KR20180106974A - A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody - Google Patents
A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody Download PDFInfo
- Publication number
- KR20180106974A KR20180106974A KR1020180031016A KR20180031016A KR20180106974A KR 20180106974 A KR20180106974 A KR 20180106974A KR 1020180031016 A KR1020180031016 A KR 1020180031016A KR 20180031016 A KR20180031016 A KR 20180031016A KR 20180106974 A KR20180106974 A KR 20180106974A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- formulation
- liquid formulation
- arginine
- concentration
- sucrose
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
Abstract
Description
본 발명은 항-TNF 알파 항체, 구체적으로 아달리무맙의 액상 제제에 관한 것이다. The present invention relates to a liquid formulation of an anti-TNF alpha antibody, specifically adalimumab.
종양괴사인자 알파 (TNF alpha, TNFa)는 엔도톡신 등의 자극에 의해 단핵백혈구 및 대식세포 등의 다양한 종류의 세포에 의해 만들어지는 사이토카인이다. TNFa는 TNF 수용체를 활성화시켜 T-세포 활성화, 흉선세포 증식 등의 반응을 유도하는 역할을 하는 주요 염증성, 면역성, 병리생리학적 반응의 주요 매개체이다 (Grell, M., et al. (1995) Cell, 83: 793-802).Tumor necrosis factor alpha (TNF alpha) is a cytokine produced by various types of cells, such as monocytes and macrophages, by stimulation of endotoxin and the like. TNFa is a major mediator of major inflammatory, immune, and pathophysiological responses that activate TNF receptors to induce T-cell activation and thymocyte proliferation (Grell, M., et al. (1995) Cell , 83: 793-802).
아달리무맙은 체내에서 종양괴사인자 알파에 선택적으로 결합하여 종양괴사인자 알파에 의한 면역반응을 저해하는 재조합 인간 면역글로불린 G1 단일클론성 항체이다. 아달리무맙은 1993년경 BASP Bioresearch Corporation에 의해 개발되었고 애벗래버러토리스 사 (Abbott Laboratories)를 통해 류마티스 관절염 치료제로 판매 승인되었다. 아달리무맙은 휴미라라는 상품명으로 판매되고 있으며, 휴미라는 류마티스 관절염 치료제로 판매허가를 받은 후 크론병, 강직성 척추염, 건선성 관절염, 궤양성 대장염 등의 치료에 사용되고 있다. Adalimuma is a recombinant human immunoglobulin G1 monoclonal antibody that selectively binds to tumor necrosis factor alpha in the body and inhibits the immune response by tumor necrosis factor alpha. Adalimumab was developed by BASP Bioresearch Corporation in 1993 and has been approved for sale as a treatment for rheumatoid arthritis by Abbott Laboratories. Admiral is marketed under the brand name HUMIRA, and HUMIRA is licensed as a treatment for rheumatoid arthritis and is used in the treatment of Crohn's disease, ankylosing spondylitis, psoriatic arthritis, and ulcerative colitis.
아달리무맙은 의약품으로 개발된 최초의 완전 인간항체로 파아지 디스플레이 기술을 적용하여 개발되었고 CDR에 돌연변이를 일으켜 친화력이 증강되었다. 아달리무맙은 D2E7이라고도 불리며, 1330개의 아미노산으로 이루어진 약 148kD의 분자량을 가지고 있다 (US 등록특허 6090382). 아달리무맙은 TNF와 결합하여 p55, p75 세포 표면의 TNF 수용체와 TNF가 서로 반응하지 못하도록 하여 TNF가 유도하는 반응을 막는 TNFa 저해제이다.Adalimumab is the first fully human antibody developed as a pharmaceutical product, developed by applying phage display technology and mutating in CDRs to enhance affinity. Adalimuma is also called D2E7 and has a molecular weight of about 148 kD consisting of 1330 amino acids (US Patent 6090382). Adalimumab is a TNFa inhibitor that binds to TNF and blocks TNF-induced responses by preventing TNF receptors on the surface of p55 and p75 cells from reacting with each other.
한편, 항체의약품은 단백질 의약품의 한 종류로 다양한 요인에 의해 물리적, 화학적 변성이 일어날 수 있다. 단백질의 변성은 산화, 탈아미드화, 이성질체화와 같은 화학적 변성과 단편이 생기거나 응집이 되는 등의 구조적 변성이 일어날 수 있으며, 단백질이 변성될 경우 단백질 자체의 약리 활성을 잃으며, 체내에서 부작용으로 불필요한 면역반응을 유도할 수도 있다. 항체가 단편화(Framentation)되는 경우, binding affinity나 체내에 머무르는 시간을 변화시켜 약리활성에 영향을 미칠 수 있다. 또한 단편화된 항체가 항체의 응집을 유도한다는 연구결과가 있다. 또한 응집에 의해 약리활성이 줄어들기도 한다. 상용 인터페론 베타 제품을 비교하였을 때 응집물 (aggregate) 및 입자 (particle)의 함량이 많은 제품이 체내에서 중화항체가 발생되는 비율도 높다는 연구 결과가 있다 (Barnard et al., 2013, J. Pharm. Sci. 102:915). 체내에서 중화항체가 생기면 단백질의약품을 주사하더라도 그 단백질의약품에 중화항체가 결합하여 단백질의약품의 안전성, 약리효과, 약동학에 영향을 미친다. 또한 EpoetinAlfa의 변성 및 응집이 Epoetin Alfa 의약품의 면역원성 증가의 원인으로 밝혀지기도 했다. 따라서 단백질 의약품의 경우 저장기간 동안 그 생리활성을 잃지 않도록, 또한 단백질이 단편화, 응집이나 입자화되지 않도록 적절한 제형으로 제조하는 것이 매우 중요하다. 따라서 여러 단백질 의약품의 제형에 대한 연구가 활발하게 일어나고 있다.Antibody drugs, on the other hand, are a kind of protein drugs, and physical and chemical degeneration can occur due to various factors. Protein denaturation may result in chemical modification such as oxidation, deamidation, isomerization, structural modification such as fragmentation or aggregation, and when the protein is denatured, it loses the pharmacological activity of the protein itself, To induce an unwanted immune response. When the antibody is fragmented, it can affect the pharmacological activity by changing the binding affinity or the time of staying in the body. Also, there is a research result that a fragmented antibody induces aggregation of an antibody. In addition, pharmacological activity may be reduced by aggregation. Compared to commercially available interferon beta products, studies have shown that products with high aggregate and particle content have a high rate of neutralizing antibodies in the body (Barnard et al., 2013, J. Pharm. Sci 102: 915). If a neutralizing antibody is present in the body, even if a protein drug is injected, the neutralizing antibody binds to the protein drug, which affects the safety, pharmacological effect and pharmacokinetics of the protein drug. In addition, the degeneration and aggregation of EpoetinAlfa was found to be responsible for the increased immunogenicity of Epoetin Alfa drugs. Therefore, in the case of protein drugs, it is very important not to lose the physiological activity during the storage period, and also to prepare the appropriate formulation so that the protein is not fragmented, aggregated or granulated. Therefore, studies on the formulation of various protein drugs are taking place actively.
단백질 제형의 연구는 각 제품의 특성을 고려하여 여러 첨가제를 적절히 혼합함으로써 최적의 조합을 찾아 환자가 투여하기 전까지 안정하게 보관할 수 있게 하는데 그 목적이 있다. 첨가제를 투입하는 주된 목적은 단백질의 안정화와 혼합물질의 물리적인 특성을 조절하기 위함이다. 첨가제는 그 목적과 특성에 따라 계면활성제, 안정화제, 보존제, 완충제 및 등장화제 등으로 구분된다. 항체 의약품의 경우 유효한 치료 효과를 내기 위해 다른 단백질 의약품보다 많은 양의 단백질이 투여될 필요가 있다. 또한 투여 루트가 피하주사인 경우 한 번에 많은 부피를 투여하기에는 환자의 통증 및 생산 등의 어려움이 있기 때문에 고농도 제형개발이 중요하다. 단백질의 농도가 높아지면 intermolecular interaction이 증가하면서 응집체 증가, 점도 증가, 용액의 gel 화 및 침전 등의 문제점이 생긴다. 이 중, 점도가 지나치게 증가하면 생산이 용이하지 못할 뿐만 아니라 주사압의 증가로 환자에게 투여하기 어렵다. 따라서 고농도의 항체 용액의 점도를 예측하고 낮추는 여러 가지 방법이 연구되고 있다. The purpose of the study of protein formulations is to optimally combine various additives in consideration of the characteristics of each product so that they can be stably stored until the patients are administered. The main purpose of adding additives is to stabilize the protein and to control the physical properties of the compound. Additives may be classified into surfactants, stabilizers, preservatives, buffering agents and isotonic agents depending on their purpose and characteristics. In the case of antibody drugs, it is necessary to administer more protein than other protein drugs in order to have an effective therapeutic effect. In addition, when the administration route is subcutaneous injection, it is important to develop a high-concentration formulation because there are difficulties in patient's pain and production to administer a large volume at a time. As protein concentration increases, intermolecular interactions increase, leading to problems such as increased aggregation, increased viscosity, gelation and precipitation of solution. Among them, when the viscosity is excessively increased, the production is not easy and it is difficult to administer to patients due to an increase in the injection pressure. Therefore, various methods for predicting and decreasing the viscosity of high concentration antibody solutions have been studied.
본 발명의 하나의 과제는 항-TNF 알파 항체의 액상 제제를 제공하는 것이다. One subject of the present invention is to provide a liquid formulation of an anti-TNF alpha antibody.
본 발명의 다른 하나의 과제는 상기 액상 제제의 제조 방법을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a method for producing the above liquid preparation.
본 발명의 다른 하나의 과제는 안정화제, 계면활성제, 및 아르기닌을 포함하는 조성물을 사용하여, 항-TNF 알파 항체의 안정화를 증가시키는 방법을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a method for increasing the stabilization of an anti-TNF alpha antibody using a composition comprising a stabilizer, a surfactant, and arginine.
본 발명의 다른 하나의 과제는 완충제를 포함하지 않고, 안정화제, 계면활성제, 및 아르기닌을 포함하는 조성물을 사용하여, 항-TNF 알파 항체의 안정화를 증가시키는 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for increasing the stabilization of an anti-TNF alpha antibody using a composition comprising a stabilizer, a surfactant, and arginine without buffering.
이하에서는, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
한편, 본원에서 개시되는 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술되는 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 할 수 없다.On the other hand, each description and embodiment disclosed herein can be applied to each other description and embodiment. That is, all combinations of the various elements disclosed herein are within the scope of the present invention. Further, the scope of the present invention can not be said to be limited by the following detailed description.
또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 통상의 실험만을 사용하여 본 출원에 기재된 본 발명의 특정 양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있다. 또한, 이러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.In addition, those of ordinary skill in the art will recognize, or be able to ascertain using no more than routine experimentation, many equivalents to the specific embodiments of the invention described in this application. Further, such equivalents are intended to be included in the present invention.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 하나의 양태는 항-TNF 알파 항체의 액상 제제이다. One aspect of the present invention for solving the above problems is a liquid preparation of an anti-TNF alpha antibody.
본 발명에서 용어, "항-TNF 알파 항체"는 TNF 알파에 결합하여 이의 생물학적 활성을 조절하는 항체를 말한다. 보다 구체적으로, 상기 항체는 TNF 알파에 결합하여 TNF 알파와 이의 수용체 간의 결합을 억제하여 TNF 알파에 의한 신호전달을 억제하는 기능을 보유할 수 있다. 또한, 이러한 항-TNF 알파 항체는 단일클론항체일 수 있다. As used herein, the term "anti-TNF alpha antibody" refers to an antibody that binds to TNF alpha and modulates its biological activity. More specifically, the antibody may bind to TNF alpha and inhibit binding between TNF alpha and its receptor, thereby inhibiting signaling by TNF alpha. In addition, such anti-TNF alpha antibodies may be monoclonal antibodies.
상기 항-TNF 알파 항체는 전장 항체 또는 이의 항원 결합 부위를 포함하는 항체 단편의 형태일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. The anti-TNF alpha antibody may be in the form of an antibody fragment comprising a full-length antibody or antigen-binding portion thereof, but is not particularly limited thereto.
보다 구체적으로, 상기 항-TNF 알파 항체는 재조합 인간 면역글로불린 G1 단일클론 항체일 수 있으며, 보다 더 구체적으로 아달리무맙일 수 있다. 상기 아달리무맙에 대한 정보는 공지의 데이터베이스에서 당업자가 용이하게 입수할 수 있다. More specifically, the anti-TNF alpha antibody may be a recombinant human immunoglobulin Gl monoclonal antibody, and even more specifically, may be unmodified. The information on Adalimumab is readily available to those skilled in the art from known databases.
상기 항체는 포유세포 발현 시스템을 이용한 재조합 DNA 기술을 통하여 제조될 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. The antibody may be produced through recombinant DNA technology using a mammalian cell expression system, but is not limited thereto.
상기 항체는 본 발명에 따른 액상 제제에 치료학적 유효량으로 포함될 수 있다. 구체적인 예로, 1 내지 250mg/mL의 농도, 구체적으로, 20 내지 200mg/mL의 농도, 더 구체적으로는, 50mg/mL 내지 200mg/mL의 농도, 더욱 더 구체적으로 50mg/mL, 100mg/mL, 또는 130mg/mL의 농도로 존재할 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. The antibody may be included in a therapeutically effective amount in a liquid formulation according to the present invention. Specific examples include a concentration of 1 to 250 mg / mL, specifically a concentration of 20 to 200 mg / mL, more specifically a concentration of 50 to 200 mg / mL, more specifically 50 mg / mL, 100 mg / mL or 130 mg / mL, but is not particularly limited thereto.
본 발명의 액상 제제는 항-TNF 알파 항체 외에 안정화제, 계면활성제, 및 아르기닌을 포함할 수 있다. 상기 액상제제는 항-TNF 알파 항체를 안정적으로 저장할 수 있는 용액 제형일 수 있다. The liquid preparations of the present invention may contain stabilizers, surfactants, and arginine in addition to the anti-TNF alpha antibody. The liquid preparation may be in a solution formulation capable of stably storing the anti-TNF alpha antibody.
구체적으로, 항-TNF 알파 항체의 안정성을 측정하기 위하여 당해 분야에서 널리 알려진 단백질 안정성 분석법이 이용될 수 있다. 안정성은 선택된 시간 동안에 선택된 온도에서 측정할 수 있다. 신속한 시험을 위해, 제형은 보다 높은 또는 "가속화된" 온도, 예를 들면, 2주 내지 1개월 이상 동안 40℃에서 보관할 수 있으며, 이 시점에서 시간-의존성 안정성을 측정한다.In particular, protein stability assays well known in the art can be used to determine the stability of anti-TNF alpha antibodies. Stability can be measured at selected temperatures during selected times. For rapid testing, the formulation can be stored at 40 DEG C for a higher or "accelerated" temperature, for example, 2 weeks to 1 month, at which time the time-dependent stability is measured.
본 발명에서 "항-TNF 알파 항체에 안정화를 부여한다는 것"은 일정한 시간 동안 특정 저장 조건, 구체적으로 특정 온도 하에서 활성 성분의 손실이 특정량 미만, 예컨대 10% 미만임을 의미한다. 보통, 5±3℃에서 2년, 25±2℃에서 6개월 또는 40±2℃에서 1개월 내지 2개월 동안 항-TNF 알파 항체가 90% 이상, 구체적으로는 약 92% 이상의 잔존율을 유지하는 경우 이러한 제제는 안정한 것으로 이해될 수 있다. In the present invention, "imparting stabilization to an anti-TNF alpha antibody" means that the loss of the active ingredient under a certain storage condition, specifically a specific temperature, for a certain period of time is less than a certain amount, for example less than 10%. Usually, an anti-TNF alpha antibody maintains a residual ratio of 90% or more, specifically, about 92% or more for 2 months at 5 ± 3 ° C, 6 months at 25 ± 2 ° C, or 1 month to 2 months at 40 ± 2 ° C These preparations can be understood to be stable.
본 발명의 액상 제제에 포함되는 안정화제는 폴리올, 아미노산, 또는 이들의 조합일 수 있다. 여기서, 상기 아미노산은 아르기닌 외의 다른 아미노산일 수 있다.The stabilizing agent included in the liquid formulation of the present invention may be a polyol, an amino acid, or a combination thereof. Here, the amino acid may be an amino acid other than arginine.
구체적으로, 상기 안정화제는 1) 한 종류의 폴리올, 2) 한 종류의 폴리올과 한 종류의 아미노산 간의 조합, 3) 한 종류의 폴리올, 제1 아미노산, 및 제2 아미노산의 조합, 4) 제1 폴리올 및 제2 폴리올의 조합, 5) 제1 폴리올, 제2 폴리올 및 한 종류의 아미노산 간의 조합, 6) 제1 폴리올, 제2 폴리올, 제1 아미노산, 및 제2 아미노산 간의 조합, 또는 7) 한 종류의 아미노산일 수 있다. Specifically, the stabilizer may be selected from the group consisting of 1) one polyol, 2) a combination of one kind of polyol and one kind of amino acid, 3) one polyol, 1 amino acid and 2 amino acid combination, 4) A combination of a polyol and a second polyol, 5) a combination of a first polyol, a second polyol and one kind of amino acid, 6) a combination of a first polyol, a second polyol, a first amino acid, and a second amino acid, or 7) Lt; / RTI > amino acids.
보다 구체적으로, 상기 폴리올은 만니톨, 수크로오스, 트레할로스, PEG, 또는 이들의 조합일 수 있으며, 보다 구체적으로 수크로오스, 트레할로스, PEG, 또는 이들의 조합일 수 있다. 상기 PEG는 구체적으로 PEG400 혹은 PEG4000일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제제에서 폴리올은 0.1 내지 100 mg/mL의 농도로 존재할 수 있다. More specifically, the polyol may be mannitol, sucrose, trehalose, PEG, or a combination thereof, more particularly sucrose, trehalose, PEG, or combinations thereof. The PEG may be specifically PEG 400 or PEG 4000, but is not particularly limited thereto. The polyol in the formulation may be present in a concentration of 0.1 to 100 mg / mL.
보다 구체적으로, 상기 아르기닌 외의 다른 아미노산은 글리신, 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 또는 프롤린일 수 있다. 상기 제제에서 아미노산은 1 내지 300 mM의 농도로 존재할 수 있다. More specifically, the amino acids other than arginine may be glycine, leucine, isoleucine, phenylalanine, or proline. The amino acid in the formulation may be present in a concentration of 1 to 300 mM.
또한, 본 발명에서 용어 "아미노산"은 실질적으로 동일한 효능을 나타내는 해당 아미노산의 유사체, 용매화물, 수화물, 입체 이성질체, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 형태도 모두 포함한다. In addition, the term "amino acid" in the present invention encompasses analogues, solvates, hydrates, stereoisomers, and pharmaceutically acceptable salts of the corresponding amino acids which exhibit substantially the same effect.
본 발명에서 용어, "약학적으로 허용가능한 염"이란 약학적으로 허용되는 무기산, 유기산, 또는 염기로부터 유도된 염을 포함한다. 적합한 산의 예로는 염산, 브롬산, 황산, 질산, 과염소산, 푸마르산，말레산, 인산, 글리콜산, 락트산, 살리실산，숙신산, 톨루엔-p-설폰산, 타르타르산, 아세트산，시트르산, 메탄설폰산，포름산, 벤조산, 말론산, 나프탈렌-2-설폰산， 벤젠설폰산 등을 들 수 있다. 적합한 염기로부터 유도된 염은 나트륨, 칼륨 등의 알칼리 금속，마그네슘 등의 알칼리 토금속，및 암모늄 등을 포함할 수 있다.The term "pharmaceutically acceptable salt" as used herein includes salts derived from pharmaceutically acceptable inorganic acids, organic acids, or bases. Suitable acids include, for example, hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, perchloric acid, fumaric acid, maleic acid, phosphoric acid, glycolic acid, lactic acid, salicylic acid, succinic acid, toluene-p-sulfonic acid, tartaric acid, acetic acid, , Benzoic acid, malonic acid, naphthalene-2-sulfonic acid, and benzenesulfonic acid. Salts derived from suitable bases may include alkali metals such as sodium and potassium, alkaline earth metals such as magnesium, and ammonium.
또한, 본 발명에서 사용된 용어 "용매화물"은 아미노산 또는 이의 염이 용매 분자와 복합체를 형성한 것을 말한다. The term "solvate ", as used herein, refers to an amino acid or salt thereof complexed with a solvent molecule.
보다 더 구체적으로, More specifically,
상기 안정화제는 (i) 수크로오스 또는 트레할로스, (ii) 수평균 분자량이 200 내지 600인 PEG, 또는 수 평균 분자량이 1000 내지 8000인 PEG, (iii) 글리신 또는 류신, 및 (iv) 상기 (i) 내지 (iii) 중 2 이상의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. Wherein the stabilizer is selected from the group consisting of (i) sucrose or trehalose, (ii) PEG having a number average molecular weight of 200 to 600, or PEG having a number average molecular weight of 1000 to 8000, (iii) glycine or leucine, To (iii), but is not particularly limited thereto.
보다 더 구체적인 예로서, 상기 안정화제는 1) 수크로오스, 트레할로스및 PEG400 중 어느 하나, 2) 수크로오스 또는 트레할로스와 글리신 또는 류신의 조합, 3) 수크로오스 또는 트레할로스와 글리신 및 류신의 조합, 4) 수크로오스 또는 트레할로스와 PEG4000의 조합, 5) 수크로오스 또는 트레할로스, PEG4000, 및 글리신의 조합, 6) 수크로오스 또는 트레할로스, PEG4000, 및 류신의 조합, 7) 수크로오스 또는 트레할로스, PEG4000, 글리신, 및 류신의 조합, 및 8) 글리신으로 이루어진 군에서 선택되는 하나일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. As a more specific example, the stabilizer may be selected from the group consisting of 1) any of sucrose, trehalose and PEG400, 2) a combination of sucrose or trehalose with glycine or leucine, 3) a combination of sucrose or trehalose with glycine and leucine, 4) sucrose or trehalose A combination of sucrose or trehalose, PEG4000, and glycine, 6) a combination of sucrose or trehalose, PEG4000 and leucine, 7) a combination of sucrose or trehalose, PEG4000, glycine, and leucine, and 8) glycine , But it is not limited thereto.
본 발명의 액상 제제에 포함되는 계면활성제는 비이온성 계면활성제일 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트 또는 폴록사머일 수 있다.The surfactant contained in the liquid preparation of the present invention may be a nonionic surfactant. More specifically, the surfactant may be polysorbate or poloxamer.
구체적으로, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트80, 폴리소르베이트20, 또는 폴록사머188일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. Specifically, the surfactant may be polysorbate 80, polysorbate 20, or poloxamer 188, but is not particularly limited thereto.
상기 제제에서 계면활성제는 0.1 내지 5 mg/mL의 농도로 존재할 수 있다. Surfactants in the formulation may be present in a concentration of 0.1 to 5 mg / mL.
본 발명의 액상 제제에 포함되는 아르기닌은 염 형태로 존재할 수 있다. 보다 구체적으로, 약학적으로 허용가능한 염의 형태일 수 있다.The arginine contained in the liquid formulation of the present invention may exist in salt form. More specifically, it may be in the form of a pharmaceutically acceptable salt.
보다 구체적으로 상기 아르기닌은 아르기닌 염산염 (Arginine hydrochloride) 형태일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. More specifically, the arginine may be in the form of arginine hydrochloride, but is not particularly limited thereto.
상기 제제에서 아르기닌은 0.1 내지 200 mM의 농도로 존재할 수 있다. 보다 구체적으로, 아르기닌은 상기 항체가 100mg/mL로 제제에 존재하는 경우에는 0.1 내지 140mM의 농도로 존재할 수 있고, 항체가 50mg/mL로 제제에 존재하는 경우에는 0.1 내지 100mM의 농도로 존재할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. Arginine in the formulation may be present at a concentration of 0.1 to 200 mM. More specifically, arginine may be present at a concentration of 0.1 to 140 mM when the antibody is present in the formulation at 100 mg / mL, and may be present at a concentration of 0.1 to 100 mM when the antibody is present in the formulation at 50 mg / mL , And is not particularly limited thereto.
상기 아르기닌은 점도강하제로서 본 발명의 액상제제에 포함될 수 있다.The arginine may be included in the liquid preparation of the present invention as a viscosity reducing agent.
아르기닌을 포함함으로써, 본 발명의 액상제제는 약 1 내지 6 cps의 점도를 가질 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. 점도의 측정은 당업계에 공지된 다양한 방법을 이용하여 수행될 수 있으며, 예컨대 본원 실시예 1에 기술된 것과 같은 방법으로 수행될 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. By including arginine, the liquid formulation of the present invention can have a viscosity of about 1 to 6 cps, but is not limited thereto. The measurement of the viscosity can be carried out using various methods known in the art and can be carried out, for example, in the same manner as described in Example 1 herein, but is not particularly limited thereto.
본 발명의 액상 제제는 항산화제를 더 포함할 수 있다. The liquid preparation of the present invention may further comprise an antioxidant.
본 발명에서 용어, "항산화제"는 용액 상태에서 단백질의 산화 반응 등에 의하여 일어날 수 있는 불순물 생성을 억제시키는 역할을 수행할 수 있다.In the present invention, the term "antioxidant" can act to inhibit the formation of impurities that may occur due to the oxidation reaction of proteins and the like in a solution state.
이러한 항산화제로서, 황산수소나트륨, 아스코르빈산, 아스코빌팔미테이트, 시트르산, 부틸히드록시아니솔 (BHA), 부틸히드록시톨루엔 (BHT), 티오글리세롤, 프로필갈레이트, 메티오닌, 아스코르브산나트륨, 시트르산나트륨, 황화나트륨, 아황산나트륨, EDTA 및 기타 항산화제를 들 수 있다. 그러나, 이에 제한되는 것은 아니다. Examples of such antioxidants include sodium hydrogen sulfate, ascorbic acid, ascorbyl palmitate, citric acid, butylhydroxyanisole (BHA), butylhydroxytoluene (BHT), thioglycerol, propyl gallate, methionine, sodium ascorbate, Sodium citrate, sodium sulfide, sodium sulfite, EDTA and other antioxidants. However, it is not limited thereto.
상기 제제에서 항산화제, 구체적으로 메티오닌은 1 내지 50 mM의 농도로 존재할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다. The antioxidant, specifically methionine, in the formulation may be present at a concentration of 1 to 50 mM, but is not particularly limited thereto.
또한, 본 발명의 상기 액상 제제의 pH는 4 내지 6일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. The pH of the liquid preparation of the present invention may be 4 to 6, but is not particularly limited thereto.
한편, 특별히 이에 제한되는 것은 아니나, 상기 액상 제제는 추가의 염 및/또는 완충액을 포함하지 않는 것일 수 있다.On the other hand, the liquid preparation may not contain additional salts and / or buffers, although it is not particularly limited thereto.
비제한적인 예로서, 50mg/mL 이상의 항-TNF 알파 항체를 포함하는 제제는 추가의 염 및/또는 완충액을 포함하지 않을 수 있다.By way of non-limiting example, formulations containing 50 mg / mL or more of an anti-TNF alpha antibody may not contain additional salts and / or buffers.
본 발명의 일 실시예에서 확인한 바와 같이, 염, 완충액, 또는 둘 다를 포함하는 제제에 비하여 이들을 포함하지 않는 본 발명에 따른 제제는 항-TNF 알파 항체에 열에 대한 더 높은 안정화를 부여할 수 있다. 그러나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다. As has been seen in one embodiment of the present invention, formulations according to the present invention that do not include salts, buffers, or both, as compared to formulations containing both, can confer higher stabilization of the anti-TNF alpha antibody to heat. However, the present invention is not particularly limited thereto.
한편, 고농도의 항체 의약품, 예컨대 50mg/mL 이상의 항체가 존재하는 의약품의 제형에 추가적인 완충제, 혹은 용액의 삼투압이 체액과 유사한 삼투압 범위에서 벗어나게 하는 양의 추가 첨가제가 사용되지 않으면 투여 시 통증이 감소하여 환자의 편의성이 증대될 수 있다. On the other hand, if a high concentration of an antibody drug, for example an additional buffering agent in the formulation of a drug in which 50 mg / mL or more antibody is present, or an additional additive in an amount such that the osmotic pressure of the solution deviates from the osmotic pressure range similar to body fluids is not used, The convenience of the patient can be increased.
한편, 특별히 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명에 따른 액상제제는 다음과 같은 효과를 보유할 수 있다: On the other hand, although not particularly limited thereto, the liquid preparation according to the present invention may have the following effects:
아르기닌을 포함하는 본 발명에 따른 액상제제는 아르기닌를 포함하지 않는 제제에 비하여 항-TNF 알파 항체 단백질의 응집이 억제되어 상대적으로 낮은 고분자 생성물 (HMW)의 함량을 나타낼 수 있고/있거나, 아르기닌을 포함하지 않는 제제에 비하여 산성 이성질 항체의 생성을 억제하여 상대적으로 낮은 산성 이성질 항체를 포함할 수 있다. 특히, 본 발명에 따른 액상제제는 변성에 의한 항체의 생성 감소, 및/또는 특정 물리적 스트레스에 대한 응집 및 파티클 생성 감소의 효과를 보유할 수 있다. The liquid preparations according to the present invention comprising arginine may exhibit a relatively low molecular weight product (HMW) content and / or contain no arginine due to inhibition of the aggregation of the anti-TNF alpha antibody protein relative to a formulation not containing arginine May contain a relatively low acidic isomeric antibody by inhibiting the production of the acidic isomeric antibody as compared to the unmodified agent. In particular, the liquid preparations according to the present invention may have the effect of reducing the production of antibody by denaturation and / or reducing aggregation and particle generation to certain physical stresses.
본 발명에 따른 용액 제형은 추가로 보존제를 포함할 수 있다. 상기 보존제는 항균제로서 작용하기 위해 제약 제제에 첨가되는 화합물을 의미하는데, 이러한 보존제로 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄, 클로로헥시딘, 페놀, m-크레졸, 벤질 알코올, 메틸파라벤, 프로필파라벤, 클로로부탄올, o-크레졸, p-크레졸, 클로로크레졸, 페닐수은산 질산염(phenylmercuric nitrate), 티메로살, 벤조산 등을 사용할 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 이들 보존제는 1종 단독으로 사용하거나 2종 이상을 임의로 조합하여 사용할 수도 있다.The solution formulations according to the present invention may further comprise a preservative. The preservative refers to a compound added to the pharmaceutical preparation to act as an antimicrobial agent. Examples of such preservatives include benzalkonium chloride, benzethonium, chlorohexidine, phenol, m-cresol, benzyl alcohol, methylparaben, But are not limited to, chlorobutanol, o-cresol, p-cresol, chlorocresol, phenylmercuric nitrate, thimerosal, benzoic acid and the like. These preservatives may be used alone or in combination of two or more.
본 발명에 따른 액상제제는 약학적 조성물의 형태일 수 있다. The liquid preparation according to the present invention may be in the form of a pharmaceutical composition.
또한, 상기 기술한 성분 외에도 다양한 약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다. In addition to the ingredients described above, various pharmaceutically acceptable carriers may be included.
본 발명의 제형은 류마티스 관절염, 건선, 건선성 관절염, 축성 척추관절염 (예, 강직성 척추염, 방사선학적으로 강직성 척추염이 확인되지 않는 중증 축성 척추관절염), 혈관염, 알츠하이머병, 궤양성 대장염, 베체트 장염, 화농성 한선염, 포도막염, 소아특발성 관절염, 소아 판상 건선, 또는 크론병 (성인 크론병, 소아 크론병 포함) 등의 예방 또는 치료에 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The formulations of the present invention are useful for the treatment and / or prophylaxis of rheumatoid arthritis, psoriasis, psoriatic arthritis, condylar spondyloarthritis (e.g., ankylosing spondylitis, severe facial osteoarthritis without radiographic evidence of ankylosing spondylitis), vasculitis, Alzheimer's disease, ulcerative colitis, But are not limited to, prophylactic or therapeutic treatments such as purulent hepatitis, uveitis, pediatric idiopathic arthritis, pediatric psoriasis, or Crohn's disease (including adult Crohn's disease and Pediatric Crohn's disease).
본 발명에 따른 제형은 경구 투여, 또는 피하, 근육 내, 복강 내, 흉골 내, 경피, 및 정맥 내 주사 및 주입을 포함하는 비경구 투여에 의해 체내에 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The formulations according to the invention may be administered to the body by oral administration or by parenteral administration, including, but not limited to, subcutaneous, intramuscular, intraperitoneal, intrasternal, transdermal, and intravenous injection and infusion.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 항-TNF 알파 항체, 안정화제, 계면활성제, 및 아르기닌을 서로 혼합하는 단계를 포함하는, 상기 항-TNF 알파 항체의 액상 제제의 제조 방법이다. Another aspect of the present invention is a method of producing a liquid formulation of the anti-TNF alpha antibody, comprising admixing an anti-TNF alpha antibody, a stabilizer, a surfactant, and arginine to one another.
상기 용어들에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다. 또한, 각 용어들의 구체적인 예들이 본 양태에도 모두 적용됨은 자명하다. The above terms are as described above. In addition, it should be apparent that specific examples of the terms apply to this embodiment as well.
또한, 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 안정화제, 계면활성제, 및 아르기닌을 포함하는 조성물을 사용하여, 항-TNF 알파 항체의 안정화를 증가시키는 방법이다. Yet another aspect of the invention is a method of increasing the stabilization of an anti-TNF alpha antibody using a composition comprising a stabilizing agent, a surfactant, and arginine.
상기 용어들에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다. 또한, 각 용어들의 구체적인 예들이 본 양태에도 모두 적용됨은 자명하다. The above terms are as described above. In addition, it should be apparent that specific examples of the terms apply to this embodiment as well.
본 발명의 다른 하나의 과제는 완충제를 포함하지 않고, 안정화제, 계면활성제, 및 아르기닌을 포함하는 조성물을 사용하여, 항-TNF 알파 항체의 안정화를 증가시키는 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for increasing the stabilization of an anti-TNF alpha antibody using a composition comprising a stabilizer, a surfactant, and arginine without buffering.
상기 용어들에 대해서는 앞서 설명한 바와 같다. 또한, 각 용어들의 구체적인 예들이 본 양태에도 모두 적용됨은 자명하다. The above terms are as described above. In addition, it should be apparent that specific examples of the terms apply to this embodiment as well.
본 발명에 따른 항-TNFa 항체, 구체적으로 아달리무맙의 액상 제제는 저장기간 동안에 아달리무맙의 부산물 형성을 감소시켜 장기보관을 가능케 할 수 있다. 또한, 생산 공정과 운송 시의 물리적인 스트레스에 변성 및 응집이 일어나는 것을 방지하여 아달리무맙의 약리효능을 장기간 안정하게 보존할 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 액상 제제는 향후 아달리무맙의 약리 효능에 관련된 치료분야에 효과적으로 응용될 수 있을 것이다.The anti-TNFa antibodies according to the invention, in particular the liquid preparations of adalimuma, can reduce long-term storage by reducing the by-product formation of adalimumab during storage. In addition, it is possible to stably maintain long-term pharmacological efficacy of adalimumab by preventing denaturation and coagulation in the production process and physical stress during transportation. Therefore, the liquid preparation according to the present invention can be effectively applied to the therapeutic field related to the pharmacological efficacy of adalimumab in the future.
도 1은, 실시예 1의 각 시료의 첨가제 조성에 따른 점도를 나타낸 것이다.
도 2은, 실시예 7의 시료 및 시료의 placebo의 펌프 통과 전과 후의 입자 수를 나타낸 것이다.Fig. 1 shows the viscosity of each sample according to the additive composition of Example 1. Fig.
Fig. 2 shows the number of particles of the sample of Example 7 before and after the pump of the placebo of the sample.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
<< 실시예Example 1> 1>
첨가제에 따른 Depending on additive 아달리무맙Ahdil mawab 용액의 점도 강하 효과 및 안정성 확인 Identification of viscosity drop effect and stability of solution
아달리무맙 액상 제제 제조에 사용하기 위한 첨가제를 확인하기 위하여 수크로오스 55mg/mL, 메티오닌 5 mM, 폴리소르베이트80 1 mg/mL, 아달리무맙 100 mg/mL, pH 5.2 조성의 제형 1을 제조하였다.Formulation 1 of sucrose 55 mg / mL, methionine 5 mM, polysorbate 80 1 mg / mL, adalimumat 100 mg / mL, pH 5.2 composition was prepared to identify additives for use in the preparation of Adalimumab liquid formulation .
또한 제형 1의 조성에 추가로 아르기닌 염산염, 라이신 염산염, 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 글루타민산, 글리신, 프롤린, 알라닌, 염화나트륨, 염화칼슘, 염화마그네슘을 각각 첨가하여 제형 2~13을 제조하여 Rheosense 사의 mVROC 기기를 사용하여 점도를 측정하였다. 상기 제형들에 첨가된 첨가제의 종류와 농도 및 각 제형의 점도를 하기 표 1 및 도 1에 나타내었다. Formulations 2 to 13 were further prepared by adding arginine hydrochloride, lysine hydrochloride, leucine, isoleucine, phenylalanine, glutamic acid, glycine, proline, alanine, sodium chloride, calcium chloride and magnesium chloride in addition to the composition of Formulation 1 to prepare mVROC instruments of Rheosense To measure the viscosity. The type and concentration of the additives added to the formulations and the viscosity of each formulation are shown in Table 1 and FIG.
상기 표 1의 각 제형의 점도 값을 보면 수크로오스, 메티오닌, 폴리소르베이트80 및 아달리무맙으로 구성된 제형1의 경우 점도는 3.23이었다. 이와 비교했을 때 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 글리신, 프롤린 등의 아미노산을 첨가한 제형의 경우 점도는 3.20 ~ 3.28로 점도가 크게 달라지지 않았다. 반면 아르기닌 염산염, 라이신 염산염, 글루타민산, 염화나트륨, 염화칼슘, 염화마그네슘 등을 첨가한 경우 점도는 2.94 ~ 3.14로 점도가 감소하는 것을 확인하였다. The viscosity values of the respective formulations in Table 1 were 3.23 in the case of Formulation 1 consisting of sucrose, methionine, polysorbate 80 and adalimumate. Compared with this, in the case of formulations containing amino acids such as leucine, isoleucine, phenylalanine, glycine and proline, the viscosity was 3.20 ~ 3.28 and the viscosity did not change much. On the other hand, when arginine hydrochloride, lysine hydrochloride, glutamic acid, sodium chloride, calcium chloride, and magnesium chloride were added, the viscosity decreased to 2.94 to 3.14.
각 제형의 안정성을 비교하기 위하여 각각의 제형을 0.2 ㎛의 pore 크기의 필터로 제균 여과하여 약 1.0 mL 용량의 유리 주사기에 0.4 mL씩 담은 후에 밀봉하여 40oC에서 2개월 보관하였다. 보관 후 각 시료를 SE-HPLC로 분석하여 올리고머, 응집체 등의 고분자 생성물 (High molecular weight impurities, HMW) 과 아달리무맙 분자의 단편인 저분자 생성물 (Low molecular weight impurities, LMW)의 함량을 분석하였다. 먼저, 점도가 강하된 제형, 즉 제형2, 제형3, 제형7, 제형11, 제형12, 제형13 및 대조군인 제형1의 SE-HPLC 결과를 표 2에 나타내었다. 또한 점도가 크게 달라지지 않은 제형, 즉 제형4, 제형5, 제형6, 제형8, 제형 9, 제형10 및 대조군인 제형1의 SE-HPLC 결과를 표3에 나타내었다.To compare the stability of each formulation, each formulation was sterilized by filtration with a 0.2 μm pore size filter. 0.4 mL of the solution was placed in a 1.0 mL glass syringe, sealed, and stored at 40 ° C for 2 months. After storage, each sample was analyzed by SE-HPLC and analyzed for the content of high molecular weight impurities (HMW) such as oligomers and aggregates and low molecular weight impurities (LMW) as a fraction of adalimumab. First, SE-HPLC results of Formulations 2, 3, 7, 11, 12, 13 and 1, in which the viscosity is lowered, are shown in Table 2. SE-HPLC results of Formulations 4, 5, 6, 8, 9, 10 and 1 in which the viscosity does not change significantly are shown in Table 3.
상기 표2의 결과를 보면, 보관 전의 HMW, LMW 및 총 불순물의 양은 유사하였으나, 40oC에서 2개월 보관한 후 총 불순물이 염화나트륨을 포함한 제형11의 경우 7.10%, 염화칼슘을 포함한 제형12의 경우 7.38%, 염화마그네슘을 포함한 제형13의 경우 7.42%로 대조군인 제형1의 총 불순물 6.59%에 대비하여 더 크게 증가한 것을 확인하였다. 반면 아르기닌 염산염, 라이신 염산염, 글루타민산을 포함한 제형2, 제형3, 제형7의 경우 40oC 2개월 보관 후 총 불순물의 양이 6.45~6.61%로 대조군인 제형1의 총 불순물 6.59%와 불순물 수준을 유지하였다The results of Table 2 show that the amounts of HMW, LMW, and total impurities before storage were similar, but the total impurities after storage at 40 ° C for 2 months were 7.10% for Formulation 11 containing sodium chloride and for Formulation 12 containing calcium chloride 7.38%, and 7.42% in the case of Formulation 13 containing magnesium chloride, as compared with 6.59% in the total impurity of Formulation 1 in the control group. On the other hand, the total amount of impurities after storage for 2 months was 40 ° C for Formulation 2, Formulation 3, Formulation 7 containing arginine hydrochloride, lysine hydrochloride and glutamic acid, and the amount of total impurities was 6.45-6.61% Kept
상기 표 3의 결과를 보면, 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 글리신, 프롤린 등의 아미노산을 첨가한 제형의 경우 40oC 2개월 보관 후 총 불순물 양이 5.94 ~ 6.17%로 대조군인 제형1의 불순물 함량 6.59%에 대비하여 크게 감소한 것을 확인하였다. 이로써 류신, 이소류신, 페닐알라닌, 글리신, 프롤린 등의 아미노산이 아달리무맙의 안정성에 기여하는 것을 확인하였다.Table 3 shows that the total amount of impurities after storage at 40 ° C for 2 months was 5.94 to 6.17% in the case of the formulation containing amino acids such as leucine, isoleucine, phenylalanine, glycine, proline and the like and the impurity content of Formulation 1 %, Respectively. It was confirmed that amino acids such as leucine, isoleucine, phenylalanine, glycine and proline contribute to the stability of adalimum.
<< 실시예Example 2> 2>
아르기닌 염산염의 함량에 따른 안정성 평가 1Evaluation of stability according to content of arginine hydrochloride 1
아르기닌 염산염의 함량에 따른 아달리무맙 제형의 안정성을 평가하기 위하여 다음과 같이 제형을 제조하였다. To evaluate the stability of the azithromycin formulation according to the content of arginine hydrochloride, the following formulation was prepared.
수크로오스 55mg/mL, 메티오닌 5mM, 폴리소르베이트80 1mg/mL 및 아달리무맙 100mg/mL이 되도록 제형14를 제조하였고, 제형14의 조성에 아르기닌 염산염 20mM 및 아르기닌 염산염 40mM을 첨가한 조성으로 제형15와 제형16을 제조하여 1mL 유리 시린지에 0.4mL씩 충전하였다. 각 시린지를 40oC에서 2개월 보관 후 SE-HPLC 로 분석하여 안정성을 평가하였다. 각 제형의 조성과 보관 전/후의 HMW 함량은 표 4와 같다. Formulation 14 was prepared to have sucrose 55 mg / mL, methionine 5 mM, polysorbate 80 1 mg / mL and adalimumat 100 mg / mL, and Formulation 15 was prepared by adding 20 mM arginine hydrochloride and 40 mM arginine hydrochloride to the composition of Formulation 14 Formulation 16 was prepared and filled in 0.4 mL each in a 1 mL glass syringe. Each syringe was stored at 40 ° C for 2 months and analyzed for stability by SE-HPLC. The composition of each formulation and the HMW content before and after storage are shown in Table 4.
보관 전40 o C 2 months
Before storage
보관 후40 o C 2 months
After storage
폴리소르베이트80 1mg/mL, 아르기닌 염산염 0mMSucrose 55 mg / mL, methionine 5 mM,
Polysorbate 80 1 mg / mL,
상기 표 4의 SE-HPLC 결과를 보면, 아르기닌 염산염의 함량을 0mM (제형14)에서 20mM (제형15) 및 40mM (제형16)로 증량 하였을 때 보관 전의 시료의 HMW 함량은 0.16~0.17%로 모두 유사하였으나, 40oC 2개월 보관 후의 HMW 함량은 아르기닌 염산염이 포함되지 않은 제형 14의 경우 1.00%, 아르기닌 염산염의 함량이 20mM 및 40mM인 제형15, 16의 경우 0.82%로 아르기닌 염산염이 20mM 또는 40mM 포함된 경우 아르기닌 염산염이 포함되지 않은 경우보다 HMW 생성 정도가 감소하였다. 따라서 아르기닌 염산염은 아달리무맙의 응집 방지 효과가 있음을 확인하였다. SE-HPLC results in Table 4 show that when the content of arginine hydrochloride was increased from 0 mM (Form 14) to 20 mM (Form 15) and 40 mM (Form 16), the HMW content of the sample before storage was 0.16-0.17% But the HMW content after storage at 40 ° C for 2 months was 1.00% for Formulation 14 which did not contain arginine hydrochloride, 0.82% for Formulations 15 and 16 which contained 20 mM and 40 mM arginine hydrochloride, and 20 mM or 40 mM HMW production was decreased in the presence of arginine hydrochloride. Therefore, it was confirmed that arginine hydrochloride had an anti - agglutination inhibitory effect.
<< 실시예Example 3> 3>
아르기닌 함량에 따른 전하 Charge according to arginine content 이성질Heterogeneity 항체 ( Antibody ( chargecharge variantvariant ) 생성 정도 비교) Generated degree comparison
아르기닌 함량에 따른 전하 이성질 항체 생성 정도를 비교하기 위하여 아르기닌 포함 제형과 포함하지 않은 제형을 만들어 40oC에서 보관 1개월 후 CEX-HPLC로 전하 이성질 항체 생성 양상을 비교하였다. 각 제형과 보관 전후의 전하 이성질 항체 함량을 아래 표 5에 나타내었다. In order to compare the degree of formation of charge-labile antibodies according to arginine content, arginine-containing formulations and non-arginine formulations were prepared, and the formation of charge-labile antibodies was compared by CEX-HPLC after storage at 40 ° C for 1 month. The charge-isomeric antibody content before and after each formulation and storage is shown in Table 5 below.
제형 A는 수크로오스 55mg/mL, 메티오닌 5mM, 폴리소르베이트80 (PS80) 1mg/mL 및 아달리무맙 100mg/mL을 포함하게 제조하였으며, 제형 B의 경우는 제형 A의 조성에 아르기닌 염산염 (Arginine Hydrochloride) 20mM을 추가로 포함하도록 제조하였다. 40oC 1개월 보관 전의 산성 이성질 항체 함량은 유사하였으며, 보관 후의 산성 이성질 항체 함량을 비교하면 아르기닌 염산염을 포함한 제형 B의 경우 제형 A 대비 산성 이성질 항체의 함량이 적고, K0의 함량이 더 많은 것을 알 수 있다. Formulation A was prepared to include sucrose 55 mg / mL, methionine 5 mM, polysorbate 80 (PS80) 1 mg / mL and adalimumat 100 mg / mL. In the case of Formulation B, arginine hydrochloride 20 mM. ≪ / RTI > The content of acidic isomeric antibody before storage at 40 o C for 1 month was similar and the content of acidic isomeric antibody after storage showed that the content of acidic isomeric antibody relative to formulation A was lower in Form B containing arginine hydrochloride and the content of K0 You can see more.
따라서 아르기닌 염산염이 아달리무맙의 산성 이성질 항체 생성을 저하하는 것을 확인할 수 있다.Therefore, it can be confirmed that arginine hydrochloride lowers the production of acidic isomeric antibody of adalimumab.
<< 실시예Example 4> 4>
계면활성제의 종류별 제형과 제형 안정성 비교Comparison of Formulation Stability and Formulation Type of Surfactant
계면활성제의 종류에 따른 아달리무맙 액상 제제의 안정성을 비교하기 위해 다음과 같은 조성의 제형을 제조하였다. The following formulation was prepared to compare the stability of adalimumab liquid formulations according to the type of surfactant.
실시예 2의 제형14와 같이 수크로오스 55mg/mL, 메티오닌 5mM, 폴리소르베이트80 1mg/mL 및 아달리무맙 100mg/mL이 되도록 구성된 제형17을 제조하였다. 또한 계면활성제의 함량은 동일하게 고정하면서 계면활성제의 종류를 폴리소르베이트20 및 폴록사머 188로 바꾸어 제형18 및 제형19를 제조하였다. Formulation 17 consisting of 55 mg / mL of sucrose, 5 mM of methionine, 1 mg / mL of polysorbate 80 and 100 mg / mL of adalimumab was prepared as in Formulation 14 of Example 2. Formulations 18 and 19 were also prepared by changing the surfactant types to polysorbate 20 and poloxamer 188 while maintaining the same amount of surfactant.
각 제형을 제균여과하여 1mL 유리시린지에 0.4mL씩 충전하여 40oC에 1개월 보관하였다. 보관 전과 후의 시료를 SE-HPLC를 이용하여 HMW 및 LMW의 불순물 함량을 분석하였다. 제형17~19의 구성 및 40oC 1개월 보관 전후의 SE-HPLC 함량을 분석한 결과를 표 6에 나타내었다.Each formulation was sterilized, filtered, and filled in 0.4 mL of 1 mL glass syringes and stored at 40 ° C for 1 month. The impurity contents of HMW and LMW were analyzed by SE-HPLC before and after storage. The compositions of Forms 17 to 19 and the SE-HPLC content before and after storage at 40 ° C for one month are shown in Table 6.
메티오닌 5mM,
폴리소르베이트80 1mg/mL,
pH5.2Sucrose 55 mg / mL,
Methionine 5 mM,
Polysorbate 80 1 mg / mL,
pH 5.2
폴리소르베이트20 1mg/mL,
pH5.2Sucrose 55 mg / mL, methionine 5 mM,
Polysorbate 20 1 mg / mL,
pH 5.2
폴록사머188 1mg/mL,
pH5.2Sucrose 55 mg / mL, methionine 5 mM,
Poloxamer 188 1 mg / mL,
pH 5.2
상기 표 6의 결과를 보면 계면활성제의 종류에 따라 40oC 1개월 보관 전후의 HMW 및 LMW 함량이 크게 다르지 않았다. According to the results of Table 6, HMW and LMW contents after storage at 40 ° C for one month were not significantly different depending on the type of surfactant.
즉, 폴리소르베이트80을 포함한 제형, 폴리소르베이트20을 포함한 제형 및 폴록사머188을 포함한 제형의 안정성이 서로 유사하게 나타났다. That is, the formulations including polysorbate 80, the formulations including polysorbate 20, and the formulations including Poloxamer 188 were similar to each other.
따라서 폴리소르베이트80, 폴리소르베이트20 및 폴록사머188이 아달리무맙의 안정성에 미치는 영향이 서로 유사함을 확인하였다.Therefore, it was confirmed that the effects of polysorbate 80, polysorbate 20 and poloxamer 188 on the stability of adalimumab were similar to each other.
<< 실시예Example 5> 5>
폴리올의 종류별 제형 및 안정성 비교Comparison of Formulations and Stability of Polyols
폴리올의 종류에 따른 아달리무맙 액상 제제의 안정성을 비교하기 위해 다음과 같은 조성의 제형을 제조하였다. The following formulations were prepared to compare the stability of Adalimum's liquid formulation according to the type of polyol.
실시예 2의 제형14와 같이 수크로오스 55mg/mL, 메티오닌 5mM, 폴리소르베이트80 1mg/mL 및 아달리무맙 100mg/mL이 되도록 구성된 제형 20을 제조하였다 (실시예4의 제형17과 동일함). 또한 폴리올의 총 함량은 동일하게 고정하면서 폴리올의 종류를 트레할로스, PEG400 및 PEG4000로 바꾸어 제형 21~23을 제조하였다. 각 제형을 제균여과하여 1mL 유리시린지에 0.4mL씩 충전하여 40oC에 1개월 보관하였다. 보관 전과 후의 시료를 SE-HPLC를 이용하여 HMW 및 LMW의 불순물 함량을 분석하였다. Formulation 20 was prepared (as in Formulation 17 of Example 4) consisting of 55 mg / mL sucrose, 5 mM methionine, 1 mg / mL polysorbate 80 and 100 mg / mL adalimumate as Formulation 14 of Example 2. Formulas 21 to 23 were also prepared by changing the polyol types to trehalose, PEG400 and PEG4000 while keeping the total content of polyol at the same value. Each formulation was sterilized, filtered, and filled in 0.4 mL of 1 mL glass syringes and stored at 40 ° C for 1 month. The impurity contents of HMW and LMW were analyzed by SE-HPLC before and after storage.
제형 20~23의 구성 및 40oC 1개월 보관 전후의 SE-HPLC 함량을 분석한 결과를 표 7에 나타내었다.The composition of formulations 20 to 23 and the SE-HPLC content before and after storage at 40 ° C for one month are shown in Table 7.
상기 표 7의 결과를 보면 폴리올의 종류에 따라 40oC 1개월 보관 전후의 HMW 및 LMW 함량이 크게 달라지는 것을 확인할 수 있다. 모든 제형의 40oC 1개월 보관 전 HMW 및 LMW 불순물 함량은 유사하였으나, 40oC 1개월 보관 후에는 HMW 함량이 수크로오스와 트레할로스 및 PEG400을 포함한 제형20~22의 경우 PEG4000을 포함한 제형23에 비해 비교적 낮았다. LMW 함량은 모두 유사하게 나타났다. 따라서 사용하는 폴리올의 종류에 따라 제형간 안정성에 차이가 있을 수 있음을 확인하였고 그 중에서도 수크로오스 및 트레할로스가 다른 폴리올보다 안정성 개선에 효과가 있음을 확인하였다. The results of Table 7 show that the content of HMW and LMW before and after storage at 40 ° C for one month varies greatly depending on the type of polyol. The HMW and LMW impurity contents of all the formulations were similar before storage at 40 ° C for 1 month, but after storage at 40 ° C for 1 month, HMW content was higher for Formulations 20-22 containing sucrose, trehalose and PEG 400 compared to Formulation 23 containing PEG 4000 It was relatively low. LMW contents were similar. Therefore, it was confirmed that there is a difference in stability between formulations depending on the type of polyol used. Among them, sucrose and trehalose were found to be more effective in improving stability than other polyols.
<< 실시예Example 6> 6>
폴리올, 아르기닌, 메티오닌, 계면활성제, 및 추가안정화제로 이루어진 제형과 Polyols, arginine, methionine, surfactants, and further stabilizers, and 휴미라Humira 제형과의 안정성 비교 Stability comparison with formulation
메티오닌 5mM을 안정화제로 사용한 조성에 서로 다른 계면활성제 및 폴리올 종류, 추가 안정화제 유무 및 아르기닌 염산염 함량 등을 변화시켜 다양한 조성을 구성하여 시료를 제조하고 상용 휴미라 제형으로 조성을 제조하여 40oC에서 보관한 후 SE-HPLC로 분석하여 각각의 제형의 안정성을 비교하였다. 각 제형의 조성을 표 8에, 각 조성의 40oC 2개월 보관 전후의 불순물 함량은 표 9에 나타내었다.Methionine was used as a stabilizer, and various compositions were prepared by varying surfactant, polyol type, addition of stabilizer and arginine hydrochloride content in the composition using 5 mM of the stabilizer. The sample was prepared and stored at 40 ° C in a commercial humira formulation SE-HPLC to compare the stability of each formulation. The composition of each formulation is shown in Table 8, and the contents of impurities before and after storage of each composition at 40 ° C for 2 months are shown in Table 9.
번호Formulation
number
*상용 휴미라 제형: Sodium Phosphate Monobasic Dihydrate (0.86 mg/mL), Sodium Phosphate Dibasic Dihydrate (1.53 mg/mL), Sodium Citrate (0.3 mg/mL), Citric Acid Monohydrate (1.3 mg/mL), Mannitol (12 mg/mL), Sodium Chloride (6.16 mg/mL), Polysorbate 80 (PS80) (1 mg/mL), pH 5.2Commercial Humira Formulation: Sodium Phosphate Monobasic Dihydrate (0.86 mg / mL), Sodium Phosphate Dibasic Dihydrate (1.53 mg / mL), Sodium Citrate (0.3 mg / mL), Citric Acid Monohydrate (1.3 mg / mL), Mannitol / mL), Sodium Chloride (6.16 mg / mL), Polysorbate 80 (PS80) (1 mg / mL), pH 5.2
번호Formulation
number
표 8에서 보면 폴리올로 수크로오스 및 트레할로스, 그리고 수크로오스와 PEG4000의 조합 및 트레할로스와 PEG4000의 조합이 사용되었고, 계면활성제로는 폴리소르베이트80 및 폴록사머 188 이 사용되었다. In Table 8, a combination of sucrose and trehalose, sucrose and PEG4000 as a polyol, and a combination of trehalose and PEG4000 were used, and polysorbate 80 and poloxamer 188 were used as surfactants.
아르기닌은 0, 20 또는 40mM이 사용되었으며, 추가 첨가제의 역할을 확인하기 위해 글리신 (Gly), 류신 (Leu) 또는 글리신와 류신의 조합으로 제형을 설계하여 아달리무맙 100mg/mL에서의 안정성을 휴미라 상용제형과 비교하였다. 50mg/mL에서의 안정성도 휴미라 상용제형과 제형44 (제형26과 아달리무맙 함량을 제외하고 동일)의 조성을 비교하였다.Arginine was used at 0, 20, or 40 mM. To determine the role of additional additives, the formulation was designed with glycine (Gly), leucine (Leu), or glycine and leucine to determine the stability at 100 mg / And compared with formulations. The stability at 50 mg / mL was also compared between the HUMIRA commercial formulations and Formulation 44 (except Formulation 26 and the azithromycin content).
표 9에서 각 제형의 안정성을 비교하면, 모든 제형이 휴미라 상용제형 보다 월등한 안정성을 나타냄을 확인하였다. 보관 전의 전체 불순물은 0.57~0.74로 모두 유사하였다. 그러나 40oC 2개월 보관 후의 안정성을 보면, 아달리무맙의 함량이 100mg/mL인 휴미라 상용 제형 (제형 43)과 아달리무맙 함량이 50mg/mL인 휴미라 상용 제형 (제형 45) 대비 다른 제형들의 아달리무맙 불순물 함량이 더 적음을 확인하였다. Comparing the stability of each formulation in Table 9, it was confirmed that all the formulations showed superior stability to the HUMIRA commercial formulations. The total impurities before storage were all 0.57 ~ 0.74. However, the stability after storage at 40 ° C for 2 months showed that the formulation of Humira (Formulation 43) having a content of adalimuma of 100 mg / mL and the formulation of Humira (Formulation 45) having an adalimumast amount of 50 mg / It was confirmed that the content of adalimumab was less.
따라서 다양한 폴리올 및 계면활성제, 아르기닌 염산염 및 추가 안정화제로 구성된 본 제형이 상용 휴미라 제형보다 불순물 증가 측면에서 더 안정한 제형이라는 것을 확인하였다.Therefore, it has been confirmed that the present formulation consisting of various polyols and surfactants, arginine hydrochloride and further stabilizers is a more stable formulation in terms of impurity increase than the commercial humira formulation.
또한 앞의 실시예 5에서 폴리올로 PEG 4000을 사용시 수크로오스, 트레할로스를 사용한 제형보다 40oC 1개월 보관 시 전체 불순물함량이 0.4% 정도 높았던 것에 비해, 본 실시예에서는 보관기간이 2개월이었음에도 불구하고 수크로오스 또는 트레할로스와 PEG4000를 섞어서 사용하면 아달리무맙의 불순물 함량이 수크로오스 및 트레할로스를 단독으로 사용하는 것 대비 유사하게 나타났다. 이에 따라, 수크로오스 혹은 트레할로스의 일부를 분자량이 더 큰 PEG으로 대체하는 것이 항산화 등의 추가적인 효과를 얻기 위해 추가적인 첨가제를 사용하는 경우 삼투압 및 안정성을 유지하는 방법으로 사용될 수 있음을 확인하였다.In addition, when PEG 4000 was used as the polyol in Example 5, the total impurity content was about 0.4% higher when stored at 40 ° C for one month than in the case of using sucrose and trehalose. In contrast, although the storage period was two months When sucrose or trehalose was mixed with PEG4000, the impurity content of adalimuma was similar to that of sucrose and trehalose alone. Accordingly, it has been confirmed that replacing a part of sucrose or trehalose with PEG having a larger molecular weight can be used as a method of maintaining osmotic pressure and stability when using an additional additive to obtain an additional effect such as antioxidation.
<< 실시예Example 7> 7>
상용 Commercial 휴미라Humira 제형과 아르기닌 염산염 포함 제형의 기계적 스트레스 (mechanical And mechanical stress of formulations containing arginine hydrochloride) stressstress )에 대한 안정성 비교 평가) Stability comparison evaluation
상용 휴미라 제형과 아르기닌 염산염을 포함한 제형의 기계적 스트레스에 대한 안정성을 비교하기 위하여, 다음과 같은 조성의 시료를 만들어 로타리 피스톤 펌프 (rotary piston pump)를 통과시켜 펌프 통과 전과 후의 입자 수를 평가하였다. In order to compare the mechanical stability of formulations containing commercial humira and arginine hydrochloride, samples of the following composition were prepared and passed through a rotary piston pump to evaluate the number of particles before and after the pump.
또한 측정된 입자가 아달리무맙 유래인지 확인하기 위하여 각 시료의 조성에서 아달리무맙 만을 제외한 플라시보 (placebo)를 만들어 동일 조건에서 로타리 피스톤 펌프를 통과시켜 펌프 통과 전과 후의 입자 수를 평가하였다. 입자 수를 평가하는 방법으로는 Protein Simple 사의 micro flow imaging 기기가 사용되었다. 각 시료의 조성은 표 10에, 각 시료 및 시료의 플라시보의 펌프 통과 전과 후의 입자 수를 표 11 및 도 2에 나타내었다.In order to determine whether the measured particles originated from the mallow, the placebo was prepared from the composition of each sample except for the azithromycin and the number of particles before and after the pump was passed through the rotary piston pump under the same conditions. A micro flow imaging device from Protein Simple was used to evaluate the number of particles. The composition of each sample is shown in Table 10, and the number of particles before and after the pump of the placebo of each sample and the sample is shown in Table 11 and FIG.
46Formulation
46
메티오닌 5 mM, 폴리소르베이트 80 1 mg/mL, pH5.2100 mg / mL of adalimumab, 55 mg / mL of sucrose, 40 mM of arginine hydrochloride,
Methionine 5 mM, polysorbate 80 1 mg / mL, pH 5.2
메티오닌 5 mM, 폴리소르베이트 80 1 mg/mL, pH5.250 mg / mL of adalimumab, 55 mg / mL of sucrose, 40 mM of arginine hydrochloride,
Methionine 5 mM, polysorbate 80 1 mg / mL, pH 5.2
(상용 휴미라 조성)Sodium diphosphate dihydrate 1.53 mg / mL, sodium citrate 0.3 mg / mL, sodium dibasic acid dihydrate 50 mg / mL, sodium dihydrogen phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg / mL, citric acid monohydrate 1.3 mg / mL, mannitol 12 mg / mL, sodium chloride 6.16 mg / mL, polysorbate 80 (PS80) 1 mg / mL,
(Composition of Commercial Humira)
표 10와 같이 제형 46와 제형 47는 첨가제의 조성이 동일하며, 아달리무맙의 함량이 제형 46는 100mg/mL, 제형 47는 50mg/mL로 다르다. 제형 48의 경우 상용 휴미라와 동일하게 조성 및 아달리무맙 함량을 조절하였다. 각 제형을 로타리 피스톤 펌프에 통과 시켜 전 후 입자 수를 분석한 결과, 표 11 및 도 2와 같이 제형 46는 85743개/mL, 제형 47는 53734개/mL로, 아달리무맙의 함량이 높은 제형 46이 아달리무맙의 함량이 낮은 제형 47보다 입자가 더 증가한 것을 확인할 수 있었다. As shown in Table 10, Formulation 46 and Formulation 47 have the same composition of additives and the content of adalimumab is different from Formulation 46 to 100 mg / mL and Formulation 47 to 50 mg / mL. In the case of Formulation 48, the amount of myristate was controlled in the same manner as in commercial humira. Each of the formulations was passed through a rotary piston pump and analyzed for the number of particles before and after injection. As a result, as shown in Table 11 and FIG. 2, Formulation 46 was 85743 / mL and Formulation 47 was 53734 / mL, 46 was found to be higher than that of Formulation 47, which had a lower content of acidalum.
반면 휴미라 상용제형인 제형 48의 경우 펌프를 통과한 후의 입자 수가 150617개/mL로 제형 46, 47 대비 높게 나타났다. 또한 모든 제형의 placebo의 입자농도가 펌프 통과 후 3618 개/mL 및 7938 개/mL로 아달리무맙을 포함한 시료의 펌프 통과 후 입자 농도에 비해 현저히 낮아, 펌프 통과 후 아달리무맙 포함 시료에서 측정되는 입자가 아달리무맙 유래임을 확인하였다. 이에 따라 아르기닌 염산염을 포함한 제형이 상용 휴미라 제형에 비해 기계적 스트레스에 대하여 아달리무맙을 효과적으로 보호함을 알 수 있다. On the other hand, in the case of Formulation 48, which is a commercial formulation of HUMIRA, the number of particles after passing through the pump was 150617 / mL, which was higher than those of Formulations 46 and 47. In addition, the particle concentrations of all the placebo formulations were 3618 / mL and 7938 / mL after pump delivery, which was significantly lower than the particle concentration after pump delivery of the sample containing adalimumab, It was confirmed that the particles originated from Adalimum. Thus, it can be seen that the formulation containing arginine hydrochloride effectively protects against miltamuth against mechanical stress compared to commercial humira.
<< 실시예Example 8> 8>
아르기닌 염산염 농도별 점도강하 효과 실험Experiment of viscosity drop by concentration of arginine hydrochloride
아달리무맙 용액에 아르기닌을 첨가하였을 때의 점도 강하가 일어나는 아르기닌 농도 범위를 확인하기 위하여 다음과 같이 실험을 진행하였다. 아르기닌 염산염(ArgHCl)을 포함하지 않은 대조군으로서, 아달리무맙 100mg/mL 및 폴리소르베이트80 1mg/mL, 또는 아달리무맙 50mg/mL 및 폴리소르베이트80 1mg/mL 을 포함하도록 시료를 제조하였다. 시험군으로서, 각 대조군의 조성에 아르기닌 염산염의 농도를 20mM씩 높여가며 아르기닌 염산염을 최대 180mM의 최종 농도로 포함하는 시료를 제조하였다. 모든 시료의 pH는 약 5.2였다. 제조한 시료의 점도를 Rheosense 사의 mVROC 기기를 사용하여 측정하였다. 점도 측정 결과를 표 12에 나타내었다.The following experiment was carried out to confirm the arginine concentration range in which the viscosity drop of arydimuthat solution was added with arginine. As a control without arginine hydrochloride (ArgHCl), a sample was prepared to include 100 mg / mL of adalimumat and 1 mg / mL of polysorbate 80, or 50 mg / mL of adalimumat and 1 mg / mL of polysorbate 80. As a test group, a sample containing arginine hydrochloride at a final concentration of 180 mM was prepared by increasing the concentration of arginine hydrochloride by 20 mM to the composition of each control group. The pH of all samples was about 5.2. The viscosity of the prepared sample was measured using a mVROC instrument from Rheosense. The results of the viscosity measurement are shown in Table 12.
(mM)ArgHCl
(mM)
(단위: cp)100 mg / mL Adalimumab
(Unit: cp)
(단위: cp)50 mg / mL Adalimumab
(Unit: cp)
표 12에서 아달리무맙 100mg/mL, 폴리소르베이트 80 1mg/mL 및 다양한 농도의 아르기닌염산염(ArgHCl) 첨가 제형의 점도를 보면, ArgHCl을 포함하지 않은 아달리무맙 100mg/ml, 폴리소르베이트 80 1mg/mL 용액의 점도는 2.71 cp였다. 여기에 ArgHCl을 20~120mM의 최종 농도로 첨가하는 경우 ArgHCl 을 첨가하지 않은 조성 대비 점도가 강하되는 것을 확인 할 수 있다. ArgHCl이 140mM의 최종 농도로 첨가된 경우는 ArgHCl을 첨가하지 않은 조성과 점도가 서로 유사하였다. ArgHCl이 160mM 이상의 최종 농도로 첨가된 경우에는 점도의 강하효과가 나타나지 않았으며, ArgHCl 미첨가 제형보다 점도가 상승함을 확인하였다. As shown in Table 12, the viscosity of arrygium hydrochloride (ArgHCl) added formulations of 100 mg / mL of adalimumat, 1 mg / mL of polysorbate 80 and various concentrations of arginine hydrochloride (100 mg / mL) / mL The viscosity of the solution was 2.71 cp. When ArgHCl is added to the final concentration of 20 ~ 120 mM, it can be confirmed that the viscosity of the composition without ArgHCl is lowered. When ArgHCl was added to the final concentration of 140 mM, the composition and the viscosity were similar to each other without addition of ArgHCl. When ArgHCl was added at a final concentration of 160 mM or more, no viscosity lowering effect was observed, and it was confirmed that the viscosity was increased more than the ArgHCl not added formulations.
아달리무맙 50mg/mL 및 폴리소르베이트 80 1mg/mL을 포함한 제형의 경우에는, ArgHCl을 포함하지 않은 경우의 점도가 1.47 cp 였으며, ArgHCl 농도가 20~80 mM인 경우의 점도가 1.42~1.45로 ArgHCl 미첨가 제형보다 점도가 낮았다. ArgHCl을 100mM의 최종 농도로 첨가하였을 때의 점도는 ArgHCl이 첨가되지 않은 조성의 점도와 유사하였으며, ArgHCl을 120mM이상의 최종 농도로 첨가한 경우 첨가하지 않은 경우보다 점도가 증가하였다. In the case of formulations containing 50 mg / mL adalimumab and 1 mg / mL polysorbate 80, the viscosity when ArgHCl was not included was 1.47 cp and the viscosity when ArgHCl concentration was 20 to 80 mM was 1.42 to 1.45 The viscosity was lower than the non-ArgHCl formulations. When the final concentration of ArgHCl was added at a final concentration of 100 mM, the viscosity was similar to that of the composition without ArgHCl. When the final concentration of ArgHCl was added at a final concentration of 120 mM or more, the viscosity was increased.
따라서 100mg/mL 아달리무맙 용액의 경우 140mM 이하의 ArgHCl을 첨가하여 점도를 강하시킬 수 있고, 50mg/mL 아달리무맙 용액의 경우 100mM 이하의 아르기닌을 첨가하여 점도를 강하할 수 있음을 확인하였다.Therefore, it was confirmed that the viscosity of 100mg / mL adalimumab solution can be lowered by adding ArgHCl of 140mM or less and that the viscosity of the 50mg / mL adalimumab solution can be lowered by adding arginine of 100mM or less.
<< 실시예Example 9> 9>
아달리무맙Ahdil mawab 제제에서 완충액 및 염의 영향 확인 실험 1 Experiment 1 to confirm the effects of buffers and salts on the preparation 1
아달리무맙의 안정성에 대한 완충액 및 염의 영향을 파악하기 위하여 완충액 및 염을 포함하지 않은 제형의 시료를 제조하였고, 이 제형에 완충액 혹은 염을 첨가한 제형의 시료를 제조하여 40oC에서 2주 및 1개월 보관하여 SE-HPLC로 안정성을 비교하였으며, 각 시료의 pH를 측정하였다.To determine the effect of buffers and salts on the stability of adalimumab, buffers and salts-free formulations were prepared, and buffers or salts were added to the formulations to produce formulations at 40 ° C for 2 weeks And stored for 1 month, and the stability was compared by SE-HPLC. The pH of each sample was measured.
번호Formulation
number
보관후40 o C 2 weeks
After storage
100mg/mL,
PS80
1mg/mL,
pH 5.2Ahdil mawab
100 mg / mL,
PS80
1 mg / mL,
pH 5.2
50mg/mL,
PS80
1mg/mL,
pH 5.2Ahdil mawab
50 mg / mL,
PS80
1 mg / mL,
pH 5.2
*Humira 조성 Buffer: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg/mL, Sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg/mL, Sodium citrate 0.3 mg/mL, Citric acid monohydrate 1.3 mg/mL* Humira composition Buffer: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg / mL, sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg / mL, sodium citrate 0.3 mg / mL, citric acid monohydrate 1.3 mg / mL
표 13에 시료의 제형 및 각 시료의 zerotime, 40 oC 2주 보관후, 40 oC 1개월 보관후의 SE-HPLC 분석결과를 나타내었다. 아달리무맙 100mg/mL 및 PS80 1mg/mL이 되도록 A-1의 시료를 제조하였고 여기에 완충액 혹은 염을 포함하도록 A-2 ~ A-5를 제조하였다. 또한 A-1~ A-5 조성의 아달리무맙의 농도를 50mg/mL로 조절하여 A-6~A-10을 제조하였다. 각 시료의 SE-HPLC 결과를 보면, 완충액을 포함하지 않은 A-1 과 버퍼를 포함한 A-2를 비교하였을 때, (혹은 아달리무맙 농도를 달리한 A-6 과 A-7을 비교하였을 때) 완충액을 포함하지 않은 제형이 HMW 및 LMW 증가폭이 더 작았고, 따라서 더 안정한 제형이라는 것을 알 수 있다.Table 13 shows the formulations of the samples and zerotime of each sample, 40 o C 2 weeks after storage, 40 o SE-HPLC analysis after storage for 1 month. A-1 samples were prepared to give 100 mg / mL of adalimumab and 1 mg / mL of PS80, and A-2 to A-5 were prepared to contain buffer or salt. Further, A-6 to A-10 were prepared by adjusting the concentration of adalimumab of A-1 to A-5 to 50 mg / mL. SE-HPLC results of each sample showed that when A-1 containing no buffer and A-2 containing buffer were compared (or comparing A-6 and A-7 with different concentrations of adalimumab ) Buffers did not show any improvement in HMW and LMW, and therefore a more stable formulation.
또한 A-1 및 A-6과, NaCl, 황산 암모늄 (Ammonium Sulfate), 황산 나트륨 (Sodium Sulfate) 등의 염을 포함한 제형을 비교하면 염을 포함하지 않은 제형이 염을 포함한 제형과 비교하였을 때 HMW 및 LMW 의 증가폭이 작다. 따라서 아달리무맙 제형의 경우에 염을 포함하지 않는 것이 아달리무맙의 안정성 면에서 더 좋음을 알 수 있다.Comparing the formulations containing A-1 and A-6 with salts such as NaCl, Ammonium Sulfate, and Sodium Sulfate, the salt-free formulations were compared with the formulations containing HMW And the increase in the LMW is small. Therefore, it can be seen that in the case of the azithromycin formulation, the salt is not included, which is better in the stability of the azithromycin.
또한 모든 시료의 pH는 보관 전, 보관 2주 후 및 보관 1개월 후에 5.2로 일정하게 유지되었다. 이에 따라 50mg/mL 이상의 아달리무맙이 충분한 자체 완충효과를 가지고 있는 것으로 확인되었으며, 따라서 완충제의 사용이 불필요하며, 완충제를 사용하지 않음으로써 더욱 높은 안정성을 가지는 제형을 구성할 수 있음을 확인하였다.The pH of all samples was kept constant at 5.2 before storage, 2 weeks after storage and 1 month after storage. Accordingly, it has been confirmed that at least 50 mg / mL adalimumab has a sufficient self-buffering effect, so that it is possible to form a formulation having higher stability by not using a buffer and not using a buffer.
<< 실시예Example 10> 10>
아달리무맙Ahdil mawab 제제에서 완충액 및 염의 영향 확인 실험 2 Experiment 2 to confirm the effect of buffers and salts on the preparation
아달리무맙의 안정성에 대한 완충액 및 염의 영향을 파악하기 위하여 아달리무맙 (100mg/mL 혹은 50mg/mL), 안정화제 (수크로오스 55mg/mL 혹은 글리신 160mM), 아르기닌 염산염(ArgHCl) 50mM, 메티오닌 5mM 및 폴리소르베이트80 1mg/mL으로 구성된 제형의 시료를 제조하였고, 이 제형에 완충제 혹은 염을 첨가한 제형의 시료를 제조하였다. 비교를 위하여 아달리무맙 100 mg/mL 또는 아달리무맙 50mg/mL의 휴미라 조성의 시료를 제조하였고, 각 제형을 유리시린지에 0.4mL씩 충전하여 55oC에서 1주 보관하여 SE-HPLC로 안정성을 비교하였고 pH를 측정하였다. 아래의 표에 각 조성과 55oC 1주 보관 전/후의 단량체(monomer) 함량을 나타내었다.(100 mg / mL or 50 mg / mL), a stabilizer (sucrose 55 mg / mL or glycine 160 mM), arginine hydrochloride (ArgHCl) 50 mM, methionine 5 mM and the like were used to determine the effect of buffers and salts on the stability of adalimumab A sample of a formulation consisting of 1 mg / mL of polysorbate 80 was prepared and a sample of the formulation with buffer or salt added to this formulation was prepared. For comparison, samples of HUMIRA of 100 mg / mL of adalimumat or 50 mg / mL of adalimumab were prepared, and 0.4 mL of each formulation was filled in a glass syringe and stored at 55 ° C for 1 week. And the pH was measured. The table below shows the composition of each composition and the monomer content before and after storage at 55 ° C for one week.
*Humira 조성: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg/mL, Sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg/mL, Sodium citrate 0.3 mg/mL, Citric acid monohydrate 1.3 mg/mL, Mannitol 12 mg/mL, Sodium chloride 6.16 mg/mL, PS80 1 mg/mL* Humira Composition: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg / mL, Sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg / mL, Sodium citrate 0.3 mg / mL, Citric acid monohydrate 1.3 mg / mL, Mannitol 12 mg / mL, Sodium chloride 6.16 mg / PS80 1 mg / mL
**Humira 조성 Buffer: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg/mL, Sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg/mL, Sodium citrate 0.3 mg/mL, Citric acid monohydrate 1.3 mg/mL** Humira composition Buffer: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg / mL, sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg / mL, sodium citrate 0.3 mg / mL, citric acid monohydrate 1.3 mg / mL
먼저, 모든 시료의 pH는 55oC 1주 보관 전/후에 5.2로 일정하게 유지되었다. 이에 따라 상기 표의 조성 및 유사 조성에서 50mg/mL 이상의 아달리무맙이 충분한 자체의 완충효과를 가지고 있는 것으로 확인되었다.First, the pH of all samples was kept constant at 5.2 ° C before and after storage at 55 ° C for 1 week. Accordingly, it was confirmed that at least 50 mg / mL of adalimumab had sufficient buffering effect in the composition and similar composition of the above table.
표 14의 결과와 같이, 각 시료의 보관 전 단량체 함량은 98.8~99.0%로 유사하였다. 55oC 1주 보관 후에는 단량체 함량이 조성별로 서로 다르게 나타났다. 아달리무맙 100mg/mL, 수크로오스 55mg/mL, ArgHCl 50mM, 메티오닌 5mM 및 폴리소르베이트80 1mg/mL 조성의 시료(A-11)는 보관 후 단량체 함량이 94.8% 이었으나 NaCl, 황산 암모늄, MgCl2 및 CaCl2 의 염, 혹은 아세트산 나트륨 완충제를 사용한 경우(A-12~A-16) 보관 후 단량체의 함량이 94.1~94.7%로 염과 완충제를 사용하지 않은 조성의 시료보다 단량체 함량이 낮았다. 안정화제로 수크로오스 대신 Gly 160mM을 사용한 경우 (A-17) 보관 후 단량체의 함량이 95.2%인데 비해 염 및 완충제를 사용한 경우 (A-18~A-23) 보관 후 단량체 함량이 94.0~94.9%로 염과 완충제를 사용하지 않은 조성보다 단량체 함량이 낮았다. 아달리무맙의 함량을 50mg/mL로 낮추어 조성한 경우에도 염과 완충제를 사용하지 않고 수크로오스를 안정화제로 사용한 경우 보관후 단량체 함량이 95.2% (A-25), Glycine (Gly)을 안정화제로 사용한 경우 보관 후 단량체 함량이 95.6% (A-32) 이었으나 각각의 제형에 추가 염/완충제를 사용한 경우 보관후 단량체 함량이 수크로오스 포함 제형의 경우 (A-26~A-31) 93.5~95.0%, Gly 포함 제형의 경우 (A-33~A-38) 93.6~95.4%로 추가 염/완충제를 사용한 제형의 단량체 함량이 염/완충제를 사용하지 않은 제형의 단량체 함량보다 낮았다. 따라서 아달리무맙, 아르기닌, 안정화제 및 계면 활성제를 포함한 제형에 추가적인 염 및 완충제를 사용하지 않는 것이 아달리무맙의 안정성을 증가시킴을 확인하였고, 아달리무맙 자체의 완충효과를 이용하여 추가적인 완충제를 사용하지 않고 안정성을 증가시킨 조성을 구성하는 것이 가능함을 확인하였다.As shown in Table 14, the content of each monomer before storage was 98.8 ~ 99.0%. After storage for 55 o C for 1 week, the monomer contents differed by composition. Oh otherwise mumap 100mg / mL, sucrose, 55mg / mL, ArgHCl 50mM, methionine 5mM and polysorbate 80 1mg / mL samples (A-11) of the following composition is ammonium monomer content is yieoteuna 94.8% NaCl, after storage of sulfuric acid, MgCl 2 and The contents of monomers were 94.1 ~ 94.7% after storage with CaCl 2 salt or sodium acetate buffer (A-12 ~ A-16), and the monomer content was lower than that without salt and buffer. The amount of monomer after storage was 95.2% compared with that of sucrose instead of sucrose (A-17), compared with that of sucrose (A-18 ~ A-23) And the monomer content was lower than the composition without buffer. When sucralose was used as a stabilizer without salt and buffer, the monomer content after storage was 95.2% (A-25) and when Glycine (Gly) was used as a stabilizer, the concentration of adalimumab was reduced to 50 mg / (A-26 to A-31) in the formulations containing sucrose after the storage when the additional salt / buffer was used in each of the formulations was 95.6% (A-32) (A-33 to A-38), the monomer content of the formulation with the additional salt / buffer was lower than the monomer content of the formulation without the salt / buffer. Thus, it has been found that the absence of additional salts and buffers in formulations including adalimumate, arginine, stabilizers, and surfactants increases the stability of adalimumab, and the use of additional buffering agents, It was confirmed that it is possible to constitute a composition having increased stability without using it.
그러나 동일한 아달리무맙 함량의 휴미라 조성 시료(A-24, A-39) 와 비교하였을 때 염 및 완충제를 포함한 제형의 55oC 1주 보관 후 단량체 함량이 휴미라 조성 시료의 55oC 1주 보관 후의 단량체 함량 이상이었다. However, the same Oh otherwise mumap amount of HUMIRA composition samples (A-24, A-39 ) and comparative hayeoteul when the salt and the composition is 55 o C 1 weeks storage the monomer content of formulations containing the buffer HUMIRA sample 55 o C 1 ju storage Was more than the amount of the monomer after.
이에 따라 아르기닌, 계면활성제, 안정화제를 포함하는 아달리무맙 제형에 추가 염 및 완충제를 사용하지 않는 것이 안정성 면에서 바람직하나, 아르기닌, 계면활성제, 안정화제를 포함하는 제형이 추가 염 및 완충제 포함 유무와 상관 없이 휴미라 상용 제형보다 안정함을 확인하였다.Accordingly, it is preferable from the standpoint of stability not to use additional salts and buffers in the formulations containing arginine, surfactants and stabilizers, but it is preferred that formulations containing arginine, surfactants and stabilizers contain additional salts and buffers Was more stable than HUMIRA commercial formulation.
<< 실시예Example 11> 11>
아달리무맙Ahdil mawab 제제에서 폴리올의 안정화 효과 확인 실험 Experiment to confirm stabilization effect of polyol in formulation
아달리무맙의 용액내 안정성을 증진시키기 위해 사용되는 폴리올의 안정화효과를 비교하기 위하여 아달리무맙 112mg/mL 용액 및 아달리무맙 112mg/mL 및 각 폴리올을 42mg/mL 포함한 제형을 다음과 같이 제조하여 -70oC와 5oC에서 5 cycle 및 10cycle 냉해동을 반복하여 SE-HPLC로 분석하여 HMW, LMW 및 단량체의 함량을 분석하였다.To compare the stabilization effect of the polyol used to enhance the stability in the solution of adalimumab, a formulation containing 112 mg / mL of adalimumat and 112 mg / mL of adalimumat and 42 mg / mL of each polyol was prepared as follows The contents of HMW, LMW and monomers were analyzed by SE-HPLC by repeating 5 cycles and 10 cycles of cold aging at -70 ° C and 5 ° C.
(%)LMW
(%)
(%)Total
(%)
(%)HMW
(%)
(%)LMW
(%)
(%)Total
(%)
(%)HMW
(%)
(%)LMW
(%)
(%)Total
(%)
표 15에 시료의 제형 및 안정성 시험의 sampling point 별 SE-HPLC결과를 나타내었다. 위의 결과에서 각 시료를 냉해동을 반복하였을 때, 만니톨, 수크로오스, 또는 트레할로스를 첨가한 제형의 경우 폴리올을 첨가하지 않은 제형과 비교하여 HMW 및 LMW 증가가 줄어드는 경향을 보여, 폴리올에 의한 안정화 효과가 있음을 확인하였다. 각 폴리올의 종류별 안정화 효과를 비교하면, 수크로오스 또는 트레할로스를 넣은 경우 냉해동 전의 시료와 HMW 및 LMW의 함량이 유사하며, 냉해동 10 cycle 이후에도 냉해동 전과 유사한 순도를 보여 안정화 효과가 큼을 확인할 수 있었다. 반면 만니톨을 포함한 시료의 경우 냉해동을 반복하였을 때 HMW 함량이 증가하는 경향을 보였으며, 냉해동 기간 동안 순도가 낮아짐을 확인할 수 있었다. 이에 따라 만니톨에 비하여 수크로오스와 트레할로스의 안정화 효과가 우월함을 확인하였다.Table 15 shows SE-HPLC results for each sampling point of the formulation and stability test of the samples. In the above results, the HMW and LMW increase was decreased in the case of the formulation containing mannitol, sucrose, or trehalose when the samples were cooled and frozen repeatedly, . Compared with sucrose or trehalose, the contents of HMW and LMW were similar to those of cold - frosted samples. After 10 cycles of cold - shock, the purity was similar to that of cold weathering. On the other hand, HMW content of samples containing mannitol tended to increase with repeated cold treatment, and it was found that the purity decreased during cold weathering. As a result, it was confirmed that the stabilizing effect of sucrose and trehalose was superior to that of mannitol.
<< 실시예Example 12> 12>
아르기닌, 메티오닌, 글리신 및 수크로오스의 안정화효과 확인 및 비교를 위한 To confirm and compare the stabilizing effects of arginine, methionine, glycine and sucrose 아달리무맙Ahdil mawab 제형 Formulation 냉해동Cold weather 시험 exam
아르기닌, 메티오닌, 글리신 및 수크로오스가 원액의 냉해동시 안정화에 미치는 영향을 확인하기 위하여 다음과 같이 시료를 제조하여 5mL polycarbonate bottle에 1mL씩 담은 후 제조 직후와 -70oC, 5oC에서 냉해동을 5회 반복 한 후 SE-HPLC를 이용하여 분석하였다. 각 시료의 조성과 냉해동 전/후의 SE-HPLC 결과는 다음과 같다. In order to confirm the effects of arginine, methionine, glycine and sucrose on the simultaneous stabilization of cold broth, samples were prepared as follows and placed in a 5 mL polycarbonate bottle in an amount of 1 mL. Then, immediately after preparation and at -70 ° C and 5 ° C, After repeating 5 times, it was analyzed by SE-HPLC. The SE-HPLC results of each sample before and after cold-shock were as follows.
(mM)ArgHCl
(mM)
(mM)Gly
(mM)
(mM)Met
(mM)
(mg/mL)Sucrose
(mg / mL)
아달리무맙 130mg/mL, 폴리소르베이트80 1mg/mL이 되도록 시료를 제조하였고, 여기에 추가적인 안정화제를 포함하도록 시료를 제조하였다. 냉해동전의 각 시료의 불순물 함량은 HMW와 LMW 모두 유사하게 나타났다. 냉해동 후, 모든 시료의 LMW는 유사하였지만 추가 안정화제의 종류와 함량에 따라 HMW의 함량이 다르게 나타났다. 추가 안정화제를 포함하지 않은 경우 냉해동 5회후 HMW가 1.76%까지 증가하였으나, 아르기닌 염산염 50mM을 포함한 경우 냉해동 5회 후 HMW가 0.67%로 크게 감소하였다. 아르기닌 염산염 50mM에 메티오닌을 추가로 포함한 제형의 경우, 메티오닌을 5mM을 포함하였을 때에는 추가적인 HMW의 감소를 확인할 수 없었으나, 25mM 사용시에는 HMW가 0.52% 정도로 추가로 감소하는 것을 확인하였다. 아르기닌 염산염, 메티오닌에 추가로 글리신 혹은 수크로오스를 첨가한 경우 냉해동 5회 후 HMW가 더욱 줄어들어 0.41~0.43%까지 감소하였고, 글리신 포함 제형과 수크로오스 포함 제형이 유사한 안정성을 나타내는 것을 확인하였다. 이에 따라, 메티오닌, 아르기닌, 글리신, 수크로오스가 모두 아달리무맙의 안정성에 기여하는 것을 확인하였다. 또한 안정화제로 폴리올 혹은 아미노산을 사용하여 적절한 조합 시 유사한 안정화 효과를 얻을 수 있음을 확인하였다.Samples were prepared to have 130 mg / mL adalimumab and 1 mg / mL polysorbate 80, and samples were prepared to include additional stabilizers. The content of impurities in each sample of cold coin was similar to that of HMW and LMW. After cooling, the LMW of all samples were similar, but the contents of HMW were different depending on the type and content of additional stabilizer. HMW was increased to 1.76% after 5th cold - frosting without addition stabilizer. However, when 50mg of arginine hydrochloride was added, HMW decreased to 0.67% after 5th cold - frosting. In the case of formulation containing methionine at 50 mM of arginine hydrochloride, no additional decrease in HMW was observed when methionine was added at 5 mM, but it was confirmed that HMW was further reduced at 0.52% when 25 mM was used. When glycine or sucrose was added to arginine hydrochloride and methionine, the HMW was further reduced to 0.41 to 0.43% after 5 times of the cold treatment, and it was confirmed that the glycine-containing formulation and the sucrose-containing formulation exhibited similar stability. Thus, it was confirmed that methionine, arginine, glycine, and sucrose all contribute to the stability of adalimumab. In addition, it was confirmed that similar stabilization effect can be obtained by using a polyol or an amino acid as a stabilizer in a proper combination.
<< 실시예13Example 13 >>
글리신 포함 제형, 수크로오스 포함 제형 및 Glycine-containing formulations, sucrose-containing formulations and 휴미라Humira 상용 제형의 안정성 비교시험 Comparison of stability of commercial formulations
글리신 포함 제형, 수크로오스 포함 제형 및 휴미라 상용제형의 안정성을 비교하기 위하여 아달리무맙의 함량이 100mg/mL 혹은 50mg/mL이 되고, 아르기닌염산염(ArgHCl) 50mM, 폴리소르베이트80(PS80) 1mg/mL, 메티오닌 5mM을 포함하도록 하여 시료를 제조하고 이 조성에 추가 안정화제로 글리신, 글리신과 메티오닌의 조합, 혹은 수크로오스를 사용하여 시료를 제조하였다. 또한 아달리무맙의 함량이 100mg/mL 또는 50mg/mL이 되도록 휴미라 상용 조성으로 시료를 제조하였다. 각각을 1mL 유리 시린지에 0.4mL씩 충전하여 40oC 4주 보관 전/후의 HMW 및 LMW 함량을 SE-HPLC로 분석하였다. 각 조성과 SE-HPLC의 결과는 다음과 같다.To compare the stability of glycine-containing formulations, sucrose-containing formulations and humira commercial formulations, the content of adalimuma was 100 mg / mL or 50 mg / mL, and arginine hydrochloride (ArgHCl) 50 mM, polysorbate 80 (PS80) 1 mg / mL , And 5 mM of methionine. A sample was prepared using a combination of glycine, glycine and methionine or sucrose as a stabilizing agent. Samples were also prepared with HUMIRA commercial composition such that the content of adalimuma was 100 mg / mL or 50 mg / mL. The contents of HMW and LMW before and after storage for 4 weeks at 40 ° C were analyzed by SE-HPLC. The results of each composition and SE-HPLC are as follows.
ArgHCl 50mM,
PS80 1mg/mL
Met 5mM100 mg / mL of adalimumab,
ArgHCl 50 mM,
PS80 1 mg / mL
Met 5 mM
ArgHCl 50mM, PS80 1mg/mL,
Met 5mM50 mg / mL of adalimumab,
ArgHCl 50 mM, PS80 1 mg / mL,
Met 5 mM
아르기닌 염산염, 폴리소르베이트80, 메티오닌, 아달리무맙을 포함하는 조성의 시료들은 40oC 4주 보관 전 유사한 안정성을 나타내었다. 한편 휴미라 상용 조성의 시료들은 제조 직후부터 기타 시료들보다 HMW가 0.1% 정도 높았다. 보관 후 HMW 및 LMW 함량의 합은 아르기닌 염산염을 포함한 모든 시료의 경우 아달리무맙 100mg/mL일 때 2.81~2.99%, 아달리무맙 50mg/mL 일 때 2.56~2.71%로 비교적 낮았으나 휴미라 상용 조성 시료의 경우 아달리무맙 100mg/mL일 때 4.03%, 아달리무맙 50mg/mL일 때 4.06%로 아르기닌 포함 조성의 시료보다 HMW 및 LMW의 함량이 높게 나타났다. 이에 따라, 본 실시예에 기술된 첨가제의 조합, 즉 아르기닌을 포함하는 제형, 아르기닌과 추가 안정화제로 폴리올 혹은 아미노산을 포함하는 제형이 상용 휴미라 제형보다 안정성 면에서 우월한 제형임을 확인할 수 있다.Samples of compositions containing arginine hydrochloride, polysorbate 80, methionine and adalimumab showed similar stability before storage at 40 ° C for 4 weeks. On the other hand, samples of HUMIRA commercial composition were 0.1% higher than those of other samples immediately after production. The sum of HMW and LMW contents after storage was 2.81 ~ 2.99% at 100 mg / mL for all samples containing arginine hydrochloride and 2.56 ~ 2.71% at 50 mg / mL for arymeum hydrochloride, , The content of HMW and LMW was higher than that of arginine-containing composition, which was 4.03% at 100 mg / mL of adalimumab and 4.06% at 50 mg / mL of adalimumab. Accordingly, it can be confirmed that the combination of the additives described in the present embodiment, that is, the formulation containing arginine, the formulation containing arginine and the polyol or amino acid as the additional stabilizer, is superior to the commercial humira in terms of stability.
<< 실시예14Example 14 >>
아달리무맙Ahdil mawab , 수크로오스, 글리신, , Sucrose, glycine, 류신Leucine , 메티오닌, 염화나트륨, 아르기닌의 농도 별 , By concentration of methionine, sodium chloride, arginine 아달리무맙Ahdil mawab 제형의 안정성 비교시험 Stability comparison test of formulation
아달리무맙 제형의 안정성을 비교하기 위하여, 아달리무맙, 아르기닌 염산염(ArgHCl), 염화나트륨 (NaCl), 폴리소르베이트80(PS80), 메티오닌(Met), 수크로오스 (Sucrose), 글리신 (Gly), 류신 (Leu)의 조합으로 다양한 조성의 시료를 제조하였다. 또한 비교를 위해 아달리무맙의 함량이 100mg/mL 또는 50mg/mL이 되도록 휴미라 상용 조성으로 시료를 제조하였다. 각 제형을 1mL 유리 시린지에 0.4mL씩 충전하여 40oC 4주 보관 전/후의 단량체 함량을 SE-HPLC로 분석하였다. 각 조성과 SE-HPLC의 결과는 다음과 같다.In order to compare the stability of the azithromycin formulation, it is preferred to use at least one selected from the group consisting of adalimumab, arginine hydrochloride (ArgHCl), sodium chloride (NaCl), polysorbate 80 (PS80), methionine (Met), sucrose, glycine (Leu) were used to prepare samples of various compositions. For comparison, Samples were prepared with HUMIRA commercial composition such that the content of adalimumab was 100 mg / mL or 50 mg / mL. Each formulation was filled in 0.4 mL of 1 mL glass syringe and analyzed for monomer content before and after 4 weeks storage at 40 ° C by SE-HPLC. The results of each composition and SE-HPLC are as follows.
*상용 휴미라 제형: Sodium phosphate monobasic dihydrate 0.86 mg/mL, Sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg/mL, Sodium citrate 0.3 mg/mL, Citric acid monohydrate 1.3 mg/mL, Mannitol 12 mg/mL, Sodium chloride 6.16 mg/mL, PS80 1 mg/mLSodium phosphate monobasic dihydrate 0.38 mg / mL, sodium phosphate dibasic dihydrate 1.53 mg / mL, sodium citrate 0.3 mg / mL, citric acid monohydrate 1.3 mg / mL, mannitol 12 mg / mL, sodium chloride 6.16 mg / mL , PS80 1 mg / mL
모든 시료의 단량체 함량은 40°C에 보관 전 99.27% ~ 99.33%로 제형과 관계없이 유사하였다. The monomer contents of all samples were 99.27% ~ 99.33% before storage at 40 ° C.
아달리무맙의 함량이 100mg/mL인 시료 (A-40~A-61)의 40°C 4주 보관 후 단량체 함량은, 염화나트륨을 포함하지 않는 제형(A-40~A-55)의 경우 97.04%~97.23% 였으며, 염화나트륨을 포함하는 제형 (A-56~A-61, 상용 휴미라 조성 A-62 제외)의 경우 96.85%~97.00%로 염화나트륨을 포함하지 않는 제형보다는 약간 낮았다. 그러나 염화나트륨, 수크로오즈, 메티오닌, 글리신, 류신의 함량에 따른 40°C 4주 보관 후의 단량체 함량 차이는 비교적 미미하였고, 아르기닌을 포함한 조성 (A-40~A-61)의 단량체 함량이 동일 아달리무맙 농도의 상용 휴미라 조성(A-62)의 단량체 함량인 95.64% 보다 1% 이상 높음을 확인하였다. The monomer content of the samples (A-40 to A-61) having a content of adalimumab of 100 mg / mL after storage for 4 weeks at 40 ° C was 97.04 for the formulations (A-40 to A-55) % To 97.23% and 96.85% to 97.00% in the case of formulations containing sodium chloride (except for A-56 to A-61 and commercial HUMIRA composition A-62) were slightly lower than those without sodium chloride. However, the content of monomers in arginine-containing composition (A-40 ~ A-61) was not significantly different after storage for 4 weeks at 40 ° C depending on the content of sodium chloride, sucrose, methionine, glycine and leucine. (A-62), which is higher than the monomer content of 95.64%.
아달리무맙 함량이 50mg/mL인 경우에도 100mg/mL 아달리무맙 조성의 분석결과와 유사한 결과를 나타내었다. 아달리무맙의 함량이 50mg/mL인 시료 (A-63~A-85)의 40°C 4주 보관 후 단량체 함량은, 염화나트륨을 포함하지 않는 제형(A-63~A-79)의 경우 97.15%~97.38% 였으며, 염화나트륨을 포함하는 제형 (A-80~A-85, 상용 휴미라 조성 A-86 제외)의 경우 96.81%~97.06%로 염화나트륨을 포함하지 않는 제형보다는 약간 낮았다. 그러나 염화나트륨, 수크로오즈, 메티오닌, 글리신, 류신의 함량에 따른 40°C 4주 보관 후의 단량체 함량 차이는 비교적 미미하였고, 아르기닌을 포함한 조성 (A-63~A-85)의 단량체 함량이 동일 아달리무맙 농도의 상용 휴미라 조성(A-86)의 단량체 함량인 95.47% 보다 1% 이상 높음을 확인하였다. Similar results were obtained with the assay of 100 mg / mL of azithromycin even when the azithromycin content was 50 mg / mL. The monomer content of the samples (A-63 to A-85) containing 50 mg / mL of adalimumab after storage for 4 weeks at 40 ° C was 97.15 for the formulations (A-63 to A-79) % To 97.38% and 96.81% to 97.06% in the case of formulations containing sodium chloride (except for A-80 to A-85, commercial HUMIRA formulation A-86) were slightly lower than those without sodium chloride. However, the difference in monomer content after storage for 4 weeks at 40 ° C was relatively small depending on the content of sodium chloride, sucrose, methionine, glycine and leucine, and the monomer content of arginine-containing composition (A-63 to A-85) (A-86), which is more than 1% higher than the monomer content of 95.47%.
이에 따라, 본 실시예에 기술된 첨가제의 조합 및 유사 제형, 즉 아르기닌을 포함하는 제형이 상용 휴미라 제형보다 안정성 면에서 우월한 제형임을 확인하였다. Thus, it was confirmed that the combination of the additives described in this example and the formulation containing the arginine, which is a similar formulation, are superior to the commercial Humira formulation in terms of stability.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.From the above description, it will be understood by those skilled in the art that the present invention may be embodied in other specific forms without departing from the spirit or essential characteristics thereof. In this regard, it should be understood that the above-described embodiments are to be considered in all respects as illustrative and not restrictive. The scope of the present invention should be construed as being included in the scope of the present invention without departing from the scope of the present invention as defined by the appended claims.
Claims (25)
A liquid formulation of an anti-TNF alpha antibody, comprising an anti-TNF alpha antibody, a stabilizer, a surfactant, and arginine.
2. The liquid formulation of claim 1, wherein the stabilizing agent is a polyol, an amino acid other than arginine, or a combination thereof.
3. The liquid formulation of claim 2, wherein the polyol is selected from the group consisting of sucrose, trehalose, PEG, and combinations thereof.
3. The liquid formulation according to claim 2, wherein the amino acid is selected from the group consisting of glycine, leucine, isoleucine, phenylalanine, proline and combinations thereof.
(i) 수크로오스 또는 트레할로스,
(ii) 수 평균 분자량이 200 내지 600인 PEG, 또는 수 평균 분자량이 1000 내지 8000인 PEG,
(iii) 글리신 또는 류신, 및
(iv) 상기 (i) 내지 (iii) 중 2 이상의 조합
으로 이루어진 군에서 선택된 것인, 항-TNF 알파 항체의 액상 제제.
The method of claim 1,
(i) sucrose or trehalose,
(ii) PEG having a number average molecular weight of 200 to 600, or PEG having a number average molecular weight of 1000 to 8000,
(iii) glycine or leucine, and
(iv) a combination of at least two of (i) to (iii)
Lt; RTI ID = 0.0 > anti-TNF < / RTI > alpha antibody.
3. The liquid formulation of claim 2, wherein the polyol in the formulation is present in a concentration from 0.1 to 100 mg / mL.
3. The liquid formulation of claim 2, wherein the amino acid other than arginine in the formulation is present at a concentration of 1 to 300 mM.
The liquid formulation of claim 1, wherein the surfactant is a nonionic surfactant.
The liquid formulation of claim 1, wherein said surfactant is polysorbate or poloxamer.
The liquid formulation of claim 9, wherein said surfactant is polysorbate 80, polysorbate 20, or poloxamer 188.
The liquid formulation of claim 1, wherein the surfactant in the formulation is present in a concentration of from 0.1 to 5 mg / mL.
The liquid formulation of claim 1 wherein the arginine is in the form of a salt.
13. The liquid formulation of claim 12, wherein said arginine is in the form of an arginine hydrochloride.
The liquid formulation of claim 1, wherein the arginine in the formulation is present in a concentration from 0.1 to 200 mM.
2. The liquid formulation of claim 1, wherein the anti-TNF alpha antibody is adalimumab.
The liquid formulation of claim 1, wherein the anti-TNF alpha antibody in the formulation is present at a concentration of 1 to 250 mg / mL.
The liquid formulation of claim 1, wherein the anti-TNF alpha antibody in the formulation is present at a concentration of 50 to 200 mg / mL.
상기 액상 제제는 항산화제를 더 포함하는, 액상 제제.
The method according to claim 1,
Wherein the liquid preparation further comprises an antioxidant.
19. The liquid formulation of claim 18, wherein said antioxidant is methionine.
20. The liquid formulation of claim 19, wherein the methionine in the formulation is present at a concentration of 1 to 50 mM.
상기 액상 제제는 추가의 염 및 완충액을 포함하지 않는 것인, 항-TNF 알파 항체의 액상 제제.
21. The method according to any one of claims 1 to 20,
Wherein said liquid formulation does not comprise additional salts and buffers.
상기 액상 제제의 pH는 4 내지 6인, 항-TNF 알파 항체의 액상 제제.
21. The method according to any one of claims 1 to 20,
Wherein said liquid formulation has a pH of from 4 to 6. < RTI ID = 0.0 > 5. < / RTI >
1 내지 250mg/mL 농도의 항-TNF 알파 항체;
0.1 내지 100mg/mL 농도의 폴리올;
0.1 내지 5mg/mL 농도의 계면활성제, 및
0.1 내지 200mM 농도의 아르기닌을 포함하는, 항-TNF 알파 항체의 액상 제제.
The method of claim 1, wherein the liquid formulation comprises
An anti-TNF alpha antibody at a concentration of 1 to 250 mg / mL;
A polyol having a concentration of 0.1 to 100 mg / mL;
0.1 to 5 mg / mL of a surfactant, and
A liquid formulation of an anti-TNF alpha antibody, comprising arginine at a concentration of 0.1 to 200 mM.
1 내지 250mg/mL 농도의 항-TNF 알파 항체;
1 내지 300mM 농도의 아르기닌 외의 다른 아미노산;
0.1 내지 5mg/mL 농도의 계면활성제, 및
0.1 내지 200mM 농도의 아르기닌을 포함하는, 항-TNF 알파 항체의 액상 제제.
The method of claim 1, wherein the liquid formulation comprises
An anti-TNF alpha antibody at a concentration of 1 to 250 mg / mL;
Amino acids other than arginine at a concentration of 1 to 300 mM;
0.1 to 5 mg / mL of a surfactant, and
A liquid formulation of an anti-TNF alpha antibody, comprising arginine at a concentration of 0.1 to 200 mM.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200098144A KR102342292B1 (en) | 2017-03-16 | 2020-08-05 | A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20170033188 | 2017-03-16 | ||
| KR1020170033188 | 2017-03-16 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200098144A Division KR102342292B1 (en) | 2017-03-16 | 2020-08-05 | A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20180106974A true KR20180106974A (en) | 2018-10-01 |
Family
ID=63522490
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020180031016A KR20180106974A (en) | 2017-03-16 | 2018-03-16 | A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody |
| KR1020200098144A KR102342292B1 (en) | 2017-03-16 | 2020-08-05 | A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200098144A KR102342292B1 (en) | 2017-03-16 | 2020-08-05 | A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (2) | JP7109849B2 (en) |
| KR (2) | KR20180106974A (en) |
| CN (1) | CN110621303A (en) |
| AU (1) | AU2018236651B2 (en) |
| BR (1) | BR112019019162A2 (en) |
| CO (1) | CO2019010860A2 (en) |
| MA (1) | MA46988A1 (en) |
| MX (1) | MX2019010895A (en) |
| MY (1) | MY197202A (en) |
| NZ (1) | NZ757965A (en) |
| PH (1) | PH12019502075A1 (en) |
| RU (1) | RU2756619C2 (en) |
| UA (1) | UA123847C2 (en) |
| WO (1) | WO2018169348A1 (en) |
| ZA (1) | ZA201906696B (en) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX2021009851A (en) | 2019-02-18 | 2021-09-10 | Lilly Co Eli | Therapeutic antibody formulation. |
| TW202102260A (en) * | 2019-03-21 | 2021-01-16 | 美商再生元醫藥公司 | Stabilized formulations containing anti-il-33 antibodies |
| EP4108258A4 (en) * | 2020-02-20 | 2024-03-06 | Bio Thera Solutions Ltd | Anti-tnf-alpha antibody preparation, preparation method therefor and use thereof |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX344727B (en) * | 2010-11-11 | 2017-01-05 | Abbvie Biotechnology Ltd | IMPROVED HIGH CONCENTRATION ANTI-TNFa ANTIBODY LIQUID FORMULATIONS. |
| UY34105A (en) * | 2011-06-03 | 2012-07-31 | Lg Life Sciences Ltd | STABLE LIQUID FORMULATION OF ETANERCEPT |
| SG11201405475UA (en) * | 2012-03-07 | 2014-10-30 | Cadila Healthcare Ltd | Pharmaceutical formulations of tnf-alpha antibodies |
| PE20191815A1 (en) | 2012-09-07 | 2019-12-27 | Coherus Biosciences Inc | STABLE AQUEOUS FORMULATIONS OF ADALIMUMAB |
| CA2898262A1 (en) * | 2013-01-24 | 2014-07-31 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Tnf-alpha antigen-binding proteins |
| CA2906101A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Bayer Healthcare Llc | Anti-prolactin receptor antibody formulations |
| WO2015134406A1 (en) | 2014-03-03 | 2015-09-11 | La Jolla Biologics, Inc. | Stable aqueous recombinant protein formulations |
| IN2014MU01248A (en) | 2014-04-02 | 2015-10-09 | Intas Pharmaceuticals Ltd | |
| EP2946765B1 (en) * | 2014-05-23 | 2016-08-31 | Ares Trading S.A. | Liquid pharmaceutical composition |
| US9821059B2 (en) | 2014-10-17 | 2017-11-21 | Alteogen Inc. | Composition for stabilizing protein and pharmaceutical formulation comprising the same |
| HUP1400510A1 (en) * | 2014-10-28 | 2016-05-30 | Richter Gedeon Nyrt | Pharmaceutical anti-tnfalpha antibody formulation |
| EP3250598A1 (en) * | 2015-01-28 | 2017-12-06 | Mabxience S.A. | Pharmaceutical formulations for anti-tnf-alpha antibodies |
| WO2016162819A1 (en) * | 2015-04-07 | 2016-10-13 | Lupin Limited | Stable aqueous pharmaceutical composition of anti-tnf alpha antibody |
-
2018
- 2018-03-16 KR KR1020180031016A patent/KR20180106974A/en active Application Filing
- 2018-03-16 MA MA46988A patent/MA46988A1/en unknown
- 2018-03-16 CN CN201880031705.6A patent/CN110621303A/en active Pending
- 2018-03-16 AU AU2018236651A patent/AU2018236651B2/en active Active
- 2018-03-16 BR BR112019019162A patent/BR112019019162A2/en active Search and Examination
- 2018-03-16 RU RU2019130728A patent/RU2756619C2/en active
- 2018-03-16 JP JP2019551275A patent/JP7109849B2/en active Active
- 2018-03-16 MY MYPI2019005331A patent/MY197202A/en unknown
- 2018-03-16 MX MX2019010895A patent/MX2019010895A/en unknown
- 2018-03-16 NZ NZ757965A patent/NZ757965A/en unknown
- 2018-03-16 WO PCT/KR2018/003097 patent/WO2018169348A1/en active Application Filing
- 2018-03-16 UA UAA201909838A patent/UA123847C2/en unknown
-
2019
- 2019-09-12 PH PH12019502075A patent/PH12019502075A1/en unknown
- 2019-09-30 CO CONC2019/0010860A patent/CO2019010860A2/en unknown
- 2019-10-10 ZA ZA2019/06696A patent/ZA201906696B/en unknown
-
2020
- 2020-08-05 KR KR1020200098144A patent/KR102342292B1/en active IP Right Grant
-
2022
- 2022-05-06 JP JP2022076654A patent/JP2022097600A/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2019130728A (en) | 2021-04-16 |
| WO2018169348A1 (en) | 2018-09-20 |
| RU2756619C2 (en) | 2021-10-04 |
| JP2020510079A (en) | 2020-04-02 |
| CN110621303A (en) | 2019-12-27 |
| BR112019019162A2 (en) | 2020-04-14 |
| AU2018236651A1 (en) | 2019-10-31 |
| ZA201906696B (en) | 2020-08-26 |
| MY197202A (en) | 2023-05-31 |
| UA123847C2 (en) | 2021-06-09 |
| JP2022097600A (en) | 2022-06-30 |
| RU2019130728A3 (en) | 2021-04-16 |
| MA46988A1 (en) | 2020-06-30 |
| NZ757965A (en) | 2022-07-01 |
| CO2019010860A2 (en) | 2020-01-17 |
| MX2019010895A (en) | 2019-11-05 |
| JP7109849B2 (en) | 2022-08-01 |
| AU2018236651B2 (en) | 2020-12-10 |
| KR102342292B1 (en) | 2021-12-24 |
| PH12019502075A1 (en) | 2020-09-14 |
| KR20200096472A (en) | 2020-08-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11179463B2 (en) | BLyS antibody formulation | |
| US20190345238A1 (en) | Formulations | |
| TWI353253B (en) | ||
| CA2976298A1 (en) | Stable liquid formulation for monoclonal antibodies | |
| KR102342292B1 (en) | A liquid formulation of anti-TNF alpha antibody | |
| EP2081553B1 (en) | Stable antibody formulations | |
| EP3532029B1 (en) | Liquid pharmaceutical composition | |
| JP7465814B2 (en) | Reducing the viscosity of highly concentrated protein formulations | |
| WO2008029908A1 (en) | Stable lyophilized pharmaceutical preparation comprising antibody | |
| AU2014201388B2 (en) | Stable Buffered Formulations Containing Polypeptides | |
| EP3533441A2 (en) | Stable pharmaceutical formulation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| AMND | Amendment | ||
| E601 | Decision to refuse application | ||
| AMND | Amendment | ||
| X601 | Decision of rejection after re-examination | ||
| A107 | Divisional application of patent |