KR20190074480A - Pharmaceutical composition for radioprotection or mitigation, and prevention or treatment of pulmonary fibrosis - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 방사선 보호용 또는 완화용 약제학적 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 방사선 피폭에 의해 유발될 수 있는 임의의 손상, 예를 들면 혈관 손상, 피부 손상, 위장관 손상, 조직 염증, 또는 조직 섬유화를 예방 또는 치료하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 폐섬유화를 예방 또는 치료할 수 있는 약제학적 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition for protecting or alleviating radiation, and particularly relates to a pharmaceutical composition for preventing or reducing radiation damage, ≪ / RTI > The present invention also relates to pharmaceutical compositions capable of preventing or treating pulmonary fibrosis.
방사선을 다루는 산업현장에서의 방사선 노출사고 및 방사선 치료시 생기는 정상조직에 대한 부작용 등 방사선 피폭에 의한 생체 손상의 사례는 다양하다.There are various cases of injury by radiation exposure, such as radiation exposure at industrial sites dealing with radiation and side effects at normal tissue during radiation treatment.
방사선은 주로 세포독성으로 인해서 세포 및 조직에 역효과를 미친다. 인간이 이온화 방사선에 노출되는 것은 주로 항암 방사선 치료, 또는 직업상 혹은 환경 노출을 통하여 발생한다Radiation is mainly cytotoxic and adversely affects cells and tissues. Human exposure to ionizing radiation occurs primarily through chemotherapy radiation therapy, or occupational or environmental exposure
방사선 노출은 직업상의 환경에서 발생할 수 있다. 예를 들어, 원자력 혹은 핵무기 산업에서 방사선에 노출(혹은 잠재적 노출)될 수 있다. 현재 미국에는 상업적으로 허가를 받은 104개의 원자력 발전소가 있다. 세계적으로, 총 430개의 원자력 발전소가 32 개국에서 작동되고 있다. 이러한 원자력 발전소에 고용된 모든 직원들은 그 할당된 의무를 수행함에 있어 방사선에 노출될 수 있다. 원자로 빌딩 및 주위 환경내로 방사능 물질이 방출된 1979년 3월 28일에 일어난 Three Mile Island 원자력 발전소 사고는 매우 위험하게 노출된 경우의 잠재성을 보여주고 있다. 이러한 대형 사고 없이도, 원자력 산업에 종사하는 근무자는 민간인들 보다 더 높은 수준의 방사선에 노출된다.Radiation exposure can occur in a professional setting. For example, it could be exposed to radiation (or potential exposure) in the nuclear or nuclear industry. Currently there are 104 commercially licensed nuclear power plants in the United States. Around the world, a total of 430 nuclear power plants are operating in 32 countries. All employees employed in these nuclear power plants may be exposed to radiation in performing their assigned duties. The accident at the Three Mile Island nuclear power plant on March 28, 1979, when radioactive material was released into the reactor building and surrounding environment, shows the potential for very dangerous exposure. Without these major accidents, workers in the nuclear industry are exposed to higher levels of radiation than civilians.
직업상 노출의 다른 원인은 기계 부품, 플라스틱 및 방사성 의료 생성물의 제조시 남는 용매, 스모크 경보, 응급 사인 및 다른 소비물자로부터 발생할 수 있다. Other causes of occupational exposure may arise from residual solvents, smoke alarms, emergency signs and other consumables in the manufacture of machine parts, plastics and radioactive medical products.
또한, 방사선 피폭에 의한 생체 손상은 방사선 치료시 만성 부작용으로서 발생되는 경우가 많으며, 이는 방사선 치료의 완치율을 저하시키게 된다. 최근, 방사선 치료 기술의 발달에 따라 방사선 치료를 받은 암환자의 생존률이 높아지고 있으나, 방사선에 의한 부작용으로서 발생되는 생체 손상, 특히 폐섬유화는 암 환자의 삶의 질을 저하시키는 큰 문제로서 제기되고 있다. 최근 방사선치료 장비 및 소프트웨어의 발달, 그리고 방사선 생물학적 개념의 진화에 힘입어 1 ~ 수회(5회 내외)의 방사선 치료로 정상조직을 보호하면서 암 병소만 효과적으로 제어할 수 있는 방사선치료 기법이 개발되고 있으나, 암 진행 단계 및 암 생성부위 등에 따라 아직 제한적으로 이용되고 있다. In addition, in vivo injury caused by radiation exposure is often a chronic side effect in the case of radiation therapy, which may reduce the cure rate of radiation therapy. Recently, the survival rate of cancer patients who have been treated with radiotherapy has been increasing with the development of radiation therapy technology, but living injuries, especially, pulmonary fibrosis, which is caused by radiation as a side effect, have been raised as a serious problem of lowering the quality of life of cancer patients . Recent advances in radiotherapy equipment and software, and the evolution of radiological biology, have led to the development of radiotherapy techniques that can effectively control cancerous lesions while protecting normal tissues with radiation therapy from one to several (about five) , Cancer progression stage, cancer site, and the like.
이러한 방사선 치료기술의 발달에도 불구하고, 방사선 치료시 불가피하게 발생하는 폐섬유화와 같은 부작용은 흉부방사선 치료환자에게 흔히 나타나는 부작용이다. 폐암, 유방암, 또는 호치킨림프종의 치료를 위해, 흉부에 방사선 치료를 받은 환자들의 10-15%에서 2-3 개월 후 방사선 폐렴이 발생하고 6 개월 후에는 만성 부작용인 섬유화 질환으로 발전하게 된다. 이와 같이 진행된 폐섬유화는 2년 정도의 기간이 경과되어도 여전히 유지되어 폐 기능 저하 및 환자의 고통과 생활의 불편함을 수반하게 된다(Xie H et.al., Exp Biol Med (Maywood):238(9):1062-8. 2013.). Despite the advances in radiotherapy techniques, side effects such as pulmonary fibrosis, which are unavoidable in radiotherapy, are a common side effect of chest radiotherapy. For the treatment of lung cancer, breast cancer or Hogichin lymphoma, radiation pneumonitis develops in 10-15% of patients who received radiation therapy to the chest, and develops to fibrosis, a chronic side effect after 6 months. This progressive pulmonary fibrosis is still persistent for a period of about 2 years, leading to lung function impairment, patient pain and discomfort (Xie et al., Exp Biol Med (Maywood): 238 9): 1062-8, 2013.).
현재 폐섬유화증의 치료는 면역억제제가 주로 사용된다. 스테로이드나 세포독성약물 등을 사용할 수 있는데 스테로이드가 우선 사용되며, 방사선 피폭에 의한 폐섬유화의 치료제로는 현재 스테로이드와 아자티오프린 또는 사이클로포스파미드의 병합요법을 사용하고 있다(Ochoa et al., Journal of Medical Case Reports, 6:413.2012). 하지만, 이와 같은 치료법이 환자의 생존율이나 삶의 질을 향상시킨다는 명확한 근거는 없으며 지금까지 여러가지 섬유화 억제제가 동물 실험 및 소규모의 환자들에게 시도됐지만 뚜렷한 효과가 입증된 것은 없다.Currently, immunosuppressants are mainly used for the treatment of pulmonary fibrosis. Steroids and cytotoxic drugs can be used. Steroids are used first, and therapies for the treatment of pulmonary fibrosis by radiation exposure currently use a combination of steroids and azathioprine or cyclophosphamide (Ochoa et al. Journal of Medical Case Reports, 6: 413.2012). However, there is no clear evidence that such treatments improve patient survival or quality of life. So far, many fibrosis inhibitors have been tried in animal studies and small-scale patients, but none have been proven effective.
따라서, 방사선에 의한 폐섬유화를 포함한 방사선에 의한 조직의 손상을 예방하거나 완화할 수 있는 방사선 보호제 또는 방사선 완화제용 의약품의 개발이 시급하다.Therefore, it is urgent to develop medicines for radioprotectants or radiation emollients that can prevent or alleviate tissue damage caused by radiation, including pulmonary fibrosis caused by radiation.
본 발명자들은 이러한 방사선 보호제 또는 방사선 완화제용 의약품을 개발하는 가운데, GSK3 억제제로 알려져 있는 화합물(6-[[2-[[4-(2,4-디클로로페닐)-5-(5-메틸-1H-이미다졸-2-일)-2-피리미디닐]아미노]에틸]아미노]-3-피리딘카르보니트릴)이 우수한 방사선 보호 또는 완화 효과를 갖는 것을 발견하였다. 즉, 상기 화합물은 GSK3 억제제로 뇌종양, 폐종양을 치료하는 등 과다증식성 질환의 치료용도로 알려져 있었으나, 방사선 보호제 및 완화제의 용도로 전혀 공지된 바가 없었다.The inventors of the present invention have found that a compound known as a GSK3 inhibitor (6 - [[2- [[4- (2,4-dichlorophenyl) -5- -Imidazol-2-yl) -2-pyrimidinyl] amino] ethyl] amino] -3-pyridinecarbonitrile) has an excellent radiation protection or relaxation effect. That is, the compound is known to be used for treatment of hypertrophic diseases such as brain tumors and lung tumors as a GSK3 inhibitor, but there has been no known use of radioprotectants and emollients.
대한민국 등록특허 제10-1667362호Korea registered patent 10-1667362
미국특허 공개번호 제2009-0041863호US Patent Publication No. No. 2009-0041863
미국특허 공개번호 제2014-0288178호US Patent Publication No. No. 2014-0288178
(비특허문헌 0001) Benjamin M et al., Chest.111(4):1061-1076. 1997(Non-Patent Document 0001) Benjamin M et al., Chest. 111 (4): 1061-1076. 1997
(비특허문헌 0002) Ochoa et al., Journal of Medical Case Reports, 6:413.2012(Non-Patent Document 0002) Ochoa et al., Journal of Medical Case Reports, 6: 413.2012
본 발명은 방사선 보호용 또는 완화용 약물을 제공하고자 한다. 구체적으로 방사선 피폭 전 또는 후에 인체에 적용하여 방사선으로 인한 생체의 손상을 예방하거나 치료할 수 있는 약물을 제공하고자 한다. 특히, 암 환자의 방사선 치료시 발생할 수 있는 혈관 손상, 피부 손상, 위장관 손상, 조직 염증, 조직 섬유화 등의 부작용을 예방 또는 치료하는 우수한 약제학적 조성물을 제공하고자 한다.The present invention is intended to provide a medicament for protecting or alleviating radiation. Specifically, it is intended to provide a drug which can be applied to human body before or after exposure to radiation to prevent or treat damage to the living body caused by radiation. In particular, it is an object of the present invention to provide an excellent pharmaceutical composition for preventing or treating side effects such as vascular damage, skin damage, gastrointestinal injury, tissue inflammation, and tissue fibrosis which may occur in radiation therapy of cancer patients.
또한, 본 발명은 방사선 피폭 또는 항암치료를 위한 약물요법 등으로 발생하는 심각한 부작용인 폐섬유화 질환을 예방 또는 치료하는 약물을 제공하고자 한다.The present invention also provides a drug for preventing or treating pulmonary fibrosis, which is a serious side effect caused by radiation therapy or drug therapy for chemotherapy.
본 발명은 하기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염 또는 용매화물을 포함하는 방사선 유발 손상에 대한 방사선 보호 또는 완화용 약학 조성물을 제공한다:The present invention provides a pharmaceutical composition for radiation protection or alleviation of a radiation-induced injury comprising a compound of the formula (1), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof:
[화학식 1][Chemical Formula 1]
상기 화학식 I의 화합물의 화학명은 6-[[2-[[4-(2,4-디클로로페닐)-5-(5-메틸-1H-이미다졸-2-일)-2-피리미디닐]아미노]에틸]아미노]-3-피리딘카르보니트릴이며, “CHIR-99021”로도 기재된다.The chemical name of the compound of formula (I) is 6 - [[2- [[4- (2,4-dichlorophenyl) -5- (5-methyl-1H-imidazol- Amino] ethyl] amino] -3-pyridinecarbonitrile, also described as " CHIR-99021 ".
본 발명자들은 상기 화학식 1의 화합물을 방사선 피폭 전 또는 후에 투여할 경우, 방사선 피폭에 의해 유발되는 여러가지 생체 손상을 현저히 감소시키는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention have completed the present invention by confirming that when the compound of Chemical Formula 1 is administered before or after exposure to radiation, various types of injuries caused by radiation exposure are significantly reduced.
즉, 본 발명의 상기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염 또는 용매화물은, 방사선 피폭에 의해 유발되는 생체 손상, 예를 들면 방사선 피폭에 의한 혈관 손상, 피부 손상, 위장관 손상, 조직 염증, 또는 조직 섬유화를 감소시킴으로써, 상기 증상을 예방 또는 치료하는 효과를 갖는다.That is, the compound of formula (I) of the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, may be used for the prevention and treatment of a living injury caused by radiation exposure, for example, blood vessel damage by radiation exposure, skin damage, Inflammation, or tissue fibrosis, thereby preventing or treating the above symptoms.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염 또는 용매화물을 포함하는 폐섬유화 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating pulmonary fibrosis comprising the compound of Formula 1, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof.
상기 폐섬유화는 다양한 원인에 의해 발생되는 폐섬유화일 수 있으며, 특히 방사선 피폭 또는 항암치료를 위한 약물요법에 의해 유발된 것일 수 있다. The pulmonary fibrosis may be pulmonary fibrosis caused by various causes, and may be caused by medication therapy for radiation exposure or chemotherapy.
본 발명자는 상기 화학식 1의 화합물을 방사선 피폭 전 또는 후에 투여할 경우, 방사선 피폭에 의해 유발되는 폐조직의 염증 및 섬유화를 감소시킴으로써, 폐조직의 염증 및 폐섬유화 증상을 예방 또는 치료할 수 있는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.The inventors of the present invention found that when the compound of Chemical Formula 1 is administered before or after exposure to radiation, inflammation and fibrosis of the lung tissue induced by radiation exposure are reduced, thereby preventing or treating inflammation and pulmonary fibrosis symptoms of lung tissue Thereby completing the present invention.
또한, 본 발명자는 상기 화학식 1의 화합물이 방사선에 의한 DNA 손상을 저해할 수 효과를 갖는 것을 확인하였다.Further, the present inventors have confirmed that the compound of Chemical Formula 1 has an effect of inhibiting DNA damage by radiation.
따라서, 본 발명은 화학식 1의 화합물이 방사선에 의한 DNA 손상을 억제함으로써, 방사선 보호 또는 완화 효과를 가지는 약학 조성물을 제공한다. Accordingly, the present invention provides a pharmaceutical composition having a radiation protection or mitigating effect by inhibiting DNA damage by radiation of the compound of Chemical Formula (1).
또한, 본 발명은 화학식 1의 화합물이 방사선에 의한 DNA 손상을 억제함으로써, 폐섬유화를 치료 또는 예방하는 약학 조성물을 제공한다. Further, the present invention provides a pharmaceutical composition for treating or preventing pulmonary fibrosis by inhibiting DNA damage by radiation of the compound of formula (1).
본 발명은 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용가능한 그의 염 또는 용매화물의 신규한 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 상기 화합물은 방사선 피폭시 나타나는 혈관손상, 피부손상, 위장관 손상, 조직 염증, 및 조직 섬유화 등을 포함한 부작용인, 방사선 유발 손상을 예방 또는 완화시키는 우수한 효과를 갖는다.The present invention relates to a novel use of a compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof. Specifically, the compound has an excellent effect of preventing or alleviating the radiation-induced damage, which is a side effect including vascular damage, skin damage, gastrointestinal injury, tissue inflammation, and tissue fibrosis appearing in radiation exposure.
또한, 본 발명의 화학식 1의 화합물, 약제학적으로 허용가능한 그의 염 또는 용매화물은 폐섬유화, 특히 방사선 피폭 또는 항암치료를 위한 약물요법에 의한 폐섬유화를 예방 또는 치료하는 우수한 효과를 갖는다. 따라서, 본 발명의 약학 조성물은 방사선 피폭 또는 항암치료를 위한 약물요법에 의해 유발된 폐섬유화의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다. In addition, the compound of formula (I) of the present invention, its pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof has an excellent effect of preventing or treating pulmonary fibrosis by pharmacological therapy for pulmonary fibrosis, particularly radiation exposure or chemotherapy. Accordingly, the pharmaceutical composition of the present invention is expected to be effectively used for the prevention or treatment of pulmonary fibrosis induced by radiation therapy or pharmacotherapy for chemotherapy.
뿐만 아니라, 본 발명의 화학식 1의 화합물, 약제학적으로 허용가능한 그의 염 또는 용매화물은 DNA 손상을 억제함으로써, 방사선 치료시 나타날 수 있는 생체 손상을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있는 효과를 갖는다.In addition, the compound of Chemical Formula (1) of the present invention, its pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof has the effect of effectively preventing or treating a biological injury which may occur in radiation treatment by inhibiting DNA damage.
<도면의 기호에 대한 설명>
No. IR :
대조군 (방사선 미조사군)
IR :
방사선 조사군
IR + CHIR-99021 :
방사선 조사 및 CHIR-99021 처리군
도 1a는 마우스 동물모델에서 CHIR-99021를 방사선 조사 1시간 전 30 mg/kg의 농도로 처리 또는 미처리 후 폐 부위에 90 Gy의 세기로 방사선을 조사한 다음, 조직 손상 부위의 염증 반응 및 섬유화를 헤마톡실린 및 에오신 염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진이다.
도 1b는 도 1a에서의 염증반응의 정도를 등급화하여 통계적으로 나타낸 그래프이다.
도 2는 마우스 동물모델에서 흉부에 대한 방사선 조사와 함께 CHIR-99021를 처리했을 때, 미처리군(IR)과 비교한 혈관벽 두께의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3a는 마우스 동물모델에 CHIR-99021를 처리 또는 미처리 후 폐부위에 방사선을 조사한 다음, 폐의 혈관내피 부위의 콜라겐을 트라이크롬 염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진이다.
도 3b는 도 3a에서 폐섬유화 관련 분자인 콜라겐의 발현정도를 트라이크롬 염색법을 실시하여 통계적으로 나타낸 그래프이다.
도 4는 마우스 동물모델에서 CHIR-99021를 방사선 조사 1시간 전 30 mg/kg의 농도로 처리 또는 미처리 후 폐 부위에 90 Gy의 세기로 방사선을 조사한 다음, DNA 손상을 γH2AX 면역염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진이다.
도 5는 마우스 동물모델에서 블레오마이신 주입 전 CHIR-99021을 30mg/Kg의 농도로 처리 또는 미처리 후 폐 조직을 헤마톡실린 및 에오신 염색과 트라이크롬 염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진이다. ≪ Description of Symbols in Drawings >
No. IR: Control group (Radiotherapy group)
IR: Radiation group
IR + CHIR-99021: Radiation and CHIR-99021 treated group
FIG. 1A shows the results of irradiation of the lung area with 90 Gy of radiation after treatment or treatment of CHIR-99021 at a concentration of 30 mg /
FIG. 1B is a graph statistically showing the degree of the inflammatory reaction in FIG. 1A. FIG.
FIG. 2 is a graph showing the change in blood vessel wall thickness compared to the untreated group (IR) when CHIR-99021 was treated with radiation to the chest in a mouse animal model.
FIG. 3A is a photograph of a result of radiological examination of collagen in the vascular endothelial region of the lung after irradiating the lung part with CHIR-99021 or an untreated mouse animal model with trichrome staining.
FIG. 3B is a graph showing the degree of expression of collagen, which is a molecule related to pulmonary fibrosis, statistically by performing a trichrome staining method in FIG.
FIG. 4 shows the result of irradiating the lung with 90 Gy of radiation after treatment or untreated with CHIR-99021 at a concentration of 30 mg /
FIG. 5 is a photograph showing the result of treatment of CHIR-99021 at a concentration of 30 mg / Kg before injection of bromomycin in a mouse animal model and the result of confirming pulmonary tissues by hematoxylin and eosin stain and trichrome staining method.
본 발명에서 사용되는 모든 용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료 등이 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. Unless defined otherwise, all terms used in the present invention are used in the sense that they are generally understood by those of ordinary skill in the relevant field of the present invention. Also, preferred methods and samples are described in this specification, but similar or equivalent ones are included in the scope of the present invention.
본 발명은 하기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염 또는 용매화물을 포함하는 방사선 유발 손상에 대한 방사선 보호 또는 완화용 약학 조성물을 제공한다:The present invention provides a pharmaceutical composition for radiation protection or alleviation of a radiation-induced injury comprising a compound of the formula (1), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof:
[화학식 1][Chemical Formula 1]
본 명세서에서 “방사선 보호(radioprotection)”란 방사선 피폭 전에 생체에 적용하여 방사선 피폭에 의해 유발되는 임의의 방사선 유발 손상을 억제 또는 경감하는 것을 의미한다.As used herein, the term " radioprotection " refers to the suppression or alleviation of any radiation-induced damage caused by radiation exposure applied to a living body prior to radiation exposure.
본 명세서에서 “방사선 완화(radiomitigation)”란 방사선 피폭의 분명한 징후가 나타나기 전에 방사선 피폭 후 단기간 내에 생체에 적용하여 방사선 피폭에 의해 유발되는 임의의 방사선 유발 손상을 억제 또는 경감하는 것을 의미한다. The term " radiomitigation " as used herein refers to suppressing or alleviating any radiation-induced damage caused by radiation exposure applied to a living body within a short period of time after the radiation exposure, before a clear indication of the radiation exposure appears.
상기 “단기간 내”란 방사선 피폭에 의한 분명한 손상 징후가 나타나기 전에 적용하여 임의의 방사선 유발 손상을 억제 또는 경감할 수 있는 정도의 기간을 의미한다. 일 구체예에서, 상기 단기간 내는 방사선 조사 후 36시간 이내, 또는 24시간 이내, 또는 12시간 이내이며, 이에 한정되는 것은 아니다.The term " within a short period of time " means a period of time sufficient to suppress or reduce any radiation-induced damage by applying it before a clear indication of damage by radiation exposure occurs. In one embodiment, the short term is within 36 hours, or within 24 hours, or within 12 hours after irradiation, but is not limited thereto.
상기 “방사선 유발 손상”은 방사선 피폭에 의해 유발되는 임의의 생체 손상을 의미하며, 예를 들면 방사선 피폭에 의한 혈관 손상, 피부 손상, 위장관 손상, 조직 염증, 또는 조직 섬유화를 포함하며, 이에 한정되는 것은 아니다.The term " radiation-induced damage " means any vital injury caused by radiation exposure, including, for example, vascular injury by radiation exposure, skin damage, gastrointestinal injury, tissue inflammation, It is not.
상기 용어 "약제학적으로 허용가능한 염”이란 염산염, 브롬화 수소산염, 요오드화 수소산염, 불화 수소염, 황산염, 설폰산염, 시트르산염, 캄포린산염, 말레산염, 아세트산염, 락트산염, 니키틴산염, 질산염, 숙신산염, 인산염, 말론산염, 말린산염, 살리실산염, 페닐아세트산염, 스테아르산염, 포른산염, 푸마르산염, 우레아, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 아연, 리튬, 신남산염, 메틸아미노, 메탄설폰산염, 피크린산염, p-톨루엔설폰산염, 나프탈렌설폰산염, 타르타르산염, 트리에틸아미노, 디메틸아미노 및 트리(하이드록시메틸)아미노메탄과 같은 제약분야에서 통상 사용되는 염을 말한다. 본 발명의 약제학적으로 허용가능한 염은 염산염일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.The term "pharmaceutically acceptable salt " as used herein refers to a salt such as hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, hydrogen fluoride, sulfate, sulfonate, citrate, camphorate, maleate, acetate, lactate, The present invention also relates to a method for producing a compound of formula (I) wherein R is selected from the group consisting of nitrate, succinate, phosphate, malonate, malate, salicylate, phenylacetate, stearate, formate, fumarate, urea, Refers to salts commonly used in pharmaceutical fields such as sulfonates, picrates, p-toluenesulfonates, naphthalenesulfonates, tartarates, triethylamino, dimethylamino and tri (hydroxymethyl) aminomethane. The pharmaceutically acceptable salt may be, but is not limited to, the hydrochloride salt.
상기 용어 "용매화물" 또는 "약학적으로 허용가능한 용매화물"은 하나 이상의 용매 분자와 화학식 I의 화합물의 결합으로부터 형성된 용매화물이다. 용매화물이란 용어는 수화물(예를 들어, 헤미수화물, 일수화물, 이수화물, 삼수화물, 사수화물 등)을 포함한다.The term "solvate" or "pharmaceutically acceptable solvate" is a solvate formed from a combination of one or more solvent molecules and a compound of formula (I). The term solvate includes hydrates (e. G., Hemihydrate, monohydrate, dihydrate, trihydrate, dihydrate, etc.).
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염 또는 용매화물을 포함하는 폐섬유화 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating pulmonary fibrosis comprising the compound of
상기 폐섬유화는 다양한 원인에 의해 발생되는 폐섬유화일 수 있으며, 특히 방사선 피폭, 항암치료를 위한 약물요법, 흡연 또는 분진이 많은 작업환경 등에 의해 유발된 것일 수 있다. 또한, 상기 폐섬유화는 암에 대한 방사선 치료 시, 정상조직까지 피폭되어 발생된 방사선 치료 부작용이거나 항암치료를 위한 약물요법의 부작용일 수 있다. 상기 폐섬유화를 유발할 수 있는, 암에 대한 방사선 치료 또는 약물요법은 폐암, 유방암, 또는 호치킨림프종 등에 대한 치료를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.The pulmonary fibrosis may be pulmonary fibrosis caused by various causes, and may be caused by radiation exposure, drug therapy for chemotherapy, smoking or dust, and the like. In addition, the pulmonary fibrosis may be a side effect of radiation therapy generated by radiation to the normal tissue during radiation therapy for cancer, or a side effect of pharmacotherapy for chemotherapy. Radiation therapy or pharmacotherapy for cancer, which may cause pulmonary fibrosis, includes, but is not limited to, treatment for lung cancer, breast cancer, or Hodgkin ' s lymphoma.
구체적으로, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용 가능한 그의 염 또는 용매화물을 포함하는 방사선 피폭 또는 항암치료를 위한 약물요법에 의해 유발된 폐섬유화인 것을 특징으로 하는 약학 조성물에 관한 것이다.Specifically, the present invention relates to a pharmaceutical composition characterized by pulmonary fibrosis induced by drug therapy for radiation exposure or chemotherapy, comprising the compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof will be.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 방사선 피폭 전 또는 후에 투여될 수 있으며, 바람직하게는 암에 대한 방사선 치료 전에 투여될 수 있다.In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may be administered before or after radiation exposure, preferably before radiation therapy for cancer.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 항암치료를 위한 약물요법 전, 후 또는 동시에 투여될 수 있다.In addition, the pharmaceutical composition of the present invention can be administered before, after or simultaneously with the drug therapy for chemotherapy.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용가능한 그의 염 또는 용매화물이 DNA 손상을 저해함으로써 방사선 보호 또는 완화 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 약학 조성물에 관한 것이다.The present invention also relates to a pharmaceutical composition characterized in that the compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, exhibits a radiation protection or mitigating effect by inhibiting DNA damage.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1의 화합물, 또는 약제학적으로 허용가능한 그의 염 또는 용매화물이 DNA 손상을 저해함으로써 폐섬유화 예방 또는 치료 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 약학 조성물에 관한 것이다.The present invention also relates to a pharmaceutical composition characterized in that the compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, has the effect of preventing or treating pulmonary fibrosis by inhibiting DNA damage.
상기 본 발명에 따른 약학 조성물은 방사선 보호 또는 완화 효과를 획득하기 위해, 성인을 기준으로 1 일 총 투여량이 화학식 1의 화합물로서 약 0.1-100 mg/kg 이 되도록 임의로 수회 나누어서 투여할 수 있다. 상기 투여량은 손상을 유발하는 방사선의 세기, 방사선 유발 손상의 종류 또는 진행 정도, 투여 경로, 성별, 나이, 체중 등에 따라 적절히 증감될 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention may be administered in several divided doses such that the total daily dose of the compound of formula (I) is about 0.1-100 mg / kg on the basis of an adult, in order to obtain radiation protection or alleviating effect. The dose may be appropriately increased or decreased according to the intensity of the radiation causing the damage, the kind or progress of the radiation-induced damage, the route of administration, sex, age, body weight,
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의하여 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the following examples. However, the following examples are intended to illustrate the present invention, but the scope of the present invention is not limited thereto.
[실시예][Example]
실험방법Experimental Method
(1) 생체조직에 대한 헤마톡실린(hematoxilin) 및 에오신(Eosin) 염색법 (H&E staining)(1) Hematoxilin and Eosin staining (H & E staining)
마우스의 조직은 10 % 의 중성포르말린(neutral formalin)으로 하루 동안 고정시키고 파라핀 섹션을 만들었다. 조직 주변의 파라핀을 제거하기 위해 자일렌(xylene), 95, 90, 70 % 에탄올 용액에 각각 5 분씩 순서대로 반응시켰으며, 헤마톡실린 용액에 1 분간 담궈 핵을 염색하고 흐르는 물에 10분간 세척하였다. 그 다음 에오신 용액에 30 초간 담궈 세포질을 염색하고 50, 70, 90, 및 95 % 에탄올 용액, 자일렌 용액에 순서대로 담근 후 마운팅 용액(mounting solution)을 한 방울 떨어뜨린 후 커버 슬라이드(cover slide)를 덮고 현미경 (Carl Zeiss Vision)으로 관찰하였다.Mouse tissues were fixed with 10% neutral formalin for one day and paraffin sections were made. In order to remove paraffin around the tissues, xylene, 95, 90, and 70% ethanol solution was reacted for 5 minutes each in order. After immersing in hematoxylin solution for 1 minute, the nuclei were stained, Respectively. Then, the cells were dipped in the eosin solution for 30 seconds to stain the cytoplasm. The cells were then dipped in 50, 70, 90, and 95% ethanol solution and xylene solution, and a drop of the mounting solution was dropped. And observed with a microscope (Carl Zeiss Vision).
(2) 생체조직에 대한 트라이크롬(Trichrome) 염색법(2) Trichrome staining for biotissue
마우스의 조직은 10 % 의 중성포르말린(neutral formalin)으로 하루 동안 고정시키고 파라핀 섹션을 만들었다. 조직 주변의 파라핀을 제거하기 위해 자일렌(xylene), 95, 90, 70 % 에탄올 용액에 각각 5 분씩 순서대로 반응시켰으며, 조직의 항원활성화를 위하여 0.1 M 농도의 시트르산 (pH 6.0) 용액에 조직을 담가 20 분 동안 끓였다. 그 다음 Bouin's solution에 1분, Weigert's hematoxylin 10분, Phosphotunstic / phosphomolydic acid에 10분, 아닐린 블루(aniline blue)에 5분, 1% 아세트산에 1 분 동안 순차적으로 반응시킨 다음, 탈수과정을 진행 후 커버글라스로 봉입하여 현미경 (Carl Zeiss Vision)으로 관찰하였다.Mouse tissues were fixed with 10% neutral formalin for one day and paraffin sections were made. To remove paraffins around the tissues, xylene, 95, 90, and 70% ethanol solutions were each reacted in order for 5 minutes each. In order to activate the tissue antigen, 0.1 M citric acid (pH 6.0) Was boiled for 20 minutes. Then, 1 minute was added to Bouin's solution, 10 minutes to Weigert's hematoxylin, 10 minutes to Phosphotunstic / phosphomolydic acid, 5 minutes to aniline blue and 1 minute to 1% acetic acid. Sealed with a glass and observed with a microscope (Carl Zeiss Vision).
(3) γH2AX 면역염색법(3) γH2AX immunostaining
마우스의 조직은 10% 의 중성포르말린(neutral formalin)으로 하루 동안 고정시키고 파라핀섹션을 만들었다. 조직 주변의 파라핀 제거를 위해 자일렌(xylene) 및 100, 95, 90, 70% 에탄올 용액을 순서대로 담갔다. 조직의 항원활성화를 위해 0.1 M 농도의 시트르산 (pH 6.0) 용액에 조직을 담가 30 분간 끓이고, 3% 과산화수소에 15 분간 반응시켰다. PBS (phosphate based saline buffer, 0.1% triton x-100 포함) 용액에 1:200 비율로 희석한 γH2AX (abcam)을 섭씨 4도에서 16 시간동안 반응시켰다. PBS로 세척 후, 비오틴이 결합된 이차 항체를 1:200 비율로 희석하여 실온에서 30 분간 반응시켰다. ABC(Avidin biotin complex)에 30 분 동안 실온에서 반응시키고 3,3'-DAB (3,3'-diaminobenzidine)를 발색시킨 후, 헤마톡실린으로 대조염색하였다. 그 다음 50, 70, 90, 95, 100% 에탄올 용액, 자일렌 용액에 순서대로 담근 후 마운팅 용액(mounting solution)을 한 방울 떨어뜨려 커버 슬라이드(cover slide)를 덮고 현미경(Carl Zeiss Vision)으로 관찰하였다.Mouse tissues were fixed with 10% neutral formalin for one day and paraffin sections were made. Xylene and 100, 95, 90 and 70% ethanol solutions were immersed in order to remove paraffin around the tissues. Tissues were immersed in a 0.1 M citric acid (pH 6.0) solution for 30 min to activate the tissue antigen, and the mixture was reacted with 3% hydrogen peroxide for 15 min. ΓH2AX (abcam) diluted 1: 200 in PBS (phosphate-based saline buffer, containing 0.1% triton x-100) was reacted at 4 ° C. for 16 hours. After washing with PBS, the biotin-conjugated secondary antibody was diluted at a ratio of 1: 200 and allowed to react at room temperature for 30 minutes. ABC (Avidin biotin complex) was reacted at room temperature for 30 minutes, 3,3'-DAB (3,3'-diaminobenzidine) was developed, and then stained with hematoxylin. Next, immerse in 50, 70, 90, 95, 100% ethanol solution and xylene solution in order. Then drop a mounting solution by one drop, cover slides are observed with a microscope (Carl Zeiss Vision) Respectively.
[실시예 1] [Example 1]
CHIR-99021의 방사선에 의한 조직 손상 저해 시험 Inhibition test of tissue damage by radiation of CHIR-99021
마우스의 흉부에 3mm의 크기로 방사선 90Gy를 조사한 마우스 동물모델의 폐 조직을 10% 포르말린으로 고정 후 파라핀 섹션을 만들어서 헤마톡실린(hematoxylin) 및 에오신(eosin) 염색법을 이용하여 조직 염증반응 및 섬유화를 확인하였다. 이 염색법으로 조직을 관찰하면 세포핵은 파란색, 세포질은 분홍색으로 관찰된다. 마우스 동물모델에게 방사선을 조사 1 시간 전에, CHIR-99021 30mg/kg을 복강주사 투여하였으며, 방사선 조사 2 주 후에 조직 손상 부위의 염증 반응, 섬유화를 헤마톡실린 및 에오신 염색법으로 확인하였다. The lung tissue of the mouse model was irradiated with 90 Gy of radiation with a size of 3 mm on the chest of the mouse. The lung tissue of the animal model was fixed with 10% formalin, and then a paraffin section was made and subjected to hematoxylin and eosin staining to induce tissue inflammation and fibrosis Respectively. When the tissue is observed by this staining method, the nucleus of the nucleus is observed in blue and cytoplasm is observed in pink. The mouse animal model was administered with 30 mg / kg of CHIR-99021
[도 1a]에 마우스 동물모델에서 CHIR-99021를 방사선 조사 1시간 전 30mg/kg의 농도로 처리 또는 미처리 후 폐 부위에 90Gy의 세기로 방사선을 조사한 다음, 조직 손상 부위의 염증 반응 및 섬유화를 헤마톡실린 및 에오신 염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진으로 나타내었다.[Fig. 1a] After treatment with CHIR-99021 in a mouse animal model at a dose of 30 mg /
도 1a에서 보는 바와 같이, 헤마톡실린 및 에오신 염색을 통해 정상조직(No IR)과 비교했을 때 90Gy 방사선 조사군(IR)의 조직에서는 염증 세포가 침윤되는 것을 확인 할 수 있다. 또한, 90Gy 방사선 조사군(IR)의 조직에서는 정상조직 대비 손상된 혈관 주위에 섬유화 기질이 나타나는 것을 알 수 있다. 이에 반해, CHIR-99021를 처리한 마우스(IR+CHIR-99021)의 조직에서는 염증 세포의 침윤과 혈관 주위 섬유화 기질이 미처리군(IR)에 비해 현저히 감소한 것을 확인할 수 있었다. As shown in FIG. 1A, it can be confirmed that inflammatory cells are infiltrated in the tissues of the 90 Gy irradiation group (IR) as compared with normal tissues (No IR) through hematoxylin and eosin staining. In addition, in the tissue of the 90 Gy irradiation group (IR), a fibrous matrix appears around the injured blood vessel compared to the normal tissue. In contrast, in the tissues of CHIR-99021-treated mice (IR + CHIR-99021), inflammatory cell infiltration and perivascular fibrous matrix were significantly reduced compared to untreated group (IR).
[도 1b]은 도 1a에 나타낸 염증반응의 정도를 등급화하여 통계적으로 나타낸 그래프이다. FIG. 1B is a graph statistically showing the degree of the inflammatory reaction shown in FIG. 1A.
상기 [도 1]의 결과로부터 CHIR-99021의 처리는 방사선에 의한 조직손상을 현저히 감소시키는 것을 알 수 있다.From the results of the above [FIG. 1], it can be seen that the treatment of CHIR-99021 significantly reduces tissue damage caused by radiation.
[실시예 2][Example 2]
CHIR-99021의 방사선에 의한 in vivo 혈관 손상 저해 시험In vivo vascular injury inhibition test of CHIR-99021 by radiation
마우스의 흉부에 3mm의 크기로 방사선 90Gy를 조사한 마우스 동물모델의 폐 조직을 10% 포르말린으로 고정 후 파라핀 섹션을 만들어서 헤마톡실린(hematoxylin) 및 에오신(eosin) 염색을 하였다. 이 염색법으로 조직을 관찰하면 세포핵은 파란색, 세포질은 분홍색으로 관찰된다. 마우스 동물모델에게 방사선을 조사 1 시간 전에, CHIR-99021 30mg/kg을 복강주사 투여하였으며, 방사선 조사 2 주 후에 폐 조직에서 혈관 손상에 따른 혈관벽 두께의 변화를 헤마톡실린 및 에오신 염색법으로 확인하였다. 결과를 도 2에 통계적으로 나타내었다. The lung tissue of a mouse animal model irradiated with 90 Gy of radiation with a size of 3 mm on the chest of a mouse was fixed with 10% formalin, and a paraffin section was made to hematoxylin and eosin staining. When the tissue is observed by this staining method, the nucleus of the nucleus is observed in blue and cytoplasm is observed in pink. The mouse animal model was administered with 30 mg / kg of CHIR-99021
도 2에 나타내 바와 같이, 방사선 조사에 따른 혈관 손상으로 방사선 조사군(IR)의 혈관벽 두께가 정상조직(No IR)과 비교했을 때 상당하게 증가하였고, CHIR-99021를 처리(IR+CHIR-99021) 했을 때, 미처리 군(IR)에 비해 혈관벽의 두께가 현저히 감소한 것으로 관찰되었다. 따라서, 도 2의 결과에 따르면, 마우스에 방사선 조사 후, 혈관 손상이 진행되며, CHIR-99021 처리에 의해 방사선 조사에 의한 혈관 손상이 현저히 저해되는 것으로 확인되었다.As shown in FIG. 2, the thickness of the blood vessel wall of the irradiated group (IR) was considerably increased as compared with the normal tissue (No IR) due to vascular injury due to irradiation, and CHIR-99021 was treated (IR + CHIR-99021 ), It was observed that the thickness of the blood vessel wall was significantly reduced as compared with the untreated group (IR). Thus, according to the results shown in Fig. 2, it was confirmed that blood vessel damage progressed after irradiation of the mice, and vascular damage by radiation irradiation was remarkably inhibited by the treatment with CHIR-99021.
[실시예 3] [Example 3]
실험동물모델에서의 폐섬유화 현상 억제 시험Inhibition of pulmonary fibrosis in experimental animal models
방사선 치료 후 발생되는 폐섬유화 증상에서 혈관내피세포의 폐섬유화 현상이 나타나는지를 관찰하기 위하여, C57BL/6 마우스의 폐 부위에 90 Gy의 국소 방사선을 조사하였다. 마우스로부터 폐를 적출한 다음 폐조직의 대동맥 단면에 대해, 폐 혈관내피세포의 섬유화시 나타나는 단백질인 콜라겐을 트라이크롬 염색법으로 확인하였다. CHIR-99021 처리군은 방사선 조사 1 시간 전에 CHIR-99021 30 mg/kg의 양으로 복강 내 투여하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.In order to observe the pulmonary fibrosis of vascular endothelial cells in pulmonary fibrosis after radiotherapy, 90 Gy of local radiation was applied to lung area of C57BL / 6 mice. After removing the lungs from the mouse, collagen, which is a protein that appears in the fibrosis of the pulmonary vascular endothelial cells, is identified by trichrome staining for the aortic cross section of lung tissue. The CHIR-99021 treatment group was intraperitoneally administered at a dose of 30 mg / kg of CHIR-99021 1 hour before irradiation. The results are shown in Fig.
도 3a는 마우스 동물모델에서 CHIR-99021를 처리 또는 미처리 후 폐 부위에 방사선을 조사한 다음, 폐의 혈관내피 부위의 콜라겐을 트라이크롬염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진이다.FIG. 3A is a photograph showing the result of examination of collagen in the vascular endothelium region of the lung after irradiation of the lung site after treatment or untreated treatment of CHIR-99021 in a mouse animal model with trichrome staining.
도 3a에서 보는 바와 같이, 방사선을 조사하지 않은 대조군의 대동맥 내벽에서는 콜라겐 염색부위인 파란색 부위가 거의 관찰되지 않았으나, 방사선조사군(IR)의 대동맥 내벽에는 파란색이 상대적으로 현저히 증가한 것으로 관찰되었다. 따라서, 마우스의 폐 부위에 방사선 조사 후, 폐섬유화가 진행된 것을 확인하였다. 이에 반해, CHIR-99021 처리군(IR+CHIR-99021)에서는 폐섬유화 관련 단백질인 콜라겐의 파란색 부위가 방사선 조사군(IR)에 비해 현저히 감소되는 것으로 나타났다. As shown in FIG. 3A, in the inner wall of the aorta of the control group, which had not been irradiated with radiation, there was almost no blue region as a collagen staining region, but blue was relatively increased in the inner wall of the aorta of the irradiated group (IR). Therefore, it was confirmed that lung fibrosis progressed after irradiation of the lung part of the mouse. In contrast, in the CHIR-99021-treated group (IR + CHIR-99021), the blue region of collagen, a protein associated with pulmonary fibrosis, was significantly reduced compared to the irradiated group (IR).
도 3b는 도 3a에서 폐 섬유화 관련 분자인 콜라겐의 발현 정도를 트라이크롬 염색법을 실시하여 통계적으로 나타낸 그래프이다. 또한 방사선 조사로 인하여 섬유화 현상이 증가된 실험군과, CHIR-99021를 처리함에 따라 증가되었던 섬유화 현상이 감소된 실험군 사이의 효과가 통계적 유의성이 있음을 확인하였다.FIG. 3B is a graph showing the degree of expression of collagen, which is a molecule related to pulmonary fibrosis, statistically by performing a trichrome staining method in FIG. It was also found that the effect of irradiation between the experimental group with increased fibrosis and the experimental group with increased fibrosis after treatment with CHIR-99021 was statistically significant.
도 3의 결과로부터, CHIR-99021이 방사선에 의한 폐혈관내피세포의 섬유화 현상을 현저히 저해하는 것을 알 수 있다.From the results of FIG. 3, it can be seen that CHIR-99021 significantly inhibits the fibrosis of pulmonary vascular endothelial cells caused by radiation.
[실시예 4] [Example 4]
CHIR-99021 의 방사선에 의한 DNA 손상 저해 시험DNA damage inhibition test of CHIR-99021 by radiation
방사선 치료 후 발생되는 부작용 중의 하나는 방사선 조사 부위 주변의 정상 세포의 DNA 손상이다. DNA가 손상을 받게 되면 γH2AX의 인산화가 진행되어 손상된 DNA를 인지하고 복구신호기전이 활성화되기 때문에 이 단백질을 염색함으로써 DNA 손상을 확인할 수 있다. 따라서 DNA 손상 정도를 측정하기 위하여 표지자로 알려져 있는 γH2AX를 염색하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.One of the side effects after radiation therapy is DNA damage of normal cells around the irradiated area. When the DNA is damaged, the phosphorylation of γH2AX proceeds, recognizing the damaged DNA and activating the repair signaling mechanism, so that the DNA damage can be confirmed by staining the protein. Therefore, γH2AX, known as a marker, was stained to measure DNA damage. The results are shown in Fig.
도 4는 마우스 동물모델에서 CHIR-99021를 방사선 조사 1시간 전 30 mg/kg의 농도로 처리 또는 미처리 후 폐 부위에 90 Gy의 세기로 방사선을 조사한 다음, DNA 손상을 γH2AX 면역염색법으로 확인한 결과를 촬영한 사진이다.FIG. 4 shows the result of irradiating the lung with 90 Gy of radiation after treatment or untreated with CHIR-99021 at a concentration of 30 mg /
도 4에 따르면, γH2AX 면역염색을 통해 정상조직(No IR)과 비교했을 때 90Gy 방사선 조사군(IR)의 조직에서는 DNA 손상이 상당하게 나타나는 것을 확인 하였다. 이에 반해, CHIR-99021를 처리한 마우스(IR+CHIR-99021)의 조직에서는 DNA 손상에 따른 γH2AX의 발현이 미처리군(IR)에 비해 현저히 감소한 것으로 나타났다. According to Fig. 4, the γH2AX immunoreactivity showed significant DNA damage in the tissues of the 90 Gy irradiation group (IR) as compared to the normal tissue (No IR). In contrast, in the tissues of CHIR-99021 treated mice (IR + CHIR-99021), the expression of γH2AX due to DNA damage was significantly reduced compared to the untreated group (IR).
이러한 도 4의 결과로부터 CHIR-99021의 처리는 방사선에 의한 DNA 손상을 현저히 감소시키는 것을 알 수 있다. From the results of FIG. 4, it can be seen that the treatment of CHIR-99021 significantly reduces DNA damage by radiation.
[실시예 5] [Example 5]
CHIR-99021 의 블레오마이신에 의한 조직 손상 저해 시험 Inhibition test of tissue damage by CHIR-99021 bleomycin
림프종을 비롯한 다양한 종양에 대한 치료제로 흔히 쓰이는 블레오마이신(bleomycin)은 중대한 부작용 중 하나로 조직의 폐손상 및 폐섬유화를 발생시키며, 이를 이용하여 실험동물에서 급성 폐손상과 폐섬유화의 모델로 널리 사용하고 있다. 따라서 블레오마이신 유도 폐섬유화 모델을 제작하여 CHIR-99021의 폐손상 및 폐섬유화 억제 효과를 확인하였다. Bleomycin, commonly used as a treatment for lymphomas and various other tumors, is one of the major adverse effects that causes lung injury and pulmonary fibrosis of tissues and is widely used as a model for acute lung injury and pulmonary fibrosis in experimental animals have. Thus, a bleomycin-induced pulmonary fibrosis model was constructed to confirm the effect of CHIR-99021 on lung injury and pulmonary fibrosis.
1.25U/kg의 블레오마이신을 50 μL의 생리식염수에 섞어 마우스의 기도 내로 주입하였다. 블레오마이신 주입 1시간 전에, CHIR-99021 30mg/kg을 복강주사 투여하였으며, 블레오마이신 주입 3 주 후에 폐 조직을 10% 포르말린으로 고정 후 파라핀 섹션을 만들어서 헤마톡실린(hematoxylin) 및 에오신(eosin) 염색과 트라이크롬 염색법으로 확인하였다. 1.25 U / kg of bleomycin was injected into the airways of mice mixed with 50 μL of physiological saline. After 3 weeks of bleomycin injection, the lung tissue was fixed with 10% formalin, and a paraffin section was made, and hematoxylin and eosin staining was performed after bleomycin injection 30 mg / kg of CHIR- And trichrome staining.
도 5에 나타내 바와 같이, 블레오마이신을 투여한 3주 후 조직에서 특히 기관지 주변을 비롯하여 광범위한 염증세포의 침윤, 콜라겐의 침착, 섬유화 결절 및 블레오마이신 유도 폐섬유화 모델의 대표적 특징인 국소적인 벌집모양의 간질 비후를 확인하였다. 이에 반해, CHIR-99021를 처리한 마우스의 조직에서는 염증 세포의 침윤, 콜라겐의 침착, 섬유화 결절 및 간질 비후 등의 병리학적 특징이 미처리군에 비해 현저히 저해되는 것을 확인하였다.As shown in FIG. 5, in the tissues after 3 weeks of administration of bleomycin, it was observed that the infiltration of a wide range of inflammatory cells, particularly around the bronchi, collagen deposition, fibrotic nodule and local honeycomb And epilepsy thickening. On the contrary, in the tissues of mice treated with CHIR-99021, the pathological features such as inflammatory cell infiltration, collagen deposition, fibrotic nodule and epileptiform hypertrophy were significantly inhibited compared to the untreated group.
Claims (11)
[화학식 1]
A pharmaceutical composition for radiation protection or alleviation of a radiation-induced injury comprising a compound of the formula (1), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof:
[Chemical Formula 1]
2. The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the radiation-induced damage is vascular injury due to radiation exposure, skin and gastrointestinal injury, tissue inflammation or tissue fibrosis.
[화학식 1]
[Chemical Formula 1]
4. The pharmaceutical composition according to claim 3, wherein the pulmonary fibrosis is pulmonary fibrosis induced by radiation exposure.
The pharmaceutical composition according to any one of claims 1 to 4, wherein the pharmaceutical composition is administered before or after radiation exposure.
6. The pharmaceutical composition according to claim 5, wherein said pharmaceutical composition is administered prior to radiation exposure during radiation therapy.
The pharmaceutical composition according to claim 3, wherein the pulmonary fibrosis is pulmonary fibrosis induced by drug therapy for chemotherapy.
8. The pharmaceutical composition according to claim 7, wherein the pharmaceutical composition is administered before, after or simultaneously with the drug therapy for chemotherapy.
The pharmaceutical composition according to claim 1 or 3, wherein the pharmaceutically acceptable salt of the compound of formula (1) is a hydrochloride salt.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the compound of formula (1), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, exhibits radiation protection or mitigating effect by inhibiting DNA damage.
Priority Applications (7)
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|---|---|---|---|
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