KR20190038033A - Manufacturing device of nanocomposites, method of preparing nanocomposites and nanocomposite prepared therefrom - Google Patents

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KR20190038033A KR1020170127991A KR20170127991A KR20190038033A KR 20190038033 A KR20190038033 A KR 20190038033A KR 1020170127991 A KR1020170127991 A KR 1020170127991A KR 20170127991 A KR20170127991 A KR 20170127991A KR 20190038033 A KR20190038033 A KR 20190038033A
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Abstract

The present invention relates to an apparatus and a method for manufacturing a nanocomposite and a nanocomposite manufactured thereby, wherein a multifunctional nanocomposite can be continuously produced through reassembling of metal agglomerates by using gas sing-pass configuration that does not require hydrothermal reaction, separation purification, or post-treatment to couple a physiologically active substance to a support.

Description

나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체{Manufacturing device of nanocomposites, method of preparing nanocomposites and nanocomposite prepared therefrom}Technical Field [0001] The present invention relates to a nanocomposite manufacturing apparatus, a nanocomposite manufacturing method, and a nanocomposite fabricated using the nanocomposite.

본 출원은 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체에 관한 것이다.The present application relates to an apparatus for producing a nanocomposite, a method for producing the nanocomposite, and a nanocomposite prepared using the same.

플라즈몬 금(Au) 기반의 나노 구조는 화학적으로 불활성이고, 쉽게 제조할 수 있다. 또한, 상기 플라즈몬 금(Au) 기반의 나노 구조는 높은 생체 적합성을 가지며, 광학 특성을 조절할 수 있기 때문에 치료 및 진단 용도로 자주 사용한다. 특히, 근적외선(NIR) 영역에서의 나노 구조의 강한 광 흡수는 란다우 댐핑(Landau damping)을 통해 비방사성 에너지의 소실을 발생시키고 광열 온열 요법을 위한 충분한 열을 생성한다. 이에 따라, 나노 구조는 약물과 표적제 같이 다양한 치료 모드 및 상이한 생체 활성 분자를 사용하여 이러한 치료법으로 광범위하게 사용하였다.Plasmon gold (Au) -based nanostructures are chemically inert and can be easily fabricated. In addition, the plasmon-gold (Au) -based nanostructure is frequently used for therapeutic and diagnostic purposes because it has high biocompatibility and can control optical characteristics. In particular, the strong light absorption of the nanostructures in the near-infrared (NIR) region results in the loss of nonradioactive energy through Landau damping and generates sufficient heat for photothermal heat therapy. Accordingly, nanostructures have been extensively used in such therapies using various modes of treatment and different bioactive molecules, such as drugs and targeting agents.

가시광선에서 근적외선에 이르는 표면 플라즈몬 공명 파장을 조작함으로써 Au 나노 구조의 모양을 변화시키는 것을 확인하였다. Au 크기 증가로 인한 국지화된 표면 플라즈몬 공명(localized surface plasmon resonance, LSPR) 흡수의 매우 제한된 적색 쉬프팅(red-shifting)과 비교할 때, Au 나노 구조의 모양 변화는 광열 요법 및 광학 진단에서 더 강한 광학적 거동을 유도한다. Au 나노 로드는 적색 쉬프팅 또는 확장을 달성하기 위해 자주 사용하며, 흡수 스펙트럼은 Au의 종횡비를 제어하여 조절할 수 있다.We confirmed that the shape of the Au nanostructure changes by manipulating the surface plasmon resonance wavelength from visible to near infrared. Compared to the very limited red-shifting of localized surface plasmon resonance (LSPR) absorption due to the increase in Au size, the change in the shape of the Au nanostructures leads to a stronger optical behavior in photothermal therapy and optical diagnosis . Au nanorods are often used to achieve red shifting or expansion, and absorption spectra can be controlled by controlling the aspect ratio of Au.

그러나, 최근에 Au 나노 로드는 날카로운 모서리, 팁 및 잔류물 예를 들어, 세틸 트리메틸암모늄 브로마이드과 같은 물리화학적 특징으로 인해 세포 생존력을 제한한다고 보고되고 있으며, 이방성 특성으로 인해 높은 종횡비에 따른 혈관 내 잔류 시간이 낮은 문제점이 있다.Recently, however, Au nanorods have been reported to limit cell viability due to sharp edges, tips and residues, for example, cetyltrimethylammonium bromide, and the anisotropic nature of the nanorods, This is a low problem.

대한민국 등록특허 10-1707468Korean Patent No. 10-1707468 대한민국 등록특허 10-1705033Korean Patent No. 10-1705033

본 출원은 생리 활성 물질 및 지지체의 결합을 위하여 열수 반응, 분리 정제 또는 후처리가 필요하지 않는 기체 단일-패스 구성을 이용하여 금속 응집체의 재조립을 통해 다기능 나노 복합체를 연속으로 제조할 수 있는 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체를 제공한다.The present invention relates to a nanofibrous nanocomposite which can continuously produce a multifunctional nanocomposite by reassembling a metal agglomerate using a gas single-pass constitution which does not require hydrothermal reaction, separation purification or post treatment for binding of a biomolecule and a support, A method for producing the nanocomposite, and a nanocomposite prepared using the same.

본 출원은 나노 복합체의 제조 장치에 관한 것이다. 예시적인 본 출원의 제조 장치에 의하면, 전자 공여 그룹(electron donating group)을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 분무하여 액적을 형성하는 분무부; 상기 분무부로부터 형성된 액적에 광을 조사하여 상기 금속 나노입자와 유기물을 재배열시켜 나노 구조체를 형성하는 광 조사부; 및 상기 광 조사부로부터 형성된 나노 구조체로부터 용매를 제거하여 나노 복합체를 생성하는 용매 제거부를 포함한다.The present application relates to an apparatus for producing nanocomposites. According to an exemplary manufacturing apparatus of the present application, there is provided an apparatus for producing droplets by spraying a solution and a metal nanoparticle aggregate having an electron donating group or a negatively charged organic material and forming droplets; A light irradiating unit for irradiating light onto the droplet formed from the atomizing unit to rearrange the metal nanoparticles and the organic material to form a nanostructure; And a solvent removal unit for removing the solvent from the nanostructure formed from the light irradiation unit to produce a nanocomposite.

본 출원은 나노 복합체의 제조 방법에 관한 것이다. 예시적인 본 출원의 제조 방법에 의하면, 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 분무하여 액적을 형성하는 단계; 상기 단계에서 형성된 액적에 광을 조사하여 상기 금속 나노입자와 유기물을 재배열시켜 나노 구조체를 형성하는 단계; 및 상기 단계에서 형성된 나노 구조체로부터 용매를 제거하여 나노 복합체를 생성하는 단계를 포함한다.The present application relates to a method for producing a nanocomposite. According to an exemplary manufacturing method of the present application, there is provided a method of producing a liquid droplet, comprising: spraying a solution and a metal nanoparticle aggregate having an electron donating group or containing a negatively charged organic compound to form droplets; Forming a nanostructure by irradiating light onto the droplet formed in the step and rearranging the metal nanoparticles and the organic material; And removing the solvent from the nanostructure formed in the step to produce a nanocomposite.

본 출원은 나노 복합체에 관한 것이다. 본 출원의 일 구현예에 따른 나노 복합체에 의하면, 다수의 금속 나노 입자 및 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하고, 상기 유기물은 금속 나노 입자 사이에 정전기적으로 배열되어 있는 것을 특징으로 한다.The present application relates to nanocomposites. According to the nanocomposite according to one embodiment of the present invention, a plurality of metal nanoparticles and an electron donating group or a group including a negatively charged organic material are electrostatically arranged between the metal nanoparticles .

본 출원은 나노 복합체에 관한 것이다. 본 출원의 또 다른 일 구현예에 따른 나노 복합체에 의하면, 다수의 금(Au) 나노 입자, 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 또는 음전하로 하전된 계면활성제, 및 약물을 포함하고, 상기 계면활성제 및 약물이 금속 나노 입자 사이에 정전기적으로 배열되어 있는 것을 특징으로 한다.The present application relates to nanocomposites. According to another embodiment of the present invention, there is provided a nanocomposite comprising a plurality of gold (Au) nanoparticles, an electron donating group or a negatively charged surfactant, and a drug, wherein the surfactant and the drug And is electrostatically arranged between the metal nanoparticles.

본 출원의 나노 복합체의 제조 장치 및 제조 방법, 이를 이용하여 제조한 나노 복합체는 생리 활성 물질 및 지지체의 결합을 위하여 열수 반응, 분리 정제 또는 후처리가 필요하지 않는 기체 단일-패스 구성을 이용하여 금속 응집체의 재조립을 통해 다기능 나노 복합체를 연속으로 제조할 수 있다.The nanocomposite manufacturing method and the nanocomposite fabricated using the nanocomposite of the present application can be fabricated by using a gas single-pass structure that does not require hydrothermal reaction, separation purification, or post-treatment for bonding of a physiologically active substance and a support, Multifunctional nanocomposites can be continuously produced by reassembling the aggregates.

도 1은 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치를 모식화한 도면이다.
도 2는 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치 중 용매 제거부를 나타낸 도면이다.
도 3은 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치의 전기장 인가부가 형성되어 있는 액적 이송부의 단면을 나타낸 도면이다.
도 4는 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치 중 수집부를 나타낸 도면이다.
도 5는 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체를 모식적으로 나타낸 도면이다.
도 6은 확산 건조기를 통한 용매 추출 전에 185 nm UV 조사 하에서 Au AG(Au 막대의 스파크 용발), TD 액적(에탄올에 용해된 TD) 및 하이브리드 액적(Au AG를 포함하는 TD 액적)의 크기 분포도이다.
도 7은 확산 건조기를 통과 한 후 (a) Au AGs 및 (b) 실시예 1(TAuD)의 저배율 및 고배율 TEM 이미지이다.
도 8은 (a) PBS에 분산된 실시예 1(TAuD) 나노 복합체의 동적광산란(DLS)법을 이용한 입자 크기 분포, 제타 전위 및 (b) TD를 포함하는 UV-vis 스펙트럼 그래프이다.
도 9는 다른 T 용액을 포함하는 재조립된 Au AG의 TEM 이미지이다.
도 10은 (a) 실시예 1(TAuD), Au 및 비교예 1(TAu)의 XPS Au 스펙트럼, (b) 실시예 1(TAuD), 비교예 1(TAu) 및 비교예 2(AuD의 FT-IR)스펙트럼, (c) 실시예 1(TAuD), 비교예 3(TD) 및 Au AG의 라만 스펙트럼 그래프이다.
도 11은 실시예 1(TAuD)로부터 (a) pH 트리거링 (5.5 및 7.4) (24 시간) 및 (b) 근적외선(NIR) 트리거 (6 시간 및 808nm) (2시간 후 5 분간 조사) 약물(DOX, D)의 시험관 내 방출 프로파일에 관한 그래프이다.
도 12는 808 nm 근적외선(NIR) 조사에 따른 (a) 농도 의존(2.5 W cm-2) 및 (b) 6분 동안 비교예 1(TAu) 및 RPMI(대조군)의 강도-의존성 (150 μg/mL) 온도 상승 프로파일이다.
도 13은 632 nm 근적외선(NIR) 조사에 따른 (a) 농도 의존(2.5 W cm-2) 및 (b) 6분 동안 비교예 1(TAu) 및 RPMI(대조군)의 강도-의존성 (150 μg/mL) 온도 상승 프로파일이다.
도 14는 (a) MDA-MB-231 및 (b) MCF-7 세포에서의 단일 D를 포함하는 근적외선(NIR) 조사의 부재 및 존재 하에서의 비교예 1(TAu) 및 실시예 1(TAuD)에 대한 생체 외 항암 효과 그래프, (c) MDA-MB-231 및 MCF 세포에서의 쿠마린-6에 로딩된 비교예 1(TAu)의 CLSM 이미지, (d) MDA-MB-231 및 (e) MCF-7 세포에 의한 실시예 1(TAuD)의 세포 흡수를 보여주는 FACS 분석 결과, (f) 808 nm 근적외선(NIR) 조사의 유무에 따른 비교예 1(TAu)로 처리된 세포에서의 p53의 웨스턴 블랏 분석 결과이다.
도 15는 (i) 대조군, (ii) 단일 D군, (iii) 비교예 1(TAu)+ 근적외선(NIR)군 및 (iv) 실시예 1(TAuD)+세포군으로 처리한 후 MCF-7(상부) 및 MDA-MB-231(하부) 세포의 세포 사멸을 결정하기 위한 FACS 결과이다.
도 16은 생존/사망 분석에서의 역 형광 현미경 이미지이다.
도 17는 세포주기 분석을 측정한 광학 현미경 이미지이다.
도 18은 생체 내 항 종양 평가에 관한 것으로서, 단일 D를 포함하여 근적외선(NIR) 조사의 유무에 따른 비교예 1(TAu) 및 실시예 1(TAuD)에 대한 이종 이식 쥐를 지닌 MDA-MB-231의 (a) 종양 성장 및 (b) 중량-변화 프로파일 그래프 및 (c) 주입 후 24 시간 동안 안락사된 쥐에서 채취한 주요 장기[간(i), 폐(ii), 심장(iii), 비장(iv) 및 신장(v)]와 종양(vi)에 대한 Cy5.5 단독(중간) 및 Cy5.5와 결합한 비교예 1(TAu)(우측)의 생체 외 형광 이미지이다.
도 19는 생리 식염수 및 실시예 1(TAuD)로 전처리한 쥐의 종양에 근적외선(NIR) 조사하던 중 생체 내 광열 촬영한 이미지이다.
도 20은 T 대신에 지질 분자 LAu를 사용하여 상이한 유형의 나노 복합체를 제조하는 다른 조합물로서, (a) 액적유동(FD) 반응으로부터 LAu의 저배율 및 고배율 TEM 이미지, (b) LAu의 광열 활성을 확인하기 위한 LAuD로부터 근적외선(NIR)(632 및 808 nm, 5분)-트리거 D의 방출 프로파일 및 (c) 순 DNA 및 시판되는 리포펙타민과 비교하여 LAu 즉, LAuG와 결합된 pDNA(EGFP 포함)의 유전자 전달 성능 그래프이다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a schematic view of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application. FIG.
Fig. 2 is a view showing a solvent removing unit in an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application.
Fig. 3 is a cross-sectional view of a droplet transferring portion in which an electric field applying portion of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application is formed.
FIG. 4 is a view showing a collecting portion of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application.
FIG. 5 is a schematic view of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus, a method of manufacturing a nanocomposite, and a nanocomposite manufactured using the same according to the present application.
FIG. 6 is a size distribution diagram of Au AG (spark discharge of Au rod), TD droplet (TD dissolved in ethanol) and hybrid droplet (TD droplet including Au AG) under 185 nm UV irradiation before solvent extraction through a diffusion drier .
Figure 7 is a low magnification and high magnification TEM image of (a) Au AGs and (b) Example 1 (TAuD) after passing through a diffusion dryer.
Figure 8 is a graph of the particle size distribution, zeta potential, and (b) UV-vis spectrum including (a) the dynamic light scattering (DLS) method of Example 1 (TAuD) nanocomposite dispersed in PBS and (b) TD.
Figure 9 is a TEM image of reassembled Au AG containing another T solution.
10 shows the XPS Au spectra of (a) Example 1 (TAuD), Au and Comparative Example 1 (TAu), (b) Example 1 (TAuD), Comparative Example 1 (TAu), and Comparative Example 2 -Ir) spectrum of (a), (c) the Raman spectral graph of Example 1 (TAuD), Comparative Example 3 (TD) and Au AG.
11 is a graph showing the results of (a) pH triggering (5.5 and 7.4) (24 hours) from Example 1 (TAuD) and (b) near infrared (NIR) trigger (6 hours and 808 nm) , ≪ / RTI > D).
Figure 12 shows the intensity-dependent (150 μg / ml) response of Comparative Example 1 (TAu) and RPMI (control) for 6 min with (a) concentration dependent (2.5 W cm -2 ) according to 808 nm near- mL) temperature rise profile.
Figure 13 shows the intensity-dependent (150 μg / ml) response of Comparative Example 1 (TAu) and RPMI (control) for 6 min with (a) concentration dependent (2.5 W cm -2 ) according to 632 nm near- mL) temperature rise profile.
Figure 14 shows the results of a comparison of the results of (a) MDA-MB-231 and (b) in comparison with Comparative Example 1 (TAu) and Example 1 (TAuD) in the absence and presence of near infrared (NIR) irradiation comprising single D in MCF- (C) MDA-MB-231 and MCF-CLSM images of coumarin-6 loaded Comparative Example 1 (TAu), (d) MDA-MB-231 and (e) MCF- 7 cells, (f) Western blot analysis of p53 in cells treated with Comparative Example 1 (TAu) with or without 808 nm near-infrared (NIR) irradiation Results.
Fig. 15 shows the results of the treatment of MCF-7 (Fig. 15) after treatment with (i) control, (ii) single D group, (iii) Comparative Example 1 (TAu) + near infrared (NIR) Top) and MDA-MB-231 (bottom) cells.
Figure 16 is an inverted fluorescence microscope image in survival / death analysis.
Fig. 17 is an optical microscope image showing cell cycle analysis. Fig.
18 shows the results of in vivo antitumor assays in which MDA-MB-T cells with xenotransplants for Comparative Example 1 (TAu) and Example 1 (TAuD), with and without NIR irradiation, (I), lung (ii), heart (iii), spleen (iii), and spleen collected from rats euthanized for 24 hours after injection (right) of Cy5.5 alone (intermediate) and Cy5.5 combined with tumor (iv) and kidney (v) and tumor (vi)
FIG. 19 is an in vivo photothermographic image of a tumor of a rat pretreated with physiological saline and Example 1 (TAuD) while undergoing near infrared (NIR) irradiation.
Figure 20 shows another combination of using lipid molecules LAu instead of T to produce different types of nanocomposites. (A) low magnification and high magnification TEM images of LAu from droplet flow (FD) reactions, (b) (632 and 808 nm, 5 minutes) from LAuD to confirm the presence of Trigger D, and (c) pure DNA and pDNA coupled with LAu, that is LAg, compared to commercially available lipofectamine (EGFP ). ≪ / RTI >

본 출원에서 용어 「나노」는 나노 미터(nm) 단위의 크기를 의미할 수 있고, 예를 들어, 1 내지 1,000 nm의 크기를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 명세서에서 용어 「나노 입자」는 나노 미터(nm) 단위의 평균 입경을 갖는 입자를 의미할 수 있고, 예를 들어, 1 내지 1,000 nm의 평균입경을 갖는 입자를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The term " nano " in this application may refer to a size in nanometers (nm), for example, but is not limited to, a size of 1 to 1,000 nm. As used herein, the term " nanoparticle " may mean particles having an average particle size in nanometers (nm), for example, particles having an average particle size of 1 to 1,000 nm, But is not limited to.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 출원의 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체를 설명하며, 첨부된 도면은 예시적인 것으로, 본 출원의 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체의 범위가 첨부된 도면에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, a nanocomposite manufacturing apparatus, a nanocomposite manufacturing method, and a nanocomposite manufactured by the same will be described with reference to the accompanying drawings, and the accompanying drawings are illustrative, and the nanocomposite manufacturing apparatus , The method of preparing the nanocomposite and the range of the nanocomposite produced by the method are not limited by the attached drawings.

도 1은 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치를 모식화한 도면이다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a schematic view of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application. FIG.

도 1에 도시된 바와 같이, 상기 나노 복합체의 제조 장치는 분무부(13), 광 조사부(14) 및 용매 제거부(15)를 포함한다.As shown in FIG. 1, the nanocomposite manufacturing apparatus includes a spray unit 13, a light irradiation unit 14, and a solvent removal unit 15.

상기 분무부(13)는, 분무 장치 및 이송 기체 주입구를 포함할 수 있고, 예를 들어, 충돌 분무기(collison atomizer)일 수 있다. 상기 분무부(13)는 전자 공여 그룹(electron donating group)을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 분무하여 액적을 형성할 수 있다.The spraying section 13 may comprise a spray device and a transfer gas inlet and may be, for example, a collision atomizer. The spraying unit 13 may have an electron donating group or spray a solution containing a negatively charged organic substance and a metal nanoparticle aggregate to form droplets.

하나의 예시에서, 상기 분무 장치는 분무 노즐을 포함할 수 있다. 상기 분무 노즐은 상부 분무 노즐 및 하부 분무 노즐로 구성될 수 있다. 상기 노즐의 입경은 특별히 제한되지 않으나, 0.05 내지 2.0 mm일 수 있다. 상기 분무부에서는 상기 분무 노즐을 통해 분무부(13) 내로 상기 전자 공여 그룹(electron donating group)을 가지는 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 액적(droplet) 형태로 분무할 수 있다.In one example, the spray device may comprise a spray nozzle. The atomizing nozzle may consist of an upper atomizing nozzle and a lower atomizing nozzle. The particle diameter of the nozzle is not particularly limited, but may be 0.05 to 2.0 mm. In the spraying portion, the solution containing the organic substance having the electron donating group and the metal nanoparticle aggregate may be sprayed into the spraying portion 13 through the spraying nozzle in a droplet form.

상기 분무부(13)는 전자 공여 그룹(electron donating group)을 가지는 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 혼합하여 용액을 제조하는 교반기를 추가로 포함할 수 있다. 상기 교반기는 고속 교반이 가능한 장치면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어, 200 내지 4000 rpm 이며, 초음파를 인가하여 교반이 가능한 장치라면 제한 없이 사용될 수 있다.The spraying unit 13 may further include a stirrer for mixing the solution containing the organic substance having the electron donating group and the metal nanoparticle aggregate to produce a solution. The stirrer is not particularly limited as long as it is capable of high-speed stirring. For example, it may be 200 to 4000 rpm, and any device capable of stirring by applying ultrasonic waves may be used without limitation.

상기 이송 기체 주입부는, 상기 액적 이송부(17)에 이송 기체를 주입할 수 있다. 상기 이송 기체는 불활성 기체일 수 있고, 상기 불활성 기체는 질소(N2), 헬륨(He), 네온(Ne) 및 아르곤(Ar) 으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 액적 이송부에 주입되는 기체의 압력은 1.5 기압 이하일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 기체의 압력이 1.5 기압을 초과하는 경우 재조립형 나노 소포체를 생성하기 곤란할 수 있고, 와류(Swirl)를 형성시켜 소포체 형성을 개선할 수 있다.The transfer gas injecting unit may inject the transfer gas into the droplet conveyance unit 17. The inert gas may be at least one selected from the group consisting of nitrogen (N 2 ), helium (He), neon (Ne), and argon (Ar), but the present invention is not limited thereto. The pressure of the gas injected into the droplet transporting part may be 1.5 atm or less, but is not limited thereto. If the pressure of the gas exceeds 1.5 atm, it may be difficult to produce a re-assembled nanofibers, and vesicle formation may be improved by forming swirls.

하나의 예시에서, 상기 나노 복합체의 제조 장치는 방전부(11)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 방전부(11)는, 방전에 의하여 금속 전극으로부터 금속 입자를 형성할 수 있다. 상기 방전부(11)는, 방전에 의해 금속 나노 입자를 발생시키기 위한 부분으로서, 소정 간격 이격되어 배치된 한 쌍의 도전성 로드 및 상기 도전성 로드에 각각 전압을 인가하는 전원부를 포함한다.In one example, the apparatus for producing a nanocomposite may further include a discharge part 11. [ The discharge part (11) can form metal particles from the metal electrode by discharging. The discharge unit 11 is a part for generating metal nano particles by discharge, and includes a pair of conductive rods spaced apart from each other by a predetermined distance, and a power supply unit for applying a voltage to each of the conductive rods.

상기 방전은 스파크 방전 또는 아크 방전을 이용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 하나의 예시에서, 상기 방전으로는 스파크 방전을 이용할 수 있다. 상기 「스파크 방전」은 상압에서 kV-mA 모드로 수행되는 고주파 방전 방식을 의미하고, 「아크 방전」은 진공에서 V-A 모드로 수행되는 고전류 방전 방식을 의미한다.The discharge may utilize a spark discharge or an arc discharge, but is not limited thereto. In one example, a spark discharge can be used as the discharge. The term " spark discharge " means a high-frequency discharge method performed in the kV-mA mode at normal pressure, and " arc discharge " means a high-current discharge method performed in vacuum mode V-A.

상기 한 쌍의 도전성 로드는 서로 이격 배치되어 간극(Gap)을 형성하고 있다. 예를 들면, 상기 방전부에서는 스파크 방전이 일어나며, 상기 스파크 방전에 의해 상기 도전성 로드 사이에서 국부적으로 발생되는 높은 온도에 의하여, 금속 나노입자가 발생된다. 본 출원에서 사용되는 용어 「간극」 또는 「간격」은 움직이거나 고정된 두 부품 사이의 틈을 의미하며, 예를 들어, 상기 간격은 각각 이격 배치 되어 있는 한 쌍의 도전성 로드 사이의 틈을 의미한다. 또한, 본 출원에서 용어 「나노」는 나노미터(nm) 단위의 크기로서, 예를 들면, 1 nm 내지 1000 nm의 크기를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 출원에서 용어 「나노입자」는 나노미터(nm) 단위의 크기, 예를 들면, 1nm 내지 1000 nm의 평균 입경을 갖는 입자를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The pair of conductive rods are spaced apart from each other to form a gap. For example, a spark discharge occurs in the discharge portion, and metal nanoparticles are generated due to the high temperature locally generated between the conductive rods by the spark discharge. The term " gap " or " gap " used in the present application means a gap between two parts that are moved or fixed, for example, the gap means a gap between a pair of conductive rods spaced apart from each other . The term " nano " in this application is meant to indicate a size in nanometers (nm), for example, a size of 1 nm to 1000 nm, but is not limited thereto. The term " nanoparticle " in the present application may mean particles having a size in nanometers (nm), for example, an average particle diameter of 1 nm to 1000 nm, but the present invention is not limited thereto.

상기 도전성 로드를 구성하는 재료로는, 일함수 6.0 eV 이하의 금속이라면 특별히 제한되는 것은 아니며, 예를 들면, 일함수 5.7 eV 이하, 5.0 eV 이하, 4.6 eV 이하 또는 4.2 eV 이하의 금속을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 하나의 예시에서, 상기 일 함수 6.0 eV 이하의 금속은 금, 바륨, 은, 카드뮴, 알루미늄, 베릴륨, 세륨, 세슘, 코발트, 크롬, 철, 갈륨, 가돌리늄, 하프늄, 수은, 인듐, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 납, 니오븀, 네오디뮴, 루비듐, 레늄, 로듐, 루테늄, 스칸듐, 주석, 스트론튬, 탄탈륨, 테르븀, 텔루륨, 토륨, 티타늄, 우라늄, 바나듐, 이트륨, 탈륨, 이테르븀, 아연, 팔라듐, 이리듐, 백금 및 지르코늄으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있고, 바람직하게는, 금을 이용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. The material constituting the conductive rod is not particularly limited as long as it is a metal having a work function of 6.0 eV or less. For example, a metal having a work function of 5.7 eV or less, 5.0 eV or less, 4.6 eV or 4.2 eV or less can be used But is not limited thereto. In one example, the metal having a work function of less than 6.0 eV is selected from the group consisting of gold, barium, silver, cadmium, aluminum, beryllium, cerium, cesium, cobalt, chromium, iron, gallium, gadolinium, hafnium, mercury, indium, A metal such as molybdenum, lead, niobium, neodymium, rubidium, rhenium, rhodium, ruthenium, scandium, tin, strontium, tantalum, terbium, tellurium, thorium, titanium, uranium, vanadium, yttrium, thallium, ytterbium, And zirconium. Preferably, gold may be used, but the present invention is not limited thereto.

또한, 상기 도전성 로드 사이의 간격, 예를 들어, 상기 도전성 로드 간 최단거리인 전극 갭(electrode gap)은, 그 거리가 작을수록 점화요구 전압이 낮아지며, 그 거리가 커질수록 고전압이 요구된다. 또한, 전극 갭이 좁으면 스파크를 발생시키는데 필요한 전압은 감소하지만, 짧은 스파크는 혼합기에 점화 최소 에너지를 전달하여 실화를 일으킬 수 있으므로, 실험에 의해 적정 거리를 설정하는 것이 필요하다. 하나의 예시에서, 상기 전극 사이의 갭은, 0.1 내지 10 mm일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. Further, the gap between the conductive rods, for example, the electrode gap which is the shortest distance between the conductive rods, becomes lower as the distance becomes smaller, and the higher the distance is, the higher the voltage is required. In addition, if the electrode gap is narrow, the voltage required to generate the spark is reduced, but the short spark can cause misfiring by transmitting the minimum ignition energy to the mixer, so it is necessary to set an appropriate distance by experiment. In one example, the gap between the electrodes may be from 0.1 to 10 mm, but is not limited thereto.

상기 전원부는 상기 각각의 도전성 로드에 전압을 인가하기 위한 부분으로서, 하나의 예시에서 상기 전원부로부터 상기 도전성 로드에 인가되는 전압은 2 내지 5 kV이고, 전류량은 0.5 내지 5 mA일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 상기 전원부에서는 상기 한 쌍의 도전성 로드에 인가되는 전압을 일정하게 조절할 수 있다. 이에 따라, 금속 나노입자를 정량적으로 공급함으로써, 우수한 공급 안정성으로 금속 나노입자를 제조할 수 있다.In one example, the voltage applied to the conductive rod from the power supply unit may be 2 to 5 kV and the amount of current may be 0.5 to 5 mA. However, It is not. For example, in the power supply unit, a voltage applied to the pair of conductive rods can be controlled to be constant. Thus, metal nanoparticles can be prepared with good supply stability by quantitatively supplying metal nanoparticles.

하나의 예시에서, 상기 전원부는, 상기 도전성 로드에 고전압을 인가하기 위한 전기 회로를 포함할 수 있다. 상기 전기 회로는 고전압 공급원, 외부 커패시터 및 저항으로 구성된 정전압원(Constant High Voltage Source) 구조를 가지며, 다수의 저항, 다수의 커패시터 및 회로전류의 고속 스위칭이 가능한 회로를 이용하여 금속 나노입자의 크기를 조절할 수 있다.In one example, the power supply unit may include an electric circuit for applying a high voltage to the conductive rod. The electrical circuit has a Constant High Voltage Source structure composed of a high voltage supply source, an external capacitor and a resistor, and uses a circuit capable of high-speed switching of a large number of resistors, a plurality of capacitors and a circuit current, Can be adjusted.

비록 도시되지는 않았지만, 상기 본 출원의 나노 복합체의 제조장치는 캐리어 기체 공급 시스템(carrier air supply system) 등의 기체 공급 장치와, 질량유량계(mass flow controller, MFC) 등의 유량계를 포함할 수 있다. 또한, 상기 기체 공급 장치 및 유량계에 의해 비활성 기체, 산소 또는 질소가 상기 도전성 로드 사이의 간격으로 정량적으로 공급될 수 있다.Although not shown, the apparatus for producing a nanocomposite of the present application may include a gas supply device such as a carrier air supply system, and a flow meter such as a mass flow controller (MFC) . In addition, inert gas, oxygen or nitrogen can be quantitatively supplied at intervals between the conductive rods by the gas supply device and the flow meter.

상기 도전성 로드에 고전압을 인가하면 스파크 방전에 의해 상기 일함수 6.0 eV 이하의 금속이 기화 또는 입자화되어 상기 도전성 로드 사이의 간격을 통해 흐르는 비활성 기체, 산소 및 질소로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 기체 흐름을 따라 상기 분무부로 유출될 수 있다. 예를 들어, 상기 방전부의 도전성 로드로 전압이 인가되면, 방전부의 한 쌍의 도전성 로드 사이의 간격에서 상기 금속이 기화되며, 비활성 기체 또는 질소 등의 캐리어 기체를 따라 이동한 기화된 금속은, 상기 간격을 벗어남에 따라, 응축되고, 이에 따라, 금속 나노입자가 형성된다.When a high voltage is applied to the conductive rod, the metal having a work function of 6.0 eV or less is vaporized or agglomerated by a spark discharge, and the inert gas flowing through the gap between the conductive rods, oxygen and nitrogen And may flow out to the atomizing portion along the gas flow. For example, when a voltage is applied to the conductive rod of the discharge unit, the metal is vaporized at a distance between a pair of conductive rods of the discharge unit, and an inert gas or a vaporized metal moved along a carrier gas such as nitrogen , And out of the interval, they are condensed, and thus metal nanoparticles are formed.

상기 방전부(11)로부터 생성되는 금속 나노입자의 입경은, 상기 비활성 기체 또는 질소의 유량 또는 유속에 따라, 수 나노미터 단위에서 수백 나노미터 단위로 광범위하게 조절될 수 있다. 예를 들어, 상기 공급되는 비활성 기체 또는 질소의 유량 또는 유속이 증가되는 경우, 상기 금속 나노입자의 농도가 감소됨에 따라 입자간의 응집현상 또한 감소하게 되며, 이러한 과정을 통해 금속 나노입자의 크기가 감소될 수 있다. 또한, 상기 금속 나노입자의 입경, 형상 및 밀도는, 인가전압, 주파수, 전류, 저항, 커패시턴스 값 등의 스파크 생성 조건; 상기 비활성 기체의 종류 및 유량; 또는 스파크 전극의 형상 등에 의해 변경될 수 있다.The particle diameter of the metal nanoparticles generated from the discharge part 11 can be widely controlled from several nanometers to hundreds of nanometers, depending on the flow rate or the flow rate of the inert gas or nitrogen. For example, when the flow rate or the flow rate of the supplied inert gas or nitrogen is increased, as the concentration of the metal nanoparticles decreases, the aggregation phenomenon between the particles also decreases. As a result, the size of the metal nanoparticles decreases . The particle size, shape, and density of the metal nanoparticles may be determined by spark generation conditions such as an applied voltage, a frequency, a current, a resistance, and a capacitance value; Type and flow rate of the inert gas; Or the shape of the spark electrode.

상기 비활성 기체로는 아르곤(Ar) 또는 헬륨(He) 등이 예시될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Examples of the inert gas include, but are not limited to, argon (Ar) or helium (He).

하나의 예시에서, 상기 나노 복합체의 제조 장치는 용액 생성부(12)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 용액 생성부(12)는 연속적으로 운영할 수 있다. 비록 도면에 도시되지는 않았지만, 상기 용액 생성부(12)는 폄프 및 교반기와 연결될 수 있다.In one example, the apparatus for producing the nanocomposite may further include a solution producing portion 12. [ The solution generating unit 12 can operate continuously. Although not shown in the drawing, the solution producing portion 12 can be connected to the pump and the stirrer.

상기 펌프는 용매 또는 하나 이상의 전구체를 용액 생성부(12)에 정량적으로 공급할 수 있다. 상기 펌프는 상기 용매 또는 하나 이상의 전구체를 연속적 또는 간헐적으로 공급할 수 있는 장치면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어, 정량펌프 또는 실린지 펌프일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The pump may quantitatively supply the solvent or one or more precursors to the solution producing portion 12. [ The pump is not particularly limited as long as it is a device capable of continuously or intermittently supplying the solvent or one or more precursors, and may be, for example, a metering pump or a syringe pump, but is not limited thereto.

상기 교반기는 상기 용매 또는 하나 이상의 전구체를 균일하게 혼합하여 용액을 제조할 수 있다. 상기 교반기는 교반이 가능한 장치면 특별히 제한되지 않으며, 교반 속도는 용매와 전구체 등의 종류, 점도 또는 함량에 따라 변경될 수 있고, 보다 균일한 교반을 위하여 초음파를 인가할 수도 있다.The agitator can prepare the solution by homogeneously mixing the solvent or the at least one precursor. The stirrer is not particularly limited as long as it is an apparatus capable of stirring, and the stirring speed may be changed according to the kind, viscosity or content of the solvent and the precursor, and ultrasonic waves may be applied for more uniform stirring.

상기 광 조사부(14)는, 상기 금속 나노 입자에 광을 조사하는 부분으로서, 상기 금속 나노 입자의 일함수보다 큰 광자 에너지를 가지는 광을 조사할 수 있다. 상기 광은 200 nm 이하 파장 범위의 자외선일 수 있다.The light irradiating unit 14 can irradiate light having photon energy larger than the work function of the metal nanoparticles as a portion for irradiating the metal nanoparticles with light. The light may be ultraviolet light in a wavelength range of 200 nm or less.

하나의 예시에서, 상기 광 조사부(14)는 상기 금속 나노 입자에 광을 조사하는 광원을 포함할 수 있다. 상기 광원의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 예를 들어, 금속의 일함수(work function)를 초과하는 광자 에너지를 보유하는 빛, 예를 들면, 200 nm 이하의 단파장을 가지는 빛을 조사할 수 있는 장치라면 제한 없이 사용 가능하다. 예를 들어, 고압 수은등, 초고압 수은등, 할로젠 램프, 블랙 라이트 램프, 마이크로파 여기 수은등, 각종 레이저 또는 X-선(X-ray) 등 공지된 광원이 이용될 수 있거나, 또는, 상온에서 비활성 기체의 흐름 중에 연 X-선(soft X-ray)의 조사를 통해 유사한 반응을 유도할 수도 있다. 200 nm 이하의 단파장을 가지는 빛을 조사할 수 있는 광원을 사용함으로써, 전이금속 나노 입자의 표면의 전자를 이탈시키고, 금속 표면의 전하를 양전하로 유도할 수 있다.In one example, the light irradiating unit 14 may include a light source for irradiating the metal nanoparticles with light. The type of the light source is not particularly limited. For example, light having a photon energy exceeding a work function of a metal, for example, a device capable of irradiating light having a short wavelength of 200 nm or less You can use it without limit. For example, a well-known light source such as a high-pressure mercury lamp, an ultra-high pressure mercury lamp, a halogen lamp, a black light lamp, a microwave-excited mercury lamp, various lasers or X-rays may be used, A similar reaction may be induced by irradiation of soft X-rays during the flow. By using a light source capable of irradiating light having a short wavelength of 200 nm or less, electrons on the surface of the transition metal nanoparticles can be released and the charge on the metal surface can be induced to a positive charge.

도 2는 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치 중 용매 제거부를 나타낸 도면이다.Fig. 2 is a view showing a solvent removing unit in an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application.

도 2에 도시된 바와 같이, 상기 용매 제거부(15)는, 상기 액적 이송부로부터 이송된 액적의 용매를 제거하기 위한 부분으로서, 상기 용매 제거부(15)를 통과하여 상기 나노 복합체를 포함하는 액적으로부터 용매를 제거할 수 있다.As shown in FIG. 2, the solvent removing unit 15 is a part for removing the solvent of droplets transferred from the droplet conveyance unit, and passes through the solvent removing unit 15 to remove droplets The solvent can be removed.

상기 용매 제거부(15)는 내부관(153) 및 관통 유로(152)를 포함할 수 있고, 내부에 흡착제(151)가 마련된 확산 건조기(diffusion dryer) 또는 디누더(denuder)일 수 있다.The solvent removing unit 15 may include an inner pipe 153 and a through passage 152 and may be a diffusion dryer or a denuder having an adsorbent 151 therein.

상기 액적이 상기 관통 유로(152)를 통과하면서 상기 나노 복합체의 용매가 추출될 수 있다. 상기 관통 유로(152)는 상기 흡착제(151)를 포함하는 복수 개의 내부관들(153) 사이에 형성될 수 있다. 상기 내부관(153)은 스테인레스 메쉬와 같이 하나 이상의 중공(hollow)을 가지고 내구성 및 내열성을 가지는 것이라면 제한되지 않는다. 상기 내부관(153) 내부에 마련된 상기 흡착제(151)는 흡수-흡착 방식의 추출층(extraction bed)이 충진되어 있을 수 있고, 예를 들어, 활성탄소, 실리카겔, 제올라이트 또는 활성 알루미나 등과 같이 상업적으로 이용 가능한 흡착제 중 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.And the solvent of the nanocomposite may be extracted while the droplet passes through the through passage 152. The through-flow passage 152 may be formed between a plurality of inner pipes 153 including the adsorbent 151. The inner tube 153 is not limited as long as it has one or more hollows, such as a stainless steel mesh, and has durability and heat resistance. The adsorbent 151 provided in the inner pipe 153 may be filled with an absorption bed of an absorption-adsorption type and may be commercially available as an activated carbon, silica gel, zeolite, activated alumina, or the like. But is not limited to, one or more of the available adsorbents.

비록 도면에 도시되지는 않았지만, 상기 용매 제거 수단으로, 추출 수단을 포함할 수 있고, 상기 추출 수단은 유입부 및 유출부를 포함하는 추출 로(Furnace)일 수 있으며, 추출 용매가 상기 유입부를 통해 추출 수단으로 유입될 수 있고, 상기 유출부로는 추출 용매에 의해 용매가 추출된 혼합물, 즉 용매가 추출된 나노 복합체가 배출될 수 있다.Although not shown in the drawing, the solvent removing means may include an extracting means, and the extracting means may be an extracting furnace including an inlet portion and an outlet portion, and the extraction solvent may be extracted through the inlet portion And the mixture in which the solvent is extracted by the extraction solvent, that is, the nanocomposite from which the solvent is extracted, may be discharged to the outlet.

하나의 예시에서, 상기 나노 복합체의 제조 장치는 액적 이송부(17)를 추가로 포함할 수 있다. 도 3은 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치의 전기장 인가부(18)가 형성되어 있는 액적 이송부(17)의 단면을 나타낸 도면이다.In one example, the apparatus for producing the nanocomposite may further include a droplet transfer unit 17. [ 3 is a cross-sectional view of a droplet transporting unit 17 in which an electric field applying unit 18 of an exemplary nanocomposite production apparatus of the present application is formed.

도 3에 도시된 바와 같이, 상기 용매 제거부(15)는 액적 이송부(17)를 추가로 포함할 수 있고, 상기 액적 이송부(17)는 전기장 인가부(18)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 전기장 인가부(18)는, 상기 용매 제거부(15)로부터 형성된 나노 복합체에 전기장을 인가하는 부분으로서, 상기 전기장 인가부(18)는 후술할 액적 이송부(17)의 중앙에서 가장자리 방향으로 전기장을 발생시키도록 탐침 또는 바늘과 같은 형태로 형성될 수 있고, 상기 전기장 인가부(18)가 형성되는 형태는 상기 액적 이송부(17)의 중앙에서 가장자리 방향으로 전기장을 발생시킬 수 있는 형태라면 제한되는 것은 아니다. 상기 전기장 인가부(18)에서 발생시키는 전기장의 세기는 -50 kV 내지 +50 kV일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 형성된 액적과 동일한 극성의 전기장을 상기 액적에 인가함으로써 액적의 응집을 방지할 수 있다.As shown in FIG. 3, the solvent removing unit 15 may further include a droplet transfer unit 17, and the droplet transfer unit 17 may further include an electric field application unit 18. The electric field applying unit 18 applies an electric field to the nanocomposite formed from the solvent removing unit 15 and the electric field applying unit 18 applies an electric field The shape in which the electric field applying unit 18 is formed is limited as long as it can generate an electric field in the edge direction from the center of the droplet transporting unit 17 It is not. The intensity of the electric field generated by the electric field applying unit 18 may be -50 kV to +50 kV, but is not limited thereto. An electric field having the same polarity as that of the formed droplet can be applied to the droplet to prevent agglomeration of the droplet.

상기 액적 이송부(17)는, 상기 용매 제거부(18)로부터 형성된 나노 복합체를 이송시키는 부분으로서, 형성된 나노 복합체를 후술할 수집부(16)로 이송시킬 수 있다.The droplet transporting unit 17 can transport the formed nanocomposite to the collecting unit 16, which will be described later, as a part for transporting the nanocomposite formed from the solvent remover 18.

도 4는 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치 중 수집부를 나타낸 도면이다. 도 4에 도시된 바와 같이, 상기 수집부(16)는 상기 용매 제거부(15)로부터 형성된 나노복합체를 수집하는 부분으로서, 상기 수집부(16)는 금속부 및 전압인가기를 포함할 수 있다.FIG. 4 is a view showing a collecting portion of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus of the present application. As shown in FIG. 4, the collecting portion 16 collects the nanocomposite formed from the solvent removing portion 15, and the collecting portion 16 may include a metal portion and a voltage inducing portion .

상기 수집부(16)의 금속부(161)는 나노 복합체와 정전기적으로 결합할 수 있고, 상기 금속부(161)는 판 또는 봉과 같은 형태일 수 있다.The metal portion 161 of the collector 16 may be electrostatically coupled to the nanocomposite and the metal portion 161 may be in the form of a plate or a rod.

상기 전압인가기(162)는 상기 금속부(161)에 연결되어 있을 수 있다. 상기 금속부(161)와 나노 복합체가 결합할 수 있도록 상기 금속부(161)에 전압을 인가할 수 있고, 상기 전압은 - 10 내지 + 10 kV일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 생성된 나노 복합체가 양전하를 띄는 경우, 음의 전압을 인가하고, 상기 나노 복합체가 음전하를 띄는 경우, 양의 전압을 인가함으로써 나노 복합체를 수집할 수 있다.The voltage source 162 may be connected to the metal part 161. A voltage may be applied to the metal part 161 so that the metal part 161 and the nanocomposite can be coupled to each other. The voltage may be -10 to +10 kV, but is not limited thereto. When the generated nanocomposite is positive, a negative voltage is applied. When the nanocomposite is negatively charged, a positive voltage may be applied to collect the nanocomposite.

본 출원은 또한, 나노 복합체의 제조 방법에 관한 것이다. 본 출원의 나노 복합체의 제조 방법은 전술한 나노 복합체의 제조 장치를 이용하여 수행될 수 있으며, 이에 따라, 상기 나노 복합체의 제조 장치에서 설명한 내용과 중복되는 내용은 생략하기로 한다. 예시적인 본 출원의 나노 복합체의 제조 방법에 의하면, 액적 형성 단계, 나노 구조체 형성 단계 및 나노 복합체 생성 단계를 포함한다.The present application also relates to a method for producing nanocomposites. The method of manufacturing the nanocomposite of the present application can be performed by using the above-described apparatus for producing a nanocomposite. Accordingly, the description of the method for manufacturing the nanocomposite will be omitted. Exemplary methods of making nanocomposites of the present application include droplet formation, nanostructure formation and nanocomposite generation.

상기 액적 형성 단계는, 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 분무부(13)에서 수행될 수 있으며, 하나의 예시에서, 상기 액적 형성 단계는 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 분무하는 것을 포함한다.The droplet forming step may be performed in the spraying part 13 of the above-described apparatus for producing a nanocomposite, and in one example, the droplet forming step may include a step of forming a droplet having an electron donating group or containing a negatively charged organic compound And spraying the solution and metal nanoparticle aggregates.

상기 전자 공여 그룹은 치환되거나 비치환될 수 있는 C1 내지 C24 알킬, 알콕시, 티오알콕시, 아민기, 이민기, 카르복실기, 인산기, 술폰산기 또는 이들의 조합을 의미하고, 화학 종에 대해 "치환된"은 바람직한 생성물 또는 방법을 방해하지 않는 기에 의해 치환된 것을 의미하며, 예를 들어 치환기는 알킬, 알콕시 등일 수 있다. 구체적으로, 상기 전자 공여 그룹은 -NR2, -NH2, -OH, -OR, -NHC(=O)R, -OC(=O)R, -R, -CH=CH2 및 -CH=CR2로 이루어진 그룹 선택되는 어느 하나를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The electron donating group refers to a substituted or unsubstituted C1 to C24 alkyl, alkoxy, thioalkoxy, amine group, imine, carboxyl, phosphate, sulfonate group or combination thereof, wherein " substituted " Substituted by a group that does not interfere with the desired product or method, for example the substituent may be alkyl, alkoxy, and the like. Specifically, the electron donating group is -NR 2, -NH 2, -OH, -OR, -NHC (= O) R, -OC (= O) R, -R, -CH = CH 2 and -CH = CR < 2 > and the like, but is not limited thereto.

상기 계면활성제는 양이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제일 수 있고, 구체적으로 비이온성 계면활성제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The surfactant may be a cationic surfactant, an anionic surfactant, an amphoteric surfactant, and a nonionic surfactant, and may be, but is not limited to, a nonionic surfactant.

상기 양이온성 계면활성제는 도데실 트리메틸 암모늄 브로마이드, 4급 암모늄 화합물, 벤즈알코늄 클로라이드, 세틸트리메틸암모늄 브로마이드, 키토산, 라우릴디메틸벤질암모늄 클로라이드, 아실 카르니틴 히드로클로라이드, 알킬피리디늄 할라이드, 세틸 피리디늄 클로라이드, 양이온성 지질, 폴리메틸메타크릴레이트 트리메틸암모늄 브로마이드, 술포늄 화합물, 폴리비닐피롤리돈-2-디메틸아미노에틸 메타크릴레이트 디메틸 술페이트, 헥사데실트리메틸 암모늄 브로마이드, 포스포늄 화합물, 4급 암모늄 화합물, 벤질-디(2-클로로에틸)에틸암모늄 브로마이드, 코코넛 트리메틸 암모늄 클로라이드, 코코넛 트리메틸 암모늄 브로마이드, 코코넛 메틸 디히드록시에틸 암모늄 클로라이드, 코코넛 메틸 디히드록시에틸 암모늄 브로마이드, 데실 트리에틸 암모늄 클로라이드, 데실 디메틸 히드록시에틸 암모늄 클로라이드, 데실 디메틸 히드록시에틸 암모늄 클로라이드 브로마이드, (C12-15)디메틸 히드록시에틸 암모늄 클로라이드, (C12-15)디메틸 히드록시에틸 암모늄 클로라이드 브로마이드, 코코넛 디메틸 히드록시에틸 암모늄 클로라이드, 코코넛 디메틸 히드록시에틸 암모늄 브로마이드, 미리스틸 트리메틸 암모늄 메틸술페이트, 라우릴 디메틸 벤질 암모늄 클로라이드, 라우릴 디메틸 벤질 암모늄 브로마이드, 라우릴 디메틸 (에테녹시)4 암모늄 클로라이드, 라우릴 디메틸 (에테녹시)4 암모늄 브로마이드, N-알킬 (C12-18)디메틸벤질 암모늄 클로라이드, N-알킬 (C14-18)디메틸-벤질 암모늄 클로라이드, N-테트라데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드 일수화물, 디메틸 디데실 암모늄 클로라이드, 트리메틸암모늄 할라이드 알킬-트리메틸암모늄 염, 디알킬-디메틸암모늄 염, 라우릴 트리메틸 암모늄 클로라이드, 에톡실화 알킬아미도알킬디알킬암모늄 염, 에톡실화 트리알킬 암모늄 염, 디알킬벤젠 디알킬암모늄 클로라이드, N-디데실디메틸 암모늄 클로라이드, N-테트라데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드 일수화물, N-알킬(C12-14) 디메틸 1-나프틸메틸 암모늄 클로라이드, 도데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드, 디알킬 벤젠알킬 암모늄클로라이드, 라우릴 트리메틸 암모늄 클로라이드, 알킬벤질 메틸 암모늄 클로라이드, 알킬 벤질 디메틸 암모늄브로마이드, C12 트리메틸 암모늄 브로마이드, C15 트리메틸 암모늄 브로마이드, C17 트리메틸 암모늄 브로마이드, 도데실벤질 트리에틸 암모늄 클로라이드, 폴리디알릴디메틸암모늄 클로라이드, 디메틸 암모늄 클로라이드, 알킬디메틸암모늄 할로게니드, 트리세틸 메틸 암모늄 클로라이드, 데실트리메틸암모늄 브로마이드, 도데실트리에틸암모늄 브로마이드, 테트라데실트리메틸암모늄 브로마이드, 메틸 트리옥틸암모늄 클로라이드, 폴리쿼트(POLYQUAT) 10, 테트라부틸암모늄 브로마이드, 벤질 트리메틸암모늄 브로마이드, 콜린 에스테르, 벤즈알코늄 클로라이드, 스테아르알코늄 클로라이드, 세틸 피리디늄 브로마이드, 세틸 피리디늄 클로라이드, 4급화 폴리옥시에틸알킬아민의 할라이드 염, 미라폴(MIRAPOL), 알카쿼트(Alkaquat), 알킬 피리디늄 염, 아민, 아민 염, 이미드 아졸리늄 염, 양성자화 4급 아크릴아미드, 메틸화 4급 중합체, 양이온성 구아 검, 벤즈알코늄 클로라이드, 트리에탄올아민 및 폴옥사민으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The cationic surfactant is selected from the group consisting of dodecyltrimethylammonium bromide, quaternary ammonium compound, benzalkonium chloride, cetyltrimethylammonium bromide, chitosan, lauryldimethylbenzylammonium chloride, acylcarnitine hydrochloride, alkylpyridinium halide, cetylpyridinium chloride , Cationic lipids, polymethylmethacrylate trimethylammonium bromide, sulfonium compounds, polyvinylpyrrolidone-2-dimethylaminoethyl methacrylate dimethyl sulfate, hexadecyltrimethylammonium bromide, phosphonium compounds, quaternary ammonium compounds , Benzyl-di (2-chloroethyl) ethylammonium bromide, coconut trimethyl ammonium chloride, coconut trimethyl ammonium bromide, coconut methyl dihydroxyethyl ammonium chloride, coconut methyl dihydroxyethyl ammonium bromide, Ammonium chloride, decyl dimethylhydroxyethylammonium chloride, decyldimethylhydroxyethylammonium chloride bromide, (C12-15) dimethylhydroxyethylammonium chloride, (C12-15) dimethylhydroxyethylammonium chloride bromide, coconut dimethylhydroxyethyl Ammonium chloride, coconut dimethylhydroxyethylammonium bromide, myristyltrimethylammonium methylsulfate, lauryldimethylbenzylammonium chloride, lauryldimethylbenzylammonium bromide, lauryldimethyl (ethenoxy) 4ammonium chloride, lauryldimethyl (C12-18) dimethylbenzylammonium chloride, N-alkyl (C14-18) dimethyl-benzylammonium chloride, N-tetradecyldimethylbenzylammonium chloride monohydrate, dimethyldecylammonium chloride , Trimethylammonium Dialkyldimethylammonium salts, lauryltrimethylammonium chloride, ethoxylated alkylamidoalkyldialkylammonium salts, ethoxylated trialkylammonium salts, dialkylbenzene dialkylammonium chlorides, N-dodecyl (C12-14) dimethyl 1-naphthylmethylammonium chloride, dodecyldimethylbenzylammonium chloride, dialkylbenzenealkylammonium chloride, lauryltrimethylammonium chloride, dimethylammonium chloride, dimethylammonium chloride, N-tetradecyldimethylbenzylammonium chloride monohydrate, Alkylbenzyldimethylammonium chloride, alkylbenzyldimethylammonium bromide, C12 trimethylammonium bromide, C15 trimethylammonium bromide, C17 trimethylammonium bromide, dodecylbenzyltriethylammonium chloride, polydiallyldimethylammonium chloride, dimethylammonium chloride, Alkyltrimethylammonium bromide, tetradecyltrimethylammonium bromide, methyltrioctylammonium chloride, POLYQUAT 10, tetrabutylammonium bromide, benzyltrimethylammonium bromide, tetradecyltrimethylammonium bromide, tetradecyltrimethylammonium bromide, But are not limited to, trimethylammonium bromide, choline ester, benzalkonium chloride, stearalkonium chloride, cetylpyridinium bromide, cetylpyridinium chloride, halide salts of quaternized polyoxyethylalkylamine, MIRAPOL, Alkaquat, From the group consisting of alkylpyridinium salts, amines, amine salts, imidazolinium salts, protonated quaternary acrylamides, methylated quaternary polymers, cationic guar gum, benzalkonium chloride, triethanolamine and polyoxamine. May be one or more selected, but limited thereto It is not.

상기 음이온성 계면활성제는 칼륨 라우레이트, 트리에탄올아민 스테아레이트, 나트륨 라우릴 술페이트, 나트륨 도데실술페이트, 알킬 폴리옥시에틸렌 술페이트, 나트륨 알기네이트, 디옥틸 나트륨 술포숙시네이트, 포스파티딜 글리세롤, 포스파티딜 이노시톨, 포스파티딜세린, 포스파티드산 또는 그의 염, 글리세릴 에스테르, 나트륨 카르복시메틸셀룰로즈, 담즙산 또는 그의 염, 콜산, 데옥시콜산, 글리코콜산, 타우로콜산, 글리코데옥시콜산, 알킬 술포네이트, 아릴 술포네이트, 알킬 포스페이트, 알킬 포스포네이트, 스테아르산 또는 그의 염, 칼슘 스테아레이트, 포스페이트, 카르복시메틸셀룰로스 나트륨, 디옥틸술포숙시네이트, 나트륨 술포숙신산의 디알킬에스테르, 인지질 및 칼슘 카르복시메틸셀룰로즈로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The anionic surfactant may be selected from the group consisting of potassium laurate, triethanolamine stearate, sodium lauryl sulfate, sodium dodecyl sulfate, alkyl polyoxyethylene sulfate, sodium alginate, dioctyl sodium sulfosuccinate, phosphatidyl glycerol, phosphatidylinositol , Phosphatidylserine, phosphatidic acid or a salt thereof, glyceryl ester, sodium carboxymethylcellulose, bile acid or a salt thereof, cholic acid, deoxycholic acid, glycocholic acid, taurocholic acid, glycodeoxycholic acid, alkylsulfonate, arylsulfonate , Alkyl phosphates, alkyl phosphonates, stearic acid or its salts, calcium stearate, phosphates, carboxymethyl cellulose sodium, dioctyl sulfosuccinate, dialkyl esters of sodium sulfosuccinic acid, phospholipids and calcium carboxymethyl cellulose ≪ / RTI > But is not limited thereto.

상기 비이온성 계면활성제는 트리톤계, SPAN 60, 폴리옥시에틸렌 지방(fatty) 알코올 에테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 알킬에테르, 폴리옥시에틸렌 피마 자유 유도체, 소르비탄 에스테르, 글리세릴 에스테르, 글리세롤 모노스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜, 폴리프로필렌 글리콜 에스테르, 세틸 알코올, 세토스테아릴 알코올, 스테아릴 알코올, 아릴알킬폴리에테르 알코올, 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌 공중합체, 폴록사머, 폴락사민, 메틸셀룰로즈, 히드록시셀룰로즈, 히드록시메틸셀룰로스, 히드록시에틸셀룰로스, 히드록시 프로필셀룰로즈, 히드록시프로필메틸셀룰로즈, 히드록시프로필메틸셀룰로스 프탈레이트, 비결정성 셀룰로즈, 다당류, 전분, 전분 유도체, 히드록시에틸 전분, 폴리비닐 알코올, 트리에탄올아민 스테아레이트, 아민 옥시드, 덱스트란, 글리세롤, 아카시아 검, 콜레스테롤, 트래거캔스, 및 폴리비닐피롤리돈으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있고, 구체적으로 트리톤계일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The nonionic surfactant may be selected from the group consisting of triton series, SPAN 60, polyoxyethylene fatty alcohol ethers, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, polyoxyethylene fatty acid esters, polyoxyethylene alkyl ethers, polyoxyethylene castor oil derivatives, Polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, polyoxyethylene polyoxypropylene copolymers, Hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, amorphous cellulose, polysaccharides, starch, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylcellulose, Starch And may be at least one selected from the group consisting of hydroxyethyl starch, polyvinyl alcohol, triethanolamine stearate, amine oxide, dextran, glycerol, acacia gum, cholesterol, tragacanth, and polyvinylpyrrolidone , But it is not limited thereto.

상기 약물은 항암제일 수 있고, 상기 항암제의 종류로는 예를 들어, 독소루비신(doxorubicin), 파클리탁셀(paclitaxel), 빈크리스틴(vincristine), 다우노루비신(daunorubicin), 빈블라스틴(vinblastine), 액티노마이신-D(actinomycin-D), 도세탁셀(docetaxel), 에토포사이드(etoposide), 테니포사이드(teniposide), 비산트렌(bisantrene), 이마티닙(imatinib), 시스플라틴(cisplatin), 5-플루오로우라실(5-fluorouracil), 아드리아마이신(adriamycin), 메토트렉세이트(methotrexate), 부설판(busulfan), 클로람부실(chlorambucil), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 멜팔란(melphalan), 저분자 약물 (small molecule drugs), 니트로겐 머스터드(nitrogen mustard) 및 니트로소우레아(nitrosourea)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The drug may be an anti-cancer agent, and examples of the anti-cancer agent include doxorubicin, paclitaxel, vincristine, daunorubicin, vinblastine, But are not limited to, actinomycin-D, docetaxel, etoposide, teniposide, bisantrene, imatinib, cisplatin, 5-fluorouracil (5- fluorouracil, adriamycin, methotrexate, busulfan, chlorambucil, cyclophosphamide, melphalan, small molecule drugs, nitro But are not limited to, one or more selected from the group consisting of nitrogen mustard and nitrosourea.

상기 약물은 분산액에 분산되어 있을 수 있고, 상기 분산액은 인체에 유해하지 않는 것이라면 가능하며, 생리식염수, 인산염 완충 식염수(PBS), 소 혈청 알부민(bovine serum albumin), 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS), 디클로로메탄, 디메틸설폭사이드 또는 에탄올 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The drug may be dispersed in a dispersion, and the dispersion may be any one that is not harmful to the human body, and may be physiological saline, phosphate buffered saline (PBS), bovine serum albumin, fetal bovine serum, FBS), dichloromethane, dimethylsulfoxide or ethanol, but the present invention is not limited thereto.

상기 약물은 용매 1 mL 당 0.1 mg 내지 3 mg으로 공급될 수 있으며, 예를 들어, 0.3 mg 내지 2.5 mg, 0.6 mg 내지 2 mg 또는 0.9 mg 내지 1.5 mg일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 질병을 가지고 있는 환자의 상태에 따라 전술한 범위 내에서 알맞게 공급될 수 있다.The drug may be supplied at a dose of 0.1 mg to 3 mg per mL of solvent, for example, but may be, but is not limited to, 0.3 mg to 2.5 mg, 0.6 mg to 2 mg or 0.9 mg to 1.5 mg, It can be suitably supplied within the above-described range according to the condition of the patient having the patient.

상기 금속 나노 입자는 일 함수가 2.0 eV 이상인 금속을 포함할 수 있고, 예를 들어, 3.0 eV 이상, 4.0 eV이상, 4.6 eV 이상 또는 5.0 eV 이상의 일함수를 가질 수 있으나, 특별히 제한되는 것은 아니다. 상기 금속 나노 입자의 일 함수를 전술한 범위로 제어함으로써, 상기 금속 나노 입자의 일 함수 이상의 광자 에너지를 보유하는 빛, 예를 들면, 자외선 등의 200 nm 이하의 단파장을 가지는 빛의 조사에 의해 상기 금속 표면의 전자를 이탈시키고, 금속 표면의 전하를 양전하로 유도할 수 있다. 또한, 200 nm 이하의 단파장을 가지는 자외선 조사 시에, 상기 계면활성제와 약물이 결합한 그룹의 음이온이 상기 양전하로 유도된 금속 나노 입자와 전기화학적으로 결합하며, 이에 따라, 정전기적으로 이온화된 금속 나노 입자에 유기기가 부착된 구조의 본 출원의 나노 입자를 자외선의 조사 등의 간단한 공정을 통해 형성할 수 있다. 본 출원에서 용어 「전기화학적 결합」은 공유결합, 이온결합 또는 물리적 흡착에 의한 결합을 의미한다.The metal nanoparticle may include a metal having a work function of 2.0 eV or more and may have a work function of, for example, 3.0 eV or more, 4.0 eV or more, 4.6 eV or 5.0 eV or more, but is not particularly limited. By controlling the work function of the metal nanoparticles in the above-mentioned range, light having a photon energy above the work function of the metal nanoparticles, for example, light having a short wavelength of 200 nm or less, such as ultraviolet light, The electrons on the metal surface can be released and the charge on the metal surface can be induced to the positive charge. When an ultraviolet ray having a short wavelength of 200 nm or less is irradiated, the anion of the group in which the surfactant and the drug are bound is electrochemically bound to the positively-charged metal nanoparticle, and thus the electrostatically ionized metal nano- The nanoparticles of the present invention having a structure in which an organic group is attached to the particles can be formed through a simple process such as irradiation with ultraviolet rays. The term " electrochemical coupling " as used herein means covalent bonding, ionic bonding, or bonding by physical adsorption.

상기 금속 나노 입자는 예를 들어, 금, 은, 철, 백금, 구리, 아연, 주석, 루테늄, 로듐, 가돌리늄, 디스프로슘, 망간, 티타늄, 팔라듐 및 크롬으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상일 수 있고, 구체적으로 금일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The metal nanoparticles may be at least one selected from the group consisting of gold, silver, iron, platinum, copper, zinc, tin, ruthenium, rhodium, gadolinium, dysprosium, manganese, titanium, palladium and chromium, But is not limited thereto.

상기 나노 구조체 형성 단계는, 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 광 조사부(14)에서 수행될 수 있으며, 하나의 예시에서, 상기 나노 구조체 형성 단계는, 상기 액적 형성 단계에서 형성된 액적에 광을 조사함으로써 상기 금속 나노 입자와 유기물을 재배열시켜 나노 구조체를 형성할 수 있다.The nanostructure forming step may be performed in the light irradiation part 14 of the nanocomposite manufacturing apparatus described above. In one example, the nanostructure forming step may include a step of irradiating a liquid droplet formed in the droplet forming step The metal nanoparticles and the organic materials may be rearranged to form a nanostructure.

상기 나노 복합체 생성 단계는, 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 용매 제거부(15)에서 수행될 수 있으며, 하나의 예시에서, 상기 나노 복합체 생성 단계는, 상기 나노 구조체 형성 단계에서 형성된 나노 구조체로부터 용매를 제거하여 나노 복합체를 생성할 수 있다.The nanocomposite forming step may be performed in the solvent removing unit 15 of the nanocomposite manufacturing apparatus described above. In one example, the nanocomposite forming step may include a step of forming a nanocomposite from the nanocomposite formed in the nanocomposite forming step Can be removed to produce a nanocomposite.

하나의 예시에서, 상기 본 출원의 나노 복합체의 제조 방법은, 나노 복합체 수집 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 나노 복합체 수집 단계는, 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 수집부(16)에서 수행될 수 있으며, 하나의 예시에서, 상기 나노 복합체 수집 단계는, 나노 복합체를 생성하는 단계 후에, 생성된 나노 복합체와 반대 극성의 전기장을 가하여 나노 복합체를 수집할 수 있다.In one example, the method of producing a nanocomposite of the present application may further comprise a nanocomposite collecting step. The nanocomposite collecting step may be performed in the collecting unit 16 of the apparatus for producing a nanocomposite as described above. In one example, the nanocomposite collecting step includes, after the step of producing the nanocomposite, Lt; RTI ID = 0.0 > polar < / RTI >

하나의 예시에서, 상기 본 출원의 나노 복합체의 제조 방법은, 상기 수집된 나노 복합체를 분산액에 분산시키는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 상기 수집된 나노 복합체를 분산시키는 단계는, 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 분산 장치에서 수행될 수 있으며, 상기 분산액은 인체에 유해하지 않는 것이라면 가능하며, 생리식염수, 인산염 완충 식염수(PBS), 소 혈청 알부민(bovine serum albumin), 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS), 디클로로메탄, 디메틸설폭사이드 또는 에탄올 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In one example, the method of producing a nanocomposite of the present application may further comprise dispersing the collected nanocomposite in a dispersion. The step of dispersing the collected nanocomposite may be performed in a dispersing device of the apparatus for producing a nanocomposite as described above. The dispersion may be any material that is not harmful to human body, and may be physiological saline, phosphate buffered saline (PBS) But are not limited to, bovine serum albumin, fetal bovine serum (FBS), dichloromethane, dimethylsulfoxide or ethanol.

본 출원은 또한, 나노 복합체에 관한 것이다. 본 출원의 나노 복합체는 전술한 나노 복합체의 제조 장치 및 나노 복합체의 제조 방법을 이용하여 수행될 수 있으며, 이에 따라, 상기 나노 복합체의 제조 장치 및 나노 복합체의 제조 방법에서 설명한 내용과 중복되는 내용은 생략하기로 한다.The present application also relates to nanocomposites. The nanocomposite of the present application can be performed by using the apparatus for producing a nanocomposite and the method for producing a nanocomposite as described above, It will be omitted.

예시적인 본 출원의 나노 복합체에 의하면, 다수의 금속 나노 입자 및 전자 공여 그룹을 가지는 유기물을 포함할 수 있다.According to exemplary nanocomposites of the present application, a plurality of metal nanoparticles and an organic substance having an electron donating group may be contained.

상기 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물은 계면활성제, 지질, 약물 또는 이들의 혼합물일 수 있고, 상기 유기물은 금속 나노 입자 사이에 정전기적으로 배열되어 있을 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The organics with or without electron donating groups may be surfactants, lipids, drugs or mixtures thereof, and the organics may be electrostatically arranged between metal nanoparticles, but are not limited thereto .

본 출원의 또 다른 구현예인 나노 복합체는 전술한 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 나노 복합체에서 설명한 내용과 중복되는 내용은 생략하기로 한다.The nanocomposite, which is another embodiment of the present application, will not be described in conjunction with the above-described apparatus for producing a nanocomposite, the method for producing a nanocomposite, and the content described in the nanocomposite.

본 출원의 또 다른 구현예인 나노 복합체에 따르면, 다수의 금(Au) 나노 입자, 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 계면활성제, 및 약물을 포함할 수 있고, 상기 전자 공여 그룹을 가지는 계면활성제 및 약물이 금속 나노 입자 사이에 정전기적으로 배열되어 있을 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.According to another embodiment of the present invention, the nanocomposite may include a plurality of gold (Au) nanoparticles, an electron donating group or a negatively charged surfactant, and a drug, and the interface The active agent and the drug may be electrostatically arranged between the metal nanoparticles, but are not limited thereto.

본 출원의 상기 나노 복합체에서 용어 「나노」는 나노 미터(nm) 단위의 크기를 의미할 수 있고, 예를 들어, 1 내지 1,000 nm의 크기를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 본 명세서에서 용어 「나노 입자」는 나노 미터(nm) 단위의 평균 입경을 갖는 입자를 의미할 수 있고, 예를 들어, 20 내지 200 nm의 평균입경을 갖는 입자를 의미할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The term " nano " in the nanocomposite of the present application may refer to a size in nanometers (nm), for example, but may not be limited to a size of 1 to 1,000 nm. As used herein, the term " nanoparticle " may mean particles having an average particle diameter in nanometers (nm), for example, particles having an average particle diameter of 20 to 200 nm, But is not limited to.

상기 나노 복합체는 디-스페이스(d-space) 값을 가질 수 있고, 본 출원에서 용어 「디-스페이스」는 상가 나노 복합체의 결정면 사이의 간격을 의미할 수 있다. 상기 디-스페이스는 고해상도 투과전자현미경(HR-TEM)으로 측정할 수 있고, 상기 디-스페이스 값은 0.20 내지 0.50 nm, 0.25 내지 0.40 nm 또는 0.27 내지 0.29 nm일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 광 조사부에서 상기 분무부로부터 형성된 액적에 광을 조사함에 따라 상기 나노 구조체를 형성하는 경우, 상기 나노 복합체의 디-스페이스 값이 상기 금속 나노 입자의 디-스페이스 값보다 증가하는 방향으로 재배열이 일어날 수 있다.The nanocomposite may have a d-space value, and the term " di-space " in the present application may mean an interval between crystal faces of the noble metal nanocomposite. The de-space can be measured by a high-resolution transmission electron microscope (HR-TEM), and the de-space value can be 0.20 to 0.50 nm, 0.25 to 0.40 nm or 0.27 to 0.29 nm, but is not limited thereto. In the case where the nanostructure is formed by irradiating light onto a liquid droplet formed from the atomizing unit in the light irradiation unit of the apparatus for producing a nanocomposite, the de-space value of the nanocomposite is larger than the de-space value of the metal nanoparticle Rearrangement can occur in an increasing direction.

상기 나노 복합체는 자외선-가시광선 분광기(UV-vis spectroscopy)로 측정하였을 경우, 광대역 흡수 피크를 가질 수 있고, 전술한 나노 복합체의 제조 장치의 광 조사부에서 광을 조사함에 따라 상기 금속 나노 입자와 상기 계면활성제가 반응하여 상기 계면활성제 단독보다 높은 광대역 흡수 피크를 나타낼 수 있다. 상기 광대역 흡수 피크의 범위는 350 내지 1,000 nm의 파장일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The nanocomposite may have a broadband absorption peak when measured by ultraviolet-visible spectroscopy. When the nanocomposite is irradiated with light by a light irradiation unit of the apparatus for producing a nanocomposite, The surfactant may react and exhibit a broadband absorption peak higher than that of the surfactant alone. The broadband absorption peak may range from 350 to 1,000 nm, but is not limited thereto.

전술한 나노 복합체의 약물의 농도(함량)는 특별히 한정되지 않으며, 예를 들면, 1 내지 50 w/w%일 수 있다. 상기 약물의 농도가 1 w/w% 미만이면 약물 공급이 충분하지 않을 수 있고, 50 w/w% 초과하면 부작용을 유발시킬 수 있는 고농도 공급이 될 수 있다.The concentration (content) of the drug of the aforementioned nanocomposite is not particularly limited, and may be, for example, 1 to 50 w / w%. If the concentration of the drug is less than 1 w / w%, the drug supply may not be sufficient, and if it is more than 50 w / w%, it may be a high concentration supply which may cause side effects.

이하 실시예 및 비교예를 통하여 상기 기술한 내용을 보다 구체적으로 설명하지만, 본 출원의 범위가 하기 제시된 내용에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Comparative Examples. However, the scope of the present application is not limited by the following description.

실시예 1Example 1

금으로 이루어진 한쌍의 전극 로드를 이용하여 금 나노 소재를 제조하였다. 상기 금 나노 소재를 제조하기 위한 구체적인 조건은 하기와 같다. 금(Au-172561)으로 이루어진 한쌍의 전극 로드가 구비된 방전부에 공기를 주입시켰다. 질량유량계(MFC; Tylan, USA)를 통하여 상기 공기의 유량을 0.9L/min로 제어하였다. 상기 전극 로드의 길이는 100 mm, 직경은 8 mm이었고, 전극의 간격은 1 mm이었다. 상기 전극에 전압 3.4kV(저항 0.5 MΩ, 전기 용량 4.7 nF, 전류 2.8 mA 및 주파수 580 Hz)를 인가하여 금 덩어리(Au agglomerates, Au AG)를 제조하였다.A gold nano material was fabricated using a pair of electrode rods made of gold. Specific conditions for producing the gold nanomaterial are as follows. Air was injected into a discharge portion provided with a pair of electrode rods made of gold (Au-172561). The flow rate of the air was controlled at 0.9 L / min through a mass flow meter (MFC; Tylan, USA). The length of the electrode rod was 100 mm, the diameter was 8 mm, and the interval between the electrodes was 1 mm. A gold agglomerate (Au AG) was prepared by applying a voltage of 3.4 kV (a resistance of 0.5 M ?, a capacitance of 4.7 nF, a current of 2.8 mA and a frequency of 580 Hz) to the electrode.

트리톤 X-100(Triton X-100, T) 및 독소루비신(DOX, D)를 함유하는 용액을 콜리슨 분무기에 주입하고 질소 가스(99.999% purity; 3 L/min)를 이용하여 상기 용액을 연속적으로 운반한다. 분무기로부터 하이브리드 방울을 7.8 초 동안 185 nm 파장으로 광 조사(E = 6.2 eV, I = 0.14 J m-2 s-1; 3SC-9-A0, UVP, UK)시켜 Au AG 내의 1차 금 입자(일함수, 5.1 eV)로부터 전자를 방출시켰다. 양극으로 충전된 Au의 표면은 TD에서 음으로 대전된 그룹과 정전기적으로 공액 결합하여 TAuD 나노 복합체를 형성할 수 있는 Au AG의 재조립을 유도한다.A solution containing Triton X-100 (Triton X-100, T) and doxorubicin (DOX, D) was injected into the colison sprayer and the solution was continuously transported using nitrogen gas (99.999% purity; 3 L / min) do. The hybrid droplets from the sprayer were irradiated with a 185 nm wavelength for 7.8 seconds (E = 6.2 eV, I = 0.14 Jm-2 s-1; 3SC-9-A0, UVP, UK) E., A work function, 5.1 eV). The surface of the Au-filled Au is electrostatically conjugated to the negatively charged group in TD to induce reassembly of Au AG, which can form the TAuD nanocomposite.

하이브리드 물방울은 실리카 겔 및 펠렛형 활성탄을 5 : 5의 질량비율로 혼합한 드누더(denuder)를 통과함으로써 용매를 추출하였다. 나노 복합체는 전기장 형성 구성(핀(+4 kV)-링(접지))에서 기체 양이온으로 충전된 후, 정전기적 인력을 통해 전기장(-2.7 kV/cm) 하에서 연마된 알루미늄 막대를 이용하여 수집하였다.The solvent was extracted by passing the hybrid droplets through a denuder obtained by mixing silica gel and pelleted activated carbon at a mass ratio of 5: 5. The nanocomposites were filled with gaseous cations in an electric field forming configuration (pin (+4 kV) - ring (ground)) and then collected using an abraded aluminum rod under an electric field (-2.7 kV / cm) through electrostatic attraction .

상기 알루미늄 수집 막대를 40 kHz로 5분 동안 초음파 처리하여 인산염 완충 식염수(PBS, pH 7.4)에 담그고 로드에서 나노 복합체를 방출하여 바이오 분석에 사용된 나노 복합체 분산액을 형성하였다.The aluminum collection rod was sonicated at 40 kHz for 5 minutes, soaked in phosphate buffered saline (PBS, pH 7.4), and the nanocomposite was released from the rod to form the nanocomposite dispersion used for the bioassay.

비교예 1Comparative Example 1

실시예 1에서 독소루비신을 결합하지 않은 것을 제외하고 동일하게 제조하였다.Was prepared in the same manner except that doxorubicin was not bound in Example 1.

비교예 2Comparative Example 2

실시예 1에서 트리톤 X-100을 결합하지 않은 것을 제외하고 동일하게 제조하였다.Was prepared in the same manner except that Triton X-100 was not bound in Example 1.

비교예 3Comparative Example 3

실시예 1에서 Au AG를 결합하지 않은 것을 제외하고 동일하게 제조하였다.Except that Au AG was not bound in Example 1.

실험예 1 - 나노 복합체의 입자 특성 분석EXPERIMENTAL EXAMPLE 1 - Analysis of particle characteristics of nanocomposite

도 5는 본 출원의 예시적인 나노 복합체의 제조 장치, 나노 복합체의 제조 방법 및 이를 이용하여 제조한 나노 복합체를 모식적으로 나타낸 도면이다. 액적유동(flowing drop; FD) 반응을 통하여 하이브리드 물방울을 형성한 것은 denuder에서 용매 추출 전에 스캐닝 이동도 입자 사이저(SMPS, 3936, TSI, USA)를 사용하여 Au AGs, TD 물방울 및 나노 복합체(하이브리드 물방울)의 크기 분포를 측정하였다. 제조한 TAuD 나노 복합체, Au AG 및 TD의 크기 분포는 Au AG와 TD 사이의 정량적 상호 작용을 확인하기 위해 SMPS (3936, TSI, USA)를 사용하여 결정되었다. SMPS 측정을 위한 샘플링 및 외장의 유속은 각각 0.1 및 1.0 L/min이었고, 스캔 시간은 135 초였다. PBS에 분산된 TAuD 나노 복합체의 크기 분포를 측정하기 위해 동적광산란법(dynamic light scattering, DLS; Nano-ZS, Malvern Instruments, UK)을 이용하였다.FIG. 5 is a schematic view of an exemplary nanocomposite manufacturing apparatus, a method of manufacturing a nanocomposite, and a nanocomposite manufactured using the same according to the present application. Hybrid droplets were formed through droplet flow (FD) reaction using a scanning mobility particle sizer (SMPS, 3936, TSI, USA) prior to solvent extraction in a denuder to produce Au AGs, TD droplets and nanocomposites Water droplets) were measured. The size distribution of the fabricated TAuD nanocomposites, Au AG and TD was determined using SMPS (3936, TSI, USA) to confirm the quantitative interaction between Au AG and TD. The sampling and enclosure flow rates for SMPS measurements were 0.1 and 1.0 L / min, respectively, and the scan time was 135 seconds. Dynamic light scattering (DLS; Nano-ZS, Malvern Instruments, UK) was used to measure the size distribution of TAuD nanocomposites dispersed in PBS.

Au AG는 압축 질소 가스가 흐르는 상태에서 1차 Au 입자의 브라운 운동(열 충돌 거동)에 의해 형성되었다. TD 방울은 또 다른 압축된 질소 가스를 주입함으로써 콜리슨 분무 장치에 의해 에탄올 TD 용액을 생성하였다. 하이브리드 물방울은 Au AG 함유 기체 흐름을 동작 유체로서 콜리슨 분무 장치 내로 직접 주입하여 제조되었으며, 여기서 AG는 하이브리드 물방울로 분무되도록 TD 용액에 혼입된다. 하이브리드 액적을 185 nm UV 조사 하에 관형 반응기로 향하게 하였다.Au AG was formed by Brownian motion (thermal collision behavior) of the primary Au particles under the condition of compressed nitrogen gas. The TD droplet produced an ethanol TD solution by means of a colison sprayer by injecting another compressed nitrogen gas. The hybrid droplets were prepared by direct injection of a Au AG-containing gas stream as a working fluid into a colison sprayer where the AG is incorporated into the TD solution to be sprayed with the hybrid droplets. The hybrid droplet was directed to the tubular reactor under 185 nm UV irradiation.

도 6은 확산 건조기를 통한 용매 추출 전에 185 nm UV 조사 하에서 Au AG(Au 막대의 스파크 용발), TD 액적(에탄올에 용해된 TD) 및 하이브리드 액적(Au AG를 포함하는 TD 액적)의 크기 분포도이다. 분포의 요약은 하기 표 1에 도시하였다.FIG. 6 is a size distribution diagram of Au AG (spark discharge of Au rod), TD droplet (TD dissolved in ethanol) and hybrid droplet (TD droplet including Au AG) under 185 nm UV irradiation before solvent extraction through a diffusion drier . A summary of the distribution is shown in Table 1 below.

MPS를 사용하여 측정한 AG, TD 및 하이브리드 액적의 크기 분포를 도 6에 도시하였다. 결과는 기하 평균 직경(GMD), 기하 표준 편차(GSD) 및 총 수 농도(TNC)로 표시하였다. AG와 TD의 경우에는 유의한 차이가 있었지만 하이브리드 물방울의 크기 또한 각각의 AG와 TD의 경우와 비슷한 단일 형태(AG와 TD의 분포 사이에 위치)를 나타냈다. 이 결과는 분무 과정에서 거의 모든 입자가 입자 방울 내에 포함되었다는 것을 의미한다. 따라서, 이 생성물은 후속의 FD 반응에 사용하기에 적합하였다. 흥미롭게도, 하이브리드 방울의 GSD는 TD 방울의 GSD보다 현저히 낮았으며 이는 분열화하는 동안 AG의 조각을 포함하여 광 조사 하에 TD 성분 (개재 및 후속 접합) AG와의 재조립에 의해 야기될 수 있다. 이 결과는 Au AG의 광 물리 화학적 재결합이 관능화된 Au 나노구조를 제조하기 위한 적절한 경로임을 시사한다.The size distributions of AG, TD and hybrid droplets measured using MPS are shown in Fig. Results are expressed as geometric mean diameter (GMD), geometric standard deviation (GSD), and total number concentration (TNC). There was a significant difference between AG and TD, but the size of the hybrid droplet also showed a single shape (located between the distribution of AG and TD) similar to that of AG and TD. This result means that almost all the particles are contained in the droplets in the spraying process. Thus, this product was suitable for use in the subsequent FD reaction. Interestingly, the GSD of the hybrid droplet was significantly lower than the GSD of the TD droplet, which can be caused by reassembly of the TD component (intervening and subsequent junctions) under light irradiation, including fragmentation of the AG during fragmentation. These results suggest that the photophysical chemical recombination of Au AG is a suitable pathway to fabricate functionalized Au nanostructures.

Au AgAu Ag TD 액적TD droplet 하이브리드 액적Hybrid droplet GMDGMD 45.245.2 153.2153.2 80.180.1 GSDGSD 1.491.49 1.921.92 1.571.57 TNCTNC 4.4x106 4.4 x 10 6 8.2x106 8.2x10 6 6.7x106 6.7 x 10 6

도 7은 확산 건조기를 통과 한 후 (a) Au AGs 및 (b) 실시예 1(TAuD)의 저배율 및 고배율 TEM 이미지이다. 두 샘플의 오른쪽 이미지는 면간 거리와 그럴듯한 미세 표면 구조(노란색, 금, 파랑, T 및 적색, D)를 포함한다. Au AG는 어두운 점(1 차 Au 입자, ~ 6 nm), TAuD 나노 복합체는 대조 요소, 어두운 점(재조립된 1 차 Au 입자, ~ 4 nm) 및 더 밝은 층(표지된 TD)으로 구성된다. TAuD의 경우 도트의 위치는 나노 복합체의 형태로 더 밝은 레이어 내에 한정된다.Figure 7 is a low magnification and high magnification TEM image of (a) Au AGs and (b) Example 1 (TAuD) after passing through a diffusion dryer. The right image of both samples contains interplanar spacing and plausible microstructure (yellow, gold, blue, T and red, D). Au AG consists of dark spots (primary Au particles, ~ 6 nm), TAuD nanocomposites consist of contrast elements, dark spots (reassembled primary Au particles, ~ 4 nm) and lighter layers (labeled TD) . In the case of TAuD, the position of the dots is confined within a lighter layer in the form of nanocomposites.

재조립은 또한 투과 전자 현미경 (TEM, CM-100, FEI / Philips, USA) 측정으로 검증되었다. 제조된 나노 복합체는 TEM 그리드 포집 (Ineris, France)를 통해 탄소 코팅된 구리 그리드(Tedpella, USA)에서 직접 전처리없이 가스 단일 패스 구성으로 포집되었다. 그리드는 46-180 kV 범위의 증가하는 전압에서 TEM 분석용 홀더 (CM-100, FEI / Philips, USA)로 옮겼다.Reassembly was also verified by transmission electron microscopy (TEM, CM-100, FEI / Philips, USA) measurements. The prepared nanocomposites were captured in a gas single pass configuration without direct pretreatment in a carbon coated copper grid (Tedpella, USA) via TEM grid collection (Ineris, France). The grid was transferred to a TEM analysis holder (CM-100, FEI / Philips, USA) at increasing voltages ranging from 46-180 kV.

도 7a에 도시된 바와 같이, 스파크 박리에 기인하는 입자는 기체 유동에서의 현탁 중에 브라운 운동에 의해 야기된 1차 Au 입자(측면 치수에서 약 6 nm)의 AGs이다. 400 AG의 이미지 분석에 따르면 단 하나의 격리된 AG의 평균 크기는 약 48.8 nm이며 SMPS 측정에서 얻은 크기와 일치한다. 1 차 입자는 구형이고 매끄러운 표면을 가지며 입자 사이에 명확한 공극이 있어 AG가 Au 입자만을 포함한다는 것을 의미한다. 고배율 TEM은 Miller (111) 면심 입방면에 해당하는 인접한 격자에 대해 0.233 nm의 d 간격을 보였다. 따라서 이 결과는 AG가 순수한 1 차 Au 입자로부터 파생되었다는 사실을 더 뒷받침한다. 도 7b에 도시된 바와 같이, TD를 이용한 AG 광 이온화 (Denuder에서 용매 추출 후)에서 입자 형태는 현저하게 변화하여 더 밝은 대비 층으로 단단히 둘러싸인 어두운 점으로 나타났다. 어둡고 가벼운 구성 요소는 각각 Au 입자와 TD에 해당하며, 서로 다른 물질(즉, 소포 구조) 내의 밀집 구조는 광 조사 동안 양전하를 띠는 Au 표면과 TD의 음으로 대전된 작용기 사이의 정전기 상호 작용으로 인해 생길 수 있다. 400 나노 복합체의 이미지 분석에 따르면 고립된 TAuD 나노 복합체의 평균 측면 치수는 88.2 nm이며 이는 SMPS 측정과 일치한다.As shown in Figure 7a, the particles due to spark exfoliation are AGs of primary Au particles (about 6 nm in lateral dimension) caused by Brownian motion during suspension in the gas flow. According to image analysis of the 400 AG, the average size of only one isolated AG is about 48.8 nm, which is consistent with the size obtained from SMPS measurements. The primary particles have a spherical, smooth surface and have clear pores between the particles, meaning that AG contains only Au particles. The high magnification TEM showed a d interval of 0.233 nm for the adjacent gratings corresponding to the Miller (111) face-centered entrance surface. This result further supports the fact that AG is derived from pure primary Au particles. As shown in Fig. 7b, the AG type photoionization (after solvent extraction in Denuder) with TD resulted in a marked change in particle shape and a dark point tightly surrounded by a lighter contrast layer. The dark and light components correspond to the Au particles and TD, respectively, and the dense structure within the different materials (ie vesicle structures) is the electrostatic interaction between the Au surface, which is positively charged during light irradiation, and the negatively charged functional group of TD . Image analysis of the 400 nanocomposite shows that the average lateral dimension of the isolated TAuD nanocomposite is 88.2 nm, which is consistent with the SMPS measurement.

도 8은 (a) PBS에 분산된 실시예 1(TAuD) 나노 복합체의 동적광산란(DLS)법을 이용한 입자 크기 분포, 제타 전위 및 (b) TD를 포함하는 UV-vis 스펙트럼 그래프이다.Figure 8 is a graph of the particle size distribution, zeta potential, and (b) UV-vis spectrum including (a) the dynamic light scattering (DLS) method of Example 1 (TAuD) nanocomposite dispersed in PBS and (b) TD.

나노 복합체의 수력학적 크기 분포를 측정하기 위해 수집된 나노 복합체를 0.01M, pH 7.4인 인산염 완충 식염수(PBS)에 분산시킨 후 동적 광산란(DLS, Nano-ZS, Malvern Instruments, UK)법을 이용하였다. 평균 크기는 SMPS 측정에서 얻은 것보다 큰 138 nm (도 8a) 인 것으로 판명되었다. 이 두 가지 방법의 크기 차이는 DLS 측정에 사용된 NV 농도가 상당히 높기 때문에 발생했을 수 있다. 그럼에도 불구하고, 평균 유체 역학 크기는 ≤200 nm이었으며, 이는 전반적인 양의 포텐셜 (+7.8 mV) 때문일 것이다. 따라서, 제조된 NV는 창상 및 비특이적 흡착성 엔도 시토시스를 통한 후속 내재화를 통해 종양 조직으로의 향상된 투과성 및 수동 축적에 적합하다. 고배율 이미지의 분석은 다양한 크기의 입자 (약 4 nm)와 d- 간격 (0.288 nm)을 나타내었으며, 그 결과는 AG를 TAuD NVs로 재조합하는 광 조사 동안 TD의 다른 원소에 의한 Au 입자 표면상의 Au 원자의 치환과 일치한다. PBS (도 8b, inset)에 분산된 가공 NV (도 8b)의 UV-vis (T60, PG Instruments, UK) 스펙트럼은 Au NP의 LSPR 효과에 기인할 수 있는 550 nm 부근에서 작은 피크를 보였다(흡수 파장, 520-530 nm). TD는 약 470nm에서만 흡수 피크를 나타내지만, NV는 광 조사 하에서 Au AG가 TD와 반응 한 후에 높은 광대역 흡수 스펙트럼을 나타낸다. 이 결과는 하이브리드 액적의 1차 Au 입자의 재배열에 의해 야기되어 인접한 Au 입자의 입자 간 플라즈몬 결합이 촉진될 수 있다. 이 결과는 또한 theranostic 응용 프로그램에서 광대역 NIR 유발 사진 변환 활동의 타당성을 지적했다.To measure the hydrodynamic size distribution of the nanocomposites, the collected nanocomposites were dispersed in phosphate buffered saline (PBS) at 0.01 M, pH 7.4, and then subjected to dynamic light scattering (DLS, Nano-ZS, Malvern Instruments, UK) . The mean size was found to be 138 nm (Fig. 8a), which is greater than that obtained from SMPS measurements. The magnitude difference between these two methods may have occurred because the NV concentration used in the DLS measurement was quite high. Nonetheless, the mean hydrodynamic size was ≤200 nm, which would be due to the overall positive potential (+7.8 mV). Thus, the prepared NV is suitable for enhanced permeability and passive accumulation into tumor tissue through subsequent internalization through wound and non-specific adsorptive endocytosis. The analysis of the high magnification image showed particles of various sizes (about 4 nm) and d-spacing (0.288 nm), and the results showed that Au on the surface of Au particles by different elements of TD during the light irradiation to recombine AG with TAuD NVs It is consistent with the substitution of atoms. The UV-vis (T60, PG Instruments, UK) spectrum of processed NV (FIG. 8b) dispersed in PBS (FIG. 8b, inset) showed a small peak around 550 nm, which could be attributed to the LSPR effect of Au NP Wavelength, 520-530 nm). TD exhibits an absorption peak only at about 470 nm, whereas NV exhibits a high broadband absorption spectrum after Au AG reacts with TD under light irradiation. This result is caused by the rearrangement of the primary Au particles of the hybrid droplet, and the inter-particle plasmon bonding of the adjacent Au particles can be promoted. These results also point to the validity of broadband NIR-induced photo-conversion activities in theranostic applications.

도 9는 다른 T 용액을 포함하는 재조립된 비교예 1(Tau)의 TEM 이미지이다. T 용액의 농도는 5.35 (0.5 vT/v·에탄올%), 10.70 (1.0 v/v%), 26.75 (2.5 v/v%) 및 53.50 (5.0 v/v%) mg·T/mL·에탄올이다. T 농도를 증가시키면 보다 세밀한 구성을 가정한 나노 복합체가 생성된다.9 is a TEM image of reassembled Comparative Example 1 (Tau) containing another T solution. The concentration of the T solution is 5.35 (0.5 vT / v.ethanol%), 10.70 (1.0 v / v%), 26.75 (2.5 v / v%) and 53.50 . Increasing the T concentration results in a nanocomposite assuming a finer configuration.

도 9에 도시된 바와 같이, TAu를 제조하기 위해 크기와 세포 독성의 원하지 않는 증가를 피하고 정의되지 않은 AGs에 느슨한 나노 소포체 구조의 형성을 방지하기 위해 2.5 v/v%(에탄올 중)의 T 농도를 선택했다.As shown in FIG. 9, T concentrations of 2.5 v / v% (in ethanol) were added to avoid the undesirable increase in size and cytotoxicity to produce TAu and to prevent the formation of loose nanosome structures in undefined AGs .

도 10은 (a) 실시예 1(TAuD), Au 및 비교예 1(TAu)의 XPS Au 스펙트럼, (b) 실시예 1(TAuD), 비교예 1(TAu) 및 비교예 2(AuD의 FT-IR )스펙트럼, (c) 실시예 1(TAuD), 비교예 3(TD) 및 Au AG의 라만 스펙트럼 그래프이다. 삽입 그림은 유리 디스크에서 광학 현미경 시편을 측정용으로 보여주었다.10 shows the XPS Au spectra of (a) Example 1 (TAuD), Au and Comparative Example 1 (TAu), (b) Example 1 (TAuD), Comparative Example 1 (TAu), and Comparative Example 2 -Ir) spectrum of (a), (c) the Raman spectral graph of Example 1 (TAuD), Comparative Example 3 (TD) and Au AG. The inset shows the optical microscope specimen for measurement on a glass disk.

나노 복합체의 표면 화학은 폴리테트라플루오로에틸렌(PTFE; polytetrafluoroethylene) 기판(11807-47-N, Sartorius, Germany)에 나노 복합체를 증착 후 흡광도 모드 (1450 내지 2300 cm- 1)에서 퓨리에 변환 적외선(FT-IR, iS-10, Thermo Electron, USA)분석을 사용하여 평가하였다. Au AG와 TAuD 사이의 표면 구조의 차이는 XPS(Axis-HIS, Kratos Analytical, Japan)를 사용하여 확인하였다. 라만 분광법 (T64000, HORIBA Jobin Yvon, Japan)을 사용하여 금 표면에 대한 TD의 통합을 평가하였다. PBS 및 TD 단독으로 분산된 나노 복합체의 광 흡수 스펙트럼을 자외선-가시광선 분광법(UV-vis spectroscopy, T60, PG Instruments, UK)를 사용하여 측정하였다.Ethylene in the surface chemistry of the nano-polytetrafluoroethylene composite (PTFE; polytetrafluoroethylene) substrates (11807-47-N, Sartorius, Germany ) nanocomposite absorbance mode after deposition on the - in the Fourier (1450 to 2300 cm 1) transform infrared (FT -IR, iS-10, Thermo Electron, USA). The difference in surface structure between Au AG and TAuD was confirmed using XPS (Axis-HIS, Kratos Analytical, Japan). The incorporation of TD on the gold surface was evaluated using Raman spectroscopy (T64000, HORIBA Jobin Yvon, Japan). The optical absorption spectra of nanocomposites dispersed in PBS and TD alone were determined using UV-vis spectroscopy (T60, PG Instruments, UK).

제조된 나노 복합체의 표면 화학을 분석하여 Au와 TD 사이의 광 조사에 의해 유도된 접합을 확인하였다. 도 10(a)에 도시된 바와 같이, Au 4f X선 광전자 분광법(XPS, K-Alpha, Thermo Scientific, USA)을 이용하여 측정한 Au AG 및 TAuD의 결과이다. AG는 89.2와 85.5 eV에서 각각 Au 4f5 /2와 Au 4f7 /2(spin-orbit splitting에서 3.7 eV로 분리)로 두 개의 뚜렷한 피크를 가지고 있다. 이러한 피크는 Au0의 피크와 일치한다. TAuD 샘플에 대한 유사한 데이터는 Au와 TD 사이의 전하 이동으로 인한 Au 4f5 /2 및 Au 4f7 /2에 대해 각각 2.6 및 2.3eV의 음의 시프트를 갖는 86.6 및 83.2eV(3.4eV에 의해 분리되고 Au3 +에 상응함)였고, 이는 광 조사가 Au와 TD 사이의 정전기적 결합(electrostatic conjugation)을 초래하는 것을 의미한다.The surface chemistry of the prepared nanocomposites was analyzed to confirm the light - induced bonding between Au and TD. As shown in FIG. 10 (a), the results of Au AG and TAuD were measured using Au 4f X-ray photoelectron spectroscopy (XPS, K-Alpha, Thermo Scientific, USA). AG has two distinct peaks at 89.2 and 85.5 eV, respectively Au 4f 5/2 and Au 4f 7/2 (separated by 3.7 eV in the spin-orbit splitting). This peak coincides with the peak of Au 0 . Similar data for TAuD sample is separated by 86.6 and 83.2eV (3.4eV each having a 2.6 and a negative shift of about 2.3eV and Au due to charge transfer between TD Au 4f 5/2, and Au 4f 7/2 And corresponding to Au 3 + ), which means that light irradiation results in electrostatic conjugation between Au and TD.

도 10(b)에 나타난 바와 같이, 푸리에 변환 적외선 (FTIR, iS-10, Thermo Electron, USA) 분석에서, Au와 TD 사이의 접합은 TAu와 AuD를 TAuD와 비교하여 더 검증되었다. TAu 스펙트럼은 TAu에서 T의 방향족 C-C 신축 및 C-H- 변형 모드의 커플링에 해당하는 1512 cm-1에서 특성 밴드를 나타냈다. 또한, 이 대역은 TAuD 스펙트럼에 존재하지만 AuD 스펙트럼에는 존재하지 않는다. AuD와 TAuD에서 약 1610cm-1의 광대역은 DOX에서 N-H 그룹의 굽힘에 부여될 수 있어 TD가 광 유도 정전기적 결합에 의해 Au 표면에 성공적으로 결합되었음을 의미한다.As shown in Fig. 10 (b), in the Fourier Transform Infrared (FTIR, iS-10, Thermo Electron, USA) analysis, the junction between Au and TD was further verified by comparing TAu and AuD to TAuD. The TAu spectrum exhibited a characteristic band at 1512 cm < -1 > corresponding to the coupling of the aromatic CC stretch and CH-strain modes of T in TAu. In addition, this band is present in the TAuD spectrum but not in the AuD spectrum. A broad band of about 1610 cm -1 in AuD and TAuD can be attributed to the bending of the NH group in the DOX, indicating that TD was successfully bound to the Au surface by photoinduced electrostatic bonding.

도 10(c)에 도시된 바와 같이, TAuD의 라만 스펙트럼은 1648 cm-1에서 Au AG 및 TD 스펙트럼에 존재하지 않는 날카로운 피크를 보였다. 이 결과는 TAuD에서 Au 광 이온화에 의해 D의 라만 시그널(링 B의 C = O 그룹의 수소 결합에 해당)이 증가하는 것을 의미한다. 이러한 표면 화학 분석은 주변 조건 즉, 단순함, 친환경 및 연속 제조 플랫폼에서의 가스 유동에서 Au 입자를 재구성, 재조합 및 기능화하기 위한 광 이온화에 기초한 실현 가능한 과학적 가능성을 제공할 수 있다.As shown in Fig. 10 (c), the Raman spectrum of TAuD showed sharp peaks at 1648 cm- 1 that were absent in the Au AG and TD spectra. This result implies that the Au photoionization in TAuD increases the Raman signal of D (corresponding to the hydrogen bond in the C = O group of ring B). This surface chemistry analysis can provide realizable scientific possibilities based on photoionization to reconstitute, recombine and functionalize Au particles in gas flow in ambient conditions, i.e., simple, environmentally friendly and continuous manufacturing platforms.

도 11은 실시예 1(TAuD)로부터 (a) pH 트리거링 (5.5 및 7.4) (24 시간) 및 (b) 근적외선(NIR) 트리거 (6 시간 및 808nm) (2시간 후 5 분간 조사) 약물(DOX, D)의 시험관 내 방출 프로파일에 관한 그래프이다.11 is a graph showing the results of (a) pH triggering (5.5 and 7.4) (24 hours) from Example 1 (TAuD) and (b) near infrared (NIR) trigger (6 hours and 808 nm) , ≪ / RTI > D).

TAuD 나노 복합체의 시험관 내 D의 방출은 ABS(pH 5.5, 0.14 M NaCl) 및 PBS(pH 7.4, 0.14 M NaCl)에서 평가하였다. TAuD 분산 샘플(1 ㎖, 1 mg/mL) (0.3 mg의 D에 상당) (MWCO, 4000-6000 Da) (Spectra/Por®, USA)을 투석백에 넣고 20 mL의 ABS(또는 PBS)가 들어있는 50 mL 튜브에 연속적으로 침지시키고, 37 ℃에서 분당 100 스트로크로 작동하는 수조 쉐이커(HST-205 SW, Hanbaek ST Co., Korea)에 넣었다. 방출 매질 (0.5 mL)의 분취액을 소정 시간 간격으로 샘플링한 다음, 동일한 부피의 새로운 매질로 보충하였다. 배지 중의 D 농도는 UV-vis spectrophotometry (U-2800, PerkinElmer, USA)를 사용하여 측정하였다. 레이저 조사 하에서 D 방출을 조사하기 위해 1 mL의 TAuD를 교반기(400 RPM)가 달린 바이알에 넣고 PBS로 3 mL로 희석한 다음 레이저로 5 분간 조사했다. 일정 시간 간격으로 분취량 (0.5 mL)을 취하여 D 농도를 측정하기 위해 분석하였다.The in vitro D release of TAuD nanocomposite was evaluated in ABS (pH 5.5, 0.14 M NaCl) and PBS (pH 7.4, 0.14 M NaCl). TAUD dispersion (1 ml, 1 mg / ml) (0.3 mg of D) (MWCO, 4000-6000 Da) (Spectra / Por®, USA) was placed in a dialysis bag and 20 ml of ABS (HST-205 SW, Hanbaek ST Co., Korea) operating at 100 strokes per minute at 37 占 폚. An aliquot of the release medium (0.5 mL) was sampled at predetermined time intervals and replenished with the same volume of fresh medium. D concentration in the medium was measured by UV-vis spectrophotometry (U-2800, PerkinElmer, USA). To investigate D emission under laser irradiation, 1 mL of TAuD was placed in a vial with a stirrer (400 RPM), diluted to 3 mL with PBS, and irradiated with a laser for 5 minutes. Aliquots (0.5 mL) were taken at constant time intervals and analyzed to determine D concentrations.

도 11(a)에 도시된 바와 같이, 화학-광열 요법으로 암 조직에 가공된 나노 복합체의 다기능 응용을 선택했기 때문에, 나노 복합체의 약물 방출 특성은 다양한 완충 용액(PBS, pH 7.4; 아세테이트-완충된 염수 (ABS), pH 5.5)로 세척하고 상이한 근적외선 파장(808 및 632nm)에 노출시켰다. 나노 복합체로부터 D의 방출은 pH 7.4인 PBS에서 50 % 및 pH 5.5인 ABS에서 70 % 누출되었음을 바탕으로 24 시간 이상에서 나노 복합체로부터의 D의 방출 (TAuD에서 31.6±5.5 w/w%의 D 로딩 분획)이 pH 의존성인 것으로 확인하였다. pH 5.5에서 D(pKa ~ 8.3)의 보다 높은 수용해도는 보다 빠른 방출에 기여한 것으로 판단된다. 이 결과는 나노 복합체가 암 세포에 내재되어있는 엔도-리소좀(endo-lysosomal) 구획(pH 4.5-5.0)의 산성 환경과 매우 관련이 높다.As shown in Figure 11 (a), because of the multifunctional application of nanocomposites processed into cancer tissues by chemo-photothermal therapy, the drug release characteristics of the nanocomposites were measured using various buffer solutions (PBS, pH 7.4; Saline (ABS), pH 5.5) and exposed to different near infrared wavelengths (808 and 632 nm). The release of D from the nanocomposites was evidenced by the release of D from the nanocomposite (31.6 ± 5.5 w / w% D loading in TAuD, based on a 70% leak in ABS with 50% and pH 5.5 in pH 7.4 Fraction) was found to be pH dependent. The higher water solubility of D (pKa ~ 8.3) at pH 5.5 seems to contribute to faster release. This result is highly relevant to the acidic environment of the endo-lysosomal compartment (pH 4.5-5.0) in which the nanocomposite is embedded in cancer cells.

도 11(b)에 나타난 바와 같이, 근적외선 광에 의한 열 발생은 NIR (4W/cm2)에 5 분간 나노 복합체 노출 시 D의 방출이 급격히 증가한 것을 나타내며, 누적 D 방출은 16 %에서 약 60 %로 증가하는 것을 확인하였다.As shown in FIG. 11 (b), heat generation by near-infrared light indicates that the D emission is drastically increased when the nanocomposite is exposed to NIR (4 W / cm 2 ) for 5 minutes, , Respectively.

도 12는 808 nm 근적외선(NIR) 조사에 따른 (a) 농도 의존(2.5 W/cm2) 및 (b) 6분 동안 비교예 1(TAu) 및 RPMI(대조군)의 강도-의존성 (150 μg/mL) 온도 상승 프로파일이다. 각 조건에 대한 온도 윤곽을 포함하며, 조사에 반응하여 레이저 빔 스폿 근처의 온도가 상당히 증가하였다.Figure 12 shows the intensity-dependent (150 μg / ml) response of Comparative Example 1 (TAu) and RPMI (control) for 6 min with (a) concentration dependent (2.5 W / cm 2 ) mL) temperature rise profile. The temperature profile for each condition was included, and the temperature near the laser beam spot increased significantly in response to irradiation.

도 13은 632 nm 근적외선(NIR) 조사에 따른 (a) 농도 의존(2.5 W/cm2) 및 (b) 6분 동안 비교예 1(TAu) 및 RPMI(대조군)의 강도-의존성 (150 μg/mL) 온도 상승 프로파일이다. 각 조건에 대한 온도 윤곽을 포함하며, 조사에 반응하여 레이저 빔 스폿 근처의 온도가 상당히 증가하였다.Figure 13 shows the intensity dependence (150 μg / ml) of (a) concentration-dependent (2.5 W / cm 2 ) and 6 (b) mL) temperature rise profile. The temperature profile for each condition was included, and the temperature near the laser beam spot increased significantly in response to irradiation.

도 12 및 도 13에 도시된 바와 같이, 근적외선 조사시의 광열 온도 상승을 조사하였다. 파장 사이의 유의한 차이가 없는 808 및 632 nm 파장에서 근적외선을 조사하였을 때, 열 발생은 농도 및 조사 강도에 의존적인 것으로 나타났다.As shown in Figs. 12 and 13, the increase of the light heat temperature at the time of near-infrared irradiation was examined. When near infrared rays were irradiated at the wavelengths of 808 and 632 nm without significant difference between wavelengths, heat generation was dependent on concentration and irradiation intensity.

도 11 내지 도 13에서 나타난 결과는 본 출원에서 제작한 나노 복합체가 포토 트리거식 제어 방출 어플리케이션에 사용할 수 있음을 의미한다.The results shown in Figures 11-13 indicate that the nanocomposites produced in this application can be used in photo-triggered controlled-release applications.

도 14는 (a) MDA-MB-231 및 (b) MCF-7 세포에서의 단일 D를 포함하는 근적외선(NIR) 조사의 부재 및 존재 하에서의 비교예 1(TAu) 및 실시예 1(TAuD)에 대한 생체 외 항암 효과 그래프, (c) MDA-MB-231 및 MCF 세포에서의 쿠마린-6에 로딩된 비교예 1(TAu)의 CLSM 이미지, (d) MDA-MB-231 및 (e) MCF-7 세포에 의한 실시예 1(TAuD)의 세포 흡수를 보여주는 FACS 분석 결과, (f) NIR (808 nm) 조사의 유무에 따른 비교예 1(TAu)로 처리된 세포에서의 p53의 웨스턴 블랏 분석 결과이다.Figure 14 shows the results of a comparison of the results of (a) MDA-MB-231 and (b) in comparison with Comparative Example 1 (TAu) and Example 1 (TAuD) in the absence and presence of near infrared (NIR) irradiation comprising single D in MCF- (C) MDA-MB-231 and MCF-CLSM images of coumarin-6 loaded Comparative Example 1 (TAu), (d) MDA-MB-231 and (e) MCF- 7 cells, (f) Western blot analysis of p53 in cells treated with Comparative Example 1 (TAu) according to presence or absence of NIR (808 nm) irradiation to be.

도 14(a) 및 (b)에 도시된 바와 같이, 시험관 내 항암 효과는 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드(MTT) assay를 사용하여 24 시간 배양한 후 MDA-MB-231(도 14(a)) 및 MCF-7(도 14(b)) 세포에서 세포 독성을 측정하여 평가하였다.As shown in Figs. 14 (a) and 14 (b), the in vitro cancerous effect was evaluated by the 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay The cells were cultured for 24 hours and then cytotoxicity was measured and evaluated by using MDA-MB-231 (Fig. 14 (a)) and MCF-7 (Fig. 14 (b)).

48 시간 인큐베이션 후 NIR 조사 유무에 따른 MTT 분석을 이용하여 MDA-MB-231 및 MCF-7 세포(즉, 인간 유방 선암종)에서 단일 D, TAu 및 TAuD 샘플에 대한 세포 독성 측정을 측정하였다. 즉, 웰당 1 × 104 세포를 96-웰 마이크로타이터 플레이트(Becton Dickinson Labware, USA)에 코팅(도말)하고, 세포 부착을 위해 12 시간 동안 배양하였다. 48 시간 후 세포를 세척하고, 100 μL MTT 용액(1.25 mg/mL)을 각 웰에 첨가하였다. 4 시간 동안 어두운 곳에서 배양하는 동안 살아있는 세포는 MTT 대사 산물인 보라색의 포르마잔 결정체를 생성하였다. 상기 결정을 100 ㎕ 디메틸설폭사이드(dimethyl sulfoxide; DMSO)에 용해시키고, 마이크로 플레이트 판독기(Multiskan EX, Thermo Scientific, USA)를 사용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 생존력은 Asample/Acontrol×100 %로 계산하였으며, 여기서 A는 570nm에서의 흡광도이다.Cytotoxicity measurements on single D, TAu and TAuD samples were measured in MDA-MB-231 and MCF-7 cells (ie, human breast adenocarcinoma) using MTT analysis with and without NIR irradiation after 48 hours incubation. That is, 1 × 10 4 cells per well were coated (plated) on 96-well microtiter plates (Becton Dickinson Labware, USA) and cultured for 12 hours for cell attachment. After 48 hours, the cells were washed and 100 μL MTT solution (1.25 mg / mL) was added to each well. During incubation for 4 hours in the dark, living cells produced purple formazan crystals, the MTT metabolite. The crystals were dissolved in 100 μl dimethyl sulfoxide (DMSO) and absorbance was measured at 570 nm using a microplate reader (Multiskan EX, Thermo Scientific, USA). Cell viability was calculated as A sample / A control × 100%, where A is the absorbance at 570 nm.

TAu로 처리된 세포의 생존율은 두 세포 유형 모두에서 75 % 이상이었으며, D 결합 전의 TAu는 생체 적합성을 나타냈다. T는 막 용해제 (membrane-lytic agent)로 알려져 있으나, 아교성 농도(<0.01 w/w%)로 존재한다. 광 조사 및 후속 용매 추출 하에서 Au로의 TD 혼입은 나노미터 공간 내에서 열적으로 안정한 비정질 T에 의하여 제한되었다. TAuD 투여 시 MDA-MB-231 및 MCF-7 세포의 IC50 값은 각각 0.24 및 0.27 μg/mL이었다. 이 값은 단일 D의 값보다 유의하게 낮았으며, 이는 TAuD가 세포 흡수 및 D(MDA-MB-231: 0.48 ㎍/mL, MCF-7: 0.77 ㎍/mL)의 유지를 증가시키고, D의 대체된 전달자-매개 유출을 증가시키는 것을 의미한다. TAuD로 처리된 세포에 근적외선을 조사하는 경우, 두 세포 유형(MDA-MB-231: 0.13 ㎍/mL, MCF-7: 0.15 ㎍/mL) 모두에서 IC50 값이 더 감소했다. 이 결과는 고열로 유도된 파열 약물 방출, 화학 증감 및 방사선 조사 시의 열 손상으로 인한 것으로 유추할 수 있다.Survival rates of cells treated with TAu were more than 75% in both cell types and TAu before D binding showed biocompatibility. T is known as a membrane-lytic agent, but it is present at a grit concentration (<0.01 w / w%). The TD incorporation into Au under light irradiation and subsequent solvent extraction was limited by thermally stable amorphous T in the nanometer space. The IC50 values of MDA-MB-231 and MCF-7 cells were 0.24 and 0.27 μg / mL, respectively, when TAuD was administered. This value was significantly lower than that of the single D, indicating that TAuD increased the retention of cell uptake and D (MDA-MB-231: 0.48 ㎍ / mL, MCF-7: 0.77 ㎍ / mL) Which means increasing the forwarder-mediated outflow. When irradiated with TAUD, the IC50 values were further decreased in both cell types (MDA-MB-231: 0.13 ㎍ / mL, MCF-7: 0.15 ㎍ / mL). These results can be attributed to high temperature induced ruptured drug release, chemical sensitization and thermal damage during irradiation.

도 14(c) 내지 도 14(e)에서 보여지는 바와 같이, TAu의 세포 흡착은 공 초점 레이저 스캐닝 현미경(CLSM, Leica Microsystems, Germany)(도 14(c)) 및 형광 활성 세포 선별(FACS, BD Biosciences, USA)을 사용하여 연구하였다(도 14(d) 및 도 14(e)).As shown in Figs. 14 (c) to 14 (e), cell adsorption of TAu was confirmed by confocal laser scanning microscopy (CLSM, Leica Microsystems, Germany) (Fig. 14 (c)) and fluorescence activated cell sorting (FACS, BD Biosciences, USA) (Fig. 14 (d) and Fig. 14 (e)).

CLSM(TCS SP2, Leica Microsystems, Germany)을 사용하여 세포에 의해 준비된 나노 복합체의 내부화를 관찰하였다. 2 mL 배지에서 MDA-MB-231 및 MCF-7 세포를 5 x 104 세포/mL의 밀도로 12-웰 플레이트에서 커버 슬립 상에 시딩하였다. 세포를 24 시간 동안 배양하여 세포를 부착시킨 다음 5 μg/mL 쿠마린-6에 로딩된 TAu 나노 복합체와 100 ng LysoTracker Red를 각 웰에 첨가하였다. 10분 배양 및 후속 배지 제거 후, 커버 슬립을 PBS로 부드럽게 세척하고, 어두운 곳에서 4 % 파라포름알데히드 용액으로 고정한 후, 유리 슬라이드 상에 올려 놓고 글리세린으로 밀봉하였다. 세포 내 섭취를 확인하기 위해, 2 mL 배지에서 MDA-MB-231 또는 MCF-7 세포(1 × 105)를 12-웰 플레이트에 시딩하였다. 12 시간 배양 후, 특정 시간 동안 TAuD와 함께 쿠마린-6에 로딩된 TAu 나노 복합체를 배양하였다. 이어서 세포를 PBS로 세척하고 트립신 처리하여 수거하고 FACS 유동 세포 계측기(BD FACS Verse, BD Biosciences, USA)를 사용하여 유세포 분석을 위한 결합 완충액을 함유하는 1 mL PBS에 재현탁시켰다. 처리되지 않은 세포의 자동 형광은 내부 대조군으로 사용하였다.The internalization of the nanocomposites prepared by the cells was observed using CLSM (TCS SP2, Leica Microsystems, Germany). MDA-MB-231 and MCF-7 cells were seeded on a cover slip in a 12-well plate at a density of 5 x 10 4 cells / mL in 2 mL medium. Cells were cultured for 24 hours to attach cells and TAu nanocomposite loaded with 5 μg / mL coumarin-6 and 100 ng LysoTracker Red were added to each well. After 10 min incubation and subsequent removal of the medium, the cover slips were gently washed with PBS and fixed in 4% paraformaldehyde solution in the dark, then placed on a glass slide and sealed with glycerin. To determine within the intake cells were seeded in 12-well plates the MDA-MB-231 or MCF-7 cells (1 × 10 5) in 2 mL medium. After 12 hours of incubation, TAU nanocomposite loaded with coumarin-6 was incubated with TAuD for a certain period of time. The cells were then washed with PBS, harvested by trypsinization and resuspended in 1 mL PBS containing binding buffer for flow cytometry using a FACS flow cytometer (BD FACS Verse, BD Biosciences, USA). Autofluorescence of untreated cells was used as an internal control.

쿠마린-6를 결합한 TAu의 녹색 형광 신호는 엔도시토시스를 통한 리소좀 흡수를 나타내는 빨간색 리소좀 염료와 함께 동위 원자화된다. D의 적색 형광은 비교적 약한 형광성 때문에 사용되지 않았으나, T의 존재 하에서 Au 1차 입자들 사이의 상호 작용 및/또는 응집 때문에 소지(quenching)에 의해 형광성이 일어날 수 있다. 세포 내 축적의 D는 FACS에 의해 확인되었으며, 섭취가 시간 의존적임을 나타낸다.The green fluorescence signal of TAu conjugated with coumarin-6 is isotopically atomized with a red lysosomal dye showing lysosome uptake via endocytosis. D red fluorescence is not used because of its relatively weak fluorescence but fluorescence may occur due to quenching due to interaction and / or aggregation between the Au primary particles in the presence of T. Intracellular accumulation of D was confirmed by FACS and indicates that intake is time dependent.

도 14(f)에 도시된 바와 같이, NIR 조사에 의해 유발된 괴사를 통한 세포 사멸을 조사하기 위하여 웨스턴 블랏 분석을 사용하였고, 세포 사멸 표지자 p53의 발현을 측정하였다.As shown in Fig. 14 (f), Western blot analysis was used to examine cell death through necrosis caused by NIR irradiation, and the expression of apoptosis marker p53 was measured.

웨스턴 블랏 분석(Western blot analysis)를 시행하여 세포 사멸 표지자 p53의 발현을 조사하였다. MDA-MB-231 또는 MCF-7 세포(4 × 105 세포)를 12 시간 동안 배양하고 TAu로 24 시간 동안 처리하였다. 이어서 세포를 수확하고, 용해된 세포로부터 단백질을 추출하고 소 혈청 알부민 단백질 검정 키트를 사용하여 정량하였다. 단백질을 10 % 폴리아크릴아미드 상에서 분리하고 PVDF 멤브레인(Millipore, USA)에 전기 영동으로 전달하였다. 1 % Tween 20(TBST; tris buffered saline with Tween)이 함유된 트리스 완충 식염수에서 막을 5 % 탈지유로 막은 후, 막을 12 시간 동안 GAPDH (glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase)와 p53(Santa Cruz Biotechnology, Inc., USA)에 대한 1차 항체와 함께 4 ℃에서 배양하였다. 막을 TBST로 세척하고, 2차 항체와 함께 1 시간 동안 배양하였다. 단백질은 발광 이미지 분석기(LAS-4000 mini, Fujifilm, Japan)에서 향상된 화학 발광제를 사용하여 검출하였다.Western blot analysis was performed to investigate the expression of apoptosis marker p53. For MDA-MB-231 or MCF-7 cells for 12 hours (4 × 10 5 cells) were cultured for 24 hours in TAu. The cells were then harvested, proteins were extracted from the lysed cells and quantitated using a bovine serum albumin protein assay kit. Proteins were separated on 10% polyacrylamide and transferred to PVDF membrane (Millipore, USA) by electrophoresis. After the membranes were blocked with 5% skim milk in Tris buffered saline containing 1% Tween 20 (TBST), the membranes were incubated with GAPDH (glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase) and p53 (Santa Cruz Biotechnology, Inc., USA) at 4 &lt; 0 &gt; C. The membranes were washed with TBST and incubated with secondary antibody for 1 hour. Proteins were detected using an enhanced chemiluminescent agent in a luminescent image analyzer (LAS-4000 mini, Fujifilm, Japan).

이 결과는 광열 효과에 의한 세포 사멸이 기존의 화학 요법 또는 방사선 치료에서보다 즉각적이기 때문에 NIR에 노출된 TAu 처리 세포에서 심각한 괴사가 발생하지 않음을 나타낸다. 따라서, 본 출원에서 제조한 나노 복합체는 NIR 조사(강도 및 지속 시간) 및 광 유도자(예: 나노 복합체)의 투여량 및 조성을 조절함으로써 조절되는 응고 괴사보다 세포 사멸의 주된 구성에서 효율적인 항암 화학-광열 요법을 제공할 수 있고, 염증 반응을 최소화할 수 있다.These results indicate that the photoperiod-induced apoptosis is more immediate than in conventional chemotherapy or radiotherapy, so that severe necrosis does not occur in the TAU-treated cells exposed to NIR. Thus, the nanocomposites produced in this application are more effective than the coagulation necrosis controlled by modulating the dose and composition of the NIR irradiation (intensity and duration) and the optical inductor (e.g., nanocomposite) Can provide therapy and can minimize the inflammatory response.

도 15는 (i) 대조군, (ii) 단일 D군, (iii) 비교예 1(TAu)+ 근적외선(NIR)군 및 (iv) 실시예 1(TAuD)+세포군으로 처리한 후 MCF-7(상부) 및 MDA-MB-231(하부) 세포의 세포 사멸을 결정하기 위한 FACS 결과이다.Fig. 15 shows the results of the treatment of MCF-7 (Fig. 15) after treatment with (i) control, (ii) single D group, (iii) Comparative Example 1 (TAu) + near infrared (NIR) Top) and MDA-MB-231 (bottom) cells.

세포 사멸 전, 세포 사멸, 괴사 및 살아있는 세포를 포함하는 분수를 비교하려면 MDA-MB-231 또는 MCF-7 세포 (2×105)를 포함하는 2 mL 미디어는 12-웰 플레이트에 배치하고 12 시간 배향하였다. TAuD 나노 복합체 및 단일 D는 근적외선 조사의 존재 또는 부재 하에 첨가되었다. 48 시간 후, 세포를 긁어서 수확하고, PBS로 세척하고, 결합 완충액과 혼합 하였다. PE-아넥신-V와 7-아미노 액티노마이신 D를 각각 2 μL씩 첨가하고 부드럽게 섞은 후 어두운 곳에서 10 분간 방치하였다. 처리된 세포를 최종적으로 1mL의 최종 부피로 결합 완충액으로 희석하고, FACS 유동 세포 계측기 (BD FACS Verse, BD Bioscience, USA)를 사용하여 세포 사멸을 분석하였다.To compare fractions containing pre-apoptotic, apoptotic, necrotic and living cells, 2 mL media containing MDA-MB-231 or MCF-7 cells (2 x 10 5 ) was placed in a 12- . The TAuD nanocomposite and single D were added in the presence or absence of near-infrared irradiation. After 48 hours, cells were scraped, harvested, washed with PBS and mixed with binding buffer. 2 μL of PE-Annexin-V and 7-aminoactinomycin D were added, gently mixed, and allowed to stand in the dark for 10 minutes. The treated cells were finally diluted with binding buffer to a final volume of 1 mL and analyzed for apoptosis using a FACS flow cytometer (BD FACS Verse, BD Bioscience, USA).

도 15에 도시된 바와 같이, 상이한 세포 사멸 단게에서 TAuD로 처리한 세포(NIR 조사의 유무)의 분획을 측정함으로써 확인하였다. TAuD와 함께 배양한 후, 초기 및 후기 세포 사멸 단계에서 세포의 비율은 단일 D로 처리한 세포의 비율보다 현저히 더 큰 것을 확인하였다. 이러한 비율은 두 세포 유형에서 근적외선 조사에 따라 더 증가하는 것을 확인하였다.As shown in Fig. 15, fractions of cells (with or without NIR irradiation) treated with TAuD in different apoptotic stages were determined. After incubation with TAuD, the percentage of cells in the early and late cell death stages was significantly greater than the percentage of cells treated with single D. These ratios were found to increase further with near-infrared irradiation in both cell types.

도 16은 생존/사망 분석에서의 역 형광 현미경 이미지이다. 표시된 이미지는 NIR 조사(4 W/cm2) 후 5 분 동안 살아있는 세포(녹색, calcein-AM으로 염색됨) 및 죽은 세포(EthD-1로 염색됨)를 나타낸다. 점선은 조사 영역을 구분한다.Figure 16 is an inverted fluorescence microscope image in survival / death analysis. The displayed images represent live cells (stained with green, calcein-AM) and dead cells (stained with EthD-1) for 5 minutes after NIR irradiation (4 W / cm 2 ). The dotted lines divide the irradiation area.

MDA-MB-231 또는 MCF-7 세포(3 x 105 in 2 mL)를 12-well dish에 깔고 세포 부착을 위해 밤새 배양했다. 0.1mg TAu의 첨가 후, 세포를 3 시간 동안 배양하였다. 세척 후, 플레이트를 레이저 초점(spot size, 2mm) 아래 14 cm에 놓고 4 W/cm2, 3분 동안 조사하였다. PBS를 제거한 후, 세포를 새로운 배지로 보충하고 3시간 동안 배양하였다. 마지막으로, 세포는 PBS에서 2 μm의 calcein-AM(생존 세포, 녹색 형광)과 EthD-1(죽은 세포, 붉은 형광)으로 염색하고 역 형광 현미경(Eclipse Ti, Nikon, Japan)을 사용하여 관찰하였다.MDA-MB-231 or MCF-7 cells (3 x 10 5 in 2 mL) were plated in a 12-well dish and incubated overnight for cell attachment. After addition of 0.1 mg TAu, the cells were incubated for 3 hours. After washing, the plate was placed at 14 cm below the spot size (2 mm) and irradiated at 4 W / cm 2 for 3 minutes. After the PBS was removed, the cells were supplemented with fresh medium and cultured for 3 hours. Finally, cells were stained with 2 μM calcein-AM (surviving cells, green fluorescence) and EthD-1 (dead cells, red fluorescence) in PBS and observed using an inverted fluorescence microscope (Eclipse Ti, Nikon, Japan) .

NIR 조사(빔 직경 약 2mm, 4W/cm2)에 노출된 TAu를 처리한 MDA-MB-231 세포에서 생존/사망 분석을 수행하였다. 도 16에 도시된 바와 같이, 광선 노출 영역은 TAu로 처리한 세포에서 세포 사멸을 보였으나, NIR 노출이 없는 대조군(NIR 단독) 또는 TAu를 처리한 세포에서는 세포 독성이 관찰되지 않았으며, 광열 세포 사멸이 부위 특수성이 있음을 의미한다.Survival / mortality analysis was performed on MDA-MB-231 cells treated with TAu exposed to NIR irradiation (beam diameter of about 2 mm, 4 W / cm 2 ). As shown in FIG. 16, the light-exposed region showed apoptosis in cells treated with TAu, but no cytotoxicity was observed in the control (NIR alone) or TAu-treated cells without NIR exposure, This means that death is site specific.

도 17는 세포주기 분석을 측정한 광학 현미경 이미지이다. MDA-MB-231 세포에서의 세포 시계 표지는 (a) 대조군, (b) 단일 D, (c) 실시예 1(TAuD)와 함께 24시간 인큐베이션한 후에 수행하였다.Fig. 17 is an optical microscope image showing cell cycle analysis. Fig. Cell clock markers in MDA-MB-231 cells were performed after 24 hours of incubation with (a) control, (b) single D, and (c) Example 1 (TAuD).

단일 D 및 TAuD 나노 복합체로 처리한 후의 MDA-MB-231 세포의 주요 세포주기 단계를 세포 시계 분석법(Biocolor Ltd., UK)을 사용하여 분석하였다. 세포를 12-웰 세포 배양 플레이트 (2×105 세포/웰) 상에 접종하고 밤새 배양하여 세포 부착을 허용하였다. 그런 다음 세포를 0.1 μg/mL 단일 D 또는 TAuD(동등 농도)로 24시간 동안 처리하였다. 세포를 세척하고, 새로운 배지로 보충하고, 150 μL 세포 시계 염료 시약을 첨가하였다. 1시간 후 세포를 세척하고 광학 현미경(Eclipse Ti, Nikon, Japan)을 사용하여 영상을 얻었다. G2/M, S 및 G0/G1 단계의 세포는 진한 파란색, 녹색 및 황색으로 각각 색 변화를 나타냈다. 각 단계의 컬러 픽셀은 ImageJ 소프트웨어를 사용하여 현미경 사진으로 정량화하였다.The major cell cycle phases of MDA-MB-231 cells after treatment with single D and TAuD nanocomposites were analyzed using cell clock method (Biocolor Ltd., UK). Inoculated cells 12-well cell culture plate in the (2 × 10 5 cells / well) and were allowed to attach to the cells cultured overnight. Cells were then treated with 0.1 μg / mL single D or TAuD (equivalent concentration) for 24 h. Cells were washed, supplemented with fresh medium, and 150 μL of cell timed dye reagent added. After 1 hour, the cells were washed and images were obtained using an optical microscope (Eclipse Ti, Nikon, Japan). Cells of G2 / M, S and G0 / G1 stages showed dark blue, green and yellow color change, respectively. The color pixels at each step were quantified by microscopy using ImageJ software.

단일 D 및 TAuD 처리 후 MDA-MB-231 세포의 세포주기 분석은 산화 환원 염료를 사용하여 수행하였다. 도 17에 도시된 바와 같이, 대부분의 대조군 세포는 S 및 G0/G1 단계에 있었고, 단일 D 처리는 세포의 53 %에서 G2/M 성장 정지를 유도하였다. TAuD 처리된 세포 중 67 %는 G2/M 체크 포인트에 도달하였다. 이러한 관찰은 엔도-리소좀에서 TAuD 내재화 증가 및 세포막 전달체를 통한 D 유출의 감소와 함께 핵으로의 D 방출로 이어질 수 있다.Cell cycle analysis of MDA-MB-231 cells following single D and TAuD treatment was performed using redox dyes. As shown in FIG. 17, most of the control cells were in the S and G0 / G1 stages and single D treatment induced G2 / M growth arrest in 53% of the cells. 67% of the TAuD treated cells reached the G2 / M checkpoint. This observation can lead to an increase in TAuD internalization in endo-lysosomes and a D release to the nucleus with a decrease in D efflux through the cell membrane transporter.

도 18은 생체 내 항 종양 평가에 관한 것으로서, 단일 D를 포함하여 근적외선(NIR) 조사의 유무에 따른 비교예 1(TAu) 및 실시예 1(TAuD)에 대한 이종 이식 쥐를 지닌 MDA-MB-231의 (a) 종양 성장 및 (b) 중량-변화 프로파일 그래프 및 (c) 주입 후 24 시간 동안 안락사된 쥐에서 채취한 주요 장기[간(i), 폐(ii), 심장(iii), 비장(iv) 및 신장(v)]와 종양(vi)에 대한 Cy5.5 단독(중간) 및 Cy5.5와 결합한 비교예 1(TAu)(우측)의 생체 외 형광 이미지이다.18 shows the results of in vivo antitumor assays in which MDA-MB-T cells with xenotransplants for Comparative Example 1 (TAu) and Example 1 (TAuD), with and without NIR irradiation, (I), lung (ii), heart (iii), spleen (iii), and spleen collected from rats euthanized for 24 hours after injection (right) of Cy5.5 alone (intermediate) and Cy5.5 combined with tumor (iv) and kidney (v) and tumor (vi)

MDA-MB-231 이종 이식 종양은 코닝 Matrigel 매트릭스와 혼합된 1×107 MDA-MB-231 세포의 피하 주사에 의해 6 주된 암컷 BALB/c 누드 마우스에서 생성하였다. 종양이 대략 100 mm3의 부피에 도달했을 때, 쥐를 4 내지 6 마리씩 5 개의 그룹으로 나누었다. 이 그룹들 중 4개 그룹은 자유 D (식염수), TAu (근적외선 조사), 또는 TAuD (근적외선 조사 여부와 상관없이)의 정맥 내 투여를 받았다. 샘플은 체중 kg 당 5 mg 약물에 상응하는 용량으로 투여하였다. 마우스를 주사 후 24 시간에 피부를 통해 NIR에 3 W/cm2의 세기로 3분 동안 노출시켰다. 종양의 크기는 디지털 캘리퍼스로 측정하였고 종양의 부피는 체적=1/2×(최장 치수)×(최단 치수)로 계산하였다. 모든 동물 취급 절차는 영남대학교의 기관 동물 윤리위원회의 승인을 받은 절차에 따라 수행되었다.MDA-MB-231 xenograft tumors were generated in 6-week-old female BALB / c nude mice by subcutaneous injection of 1 x 10 7 MDA-MB-231 cells mixed with a Corning Matrigel matrix. When tumors reached a volume of approximately 100 mm &lt; 3 & gt ;, mice were divided into 5 groups of 4 to 6 mice. Four of these groups received intravenous doses of free D (saline), TAu (near infrared), or TAuD (with or without near infrared radiation). Samples were administered at a dose equivalent to 5 mg of drug per kg of body weight. The mice were exposed to NIR through the skin for 3 minutes at a power of 3 W / cm 2 at 24 hours after injection. The tumor size was measured with a digital caliper and the volume of the tumor was calculated as volume = 1/2 × (longest dimension) × (shortest dimension). All animal handling procedures were carried out in accordance with procedures approved by Yeungnam University's Institutional Animal Ethics Committee.

도 18(a)에 도시된 바와 같이, NIR 조사에 의한 TAu 및 TAuD의 항 종양 효능을 MDA-MB-231 보유 암컷 BALB/c 누드 마우스를 사용하여 생체 내에서 조사하였다. 처리되지 않은 대조군과 비교하여, 단일 D 또는 TAu 또는 TAuD로 처리하여 NIR을 조사한 쥐는 실험 기간이 끝날 때 종양 체적이 현저하게 감소하였다. TAu로 치료하고 NIR을 조사한 쥐는 또한 고열 유도로 인한 중요한 종양 퇴행을 나타냈다.As shown in Figure 18 (a), the antitumor efficacy of TAu and TAuD by NIR irradiation was investigated in vivo using female BALB / c nude mice bearing MDA-MB-231. Compared to the untreated control group, rats treated with single D or TAU or TAUD and irradiated with NIR significantly decreased tumor volume at the end of the experimental period. Rats treated with TAu and investigated for NIR also showed significant tumor regression due to high heat induction.

도 18(b)에 도시된 바와 같이, 체중 변화 프로파일은 TAuD 치료가 치료의 마지막까지 생쥐의 체중에 유의한 변화를 유발하지 않았으나, D 단일 치료는 치료 7 일부터 체중 감소를 유도하였다. 이는 TAuD 치료가 D와 관련하여 유의한 전신성 세포 독성을 유도하지 않는다는 것을 의미한다.As shown in FIG. 18 (b), the weight change profiles did not cause significant changes in the body weight of the mice until the end of treatment, whereas the D single treatment induced weight loss from the 7th day of treatment. This means that TAuD treatment does not induce significant systemic cytotoxicity in relation to D.

도 18(c)에 도시된 바와 같이, 주입 후 24 시간 후의 TAu 생체 분포를 생체 외 형광 영상(FOBI, NeoScience Co., Ltd, Korea)을 사용하여 평가하였다.As shown in Fig. 18 (c), the TAu biodistribution 24 hours after the injection was evaluated using an in vitro fluorescence image (FOBI, NeoScience Co., Ltd, Korea).

MDA-MB-231 이종 이식 BALB/c 마우스에서의 TAu의 생체 내 분포는 형광 생체 내 이미징 시스템(FOBITM, Neoscience, Korea)을 사용하여 조사하였다. 이종 이식 쥐에 Cy5.5를 결합한 TAu를 정맥 내에 주사 하였다. 24시간 후, CO2 질식으로 생쥐를 희생시켰다. 종양 및 주요 장기를 절제하고 적색 채널에서 FOBITM을 사용하여 스캔하였다. 형광 세기는 NEOimage 소프트웨어를 사용하여 결정하였다.The in vivo distribution of TAu in MDA-MB-231 xenografted BALB / c mice was investigated using a fluorescence in vivo imaging system (FOBITM, Neoscience, Korea). Cyto5.5-conjugated TAu was intravenously injected into xenotransplanted mice. After 24 hours, the mice were sacrificed by CO 2 suffocation. Tumors and major organs were excised and scanned using FOBITM in the red channel. Fluorescence intensity was determined using NEOimage software.

TAu는 종양, 간, 폐 및 신장에 축적되는 것으로 확인하였으나, 심장 및 비장의 축적은 미미하였다. 종양에서의 Cy5.5를 결합한 TAu의 평균 형광 강도는 간에서의 두 배였으며, 이는 TAu 크기 분포에 의해 증가된 투과 및 보유로 인해 종양 조직에서의 TAu의 우선적 및 수동적 축적을 의미한다.TAu was found accumulating in tumors, liver, lungs and kidney, but accumulation of heart and spleen was minimal. The mean fluorescence intensity of TAu conjugated with Cy5.5 in the tumor was twice that in the liver and this indicates preferential and passive accumulation of TAu in tumor tissue due to increased permeation and retention by the TAu size distribution.

도 19는 생리 식염수 및 실시예 1(TAuD)로 전처리한 쥐의 종양에 근적외선(NIR) 조사하던 중 생체 내 광열 촬영한 이미지이다.FIG. 19 is an in vivo photothermographic image of a tumor of a rat pretreated with physiological saline and Example 1 (TAuD) while undergoing near infrared (NIR) irradiation.

TAuD 투여 시, 디지털 열 화상 카메라 (Therm-App TH, Israel)를 사용하여 생체 내 광열 이미징을 수행하였다. 간단히 말하면, 생쥐는 식염수 또는 TAuD로 치료받았다. 24 시간 후, 종양을 NIR 조사 (4.0 W/cm2)에 최대 5분 동안 노출시켰다. 그런 다음 디지털 이미징을 수행하여 치료의 광열 효과를 결정하였다.At TAuD administration, in vivo photothermal imaging was performed using a digital thermal imager (Therm-App TH, Israel). Briefly, mice were treated with saline or TAuD. After 24 hours, the tumors were exposed to NIR irradiation (4.0 W / cm 2 ) for up to 5 minutes. Digital imaging was then performed to determine the photothermal effect of the treatment.

도 19에 도시된 바와 같이, MDA-MB-231을 갖는 이종 이식 쥐에서 TAuD 치료의 광열 효과를 조사하기 위해 생체 내 이미징을 수행하였다. 꼬리 정맥을 통한 주사 후 24시간에, 종양을 NIR 조사 (4.0 W/cm2)에 최대 5분 동안 노출시켰다. 생리 식염수로 처리한 쥐에서는 유의한 열 상승이 발생하지 않았다. TAuD로 치료한 쥐는 초점 영역에서 34.8 ℃에서 43.4 ℃로 상당한 열 상승을 보였다. NIR에 노출되지 않은 신체 부위에서 명백한 온도 변화는 관찰되지 않았다. 근적외선 빛은 생물체에서 수 밀리미터의 깊이까지만 침투할 수 있으나, TAuD에 의한 종양의 효과적인 타겟팅으로 인하여 명백한 항암 효과를 나타낸다.As shown in Figure 19, in vivo imaging was performed to investigate the photothermal effects of TAuD treatment in xenografted mice with MDA-MB-231. At 24 hours after injection through the tail vein, tumors were exposed to NIR irradiation (4.0 W / cm 2 ) for up to 5 minutes. No significant heat buildup occurred in rats treated with saline solution. The rats treated with TAuD showed a significant increase in temperature from 34.8 ° C to 43.4 ° C in the focus area. No apparent temperature changes were observed in body parts not exposed to NIR. Near-infrared light can only penetrate to a depth of a few millimeters in an organism, but exhibits a clear anticancer effect due to the effective targeting of the tumor by TAuD.

도 20은 T 대신에 지질 분자 LAu를 사용하여 상이한 유형의 나노 복합체를 제조하는 다른 조합물로서, (a) 물방울 낙하(FD) 반응으로부터 LAu의 저배율 및 고배율 TEM 이미지, (b) LAu의 광열 활성을 확인하기 위한 LAuD로부터 근적외선(NIR)(632 및 808 nm, 5 분)-트리거 D의 방출 프로파일 및 (c) 제거된 DNA 및 시판되는 리포펙타민과 비교하여 LAu 즉, LAuG와 결합된 pDNA(EGFP 포함)의 유전자 전달 성능 그래프이다. 삽입은 LAuG와 24 시간 및 48 시간 배양 한 HeLa 세포의 형광 이미지를 보여준다.Figure 20 shows another combination of using lipid molecules LAu instead of T to produce different types of nanocomposites. (A) low-magnification and high-magnification TEM images of LAu from drop-drop (FD) (NIR) (632 and 808 nm, 5 min) from the LAuD to confirm the release profile of the Trigger D and (c) pUNA associated with the LAu, LAuG compared to the removed DNA and commercially available lipofectamine EGFP). &Lt; / RTI &gt; Insertion shows fluorescence images of HeLa cells cultured with LAuG for 24 and 48 hours.

HeLa 세포를 24-웰 플레이트에 1×105 세포/웰의 밀도로 접종하였다. 세포를 37 ℃에서 4 시간 동안 2 mg pDNA (NV to pDNA, 10 : 1, w/w)를 함유한 복합 용액으로 처리하였다. 루시퍼 라제 활성은 루미노미터 (TD-20/20, Promega, US)로 측정하였다. 최종 루시퍼라제 활성은 단백질의 RLU/mg로서 나타내었다. 역 형광 현미경(DMI 4000 B, Leica Microsystems, Germany)을 사용하여 세포에서 녹색 형광 단백질 발현을 관찰하였다.It was inoculated into HeLa cells in 24-well plates at a density of 1 × 10 5 cells / well. Cells were treated with a complex solution containing 2 mg pDNA (NV to pDNA, 10: 1, w / w) for 4 hours at 37 ° C. Luciferase activity was measured with a luminometer (TD-20/20, Promega, US). The final luciferase activity is expressed as RLU / mg of protein. Green fluorescence protein expression was observed in cells using an inverted fluorescence microscope (DMI 4000 B, Leica Microsystems, Germany).

FD 반응을 통해 지질 (L-1118, Echelon Biosciences, USA) 분자 결합 Au(LAuD)와 유전자 복합체 LAu(LAuG)를 포함한 다른 나노 복합체를 제조하였다. 도 20(a)에서 보여지는 바와 같이, LAu의 모양을 보여 주며 어두운 부분(Au)이 더 밝은 대비 재료(L) 내에 갇혀 있음을 보여주며, FD 반응을 복잡한 시스템을 수정하지 않고 다양한 유형의 나노 복합체를 제조하도록 확장할 수 있음을 나타낸다.Other nanocomposites including lipid (L-1118, Echelon Biosciences, USA) molecular-binding Au (LAuD) and gene complex LAu (LAuG) were prepared by FD reaction. As shown in Fig. 20 (a), it shows the shape of LAu and shows that the dark part (Au) is trapped in a lighter contrast material (L), and FD reaction can be applied to various types of nano Lt; RTI ID = 0.0 &gt; composites. &Lt; / RTI &gt;

도 20(b)에 도시된 바와 같이, NIR 트리거 D의 방출은 LAuD에 대해 테스트하였으며, 결과는 TAuD의 결과와 유사하다. HeLa 세포로의 LAu의 유전자 전달 성능은 FD 반응의 또 다른 치료에 대한 응용으로서, 루시퍼 라아제 및 강화된 녹색 형광 단백질(EGFP)에 대한 유전자를 함유하는 플라스미드 DNA(pDNA)를 사용하여 추가로 평가하였으며, 이를 도 20(c)에 도시하였다. 24시간 및 48시간 배양한 후, 세포[LA당 (relative luminescence unit; RLU)] 내로 24시간 및 48시간 동안 트랜스펙션한 LAu-pDNA 복합체 즉, LAuG의 양은 리포펙타민의 양과 비교할 만하고 제거된 DNA의 양보다 훨씬 컸다. EGFP를 포함하는 pDNA의 유전자 전달 수행은 제거된 DNA및 시판되는 리포펙타민과 비교하여 LAu 즉, LAuG와 복합체를 형성하였다. 도 20(c)의 상단 이미지는 유전자 전달 성능을 추가로 확인하는 24시간 및 48시간 배양 후 해당 형광 이미지(EGFP 발현에서 파생됨)를 보여준다. LAu를 이용한 NIR 트리거 D 방출 및 유전자 전달의 결과는 FD 반응의 잠재력을 증명하였다. 따라서, 다양한 구성 요소를 갖는 나노 복합체는 광범위한 나노 의학 응용 분야에 대해 효율적으로 제조될 수 있다.As shown in Fig. 20 (b), the emission of NIR trigger D was tested for LAuD, and the results are similar to those of TAuD. The gene delivery performance of LAu to HeLa cells was further evaluated using plasmid DNA (pDNA) containing the gene for luciferase and enhanced green fluorescent protein (EGFP) as an application for another treatment of FD response This is shown in Fig. 20 (c). The amount of LAu-pDNA complex or LAuG transfected for 24 hours and 48 hours into the cell (relative luminescence unit; RLU) after culturing for 24 hours and 48 hours was compared with the amount of lipofectamine, It was much larger than the amount of DNA. The gene delivery performance of pDNA containing EGFP complexed with LAu, i.e., LAuG, compared to the removed DNA and commercially available lipofectamine. The top image of Figure 20 (c) shows the corresponding fluorescence image (derived from EGFP expression) after 24 hours and 48 hours of incubation to further confirm gene delivery performance. The results of NIR trigger D release and gene transfer using LAu demonstrated the potential of the FD response. Thus, nanocomposites with various components can be efficiently fabricated for a wide range of nanomedical applications.

11: 방전부
12: 용액 생성부
13: 분무부
14: 광 조사부
15: 용매 제거부
151: 흡착제
152: 관통 유로
153: 내부관
16: 수집부
161: 금속부
162: 전압인가기
17: 액적 이송부
18: 전기장 인가부11: discharge unit
12:
13:
14:
15: Solvent removal
151: Absorbent
152: Through-
153: internal pipe
16: collecting section
161: metal part
162: Go to the voltage
17:
18:

Claims (23)

전자 공여 그룹(electron donating group)을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 분무하여 액적을 형성하는 분무부;
상기 분무부로부터 형성된 액적에 광을 조사하여 상기 금속 나노입자와 유기물을 재배열시켜 나노 구조체를 형성하는 광 조사부; 및
상기 광 조사부로부터 형성된 나노 구조체로부터 용매를 제거하여 나노 복합체를 생성하는 용매 제거부를 포함하는 나노 복합체의 제조 장치.A spraying part for spraying a solution and a metal nanoparticle aggregate having an electron donating group or containing a negatively charged organic compound to form droplets;
A light irradiating unit for irradiating light onto the droplet formed from the atomizing unit to rearrange the metal nanoparticles and the organic material to form a nanostructure; And
And a solvent removing unit for removing the solvent from the nanostructure formed from the light irradiation unit to produce a nanocomposite. 제 1 항에 있어서, 분무부는 충돌 분무기(collison atomizer)인 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus of claim 1, wherein the atomizing portion is a collision atomizer. 제 1 항에 있어서, 분무부는 이송 기체 주입구를 포함하는 나노 복합체의 제조 장치.2. The apparatus of claim 1, wherein the atomizing portion comprises a transfer gas inlet. 제 1 항에 있어서, 방전에 의하여 금속 전극으로부터 금속 입자를 형성하는 방전부를 추가로 포함하는 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus for manufacturing a nanocomposite according to claim 1, further comprising a discharge portion for forming metal particles from the metal electrode by discharge. 제 1 항에 있어서, 광 조사부는 금속 나노 입자의 일함수보다 큰 광자 에너지를 가지는 광을 조사하는 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus for producing a nanocomposite according to claim 1, wherein the light irradiation unit irradiates light having photon energy larger than a work function of the metal nanoparticles. 제 1 항에 있어서, 용매 제거부는 내부에 흡착제가 마련된 확산 건조기(diffusion dryer)인 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus for manufacturing a nanocomposite according to claim 1, wherein the solvent removing unit is a diffusion dryer having an adsorbent therein. 제 1 항에 있어서, 용매 제거부로부터 형성된 나노 복합체에 전기장을 인가하는 전기장 인가부를 추가로 포함하는 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus for producing a nanocomposite according to claim 1, further comprising an electric field application unit for applying an electric field to the nanocomposite formed from the solvent removal. 제 1 항에 있어서, 전기장 인가부는 액적 이송부의 중앙부에서 가장자리 측으로 전기장을 발생시키도록 마련된 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus for manufacturing a nanocomposite material according to claim 1, wherein the electric field applying unit is arranged to generate an electric field toward the edge side from a central portion of the droplet conveyance unit. 제 1 항에 있어서, 용매 제거부로부터 형성된 나노 복합체를 수집하는 수집부를 추가로 포함하는 나노 복합체의 제조 장치.The apparatus for producing a nanocomposite according to claim 1, further comprising a collector for collecting the nanocomposite formed from the solvent removal. 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하는 용액 및 금속 나노 입자 응집체를 분무하여 액적을 형성하는 단계;
상기 단계에서 형성된 액적에 광을 조사하여 상기 금속 나노입자와 유기물을 재배열시켜 나노 구조체를 형성하는 단계; 및
상기 단계에서 형성된 나노 구조체로부터 용매를 제거하여 나노 복합체를 생성하는 단계를 포함하는 나노 복합체 제조 방법.Forming a droplet by spraying a solution and a metal nanoparticle aggregate having an electron donating group or containing a negatively charged organic compound;
Forming a nanostructure by irradiating light onto the droplet formed in the step and rearranging the metal nanoparticles and the organic material; And
And removing the solvent from the nanostructure formed in the step to produce a nanocomposite. 제 10 항에 있어서, 전자 공여 그룹은 -O-, -OH, 에테르, 에스테르, 아마이드, 또는 아민인 나노 복합체의 제조 방법.The method of claim 10 wherein the electron donating group is -O -, -OH, ether, ester, amide, or a production method of an amine of the nanocomposite. 제 10 항에 있어서, 전자 공여 그룹을 가지는 유기물은 계면활성제, 지질, 약물 또는 이들의 혼합물인 나노 복합체의 제조 방법.11. The method of claim 10, wherein the organic substance having an electron donating group is a surfactant, a lipid, a drug, or a mixture thereof. 제 10 항에 있어서, 금속 나노 입자는 금(Au) 나노 입자인 나노 복합체의 제조 방법.11. The method of claim 10, wherein the metal nanoparticles are gold (Au) nanoparticles. 제 10 항에 있어서, 나노 복합체를 생성하는 단계 후에, 생성된 나노 복합체와 반대 극성의 전기장을 가하여 나노 복합체를 수집하는 단계를 추가로 포함하는 나노 복합체의 제조 방법.11. The method of claim 10, further comprising, after the step of generating the nanocomposite, collecting the nanocomposite by applying an electric field of opposite polarity to the generated nanocomposite. 제 10 항에 있어서, 수집된 나노 복합체를 분산액에 분산시키는 단계를 추가로 포함하는 나노 복합체의 제조 방법.11. The method of claim 10, further comprising dispersing the collected nanocomposite in a dispersion. 다수의 금속 나노 입자 및 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 음전하로 하전된 유기물을 포함하고,
상기 유기물은 금속 나노 입자 사이에 정전기적으로 배열되어 있는 나노 복합체.Comprising a plurality of metal nanoparticles and an electron donating group or a negatively charged organic material,
Wherein the organic material is electrostatically arranged between metal nanoparticles. 제 16 항에 있어서, 금속 나노입자는 금(Au) 나노 입자인 나노 복합체.17. The nanocomposite according to claim 16, wherein the metal nanoparticles are gold (Au) nanoparticles. 제 16 항에 있어서, 전자 공여 그룹을 가지는 유기물은 계면활성제, 지질, 약물 또는 이들의 혼합물인 나노 복합체.The nanocomposite according to claim 16, wherein the organic substance having an electron donating group is a surfactant, a lipid, a drug, or a mixture thereof. 다수의 금(Au) 나노 입자, 전자 공여 그룹을 가지거나 또는 또는 음전하로 하전된 계면활성제, 및 약물을 포함하고,
상기 계면활성제 및 약물이 금속 나노 입자 사이에 정전기적으로 배열되어 있는 나노 복합체.A plurality of gold (Au) nanoparticles, an electron donating group or a negatively charged surfactant, and a drug,
Wherein the surfactant and the drug are electrostatically arranged between the metal nanoparticles. 제 19 항에 있어서, 나노 복합체의 평균 입경은 20 내지 200 nm인 나노 복합체.20. The nanocomposite according to claim 19, wherein the nanocomposite has an average particle diameter of 20 to 200 nm. 제 19 항에 있어서, 고해상도 투과전자현미경으로 측정한(HRTEM) 나노 복합체의 디-스페이스(d-space) 값은 0.20 내지 0.50 nm인 나노 복합체.
The nanocomposite according to claim 19, wherein the d-spacing value of the (HRTEM) nanocomposite measured by a high-resolution transmission electron microscope is 0.20 to 0.50 nm.
제 19 항에 있어서, 자외선/가시광선분광기(UV-vis spectroscopy)로 측정시 나노복합체는 350 내지 800 nm의 파장에서 광대역 흡수 피크를 가지는 나노 복합체. 20. The nanocomposite according to claim 19, wherein the nanocomposite has a broadband absorption peak at a wavelength of 350 to 800 nm when measured by ultraviolet / visible spectroscopy. 제 19 항에 있어서, 약물의 농도(함량)은 1 내지 50 w/w%인 나노 복합체.The nanocomposite according to claim 19, wherein the concentration (content) of the drug is 1 to 50 w / w%.
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080001976A (en) * 2006-06-30 2008-01-04 포항공과대학교 산학협력단 The metal composite nanoparticles having core-shell structure prepared by irradiating x-ray to metal composite solution and the preparation method thereof
KR20120119355A (en) * 2011-04-21 2012-10-31 한국과학기술연구원 Apparatus and method for hybrid nanostructured materials of metallic nanoparticles and carbon nanotubes
KR20160077651A (en) * 2014-12-24 2016-07-04 에스케이이노베이션 주식회사 Nano structures
WO2017014108A1 (en) * 2015-07-23 2017-01-26 国立研究開発法人産業技術総合研究所 Apparatus and method for manufacturing metal nanoparticle dispersion, method for manufacturing metal nanoparticle support, metal nanoparticle, metal nanoparticle dispersion, and metal nanoparticle support
KR101705033B1 (en) 2015-12-18 2017-02-14 충남대학교산학협력단 Self-assembled nanovesicles with multi-walls for stepwise drug-release and manufacturing method thereof
KR101707468B1 (en) 2015-11-10 2017-02-16 영남대학교 산학협력단 Self-assembly preparation method for nanocomposite

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080001976A (en) * 2006-06-30 2008-01-04 포항공과대학교 산학협력단 The metal composite nanoparticles having core-shell structure prepared by irradiating x-ray to metal composite solution and the preparation method thereof
KR20120119355A (en) * 2011-04-21 2012-10-31 한국과학기술연구원 Apparatus and method for hybrid nanostructured materials of metallic nanoparticles and carbon nanotubes
KR20160077651A (en) * 2014-12-24 2016-07-04 에스케이이노베이션 주식회사 Nano structures
WO2017014108A1 (en) * 2015-07-23 2017-01-26 国立研究開発法人産業技術総合研究所 Apparatus and method for manufacturing metal nanoparticle dispersion, method for manufacturing metal nanoparticle support, metal nanoparticle, metal nanoparticle dispersion, and metal nanoparticle support
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