KR20230041771A - 다가 베타-코로나바이러스 백신, 이의 설계 및 용도 - Google Patents

다가 베타-코로나바이러스 백신, 이의 설계 및 용도 Download PDF

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Abstract

CoV 감염을 예방하기 위한 다가 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함한다. CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 단백질 항원, RNA-인코딩된 유전 정보, DNA-인코딩된 유전 정보, 또는 유전 벡터 내의 유전 정보이다.

Description

다가 베타-코로나바이러스 백신, 이의 설계 및 용도
관련 출원에 대한 상호 참조문헌
본 출원은 2020년 7월 22일에 출원된 가출원 제63,055,139호의 우선권을 주장하고, 이러한 출원의 정식 출원이며, 이는 그 전체가 본원에 참조로서 포함된다.
분야
[0001] 본 개시는 β-코로나바이러스 백신, 및 더욱 특히 β-코로나바이러스 감염에 대한 면역 반응을 유도하기 위한 특정 항원의 설계 및 조립에 관한 것이다.
[0002] 코로나바이러스(CoV)는 4개의 속으로 분류된다: 알파-, 베타-, 감마- 및 델타-코로나바이러스. β-CoV는 포유동물, 일반적으로 박쥐 및 설치류를 감염시킬 수 있는 외피된 양성-가닥 RNA(30 kb) 바이러스이지만, 많은 β-CoV가 또한 인간을 감염시키는 것으로 알려져 있다. 바이러스는 안지오텐신-전환 효소 2(ACE2)를 통해 숙주 세포에 진입한다. 이들의 4개의 주요 구조 단백질 중에서, S 단백질은 세포 수용체 결합을 매개한다. 이는 푸란 절단 부위에 의해 분리되는 S1 사슬과 S2 사슬로 나뉜다. SARS 수용체 결합 도메인(RBD)은 S1에 위치하고, 막 융합 섹션은 S2에 위치한다. 다른 주요 단백질은 M, N 및 외피(E) 단백질을 포함한다.
[0003] 인간 및 동물에서 CoV에 의한 감염은 일반적으로 짧은 기간의 경증 내지 중등도의 상부 호흡기 질환을 일으킨다. 중증 또는 종종 치명적인 증상을 특징으로 하는, 중증 급성 호흡기 증후군(SARS-1), 중동 호흡기 증후군(MERS) 및 우한-기원 SARS-CoV-2(SARS-2)(COVID-19로도 지칭됨)는 예외이다. MERS의 첫 번째 사례는 2012년 9월 사우디아라비아에서 보고되었으며, 2014년과 2015년에 주요 분화가 있었고, 이어서 작은 계절적 발병이 뒤따랐다. 확인된 MERS의 2,494건의 사례는 지금까지 858명의 환자에서 사망을 초래한 것으로 관찰되었다(34.3%의 치사율; WHO). SARS-2 감염의 첫 번째 사례는 2019년 12월에 나타났다. 2020년 4월 16일 기준으로, 질병 통제 센터(CDC)에 의해 보고된 바와 같이, 미국에서만 약 632,000명의 사례가 보고되었고 약 31,000명이 사망하여 4.9%의 치사율을 나타내는 것으로 추정되었다. SARS-2는 인간에게 매우 전염성이 있으며, Ro는 대략 3으로 추정된다(Liu 2020). 세계보건기구(WHO)는 2020년 1월 30일에 SARS-2의 세계적인 대유행을 세계 보건 비상사태(Global Health Emergency)로 선언하였다.
[0004] 미국에서, SARS-2는 모든 50개 주, 워싱턴 D.C., 및 적어도 4개 영토에서 보고되었다. 장기 요양 시설 및 노숙자 보호소에서의 발병은 집단 환경에서 노출 및 감염의 위험을 역설하였다. 직접 또는 비말을 통한 사람-대-사람 전파는 SARS-2의 주요 전파 수단으로 추정된다.
[0005] SARS-2는 일반적으로 열, 기침 또는 흉부 압박감, 및 호흡곤란이 가장 흔한 증상과 함께 가벼운 질병으로 나타나지만, 질병은 고령 및 다병 환자에게 가장 치명적이다. 중증 합병증은 폐렴, 과응고, 다기관 기능장애(심근 손상 및 신장 포함) 및 궁극적으로 사망을 포함한다. 소아에서, 다계통 염증 증후군(MIS-C)은 심장, 혈관, 신장, 소화계, 뇌, 피부 또는 눈과 같은 일부 신체 부위에 염증이 생기는 중증 병태이다.
[0006] SARS-2에 대한 특정 치료법은 이용 가능하지 않고, 연구 중에 있다. 현재 권장 사항은 무증상 또는 경증의 질병을 갖는 환자를 관찰하는 것이다. 질병의 추가 확산을 방지하기 위한 최선의 접근법은 특정 백신의 개발이다. 불활성화된 바이러스 백신 외에도, RNA-기반 및 바이러스 벡터화된 백신 및 유전자 백신에 중점을 두고 조작된 백신의 상이한 접근법이 조사되고 있다. 이러한 백신의 대부분은 SARS-2 스파이크(S) 단백질을 주요 항원으로 사용한다. 동물 시험뿐만 아니라 초기 임상 시험의 데이터가 공개되었다. 강력한 중화 항체 반응을 유도하기 위해 프라임/부스트 면역화 프로토콜이 필요하였다. 그러나, 많은 환자는 다중-용량 또는 부스터-요구 요법보다 단일-용량 요법을 선호할 것이다. 단일 항원 초과를 갖는 조작된 백신이 단일 투여 후 면역 보호를 추가로 향상시키는지 여부를 조사할 필요가 존재한다.
[0007] CoV는 체액성 및 세포성 면역 반응 둘 모두를 유도한다. 동물 및 임상 연구는 SARS-1 및 MERS 감염이 S 단백질에 대한 강력한 중화 항체 반응을 증가시킨다는 것을 입증한다. 또한, SARS-2 체액성 반응은 M 단백질에 결합하는 다른 항체로 S 단백질을 유사하게 표적화하였다. M 단백질은 또한 CD8+ T 세포 반응의 초점으로 작용한다. 항-SARS-2 CD4+ T 세포는 주로 N 및 S 항원 둘 모두를 본다. 불활성화된 바이러스 백신은 본질적으로 다가이다. 이들은 단일 S 단백질 백신보다 더 강한 SARS-2 반응을 제공할 수 있다. 동물 연구는 불활성화된 바이러스 백신이 Th2-타입 가능하게 항-N 질환 강화 면역 반응을 유도하기 쉽다는 것을 시사하였다. 질환 강화(disease enhancement)는 또한 S-기반 성분 백신에서 관찰되었지만, 이러한 것은 바이러스 벡터화된 항-S 백신에서는 명백하지 않았다. FDA는 강한 중화 항체와 함께 Th1-타입 T 세포 분극화을 나타내는 SARS-2 백신을 선호한다.
[0008] SARS-관련(SARSr) 바이러스의 전체 돌연변이율은 0.1 돌연변이/세대로 계산되었다. 동물 SARSr 바이러스의 S 수용체 결합 도메인의 사소한 변화는 인간 ACE2에 대한 결합을 향상시킬 수 있고, 따라서 인간 집단으로의 점프를 용이하게 할 수 있다. S 단백질 서열을 정렬하면 S2 영역 내에 유의한 안정한 영역을 갖는 유전자 전체에 걸쳐 유의한 발산(divergence)이 나타나는 반면, SARSr 바이러스의 M 및 N은 전반적으로 유의하게 더 낮은 돌연변이율을 나타낸다. 따라서, 다가 백신은 SARS-2 변이체에 대해 더 나은 보호를 제공할 것이다.
[0009] Ad 벡터로서 조작된 현재의 백신은 다른 백신 시스템과 비교하여 더 높고 더 지속되는 면역원성을 반복적으로 입증하였다. 최소 변형된 초기 세대(eg) Ad 벡터는 격렬한 체액성 및 세포 면역 반응이 유도되는 다수의 내인성 Ad 유전자를 보유한다. 따라서, egad 백신을 이용한 프라임/부스트 백신 접종 요법은 제2 용량에 대해 상이한 디자인의 백신에 의존하였다. 그러나, 최근의 임상 시험에서, 동물 유래 eg Ad 백신은 부스팅된 주사 후 증가된 면역 반응을 보였다. 항-Ad 반응은 모든 내인성 Ad 유전자의 완전히 결실된(fd) Ad 벡터에 의해 가장 효율적으로 최소화되었다. 이러한 fdAd 벡터는 향상된 트랜스진 발현, 생체내 연장된 유지, 및 개선된 면역원성을 보였다. fdAd 게놈에 대한 패키징 정보는 원래 제2 바이러스 작제물, 하이브리드 배큘로바이러스-아데노바이러스 또는 헬퍼 바이러스와 함께 전달되었고, 이는 복제 적격 Ad(RCA) 또는 헬퍼 바이러스로의 오염을 초래하였다.
[0010] 이러한 문제를 피하기 위해, 헬퍼 바이러스-독립 기술이 개발되었다. 헬퍼 바이러스-독립 백신은 모든 내인성 유전자의 완전한 결실 및 인간 Ad6과 같은 희귀 스테레오타입(stereotype)의 캡시드로의 패키징에 의해 기존의 및 유도된 간섭 항-Ad 반응을 최소화한다. 현재의 헬퍼 바이러스-독립 기술은 2개의 독립적으로-변형 가능한 성분 - (i) ITR 및 패키징 신호를 운반하는 최대 33 kb의 트랜스진 작제물을 수용할 수 있는 기본 벡터 모듈, 및 (ii) Ad2, Ad5, Ad6 및 Ad35 스테레오타입(pPaC2/5/6 및 pPaB35)을 기초로 한 상이한 원형 패키징 플라스미드에 구축된다. 기본 벡터 모듈은 모든 Ad 유전자가 제거되고 인간 하우스키핑 유전자 5-아미노이미다졸-4-카르복사미드 리보뉴클레오티드 포르밀트랜스-페라제 유전자(ATIC)의 단편으로부터 유래된 크기-보상 스터퍼(size-compensating stuffer)로 대체되었다. 원형 패키징 플라스미드에서, 좌측 ITR, 패키징 신호, 및 E1, E3 및 단백질 IX 유전자가 결실된다. 벡터 모듈은 HEK-293-유래 HTP7/Q7 패키징 세포를 사용하여 최적화된 1주 공동-트랜스펙션 프로토콜에 의해 캡슐화된다. 강력한 면역원성을 갖고 광범위한 CoV에 대한 보호를 제공하기 위해 단일 용량을 필요로 하는 CoV 백신을 제공하기 위해 이러한 동일한 기술을 사용하는 것이 바람직하다.
[0011] 일 구현예에서, 본 개시는 다가 백신을 제공한다. 본 개시의 구현예에 따르면, CoV 감염을 예방하기 위한 다가 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함한다.
[0012] 또 다른 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 단백질 항원, RNA-인코딩된 유전 정보, DNA-인코딩된 유전 정보, 유전자 내의 유전 정보, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 추가 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV 입자 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질이다. 또 다른 추가 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV에 감염된 세포 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질이다.
[0013] 추가의 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 단백질을 생산하기 위해 CoV 유전 정보로 트랜스펙션된 생산 세포로부터 수득된 단백질이다. 일 구현예에서, 생산 세포는 진핵 세포이다. 또 다른 구현예에서, 생산 세포는 박테리아이다. 또 다른 구현예에서, 생산 세포는 진균이다.
[0014] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보이다. 또 다른 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보이다.
[0015] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 유전 벡터 내의 유전 정보이다. 또 다른 구현예에서, 유전 벡터는 바이러스 유전 벡터이다. 또 다른 구현예에서, 바이러스 유전 벡터는 아데노바이러스 관련 바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 백시니아 벡터, 폴리오마 바이러스 벡터, 알파-바이러스 벡터 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 추가 구현예에서, 바이러스 유전 벡터는 박테리아이다. 또 다른 구현예에서, 유전 벡터는 박테리아 유전 벡터이다.
[0016] 일 구현예에서, CoV는 β-CoV이다. 추가 구현예에서, β-CoV는 SARSr 바이러스, MERS 바이러스 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 또 다른 추가 구현예에서, β-CoV는 SARSr 바이러스이다. 또 다른 구현예에서, SARSr은 SARS-1 바이러스, SARS-2 바이러스, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 추가 구현예에서, SARSr 바이러스는 SARS-2 바이러스이다. 또 다른 추가 구현예에서, β-CoV는 MERS 바이러스이다.
[0017] 일 구현예에서, 다가 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 적어도 3개의 상이한 단백질 항원을 포함한다.
[0018] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV 스파이크(S) 단백질, CoV 막(M) 단백질, CoV 뉴클레오캡시드(N) 단백질, CoV 외피(E) 단백질, 레플리카제 1a/1b 단백질, 및 ORF 4, 9, 10 및 13 인코딩된 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된다. 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV S 단백질로부터 유래된다. 또 다른 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV M 단백질로부터 유래된다. 추가 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV N 단백질로부터 유래된다.
[0019] 일 구현예에서, 백신은 CoV S 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원, 및 CoV M 단백질, CoV N 단백질 및 CoV E 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원을 포함한다.
[0020] 일 구현예에서, 본 개시는 대상체에서 면역 반응을 자극하는 방법을 제공한다. 본 개시의 구현예에 따르면, 대상체에서 면역 반응을 자극하는 방법은 대상체에게 유효량의, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
[0021] 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 단백질 항원, RNA-인코딩된 유전 정보, DNA-인코딩된 유전 정보, 유전 벡터 내의 유전 정보, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 또 다른 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV 입자 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질이다. 또 다른 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV에 감염된 세포 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질이다.
[0022] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 단백질을 생산하기 위해 CoV 유전 정보로 트랜스펙션된 생산 세포로부터 수득된 단백질이다. 추가 구현예에서, 생산 세포는 진핵 세포이다. 또 다른 구현예에서, 생산 세포는 박테리아이다. 또 다른 추가 구현예에서, 생산 세포는 진균이다.
[0023] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보이다. 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보이다.
[0024] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 유전 벡터 내의 유전 정보이다. 일 구현예에서, 유전 벡터는 바이러스 유전 벡터이다. 또 다른 구현예에서, 바이러스 유전 벡터는 아데노바이러스 관련 바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 백시니아 벡터, 폴리마 바이러스 벡터, 알파-바이러스 벡터, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 또 다른 구현예에서, 바이러스 유전 벡터는 박테리아이다. 추가 구현예에서, 유전 벡터는 박테리아 유전 벡터이다.
[0025] 일 구현예에서, CoV는 β-CoV이다. 추가 구현예에서, β-CoV는 SARSr 바이러스, MERS 바이러스 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 추가의 구현예에서, β-CoV는 SARSr 바이러스이다. 또 다른 구현예에서, SARSr은 SARS-1 바이러스, SARS-2 바이러스, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 추가 구현예에서, SARSr 바이러스는 SARS-2 바이러스이다. 또 다른 추가 구현예에서, β-CoV는 MERS 바이러스이다.
[0026] 일 구현예에서, 조성물은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 적어도 3개의 상이한 단백질 항원을 포함한다.
[0027] 일 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV 스파이크(S) 단백질, CoV 막(M) 단백질, CoV 뉴클레오캡시드(N) 단백질, CoV 외피(E) 단백질, 레플리카제 1a/1b 단백질, 및 ORF 4, 9, 10 및 13 인코딩된 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된다. 또 다른 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV S 단백질로부터 유래된다. 또 다른 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV M 단백질로부터 유래된다. 추가 구현예에서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 CoV N 단백질로부터 유래된다. 일 구현예에서, 조성물은 CoV S 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원 및 CoV M 단백질, CoV N 단백질 및 CoV E 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원을 포함한다.
[0028] 일 구현예에서, 대상체는 포유동물 대상체이다. 또 다른 구현예에서, 대상체는 인간 대상체이다.
[0029] 일 구현예에서, 투여는 근육내, 피내 또는 피하 주사에 의한 것이다. 추가 구현예에서, 투여는 경구 또는 비강내 투여에 의한 것이다.
[0030] 일 구현예에서, 본 개시는 CoV 감염을 예방하기 위한 다가 백신을 제공한다. 본 개시의 구현예에 따르면, CoV 감염을 예방하기 위한 다가 백신은 (i) 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원, (ii) 재1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보, (iii) 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보, (iv) 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 유전 벡터 내의 유전 정보 중 하나 초과를 포함한다.
[0031] 일 구현예에서, 제1 CoV 게놈은 SARSr 게놈 및 MERS 게놈으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 일 구현예에서, 백신은 (i) 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원, (ii) 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보, (iii) 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보, (iv) 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 유전 벡터 내의 유전 정보 중 하나 초과를 추가로 포함한다.
도면의 간단한 설명
[0032] 없음.
[0033] 본 개시의 임의의 구현예가 상세히 설명되기 전에, 본 개시는 이의 적용에서 하기 설명에 제시되거나 도면에 예시된 구성요소의 구성 및 배열의 세부사항으로 제한되지 않는 것으로 이해되어야 한다. 본 개시는 다른 구현예가 가능하고 다양한 방식으로 실시되거나 수행될 수 있다. 또한, 본원에서 사용되는 어구 및 용어는 설명의 목적을 위한 것이며 제한하는 것으로 간주되어서는 안 되는 것으로 이해된다. 본원에서 "포함하는(including, comprising)" 또는 "갖는"의 사용 및 이들의 변형은 이 앞에 열거된 항목 및 이들의 등가물뿐만 아니라 추가 항목을 포함하는 것을 의미한다. 본원에서 "본질적으로 포함하는(including essentially)" 및 "필수적 요소로 하여 구성되는(consisting essentially of)" 및 이들의 변형의 사용은 이 앞에 열거된 항목뿐만 아니라 전체의 특성, 용도 또는 제조를 본질적으로 변경하지 않는 이러한 등가물 및 추가 항목을 제공하는 등가물 및 추가 항목을 포함하는 것을 의미한다. 본원에서 "~로 구성되는" 및 이의 변형의 사용은 이 앞에 열거된 항목 및 이러한 항목만을 포함하는 것을 의미한다.
[0034] 도면을 참조하여, 유사한 번호는 전체에 걸쳐 유사한 요소를 지칭한다. 용어 제1, 제2 등은 다양한 요소, 성분, 영역, 및/또는 섹션을 설명하기 위해 본원에서 사용될 수 있지만, 이러한 요소, 성분, 영역 및/또는 섹션은 이들 용어에 의해 제한되어서는 안 되는 것으로 이해될 것이다. 이러한 용어는 하나의 요소, 성분, 영역 및/또는 섹션을 다른 요소, 성분, 영역 및/또는 섹션을 구별하기 위해서만 사용된다. 따라서, 제1 요소, 성분, 영역 또는 섹션은 본 개시로부터 벗어남 없이 제2 요소, 성분, 영역 또는 섹션으로 지칭될 수 있다.
[0035] 본 개시의 수치 범위는 근사치이며, 따라서 달리 지시되지 않는 한 범위 밖의 값을 포함할 수 있다. 수치 범위는 임의의 하한 값과 임의의 상한 값 사이에 적어도 2개의 단위의 분리가 존재하는 한, 1 단위의 증분으로 (달리 구체적으로 언급되지 않는 한) 하한 값 및 상한 값으로부터의 및 하한 값 및 상한 값을 포함하는 모든 값을 포함한다. 예로서, 조성, 물리적 또는 다른 특성, 예컨대, 예를 들어, 중량 기준 성분의 양 등이 10 내지 100인 경우, 모든 개별 값, 예컨대, 10, 11, 12 등, 및 하위 범위, 예컨대, 10 내지 44, 55 내지 70, 97 내지 100 등이 명시적으로 열거되는 것으로 의도된다. 명시적인 값을 함유하는 범위(예를 들어, 1, 또는 2, 또는 3 내지 5, 또는 6, 또는 7의 범위)의 경우, 임의의 2개의 명시적 값 사이의 임의의 하위 범위가 포함된다(예를 들어, 상기 범위 1 내지 7은 하위 범위 1 내지 2; 2 내지 6; 5 내지 7; 3 내지 7; 5 내지 6 등). 1보다 작은 값을 함유하거나 1보다 큰 분수(예를 들어, 1.1, 1.5 등)를 함유하는 범위의 경우, 1 단위는 적절하게는 0.0001, 0.001, 0.01 또는 0.1인 것으로 간주된다. 10 미만(예를 들어, 1 내지 5)의 한 자리 숫자를 포함하는 범위의 경우, 1 단위는 전형적으로 0.1로 간주된다. 이들은 구체적으로 의도된 것의 단지 예이며, 열거된 가장 낮은 값과 가장 높은 값 사이의 수치 값의 모든 가능한 조합은 본 개시에서 명시적으로 언급되는 것으로 간주되어야 한다.
[0036] "아래(beneath, below, lower)", "위(above, upper)" 등과 같은 공간 용어는 도면에 예시되는 바와 같은 다른 요소(들) 또는 특징(들)에 대한 하나의 요소 또는 특징의 관계를 설명하기 위해 본원에서 사용될 수 있다. 공간적으로 상대적인 용어는 사용 또는 예시에서의 배향에 따라 상이한 배향을 포함하는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 도면에서 장치가 뒤집힌 경우, 다른 요소 또는 특징의 "아래"로 기술된 요소는 다른 요소 또는 특징의 "위"로 배향될 것이다. 따라서, 예시적인 용어 "아래"는 위와 아래의 배향 둘 모두를 포함할 수 있다. 디바이스는 달리 배향될 수 있고(90°또는 다른 배향으로 회전됨) 본원에서 사용되는 공간적으로 상대적인 기술어가 이에 따라 해석될 수 있다.
[0037] 본원에서 사용되는 용어 "및/또는"은 관련된 열거된 항목 중 하나 이상의 임의의 및 모든 조합을 포함한다. 예를 들어, "A 및/또는 B"와 같은 어구에서 사용될 때, 어구 "및/또는"은 A 및 B 둘 모두, A 또는 B; A(단독); 및 B(단독)를 포함하는 것으로 의도된다. 유사하게, "A, B 및/또는 C"와 같은 어구에서 사용되는 용어 "및/또는"은 A, B 및 C; A, B, 또는 C; A 또는 C; A 또는 B; B 또는 C; A 및 C; A 및 B; B 및 C; A(단독); B(단독); 및 C(단독)의 구현예 각각을 포함하는 것으로 의도된다.
[0038] 일 구현예에서, 본 개시는 CoV 감염에 대한 다가 백신을 제공하며, 다가 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함한다.
[0039] 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원은 백신에서 단백질로서 전달되고/되거나, 백신에서 RNA-인코딩된 유전 정보로서 전달되고/되거나, 백신에서 DNA-인코딩된 유전 정보로서 전달되고/되거나, 백신에서 유전 벡터 내에서 유전 정보로서 전달될 수 있다.
단백질 항원
[0040] 일 구현예에서, 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원을 포함한다. 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원은 (i) CoV 상에서 또는 CoV에 의해 발현되는 항원 (ii) CoV에 감염된 세포 상에서 또는 이에 의해 발현된 항원, 및/또는 (iii) 단백질 항원을 생산하도록 조작된 생산 세포 상에서 또는 이에 의해 발현된 항원이다.
[0041] 본원에서 사용될 때, 용어 "하나 초과"는 적어도 2개의 상이한 성분, 예를 들어, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 2개의 상이한 단백질 항원을 지칭하기 위해 사용된다. 일 구현예에서, "하나 초과"는 적어도 2개, 2개 초과, 적어도 3개, 3개 초과, 적어도 4개, 4개 초과, 적어도 5개, 5개 초과 등일 수 있다. 특정 구현예에서, 백신은 하나 초과, 또는 적어도 2개, 또는 2개 초과, 또는 적어도 3개, 또는 3개 초과, 또는 적어도 4개, 또는 4개 초과, 또는 적어도 5개 또는 5개 초과의, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 상이한 단백질 항원을 포함한다.
[0042] CoV는 β-CoV, SARSr 바이러스, 및 더욱 특히 SARS-2 바이러스를 포함하는 임의의 CoV일 수 있다. 일 구현예에서, 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원을 포함하고, 여기서 하나 초과의 CoV 단백질 항원은 각각 동일한 CoV 균주로부터의 것이다. 특정 구현예에서, 각각의 CoV 단백질 항원은 SARSr 게놈 및 MERS 게놈, 또는 보다 구체적으로 SARS-1 게놈, SARS-2 게놈 및 MERS 게놈으로 구성되는 군으로부터 선택된 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된다. 또 다른 구현예에서, 백신은 제1 CoV 게놈으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원 및 제2 CoV 게놈으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원을 포함한다. 예를 들어, 일 구현예에서, 백신은 SARS-1 게놈, SARS-2 게놈 및 MERS 게놈으로 구성되는 군으로부터 선택된 제1 CoV 게놈으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원, 및 SARS-1 게놈, SARS-2 게놈 및 MERS 게놈으로 구성되는 군으로부터 선택된 제2 CoV 게놈으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원을 포함하며, 여기서 제1 CoV 게놈 및 제2 CoV 게놈은 동일하지 않다.
[0043] 또 다른 구현예에서, 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함하고, 여기서 제1 단백질 항원은 제1 CoV 게놈으로부터 유래되고, 제2 단백질 항원은 제2 CoV 게놈으로부터 유래되고, 여기서 제1 CoV 게놈 및 제2 CoV 게놈은 상이하고, 각각은 SARS-1 게놈, SARS-2 게놈, 및 MERS 게놈으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
[0044] 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원은 SARSr 바이러스 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원, 또는 SARS-2 바이러스 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 2개, 또는 3개, 또는 3개 초과의 단백질 항원을 포함하고, 여기서 단백질 항원 중 하나, 일부 또는 모두는 SARSr 바이러스 게놈 또는 SARS-2 바이러스 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된다.
[0045] 일 구현예에서, 단백질 항원은 CoV 막(M) 단백질, 뉴클레오캡시드(N) 단백질, 엔벨로프(E) 단백질, 레플리카제 1a/1b 단백질, 및 ORF 4, 9, 10 및 13 인코딩된 단백질로부터 유래된다.
백신
[0046] CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나는 백신에서 단백질로서 전달되고/되거나, 백신에서 RNA-인코딩된 유전 정보로서 전달되고/되거나, 백신에서 DNA-인코딩된 유전 정보로서 전달되고/되거나, 백신에서 유전 벡터 내에서 유전 정보로서 전달된다.
[0047] 일 구현예에서, 단백질 항원은 백신에서 단백질로서 전달된다. 단백질 항원은 CoV 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질일 수 있다. 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원 중 하나, 일부 또는 모두는 CoV 상에서 또는 이에 의해 발현된다.
[0048] 또 다른 구현예에서, 단백질 항원은 CoV에 감염된 세포에 의해 발현된다. 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 CoV 단백질 항원 중 하나, 일부 또는 모두는 CoV에 감염된 세포에 의해 발현된다.
[0049] 일 구현예에서, 단백질 항원은 CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 사용하여 생산 세포에서 단백질 항원을 생산하도록 생산 시스템을 조작함으로써 제조된다. 생산 세포는 동물 세포 및 식물 세포를 포함하나 이로 제한되지 않는 박테리아 또는 진핵 세포일 수 있다. 동물 세포는 인간 세포, 곤충 세포, 및 인간 및 곤충 이외의 동물의 세포로부터 선택될 수 있다. 식물 세포는 살아있는 식물의 세포를 포함한다. 일 구현예에서, 생산 세포는 진핵 세포, 박테리아 세포, 진균 세포, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 일 구현예에서, CoV 단백질 항원 중 하나, 일부 또는 모두는 CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 사용하여 생산 세포에서 단백질 항원을 생산하도록 생산 시스템을 조작함으로써 제조된다.
[0050] 백신에서 사용하기 위해 CoV 상에서 또는 CoV에 의해 발현된 하나 이상의 CoV 단백질 항원을 수득하기 위해, 단백질 항원은 정제된 CoV, 또는 정제된 SARSr 바이러스, 또는 정제된 SARS-2 바이러스로부터 추출된다. 일 구현예에서, 단백질 항원은 추출 후 추가 정제 없이 혼합물로서 사용된다. 또 다른 구현예에서, 추출된 단백질 항원은 정제되고 정제된 혼합물로서 사용된다. 또 다른 추가 구현예에서, 단백질 항원은 정제 및 분리되어 맞춤 혼합물(custom mixture)을 형성하거나 개별적으로 사용될 수 있다.
[0051] CoV에 감염된 세포에 의해 발현되는 하나 이상의 CoV 단백질 항원을 수득하기 위해, 단백질 항원은 CoV-감염된 세포, 또는 SARSr-감염된 세포, 또는 SARS-2-감염된 세포로부터 추출된다. 일 구현예에서, CoV-감염된 세포는 추출 전에 정제된다. 일 구현예에서, 단백질 항원은 추출 후 추가 정제 없이 혼합물로서 사용된다. 또 다른 구현예에서, 추출된 단백질 항원은 정제되고 정제된 혼합물로서 사용된다. 또 다른 추가 구현예에서, 단백질 항원은 정제 및 분리되어 맞춤 혼합물을 형성하거나 개별적으로 사용될 수 있다.
[0052] CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 사용하여 생산 세포에서 단백질 항원을 생산하기 위해 생산 시스템을 조작함으로써 제조된 하나 이상의 CoV 단백질 항원을 수득하기 위해, 생산 세포는 하나 초과의 CoV 단백질 항원 중 적어도 하나를 코딩하는 유전 발현 벡터로 트랜스펙션된다. 단백질 항원은 이후 생산 세포로부터 추출된다. 일 구현예에서, 단백질 항원은 추출 후 추가 정제 없이 혼합물로서 사용된다. 또 다른 구현예에서, 추출된 단백질 항원은 정제되고 정제된 혼합물로서 사용된다. 또 다른 추가 구현예에서, 단백질 항원은 정제 및 분리되어 맞춤 혼합물을 형성하거나 개별적으로 사용될 수 있다.
[0053] 일 구현예에서, 백신은 단백질 항원의 발현을 코딩하는 유전자 작제물을 조작하기 위해 CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 포함한다. 이러한 유전자 작제물은 RNA 및 DNA 작제물을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 일 구현예에서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 하나, 일부 또는 전부는 RNA-인코딩된 유전 정보, DNA-인코딩된 유전 정보, 및 이들의 조합으로서 백신에 의해 전달된다.
[0054] 유전자 작제물의 생성은 공지되어 있으며, 본 발명의 백신에 유용한 유전자 작제물은 당 분야에 공지된 유사한 수단으로 수득될 수 있다.
[0055] 백신이 단백질 항원의 발현을 코딩하는 유전자 작제물을 조작하기 위해 CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 포함하는 구현예에서, 단백질 항원은 유전자 작제물과 함께 백신을 수용한 것에 반응하여 백신 수용자에 의해 제조된다.
[0056] 일 구현예에서, 백신은 단백질 항원의 발현을 코딩하는 트랜스진 발현 카세트를 운반하는 발현 벡터를 조작하기 위해 CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 포함한다. 이러한 발현 벡터는 플라스미드-타입 벡터 및 바이러스 벡터, 예컨대, 비제한적으로 아데노바이러스 관련 바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, SV40-유래 벡터, VSV-타입 벡터, 백시니아-유래 벡터, 및 박테리아 벡터이다. 특정 구현예에서, 백신은 유전 벡터에 유전 정보를 포함한다. 추가 구현예에서, 유전 벡터는 바이러스 유전 벡터, 박테리아 유전 벡터, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된다. 일 구현예에서, 유전 벡터는 아데노바이러스 관련 바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 백시니아 벡터, 폴리오마 바이러스 벡터, 알파-바이러스 벡터, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택된 바이러스 벡터이다.
[0057] 예시적인 벡터는 PCT/US2021/28187호 및 PCT/US2021/31974호에 기술되어 있으며, 둘 모두는 전문이 본원에 참조로서 포함된다.
[0058] 백신이 단백질 항원의 발현을 코딩하는 트랜스진 발현 카세트를 운반하는 발현 벡터를 조작하기 위해 CoV 게놈 내에 인코딩된 유전 정보를 포함하는 구현예에서, 단백질 항원은 발현 벡터와 함께 백신을 수용하는 것에 반응하여 백신 수용자에 의해 제조된다.
[0059] 전술한 바와 같이, 백신은 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함한다. 일 구현예에서, 적어도 하나의 단백질 항원은 CoV 스파이크(S) 단백질, CoV 막(M) 단백질, CoV 뉴클레오캡시드(N) 단백질, CoV 외피(E) 단백질, 레플리카제 1a/1b 단백질, 및 ORF 4, 9, 10 및 13 인코딩된 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된다. 특정 구현예에서, 백신은 CoV S 단백질, CoV M 단백질, 및 CoV N 단백질로부터 유래된 단백질 항원을 포함한다. 추가 구현예에서, 백신은 CoV S 단백질로부터 유래된 단백질 항원 및 CoV M 단백질, CoV N 단백질, 및 CoV E 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 다른 단백질 항원을 포함한다.
면역 반응을 자극하는 방법
[0060] 일 구현예에서, 본 개시는 대상체에서 면역 반응을 자극하는 방법을 제공한다. 본 방법은 대상체에, 유효량의, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일 구현예에서, 조성물은 본원에 기술된 임의의 구현예 또는 구현예들의 조합에 따른 백신 조성물이다.
[0061] 백신은 특정 상황에 의해 결정되는 정의된 용량 및 정의된 투여 횟수(즉, "유효량")로 동물 대상체, 예컨대, 포유동물 대상체 또는 보다 구체적으로 인간 대상체에게 전달될 수 있다.
[0062] 백신은 근육내 주사, 피하 주사, 피내 주사, 경구 투여 및 비강내 투여와 같은, 그러나 이로 제한되지 않는 상이한 경로에 의해 투여될 수 있다.
실시예
[0063] 2가 CoV 백신은 SARS-2 S 항원에 대한 트랜스진 발현 카세트 및 SARS-2 M 항원에 대한 트랜스진 발현 카세트를 포함한다. 이러한 백신은 강력한 체액성(항-S 및 항-M) 및 세포성(CD4+ T 세포: 항-S; CD8+ T 세포: 항-M) 면역 반응을 유도할 것으로 예상된다. 아데노바이러스 벡터화된 백신으로서, 2가 백신은 후속 SARS-2 감염 시 질환 과정의 향상을 초래하지 않으면서 Th1-타입 T 세포 분극화를 입증할 것이다. 백신에서 벡터 게놈은 인간 코돈-최적화된 S 및 M 항원의 발현을 가이딩하는 트랜스진 발현 카세트를 운반한다. 발현 카세트는 사이토메갈로바이러스(CMV) 즉각적인 초기 프로모터/인핸서로부터 구동되고 인간 성장 호르몬(HGH) 유전자로부터 유래된 폴리-아데닐화 부위에 의해 종결된다. 2개의 트랜스진은 인간 뇌척수염 바이러스 내부 리보솜 진입 부위(IRES)에 의해 분리된다.
[0064] 제3 항원(SARS-2 N 항원)의 포함은 2가 백신과 비교하여 백신의 효능을 추가로 향상시킬 것으로 고려된다.
[0065] 백신의 다수의 구현예가 본원에 상세히 기술되어 있지만, 이에 대한 변형 및 변경이 가능하며, 이들 모두는 본 발명의 진정한 사상 및 범위 내에 속하는 것이 명백하다. 특히, 백신이 β-CoV, 및 보다 특히 SARSr 바이러스 및 SARS-2 바이러스에 대해 상세히 설명되었지만, 백신은 예를 들어, α-CoV, ν-CoV, 및 δ-CoV와 같은 다른 부류의 코로나바이러스에 적용하기 위해 당업자의 기술에 따라 변형될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 또한, 당업자는 다수의 변형 및 변경을 용이하게 할 수 있으므로, 본 발명을 도시되고 기술된 정확한 구성 및 작동으로 제한하는 것은 바람직하지 않으며, 따라서, 본 개시의 범위 내에 속하는, 모든 적합한 변형 및 동등물은 재분류될 수 있다.

Claims (61)

  1. CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함하는 CoV 감염을 예방하기 위한 다가 백신.
  2. 제1항에 있어서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 단백질 항원, RNA-인코딩된 유전 정보, DNA-인코딩된 유전 정보, 유전 벡터 내의 유전 정보, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 다가 백신.
  3. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV 입자 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질인, 다가 백신.
  4. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV로 감염된 세포 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질인, 다가 백신.
  5. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 단백질을 생산하기 위해 CoV 유전 정보로 트랜스펙션된 생산 세포로부터 수득된 단백질인, 다가 백신.
  6. 제5항에 있어서, 생산 세포가 진핵 세포인, 다가 백신.
  7. 제5항에 있어서, 생산 세포가 박테리아인, 다가 백신.
  8. 제5항에 있어서, 생산 세포가 진균인, 다가 백신.
  9. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보인, 다가 백신.
  10. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 DNA-코딩된 유전 정보인, 다가 백신.
  11. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 유전 벡터 내의 유전 정보인, 다가 백신.
  12. 제11항에 있어서, 유전 벡터가 바이러스 유전 벡터인, 다가 백신.
  13. 제12항에 있어서, 바이러스 유전 벡터가 아데노바이러스 관련 바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 백시니아 벡터, 폴리오마 바이러스 벡터, 알파-바이러스 벡터 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 다가 백신.
  14. 제12항에 있어서, 바이러스 유전 벡터가 박테리아인, 다가 백신.
  15. 제11항에 있어서, 유전 벡터가 박테리아 유전 벡터인, 다가 백신.
  16. 제1항에 있어서, CoV가 β-CoV인, 다가 백신.
  17. 제16항에 있어서, β-CoV가 SARSr 바이러스, MERS 바이러스 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 다가 백신.
  18. 제17항에 있어서, β-CoV가 SARSr 바이러스인, 다가 백신.
  19. 제18항에 있어서, SARSr이 SARS-1 바이러스, SARS-2 바이러스, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 다가 백신.
  20. 제19항에 있어서, SARSr 바이러스가 SARS-2 바이러스인, 다가 백신.
  21. 제17항에 있어서, β-CoV가 MERS 바이러스인, 다가 백신.
  22. 제1항에 있어서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 적어도 3개의 상이한 단백질 항원을 포함하는, 다가 백신.
  23. 제1항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV 스파이크(S) 단백질, CoV 막(M) 단백질, CoV 뉴클레오캡시드(N) 단백질, CoV 외피(E) 단백질, 레플리카제 1a/1b 단백질, 및 ORF 4, 9, 10 및 13 인코딩된 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래되는, 다가 백신.
  24. 제23항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV S 단백질로부터 유래되는, 다가 백신.
  25. 제23항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV M 단백질로부터 유래되는, 다가 백신.
  26. 제23항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV N 단백질로부터 유래되는, 다가 백신.
  27. 제1항에 있어서, 백신이 CoV S 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원, 및 CoV M 단백질, CoV N 단백질 및 CoV E 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원을 포함하는, 다가 백신.
  28. 대상체에서 면역 반응을 자극하는 방법으로서, 상기 대상체에게, 유효량의, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원을 포함하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  29. 제28항에 있어서, CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 단백질 항원, RNA-인코딩된 유전 정보, DNA-인코딩된 유전 정보, 유전 벡터 내의 유전 정보, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 방법.
  30. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV 입자 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질인, 방법.
  31. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV로 감염된 세포 상에서 또는 이에 의해 발현되는 단백질인, 방법.
  32. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 단백질을 생산하기 위해 CoV 유전 정보로 트랜스펙션된 생산 세포로부터 수득된 단백질인, 방법.
  33. 제32항에 있어서, 생산 세포가 진핵 세포인, 방법.
  34. 제32항에 있어서, 생산 세포가 박테리아인, 방법.
  35. 제32항에 있어서, 생산 세포가 진균인, 방법.
  36. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보인, 방법.
  37. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보인, 방법.
  38. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 유전 벡터 내의 유전 정보인, 방법.
  39. 제38항에 있어서, 유전 벡터가 바이러스 유전 벡터인, 방법.
  40. 제39항에 있어서, 바이러스 유전 벡터가 아데노바이러스 관련 바이러스 벡터, 아데노바이러스 벡터, 백시니아 벡터, 폴리마 바이러스 벡터, 알파-바이러스 벡터, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 방법.
  41. 제39항에 있어서, 바이러스 유전 벡터가 박테리아인, 방법.
  42. 제38항에 있어서, 유전 벡터가 박테리아 유전 벡터인, 방법.
  43. 제28항에 있어서, CoV가 β-CoV인, 방법.
  44. 제43항에 있어서, β-CoV가 SARSr 바이러스, MERS 바이러스 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 방법.
  45. 제44항에 있어서, β-CoV가 SARSr 바이러스인, 방법.
  46. 제45항에 있어서, SARSr이 SARS-1 바이러스, SARS-2 바이러스, 및 이들의 조합으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 방법.
  47. 제46항에 있어서, SARSr 바이러스가 SARS-2 바이러스인, 방법.
  48. 제44항에 있어서, β-CoV가 MERS 바이러스인, 방법.
  49. 제28항에 있어서, 조성물이 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 적어도 3개의 상이한 단백질 항원을 포함하는, 방법.
  50. 제28항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV 스파이크(S) 단백질, CoV 막(M) 단백질, CoV 뉴클레오캡시드(N) 단백질, CoV 외피(E) 단백질, 레플리카제 1a/1b 단백질, 및 ORF 4, 9, 10 및 13 인코딩된 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래되는, 방법.
  51. 제50항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV S 단백질로부터 유래되는, 방법.
  52. 제50항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV M 단백질로부터 유래되는, 방법.
  53. 제50항에 있어서, 하나 초과의 단백질 항원 중 적어도 하나가 CoV N 단백질로부터 유래되는, 방법.
  54. 제28항에 있어서, 조성물이 CoV S 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원, 및 CoV M 단백질, CoV N 단백질 및 CoV E 단백질로 구성되는 군으로부터 선택된 단백질로부터 유래된 적어도 하나의 단백질 항원을 포함하는, 방법.
  55. 제28항에 있어서, 대상체가 포유동물 대상체인, 방법.
  56. 제55항에 있어서, 대상체가 인간 대상체인, 방법.
  57. 제28항에 있어서, 투여가 근육내, 피내 또는 피하 주사에 의한 것인, 방법.
  58. 제28항에 있어서, 투여가 경구 또는 비강내 투여에 의한 것인, 방법.
  59. (i) 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원, (ii) 상기 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보, (iii) 상기 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보, (iv) 상기 제1 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 유전 벡터 내의 유전 정보 중 하나 초과를 포함하는, CoV 감염을 예방하기 위한 다가 백신.
  60. 제59항에 있어서, 제1 CoV 게놈이 SARSr 게놈 및 MERS 게놈으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 다가 백신.
  61. 제59항에 있어서, (i) 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원, (ii) 상기 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 RNA-인코딩된 유전 정보, (iii) 상기 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 DNA-인코딩된 유전 정보, (iv) 상기 제2 CoV 게놈 내에 인코딩된 항원으로부터 유래된 단백질 항원의 발현을 코딩하는 유전 벡터 내의 유전 정보 중 하나 초과를 추가로 포함하는, 다가 백신.
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