KR20190124197A - 종양 치료용 한약 조성물 및 그 제조방법 및 응용 - Google Patents

종양 치료용 한약 조성물 및 그 제조방법 및 응용 Download PDF

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Abstract

본 발명은 고삼, 들국화, 금은화, 박하, 복령, 삽주, 육계, 정향, 황기, 영지, 천궁, 목향 및 감초로 이루어지는 항종양 효과가 있는 종양 치료용 한약 조성물 및 그 제조방법을 제공한다.

Description

종양 치료용 한약 조성물 및 그 제조방법 및 응용
본 발명은 한약 분야에 속하는 것으로, 종양 치료용 한약 조성물 및 그 제조방법 및 응용에 관한 것이다.
종래부터 악성 종양 치료는 주요하게 수술치료, 화학치료 또는 방사선 치료 등을 사용하고 있으나, 수술치료는 수술후 회복이 어렵고, 화학치료와 방사선 치료 등은 인체에 대한 손상이 비교적 큰 문제점이 존재한다.
현재 악성 종양 치료중에서 항종양 약물시장은 근래 해마다 증가하는 추세를 보이고 있으나, 종양 환자가 해마다 증가하고 있고 항종양 약물의 독성 부작용이 비교적 크므로 효과가 뚜렷하고 부작용이 적은 항암 약물을 개발하는 것은 중요한 의의를 가진다.
본 발명은 한 방면으로는 종양 치료용 한약 조성물을 제공하고, 다른 한 방면으로는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법을 제공하며, 또 다른 한 방면으로는 상기 종양 치료용 한약 조성물의 응용 및 종양 치료방법을 제공한다.
본 발명의 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 3%-12%, 들국화 5%-15%, 금은화 2%-12%, 박하 5%-15%, 복령 5%-15%, 삽주 10%-20%, 육계 0.5%-3%, 정향 0.5%-3%, 황기 3%-12%, 영지 5%-15%, 천궁 10%-20%, 목향 5%-12%, 감초 2%-10%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 5%-10%, 들국화 5%-10%, 금은화 3%-8%, 박하 5%-10%, 복령 5%-10%, 삽주 12%-20%, 육계 0.5%-3%, 정향 0.5%-3%, 황기 5%-10%, 영지 5%-10%, 천궁 11%-15%, 목향 8%-12%, 감초 3%-8%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 6%-10%, 들국화 6%-9%, 금은화 3%-6%, 박하 6%-9%, 복령 6%-9%, 삽주 15%-18%, 육계 1%-3%, 정향 0.5%-1.5%, 황기 6%-10%, 영지 6%-10%, 천궁 12%-15%, 목향 8%-11%, 감초 3%-6%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 8%, 들국화 9%, 금은화 4%, 박하 6%, 복령 6%, 삽주 17%, 육계 2%, 정향 1%, 황기 8%, 영지 10%, 천궁 13%, 목향 9%, 감초 7%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 7%, 들국화 7%, 금은화 6%, 박하 8%, 복령 8%, 삽주 15%, 육계 2%, 정향 1.5%, 황기 7%, 영지 8%, 천궁 15%, 목향 10%, 감초 5.5%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 8%, 들국화 7%, 금은화 5%, 박하 6%, 복령 9%, 삽주 18%, 육계 1.5%, 정향 0.5%, 황기 6%, 영지 9%, 천궁 16%, 목향 9%, 감초 5%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 6%, 들국화 9%, 금은화 8%, 박하 5%, 복령 9%, 삽주 19%, 육계 1%, 정향 1%, 황기 6%, 영지 15%, 천궁 11%, 목향 9%, 감초 10%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물은 중량%로, 고삼 9%, 들국화 8%, 금은화 3%, 박하 9%, 복령 8%, 삽주 16.5%, 육계 1%, 정향 1%, 황기 9%, 영지 9%, 천궁 13.5%, 목향 10%, 감초 3%의 원료로 이루어진다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물의 제형은 주사제, 밀환제, 수환제, 캡슐, 정제, 점적 환제(滴丸劑), 산제, 구복액, 겔제, 전고제(煎膏劑), 침고제(浸膏劑) 또는 막제일수 있다.
본 발명은 다른 한 방면으로 상기 중량%에 따라 각 한약 원료를 취하여 각각 분쇄하여 체로 친 후 균일하게 혼합하는 단계(1),
단계(1)에서 제조된 한약 분말을 에탄올 수용액으로 침윤시킨 후 퍼컬레이션통에 투입하는 단계(2),
단계(2)의 퍼컬레이션통에 에탄올 수용액을 투입하여 담근 후 퍼컬레이션을 실시하고, 퍼컬레이션 후의 약 찌꺼기는 비축하고, 얻은 알콜 퍼컬레이션 용액을 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말A를 얻는 단계(3),
단계(3)에서 얻은 약 찌꺼기에 물을 투입하여 달인 후 여과하여 얻은 약액을 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말B를 얻는 단계(4), 및
단계(3)에서 얻은 한약 복합 분말A와 단계(4)에서 얻은 한약 복합 분말B를 균일하게 혼합하여 상기 한약 조성물을 얻는 단계(5)를 포함하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법을 제공한다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(1)에서 각 약재를 10-100메쉬의 입도로 분쇄할 수 있으며, 바람직하게는 20-40메쉬의 입도로 분쇄할 수 있고, 더욱 바람직하게는 24메쉬의 입도로 분쇄할 수 있다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)와 단계(3)에서 사용되는 에탄올 수용액의 농도는 40%-95%일 수 있으며, 바람직하게는 60%-80%일 수 있고, 더욱 바람직하게는 70%일 수 있다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)에서 균일하게 혼합한 한약 분말을 10-48시간 침윤 시킬 수 있으며, 바람직하게는 8-30시간 침윤시킬 수 있고, 더욱 바람직하게는 24시간 침윤시킬 수 있다.
바람직한 또 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(3)에서 담금 시간은 2-48시간일 수 있으며, 바람직하게는 18-36시간일 수 있다.
바람직한 또 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(4)에서 물 사용량은 약 찌꺼기 중량의 2-10배일 수 있으며, 물로 달이는 횟수는 1-3회일 수 있으며, 회당 0.5-2시간 달일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법은 상기 임의의 중량%로 각 한약 원료를 취하여 각각 10메쉬-100메쉬의 입도로 분쇄하는 단계(1),
40%-95%의 농도로 에탄올 용액을 배합하여 비축하고, 배합한 40%-95% 농도의 에탄올 용액을 균일하게 혼합한 한약을 10-48시간 침윤시키고, 침윤시킨 후의 한약 혼합물을 여러 번에 나누어 퍼컬레이션통에 투입하여 가볍게 눌러 펴서 까는 단계(2),
배합한 40%-95% 농도의 에탄올 용액을 단계(2)의 퍼컬레이션통에 약재 표면을 1-2cm 초과하도록 투입하여 설정된 시간동안 담근 후 남은 에탄올을 퍼컬레이션 하여 약 찌꺼기를 보류하여 비축하며, 얻은 알콜 용액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말A를 얻는 단계(3),
상기 약 찌꺼기에 약 찌꺼기의 2-10배의 량의 물을 투입하여 0.5-2시간 달여서 추출하여 원심여과를 하여 약액을 감압 농축하여 한약 복합 분말B을 얻고, 상기 한약 복합 분말A와 한약 복합 분말B를 균일하게 혼합하여 한약 조성물을 얻는 단계(4)를 포함한다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(1)의 약재를 20-40메쉬의 입도로 분쇄할 수 있고, 바람직하게는 24메쉬의 입도로 분쇄할 수 있으며, 상기 단계(2)와 단계(3)에서 배합한 에탄올의 농도는 60%-80%일 수 있으며, 바람직하게는 70%일 수 있다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)에서 균일하게 혼합한 한약을 18-30시간 침윤시킬 수 있으며, 바람직하게는 24시간 침윤시킬 수 있으며, 상기 단계(3)에서 2-48시간 담글 수 있으며, 바람직하게 18-36시간 담글 수 있다.
본 발명은 다른 한 방면으로 상기 중량%로 천궁, 삽주, 목향, 정향, 육계, 박하를 취하여 적당한 량의 물을 투입하여 휘발유를 추출한 후, 시클로덱스트린을 투입하여 포접화하고, 휘발유를 추출한 후의 물로 달인 액체를 여과하여 수집하여 비축하고, 얻은 약 찌꺼기도 비축하는 단계(1),
단계(1)의 휘발유를 추출하여 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼 및 감초를 혼합하여 물을 투입하여 달여 약액을 여과하고, 여과후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계(2),
단계(2)에서 얻은 한약 혼합 약액을 청고(淸膏)로 농축하고, 에탄올을 투입하여 침전시켜 여과하여 얻은 혼합 알콜 용액을 비축하는 단계(3),
단계(3)에서 얻은 혼합 알콜 용액을 농축하여 건조시킨 후 단계(1)의 휘발유의 시클로덱스트린 포접화물에 투입하여 균일하게 혼합하여 상기 한약 조성물을 얻는 단계(4)를 포함하는 상기 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법을 제공한다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(1)에서 휘발유의 추출에 사용된 물의 량은 상기 약재 량의 4-15배일 수 있으며, 바람직하게는 4-8배일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 6배일 수 있으며, 추출시간은 2-12시간일 수 있으며, 얻은 휘발유를 40℃이하에서 시클로덱스트린 포접화하고, 포접화 시간은 1-10시간일 수 있으며, 바람직하게는 2-8시간일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 6시간일 수 있다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)는 단계(1)에서 휘발유를 추출하여 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼 및 감초를 혼합하여 약재량의 10-15배의 물을 투입하여 회당 1-2시간씩 2-5회 달인 후 여과하고, 여과후의 약액과 휘발유을 추출하여 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계를 포함한다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(3)은 단계(2)에서 얻은 한약 혼합물을 수욕으로 상대 밀도가 1.06-1.08인 청고가 되도록 농축하고, 알콜 함량이 60% 되도록 에탄올을 가하고 12-72시간 방치시켜 여과하여 혼합 알콜 용액을 얻는 단계를 포함한다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법은 상기 중량%에 따라 천궁, 삽주, 목향, 정향, 육계, 박하를 취하여 적당한 량의 물을 투입하여 휘발유를 추출한 후, 시클로덱스트린을 투입하여 포접화시키고, 달인 액체를 여과하여 다른 기기에 수집하여 비축용 여액으로 하는 단계(1),
휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼, 감초에 물을 투입하여 달이고, 약액을 여과하며, 여과후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계(2),
얻은 한약 혼합 약액을 수욕으로 청고로 농축하고, 알콜 함량이 50%-80%가 되도록 에탄올을 투입하여 알콜 침전시켜 한약 알콜 용액을 얻는 단계(3),
상기 한약 혼합 알콜 용액을 감압 농축하고 건조시킨 후 휘발유의 시클로덱스트린포접화물을 투입하여 한약 조성물을 얻는 단계(4)를 포함한다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(1)의 휘발유 추출용매로 사용된 물의 량은 상기 약재량의 4-15배일 수 있으며, 추출시간은 2-12시간일 수 있으며, 얻은 휘발유를 40℃이하에서 시클로덱스트린 포접화하고, 포접화 시간은 1-10시간일 수 있다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(1)의 휘발유 추출용매로 사용된 물의 량은 상기 약재량의 4-8배일 수 있으며, 바람직하게는 6배일 수 있으며, 상기 단계(1)의 시클로덱스트린 포접화는 2-8시간 실시할 수 있으며, 바람직하게는 6시간 실시할 수 있다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)는 휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%로 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼, 감초를 혼합하고, 약재량의 10-15배의 물을 투입하여 회당 1-2시간씩 2-5회 달이고, 얻은 약액을 여과하며, 여과하여 얻은 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계를 포함한다.
바람직한 다른 일 실시예에 있어서, 상기 단계(3)은 얻은 한약 혼합물을 수욕으로 상대 밀도가 1.06-1.08인 청고로 되도록 농축하고, 알콜 함량이 60%가 되도록 에탄올을 투입하고 12시간이상 방치하여 한약 혼합 알콜 용액을 얻는 단계를 포함한다.
본 발명은 다른 한 방면으로 상기 중량%에 따라 각 한약 원료를 취하여 균일하게 혼합하는 단계(1),
상기 단계(1)의 균일하게 혼합한 한약에 에탄올 수용액을 투입하고, 바람직하게는 40%-80%의 에탄올 수용액을 투입하고, 회당 1-2시간씩 1-4회 가열 환류 추출을 실시하고, 추출액을 합치고 감압하여 에탄올을 회수한 후 농축하고 건조시켜 한약 조성물을 얻는 단계(2)를 포함하는 상기 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법을 제공한다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)에서 에탄올 수용액 농도는 50%-70%일 수 있으며 바람직하게는 60%일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법은 상기 중량%에 따라 한약 원료를 취하는 단계(1),
40%-80%의 농도로 에탄올 용액을 배합하여 비축하고, 균일하게 혼합한 한약에 배합한 에탄올 용액을 투입하고, 회당 1-2시간씩 1-4회 가열 환류 추출을 실시하고, 추출액을 합치고 감압하여 에탄올을 회수한 후 농축하고 건조시켜 한약 조성물을 얻는 단계(2)를 포함한다.
바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 단계(2)에서 50%-70% 농도의 에탄올 용액을 배합하여 비축하는 것일 수 있으며, 바람직하게는 60% 농도의 에탄올 용액을 배합하는 것일 수 있다.
본 발명은 다른 방면으로 종양 치료용 약물 제조에서의 상기 종양 치료용 한약 조성물의 응용을 제공한다.
본 발명은 또 다른 방면으로 상기 종양 치료용 한약 조성물을 수요로 하는 피험자에 투여하는 종양 치료방법을 제공한다.
본 발명은 또 다른 방면으로 종양 치료에 사용되는 상기 종양 치료용 한약 조성물을 제공한다.
본 발명의 한약 조성물은 주로 맛이 쓰고 성질이 차며, 청열, 조습으로 중용된다. 고삼은 맛이 쓰고 성질이 찬 것으로 열을 제거하여 가라앉히고, 습열을 씻어내는 효능을 가지는바, 습열로 인한 독을 제거할 수 있다. 들국화, 금은화, 박하, 복령 및 삽주를 보조약으로 하여 청열, 조습을 함께 이루는 효능을 가지는바, 폐와 위의 열독(熱毒)을 제거하도록 소풍(疏風), 청열하고, 비장과 위의 습체를 제거하도록 건비(健脾), 거습(祛濕)한다. 습열이 일단 제거되면, 양기를 약화시키므로 이러한 맛이 쓰고 성질이 찬 약재들에 상반 작용의 열을 보충하고 양기를 돕는 정향, 육계를 소량으로 첨투입하여 습을 방지하면서 공휴일궤(
Figure pct00001
)의 우려가 될 양기의 약화를 막아준다. 황기, 영지는 익기부정(益氣扶正), 고본배원(固本培元)의 효능이 있다. 양과 기를 동시에 보충해줌으로서 지나치게 쓰고 찬 것으로 인한 비장과 위를 상하게 하는 것을 막을 수 있다. 천궁, 목향은 활혈행기(活血行氣)의 작용이 있고 기혈을 통하게 함으로서 기를 통하게 하고 혈액순환을 원활하게 하며, 막힌 습열독이 기혈에 따라 제거되도록 한다. 따라서, 육계, 정향, 황기, 영지, 천궁 및 목향은 모두 보조약으로 사용된다. 감초는 使藥(conductant drug)으로서 기를 돕고 몸의 방어 기능을 강화하며, 온중(溫中)을 실현하고, 약물의 편향적인 성질을 조절하고, 정기를 상하지 않게 한다.
본 발명의 상기 한약 조성물은 래트(rat) 및 마우스에 의한 약물 시험을 통하여 항종양 효과가 현저하고 면역 기능과 항종양 기능을 강화하는 작용이 있다는 것이 확인되었다. 또한, 약재를 간단하게 얻을 수 있고, 제조방법도 간단하며, 원가가 상대적으로 저렴하다.
실시예1
중량%로, 고삼 8%, 들국화 9%, 금은화 4%, 박하 6%, 복령 6%, 삽주 17%, 육계 2%, 정향 45%, 황기 8%, 영지 10%, 천궁 13%, 목향 9%, 감초 7%의 원료를 포함하는 종양 치료용 한약 조성물을 제조한다.
해당 한약 조성물의 제조방법은 하기와 같다.
상기 중량%에 따라 각 한약 원료를 취하고 각각 20메쉬의 입도로 분쇄한 후 균일하게 혼합하고; 70% 농도의 에탄올 용액을 배합하여 비축하고; 배합한 70% 농도의 에탄올 용액을 사용하여 균일하게 혼합한 후의 한약을 적어도 24시간 침윤시키고, 침윤시킨 후의 한약 혼합물을 여러 번에 나누어 퍼컬레이션통에 투입하여 가볍게 눌러 펴서 깔고; 배합한 70% 농도의 에탄올 용액을 퍼컬레이션통에 약재 표면을 1-2cm 초과하도록 투입하고 18-30시간(바람직하게는 20시간) 담근 후 남은 에탄올을 퍼컬레이션 하여 약 찌꺼기를 보류하여 비축하고; 얻은 알콜 용액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말A를 얻고; 상기 약 찌꺼기에 약 찌꺼기의 2-10배(바람직하게는 8배)의 량의 물을 투입하여 0.5-2시간(바람직하게는 1시간) 달여서 추출하여 원심여과를 하여 약액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말B를 얻고, 상기 한약 복합 분말A와 한약 복합 분말B를 균일하게 혼합하여 한약 조성물 얻는다.
실시예2
중량%로, 고삼 7%, 들국화 7%, 금은화 6%, 박하 8%, 복령 8%, 삽주 15%, 육계 2%, 정향 1.5%, 황기 7%, 영지 8%, 천궁 15%, 목향 10%, 감초 5.5%의 원료를 포함하는 종양 치료용 한약 조성물을 제조한다.
해당 한약 조성물의 제조방법은 하기와 같다.
상기 중량%로 천궁, 삽주, 목향, 정향, 육계, 박하를 취하고 적당한 량의 휘발유 추출용매를 투입하여 휘발유를 추출하는바, 휘발유 추출용매인 물을 상기 약재량의 6배의 량으로 투여하여 2-12시간(바람직하게는 10시간) 추출하고; 휘발유를 추출한 후 40℃이하에서 6시간 시클로덱스트린 포접화를 실시하고; 달인 액체를 여과하고 다른 기기에 수집하여 여액으로 비축하고; 휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼 및 감초를 혼합하고 약재량의 10-15배(바람직하게는 12배)의 량의 물을 투입하고 회당 1-2시간(바람직하게는 1.5시간)씩 2-5회(바람직하게는 3회) 달이고; 달여서 얻은 약액을 여과하고, 여과한 후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻고; 얻은 한약 혼합 약액을 수욕으로 상대밀도가 1.06-1.08인 청고가 되도록 농축을 실시하고 알콜 함량이 60% 되도록 에탄올을 투입하고 12시간이상(바람직하게는 48시간) 방치하여 한약 혼합물 알콜 용액을 얻고; 상기 한약 혼합 알콜 용액을 감압 농축하여 건조시킨 후 휘발유 시클로덱스트린 포접화물을 투입하여 한약 조성물 제조한다.
실시예3
중량%로, 고삼 8%, 들국화 7%, 금은화 5%, 박하 6%, 복령 9%, 삽주 18%, 육계 1.5%, 정형 0.5%, 황기 6%, 영지 9%, 천궁 16%, 목향 9%, 감초 5%의 원료를 포함하는 종양 치료용 한약 조성물을 제조한다.
해당 한약 조성물의 제조방법은 하기와 같다.
상기 중량%로 한약 원료를 취하고; 60% 농도의 에탄올 용액을 배합하여 비축하고; 균일하게 혼합한 한약에 상기 배합한 에탄올 용액을 한약의 6배의 량으로 투입하고 가열 환류 추출을 회당 1-2시간(바람직하게는 1.5시간)씩 2회 실시하여(미약하게 비등할 때까지 가열하여 환류 추출을 실시), 2회의 추출액을 합치여 감압하여 에탄올을 회수한 후 농축하여 건조시켜 한약 조성물을 얻는다.
실시예4
중량%로, 고삼 6%, 들국화 9%, 금은화 8%, 박하 5%, 복령 9%, 삽주 19%, 육계 1%, 정향 1%, 황기 6%, 영지 15%, 천궁 11%, 목향 9%, 감초 10%의 원료를 포함하는 종양 치료용 한약 조성물을 제조한다.
해당 한약 조성물의 제조방법은 하기와 같다.
상기 중량%에 따라 한약 원료를 취하여 각각 30메쉬의 입도로 분쇄한 후 균일하게 혼합하고; 65% 농도의 에탄올 용액을 배합하여 비축하고; 배합한 65% 농도의 에탄올을 사용하여 균일하게 혼합한 후의 한약을 36시간 침윤시키고, 침윤시킨 후의 한약 혼합물을 여러 번에 나누어 퍼컬레이션통에 투입하여 가볍게 눌러 펴서 깔고; 배합한 65% 농도의 에탄올 용액을 퍼컬레이션통에 약재 표면을 1-2cm 초과하도록 투입하고 18시간 담근 후 남은 에탄올을 퍼컬레이션 하여 약 찌꺼기를 보류하여 비축하고; 얻은 알콜 용액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말A를 얻고; 상기 약 찌꺼기에 약 찌꺼기의 5배의 량의 물을 투입하여 1-2시간(바람직하게는 1.5시간) 달여서 추출하여 원심여과를 하여 약액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말B를 얻고, 상기 한약 복합 분말A와 한약 복합 분말B를 균일하게 혼합하여 한약 조성물 얻는다.
실시예5
중량%로, 고심 9%, 들국화 8%, 금은화 3%, 박하 9%, 복령 8%, 삽주 16.5%, 육계 1%, 정향 1%, 황기 9%, 영지 9%, 천궁 13.5%, 목향 10%, 감초 3%의 원료를 포함하는 종양 치료용 한약 조성물을 제조한다.
해당 한약 조성물의 제조방법은 하기와 같다.
상기 중량%로, 천궁, 삽주, 목향, 정향, 육계, 박하를 취하고 적당한 량의 휘발유 추출용매를 투입하여 휘발유를 추출하는바, 휘발유 추출용매인 물을 상기 약재량의 4배의 량으로 투여하여 2-12시간(바람직하게는 10시간) 추출하고; 휘발유를 추출한 후 40℃이하에서 5시간 시클로덱스트린 포접화를 실시하고; 달인 액체를 여과하고 다른 기기에 수집하여 여액으로 비축하고; 휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼 및 감초를 혼합하고 약재량의 10-15배(바람직하게는 12배)의 량의 물을 투입하고 회당 1-2시간(바람직하게는 1.5시간)씩 2-5회(바람직하게는 3회) 달이고; 달여서 얻은 약액을 여과하고, 여과한 후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻고; 얻은 한약 혼합 약액을 수욕으로 상대밀도가 1.06-1.08인 청고가 되도록 농축을 실시하고 알콜 함량이 60% 되도록 에탄올을 투입하고 12시간이상(바람직하게는 24시간) 방치하여 한약 혼합물 알콜 용액을 얻고; 상기 한약 혼합 알콜 용액을 감압 농축하여 건조시킨 후 휘발유 시클로덱스트린 포접화물을 투입하여 한약 조성물 제조한다.
약효시험：
종양 치료에서의 본 발명의 한약 조성물의 효과를 검증하기 위하여 실시예1과 실시예2의 방법을 통하여 얻은 한약 조성물(각각 한약 조성물1호와 한약 조성물 2호)을 하기 약효시험에 사용한다.
본 발명의 종양 치료용 한약 조성물의 성인 임상 권장 사용량은 생약 7.6g/60kg/d으로, 마우스에 대한 등가 사용량으로 환산하면 1.4g/kg/d이다. 시험에서 2.8, 1.4, 0.7g/kg/d 등 3개 그룹의 사용량(각각 인간 임상 사용량의 2배, 등가, 1/2배에 해당 )을 사용한다.
본 발명의 종양 치료용 한약 조성물의 인간 췌장암 세포주(A549)의 누드 마우스 모델에 대한 억제작용.
본 발명의 실시예1과 실시예2에서 얻은 샘플의 각 사용량 그룹의 종양 체적은 투여후 모델 대조 그룹과 비교한 결과 모두 어느 정도 저하하였고, 투여 8일 후 종양 체적을 모델 대조 그룹과 비교한 결과 뚜렷하게 저하하였다(P＜0.01, P＜0.05). 모델 대조조와 비교한 한약 조성물 1호의 고(高) 사용량 그룹과 한약 조성물 2호의 중(中) 사용량 그룹의 상대 종양 증가율은 28-70%로 나타났다. 2개 샘플의 각 사용량 그룹의 종양 덩어리 중량을 모델 대조 그룹과 비교한 결과 뚜렷이 저하하였다(P＜0.01). 본회 시험수치를 종합해보면 2호 샘플의 중 사용량의 그룹의 종양 체적은 투약 4-20일의 5개 측정시점에서 모델 대조 그룹 대비 모두 차이를 보이고, 상대 종양 증가율은 투약 8일 후 40이하로 저하되고, 해당 약 그룹의 종양 중량이 제일 낮다는 것을 보아낼수 있다.
1. 시험재료
1.1 피험약물 한약 조성물 1호, 한약 조성물 2호; 사용방법 및 사용량: 경구 투여, 임상 권장 사용랑은 매일 7.6g의 생약량
1.2 양성 대조약 복방엔독산정제(
Figure pct00002
)(생산단위: 통화무상제약유한회사). 적응증: 림프종, 다발성 골수종, 림프구 백혈병, 모세포종, 난소암, 유방암 및 각종 육종 및 페암 등. 제품번호: 160702, 생산일자: 2016. 07.25, 유효기간: 2018.06. 성분: 복방제제, 구성요소: 엔독산(50mg)과 인삼경엽제너럴진세노사이드(General Ginsenoside in extract of Ginseng stems and leaves)(50mg). 성상: 장용정, 코팅이 제거되면 황갈색 또는 회갈색을 나타낸다. 규격: 1정에 엔독산 50mg 및 인삼경엽제너럴진세노사이드 50mg 함유, 12정/판, 2판/곽. 사용법 및 사용량：경구투여, 성인 회당 1정, 하루 3-4회. 저장조건：차광, 밀봉, 30℃이하 보존.
1.3 시험동물
Figure pct00003
1.4 종양 세포주
Figure pct00004
2. 시험방법2.1 사용량 설계
2.1.1 종양 치료용 한약 조성물: 성인 임상 권장 사용량은 7.6g생약/60kg/d이고 시험에서 인간과 동물체 표면적에 따라 환산하면, 마우스에 대한 사용량은 인간에 대한 사용량의 11배인 바, 마우스에 대한 투여량은 (7.6/60)×11＝1.4g생약/kg/d이고, 측정용 약 용액을 2g생약/ml 농도로 배합하고, 마우스에 대한 투여량을 체적으로 환산하면 (1.4/2)＊1＝0.7ml/kg/d이고, 따라서 3가지 추출물의 대, 중, 소 사용량은 1.4ml/kg/d, 0.7ml/kg/d, 0.35ml/kg/d이다(각각 인간 임상 사용량의 2배, 등가 및 1/2배에 해당함)
2.1.2 복방엔독산정제(
Figure pct00005
): 성인 임상 권장 사용량은 175mg/60kg/d이고, 시험에서 인간과 동물체 표면적에 따라 환산하면, 마우스에 대한 사용량은 인간에 대한 사용량의 11배인 바, 마우스에 대한 투여량은 (175/60)×11＝32mg/kg/d이다.
2.2 인간 췌장암세포(A549) 배양 세포주를 완전 배지 (DMEM 배양액 +10%우태아혈청, pH7.2)에서 배양하고, 37℃, 5% CO2 항온 인큐베이터에 넣어 매일 배양액을 교체하고, 세포를 80%-90% 융합비율을 실현할 때까지 배양하여, 0.25% 트립신을 사용하여 소화시키고, 원심처리하여 계대하여 세포가 일정한 수량까지 배양될 때까지 기다렸다가 PBS를 사용하여 종양 세포 현탁액으로 희석하여 시험 동물 체내에 접종하였다.
2.3 세포 체외 활동 검측 및 종양 세포 현탁액의 제조는 무균 조건에서 생장이 양호한 A549 종양세포를 취하여 0.25% 트립신을 사용하여 소화시키고, 원심처리하여 세포를 현탁시키고, 트라이판 블루 스테이닝을 사용하여 세포 활성을 검측하여 기록하였다. PBS를 사용하여 2×107 세포/ml 농도의 종양 세포 현탁액으로 희석하였다.
2.4 A549 종양 세포를 접종하여 인간페암이식종양 모델을 제조하고, 체중이 18+2g인 누드마우스를 자웅 각각 반반씩 취하여 실험동물중심에서 7일간 적응성 사육을 하였다. 무균조건에서 75% 에탄올로 누드 마우스의 피부를 소독한 후 누드 마우스의 우측 겨드랑이 피하에 인간 췌장암A549세포 현탁액 0.2ml를 접종한 후 누드 마우스를 우리(cage)에 돌려보내고, 정기적으로 마우스의 정신, 식사 및 배변 등 정황을 관찰하였다. 접종 1주후 접종부위의 피하에 쌀알만큼한 경화종이 자라난 것을 볼 수 있었고, 이로써 이식종양 모델이 완성되었다.
2.5 그룹을 나누어 종양 세포를 투여접종하여 2주후 종양 덩어리, 체중이 고른 누드 마우스를 선출하여 그룹당 7마리씩 임의로 8개 그룹으로 나누고 각각 모델 대조그룹, 엔독산 양성 대조그룹, 한약 조성물 1호 고, 중, 저 3개 사용량 그룹, 한약 조성물 2호 고, 중, 저 3개 사용량 그룹으로 하였으며, 그룹을 나눈 당일부터 하루 1회, 회당 0.2ml/10g의 량으로 연속 3주동안 경구 투여를 실시하였다.
2.6 투여 당일 누드 마우스의 체중, 종양 체적을 측정하였고, 3일에 한 번씩 측정하여 3주후 사망한 누드 마우스의 체중을 측정하고 종양조직을 적출하여 중량을 측정하고 매개 그룹의 종양의 평균 중량, 종양 생장억제율, 종양체적, 상대 종양체적, 상대 종양 증식율을 계산하여 지표를 관찰하였다.
계산방법：
종양 체적(tumor volume, TV)의 계산공식：V＝1/2×a×b2 (a, b는 각각 길이, 폭, 높이를 가리킨다.)
상대 종양 체적(relative tumor volume, RTV)의 계산공식：RTV＝Vt/V0 (V0는 우리별로 투여할 시 (즉 d0) 측정한 종양 체적을 가리키고 Vt는 매번 측정할 시의 종양 체적을 가리킨다.)
상대 종양 증식율T/C(%)(항종양 활성 평가 지표)의 계산공식：T/C%＝TRTV/CRTV×100% (TRTV：치료그룹 RTV；CRTV：음성 대조그룹 RTV)
2.7 Excel표로 통계학 처리 실험 데이터를 구축하여 정리한 후 SPSS13.0 통계 소프트웨어 패키지를 사용하여 분석하였는바, 계량 자료는
Figure pct00006
로 표시하였고, 두 개 그룹사이의 비교는 t로 검증하였으며, 여러 그룹사이의 비교는 일원분산분석을 통하여 실시하였으며, P＜0.05일 경우 차이가 통계학적 의의가 있는 것으로 판단된다.
3 시험결과
3.1 A549 종양 세포수(접종시 세포농도)를 기록하고, 세포를 원심처리하고 PBS를 사용하여 현탁시키고 세포 현탁액 10ul를 취하여 1배 희석시킨 후 트라이판 블루 스테이닝 20ul를 투입하여 균일하게 두드린 후 세포 카운트판내에 넣고 자동화 셀 카운터에 꽂아 넣고 검측을 실시하였는 바, 총세포수：2.14×107/ml；살아 있는 세포수：1.5×107/ml；죽은 세포수：6.42×106/ml；세포 생존율：95.04%로 나타났다.
3.2 인간 췌장암 세포주(A549)에 감염된 누드 마우스 모델 종양 체적 생장에 대한 영향
표1 인간 췌장암 세포주(A549)의 누드 마우스 모델 종양 체적 생장에 대한 한약 조성물의 영향(　
Figure pct00007
n＝7)
Table 1.Effect of Ai Kang tablets on tumor volume in BALB/c nude mice infected with human lung adenocarcinoma cancer cell(A549)(　
Figure pct00008
n＝7)mm3
Figure pct00009
Figure pct00010
비고： 모델 대조 그룹과 비교할 경우, ＊P＜0.05,＊＊P＜0.01임.
결과로부터 2종류의 한약 조성물은 투여 2일후 종양 체적이 모델 대조 그룹 대비 모두 어느 정도 저하하였고, 2가지 샘플은 투여 8-20일 후 종양 체적이 모델 대조 그룹 대비 뚜렷이 저하하였고(P＜0.01, P＜0.05), 그중 2호 약품의 중 사용량 그룹의 종양 체적은 4-20일 투여중 5개 검측 시점에서 모델 대조 그룹 대비 모두 차이(P＜0.01)를 보였는 바, 수치상으로 차이가 가장 뚜렷하였다.
3.3 인간 췌장암 세포주(A549)에 감염된 누드 마우스의 상대 종양 증식 체적(RTV) 및 상대 종양 증식율에 대한 영향
표2 인간 췌장암 세포주(A549)에 감염된 누드 마우스의 상대 종양 증식 체적(RTV) 및 상대 종양 증식율(T/C%)에 대한 한약 조성물의 영향(　
Figure pct00011
n＝7)
Table 2 Effect of Ai Kang tablets on the relative tumor volume and the relativeproliferation rate in BALB/c nude mice infected with human lung adenocarcinoma cancer cell(A549)(　
Figure pct00012
n＝7)
Figure pct00013
Figure pct00014
Figure pct00015
비고： 모델 대조 그룹과 비교할 경우, ＊P＜0.05,＊＊P＜0.01임.
결과로부터 한약 조성물 2호 중 사용량 그룹의 상대 종양 증식 체적은 투여기간동안 모델 대조 그룹 대비 차이(P＜0.05)를 보였으며, 기타 약물 사용 그룹은 모델 그룹 대비 차이를 보이지 않았다. 모델 대조 그룹에 비교하여 한약 조성물 1호 고사용량 그룹, 한약 조성물 2호 중 사용량 그룹의 상대 종양 증식율은 28-70%이고, 기타 약물 사용 그룹의 상대 종양 증식율은 50-90%인 것으로 나타났다.
3.4 인간 췌장암 세포주(A549)에 감염된 누드 마우스의 상대 종양 중량에 대한 영향
표3 인간 췌장암 세포주(A549)에 감염된 누드 마우스의 상대 종양 중량에 대한 한약 조성물의 영향(　
Figure pct00016
n＝7)
Table 3 Effect of Ai Kang tablets on tumor weight in BALB/c nude mice infected with human lung adenocarcinoma cancer cell(A549)(　
Figure pct00017
n＝7)
Figure pct00018
비고： 모델 대조 그룹과 비교할 경우, ＊P＜0.05,＊＊P＜0.01임.
한약 조성물의 각 사용량 그룹의 종양 덩어리 중량은 모델 대조 그룹 대비 모두 차이(P＜0.01)를 보였는바, 본 발명의 한약 조성물 2호 중 사용량 그룹의 종양 덩어리 중량이 제일 가벼웠다.
4. 결론
본 출원의 한약 조성물은 인간 췌장암 세포주(A549)가 감염된 누드 마우스의 종양 성장에 일정하게 억제 작용이 있다. 두 가지 추출 공정으로 얻은 샘플은 모두 누드 마우스의 종양 체적, 상대 종양 증식 체적, 종양 증식율, 종양 중량을 뚜렷이 저하시킬 수 있다. 본 출원의 보호범위는 청구항에 기재된 내용을 기준으로 한다.

Claims (17)

  1. 중량%로, 고삼 3%-12%, 들국화 5%-15%, 금은화 2%-12%, 박하 5%-15%, 복령5%-15%, 삽주 10%-20%, 육계 0.5%-3%, 정향 0.5%-3%, 황기 3%-12%, 영지 5%-15%, 천궁 10%-20%, 목향 5%-12%, 감초 2%-10%의 원료로 이루어지고, 바람직하게는 고삼 5%-10%, 들국화 5%-10%, 금은화 3%-8%, 박하 5%-10%, 복령 5%-10%, 삽주 12%-20%, 육계 0.5%-3%, 정향 0.5%-3%, 황기 5%-10%, 영지 5%-10%, 천궁 11%-15%, 목향 8%-12%, 감초 3%-8%의 원료로 이루어지고, 더욱 바람직하게는 고삼 6%-10%, 들국화 6%-9%, 금은화 3%-6%, 박하 6%-9%, 복령 6%-9%, 삽주 15%-18%, 육계 1%-3%, 정향 0.5%-1.5%, 황기 6%-10%, 영지 6%-10%, 천궁 12%-15%, 목향 8%-11%, 감초 3%-6%의 원료로 이루어지고, 더더욱 바람직하게는 고삼 8%, 들국화 9%, 금은화 4%, 박하 6%,복령 6%, 삽주 17%, 육계 2%, 정향 1%, 황기 8%, 영지 10%, 천궁 13%, 목향 9%, 감초 7%의 원료로 이루어지는 종양 치료용 한약 조성물 또는
    고삼 7%, 들국화 7%, 금은화 6%, 박하 8%, 복령 8%, 삽주 15%, 육계 2%, 정향 1.5%, 황기 7%, 영지 8%, 천궁 15%, 목향 10%, 감초 5.5%의 원료로 이루어지거나, 또는 고삼 8%, 들국화 7%, 금은화 5%, 박하 6%, 복령 9%, 삽주 18%, 육계 1.5%, 정향 0.5%, 황기 6%, 영지 9%, 천궁 16%, 목향 9%, 감초 5%의 원료로 이루어지거나, 또는 고삼 6%, 들국화 9%, 금은화 8%, 박하 5%, 복령 9%, 삽주 19%, 육계 1%, 정향 1%, 황기 6%, 영지 15%, 천궁 11%, 목향 9%, 감초 10%의 원료로 이루어지거나, 또는 고삼 9%, 들국화 8%, 금은화 3%, 박하 9%, 복령 8%, 삽주 16.5%, 육계 1%, 정향 1%, 황기 9%, 영지 9%, 천궁 13.5%, 목향 10%, 감초 3%의 원료로 이루어지는 종양 치료용 한약 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서,
    제형이 주사제, 밀환제, 수환제, 캡슐, 정제, 점적 환제, 산제, 구복액, 겔제, 전고제, 침고제 또는 막제인 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물.
  3. 청구항 1 또는 청구항 2의 중량%에 따라 각 한약 원료를 취하여 각각 분쇄하여 체로 친 후 균일하게 혼합하는 단계(1),
    단계(1)에서 제조된 한약 분말을 에탄올 수용액으로 침윤시킨 후 퍼컬레이션통에 투입하는 단계(2),
    단계(2)의 퍼컬레이션통에 에탄올 수용액을 투입하여 담근 후 퍼컬레이션을 실시하고, 퍼컬레이션 후의 약 찌꺼기는 비축하고, 얻은 알콜 퍼컬레이션 용액을 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말A를 얻는 단계(3),
    단계(3)에서 얻은 약 찌꺼기에 물을 투입하여 달인 후 여과하여 얻은 약액을 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말B를 얻는 단계(4), 및
    단계(3)에서 얻은 한약 복합 분말A와 단계(4)에서 얻은 한약 복합 분말B를 균일하게 혼합하여 상기 한약 조성물을 얻는 단계(5)를 포함하는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  4. 청구항 3에 있어서
    상기 단계(1)에서 각 약재를 10-100메쉬의 입도로, 바람직하게는 20-40메쉬의 입도로 분쇄하며; 상기 단계(2)와(3)에서 사용된 에탄올 수용액의 농도는 40%-95%이고 바람직하게 60%-80%이며; 상기 단계(2)에서 균일하게 혼합한 후의 한약 분말을 10-48시간, 바람직하게는 18-30시간 침윤시키며; 상기 단계(3)에서 담금시간은 2-48시간이며; 상기 단계(4)에서 물의 사용량은 약 찌꺼기 중량의 2-10배이며, 회당 0.5-2시간씩 1-3회 달이는 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  5. 청구항 1 또는 청구항 2의 중량%로 각 한약 원료를 취하여 각각 10메쉬-100메쉬의 입도로 분쇄하는 단계(1),
    40%-95%의 농도로 에탄올 용액을 배합하여 비축하고, 배합한 40%-95% 농도의 에탄올 용액을 사용하여 균일하게 혼합한 후의 한약을 10-48시간 침윤시키고, 침윤시킨 후의 한약 혼합물을 여러 번에 나누어 퍼컬레이션통에 투입하여 가볍게 눌러 펴서 까는 단계(2),
    상기 배합한 40%-95% 농도의 에탄올 용액을 단계(2)의 퍼컬레이션통에 약재 표면을 1-2cm 초과하도록 투입하여 설정된 시간동안 담근 후 남은 에탄올을 퍼컬레이션 하여 약 찌꺼기를 보류하여 비축하며, 얻은 알콜 용액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합분말A를 얻는 단계(3),
    상기 약 찌꺼기에 약 찌꺼기의 2-10배의 량의 물을 투입하여 0.5-2시간 달여서 추출하여 원심여과를 하여 약액을 감압 농축하고 건조시켜 한약 복합 분말B을 얻고, 상기 한약 복합 분말A와 한약 복합 분말B를 균일하게 혼합하여 한약 조성물을 얻는 단계(4)를 포함하는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  6. 청구항 5에 있어서,
    상기 단계(1)에서 각 약재를 20-40메쉬의 입도로 분쇄하며; 상기 단계(2)와(3)에서 배합한 에탄올의 농도는 60%-80%이며; 상기 단계(2)에서 균일하게 혼합한 후의 한약을 18-30시간 침윤시키며; 상기 단계(3)에서 담금시간은 2-48시간인 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  7. 청구항 1 또는 청구항 2의 중량%로 천궁, 삽주, 목향, 정향, 육계, 박하를 취하여 적당한 량의 물을 투입하여 휘발유를 추출한 후, 시클로덱스트린을 투입하여 포접화하고, 휘발유를 추출한 후의 물로 달인 액체를 여과하여 수집하여 비축하고, 얻은 약 찌꺼기를 비축하는 단계(1),
    단계(1)에서 휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼 및 감초를 혼합하여 물을 투입하여 달여 약액을 여과시키고, 여과후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계(2),
    단계(2)에서 얻은 한약 혼합 약액을 청고로 농축하고, 에탄올을 투입하여 침전시켜 여과하여 얻은 혼합 알콜 용액을 비축하는 단계(3),
    단계(3)에서 얻은 혼합 알콜 용액을 농축하여 건조시킨 후 단계(1)의 휘발유의 시클로덱스트린 포접화물에 투입하여 균일하게 혼합하여 한약 조성물을 얻는 단계(4)를 포함하는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  8. 청구항 7에 있어서,
    상기 단계(1)에서 휘발유 추출에 사용된 물의 량은 상기 약재량의 4-15배이고, 추출시간은 2-12시간이며, 얻은 휘발유를 40℃이하에서 시클로덱스트린 포접화하고, 포접화 시간은 1-10시간이며; 상기 단계(2)는 상기 단계(1)에서 휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%로 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼, 감초를 혼합하고 약재량의 10-15배의 물을 투입하여 회당 1-2시간씩 2-5회 달인 후 여과하며, 여과하여 얻은 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계를 포함하며; 상기 단계(3)은 단계(2)에서 얻은 한약 혼합물을 수욕으로 상대 밀도가 1.06-1.08인 청고로 되도록 농축하고, 알콜 함량이 60%가 되도록 에탄올을 투입하고 12-72시간 방치하고 여과하여 혼합 알콜 용액을 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  9. 청구항 1 또는 청구항 2의 중량%에 따라 천궁, 삽주, 목향, 정향, 육계, 박하를 취하여 적당한 량의 물을 투입하여 휘발유를 추출한 후, 시클로덱스트린을 투입하여 포접화하고, 달인 액체를 여과하여 다른 기기에 수집하여 비축용 여액으로 하는 단계(1),
    휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%에 따라 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고삼, 감초에 물을 투입하여 달이고, 약액을 여과하며, 여과후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계(2),
    얻은 한약 혼합 약액을 수욕으로 청고로 농축하고, 알콜 함량이 50%-80%가 되도록 에탄올을 투입하여 알콜 침전시켜 한약 알콜 용액을 얻는 단계(3),
    상기 한약 혼합 알콜 용액을 감압 농축하고 건조시킨 후 휘발유의 시클로덱스트린 포접화물을 투입하여 한약 조성물을 얻는 단계(4)를 포함하는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  10. 청구항 9에 있어서
    상기 단계(1)에서 휘발유 추출용매는 상기 약재량의 4-15배의 물을 사용하고, 추출시간은 2-12시간이며, 얻은 휘발유를 40℃이하에서 시클로덱스트린 포접화하고, 포접화 시간은 1-10시간인 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  11. 청구항 9에 있어서
    상기 단계(2)는 휘발유를 추출한 후 얻은 약 찌꺼기와 상기 중량%로 취한 복령, 황기, 들국화, 영지, 금은화, 고심, 감초를 혼합하고, 약재량의 10-15배 량의 물을 투입하여 회당 1-2시간씩 2-5회 달이고, 달여서 얻은 약액을 여과하여, 여과후의 약액과 휘발유를 추출한 후 얻은 여액을 합치여 한약 혼합 약액을 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  12. 청구항 9에 있어서
    상기 단계(3)은 얻은 한약 혼합 약액을 수욕으로 1.06-1.08 밀도의 청고가 되도록 농축하고, 알콜 함량이 60%가 되도록 에탄올을 투입하고 12시간이상 방치하여 한약 혼합 알콜 용액을 얻는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  13. 청구항 1 또는 청구항 2의 중량%로 각 한약 원료를 취하여 균일하게 혼합하는 단계(1),
    단계(1)에서 균일하게 혼합한 한약에 에탄올 수용액을 투입하고, 바람직하게는 40%-80%의 에탄올 용액을 투입하며, 회당 1-2시간씩 1-4회 가열 환류 추출하고 추출액을 합치여 감압하여 에탄올을 회수한 후 농축하고 건조시켜 한약 조성물을 얻는 단계(2)를 포함하는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  14. 청구항 1 또는 청구항 2의 중량%로 각 한약성분을 취하는 단계(1),
    40%-80%의 농도로 에탄올 용액을 배합하여 비축하고, 균일하게 혼합한 한약에 배합한 에탄올 용액을 투입하여 회당 1-2시간씩 1-4회 가열 환류 추출을 하고, 추출액을 합치여 감압하여 에탄올을 회수한 후 농축하고 건조시켜 한약 조성물을 얻는 단계(2)를 포함하는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 제조방법.
  15. 종양 치료용 약물 제조에서의 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물의 응용.
  16. 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물을 수요로 하는 피험자에 투여하는 종양 치료방법.
  17. 종양 치료에 사용되는 청구항 1 또는 청구항 2의 종양 치료용 한약 조성물.
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