KR20210024357A

KR20210024357A - 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20210024357A
Application number: KR1020190103183A
Authority: KR
Inventors: 김지효; 이태범; 황지영; 소양강; 이범석
Original assignee: 재단법인 남원시화장품산업지원센터
Priority date: 2019-08-22
Filing date: 2019-08-22
Publication date: 2021-03-05
Also published as: KR102348698B1

Abstract

본 발명은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따르면, 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

Description

왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물{Antioxidant and moisturizing cosmetic composition containing mixed extracts including Prunus yedoensis flower, Peach tree flower and Chrysanthemum flower extract}

본 발명은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃 및 그 외 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유함으로써, 항산화 및 보습 기능이 보다 효과적인 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.

인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다.

즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하게 되고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가되며, 탄력이 감소될 뿐 아니라 피부 혈색도 칙칙하게 안좋게 되고, 피부트러블이 자주 발생하며, 기미와 주근깨 및 검버섯 또한 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다.

노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히알루론산, 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 되고, 자유 라디칼 및 활성 유해 산소에 의한 산화적 스트레스를 받게된다. 또한 노화가 진행되거나 자외선에 의해서, 피부를 구성하는 대부분의 세포에서는, 염증을 일으킨다고 알려져 있는 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine)을 생성하는 효소인 사이클로옥시게나제-2(Cox-2, cyclooxygenase)의 생합성이 증가하고, 이들 염증성 인자에 의해 피부조직을 분해하는 효소인 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP, Matrix metalloproteinase)의 생합성이 증가하며, iNOS(inducible nitric oxide synthase)에 의한 NO(nitric oxide)생성이 증가하는 것으로 알려져 있다.

즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다.

따라서, 이러한 노화의 현상들을 방지하고, 개선 시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있는 것이 현실이다. 일 예로 한국공개특허 제10-2002-0080657호가 공개되어 있다.

한편, 피부는 체내 수분을 보유하고 외부인자의 침입으로부터 내부를 보호하는 필수적인 장벽 기능을 수행하면서 면역반응을 나타내는 대표적 장기이다.

여기서 피부보습을 유지하는 대표적인 인자인 히알루론산(hyaluronic acid, HA)은 콜라겐, 엘라스틴과 함께 피부 3대 요소가운데 하나로, 친수성이 강해 물과 결합하여 겔을 형성하는 성질이 있어 피부 수분 유지에 중요한 역할을 하는 천연 보습제로 알려져 있다.

따라서 히알루론산의 합성을 유도하거나 분해를 억제하는 물질은 피부 보습과 노화 방지에 효과적이며, 특히 히알루론산 합성효소(hyaluronic acid synthase, HAS) 중 HAS2와 HAS3는 히알루론산 합성에 결정적인 역할을 하는 것으로 알려져 있고, 최근 HAS의 유전자 발현 증가를 통해 히알루론산의 생산을 촉진시키고자 하는 연구가 활발하게 이루어지고 있다.

이에, 본 발명에서는 남원·지리산권 자원식물 중 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃 등의 추출물이 항산화 및 보습 기능을 가지는 것을 확인하였고, 이에 따라 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃 및 그 외 추출물을 이용하여 항산화 및 보습 기능이 우수한 화장료 조성물을 개발하고자 한다.

상기와 같은 문제를 해결하고자, 본 발명은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃 및 그 외 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유함으로써, 항산화 및 보습 기능이 보다 효과적인 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물을 제공하는데 목적이 있다.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명의 실시예에 따른 항산화 및 보습용 화장료 조성물은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

여기서, 상기 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃을 각각 물 또는 유기용매 중 하나를 용매로하여 추출한 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 혼합 추출물은 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물을 1.5 내지 3.5 : 1.5 내지 2.5 : 2 내지 3의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 항산화 및 보습용 화장료 조성물은 상기 화장료 조성물 전체 중량에 대하여, 상기 혼합 추출물 5 내지 10중량%를 함유하는 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 혼합 추출물은 사포딜라열매 추출물 및 박하 발효액을 더 포함할 수 있다.

이러한 상기 항산화 및 보습용 화장료 조성물은 유액, 크림, 화장수, 에센스, 팩, 현탁액, 페이스트, 젤, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 겔, 패취, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징 크림, 클렌징 워터, 비누, 샴푸, 린스, 분무제의 제형인 것을 특징으로 한다.

상기와 같은 본 발명의 실시예에 따른 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃 및 그 외 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유함으로써, 항산화 및 보습 기능을 가지며, 함께 사용함으로써 상호 보완되어 각 추출물을 단독으로 사용하는 경우보다 항산화 및 보습 기능이 효과적일 수 있다.

이하, 도면을 참조한 본 발명의 설명은 특정한 실시 형태에 대해 한정되지 않으며, 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있다. 또한, 이하에서 설명하는 내용은 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

이하의 설명에서 제1, 제2 등의 용어는 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용되는 용어로서, 그 자체에 의미가 한정되지 아니하며, 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 사용된다.

본 명세서 전체에 걸쳐 사용되는 동일한 참조번호는 동일한 구성요소를 나타낸다.

본 발명에서 사용되는 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 또한, 이하에서 기재되는 "포함하다", "구비하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것으로 해석되어야 하며, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.

본 발명의 실시예에 따른 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물(이하 '화장료 조성물'이라 함)은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유함으로써, 항산화 및 보습 기능이 보다 우수한 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

먼저, 혼합 추출물에 포함되는 왕벚나무꽃 추출물은 히알루론산 생성능을 가지며, 폴리페놀, 플라보노이드를 함유하고 있어 항산화 효과를 통해 활성 산소를 효과적으로 감소시키고 세포를 보호하여 피부 노화를 방지할 수 있다.

또한, 복사나무꽃 추출물은 피부 보습에 관련된 HAS2 및 HAS3을 발현시킬 수 있고, 폴리페놀, 플라보노이드를 함유하고 있어 항산화 효과를 나타낼 수 있으며, 피부에 영양을 공급하고 컨디셔닝 역할로 피부에 활력이 생기도록 도움을 줄 수 있다.

또한, 국화꽃 추출물은 우수한 히알루론산 생성능을 가져 보습효과가 뛰어나 속 건조를 잡아줄 수 있고 수분 손실을 야기하는 각질에 대한 제거 기능을 나타낼 수 있으며, 폴리페놀 및 플라보노이드를 함유하고 있어 항산화 효과를 나타내고, 비타민A, B1, C 그 외 각종 영양소가 풍부해 아토피, 두드러기 등 피부질환 개선에 도움이 될 수 있다.

이와 같이, 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물, 국화꽃 추출물은 동일하게 항산화 및 보습 기능을 가지나 세부적으로는 효능에 차이가 있는데, 이러한 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물, 국화꽃 추출물을 혼합하여 혼합 추출물로 사용함으로써 본 발명은 항산화 및 보습 기능이 보다 더 효과적으로 나타나도록 한다.

이러한 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물, 국화꽃 추출물은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃을 각각 물 또는 유기용매 중 하나를 용매로하여 추출하는 것으로 제조할 수 있다.

여기서 사용되는 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃은 남원·지리산권 자원식물로, 남원시에서 채취하고 건조시켜 사용될 수 있는데, 35 내지 45℃에서 24시간 내지 72시간 건조한 것을 사용할 수 있고, 42℃에서 48시간 건조시킨 것을 사용하는 것이 바람직하다.

이때, 건조 온도가 35℃미만일 경우 건조시간이 너무 오래걸리거나 수분 증발이 잘 이루어지지 않아 추출 효율이 저하될 수 있으며, 45℃를 초과할 경우 타거나 유효성분에 파괴, 변형 등이 일어날 수 있다.

또한, 건조 시간이 24시간 미만일 경우 건조가 잘 이루어지지 않고, 72시간을 초과할 경우 이미 건조가 충분히 이루어져 있기 때문에 비효율적이며 오히려 추출 효율이 저하될 수 있다.

유기용매는 에탄올 또는 1,3-부틸렌글리콜(1,3-butylene glycol)이 바람직하나, 메탄올, 이소프로탄올, 부탄올 등도 사용할 수 있다. 또한, 에탄올을 사용할 경우 50% 에탄올을 사용하는 것이 바람직하나, 이는 본 발명의 실시예에 불과하므로 한정되지는 않는다.

더욱 구체적으로, 왕벚나무꽃 추출물 또는 복사나무꽃 추출물 또는 국화꽃 추출물은 원료(왕벚나무꽃 또는 복사나무꽃 또는 국화꽃) 4 내지 6중량부에 95 내지 100중량부의 물 또는 유기용매를 첨가하고 가열한 후 농축시키고 동결건조하여 제조될 수 있다. 이때, 원료 5중량부에 95중량부의 물 또는 유기용매를 첨가하는 것이 바람직하다.

이 경우 원료가 4중량부 미만일 경우 추출물의 효능이 적게 나타나고 6중량부를 초과할 경우 화장료의 관능적인 특성인 향과 색상에 영향을 미칠 수 있기 때문이다.

또한, 용매가 95중량부 미만일 경우 유효성분이 완전히 침출되지 않고 약간만 증발해도 추출액이 농축되고, 추출액의 유효성분이 과다한 열에 의해 국소적으로 파괴될 수 있으며, 100중량부 초과일 경우 유효성분의 용출량은 증가할 수 있으나 동결건조 시 비효율적이다.

한편, 용매로 물을 사용할 경우 95 내지 105℃에서 230 내지 250분동안 가열할 수 있고, 유기용매를 사용할 경우 60 내지 85℃에서 3 내지 12시간동안 가열할 수 있으며, 바람직하게는 물을 사용할 경우 100℃에서 240분, 유기용매를 사용할 경우 80℃에서 4시간 동안 가열할 수 있다.

이때, 물을 사용할 때 온도가 95℃, 시간이 230분, 유기용매를 사용할 때 60℃, 3시간 미만이면 유효성분이 완전하게 추출되지 못할 수 있고, 물을 사용할 때 온도가 105℃, 시간이 250분, 유기용매를 사용할 때 85℃, 12시간을 초과하면 유효성분이 파괴될 수 있으며, 더 이상 추출되는 유효성분 수율이 더 증가하지 않으므로 더 이상의 추출은 의미가 없다.

이와 같이 추출된 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물, 국화꽃 추출물을 배합하여 혼합 추출물이 제조될 수 있는데, 각 추출물을 바람직한 배합비로 혼합함으로써 상호작용으로 각 추출물을 단독으로 사용하는 것 보다 화장료 조성물의 항산화 및 보습 기능이 향상 될 수 있다.

즉, 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물이 혼합되어 이루어진 혼합 추출물은 각 추출물을 1.5 내지 3.5 : 1.5 내지 2.5 : 2 내지 3의 중량비로 포함할 수 있고, 3.5 : 1.5 : 2 또는 1.5 : 2.5 : 3의 중량비로 포함하는 것이 보다 바람직하다.

이러한 중량비로 포함될 경우에 가장 바람직한 항산화 및 보습 기능을 나타낼 수 있다.

또한, 혼합 추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여, 5 내지 10중량%가 함유될 수 있고, 7중량%가 가장 바람직하다.

이때, 화장료 조성물 전체 중량에 대하여, 혼합 추출물이 5중량% 미만일 경우 항산화 및 보습 기능이 미미하고, 10중량%를 초과할 경우 알레르기 반응, 따가움, 가려움 등을 발생시킬 수 있어 피부 안전성에 문제가 있을 수 있으며 관능적인 특성에 영향을 줄 수 있다.

또한, 본 발명의 실시예에 따른 화장료 조성물의 혼합 추출물은 항산화 효과 및 보존성을 향상시키기 위해 사포딜라열매 추출물 및 박하 발효액을 더 포함할 수 있다.

사포딜라열매 추출물은 활성산소를 제거하여 노화 방지 효과가 있고, 비타민 A를 함유하고 있어 건강한 점막과 피부를 유지하는데 도움을 주며, 폴리페놀인 탄닌을 함유해 항염 작용 및 진정 효과로 피부염에 도움을 주는 것으로, 건조시킨 사포딜라열매를 물 또는 유기용매 중 하나를 용매로하여 추출하는 것으로 제조할 수 있는데, 추출 조건은 상기 다른 추출물과 동일한 조건으로 추출될 수 있다.

박하 발효액은 항산화 및 항균 효능이 있고 수분 증발을 감소시켜 보습 효과가 더욱 우수하게 나타나도록 할 수 있으며, 화장료 조성물의 보존성을 향상시키는 것으로, 박하추출물에 자일리톨분말, 모링가분말, 산수유분말을 혼합한 후 유산균을 첨가하여 발효시켜 제조될 수 있다.

이때 사용되는 박하 추출물은 박하 항산화 물질을 포함하고 있어 알레르기 증상을 완화시키는데 효과가 있고 항염 작용을 하는 것으로, 건조시킨 박하를 물 또는 유기용매 중 하나를 용매로하여 추출하는 것으로 제조할 수 있는데, 추출 조건은 상기 다른 추출물과 동일한 조건으로 추출될 수 있다.

또한, 자일리톨분말은 수분 증발을 감소시켜 보습 효과가 우수하게 나타나도록 할 수 있고, 피부 건강에 도움을 줄 수 있다.

또한, 모링가분말 및 산수유분말은 항균 작용, 정화작용으로 화장료 조성물의 보존성을 향상시킬 수 있다.

유산균은 비피도박테리엄 비피덤 (Bifidobacterium bifidum) 및 스트렙토코쿠스 써모필러스 (Streptococcus thermophilus)이 바람직하나, 이에 한정되지는 않는다.

구체적으로, 박하 발효액은 박하 추출물 100중량부에 자일리톨분말 20 내지 30중량부, 모링가분말 0.1 내지 0.5중량부, 산수유분말 0.1 내지 1중량부를 혼합한 후, 유산균을 첨가하고 상온에서 자연 발효시켜 제조될 수 있다. 이 후 여과시켜 사용할 수 있다.

이때, 자일리톨분말이 20중량부 미만일 경우 보습 기능 향상 효과가 미미할 수 있고, 30중량부 초과일 경우 화장료 조성물의 관능적인 특성에 영향을 줄 수 있다.

모링가분말이 0.1중량부 미만일 경우 모링가 분말에 의한 효능이 미미하고, 0.5중량부를 초과할 경우 피부 안전성에 문제가 발생할 수 있다.

산수유분말이 0.1중량부 미만일 경우 산수유분말에 의한 효능이 미미하고, 1중량부를 초과할 경우 피부 안전성에 문제가 발생할 수 있으며 화장료 조성물의 관능적인 특성에 영향을 줄 수 있다.

이와 같이 제조된 박하 발효액은 유산균으로 발효되어 제조됨으로써, 각 재료들의 효능이 보다 우수해져 화장료 조성물의 기능 향상에 효과적으로 작용할 수 있다.

이러한 사포딜라열매 추출물 및 박하 발효액은 혼합 추출물에 각각 2 내지 2.5중량부, 0.5 내지 1중량부로 더 포함될 수 있다.

이때, 사포딜라열매 추출물 및 박하 발효액이 각각 상기 범위 미만일 경우 더 포함됨에 따라 나타나는 항산화, 보습 기능 등의 상승 효과가 미미하고, 상기 범위 초과일 경우 피부 안전성에 문제가 발생할 수 있다.

즉, 혼합 추출물은 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물, 국화꽃 추출물, 사포딜라열매 추출물 및 박하 발효액을 1.5 내지 3.5 : 1.5 내지 2.5 : 2 내지 3 : 2 내지 2.5 : 0.5 내지 1의 중량비로 포함할 수 있고, 3.5 : 1.5 : 2 : 2.5 : 0.5 또는 1.5 : 2.5 : 3 : 2.5 : 0.5의 중량비로 포함하는 것이 바람직하다.

이와 같은 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물은 유액, 크림, 화장수, 에센스, 팩, 현탁액, 페이스트, 젤, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 겔, 패취, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징 크림, 클렌징 워터, 비누, 샴푸, 린스, 분무제의 제형과 같이 형성될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.

상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 실시예에 따른 왕벚나무꽃, 복사나무꽃 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물은 왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃 및 그 외 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유함으로써, 항산화 및 보습 기능을 가지며, 함께 사용함으로써 상호 보완되어 각 추출물을 단독으로 사용하는 경우보다 항산화 및 보습 기능이 효과적일 수 있다.

이하, 실시되는 실험 예들은 이해를 돕기 위하여 제시되는 것으로서, 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 하기 실험 예들에 한정되는 것은 아니다.

또한, 하기에서 화장료 조성물의 효과를 알아보기 위해 용매로 물 및 에탄올을 사용하여 실시예 및 실험예를 설명하였으나, 실질적으로 화장료 조성물을 제조 시엔 1,3-부틸렌글리콜(1,3-butylene glycol)가 주로 사용될 수 있다.

[제조예 1] 왕벚나무꽃 추출물 제조

남원·지리산권 자원식물인 왕벋나무꽃을 건조시키고, 건조시킨 왕벚나무꽃 5중량부에 대하여 95중량부의 50%에탄올을 첨가하고 80℃로 4시간 동안 가열한 후 농축시키고 동결건조하여 제조하였다.

[제조예 2] 복사나무꽃 추출물 제조

남원·지리산권 자원식물인 복사나무꽃을 건조시키고, 건조시킨 복사나무꽃 5중량부에 대하여 95중량부의 50%에탄올을 첨가하고 80℃로 4시간 동안 가열한 후 농축시키고 동결건조하여 제조하였다.

[제조예 3] 국화꽃 추출물 제조

남원·지리산권 자원식물인 국화꽃을 건조시키고, 건조시킨 국화꽃 5중량부에 대하여 95중량부의 50%에탄올을 첨가하고 80℃로 4시간 동안 가열한 후 농축시키고 동결건조하여 제조하였다.

[제조예 4] 사포딜라열매 추출물 제조

건조시킨 사포딜라열매 5중량부에 대하여 95중량부의 50%에탄올을 첨가하고 80℃로 4시간 동안 가열한 후 농축시키고 동결건조하여 제조하였다.

[제조예 5] 박하 발효액 제조

박하 추출물 100중량부에 자일리톨분말 20중량부, 모링가분말 0.5중량부, 산수유분말 1중량부를 혼합한 후, 유산균을 첨가하고 상온에서 자연 발효시켜 제조하였다.

[실시예 1 및 2] 혼합 추출물 제조

제조예 1 내지 5를 표 1의 중량비와 같이 혼합하여 실시예 1 및 2의 혼합 추출물을 제조하였다.

[ 실험예 1] 폴리페놀 및 플라보노이드 함량

항산화 기능을 가지고 있는지 확인하기 위하여 제조예 1 내지 3의 폴리페놀 및 플라보노이드 함량을 하기와 같은 방법으로 측정하였다.

폴리페놀은 96well plate에 각 제조예 1 내지 3 80㎕와 1N Folin 시약 20㎕를 넣고, 실온에서 5분동안 배양하고, 2% Na₂CO₃ 시약 100㎕를 첨가한 다음, 실온에서 30분동안 배양한 후, ELISA 흡광도 750nm로 측정하였다.

플라보노이드는 96well plate에 각 제조예 1 내지 3 10㎕와 diethylene glycol 시약 100㎕를 넣고, 1N NaOH 10㎕를 첨가한 다음, 37℃에서 1시간동안 배양한 후, ELISA 흡광도 420nm로 측정하였다.

그 결과는 하기 표 2와 같다.

상기 표 2에서 알 수 있듯이, 제조예 1 내지 3 모두 폴리페놀 및 플라보노이드가 함유되어 있는 것을 확인할 수 있었다.

이에 제조예 1 내지 3인 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물 모두 항산화 기능을 나타낼 수 있는 것으로 판단되었다.

[ 실험예 2] 항산화 기능

항산화 기능을 확인하기 위하여 제조예 1 내지 3, 실시예 1 및 2의 추출물에 대해 하기와 같은 방법으로 자유라디칼 소거능(free radical scavenging activity, SC)을 측정하여 항산화 기능을 평가하였다.

DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical) 용액 (60 M)을 준비하였다. 그런 다음 실시예 1 내지 3의 농도를 1 %로 조정하고, 여기에 DPPH 용액을 1:1 비율로 섞은 다음 볼텍싱(와류 혼합)하였다. 30분 동안 상온에서 반응시킨 후 520 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 1의 공식에 따라 자유라디칼 소거능(free radical scavenging activity, SC)을 구하였다.

양성대조군으로는 Ascorbic acid을 사용하였다.

[수학식 1]

자유라디칼 소거능(%)=(대조군 흡광도-실시예 흡광도)/(대조군 흡광도)X100

그 결과는 하기 표 3과 같다.

상기 표 3에서 알 수 있듯이, 제조예 1 내지 3, 실시예 1 및 2 모두 대조군보다 높은 자유라디칼 소거능이 나타나는 것을 확인할 수 있었다.

특히, 실시예 1 및 2의 자유라디칼 소거능이 특히 높은 것을 확일 할 수 있었다.

이는 제조예 1 내지 3이 항산화 기능을 나타낼 수 있으나, 각각 단독으로 사용하는 것보다 혼합하여 사용할 경우 항산화 기능이 좀더 높은 것으로 판단된다.

[ 실험예 3] 보습 기능

보습효능을 확인하기 위하여 제조예 1 내지 3, 실시예 1 및 2의 추출물에 대해 하기와 같은 방법으로 히알루론산 분비능 및 HAS2, HAS3 발현 정도 측정하여 보습 기능을 분석하였다.

히알루론산 분비능은 heat inactivation 10% fetal bovine serum (Merck, MA, USA)와 1% penicillin/streptomycin (Gibco, Carlsbad, CA, USA)가 함유된 DMEM(High glucose, Welgene, Daegu, Korea)를 사용하여 5% CO₂, 37℃ 세포배양기에서 배양하였다. 각각의 시료를 50㎍/mL 농도로 시료를 48시간 처리한 후 HA ELISA로 측정하였다.

HAS2, HAS3 발현 정도는 6 well plate에 HaCaT 세포를 6Х10⁵cells로 분주한 후 24시간 동안 배양하고, FBS free 배지로 2번 세척한 후 FBS free 배지로 교체하고 시료를 50㎍/ml로 처리하여 48시간동안 배양하였다. 48시간 후에 세포에서 RNA를 추출하기 위해 total RNA extraction reagent인 tri reagent(RNAiso PLUS, Takara, Otsu, Japan)를 이용하였다. Tri reagent 1mL을 세포에 넣은 후 15초 동안 vortex하였다. 이어 15,000rpm에서 15분 동안 원심분리한 후 chloroform 200㎕를 넣고 20초간 vortex한 후 원심 분리한 다음 상층액을 새로운 튜브에 옮겼다. 차가운 isopropanol 동량을 넣고 상온에서 10분 동안 방치하였다. 이를 다시 15,000rpm에서 20분간 원심 분리하여 RNA 침전물을 얻었다. RNA 침전물을 75% ethanol로 씻은 후, 침전물을 실온에서 건조시켜 0.1% diethyl pyrocarbonate(DEPC) water에 녹였다. RNA 농도(1 OD=40㎍/mL)는 Evloution 260 Bio UV-Vis spectrophotometer(Thermo Scientific, CA, USA)를 이용하여 260nm에서 측정한 후, reverse transcription kit(RNA to cDNA EcoDry Premix (Oligo dT), Clontech, USA)를 이용하여 1㎍ RNA로부터 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA를 멸균 증류수로 7배 희석한 후 실시간 PCR은 Fast Start DNA MasterPLUS SYBR Green I kit (Roche, Mannheim, Germany)을 이용하여 Light Cycler 2.0 (Roche)에서 증폭하였다.

PCR 조건은 50℃에서 60분으로 하여 진행하였다.

양조대조군으로는 ATRA를 사용하였다.

그 결과는 하기 표 4와 같다.

상기 표 4에서 알 수 있듯이, 제조예 1 및 3, 실시예 1 및 2에서 히알루론산 분비능이 나타나는 것을 확인할 수 있었고, 실시예 1 및 2에서 보다 높게 나타나는 것을 확인할 수 있었다.

또한, 제조예 2, 실시예 1 및 2에서만 HAS2, HAS3 발현이 일어나는 것을 확인할 수 있었다.

이는 제조예 1 내지 3이 보습 효능을 나타낼 수 있으나, 단독으로 사용하는 것보다 혼합하여 사용할 경우 보습 효과가 좀더 높을 것으로 판단된다.

[ 제형예 1 내지 5] 에센스 제조

상기 제조예 1 내지 3, 실시예 1 및 2의 추출물을 각각 이용하여 화장료 조성물인 제형예 1 내지 5를 제조하였고 하기 표 5에 나타내었다.

[ 실험예 4] 피부 보습 효과 확인

제형예 1 내지 5의 보습효과를 확인하기 위하여 건강한 30세에서 50세의 여성 50명을 대상으로 시험하였다.

피부 보습 개선 효과를 확인하기 위해, 각 10명씩 나누어 제형예 1 내지 4를 안면부에 하루 2회씩(아침 및 저녁) 2주간 도포하였다.

실험이 시작되기 전, 측정하고자 하는 2부위를 정하고 피부의 수분량을 각각 3회에 걸쳐 측정한 후 2주간 도포(2회/일) 한 후, 피부 수분함량 측정 장치를 이용하여 각질층 바로 아래의 표피층의 수분을 측정하였다. 상기 측정결과는 표 6과 같다.

상기 표 6에서 볼 수 있듯이, 제형예 1 내지 3이 보습 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있으나, 제형예 4 및 5에서 보다 높은 보습 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

[ 실험예 5] 보존성 평가

제형예 4 및 5를 항온 항습기(고온, 40℃에서 보관하여 10주 동안 주기적으로 pH의 변화를 측정하여 각 제형예의 보존성을 조사하였고 그 결과는 표 7과 같다.

상기 표 7에서 볼 수 있듯이, 제형예 4보다 제형예 5의 pH 변화가 적은 것을 확인할 수 있었다.

이에 따라, 제형예 5가 제형예 4보다 보존성이 우수한 것으로 판단된다.

이상으로 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예를 설명하였으나, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고 다른 구체적인 형태로 실시할 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 따라서 이상에서 기술한 실시예는 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것이다.

Claims

왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물을 포함하는 혼합 추출물을 함유하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물은,
왕벚나무꽃, 복사나무꽃, 국화꽃을 각각 물 또는 유기용매 중 하나를 용매로하여 추출한 것을 특징으로 하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 혼합 추출물은,
왕벚나무꽃 추출물, 복사나무꽃 추출물 및 국화꽃 추출물을 1.5 내지 3.5 : 1.5 내지 2.5 : 2 내지 3의 중량비로 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 항산화 및 보습용 화장료 조성물은,
상기 화장료 조성물 전체 중량에 대하여, 상기 혼합 추출물 5 내지 10중량%를 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 혼합 추출물은,
사포딜라열매 추출물 및 박하 발효액을 더 포함하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 항산화 및 보습용 화장료 조성물은,
유액, 크림, 화장수, 에센스, 팩, 현탁액, 페이스트, 젤, 파우더, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 겔, 패취, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징 크림, 클렌징 워터, 비누, 샴푸, 린스, 분무제의 제형인 것을 특징으로 하는 항산화 및 보습용 화장료 조성물.