KR20220112449A - 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물 - Google Patents
참꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 참꽃나무의 줄기, 잎, 가지 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 산화적 스트레스로부터 세포 사멸을 억제하여 세포의 생존율을 증가시키고, 미토콘드리아 DNA 합성 증가 및 기능 활성화를 통해 활성산소를 억제하여 피부개선에 효과가 이는 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 피부 개선용 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물에 관한 것이다.
피부는 노화 정도를 가장 먼저 판단할 수 있는 요소이므로 많은 사람들이 다양한 방법으로 피부 노화를 막기 위해 노력하고 있다. 특히 자외선, 스트레스, 환경 오염 물질 등을 통해 생성되는 활성산소 (Reactive Oxygen Species, ROS)는 피부노화에 가장 중요한 원인으로 꼽히며, 주름, 아토피, 피부염 등의 영향을 미친다. 따라서 기존의 화장료 조성물들은 항산화제를 활용하여 자유 라디칼과 병합하거나 중화하여 ROS에 의한 손상을 완화하는데 목적을 두고 있다.
한편, 외부로부터 자극을 받은 피부 세포는 이를 방어하기 위해 높은 에너지를 필요로 한다. 진피의 경우 주로 미토콘드리아에서 산화적 인산화 과정을 통해 에너지를 공급받는 것으로 알려져 있다. 에너지 생성이 감소하면 교원섬유와 탄력섬유의 합성 및 항산화 효소 합성에 필요한 에너지를 충분히 공급받지 못해 교원섬유와 탄력섬유의 발현을 감소시켜 피부 주름을 생성시킬 수 있다.
또한, 미토콘드리아 기능 이상으로 인해 활성산소종이 증가하는 경우, 이들 물질이 멜라닌 생성을 촉진하고, 색소침착을 유발하며 피부 내 단백질, 지방, 세포막, 핵산 등을 산화시켜 피부 노화를 더욱 촉진할 수도 있다.
더욱이 미토콘드리아 DNA는 세포의 핵 DNA와는 달리 자체적인 수선 기작(repair mechanism)이 없으며, DNA를 보호하는 역할을 하는 히스톤 단백질이 없기 때문에 상대적으로 손상되기 쉽다. 따라서 노화 및 활성산소로 인해 미토콘드리아 DNA 손상 및 기능 이상이 생기면, 에너지 생성이 감소되고, 동시에 전자 유출이 증가하여 활성 산소를 더 많이 생성하게 된다. 증가한 활성 산소는 다시 미토콘드리아를 표적으로 해 미토콘드리아의 기능 이상을 초래하여 과도한 활성산소 발생으로 이어진다 (Prahl, S., et al., 2008, 32.1-4: 245-255).
이러한 기술적 배경하에서, 미토콘드리아 보호 및 기능 활성화를 통해 미토콘드리아의 에너지 생성을 촉진하는 것이 산화적 스트레스를 저해하고, 피부 노화를 방지할 수 있는 방법으로 제시될 수 있다.
이에 본 발명의 목적은 참꽃나무천연 물질을 이용하여 친환경적이면서도, 산화적 스트레스로부터 세포 사멸을 억제하여 피부 세포를 보호하고, 피부 세포 내 미토콘드리아 DNA 합성 증가 및 기능 활성화를 통해 활성산소를 억제함으로써, 피부를 개선하는 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 추가적인 목적은 인체에 해가 없는 친환경적인 피부개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 인체에 해가 없는 친환경적인 피부개선용 건강기능성식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 피부개선이 항산화 및 항노화인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 조성물은 산화스트레스에 대한 피부 세포 보호용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 미토콘드리아의 보호 및 기능 활성화에 의한 피부 개선용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 피부 주름 개선용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 피부 활력 증진용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 활성산소종(ROS)의 감소에 의한 피부 개선용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 참꽃나무 추출물을 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~10% 중량%로 포함하는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 참꽃나무 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출되는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물이 화장료 조성물로 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 화장료 조성물이 수용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 화장료 조성물은 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도, 치크칼라 및 아이브로우 펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물이 건강기능성식품 조성물인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 건강기능식품 조성물은 캡슐, 정제, 과립, 분말 또는 음료 형태인 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 조성물은 산화적 스트레스로부터 세포 사멸을 억제하여 세포의 생존율을 증가시켜 세포 보호 효과를 나타내므로, 이에 따라서 피부 탄력, 주름 방지 및 노화 방지 효과를 나타낸다.
본 발명에 따른 조성물은 산화적 스트레스에 대하여 미토콘드리아 DNA 합성을 증가시키고, 주요 기능인 ATP 생성을 증가시켜 기능을 활성화시켜 미토콘드리아를 보호하고 기능을 활성화시켜 피부를 개선하는 효과가 있다.
또한 본 발명에 따른 조성물은 미토콘드리아의 주요 기능인 ATP 생성을 증가시킴으로서 피부 활력을 증가시키는 효과가 있다.
또한, 본 발명에 따른 조성물은, ROS 생성량을 감소시켜, 주름, 아토피, 피부염 등의 피부 문제를 개선시키는 효과를 나타낸다.
본 발명에 따른 조성물은 피부 세포 노화를 방지하는 효과를 나타낸다.
본 발명에 따른 조성물은 피부 세포에 악영향을 미치지 않는 안전성을 가지면서 항산화 효과 및 피부 세포 노화를 방지하므로 피부 외용제, 화장료 조성물 및 약학 조성물에 널리 적용될 수 있다.
도 1은 인간 정상 섬유아세포에 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 처리하여 세포 독성 여부를 MTT assay를 통해 확인한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 DMSO를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 2는 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 과산화수소에 대한 세포보호효과를 MTT assay를 통하여 확인한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 3은 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 미토콘드리아 DNA Copy 수를 real time PCR를 통하여 측정한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 4는 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 미토콘드리아 ATP 합성을 측정한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 5는 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 ROS 생성량을 DCF-DA를 통해 측정한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 2는 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 과산화수소에 대한 세포보호효과를 MTT assay를 통하여 확인한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 3은 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 미토콘드리아 DNA Copy 수를 real time PCR를 통하여 측정한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 4는 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 미토콘드리아 ATP 합성을 측정한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
도 5는 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물이 처리된 인간 정상 섬유아세포의 ROS 생성량을 DCF-DA를 통해 측정한 결과이다. (대조군으로는 어떠한 처리도 하지 않은 인간 정상 섬유아세포를, 음성대조군으로는 과산화수소만을 처리한 인간 정상 섬유아세포를, 양성대조군으로는 과산화수소와 10μM의 Ascorbic acid를 처리한 인간 정상 섬유아세포를 사용하였다.)
이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예를 통해 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 의해 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 조성물은 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물이다.
본 발명에 있어서 용어 "피부 개선용"이란, 피부 보호 및 피부 상태 개선, 피부 미백, 피부 노화 및 주름의 예방 또는 개선, 피부 보습, 피지분비억제, 여드름개선, 모공축소, 피부보호 및 피부의 염증 반응의 완화, 항염, 피부 장벽 기능, 보습 개선, 피부 활력 증진, 자외선으로부터의 피부 보호, 항산화 및 항노화 등을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명에서 "피부"는 얼굴 뿐만 아니라, 두피, 전신도 포함되는 개념이다.
여기서 "유효성분으로 함유하는"은 피부 개선 효과를 나타낼 수 있는 정도의 참꽃나무 추출물을 포함한다는 것을 의미한다.
참꽃나무(Rhododendron weyrichii Maxim.)는 쌍떡잎식물 진달래목 진달래과의 낙엽 활엽관목이다. 높이는 3~6cm이다. 잎은 가지끝에서 세개씩 모여나며 넓은 달걀 모양이다.
상기 참꽃나무는 꽃, 종자, 뿌리, 잎, 줄기 등 모두 사용할 수도 있으나, 특히 뿌리의 사용이 가능하며, 특히 건조한 후 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면 상기 피부개선은 항산화 및 항노화인 것이 바람직하다.
본 발명에서 용어 "항산화"란 대사 과정을 통해 생성된 활성 산소가 축적디면 조직 세포의 노화, 퇴행성 질환 등이 유발되는데 이러한 활성 산소의 생성을 억제하는 것을 말한다.
본 발명에서 용어 "노화"란 피부 내 또는 피부 외 요인으로 인하여 세포 기능이 저하되어 피부 주름 발생, 피부 탄력 저하, 피부 건조, 색소 침착, 또는 피부 재생력 저하 등을 말하며, "항노화"란 노화를 방지하는 것을 말한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 산화스트레스에 대한 피부 세포 보호용인 것이 바람직하다.
본 발명에서 용어 "산화스트레스"란 체내 활성산소가 많아져 생체 산화 균형이 무너진 상태를 말한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 미토콘드리아의 보호 및 기능 활성화에 의한 피부 개선용인 것이 바람직하다.
본 발명에서 용어 "미토콘드리아의 보호 및 기능 활성화"란 미토콘드리아의 DNA의 합성 및/또는 미토콘드리아의 ATP 합성을 통해 미토콘드리아를 보호하고 그 기능을 지속적으로 유지 및 활성화시키는 것을 말한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 피부 주름 개선용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 피부 활력 증진용인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 활성산소종(ROS)의 감소에 의한 피부 개선용인 것이 바람직하다.
본 발명에서 용어 "활성산소종(ROS)"란 화학적으로 활성화된, 즉 불안정한 산소를 포함하는화학물질들을 말하며, 일반적으로 산소 대비 화학적 반응성이 높은 산소를 포함하는 분자들의 총칭으로, 생체 조직을 공격하고 세포를 손상시키는 산화력이 강한 산소이다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 참꽃나무 추출물을 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~10% 중량%을 포함하는 것이 바람직하다.
참꽃나무 추출물이 0.0001중량% 미만으로 포함되면, 항산화 및 항노화 효능의 발휘가 나타나기 어려울 수 있으며, 10중량% 이상 포함되는 경우 변색, 변취 등 제형의 안정성이 저하되어 항산화 및 항노화 효과가 미미해질 수 있으며, 화장료 등으로 제조 시 향이 좋지 않을 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 본 발명에서 추출 방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 추출, 열수 추출 등이 있다. 여기서, 열수추출의 경우, 열탕증류기에서 8~48시간동안, 80~ 100℃ 로 가열하여 열수 추출물을 얻는다. 냉수 추출의 경우, 예컨대, 냉수 (15-25℃)에 상기 조직 배양물 자체 또는 그것의 건조된 분말을 혼합하여 3일동안 추출하여 냉수추출물을 얻는다.
또는, 물, 유기 용매, 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출하는 방법으로 제조될 수 있다. 추출한 액은 바로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용하며 생약의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서,상기 참꽃나무 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출되는 것이 바람직하다.
특히, 본 발명에 있어서는 에탄올 추출물, 바람직하게는 20-80% 에탄올 추출물, 일 구체예로써 80% 에탄올 추출물이 바람직하며, 추출 방법은 80% 에탄올에 섞은 후 3일동안 교반하여 얻는다. 본 발명에 있어서, 상기 추출물은 농축, 또는 희석하여 사용할 수 있고, 추출물의 증류액을 사용할 수도 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물이 화장료 조성물로 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 화장료 조성물이 수용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 화장료 조성물은 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도, 치크칼라 및 아이브로우 펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물이 건강기능성식품 조성물인 것이 바람직하다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 건강기능식품 조성물은 캡슐, 정제, 과립, 분말 또는 음료 형태인 것이 바람직하다.
상기 화장료 조성물에 있어서는, 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서, "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다.
싱기 담체는 본 발명의 화장료 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 90 중량% 내지 약 99.99 중량 %로 포함될 수 있다. 그러나 상기 비율은 본 발명의 화장료 조성물이 제조되는 후술한 바의 제형에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴, 목 등)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
본 발명의 일 구현예로써, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글키롤, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 에탄올, 트리에탄올아민 등을 포함할 수 있으며, 방부제, 항료, 착색료, 정제수 등을 필요에 따라 미량 포함할 수 있다.
또한, 종래에 잘 알려져 있는 생리활성성분이나 다른 태좌세포 배양물 또는 추출물을 더 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서의 피부는 얼굴뿐만 아니라, 두피, 전신도 포함되는 개념으로, 이러한 두피에 적용될 수 있는 화장료 조성물로써, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 발모제 등이 있고, 전신에 적용될 수 있는 바디클렌져 등의 용도로써 다양한 형태로 제조될 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제조방법은 전술한 제조방법에 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 제조방법을 일부 변형시킨 방법으로도 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일,염료,안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따라 본 발명의 건강음료 조성물은 지시된 비율로 필수성분으로서 상기 분획물을 함유하는 외에는 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 또한, 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 ~ 20 g, 또는 약 5 ~ 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 조성물 100중량부당 0 ~ 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하 본 발명을 하기 실시예에 따라 상세히 설명한다. 단 하기 실시예는 본 발명을 보다 상세히 설명하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위를 제한하는 방법으로 해석되어서는 안된다.
실시예 1: 참꽃나무 추출물의 제조
건조된 참꽃나무를 분쇄하여 분말화 한 후, 2 배량의 80% 에탄올에 24시간 이상 침지하여 유효성분을 추출한다. 이렇게 추출된 추출물을 여과지에 거른 다음 회전감압농축기로 용매를 제거하여 추출물을 제조하였다.
[시험예 1: 참꽃나무 추출물의 세포 독성 평가]
본 시험예에서는 참꽃나무 추출물의 세포 독성 여부를 확인하고자 농도가 다른 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 인간 정상 섬유아세포인 CCD986sk에 처리하여 세포생존능력을 측정하였다.
인간 정상 피부 섬유아세포(CCD-986sk)를 1X104 cells/well 농도로 96-well plate에 분주한 후 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 모두 제거 후, 무혈청배지에 실시예 1에 따라 제조된 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 각각 0, 10, 50, 100, 200 μg/mL 로 희석하여 제조된 시료를 각 웰 당 100 μL씩 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 그 후, 각 well 당 0.5 mg/ml 농도의 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 용액 100 ㎕를 처리하여 3시간동안 반응시킨 후 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO 200 ㎕로 용해시켜 micro-plate reader를 이용하여 540 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 아무것도 처리하지 않은 well의 세포 생존율을 100%으로 하여 정상 대조군 대비 시료 처리군의 세포 생존율을 계산하여 결과를 도 1에 나타내었다.
실험결과, 참꽃나무 추출물을 처리한 인간정상섬유아세포 중, 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물 100 μg/mL 에서 각각 유의적인 세포독성효과가 확인되지 않았다 (도 1). 따라서 100 μg/mL 농도의 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 선택하여 하기 실험에 사용하였다.
[시험예 2: 참꽃나무 추출물의 세포 보호 효과 확인]
본 시험예에서는 참꽃나무 추출물의 산화 스트레스에 의한 세포 손상 보호 효과를 MTT법을 변형하여 측정하였다. 인간 정상 피부 섬유아세포(CCD-986sk)를 1X104 cells/well 농도로 96-well plate에 분주한 후 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거 후 무혈청배지에 실시예 1에 따라 제조한 추출물을 100 μg/mL 농도로 희석한 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 배양이 끝난 후, 세포 내 산화스트레스를 유발하기 위하여 800 μM의 과산화수소 (hydrogen peroxide, H2O2)를 3시간 동안 처리하였다. 3시간 후, 각 well 당 0.5 mg/ml 농도의 MTT용액 100 ㎕를 처리하여 3시간동안 반응시킨 후 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO 100 ㎕로 용해시켜 micro-plate reader를 이용하여 540 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 정상 대조군으로는 시료와 과산화수소를 처리하지 않은 well을 사용하여 정상 대조군의 세포 생존율을 100%으로 하여 정상 대조군 대비 과산화수소만 처리군 (음성대조군)과 시료 및 과산화수소 처리군, Ascorbic acid 10 μM 처리군의 세포 생존율을 계산하여 결과를 도 2에 나타내었다.
실험결과, 음성대조군의 경우, 과산화수소 (H2O2)에 의한 산화스트레스 증가로 세포 생존율이 64.5 %로 감소하였으나, Ascorbic acid 10 μM을 비롯한 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 처리한 인간정상섬유아세포의 경우, 과산화수소 (H2O2)에 의해 감소한 세포 생존률이 회복되어 세포 보호 효과를 나타내었다. 도 2는 참꽃나무 가지 추출물, 참꽃나무 잎 추출물이 100 μg/mL 농도로 처리된 인간정상섬유아세포의 세포보호 효과를 확인한 결과이다.
[시험예 3: 참꽃나무 추출물이 미토콘드리아의 DNA 합성에 미치는 영향 확인]
본 시험예에서는 참꽃나무 추출물이 미토콘드리아의 DNA 합성에 어떠한 영향을 미치는지 확인하고자 하였다. 인간 정상 피부 섬유아세포(CCD-986sk)를 1X105 cells/well 농도로 6-well plate에 분주한 후 37
, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거 후 무혈청배지에 실시예 1에 따라 제조한 추출물을 100 μg/mL 농도로 희석한 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물 각각을 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 배양이 끝난 후, 세포 내 산화스트레스를 유발하기 위하여 100 μM의 과산화수소 (hydrogen peroxide, H2O2)를 1시간 동안 처리하였다. 1시간 후, 1
PBS로 세척한 다음 게놈 DNA를 추출하였다. 추출한 DNA 50ng을 Power SYBR Green Supermix® (Thermo Fisher Scientific) 및 프라이머(COX Ⅱ F: CAGGCCGACTAAATCAAGCAAC, R: CTAGGACAATGGGCATAAAGCT, Cyclophilin A F: TTCCTCCTTTCACAGAATTATTCCA, R: CCGCCAGTGCCATTATGG)를 이용하여 정량적 실시간 PCR을 수행하였다.
세포 내 미토콘드리아 수는 미토콘드리아에서 합성되는 COX Ⅱ (Cytochrome oxidase subunit Ⅱ) 양을 핵에서 만들어지는 cyclophilin A의 양으로 나누어 미토콘드리아 DNA 카피 수를 계산함으로써 측정하였다. 정상 대조군으로는 시료와 과산화수소를 처리하지 않은 미토콘드리아 DNA 카피 수를 1로 하여 정상 대조군 대비 과산화수소만 처리군 (음성대조군)과 시료 및 과산화수소 처리군의 미토콘드리아 DNA Copy 수를 계산하여 결과를 도 3에 나타내었다.
실험 결과, 미토콘드리아 DNA(mtDNA)의 카피 수가 과산화수소를 처리한 음성대조군의 경우 정상 대조군 대비 0.49-fold 로 감소하였다. 또한, Ascorbic acid 10 μM을 처리한 실험군의 경우, 정상 대조군 대비 0.62-fold로 음성대조군과 비슷한 수준으로 감소하였다. 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물 100 μg/mL 농도의 시료를 각각 처리한 경우, 미토콘드리아 DNA(mtDNA) 카피 수는 정상 대조군 대비과 동일한 수준으로 증가하였다. 미토콘드리아 DNA(mtDNA) 카피 수의 증가는 미토콘드리아 생성이 증가되었음을 직접적으로 보여주는 지표로 10 μM의 Ascorbic acid(Vit C)는 미토콘드리아 DNA 합성을 유의미하게 증가시키지 못하였으나 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물의 경우, 미토콘드리아의 생성을 증가시킨다는 것을 확인하였다.
[시험예 4: 참꽃나무 추출물이 미토콘드리아의 ATP 합성에 미치는 영향 확인]
본 시험예에서는 미토콘드리아의 주 기능은 ATP합성으로, 참꽃나무 추출물이 미토콘드리아 내의 ATP 합성에 미치는 영향을 확인하고자 하였다. 사람의 정상섬유아세포인 CCD-986sk 세포를 12-웰 플레이트에 5X104 cells/well의 농도로 접종하고, 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 배양 배지를 제거하고, 혈청이 포함되지 않은 배지에 실시예 1에 따라 제조된 추출물을 각각 100 μg/mL 농도로 희석한 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물 각각을 well 당 1 ml씩 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 그 후, 100 μM의 과산화수소를 1시간 동안 처리한 세포를 PBS로 세척하고, 100 ℃의 증류수를 가해 여러 번 섞어주어 세포를 수거하였다. 수거한 세포를 4 ℃에서 5분간 12,000 xg로 원심분리하여 얻은 상층액 10 ㎕와 미리 준비한 ATP 어세이 혼합물 90 ㎕ 넣고 흡광값을 측정하였다. 정상 대조군으로는 시료와 과산화수소를 처리하지 않은 well을 사용하여 정상 대조군의 세포 생존율을 100%으로 하여 정상 대조군 대비 과산화수소만 처리군 (음성 대조군)과 시료 및 과산화수소 처리군의 ATP 양을 계산하여 결과를 도 4에 나타내었다.
실험결과, 인간정상섬유아세포에서 무첨가 대비 과산화수소 (H2O2)에 의해 65.8%로 감소되었던 ATP 합성 정도가 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 처리한 결과, ATP 생성 정도가 정상 대조군의 수준보다 증가한 것을 확인하였다.
[시험예 5: 참꽃나무 추출물이 ROS 생성에 미치는 영향 확인]
세포 내에 생성되는 활성 산소는 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCF-DA)를 사용하여 측정하였다. H2DCF-DA는 지용성 물질로, 세포 안으로 쉽게 투과하여 esterase에 의해 가수분해되어 형광물질인 DCF (dichlorofluorescein)를 생성한다. 따라서 이를 측정함으로써 활성산소 생성량을 측정할 수 있다. 물질 처리 및 과산화수소(H2O2) 처리를 통해 얻어진 세포를 DPBS로 두 번 세척 후 25 μ M의 농도로 희석한 H2DCF-DA를 100μL 가하고 37℃, 5% CO2 조건에서 45 min 간 배양 후, 초기에 활성산소종으로 산화된 DCF의 형광 강도를 형광플레이트리더(Ex = 485 nm, Em = 530 nm)로 측정하였다. 과산화수소만 처리한 well (음성 대조군)의 ROS 생성 정도를 100%로 하여 시료와 과산화수소 모두 처리하지 않은 군과 시료 및 과산화수소 처리 군의 ROS 생성 양을 계산하여 도 5에 나타내었다.
여기서 상기 시료는 실시예 1에 따라 제조된 추출물을 각각 100 μg/mL 농도로 희석한 참꽃나무 줄기, 잎, 가지 추출물을 말한다.
실험 결과, 인간정상섬유아세포에서 과산화수소 (H2O2)에 의해 증가되었던 ROS 생성 정도가 아무것도 처리하지 않은 무 첨가 대조 군과 비슷한 수준인 62.1 %, 61.3 %, 64.7 % 로 감소한 것을 확인하였다.
시험예 1, 2, 3, 4 및 5의 실험 결과에 따르면, 본 발명에 따른 참꽃나무 추출물을 처리 시 과산화수소 (H2O2)로부터 세포를 보호, 미토콘드리아 DNA의 생합성 증가, 미토콘드리아의 주된 기능인 ATP 합성, 그리고 ROS 생성을 감소시키는 효과가 있음을 확인하였다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 피부 내 산화스트레스로 유도되는 피부 항산화 및 노화를 효과적으로 개선시킬 수 있음을 기대할 수 있다.
이하, 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여, 참꽃나무 추출물을 이용한 여러 제형 예를 조성하여 제시한다. 그러나 이들 제형예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 제형이 이들 제형예에만 국한되지 않는 다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명한 것이다.
| 성분명 | 함량 (중량%) |
| 참꽃나무 추출물 | 0.1 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 에탄올 | 5.0 |
| 폴리옥시에틸렌노닐페닐에테르 | 0.5 |
| 향료 | 적량 |
| 방부제 | 적량 |
| 정제수 | 적량 |
| 성분명 | 함량 (중량%) |
| 참꽃나무 추출물 | 0.1 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 구연산 | 0.1 |
| 에탄올 | 10.0 |
| 폴리옥시에틸렌올레일에테르 | 1.0 |
| 소르비톨 | 2.0 |
| 향료 | 적량 |
| 벙부제 | 적량 |
| 정제수 | 적량 |
| 성분명 | 함량 (중량%) |
| 참꽃나무 추출물 | 0.1 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 1,3-부틸렌글리콜 | 8.0 |
| 스쿠알란 | 10.0 |
| 모노올레인산폴리옥시에틸렌소르비탄 | 2.0 |
| 트리에탄올아민 | 1.5 |
| 글리세릴스테아레이트 | 0.5 |
| 스테아릴글리시레티네이트 | 0.2 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
| 아르기닌 | 0.1 |
| 향료 | 적량 |
| 방부제 | 적량 |
| 정제수 | 적량 |
| 성분명 | 함량 (중량%) |
| 참꽃나무 추출물 | 0.1 |
| 글리세린 | 5.0 |
| 스테아린산 | 8.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 자기유화형 모노스테아린산 글리세린 | 2.5 |
| 모노스테아린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄 | 1.5 |
| 프로필렌 글리콜 | 4.0 |
| 스테아릴글리시레티네이트 | 0.2 |
| 바셀린 | 2.0 |
| 산화방지제 | 적량 |
| 향료 | 적량 |
| 방부제 | 적량 |
| 정제수 | 적량 |
| 성분명 | 함량 (중량%) |
| 참꽃나무 추출물 | 0.5 |
| 구연산 | 10 |
| 올리고당 | 1.0 |
| 매실농축액 | 0.02 |
| 타우린 | 0.01 |
| 향료 | 적량 |
| 방부제 | 적량 |
| 정제수 | 적량 |
Claims (15)
- 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 피부개선이 항산화 및 항노화인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 산화스트레스에 대한 피부 세포 보호용인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 미토콘드리아 기능 유지 및 기능 활성화에 의한 피부 개선용인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 주름 개선용인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 활력 증진용인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 조성물은 활성산소종(ROS)의 감소에 의한 피부 개선용인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제 1항에 있어서,
상기 조성물은 참꽃나무 추출물을 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~10% 중량%로 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 참꽃나무 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 조성물. - 제9항에 있어서,
상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 조성물. - 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료조성물.
- 제 11항에 있어서,
상기 화장료 조성물이 수용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물. - 제11항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 수중유형 및 유중수형 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이섀도, 치크칼라 및 아이브로우 펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물. - 제 1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부개선용 건강기능성식품 조성물.
- 제 14항에 있어서,
상기 건강기능식품 조성물은 캡슐, 정제, 과립, 분말 또는 음료 형태인 것을 특징으로 하는 피부개선용 건강기능식품 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210016018A KR20220112449A (ko) | 2021-02-04 | 2021-02-04 | 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210016018A KR20220112449A (ko) | 2021-02-04 | 2021-02-04 | 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220112449A true KR20220112449A (ko) | 2022-08-11 |
Family
ID=82803117
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210016018A KR20220112449A (ko) | 2021-02-04 | 2021-02-04 | 참꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부개선용 조성물, 이를 포함하는 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20220112449A (ko) |
-
2021
- 2021-02-04 KR KR1020210016018A patent/KR20220112449A/ko unknown
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