KR840000254B1

KR840000254B1 - 옥스-이미노-치환된 세팔로스포린의 헤테로싸이클유도체의 제조방법

Info

Publication number: KR840000254B1
Application number: KR1019800001864A
Authority: KR
Inventors: 난니니 줄리아노; 페로네 에또레; 카싸부오나 페루치오; 그라쏘 실비오
Original assignee: 팜 이탈리아 칼로 엘바 에스.피.에이.; 비또리노 페라리오
Priority date: 1980-05-12
Filing date: 1980-05-12
Publication date: 1984-03-08
Also published as: KR830002780A

Abstract

내용 없음.

Description

옥스-이미노-치환된 세팔로스포린의 헤테로싸이클유도체의 제조방법

본 발명은 다음 일반식(Ⅰ)의 신규, 옥스-이미노-치환된 세팔로스포린의 헤테로사이클 유도체의 제조방법에 관한 것이다.

상기식에서, R은 -(CH₂)_n-COOR'그룹(여기에서 n은 0,1 또는 2이며, R'는 수소원자 또는 C₁내지 C₆알킬그룹을 나타낸다), 또는

그룹(여기에서 각각의 R' 및 R"는 같거나 다를수 있으며 수소원자 또는 C₁내지 C₆알킬그룹을 나타낸다)을 나타내며 ; R₁은 수소원자 또는 아미노-보호그룹을 나타내고 ; R₂는 수소원자, 하이드록시-보호그룹, 또는 하이드록시, 시아노, -COOR'(여기에서 R'는 상기 정의한 바와 같다) 및

(여기에서 R' 및 R"는 상기 정의한 바와 같다) 중에서 선택된 치환체에 의해 치환되거나 비치환될 수 있는, 직쇄 또는 측쇄의 포화 또는 불포화 C₁내지 C₆지방족 탄화수소그룹을 나타내며, x는 0,1 또는 2이다.

본 발명은 또한 일반식(Ⅰ) 화합물의 약학적으로 및 수의과적으로 허용되는 염뿐 아니라 신-및 안티-이성체, 시스-및 트란스-이성체 및 광학이성체와 같은 존재가능한 이성체 및 이들의 혼합물, 항균활성을 갖는 대사산물 및 일반식(Ⅰ) 화합물의 대사 전구체를 모두 포함한다.

본 발명의 일반식에서 파선(ξ)은 옥시이미노그룹이 신- 및 안티-배위를 모두 갖는 것을 의미한다.

전술한 바와 같이, 일반식(Ⅰ) 화합물의 신- 및 안티-이성체 각각과 이들의 혼합물이 모두 본 발명의 범주내에 포함된다.

7-위치에서 탄소원자에 연결된 체인(chain)은 언제나 7β-체인이다.

일반식(Ⅰ) 화합물에서, 7β-체인은 다음과 같은 2가지 호변이성체 형태중의 어느 하나 또는 둘다로 존재할 수 있다.

본 발명은 7β-체인이 티아졸린형태(ⅠA)인 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 7β-체인이 티아졸형태(ⅠB)인 화합물 모두 뿐 아니라 이들의 혼합물도 포함한다.

x가 1인 경우에 생성된 화합물은 설폭사이드이며 R 또는 S배위로 존재할 수 있다. x가 2인 경우에 화합물은 설폰이다.

R₁이 아미노-보호그룹이면 이는 예를들어 포르밀, 임의로 할로겐-치환된 C₁내지 C₆지방족 아실, 바람직하게는 클로로아세틸 또는 디클로아세틸, 3급-부톡시카보닐, p-니트로벤질옥시카보닐 또는 트리틸그룹과 같은 펩타이드 화학에서 통상 사용되는 보호그룹중의 하나이다.

R₂가 하이드록시-보호그룹인 경우에, 이는 예를들어 포르밀, 아세틸, 클로로아세틸, 디클로로아세틸, 트리플루오로아세틸, 테트라하이드로피라닐, 트리틸 또는 실릴그룹, 특히 트리메틸실릴 또는 디메틸-3급-부틸실릴일 수 있다.

R₂가 C₁내지 C₆지방족 탄화수소그룹인 경우에, 이는 바람직하게 C₁내지 C₆알킬, 특히 C₁내지 C₃알킬, 또는 C₂또는 C₃알케닐이다.

본 발명의 화합물중 바람직한 그룹은, R이 -NH₂, -NHCH₃, -COOH, -CONH₂또는 -CH₂COOH이며 ; R₁은 수소이고 ; R₂는 수소, 메틸, 에틸, -CH₂COOH 또는

, -CH₂CN, -CH₂-CONH₂또는 -CH=CH-COOH이며 ; x는 0,1 또는 2인 일반식(Ⅰ) 화합물의 신-이성체 및 그의 약학적으로 또는 수의과적으로 허용되는 염이다.

특히 바람직한 본 발명의 화합물은, R이 -NH₂, -COOH 또는 -CH₂COOH이며 ; R₁은 수소이고 ; R₂는 수소, 메틸 또는 에틸이며 ; x는 0인 일반식(Ⅰ) 화합물의 신-이성체 및 그의 약학적으로 또는 수의과적으로 허용되는 염이다.

더욱 특히 바람직한 본 발명의 화합물은, R은 -NH₂또는 -COOH이며 ; R₁은 수소이고 ; R₂는 메틸 또는 에틸이며 ; x는 0인 일반식(Ⅰ) 화합물의 신-이성체 및 그의 약학적으로 또는 수의과적으로 허용되는 염이다.

일반식(Ⅰ) 화합물의 약학적으로 및 수의과적으로 허용되는 염은 염산 및 황산과 같은 무기산 ; 시트르산, 타타르산, 말산, 말레산, 만델산, 푸마르산 및 메탄설폰산과 같은 유기산 ; 알칼리금속, 특히 나트륨 및 칼륨, 알칼리토금속, 특히 칼슘 및 알루미늄 및 알칼리금속 또는 알칼리토금속 카보네이트염(이들 알칼리 및 알칼리토금속염은 하이드록사이드, 카보네이트 또는 비카보네이트와의 반응에 의해 형성될 수 있으며, 알루미늄염은 수산화알루미늄염과의 반응에 의해 형성된다)과 같은 무기염기 ; 또는 유기아민, 특히 리신, 트리에틸아민, 프로카인, 디벤질아민, N-벤질-β-펜에틸아민, (N,N'-디벤질)에틸렌디아민, 데하이드로아비에틸아민, N-에틸피페리딘, 디에탄올아민, N-메틸글루카민, 트리스(하이드록시메틸아미노)메탄 등과 같은 유기염기와의 염을 포함한다. 또한 분자내염(즉, 양성이온)도 본 발명의 범위에 포함된다.

본 발명화합물의 구체적인 예는 다음과 같다 :

(1) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(2) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(3) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-시아노메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(4) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-아미노카보닐메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(5) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-카복시메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(6) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-1(R)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(7) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-1(S)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(8) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(R)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(9) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(S)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(10) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-1-설포닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(11) 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1-설포닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(12) 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(13) 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(14) 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(15) 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(16) 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(17) 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(18) 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-에톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(19) 3-[(8-카복시메틸-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ;

(20) 3-[(8-β-카복시에틸-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노-아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 및 이들의 약학적으로 또는 수의과적으로 허용되는 염.

상기 언급한 일반식(Ⅰ) 화합물의 구조는 다음 표에 나타내었다.

[표]

본 발명의 화합물은

A) 일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 그의 반응성 유도체를 일반식(Ⅲ)의 화합물 또는 일반식(Ⅲ) 화합물의 반응성 유도체와 반응시키고, 원한다면 존재하는 보호그룹을 제거하거나 ; 또는

B) 일반식(Ⅳ)의 화합물 또는 그의 염을 일반식(Ⅴ)의 화합물 또는 일반식(Ⅴ) 화합물의 반응성 유도체와 반응시키고, 원한다면 존재하는 보호그룹을 제거하거나 ; 또는

C) 일반식(Ⅵ)의 화합물 또는 그의 염 또는 에스테르를 티오우레아와 반응시켜 R₁이 수소인 일반식(Ⅰ)화합물을 수득하고, 경우에 따라 R₂에 존재가능한 보호그룹을 제거하며/제거하거나, 원한다면 일반식(Ⅰ)화합물을 그의 염으로 전환시키거나 염으로부터 유리화합물을 수득하고/하거나, 원한다면 이성체 혼합물을 단일이성체로 분리하고/하거나, 경우에 따라 일반식(Ⅰ) 화합물을 일반식(Ⅰ)의 다른 화합물로 전환시킴을 특징으로 하는 공정에 의해 제조할 수 있다.

상기식에서, x, R, R₁및 R₂는 상기 정의한 바와 같으며 ; E는 아미노그룹 또는 일반식 -N=C=Y의 그룹(여기에서 Y는 산소 또는 황이다)을 나타내고 ; Z는 할로겐원자를 나타낸다.

일반식(Ⅱ),(Ⅳ) 및 (Ⅵ) 화합물에 있어서, 유리카복시그룹은 필요한 경우에 반응개시전에 통상적 방법으로 보호할 수 있다. 보호그룹으로는 예를들어 3급-부틸, 벤즈하이드릴, p-메톡시벤질, p-니트로벤질, 트리틸 및 트리알킬실릴과 같이 펩타이드 합성에서 일반적으로 사용되는 그룹들이 있다. 보호그룹은 반응이 끝난 후에 공지된 방법으로, 예를들면 온화한 산가수분해 또는 상압에서 Pd/C를 사용하는 것과 같은 촉매적수소화에 의해 제거할 수 있다. 그러나 상기 보호그룹을 함유하는 일반식(Ⅰ) 화합물도 본 발명에 포함되기 때문에 보호그룹의 제거는 공정의 필수적인 단계는 아니다.

상기 언급된 공정 A) 내지 C) 각각에서 사용된 출발물질에, 하나 이상의 비대칭 탄소원자가 존재하는 경우에는 광학적 활성화합물이거나 라세미화합물일 수 있다. 또한 출발물질은 신-또는 안티-이성체 및 이들의 혼합물일 수 있으며, 또한 시스- 또는 트란스-이성체 및 이들의 혼합물일 수도 있다.

일반식(Ⅱ) 화합물의 반응성 유도체는 예를들어 아민염, 실릴에스테르 또는 금속염일 수 있다. 일반식(Ⅲ)화합물의 반응성 유도체는 예를들어 아실할라이드, 무수물, 혼합무수물, 아지드, 반응성 에스테르 또는 알칼리금속 또는 알칼리토금속, 암모니아 또는 유기염기에 의해 형성된 염과 같은 염이다. 반응성 에스테르는 예를들어 p-니트로페닐에스테르, 2,4-디니트로페닐에스테르, 펜타클로로페닐에스테르, N-하이드록시석신이미드에스테르 및 N-하이드록시프탈리미드에스테르이다.

일반식(Ⅵ)의 화합물에서 Z는 바람직하게 염소 또는 브롬이다.

일반식(Ⅵ) 화합물의 염은 예를들어 화합물 중의 -COOH그룹의 알칼리 또는 알칼리 토금속염이다. 또한 R치환체로 나타낼 수 있는 유리카복시, 카복시메틸 또는 카복시에틸그룹은 유사하게 염을 형성할 수 있다.

일반식(Ⅱ) 화합물 또는 그의 반응성 유도체와 일반식(Ⅲ) 화합물 또는 그의 반응성 유도체 사이의 반응은 아세톤, 디옥산, 테트라하이드로푸란, 아세토니트릴, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, N,N-디메틸포름아미드, 1,2-디클로로에탄과 같은 적합한 용매 또는 물과 혼화할 수 있는 용매와 물과의 혼합물중, 실온 또는 냉각하에서, 바람직하게는 약 -50℃ 내지 약 +40℃에서, 경우에 따라 중탄산나트륨, 중탄산칼륨 또는 트리알킬아민과 같은 염기존재하에 또는 알킬렌옥사이드(예, 프로필렌옥사이드)와 같은 다른 산수용체 존재하에 수행할 수 있다.

일반식(Ⅲ) 화합물을 유리산 또는 염형태의 E가 아미노인 일반식(Ⅱ) 화합물과 반응시키는 경우에 반응은 N,N'-디사이클로헥실카보디이미드와 같은 축합제 존재하에서 수행하는 것이 바람직하다. 반응이 끝난후, 보호그룹은 공지된 방법에 의해 임의로 제거할 수 있다. 예를들어, 3급-부톡시카보닐그룹은 산(예를들어 HCl 또는 H₂SO₄)의 수용액으로 처리하여 제거할 수 있으며, 모노클로로아세틸그룹은 티오우레아로 처리하여 제거할 수 있다. 포르밀과 트리플루오로아세틸그룹은 수성메탄올 중의 중탄산 칼륨으로 처리하여 제거할 수 있으며, 테트라하이드로피라닐그룹은 묽은 염산으로 처리하여 제거하고 트리틸그룹은 포름산 또는 트리플루오로아세트산으로 처리하여 제거할 수 있다.

일반식(Ⅳ) 화합물과 일반식(Ⅴ)의 헤테로사이클릭티올 사이의 반응은 약 2당량의 중탄산 나트륨과 같은 염기존재하에 물 또는 물과 아세톤, 에탄올, 디옥산 또는 테트라하이드로푸란과 같은 유기용매와의 혼합물중에서 수행할 수 있다. 반응온도는 약 5℃ 내지 약 90℃ 범위가 바람직하며, pH는 약 5 내지 약 7.5로 유지시키는 것이 바람직하다. 원한다면, 나트륨포스페이트 또는 아세테이트와 같은 완충액을 사용할 수 있다. 또한 다른 방법으로, 동일반응은 염기부재하, 완전 무수용매 중에서, 약 50℃ 내지 약 120℃의 온도에서 수시간 내지 수일 동안의 반응시간 동안 수행할 수 있다. 바람직한 용매는 아세토니트릴이며, 헤테로사이클릭티올(Ⅴ)의 산화를 방지하기 위해 불활성대기(예. 질소)하에서 반응을 수행하는 것이 이상적일 수 있다. 계속해서 임의로, 상술한 바와 같은 공지의 방법에 의해 보호그룹을 제거할 수 있다.

일반식(Ⅵ) 화합물 또는 그의 염 또는 에스테르와 티오우레아의 반응은 바람직하게 N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 디메틸설폭사이드, 아세토니트릴, 헥사메틸포스포로트리아미드와 같은 비양자성 용매 또는 이들 용매의 혼합물 중에서 수행한다. 반응온도는 약 0℃ 내지 약 90℃ 범위가 바람직하다. 계속해서, R₂로 존재할 수 있는 보호그룹의 임의 제거반응은 상술한 바와 같이 수행할 수 있다.

일반식(Ⅰ) 화합물의 그의 염으로의 임의전환반응 및 염 또는 에스테르로부터 유리화합물의 제조공정 뿐 아니라 이성체 혼합물의 단일이성체의 임의단리공정 및 일반식(Ⅰ) 화합물의 일반식(Ⅰ)의 다른 화합물로의 임의의 전환공정은 공지의 방법에 의해 수행할 수 있다. 그러므로 예를들어 x가 1이고 설폭사이드가 S-배위인 일반식(Ⅰ) 화합물은 x가 0인 상응하는 일반식(Ⅰ) 화합물을 산화제, 특히 퍼벤조산, 퍼말레산, 나트륨퍼요오데이트, 과산화수소 또는 이들의 혼합물과 같은 과산으로 처리하거나, 포름산, 아세트산 또는 트리플루오로아세트산과 같은 무기 또는 유기산으로 처리하여 바람직하게 수득할 수 있다. 반응은 디옥산, 테트라하이드로푸란, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 포름산, 아세트산, 벤젠, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드 등과 같은 용매 중에서 수행할 수 있다. 반응온도는 약 -30℃ 내지 약 +90℃가 바람직하다.

설폭사이드가 R-배위인 화합물을 수득하기 위해서는, 중간체 생성물에 대해, 바람직하게는 E가 아미노인 일반식(Ⅱ)의 화합물에 대해, 우선 이 아미노그룹을 쉬프염기를 형성시켜 보호한 후 동일한 산화반응을 수행하는 것이 바람직하다. 쉬프염기는 공지의 방법에 의해 제조할 수 있는데, 예를들어 일반식(Ⅱ)의 아민을 벤즈알데히드, 살리실알데히드 또는 p-니트로벤즈알데히드와 같은 알데히드로 처리하여 제조하며, 산화반응이 끝난 후 페닐하이드라진, 2,4-디니트로페닐하이드라진과 같은 하이드라진 유도체 또는 그리나드(Grignard)시약으로 처리하여 유리아미노그룹을 생성시킬 수 있다. 카복실그룹은 산화반응중에 상기 언급한 보호그룹 등을 사용하여 보호하는 것이 바람직하다.

설파이드를 설폭사이드로, 즉 x가 0인 일반식(Ⅰ) 화합물을 x가 1인 상응하는 화합물로 전환시키는 공정은 산화되는 화합물 1몰당 산화제 1 내지 1.2몰당량을 사용하여 수행할 수 있다.

설파이드를 설폰으로, 즉 x가 0인 일반식(Ⅰ) 화합물을 x가 2인 상응하는 일반식(Ⅰ) 화합물을 전환시키는 공정은 설폭사이드를 수득하는데 사용된 산화제와 동일한 산화제를, 산화되는 화합물 1몰당 적어도 2몰당량으로 사용하여 수행할 수 있다.

E가 아미노이고 x가 0인 일반식(Ⅱ)의 화합물은 예를들어 7-아미노-세팔로스포란산 또는 그의 염을 문헌에 잘 알려진 반응조건하에서 일반식(Ⅴ)의 화합물과 반응시켜서 제조할 수 있다.

E가 -N=C=Y이고 x는 0인 일반식(Ⅱ)의 화합물은 E가 아미노이고 x는 0인 일반식(Ⅱ) 화합물을 공지의 방법을 사용하여, 염산수용체 존재하에서 포스겐 또는 티오포스겐과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.

일반식(Ⅲ) 화합물은 공지화합물이거나 공지의 방법에 의해 제조할 수 있다.

x가 0인 일반식(Ⅳ)의 화합물은 예를들어, 일반식(Ⅱ)의 화합물과 일반식(Ⅲ) 화합물의 반응에서 상술한 것과 유사한 반응조건을 사용하여, 7-아미노-세팔로스포란산 또는 그의 염을 일반식(Ⅲ)의 화합물 또는 그의 반응성 유도체와 반응시켜 제조할 수 있다.

x가 0인 일반식(Ⅵ)의 화합물은 예를들어, 일반식(Ⅱ) 화합물과 일반식(Ⅲ) 화합물의 반응에서 기술한것과 유사한 반응조건을 사용하여 E가 아미노이고 x는 0인 일반식(Ⅱ) 화합물을 일반식(Ⅶ) 화합물 또는 일반식(Ⅲ) 화합물에 대해 상기 언급된 반응성 유도체 중의 하나와 같은 그의 반응성 유도체와 반응시켜서 제조할 수 있다.

상기식에서 Z는 상기 정의한 바와 같다. 이렇게 하여 수득된 일반식(Ⅷ)의 화합물은 염산 또는 아세트산과 같은 산존재하에서 니트로소화제로 니트로실클로라이드, 또는 아밀나이트라이트, 아질산나트륨 또는 아질산칼륨과 같은 유기 또는 무기아질산염을 사용하여 니트로소화하여 R₂가 수소인 일반식(Ⅵ) 화합물로 전환시킬 수 있다.

니트로소화반응은 디옥산, 아세토니트릴, 테트라하이드로푸란, 아세트산 또는 이들 용매중의 하나와 물의 혼합물과 같은 적합한 용매중 실온 또는 냉각하에서, 바람직하게는 약 -20℃ 내지 약 40℃ 범위의 온도에서 수행할 수 있다. 니트로소화반응 전에 화합물에 존재하는 카복실그룹은 경우에 따라 알칼리금속 수산화물로 처리하여 염형태로 전환시키거나 상술한 보호그룹으로 보호시킬 수 있으며, 그후 보호그룹은 반응이 끝난 다음에 공지의 방법에 의해 제거할 수 있다.

R₂가 수소가 아닌 일반식(Ⅵ)의 화합물은 R₂가 수소인 상응하는 화합물을 출발물질로 하여 통상적인 에테르화 또는 에스테르화반응에 의해 수득할 수 있다.

x가 1 또는 2인 일반식(Ⅱ),(Ⅳ) 및 (Ⅵ) 의 화합물은 일반식(Ⅰ) 화합물에 대한 전환반응에서 상술한 바와 같이 x 가 0인 상응하는 화합물을 산화시킴으로써 수득할 수 있다.

일반식(Ⅲ), (Ⅳ) 및 (Ⅵ)의 출발물질이 신-이성체인 경우에 반응생성물은 신-이성체이며 반대일 수도 있다. 대부분의 경우에 소량의 안티-이성체가 신-이성체와 함께 수득된다. 이성체는 분별결정법 또는 크로마토그라피방법과 같은 공지방법에 의해 분리할 수 있다.

본 발명의 화합물은 동물 또는 인체에 있어서 스타필로코커스(Staphylococcus), 스트렙토코서스(Streptoco-ccus), 디플로코커스(Diplococcus), 클렙시엘라(Klebsiella), 에쉐리키아 콜리(Escherichia coli), 프로테우스 미라빌리스(Proteus mirabilis), 살모넬라(Salmonella), 시겔라(Shigella), 헤모필루스(Haemophilus) 및 나이세리아(Neisseria)와 같이 통상 세팔로스포린에 대해 감수성이 있는 그람-양성 및 그람-음성균에 대해서 뿐 아니라 클렙시엘라 에어로겐스(Klebsiella aerogenes) 1082E, 에쉐리키아 콜리 Tem, 엔테로박터 클로아세(Enterobacter cloacae) P99, 인돌-양성 프로테우스(Proteus) 등과 같은 강력한 베타-락타마제생성 그람-음성미생물에 대해서도 높은 항균활성을 나타내며, 또한 대부분의 세팔로스포린 화합물에 대해 일반적으로 저항성인 슈도모나스 에루기노자(Pseudomonas aeruginosa)균주에 대해서도 항균활성을 갖는다, 그러므로 이들 화합물은 그람-음성균에 의해 야기된 감염증, 예를들면 뇨로감염증 및 호흡기감염증의 치료에 특히 적합하다.

일반적으로 세팔로스포린에 대해 감수성이 세균 및 베타-락타마제 생성균에 대한 본 발명화합물의 활성은 세파졸린 및 세푸록심의 활성에 비해 더 크다. 예를들어, 화합물 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]-피라다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체 : FCE 20127로 명명)은 스트렙토코커스에 대해 세파졸린보다 약 24배 더 활성이 있으며, 대부분의 그람-음성균에 대해서도 세파졸린 및 세푸록심보다 약 30배 더 큰 활성을 나타낸다. 그외에도 화합물 FCE20127은 클렙시엘라 에어로겐스 1082E, 엔테로박터 클로아세 P99 및 에쉐리카아 콜리 Tem.과 같은 몇종의 베타-락타마제 생성균에 대해 세푸록심보다 약 20배 내지 60배 더 큰 활성을 나타낸다. 화합물 FCE20127을 슈도모나스 에루기노자 균주 10개, 프로테우스 불가리스(Proteus vulgaris)균주 4개 및 프로테우스모르가니(Proteus morganii)균주 4개에 대해 시험하여 세파졸린 및 세푸록심보다 수배 더 큰 활성이 있음을 확인하였다.

화합물 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체 : FCE 20485로 명명)은 스트렙토코커스에 대해서 세파졸린에 비해 약 5배 더 활성이 있으며 대부분의 그람-음성균에 대해서는 세파졸린에 비해 약 32배, 세푸록심에 비해서는 약 40배 더 큰 활성을 나타낸다. 엔테로박터 에어로겐스(Enterobater aerogenes) ATCC 8308, 엔테로박터 클로아세 1321E, 살모네라 티피 와트슨(Salmonella typhi Watson) 및 시겔라 존네이(Shigella sonnei) ATCC 11060와 같은 균에 대해서 화합물 FCE 20485는 세파졸린보다는 15 내지 50배, 세푸록심보다는 50 내지 100배 더 큰 활성이 있다.

또한 화합물 FCE 20485는 프로테우스 불가리스 X20 및 프로테우스 미라빌리스 ATCC 9921에 대해서 세파졸린 및 세푸록심에 비해 적어도 100 내지 500배 더 큰 활성을 나타낸다. 화합물 FCE 20485는 또한 슈도모나스 에루기노자 G. 및 박테로이데스 프라질리스(Bacteroides fragilis) VPI 9032에 대해 명백한 시험관내 활성을 나타낸다.

화합물 FCE 20485의 또 다른 중요한 특성은 정맥내 주사 후에 마우스 및 랫트에 있어서 혈장반감기(마우스 : 약 90분, 랫트 : 약 100분)가 매우 길다는 점이며 이와는 달리 세파졸린의 혈장반감기는 각각의 경우에 16분 및 20분이다. 따라서, 화합물 FCE 20485는, 예를들어 에쉐리키아 콜리 G, 클렙시엘라 뉴모니아에(Klebsiella pneumoniae) ATCC 10031, 프로테우스 미라빌리스 ATCC 9921, 에쉐리키아 콜리 Tem., 헤모필루스 인플루엔자에(Haemophilus influenzae), 살모넬라 티피 와트슨 및 프로테우스 불가리스 X20으로 감염된 마우스를 사용한 생체내 시험에서 높은 활성을 나타내며, 세파졸린보다 활성이 20 내지 200배 더크다.

본 발명 화합물의 독성은 거의 없으며 따라서 치료시 안전하게 사용할 수 있다. 예를들어 증가용량을 마우스의 정맥내 투여하여 처리 7일 후에 측정한 화합물 FCE 20127과 FCE 20485의 대략의 급성독성(LD₅₀)은 2000mg/kg 이상이다. 본 발명의 다른 화합물에 대해서도 이와 유사한 활성 및 독성데이타가 측정된다.

그러므로 본 발명의 화합물은 호흡기감염(에. 기관지염, 기관지폐염, 늑막염), 간담도계 및 복부감염(예. 담낭염, 복막염), 혈액 및 심혈관계감염(예. 패혈증), 뇨로감염(예. 신우신염, 방광염), 산부인과감염(예. 자궁경관염, 자궁내막염), 이비인후계감염(예. 이염, 부비강염, 이하선염)과 같은, 그람-양성 또는 그람-음성균에 의해 야기된 감염증의 치료에 유용하다. 본 발명의 화합물은 인체 또는 동물에게 여러가지 용량형으로 투여할 수 있는데, 예를들어 정제, 캅셀제, 적재 또는 시럽제의 형태로 경구투여하거나 ; 좌제의 형태로 직장내 투여하거나 ; 정맥내 또는 근육내(용액 또는 현탁액으로) 투여방식으로 비경구투여(응급상태에는 정맥내 투여가 바람직하다)하거나 ; 분무기를 사용하여 에어로졸 또는 용액의 형태로 흡입시키거나 ; 좌제(bougie)와 같은 형태로 질내투여하거나 ; 또는 로숀제, 크림제 및 연고제의 형태로 국소투여할 수 있다.

본 발명은 본 발명의 화합물과 약학적으로 또는 수의과적으로 허용되는 부형제를 함유하는 약학적 또는 수의과적 조성물을 포함한다. 이러한 조성물은 다른 세팔로스포린 조성물에서 사용된 통상적인 부형제, 일반적으로 담체 및/또는 희석제를 사용하여 통상적 방법으로 제조할 수 있다. 통상적인 담체 또는 희석제는 예를들어 물, 젤라틴, 락토즈, 전분, 마그네슘스테아레이트, 탈크, 식물유, 셀룰로즈 등이 있다. 1일용량은 체중 kg당 약 1 내지 약 100mg이며 여러 종류의 동물에 대한 정확한 용량은 치료받는 대상의 나이, 체중 및 조건 및 투여횟수 및 투여경로에 따라 결정된다. 본 발명화합물의 바람직한 투여방식은 비경구투여이며, 이 경우에 화합물은 근육주사용 멸균수 또는 리도카인 염산염용액 및 정맥주사용 멸균수, 생리적 식염용액, 덱스트로즈용액 또는 통상적인 정맥내 액체 또는 전해질에 용해시켜 성인환자에게 1회 약 100mg 내지 200mg, 바람직하게는 1회 약 150mg씩의 양으로 1일 1 내지 4회 투여할 수 있다.

또한 본 발명의 화합물은, 세척 또는 분무용의 통상적인 불활성 무수 또는 수성담체에 현탁시키거나 용해시켜 혼합한 화합물 약 0.2 내지 1중량% 농도로, 세정과 같은 예방목적에 사용하는 항균제로 또는 표면살균조성물로 사용할 수 있다. 이들 화합물은 또한 동물사료에 영양보충물질로 유용하다.

다음 실시예는 본 발명을 설명하는 것이다. 몇 경우에 화합물은 용매를 함유하는 경향이 있기 때문에 융점의 측정이 다소 곤란하였다.

IR스펙트럼은 고상(KBr)에서 또는 퍼킨-엘머(Perkin-Elmer) 125 분광분석기상 뉴졸(Nujol

) 중에서 측정하며, UV스펙트럼은 pH7.4완충인산염 용액 중에서 측정하거나 바우쉬-롬브(Bausch-Lomb) 장치상 1% NaHCO₃중에서 측정한다. NMR스펙트럼은 내부표준으로 (CH₃)₄Si를 사용하여 DMSO(디메틸설폭사이드) 또는 CDCl₃중에서 최종생성물에 대해서는 브루커(Bruker) HX-90(90MHz)으로, 중간체 생성물에 대해서는 퍼킨-엘머(Perkim-Emer) R-24B(60MHz)로 측정한다.

[실시예 1]

3-[(8-아미노-6-테트라졸로-[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)

2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트산(신-이성체 ; 4.43g ; 0.01몰)과 트리에틸아민(1.41ml ; 0.01몰)을 함유하는 무수메틸렌클로라이드(70ml)의 교반용액을 0℃로 냉각시키고 오염화인(2.08g ; 0.01몰)을 조금씩 가한다. 0℃에서 10분 및 실온에서 1시간 동안 교반한 후에 혼합물을 감압하에 증발시키고 아세톤/벤젠에 늑여 재증발시켜 잔유하는 미량의 옥시염화인을 제거하고 무수아세톤 50ml에 녹인다. 그후 여과하여 트리에틸아민염산염을 제거한다. 이렇게 하여 수득한 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세틸클로라이드의 아세톤 용액을 물과 아세톤의 혼합물(75ml : 50ml) 중의 7-아미노-3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산(3.8g ; 0.01몰), NaHCO₃(0.84g) 및 트리에틸아민(2.82ml)의 격렬히 교반한 빙냉용액에 적가한다. 생성된 슬러리를 0°내지 5℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 실온에서 1.5시간 동안 교반하고 에틸아세테이트(500ml)에 녹여 묽은 염산(50ml)으로 세척한 후, 수성염화나트륨(100ml)으로 세척하고 황산나트륨으로 건조시켜 증발건고시킨다. 잔사를 메틸렌클로라이드(5ml) 중에서 교반한 후, 에틸아세테이트(50ml)와 디에틸에테르(50ml)를 가한다. 침전된 생성물을 모아 따뜻한 메틸렌클로라이드(30ml)에 용해시키고 냉각하여 교반하면서 디에틸 에테르(100ml)로 처리한다. 20분 동안 교반한 후, 백색고체를 여과하여 에테르로 세척하고 건조시켜 백색분말로 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)을 수득한다.

상기 언급한 화합물(2.0g)을 물(13ml) 중의 포름산(13ml)의 교반된 열(55℃) 용액에 조금씩 가한다. 동일온도에서 25분 동안 교반 및 가열을 계속한 후, 냉각된 혼합물로부터 고체를 여과한다. 고체를 99% 포름산(10ml) 중에서 연마한 후, 물(2ml)을 가하고 순수한 트리페닐메탄올을 여과한다.

산성모액을 합하여 증발시켜 잔사를 얻는다. 물과 포름산을 완전히 제거한 후, 무수에탄올로 연마하여 고체를 수득한다(1.225g). 조생성물을 물(70ml)에 현탁시키고 충분량의 NaHCO₃를 가해 용액을 생성시킨다. 용액의 pH는 2N HCl을 가해 2.0으로 낮추고 20분 후에 침전된 생성물을 모아 물로 철저히 세척하여 75℃에서 18시간 동안 건조시킨다. 이렇게 하여 225℃ 이상에서 용융하지 않고 분해하는 표제화합물 1.13g을 수득한다.

원소분석 : C₁₈H₁₇N₁₁O₅S₃

실 측 치 : C 37.90 ; H3.14 ; N26.78 ; S16.83

계 산 치 : C 38.35 ; H3.04 ; N27.33 ; S17.07

I.R.(KBr)[cm^-1] : 3320-3180NH

1760 >C=O(β 락탐), 1520-CONH-(2급 아미드), 1030 =N-O-CH₃

NMR, 100MHz(DMSO-d₆) : [δ, ppm] 3.74(2H, d.d., 2-CH₂)J=17Hz, 3.88(3H, S., -OCH₃), 4.36(2H, d.d., 3-CH₂S)J=13Hz, 5.20(1H,d., 6 -H)J=5Hz, 5.83(1H, d.d., 7-H)J=5Hz+8Hz, 6.41(1H,S., 피리다진환상의 7-H), 6.82(1H, S., 티아졸환상의 5-H), 6.80 내지 7.80(2H, 브로드 S., 티아졸환상의 -NH₂), 8.02(2H, 브로드 S., 피리다진환상의 -NH₂), 9.69(1H, d., -CONH-) J=8Hz

[실시예 2]

실시예 1에 기술한 방법을 사용하여 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트산과 7-아미노-3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)티오메틸]-3-세펨-4-카복실산을 반응시켜 융점 220℃(분해)의 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸-[7-[2-(2-아미노-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)을 수득한다.

원소분석 : C₁₉H₁₇N₁₁O₆S₃

실 측 치 : C38.71 ; H2.96 ; N25.81 ; S16.01

계 산 치 : C38.57 ; H2.89 ; N26.04 ; S16.26

T.L.C.(CHCl₃: MeOH : HCOOH : H₂O=140 : 75 : 20 : 20) : Rf=0.42

I.R.(KBr) <C=O β-락탐

출발물질로 사용된 7-아미노-3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b] 피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산은 다음과 같이 제조한다. : 6-클로로-8-아미노카보닐-테트라졸로[1,5-b]피리다진

15% 아세트산 중의 3-하이드라지노-4-아미노카보닐-6-클로로-피리다진(4.2g ; 0.0244몰)[문헌 J.Het. Chemistry, 7, 465(1970)에 기술된 방법으로 제조]의 빙냉용액에 물(10ml) 중의 아질산나트륨(1.55g)의 용액을 적가한다. 5 내지 10℃에서 1시간 동안 교반한 후, 분리된 침전을 여과하고 물로 결정화시켜 다시 여과하고 진공하에 50℃에서 건조시켜 융점 226℃(분해)의 표제화합물 3.44g(77.5%)을 수득한다.

원소분석 : C₅H₃ClN₆O

실 측 치 : C30.11 ; H1.44 ; N42.00 ; Cl17.69

계 산 치 : C30.24 ; H1.52 ; N42.32 ; Cl17.85

6-머캅토-8-아미노카보닐-테트라졸로[1,5-b]피리다진

물 150ml 중의 NaSH·H₂O(10g ; 0.135몰)의 교반용액에 6-클로로-8-아미노카보닐-테트라졸로[1,5-b]-피리다진(10g ; 0.05몰)을 가하고 혼합물을 90분 동안 격렬히 교반한다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응혼합물을 23% HCl을 사용하여 산성화시킨다. 0℃에서 1시간 동안 냉각시킨 후, 고체를 모아 소량의 냉수로 세척하여 융점 185 내지 187℃(분해)의 표제화합물을 정량적 수율로 수득한다.

I.R.(뉴졸) : -SH 2480cm^-1, >C=O 1675cm^-1

T.L.C.(CHCl₃: CH₃OH : HCOOH=160 : 70 : 30) : 순수한 생성물

U.V.(pH7.4의 인산염 완충액) : λ_max=262 ;

원소분석 : C₅H₄N₆OS

실 측 치 : C30.65 ; H2.00 ; N42.53 ; S16.16

계 산 치 : C30.60 ; H2.05 ; N42.84 ; S16.34

7-아미노-3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산

인산염완충액(pH6.4) 90ml 중의 6-머캅토-8-아미노카보닐-테트라졸로-[1,5-b]피리다진(2g ; 0.010몰)과 중탄산나트륨 2.8g의 열(50 내지 55℃)용액에 7-ACA(4.6g ; 0.017몰)를 조금씩 가하고 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 가열한다. 10℃에서 냉각시킨 후, 침전된 7-아미노-3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산을 여과하여 모은다. 고체를 Me₂CO : H₂O(1 : 2)150ml에 현탁시키고 30분 동안 교반하여 재여과한다. 침전을 모아 Me₂CO로 세척하고 진공하, 60℃에서 건조시켜 융점 228 내지 230℃(분해)의 표제화합물(80%)을 수득한다.

원소분석 : C₁₃H₁₂N₈O₄S₂

실 측 치 C37.93 ; H2.93 ; N27.13 ; S15.45

계 산 치 C38.22 ; H2.96 ; N27.43 ; S15.70

I.R.(뉴졸) : >C=O β-락탐 1780cm^-1

U.V.(1% NaHCO₃) : λ_max=249 ; λ_max=332

[실시예 3]

동일한 방법을 사용하여 다음 화합물들을 수득한다.

3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(R)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(S)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체).

[실시예 4]

3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체).

2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트산(신-이성체 ; 11.35g ; 0.0256몰)과 트리에틸아민(3.61ml ; 0.0256몰)을 함유하는 무수메틸렌클로라이드(200ml)의 교반용액을 0℃로 냉각시키고 오염화인(5.6g ; 0.027몰)을 조금씩 가한다. 0℃에서 15분간 및 실온에서 1시간 동안 교반한 후에, 혼합물을 감압하에 증발시키고 무수벤젠에 녹여 재증발시켜 미량의 옥시염화인을 제거한다. 이러한 처리조작을 2회(2×50ml)반복한다. 잔사를 무수아세톤 50ml에 현탁시킨 후, 트리에틸아민염산염을 여과하여 제거한다. 이렇게 하여 수득한 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세틸클로라이드의 아세톤용액을 물과 아세톤의 혼합물(500ml : 250ml) 중의 7-아미노-3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산(10g ; 0.0232몰)과 NaHCO₃(15g)의 격렬히 교반한 빙냉용액에 적가한다. 혼합물을 30분 동안 0내지 5℃에서 교반한 후, 실온에서 90분 동안 교반하고 미용해물질을 여과제거하여 진공하에 증발시켜 아세톤을 제거한다. 수성상을 8% HCl을 가해 pH2로 조정하고 에틸아세테이트(3×400ml)로 추출하여 수성염화나트륨으로 세척하고 건조(Na₂SO₄)시켜 증발건고시킨다. 잔사를 디에틸에테르와 함께 교반하고, 20분 동안 교반한 후에 백색고체를 여과하여 에테르로 세척하고 건조시켜 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산을 수득한다. 상기 생성된 화합물을 50% 포름산(140ml)의 교반된 열(55℃)용액에 조금씩 가한다. 동일온도에서 30분 동안 교반 및 가열을 계속한 후, 냉각된 혼합물로부터 고체를 여과한다. 여액을 진공중에서 증발건고시켜 잔사를 얻는다. 물과 포름산을 완전히 제거한 후, 에테르로 연마하여 고체를 수득한다. 조생성물을 50% 에탄올로 결정화하여 225℃에서 분해하는 표제화합물 9.1g(60%)을 수득한다.

원소분석 : C₁₉H₁₆N₁₀S₃O₇

실 측 치 C38.10 ; H2.91 ; N23.34 ; S15.93

계 산 치 C38.50 ; H2.72 ; N23.63 ; S16.23

T.L.C.(CHCl₃: MeOH : HCOOH : H₂O=140 : 75 : 20 : 20) : Rf=0.25

I.R.(KBr)ν 3500-2300cm^-1결합된 -COOH, ν1765cm^-1>C=O β-락탐, ν1710cm^-1C=O 산, 1650cm^-12급마이드, 1620-1580cm^-1{(C=N)옥심, ν(C-N)+δ(N-H)}, 1540cm^-1ν(C-N)+δ(N-H) 아미드 N.M.R., 100MHz(DMSO-d₆) : δp.p.m. 3.68(1H, d, 2-CH₂) ; 3.86(1H, d, 2-CH₂) ; 3.92(3H, S,=N-OCH₃) ; 4.36(1H, d. 3-CH₂-S) ; 4.69(1H, d, 3-CH₂-S) ; 5.21(1H, d, 6-H) ; 5.85(1H, d-d,7-H) ; 6.83(1H, S, 티아졸환상의 5-H) ; 7.30(2H, br-s, 티아졸환상의 -NH₂) ; 8.02(1H, S, 피리다진환상의 7-H) ; 9.83(1H, d, -CONH).

출발물질로 사용된 7-아미노-3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산은 다음과 같이 제조한다 : 3-하이드라지노-4-카복시-6-클로로-피리다진

50% 에탄올 200ml 중의 3,6-디클로로-4-카복시-피리다진(20g ; 0.103몰)과 98% 하이드라진하이드레이트 22ml의 혼합물을 교반하면서 1시간 동안 환류시킨다. 5℃로 냉각시킨 후, 고체침전물을 모아 무수에탄올 20ml로 세척한다. 고체를 물 100ml에 현탁시키고 혼합물을 23% HCl로 pH1 내지 2로 조정하여 5℃로 냉각시킨 후, 고체를 여과하고 진공중, 80℃에서 건조시켜 융점 198 내지 201℃의 표제화합물 18.29g(93.4%)을 수득한다.

원소분석 : C₅H₅ClN₄O₂

실 측 치 C31.64 ; H2.64 ; N29.32 ; Cl18.53

계 산 치 C31.84 ; H2.67 ; N29.71 : Cl18.80

N.M.R.(DMSO-d₆) : 7.8(1H, s, 피리다진환상의 5-H), 9.2(4H, br-s, -COOH, -NHNH₂)

6-클로로-8-카복시-테트라졸로[1,5-b]피리다진

15% 아세트산 중의 3-하이드라지노-4-카복시-6-클로로-피리다진(1.88g ; 0.01몰)의 빙냉현탁액에 물(5ml) 중의 아질산나트륨(0.70g)용액을 적가한다. 5 내지 10℃에서 1시간 동안 교반한 후, 분리된 침전을 여과하여 무수에탄올로 세척한다. 고체를 2N HCl 중에 현탁시키고 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 고체를 여과하고 냉수로 세척하여 진공중, 70℃에서 건조시켜 융점 225℃의 표제화합물 1.73g(87%)을 수득한다.

원소분석 : C₅H₂ClN₅O₂

실 측 치 C29.95 ; H0.98 ; N35.15 ; Cl17.58

계 산 치 C30.09 ; H1.00 ; N35.09 ; Cl17.76

I.R.(뉴졸) : <C=O 1730cm^-1

N.M.R.(DMSO-d₆) : 8.33(1H, S, 피리다진환상의 7-H)

6-머캅토-8-카복시-테트라졸로[1,5-b]피리다진

물 150ml 중의 NaSH·H₂O(10g ; 0.135몰)의 교반용액에 6-클로로-8-카복시-테트라졸로[1,5-b]피리다진(10g ; 0.05몰)을 가하고 혼합물을 2시간 동안 격렬히 교반한다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응혼합물을 23% HCl로 산성화한다. 0℃에서 1시간 동안 냉각시킨 후, 생성된 고체를 모아 소량의 냉수로 세척하여 융점210℃(분해)의 표제화합물 9g(91.5%)을 수득한다.

원소분석 : C₅H₃N₅O₂S

실 측 치 : C30.41 ; H1.52 ; N35.61 ; S16.19

계 산 치 : C30.45 ; H1.53 ; N35.52 ; S16.26

I.R.(KBr) : (S-H) 2540cm^-1, >C=O 1725cm^-1

U.V.(pH7.4의 인산염완충액) : λ_max=258,

7-아미노-3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산

인산염완충액(pH6.4) 265ml중의 6-머캅토-8-카복시-테트라졸[1,5-b]-피리다진(8.2g ; 0.0415몰)과 중탄산나트륨 11.6g의 열용액(40℃)에 7-ACA(18.5g ; 0.068몰)를 조금씩 가하고 혼합물을 교반하면서 60℃에서 5시간 동안 가열한다. 20℃로 냉각시킨 후, 미용해물질을 여과하고 용액을 23% HCl를 가해 pH4.4로 조정한다. 침전을 여과하여 Me₂CO : H₂O(3 : 1)의 혼합물로 세척한 후, Me₂CO로 세척하여 융점 >270℃(분해)의 표제화합물의 나트륨염(75%)을 수득한다.

원소분석 : C₁₃H₁₀N₇O₅S₂Na

실 측 치 : C35.80 ; H2.66; N22.43 ; S14.66 ; Na5.10

계 산 치 : C36.19 ; H2.33 ; H22.72 ; S14.86 ; Na5.32

I.R.(뉴졸) : >C=O β-락탐 1770cm^-1

U.V.(1% NaHCO₃) : λ_max=246 ;

나트륨염을 물에 현탁시키고 8% HCl로 산성화하여 생성된 고체를 여과하고 물로 세척하여 융점 245℃(분해)의 표제화합물을 수득한다.

원소분석 : C₁₃H₁₁N₇O₅S₂

실 측 치 : C38.45 ; H2.90 ; N23.55 ; S15.10

계 산 치 : C38.13 ; H2.70 ; N23.94 ; S15.66

[실시예 5]

3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)

무수메틸렌클로라이드(13ml) 중의 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노-아세트산(3.675g ; 0.0828몰)의 냉(0°내지 5℃)용액에 N,N'-디사이클로헥실카보디이미드(0.9g ; 0.00438몰)를 가하여 5℃에서 40분간 및 실온에서 30분간 교반한 후, 생성된 슬러리를 무수메틸렌클로라이드로 희석한다. 분리된 고체, 즉 디사이클로헥실우레아(0.98g ; 정량적수율)를 여과하여 새로운 메틸렌클로라이드로 세척한다. 메틸렌클로라이드용액을 합하여 증발건고시키고 이렇게하여 생성된 출발산의 대칭무수물을 즉시 무수아세톤(30cc)에 녹인다. 상기 수득된 용액을 1 : 1 수성아세톤(120ml) 중의 7-아미노-3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산(1.65g ; 0.00436몰), 트리에틸아민(1.22ml ; 0.00872몰) 및 NaHCO₃(0.347g ; 0.00414몰)의 빙욕중에서 냉각된 용액에 교반하면서 적가한다. 0°내지 5℃에서 1시간 동안 교반한 후, 빙욕을 치우고 추가로 2시간 후에 혼합물을 에틸아세테이트(500ml)에 녹이고 수성1N HCl(100ml)와 진탕한다. 불용성물질(소량의 미반응 7-아미노-세펨)을 여과제거하고 유기층을 염화나트륨수용액으로 세척하여 Na₂SO₄로 건조시키고 여과하여 증발시킨다. 조반응혼합물 중에 함유된 출발 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트산의 대부분은 디사이클로헥실아민(1.4ml)을 서서히 가하여 디옥산용액(30ml)으로부터 침전시킨다. 12℃에서 20분 후에 생성된 디사이클로헥실아민염을 여과하고 용액은 에틸아세테이트(200ml)로 희석하여 1N HCl로 산성화시키고 수층은 버린다. 유기상을 염화나트륨수용액으로 세척하고 Na₂SO₄상에서 건조시켜 농축하여 용적을 감소시키고 이것을 디에틸에테르에 가하여 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시-이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) 3.1g을 수득한다. 생성물을 실시예1에서 기술한 바와 같이 50% 수성포름산으로 처리하여 실시예 1에서 제조한 생성물과 동일한 T.L.C., I.R. 및 N.M.R. 데이타를 나타내는 표제화합물을 수득한다.

동일한 방법을 사용하여, 다음 화합물들을 제조한다 : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-시아노-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-아미노카보닐메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-카복시메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시-이미노아세트아미도]-1(R)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(S)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1-설포닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체).

[실시예 6]

3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)

무수메틸렌클로라이드(13ml) 중의 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트산(3.675g ; 0.0828몰)의 냉(0°내지 5℃)용액에 N,N'-디사이클로헥실카보디이미드(0.9g ; 0.00438몰)를 가하여 5℃에서 40분간 및 실온에서 30분간 교반한 후에 생성된 슬러리를 무수메틸렌클로라이드로 희석한다. 분리된 고체, 즉 디사이클로헥실우레아(0.98g ; 정량적 수율)를 여과하여 새로운 메틸렌클로라이드로 세척한다. 메틸렌클로라이드용액을 합하여 증발건조시키고 이렇게 하여 생성된 출발산의 대칭무수물을 즉시 무수아세톤(30cc)에 녹인다. 상기 수득된 용액을 1 : 1 수성아세톤(120ml) 중의 7-아미노-3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산(1.78g ; 0.00436몰), 트리에틸아민(1.22ml ; 0.00872몰) 및 NaHCO₃(0.347g ; 0.00414몰)의 빙욕중에서 냉각된 용액에 교반하면서 적가한다. 0°내지 5℃에서 1시간 동안 교반한 후, 빙욕을 치우고 추가로 2시간 후에 혼합물을 에틸아세테이트(500ml)에 녹이고 수성 1N HCl(100ml)와 진탕한다. 불용성물질(소량의 미반응 7-아미노-세펨)을 여과제거하고 유기층을 염화나트륨수용액으로 세척하여 Na₂SO₄로 건조시키고 여과하여 증발시킨다. 조반응혼합물 중에 함유된 출발 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트산의 대부분은 디사이클로헥실아민(1.4ml)을 서서히 가하여 디옥산용액(30ml)으로부터 침전시킨다. 12℃에서 20분 후에, 생성된 디사이클로헥실아민 염을 여과하고 용액은 에틸아세테이트(200ml)로 희석하여 1N HCl로 산성화시키고 수층은 버린다. 유기상을 염화나트륨수용액으로 세척하고 NaSO₄상에서 건조시켜 농축하여 용적을 감소시키고 이것을 디에틸에테르에 가하여 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b│피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) 3.3g을 수득한다. 생성물을 실시예 4에서 기술한 바와 같이 50% 수성포름산으로 처리하여 실시예 4에서 제조한 생성물과 동일한 T.L.C., I.R. 및 N.M.R. 데이타를 나타내는 표제화합물을 수득한다.

[실시예 7]

3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)

-5℃로 냉각된 무수메틸렌클로라이드 중의 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-트리틸옥시이미노아세트산(2.25g ; 0.00335몰)과 트리에틸아민(0.47ml ; 0.00335몰)의 용액에 오염화인(0.697g ; 0.00335몰)을 한꺼번에 가한다. -5℃에서 20분 및 실온에서 1시간 동안 교반 후에, 반응혼합물을 모두 POCl₃가 제거될때까지 외부 가열없이 감압하에 증발시킨다. 잔사를 무수아세톤(50ml)에 녹여 트리에틸아민염산염을 여과제거한다. 이렇게하여 수득한 2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-트리틸옥시이미노아세틸클로라이드의 아세톤용액을 0℃로 냉각, 물(35ml)와 아세톤(25ml) 중에 7-아미노-3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산(0.76g ; 0.002몰), 트리에틸아민(0.562ml ; 0.004몰 및 NaHCO₃(0.281g ; 0.00335몰)를 함유하는 용액에 적가한다.

첨가 후에, 슬러리를 0℃에서 30분 동안 및 25℃에서 90분 동안 교반한다. 반응혼합물을 격렬히 교반하면서 에틸아세테이트(350ml)에 붓고 물(50ml)을 가한 후, 충분량의 2N HCl을 가하여 수성상의 pH를 2조로 조정한다. 유기상을 분리하여 염화나트륨수용액으로 세척하고 Na₂SO₄로 건조시켜 증발건고시킨다. 생성된 포움상 물질을 디에틸에테르로 연마하여 상당량의 출발산을 함유하는 조생성물 1.98g을 수득한다. 이러한 불순물의 대부분은, 조물질을 디옥산(10ml)에 용해시키고 생성된 용액을 디에틸에테르(70ml)에 적가하여 제거한다. 10분 동안 교반한 후에 백색침전을 여과하여 모아 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-트리릴옥시-이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)(1.02g)을 수득한다.

상기 제조된 화합물(1g)을 55℃(유욕)로 유지시킨 50% 포름산수용액(40ml)에 교반하면서 가한다. 35분후, 혼합물을 25℃로 냉각시키고 흡입여과하여 고체를 새로운 50% 포름산(20ml)으로 세척한 다음, 증류수로 세척하고 버린다. 산성용액을 합하여 감압하에서 증발시킨다. 잔사률 99% 에탄올에 녹여 다시 증발시키고 99% 에탄올에 녹여 소용적(5ml)이 되도록 증발시키고 여과한다. 생성된 베이지색 분말을 2% NaHCO₃수용액(20ml)에 용해시키고 목탄을 가한다. 여과한 용액을 2N HCl을 가해 pH2로 조정하고 5분 동안 교반한다. 여과하여 침전을 모으고 물로 완전히 세척한 후, 소량의 에탄올로 세척하고 65℃에서 16시간 동안 건조시켜 약 205℃에서 용융하지 않고 분해하는 회백색분말상의 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) 0.25g을 수득한다.

원소분석 : C₁₇H₁₅N₁₁O₅S₃

실 측 치 : C36.81 ; H2.88 ; N27.73 ; S16.92

계 산 치 : C37.15 ; H2.75 ; N28.03 ; S17.20

I.R.(KBr) [cm^-1] : 3400 -NH, 3000 -OH, 1760 >C=O(β락탐)

NMR, 100MHz(DMSO-d₆)

[δ, p.p.m.] : 3.61(1H, d., 2-CH₂) ; 3.89(1H, d., 2-CH₂) J

17Hz ; 4.16(1H, d., 3-CH₂S) ; 4.60(1H, d, 3-CH₂S) J

13Hz ; 5.21(1H, d., 6-H) ; 5.86(1H, d,d., 7-H) ; 6.42(1H, s., 피리다진환상의 7-H) ; 6.76(1H, s., 티아졸환상의 5-H) ; 7.20(2H, 브로드 s., 티아졸환상의 -NH₂) ; 8.02(2H, 브로드 s., 피리다진환상의 -NH₂) ; 9.56(1H, d., -CONH-) ; 11.66(1H, 브로드 s.,=N-OH)

동일한 방법을 사용하여 전술한 표의 화합물 (6), (7), (10), (12), (14) 및 (16)을 제조한다.

[실시예 8]

3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)

물(10ml) 중의 3-아세톡시메틸-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)(0.456g ; 0.001몰)과 NaHCO₃(0.143g ; 0.0017몰)의 교반용액에 8-아미노-6-머캅토-테트라졸로[1,5-b]피리다진(0.118g ; 0.0007몰)을 가한다. 저속의 질소류를 용액에 통과시키고 혼합물을 pH6.8을 유지하면서 50℃에서 12시간 동안 가열한다. 냉각시킨 후, 용액을 10% HCl로 산성화하고 침전을 여과하여 모아 물로 세척한 다음 에탄올로 세척한다. 이렇게 하여 실시예 1에서 기술한 생성물과 동일한 NMR, TLC 및 IR 데이타를 나타내는 화합물(2) 0.215g과 소량의 불순물인 안티-이성체를 수득한다. 동일한 방법을 사용하여, 다음 화합물들을 제조한다 : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(R)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1(S)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-1-설포닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-에톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-카복시메틸-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-β-카복시에틸-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체).

[실시예 9]

무수아세토니트릴(50ml) 중의 3-아세톡시-메틸-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(0.697g ; 0.001몰)의 교반용액에 8-아미노-6-머캅토-테트라졸로[1,5-b] 피리다진(0.336g ; 0.002몰)을 가하고 생성된 슬러리를 저속질소류하에서 24시간 동안 환류시킨다. 추가량의 머캅토화합물(0.168g ; 0.001몰)을 가하고 환류온도에서 추가로 16시간 동안 교반한 후에, 혼합물을 냉각시켜 미용해물질(미반응머캅토화합물)을 여과제거하고 아세토니트릴 용액을 증발건고시켜 생성된 포움상 물질을 따뜻한 메틸렌클로라이드(5ml)에 녹이고 디에틸에테르(25ml)를 가한다. 생성된 백색침전을 여과하여 모으고 소량의 에틸아세테이트로 세척한 후, 디에틸에테르로 세척하여 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노-아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) 0.650g을 수득한다. 생성물을 실시예 1에서 기술한 바와같이 50% 수성포름산으로 처리하여 실시예 1에서 제조한 생성물과 동일한 TLC, IR 및 NMR 데이타를 나타내는 표제생성물을 수득한다.

동일한 방법을 사용하여 다음 화합물들을 제조한다 : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-에톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-카복시메틸-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-β-카복시에틸-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체).

[실시예 10]

물(10ml) 중의 3-아세톡시메틸 7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)(0.456g ; 0.001몰)과 NaHCO₃(0.143g ; 0.0017몰)의 교반용액에 8-카복시-6-머캅토-테트라졸로[1,5-b]피리다진(0.138g ; 0.0007몰)을 가한다. 저속의 질소류를 용액에 통과시키고 혼합물을 pH6.8을 유지하면서 50℃에서 12시간 동안 가열한다. 냉각시킨 후, 용액을 10% HCl로 산성화하고 침전을 여과하여 모아 물로 세척한 다음 에탄을로 세척한다. 이렇게하여 실시예 4에서 기술한 생성물과 동일한 NMR, TLC 및 IR 데이타를 나타내는 표제화합물 0.245g과 소량의 불순물인 안티-이성체를 수득한다.

[실시예 11]

무수아세토니트릴(50ml) 중의 3-아세톡시메틸-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시-이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(0.697g ; 0.001몰)의 교반용액에 8-카복시-6-머캅토-테트라졸로[1,5-b]피리다진(0.394g ; 0.002몰)을 가하고 생성된 슬러리를 저속질소류하에서 24시간 동안 환류시킨다. 추가량의 머캅토 화합물(0.168g ; 0.001몰)을 가하고 환류온도에서 추가로 16시간 동안 교반한 후에, 혼합물을 냉각시켜 미용해물질(미반응 머캅토화합물)을 여과제거하고 아세토니트릴 용액을 증발건고시켜 생성된 포움상물질을 따뜻한 머틸렌클로라이드(5ml)에 녹이고 디에틸에테르(25ml)를 가한다. 생성된 백색 침전을 여과하여 모으고 소량의 에틸아세테이트로 세척한후, 디에틸에테르로 세척하여 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-트리틸아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노-아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) 0.730g을 수득한다. 생성물을 실시예 4에서 기술한 바와 같이 50% 수성포름산으로 처리하여 실시예 4에서 제조한 생성물과 동일한 TLC, IR 및 NMR 데이타를 나타내는 표제생성물을 수득한다.

[실시예 12]

단계 A : 4-클로로아세토아세트산

에틸 4-클로로아세토아세테이트(30g ; 0.182몰)를 37% 수성 HCl(200ml)과 실온에서 15시간 동안 교반한후, 반응혼합물을 얼음/물에 붓고 에틸아세테이트로 추출하여 Na₂SO₄상에서 건조시키고 외부가열없이 증발건고시켜 4-클로로아세토아세트산 17.4g(수율 70%)을 수득한다. 조생성물은 더 정제하지 않고 다음 단계에서 사용한다.

N.M.R. 60MHz(CDCl₃) : 3.71(2H, s., COCH₂COOH) ; 4.20(2H, s., ClCH₂CO) ; 9.98(1H, 브로드 s., COOH)

단계 B : 4-클로로아세토아세틸클로라이드

무수벤젠 중의 4-클로로아세토아세트산(2.4g ; 0.017몰)의 용액에 옥살릴 클로라이드(1.71ml ; 0.02몰)를 가한 후, N,N-디메틸포름아미드 1적을 가한다. 25℃에서 15시간 동안 교반한 후, 용액을 증발건고시키고 무수벤젠에 녹여 다시 증발시켜 다음 아실화단계(단계 C)에서 사용하는 흑색 오일상생성물 2.7g을 수득한다. 또한 다른 방법으로, 4-클로로아세토아세틸클로라이드는 문헌[Helv. Chim. Acta. 60, 1256(1977)]에 기술된 방법에 따라 메틸렌클로라이드와 같은 적합한 불활성 용매에 용해된 디케텐을 염소와 반응시켜 제조할수 있다.

단계 C : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[4-클로로-3-옥소부티르아미도)-3-세펨-4-카복실산

7-아미노-3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-3-세펨-4-카복실산(3.8g ; 0.01몰)을 무수 N,N-디메틸포름아미드(50ml)에 현탁시키고 N,O-비스-(트리메틸실릴)-아세트아미드(8.13g ; 0.04몰)를 가한다. 실온에서 2시간 동안 교반 후에 거의 모든 출발물질이 용해된다. 냉각된(-30℃) 혼합물에 무수메틸렌클로라이드(20CC) 중의 4-클로로아세토아세틸클로라이드(2.35g ; 약 0.015몰)의 용액을 적가한다. 혼합물을 -30℃에서 2시간 동안 교반하고 추가로 1시간에 걸쳐 실온으로 상승시킨 후, 이소프로판올(40ml)을 가하여 실릴화 화합물을 분해한다. 용매를 감압하에서 증발시키고 오일상잔사를 물과 에틸아세테이트 사이에 분배시킨다. 유기층을 분리하여 염화나트륨수용액으로 세척하고 감압하에서 농축하여 용적을 감소시킨 후, 디에틸에테르를 가하여 침전의 형성을 완결시킨다. 침전된 고체를 여과하여 모으고 새로운 에테르로 세척하여 진공중에서 건조시켜 더 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하는 표제화합물 4.6g을 수득한다.

N.M.R. 60MHz(DMSO-d₆)

[δ, p.p.m.] : 3.6-3,7(4H, s+d, d., 2-CH₂+COCH₂CO) ; 4.35(2H, d.d., 3-CH₂S) ; 4.57(2H, s., Cl-CH₂CO) ; 5.08(1H, d., 6-H) ; 5.69(1H, d.d., 7-H) ; 6.3(1H, S., 피리다진환상의 7-H) ; 7.95(2H, 브로드 S., 피리다진환상의 -NH₂) ; 9.02(1H, s., CONH)

단계 D : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-(4-클로로-2-하이드록시이미노-3-옥소부티르아미도)-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)

아세트산(60ml) 중의 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-(4-클로로-3-옥소부티르아미도)-3-세펨-4-카복실산(6.72g ; 0.0171몰)의 교반용액에 5°내지 10℃에서 물(6ml) 중의 아질산나트륨(1.65g ; 0.0239몰)의 용액을 가한다. 실온에서 3.5시간 동안 교반한 후에, 반응혼합물을 염수로 처리하고 에틸아세테이트(4×200ml)로 추출한다. 추출물을 합하여 물로 세척하고 Na₂SO₄상에서 건조시킨 후 증발시켜 포움상물질을 얻는다. 이 생성물을 디에틸에테르로 연마하여 베이지색 분말인 표제화합물 6.3g을 수득한다.

TLC(실리카겔플레이트, CHCl₃/MeOH/HCOOH 160 : 40 : 20)에 의해 출발물질보다 약간 작은 Rf값을 갖는 단일스포트를 확인한다.

NMR,, 60 MHz(DMSO-d₆)

[δ, p.p.m] : 3.60(2H, d.d., 2-CH₂) ; 4.35(2H, d.d., 3-CH₂S) ; 4.74(2H, s., ClCH₂CO) ; 5.08(1H, d., 6-H) ; 5.70(1H, d.d., 7-H) ; 6.38(1H, s., 피리다진환상의 7-H) ; 7.96(2H 브로드 s, 피리다진환상의 -NH₂) ; 9.21(1H, d., -CONH-) ; 13.00(1H, s., =N-OH)

단계 E : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로-[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시-이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체), 화합물(1)

3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-(4-클로로-2-하이드록시-이미노-3-옥소부티르아미도)-3-세펨-4-카복실산(5.12g ; 0.01몰)을 무수 N,N-디메틸아세트아미드(25ml)에 용해시킨다. 티오우레아(0.76g ; 0.01몰)를 가하고 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한다. 생성된 용액을 교반하면서 에틸아세테이트(250ml)에 적가한다. 고무상물질이 침전되며 상등모액은 버리고 잔사를 분말이 생성될 때까지 새로운 에틸아세테이트로 조심스럽게 연마한다. 분말을 여과하여 모아 건조시킨다. 이렇게하여 목적생성물의 염산염의 N,N-디메틸아세트아미드 용매화물을 수득한다. 생성된 물질을 수성 NaHCO₃에 용해시키고 에틸아세테이트로 5회 세척한 후, 디에틸에테르로 세척한다. 15분 동안 질소를 도입시키고 목탄을 가한 후, 목탄을 여과제거하고 용액은 2N HCl을 가해 산성화시킨다. 결정성침전을 모아 물로 철저히 세척한 후, 에틸알콜로 세척하여 TLC, IR 및 NMR에 의해 실시예 7에서 제조한 생성물과 동일한 것으로 나타나는 표제화합물 3.8g을 수득한다.

동일한 방법을 사용하여 다음 화합물을 제조한다 : 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미노]-1(R)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-1(S)-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-1-설피닐-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1, 5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-아미노카보닐-6-테트라졸로[1, 5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) ; 3-[(8-메틸아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-하이드록시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체).

[실시예 13]

물(80ml) 중의 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)(5.63g)의 수성현탁액에 화학량론적 양의 NaHCO₃를 가하여 화합물의 완전한 용액을 수득한다. 이 용액을 동결건조시켜 융점>240℃(분해)인 3-[(8-아미노-6-테트라졸로[1,5-b]-피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)의 나트륨염을 수득한다.

원소분석 : 실 측 치 Na3.80

계 산 치 Na3.90

I.R.(KBr) : 1760cm^-1>C=O(β-락탐)

[실시예 14]

물(80ml) 중의 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)(5.92g)의 수성현탁액에 2당량의 NaHCO₃를 가하여 화합물의 완전용액을 수득한다. 그후 생성된 용액을 동결건조시켜 융점>270℃(분해)인 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)의 2나트륨염을 수득한다.

원소분석 : 실측치 Na6.91

계산치 Na7.19

I.R.(KBr) : 1765cm^-1>C=O(β-락탐)

[실시예 13]

아세톤(400ml) 중의 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)(5.92g)의 용액에 이소프로필알콜 중의 나트륨 2-에틸헥사노에이트 30% 용액 2당량을 가한다. 실온에서 30분 동안 교반한 후에, 혼합물을 석유에테르로 희석하고 생성된 침전을 여과하여 융점 >270℃(분해)인 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도)-3-세펨-4-카복실산(신-이성체)의 2나트륨염을 수득한다.

원소분석 : 실측치 Na6.91

계산치 Na7.19

I.R.(KBr) : 1765cm^-1>C=O(β-락탐)

[실시예 16]

주사용 약학적 조성물은 3-[(8-카복시-6-테트라졸로[1,5-b]피리다지닐)-티오메틸]-7-[2-(2-아미노-4-티아졸릴)-2-메톡시이미노아세트아미도]-3-세펨-4-카복실산(신-이성체) 2나트륨염 100 내지 500mg을 멸균수 또는 멸균생리식염수(1내지 2ml)에 용해시켜 제조한다.

Claims

일반식(Ⅱ)의 화합물 또는 그의 반응성 유도체를 일반식(Ⅲ)의 화합물 또는 그의 반응성 유도체와 반응시키거나, 일반식(Ⅳ)의 화합물 또는 그의 염을 일반식(Ⅴ)의 화합물 또는 그의 반응성 유도체와 반응시키거나, 일반식(Ⅵ)의 화합물 또는 그의 염 또는 에스테르를 티오우레아와 반응시켜 R₁이 수소인 일반식(Ⅰ) 화합물을 수득하거나, 이렇게하여 생성된 일반식(Ⅰ)의 화합물들에서 존재하는 보호그룹을 제거함을 특징으로 하여, 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 그의 광학이성체 및 약학적으로 및 수의과적으로 허용되는 염을 제조하는 방법.

상기식에서, R은 -(CH₂)_n-COOR'그룹(여기에서, n은 0,1 또는 2이며, R'는 수소원자 또는 C₁내지 C₆알킬그룹을 나타낸다). 또는
그룹(여기에서, 각각의 R' 및 R"는 같거나 다를 수 있으며 수소원자 또는 C₁내지 C₆알킬그룹을 나타낸다)을 나타내며 ; R₁은 수소원자 또는 아미노-보호그룹을 나타내고 ; R₂는 수소원자, 하이드록시-보호그룹, 또는 하이드록시, 시아노, -COOR'(여기에서 R'는 상기 정의한 바와 같다) 및
(여기에서 R' 및 R"는 상기에서 정의한 바와 같다)중에서 선택된 치환체에 의해 치환되거나 비치환될 수 있는 직쇄 또는 측쇄의 포화 또는 불포화 C₁내지 C₆지방족 탄화수소그룹을 나타내며 ; x는 0,1 또는 2이고 ; E는 아미노그룹 또는 일반식 -N-C=Y의 그룹(여기에서 Y는 산소 또는 황이다)을 나타내며 ; Z는 할로겐원자를 나타낸다.