KR20230024456A - 인삼 열매와 녹용을 포함하는 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유용 조성물 - Google Patents

인삼 열매와 녹용을 포함하는 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유용 조성물 Download PDF

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Abstract

본원에는 인삼 열매와 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 및/또는 상처 치유 촉진용 조성물이 개시된다. 상기 인삼 열매와 녹용은 1 : 3 내지 7의 중량비로 혼합될 수 있고, 상기 조성물은 인삼 열매와 녹용을 병행하여 사용함으로써 피부의 수분 저하, 주름 생성, 탄력 저하, 상처 및/또는 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 개선 및/또는 치료하는 효과가 매우 우수하다.

Description

인삼 열매와 녹용을 포함하는 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유용 조성물{COMPOSITION FOR SKIN MOISTURIZING, ANTI-WRINKLE OR WOUND HEALING COMPRISING GINSENG FRUIT AND DEER ANTLERS}
본 개시물에는 인삼 열매와 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 및/또는 상처 치유 촉진용 조성물이 개시된다.
피부는 일차적인 방어막으로서 온도와 습도 변화, 자외선, 오염 물질 등의 외부 환경에 의한 자극으로부터 인체를 보호해 주며, 인체 항상성 유지에 중요한 역할을 수행한다. 이러한 피부는 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 노화가 발생되며, 노화는 크게 유전적 원인에 의한 내인성 노화와 환경적 원인에 의한 외인성 노화로 구분된다. 최근 환경오염으로 인한 오존층 파괴는 자외선의 양을 증가시켰고, 이에 따라 광노화, 즉 자외선에 의한 노화에 대한 연구가 주목되고 있다. 광노화된 피부에서는 거칠어짐, 건조증, 탄력 손실, 주름 발생 및 불규칙한 색소 침착 등과 같은 외관상의 특징이 관찰된다. 피부의 주요 구성성분인 콜라겐의 합성, 분해 및 수분 함유량 등은 피부 탄력과 주름 형성에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다.
피부는 표피층 (epidermis), 진피층 (dermis), 피하지방층 (subcutaneous fat tissue) 세 층으로 나뉠 수 있다. 표피는 피부의 가장 외측에 존재하고 대부분의 세포는 각질 형성세포들로 표피의 가장 깊은 층에 있는 기저층에 위치한 세포에서 시작하여 표피층으로 올라가면서 세포의 생명력이 없어지며 견고하고 규칙적인 세포층으로 변하게 되고, 피부 표면에 도달하면 떨어져 나가게 된다. 피부의 표면에 상처가 생길 경우, 표피의 빠른 재생 능력으로 인해 상처의 회복을 촉진하여 추가 감염을 방지하는 역할을 수행한다. 진피는 피부를 유지하는 조직으로, 신경 말단, 땀샘, 피지선을 포함한 각종 분비선 및 혈관 등의 다양한 기관이 존재한다. 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질 중 콜라겐은 생체 단백질 총 중량의 약 30%를 차지하며 피부의 진피에 대부분이 존재한다. 콜라겐은 상처 치료에서 중요한 역할을 담당한다.
콜라겐 중에서, 타입 IV 콜라겐 (COL4A1)은 기저 진피표피 막 (basal dermoepidermal membrane)을 구성하는 과정 및 특히 매트릭스 중 세포 배향과 관련하여 세포외 기질 (extracellular matrix, ECM)의 초분자적 조직화 (supramolecular organisation) 과정에서 중요한 역할을 수행한다. 타입 IV 콜라겐 결핍증은 노화, 탄력 상실과 밀접한 관련이 있으며, 타입 IV 콜라겐은 엘라스틴 생합성 및 상처 치유에 관여하는 것으로 알려져 있다. 타입 VII 콜라겐 (COL7A1)은 진피-표피 경계 (Dermal-epidermal Junction, DEJ)에서 고정 원섬유 형성에 중요한 단백질로 작용한다.
KR 10-2008-0094540 A
일 측면에서, 본 개시물은 인삼 열매와 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 및/또는 상처 치유 촉진용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
일 측면에서, 본 개시물은 인삼 열매 및 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매는 조성물 전체 중량을 기준으로 2 중량% 미만으로 포함된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 조성물 전체 중량을 기준으로 8 중량% 미만으로 포함된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용의 혼합 중량은 조성물 전체 중량을 기준으로 5 중량% 이하인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용은 1 : 0.1 내지 10의 중량비로 혼합된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용은 1 : 3 내지 7의 중량비로 혼합된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매는 인삼 열매의 농축물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 녹용의 추출물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용의 추출물은 녹용의 열수 추출물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 화장료 조성물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 식품 조성물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 피부 건조증을 예방 또는 치료하거나 상처 또는 자외선에 의한 피부 손상을 예방 또는 치료하는 약학 조성물인 것일 수 있다.
일 측면에서, 본 개시물에 개시된 기술은 인삼 열매와 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 및/또는 상처 치유 촉진용 조성물을 제공하는 효과가 있다.
도 1은 일 실험예에 따른 인삼 열매의 세포 독성 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 일 실험예에 따른 녹용의 세포 독성 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 일 실험예에 따른 인삼 열매 및 녹용 혼합물의 세포 독성 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 일 실험예에 따른 히알루론산 합성효소 2 (HAS2) 발현량 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 일 실험예에 따른 타입 VII 콜라겐 (COL7A1) 발현량 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 일 실험예에 따른 타입 IV 콜라겐 (COL4A1) 발현량 평가 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 개시물을 상세히 설명한다.
일 측면에서, 본 개시물은 인삼 열매 및 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물을 제공한다.
본원에서 '유효성분'은 단독으로 목적으로 하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체 등과 함께 목적으로 하는 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매는 조성물 전체 중량을 기준으로 2 중량% 미만, 바람직하게는 1 중량% 이하로 포함된 것일 수 있다. 다른 예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매는 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.1 중량% 이상 또는 0.5 중량% 이상이고, 2 중량% 미만, 1.8 중량% 이하, 1.6 중량% 이하, 1.4 중량% 이하, 1.2 중량% 이하, 1 중량% 이하, 0.8 중량% 이하 또는 0.6 중량% 이하로 포함된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 조성물 전체 중량을 기준으로 8 중량% 미만, 바람직하게는 4 중량% 이하로 포함된 것일 수 있다. 다른 예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.1 중량% 이상 또는 0.5 중량% 이상이고, 8 중량% 미만, 7.5 중량% 이하, 7 중량% 이하, 6.5 중량% 이하, 6 중량% 이하, 5.5 중량% 이하, 5 중량% 이하, 4.5 중량% 이하, 4 중량% 이하, 3.5 중량% 이하, 3 중량% 이하, 2.5 중량% 이하, 2 중량% 이하, 1.5 중량% 이하, 1 중량% 이하 또는 0.5 중량% 이하로 포함된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용의 혼합 중량은 조성물 전체 중량을 기준으로 5 중량% 이하, 바람직하게는 4 중량% 이하인 것일 수 있다. 다른 예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용의 혼합 중량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.1 중량%, 0.5 중량% 이상, 1 중량% 이상, 1.5 중량% 이상, 2 중량% 이상, 2.5 중량% 이상 또는 3 중량% 이상이고, 5 중량% 이하, 4.8 중량% 이하, 4.6 중량% 이하, 4.4 중량% 이하, 4.2 중량% 이하 또는 4 중량% 이하인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용은 1 : 0.1 내지 10의 중량비로 혼합된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매 및 녹용은 1 : 3 내지 7의 중량비로 혼합된 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매는 인삼 열매를 건조, 분쇄, 농축, 추출, 분획, 발효 등의 방법으로 가공한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 인삼 열매는 인삼 열매에서 씨를 제거하고 과육 및 과즙을 농축하여 얻은 인삼 열매의 농축물인 것일 수 있다. 상기 농축물은 50 내지 60 ℃, 50 내지 55 ℃ 또는 55 내지 60 ℃의 조건에서 농축한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 녹용을 건조, 분쇄, 농축, 추출, 분획, 발효 등의 방법으로 가공한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 건조한 녹용을 분쇄한 다음 추출하여 얻은 녹용의 추출물인 것일 수 있다. 다른 예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용은 건조한 녹용을 분쇄한 다음 추출 및 농축하여 얻은 녹용의 농축물인 것일 수 있다. 상기 농축물은 50 내지 60 ℃, 50 내지 55 ℃ 또는 55 내지 60 ℃의 조건에서 농축한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용의 추출물은 물 및 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 용매로 추출한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용의 추출물은 85 ℃ 이상, 90 ℃ 이상, 95 ℃ 이상, 85 내지 100 ℃, 90 내지 100 ℃ 또는 95 내지 100 ℃의 온도에서 추출한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 녹용의 추출물은 녹용의 열수 추출물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 콜라겐 합성 촉진, 콜라겐 분해 억제 및/또는 보습 인자 합성 촉진 활성을 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 주름 개선은 탄력 개선을 포함하는 것을 의미하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 상처 치유 촉진은 피부 재생을 포함하는 것을 의미하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 피부의 수분 저하, 주름 생성, 탄력 저하, 상처 및/또는 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 개선 및/또는 치료하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 피부 건조증을 예방, 개선 및/또는 치료하거나 상처 및/또는 자외선에 의한 피부 손상을 예방, 개선 및/또는 치료하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 화장료 조성물인 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물에는 유효성분 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 적정량 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 성분을 포함할 수 있다. 이외에 포함될 수 있는 배합 성분으로는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한 (制汗)제, 정제수 등을 예로 들 수 있다. 상기 성분은 본 개시물의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.
상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 오일, 영양에센스, 팩, 패취, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 메이크업 베이스, 파운데이션 및 새도우로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 개시물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 개시물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 개시물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 개시물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 개시물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 식품 조성물인 것일 수 있다.
상기 식품 조성물은 액상 또는 고체 상태의 제형일 수 있고, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류, 건강기능 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 제조될 수 있다. 각 제형의 식품 조성물은 유효성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.
상기 식품 조성물은 유효성분 이외에 함유할 수 있는 액체 성분으로 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 포함할 수 있으나, 상기 액체 성분에 특별한 제한이 있는 것은 아니다. 상기 천연 탄수화물의 예로는 모노사카라이드, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 말토스, 슈크로스 등의 폴리사카라이드, 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알코올 등이 있다. 상기 향미제로는 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (예를 들어 사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 개시물에 개시된 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 일 측면에서 약 5 내지 12 g일 수 있다.
상기 식품 조성물은 일 측면에서 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 다른 측면에서 천연 과일 주스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 더 포함할 수 있다. 상기 성분들은 독립적으로 또는 조합하여 사용될 수 있다. 상기 첨가제의 비율은 다양할 수 있으나, 본 개시물에 개시된 조성물 100 중량부 당 0.001 내지 20 중량부의 범위에서 선택될 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 피부 건조증을 예방 또는 치료하거나 상처 또는 자외선에 의한 피부 손상을 예방 또는 치료하는 약학 조성물인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 자외선에 의한 피부 손상은 주름 생성 또는 탄력 저하인 것일 수 있다.
상기 약학 조성물은 유효성분 이외에 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 투여제 또는 비경구 투여제 형태로 제형화할 수 있다.
상기 경구 투여제는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 분제, 산제, 세립제, 과립제, 펠렛제 등이 있으며, 이들 제형은 유효성분 이외에 계면 활성제, 희석제, 활택제를 함유할 수 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 상기 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.
또한, 상기 비경구 투여제 형태로는 경피 투여형 제형일 수 있으며, 예를 들어 주사제, 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 스프레이, 현탁제, 유제, 패취 등의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 유효성분의 투여량 결정은 통상의 기술자의 수준 내에 있으며, 약물의 1일 투여 용량은 투여하고자 하는 대상의 진행 정도, 발병 시기, 연령, 건강상태, 합병증 등의 다양한 요인에 따라 달라지지만, 성인을 기준으로 할 때 일 측면에서 1 ㎍/kg 내지 200 mg/kg, 다른 일 측면에서 50 ㎍/kg 내지 50 mg/kg을 1일 1회 내지 3회 분할하여 투여할 수 있으며, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 개시물의 범위를 한정하는 것이 아니다.
상기 약학 조성물은 피부 외용제 조성물을 포함하는 것일 수 있다. 상기 피부 외용제 조성물은 피부 외부에서 도포되는 어떠한 것이라도 포함될 수 있는 총칭으로서 다양한 제형의 의약품 및 의약외품이 여기에 포함될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 개시물을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 개시물을 예시하기 위한 것으로서, 본 개시물의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
비교예 1. 인삼 열매 농축액 ( GBP )의 제조
대한민국 충청남도 금산에서 재배한 4년근 인삼의 열매를 수확한 후 씨를 제거하였다. 씨가 제거된 상태에서 과육과 과즙을 55 ℃의 조건에서 농축하여 농축액을 제조하였다.
비교예 2. 녹용 농축액 (DA)의 제조
건조된 녹용을 거모한 후 분쇄하여 분쇄물 500 g을 취득하고, 정제수 5,000 mL를 가하여 95 ℃의 조건에서 240분 동안 추출하였다. 이후, 상기 추출물을 55 ℃의 조건에서 농축하여 농축액을 제조하였다.
실시예 1. 인삼 열매와 녹용 혼합물의 제조
상기 비교예 1 및 비교예 2에서 제조한 인삼 열매 농축액 (GBP)과 녹용 농축액 (DA)을 하기 표 1에서와 같이 다양한 중량 비율로 혼합하여 인삼 열매와 녹용의 혼합물을 제조하였다.
실시예 1-1 실시예 1-2 실시예 1-3 실시예 1-4 실시예 1-5 실시예 1-6 실시예 1-7
GBP 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
DA 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5
실험예 1. 세포 독성 평가
상기 비교예 1, 2 및 실시예 1에서 제조한 각각의 농축액 및 혼합물에 대해 세포 독성 여부를 평가하여 도 1 내지 3에 나타내었다.
실험에 사용된 섬유아세포는 인간 유래 섬유아세포인 Hs68 (ATCC, #CRL 1635)을 이용하였으며, 세포는 10% FBS (fetal bovine serum)와 1% 페니실린-스트렙토마이신이 포함된 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지에서 배양하였다. 각 시료를 다양한 농도로 세포에 처리하기 위해 1% 페니실린-스트렙토마이신이 포함된 무혈청 DMEM 배지에 희석하여 준비하였다. Hs68 세포 1×105개를 48-웰 플레이트에 분주한 다음 24시간 동안 배양하고 준비된 시료를 처리하였다. 시료 처리 24시간 후에 세포 독성을 확인하기 위해 CCK-8 (Dojindo, Japan) KIT를 이용하였다. KIT에 포함된 생존 세포에 존재하는 효소와 반응하는 WST (water soluble tetrazolium salt)를 450 nm에서 흡광도 측정하여 세포 생존률을 계산하였다.
그 결과, 인삼 열매 농축액은 2% 이상의 농도에서 세포 독성을 나타내었고, 녹용 농축액은 8% 이상의 농도에서 세포 독성을 나타내었다. 인삼 열매와 녹용 혼합물의 경우, 최대 농도를 4%로 하여 다양한 중량 비율로 혼합하였을 때 인삼 열매 농축액과 녹용 농축액이 0.5 : 3.5의 중량비 및 1 : 3의 중량비로 혼합된 혼합물에서 세포 독성이 없는 것으로 나타났다.
실험예 2. HAS2, COL7A1 및 COL4A1 발현량 평가
상기 실험예 1에서 세포 독성이 없는 것으로 확인된 각 시료를 대상으로 이들이 HAS2, COL7A1 및 COL4A1 발현량에 미치는 영향을 평가하여 하기 표 2 및 도 4 내지 6에 나타내었다.
Hs68 인간 유래 섬유아세포를 10% FBS (fetal bovine serum)가 함유된 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)과 함께 6-웰 플레이트에 2×105 세포/웰이 되도록 넣었다. 90%까지 자란 후 배지를 제거하고 무혈청 DMEM에 하기 표 2에 표기된 농도 (v/v)로 각 시료를 녹여 세포에 처리하였다. 시료가 첨가되지 않은 것을 대조군으로 하였다. 24시간 경과 후, RNeasy Mini Kit (#74101, Qiagen)를 사용하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍 1000 (NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc. Waltham, MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 정량된 1 ㎍의 RNA를 SuperScript® III First-Strand Synthesis System (#18080-051, Invitrogen)과 PCR 기계 (TP600, Takara, Japan)를 이용하여 42℃ 60분, 70℃ 5분의 조건에서 cDNA로 합성하였다. 2 μL cDNA, TaqMan™ Gene Expression Master Mix (#4369016, ThermoFisher Scientific), 그리고 하기 특정 pre-inventoried TaqMan primers를 혼합하여 ABI 7500 Fast Real-Time PCR system (Applied Biosystems, CA, USA)을 이용하여 qPCR을 실시하였다. GAPDH로 mRNA의 로딩량이 일정함을 확인하였다.
HAS2 (hyaluronan synthase 2) - Hs00193435_m1
COL7A1 (collagen type VII alpha 1) - Hs00164310_m1
COL4A1 (collagen type IV alpha 1 chain) - Hs00266237_m1
GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) - Hs02786624_g1
mRNA 발현량 비교 HAS2 COL7a1 COL4a1
CTL(무처리) 100% 100% 100%
GBP_0.5% 18% 144% 160%
GBP_1% 24% 176% 172%
DA_1% 161% 133% 113%
DA_2% 287% 104% 102%
DA_4% 271% 96% 103%
GBP_1%+DA_3%
(실시예 1-2)
468% 265% 185%
GBP_0.5%+DA_3.5%
(실시예 1-1)
409% 179% 186%
그 결과, 인삼 열매는 단독으로 처리할 때 무처리군과 대비하여 HAS2 mRNA 발현량을 크게 감소시키고 COL7A1 및 COL4A1 mRNA 발현량은 증가시키는 것으로 나타났다. 한편, 녹용은 단독으로 처리할 때 무처리군과 대비하여 HAS2 mRNA 발현량은 크게 증가시켰지만, COL7A1 및 COL4A1 mRNA 발현량은 처리 농도를 증가시킬 경우 오히려 저농도 처리군에 비해 낮은 것으로 나타났다. 반면, 인삼 열매와 녹용의 혼합물을 처리한 경우, HAS2, COL7A1 및 COL4A1 mRNA 발현량 모두 현저하게 증가되는 것을 확인하였다. 즉, 인삼 열매와 녹용을 함께 사용하는 경우, 인삼 열매를 단독으로 사용할 때 나타나는 HAS2 mRNA 발현량 감소 문제를 해결함과 동시에, 녹용을 단독으로 사용할 때 무처리군과 비슷한 수준이거나 소폭으로 증가하는 COL7A1 및 COL4A1 mRNA 발현량을 더욱 현저하게 증가시켜 시너지 효과를 나타내었다.
따라서, 인삼 열매와 녹용의 혼합물은 피부 보습 및 항상성 유지에 기여를 하는 것으로 알려져 있는 유전자들의 발현량을 크게 증가시켜 피부 보습, 항노화 및 상처 치유에 있어서 우수한 효과가 있음을 확인하였다.
본 개시물의 일 측면에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 개시물을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제형예 1] 캡슐제
실시예 1-1의 혼합물 10 mg, 결정성 셀룰로오스 3 mg, 락토오스 14.8 mg, 마그네슘 스테아레이트 0.2 mg을 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
[ 제형예 2] 액제
실시예 1-1의 혼합물 20 mg, 이성화당 10 g, 만니톨 5 g, 정제수 적량을 통상의 액제 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고, 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합하고 정제수를 가하여 전체 100 ml로 조절한 후, 갈색병에 충진하고 멸균시켜 액제를 제조하였다.
[ 제형예 3] 연고
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다 (중량%).
실시예 1-1의 혼합물................... 3.0
글리세린.............................. 8.0
부틸렌글리콜.......................... 4.0
유동파라핀........................... 15.0
베타글루칸............................ 7.0
카보머................................ 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드...... 3.0
스쿠알란.............................. 1.0
세테아릴 글루코사이드................. 1.5
소르비탄 스테아레이트................. 0.4
세테아릴 알코올....................... 1.0
밀납.................................. 4.0
방부제, 색소, 향료................... 적량
정제수............................... 잔량
[ 제형예 4] 화장수
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 화장수를 제조하였다 (중량%).
실시예 1-1의 혼합물...................... 0.1
글리세린................................. 3.0
부틸렌글리콜............................. 3.0
프로필렌글리콜........................... 3.0
카르복시비닐폴리머....................... 0.1
밀납..................................... 4.0
폴리솔베이트 60.......................... 1.5
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드......... 5.0
스쿠알란................................. 5.0
솔비탄세스퀴올레이트..................... 1.5
세테아릴 알코올.......................... 1.0
트로메타민............................... 0.2
방부제, 향료............................. 적량
정제수................................... 잔량
[ 제형예 5] 로션
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 로션을 제조하였다 (중량%).
실시예 1-1의 혼합물.........................1.00
다이에틸아스코빅애씨드........ .... ........1.00
시트르산나트륨..............................0.10
감초 엑기스.................................0.20
1,3-부틸렌글리콜............................3.00
정제수..................................... 잔량
[ 제형예 6] 크림
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 크림을 제조하였다 (중량%).
실시예 1-1의 혼합물...................... 0.1
글리세린................................. 3.5
부틸렌글리콜............................. 3.0
유동파라핀............................... 7.0
베타글루칸............................... 7.0
카보머................................... 0.1
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드......... 3.0
스쿠알란................................. 5.0
세테아릴 글루코사이드.................... 1.5
소르비탄 스테아레이트.................... 0.4
폴리솔베이트 60.......................... 1.2
트로메타민............................... 0.1
방부제, 향료............................. 적량
정제수................................... 잔량
[ 제형예 7] 비누
하기 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 비누를 제조하였다 (중량%).
실시예 1-1의 혼합물.................... 0.1
유지...................................적당량
수산화나트륨...........................적당량
염화나트륨.............................적당량
향료...................................소량
정제수.................................잔량
이상, 본 개시물의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시 태양일 뿐이며, 이에 의해 본 개시물의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 개시물의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.

Claims (12)

  1. 인삼 열매 및 녹용을 유효성분으로 포함하는 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 인삼 열매는 조성물 전체 중량을 기준으로 2 중량% 미만으로 포함된 것인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 녹용은 조성물 전체 중량을 기준으로 8 중량% 미만으로 포함된 것인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 인삼 열매 및 녹용의 혼합 중량은 조성물 전체 중량을 기준으로 5 중량% 이하인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 인삼 열매 및 녹용은 1 : 0.1 내지 10의 중량비로 혼합된 것인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  6. 제 5항에 있어서,
    상기 인삼 열매 및 녹용은 1 : 3 내지 7의 중량비로 혼합된 것인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 인삼 열매는 인삼 열매의 농축물인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 녹용은 녹용의 추출물인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  9. 제 8항에 있어서,
    상기 녹용의 추출물은 녹용의 열수 추출물인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  10. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 화장료 조성물인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  11. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
  12. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 건조증을 예방 또는 치료하거나 상처 또는 자외선에 의한 피부 손상을 예방 또는 치료하는 약학 조성물인, 피부 보습, 주름 개선 또는 상처 치유 촉진용 조성물.
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