KR20210054523A - 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법 - Google Patents
폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20210054523A KR20210054523A KR1020217007500A KR20217007500A KR20210054523A KR 20210054523 A KR20210054523 A KR 20210054523A KR 1020217007500 A KR1020217007500 A KR 1020217007500A KR 20217007500 A KR20217007500 A KR 20217007500A KR 20210054523 A KR20210054523 A KR 20210054523A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- polyoxyethylene
- fatty acid
- acid ester
- sorbitan
- sorbitan fatty
- Prior art date
Links
- -1 polyoxyethylene Polymers 0.000 title claims abstract description 197
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 title claims abstract description 175
- 229940084778 1,4-sorbitan Drugs 0.000 title claims abstract description 146
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 title claims abstract description 115
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 title claims abstract description 91
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 title claims abstract description 91
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 6
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 claims abstract description 107
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 89
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 18
- 229960002479 isosorbide Drugs 0.000 claims description 96
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 73
- KLDXJTOLSGUMSJ-JGWLITMVSA-N Isosorbide Chemical compound O[C@@H]1CO[C@@H]2[C@@H](O)CO[C@@H]21 KLDXJTOLSGUMSJ-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 71
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 63
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 claims description 63
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 59
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 57
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 42
- 238000001869 matrix assisted laser desorption--ionisation mass spectrum Methods 0.000 claims description 38
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 claims description 34
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 27
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 27
- JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC JRMUNVKIHCOMHV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 25
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 19
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 14
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 14
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 101100345673 Xenopus laevis mix-b gene Proteins 0.000 claims description 8
- 101100184148 Xenopus laevis mix-a gene Proteins 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 3
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 abstract description 27
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 abstract description 26
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 abstract description 26
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 abstract description 23
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 abstract description 10
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 86
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 39
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 38
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 33
- 239000000047 product Substances 0.000 description 33
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 30
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 29
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 24
- MLQBTMWHIOYKKC-KTKRTIGZSA-N (z)-octadec-9-enoyl chloride Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(Cl)=O MLQBTMWHIOYKKC-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 21
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 20
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 20
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 18
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 17
- 238000005315 distribution function Methods 0.000 description 15
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 15
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 14
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 12
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 11
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 10
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 10
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 8
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 8
- 101000927799 Homo sapiens Rho guanine nucleotide exchange factor 6 Proteins 0.000 description 7
- 102100033202 Rho guanine nucleotide exchange factor 6 Human genes 0.000 description 7
- JDRAOGVAQOVDEB-JXYJBCOESA-N [(6s)-3-hydroxy-2,3,3a,5,6,6a-hexahydrofuro[3,2-b]furan-6-yl] (e)-octadec-9-enoate Chemical compound OC1COC2[C@@H](OC(=O)CCCCCCC/C=C/CCCCCCCC)COC21 JDRAOGVAQOVDEB-JXYJBCOESA-N 0.000 description 7
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 6
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 6
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 6
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 6
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101000927796 Homo sapiens Rho guanine nucleotide exchange factor 7 Proteins 0.000 description 5
- 102100033200 Rho guanine nucleotide exchange factor 7 Human genes 0.000 description 5
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 5
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 5
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 5
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 5
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid ester group Chemical group C(CCCCCCCCCCC)(=O)O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 4
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 4
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 3
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 3
- 150000004703 alkoxides Chemical class 0.000 description 3
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 3
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 3
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 3
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 3
- 150000005691 triesters Chemical class 0.000 description 3
- MCHWWJLLPNDHGL-JGWLITMVSA-N (2s,3s,4s,5r)-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MCHWWJLLPNDHGL-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- MPCAJMNYNOGXPB-UHFFFAOYSA-N 1,5-Anhydro-mannit Natural products OCC1OCC(O)C(O)C1O MPCAJMNYNOGXPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MPCAJMNYNOGXPB-SLPGGIOYSA-N 1,5-anhydro-D-glucitol Chemical compound OC[C@H]1OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O MPCAJMNYNOGXPB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- RPDAUEIUDPHABB-UHFFFAOYSA-N potassium ethoxide Chemical group [K+].CC[O-] RPDAUEIUDPHABB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BDAWXSQJJCIFIK-UHFFFAOYSA-N potassium methoxide Chemical group [K+].[O-]C BDAWXSQJJCIFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical group [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MKNZKCSKEUHUPM-UHFFFAOYSA-N potassium;butan-1-ol Chemical group [K+].CCCCO MKNZKCSKEUHUPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- MFRIHAYPQRLWNB-UHFFFAOYSA-N sodium tert-butoxide Chemical compound [Na+].CC(C)(C)[O-] MFRIHAYPQRLWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 2
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 1
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SDTMFDGELKWGFT-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropan-2-olate Chemical compound CC(C)(C)[O-] SDTMFDGELKWGFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 description 1
- 101100223811 Caenorhabditis elegans dsc-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100035792 Kininogen-1 Human genes 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 235000021319 Palmitoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 238000000961 QCM-D Methods 0.000 description 1
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000333 X-ray scattering Methods 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N cis-palmitoleic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 1
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004807 desolvation Methods 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N dmso dimethylsulfoxide Chemical compound CS(C)=O.CS(C)=O CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 150000002066 eicosanoids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 238000000572 ellipsometry Methods 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- HHFAWKCIHAUFRX-UHFFFAOYSA-N ethoxide Chemical compound CC[O-] HHFAWKCIHAUFRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007046 ethoxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 230000003165 hydrotropic effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- MOYKHGMNXAOIAT-JGWLITMVSA-N isosorbide dinitrate Chemical compound [O-][N+](=O)O[C@H]1CO[C@@H]2[C@H](O[N+](=O)[O-])CO[C@@H]21 MOYKHGMNXAOIAT-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910000000 metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- NBTOZLQBSIZIKS-UHFFFAOYSA-N methoxide Chemical group [O-]C NBTOZLQBSIZIKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 1
- 239000002539 nanocarrier Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000006911 nucleation Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- AWDMDDKZURRKFG-UHFFFAOYSA-N potassium;propan-1-olate Chemical group [K+].CCC[O-] AWDMDDKZURRKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQKGAJDYBZOFSR-UHFFFAOYSA-N potassium;propan-2-olate Chemical group [K+].CC(C)[O-] WQKGAJDYBZOFSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004886 process control Methods 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGHBATFHNDZKSO-UHFFFAOYSA-N propan-2-olate Chemical compound CC(C)[O-] OGHBATFHNDZKSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 208000012134 pseudoallergy Diseases 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 238000000235 small-angle X-ray scattering Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- LGQXXHMEBUOXRP-UHFFFAOYSA-N tributyl borate Chemical compound CCCCOB(OCCCC)OCCCC LGQXXHMEBUOXRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 238000004736 wide-angle X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/26—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers and other compounds
- C08G65/2603—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers and other compounds the other compounds containing oxygen
- C08G65/2606—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers and other compounds the other compounds containing oxygen containing hydroxyl groups
- C08G65/2609—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers and other compounds the other compounds containing oxygen containing hydroxyl groups containing aliphatic hydroxyl groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
- C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
- C08G65/331—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen
- C08G65/332—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups, or halides, or esters thereof
- C08G65/3322—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups, or halides, or esters thereof acyclic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
- C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
- C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
- C08G65/331—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen
- C08G65/332—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups, or halides, or esters thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G2650/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
- C08G2650/22—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule characterised by the initiator used in polymerisation
- C08G2650/26—Sugars or saccharides used as initiators
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Polyethers (AREA)
- Furan Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
본 발명은 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄과 지방산 염화물의 반응에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르, 예컨대 폴리소르베이트 80의 제조 방법, 및 본 방법에 의해 획득 가능한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르를 개시한다.
Description
본 발명은 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 및 지방산 염화물의 반응에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르, 예컨대 폴리소르베이트 80의 제조 방법, 및 본 방법에 의해 획득 가능한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르를 개시한다.
폴리소르베이트 80은 친수성 비-이온성의 계면활성제이다. 양호한 친수 가용화 효과 (hydrotropic effect)로 인하여, 이는 통상 API 제제 또는 비경구용, 예컨대 주사 약물 제조 과정에서 공용매, 유화제, 및 안정화제로 사용된다.
이하 "리 등."으로 축약되는 장 리 등은, International Journal of Nanomedicine, 2014, 9, 2089-2100에서, PNS (폴리옥시에틸렌 비이온성 계면활성제) 군으로서 폴리소르베이트, 예컨대 폴리소르베이트 80, 및 무엇보다도 정제, 유화액에서 및 특히 주사액 제조에 있어서 나노전달체 시스템으로서의 이들의 용도를 기술한다. 이는 약물, 특히 소수성 약물, 예컨대 소수성 항암 약물을, 표적 조직으로의 전달 개선을 위한 촉진체로 사용된다. 그러나, 다른 제조업체들에서 적용되는 폴리소르베이트 획득을 위한 상이한 합성 공정으로 인하여, 이들 구조 및 조성은 공정 마다 동일하지 않다. 예를들면, 미국 약전 35-국가의약품집 30에서, 폴리소르베이트 80은 소르비톨 및 소르비톨 무수물 각각의 몰 당 대략 20 몰의 산화에틸렌이 에톡시화된 소르비톨 및 이의 무수물과 지방산, 주로 올레산의 부분 에스테르 혼합물로 정의된다.
폴리소르베이트 80의 제조 방법 중 하나는 먼저 탈수화 유도체로의 소르비톨의 탈수화, 및 소르비탄 지방산 에스테르를 제공하는 올레산과의 에스테르화, 이어 산화에틸렌과 소르비탄 지방산 에스테르의 다중반응을 포함한다.
또 다른 방법은 먼저 산화에틸렌과 소르비탄의 탈수화 유도체의 다중반응, 이어 에스테르화이다.
널리 인정되는 폴리소르베이트 80의 구조는 식 (PS80)의 화합물로서 식중 w+x+y+z = 20이고, 즉 EO (산화에틸렌) 단위 평균 함량은 20이다.
다양한 이유로 인하여 폴리소르베이트 80은 많은 화합물들의 혼합물이다. 다양성을 보이는 하나의 원천은 폴리소르베이트 80의 경우 올레산인 지방산 모이어티이다. 그러나, 올레산은 천연에서 얻은 천연물로서 사용되고, 다른 지방산 예컨대 미리스트산, 팔미트산, 팔미트올레산, 스테아르산, 리놀레산, 또는 리놀렌산이 포함된다. 따라서 제품 폴리소르베이트 80은 올레산 뿐 아니라, 천연 올레산 제품에 존재하는 다른 지방산에서 유래되는 지방산 에스테르를 포함한다.
추가적인 다양성 원천으로서 리 등은 폴리소르베이트 합성에서 통상 소르비톨을 소르비탄으로 탈수하는 제1 단계를 지적하고, 이에 따라 최종 생성물은, 식 (SORBITOL)의 화합물 일반식을 가지는 소르비톨, 및 상이한 구조들을 가지는 소르비톨-유래 환형 에테르, 예컨대
식 (1,4)의 화합물 일반식을 가지는1,4-소르비탄, 식 (1,5)의 화합물 일반식을 가지는
1,5-소르비탄, 식 (2,5)의 화합물 일반식을 가지는 2,5-소르비탄, 및
식 (1,4:3,6)의 화합물 일반식을 가지는 1,4:3,6 이소소르비드의 혼합물이다.
1,4-소르비탄, 1,5-소르비탄, 및 2,5-소르비탄은 달리 명시되지 않는 한 본원에서 의미상 서로 이성질체이다.
탈수 반응의 추가 부산물은 소르비톨 고분자일 수 있다.
소르비톨의 탈수화로 제공되는 탈수화 생성물이 이미 상이한 화합물들의 혼합물이고, 이러한 혼합물이 이어 올레산 및 산화에틸렌에 의해 폴리소르베이트 80으로 전환될 때, 명백하게 폴리소르베이트 80으로 칭하는 생성물은 소르비톨의 탈수화에 의해 제공되는 혼합물 중의 임의의 화합물들로부터 유래되는 화합물들을 포함한다.
산화에틸렌은 소르비톨의 탈수 반응에 의한 생성물의 각각의 히드록실 잔기와 반응하여, 히드록실 잔기에 폴리옥시에틸렌 사슬을 형성하고, 재차 가변적인 개수의 산화에틸렌 단위가 다양한 폴리옥시에틸렌 사슬들에 도입되어 다양한 히드록실 잔기를 형성하기 때문에, 확실히 산화에틸렌의 다중반응은 재차 추가 다양성을 도입할 것이다.
리 등은 더 나아가 PNS의 위알레르기 (pseudoallergy) 촉발 가능성이 잘 알려져 있다고 지적한다. 위 알레르기는 세계 알레르기 협회 (World Allergy Organization)에서 사용되는 공식 용어이다. 이는 악화 인자 (offending agent)의 초기 투여에 따라 관찰되는 면역성 알레르기 반응과 유사한 반응이다. 일반적인 알레르기와 달리, 위알레르기 반응은 비만 세포에서 직접 히스타민 방출을 유도하고 에이코사노이드의 비정상적인 합성 및 브라디키닌 분해 억제로 보체를 활성화 시키고, 이는 기존의 면역글로불린 E 항체에 의해 개시 또는 조절되지 않는다. PNS에 반응하는 위 알레르기의 정확한 기작은 명확하지 않지만, 보체 활성화 및 비만세포의 탈과립화는 위 알레르기에 이르는 반응을 개시하고, 즉, 위 알레르기 반응의 초기 단계는 결정 단계라는 점은 분명하다.
공지 생성물보다 고품질 및 바람직한 성능을 가지는 폴리소르베이트, 특히 폴리소르베이트 80에 대한 필요성이 언제나 존재한다.
본 발명 방법의 기술적 특징은 에스테르화 반응을 위하여 유리 지방산 대신 지방산 염화물을 적용하는 것이다.
약어 및 기타 데이터:
이하 용어 및 약어는 명시적으로 달리 언급되지 않는 한 명세서 전반에서 사용된다:
ACN 아세토니트릴
API 활성 약학 성분
DCM 디클로로 메탄
DMSO 디메틸 술폭시드
DSC 시차주사열량계
ELSD 증기 광산란 검출기
EO 산화에틸렌, MW 44 g/mol
엡실론 분자흡광계수, 단위 [Lㆍmol-1ㆍcm-1]
equiv, eq 당량
이소소르비드 식 (3) 화합물의 입체화학을 가짐, MW 146,1 g/mol, CAS 652-67-5
MALDI 매트릭스-보조 레이저 탈착/이온화, MALDI-TOF는 달리 언급이 없는 한 MALDI 방법으로 사용됨 (TOF 비행시간)
MW 분자량
PEO 폴리옥시에틸렌 또는 폴리에틸렌옥시
PEO 소르비탄 폴리옥시에틸렌 소르비탄, 및 달리 언급되지 않는 한, PEO 1,4-소르비탄 의미
PNS 폴리옥시에틸렌 비이온성 계면활성제
폴리소르베이트 본 발명에서 용어 폴리소르베이트는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르계 다양한 생성물, 예컨대 폴리소르베이트 80에 대한 동의어로 사용됨
나트륨화 나트륨화 부가물이란 반대이온으로 나트륨을 가지는 이온화 종의 부가물을 의미
1,4-소르비탄 식 (1) 화합물의 입체화학을 가짐, MW 164.2 g/mol, CAS 27299-12-3
D-소르비톨 식 (2) 화합물, MW 182.2 g/mol, CAS 50-70-4
TBAB 테트라부틸암모늄 브롬화물
% 달리 언급이 없는 한 백분율은 중량 기준 백분율 (wt%),
본 발명의 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄과 산염화물 ACIDCHLOR의 반응 REAC-A에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제법이다;
ACIDCHLOR은 식 (I)의 화합물이다;
R1은 선형 또는 분지형 C10-22 알킬 또는 선형 또는 분지형 C10-22 알케닐이다.
바람직하게는, R1은 선형 C10-22 알킬 또는 선형 C10-22 알케닐이다.
바람직하게는, ACIDCHLOR은 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 아라키드산, 올레산염화물 및 이들 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다;
더욱 바람직하게는, ACIDCHLOR은 라우르산, 팔미트산, 스테아르산, 올레산염화물 및 이들 혼합물로 이루어진 군에서 선택된다;
더더욱 바람직하게는, ACIDCHLOR은 올레산염화물이다;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄의 폴리옥시에틸렌은 평균 10 내지 30, 더욱 바람직하게는 12 내지 28, 더더욱 바람직하게는 14 내지 26, 특히 16 내지 26, 더욱 상세하게는 18 내지 24, 더더욱 상세하게는 18 내지 23, 상세하게는 19 내지 23개의, EO 단위, 더욱 상세하게는 19 내지 22개의, EO 단위, 더더욱 상세하게는 20 내지 22개의, EO 단위를 가진다.
하나의 실시태양에서, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄은 평균 21 내지 22개의 EO 단위를 가진다.
또 다른 실시태양에서, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄은 평균 20 또는 22개의 EO 단위를 가진다.
바람직하게는, REAC-A에서 ACIDCHLOR의 몰 당량은 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄의 0.2 내지 4 배, 더욱 바람직하게는 0.4 내지 2 배, 더더욱 바람직하게는 0.6 내지 2 배, 특히 0.8 내지 2 배, 더욱 상세하게는 0.9 내지 2 배, 더더욱 상세하게는 0.9 내지 1.8 배, 상세하게는 1 내지 1.8 배의 몰 당량이다.
바람직하게는, REAC-A는 온도 TEMP-A에서 수행되고, TEMP-A는 0 내지 70℃, 더욱 바람직하게는 0 내지 60℃, 더더욱 바람직하게는 0 내지 50℃, 특히 10 내지 50℃, 더욱 상세하게는 10 내지 40℃, 더더욱 상세하게는 10 내지 30℃, 상세하게는 15 내지 25℃, 더욱 상세하게는 17.5 내지 25℃이다.
바람직하게는, REAC-A의 반응 시간 TIME-A는 1 min 내지 4 h, 더욱 바람직하게는 1 min 내지 2 h, 더더욱 바람직하게는 1 min 내지 1 h, 특히 2 내지 45 min, 더욱 상세하게는 5 내지 30 min, 더더욱 상세하게는 10 min 내지 20 min이다.
REAC-A는 대기압 또는 대기압보다 높은 압력에서 수행될 수 있다;
바람직하게는, REAC-A는 대기압에서 수행된다.
바람직하게는, 용매는 REAC-A에 대하여 존재하지 않거나 충전되지 않거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, 물은 REAC-A에 대하여 충전되지 않거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, 촉매는 REAC-A에 대하여 충전되지 않거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, REAC-A는 순수하게 수행되고, 즉 REAC-A에 대하여 사용되거나 충전되는 유일한 물질은 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 및 ACIDCHLOR이다.
REAC-A 후, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 당업자에게 알려진 표준 방법으로 분리된다. REAC-A 후에 증기 증류가 수행된다.
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄은
1,4-소르비탄과 산화에틸렌이 반응하는 반응 REAC-B에 의해 제조된다.
바람직하게는, REAC-B산에서 산화에틸렌의 몰 당량은 1,4-소르비탄 몰 당량의 10 내지 30 배, 더욱 바람직하게는 12 내지 28 배, 더더욱 바람직하게는 14 내지 26 배, 특히 16 내지 26 배, 더욱 상세하게는 18 내지 24 배, 더더욱 상세하게는 18 내지 23 배, 상세하게는 18 내지 22 배 또는 19 내지 23 배, 더욱 상세하게는 19 내지 22 배, 더더욱 상세하게는 20 내지 22, 특히 20 내지 21 배이다.
바람직하게는, REAC-B는 염기 BASE-B 존재에서 수행된다.
바람직하게는, BASE-B는 알칼리 금속 C1-4 알콕시드 및 알칼리금속 수산화물로 이루어진 군에서 선택된다.
바람직하게는, 알칼리 금속 C1-4 알콕시드의 알칼리 금속은 Na 또는 K이다;
바람직하게는, C1-4 알콕시드는 메톡시드, 에톡시드, n-프로폭시드, 이소프로폭시드, n-부톡시드 또는 tert-부톡시드이다.
바람직하게는, 알킬 금속 수산화물은 바람직하게는 NaOH 또는 KOH이다.
더욱 바람직하게는 BASE-B는 나트륨 또는 칼륨 메톡시드, 나트륨 또는 칼륨 에톡시드, 나트륨 또는 칼륨 n-프로폭시드, 나트륨 또는 칼륨 이소프로폭시드, 나트륨 또는 칼륨 n-부톡시드, 나트륨 또는 칼륨 tert-부톡시드, NaOH 및 KOH로 이루어진 군에서 선택된다;
더더욱 바람직하게는, BASE-B는 나트륨 또는 칼륨 메톡시드, 나트륨 또는 칼륨 에톡시드, 나트륨 또는 칼륨 n-부톡시드, 나트륨 또는 칼륨 tert-부톡시드, NaOH 및 KOH로 이루어진 군에서 선택된다;
특히, BASE-B는 나트륨 메톡시드, 나트륨 tert-부톡시드, NaOH 및 KOH로 이루어진 군에서 선택된다;
더욱 상세하게는, BASE-B는 나트륨 메톡시드, NaOH 및 KOH로 이루어진 군에서 선택된다;
더더욱 상세하게는, BASE-B는 NaOH 또는 KOH이다;
상세하게는, BASE-B는 KOH이다.
바람직하게는, REAC-B에서 BASE-B의 몰 당량은 0.5 내지 3 %, 더욱 바람직하게는 0.75 내지 2.5, 더더욱 바람직하게는 1 내지 2.25 %, 특히 1.25 내지 2.25 %, 더욱 상세하게는 1.5 내지 2 %이고, %는 1,4-소르비탄의 몰 함량 기준이다.
바람직하게는, REAC-B는 용매 SOLV-B에서 수행되고, SOLV-B는 바람직하게는 알킬화 석유, 예컨대 나프타 (석유), 중질 알킬레이트이다.
바람직하게는, SOLV-B의 중량은1,4-소르비탄의 중량의 1 내지 10 배, 더욱 바람직하게는 1 내지 5 배, 더더욱 바람직하게는 1 내지 4 배, 특히 1 내지 3 배이다.
바람직하게는, REAC-B는 온도 TEMP-B에서 수행되고, TEMP-B는 100 내지 200℃, 더욱 바람직하게는 110 내지 190℃, 더더욱 바람직하게는 120 내지 180℃, 특히 130 내지 170℃, 더욱 상세하게는 140 내지 165℃이다.
바람직하게는, REAC-B의 반응시간 TIME-B는 1 내지 20 h, 더욱 바람직하게는 2 내지 15 h, 더더욱 바람직하게는 3 내지 10 h, 특히 4 내지 8 h이다.
REAC-B는 대기압 또는 대기압보다 높은 압력에서 수행된다;
바람직하게는, REAC-A는 대기압보다 높은 압력에서 수행된다. 바람직하게는, TEMP-B가 선택되고 압력은 특히 SOLV-B가 존재하는 경우, 선택 온도에 의한 REAC-B의 반응 혼합물의 증기압에 따른 것이다.
바람직하게는, REAC-B는 불활성 분위기, 예컨대 질소 또는 아르곤 분위기 하에서 수행된다.
REAC-B 후, PEO 소르비탄은 당업자에게 알려진 표준 방법으로 분리된다. 임의의 SOLV-B는 예를들면 상 분리, 증기 증류 또는 기타 등에 의해 제거되고, 바람직하게는, REAC-B 후에 증기 증류가 수행된다.
하나의 실시태양에서, 1,4-소르비탄은 방법 SORBID에 의해 제조되고 이는 연속 4 단계들 STEP1, STEP2, STEP3 및 STEP4을 포함하고,
STEP1에서 D-소르비톨은 p-톨루엔술폰산 및 테트라부틸암모늄 브롬화물의 존재에서 탈수 반응 DEHYDREAC으로 탈수되어, STEP1은 혼합물 MIX1을 제공하고;
STEP2에서 에탄올은 MIX1과 혼합되어, STEP2는 혼합물 MIX2를 제공하고;
STEP3에서 이소프로판올이 MIX2와 혼합되어, STEP3은 혼합물 MIX3을 제공하고;
STEP4에서 1,4-소르비탄은 MIX3으로부터 분리된다.
방법 SORBIT는 고수율, 고순도, 저함량의 이소소르비드, 저함량 D-소르비톨로1,4-소르비탄을 제공하고; 방법 SORBID는 경제적이고, 여과와 같은 단계 수가 적고 사용되는 상이한 화학물질들의 수가 적다. 방법 SORBID는 하나의 반응기에서 수행될 수 있다.
바람직하게는, p-톨루엔 술폰산은 p-톨루엔술폰산 일수화물 형태로 사용되고; 따라서 p-톨루엔 술폰산이 언급되는 임의의 실시태양에서, 바람직한 실시태양은 p-톨루엔술폰산 일수화물이다.
바람직하게는, DEHYDREAC에서 용매가 존재하지 않거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, DEHYDREAC에서 물이 충전되지 않는다.
바람직하게는, DEHYDREAC는 순수하게 수행되고, 즉 3 성분들 D-소르비톨, p-톨루엔술폰산 및 테트라부틸암모늄 브롬화물만이 DEHYDREAC에 사용되고 충전된다.
바람직하게는, DEHYDREAC산에서 p-톨루엔술폰산의 몰 당량은 D-소르비톨의 몰 당량의 0.2 내지 1.6%, 더욱 바람직하게는 0.4 내지 1.4%, 더더욱 바람직하게는 0.6 내지 1.2%, 특히 0.6 내지 1.0%이다.
바람직하게는, DEHYDREAC 산에서 테트라부틸암모늄 브롬화물의 몰 당량은 D-소르비톨의 몰 당량의 1.0 내지 3.6%, 더욱 바람직하게는 1.2 내지 3.2%, 더더욱 바람직하게는 1.4 내지 2.8%, 특히 1.6 내지 2.4%, 더욱 상세하게는 1.6 내지 2.0%이다.
바람직하게는, STEP2에서 혼합되는 에탄올의 중량은 D-소르비톨의 중량의 0.2 내지 5 배, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 2 배, 더더욱 바람직하게는 0.2 내지 1 배, 특히 0.2 내지 0.8 배, 더욱 상세하게는 0.2 내지 0.6 배, 더더욱 상세하게는 0.3 내지 0.5 배이다.
바람직하게는, STEP2에서 혼합되는 이소프로판올의 중량은 D-소르비톨의 중량의 0.2 내지 5 배, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 2 배, 더더욱 바람직하게는 0.2 내지 1 배, 특히 0.2 내지 0.8 배, 더욱 상세하게는 0.2 내지 0.6 배, 더더욱 상세하게는 0.3 내지 0.5 배이다.
바람직하게는, DEHYDREAC는 온도 TEMP1에서 수행되고, TEMP1은 95 내지 120℃, 더욱 바람직하게는 100 내지 115℃, 더더욱 바람직하게는 105 내지 115℃이다.
바람직하게는, DEHYDREAC의 반응시간 TIME1-1은 4 내지 12 h, 더욱 바람직하게는 6 내지 10 h, 더더욱 바람직하게는 7 내지 9 h이다.
바람직하게는, DEHYDREAC는 50 mbar 미만, 더욱 바람직하게는 25 mbar 미만, 더더욱 바람직하게는 15 mbar 미만의 압력 PRESS1에서 수행된다.
또 다른 실시태양에서, DEHYDREAC는 0.001 내지 50 mbar, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 25 mbar, 더더욱 바람직하게는 0.1 내지 15 mbar, 특히 1 내지 15 mbar, 더욱 상세하게는 1 내지 12.5 mbar의 PRESS1에서 수행된다.
바람직하게는, STEP2, STEP3 및 STEP4는 대기압에서 수행된다.
1 당량의 물을 제거하는 탈수 반응이므로 DEHYDREAC에 의해 물이 형성된다. p-톨루엔 술폰산이 p-톨루엔술폰산 일수화물의 형태로 사용되면, 이는 또한 DEHYDREAC 과정에서 수분 원천이 될 수 있다.
바람직하게는, 물은 DEHYDREAC 과정에서 제거된다.
바람직하게는, STEP2는 60 내지 90℃, 더욱 바람직하게는 60 내지 85℃, 더더욱 바람직하게는 65 내지 80℃의 온도 TEMP2에서 수행된다.
바람직하게는, STEP1은 DEHYDREAC 후 냉각 COOL1을 포함하고, MIX1은 TEMP1에서 TEMP2로 냉각된다.
바람직하게는, COOL1은 시간 TIME1-2 동안 수행되고, TIME1-2는 10 min 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 15 min 내지 5 h, 더더욱 바람직하게는 15 min 내지 2 h, 특히 20 min 내지 1 h이다.
바람직하게는, DEHYDREAC는 PRESS1에서 수행되고, 이어 압력은 DEHYDREAC 후 PRESS1에서 대기압으로 복귀된다. STEP1이 COOL1을 포함하면 DEHYDREAC는 PRESS1에서 수행되고, 이어 압력은 COOL1 전, 동안 또는 후에 PRESS1에서 대기압으로 복귀된다.
바람직하게는, 에탄올의 혼합 후, STEP2는 시간 TIME2-1 동안 MIX2의 교반 STIRR2를 포함하고, TIME2-1는 30 min 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 8 h, 더더욱 바람직하게는 1 내지 6 h, 특히 1 내지 4 h, 더욱 상세하게는 1.5 내지 3 h이다.
바람직하게는, STIRR2는 TEMP2에서 수행된다.
바람직하게는, STEP3은 10 내지 30℃, 더욱 바람직하게는 15 내지 25℃, 더더욱 바람직하게는 17.5 내지 22.5℃의 온도 TEMP3-1에서 수행된다.
바람직하게는 STEP2는 냉각 COOL2를 포함하고, MIX2는 TEMP1 또는 TEMP2에서 TEMP3으로 냉각된다.
바람직하게는, COOL2는 STIRR2 후에 수행된다.
바람직하게는, COOL2는 TEMP2에서 TEMP3으로 수행된다.
바람직하게는, STEP2는 STIRR2 및 COOL2를 포함하고, COOL2는 STIRR2 후 수행된다.
바람직하게는, COOL2는 시간 TIME2-2 동안 수행되고, TIME2-2는 1 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 8 h, 더더욱 바람직하게는 1 내지 6 h, 특히 1 내지 4 h, 더욱 상세하게는 2 내지 4 h이다.
바람직하게는, 이소프로판올의 혼합 후, STEP3은 -5 내지 5℃, 더욱 바람직하게는 -2.5 내지 2.5℃, 더더욱 바람직하게는 -1 내지 2℃의 온도 TEMP3-2으로의 MIX3의 냉각 COOL3을 포함한다.
바람직하게는, COOL3은 시간 TIME3-1 동안 수행되고, TIME3-1은 30 min 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 30 min 내지 8 h, 더더욱 바람직하게는 30 min 내지 6 h, 특히 30 min 내지 4 h, 더욱 상세하게는 30 min 내지 2 h이다.
바람직하게는, STEP3은 MIX3의 교반 STIRR3을 포함하고, STIRR3은 시간 TIME3-2 동안 수행되고, TIME3-2는 1 내지 12 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 10 h, 더더욱 바람직하게는 2 내지 8 h, 특히 2 내지 6 h, 더욱 상세하게는 3 내지 5 h이다.
바람직하게는, STIRR3은 COOL3 후에 수행된다.
바람직하게는, STIRR3은 TEMP3-2에서 수행된다.
더욱 바람직하게는, STIRR3은 COOL3 후에 수행되고 STIRR3은 TEMP3-2에서 수행된다.
바람직하게는, STEP4에서 MIX3으로부터1,4-소르비탄의 분리는 숙련가에서 알려진 임의의 수단, 예컨대 MIX3 중 임의의 액체의 증발, 여과, 원심분리, 건조, 또는 이들의 조합에 의해 수행되고, 바람직하게는 분리는 여과에 의해 수행된다.
바람직하게는, 1,4-소르비탄은 STEP4에서 MIX3으로부터 여과에 의해 분리되어 프레스 케이크를 제공하고, 이어 프레스 케이크는 이소프로판올로 세척되고, 이어 세척된 프레스 케이크는 건조된다.
하나의 실시태양에서,
STEP1은 연속하여 DEHYDREAC 및 COOL1을 포함한다;
STEP2는 에탄올 혼합 후 연속하여 STIRR2 및 COOL2를 포함한다;
STEP3은 이소프로판올 혼합 후 연속하여 COOL3 및 STIRR3을 포함한다;
STEP4 MIX3의 여과에 의한1,4-소르비탄의 분리를 포함하고, 바람직하게는 세척 및 건조가 이어진다.
바람직하게는, STEP2에서 에탄올은 MIX1에 충전되어 (charged) MIX2를 제공한다.
바람직하게는, STEP3에서 이소프로판올은 MIX2에 충전되어 MIX3을 제공한다.
바람직하게는, STEP1, STEP2 및 STEP3은 연속하여 하나의 및 동일한 반응기에서 수행된다.
또 다른 실시태양에서, 1,4-소르비탄의 제조를 위한 방법 SORBIDAQU로1,4-소르비탄이 제조되고 이는 연속 3 단계들 STEP1AQU, STEP2AQU 및 STEP3AQU를 포함하고,
STEP1AQU에서 D-소르비톨은 p-톨루엔술폰산 및 테트라부틸암모늄 브롬화물의 존재에서 탈수 반응 DEHYDREACAQU에서 탈수되어, STEP1AQU는 혼합물 MIX1AQU를 제공하고;
STEP2AQU에서 에탄올은 MIX1AQU와 혼합되어, STEP2AQU는 혼합물 MIX2AQU를 제공하고;
STEP3AQU에서 이소프로판올은 MIX2AQU와 혼합되어, STEP3AQU는 혼합물 MIX3AQU를 제공하고;
D-소르비톨은 STEP1AQU에서 D-소르비톨 및 물의 혼합물 형태로 사용된다.
바람직하게는, D-소르비톨은 STEP1AQU에서 D-소르비톨 및 물의 혼합물 형태로 사용되고 충전된다.
STEP1AQU에서 사용되는 D-소르비톨과 물의 혼합물은 용액 또는 수중 D-소르비톨의 현탁액일 수 있다.
바람직하게는, D-소르비톨은 STEP1AQU에서 D-소르비톨과 물의 혼합물로 사용되고 D-소르비톨의 함량은 20 내지 80 wt%, 더욱 바람직하게는 40 내지 80 wt%, 더더욱 바람직하게는 60 내지 80 wt%, 특히 65 내지 75 wt%, 상세하게는 70 wt%이고, wt%는 D-소르비톨과 물의 혼합물 총 중량 기준이다.
바람직하게는, TBAB는 STEP1AQU에서 TBAB 및 물의 혼합물로서 사용된다;
더욱 바람직하게는, TBAB는 STEP1AQU에서 TBAB와 물의 혼합물로서 사용되고 충전된다.
TBAB와 물의 혼합물은 용액 또는 수중 TBAB의 현탁액일 수 있다.
더욱 바람직하게는, TBAB는 STEP1AQU에서 TBAB와 물의 혼합물로서 사용되고 TBAB 함량은 20 내지 80 wt%, 더더욱 바람직하게는 40 내지 80 wt%, 특히 60 내지 80 wt%, 더욱 상세하게는 60 내지 75 wt%, 더더욱 상세하게는 60 내지 70 wt%, 상세하게는 65 wt%이고, wt%는 TBAB와 물의 혼합물 총 중량 기준이다.
바람직하게는, STEP1AQU는 3 단계들 STEP1AQUA, STEP1AQUB 및 STEP1AQUC를 포함한다.
STEP1AQUA에서 D-소르비톨 및 물의 혼합물, TBAB 및 p-톨루엔술폰산이 혼합되어 혼합물 MIX1AQUA를 제공한다;
STEP1AQUB에서 물은 증류 DIST1A에서 MIX1AQUA로부터 증류되어, 혼합물 MIX1AQUB를 제공한다;
STEP1AQUC에서 MIX1AQUB는 교반되어 MIX1AQU를 제공한다.
MIX1AQUA는 D-소르비톨, TBAB 및 물을 포함한다.
바람직하게는, DIST1A는 40 내지 100℃, 더욱 바람직하게는 50 내지 90℃, 더더욱 바람직하게는 55 내지 85℃, 상세하게는 60 내지 80℃의 온도 TEMP1A에서 수행된다.
바람직하게는, DIST1A는 감압 PRESS1A에서 수행되고; PRESS1A는 DIST1A가 TEMP1A에서 진행되도록 조정된다.
바람직하게는, 모든 물이 MIX1AQUA로부터 STEP1AQUA에서 유거된다 (distilled off).
바람직하게는, DIST1A는 모든 물이 MIX1AQUA로부터 유거될 때까지의 시간 구간 동안 수행된다.
바람직하게는, STEP1AQUC에서 MIX1AQUB의 교반은 온도 TEMP1C에서 수행되고; TEMP1C는 80 내지 120℃이다.
바람직하게는, TEMP1C는 90 내지 110℃, 더욱 바람직하게는 100 내지 110℃, 상세하게는 105℃이다.
바람직하게는, STEP1AQUC에서 MIX1AQUB의 교반은 시간 TIME1C 동안 수행되어 MIX1AQU를 제공하고, TIME1C는 2 내지 10 h이다.
바람직하게는, TIME1C는 4 내지 8 h, 더욱 바람직하게는 5 내지 7 h, 상세하게는 6 h이다.
바람직하게는, TIME1C 동안 교반은 감압 PRESS1C 하에서 수행되고; 하나의 실시태양에서 선택 TEMP1C에서 환류 조건들에서 교반되도록 PRESS1C는 조정되어, 또 다른 실시태양에서, PRESS1C는 40 내지 100 mbar, 더욱 바람직하게는 40 내지 60 mbar, 상세하게는 50 mbar이다.
바람직하게는, TIME1C 후 압력은 PRESS1C에서 질소 주입에 의해 대기압으로 복귀된다.
바람직하게는, STEP2AQU 및 STEP3AQU는 대기압에서 수행된다.
바람직하게는, p-톨루엔 술폰산은 p-톨루엔술폰산 일수화물의 형태로 사용되고; 따라서 p-톨루엔 술폰산이 언급되는 임의의 실시태양에서, 바람직한 실시태양은 p-톨루엔술폰산 일수화물이다.
DEHYDREACAQU는 STEP1AQUB, STEP1AQUC 또는 양자에서 진행된다;
바람직하게는 DEHYDREACAQU는 STEP1AQUB에서 진행되고 STEP1AQUC까지 더욱 연장될 수 있다.
바람직하게는, DEHYDREACAQU에서 유기 용매가 존재하거나 사용되지 않고, 더욱 바람직하게는 물을 제외한 용매가 존재하거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, STEP1AQU에서 유기 용매가 존재하거나 사용되지 않고, 더욱 바람직하게는 물을 제외한 용매가 존재하거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, DEHYDREACAQU에서 단지 3 성분들 D-소르비톨, p-톨루엔술폰산 및 테트라부틸암모늄 브롬화물만이 DEHYDREACAQU에서 사용되며 충전되고, D-소르비톨은 D-소르비톨과 물의 혼합물 형태로 사용되며 충전되고, 더욱 바람직하게는 또한 TBAB는 TBAB와 물의 혼합물 형태로 사용되고 충전된다.
바람직하게는, DEHYDREACAQU 산에서 p-톨루엔술폰산의 몰 당량은 D-소르비톨의 몰 당량의 0.2 내지 1.6%, 더욱 바람직하게는 0.4 내지 1.4%, 더더욱 바람직하게는 0.6 내지 1.2%, 특히 0.6 내지 1.0%, 더욱 상세하게는 0.8 내지 1.0%, 상세하게는 0.9%이다.
바람직하게는, DEHYDREACAQU 산에서 테트라부틸암모늄 브롬화물의 몰 당량은 D-소르비톨의 몰 당량의 1 내지 3%, 더욱 바람직하게는 1.2 내지 2.5%, 더더욱 바람직하게는 1.4 내지 2%, 특히 1.6 내지 1.8%, 상세하게는 1.7%이다.
바람직하게는, STEP2AQU에서 혼합되는 에탄올의 중량은 D-소르비톨의 중량의 0.2 내지 5 배, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 2 배, 더더욱 바람직하게는 0.2 내지 1 배, 특히 0.2 내지 0.8 배, 더욱 상세하게는 0.2 내지 0.6 배, 더더욱 상세하게는 0.3 내지 0.5 배, 상세하게는 0.4 배이다.
바람직하게는, STEP2AQU에서 혼합되는 이소프로판올의 중량은 D-소르비톨의 중량의 0.2 내지 5 배, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 2 배, 더더욱 바람직하게는 0.2 내지 1 배, 특히 0.2 내지 0.8 배, 더욱 상세하게는 0.2 내지 0.6 배, 더더욱 상세하게는 0.3 내지 0.5 배, 상세하게는 0.4 배이다.
바람직하게는, STEP2AQU는 60 내지 90℃, 더욱 바람직하게는 60 내지 85℃, 더더욱 바람직하게는 65 내지 80℃, 상세하게는 70 내지 75℃의 온도 TEMP2AQU에서 수행된다.
바람직하게는, STEP1AQU는 DEHYDREACAQU 후에, 바람직하게는 STEP1AQUC 후에 냉각 COOL1AQU을 포함하고, MIX1AQU는 TEMP1C에서 TEMP2AQU로 냉각된다.
바람직하게는, COOL1AQU는 시간 TIME1-2AQU 동안 수행되고, TIME1-2AQU는 10 min 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 15 min 내지 5 h, 더더욱 바람직하게는 15 min 내지 2 h, 특히 20 min 내지 1.5 h, 더욱 상세하게는 30 내지 60 min, 상세하게는 45 min이다.
STEP1AQU가 COOL1AQU를 포함하면 SETP1C는 PRESS1C에서 수행되고, 이어 압력은 COOL1AQU 전, 동안 또는 후에 PRESS1C에서 대기압으로 복귀된다.
바람직하게는, 에탄올의 MIX1AQU와의 혼합 후에, STEP2AQU는 시간 TIME2-1AQU 동안 MIX2AQU의 교반 STIRR2AQU을 포함하고, TIME2-1AQU는 30 min 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 8 h, 더더욱 바람직하게는 1 내지 6 h, 특히 1 내지 4 h, 더욱 상세하게는 1.5 내지 3 h, 상세하게는 2 h이다.
바람직하게는, STIRR2AQU는 TEMP2AQU에서 수행된다.
바람직하게는, 1,4-소르비탄의 결정핵이 MIX2AQU에 첨가된다;
바람직하게는, 0.1 내지 2 wt%, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 1.5 wt%, 더더욱 바람직하게는 0.3 내지 1 wt%, 특히 0.4 내지 0.7 wt%, 상세하게는 0.5 wt%의 1,4-소르비탄의 결정핵이 첨가되고, wt%는 D-소르비톨의 중량 기준이다;
바람직하게는, 1,4-소르비탄의 결정핵은 STIRR2AQU 후에 MIX2AQU에 첨가된다.
바람직하게는, MIX2AQU는 투명 용액이다;
더욱 바람직하게는, MIX2AQU는 1,4-소르비탄의 결정핵 첨가 전에 투명 용액이다;
더욱 바람직하게는, STIRR2AQU 후에 MIX2AQU는 투명 용액이다;
더더욱 바람직하게는, STIRR2AQU 후에 및 1,4-소르비탄의 결정핵의 MIX2AQU로의 첨가 전에 MIX2AQU는 투명 용액이다.
바람직하게는, STEP3AQU에서 이소프로판올의 MIX2AQU와의 혼합은 20 내지 70℃, 더욱 바람직하게는 30 내지 60℃, 더더욱 바람직하게는 40 내지 55℃, 상세하게는 45 내지 50℃의 온도 TEMP3-1AQU에서 수행된다.
바람직하게는 에탄올의 MIX1AQU와의 혼합 후, STEP2AQU는 냉각 COOL2AQU를 포함하고, MIX2AQU는 TEMP1C 또는 TEMP2AQU에서 TEMP3-1AQU로 냉각된다.
바람직하게는, COOL2AQU는 STIRR2AQU 후에 수행된다.
더욱 바람직하게는, COOL2AQU는 1,4-소르비탄의 결정핵의 MIX2AQU로의 첨가 후에 수행된다.
바람직하게는, COOL2AQU는 TEMP2AQU에서 TEMP3-1AQU로 수행된다.
바람직하게는, STEP2AQU는 STIRR2AQU 및 1,4-소르비탄의 결정핵의 MIX2AQU로의 첨가 및 COOL2AQU를 포함하고, COOL2AQU는1,4-소르비탄의 결정핵의 MIX2AQU로의 첨가 후에 수행된다.
바람직하게는, COOL2AQU는 시간 TIME2-2AQU 동안 수행되고, TIME2-2AQU는 1 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 8 h, 더더욱 바람직하게는 1 내지 6 h, 특히 1 내지 4 h, 더욱 상세하게는 1 내지 3 h, 상세하게는 2 h이다.
바람직하게는, 1,4-소르비탄의 결정핵은 STIRR2AQU 후에 및 COOL2AQU 전에 MIX2AQU에 첨가된다.
바람직하게는, STEP2AQU에서 사용되는 에탄올의 함량은 에탄올이 MIX1AQU와 혼합 후, 바람직하게는 TEMP2AQU에서, 에탄올 중1,4-소르비탄의 투명 용액이 획득되는 함량이다;
바람직하게는 에탄올의 함량은 상기 투명 용액이 TEMP2AQU에서 에탄올 중1,4-소르비탄의 투명 용액 및 TEMP2AQU, 바람직하게는 예컨대 본원에 정의된 바와 같이 TEMP3-2AQU, 더욱 바람직하게는 예컨대 TEMP3-1AQU 이하의 온도에서 에탄올 중 1,4-소르비탄의 과포화 용액인 함량이다;
더욱 바람직하게는 에탄올의 함량은 TEMP2AQU에서 에탄올 중 1,4-소르비탄의 과포화 용액인 함량이다.
바람직하게는 상기 투명 용액은 STIRR2AQU 후에; 더욱 바람직하게는 STIRR2AQU 후 및 MIX2AQU에 1,4-소르비탄의 결정핵의 첨가 전에 획득된다.
바람직하게는, 에탄올의 함량은 COOL2AQU 동안 결정화가 시작되는 함량이다;
더욱 바람직하게는, 에탄올의 함량은
에탄올이 MIX1AQU와 혼합 후 에탄올 중1,4-소르비탄의 투명 용액이, 바람직하게는 TEMP2AQU에서, 획득되고; 및
COOL2AQU 동안 결정화가 시작되는 함량이다;
더더욱 바람직하게는, 에탄올의 함량은
에탄올이 MIX1AQU와 혼합 후 에탄올 중1,4-소르비탄의 투명 용액이, 바람직하게는 TEMP2AQU에서, 획득되고; 및
상기 투명 용액이 TEMP2AQU에서 에탄올 중1,4-소르비탄의 투명 용액 및 TEMP2AQU, 바람직하게는 예컨대 TEMP3-2AQU, 더욱 바람직하게는 예컨대 TEMP3-1AQU 이하의 온도에서 에탄올 중 1,4-소르비탄의 과포화 용액이고; 및
COOL2AQU 동안 결정화가 시작되는 함량이다.
바람직하게는, COOL2AQU 후에 MIX2AQU는 현탁액이다.
바람직하게는, 이소프로판올이 MIX2AQU와 혼합 후, STEP3AQU는 -5 내지 10℃, 더욱 바람직하게는 -2.5 내지 7.5℃, 더더욱 바람직하게는 -1 내지 6℃, 상세하게는 0 내지 5℃인 온도 TEMP3-2AQU로의 MIX3AQU의 냉각 COOL3AQU를 포함한다.
바람직하게는, COOL3AQU는 시간 TIME3-1AQU 동안 수행되고, TIME3-1AQU는 1 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 8 h, 더더욱 바람직하게는 1 내지 6 h, 특히 2 내지 6 h, 더욱 상세하게는 2 내지 4 h, 상세하게는 3 h이다.
바람직하게는, 이소프로판올이 MIX2AQU와 혼합 후, STEP3AQU는 MIX3AQU의 교반 STIRR3AQU을 포함한다.
바람직하게는, STIRR3AQU는 TEMP3-2AQU에서 수행된다.
바람직하게는, STIRR3AQU는 시간 TIME3-2AQU 동안 수행되고, TIME3-2AQU는 1 내지 12 h, 더욱 바람직하게는 1 내지 10 h, 더더욱 바람직하게는 1 내지 8 h, 특히 2 내지 6 h, 더욱 상세하게는 3 내지 5 h, 상세하게는 4 h이다.
바람직하게는, STIRR3AQU는 COOL3AQU 후에 수행된다.
더욱 바람직하게는, STIRR3AQU는 COOL3AQU 후에 수행되고 STIRR3AQU는 TEMP3-2AQU에서 수행된다.
바람직하게는, MIX3AQU는 현탁액이다.
바람직하게는, 본 방법은 STEP4AQU를 포함하고, STEP4AQU는 STEP3AQU 후에 수행되고, STEP4AQU에서 1,4-소르비탄은 MIX3AQU로부터 분리된다.
STEP4AQU에서 MIX3AQU로부터1,4-소르비탄의 분리는 숙련가에서 알려진 임의의 수단, 예컨대 MIX3AQU에서 임의의 액체의 증발, 여과, 원심분리, 건조, 또는 이들의 조합에 의해 수행되고, 바람직하게는 분리는 여과에 의해 수행된다.
바람직하게는, 1,4-소르비탄은 STEP4AQU에서 MIX3AQU로부터 여과에 의해 분리되어 프레스 케이크를 제공하고, 바람직하게는 프레스 케이크의 이소프로판올로 세척이 이어지고, 바람직하게는 세척된 프레스 케이크의 건조가 이어지고, 바람직하게는 건조는 30 내지 70℃, 더욱 바람직하게는 35 내지 65℃, 더더욱 바람직하게는 40 내지 60℃, 상세하게는 45 내지 55℃의 온도에서 진행된다.
하나의 실시태양에서,
STEP1AQU는 연속하여 DEHYDREACAQU 및 COOL1AQU를 포함한다;
STEP2AQU는 에탄올의 혼합 후에 연속하여 STIRR2AQU 및 COOL2AQU를 포함한다;
STEP3AQU는 이소프로판올의 혼합 후에 연속하여 COOL3AQU 및 STIRR3AQU를 포함한다;
바람직하게는,
STEP1AQU는 연속하여 STEP1AQUA, STEP1AQUB, STEP1AQUC 및 COOL1AQU를 포함한다;
STEP2AQU는 에탄올의 혼합 후에 연속하여 STIRR2AQU 및 COOL2AQU를 포함한다;
STEP3AQU는 이소프로판올의 혼합 후에 연속하여 COOL3AQU 및 STIRR3AQU를 포함한다.
더욱 바람직하게는,
STEP1AQU는 연속하여 STEP1AQUA, STEP1AQUB, STEP1AQUC 및 COOL1AQU를 포함한다;
STEP2AQU는 에탄올의 혼합 후에 연속하여 STIRR2AQU, MIX2AQU로 1,4-소르비탄의 결정핵의 첨가, 및 COOL2AQU를 포함한다;
STEP3AQU는 이소프로판올의 혼합 후 연속하여 COOL3AQU 및 STIRR3AQU를 포함한다.
바람직하게는, STEP1AQU, STEP2AQU 및 STEP3AQU는 연속하여 하나의 동일한 반응기에서 수행된다.
바람직하게는, ACIDCHLOR은 식 (II)의 화합물과 염화티오닐의 반응 REAC-D에 의해 제조된다;
식 중 ACIDCHLOR 및 R1은 본원에서, 또한 모든 실시태양들에 대하여 정의된 바와 같다.
바람직하게는, REAC-D에서 용매가 존재하거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, REAC-D에서 물이 충전되거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, REAC-D에서 촉매가 충전되거나 사용되지 않는다.
바람직하게는, REAC-D는 순수하게 수행되고, 즉 REAC-D에 대하여 사용되거나 충전되는 유일한 물질은 식 (II)의 화합물 및 염화티오닐이다.
바람직하게는, REAC-D 산에서 염화티오닐의 몰 당량은 식 (II) 화합물의 몰 당량의 1 내지 10 배, 더욱 바람직하게는 2 내지 8 배, 더더욱 바람직하게는 3 내지 6 배이다.
바람직하게는, REAC-D는 온도 TEMP-D에서 수행되고, TEMP-D는 0 내지 100℃, 더욱 바람직하게는 10 내지 80℃, 더더욱 바람직하게는 20 내지 80℃, 특히 30 내지 80℃, 더욱 상세하게는 30 내지 75℃이다.
바람직하게는, REAC-D의 반응시간 TIME-D은 30 min 내지 10 h, 더욱 바람직하게는 30 min 내지 5 h, 더더욱 바람직하게는 40 내지 2.5 h이다.
REAC-D는 대기압 또는 대기압보다 높은 압력에서 수행된다;
바람직하게는, REAC-D는 대기압에서 수행된다. 바람직하게는, TEMP-D는 선택되고 압력은 선택 온도로 인한 REAC-D의 반응 혼합물의 증기압 결과이다.
바람직하게는, REAC-D는 불활성 분위기 하에서, 예컨대 질소 또는 아르곤 분위기에서 수행된다.
REAC-D 후에, ACCDICHLOR은 당업자에게 알려진 표준 방법에 의해 분리될 수 있다. 임의의 잔류 염화티오닐은 예를들면 증발 또는 기타 등으로 제거될 수 있다. 생성물은 통상 방법 예컨대 진공 건조에 의해 건조될 수 있다.
본 발명의 또 다른 주제는 본원에 또한 모든 실시태양들에 대하여 정의된 바와 같은 반응 REAC-A에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법으로 획득되는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르이다.
바람직하게는, 본원에 또한 모든 실시태양들에 대하여 정의된 바와 같은 반응 REAC-A에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법으로 획득되는 상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르에서 PEO 1,4-소르비탄 모노에스테르 종의 EO 단위 평균 개수는, 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22이다.
PEO 1,4-소르비탄 모노에스테르 종의 상기 EO 단위 평균 개수는 실시예 9에 기술된 바와 같이 결정된다.
본 발명의 또 다른 주제는 이소소르비드 종, 예컨대 PEO 이소소르비드 및/또는 예컨대 PEO 이소소르비드 지방산 에스테르를 함유하지 않은 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르이다;
바람직하게는 분석은 MALDI 및/또는 13C NMR 및/또는 HPLC에 의해 수행된다;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 소르비톨 종, 예컨대 소르비톨 에스테르 에톡실레이트를 함유하지 않는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르이다;
바람직하게는 분석은 MALDI에 의해 수행된다;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 MALDI 스펙트럼에서 단 하나의 최대치 (maximum)를 가지는 신호 분포를 보이는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르이다;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 MALDI 스펙트럼은 다음 MW를 가지는 물질의 신호를 보이지 않는다:
3500 이상으로 신호 높이는 MALDI 스펙트럼의 전체 분포 최대치 대비 5% 이상, 바람직하게는 4% 이상, 더욱 바람직하게는 3% 이상, 더더욱 바람직하게는 2% 이상, 특히 1% 이상;
바람직하게는 3400 이상으로 신호 높이는 MALDI 스펙트럼의 전체 분포 최대치 대비 5% 이상, 바람직하게는 4% 이상, 더욱 바람직하게는 3% 이상, 더더욱 바람직하게는 2% 이상, 특히 1% 이상;
더욱 바람직하게는 3300 이상으로 신호 높이는 MALDI 스펙트럼의 전체 분포 최대치 대비 5% 이상, 바람직하게는 4% 이상, 더욱 바람직하게는 3% 이상, 더더욱 바람직하게는 2% 이상, 특히 1% 이상;
더더욱 바람직하게는 3200 이상으로 신호 높이는 MALDI 스펙트럼의 전체 분포 최대치 대비 5% 이상, 바람직하게는 4% 이상, 더욱 바람직하게는 3% 이상, 더더욱 바람직하게는 2% 이상, 특히 1% 이상;
특히 3100 이상으로 신호 높이는 MALDI 스펙트럼의 전체 분포 최대치 대비 5% 이상, 바람직하게는 4% 이상, 더욱 바람직하게는 3% 이상, 더더욱 바람직하게는 2% 이상, 특히 1% 이상;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 MW이 3500 이상, 바람직하게는 3400 이상, 더욱 바람직하게는 3300 이상, 더더욱 바람직하게는 3200 이상, 특히 3100 이상인 물질을 함유하지 않고;
물질의 MW은 바람직하게는 MALDI에 의해 결정되고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 흡열 신호를 보이되 최대 신호는 온도 13 ℃ 이하, 바람직하게는 -15 ℃ 이하, 더욱 바람직하게는 -20 ℃ 이하, 더더욱 바람직하게는 -25 ℃ 이하, 특히 -27.5 ℃ 이하이고;
DSC에서 흡열 신호는 바람직하게는 델타 H는 35 J/g 이하, 더욱 바람직하게는 30 J/g 이하, 더더욱 바람직하게는 25 J/g 이하, 특히 20 J/g 이하, 더욱 상세하게는 15 J/g 이하, 더더욱 상세하게는 10 J/g 이하, 상세하게는 5 J/g 이하, 더욱 상세하게는 1 J/g 이하이고;
흡열 신호는 바람직하게는 DSC의 가열 주기에 있고; 더욱 바람직하게는 흡열 신호는 DSC의 제1 가열 주기에 있고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 흡열 신호를 보이되 델타 H는 35 J/g 이하, 바람직하게는 30 J/g 이하, 더욱 바람직하게는 25 J/g 이하, 더더욱 바람직하게는 20 J/g 이하, 특히 15 J/g 이하, 더욱 상세하게는 10 J/g 이하, 더더욱 상세하게는 5 J/g 이하, 상세하게는 1 J/g 이하이고;
DSC에서 흡열 신호는 바람직하게는 최대 신호는 온도 13 ℃ 이하, 바람직하게는 -15 ℃ 이하, 더욱 바람직하게는 -20 ℃ 이하, 더더욱 바람직하게는 -25 ℃ 이하, 특히 -27.5 ℃ 이하이고;
흡열 신호는 바람직하게는 DSC의 가열 주기에 있고; 더욱 바람직하게는 흡열 신호는 DSC의 제1 가열 주기에 있고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 최대 신호가 온도 -13 ℃ 초과, 바람직하게는 -15 ℃ 초과, 더욱 바람직하게는 -20 ℃ 초과, 더더욱 바람직하게는 -25 ℃ 초과, 특히 -27.5 ℃ 초과인 흡열 신호를 보이지 않고;
DSC에서 상기 흡열 신호는 바람직하게는 델타 H는35 J/g 초과, 더욱 바람직하게는 30 J/g 초과, 더더욱 바람직하게는 25 J/g 초과, 특히 20 J/g 초과, 더욱 상세하게는 15 J/g 초과, 더더욱 상세하게는 10 J/g 초과, 상세하게는 5 J/g 초과, 더욱 상세하게는 1 J/g 초과이고;
상기 흡열 신호는 바람직하게는 DSC의 가열 주기에 있고; 더욱 바람직하게는 DSC의 제1 가열 주기에 있고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 델타 H가 35 J/g 초과, 바람직하게는 또는 30 J/g 초과, 더욱 바람직하게는 25 J/g 초과, 더더욱 바람직하게는 20 J/g 초과, 특히 15 J/g 초과, 더욱 상세하게는 10 J/g 초과, 더더욱 상세하게는 5 J/g 초과, 상세하게는 1 J/g 초과인 흡열 신호를 보이지 않고;
DSC에서 상기 흡열 신호는 바람직하게는 최대 신호가 온도 13 ℃ 초과, 더욱 바람직하게는 -15 ℃ 초과, 더더욱 바람직하게는 -20 ℃ 초과, 특히 -25 ℃ 초과, 더욱 상세하게는 -27.5 ℃ 초과이고;
상기 흡열 신호는 바람직하게는 DSC의 가열 주기에 있고; 더욱 바람직하게는 DSC의 제1 가열 주기에 있고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 델타 H가 30 J/g 초과, 바람직하게는 25 J/g 초과, 더욱 바람직하게는 20 J/g 초과, 더더욱 바람직하게는 15 J/g 초과, 특히 10 J/g 초과, 더욱 상세하게는 5 J/g 초과, 더더욱 상세하게는 1 J/g 초과인 발열 신호를 보이지 않고;
DSC에서 상기 발열 신호는 바람직하게는 최대 신호가 온도 -50 ℃ 이상; 더욱 바람직하게는 -55 ℃ 이상, 더더욱 바람직하게는 -60 ℃ 이상, 특히 -70 ℃ 이상, 더욱 상세하게는 -80 ℃ 이상이고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 최대 신호가 온도 -50 ℃ 이상; 바람직하게는 -55 ℃ 이상, 더욱 바람직하게는 -60 ℃ 이상, 더더욱 바람직하게는 -70 ℃ 이상, 특히 -80 ℃ 이상인 발열 신호를 보이지 않고;
DSC에서 상기 흡열 신호는 바람직하게는 델타 H가 30 J/g 초과, 더욱 바람직하게는 25 J/g 초과, 더더욱 바람직하게는 20 J/g 초과, 특히 15 J/g 초과, 더욱 상세하게는 10 J/g 초과, 더더욱 상세하게는 5 J/g 초과, 상세하게는 1 J/g 초과이고;
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 19 내지 23, 바람직하게는 20 내지 22, 더욱 바람직하게는 20 또는 22의 산화에틸렌 단위 평균량을 가진다.
본 발명의 또 다른 주제는 약물 제제의 조제에서 본원에 또한 모든 실시태양들에 대하여 정의된 바와 같이 반응 REAC-A에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법으로 획득 가능한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 부형제로서의 용도이다.
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르가 부형제로서 사용되는 약물 제제는, 비경구적으로 적용되는 제형이다.
본 발명의 또 다른 주제는 10 wt% 이하, 바람직하게는 8 wt% 이하, 더욱 바람직하게는 6 wt% 이하, 더더욱 바람직하게는 4 wt% 이하, 특히 3 wt% 이하, 더욱 상세하게는 2 wt% 이하, 더더욱 상세하게는 1.5 wt% 이하의 PEO 이소소르비드 모노올레이트를 함유하는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르이고, 이때 wt%는 PEO 이소소르비드 모노올레이트 함량이 분석되는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 샘플 중량 기준이다.
본 발명의 방법으로 제조되는 폴리소르베이트, 즉 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는 고순도를 보인다;
저함량의 소르비톨, 소르비탄, 1,4:3,6 이소소르비드, 소르비톨 고분자, 및 임의의 이들 이성질체;
저함량의 폴리에틸렌 글리콜;
저함량의 PEO 이소소르비드, PEO 소르비탄 및 임의의 이들 이성질체, 예컨대 PEO 1,4-소르비탄;
저함량의 지방산 예컨대 올레산;
저함량의 이소소르비드 지방산 에스테르, 소르비탄 지방산 에스테르 및 임의의 이들 이성질체, 예컨대 1,4-소르비탄 지방산 에스테르, 상세하게는 예컨대 1,4-소르비탄 올레이트 및 이소소르비드 모노-, 디- 또는 트리올레이트;
저함량의 PEO 지방산 에스테르, 예컨대 PEO 모노-, 디- 또는 트리올레이트;
저함량의 PEO 이소소르비드 지방산 에스테르, 예컨대 PEO 이소소르비드 모노-, 디- 또는 트리올레이트;
고함량의 PEO 1,4-소르비탄 지방산 에스테르, 예컨대 PEO 1,4-소르비탄 모노에스테르, PEO 1,4-소르비탄 모노올레이트;
폴리소르베이트는 낮은 착색도 (low coloration)를 보인다; 이는 산화에틸렌 단위 개수의 좁은 분포도를 가진다; 이는 양호한 유화도 및 안정화 특성을 보인다.
본 발명의 방법으로 제조되는 폴리소르베이트, 즉 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르는, 약물 제제의 제조에서 부형제, 예컨대 비경구적으로 적용되는 약물 제제에서 부형제로서 사용될 수 있다. 폴리소르베이트는 생물제제 및 백신의 안정화에 사용된다. 특히 비경구적으로 적용되는 약품에서, 입자 형성이 감소되거나 심지어 없어질 수 있다. 유통 기간이 연장되고, 예를 들어 입자 형성 감소로 회분이 줄어든다. 입자 형성은 다양한 방식, 예컨대 DLS (동적 광산란) 또는 라만 분광법으로 측정될 수 있다.
추가 용도는 계면활성제, 습윤제, 유화제 및 용해보조제로서의 용도이다. 유화제로서 폴리소르베이트는 에멀션 제조에 사용되고, 이는 크림 및 국소 및 경구용 에멀션 및 안과, 비과 (nasal), 이 (otic)과 제제, 또는 흡입 제제일 수 있다. 용해보조제로서 폴리소르베이트는 예를들면 비경구적으로 적용되는, 난용성 약물, 예컨대 주사액, 점안액 등과 함께 사용된다. 집적 방지 및 계면 응력 감소를 위한 생물제제용 안정화제로서, 폴리소르베이트는 제제 과정 및 정맥, 피하 및 근육내 주사액에서 사용된다. 폴리소르베이트는 공지 폴리소르베이트와 대비하여 예를 들어 더 낮은 CMC (임계 미셀 농도)를 보이고, 이는 예를 들어 에멀션 제조에 필요한 함량이 공지 폴리소르베이트 보다 더 낮다는 것을 의미하고 또는 달리 언급하자면, 예를들면 Z-전위 측정으로 보이는 바와 같이 동일 함량에서 에멀션이 더욱 안정하다는 것을 의미한다. CMC는 예를 들어 특히 낙하 부피 장력 (drop volume tensiometric)으로 측정된다. 폴리소르베이트는 예를 들어 접촉각 (goniometric) 측정으로 결정되는 바와 같이 더 낮은 계면 장력을 보이고; 또한 타원 편광법 (elipsometry)을 사용하여 공지 생성물과 비교하여 표면 (계면) 특성에 대하여 본 폴리소르베이트의 개선된 성능이 특정된다. 폴리소르베이트는 단백질 안정화에 있어서 개선된 성능을 보인다. 이는 특히 SWAXD (협각 및 광각 X-선 회절), 싱크로톤 (Synchroton)-SAXS (Synchrotron 협각 X-선 산란), QCM-D (흡착, 손실형 수정진동자 미소저울), 중성자 편광측정기 (neutron deflectometry) 또는 Z-전위에 의해 결정된다. 또한 lTC (등온 적정형 열량계)는 공지 폴리소르베이트와 비교하여 단백질과의 상호 작용에 있어서 본 폴리소르베이트의 개선된 성능을 보이는 또 다른 방법이다.
또 다른 중요한 양태는 면역 반응이다. 본 폴리소르베이트가 비경구적으로 적용될 때, 예컨대 항암 약물, 생물제제 및 단백질 제제에서 상이한 유형의 면역 반응이 현저하다. 탁솔과 같은 화합물은 난용성이고 폴리소르베이트와 같은 용해보조제가 요구된다. 폴리소르베이트로 인한 면역 반응으로 인하여 치료를 중단할 필요가 있을 수 있고, 이러한 결과는 치명적일 수 있다. 리 등에 의하면 순도 및 부산물 저함량은 면역 반응의 위험성을 낮출 수 있다는 것이 알려져 있다.
달리 언급되지 않는 한 도면에서의 설명은 다음을 의미한다,:
DSCExo^ 열류량, 달리 언급이 없는 한 발열 유량은 정 (positive)이고, 흡열 유량은 부(negative)이다
MALDI 강도 (a.u.) 임의 단위의 강도
m/z 질량 대 전하비
분취용 HPLCa.u. 임의 단위의 강도
도 1 실시예 2의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 2 실시예 4 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 3 실시예 5 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 4 실시예 6 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 5Croda HP 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 6NOF 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 7 실시예 5 의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 8Croda HP 의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 9NOF 의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 10 실시예 10의 MALDI 스펙트럼
도 11 실시예 2의 MALDI 스펙트럼
도 12 실시예 4의 MALDI 스펙트럼
도 13 실시예 5의 MALDI 스펙트럼
도 14 실시예 6의 MALDI 스펙트럼
도 15 가우스 분포 함수 곡선과 중첩된 실시예 10의 MALDI 스펙트럼
도 16 실시예 5의 분취용 HPLC의 HPLC 크로마토그램, UV 흡광 (실선) 및 중량 분포 (점선)와 중첩됨
도 17Croda HP의 분취용 HPLC의 HPLC 크로마토그램, UV 흡광 (실선) 및 중량 분포 (점선)와 중첩됨
도 18 분취용 HPLC의 HPLC UV 크로마토그램, 실시예 5 (실선) 및 Croda HP (점선)와 중첩됨
도 19HPLC 중량 크로마토그램 분취용 HPLC, 실시예 5 (실선) 및 Croda HP (점선)와 중첩됨
도 20 실시예 5의 DSC 측정에서 흡열부 (valley) 면적 분석도, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 가열 주기, 차원 표시를 위해 y-축 스케일링은 정규화되고, 단지 0 W/g 위치를 제공하지 않음.
도 21Croda HP의 분취용 HPLC의 HPLC UV 크로마토그램
도 22aMALDI 스펙트럼: (A) 실시예 5, (B) NOF, (C) Croda HP (도 22a) 및 (D) Croda SR (도 22b)의 비교
도 22bMALDI 스펙트럼: (A) 실시예 5, (B) NOF, (C) Croda HP (도 22a) 및 (D) Croda SR (도 22b)의 비교
도 23Croda의 폴리소르베이트 합성
도 24Croda의 폴리소르베이트의 두 생성물 범주들을 위한 원재료
도 25Croda HP 및 Croda SR의 공정 차이
도 26Croda HP 및 Croda SR의 색상 차이
도 27Croda SR의 MALDI 스펙트럼
도 28Croda SR의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 29Croda SR의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 30a (A) 실시예 5, (B) NOF (도 30a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 30b)의 질량 분포 좌측에 가우스 분포 함수를 피팅
도 30b (A) 실시예 5, (B) NOF (도 30a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 30b)의 질량 분포 좌측에 가우스 분포 함수를 피팅
도 31a (B) NOF (도 31a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 31b)의 MALDI 스펙트럼의 3 피크들 각각에 3 가우스 곡선들을 피팅, 및 실시예 5 (도 31a)의 MALDI 스펙트럼에서 하나의 피크에1 가우스 곡선을 피팅.
도 31b(B) NOF (도 31a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 31b)의 MALDI 스펙트럼의 3 피크들 각각에 3 가우스 곡선들을 피팅, 및 실시예 5 (도 31a)의 MALDI 스펙트럼에서 하나의 피크에1 가우스 곡선을 피팅.
도 32a (B) NOF (도 32a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 32b)의 MALDI 스펙트럼의 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅, 및 실시예 5 (도 32a)의 MALDI 스펙트럼에서 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅함.
도 32b(B) NOF (도 32a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 32b)의 MALDI 스펙트럼의 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅, 및 실시예 5 (도 32a)의 MALDI 스펙트럼에서 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅함.
도 33PEO 이소소르비드 올레이트 (농도들 0.001, 0.002 및 0.006 mg/ml)의 3 용액들에 대한 검량선들
DSCExo^ 열류량, 달리 언급이 없는 한 발열 유량은 정 (positive)이고, 흡열 유량은 부(negative)이다
MALDI 강도 (a.u.) 임의 단위의 강도
m/z 질량 대 전하비
분취용 HPLCa.u. 임의 단위의 강도
도 1 실시예 2의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 2 실시예 4 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 3 실시예 5 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 4 실시예 6 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 5Croda HP 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 6NOF 의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 7 실시예 5 의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 8Croda HP 의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 9NOF 의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 10 실시예 10의 MALDI 스펙트럼
도 11 실시예 2의 MALDI 스펙트럼
도 12 실시예 4의 MALDI 스펙트럼
도 13 실시예 5의 MALDI 스펙트럼
도 14 실시예 6의 MALDI 스펙트럼
도 15 가우스 분포 함수 곡선과 중첩된 실시예 10의 MALDI 스펙트럼
도 16 실시예 5의 분취용 HPLC의 HPLC 크로마토그램, UV 흡광 (실선) 및 중량 분포 (점선)와 중첩됨
도 17Croda HP의 분취용 HPLC의 HPLC 크로마토그램, UV 흡광 (실선) 및 중량 분포 (점선)와 중첩됨
도 18 분취용 HPLC의 HPLC UV 크로마토그램, 실시예 5 (실선) 및 Croda HP (점선)와 중첩됨
도 19HPLC 중량 크로마토그램 분취용 HPLC, 실시예 5 (실선) 및 Croda HP (점선)와 중첩됨
도 20 실시예 5의 DSC 측정에서 흡열부 (valley) 면적 분석도, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 가열 주기, 차원 표시를 위해 y-축 스케일링은 정규화되고, 단지 0 W/g 위치를 제공하지 않음.
도 21Croda HP의 분취용 HPLC의 HPLC UV 크로마토그램
도 22aMALDI 스펙트럼: (A) 실시예 5, (B) NOF, (C) Croda HP (도 22a) 및 (D) Croda SR (도 22b)의 비교
도 22bMALDI 스펙트럼: (A) 실시예 5, (B) NOF, (C) Croda HP (도 22a) 및 (D) Croda SR (도 22b)의 비교
도 23Croda의 폴리소르베이트 합성
도 24Croda의 폴리소르베이트의 두 생성물 범주들을 위한 원재료
도 25Croda HP 및 Croda SR의 공정 차이
도 26Croda HP 및 Croda SR의 색상 차이
도 27Croda SR의 MALDI 스펙트럼
도 28Croda SR의 DSC 측정, 제1 가열 주기
도 29Croda SR의 DSC 측정, 제1 (실선) 및 제2 (점선) 냉각 주기
도 30a (A) 실시예 5, (B) NOF (도 30a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 30b)의 질량 분포 좌측에 가우스 분포 함수를 피팅
도 30b (A) 실시예 5, (B) NOF (도 30a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 30b)의 질량 분포 좌측에 가우스 분포 함수를 피팅
도 31a (B) NOF (도 31a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 31b)의 MALDI 스펙트럼의 3 피크들 각각에 3 가우스 곡선들을 피팅, 및 실시예 5 (도 31a)의 MALDI 스펙트럼에서 하나의 피크에1 가우스 곡선을 피팅.
도 31b(B) NOF (도 31a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 31b)의 MALDI 스펙트럼의 3 피크들 각각에 3 가우스 곡선들을 피팅, 및 실시예 5 (도 31a)의 MALDI 스펙트럼에서 하나의 피크에1 가우스 곡선을 피팅.
도 32a (B) NOF (도 32a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 32b)의 MALDI 스펙트럼의 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅, 및 실시예 5 (도 32a)의 MALDI 스펙트럼에서 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅함.
도 32b(B) NOF (도 32a), (C) Croda HP 및 (D) Croda SR (도 32b)의 MALDI 스펙트럼의 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅, 및 실시예 5 (도 32a)의 MALDI 스펙트럼에서 모든 신호들에 하나의 가우스 곡선을 피팅함.
도 33PEO 이소소르비드 올레이트 (농도들 0.001, 0.002 및 0.006 mg/ml)의 3 용액들에 대한 검량선들
실시예들
재료
달리 언급이 없는 한 재료들은 다음과 같다:
염화티오닐의 밀도: 1.683 kg/L
NOF 폴리소르베이트 80 (HX2)™, Lot 704352, NOF 사, 동경, 일본
MALDI를 이용하여 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르, 및 또한 소르비톨 종, 예컨대 소르비톨 에스테르 에톡실레이트는 검출 가능.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출 가능.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출 가능.
MALDI 스펙트럼은 3 최대치 (maxima)를 가지는 신호 분포를 보임.
Croda HPTween® 80HP-LQ-(MH), 또한 Tween 80 HP로 칭함, "HP"란 "High Purity"를 의미함, 회분 번호 0001176143, 화학적 설명: 폴리소르베이트 80, Croda Europe Limited, 62920 Chocques, 프랑스
MALDI를 이용하여 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르, 및 또한 소르비톨 종, 예컨대 소르비톨 에스테르 에톡실레이트는 검출 가능.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출 가능.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출 가능.
MALDI 스펙트럼은 3 최대치의 신호 분포를 보임.
Croda SRSUPER REFINED® 폴리소르베이트 80-LQ-(MH), 회분 번호 0001186606, 화학적 설명: 폴리소르베이트 80, Croda Europe Limited, Cowick Hall, Snaith, Goole, DN14 9AA, East Riding of Yorkshire, GB
MALDI를 이용하여 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르, 및 또한 소르비톨 종, 예컨대 소르비톨 에스테르 에톡실레이트는 검출 가능.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출 가능.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출 가능.
MALDI 스펙트럼은 3 최대치의 신호 분포를 보임.
D-소르비톨98 wt%
TsOH-H2O99 wt%
TBAB98 wt%
에탄올99 wt%
이소프로판올99 wt%
방법:
(A) HPLC-ELSD
HPLC-ELSD는 증발 광산란 검출식 역상 HPLC이다.
컬럼:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 (150 mm x 3 mm; 3.5 마이크로미터)
펌프:
min 압력:5 bar
may 압력:400 bar
최대 유량 구배:100 mL/min2
용출액 A: 초순수 H2O
용출액 B: 이소프로판올
구배:
주입:
주입량 10 마이크로리터
자동주입기:
주사기 용량 100 마이크로리터
주사 모드 니들 세척 주사 / 세척액: 아세토니트릴
검출기
검출기 유형 ELSD
온도 60 ℃
압력 (Gas) 3.5 bar
게인 (Gain) 10
필터 8 s
컬럼 오븐
온도 20 ℃
SAT/IN
단위 mV
설명 ELSD
기준화 인자 1000
샘플링 레이트 10
전형적인 적분 파라미터
피크 폭 250
한계값 20
저지(Inhibit) 적분 42 - 56 min
샘플 전처리:
50 mg +/- 5 mg 샘플을 50 ml의 아세토니트릴에 녹인다.
HPLC 크로마토그램에 의해 결정되는 백분율은 각자 신호의 면적 백분율이다.
신호-대-잡음 비율 3으로 LOD (검출한계)는 0.06 면적-%.
신호-대-잡음 비율 10으로 LOQ (정량한계)는 0.20 면적-%.
HPLC 크로마토그램에서 0.06 이상의 면적-% 신호들의 부재는 이소소르비드가 검출되지 않는다는 것을 의미한다.
HPLC 크로마토그램에서 0.06 내지 0.20의 면적-% 신호들의 존재는 이소소르비드가 검출되지만 정량되지 않는다는 의미이다.
HPLC 크로마토그램에서 0.20 이상의 면적-% 신호들의 존재는 이소소르비드가 정량 가능하다는 의미이다.
(B) DSC
모든 측정들은 동일 방식으로 측정되고, 달리 언급되지 않는 한, 상이한 생성물들에 대하여 샘플 중량 범위가 2 내지 12 mg인 샘플들이 사용된다. 달리 언급되지 않는 한 샘플들을 진공 피스톨에서 밤새 실온으로 건조하고, 이어 즉시 글로브 백에서 핀으로 40 마이크로리터 알루미늄 팬들 (Mettler Toledo 사)에 밀폐시켜 주변으로부터 임의의 습기 침투를 방지하고 최소화하며, 이어 팬들에 대하여 DSC 1 STARe 시스템 (Mettler Toledo사)으로 DCS 측정을 진행한다. 샘플들을 25에서 -80 ℃로 운전하고, 5 min 동안 -80 ℃에서 평형시키고, 이어 -80에서 +80 ℃로 가열하고, 5 min 동안 +80 ℃에서 평형시킨다 (제1 주기로 표기). 이어 이러한 열적 주기를 반복하고, +80 에서 -80 ℃, -80 ℃에서 평형, -80에서 +80 ℃, +80 ℃에서 평형 및 이어 25 ℃로 복귀하고, 모든 가열 및 냉각 구간들에서는 10 ℃/min이다. 달리 언급되지 않는 한, 제1 열적 주기로부터 가열 구간들이 표시된다. 특히 사항이 없다면, 제2 가열 주기의 측정은 제1 가열 주기의 측정과 동일한 신호를 발생시키고, 이에 따라 샘플들은 임의의 열적 이력을 보이지 않는다는 것이 확인된다.
(C) 분취용 HPLC 및 미-분획화 샘플들의 MALDI 및 DSC
(C1) 샘플 전처리 및 분취용 HPLC
달리 언급되지 않는 한 모든 샘플들이 사용된다. 샘플들을 ACN에 녹여 300 mg/ml 농도의 용액을 만든다. 300 마이크로리터의 본 용액을 주입하고 (Waters 샘플 관리자 2700) C18 컬럼 (Xterra Prep MS C18 OBD, 5 마이크로미터, 19x100 mm, Waters)에 로딩한다. 유량 10 ml/min 및 컬럼 온도 50 ℃ (컬럼 온도 조절기 TCC-100, Dionex)로 45% ACN에서 시작하여30 min 동안 점차 100 %로 올리는 ACN:H2O 구배를 이용하여 폴리소르베이트 종을 분리한다. 100 % ACN에서 더 이상 검출되지 않는 120 min까지 계속 분리한다. 종들은 UV 검출기 (Waters 2487 이중 흡광 검출기)로 195 nm (올레산에 존재하는 C=C 결합들에 대한 람다 max 엡실론 = 11000)에서 검출된다. 데이터 수집에 MassLynx V4.0 소프트웨어를 사용하였다. 10 ml 분획물들을 수동으로 20 ml 유리관들에 수집한다. 각각의 관에서 10 마이크로리터를 취하여 MALDI 분석에 사용한 후 진공 (GeneVac 원심 증류기 EZ-2, SP Scientific) 하에서 완전 증발시킨다. 증류된 분획물들은 이어 DSC 분석에 사용된다.
(C2) 분취용 HPLC (C1)에서 얻은 샘플들 및 미-분획화 샘플들의 MALDI
2.5-디히드록시벤조산 (super-DHB >=99.0%, Sigma Aldrich)을 매트릭스로 사용하고 EtOH 중 5 mg/ml 용액으로 준비하되 오로지 나트륨화 부가물을 검출하도록10 mM NaCl을 첨가한다. 사용 전, 매트릭스를 10 min 동안 조에서 음파 파쇄하여 용액을 얻는다. 미-분획화 샘플들은 에탄올에 녹여 5 mg/ml 농도의 용액을 얻고, HPLC 분획물들에 대하여는 10 마이크로리터 샘플들을 추가 전처리없이 그대로 사용한다. 모든 샘플들을 매트릭스와 1:1 (vol:vol) 혼합하고 와류 교반한 후 각각의 샘플 1 마이크로리터를 표적판 (MPT 384 연마 강재, Bruker)에 3회 점적한다. 모든 점적 샘플들을 건조시키고 판에서 결정화한 후 MALDI 측정을 수행한다. 양이온 MALDI-TOF 질량 분석은 반사 모드에서 5 Hz 주파수로 작동되는337 nm N2 레이저가 구비되는 Ultraflex TOF/TOF, Bruker Daltonics 장비에서 수행되었다. 스펙트럼은 가속 전압 25 kV에서 450 Da까지 매트릭스 억제하면서 측정 당 총 1000 수집으로 기록되었다. 레이저 파워는 검출 한계값보다 약간 높게 (통상 ca. 40 %) 유지되어 최적 피크 해상도를 달성한다. 모든 질량 분석 스펙트럼은 FlexControl 3.4로 취득되고 FlexAnalysis 3.4 소프트웨어로 분석된다.
(C3) 분취용 HPLC (C1)에서 얻은 샘플들의 DSC
분취용 HPLC 분리로 얻은 증류된 샘플들을 20 ml 관에서 아세톤으로 녹여 추출하고 (3 회 세척하고) 0.1 ml 마이크로-인서트 (micro-inserts) (Sigma Aldrich)가 구비된1.5 ml 유리 바이알로 옮긴다. 샘플들을 이어 진공에서 완전히 증류시킨다(GeneVac 원심 증류기 EZ-2, SP Scientific). 이후 모든 샘플들을 진공 피스톨에서 밤새 건조시키고 DSC 팬 (40 마이크로리터, 핀 구비 알루미늄 팬, Mettler Toledo)으로 옮기고 습도가 조절되도록 (ca. 7% 이하) 진공 백에서 밀봉하여 주변에서 습기가 침투되지 않도록 한다.
DSC 측정은 방법 설명 (B) DCS에 따라 수행된다.
(D) GC (1,4-소르비탄)
장비 파라미터
칼럼DB-1 HT (30 m * 0.25 mm * 0.1 μm) Agilent Technologies, Santa Clara, USA
온도 프로그램:
개시; 시간100 ℃; 0 min
속도1; 최종 1; 시간 18℃/min; 350℃; keep 10min
운전 시간41.25 min
평형 시간0.5min
모드Cons. 유량
캐리어 가스H2
유량1.5 ml/min
분할비10:1
입구 온도350 ℃
주입량1 마이크로리터
검출기 온도350℃
샘플 전처리
샘플 저장 용액
2 g 샘플을 나사식-뚜겅 병 (25 mL)에 있는 5 ml 피리딘 및 10 ml 아세트산 무수물에 첨가하고 120℃까지 2 시간 교반하면서 가열한다.
샘플 용액
0.5 ml의 샘플 저장 용액을 자동 샘플러 바이알에 1 ml의 디클로로메탄과 함께 첨가하고 혼합한다.
1,4-소르비탄은 ca. 12.3 min에 검출된다.
(E) 1H NMR
1H NMR은 숙련가에서 일반적인 분석 방법이므로, 단 하나의 사용 가능한 예시적 파라미터 세트가 다음과 같이 제시된다:
용매: DMSO-d6
5 내지 10 mg의 샘플을 0.6 ml의 DMSO-d6에 용해시키고 잘 혼합한다.
(F) 13C NMR
13C NMR 은 숙련가에서 일반적인 분석 방법이므로, 단 하나의 사용 가능한 예시적 파라미터 세트가 다음과 같이 제시된다:
용매: DMSO-d6
20 내지 50 mg의 샘플을 0.6 ml의 DMSO-d6에 용해시키고 양호하게 혼합한다.
(G) 선광 방법 (1,4-소르비탄)
장비 파라미터
장비MCP 300, Anton Paar GmbH, Graz, Austria
파장589 nm
셀100.00 mm
온도20.0 ℃
응답2 s
측정N=5
지연10 s
안정 온도±0.3℃
샘플 전처리
블랭크
순수
샘플 용액
300±3 mg의 1,4-소르비탄을 100 ml 정량 플라스크에 첨가하고, 이어 물로 녹이고 정량까지 희석하였다.
(H) 이소소르비드 종 존재 또는 부재 확인을 위한 13C NMR 방법
측정 전에 샘플들을 중수소화 클로로포름에 용해한다. 대략 90 내지 120 mg의 물질을 0.55 ml의 d1-클로로포름과 혼합한다. 0.5 ml의 용액을 5 mm NMR 관에 채운다. 1H-디커플된 13C-NMR, 13C(1H)-NMR은 양성자 디커플링 및 핵오버 하우저 효과 (NOE)로 수행된다. 측정은 25 ℃에서, 400 MHz 분광기로 공명 주파수 100.61 MHz에서 수행된다. 샘플들을 8192 스캔들로 운전하고, 펄스 길이 14.5 micro-sec (90°), 20 Hz 스핀, 수집 시간 1.301 s, 및 이완 지연 5 s이 적용된다. 스펙트럼 폭 25188.9 Hz (250 ppm)을 적용하여 32768 복잡 데이터 점들이 얻어진다. 선 폭증가 1 Hz 및 128k 데이터 점들로 제로 필링하여 모든 스펙트럼은 푸리에 변환된다. 스펙트럼은 상 및 기준선 보정되고, 13C-NMR에서 TMS에 대하여77.23 ppm에서 결정되는 클로로포름 피크를 참고 피크로 사용한다.
실시예 1 -염화티오닐을 이용한 염화올레오일
교반 막대가 구비된 2-구 환저 플라스크에 올레산 (12.62 g, 40.9 mmol, 1.0 equiv)을 채우고 플라스크를 N2로 퍼징하였다. 40 ℃로 가열 후, 교반하면서 투입 깔대기를 이용하여 10 min에 걸쳐 염화티오닐 (12.5 ml, 172.0 mmol, 4.2 equiv)을 적가하였고, 가스 발생을 확인하였다. 이어 65 ℃로 승온하고 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 과잉 SOCl2 를 회전 증발기로 제거하고 진공 건조하여 염화올레오일을 획득하였다. 염화올레오일의 수율은 100%로 추정된다.
실시예 2- 염화티오닐로부터의1.0 equiv 염화올레오일을 이용한 폴리소르베이트 80
실시예 10에 따라 제조되는 PEO 소르비탄 (47.1 g, 42.9 mmol, 1.0 equiv)을 1-구 환저 플라스크에서 계량하고 플라스크 내부를 N2로 교환하였다. 실시예 1에 따라 제조된 전량의 염화올레오일을 실온에서 첨가하고 반응 혼합물을 15 min 동안 실온에서 교반하였다.
약 80 mbar의 감압하에서 ca. 10 min 동안 혼합물 증기가 증류되었다. 증기 증류에 의해 pH는 ca. 1.5에서 ca. 4.5으로 상승하였다.
증기 증류에서 얻은 생성물을 분석하였다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
실시예 3 - 염화티오닐을 이용한 염화올레오일
교반 막대가 구비된 2-구 환저 플라스크에 올레산 (30.0 g, 97.3 mmol, 1.0 equiv)을 채우고 플라스크를 N2로 퍼징하였다. 40 ℃로 가열 후, 교반하면서 투입 깔대기를 이용하여 10 min에 걸쳐 염화티오닐 (30 ml, 413.0 mmol, 4.2 equiv)을 적하하였고, 가스 발생을 확인하였다. 이어 65 ℃로 승온하고 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 과잉 SOCl2 를 회전 증발기로 제거하고 진공 건조하여 염화올레오일을 획득하였다. 염화올레오일의 수율은 100%로 추정된다.
실시예 4 - 염화티오닐로부터의1.2 equiv 염화올레오일을 이용한 폴리소르베이트 80
실시예 10에 따라 제조되는 PEO 소르비탄 (22.4 g, 21.4 mmol, 1.0 equiv)을 1-구 환저 플라스크에서 계량하고 플라스크 내부를 N2로 교환하였다. 염화올레오일 (7.74 g, 25.7 mmol, 1.2 equiv, 실시예 3에 따라 제조) 을 실온에서 첨가하고 반응 혼합물을 15 min 동안 실온에서 교반하였다.
약 80 mbar의 감압하에서 ca. 10 min 동안 혼합물 증기가 증류되었다. 증기 증류에 의해 pH는 ca. 1.5에서 ca. 4.5으로 상승하였다.
증기 증류에서 얻은 생성물을 분석하였다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
실시예 5 - 염화티오닐로부터의1.4 equiv 염화올레오일을 이용한 폴리소르베이트 80
실시예 4를 반복하되 1.2 equiv 대신1.4 equiv 염화올레오일이 사용되는 것이 다르다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
실시예 6 - 염화티오닐로부터의1.6 equiv 염화올레오일을 이용한 폴리소르베이트 80
실시예 4를 반복하되 1.2 equiv 대신1.6 equiv 염화올레오일이 사용되는 것이 다르다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
실시예 7 - 염화옥살릴을 이용한 염화올레오일
교반 막대가 구비된 2-구 환저 플라스크에 올레산 (2.0 g, 7.1 mmol, 1.0 equiv)을 채우고 플라스크를 N2로 퍼징하였다. DCM (6.5 mL)을 첨가하고 투명 용액이 형성되었다. 이어 교반하면서 투입 깔대기를 이용하여 10 min에 걸쳐 염화옥살릴 (1.21 ml, 14.2 mmol, 2.0 equiv)을 적하하였고, 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다.
이어 65 ℃로 승온하고 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. DCM 및 과잉 염화옥살릴을 회전 증발기로 제거하고 이어 진공 건조하였다. 염화올레오일의 수율은 100%로 추정된다.
실시예 8- 염화옥살릴로부터의1.0 equiv 염화올레오일을 이용한 폴리소르베이트 80
실시예 10에 따라 제조되는 PEO 소르비탄 (7.4 g, 7.1 mmol, 1.0 equiv)을 1-구 환저 플라스크에서 계량하고 플라스크 내부를 N2로 교환하였다. 실시예 7에 따라 제조된 전량의 염화올레오일을 실온에서 첨가하고 반응 혼합물을 15 min 동안 실온에서 교반하였다.
생성물을 분석하였다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
실시예 9- 상업적 입수 가능한 1.0 equiv 염화올레오일을 이용한 폴리소르베이트 80
실시예 10에 따라 제조되는 PEO 소르비탄 (5.96 g, 5.7 mmol, 1.0 equiv)을 1-구 환저 플라스크에서 계량하고 플라스크 내부를 N2로 교환하였다. 염화올레오일 (1.885 mL, 5.7 mmol, 1.0 equiv, Sigma Aldrich)을 실온에서 첨가하고 반응 혼합물을 15 min 동안 실온에서 교반하였다.
생성물을 분석하였다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 결과
표 1은 실시예들 1, 4, 5, 6, 8 및 9의 HPLC-ELSD 결과를 보이고, 각자의 HPLC 크로마토그램에서 모노-, 디- 및 트리-에스테르 (표 1에서 "모노", "디" 및 "트리"로 표기)의 용출 피크들의 면적 %를 나타낸다; 제1 값은 크로마토그램의 총 피크 면적 기분으로 각자 피크 면적의 절대 백분율 ("abs %")이고, 제2 값은 3개 피크들의 면적 합 기준으로 각자 피크 면적의 백분율 ("rel")이다.
최대 용출 피크는:
모노-에스테르의 경우27.4 및 27.7 min 사이에서
디-에스테르의 경우40.3 및 40.6 min 사이에서
트리-에스테르의 경우47.2 및 47.3 min 사이에서 관찰된다.
3 에스테르들의 용출 피크들은 서로 잘 분리된다.
| 표 1 | ||||||
| Ex | 모노 | 디 | 트리 | |||
| abs % | rel % | abs % | rel % | abs % | rel % | |
| 2 | 28.1 | 60.2 | 13.8 | 29.6 | 4.73 | 10.2 |
| 4 | 30.3 | 56.0 | 17.5 | 32.3 | 6.3 | 11.7 |
| 5 | 30.1 | 43.2 | 27.3 | 39.1 | 12.3 | 17.7 |
| 6 | 27.3 | 33.8 | 34.4 | 42.5 | 19.3 | 23.7 |
| 8 | 29.5 | 61.0 | 14.8 | 30.5 | 4.13 | 8.5 |
| 9 | 28.9 | 62.2 | 13.8 | 29.7 | 3.8 | 8.1 |
(B) DSC 결과
표 2는 DSC 결과를 보이고, T(피크) 및 델타 H 값들은 Croda HP 및 NOF의 경우 샘플 당 3회 DCS 분석들의 평균이고, 실시예 2, 4, 5 및 6의 경우 1회 DSC 분석에 대한 값이다.
| 표 2 | ||||
| Ex | 도 | T(피크) | 델타 H | 주기 |
| [℃] | [J/g] | |||
| 흡열 피크들 | ||||
| 2 | 도 1 | -31.5 | 0.13 | 가열 제1 주기 |
| 4 | 도 2 | -39.5 | 0.32 | 가열 제1 주기 |
| 5 | 도 3 | -40.6 | 0.42 | 가열 제1 주기 |
| 6 | 도 4 | -39.3 | 0.49 | 가열 제1 주기 |
| Croda HP | 도 5 | -11.6 | 47.7 | 가열 제1 주기 |
| NOF | 도 6 | -6.5 | 42.0 | 가열 제1 주기 |
| Croda SR | 도 28 | -7.4 | 46.3 | 가열 제1 주기 |
| 발열 피크들 | ||||
| Croda HP | 도 8 | -35.2 | 41.7 | 냉각 제1 주기 |
| Croda HP | 도 8 | -35.4 | 41.4 | 냉각 제2 주기 |
| NOF | 도 6 | -46.1 | 36.4 | 가열 제1 주기 |
| Croda SR | 도 29 | -41.5 | 32.4 | 냉각 제1 및 제2 주기들 |
가열 주기 곡선 논의:
Croda HP는 가열 주기에서 구분되는 흡열 피크를 보이고, 이는 용융 피크로 해석되며, ca. -12 ℃에서 델타 H는 ca. 48 J/g (도 5) 이다
NOF는 가열 주기에서 두 개의 구분되는 피크들을 보인다:
흡열 피크, 이는 용융 피크로 해석되고, ca. -7 ℃에서 델타 H는 ca. 42 J/g이고;
발열 피크, 이는 용융 피크, ca. -46 ℃에서 델타 H는 ca. 36 J/g (도 6) 이다
Croda SR은 가열 주기에서 구분되는 흡열 피크를 보이고, 이는 용융 피크로 해석되며, ca. -7.4 ℃에서 델타 H는 ca. 46.3 J/g (도 28) 이다
4개의 실시예들 2, 4, 5 및 6의 DSC는 ca. -30 내지 -40 ℃ 사이에서 경미한, 덜-구분되는, 명백하지 않고 보고 넓은 흡열부를 보이고 델타 H는 0.1 내지 0.5 J/g (도 1 내지 4)이고, 이는 Croda HP 및 NOF의 용융 피크들에 대한 델타 H와 비교하여 ca. 100배 더 작다. DSC 장비 프로그램에 의한 이러한 경미한 흡열부의 면적 결정은 도 20에 제시된다.
곡선들에서, 상기 경미한 흡열부 (도 1 내지 4) 바로 직전, 즉 여전히 더 낮은 온도에서 발열 볼록부 (hump)가 보이고, 이는 명백하게 해석될 수 없는 것이, 보다 신속한 가열 속도 분 당 10 ℃ 및 매우 작은 크기에 원인이 있을 수 있는 단지 기준선 불규칙성으로 인한 것일 수 있기 때문이다. 이의 면적은 단지 경미한 흡열부 면적의1/3이어서, 더욱 무의미할 수 있다.
실시예 8, 9 및 13의 DSC는 4개 실시예들 2, 4, 5 및 6의 DSC와 유사하게 보인다. 따라서 실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9 및 13은 전혀 또는 적어도 명백한 결정 거동의 용융화를 보이지 않는다.
냉각 주기 곡선 논의:
Croda HP는 제1 냉각 주기에서 구분되는 발열 피크를 보이고 ca. -35 ℃에서 델타 H는 ca. 42 J/g이고; 제2 냉각 주기에서 구분되는 발열 피크가 존재하고 ca. -35 ℃에서 델타 H는 ca. 41이고, 이는 ca. -30 ℃에서 구분되는 어깨를 보이고; 이러한 어깨로 인하여 제1 냉각 주기의 피크와 차별되게 다른 형상을 가진다 (도 8).
Croda SR은 제1 및 제2 냉각 주기들에서 다소 동일한 구분되는 발열 피크를 보이고 ca. -41.5 ℃에서 델타 H는 ca. 32.4 J/g (도 29)이다.
NOF 또는 실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9 및 13은 임의의 두 냉각 주기들에서 피크를 보이지 않는다 (도 7 (실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9 및 13) 및 도 9).
분취용 HPLC로부터의(C) MALDI 및 DSC 결과
샘플들에 대하여 MALDI를 수행하였다. 실시예 5 및 Croda HP는 분취용 HPLC로 분리 및0 내지 100 min 사이에 연속하여 수집되어 따라서 각각의 분획물이 1 min 동안 수집되도록 (10 ml 분획물들) 100개의 개별 분획물들로 분획하여 MALDI 분석하여 상세하게 조사되었다. 모든 분획물들의 실제 중량을 결정하고 중량 분포를 얻어 UV 크로마토그램에 중첩하였다:
도 16 및 17: 각각 실시예 5 및 Croda HP 대한 분취용 HPLC의 HPLC 크로마토그램으로 UV 흡광 (실선) 및 중량 분포 (점선)가 중첩된다,
도 18 및 19: 각각 UV 흡광 및 중량 분포에 대한 분취용 HPLC의 HPLC 크로마토그램으로, 실시예 5 (실선) 및 Croda HP (점선)이 중첩된다.
이러한 분리로부터 PEO 소르비탄 모노 올레이트의 순수 분획물들이 DSC 시험된다:
실시예 5의 분획으로 순수 PEO 소르비탄 모노에스테르 분획물들을 제공하고, 이것 또한 DSC 분석에서 임의의 용융 피크들을 보이지 않는다.
MALDI 질량 분석 스펙트럼에서 모든 에톡시화 분포들은 44 Da 만큼 분리되고, 이는 하나의 EO 단위와 같다. 질량 분포의 평균 EO 함량을 계산하기 위하여 질량 피크목록은 가우스 분포 함수로 피팅된다:
식 중 a는 가우스 분포 함수의 높이이고, b는 가우스 분포 함수 중심의 위치이고 c는 중심 질량 주위의 가우스 분포 함수의 EO 확산 (spread) 또는 분산도 예측에 사용될 수 있다. 가우스 분포 함수 중심 위치는 따라서 혼합물에 존재하는 분자의 질량을 나타내고, 이는 최고의 MALDI 피크를 제시한다.
실시예 10의 경우, PEO 소르비탄, 이 값은 1146 Da에 해당한다. 21 EO 단위를 가지는 나트륨화 PEO 소르비탄은 1112 Da의 분자 질량을 가지고 22 EO 단위를 가지는 나트륨화 PEO 소르비탄은 1156 Da의 질량을 가진다. 본 가우스 분포 함수에 대한 평균 정수인 EO 개수는 따라서 22로 예측된다 (도 10 및 15: 가우스 분포 함수 곡선 중첩 유무의 실시예 10).
동일한 방법론은 순수 PEO 소르비탄 모노올레이트 분획물들의 분석에 대하여 사용될 수 있다. 그러나 미-분획화 생성물들은, 264 Da를 가지는 하나의 올레이트는 6개의 EO 단위와 동급이라는 사실로 인하여 중첩 분포의 PEO 소르비탄 모노- 디 및 트리-에스테르를 함유한다. 20 EO 단위를 가지는 나트륨화 PEO 소르비탄 모노올레이트의 질량 피크는 1332 Da를 가지고 따라서 14 EO 단위를 가지는 PEO 소르비탄 디에스테르 및 8 EO 단위를 가지는 PEO 소르비탄 트리에스테르에 해당된다. 따라서 HPLC 분획물들의 중량을 알고 있더라도 미-분획화 샘플들 단독의 MALDI 질량 분석 스펙트럼으로부터 평균 EO 함량을 계산할 수 없다. 그러나, 분획화 샘플들에서 얻어진 지식으로, 미-분획화 샘플들의 평균 EO 함량은 예측할 수 있다.
이소소르비드 계열 종 및 PEO 에스테르:
도 18은 UV 흡광도에서 실시예 5 (실선) 및 Croda HP (점선)의 중첩을 보인다. UV 흡광은 ca. 16 및 27 min 사이에서 주 신호들을 보인다. 일반적으로, 적용되는 구배 (극성에서 비-극성으로)와 연관되는 HPLC 컬럼은 극성에 따라 분리하고, 더 높은 극성 종은 더 빨리 용출되고 이어 극성이 덜한 종이 용출되므로, 모노에스테르 종이 먼저, 이어 디에스테르 및 후에 2개의 에스테르 잔기들보다 많은 종이 용출된다. 분취용 HPLC 샘플들에 기반한 MALDI를 이용하면, 모노에스테르 종에 대하여 분자량 분포를 더욱 분석할 수 있다. 동일한 방식으로, ca. 30 및 46 min 사이의 주 신호들은 디에스테르 종으로 확인되고 지정된다.
ca. 16 및 27 min 사이에 용출되는 모노에스테르 종의 경우:
실시예 5의 주 신호들은 다양한 개수의 EO 단위를 가지는 PEO 소르비탄 모노에스테르 종으로 지정된다;
Croda HP의 주 신호들은 다음과 같이 지정된다
다양한 개수의 EO 단위를 가지는 PEO 소르비탄 모노에스테르 종,
다양한 개수의 EO 단위 PEO 이소소르비드 모노에스테르 종, 및
다양한 개수의 EO 단위 PEO 모노에스테르, 즉 폴리옥시에틸화 지방산 에스테르.
ca. 30 및 46 min 사이에 용출되는 디에스테르 종의 경우:
실시예 5의 주 신호들은 다양한 개수의 EO 단위를 가지는 PEO 소르비탄 디에스테르 종으로 지정되고;
Croda HP의 주 신호들은 다음과 같이 지정된다
다양한 개수의 EO 단위를 가지는 PEO 소르비탄 디에스테르 종, 및
다양한 개수의 EO 단위를 가지는 PEO 이소소르비드 디에스테르 종.
다양한 개수의 EO 단위를 가지는 PEO 디에스테르, 즉 양측에 지방산 에스테르를 가지는 PEG.
EO 단위 개수 분포에 인한 분자량 분포에 의해 중첩이 있을지라도 이소소르비드 계열 종 및 PEO 에스테르 종은 소르비탄 종, 및 모노- 및 디에스테르 종의 경우 이들 양자보다 훨씬 늦게 용출된다.
이소소르비드 계열 종 및 PEO 에스테르 종은 실제로 다소 동시 용출된다. 도 21은 Croda HP 경우에 다양한 종들이 용출되는 시간 범위를 보인다
A: PEO 소르비탄 모노에스테르 종의 피크
B: PEO 이소소르비드 모노에스테르 및 PEO 모노에스테르 종의 피크
C: PEO 소르비탄 디에스테르 종의 피크
D: PEO 이소소르비드 디에스테르 및 PEO 디에스테르 종의 피크
또한 실시예 5의 경우 또한 PEO 에스테르가 관찰되지만, PEO 소르비탄 에스테르의 주 피크들과 비교하면 미량이거나 소량이다.
실시예 10의 경우 또한 PEO 이소소르비드가 관찰되지만, PEO 소르비탄의 주 피크들과 비교하면 잡음 수준 바로 위의 미량이다.
이소소르비드 종은 실시예 5에서 관찰되지 않는다.
실시예 5, NOF, Croda HP 및 Croda SR에서 PEO 1,4-소르비탄 모노에스테르 종의 EO 단위의 평균 개수 평가:
일반적으로 실시예 5에서 임의의 에톡시화 종은 Croda HP 및 in Croda SR에서 각자 종과 비교할 때, 더 낮은 개수의 EO 단위를 보이고, 차이는 언제나 대략 5 및 10 EO 단위 사이이다. 도 22a 및 도 22b는 EO 단위의 평균 개수 이동이 MALDI 스펙트럼의 m/z 분포에 미치는 영향을 보인다:
A: 실시예 5
B: NOF
C: Croda HP
D: Croda SR
확실히 실시예 5의 경우 NOF, Croda HP 및 Croda SR와 비교하여 MALDI 피크들은 더 낮은 m/z 값들로 이동되었다.
순수 1,4-소르비탄 모노에스테르 분획물들의 MALDI 질량 분포는 가우스 분포 함수에 잘 맞는다. 미-분획화 물질, 즉 실시예 5, NOF, Croda HP 및 Croda SR 경우, 주요 질량 분포는 모두 동급 분자들인 PEO 소르비탄 모노- 디- 및 트리-올레이트의 존재로 중첩 질량 분포를 가진다. 폴리에스테르 종은 모노에스테르보다 더 낮은 함량으로 존재하지만 총 질량 분석 스펙트럼을 경미하게 더 높은 질량으로 이동시킬 뿐이다. 미-분획화 샘플로부터의 MALDI 질량 분포는 따라서 가우스 분포 함수에서 벗어날 것이다. 그러나, 가우스 분포 함수가 도 30a 및 도 30b에 도시된 바와 같이 질량 분포의 좌측에 피팅된다면, 중심 질량 피크 (b, 가우스 분포 함수 중심의 위치)는 1,4-소르비탄 모노에스테르 종의 EO 단위의 평균 개수에 대한 양호한 평가이다. 이러한 평가는 두 샘플들인 실시예 5 및 Croda HP는 이미 분획되고 상세하게 분석되었던 3개의 샘플들 (실시예 5, NOF, Croda HP 및 Croda SR)에 대하여 시험되고 확인되고, 결과는 표 3에 제시된다:
| 표 3 | ||
| 샘플 | b (m/z) | 평균 EO 단위 |
| (A) 실시예 5 | 1331 | 20 |
| (B) NOF | 1660 | 27 |
| (C) Croda HP | 1659 | 27 |
| (D) Croda SR | 1745 | 29 |
실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9, 13의 MALDI는 이소소르비드 종 또는 소르비톨 종의 부재를 보인다:
MALDI로, 실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9 및 13에서는 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
MALDI로, 실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9 및 13에서는 소르비톨 종, 예컨대 소르비톨 에스테르 에톡실레이트는 검출되지 않았다.
분포 폭 및 최대 개수의 분석을 위한 실시예 5, NOF, Croda HP 및 Croda SR의 MALDI:
실시예 5의 MALDI는 단 하나의 최대치를 가지는 신호 분포를 보이는 반면, NOF, Croda HP 및 Crode SR의 MALDI는 신호 분포에서 주요 최대치 외에 2개의 추가 최대치를 보이고; 하나의 추가 최대치는 주요 최대치의 b 값에 비하여 더 낮은 m/z 값에서 b 값을 가지고, 또 다른 추가 최대치는 주요 최대치의 b 값에 비하여 더 높은 m/z 값에서 b 값을 가진다. 양 추가 최대치들은 주요 최대보다 더 낮은 강도를 가진다.
표 4는 각각의 최대치에 대하여 피팅한3 가우스 곡선들의 b 값들, 실시예 5의 MALDI 스펙트럼에서 하나의 최대치에 피팅한 가우스 곡선의 b 값을 보인다. 이들 피팅 곡선들은 도 31a 및 도 31b에 도시된다.
| 표 4 | |||
| 샘플 | b (m/z) | ||
| 좌측 최대치의 피팅 | 주요 최대치의 피팅 | 우측 최대치의 피팅 | |
| (A) 실시예 5 | ----- | 1392 | ----- |
| (B) NOF | 900 | 1774 | 2788 |
| (C) Croda HP | 886 | 1727 | 2553 |
| (D) Croda SR | 930 | 1795 | 2797 |
실시예들 2, 4, 5, 6, 8, 9 및 13의 MALDI 스펙트럼은 단 하나의 최대치를 가지는 신호 분포를 보인다.
본 발명에 의한 생성물과 공지 폴리소르베이트 생성물 간의 차이는 단 하나의 가우스 곡선을 모든 신호들, 즉 MALDI 스펙트럼에서 전체 분포에 대하여 피팅할 때 또한 보여진다. 가우스 분포 함수의 c 값은 신호들의 m/z 값들의 확산, 즉 b 값으로 표기되는 가우스 분포 함수의 중심 m/z 값 주위로 가우스 분포 함수의 분산도의 평가에 사용될 수 있다. 표 5는 실시예 5, NOF, Croda HP 및 Croda SR에 대한 c 값들을 보인다.
MALDI 스펙트럼에서 모든 신호들에 대한 하나의 가우스 곡선 피팅은 도 32a 및 도 32b에 도시된다.
| 표 5 | |
| 샘플 | c (m/z) |
| 전체 분포 중 하나의 피팅 | |
| (A) 실시예 5 | 440 |
| (B) NOF | 816 |
| (C) Croda HP | 785 |
| (D) Croda SR | 981 |
실시예 10 -20 EO를 이용하여1,4-소르비탄으로부터 얻은 PEO 소르비탄
200 g 나프타 (석유), 중질 알킬레이트, CAS 64741-65-7, 실시예 11에 따라 제조되는 100 g (0.61 mol, 1 equiv) 1,4-소르비탄, 및 0.6 g KOH를 4 L 오토클레이브에 충전하였다. 오토클레이브를 먼저 비우고 이어 총 4시간 동안 0.5 bar 압력의 N2를 인가하여 불활성시킨다.
혼합물을 150 ℃로 가열하고, 553 g (12.6 mol, 20.7 equiv) 산화에틸렌을 첨가하되 온도가 160 ℃를 넘지않고 압력이 3.8 bar 이상 되지 않는 속도로 첨가하고; 첨가는 4 h 수행되었다. 이어 혼합물을 2 h 동안 150 ℃에서 교반하였다.
60℃로 냉각 후 2.3 g AcOH를 첨가하였다. 2개의 상들이 형성되고, 하나는 용매와, 다른 하나는 생성물이 존재하고 이들을 분리한다. 잔류 용매를 회전 증발기로 증기 증류하여 제거하였다. 625 g의 생성물을 얻었다.
수율: 95%, 단 평균 20 EO의 PEO 소르비탄이 획득되었다고 가정. 이러한 가정은 추가 반응들에 본 생성물이 사용될 때에도 적용된다.
1H-NMR 및 13C-NMR로 구조를 확인하였다.
DSC 분석은 결정화 또는 용융화 신호를 보이지 않았고, 양 가열 주기들 또는 양 냉각 주기들에서도 그러하다.
실시예 11 - 1,4-소르비탄
D-소르비톨 (300 g, 1.647mol, 1 equiv)을 1.5 L 반응기에 채웠다. p-톨루엔술폰산 일수화물 (2.665 g, 0.014 mol, 0.0085 (0.85%) equiv)을 채우고, 이어 TBAB (9.6 g, 0.03 mol, 0.0182 (1.81 %) equiv)를 충전하였다. 반응기에 진공 4 내지 6 mbar을 인가하였다. 이어 혼합물을 110℃로 가열하고 (혼합물은 90℃ 정도에서 용융) 110℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 70내지 75 ℃로 30 min 냉각하였다. 에탄올 (150 mL)을 투입하였다. 얻어진 혼합물을 70 내지 75 ℃에서 2 시간 동안 교반하여 투명 용액이 형성된다. 이어 용액을 20 ℃로 3 시간 식힌다. 노란 현탁액이 형성되었다. 이소프로판올 (150 mL)을 충전하였다. 혼합물을 0 ℃로 1 시간 냉각하였다. 혼합물은 0 ℃에서 4 시간 동안 슬러리 상태로 방치한다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 이소프로판올 (150 mL)로 세척한다. 케이크를 50 ℃에서 16 시간 동안 진공 건조하여 142.2 g의 생성물을 백색 고체로 획득하였다.
수율 52.6%
1H NMR 및 13C NMR로 구조를 확인하였다.
GC 면적-%:
1,4-소르비탄97%
이소소르비드0.14%
D-소르비톨0.12%
고유 회전: -22.26°, c=3.1 (물)
비교예 1
2018.11.2 금요일 접수, 2018.11.3. 토요일 회의-전 활동에 이어 2018년11월4일부터 7일까지, Walter E Washington Convention Center, Washington, DC에서, 회의 "aaps 2018 PharmSci 360"가 개최되었다.
이들 회의-전 활동 워크숍 및 단기 코스는 9:00 am에서 5:00 pm까지 진행되었다. 이들 워크숍 중 하나는 9.45 AM 에서 10:15 AM까지 진행되었고 주제는: "SC1- Biouharmaceuticel 적용을 위한 폴리소르베이트 합성 및 조절"이고, CRODA사 www.crodahealthcare.com, Croda, Inc., Edison, New Jersey, USA 를 대표하는 Sreejit R. Menon이 주최하였다.
발표는 슬라이드 12에 Croda의 폴리소르베이트 합성을 보이고, 이는 다음 순서를 적용한다 (도 23참고):
소르비톨(탈수화)> 소르비탄 (지방산으로 에스테르화)> 소르비탄 지방 에스테르 (에톡시화)> 폴리소르베이트 (종료)> 고품질 폴리소르베이트.
본 순서에 의하면 Crode는 두 범주의 생성물을 생산한다:
Croda HP, 또한 트윈 (Tween) 80 HP로 칭하고, 약어 "HP"는 "고순도" 의미
Croda SR, 약어 "SR"은 "초정제"를 의미하고, 또한 "SR PS 80" (초정제 폴리소르베이트 80), 초정제 폴리소르베이트로 칭함"
슬라이드 11은 두 범주 생성물의 원재료들을 나열한다 (도 24 참고).
슬라이드 17에는 Croda HP 및 Croda SR의 차이점이 설명된다 (도 25 참고):
SR 등급과 HP 등급의 공정 차이는 다음과 같다:
더 높은 순도의 출발 물질들 (지방산 ＆ 소르비톨)
캐러멜화 방지를 위해 보다 온화한 조건들에서 제조
매 단계에서 공정 조절
색상 차이: HP 등급은 노란색인 반면, SR 등급은 거의 무색이고, 슬라이드 16에 보인다 (도 26 참고). 원래 발표는 흑백이 아니고 칼러이지만, 음영 모드로도 Croda HP의 노란색은 Croda SR의 샘플과 비교할 때 더 어두운 색조 형태를 보인다.
슬라이드 15에서 (도 27 참고), SR 등급의 MALDI 스펙트럼이 도시된다. 3 부류의 지배적인 피크들 면적들은 피크 면적에 기여하는 화학 종들에 따라 특정하였다:
이소소르비드 에스테르 에톡실레이트 ＆ PEG
소르비탄 에스테르 에톡실레이트
소르비톨 에스테르 에톡실레이트
명백히 MALDI 스펙트럼은 현재 상업적으로 입수 가능한 최고 순도 등급인 SR 등급에서 조차 소르비탄 에스테르 에톡실레이트의 하나의 원하는 피크 면적뿐 아니라, SR 등급에 존재하는 이소소르비드 및 소르비톨 유도체들 존재에 따른 유의한 피크 면적들을 보인다.
실시예 12 - 염화올레오일
2-구 환저 플라스크에 올레산 (469.3 g, 1.64 mol, 1.0 equiv)을 채우고 플라스크를 N2로 퍼징한다. 디클로로메탄 (DCM) (1520 mL)을 첨가하고, 투명한 무색 용액이 형성된다. 이어 염화옥살릴 (288 ml, 3.3 mol, 2.0 equiv)을 실온에서 50 min에 걸쳐 교반하면서 적가하고, 이어 반응 혼합물을 실온에서 2 h 동안 교반하였다. DCM 및 과잉 염화옥살릴을 ca. 35 ℃ 및 ca. 450내지 8 mbar 회전 증발기 이어 진공 건조하여 제거하였다. 염화올레오일의 수율을 100%로 가정한다.
실시예 13 - 폴리소르베이트 80
PEO 소르비탄 (1001.9 g, 0.96 mol, 1.0 equiv, 실시예 10에 따라 제조)을 2 l 반응기에서 계량하고 플라스크 내부 환경을 N2로 교환하였다. 염화올레오일 (435.5 g, 1.34 mol, 1.4 equiv, 실시예 12에 따라 제조)을 실온에서 ca. 40 min 동안 첨가하고 반응 혼합물을 1 h 동안 실온에서 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 60 ℃까지 가열하고 진공을 인가하면서 1일 동안 교반 (200 mbar)하였다.
형성된 HCl을 제거하면 pH는 5.9로 상승한다. pH는 생성물 샘플의 5 wt% 수용액에서 측정되었다.
(H) 13C NMR 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
(A) HPLC-ELSD 방법: 이소소르비드 종, 예컨대 PEO-이소소르비드 또는 PEO-이소소르비드-지방산 에스테르는 검출되지 않았다.
실시예 14 - PEO 이소소르비드 모노올레이트의 정량
검량 물질의 전처리
(C1) 샘플 전처리 및 분취용 HPLC (마지막 문장 " 증류된 분획물들은 이어 DSC 분석에 사용된다."을 제외)에서 기술된 분취용-HPLC 방법을 이용하여 실시예 15에 따라 제조된 PEO 이소소르비드 올레이트를 분리하였다. 물질은 제2 피크, PS80의 분리 공정에서 피크 B (예로써 도 21 참고)와 유사한 시간에 용출되었다. 3개의 맑은 분획물들이 추출되고 합하여 넓은 PEO 분포 및 대량의 물질을 얻었다. MALDI (HPLC 분획물들에 대한(C2)에 기술된 방법)를 이용하여 물질은 PEO 이소소르비드 모노올레이트로 확인되었다.
표준화를 위하여 필요한 평균 12 EO 단위를 가지는 PEO 이소소르비드 올레이트는, 알려진 방법으로 합성되고, 본 실시예에서 실시예 15에 따라 제조되는 PEO 이소소르비드 올레이트가 사용된다.
LC-MS(ESI)
이소소르비드 검량 물질, 실시예 15에 따라 제조되는 PEO 이소소르비드 올레이트를 3 개의 별도 용액: 0.001 mg/ml, 0.002 mg/ml, 0.006 mg/ml으로 녹인다. 3 용액들 각각 10 마이크로리터를 LC (Water 2795 Alliance HT, Waters AG, 5405 Baden-Dattwil, Switzerland)에 주입하고 C18 컬럼 (Luna C18(2), 3 마이크로미터, 75 x 4.6 mm, Phenomenex, 63741 Aschaffenburg, Germany)에 로딩한다. 유량 0.8 ml/min 및 컬럼 온도 50 ℃로 45 vol% ACN에서 시작하여 45 min 동안 100 vol% ACN로 올리는 (아세토니트릴) : H2O 구배를 이용하여 피분석물 종들을 분리하였다. 100 % ACN에서 60 min까지 계속 분리하였다. 종들은 전자분무 이온화 소스 (ESI)가 구비된 질량 분광기 (Waters Micromass Quattro microTM)로 검출되었다. MassLynx V4.0 소프트웨어를 이용하여 데이터를 수집하였다. m/z 200 및 2000 사이에서 초 당 1 스캔의 속도로 완전 스캔 질량 분석 스펙트럼을 얻었다. MS 스캔을 위한 파라미터들은 다음과 같다: 탈용매화 가스 온도 300 ℃, 이온 소스 온도 100 ℃, 질소 가스 유속 500 L/시간, 분무 (N2) 가스 압력 6 bar, 모세관 전압 3000 V, 및 콘 전압 30 V.
PEO 이소소르비드 모노올레이트에 대한 검량선
질량 분석 스펙트럼을 얻고 MassLynx V4.0 소프트웨어를 이용하여 관심 피크 위에 합친다. 질량 스펙트럼은 PEO 이소소르비드 모노올레이트 종이 검출되는 시간 (샘플에 따라 다르지만 28 및 34 min 사이의 용출 시간)부터 합쳐진다. 각각의 검량 농도는 검량선으로 사용되는 하나의 질량 분석 스펙트럼에 해당된다. 각각의 스펙트럼에서4개의 상이한 분포들이 검출되고, 4개의 상이한 부가물: Na+, K+, H+ 및 H2O에 해당된다. 각각의 부가물 분포는 피크들 범위에서 표시되고, 하나의 EO 단위에 해당되는44 Da 만큼 분리된다. 각각의 분포에서 모든 피크들의 강도를 모두 합하여 4개의 강도를 제공하고, 각각의 부가물 (도면 참고, 원: 모든 부가물의 합, 사각형: H2O 부가물, 삼각형: H+ 부가물, 별형: Na+ 부가물, 다이아몬드 (도 33에서 삼각형 인근에서 가시): K+ 부가물) 및 검량 농도에 대하여 하나 대응한다. 검량선은 0.001 내지 0.006 mg/ml 범위에 걸쳐 각각의 부가물에 대하여 계산된다 (표준 선형 회귀 이용) (도 1 참고). 도 33은 곡선들을 보인다.
두 검량선들이 사용되고, 하나는 H2O 부가물 (점선)에 대한 것이고 하나는 K+ 부가물 (실선)에 대한 것으로, 이들 피크들은 폴리소르베이트 샘플들에 있는PEO 모노올레이트와 중첩되지 않으므로 PEO 이소소르비드 함량을 결정한다.
폴리소르베이트 80 생성물 중 PEO 이소소르비드 모노올레이트의 함량 결정
두 폴리소르베이트 샘플들, Croda HP 및 실시예 13에 따라 제조되는 폴리소르베이트를 H2O에 녹여 0.05 mg/ml 농도의 용액을 제공한다. 이소소르비드 검량 물질, PEO 이소소르비드 올레이트와 동일한 방법으로 28 및 34 min 사이 (샘플에 따라 다름) 용출 피크에 대한 각각의 샘플에 대하여 합쳐진 질량 분석 스펙트럼을 수집한다. 각각의 부가물 분포에 대한 강도를 계산하고, 검량선들을 이용하여 각각의 샘플에 대한 PEO 이소소르비드 모노올레이트 종의 함량 (샘플 중량 기준 wt%)을 계산한다. 실시예 17에 따라 제조되는 폴리소르베이트는 1 wt% PEO 이소소르비드 모노올레이트를 함유한다. Croda HP는 12 wt%이상의 PEO 이소소르비드 모노올레이트를 함유하고, 비 농도는 검량 범위 외에 있으므로 결정하지 못한다.
wt%는 각자 폴리소르베이트 샘플, Croda HP 및 실시예 17에 따라 제조되는 폴리소르베이트의 중량 기준이다.
검출 한계:
검출기 포화는 10 마이크로리터의 PEO 이소소르비드 올레이트 용액에 대하여 0.006 mg/ml 이상의 농도, 더욱 상세하게는, 0.006 mg/ml 내지 0.01 mg/ml이 주입되면 발생되며, 이는 PEO 이소소르비드 올레이트의 0.06 마이크로그램 및 0.1 마이크로그램 사이 함량에 해당된다..05 mg/ml 농도의 10 마이크로리터의 샘플 용액이 주입되므로, 이러한 주입량은 샘플 물질이0.5 마이크로그램 주입되는 것과 같다. 따라서 검출 한계는 12 wt% 및 20 wt% 사이이다.
실시예 15 - PEO 이소소르비드 모노올레이트
올레산 (204.1 g) 및 DCM (660 ml)를 혼합하고, 염화옥살릴 (185 g)를 20 ℃에서 40 min 동안 첨가하고, 2 h 동안 20 ℃에서 교반 후 반응 혼합물을 33 ℃에서 450 내지 22 mbar로 농축하여, 노란색의 투명 액체 (216.6 g)를 얻었다.
PEO 이소소르비드 (254.5 g, 실시예 16에 따라 제조됨)를 2 l 반응기 내에서 계량하고 플라스크 내부를 N2 교환하였다. 염화올레오일 (216.6 g 중160.9 g)을 실온에서 30 min 동안 첨가하고 반응 혼합물을 40 min 동안 실온에서 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 60 ℃로 가열하고 1.5 일 동안 교반하면서 진공을 가한다 (200 mbar).
형성된 HCl이 제거되고 pH는 3.8으로 상승한다. pH는 생성물 샘플의 5 wt% 수용액에서 측정되었다.
실시예 16 -12 EO를 이용하여1,4-소르비탄으로부터 얻은 PEO 이소소르비드
200 g 나프타 (석유), 중질 알킬레이트, CAS 64741-65-7, 89.1 g (0.61 mol, 1 equiv) 이소소르비드 (Sigma-Aldrich), 및 0.6 g KOH를 4 L 오토클레이브에 채웠다. 오토클레이브를 먼저 비우고 이어 총 4시간 동안 0.5 bar 압력의 N2를 인가하여 불활성시킨다.
혼합물을 150 ℃로 가열하였다. 333 g (7.6 mol, 12.4 equiv.) 산화에틸렌을 첨가하되 온도가 160 ℃를 넘지않고 압력이 3.8 bar 이상 되지 않는 속도로 첨가하고; 첨가는 4 h 수행되었다. 이어 혼합물을 2 h 동안 150 ℃에서 교반하였다
60℃로 냉각 후 1.4 g AcOH를 첨가하였다. 2개의 상들이 형성되고, 하나는 용매와, 다른 하나는 생성물이 존재하고 이들을 분리한다. 잔류 용매를 회전 증발기로 증기 증류하여 제거하였다. ca. 376 g의 생성물을 얻었다.
수율: 95%, 단 평균 120 EO의 PEO 소르비탄이 획득되었다고 가정. 이러한 가정은 추가 반응들에 본 생성물이 사용될 때에도 적용된다.
1H-NMR 및 13C-NMR로 구조를 확인하였다.
DSC 분석은 결정화 또는 용융화 신호를 보이지 않았고, 양 가열 주기들 또는 양 냉각 주기들에서도 그러하다.
실시예 17 - 22 EO를 가지는 폴리소르베이트 80
PEO 소르비탄 (502, 0.44 mol, 1.0 equiv, 실시예 18에 따라 제조)을 2 l 반응기 내에서 무게를 계량하고 플라스크 내부 환경은 N2 교환하였다. 염화올레오일 (215.8 g, 0.7 mol, 1.5 equiv, 실시예 12에 따라 제조)을 실온에서 ca. 40 min 동안 첨가하고 반응 혼합물을 1 h 동안 실온에서 교반하였다. 이어 반응 혼합물을 60 ℃로 가열하고 교반하면서 3일 동안 진공을 가한다 (200 mbar).
형성된 HCl이 제거되고 pH는 6.9로 상승한다. pH는 생성물 샘플의 5 wt% 수용액에서 측정되었다.
실시예 18 -22 EO 22 EO를 이용하여1,4-소르비탄으로부터 얻은 PEO 소르비탄
200 g 나프타 (석유), 중질 알킬레이트, CAS 64741-65-7, 실시예 11에 따라 제조되는 100 g (0.61 mol, 1 equiv) 1,4-소르비탄, 및 0.6 g KOH를 4 L 오토클레이브에 충전하였다. 오토클레이브를 먼저 비우고 이어 총 4시간 동안 0.5 bar 압력의 N2를 인가하여 불활성시킨다.
혼합물을 150 ℃로 가열하고, 150 ℃ 612 g (13.92.6 mol, 22.8 equiv) 산화에틸렌을 첨가하되 온도가 160 ℃를 넘지않고 압력이 3.8 bar 이상 되지 않는 속도로 첨가하고; 첨가는 4 h 수행되었다. 이어 혼합물을 2 h 동안 150 ℃에서 교반하였다.
60℃로 냉각 후 2.5 g AcOH를 첨가하였다. 2개의 상들이 형성되고, 하나는 용매와, 다른 하나는 생성물이 존재하고 이들을 분리한다. 잔류 용매를 회전 증발기로 증기 증류하여 제거하였다. 688g의 생성물을 얻었다.
수율: 95%, 단 평균 22 EO의 PEO 소르비탄이 획득되었다고 가정. 이러한 가정은 추가 반응들에 본 생성물이 사용될 때에도 적용된다.
1H-NMR 및 13C-NMR로 구조를 확인하였다.
DSC 분석은 결정화 또는 용융화 신호를 보이지 않았고, 양 가열 주기들 또는 양 냉각 주기들에서도 그러하다.
Claims (36)
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄과 산염화물 ACIDCHLOR의 반응 REAC-A에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법;
ACIDCHLOR은 식 (I)의 화합물이고;
R1은 선형 또는 분지형 C10-22 알킬 또는 선형 또는 분지형 C10-22 알케닐이다. - 제1항에 있어서,
R1은 선형 C10-22 알킬 또는 선형 C10-22 알케닐인, 방법. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄의 상기 폴리옥시에틸렌은 평균 10 내지 30개를 가지는, 방법. - 제1항 내지 제3항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
REAC-A는 온도 TEMP-A에서 수행되고, TEMP-A는 0 내지 70℃인, 방법. - 제1항 내지 제4항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
REAC-A에 대하여 용매가 사용되지 않는, 방법. - 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
REAC-A에 대하여 물이 사용되지 않는, 방법. - 제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
REAC-A에 대하여 촉매가 사용되지 않는, 방법. - 제1항 내지 제7항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
REAC-A는 순수하게 (neat) 수행되는, 방법. - 제1항 내지 제8항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄은 1,4-소르비탄은 산화에틸렌과 반응하는 반응 REAC-B에 의해 제조되는, 방법. - 제9항에 있어서,
상기 1,4-소르비탄은 4 연속 단계들 STEP1, STEP2, STEP3 및 STEP4를 포함하는 방법 SORBID에 의해 제조되고,
STEP1에서 D-소르비톨은 p-톨루엔술폰산 및 테트라부틸암모늄 브롬화물의 존재에서 탈수 반응 DEHYDREAC에서 탈수되고, STEP1는 혼합물 MIX1를 제공하며;
STEP2에서 에탄올이 MIX1와 혼합되고, STEP2는 혼합물 MIX2를 제공하며;
STEP3에서 이소프로판올이 MIX2와 혼합되고, STEP3은 혼합물 MIX3을 제공하며;
STEP4에서 1,4-소르비탄은 MIX3에서 분리되는, 방법. - 제10항에 있어서,
상기 p-톨루엔 술폰산은 p-톨루엔술폰산 일수화물의 형태로 사용되는, 방법. - 제10항 또는 제11항에 있어서,
DEHYDREAC에 대하여 용매가 사용되지 않는, 방법. - 제10항 내지 제12항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
DEHYDREAC에 대하여 물이 충전되지 않는, 방법. - 제10항 내지 제13항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
DEHYDREAC는 순수하게 수행되는, 방법. - 제10항 내지 제14항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
STEP2는 60 내지 90℃인 온도 TEMP2에서 수행되는, 방법. - 제10항 내지 제15항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
STEP3은 10 내지 30℃인 온도 TEMP3-1에서 수행되는, 방법. - 제10항 내지 제16항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
이소프로판올의 상기 혼합 후, STEP3은 -5 내지 5℃인 온도 TEMP3-2으로 MIX3의 냉각 COOL3을 포함하는, 방법. - 제10항 내지 제17항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
STEP3은 MIX3의 교반 STIRR3을 포함하고, STIRR3은 시간 TIME3-2 동안 수행되고, TIME3-2는 1 내지 12 h인, 방법. - 제18항에 있어서,
STIRR3은 제17항에서 정의된 COOL3 후에 수행되는, 방법. - 제18항 또는 제19항에 있어서,
STIRR3은 제17항에서 정의된 TEMP3-2에서 수행되는, 방법. - 제10항 내지 제20항 중 어느 하나의 방법에 있어서,
STEP1, STEP2 및 STEP3은 연속하여 하나의 동일한 반응기에서 수행되는, 방법. - 제9항에 있어서,
상기 1,4-소르비탄은3 연속 단계들 STEP1AQU, STEP2AQU 및 STEP3AQU를 포함하는 1,4-소르비탄의 전처리를 위한 방법 SORBIDAQU에 의해 제조되고,
STEP1AQU에서 D-소르비톨은 p-톨루엔술폰산 및 테트라부틸암모늄 브롬화물의 존재에서 탈수 반응 DEHYDREACAQU에서 탈수되어, STEP1AQU는 혼합물 MIX1AQU를 제공하며;
STEP2AQU에서 에탄올은 MIX1AQU와 혼합되어, STEP2AQU는 혼합물 MIX2AQU를 제공하며;
STEP3AQU에서 이소프로판올은 MIX2AQU와 혼합되어, STEP3AQU는 혼합물 MIX3AQU를 제공하며;
D-소르비톨은 STEP1AQU에서 D-소르비톨과 물의 혼합물 형태로 사용되는, 방법. - 제1항 내지 제21항 중 어느 하나의 항에 따른 반응 REAC-A에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법에 의해 획득되는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 제23항에 있어서,
상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르에서 상기 PEO 1,4-소르비탄 모노에스테르 종의 EO 단위의 평균 개수는 19 내지 23인, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르. - 이소소르비드 종을 함유하지 않는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 소르비톨 종을 함유하지 않는 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 MALDI 스펙트럼에서 단 하나의 최대치를 가지는 신호 분포를 보이는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 MALDI 스펙트럼은 3500 이상의 MW를 가지고 신호 높이가 상기 MALDI 스펙트럼의 전체 분포의 최대치에 대하여5% 초과하는 물질의 신호를 보이지 않는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 흡열 신호를 보이되 상기 신호의 최대치는 온도 13 ℃ 이하인, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 흡열 신호를 보이되 델타 H는 35 J/g 이하인, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 최대 신호가 온도 -13 ℃ 초과의 흡열 신호를 보이지 않는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 델타 H가 35 J/g 초과의 흡열 신호를 보이지 않는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 델타 H가 30 J/g 초과의 발열 신호를 보이지 않는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 DSC에서 최대 신호가 온도 -50 ℃ 이상인 발열 신호를 보이지 않는, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
- 제23항 내지 제34항 중 어느 하나의 항에 의한 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 용도로서, 약물 제제의 조제에서 부형제로서의 용도.
- 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르로서 10 wt% 이하의 PEO 이소소르비드 모노올레이트를 함유하고, 이때 wt%는 PEO 이소소르비드 모노올레이트의 함량이 분석되는 상기 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 샘플 중량 기준인, 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르.
Applications Claiming Priority (17)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNPCT/CN2018/104219 | 2018-09-05 | ||
| CN2018104219 | 2018-09-05 | ||
| US201862745676P | 2018-10-15 | 2018-10-15 | |
| US62/745,676 | 2018-10-15 | ||
| EP18200298 | 2018-10-15 | ||
| EP18200298.0 | 2018-10-15 | ||
| EP19157032.4 | 2019-02-13 | ||
| EP19157032 | 2019-02-13 | ||
| EP19157068 | 2019-02-14 | ||
| EP19157297 | 2019-02-14 | ||
| EP19157297.3 | 2019-02-14 | ||
| EP19157068.8 | 2019-02-14 | ||
| EP19194776 | 2019-08-30 | ||
| EP19194776.1 | 2019-08-30 | ||
| EP19195046.8 | 2019-09-03 | ||
| EP19195046 | 2019-09-03 | ||
| PCT/EP2019/073509 WO2020049010A1 (en) | 2018-09-05 | 2019-09-04 | Method for making poyoxyethylene 1,4 sorbitan fatty acid ester |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210054523A true KR20210054523A (ko) | 2021-05-13 |
Family
ID=67809507
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020217007500A KR20210054523A (ko) | 2018-09-05 | 2019-09-04 | 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210324139A1 (ko) |
| EP (1) | EP3820928A1 (ko) |
| JP (1) | JP2021536464A (ko) |
| KR (1) | KR20210054523A (ko) |
| CN (1) | CN113166393A (ko) |
| CA (1) | CA3111693A1 (ko) |
| SG (1) | SG11202102138UA (ko) |
| WO (1) | WO2020049010A1 (ko) |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4460791A (en) * | 1978-09-22 | 1984-07-17 | Ciba-Geigy Corporation | Oil recovery by fluorochemical surfactant waterflooding |
| JPS59142299A (ja) * | 1983-02-03 | 1984-08-15 | 味の素株式会社 | 新規なカチオン界面活性剤 |
| US5374446A (en) * | 1993-12-10 | 1994-12-20 | Arco Chemical Technology, L.P. | Linked esterified alkoxylated polyols useful as reduced calorie fat substitutes |
| SE0301119D0 (sv) * | 2003-04-14 | 2003-04-14 | Astrazeneca Ab | New non-ionic surfactants for solubilizing poorly soluble molecules |
| HUE025165T2 (hu) * | 2011-03-21 | 2016-01-28 | Solenis Tech Cayman Lp | Kémiai adalékanyagok és alkalmazásuk cefre feldolgozási mûveletekben |
| WO2013003608A1 (en) * | 2011-06-28 | 2013-01-03 | Brookhaven Science Associates, Llc | Modified plants with increased oil content |
| WO2015081830A1 (zh) * | 2013-12-02 | 2015-06-11 | 天津键凯科技有限公司 | 多臂聚乙二醇硬脂酸衍生物和油酸衍生物 |
| DK3347031T3 (da) * | 2015-09-11 | 2021-04-26 | Nutrition & Biosciences Usa 1 Llc | Sammensætning, der omfatter et protein og en polyalkoxyfedtforbindelse |
| JP6846409B2 (ja) * | 2015-09-11 | 2021-03-24 | ダウ グローバル テクノロジーズ エルエルシー | ポリアルコキシ脂肪族化合物 |
| WO2019131515A1 (ja) * | 2017-12-27 | 2019-07-04 | 三洋化成工業株式会社 | 医薬品原薬用原料又は医薬品用添加物及びこれらを用いた医薬品原薬又は医薬品 |
| CN108484898A (zh) * | 2018-04-20 | 2018-09-04 | 江苏保易制药有限公司 | 不含聚氧乙烯异山梨醇脂肪酸酯的聚山梨酯的制备方法 |
-
2019
- 2019-09-04 SG SG11202102138UA patent/SG11202102138UA/en unknown
- 2019-09-04 CA CA3111693A patent/CA3111693A1/en not_active Abandoned
- 2019-09-04 EP EP19761871.3A patent/EP3820928A1/en not_active Withdrawn
- 2019-09-04 WO PCT/EP2019/073509 patent/WO2020049010A1/en unknown
- 2019-09-04 JP JP2021512487A patent/JP2021536464A/ja active Pending
- 2019-09-04 CN CN201980064149.7A patent/CN113166393A/zh active Pending
- 2019-09-04 US US17/273,386 patent/US20210324139A1/en active Pending
- 2019-09-04 KR KR1020217007500A patent/KR20210054523A/ko not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2020049010A1 (en) | 2020-03-12 |
| WO2020049010A9 (en) | 2020-06-18 |
| US20210324139A1 (en) | 2021-10-21 |
| EP3820928A1 (en) | 2021-05-19 |
| JP2021536464A (ja) | 2021-12-27 |
| CN113166393A (zh) | 2021-07-23 |
| CA3111693A1 (en) | 2020-03-12 |
| SG11202102138UA (en) | 2021-04-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Borisov et al. | Oxidative degradation of polysorbate surfactants studied by liquid chromatography–mass spectrometry | |
| Hvattum et al. | Characterization of polysorbate 80 with liquid chromatography mass spectrometry and nuclear magnetic resonance spectroscopy: specific determination of oxidation products of thermally oxidized polysorbate 80 | |
| Martos et al. | Trends on analytical characterization of polysorbates and their degradation products in biopharmaceutical formulations | |
| Sharma et al. | Evaluation of a crystalline nanosuspension: polymorphism, process induced transformation and in vivo studies | |
| TWI526437B (zh) | 卡巴他賽之結晶型 | |
| IL175511A (en) | Rosuvastatin degradation products | |
| Mueller et al. | Noncovalent PEGylation: Different effects of dansyl-, l-tryptophan–, phenylbutylamino-, benzyl-and cholesteryl-PEGs on the aggregation of salmon calcitonin and lysozyme | |
| Boldizsár et al. | Complementary fragmentation pattern analysis by gas chromatography–mass spectrometry and liquid chromatography tandem mass spectrometry confirmed the precious lignan content of Cirsium weeds | |
| Júnior et al. | A new ferulic acid–nicotinamide cocrystal with improved solubility and dissolution performance | |
| KR20210054523A (ko) | 폴리옥시에틸렌 1,4-소르비탄 지방산 에스테르의 제조 방법 | |
| Coufalová et al. | New propanoyloxy derivatives of 5β-cholan-24-oic acid as drug absorption modifiers | |
| EP3339306B1 (en) | Crystal form of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxole-5-yl)cyclopropane formamido)-3-methylpyridine-2-yl)benzoic acid and preparation method thereof | |
| Lind et al. | Effects of ethylene oxide chain length on crystallization of polysorbate 80 and its related compounds | |
| EA033647B1 (ru) | Масло семян коикса, содержащее 11 триглицеридов, и его фармацевтический препарат и его применение | |
| Buckingham et al. | Reversal of multi‐drug resistance in vitro by fatty acid PEG fatty acid diesters | |
| CN101316830A (zh) | 从绿茶茶叶分离儿茶素的方法 | |
| Dhanikula et al. | Preparation and characterization of water-soluble prodrug, liposomes and micelles of paclitaxel | |
| KR20220159986A (ko) | 이온 액체, 용매, 제제 및 경피흡수제 | |
| CA2954797C (en) | Coix seed oil comprising 16 glycerides, formulation and application thereof | |
| Everett et al. | Ketone–hemiacetal tautomerism in erythromycin A in non-aqueous solutions. An NMR spectroscopic study | |
| Schou-Pedersen et al. | Structure elucidation and quantification of impurities formed between 6-aminocaproic acid and the excipients citric acid and sorbitol in an oral solution using high-resolution mass spectrometry and nuclear magnetic resonance spectroscopy | |
| US20140030321A1 (en) | Solid pharmaceutical composition | |
| US11840499B2 (en) | Biobased-fatty acid arginates | |
| EP3582789B1 (en) | Multivalent fucose derivatives for use as a drug | |
| Martínez-Parra et al. | Supporting information: A Comparative Study of Ultrasmall Calcium Carbonate Nanoparticles for Targeting and Imaging Atherosclerotic Plaque |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal |