KR920005964B1 - 항원에 대해 특이적인 종류의 항체 측정 방법 및 이 방법을 실행하기 위한 시약 - Google Patents

항원에 대해 특이적인 종류의 항체 측정 방법 및 이 방법을 실행하기 위한 시약 Download PDF

Info

Publication number
KR920005964B1
KR920005964B1 KR1019890015341A KR890015341A KR920005964B1 KR 920005964 B1 KR920005964 B1 KR 920005964B1 KR 1019890015341 A KR1019890015341 A KR 1019890015341A KR 890015341 A KR890015341 A KR 890015341A KR 920005964 B1 KR920005964 B1 KR 920005964B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
antibody
antigen
receptor
solution
specific
Prior art date
Application number
KR1019890015341A
Other languages
English (en)
Other versions
KR900006779A (ko
Inventor
슈미트 우반
Original Assignee
뵈링거 만하임 게엠베하
데에르. 다움 · 데에르. 포우쿠에트
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 뵈링거 만하임 게엠베하, 데에르. 다움 · 데에르. 포우쿠에트 filed Critical 뵈링거 만하임 게엠베하
Publication of KR900006779A publication Critical patent/KR900006779A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR920005964B1 publication Critical patent/KR920005964B1/ko

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54393—Improving reaction conditions or stability, e.g. by coating or irradiation of surface, by reduction of non-specific binding, by promotion of specific binding
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/576—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for hepatitis
    • G01N33/5761—Hepatitis B
    • G01N33/5762—Hepatitis B core antigen
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins

Abstract

내용 없음.

Description

항원에 대해 특이적인 종류의 항체 측정 방법 및 이 방법을 실행하기 위한 시약
본 발명은 체액중에 있는 항원에 대한 특이적인 종류의 항체(class-specific antibody)를 면역 검정법의 원리에 의해, 시료용액을 최소한 두 종류의 수용체 및 R1및 R2(R1은 고정화될 수 있으며 측정하려는 특이적인 종류의 항체와 결합하고 R2는 표식되고 측정하려고 하는 특이적인 종류의 항체와 특이적으로 결합하거나 또는 측정하려고 하는 항체에 특이적인 항원과 결합할 수 있는 가능성을 갖는다)과 인큐베이션시키고 고상을 액상에서부터 분리해내고 두 상중 어느 한 상에 들어있는 도식을 측정함에 의해 채액중의 항원에 대해 특이적인 종류의 항체를 측정하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 이러한 방법을 실행하는데 사용할 수 있는 시약에 관한다.
생체는 이물질의 침입에 대한 응답으로서 면역글로불린이라고 불리는 항체를 생산하다. 이 면역글로불린은 그것의 기능 및 구성에 의해 구분되는 5종류의 부류로 분류할 수 있다. 이러한 다른 종류의 면역글로불린은 생채내에서 다른 역할을 한다. 예를들어 이물질이 침입하거나 또는 이것으로 면역이 되면 M 종류의 면역글로불린("IgM")이 형성된다. 그러나, IgM의 농도는 감염이 진행하는 경우에는 빠르게 감소한다. G 종류의 면역글로불린(즉, "IgG")은 1차 면역이 이루어진 후에는 처음에 천천이 만들어지지만 동일한 이물질에 의해 두번째로 면역이 이루어진 후에는 다량으로 생성된다. A 종류의 면역글로불린("IgA")는 유기체의 점막표면에 방어하는 역할을 한다. E 종류의 면역글로불린("IgE")은 주로 알레르기 반응을 담당한다. D 종류의 면역글로불린("IgD")에 대해서는 비교적 잘 알려져 있지 않다.
각각의 면역글로불린 종류들은 상당히 다른 농도로 혈액내에 존재한다. 그러므로, 정상인의 혈청내 IgG함량은 8-16mg/ml이다. IgG 종류의 항체는 0.5-2mg/ml의 양으로 혈청내에 존재한다. 두번째로 많이 존재하는 면역글로불린은 정상인의 혈청내에 1.4-4mg/ml의 양으로 존재하는 IgA이다. 0.000017-0.00045mg/ml 범위로 존재하는 IgE의 농도가 가장 작다. 혈청내 IgD의 함량은 0-0.4mg/ml 범위내이다.
진단을 하는데는, 특정 항원에 대해 특이적인 특별한 부류의 면역글로불린 항체를 검사하는 것이 중요하다. 이러한 방법으로 예를들어 비루스, 박테리아 및 기생충 감염을 달리 진단할 수 있다. IgG 및 IgM을 측정하는 것은 초기 감염과 오래된 감염을 감별하는 것뿐 아니라 감염과정을 검사하는데 특히 적당하다. 특히, 특이적인 종류의 항체를 측정하는 것은 B형 간염, 특소플라스마병, 풍진 및 클라미디아(Chlamydia)감염을 진단하는데 유용하다.
특이적인 종류의 항체를 측정하는 방법들이 공지되었다. 그러므로, 예를들어 U.S 특허 제 4,020,151호에 혈청내에 있는 IgG, IgA, 및 IgM의 농도를 측정하는 방법이 기재되어 있다. 이러한 기재된 방법들은 고체 담체가 우선 샘플 용액과 반응하여 IgG, IgA 또는 IgM이 고체상에 흡착하게 되는 것을 가르킨다. 이후에 특별한 Ig 종류에 대한 표식된 항체를 여기에 부가하고 결합된 표식을 평가한다. 또 다른 검사 시스템이 W.Duereyer와 그의 동료의 The Lancet II, 684-185에 기술되어 있는데, 여기서는 특정한 종류의 면역글로불린에 대한 항체가 고체 담체에 결합한다. 샘플을 부가한 후에, 특정한 종류의 면역글로불린이 벽(wall)에 결합하며, 두번째 단계에서, 측정하려는 항체에 특이적인 항원이 부가되어 항체에 결합한다. 세번째 단계에서, 이러한 항원에 연결된 표식된 항체를 부가하고 결합된 표식의 비율을 다시 측정한다.
그러나, 특정한 종류의 면역글로불린을 측정하는 이미 공지된 방법들은 만족스럽지 못하다. 고상의 결합용량이 제한적이고 샘플내의 분석물의 농도가 높기 때문에, 단지 혈청내에 함유되어 있는 면역글로불린 종류들이 적은 비율로만 결합할 수 있다. 그러므로, 결국 항원에 특이적인 면역글로불린을 정량하는데 상당한 차이가 생기는데 그 이유는 혈청내의 이들 면역글로불린의 총량이 상당히 크게 변하기 때문이다. 샘플내의 주어진 종류의 항체의 변화가 매우 클 경우, 공지된 방법들을 모두 사용할 수 있는 것은 아니다. 다른 측정치가 얻어지며, 극단적인 경우에는 양성 샘플이 음성인 것으로서 검사될 수 있다.
이러한 장해를 경감시키기 위해, 샘플 용액을 희석한 다음 측정하려는 종류의 면역글로불린 항체를 함유하는 혈청을 첨가하고 샘플을 더 희석시키는 것이 Journal of Clinical Microbiology, 8월 1986, 페이지 288-293에 제안되어 있다. 이 방법의 경우,1 : 20000의 비로 희석하는 것이 필요하다. 한편으로 이러한 높은 희석율로 이해, 얻은 결과물의 재생산성이 문제시되며 다른 한편으로 이 방법은 자동 분석기로 이동될수 없다.
그러므로, 본 발명의 목적은 샘플을 애써 제조하거나 또는 샘플을 희석시킬 필요없이 체액 샘플에서 어떤 항원에 대한 특이적 종류의 항체를 측정할 수 있는, 적은 단계로 실행될 수 있는 방법을 제공하는 것이다.
그러므로 본 발명에 따라, 체액중의 항원 A에 대한 특정한 면역글로불린 종류의 항체를 측정하는 방법이 제공된다. R1은 고체상에 고정화되고 측정하려고하는 항체와 결합할 수 있으며 R2가 표식되고 측정하려는 항체나 또는 항원 A와 결합하는 최소한 2개의 수용체 R1과 R2를 샘플용액과 함께 인큐베이션하고 고체상을 액체상과 분리시키며 두개 상중 하나의 표식을 측정하여 본 발명을 실행하는데, 면역반응은 균일 상(homogeneous phase)에서 행해지며 샘플용액은 항원 A와 결합하지 않는 측정하려는 항체로서 동일한 종류의 면역글로불린에 속하는 과량의 사람 항체나 이것의 단편 및 수용체 R1과 함께 동시에 인큐베이션한다. 이어서, 수용체 R2및 가능한 또 다른 수용체들을 여기에 첨가한다.
놀랍게도, 본 발명의 방법을 사용하면 샘플을 예비처리하지 않고도 특이적인 종류의 항체를 재현가능하게 검출할 수 있다. 본 발명의 방법은 간단하고 빠르게 행해질 수 있다.
본 발명에 따라, 항원 A에 대해 특이적인 종류의 항체가 균일 면역분석으로 측정되는데, 즉 면역반응이 균일상에서 일어난다. 이 목적을 위해, 측정하려는 항체와 결합할 수 있는 수용체 R1으로서, 면역 반응동안 균일상으로 존재하고 고체상에 고정화되는 고정화가능한 수용체가 사용된다. 그러므로, 수용체 R1은 이것을 고체상에 결합할 수 있게하는 부분 및 특이적인 종류의 항체와 결합하는 부분을 갖는다. 바람직하게, 상기 후자 부분은 항체 또는 일정한 부분의 특이적인 종류의 항체에 대한 결합 단편 또는 이것의 유도체이다. 그러므로, 만약 G 종류의 면역글로불린을 측정한다면 수용체 R1는 항 -IgG 항체 또는 이것의 Fab 단편을 갖는다. 고정화되는 경우 수용체 R1의 일정 부분과 결합할 수 있는 수용체가 고체상에 고정화될 수 있다. 그러나, 바람직하게 R1은 특이적인 종류의 항체와 결합하는 첫번째 부분과 특이적 결합쌍의 파트너와의 접합체이다. 이런면으로 볼때 비오틴이 특히 바람직하다. 스트렙타비딘 같은 특이적 결합쌍의 다른 파트너가 결합되어 있는 매트릭스가 고체상으로서 바람직하다. 이런뒤 두개의 파트너를 서로 결합시킴에 의해 고정화가 일어난다. 이러한 결합은 불균일하게 일어나고 그러므로써 면역반응보다 훨씬 더 천천이 일어나기 때문에 이것은 균일상으로 면역반응을 행하는 것에 손상을 주지 않는다.
본 발명의 다른 변형된 방법에서, 고체상에다 비오틴 같은 특이적 결합쌍의 동일한 파트너를 결합시킨다. 고정화를 행하는데 있어, 특이적 결합쌍의 다른 파트너가 여기에 부가된다. 이렇게 하므로써 고체상과 수용체 R1이 결합하게 된다.
본 발명의 방법을 실행하기 위해, 항원 A와 결합하기 않으며 과량의 측정하려는 사람의 특이적인 종류의 면역글로불린 항체 또는 이것의 단편을 샘플 용액과 수용체 R1에 부가한다. 단편으로서, 측정하려고하는 면역글로불린 종류의 Fc 단편 또는 H-사슬 항원 결정소가 사용될 수 있다. 그러므로, IgM을 검사하기위해, μ-사슬이 사용될 수 있고, IgG 검사에 대해 γ-사슬 등이 사용될 수 있다.
바람직하게, 사람의 특이적인 종류의 항체는 샘플 용액내 있을 것 같은 면역글로불린의 양에 대해 2 내지100 : 1의 과량으로 부가된다.
수용체 R1과 과량의 특이적인 종류의 항체와의 용액을 우선 만드는 것이 바람직하다. 이렇게 하므로서 측정하려고 하는 항체와 결합할 수 있는 수용체 R1부분이 부가된 특이적인 종류의 항체와 반응한다. 이런다음, 샘플 용액을 여기에 부가한다. 샘플 용액내에 불충분하게 존재하는 샘플의 특이적인 종류의 항체가 과량으로 존재하는 비특이적인 항체를 수용체 R1과 함께 형성된 복합체로부터 부분적으로 치환시킨다. 이러한 치환은 특이적인 종류의 항체의 R1에 대한 친화력에 의존한다. 친화력이 작으면 이것은 더욱 빠르게 일어난다. 바람직하게 R1에 대해 ＜5×10-91/mole의 친화력을 갖는 특이적인 종류의 항체가 사용되었다. 고정화한 후에, 결합된 표식의 비율을 공지된 방법으로 측정할 수 있으므로 샘플 용액내 특이적인 종류 항체의 양을 직접 측정할 수 있다.
부가된 특이적인 종류의 항체의 양이 결정적으로 중요하지는 않지만 이것은 혈청내 이런 종류의 면역글로불린에 대해 보통 기대할 수 있는 상한값의 최소한 2배 정도로 커야한다. 그러므로, 바람직하게 과량은 기대했던 양의 면역글로불린에 대해 2 : 1 내지 100 : 1에 상당한다. 100배 이상 많아도 더이상 좋은점이 없기 때문에 이보다 더 많은 것은 비경제적이다.
두번째 수용체로서, 표식된 수용체가 사용된다. 표식은 공지된 방법으로 행해지며 방사성 동위원소, 화학발광이나 형광성 물질, 착색된 물질을 형성하는 물질 또는 효소일 수 있다. 이러한 표식을 검사하는 방법들이 공지되었으므로 설명할 필요가 없다. 수용체 R2는 측정하려는 항체나 또는 이러한 항체에 특이적인 항원과 결합할 수 있다. 첫번째 변형 방법에서, 측정하려는 항체에 특이적인 항원이 수용체 R1로서 사용된다. 이것은 공지된 방법으로 표식된다. 다른 변형 방법에서, 측정하려는 항체에 특이적인 항원에 대한 항체 또는 이것의 단편이 수용체 R2로서 바람직하다. 항체는 단클론(monoclonal)이나 다클론(polyclonal)일 수 있다. 이러한 두번째 구체예에서, 측정하려는 항체 및 R2와 특이적으로 결합할 수 있는 물질인 또 다른 수용체 R3가 필요하다. R3는 바람직하게 측정하려는 항체에 대해 특이적인 항원을 함유한다. 상기 항원이 R2및 측정하려는 항체에 대한 결합부위(에피토프)를 갖는다면 이 항원은 R3로서 사용될 수 있다.
본 발명의 방법을 실행하기 위해, 샘플 용액이 우선 수용체 R1및 과량의 특이적인 종류의 항체와 함께 인큐베이트된다. 연속해서 수용체 R2가 여기에 부가된다. 수용체 R3가 사용되는 경우에, 이것은 수용체 R2를 부가하기 전에 샘플 용액에 부가한다. 반응이 2단계로 행해져 자동 분석기로의 이동이 가능하도록 단지 2개의 수용체가 필요한 본 발명의 방법을 실행하는 형태가 특히 바람직하다.
면역반응은 균일상에서 일어나는 것이 매우 유리한데 왜냐하면 균일반응이 불균일반응보다 더 빠르고 더재현적으로 진행하기 때문이다.
본 발명은 또한 항원 A에 특이적인 종류인 체액내 항체를 측정하는 시약을 제공하는데, 이 시약은 고정화가능하고 측정될 항체와 결합하는 수용체 R1및 항원 A와 결합할 수 없는 특이적인 종류인 과량의 사람 항체의 혼합물인 제1용액 및 표식되고 항원 A를 갖는 수용체 R2를 함유하는 제2용액을 함유한다.
또 다른 변형 방법에서, 본 발명의 시약은 항원 A와 결합하지 않는 과량의 특이적인 종류인 사람 항체와 수용체 R1과의 혼합물인 제1용액, 항원 A에 대한 항체를 함유하며 표식된 수용체 R2인 제2용액, 및 항원 A를 지니는 수용체 R3를 함유하는 제3용액을 갖는다.
이런 방법에서, 수용체 R3는 특이적인 결합 가능한 항체에 대한 최소한 하나의 결합 부위 및 수용체 R2에 대한 최소한 하나의 결합 부위를 가져야 한다. 그러므로, 수용체 R3는 다가의 항원이다. 그러나, 만약 1가 항원에 대한 항체가 검사된다면, R3는 중합 형태의 항원이다. 이러한 목적으로 항원은 예를들어 소의 혈청 알부민, 라텍스 또는 미세 담체와 같은 담체에 결합될 수 있거나 가교결합될 수 있다. 이런 목적을 위한 방법들이 공지되었다.
바람직한 구체예에서, 시약의 제2용액과 제3용액은 미리 혼합될 수 있다. 시약은 제1용액으로서, 항원 A와 결합하지 않는 과량의 특이적인 종류인 사람 항체와 수용체 R1과의 혼합물 및 제2용액으로서, 항원 A에 대한 항체를 함유하고 표식된 수용체 R2및 항원 A를 지니는 수용체 R3를 함유한다.
시약은 샘플 용액내 있을거라고 생각되는 면역글로불린 양에 대해 1-200배 되는 정도의 사람의 특이적인 종류 항체가 반응용액에 존재하도록 하는 정도로 많은 양의 사람의 특이적 종류의 항체를 함유한다. 이렇게하기 위해서는 10μl의 샘플이 1ml의 시약에 부가되는 경우, 시약은 바람직하게 ℓ당 20-200mg의 항체를 함유한다.
본 발명의 시약은 2개 또는 3개의 분리된 용액에 특이적인 종류의 항체를 측정하는데 필요한 성분을 함유한다. 물리적으로 서로 분리된 용액이 저장되며 측정하기 위해서는 연속해서 샘플 용액과 함께 인큐베이트된다. 이 용액은 저장에 안정한다.
다음 실시예는 본 발명을 설명한다.
[실시예 1]
면역글로불린 종류 M의 항 -HBcAG 항체를 혈청내에서 측정하였다. 이렇게 하기위해 스트렙타비딘으로 피복된 테스트 튜브를 고체상으로서 사용하였다. 다음과 같은 조성의 100μl의 시약과 함께 10μl의 샘플을 부가하였다.
시약 1 : 40mMole/l 인산염 완충액(pH 7.0),
0.5% Pluronic F68, 0.2% 소의 혈청 알부민,
0.01% 페놀, HBcAG와 결합할 수 없는 사람의 IgM 40mg/ml 및
비오틴과 결합되었던 IgM에 대한 단클론 항체 2mg/l.
주변 온도에서 30분간 인큐베이트하였다. 물로 3번 세척한 후에, 다음과 같은 조성의 시약 1ml을 여기에 부가하였다.
시약 2 : 40mMol/l 인산염 완충액(pH 7.0)
0.2% 소의 혈청 알부민
0.01% 페놀,
75μl 간염 코아(core)항원 및 단클론 항 -HBcAG 항체와 퍼옥시다제와의 접합체 25μl.
20-22℃에서 60분간 인큐베이션하고 물로 3번 세척한 다음 기질로서 1ml의 ABTS 용액을 부가하는 것이 적절한 프로토콜(protocol)이었다. 1시간 후에 405nm에서 광흡수를 측정하고 캘리브레이션 커브(calibraiton cunre)를 기초로하여 평가하였다. 얻은 결과가 다음 표에 주어진다.
Figure kpo00001
1) 평균 : 179
2) 평균 : 451
[실시예 2]
사람의 IgM에 대한 비오티닐화 단클론 항체 대신에 사람의 IgM에 대한 비오티닐화 다클론 항체를 시약 1로서 사용했던 것을 제외하고 실시예 1과 유사하게 혈청내 IgM 종류의 항 -HBc 항체를 측정하였다. 실시예 1에 기술된 방법으로 평가하였다.
[실시예 3]
혈청내 IgM 종류의 항-HBcAG 항체를 실시예 1에 기술된 프로토콜을 이용해 검사하였다. 그러나 시약 2내 간염 코아 항원 및 항체 POD 접합체 대신에 HBcAG와 퍼옥시다제의 접합체를 사용하였다. 실시예 1에 기술된 방법으로 평가하였다.
상기 명세서의 내용과 실시예가 본 발명을 설명하지만 이것을 제한하지 않으며 본 발명의 범위내 기타 구체예가 당 업계의 숙련자에게 제한될 것임이 이해될 것이다.

Claims (10)

  1. 면역검정법의 원리에 따라, 시료 용액을 최소한 두 종류의 수용체 R1및 R2(R1은 고정화될 수 있으며 측정하려고하는 항체와 결합될 수 있고 R2는 표식되며 측정하려고 하는 항체와 결합할 수 있거나 또는 항원 A와 결합할 수 있다)와 인큐베이션시키고 액상에서 고상을 분리하고 두상중 한상에서 표식을 측정하는 것에 의해 특정종류의 면역글로불린 항체를 측정하는 경우에 ; 당해 면역반응을 균질상으로 실시하고, 측정하려는 항체와 동일한 종류의 면역글로불린에 속하며 항원 A와는 결합될 수 있는 과량의 사람의 항체 또는 이것의 단편을 시료용액과 함께 인큐베이션하고 곧이어 여기에 수용체 R2및 가능하다면 또 다른 수용체들을 부가하는 것을 특징으로하는, 특정한 종류의 면역글로불린 항체를 측정하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, IgM 항체를 측정하는데 이용되는 방법.
  3. 제1항에 있어서, 수용체 R1으로서, 비오틴과 항-IgM 항체 또는 이것의 유도체와의 접합체가 사용되고 고체상으로서, 다수의 스트렙타비딘 분자가 결합되어 매트릭스가 사용되는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 수용체 R2로서 항원 A와의 결합체가 사용되는 방법.
  5. 제1항에 있어서, 수용체 R2로서 항원 A에 대한 항체와 표식과의 접합체가 사용되고 수용체 R3로서 항원 A가 사용되는 방법.
  6. 제1항에 있어서, 사람의 특이적인 종류의 항체로서, Fc 단편 또는 상응하는 H 사슬이 사용되는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 사람의 특이적인 종류의 항체가 샘플 용액내 있다고 생각되는 면역글로불린의 양에 대해 2 : 1 내지 100 : 1의 과량으로 사용되는 방법.
  8. 항원 A와 결합할 수 없는 과량의 특이적인 종류인 사람 항체와 측정하려는 항체와 결합될 수 있고 고정화될 수 있는 수용체 R1과의 혼합물인 용액 1, 및 표식되고 항원 A를 갖는 수용체 R2를 함유하는 용액 2를 포함하는, 제1항 내지 제7항의 어느 한 항의 방법으로 특정한 종류의 면역글로불린 항체를 측정하기 위한 시약.
  9. 수용체 R1과 과량인 사람의 특이적인 종류의 항체와의 혼합물인 용액 1, 표식되고 항원 A에 대한 항체를 지니는 수용체 R2를 함유하는 용액 2, 및 항원 A를 갖는 수용체 R3를 지니는 용액 3을 포함하는, 제1항 내지 제7항의 어느 한 항의 방법으로 특정한 종류의 면역글로불린 항체를 측정하기 위한 시약.
  10. 수용체 R1과 과량인 사람의 특이적인 종류의 항체와의 혼합물인 용액 1, 및 표식되고 항원 A에 대한 항체를 지니는 수용체 R2와 항원 A를 갖는 수용체 R3를 함유하는 용액 2을 포함하는, 제 1 항 내지 제 7 항의 어느 한 항의 방법으로 특정한 종류의 면역글로불린 항체를 측정하기 위한 시약.
KR1019890015341A 1988-10-25 1989-10-25 항원에 대해 특이적인 종류의 항체 측정 방법 및 이 방법을 실행하기 위한 시약 KR920005964B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3836348A DE3836348A1 (de) 1988-10-25 1988-10-25 Verfahren zur bestimmung von fuer ein antigen klassenspezifischen antikoerpern und dazu geeignetes reagenz
DEP3836348.8 1988-10-25

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR900006779A KR900006779A (ko) 1990-05-08
KR920005964B1 true KR920005964B1 (ko) 1992-07-25

Family

ID=6365891

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019890015341A KR920005964B1 (ko) 1988-10-25 1989-10-25 항원에 대해 특이적인 종류의 항체 측정 방법 및 이 방법을 실행하기 위한 시약

Country Status (9)

Country Link
US (1) US5376557A (ko)
EP (1) EP0366092B1 (ko)
JP (1) JP2613109B2 (ko)
KR (1) KR920005964B1 (ko)
AT (1) ATE102357T1 (ko)
AU (1) AU618137B2 (ko)
CA (1) CA2001253C (ko)
DE (2) DE3836348A1 (ko)
ES (1) ES2061881T3 (ko)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3822750A1 (de) * 1988-07-05 1990-01-11 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur bestimmung einer spezifisch bindefaehigen substanz
EP0507587A3 (en) * 1991-04-03 1993-03-03 Syntex (U.S.A.) Inc. Immunoassay for immunoglubulins
DE4212706A1 (de) * 1992-04-16 1993-10-21 Behringwerke Ag Diagnostisches Verfahren zur immunologischen Bestimmung eines oder mehrerer Analyten
WO1994018566A1 (en) * 1993-02-04 1994-08-18 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Method of assaying specific antibody
DE19649390A1 (de) * 1996-11-29 1998-06-04 Boehringer Mannheim Gmbh Antigenspezifischer IgG-Nachweis
US6153392A (en) * 1997-07-30 2000-11-28 Bionova Corporation Devices and methods comprising an HBcAg from hepatitis B virus
ITTO980473A1 (it) * 1998-06-02 1999-12-02 Sorin Diagnostics S R L Nuovo procedimento per la rivelazione di anticorpi e/o isotipi di anticorpi specifici per almeno due differenti fasi di un'infezione
US6379909B1 (en) * 1998-06-24 2002-04-30 Alk-Abello A/S Method of detecting an antibody in a liquid sample
US8323903B2 (en) 2001-10-12 2012-12-04 Life Technologies Corporation Antibody complexes and methods for immunolabeling
US20050069962A1 (en) 2001-10-12 2005-03-31 Archer Robert M Antibody complexes and methods for immunolabeling

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4020151A (en) * 1976-02-17 1977-04-26 International Diagnostic Technology, Inc. Method for quantitation of antigens or antibodies on a solid surface
JPS5510590A (en) * 1978-05-04 1980-01-25 Wellcome Found Enzyme immunity quantity analysis
US4273756A (en) * 1978-07-28 1981-06-16 Abbott Laboratories Immunoassay for class specific antibodies
US4600690A (en) * 1978-08-07 1986-07-15 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University, A Division Of Yeshiva University Immunoassay
US4292403A (en) * 1978-08-24 1981-09-29 Akzona Incorporated Detection and/or determination of IgM, IgA, IgD and IgE immunoglobulins
DE2930706A1 (de) * 1979-07-28 1981-02-05 Medac Klinische Spezialpraep Verfahren zum nachweis von erregerspezifischen antikoerpern
US4376110A (en) * 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
GB2109932B (en) * 1980-10-24 1984-08-01 David Parratt A method of diagnosis
US4496654A (en) * 1983-04-08 1985-01-29 Quidel Detection of HCG with solid phase support having avidin coating
DE3400027A1 (de) * 1984-01-02 1985-07-18 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur bestimmung eines polyvalenten antigens und reagenz hierfuer
US4661444A (en) 1984-03-29 1987-04-28 Ortho Diagnostic Systems Inc. Homogeneous immunoassays employing double antibody conjugates comprising anti-idiotype antibody
ZA855031B (en) * 1984-08-31 1986-02-26 New York Blood Center Inc Assay for simultaneous detection of antigen and antibody in given serum
US4935339A (en) * 1985-05-07 1990-06-19 Nichols Institute Diagnostics Delayed solid phase immunologic assay
US4931385A (en) * 1985-06-24 1990-06-05 Hygeia Sciences, Incorporated Enzyme immunoassays and immunologic reagents
US4778751A (en) * 1986-05-12 1988-10-18 Diagnostic Products Corporation Method for measuring antigens or antibodies in biological fluids using ligand labeled antigens or ligand labeled antibodies
GB2203836B (en) * 1987-04-24 1991-01-23 Dr Ch Ng Soo Ling Determination of analyte concentration by re-equilibration
DE3834766A1 (de) * 1988-10-12 1990-04-26 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur bestimmung einer spezifisch bindefaehigen substanz

Also Published As

Publication number Publication date
CA2001253C (en) 2000-05-16
ATE102357T1 (de) 1994-03-15
EP0366092B1 (de) 1994-03-02
ES2061881T3 (es) 1994-12-16
JP2613109B2 (ja) 1997-05-21
AU618137B2 (en) 1991-12-12
KR900006779A (ko) 1990-05-08
AU4365689A (en) 1990-05-03
JPH02159562A (ja) 1990-06-19
DE58907087D1 (de) 1994-04-07
US5376557A (en) 1994-12-27
EP0366092A3 (de) 1991-04-03
EP0366092A2 (de) 1990-05-02
CA2001253A1 (en) 1990-04-25
DE3836348A1 (de) 1990-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4294817A (en) Method of fluoro immunoassay
KR920005963B1 (ko) 특이적으로 결합가능한 물질의 측정방법
Voiler Heterogeneous enzyme-immunoassays and their applications
US5296347A (en) Bridge immunoassay
US4020151A (en) Method for quantitation of antigens or antibodies on a solid surface
JP2599058B2 (ja) クラス特異的な免疫グロブリン抗体の免疫分析法
US20080213797A1 (en) Immunoassays exhibiting a reduction in prozone phenomena
KR920000056B1 (ko) 특이적으로 결합가능한 물질의 측정방법
JPH0421818B2 (ko)
KR20140015153A (ko) 심근세포 손상의 진단을 위한 검사
FI89984B (fi) Enstegsimmuntest foer bestaemning av antigenspecifika antikroppar hoerande till immunoglobulingruppen a, m, d eller e och medel daerfoer
US7368277B2 (en) Method for assay of antibodies and antibody assay device
KR920005964B1 (ko) 항원에 대해 특이적인 종류의 항체 측정 방법 및 이 방법을 실행하기 위한 시약
CA2507024A1 (en) Immunoassay and kit for an early and simultaneous detection of biochemical markers in a patient's sample
JP2002296281A (ja) 改良された均一系イムノアッセイ法
JP4065600B2 (ja) 免疫学的測定法および免疫学的測定用キット
WO1993017335A1 (en) Bridge immunoassay
DK161168B (da) Immunometrisk fremgangsmaade til bestemmelse af haptener og analysesaet til anvendelse ved fremgangsmaaden
US4288426A (en) Serological test for syphilis
JPH0421819B2 (ko)
CA2047742A1 (en) Method and diagnostic test kit for detection of anti-cardiolipin
WO1990015328A1 (en) Improved immunoassay
JP4556605B2 (ja) 標的物質の測定方法および測定試薬
JPH0799370B2 (ja) 免疫学的に結合可能な物質の定量方法
JPH11295311A (ja) 抗体測定方法

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
G160 Decision to publish patent application
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 19960718

Year of fee payment: 5

LAPS Lapse due to unpaid annual fee