KR900007498B1

KR900007498B1 - 다당류 및 그것을 활성성분으로 함유하는 항바이러스 약제

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Publication number: KR900007498B1
Application number: KR1019880007287A
Authority: KR
Inventors: 시게아끼 무또; 고이찌 니무라; 미노루 오하라; 요시하루 오구찌; 겐니찌 마쯔나가; 구니따까 히로세; 준지 가꾸찌; 노리후미 스지따; 다까오 후루쇼; 찌까오 요시꾸미; 마사아끼 다까하시
Original assignee: 구레하 가가꾸 고교 가부시끼가이샤; 스가노 요리쓰구
Priority date: 1987-06-18
Filing date: 1988-06-17
Publication date: 1990-10-11
Also published as: CA1332650C; EP0295956A2; KR890000100A; US5089481A; DE3855525D1; AU599241B2; EP0295956A3; AU1779488A; EP0295956B1; DE3855525T2

Abstract

내용 없음.

Description

다당류 및 그것을 활성성분으로 함유하는 항바이러스 약제

본 발명은 해조류, 특히 갈조류(Phaeophyceae), 홍조류(Rhodophyceae) 및 녹조류(Chlorophyceae)강에 속하는 조류로 부터 수득된 다당류 ; 및 이 다당류를 활성성분으로 함유하는 항 바이러스 약제, 특히 항 레트로바이러스 약제, 보다 상세하게는 항 AIDS 바이러스 약제에 관한 것이다. 본 발명에서 말하는 "다당류"는 다당류와 단백질-결합 다당류를 의미한다.

최근 AIDS(후천성 면역 결핍증후군)와 같은 새로운 형태의 불치병이 관심을 끌어왔고, 또 이 질병에 대한 치료제의 개발이 강하게 요구되어 왔다. 현재, 3'-아지도-3'-데옥시 티미딘(AZT)이라는 헥산 유도체가 유일한 AIDS 치료제로 공지되어 있다. 이 질병의 원인으로는, 레트로바이러스의 일종인 사람의 면역결핍 바이러스(HIV)가 사람의 T₄임파구상에 흡착되어 이 임파구를 감염시키고 또 다른 임파구도 차례로 감염시켜 마침내 면역 시스템을 파괴하게 된다는 것이 많은 연구자에 의해 이미 발표되어 있다.

본 발명자들은 면역시스템에서 생물학적 반응 조절제(biological response modifier : BRM)로 작용할 수있는 많은 단백질-결합 다당류를 이미 발견하였다. 예를들면, 본 발명자들은 항암 활성을 갖는 하기 다당류를 영국 특허 제 1,331,513호에서 제안하였다.

다당류는 담자균류의 진균종의 균사체 액체 추출물 또는 상기 종의 배양 육즙으로 부터 수득하며, 상기 다당류는 상기 액체 추출물 또는 상기 배양 육즙에서 존재하는 불순물을 함유하지 않거나 완전히 함유하지 않고, 또 비흡습성 및 비투석성인 수용성 무형정 고체이고 ; 가수분해후 IN황산으로 글루코스 존재 확인시험시 양성을 나타내며 ; 페놀 존재를 확인하기 위한 염화철 반응 처리 및 환원당 존재를 확인하기 위한 펠링 반응처리시 음성을 나타내고 ; 아니스알데히드-황산반응, α-나프톨을 사용한 몰리쉬반응, 안트론-황산반응, 트립토판-황산반응, 크로모트로프산-황산반응, 아닐린 -염산반응, 레조르시놀-염산반응, 카르바졸-시스테인-황산반응, 톨렌반응 및 티오글리콜-황산반응 처리시 양성을 나타내며 ; 0.05몰 붕산나트륨 용액중, 20-25V/cm로 90분간 셀룰로오즈 아세테이트 막을 사용한 전기 영동 처리시 양극측 한곳에서만 나타나고 ; 또 황색포도상 구균(Staphylococus aureus), 대장균(Escherichia coli), 고초균(Bacillus subtilis), 흑색국균(Aspergillus niger) 및 아구창 칸디다(Candia albicans)과 같은 세균, 진균 및 이스트에 대한 항미생물 활성을 나타내지 않는 것을 특징으로 한다.

본 발명자들은 BRM 작용을 갖는 다당류 및 단백질-결합 다당류가 면역시스템에 지대한 영향을 미친다는 사실을 알고 많은 연구를 행한 결과, 갈조류, 홍조류 및 녹조류 강(綱)에 속하는 해조류로 부터 추출된 물질이 사람-유래 임파구상에 HIV가 흡착하는 것에 대한 억제활성 밋 HIV의 중식에 필수적인 효소인 역전사효소(RTase)의 활성을 억제하는 작용을 갖는다는 것을 발견하였다. 본 발명은 이러한 발견을 기초로하여 완성되었다.

본 발명의 제1목적은, (a) (ⅰ) α-나프톨-황산반응, 인돌-황산반응, 안트론-황산반응 또는 페놀-황산반응 처리시 양성을 나타내거나 ; 또는 (ⅱ) α-나프톨-황산반응, 인돌-황산반응, 안트론-황산반응 또는 페놀-황산반응 및 염산가수분해후 로우리 폴린공정 또는 닌히드린 반응 처리될때 양성을 나타내고 ; (b) 20 내지 55% 탄소, 3 내지 9% 수소 및 16% 이하 질소의 원소 분석치를 가지며 ; (c) pH가 6.0 내지 7.5이고 ; (d) 당 성분으로서는 글루코오스, 글루쿠론산, 크실로오스 밋 만노오스로 부터 선정된 2종이상의 당류를, 또 단백질 성분으로는 아스파라긴산, 리신, 로이신, 글루탐산 및 글리신으로 부터 선정된 3종 이상의 아이노산을 함유하고 ; (e) 적외선 흡수 스펙트럼에서, (ⅰ) 3600 내지 3200cm^-1, 또는 (ⅱ) 3600내지 3200cm^-1및 1700 내지 1600cm^-1에서 흡수 피이크를 나타내며 ; (f) 겔 여과 크로마토그래피에 의하여 측정된 것과 같은 10³내지 3×10⁶의 분자량을 가지고 ; 또 (g) 물 및 수용성 알코올, 산 또는 염기를 함유하는 수성 용매에는 가용성이지만 클로로포름, 벤젠 및 에테르의 유기용매에는 불용성인 특징을 갖는 해조류로 부터 생성된 다당류를 제공하는 데 있다.

본 발명의 제2목적은 해조류로 부터 추출된 유효량의 다당류를 활성성분으로 함유하는 항바이러스 약제를 제공하는 데 있다.

본 발명의 특징은 해조류로 부터 추출되고 또 HIV가 사람의 임파구상에 흡착하는 것에 대한 억제 활성과 RTase 활성을 억제하는 작용을 갖는 다당류(이후, 이 다당류를 "본 물질"로 칭함) 및 이 다당류를 활성성분으로 함유하는 항 바이러스 약제에 존재한다.

해양 조류는 크게 갈조류(Phaeophyceae), 훙조류(Rhodophyceae) 및 녹조류(Chlorophyceae)의 3개 강(綱)으로 분류된다.

본 발명에서 고려하는 조류의 분류는 Y.Yamada 및 S.Segawa : "An llustrated Book of the Japanese Marine Algae" (Hoikusha에 의해 1971년 6월 1일 발행) 및 그의 "Supplement"(1977년 7월 1일 발행)과 T.Yamade등 : "Iwanami Encyclopedia Bio1ogica" 제3판 (Iwanami Shoten에 의하여 1983년 3월 10일 발행)에 따른 것이다.

본 발명에서 사용 가능한 녹조류는 엑토카르팔레스(Ectocarpales), 스파셸라리아레스(Sphacelariales), 쿠트레리아레스(Cutleriales), 딕티오탈레스(Dictyotales), 코르다리아레스(Chordariales), 스포로크날레스(Sporochnales), 데스마레스티아레스(Desmarestiales), 푼크타리아레스(Punctariales), 딕티오시포날레스(Dictyosiphonales), 라미나리아레스(Laminariales) 및 푸카레스(Pucales)를 포함한다. 본 발명에서 사용가능한 훙조류는 포르피리디아레스(Porphyridiales), 고니오트리카레스(Goniotrichales), 반지아레스(Bangiales), 콤프소포고날레스(Compsopogonales)(원시홍조강=Protoflorideophyceae)과 네말리아레스(Nemaliales), 젤리디아레스(Gelidiales), 크립토네미아레스(Cryptonemiales), 지가르티나레스 (Gigartinales), 로디메니아레스(Rhodymeniales) 및 세라미아레스(Ceramiales) (진정홍조강)를 포함한다. 본 발명에서 사용가능한 녹조류는 볼보카레스(Volvocales), 테트라스포랄레스(Tetrasporales), 클로로코카레스(Chlorococcales), 울로트리카레스(Ulotrichales), 울바레스(Ulvales), 프라시오랄레스(Prasioiales), 스파애로플레아레스(Sphaeropleales), 클라도포라레스(Cladophorales), 시포노클라다레스(Siphonocladales), 오에도고니아레스(Oedogoniales), 다시클라다레스(Dasycladales) 및 코디아레스(Codiales)를 포함한다.

조류의 목(目)중에서, 네마시스투스(Nemacystus), 크젤마니엘라(Kjellmaniella), 라미나리아(Laminaria), 운다리아(Undaria), 히지키아(Hizikia), 포르피라(Porphyra), 젤리디움(Gelidium), 글로이오펠티스(Gloiopelitis), 그라실라리아(Gracilaria), 헤미네우라(Hemineura), 클로렐라(Chlorella), 울바(Ulva), 스피로지라(Spirogyra), 코디움(Codium) 및 아세타불라리아(Acetabularia) 속(屬)에 속하는 것이 바람직하다.

본 물질은 해조류를 수성용매로 추출시키고 또 그 추출물을 정제처리 시킴으로써 수득할 수 있다.

추출하기 위해 사용하는 수성용매는 물이거나 또는 소량의, 예를들어 약 10중량％ 미만의 유기용매, 산, 염기 또는 물에 녹는 염을 함유하는 수용액일 수 있다. 본 발명에 따른 추출은 물 추출법, 유기용매 추출법, 산 용액 추출법, 염기 용액 추출법, 염용액 추출법 및 이들을 결합한 방법으로 구성된 군으로 부터 선정된 방법에 의하여 실행될 수 있다. 상기 추출에 사용가능한 유기용매로는 메탄올, 에탄올, 이소프로필 알코올등을 포함한다. 상기 추출에 사용가능한 산으로는 염산, 황산, 아세트산등을 포함한다. 염기로서는 암모니아, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨둥을 사용할 수 있다. 염으로는 염화나트륨, 염화칼륨등을 사용할 수 있다.

추출은 출발물질의 5 내지 200배량의 추출용액(건조량 기준)을 사용하여 통상 4°내지 120℃ 온도에서 20분 내지 20시간 동안 실행한다.

정제처리는 염석, 투석, 한외여과, 역 침투, 겔 여과, 유기용매를 사용한 침전법등 또는 이러한 처리를

결합한 방법과 같은 처리를 적용함으로써 저분자량 물질을 제거하기 위한 것이다. 기술적으로 볼때, 압력하에서의 막 분리법인 한외여과, 역 침투 또는 이들을 결합한 방법중의 하나로 실행하는 것이 바람직하다. 경우에 따라서, 염석후 이러한 처리를 실시할 수도 있다.

염석하는데 사용 가능한 약품은 황산 암모늄, 식염(염화나트륨), 염화칼륨. 탄산바륨둥을 포함하고, 그중에서 황산 암모늄이 바람직하다. 이 염석 처리후, 투석, 한외여과, 겔여과, 역침투 또는 이들을 결합한 방법을 실시하는 것이 필요하다.

투석은 통상 셀로판 또는 콜로디온막과 같은 반투과성 막을 사용하여 실행한다.

겔 여과는 덱스트란 또는 폴리아크릴아미드 겔과 같은 흡착제로 충전된 칼럼을 사용하여 실행한다. 통상 세파텍스(Cephadex), 바이오겔(Biogel)등의 상표명으로 시판되는 충전제를 사용한다.

한외여과 및 역침투는 모두 압력하에서 막을 사용하여 분별해내는 방법이다. 한외여과는 통상 0.5 내지 5kg/㎠ 압력하에서 실행하고 역침투는 통상 20 내지 35kg/㎠ 압력하에서 실행한다.

유기용매를 사용한 침전법은 통상 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 아세톤등을 사용하여 실시한다. 필요에 따라서, 이온 교환 처리를 상기 조작과 결합시킬 수 있다.

정제 처리후, 분무-건조, 동결-건조 또는 기타 방법에 의하여 생성물을 탈수시키고 또 가공처리시켜 상업제품으로 만든다.

본 물질은 물 또는 소량의 유기용매, 산 또는 물에 녹는 염을 함유하는 수용액을 사용하여 추출처리시켜 수득되며, 정제 처리는 수성 알칼리성 용액으로 처리하는 것이 바람직하고, 그 결과 본 물질의 항바이러스 효과가 놀랄만큼 향상된다. 이러한 수성 알칼리성 용액 처리는 예를들어, 40°내지 250℃, 바람직하게는 60°내지 200℃, 보다 바람직하게는 100°내지 l50℃에서, 5분 내지 2시간, 바람직하게는 l0분 내지 1시간동안 출발물질의 5 내지 200배량(건조량기준)의 0.01 내지 5N, 바람직하게는 0.1 내지 2N 알칼리성 용액으로 본 물질을 처리시키는 것에 의하여 완성된다. 이어서, 처리된 용액을 중화시키고 정제 처리시킨다. 정제 처리는 염석, 투석, 한외여과, 역침투, 겔여과, 유기용매를 사용한 침전법 또는 이들을 결합한 방법을 적용함으로써 실행한다. 정제 처리하기 위한 조건은 상술한 바와같다. 이 정제 조작후, 분무-건조, 동결건조 또는 기타 방법에 의하여 생성물을 탈수시킨다.

상술한 방법으로 수득한 본 물질은 (ⅰ) α-나프톨-황산반응, 인돌-황산반응, 안트론-황산반응 또는 페놀-황산반응 처리시 양성(다당류)을 나타내거나, 또는 (ii) α-나프톨-황산반응, 인돌-황산반응, 안트론-황산반응 또는 페놀-황산반응 및 염산가수분해후 로우리 폴린공정 또는 닌히드린 반응처리시 양성(단백질-결합 다당류)을 나타낸다.

본 물질의 원소분석은 20 내지 55% 탄소, 3 내지 9% 수소 및 16% 이하 질소를 나타내었다. pH는 6.0내지 7.5이었다.

본 물질은 그의 당 성분으로는 글루코오스, 글루쿠론산, 크실로오스 및 만노오스로 구성된 군으로 부터 선정된 2종 이상의 당류를 함유하고, 또 그의 단백질 성분으로는 아스파라긴산, 리신, 로이신, 글루탐산 및 글리신으로 구성된 군으로 부터 선정된 3종 이상의 아미노산을 함유한다.

본 물질의 적외선 흡수 스펙트럼은 3600 내지 3200cm^-1영역에서 히드록시기 흡수 (다당류)를 나타내거나, 또는 3600 내지 3200cm^-1영역에서 히드록시기 흡수와 1700 내지 1600cm^-1영역에서 아미드기에 기인한 흡수(단백질-결합 다당류)를 나타낸다.

본 물질은 수성용매에 가용성이고 유기용매에 불용성이다. 상기한 "수성용매"라 함은 물 및 수성 수용성알코올, 산 및 염기를 포함하고, 또 "유기용매"는 클로로포름, 벤젠, 에테르등을 포함한다.

본 물질은 백색, 녹색 또는 갈색 물질이고 또 겔 여과 크로마토그래피에 의하여 측정된 분자량은 10³내지 3×10⁶이다.

본 물질의 급성 독성 시험에서, 4 내지 5주령이고 체중 100 내지 150g인 돈리우주 쥐에게 본 물질을 1000mg/kg의 1회 복용량으로 투여한 경우, 투여후 7일간 관찰 기간이 지나도 쥐 모두는 생존하고 있었다.

본 물질은 독성이 극히 낮으며 해로운 부작용을 거의 일으키지 않아 안전한 물질이다.

일반적으로 바이러스가 표적 세포에 흡착되면 바이러스의 핵산이 세포에 주입되어 또 세포의 게놈(genome)에 통합되며, 이 과정후에 바이러스가 복제된다. 레트로바이러스의 경우, 세포 게놈에 통합되기전에 이 바이러스에서 유래된 핵산인 RNA를 역전사효소에 의하여 DNA로 전사시키는 과정을 필요로 한다.

본 물질은 사람의 임파구상에 HIV(사람의 면역결핍 바이러스)의 흡착과 그에 따른 감염을 억제한다. 본 물질은 또한 역전사효소의 활성을 억제한다. 본 물질의 이들 효과는 실험에 의해 측정된 것이다. 예를들어, 0℃에서 HIV를 50 내지 1000μg/ml 농도의 조류 추출물로 2시간 처리한 다음 세척하고 MT-4 세포에 적용시켜 MT-4 세포를 HIV로 감염시키고 또 3일간 배양한 후, HIV 항원 양성 세포를 세는 방법에 의하여 본 물질의 효과를 조사하였고, 본 물질로써 예비처리하면 사람의 임파구상에 HIV가 흡착하는 것에 대한 본 물질의 강한 억제 활성을 나타내는 HIV 항원 양성 세포 모두의 소멸을 유발한다는 것을 발견하였다. 또한 본 물질의 역전사 효소 활성에 대한 영향은 주형으로서 쥐간에서 수득한 전체 mRAN를 사용하여 조사하였고, 본 물질을 50 내지 1,000μg/ml 첨가함으로써 역전사 효소 활성을 강하게 억제한다는 것을 알았다.

이들 실험 결과는 본 물질이 바이러스 감염, 특히 역전사 효소를 갖는 레트로바이러스에 의한 감염에 대한 억제활성을 가지며, 또 특히 AIDS와 같은 HIV 감염에 의해 유발된 질병에 대하여 효과적이라는 사실을 입증한다.

이미 항바이러스 약제로 사용되고 있는 AZT의 경우, 이것은 정상적인 세포분열에 해로운 부작용을 초래하는 반면, 본 물질은 급성독성이 극히 낮은 안전한 물질이고 또 본 물질이 바이러스 감염, 특히 레트로바이러스 감염에 대하여 억제 활성을 나타내기 때문에 항바이러스제로서 유용하다. 그러므로 본 물질은 바이러스 전염병, 특히 AIDS와 같은 레트로바이러스 전염병 치료용으로 효과적이다.

본 물질을 항바이러스 약물로 사용하는 경우, 어떠한 원하는 형태의 제제로도 제공될 수 있다. 또한 이 약제는 다양한 방법으로 투여될 수 있다. 더우기, 본 물질은 정상적인 약효를 저하시키지 않고도 AZT와 같은 기타 공지된 항바이러스 약제와 결합되어 사용될 수 있다. 이러한 결합물 사용은 사실상 질병을 치료하기 위한 효과적인 방법이다.

본 물질을 경구 투여하는 경우, 본 물질은 정제, 입제, 분말제, 캡슐 형태 또는 그의 조성물내에 결합제, 포함물, 부형제, 윤활제, 붕해제, 습윤제등 약제 제조에 일반적으로 사용되는 보조제 또는 보조제들을 함유할 수 있는 유사 제제형태로 처리된다.

본 물질을 경구 투여용 액체 제제로서 투여하는 경우, 이 제제는 내복용 액체, 진탕 혼합물, 현탁액, 유제, 시럽등의 형태를 취할 수 있다. 사용될때 액체로 변하는 건조 제품의 형태를 취할 수도 있다. 이들 액체 제제는 일반적으로 사용되는 첨가제 및 보존제를 함유할 수 있다. 주사제의 경우, 조성물은 안정화제, 완충제, 보존제, 등장제등과 같은 첨가제를 함유할 수 있고 또 단위 투약 앰풀 또는 다수회 투약 포함제 형태로 제공된다. 이 조성물은 수용액, 현탁액, 용액제, 유성 또는 수성 부형제중의 유제등의 형태를 취할 수 있다. 이러한 제제의 활성성분(본 물질)은 사용될때 발열성 물질이 없는 멸균수와 같은 적당한 부형제중에 재용해되는 분말제 일 수 있다.

본 발명에 따른 항바이러스 약제는 경구적으로 또는 비경구적으로 사람과 동물에게 투여된다. 경구 투여는 설하 적용도 포함한다. 비경구적 투여는 피하주사, 근육내주사 및 정맥주사와 같은 주사법 및 점적법을 포함한다. 본 발명에 따른 항바이러스 약제의 투여량은 투여대상이 사람 또는 동물 인지에 따라 또 연령, 개인차, 질병 상태등과 같은 인자에 따라 다르지만, 보통 대상이 사람인 경우, 본 물질의 경구 투여량은 체중 kg당 1일에 0.1 내지 1,000mg, 바람직하게는 1 내지 100mg이고, 또 물질의 이러한 양은 1회분 내지 3회분으로 주어진다.

본 물질은 급성 독성이 극히 낮고 또 안정성이 높으며, 사람의 임파구상에 HIV가 흡착하는 것에 대한 억제 활성뿐 아니라 역전사 효소의 활성을 억제하는 작용도 가지고 있다. 또한 본 물질은 바이러스 전염병, 특히 AIDS와 같은 레트로바이러스 전염병을 치료하는데 유용한 물질이다.

하기 실시예를 들어 본 발명을 보다 상세하게 설명하지만, 이들 실시예에 의하여 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.

실시예 1

갈조류중에서 코르다리아레스(Chordariales) 목(目)의 스페르마토크나세아애(Spermatochnaceae) 과(科)의 네마시스투스(Nemacystus)속에 속하는 네마시스투스 데시피네스(Nemacystus decipines)건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고 2,000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정하며, 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 21g의 건조 생성물(A)을 수득하였다.

실시예 2

갈조류중에서 라미나리아레스(Laminariales) 목의 라미나리아세아애(Laminariaceae) 과(科)의 크젤마니엘라(Kjellmaniella)속에 속하는 크젤마니엘라 지레이트(Kjellmaniella gyrate) 건조중량 100g을 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 후, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정하며 또 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키켜, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 23g의 건조 생성물(B)을 수득하였다.

실시예 3

갈조류중에서 라미나리아레스(Laminariales)목의 라미나리아세아애(Laminariaceae)과의 라미나리아(Lamnaria)속에 속하는 라미나리아 자포니카(Laminaria Japonica) 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 후, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시키고, 생성한 용액을 실온까지 냉각시키며, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 20g의 건조 생성물(C)을 수득하였다.

실시예 4

갈조류중에서 라미라니아레스(Laminariales)목의 라미나리아세아애(Laminariaceae)과의 운다리아(Undaria)속에 속하는 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida) 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 후, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하고 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 생성한 용액을 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정하며, 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하요ㅕ건조시켜 18g의 건조 생성물(D)을 수득하였다.

실시예 5

갈조류중에서 푸카레스(Fucales)목의 사르가싸세아애(Sargassaceae)과의 히지키아(Hizikia)속에 속하는 히지키아 푸시포르메(Hizikia frsiforme) 건조중량% 100g을 미세 칩으로 파세하고, 3리터들이 스테인레스강탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90° 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간동 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 추출용액을 진공 농축기로써 400ml로 농축시키고 동결건조에 의하여 건조시켜 20g의 건조 생성물 (E-1)을 수득하였다.

실시예 6

실시예 5에서 사용된 것과 둥일한 히지키아 푸시포르메(Hizikia fusiforme)건조중량 100g을 미세 칩으로 파세하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90° 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95°에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N NC1로 pH를 7.0으로 조정하며, 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 25g의 건조 생성물(E-2) 수득하였다.

실시예 7

실시예 5에서 수득된 히지키아 푸시포르메(Hizikia fusiforme) 추출물 20g을 1N NaOH 용액중에 용해시키고 120℃에서 20분동안 열처리 시켰다. 실온까지 냉각시킨 후, 처리된 용액을 2N NCl로 pH 7.0으로 조정하고, 한외 여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결 건조에 의하여 건조시켜 19g의 알칼리 처리된 생성물(E-3)을 수득하였다.

실시예 8

홍조류중에서, 반기아레스(Bangiales) 목의 반기아세아애(Bangiaceae)과의 포르피라 테네라(Porphyratenera)의 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 증류수를 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 후, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하고 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 생성한 용액을 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 감압하에서 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 30g의 건조 생성물(F)을 수득하였다.

실시예 9

홍조류중에서 젤리디아레스(Gellidiales)목의 젤리디아세아애(Gellidiaceae)과에 속하는 젤리디움 아만시(Gelidium amansii) 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 증류수를 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시키고 또 그 추출물을 실온까지 냉각시키며, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 감압하에서 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 25g의 건조 생성물(G)을 수득하였다.

실시예 10

홍조류중에서, 크립토네미아레스(Cryptonemiales)목의 엔도클라디아세아애(Endocladiaceae)과에 속하는 글로이오펠티스 콤프라나테(Gloiopeltis complanate) 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 90 내지 95℃로 유지하면서 2000ml의 증류수를 첨가하였다.

약 3시간 동안 추출한 다음, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 감압하에서 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 27g의 건조 생성물(H)을 수득하였다.

실시예 11

홍조류중에서 지가르티나레스(Gigartinales)목의 그라실라리세아애(Gracilariceae)과의 그라실라리아(Gracilaria)속에 속하는 그라실라리아 레르투고사(Gracilaria rerrucosa) 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 2000ml의 증류수를 첨가하였다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하고 잔유물은 90 내지 95ㄹ에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 감압하에서 농축시키며, 한외여과기에 의하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 23g의 건조 생성물(Ⅰ)을 수득하였다.

실시예 12

홍조류중에서 세라미아레스(Ceramiales)목의 델레쎄리아세아애(Delesseriaceae)과의 헤미네우라(Hemineura)속에 속하는 헤미네우라 쉬미치아나(Hemineura schmitziana) 건조중량 100g을 미세 칩으로 파쇄하고, 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 증류수를 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하고 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시킨 다음 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 감압하에서 농축시키며, 한외여과기에의하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의하여 건조시켜 22g의 건조 생성물(J)을 수득하였다.

실시예 13

클로로코카레스(Chlorococcales)목의 클로렐라세아애(Chlorellaceae)과에 속하는 파쇄된 클로렐라 불가리스(Chlorella vnlgaris) 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 온도를 90° 내지 95℃로 유지하면서 2000ml의 물을 첨가하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시키고, 그 추출물은 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기에 의하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 13g의 건조 생성물(K-1)을 수득하였다.

실시예 14

미세하게 파쇄된 클로렐라 엘리프소이데아(Chlerella ellipsoidea) 분말 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 0.4N NaOH 수용액을 첨가한 다음 용액을 교반하면서 90 내지 95℃로 유지시켰다.약 3시간 동안 추출한 다음, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다. 2N HCl로 추출물을 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리시켰다. 추출용액을 진공 농축기로써 400ml 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 12g의 건조 생성물(K-2)을 수득하였다.

실시예 15

분쇄된 클로렐라 불가리스(Chlorella vulgaris) 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 교반하에서 90 내지 95℃로 유지시켰다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 10g의 건조 생성물(K-3)을 수득하였다.

실시예 16

녹조류중에서 울바레스(Ulvales)목의 울바세아애(Ulvaceae)과에 속하는 파쇄된 울라 페르투사(Ulrapertusa) 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 1000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하였다. 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 1,000ml로 더 추출시키고, 그 추출물을 실온까지 냉각시키고 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔류물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기로써 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 18g의 건조 생성물(L)을 수득하였다.

실시예 17

녹조류중에서 지그네마타레스(Zygnematales)목에 속하는 분쇄된 스피로지라 아크타(Spirogyra arcta) 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 1000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하고 그 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 1,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔류물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기에 의해 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 15g의 건조 생성물(M)을 수득하였다.

실시예 18

녹조류에서 코디아레스(Codiales)목에 속하는 분쇄된 코디움 프라질레(Codium fragile) 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음, 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출물 슬러리를 원심분리하여 추출용액과 잔유물로 분리하고 그 잔유물은 90 내지 95℃에서 3시간 동안 0.4N NaOH 2,000ml로 더 추출시켜 실온까지 냉각시키고, 2N HCl로 pH를 7.0으로 조정한 다음 원심분리시켜 추출용액과 잔유물로 분리하였다.

추출용액을 합쳐서 진공 농축기에 의해 400ml로 농축시키며, 한외여과기를 사용하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 17g의 건조 생성물(N)을 수득하였다.

실시예 19

아세타불라리아 리우키우엔시스(Acetabularia ryukyuensis) 분말 100g을 3리터들이 스테인레스강 탱크에 넣고, 2000ml의 물을 첨가한 다음 온도를 90 내지 95℃로 유지하면서 교반하였다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다. 약 3시간 동안 추출한 다음 생성한 용액을 실온까지 냉각시켰다.

추출용액을 합쳐서 진공농축기로써 400ml로 농축시키고, 한외여과기에 의하여 탈염시킨 다음 동결건조에 의해 건조시켜 19g의 건조 생성물(O)을 수득하였다.

해조류로 부터 추출된 본 물질의 이화학적 특성을 표 1에 나타낸다. 이 표에서, 페놀-황산 발색 반응이 양성이면 당류가 존재함을 의미하고, 또 로우리-폴린 발색 반응이 양성이면 펩티드 결합이 존재함을 의미한다. 분자량의 경우, 본 물질이 풍부한 분획에서의 분자량 분포는 겔 여과법에 의하여 결정하여 표 1에 나타내었다.

실시예 20

레트로바이러스에 특이적으로 포함되어 있는 역전사 효소에 대한 실시예 1 내지 19에서 수득된 본 물질의 억제 효과는 하기 방법에 의하여 측정하였다.

동결 건조된 생성물(A)-(O) 형태인 본 물질 각 10mg을 10ml의 멸균증류수에 용해시켰다(농도 : 1mg/ml).

20mM D. T. T.(디티오트레이톨, 시그마 컴페니 리미티드 제품) 1μl, 5배 농축된 효소 반응 용액(250mM 트리스-HCl(pH 8.3), 250mM KCl 및 40mM MgCl₂포함) 5μl, 3dNTP 용액(1mM dATP, 1mM dGTP 및 1mM dTTP 포함, 시그마 컴페니 리미티드 제품) 1μl, 100μg/ml 올리고머(dt)_12-18(PL 바이오케미컬 컴페니 리미티드 제품) 2μl, mRNA(정상적인 쥐간에서 유도됨 ; 1μg/μl) 1μl, RNase 억제제 (16단위체/μl, 다까라 스조 가부시끼가이샤 제품) 0.5μl 및[α-³²P] dCTP (800Ci/mmol까지, 10μCl/μl, 아메르삼 자팬 컴페니 리미티드 제품) 1μl를 1.5ml 에펜도르프 튜브에 넣고, 이 에펜도르프 튜브를 37℃ 수욕중에 방치하였다.

5분후, 앞서 제조된 본 물질의 용액 각 12.5μl(농도 : 1mg/ml)를 반응튜브에 부가하고, 1μl의 역전사 효소(7단위체/μl, 로우스(Rous) 관련 바이러스로 부터 유도됨, 다까라 스조 가부시끼가이샤 제품)를 더 첨가시켜 반응 용액의 최종 양은 25μl가 되었고 또 이 혼합물을 37℃에서 반응시켰다.

1시간 후, 5μl의 반응 용액을 2cm×2cm의 DEAE 페이퍼 시이트(도요 로시 가부시끼가이샤 제품)에 침투시키고 공기건조시킨 후, 각 시이트를 0.5M Na₂HPO₄수용액과 DNA 합성에 사용되지 않은[α-³²P] dCTP 10ml중에 함침시키고 또 필터 페이퍼상의 잔유물을 진탕하에서 세척해내었다.(이 조작은 5분간격으로 5회 실행하였다).

그후, 상기 각 DEAE 페이퍼 시이트를 10ml의 액체 신틸레이션 칵테일(아메르삼 자팬 컴페니 리미티드의 제품)을 함유하는 유리병(vial)에 넣고 신틸레이션 계수기(아로까 컴페니 리미티드 제품)에 의해 각 시이트의 방사능(c.p.m)을 1분간 측정하였다.

역전사 효소 활성 억제 비율(%)은 하기 식으로 산출하였다:

역전사 효소 활성

Co : 본 물질을 부가하지 않은 경우의 시이트의 방사능

Cs : 본 물질을 부가한 경우의 시이트의 방사능

시험한 본 물질의 역전사 효소(RTase) 활성 억제 비율을 표 1에 나타낸다.

실시예 21

사람의 임파구상에 HIV(AIDS 바이러스)가 흡착하는 것에 대한 본 물질의 억제 활성을 하기 방법에 의하여 측정하였다.(모든 조작은 무균조건하에서 실행하였다).

HIV(사람의 면역결핍 바이러스) 현탁액 1ml와 본 물질의 수용액 1ml(800μg/ml)를 시험관에 넣고 이 시험관을 가만히 얼음안에 방치하였다. 2시간후, 바이러스 현탁액 1ml를 시험관으로 부터 채취하고 바이러스를 사람의 임파구로 부터 유도된 MT-4 세포주상에 감염 중복도(M.O.I) 약 2로 흡착시켰다(Jpn.J.Cancer Res. (Gann), 28,219-229(1982)). 2000rpm에서 10분간 원심분리 한후, 상층액은 제거하고 침전한 MT-4 세포는 20%의 FCS를 함유하는 RPMI 1640(깁코 라보라토리즈, 뉴욕)중에 용해 시켜 세포농도를 2x10⁵세포/ml로 만들었다.

상기 MT-4 세포 현탁액의 100μl 부분을 피펫으로 취해 96-홀 플레이트에 넣고 5% CO₂및 37℃ 조건하에서 배양하였다. 배양 3일째 날에, 간접적인 형광 항체 기술을 사용하여 HIV가 흡착된 세포수와 HIV가 흡착되지 않는 세포수를 계산하였다.

HIV 흡착 억제 비율(%)은 하기 식으로 산출하였다 :

결과를 표 1에 나타낸다.

제조 실시예

압력자동 충전기를 이용하여 실시예 1의 본 물질 330mg을 # 0 경질 캡슐내에 충전시켜 본 물질을 함유하는 캡슐을 제조하였다.

[표 1]

Claims

네마시스투스(Nemacystus), 라미나리아(Laminaria), 운다리아(Undaria), 히지키아(Hizikia), 포르피라(Porphyra), 젤리디움(Gelidium), 글로이오펠티스(Gloiopeltis), 그라실라리아(Gracilaria), 헤미네우라(Hemineura), 울바(Ulva), 스피로지라(Spirogyra), 코디움(Codium) 및 아세타불라리아(Acetabularia)속에 속하는 해조류로 부터 수득될 수 있으며, (a) α-나프톨-황산반응, 인돌-황산반응, 안트론-황산반응 또는 페놀-황산반응 처리시 양성을 나타내고, 염산 가수분해후 로우리-폴린법 또는 닌히드린 반응처리될때 양성을 나타내고 ; (b) 20 내지 55% 탄소, 3 내지 9% 수소 및 16% 이하 질소의 원소 분석치를 가지며 ; (c) pH가 6.0 내지 7.5이고 ; (d) 당 성분으로서는 글루코오스, 글루쿠론산, 크실로오스 및 만노오스로 부터 선정된 2종 이상의 당류를 함유하고 또 단백질 성분으로는 아스파라긴산, 리신, 로이신, 글루탐산 및 글리신으로 부터 선정된 3종 이상의 아미노산을 함유하고, (e) 적외선 흡수 스펙트럼에서, 3600내지 3200cm^-1및 1700 내지 1600cm^-1에서 흡수 피이크를 나타내며 ; (f) 겔 여과 크로마토그래피에 의한 측정시 10³내지 3×10⁶의 분자량을 가지고 ; 또 (g) 물 및 수용성 알코올, 산 또는 염기를 함유하는 수성용매에는 가용성이지만 클로로포름, 벤젠 및 에테르에는 불용성인 특징을 갖는 단백질-결합 다당류.
제1항에 있어서, 해조류가 네마시스투스 데시피네스(Nemacystus decipines), 라미나리아 자포니카(Laminaria japonica), 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida), 히지키아 푸시포르메(Hizikiafusiforme), 포르피라 테네라(Porphyra tenera), 젤리디움 아만시 (Gelidium amansii), 글로이오펠티스 콤프라나테(Gloiopeltis complanate), 그라실라리아 레르루코사(Gracilaria rerrucosa), 헤미네우라 쉬미치아나(Hemineura schmitziana), 울바 페르투사(Ulva pertusa), 스피로지라 아크타(Spirogyria arcta), 코디움 프라질레(Codium fragile) 및 아세타불라리아 리우키우엔시스(Acetabularia ryukyuensis)종(種)에 속하는 해조류인 단백질-결합 다당류.
제1항 또는 제2항에 있어서, 해조류를 수성용매로 추출시키고 또 정제 처리시켜 수득된 단백질-결합 다당류.
제3항에 있어서, 수성용매가 물 또는 수용성 유기용매, 산, 염기 또는 염이 용해된 수용액인 단백질-결합 다당류.
제4항에 있어서`추출이 해조류의 양(건조중량 기준)의 5 내지 200배 양의 추출용액을 사용하여 4 내지 120℃에서 20분 내지 20시간 동안 행하여진 단백질-결합 다당류.
제4항에 있어서, 정제처리가 염석, 투석, 한외여과, 역침투, 겔 여과 및 유기용매를 사용한 침전법으로 부터 선정된 1종 이상의 처리인 단백질-결합 다당류.
네마시스투스(Nemacystus), 라미나리아(Laminaria), 운다리아(Undaria), 히지키아(Hizikia), 포르피라(Porphyra), 젤리디움(Gelidium), 글로이오펠티스(Gloiopeltis), 그라실라리아(Gracilaria), 헤미네우라(Hemineura), 울바(Ulva), 스피로지라(Spirogyra), 코디움(Codium) 및 아세타불라리아(Acetabularia)속에 속하는 해조류로 부터 추출된 유효량의 단백질-결합 다당류를 활성성분으로 함유하는 항 레트로바이러스 약제.
제7항에 있어서, 단백질-결합 다당류가 (a) α-나프톨-황산반응, 인돌-황산반응, 안트론-황산반응 또는 페놀-황산반응 처리시 양성을 나타내고, 염산 가수분해후 로우리-폴린법 또는 닌히드린 반응처리될때 양성을 나타내고 ; (b) 20 내지 55% 탄소, 3 내지 9% 수소 및 16% 이하 질소의 원소 분석치를 가지며 ; (c) pH가 6.0 내지 7.5이고 ; (d) 당 성분으로서는 글루코오스, 글루쿠론산, 크실로오스 및 만노오스로 부터 선정된 2종 이상의 당류를 함유하고 또 단백질 성분으로는 아스파라긴산, 리신, 로이신, 글루탐산 및 글리신으로 부터 선정된 3종의 이상의 아미노산을 함유하고 ; (e)적외선 흡수 스펙트럼에서, 3600 내지 3200cm^-1및 1700 내지 1600cm^-1에서 흡수 피이크를 나타내며 ; (f) 겔 여과 크로마토그래피에 의한 측정시 10³내지 3×10⁶의 분자량을 가지고 ; 또 (g) 물 및 수용성 알코올, 산 또는 염기를 함유하는 수성용매에는 가용성이지만 클로로포름, 벤젠 및 에테르에는 불용성인 특징을 갖는 단백질-결합 다당류인 항 레트로바이러스 약제.
제7항에 있어서, 해조류가 네마시스투스 데시피네스(Nemacystus decipines), 라미나리아 자포니카(Laminaria japonica), 운다리아 핀나티피다(Undaria pinnatifida), 히지키아 푸시포르메(Hizikiafusiforme), 포르피라 테네라(Porphyra tenera), 젤리디움 아만시 (Gelidium amansii), 글로이오펠티스 콤프라나테(Gloiopeltis complanate), 그라실라리아 레르루코사(Gracilaria rerrucosa), 헤미네우라 쉬미치아나(Hemineura schmitziana), 울바 페르투사(Ulva petusa), 스피로지라 아크타(Spirogyra arcta), 코디움 프라질레(Codium fragile) 및 아세타불라리아 리우키우엔시스(Acetabularia ryukyuensis)종(種)에 속하는 해조류인 항 레트로바이러스 약제.
제7항에 있어서, 단백질-결합 다당류가 해조류를 수성용매로 추출시키고 또 정제 처리시켜 수득된 것인 항 레트로바이러스 약제.
제10항에 있어서, 수성용매가 물 또는 수용성 유기용매, 산, 염기 또는 염이 용해된 수용액인 항 레트로바이러스 약제.
제10항에 있어서, 추출이 해조류의 양(건조중량 기준)의 5 내지 200배 양의 추출용액을 사용하여 4내지 120℃에서 20분 내지 20시간 동안 행하여진 항 레트로바이러스 약제.
제10항에 있어서, 정제처리가 염석, 투석, 한외여과, 역침투, 겔 여과 및 유기용매를 사용한 침전법으로 부터 선정된 1종 이상의 처리인 항 레트로바이러스 약제.
제10항에 있어서, 수성용매가 암모니아수, 수산화 나트륨 용액, 수산화칼륨 용액 또는 탄산나트륨 용액인 항 레트로바이러스 약제.
제10항에 있어서, 단백질-결합 다당류가 해조류를 물 또는 수용성 유기용매, 산 또는 염을 갖는 수용액으로 추출시키고 그 추출물을 정제 처리시킨 다음 40 내지 250℃에서, 5분 내지 20시간 동안 정제 물질을 해조류의 5 내지 200배량의 0.01 내지 5N 알칼리성 수용액으로 처리시키고 또 그 결과 얻어진 물질을 정제처리시켜 수득된 것인 항 레트로바이러스 약제.
제1항의 단백질-결합 다당류fmf 활성성분으로 함유하는 항 AIDS 약제.
제4항에 있어서, 수성용매가 암모니아수, 수산화나트륨 dyd액, 수산화칼륨 용액 또는 탄산나트륨 용액인 단백질-결합 다당류.