granulocitos (GM-CSF) , factor de estimulación de la colonia de macrófagos (M-CSF) , heparinasa, factor de crecimiento endotelial vascular (VEG-F) , proteina morfogénica ósea (BMP) , hANP, péptido similar al glucagón (GLP-1), exenátido, péptido YY (PYY), renina, bradiquinina, bacitracinas , polimixinas, colistinas, tirocidina, gramicidinas , ciclosporinas (las cuales incluyen análogos sintéticos y fragmentos farmacológicamente activos de los mismos), enzimas, citocinas, anticuerpos, vacunas, antibióticos, anticuerpos, glicoproteinas, hormona folículo estimulante, ciotorfina, taftsina, timopoyetina , timosina, timoestimulina , factor humoral tímico, factor tímico del suero, factores estimulantes de colonias, motilina, bombesina, dinorfina, neurotensina, ceruleína, urocinasa, calicreína, antagonistas y análogos de la sustancia P, angiotensina II, factor de coagulación de sangre VII y IX, gramicidinas, hormona estimulante del melanocito, hormona de liberación de la hormona tiroides, hormona estimulante de la tiroides, pancreozimina , colecistoquinina , lactógeno placental humano, gonadotropina coriónica humana, péptido que estimula la síntesis de proteína, péptido inhibidor gástrico, péptido intestinal vasoactivo, factor de crecimiento derivado de plaquetas, y análogos sintéticos y modificaciones y fragmentos de los mismos farmacológicamente activos. Los agentes peptidicos preferidos usados aquí incluyen los agentes peptidicos en donde el N-término no es una amina primaria. Por ejemplo, el N-término de los agentes peptidicos puede ser un ácido piroglutámico, por ejemplo, LHRH, y agonistas de LHRH tales como leuprorelina , buserelina, gonadorelina, deslorelina, fertirelina, histrelina, leutrelina, goserelina, nafarelina, triptorelina y similares. Alternativamente, el grupo amina N-terminal puede ser tapado o acilado, por ejemplo, cetrorelix, enfuvirtido, timosina al, abarelix, y similares. Los agentes peptidicos usados aqui, también incluyen los agentes peptidicos en donde la amina primaria N-terminal es covalentemente modificada con porciones hidrofilicas y/o lipofilicas tales como a través de pegilación, acilación y similares. Los agentes peptidicos usados aqui además incluyen los agentes peptidicos en donde la(s) amina (s) primarias de cadena lateral son covalentemente modificadas con porciones hidrofilicas y/o lipofilicas tales como a través de pegilación, acilación y similares. Los agentes peptidicos preferidos usados aqui además incluyen los agentes peptidicos, en donde tanto la amina primaria N-terminal como grupos amina primaria de cadena lateral son covalentemente modificados simultáneamente con porciones hidrofílicas y/o lipofilicas tales como a través de pegilación, acilación y similares. El término "porción hidrofilica" , se refiere a cualquier oligómero o polímero lineal o ramificado, soluble en agua, que incluye pero no se limita a, polietilenglicol y polipropilenglicol y polímeros lineales y ramificados similares. Preferiblemente, el peso molecular del polímero varía desde aproximadamente 500 daltons hasta aproximadamente 50,000 daltons. Los polímeros hidrofílicos para uso en la presente invención pueden tener un grupo reactivo incorporado para unión al agente peptídico de interés a través de grupos amina, carboxí lieos , hidroxilo o tiol. El término "pegilación" usado aquí, se refiere a la conjugación covalente de un polietilenglicol soluble a los agentes peptídicos. El polietilenglicol puede ser preparado de conformidad con protocolos estándares con un extremo tapado como con un grupo metoxi y el otro extremo activado para conjugación fácil a grupos activos en agentes peptídicos. Por ejemplo, varios métodos para preparar polietilenglicoles y su uso para pegilaciones se describen en la técnica: [por ejemplo, Roberts MJ, Bentley MD, Harris J , Chemistry for peptide and protein PEGylation. Adv Drug Deliv Rev. 2002 Jun 17; 54(4): 459- 76. Veronese F . Peptide and protein PEGylation: a review of problems and solutions. Biomaterials. 2001 Mar; 22(5): 405-17 y Patentes Estadounidenses Nos. 6,113,906; 5,446,090; 5,880,255], los cuales todos se incorporan aquí por referencia. El término "porción lipofilica", se refiere a cualquiera de las moléculas que tienen una solubilidad en agua a 20°C menos de 5 mg/ml, preferiblemente menso de 0.5 mg/ml, más preferiblemente menos de 0.1 mg/ml. Tal porción lipofilica es preferiblemente seleccionada de alquilo C2-39, alquenilo C2-39, alcadienilo C2-39, y residuos esteroidales . El término "alquilo C2-39, alquenilo C2-39, alcadienilo C2-39", está propuesto para cubrir hidrocarburos de cadenas recta y ramificada, preferiblemente de cadena recta, saturados, monoinsaturados y di-insaturados de 2-39 átomos de carbono. La introducción de una porción lipofilica covalentemente a un agente peptidico por lo tanto, conduce a un péptido lipofilicamente modificado que puede tener efecto terapéutico mejorado comparado con la molécula nativa. Esto puede hacerse típicamente haciendo reaccionar un grupo amina en un agente peptidico con un ácido o con otros grupos reactivos en una molécula lipofilica. Alternativamente, la conjugación entre el agente peptidico y molécula lipofilica es realizado a través de una porción adicional, tal como una porción de puente, espaciadora o enlace, el cual puede ser degradable o no degradable. Algunos ejemplos son descritos en la técnica anterior, [por ejemplo, Hashimoto, M. , et al., Pharmaceutical Research, 6:171-176 (1989), y Lindsay, D. G., et al., Biochemical J. 121:737-745 1971), Patente Estadounidense No. 5,693,609, WO95/07931, Patente Estadounidense No. 5,750,497, y W096/29342. WO98/08871, WO98/08872, y WO99/43708] . Estas descripciones son expresamente incorporadas aquí por referencia para describir péptidos hidrofilicamente modificados y para permitir la preparación de los mismos. El término "ácido fuerte" como se define aquí, significa incluir cualquiera de los ácidos con un pKa de menos de 3, preferiblemente menos de 0, y más preferiblemente de menos de -3. Los ácidos fuertes adecuados para la presente invención, pueden ser seleccionados de, pero no limitados al, grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido nítrico, ácido crómico, ácido sulfúrico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido pamoico, ácido perclórico, ácido fosfórico, yoduro de hidrógeno, y similares . El término "ácido fuerte" de la presente invención, también incluye cualquiera de los ácidos sulfúricos orgánicos, tales como ácidos sulfúricos alquilo, arilo o alquilarilo de 1-40 átomos de carbono, preferiblemente menos de 18 carbonos, y más preferiblemente, menos de 6 carbonos, y ácidos sulfónicos orgánicos tales como ácidos alcano, arilalcano, areno o alquen sulfónicos de 1-40 carbonos, preferiblemente menos de 18 carbonos, y más preferiblemente menos de 6 carbonos. El término "una sal benéfica de un agente peptidico" como se define en la presente, significa incluir cualquier sal de un agente peptidico formada con un ácido fuerte. Las sales benéficas de agentes peptidicos pueden ser preparadas durante su síntesis y procesos de purificación. Alternativamente, pueden ser preparadas del agente peptidico en la forma de una base libre. La base libre es disuelta en un medio líquido adecuado. Esta solución del agente peptidico es mezclada con una solución de un ácido fuerte para formar las sales benéficas removiendo el solvente a través de medios adecuados tales como filtración o liofilización . Si el agente peptidico está en su forma comercialmente disponible común, de una sal formada con un ácido débil (es decir, pKa>3), el ácido débil puede ser reemplazado por un ácido fuerte a través de métodos de intercambio iónico comunes tales como, liofilización, precipitación u otros métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, el acetato de leuprolido es disuelto en un medio líquido adecuado, por ejemplo, agua. Esta solución del agente peptidico es mezclada con una solución acuosa de un ácido fuerte tal como ácido clorhídrico. Cuando el acetato peptidico y un ácido fuerte tal como ácido clorhídrico son disueltos en agua, el péptido tiende a ser asociado con el ión cloruro, como el HC1 de ácido fuerte desplaza el ácido acético carboxílico más débil. El solvente y ácido acético liberado (u otro ácido carboxílico débil pero volátil) , puede ser removido bajo vacío. De este modo, la solución de mezcla es secada por congelamiento para remover el agua y ácido más débil para formar las sales benéficas. Si el agente peptidico no es estable bajo pH bajo, las sales benéficas del agente peptidico pueden ser preparadas a través de diálisis extensiva contra una concentración muy baja de un ácido fuerte . Las composiciones poliméricas inyectables de la presente invención pueden contener agente peptidico en un intervalo de 0.01 hasta 40% en peso. En general, la carga de fármaco óptima depende del periodo de liberación deseado y la potencia del agente peptidico. Obviamente, para el agente peptidico de baja potencia y periodo más largo de liberación, pueden ser requeridos niveles superiores de incorporación. El término "biodegradable" , se refiere a un material que gradualmente se descompone, disuelve, hidroliza y/o erosiona in situ. En general, los "polímeros biodegradables" aquí, son polímeros que son hidrolizables y/o bioerosionados in situ principalmente a través de hidrólisis y/o enzimólisis.

El término "polímero biodegradable", como se usa en la presente, significa incluir cualquiera de los polímeros naturales y sintéticos biocompatibles y/o biodegradables que pueden ser usados in vivo, siempre que el polímero sea al menos sustancialmente insoluble en medio acuoso o fluido corporal. El término "sustancialmente insoluble" como se usa en la presente, se refiere a que la insolubilidad del polímero debe ser suficiente para resultar en precipitación del polímero en medio acuoso o fluido corporal. Preferiblemente, la solubilidad de los polímeros es menos de 1% en peso, y más preferiblemente, menos de 0.1%. Cuando la solución polimérica en un solvente orgánico miscible o dispersable en agua se mezcla con una solución acuosa, el polímero precipitará para formar una matriz sólida o gelificada como el solvente orgánico se disipa. Los polímeros biodegradables adecuados son descritos, por ejemplo, en las Patentes Estadounidenses Nos. 4,938,763; 5,278,201; 5,278,2012; 5,324,519; 5,702,716; 5,744,153; 5,990,194; y 6,773,714. Algunos ejemplos no limitantes de los polímeros son poliláctidos, poliglicólidos , policaprolactonas , polidioxanonas , policarbonatos, polihidroxibutiratos, polialquilen oxalatos, polianhídridos , poliesteramidas , poliuretanos , poliacetales , poliortocarbonato, polifosfacenos , polihidroxivaleratos , polialquilensuccinatos , poli (ácido málico) y poliortoésteres y copolímeros, copolímeros de bloque, copolimeros ramificado, terpolimeros y combinaciones y mezclas de los mismos. Los copolimeros de bloque incluyen copolimeros de bloque A-B-A, copolimeros de bloque B-A-B, y/o copolimeros de bloque A-B y/o copolimeros ramificados. Los copolimeros de bloque preferidos son aquellos en donde el bloque A comprende un polímero hidrofóbico y el bloque B comprende un polímero hidrofílico. Particularmente, cuando se usa uno de los copolímeros de bloque mencionados anteriormente, las matrices poliméricas más preferidas son definidas en donde el bloque A es un polímero biodegradable seleccionado del grupo que consiste de poliláctidos , poliglicólidos , poli ( láctido-co-glicólido)s, polianhídridos , poli (ortoéster) es, poliéterésteres , policaprolactonas , poliesteramidas , poli (e-caprolactona) s; poli (ácido hidroxibutírico ) s , y mezclas de copolímeros de los mismos, y el bloque B es polietilenglicol o polietilenglicol monofuncionalmente derivatizado tal como metoxipolietilenglicol . Muchas de estas combinaciones pueden formar geles reversibles térmicos aceptables. Los pesos moleculares adecuados para polímeros pueden ser determinados por una persona de habilidad ordinaria en la técnica. Los factores que pueden ser considerados cuando se determinan los pesos moleculares incluyen, la velocidad de degradación del polímero deseado, resistencia mecánica, y velocidad de disolución del polímero en solventes orgánicos. Típicamente, un intervalo adecuado de pesos moleculares promedios ponderados de polímeros es de aproximadamente 2,000 Daltons hasta aproximadamente 100,000 Daltons con una polidispersidad desde 1.1 hasta 2.5, dependiendo de cual polímero es seleccionado para uso, entre otros factores. Las composiciones poliméricas inyectables de la presente invención pueden contener un polímero biodegradable en un intervalo de 10% hasta 70% en peso. La viscosidad de las composiciones inyectables de la invención depende del peso molecular del polímero y el solvente orgánico usado. Típicamente, cuando se usa el mismo solvente, a peso molecular superior y concentración del polímero, superior la viscosidad. Preferiblemente, esta concentración del polímero en las composiciones es menos de 70% en peso. Más preferiblemente, la concentración del polímero en las composiciones es entre 30 y 60% en peso. El poli (ácido láctico) y copolímeros de ácido láctico y ácido glicólico (PLGA), que incluyen poli(D,L-láctido-co-glicólido) y poli (L-láctido-co-glicólido) , son preferiblemente usados en la presente invención. Los polímeros (o poliésteres termoplásticos ) , tienen relaciones de monómero de ácido láctico a ácido glicólico de entre aproximadamente 50:50 hasta aproximadamente 100:0 y pesos moleculares promedios en peso de entre aproximadamente 2,000 hasta aproximadamente 100,000. Los poliésteres termoplásticos biodegradables pueden ser preparados usando los métodos conocidos en la técnica, por ejemplo, policondensación y polimerización de apertura de anillo (por ejemplo, Patente Estadounidense No. 4,443,340; 5,242,910; 5,310,865, las cuales son incorporadas todas aquí por referencia) . Los grupos terminales del poli (DL-láctido-co-glicólido) pueden ser ya sea, hidroxilo, carboxilico o éster, dependiendo del método de polimerización. Los polímeros adecuados pueden incluir alcohol monofuncional o un residuo poliol y pueden no tener un término de ácido carboxilico. Ejemplos de alcoholes monofuncionales son metanol, etanol o 1-dodecanol. El poliol puede ser un diol, triol, tetraol, pentaol, y hexanol, incluyendo etilenglicol , 1 , 6-hexandiol , polietilenglicol , glicerol, sacáridos, sacáridos reducidos, tales como sorbitol y similares. Muchos PLGAs adecuados son disponibles comercialmente, y los PLGAs de composiciones específicas pueden ser fácilmente preparados de conformidad con la técnica anterior. Los PLGAs de varias relaciones monoméricas y pesos moleculares son disponibles de Boehringer-Ingelheim (Petersburg, Va, USA) , Lakeshore Biomaterials (Birmingham, AL, USA), DURECT Corporation (Pelham, AL). El tipo, peso molecular y cantidad de polímero biodegradable presente en las composiciones, puede influenciar la longitud de tiempo en el cual el agente peptidico es liberado del implante de liberación controlada. La selección del tipo, peso molecular, y cantidad de polímero biodegradable presente en las composiciones para lograr las propiedades deseadas del implante de liberación controlada, pueden ser determinados por experimentaciones simples. En una modalidad preferida de la presente invención, la composición líquida puede ser usada para formular un sistema de suministro de liberación controlada para clorhidrato de leuprólido. En tal modalidad, el poliéster termoplástico biodegradable puede preferiblemente, ser 85/15 poli ( DL-láctido-co-glicólido ) que contiene un grupo hidroxilo terminal y un término de lauriléster ; puede estar presente en aproximadamente 30% hasta aproximadamente 60% de la composición en peso; y puede tener un peso molecular promedio de aproximadamente 15,000 hasta aproximadamente 50, 000. En otra modalidad preferida de la presente invención, la composición líquida puede ser usada para formular un sistema de suministro de liberación controlada para clorhidrato de leuprólido. En tal modalidad, el poliéster termoplástico biodegradable puede preferiblemente, ser 85/15 poli ( DL-láctido-co-glicólido ) que contiene dos grupos hidroxilo terminales; puede estar presente en aproximadamente 30% hasta aproximadamente 60% de la composición en peso; y puede tener un peso molecular promedio de aproximadamente 15,000 hasta aproximadamente 50,000. En todavía otra modalidad preferida de la presente invención, la composición líquida puede ser usada para formular un sistema de suministro de liberación controlada para clorhidrato de leuprólido. En tal modalidad, el poliéster termoplástico biodegradable puede preferiblemente, ser 85/15 poli ( DL-láctido-co-glicólido) que contiene grupos de ácido carboxílico terminales; puede estar presente en aproximadamente 30% hasta aproximadamente 60% de la composición en peso; y puede tener un peso molecular promedio de aproximadamente 15,000 hasta aproximadamente 50,000. En todavía otra modalidad preferida de la presente invención, la composición puede ser usada para formular un sistema de suministro de liberación controlada de leuprólido. En tal modalidad, el polímero biodegradable puede preferiblemente, ser 100/0 poli ( DL-láctido ) con/sin grupos de ácido carboxílico terminales; puede estar presente en aproximadamente 40% hasta aproximadamente 60% de la composición en peso; y puede tener un peso molecular promedio de aproximadamente 8,000 hasta aproximadamente 50,000. El término "solvente orgánico farmacéuticamente aceptable", significa incluir cualquiera de los solventes orgánicos biocompatibles que son miscibles o dispersables en fluido corporal o acuoso. El término "dispersable" , significa tal solvente parcialmente soluble o miscible en agua. Preferiblemente, un solvente único o una mezcla de solventes tiene una solubilidad o miscibilidad en agua mayor de 0.1% en peso. Más preferiblemente, el solvente tiene una solubilidad o miscibilidad en agua mayor de 3% en peso. Más preferiblemente, el solvente tiene una solubilidad o miscibilidad en agua mayor de 7% en peso. El solvente orgánico adecuado debe ser capaz de difundirse en el fluido corporal de manera que la composición liquida de coagule o solidifique. La mezcla y/o únicos de tales solventes pueden ser empleados; la adecuabilidad de tales solventes puede ser determinada fácilmente por experimentación simple. Ejemplos de un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable incluyen pero no se limitan a, N-metil-2-pirrolidona, metoxipolietilen glicol, alcoxipolietilen glicol, ásteres de polietilen glicol, glicofurol, glicerol formal, metil acetato, etil acetato, metil etil cetona, dimetilformamida, dimetil sulfóxido, tetrahidrofurano, caprolactama, decilmetilsulfóxido, benzoato de bencilo, benzoato de etilo, triacetina, diacetina, tributirina, trietil citrato, tributil citrato, acetil trietil citrato, acetil tributil citrato, trietilglicéridos , trietil fosfato, dietil ftalato, dietil tartrato, etil lactato, carbonato de propileno, carbonato de etileno, butirolactona, y 1-dodecacilazaciclo-heptan-2-ona y combinaciones de los mismos.

La solubilidad de los polímeros biodegradables en varios solventes orgánicos farmacéuticamente aceptables diferirá dependiendo de las características de los polímeros y su compatibilidad con varios solventes. De este modo, el mismo polímero no será soluble en la misma magnitud en diferentes solventes. Por ejemplo, el PLGA tiene una solubilidad muy superior en N-metil-2-pirrolidona (NMP) que aquella en triacetina. Sin embargo, cuando la solución de PLGA en NMP está en contacto con solución acuosa, la NMP se disipará muy rápidamente para formar una matriz de polímero sólido debido a su alta miscibilidad en agua. La velocidad de difusión rápida del solvente puede resultar en un implante sólido rápidamente, sin embargo, también puede conducir a una liberación de estallido inicial alto. Cuando la solución de PLGA en triacetina está en contacto con solución acuosa, la triacetina se disipará muy lentamente debido a su baja miscibilidad en agua. La velocidad de difusión lenta del solvente, puede tomar un largo tiempo para transformarse de un líquido viscoso a una matriz sólida. Puede haber un balance óptimo en el cual el solvente se difunde y la coagulación del polímero para encapsular agentes peptídicos. Hasta ahora, puede ser ventajoso combinar diferentes solventes para obtener un sistema de suministro deseable. Los solventes de baja y alta miscibilidad en agua, pueden ser combinados para mejorar la solubilidad del polímero, modificar la viscosidad de la composición, optimizar la velocidad de difusión y reducir la liberación de estallido inicial . Las composiciones poliméricas inyectables de la presente invención, típicamente contienen un solvente orgánico en el intervalo de 30% hasta 80% en peso. La viscosidad de las composiciones inyectables de la invención depende del peso molecular del polímero y solvente orgánico usado. Preferiblemente, la concentración del polímero en las composiciones es menos de 70% en peso. Más preferiblemente, la concentración del polímero en soluciones es entre 30 a 60% en peso. El término "excipientes" como se usa en la presente, significa incluir cualquier gradiente útil en la composición a un lado del agente peptídico o los polímeros biodegradables usados para formar la composición. Los excipientes adecuados incluyen, agentes que modifican la velocidad de liberación, materiales que reducen el efecto de estallido, materiales amortiguadores, antioxidantes, y similares. De conformidad con la presente invención, los agentes que modifican la velocidad de liberación adecuados incluyen, pero no se limitan a, compuestos o copolímeros anfifílicos, tales como ácido alcancarboxílico, ácido oleico, alcohol alquilo, lípidos polares, tensoactivos, copolímeros de polietilenglicol y poliláctido o poli ( láctido-co-glicólido) , poloxámeros, polivinilpirrolidona, polisorbatos y similares; ésteres de ácidos mono, di y tri-carboxilicos, tales como 2-etoxietil acetato, trietil citrato, acetil tributil citrato, acetil trietil citrato, glicerol triacetato, di (n-butil) sebacato y similares; polihidroxi alcoholes, tales como polietilenglicol, sorbitol y similares; ácidos grasos; triésteres de glicerol, tales como triglicéridos, triglicéridos de cadena media tales como MIGLYOL 810, 812, 818, 829, 840, y similares. Mezclas de agentes que modifican la velocidad pueden también ser usadas en los sistemas poliméricos de la invención. Los agentes que modifican la velocidad de liberación pueden estar presentes en la composición polimérica inyectable en una cantidad, efectiva para reducir el estallido inicial del agente peptidico liberado de la composición polimérica durante las primeras 24 horas después del implante. Preferible, la composición polimérica incluye aproximadamente 1% hasta aproximadamente 50% en peso, más preferiblemente aproximadamente 2% hasta aproximadamente 20% en peso de los agentes que modifican la velocidad de liberación . De conformidad con la presente invención, agentes amortiguadores adecuados incluyen, pero no se limitan a, sales orgánicas e inorgánicas que incluyen carbonato de calcio, hidróxido de calcio, miristato de calcio, oleato de calcio, palmitato de calcio, estearato de calcio, fosfato de calcio, carbonato de magnesio, hidróxido de magnesio, fosfato de magnesio, miristato de magnesio, oleato de magnesio, palmitato de magnesio, estearato de magnesio, carbonato de zinc, hidróxido de zinc, miristato de zinc, oleato de zinc, palmitato de zinc, estearato de zinc, fosfato de zinc y combinaciones de los mismos. Los agentes amortiguadores pueden estar presentes en la composición polimérica inyectable en una cantidad efectiva para estabilizar el pH dentro de los implantes durante el proceso de degradación. Preferiblemente, la composición polimérica incluye aproximadamente 1% en peso hasta aproximadamente 30% en peso, más preferiblemente aproximadamente 2% en peso hasta aproximadamente 15% en peso de los agentes amortiguadores. De conformidad con la presente invención, antioxidantes adecuados incluyen, pero no se limitan a, acetato de d-alfa tocoferol, ascorbil palmitato, hidroxianidol butilado, hidroxianisol butilado, butiladohidroxiquinona, hidroxicomarina, hidroxitolueno butilado, galato de etilo, galato de propilo, galato de óctilo, galato de laurilo, propilhidroxibenzoato, trihidroxibutilrofenona, vitamina E, vitamina E pegilada, o vitamina E-TPGS y similares.

Los antioxidantes pueden estar presentes en la composición polimérica inyectable en una cantidad efectiva para depurar cualquiera de los radicales o peróxidos generados dentro de los implantes. Preferiblemente, la composición polimérica incluye aproximadamente 1% en peso hasta aproximadamente 30% en peso, más preferiblemente, aproximadamente 3% en peso hasta aproximadamente 15% en peso de los antioxidantes. En un aspecto, la presente invención proporciona una composición polimérica biodegradable inyectable estabilizada para formar un sistema de suministro de liberación controlada económico, práctico y eficiente para agentes peptidicos que comprende a) una sal benéfica de un agente peptidico formado con un ácido fuerte que minimiza o previene la interacción/reacción entre el agente peptidico y el polímero en una solución orgánica; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable; y d) opcionalmente dos o más excipientes para lograr el suministro óptimo del agente peptidico. Preferiblemente, la composición inyectable es envasada en un kit que comprende una etapa para llenar la composición en una jeringa en una configuración lista para usar. La composición en el kit es estable por un periodo de tiempo razonable, preferiblemente al menos un año, para tener una vida de anaquel de almacenaje adecuado bajo condiciones de almacenaje controladas. La composición es preferiblemente inyectada en un sujeto para formar in situ un implante, a partir del cual el agente peptidico es liberado en una cantidad efectiva terapéutica durante un periodo de tiempo extendido, deseado . La composición polimérica biodegradable inyectable estabilizada de la presente invención, puede ser preparada combinando apropiadamente una sal benéfica de un agente peptidico, un polímero biodegradable, un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable, y un excipiente opcional. La composición para administración puede convenientemente, ser presentada en forma de dosificación unitaria y puede ser preparada por cualquiera de los métodos conocidos en la técnica de farmacia. Un método preferido para preparar la composición de la presente invención es disolver un polímero biodegradable y/o un excipiente en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable para obtener una primera solución/suspensión polimérica uniforme. Entonces, la sal benéfica de un agente peptidico se agrega a esta solución/suspensión. Los componentes son mezclados uniformemente usando cualquiera de los medios apropiados para obtener una solución o suspensión uniforme. Después, una cantidad apropiada de la solución o suspensión se transfiere a una jeringa para obtener un producto listo para usar.

El nivel de incorporación de la sal y polímero benéficos en la composición de la invención naturalmente variará, dependiendo de la potencia del componente de agente peptídico, es deseable el periodo de tiempo sobre el cual se suministra el agente, la solubilidad del polímero en el solvente, y el volumen y viscosidad de la composición inyectable la cual es deseable para administrar. En ciertas modalidades preferidas de la presente invención, la composición polimérica biodegradable inyectable para formar un sistema de suministra de liberación controlada económica, práctica y eficiente para agentes peptídicos que contienen aproximadamente 0.01% hasta 40% de la sal benéfica de un agente peptídico y aproximadamente 10% hasta 70% de un polímero poli (láctido-co-glicólido) . La composición además contiene aproximadamente 30% hasta 70% de un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable. En una modalidad preferida de la presente invención, la composición además contiene aproximadamente 1% hasta 40% de un excipiente adecuado que incluye agentes que modifican la velocidad de liberación, materiales que reducen el efecto de estallido, materiales amortiguadores, antioxidantes, agentes que transportan el tejido y similares como se define anteriormente. De conformidad con la presente invención, la composición inyectable es transfectada en un portador estéril adecuado para administración de inyección, por ejemplo, una jeringa. El contenedor es envasado para almacenaje y los componentes de la composición retienen al menos 80%, preferiblemente 90%, de su peso molecular original, estructura y/o actividad biológica durante la manufactura y proceso de almacenaje o previo a la administración a un sujeto tal como un animal o humano. De esta forma, de conformidad con la presente invención, las composiciones estabilizadas pueden ser administradas a un sujeto en donde el suministro de liberación controlada de un agente peptidico es deseable. Como se usa en este documento, el término "sujeto" se pretende incluir animales de sangre caliente, preferiblemente mamíferos, más preferiblemente humanos. Como se usa en este documento, el término "administrar a un sujeto" se pretende referir a dispersar, suministrar o aplicar una composición (por ejemplo, formulación farmacéutica) a un sujeto por cualquier ruta adecuada para suministro de la composición a la ubicación deseada en el sujeto. Preferiblemente, la composición de la presente invención puede ser administrada por inyección y/o implantación subcutáneamente, intramuscularmente, intraperitonealmente o intradérmicamente para proporcionar la dosificación deseada en base a parámetros conocidos para tratamiento de las condiciones médicas variadas con el agente peptídico . El término "suministro de liberación controlada", como se define en este documento, se pretende referirse a suministro continuo de un agente peptídico in vivo durante un periodo de tiempo después de la administración, preferiblemente de al menos varias semanas a un año. El suministro de liberación controlada sostenida del agente se puede demostrar por, por ejemplo, el efecto terapéutico continuo del agente durante un tiempo (por ejemplo, para un análogo LHRH, el suministro sostenido del análogo se puede demostrar por supresión continua de síntesis de testosterona durante un tiempo) . Alternativamente, el suministro sostenido del agente peptídico puede ser demostrado detectando la presencia del agente in vivo durante un tiempo. La cantidad de la composición inyectable administrada típicamente dependerá de las propiedades deseadas del implante de liberación controlada. Por ejemplo, la cantidad de la composición inyectable puede influenciar la duración de tiempo en el cual el agente peptídico se libera del implante de liberación controlada. En una modalidad preferida, el volumen de la composición polimérica inyectable de la presente invención a ser inyectada a un sujeto varía de aproximadamente 0.1 mi hasta 2.0 mi; preferiblemente de 0.2 mi hasta 1.0 mi; y más preferiblemente de 0.3 mi hasta 0.5 mi.

La presente invención además proporciona un método para formar in situ un implante en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad efectiva de la composición inyectable que comprende: a) una sal benéfica de un agente peptidico formado con un ácido fuerte el cual minimiza o previene la interacción/reacción entre el agente peptidico y el polímero en una solución orgánica; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable; y d) opcionalmente uno o más excipientes para lograr suministro óptimo del agente peptidico; y permitir que el solvente se disipe en el ambiente acuoso circundante para transformar la composición líquida en un depósito para separación de fase. El depósito puede ser un gel viscoso, un semi-sólido, o una matriz sólida. El depósito también puede ser poroso o no poroso. El depósito sirve como el sistema de suministro del cual el agente peptidico se libera durante un periodo de tiempo deseado y prolongado. En otra modalidad preferida, la composición inyectable de la presente invención puede ser administrada para fijarse en la cavidad corporal para formar un sistema de depósito. Tales cavidades incluyen, las cavidades creadas después de una cirugía o cavidad corporal natural tal como vagina, ano y similares. En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición polimérica biodegradable liquida estabilizada para formar un sistema de suministro de liberación controlada económica, práctica y eficiente para agentes peptidicos que comprenden a) una sal benéfica de un agente peptidico formado con un ácido fuerte el cual minimiza o previene la interacción/reacción entre el agente peptidico y el polímero en una solución orgánica; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico; y d) opcionalmente uno o más excipientes para lograr suministro óptimo del agente peptidico. La composición polimérica biodegradable puede ser fabricada en matrices poliméricas implantables . En donde la composición polimérica biodegradable líquida retiene al menos 90%, preferiblemente 95%, de su peso molecular original, estructura y/o actividad biológica antes y durante el proceso de fabricación. Como se usa en este documento, el término de "matrices poliméricas implantables" se pretende incluir a partículas, películas, pelotillas, cilindros, discos, microcápsulas, microesferas, nanoesferas, micropartículas, obleas y otras configuraciones poliméricas conocidas usadas para suministro del fármaco. Métodos para formar portadores poliméricos farmacéuticamente aceptables variados son bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, métodos y materiales variados se describen en las Patentes Estadounidenses 6,410,044; ,698,213; 6,312,679; 5,410,016; 5,529,914; 5,501,863; y Publicación PCT No. O 93/16687; 4,938,763; 5,278,201; 5,278,202; EP 0,058,481; todas las cuales se incorporan en este documento por referencia. De conformidad con la presente invención, las matrices poliméricas implantables en la forma de microesferas , se producen encapsulando la sal benéfica de los agentes peptidicos en el polímero. La sal benéfica de agentes peptídicos pueden ser encapsulados usando polímeros biocompatibles y/o biodegradables variados que tienen propiedades únicas que son adecuadas para suministro a diferentes ambientes biológicos o para provocar funciones específicas. La velocidad de disolución y, por lo tanto, el suministro de agentes peptídicos se determina por la técnica de encapsulación particular, composición polimérica, reticulación de polímero, espesor de polímero, solubilidad de polímero, tamaño y solubilidad de complejo compuesto/polianión biológicamente activo. Las sales benéficas de los agentes peptídicos para ser encapsulados se disuelven o suspenden en una solución en un solvente orgánico. La solución polimérica puede ser concentrada suficientemente para completamente recubrir la sal benéfica después que agregue a la solución. Tal cantidad es una que proporciona una relación de peso de la sal benéfica de los agentes peptídicos a polímero entre aproximadamente 0.01 y aproximadamente 50, preferiblemente entre aproximadamente 0.1 y aproximadamente 30. La sal benéfica de agentes peptidicos se debe mantener suspendida y no se debe dejar formar agregado hasta que se recubra por contacto con el polímero. Una solución polimérica de las sales benéficas de los agentes peptidicos puede por lo tanto ser sometida a una variedad de técnicas de microencapsulacion que incluye secado por atomizado, congelamiento por atomizado, emulsión y emulsión por evaporación del solvente. De conformidad con una modalidad de la invención, la sal benéfica de los agentes peptidicos se disuelve o suspende en una solución polimérica en un solvente orgánico. La solución o suspensión se transfiere a un volumen grande de una solución acuosa que contiene un emulsificador . En una solución acuosa, la fase orgánica se emulsiona, en donde el solvente orgánico se evapora o difunde lejos del polímero. El polímero solidificado encapsula la sal benéfica de los agentes peptidicos para formar una matriz polimérica. El emulsificador ayuda a reducir la tensión de superficie interfacial entre las fase de materia variadas en el sistema durante la fase de endurecimiento del proceso. Alternativamente, sí el polímero de encapsulación tiene alguna actividad de superficie inherente, no puede ser necesario para adición de un agente activo de superficie separada . Emulsificadores útiles para preparar encapsulado de la sal benéfica de los agentes peptidicos de conformidad con la presente invención incluyen poloxámeros y alcohol polivinilico como se ejemplifica en este documento, tensoactivos y otros compuestos activos de superficie los cuales pueden reducir la tensión de superficie entre la sal benéfica encapsulada polimérica de agentes peptidicos y la solución . Solvente orgánicos útiles para preparar las microesferas de la presente invención, excepto para aquellos descritos anteriormente, también incluyen ácido acético, acetona, cloruro de metileno, acetato de etilo, cloroformo y otros solventes no tóxicos que dependerán de las propiedades del polímero. Los solventes deben ser elegidos por disolver el polímero y son en última instancia no tóxicos. De esta forma, de conformidad con la presente invención, estas matrices poliméricas implantables pueden ser administradas a un sujeto, en donde el suministro de liberación controlada sostenida de un agente peptídico se deseable. Preferiblemente, las matrices poliméricas implantables de la invención pueden ser administradas por inyección y/o implantación subcutáneamente, intramuscularmente , intraperitonealmente o intradermalmente para proporcionar la dosificación deseada en base a los parámetros conocidos para tratamiento de las condiciones médicas variadas con el agente peptidico. Todos los libros, artículos y patentes referenciadas en este documento son completamente incorporados por referencia.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos ilustran las composiciones y métodos de la presente invención. Los siguientes ejemplos no deben ser considerados como limitaciones, pero deben simplemente enseñar como elaborar las composiciones de suministro del fármaco de liberación controlada útil.

Ejemplo 1. Preparación de sales benéficas de agentes peptídicos y derivados peptídicos formados con ácidos fuertes. Se disuelve un agente peptidico o derivados peptídicos que contienen al menos un grupo funcional básico en agua. Las cantidades estequiomét ricas de un ácido fuerte se agregan a la solución acuosa del agente peptidico, resultando en neutralización de los grupos básicos en el agente peptidico. La sal se obtiene por precipitación, filtración y/o 1 i o f i 1 i z ac i ón .

Ejemplo 2. Preparación de clorhidrato de leuprolido El leuprolido es una hormona luteinizante que libera agonista de la hormona (LHRH) que contiene residuos de 9 aminoácidos y dos funcionalidades básicas (una histidina y un grupo arginina) . Su amina N-terminal fue bloqueada en la forma de ácido piroglutámico . Se ha usado en el tratamiento de cáncer de próstata y endometriosis . El acetato de leuprolido (LA-Ac) se obtiene de Polypeptides Laboratories, Inc. (PPL Lot#PPL-LEUP0401A) . Se preparó clorhidrato de leuprolido (LA-HC1) reemplazando ácido acético con HC1 a través de un proceso de intercambio iónico y liofilización . Típicamente, 100 mg de acetato de leuprolido se disolvió en 30 mi de agua. Se agregó 3.19 mi de 0.5N HC1 (HC1:LA - 2.2:1) y se mezcló bien. La solución se secó por congelamiento por 72 horas para remover el ácido acético. El polvo seco se re-disolvió en agua y nuevamente se secó por congelamiento.

Ejemplo 3. Preparación de mesilato de leuprolido Se disolvió 345.5 mg de acetato de leuprolido (PPL Lot#PPL-LEUP0401A) en 20 mi de agua. Se agregó 32 DI de ácido metansulfónico y se mezcló bien (relación molar de acetato de leuprolido a ácido metansulfónico -1:2). La solución se secó por congelamiento por 72 horas para remover el ácido acético. El polvo seco se re-disolvió en agua y nuevamente se secó por congelamiento.

Ejemplo 4. Preparación de clorhidrato de goserelina Se disolvió 766 mg de acetato de goserelina (PPL Lot#0603-219) en 20 mi de agua. Se agregó 2.12 mi de 0.5N HC1 (relación molar de HC1 : acetato de goserelina ~2.2:1) y se mezcló bien. La solución se secó por congelamiento por 72 horas para remover el ácido acético. El polvo seco se re-disolvió en agua y nuevamente se secó por congelamiento.

Ejemplo 5. Preparación de Palmitoil- Octreótido (PAL-OCT) Se disolvió 50 mg de acetato de octreótido en 100 µ? de DMSO anhidro que contiene 100 ul de TEA. Se disolvió 17.1 mg de éster N-hidroxisuccinimida del ácido palmitico (Mw 353.50) en 3 mi de DMSO anhidro y se agregó por inyección directa a la solución del péptido. La reacción se dejó seguir durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en éter dietilico para precipitar octreótido pa lmi t o i 1 ado . Lo precipitado se lavó con éter dietilico dos veces y después se secó bajo vacio. El péptido acilado resultante está en la forma de polvo blanco. La sal benéfica del péptido acilado se formó neutralizando los grupos amina básicos residuales usando un ácido fuerte .

Ejemplo 6. Preparación de Decanal-Octreótido (DCL- OCT) Se disolvió 50 mg de octreótido en 2 mi de solución de cianoborohidruro de sodio 20 mM (Mw 62.84, NaCNBH3) (2.52 mg) en 0.1 M de amortiguador de acetato a pH 5. Se agregó 13.7 mg de Decanal (Mw 156.27) (OCT : DCL = 1:2) por inyección directa a la solución peptidica. La reacción se dejó continuar durante la noche a 4°C. La mezcla se separó por centrifugación. El PAL-OCT precipitado se secó por congelamiento. La sal benéfica del péptido acilado se formó neutralizando los grupos amina básicos residuales usando un ácido fuerte.

Ejemplo 7. Preparación de octreótido PEGilado Se agregó una solución de acetato de octreótido (10 mg/ml) en agua a un vial que contiene cantidad equivalente a 2 molar de monometoxi PEG de succinimidil propionato (SPA-mPEG, MW 2000 daltons) en 0.1 M de amortiguador de fosfato a pH 7.4. La reacción se dejó continuar con agitación a 4°C durante la noche. Después la mezcla de reacción se separó usando CLAR de fase inversa (RP-CLAR) en C-18 (YMC ODS-A 4.6x250 mm, 5 um, Waters Corporation) . La fase móvil consiste de 0.1 % de TFA en agua (A) y CAN que contiene 0.1% de TFA (B) . La fase móvil se corrió con un gradiente lineal de 30 hasta 60% de eluyente B por 20 minutos a una velocidad de flujo de 1 ml/min y la absorbancia UV de la elución se monitoreó a 215 nm. Las fracciones de elución que corresponde a picos representativos se colectaron separadamente, se purgaron con nitrógeno y se liofilizaron . Alternativamente, se puede obtener la PEGilación especifica del sitio de octreótido. Se agregó una solución de acetato de octreótido (10 mg/ml) en 20 mM de cianoborohidruro de sodio (NaCNBH3) y 0.1 M de amortiguador de acetato a pH 5 a un vial que contiene cantidad equivalente a 3 molar de PEG-propionaldehido de monometoxi (ALD-mPEG, MW 2000 daltons) en agua. La reacción se dejó continuar con agitación a 4°C durante la noche. Después la mezcla de reacción se separó por CLAR de fase inversa (RP-CLAR) en C-18 (YMC ODS-A 5 Dm, 4.6x250 min, Waters Corporation) . La fase móvil consiste de 0.1% de TFA en agua (A) y CAN que contiene 0.1% de TFA (B) . La fase móvil se corrió con un gradiente lineal de 30 hasta 60% de eluyente B por 20 minutos a una velocidad de flujo de 1 ml/min y la absorbancia UV de la elución se monitoreó a 215 nm . Las fracciones de elución que corresponden a picos respectivos se colectaron separadamente, se purgaron con nitrógeno, y se liofilizaron . La sal benéfica del péptido pegilado se formó neutralizando los grupos amina básicos residuales usando un ácido fuerte.

Ejemplo 8. Estabilidad del agente peptidico y polímero biodegradable en composiciones poliméricas inyectables Poli (DL-láctido-co-glicólido) (PLGA) de una relación 85/15 de láctido a glicólido (DLPLG85/15, IV: 0.28) con un grupo final éster laurílico en N-metil-2-pirrolidina (NMP) para proporcionar una solución al 50% en peso. Las sales de leuprolina se mezclaron con la solución PLGA en NMP para proporcionar una composición inyectable uniforme a relaciones mostradas en la tabla 1. Las composiciones inyectables se rellenaron en jeringas de polipropileno de 1.2 mi con puntas de cierre roscado de ajuste hermético. Después las jeringas pre-rellenadas se sellan usando cierre roscado de ajuste hermético. Las jeringas tapas se envasa en un recipiente y se sellan en una bolsa de plástico bajo vacío y después se almacenan a 4°C y temperatura ambiente (~22°C) por hasta 18 meses. La composición inyectable se muestrea a puntos de tiempo de 24 h, 1, 2, 3, 6, 12 y 18 meses. La pureza de leuprólido en la muestra se determina por CLAR. El peso molecular del polímero se determina por cromatografía de impregnación de gel (GPC) usando estándares de poliestireno con pesos moleculares conocidos.

Tabla 1: Formulaciones poliméricas inyectables probadas Sorprendentemente se encontró que el uso de sales de clorhidrato y mesilato de leuprólido un lugar de acetato significativamente reduce la degradación de leuprólido y polímero en soluciones PLGA en NMP tanto a 4°C como a temperatura ambiente durante un tiempo. Las tablas 2 y 3 muestran la degradación de leuprólido en soluciones PLGA en NMP a 4°C y temperatura ambiente durante un tiempo, respectivamente. A 4°C, hasta 23% de leuprólido se degradó en la composición polimérica que contiene acetato de leuprólido, mientras menos del 2% de leuprólido se degradó por aquellas formulaciones que contienen clorhidrato de leuprólido y mesilato de leuprólido después de 18 meses. A temperatura ambiente, se observó más del 35% de degradación de leuprólido para formulaciones de acetato de leuprólido, mientras únicamente aproximadamente el 11% para formulaciones de clorhidrato de leuprólido y mesilato de leuprólido después de 12 meses. Además, a temperatura ambiente, se observaron cambio de color (de lechoso a amarillo hasta color oxidado) y separación de fase. La separación de fase resultó en formulaciones heterogéneas y degradación no uniforme del péptido y el polímero en la formulación. La heterogeneidad de las formulaciones puede ser la causa para la fluctuación de los resultados obtenidos en varios puntos de tiempo.

Tabla 2. Estabilidad de Leuprólido en Formulación PLGA/NMP a 4°C Tabla 3. Estabilidad de Leuprólido en Formulación PLGA/NMP a temperatura ambiente Tiempo (M) LA-AC LA-HC1-1 LA-HC1-2 LA-MS 0 100 100 100 100 1 75 99 100 95 2 78 98 97 97 3 86 100 100 100 6 87 99 100 99 12 65 89 89 89 Las tablas 4 y 5 muestran cambios de pesos moleculares del polímero en formulaciones diferentes. Comparado al control negro, el peso molecular de PLGA en formulación de acetato de leuprólido disminuye más del 10% a 4°C y más del 90% a temperatura ambiente después de 6 meses. El peso molecular de PLGA en formulaciones de clorhidrato de leuprólido y mesilato de leuprólido es el mismo como el del control blanco tanto 4°C como a temperatura ambiente, aún después de 12 meses. Sin embargo, después de 12 meses, más del 90% del polímero tanto del control blanco como de formulaciones de clorhidrato de leuprólido y mesilato de leuprólido se degrada. Los resultados indican que las sales de leuprólido formado con ácido fuerte tal como HC1 y ácido metansul fónico completamente previene la int e ra cci ón / re acc i ón entre el péptido y PLGA en solución. Mientras el ácido débil tal como ácido acético no previene la interacción/reacción nociva entre el péptido y PLGA en solución. De esta forma, el mejoramiento de la estabilidad de la formulación usando la sal del péptido formado con un ácido fuerte facilita la manuf acturación de una composición inyectable lista para usarse con una estabilidad satisfactoriamente fuerte de al menos un año .

Tabla 4. Peso Molecular de PLGA en Formulaciones Diferentes durante un tiempo a 4°C.

Tabla 5. Peso Molecular de PLGA en Formulaciones Diferentes durante un tiempo a temperatura ambiente Ejemplo 9. Estabilidad de Leuprólido y polímero en composiciones polimérico inyectables Se disolvió poli ( DL-Láctido-co-glicólido) PLGA) de una relación 85/15 de láctido a glicólido (DLPLG85/15, IV: 0.28) con un grupo final éster laurílico en dimetilsulfóxido (DMSO) para proporcionar una solución al 50% en peso. Las sales de leuprólido se mezclaron con solución PLGA en DMSO para proporcionar una composición uniforme inyectable a relaciones mostradas en la tabla 6. Las composiciones inyectables se rellenaron en jeringas de polipropileno de 1.2 mi con puntos de cierre roscado de ajuste hermético. Después las jeringas pre-rellenadas se sellaron usando tapas de cierre roscado de ajuste hermético. Las jeringas tapadas se envasaron en un reciente y se sellaron en bolsas de plástico bajo vacio y después se almacenaron a 4°C y temperatura ambiente (~22°C) por hasta 16 meses. La composición inyectable se muestreó a puntos de tiempo definidos. Se determinó la pureza de leuprólido en la muestra por CLAR. Se determinó el peso molecular del polímero por cromatografía de impregnación de gel (GPC) usando estándares de poliestireno con pesos moleculares conocidos.

Tabla 6. Composición polimérica inyectable probada Muestra Sal de Leuprólido DLPLG 8515 en Carga de fármaco (mg) DMSO (mg) (%, P/P) Blanco 0 4000 0 LAAc 200.4 4788 4 LAMS-3 200.0 4806 4 LAHC1-3 202.8 4810 4 Sorprendentemente se encontró que el uso de sales de clorhidrato y mesilato de leuprólido un lugar de acetato significativamente reduce la degradación de leuprólido y polímero en soluciones PLGA en DIVISO a 4°C durante un tiempo. Las figuras 1 y 2 muestran la degradación de leuprólido en soluciones PLGA en D SO a 4°C durante un tiempo. Hasta 20% de leuprólido se degradó en el caso de acetato de leuprólido, mientras menos del 5% de leuprólido se degradó por formulaciones de clorhidrato de leuprólido y mesilato de leuprólido después de 16 meses. La figura 5 muestra los cambios de peso molecular de PLGA en diferentes formulaciones. En comparación al control blanco, el peso molecular de PLGA en formulación de acetato de leuprólido disminuye aproximadamente 40% a 4°C después de 16 meses. El peso molecular de PLGA en composiciones poliméricas inyectables que contienen clorhidrato de leuprólido y mesilato de leuprólido es comparable a aquel del control a 4°C después de 16 meses. Los resultados indican que las sales de leuprólido formadas con ácido fuerte tal como HC1 y ácido metansulfónico al menos completamente previene la interacción/reacción entre el péptido y PLGA en solución DMSO. Mientas el ácido débil tal como ácido acético no previene la interacción/reacción nociva entre el péptido y PLGA en solución DMSO.

Ejemplo 10. Liberación in vivo de leuprólido a partir de formulaciones poliméricas inyectables Se prepararon tres soluciones de vehículo polimérico como sigue: se disolvió PLG 85/15 (0.28 IV) con un grupo final éster de laurílico en N P a 50% y 55% en peso, y se disolvió RG503 (0.42 IV) con un grupo final de ácido carboxílico en NMP a 50% en peso. Después la cantidad adecuada clorhidrato de leuprólido (LAHC1) y mesilato de leuprólido (LAMS) se mezcló con las soluciones poliméricas a 6% en peso cada una. Las formulaciones son completamente mezcladas para obtener formulaciones uniformes. Una alícuota de la suspensión de formulación (aproximadamente 100 mg) se inyectó en 3 mi de una solución salina amortiguada con fosfato a pH 7.4 con 0.1% de azida de sodio a 37°C. El fluido receptor se reemplazó a puntos de tiempo seleccionados con soluciones amortiguadoras recientes, y la solución amortiguada removida se diluyó 2 veces con amortiguador de fosfato a pH 7.4, se analizó parta concentración de fármaco por CLAR. Se calculó la cantidad liberada en cada punto de tiempo. La figura 3 muestra la liberación cumulativa de leuprólido para diferentes formulaciones durante un tiempo. Como se muestra en la figura 3, no existe diferencia significante en leuprólido liberado entre LAHC1 y LAMS. Sin embargo, el tipo y la concentración de PLGA parecen afectar significantemente la liberación de leuprólido. La velocidad de liberación de leuprólido de la formulación RG503H es mucho más rápida que la de las formulaciones PLG85/15. De esta forma, RG503H puede ser adecuada para suministro a corto tiempo de leuprólido, mientras PLG85/15 puede ser útil para suministro a largo plazo. La velocidad de liberación del péptido puede también ser además modificada cambiando la concentración de PLGA. Como la concentración de PLG85/15 se incrementó de 50% hasta 55%, la velocidad de liberación inicial de leuprólido es significantemente reducida. De esta forma, los parámetros para una formulación especifica para el péptido para lograr un perfil de liberación deseado pueden ser fácilmente obtenidos por experimentación simple.

Ejemplo 11. Efecto de excipientes en la liberación in vitro de leuprólido Las soluciones de vehículo polimérico con y sin excipientes, se prepararon como sigue: PLA lOOdlpl (0.26 IV, Lakeshore, AL) , con un grupo final de lauril éster y vitamina E TPGS, se disolvieron en NMP a cantidad adecuada de conformidad con la Tabla 7. Después una cantidad adecuada de clorhidrato de leuprólido (LAHC1) se mezcló con las soluciones poliméricas a 15% en peso. Las formulaciones fueron uniformemente mezcladas para obtener las formulaciones uniformes.

Tabla 7. Efecto de excipientes sobre la liberación in vitro de leuprólido Una alícuota de la suspensión de formulación (aproximadamente 100 mg) , se inyectó en 3 mi de una solución salina amortiguada con fosfato a pH 7.4 con 0.1% de azida de sodio a 37°C. El fluido recibido se reemplazó a puntos de tiempo seleccionados con solución amortiguadora fresca, y la solución amortiguadora removida diluida 10 veces con PBS a pH 7.4, se analizó para determinar la concentración de fármaco por CLAR. La cantidad liberada en cada punto de tiempo de calculó. La Figura 4 muestra la liberación cumulativa de leuprólido para diferentes formulaciones con el tiempo. Como se muestra en la figura 4, la incorporación de Vitamina E TPGS, no afecta el estallido inicial, pero parece reducir la velocidad de liberación de leuprólido en las etapas finales. De este modo, la Vitamina E TPGS puede ser útil para extender el suministro del péptido y también funcionar como un antioxidante.

Ejemplo 12. Efecto de excipientes en la liberación in vitro de leuprólido Las soluciones de vehículo polimérico con y sin excipientes, se prepararon como sigue: PLA 100D040 (0.34 IV, Durect, CA) , con un grupo final lauril éster y cadena media de triglicérido Miglyol 812, se disolvieron en NMP a una cantidad adecuada de conformidad con la Tabla 8. Después la cantidad adecuada de clorhidrato de leuprólido (LAHC1) se mezcló con las soluciones poliméricas a 15% en peso. Las formulaciones fueron uniformemente mezcladas para obtener las formulaciones uniformes.

Tabla 8. Efecto de excipientes en la liberación in vitro de leuprólido de leuprólido Una alícuota de la suspensión de formulación (aproximadamente 100 mg) , se inyectó en un vial que contiene 3 mi de una solución salina amortiguada con fosfato a pH 7.4 con 0.1% de azida de sodio a 37°C. El fluido recibido se reemplazó a puntos de tiempo seleccionados con solución amortiguadora fresca, y la solución amortiguadora removida diluida 10 veces con PBS a pH 7. , se analizó para determinar la concentración de fármaco por CLAR. La cantidad liberada en cada punto de tiempo fue nuevamente calculada usando una curva estándar. La Figura 5 muestra la liberación cumulativa de leuprólido para diferentes formulaciones con el tiempo. Como se muestra en la Figura 5, la incorporación de Miglyol 812, no reduce significantemente la liberación de estallido inicial de leuprólido, y parece mantener la velocidad de liberación de leuprólido a etapas posteriores. De este modo, el Miglyol 812 puede ser empleado para extender el suministro del péptido. Comparando con los resultados en el Ejemplo 11, parece que el peso molecular del polímero también afecta significantemente la liberación de estallido inicial de leuprólido. Parece que a peso molecular más pequeño de PLA, menor la velocidad de liberación de estallido inicial de leuprólido.

Ejemplo 13. Liberación in vivo de leuprólido Poli (DL-láctido-co-glicólido) de una relación 85/15 de láctido a glicólido (DLPLG85/15, IV: 0.28), que contiene un grupo final de lauriléster, se disolvió en N-metil-2-pirrolidona (NMP) para dar una solución al 55% en peso. La sal de leuprólido, es decir, el mesilato de leuprólido o HC1 de leuprólido, se mezclaron con la solución de PLGA en NMP para dar una formulación inyectable uniforme a una carga de fármaco de aproximadamente 12%. Las formulaciones inyectables fueron transferidas en jeringas de polipropileno de 1.2 mi con puntas de cierre tipo Luer y una aguja de pared delgada de calibre 19 unida. Cada formulación fue entonces inyectada en las ratas subcutáneamente a un volumen de aproximadamente 100 µ? con 6 animales por grupo. Las muestras de suero se colectaron de cada animal a 3 horas, 1, 3, 7, 14, 28, 42, 56 y 70 días posteriores a la inyección. Las muestras de suero se analizaron por concentración de leuprólido por ELISA usando los kits disponibles a partir de Península Laboratories Inc. El leuprólido que permanece en los implantes a varios tiempos se analizó por CLAR. La Figura 6 muestra el perfil de liberación de leuprólido a partir de dos diferentes formulaciones hasta 70 días. Ambas formulaciones mostraron liberación de estallido inicial de leuprólido. La formulación que contiene LAHC1 alcanzó Cmax de 661.6 ng/ml a 3 horas, y la formulación que contiene LAMS alcanzó Cmax de 370.6 mg/ml, también a 3 horas. Ambas formulaciones mostraron liberación sostenida de leuprólido durante un periodo de tiempo extendido. La formulación que contiene LAMS, mostró niveles de suero más constantes de leuprólido que aquellos obtenidos a partir de la formulación que contiene LAHC1.

Ejemplo 14. Liberación in vivo de leuprólido Poli (DL-láctido-co-glicólido) de una relación 85/15 de láctido a glicólido (DLPLG85/15, IV:0.27), que contiene una porción 1 , 6-hexandiol , se disolvió en N-metil-2-pirrolidona (NMP) para dar una solución al 50% en peso. La sal de leuprólido, es decir, acetato de leuprólido o HC1 de leuprólido, son mezclados con la solución de PLGA en NMP para dar una formulación inyectable uniforme a una carga de fármaco de aproximadamente 12%. Las formulaciones inyectables son transferidas en jeringas de polipropileno de 1.2 mi con puntas de cierre tipo Luer y una agua de pared delgada de calibre 16 unida. Cada formulación es entonces inyectada en las ratas subcutáneamente a un volumen de aproximadamente 100 µ? con 6 animales por grupo. Las muestras de suero son colectadas a partir de cada animal a 3 horas, 1, 3, 7, 14, 28, 42, 56, 70, 91, 112, 133, 154, 175 y 206 días posteriores a la inyección. Las muestras de suero son analizadas para determinar la concentración de leuprólido por ELISA, usando los kits disponibles de Península Laboratories Inc., y para concentración de testosterona por CL/EM/EM. El leuprólido que permanece en los implantes a varios tiempos puede ser analizado por CLAR. Experimentos similares se pueden diseñar y realizar usando otros análogos de LHRH tales como, buserelina, deslorelina, fertirelina, histrelina, lutrelina, goserelina, nafarelina, triptorelina, cetrorelix, abarelix y otros péptidos, tales como GLP-1, PYY, etc., y otros polímeros y solventes .

Ejemplo 15. Uso de las composiciones poliméricas inyectables estabilizadas La administración de la composición polimérica inyectable estabilizada a un paciente, puede ser realizada en un número de formas. Una composición polimérica biodegradable puede ser inyectada subcutáneamente o intramuscularmente para formar un implante in situ, aplicado como una crema transdérmica , y también introducida al paciente como un supositorio rectal o vaginal.

Ejemplo 16. Preparación de microesferas poliméricas que contienen LAHC1 Se preparan microesferas de poli (láctido-co-glicólido) (PLGA) por una técnica de emulsión única aceite en agua (A/A) . El PLGA es disuelto en cloruro de metileno (DCM) . Para la encapsulación de LAHC1, el fármaco es mezclado con la solución de PLGA en DCM. La solución mezclada o suspensión, es emulsificada en 500 mi de 0.5-1% (p/v) de PVA (PVA, 88% hidrolizado, peso molecular promedio de 31,000-50,000, Sigma-Aldrich) , solución pre-enfriada en el refrigerador a 4°C. La emulsión es agitada continuamente por 3 h a TA para evaporar el DCM. Las microesferas endurecidas son colectadas, lavadas tres veces con agua desionizada y después secadas por congelamiento.

Ejemplo 17. Uso de la composición polimérica liquida estabilizada para preparar matrices poliméricas implantables El polímero biodegradable que consiste de un poli (ácido láctico-co-ácido glicólico) , que tiene una relación de láctido a glicólido de 50:50 hasta 100:0, tal como RG503H (Boehringer Ingelheim Chemicals, Inc. USA), se disolvió en un solvente orgánico volátil, tal como acetato de etilo o cloruro de metileno. Una cantidad apropiada de una sal benéfica como se define aquí, tal como mesilato de goserelina (0.01%-30% en peso con relación al polímero), se disolvió/dispersó en la solución polimérica. La solución es uniformemente mezclada para obtener la solución o suspensión uniforme. Después que se completa el mezclado, el solvente es removido por evaporación. Esto se hace por un procedimiento de secado por atomización para formar partículas uniformes pequeñas para inyección. Esto se puede hacer también en un molde para formar un implante. Las matrices poliméricas resultantes pueden también ser trituradas a un polvo y formuladas como una suspensión inyectable. De este modo, las formas de dosificación sólidas obtenidas pueden ser inyectadas subcutáneamente o intramuscularmente , o pueden ser colocadas quirúrgicamente bajo la piel en la forma de un implante, o dadas oralmente como parte de un sistema de suministro oral para agentes peptidicos. Las microparticulas sólidas pueden también ser preparadas como una suspensión o una solución no acuosa, la cual puede también ser administrada a un paciente vía inhalación, para suministro de fármaco pulmonar. Las microparticulas pueden también ser suspendidas en un aceite e introducidas al paciente como un supositorio rectal o vaginal. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (39)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Composición polimérica inyectable, caracterizada porque comprende: a) una sal benéfica de un agente peptidico formado con un ácido fuerte seleccionado del grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crómico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido perclórico, y ácido fosfórico; b) un polímero biodegradable; c) un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable el cual disuelve el polímero biodegradable y es miscible o dispersable en fluido acuoso o biológico; y d) opcionalmente uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
2. 2. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque está en la forma de una solución, suspensión, gel o un semi-sólido .
3. 3. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente peptidico contiene al menos, un grupo amina básico.
4. 4. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente peptidico se selecciona del grupo que consiste de oxitocina, vasopresina, hormona adrenocorticotrópica (ACTH) , factor de crecimiento epidérmico (EGF) , factor de crecimiento derivado de plaquetas ( PDGF) , prolactina, hormona luteinizante, hormona de liberación de la hormona luteinizante (LHRH) , agonistas de LHRH, antagonistas de LHRH, hormonas de crecimiento, factor de liberación de la hormona de crecimiento, insulina, eritropoyetina, somatostatina , glucagón, interleucina , interferón-alfa, interferón-beta , interferón-gama , gastrina, tetragastrina , pentagastrina , urogastrina, secretina, calcitonina, encefalinas, endorfinas, angiotensinas , hormona de liberación de tirotropina (TRH) , factor necrosis del tumor (TNF) , hormona paratiroidea (PTH), factor de crecimiento del nervio (NGF) , factor de estimulación de la colonia de granulocitos (G-CSF) , factor de estimulación de la colonia de macrófago granulocitos (GM-CSF) , factor de estimulación de la colonia de macrófagos (M-CSF) , heparinasa, factor de crecimiento endotelial vascular (VEG-F) , proteina morfogénica ósea (BMP) , hANP, péptido similar al glucagón (GLP-1), exenátido, péptido YY (PYY), renina, bradiquinina, bacitracinas , polimixinas, colistinas, tirocidina, gramicidinas , ciclosporinas, enzimas, citocinas, anticuerpos, vacunas, antibióticos, anticuerpos, glicoproteinas , hormona folículo estimulante, ciotorfina, taftsina, timopoyetina, timosina, timoestimulina, factor humoral tímico, factor tímico del suero, factores estimulantes de colonias, motilina, bombesina, dinorfina, neurotensina, ceruleína, urocinasa, calicreína, antagonistas y análogos de la sustancia P, angiotensina II, factor de coagulación de sangre VII y IX, gramicidinas, hormona estimulante del melanocito, hormona de liberación de la hormona tiroides, hormona estimulante de la tiroides, pancreozimina, colecistoquinina, lactógeno placental humano, gonadotropina coriónica humana, péptido que estimula la síntesis de proteína, péptido inhibidor gástrico, péptido intestinal vasoactivo, factor de crecimiento derivado de plaquetas, y análogos sintéticos y modificaciones y fragmentos de los mismos farmacológicamente activos.
5. 5. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente peptídico tiene un N-término que no es una amina primaria .
6. 6. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque el agente se selecciona del grupo que consiste de hormona de liberación de la hormona luteinizante (LHRH) , análogos de LHRH, agonistas y antagonistas.
7. 7. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada porque el agente peptidico se selecciona del grupo que consiste de leuprorelina, buserelina, gonadorelina, deslorelina, fertirelina, histrelina, leutrelina, goserelina, nafarelina, triptorelina, cetrorelix, enfuvirtido, timosina al y abarelix.
8. 8. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente peptidico tiene una amina primaria N-terminal y/o amina (s) primarias de cadena lateral que son covalentemente modificadas con porciones hidrofilicas .
9. 9. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque las porciones hidrofilicas incluyen cualquiera de los oligómeros lineales o ramificados solubles en agua, o polímeros de peso molecular promedio ponderado que varía desde aproximadamente 500 daltons hasta aproximadamente 50,000 daltons.
10. 10. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque las porciones hidrofilicas son polietilenglicol y/o sus derivados.
11. 11. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente peptidico tiene una amina primaria N-terminal y/o amina (s) primarias de cadenas laterales que son covalentemente modificadas con porciones lipofilicas.
12. 12. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque las porciones lipofilicas son seleccionadas del grupo que consiste de alquilo C2-39, alquenilo C2-39, alcadienilo C2-39 y residuos esferoidales.
13. 13. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el agente peptidico está presente a aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 40% de la composición por peso.
14. 14. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero biodegradable se selecciona del grupo que consiste de poliláctidos , poliglicólidos , poli ( láctido-co-glicólido ) s ; policaprolactonas , polidioxanonas , policarbonatos , polihidroxibutiratos , polialquilen oxalatos, polianhídridos, poliesteramidas , poliuretanos , poliacetales , poliortocarbonatos , polifosfacenos , polihidroxivaleratos , polialquilensuccinatos, poliortoésteres y copolímeros, copolímeros de bloque, copolímeros ramificados, terpolímeros y combinaciones y mezclas de los mismos.
15. 15. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero biodegradable es copolímeros de poli ( láctido-co-glicólido) que tienen una relación de ácido láctico a ácido glicólico entre aproximadamente 50:50 hasta aproximadamente 100:0, y un peso molecular promedio en peso ponderado de entre aproximadamente 2,000 hasta aproximadamente 100,000.
16. 16. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque los copolímeros de poli ( láctido-co-glicólido ) contienen un grupo terminal hidroxilo, carboxílico o éster.
17. 17. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque los copolímeros de poli ( láctido-co-glicólido) contienen un alcohol monofuncional o un residuo de poliol y no tienen un término de ácido carboxílico.
18. 18. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero biodegradable está presente a aproximadamente 30% hasta 70% de la composición en peso.
19. 19. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el solvente orgánico farmacéuticamente aceptable se selecciona de un grupo de N-metil-2-pirrolidona, dimetil sulfóxido, glicerol formal, glicofurol, metoxipolietilen glicol 350, alcoxipolietilenglicol, ásteres de polietilenglicol, benzoato de bencilo, benzoato de etilo, ésteres de ácido cítrico, triacetina, diacetina, trietil citrato, acetil trietil citrato y mezclas de los mismos.
20. 20. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el solvente orgánico farmacéuticamente aceptable está presente a aproximadamente 30% hasta aproximadamente 80% de la composición por peso.
21. 21. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque además comprende uno o más agentes que modifican la velocidad de liberación.
22. 22. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 21, caracterizada porque los agentes que modifican la velocidad de liberación se seleccionan del grupo que consiste de ácido alcancarboxílico, ácido oleico, alcohol alquilo, lípidos polares, tensoactivos , copolímeros de polietilenglicol y poliláctido o poli ( láctido-co-glicólido) , poloxámeros, polivinilpirrolidona , polisorbatos, 2-etoxietil acetato, triacetina, trietil citrato, acetil tributilcitrato, acetil trietilcitrato, glicerol triacetato, di (n-butil ) sebacato, polietilenglicol, sorbitol, triglicéridos , triglicéridos de cadena media y mezclas de los mismos.
23. 23. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque además comprende uno o más agentes amortiguadores.
24. 24. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada porque los agentes amortiguadores se seleccionan del grupo que consiste de carbonato de calcio, hidróxido de calcio, miristato de calcio, oleato de calcio, palmitato de calcio, estearato de calcio, fosfato de calcio, carbonato de magnesio, hidróxido de magnesio, fosfato de magnesio, miristato de magnesio, oleato de magnesio, palmitato de magnesio, estearato de magnesio, carbonato de zinc, hidróxido de zinc, miristato de zinc, oleato de zinc, palmitato de zinc, estearato de zinc, fosfato de zinc y combinaciones de los mismos.
25. 25. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque además comprende uno o más antioxidantes.
26. 26. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque los antioxidantes se seleccionan del grupo que consiste de acetato de d-alfa tocoferol, ascorbil palmitato, hidroxianidol butilado, hidroxianisol butilado, butiladohidroxiquinona, hidroxicomarina , hidroxitolueno butilado, galato de etilo, galato de propilo, galato de octilo, galato de laurilo, propilhidroxibenzoato, trihidroxibutilrofenona, vitamina E, vitamina E pegilada, y vitamina E-TPGS.
27. 27. Composición polimérica inyectable, caracterizada porque comprende: a) una sal de mesilato o clorhidrato de un agonista o antagonista de LHRH; b) un copolimero de poli ( láctido-co-glicólido) , en donde la relación de láctido : glicólido del copolimero es desde 50:50 hasta aproximadamente 100:0; c) N-metil-2-pirrolidona (NMP) ; y d) Un triglicérido y/o vitamina E o sus derivados .
28. 28. Composición polimérica inyectable de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el agonista o antagonista de LHRH se selecciona del grupo que consiste de leuprorelina , buserelina, gonadorelina , deslorelina, fertirelina, histrelina, leutrelina, goserelina, nafarelina, triptorelina, cetrorelix, enfuvirtido, timosina al y abarelix.
29. 29. Método para preparar una sal de un agente peptidico, caracterizado porque comprende las etapas de disolver una base libre de un agente peptidico en un medio liquido para formar una solución, y mezclar la solución con una solución acuosa de un ácido fuerte para formar la sal del agente peptídico.
30. 30. Método para preparar una sal de un agente peptídico, caracterizado porque comprende: a) disolver una primera sal de un agente peptídico formado con un ácido débil volátil en un medio líquido adecuado para formar ' una solución; b) mezclar la solución con una solución acuosa de un ácido fuerte para formar una mezcla; c) remover el solvente de la mezcla y d) remover el ácido débil para formar una segunda sal del agente peptídico.
31. 31. Método para preparar una sal de un agente peptídico, para formar un sistema de liberación controlada sostenido para suministrar una cantidad terapéutica de agente peptídico a un sujeto, caracterizado porque comprende las etapas de: a. disolver un polímero biodegradable en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable; b. combinar una sal de un agente peptídico formado con un ácido fuerte con la solución polimérica de la etapa a) y mezclarlos para formar una composición inyectable; en donde el ácido fuerte se selecciona del grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crómico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido perclórico, y ácido fosfórico.
32. 32. Método de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado porque el polímero biodegradable se disuelve con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables en un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable .
33. 33. Método para la formación in situ de un implante dentro de un cuerpo vivo, caracterizado porque comprende : a. administrar una composición polimérica inyectable en el cuerpo de un sujeto, la composición comprende una sal de un agente peptídico formada con un ácido fuerte, un polímero biodegradable, un solvente orgánico farmacéuticamente aceptable y opcionalmente, uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. b. permitir al solvente orgánico farmacéuticamente aceptable, disiparse de la composición para formar un implante biodegradable; en donde el ácido fuerte se selecciona del grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crómico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido perclórico, y ácido fosfórico.
34. 34. Método de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado porque la composición polimérica es administrada subcutáneamente.
35. 35. Método de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado porque la composición polimérica es administrada intramuscularmente .
36. 36. Método para producir una composición polimérica como un sistema de liberación controlada para suministrar una cantidad terapéutica de un agente peptidico a un sujeto, caracterizado porque comprende: a. disolver un polímero biodegradable en un solvente orgánico; b. disolver o suspender una sal del agente peptidico formada con un ácido fuerte en la solución polimérica de la etapa a) para formar una formulación uniforme; y c. formar micropartículas o nanopartículas que comprenden el polímero biodegradable que encapsula el agente peptidico, en donde el ácido fuerte se selecciona del grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhidrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crómico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido perclórico, y ácido fosfórico.
37. 37. Método para producir una composición polimérica como un sistema de liberación controlada para suministrar una cantidad terapéutica de un agente peptídico a un sujeto, caracterizado porque el método comprende: a. disolver un polímero biodegradable en un solvente orgánico; y b. disolver o suspender una sal del agente peptídico formada con un ácido fuerte en la solución polimérica de la etapa a) para formar una formulación uniforme; y c. formar una matriz polimérica sólida que comprende el polímero biodegradable que encapsula el agente peptídico, en donde el ácido fuerte se selecciona del grupo que consiste de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhidrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido crómico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido tricloroacético, ácido dicloroacético, ácido bromoacético, ácido cloroacético, ácido cianoacético, ácido 2-cloropropanoico, ácido 2-oxobutanoico, ácido 2-clorobutanoico, ácido 4-cianobutanoico, ácido perclórico, y ácido fosfórico.
38. 38. Método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque la matriz polimérica sólida está en la forma de microparticulas , nanopartículas, varillas, película, grano, cilindro u oblea.
39. 39. Método de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado porque la matriz polimérica sólida es ad'ecuada para administración parenteral; administración mucosal; administración oftálmica; administración subcutánea o inyección o inserción intramuscular; o inhalación.