KR20210071302A - 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 조성물 - Google Patents
누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선 및 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
보다 상세하게는 본 발명의 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물은 NMDA 수용체 저해 효과, 산화질소 생성 저해 효과, 세포 증식 효과 및 아밀로이드-베타 생성 저해 효과가 각각의 단일 추출물에 비하여 우수하므로 인지능력 개선 및 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
보다 상세하게는 본 발명의 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물은 NMDA 수용체 저해 효과, 산화질소 생성 저해 효과, 세포 증식 효과 및 아밀로이드-베타 생성 저해 효과가 각각의 단일 추출물에 비하여 우수하므로 인지능력 개선 및 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 누에 (Bombyx mori L.), 감초 (Glycyrrhiza uralensis Fisch,) 및 수수 (Sorghum bicolor (L.) Moench) 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 조성물에 관한 것이다.
기억에 대한 전반적인 기능을 인지능이라 하는데 이러한 인지능력의 저하는 학습저하 및 삶의 질 저하 등을 초래하기 때문에 현대사회에 큰 문제로 대두 되고 있다. 현재 뇌 손상 및 치매, 알츠하이머 등과 같은 인지능 저하에 대한 질병이 현대사회의 급격한 고령화로 증가하는 추세를 보이고 있다. 이와 같은 질병들은 자기유지나 사회생활에 심한 장애를 초래할 정도로 기억력, 사고력, 이해력, 계산능력, 학습능력, 언어 및 판단력 등 전체적이고 복합적인 지적 기능의 저하가 발생하게 된다.
퇴행성 뇌질환(degenerative brain diseases)은 노화에 따른 신경퇴화, 유전적 요인 등으로 인해 뇌신경세포가 사멸하거나, 뇌신경세포의 기능이 상실되어 발병하는 것으로 알려져 있다. 퇴행성 뇌질환 발병에 대한 정확한 원인은 밝혀지지 않았으며 원인 규명을 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 퇴행성 뇌질환으로 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 헌팅톤병(Huntington's disease), 다발성경화증 (Multiple sclerosis) 및 근위축성 측색 경화증(Amyotrophic lateral sclerosis) 등이 알려져 있다.
최근 노인 인구가 증가하면서 인지능력 저하 및 퇴행성 뇌질환에 대한 문제가 심각한 사회문제로 대두되고 있으며 이에 인지능력 개선 및 알츠하이머병을 비롯한 퇴행성 뇌질환에 대하여 해당 분야에서는 최근 인체 적합성을 가진 천연물 소재를 이용한 치료제 개발이 발전 중에 있으며, 또한 부작용이 적은 신소재의 개발이 필요한 실정이다.
한편, 누에(Bombyx mori L.)는 한자로 잠(蠶)이라고 하며, 누에나방(Bombyx mori, 문화어: 누에나비)의 애벌레로서, 알깨기 시작 후 10 내지 14일만 알에서 부화한 누에는 1령 누에 또는 개미누에라 하여, 까맣고 털이 많고 약 5 mm 정도로 개미와 비슷한 형태가 특징이며, 3령이 지나야지만 누에 특유의 형태가 나타난다. 누에가 5령이 된지 5 내지 6일째부터 토사구에서 실을 뽑아 고치를 짓게 되는데 고치 상태에서 12 내지 13일이 지나면 나방이 되며, 양잠산업에서는 고치를 이용하여 실크를 생산하고 있다. 동의보감에 나와 있는 천연 자양 강정 식품인 누에 번데기는 한방에서는 잠용자(蠶踊子)라고 부르며, 성질이 고르고 맛이 달며 독이 없어, 풍과 여윈 것을 다스린다고 하였다. 최근 국내의 누에와 관련된 산업 시장은 전통적인 양잠 산업인 누에고치 생산에서 벗어나, 누에를 소재로 하는 기능성 식품과 천연물의약품과 관련된 기술개발이 활발하게 이루어지고 있는데, 동결건조로 제조된 누에분말은 1995년부터 상품화되기 시작하였으며, 5령3일 누에의 알코올 추출물을 생강, 계피, 타우린과 함께 혼합한 기능성 항당뇨 음료(한국등록특허 제10-0354151호), 누에 번데기 유래의 지방산을 유효성분으로 하는 고지혈증 예방 및 치료 조성물(한국등록특허 제10-0732727호), 누에 체액 추출물을 이용한 건강기능식품(한국공개특허 제2010-0020463호) 등이 대표적으로 개발되어 있으며, 혈당조절제, 면역증강, 항피로 등 효능으로 누에분말을 주성분으로 한 건강기능식품이 다수 출시되었다.
감초(Glycyrrhiza uralensis Fisch,)는 콩과(fabaceae)에 속하는 다년생 초본식물로 주로 뿌리를 이용하며 적갈색 또는 암갈색을 나타내고, 특유의 단맛이 있다. 감초의 주요 성분으로는 글리시리진(glycyrrhizin), 사포닌(saponin), 플라보노이드(flavonoid), 다당류(polysaccharides) 및 아스파라긴산(asparagine)이 있으며, 약간의 호모나탈로인(homonataloin), 레진(resins) 및 섬유질(fibers)을 함유하고 있다.
한편 수수(Sorghum bicolor (L.) Moench)는 외떡잎식물 벼목 화본과의 한해살이풀로 쌀, 보리, 밀, 옥수수에 이어 중요한 잡곡의 하나이며, 세계의 많은 지역에서 주요 곡물 식량 작물이다. 그리고 아시아 및 아프리카에서는 식량자원 및 민간요법으로서 특히 중요하다 (Ryu et al., 2006, Korean Journal of Food and nutrition, 19, 176182). 수수는 사람의 건강에 상당히 영향을 미치는 것으로 알려진, 탄닌, 석탄산, 안토시아닌, 식물 스테롤, 및 폴리코사놀(policosanols) 같은 2차대사산물이 풍부하다(Awika & Rooney, 2004, Phytochemistry, 65, 1199-1221).
본 발명자들은 인지능력 개선 및 퇴행성 뇌질환 예방, 치료제를 개발하기 위하여 연구하던 중 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물이 NMDA 수용체 저해 효과, 산화질소 생성 저해 효과, 세포 증식 효과가 우수함을 확인하여 상기 혼합물을 인지능력 개선 및 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있음을 밝혀 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 개선용 식품조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 식품조성물을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 개선용 식품조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 식품조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물은 우수한 NMDA 수용체 저해 효과, 산화질소 생성 저해 효과, 세포 증식 효과 및 아밀로이드-베타 생성 저해 효과를 가진다.
도 1은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 BV2세포에서의 산화질소 저해 활성을 나타낸 도이다.
도 2는 누에, 감초 및 수수 추출물의 BV2세포에서의 세포 증식 효과를 나타낸 도이다.
도 3은 누에, 감초 및 수수 각각의 추출물과 혼합 171 시료의 아밀로이드-베타 생성 저해 효과를 나타낸 도이다.
도 2는 누에, 감초 및 수수 추출물의 BV2세포에서의 세포 증식 효과를 나타낸 도이다.
도 3은 누에, 감초 및 수수 각각의 추출물과 혼합 171 시료의 아밀로이드-베타 생성 저해 효과를 나타낸 도이다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
또한, 본 발명에서 사용되는 용어(terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는 달리 정의되지 않는 이상 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.
본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 퇴행성 뇌질환은 알츠하이머병(Alzheimer disease), 픽병(Pick disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 루게릭병(amyotrophic lateral sclerosis) 및 헌팅턴병(Huntington's disease) 중에서 선택된 어느 하나일 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 감초 추출물은 감초의 지상부 또는 뿌리 중에서 선택된 어느 하나의 부위를 사용하여 추출될 수 있으나, 상술한 부위들 중에서도 감초의 뿌리로부터 추출된 추출물이 NMDA 수용체 저해 효과, 산화질소 생성 저해 효과 및 세포 증식 효과가 더 우수할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 수수 추출물은 수수의 지상부 또는 종자 중에서 선택된 어느 하나의 부위를 사용하여 추출될 수 있으나, 상술한 부위들 중에서도 수수의 종자로부터 추출된 추출물이 NMDA 수용체 저해 효과, 산화질소 생성 저해 효과 및 세포 증식 효과가 더 우수할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "추출물(extract)"은 누에, 감초 및 수수를 적절한 추출용매로 추출하고 용매를 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 누에, 감초 및 수수 추출물은 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 "추출물"은 적절한 용매를 이용하여 누에, 감초 및 수수로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다. 상기 누에, 감초 및 수수로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.
본 발명의 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 추출물은 상기한 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말상태로 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 누에 추출물, 감초 추출물 및 수수 추출물의 혼합물은 누에, 감초 및 수수 추출물을 수득한 후 혼합한 혼합물이거나 누에, 감초 및 수수를 혼합한 후 추출한 혼합물인 것을 특징으로 할 수 있으며, 바람직하게는 누에, 감초 및 수수로부터 각각의 추출물을 수득한 후 혼합한 혼합물이다.
상기 누에 추출물, 감초 추출물 및 수수 추출물의 제조 시 침지 온도는 10 내지 100℃, 바람직하게는 상온 또는 80 내지 90℃ 이다.
본 발명에 있어서, 상기 누에 추출물, 감초 추출물 및 수수 추출물의 혼합물은 누에 추출물, 감초 추출물 및 수수 추출물을 1 : 7~10 : 1의 중량비로 혼합한 것임을 특징으로 할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 “조성물(composition)”은 본 발명의 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물에 희석제 또는 담체와 같은 다른 화학 성분들을 혼합한 혼합물을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 “담체(vehicle)”는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다. 예를 들어, 디메틸술폭사이드(DMSO)는 생물체의 세포 또는 조직 내로의 많은 유기 화합물들의 투입을 용이하게 하는 통상 사용되는 담체이며, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에서 사용되는 용어 “희석제(diluent)”는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물로 정의된다. 버퍼 용액에 용해되어 있는 염은 당해 분야에서 희석제로 사용된다. 통상적으로 사용되는 버퍼 용액은 포스페이트 버퍼 식염수이며, 이는 인간 용액의 염상태를 모방하고 있기 때문이다. 버퍼 염은 낮은 농도에서 용액의 pH를 제어할 수 있기 때문에, 버퍼 희석제가 화합물의 생물학적 활성을 변형하는 일은 드물다.
본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 퇴행성 뇌질환의 발생 및 이로 인한 합병증을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용된 용어 "치료"란 상기 약학적 조성물의 투여에 의해 퇴행성 뇌질환의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
본 발명의 약학 조성물에는 유효성분 이외에 보조제(adjuvant)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 보조제는 당해 기술분야에 알려진 것이라면 어느 것이나 제한 없이 사용할 수 있으나, 예를 들어 프로인트(Freund)의 완전 보조제 또는 불완전 보조제를 더 포함하여 그 면역성을 증가시킬 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분을 약학적으로 허용된 담체에 혼입시킨 형태로 제조될 수 있다. 여기서, 약학적으로 허용된 담체는 제약 분야에서 통상 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 포함한다. 본 발명의 약학 조성물에 이용할 수 있는 약학적으로 허용된 담체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 그러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카르보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 일반적으로 사용되는 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수용성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 개체에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식이 예상될 수 있는데, 예를 들면 경구, 정맥, 근육, 피하, 복강내 주사에 의해 투여될 수 있다.
상기 약학 조성물은 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화될 수 있다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질, 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/ 또는 폴리에틸렌 글리콜)를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 제형은 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.
비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제제이며, 주사용 제제의 용매로서 물, 링거액, 등장성 생리식염수 또는 현탁액을 들 수 있다. 상기 주사용 제제의 멸균 고정 오일은 용매 또는 현탁 매질로서 사용할 수 있으며 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있다. 상기 주사용 제제는 올레산과 같은 지방산을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에서 인지능력 개선용 약학적 조성물은 기억력 장애 개선 또는 기억력 증진용 조성물과 동일한 의미로 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 개선용 식품조성물을 제공한다.
상기 식품조성물의 종류에는 통상적으로 제조 및/또는 판매되는 것이라면 특별히 제한하지 않는다. 예를 들면, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있고 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
상기 건강 음료 조성물은 본 발명에 따른 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 함유하는 것 외에는 액체성분에는 특별한 제한은 없으며 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
통상적으로, 건강기능식품에 포함되는 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1~50 중량%, 바람직하게는 1~40 중량%로 포함될 수 있다.
또한, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수도 있다.
또한, 본 발명은 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 식품조성물을 제공한다.
본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 '%'는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (w/w) %, 고체/액체는 (w/v) %, 그리고 액체/액체는 (v/v) %이다.
이하 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 기술적 사상의 내용과 범위를 쉽게 설명하기 위한 예시일 뿐, 이에 의해 본 발명의 기술적 범위가 한정되거나 변경되는 것은 아니다. 또한 이러한 예시에 기초하여 본 발명의 기술적 사상의 범위 안에서 다양한 변형과 변경이 가능함은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
<실시예 1>
누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 제조
<1-1> 누에 추출물의 제조
누에를 상압 85℃에서 100% 주정으로 환류추출장치를 이용하여 추출한 후 여과하고 여과된 추출액을 감압농축장치를 이용하여 용매를 제거하여 누에 추출물을 수득하였다.
<1-2> 감초 추출물의 제조
감초를 상압, 상온 조건에서 50% 주정으로 추출한 후 여과하고 여과된 추출액을 감압농축장치를 이용하여 용매를 제거하였고 추출물 중에 남은 수분을 동결건조기를 사용하여 제거하여 감초 추출물을 수득하였다.
<1-3> 수수 추출물의 제조
수수를 상압 85℃에서 50% 주정으로 환류추출장치를 이용하여 추출한 후 여과하고 여과된 추출액을 감압농축장치를 이용하여 용매를 제거하였고, 상기 수득한 추출액 중에 남은 수분을 동결건조기를 사용하여 제거하여 수수 추출물을 수득하였다.
<1-4> 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 제조
상기 실시예 1-1, 1-2 및 1-3에서 제조한 각 추출물을 하기 표 1의 중량비에 따라 조성하여 혼합물을 제조하였다.
| 시료명 | A 비율 | B 비율 | C 비율 |
| 혼합 151 | 1 | 5 | 1 |
| 혼합 111 | 1 | 1 | 1 |
| 혼합 121 | 1 | 2 | 1 |
| 혼합 171 | 1 | 7 | 1 |
| 혼합 1102 | 1 | 10 | 2 |
<실험예 1>
누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 NMDA 수용체에 대한 저해 효과 확인
4°C에서 1 mg 단백질에 해당하는 뇌피질막 균질액을 5 nM [3H]CGP39653와 함께 5mM Tris-HCl(pH7.7), 10mMEDTA-Tris와 함께 본 발명의 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 포함 또는 포함하지 않는 조건에서 60 분간 배양하였으며, 비특이적 결합을 100 μM L-glutamate 존재 하에 결정하였다. 배양 후, 시료를 진공 하에 glass fiber filters (GF/B, Whatman)로 신속히 여과하고, 48-sample cell harvester (Brandel)를 사용하여 ice-cold incubation buffer로 여러 차례 세척한 후 여과액은 건조시키고 a scintillation cocktail (Formula 989, Packard)을 사용하여 scintillation counter (LS series, Beckman)에서 radioactivity를 계산하였다. 상기 실험 결과는 control radioligand specific binding에 대한 % 저해율로서 나타내었으며 standard reference compound는 CGS 19755을 사용하였다.
그 결과 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 누에, 감초(원감), 수수 단일 추출물의 NMDA 수용체 저해효과는 각각 19.5%, 26.1% 및 12.4% 로 나타났으며, 이들의 혼합물은 25.2~36.7%의 저해효과를 보여 혼합물의 NMDA 수용체 저해 효과가 단일 추출물보다 우수함을 확인하였다.
특히 누에, 감초 및 수수 추출물의 중량비가 1:7:1인 혼합 171 시료 및 누에, 감초 및 수수 추출물의 중량비가 1:10:2인 혼합 1102 시료의 NMDA 수용체 저해효과가 우수한 것으로 나타났다.
| 시료명 | 사용부위 | 처리농도 (㎍/㎖) | NMDA 수용체 저해능 (%) |
| 누에 | - | 50 | 19.5 ± 1.6d |
| 감초(원감) | 뿌리 | 50 | 26.1 ± 2.9bc |
| 수수 | 종자 | 50 | 12.4 ± 3.2e |
| 혼합 151 | - | 50 | 25.2 ± 2.1c |
| 혼합 111 | - | 50 | 31.7 ± 2.4ab |
| 혼합 121 | - | 50 | 27.7 ± 4.0bc |
| 혼합 171 | - | 50 | 34.5 ± 2.4a |
| 혼합 1102 | - | 50 | 36.7 ± 5.0a |
<실험예 2>
누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 산화질소(NO) 생성저해 활성 확인
48 웰 플레이트에 BV2 microglia cell을 seeding한 후 CO2 배양기에서 24시간 배양한 뒤 시료처리하고 2시간 후 LPS (0.5 ㎍/㎖)를 처리하였다. 그 후 다시 24시간 후 반응된 media 50 ㎕를 96 웰 플레이트에 취해 1% sulfanilamide 및 0.1% NED (N-1-napthylnethylenediamine dihydrochloride)를 각 50 ㎕가하여 520 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과 도 1에 나타낸 바와 같이 음성대조군 (NC)에서는 NO 생성이 무처리군 (cont)에 비해 유의하게 증가하였으나, 본 발명의 누에, 감초 및 수수의 단일 추출물 및 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물 처리군에서는 산화질소가 음성대조군에 비해 유의하게 감소하였으며, 특히 단일 추출물의 산화질소 생성저해율 (16.0~33.6%)에 비해 각 추출물의 혼합물의 저해효과 (33.6~53.6%)가 더 우수함을 확인하였다.
<실험예 3>
누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 세포 증식 효과 확인
48 웰 플레이트에 BV2 microglia cell을 seeding한 후 CO2 배양기에서 24시간 배양한 뒤 시료처리하고 2시간 후 LPS (0.5 ㎍/㎖)를 처리하였다. 그 후 다시 24시간 후 반응된 media 50 ㎕를 96 웰 플레이트에 취해 1% sulfanilamide 및 0.1% NED (N-1-napthylnethylenediamine dihydrochloride)를 각 50 ㎕가하여 520 nm에서 흡광도를 측정하였다.
상기와 같은 과정으로, 처리된 표준물질로부터 얻어진 검량선을 적용하여 nitrite 함량 (μM)을 산출하였고, 상등액을 제거하고 남은 세포에 대해 MTT 시약을 처리하여 1시간동안 CO2 배양기에서 반응시킨 후 540 nm에서 흡광도를 측정하여 세포증식효과를 분석하였다.
그 결과 도 2에 나타낸 바와 같이 음성대조군 (NC, 80.7%)에서는 무처리군 (cont, 100.0%)에 비해 세포증식율이 유의하게 감소하였으며, 누에 및 수수 단일 추출물 (77.9%, 57.8%)에서도 음성대조군과 같은 수준 또는 더 낮은 세포증식율을 나타내었다. 반면, 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물 처리 시 세포증식율 (87.2~97.5%)은 음성대조군에 비해 유의하게 증가함을 확인하였다.
<실험예 4>
누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물의 아밀로이드-베타(Aβ) 생성 저해 활성 확인
24 well plate에 PC12 세포를 seeding한 후 CO2 배양기에서 24시간 배양한 뒤 신경성장인자(nerve growth factor, NGF)를 처리한 후 3일 후 시료를 처리하였다. 시료처리 후 2시간 뒤 아밀로이드-베타를 처리하고 24시간 뒤에 배지를 일정량 취한 후 원심분리하여 상등액을 확보하였다. 상기 원심분리한 배지시료를 ELISA kit를 이용하여 생성된 아밀로이드-베타의 양을 동일과정으로 분석한 표준물질에 대한 검량선 식에 의해 산출하였다.
그 결과 도 3에 나타낸 바와 같이 누에, 감초 및 수수 각각의 단일 추출물 및 이들의 혼합물을 PC12세포에서의 아밀로이드-베타 생성에 대한 저해효과를 실험하였을 때, 혼합 171 시료는 누에 추출물 및 정상처리에 비하여 유의하게 우수한 아밀로이드-베타 생성 저해 효과를 나타내었다.
Claims (12)
- 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 감초 추출물은 감초의 뿌리로부터 추출된 것을 특징으로 하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 수수 추출물은 수수의 종자로부터 추출된 것을 특징으로 하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 누에, 감초 및 수수의 각 추출물은 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것인 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물은 산화질소(Nitric oxide)의 생성을 억제하는 것인, 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물은 NMDA 수용체 저해 효과가 있는 것인, 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물은 아밀로이드-베타 생성 저해 효과가 있는 것인, 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 퇴행성 뇌질환은 알츠하이머병(Alzheimer disease), 픽병(Pick disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 루게릭병(amyotrophic lateral sclerosis) 및 헌팅턴병(Huntington's disease) 중에서 선택된 어느 하나인, 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 혼합물은 누에, 감초 및 수수 추출물의 중량비가 1:5:1, 1:1:1, 1:2:1, 1:7:1 및 1:10:2 중 어느 하나인, 퇴행성 뇌질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물. - 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능 개선용 약학적 조성물.
- 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 누에, 감초 및 수수 추출물의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 인지능력 개선용 식품 조성물.
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