KR20180103158A - 피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 유도체 - Google Patents

피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 유도체 Download PDF

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Abstract

하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물이 제공된다:
Figure pct00175

상기 식에서, A, A' 및 A"는 독립적으로 O, C=O, C-R' 또는 N-R"이고, 이때 R' 및 R"는 독립적으로 H, 아미노, -NR7COR6, COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)일 수 있고, R"는 존재하거나 부재할 수 있고, 원자가 법칙이 허용하는 경우에 존재하고, A, A' 및 A" 중 1개 이하는 O 또는 C=O이고; R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고; R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고; R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 하이드록시(C1-C6 알킬), 페닐(C1-C6 알킬), 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고; X는 C-R3 또는 N이고, 이때 R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고; R4 및 R5는 독립적으로 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고; R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고; n은 0, 1, 2 또는 3이다.
또한, 야누스 키나아제 억제제로서의 치료 방법, 및 본 발명의 화합물 또는 다른 치료제와 이의 조합물을 함유하는 약학 조성물이 제공된다.

Description

피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 유도체
본 발명은, 약학적으로 활성인 피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 TYK2 리간드 및 유사체를 제공한다. 상기 화합물은, 야누스 키나아제(Janus Kinases, JAK)를 억제하는데 유용하다. 본 발명은 또한, 상기 화합물을 포함하는 조성물, 상기 화합물의 제조 방법, 및 JAK에 의해 매개되는 증상의 치료 및 예방 방법에 관한 것이다.
단백질 키나아제는, 티로신 및 세린/트레오닌 키나아제로 넓게 분류되는 단백질에서 특이적 잔기의 인산화를 촉진하는 효소의 계열로서 대분된다. 돌연변이, 과발현 또는 부적절한 조절, 조절장애(dysregulation) 또는 조절완화(deregulation)뿐만 아니라 성장 인자 또는 사이토카인의 과잉 생산 또는 생산 부족으로부터 유래하는 부적절한 키나아제 활성은, 수많은 질환, 예컨대, 비제한적으로, 암, 심혈관계 질환, 알레르기, 천식 및 다른 호흡기 질환, 자가면역 질환, 염증성 질환, 골 질환, 대사 장애, 및 신경성 및 신경퇴행성 질환, 예를 들면 알츠하이머병과 연관되어 있다. 부적절한 키나아제 활성은, 전술된 질환 및 관련 질환과 연관된 세포 성장, 세포 분화, 세포 기능, 생존, 세포자멸사, 및 세포 이동성에 관한 다양한 생물학적 세포 반응을 촉발시킨다.
따라서, 단백질 키나아제는, 치료적 개입을 위한 표적으로서 중요한 부류의 효소로 나타났다. 특히, 세포 단백질 티로신 키나아제의 JAK 계열(JAK1, JAK2, JAK3 및 Tyk2)은 사이토카인 신호전달에서 중추적인 역할을 한다(문헌[Kisseleva et al., Gene, 2002, 285, 1]; 및 문헌[Yamaoka et al. Genome Biology 2004, 5, 253]). 사이토카인은, 이의 수용체에 대한 결합시, JAK를 활성화시키고, 이어서 이는 사이토카인 수용체를 인산화시킴으로써, 신호전달 분자, 특히, 궁극적으로 유전자 발현을 야기하는 전사의 신호 변환제 및 활성제(STAT) 계열의 일원에 대한 도킹(dockig) 부위를 생성한다. 수많은 사이토카인이 JAK 계열을 활성화시키는 것으로 공지되어 있다. 이러한 사이토카인은 인터페론(IFN) 계열(IFN-α, IFN-β, IFN-ω, 리미틴(Limitin), IFN-γ, IL-10, IL-19, IL-20, IL-22), gp130 계열(IL-6, IL-11, OSM, LIF, CNTF, NNT-1/BSF-3, G-CSF, CT-1, 렙틴(Leptin), IL-12, IL-23), γ C 계열(IL-2, IL-7, TSLP, IL-9, IL-15, IL-21, IL-4, IL-13), IL-3 계열(IL-3, IL-5, GM-CSF), 단일쇄 계열(EPO, GH, PRL, TPO), 수용체 티로신 키나아제(EGF, PDGF, CSF-1, HGF), 및 G-단백질 커플링된 수용체(AT1)를 포함한다.
특정 JAK 효소(특히, TYK2)를 효과적으로 및 선택적으로 억제하는 신규 화합물에 대한 필요성이 남아 있다. TYK2는 JAK 키나아제 계열의 일원이며, 제1형 인터페론(예컨대, IFNα, INFβ), IL-6, IL-10, IL-12 및 IL-23의 신호전달에 중요하다(문헌[Liang, Y. et al., Expert Opinion on Therapeutic Targets, 18, 5, 571-580 (2014)] 참조). 또한, TYK2는, JAK 키나아제 계열의 다른 일원들과 하기와 같은 조합으로 신호를 전달한다: TYK2/JAK1, TYK2/JAK2, TYK2/JAK1/JAK2. TYK2는, 염증 질환 및 자가면역 질환에 중요한 다수의 세포 유형(예컨대, 자연 살해 세포, B 세포 및 T 도움 세포 유형)의 분화 및 기능에 중요한 것으로 나타났다. 이상(aberrant) TYK2 발현은, 다수의 자가면역 또는 염증 증상과 관련된다. TYK2 키나아제 활성의 억제를 통한 면역 활성의 조절은, JAK2 의존성 에리트로포이에틴(EPO) 및 트롬보포이에틴(TPO) 신호전달을 피하면서(문헌[Neubauer H., et al., Cell, 93(3), 397-409 (1998)]; 및 문헌[Parganas E., et al., Cell, 93(3), 385-95 (1998)] 참조), 다양한 면역 장애의 치료에 유용함을 입증할 수 있다(문헌[O'Shea JJ, Plenge R, Immunity, 36, 542-50 (2012)]; 문헌[Murray, P.J., J. Immunol., 178, 2623-2629 (2007)]; 및 문헌[Kisseleva, T., et al., Gene, 285, 1-24 (2002)] 참조).
본 발명은, 하기 구조를 갖는 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00001
상기 식에서,
A, A' 및 A"는 독립적으로 O, C=O, C-R' 또는 N-R"이고, 이때 R' 및 R"는 독립적으로 H, 아미노, -NR7COR6, COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)일 수 있고, R"는 존재하거나 부재할 수 있고, 원자가 법칙이 허용하는 경우에 존재하고, A, A' 및 A" 중 1개 이하는 O 또는 C=O이고;
R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고;
R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 하이드록시(C1-C6 알킬), 페닐(C1-C6 알킬), 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
X는 C-R3 또는 N이고, 이때 R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고;
R4 및 R5는 독립적으로 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
또다른 양태에서, 본 발명은 또한,
약학적으로 허용가능한 담체 및 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약학적 조성물;
치료 효과량의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 개체에게 투여함으로써, 염증, 자가면역 질환, 전신 홍반성 루푸스, 홍반성 신염, 원판성 루푸스, 피부 루푸스, 중추 신경계 루푸스, 류마티스성 관절염, 건선성 관절염, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 천식, 알레르기성 천식, 제1형 당뇨병, 다발성 근염, 피부 근염; 아이카르디-고우티에레스 증후군 및 제1형 인터페론 과발현의 다른 멘델 유전질환을 비롯한 제1형 인터페론병증; 다발성 경화증, 원발성 진행성 다발성 경화증, 재발 이장성 다발성 경화증, 원발성 담즙 담관염으로도 공지된 원발성 담즙 간경변, 원발성 경화 담관염, 자가면역 간염, 비-알코올성 지방간 질환, 비-알코올성 지방간염, 건선, 피부 근염, 경피증, 아토피성 피부염, 백반증, 원형 탈모, 척추증, 강직성 척추염, 알츠하이머병, 신경-염증 근염, 혈관염, 천포창, 크론병, 루푸스, 신염, 건선, 다발성 경화증, 주요 우울 장애, 알레르기, 천식, 쇠그렌병, 안구 건조증, 이식 거부증, 암, 염증성 장 질환, 패혈 쇼크, 심폐 기능장애, 백반증, 탈모, 급성 호흡기 질환, 강직성 척추염, 자가면역 간염, 원발성 경화 담관염, 원발성 담즙 간경변증, 알츠하이머병, 또는 악액질을 비롯한 증상 또는 장애를 치료하는 방법;
치료 효과량의 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 포유동물에게 투여함으로써, 아토피성 피부염, 습진, 건선, 경피증, 루푸스, 소양증, 피로, 다른 소양증 증상, 알레르기성 반응, 예컨대 포유동물에서의 알레르기성 피부염, 말 알레르기성 질환, 예컨대 교상(bite) 과민증, 여름철 습진, 말의 피부 가려움증(sweet itch), 식노, 염증성 기도 질환, 재발성 기도 폐색, 기도 과민반응, 및 만성 폐색성 폐 질환을 비롯한 증상 또는 장애를 치료하는 방법; 및
본 발명의 화합물의 제조 방법
을 제공한다.
본 발명은, 단지 예로서 제시되는 하기 설명으로부터 더 잘 이해될 것이다. 본 발명은, 피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 유도체의 부류에 관한 것이다. 특히, 본 발명은, JAK(특히, TYK2)의 억제제로서 유용한 피라졸로[1,5-a]피라진-4-일 화합물에 관한 것이다. 본 발명이 그렇게 제한되는 것은 아니지만, 하기 논의 및 예를 통해 본 발명의 다양한 양태가 이해될 것이다.
용어 "알킬"은, 단독으로 또는 조합으로, 구조식 CnH2n+1의 비환형 포화된 탄화수소 기를 의미하며, 이는 선형 또는 분지형일 수 있다. 상기 기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 2급-부틸, 3급-부틸, 펜틸, 이소-아밀 및 헥실을 포함한다. 달리 명시되지 않는 한, 알킬 기는 1 내지 6개의 탄소 원자를 포함한다. 알킬 및 다양한 다른 탄화수소-함유 잔기의 탄소 원자 함량은, 상기 잔기에서 탄소 원자의 하한 개수 및 상한 개수를 지정하는 접두사로 표시된다(즉, 접두사 Ci-Cj는 정수 "i" 내지 정수 "j"개의 탄소 원자를 포함하는 잔기를 나타냄). 따라서, 예를 들면, C1-C6 알킬은 1 내지 6개(끝값 포함)의 탄소 원자의 알킬을 지칭한다.
본원에서 용어 "하이드록시"는 OH 기를 의미한다. 용어 "헤테로사이클릭"은, 3 내지 10개의 고리 원자(이때, 하나 이상, 바람직하게는 1, 2 또는 3개의 고리 원자는 N, O 및 S로부터 선택되는 헤테로원자(들)이고, 나머지는 탄소임)를 함유하고 고리 질소 원자 또는 고리 탄소 원자를 통해 부착될 수 있는 포화된 또는 부분적으로 포화된(즉, 비-방향족) 헤테로환을 지칭한다. 동일하게, 치환되는 경우, 치환기는 고리 질소 원자(치환기가 탄소 원자를 통해 결합된 경우) 또는 고리 탄소 원자(모든 경우)에 위치될 수 있다. 구체적 예는 옥시란일, 아지리딘일, 옥세탄일, 아제티딘일, 테트라하이드로퓨란일, 피롤리딘일, 테트라하이드로피란일, 피페리딘일, 1,4-다이옥산일, 모폴린일, 피페라진일, 아제판일, 옥세판일, 옥사제판일 및 다이아제핀일을 포함한다.
용어 "아릴"은, 고리 탄소 원자들 중 하나를 통해 부착될 수 있는 6 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 방향족 일환형 또는 이환형 탄화수소를 지칭한다. 동일하게, 치환되는 경우, 치환기는 고리 탄소 원자에 위치될 수 있다. 구체적 예는, 비제한적으로, 페닐, 톨릴, 자일릴, 트라이메틸페닐 및 나프틸을 포함한다. 아릴 치환기의 예는, 비제한적으로, 알킬, 하이드록실, 할로, 니트릴, 알콕시, 트라이플루오로메틸, 카복스아마이도, SO2Me, 벤질 및 치환된 벤질을 포함한다.
용어 "헤테로아릴"은, 5 내지 10개의 고리 원자(여기서 하나 이상, 바람직하게는 1, 2 또는 3개의 고리 원자는 N, O, 및 S로부터 선택되는 헤테로원자(들)이고, 나머지는 탄소임)를 함유하고 적절한 원자가로 고리 탄소 원자 또는 고리 질소 원자를 통해 부착될 수 있는 1가 방향족 일환형 또는 이환형 헤테로환을 지칭한다. 동일하게, 치환되는 경우, 치환기는 적절한 원자가로 고리 탄소 원자 또는 고리 질소 원자에 위치될 수 있다. 구체적 예는, 비제한적으로, 티엔일, 퓨란일, 피롤릴, 피라졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 트라이아졸릴, 옥사다이아졸릴, 티아다이아졸릴, 테트라졸릴, 피리딜, 피리다진일, 피리미딘일, 및 피라진일을 포함한다. 용어 "사이클로알킬"은, 구조식 CnH2n-1의 일환형 포화된 탄화수소 기를 의미한다. 그 예는, 비제한적으로, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 및 사이클로헵틸을 포함한다. 달리 명시되지 않는 한, 사이클로알킬 기는 3 내지 8개의 탄소 원자를 포함한다.
용어 "할로" 및 "할로겐"은, 플로라이드(F), 클로라이드(Cl), 브로마이드(Br) 또는 요오다이드(I)를 지칭한다.
용어 "포유 동물"은, 인간, 가축 또는 반려 동물을 지칭한다.
용어 "반려 동물"은, 애완 동물 또는 가계 동물로서 기르는 동물을 지칭한다. 반려 동물의 예는 개, 고양이 및 설치류, 예컨대 햄스터, 기니 피그, 저빌, 토끼, 흰담비 및 조류를 포함한다.
용어 "가축"은, 제품(예컨대, 식품 또는 섬유)를 제조하기 위한 농업 환경에서, 또는 이의 노동을 위해 양육되거나 길러지는 동물을 지칭한다. 몇몇 실시양태에서, 가축은 포유 동물, 예를 들면 인간에 의한 소비에 적합하다. 가축 동물의 예는 소, 염소, 말, 돼지, 양, 예컨대 새끼양, 및 토끼뿐만 아니라 조류, 예컨대 닭, 오리 및 칠면조를 포함한다.
용어 "치료하다" 또는 "치료"는, 질환, 장애 또는 증상과 관련된 징후의 완화, 또는 이러한 징후의 추가적 진행 또는 악화의 중단을 의미한다. 환자의 질환 및 증상에 따라, 본원에서 용어 "치료"는 하나 이상의 치유적, 완화적 및 예방적 치료를 포함할 수 있다. 치료는 또한, 다른 요법과 조합으로 본 발명의 약학 조성물을 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
용어 "치료 효과적"은, 장애를 예방하거나 장애의 중증도를 개선하는 약제의 능력을 나타낸다. 어구 "치료 효과적"은, 어구 "치료, 예방 또는 완화에 효과적"과 동등하게 이해되어야 하고, 이들 어구는 둘 다, 그 자체로 각각의 약제의 치료에 걸쳐 암, 심혈관계 질환 또는 통증 및 염증의 중증도 및 발생 빈도를 개선하는 목표를 달성하는 약제의 양을 한정하는 것으로 의도된다.
"약학적으로 허용가능한"은, 포유 동물, 반려 동물 또는 가축 동물에 사용하기에 적합함을 의미한다.
치환기가 어떤 기로부터 "독립적으로 선택되는"으로서 기재되는 경우, 각각의 치환기는 서로 독립적으로 선택된다. 따라서, 각각의 치환기는 다른 치환기(들)와 동일하거나 상이할 수 있다.
본 발명은, TYK2의 기능장애와 관련된 질환 및 증상의 치료에 유용한 TYK2 조절제인 신규 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 상기 JAK 효소 조절제를 포함하는 약학 조성물뿐만 아니라, 상기 질환 및 증상의 치료 및/또는 예방 방법을 제공한다. 따라서, 본 발명은, 하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 전술된 바와 같은 화학식 (I)의 화합물을 제공한다:
Figure pct00002
.
본 발명은 또한 하기 화학식 (Ia)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00003
상기 식에서,
A, A' 및 A"는 독립적으로 O, C=O, C-R' 또는 N-R"이고, 이때 R' 및 R"는 독립적으로 H, 아미노, -NR7COR6, COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-일 수 있고, R"는 존재하거나 부재할 수 있고, 원자가 법칙이 허용하는 경우에 존재하고, A, A' 및 A" 중 1개 이하는 O 또는 C=O이고;
R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고; R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고; R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고;
R4 및 R5는 독립적으로 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
본 발명은 또한, 하기 화학식 (Ib)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00004
상기 식에서,
R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고;
R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 하이드록시(C1-C6 알킬), 페닐(C1-C6 알킬), 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고;
R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
본 발명은 또한, 하기 화학식 (Ic)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00005
상기 식에서,
R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R2는 H, C1-C6 알킬-, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
R3은 H 또는 C1-C6 알킬이고;
R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬-, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬)-, 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n 1, 2 또는 3이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, R"가 C1-C6 알킬이고, R5가 H인, 상기 화합물을 제공한다.
본 발명은 또한, 하기 화학식 (Id)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00006
상기 식에서,
R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 하이드록시(C1-C6 알킬), 페닐(C1-C6 알킬), 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n은 1, 2 또는 3이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, R"가 C1-C6 알킬이고, R5가 H인, 상기 화합물을 제공한다.
본 발명은 또한, 하기 화학식 (Ie)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00007
상기 식에서,
R2는 H, C1-C6 알킬-, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R'이고, R'는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬-, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬)- 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n은 1, 2 또는 3이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, R2가 -(CH2)n-W이고, 이때 W는 시아노이고, n은 1, 2 또는 3인, 상기 화합물을 제공한다.
본 발명은 또한, 하기 화학식 (If)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 제공한다:
Figure pct00008
상기 식에서,
R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬-, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬)-, 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, R"가 C1-C6 알킬인, 상기 화합물을 제공한다. 또다른 특정 실시양태에서, 본 발명은, R"가 메틸인, 상기 화합물을 제공한다.
특정 바람직한 실시양태에서, 본 발명은, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
(1r,3r)-3-(4-(6-(3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
2,2'-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1,3-다이일)다이아세토나이트릴;
2-((1s,3r)-1-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴;
5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복스아마이드;
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)이속사졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(3-아미노-1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴;
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴; 및
2-(1-에틸-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴.
특정 실시양태에서, 본 발명은, (1r,3r)-3-(4-(6-(3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로-부탄-1-카보나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, 2,2'-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1,3-다이일)다이아세토나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, 2-((1s,3r)-1-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로-부틸)아세토나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, 5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복스아마이드인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)이속사졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은, (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
또다른 특정 실시양태에서, 본 발명은, (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
또다른 실시양태에서, 본 발명은, (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
또다른 특정 실시양태에서, 본 발명은, 2-((1r,3s)-1-(4-(6-(3-아미노-1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
또다른 특정 실시양태에서, 본 발명은, 2-(1-에틸-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴인 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
본 발명은 또한, 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물 또는 수의학 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한, Tyk2 억제제가 처방되는 질환 또는 증상의 치료가 필요한 개체에서 상기 질환 또는 증상을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은, 치료 효과량의 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 상기 개체에게 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한, 알레르기성 비염, 비충혈, 비루, 다년성 비염, 코 염증, 모든 유형의 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환, 만성 또는 급성 기관지 수축, 만성 기관지염, 작은 기도 폐색, 기종, 만성 호산구성 폐렴, 성인 호흡 장애 증후군, 다른 약물 요법에 따른 결과로서 기도 과민반응의 악화, 폐 혈관 질환, 폐 동맥 고혈압, 급성 폐 손상, 기관지 확장, 축농증, 알레르기성 결막염, 특발성 폐 섬유증 및 아토피성 피부염으로부터 선택되는 장애 또는 증상의 치료 또는 예방 방법을 제공하며, 상기 방법은, 치료 효과량의 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 개체에게 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한, 원발성 담즙 간경변증의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은, 치료 효과량의 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 개체에게 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한, 염증, 염증, 자가면역 질환, 전신 홍반성 루푸스, 홍반성 신염, 원판성 루푸스, 피부 루푸스, 중추 신경계 루푸스, 류마티스성 관절염, 건선성 관절염, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 천식, 알레르기성 천식, 제1형 당뇨병, 다발성 근염, 피부 근염; 아이카르디-고우티에레스 증후군 및 제1형 인터페론 과발현의 다른 멘델 유전질환을 비롯한 제1형 인터페론병증; 다발성 경화증, 원발성 진행성 다발성 경화증, 재발 이장성 다발성 경화증, 원발성 담즙 담관염으로도 공지된 원발성 담즙 간경변, 원발성 경화 담관염, 자가면역 간염, 비-알코올성 지방간 질환, 비-알코올성 지방간염, 건선, 피부 근염, 경피증, 아토피성 피부염, 백반증, 원형 탈모, 척추증, 강직성 척추염, 알츠하이머병, 및 신경-염증으로부터 선택되는 질환 또는 증상의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은, 치료 효과량의 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 개체에게 투여하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한, 염증성 또는 자가면역 질환 증상(예컨대, 소양증 및 피로)을 치료하는 방법을 제공한다.
특정 실시양태에서, 상기 방법에 따라 사용되는 치료 효과량은, 0.01 mg/kg 체중/일 내지 100 mg/kg 체중/일이다. 다른 특정 실시양태에서, 상기 방법에 따라 사용되는 치료 효과량은, 0.1 mg/kg 체중/일 내지 10 mg/kg 체중/일이다.
동일한 분자식을 갖지만 원자의 결합 특성 또는 순서, 또는 원자의 공간 배열이 상이한 본 발명의 화합물을 "이성질체"라 칭한다. 원자의 공간 배열이 상이한 이성질체를 "입체 이성질체"라 칭한다. 당업자는, 화학식 (I)의 화합물은 시스- 및 트랜스-아키랄 부분입체 이성질체로서 존재할 수 있을 이해할 것이다.
본원에 기술된 화합물의 모든 이성질체(예를 들면, 시스-, 트랜스- 또는 부분입체 이성질체) 단독뿐만 아니라 임의의 혼합물은, 기술된 화합물의 범주 내에 포함된다. 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, 시스, 트랜스, 신(syn), 안티(anti), 용매화물(수화물 포함), 호변 이성질체, 및 이들의 혼합물을 비롯한 이의 모든 형태는 기술된 화합물에 포함된다. 입체 이성질체 혼합물, 예를 들면 부분입체 이성질체 혼합물은, 적합한 분리 방법에 의해 공지된 방식으로 이의 상응하는 이성질체로 분리될 수 있다. 부분입체 이성질체 혼합물은, 예를 들면 분별 결정화, 크로마토그래피, 용매 증류, 및 유사한 과정에 의해 이의 개별적인 부분입체 이성질체로 분리될 수 있다. 이러한 분리는 출발 화합물 중 하나의 수준에서, 또는 화학식 (I)의 화합물 자체로 수행될 수 있다. 거울상 이성질체는 부분입체 이성질체 염의 형성을 통해, 예를 들면 거울상 이성질체-순수 키랄 산을 사용한 염 형성에 의해, 크로마토그래피 기재를 키랄 리간드와 함께 사용하는 크로마토그래피, 예를 들면 HPLC에 의해 분리될 수 있다. 본 발명은, 화학식 (I)의 모든 약학적으로 허용가능하고 동위원소-표지된 화합물을 포함하며, 이때 하나 이상의 원자는, 동일한 원자 번호를 갖지만 자연에서 지배적인 원자 질량 또는 질량수와는 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 하나 이상의 원자로 대체된다.
본 발명의 화합물에 포함되기에 적합한 동위원소의 예는, 수소 동위원소(예컨대, 2H 및 3H); 탄소 동위원소(예컨대, 11C, 13C 및 14C); 염소 동위원소(예컨대, 36Cl); 불소 동위원소(예컨대, 18F); 요오드 동위원소(예컨대, 123I 및 125I); 질소 동위원소(예컨대, 13N 및 15N); 산소 동위원소(예컨대, 15O, 17O 및 18O); 인 동위원소(예컨대, 32P); 및 황 동위원소(예컨대, 35S)를 포함한다.
화학식 (I)의 특정 동위원소-표지된 화합물(예를 들어, 방사성 동위원소를 포함하는 것)은 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에 유용하다. 방사성 동위원소인 삼중 수소(즉, 3H) 및 탄소-14(즉, 14C)는 이의 혼입 용이성 및 즉시 검출 수단의 견지에서 이러한 목적에 특히 유용하다.
더 무거운 동위원소(예컨대, 중수소, 즉, 2H)를 사용한 치환은, 더 큰 대사 안정성, 예를 들어 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건으로 인한 특정 치료 이점을 제공할 수 있으며, 따라서 일부 상황에서 바람직할 수 있다. 양전자 방출 동위원소, 예컨대 11C, 18F, 15O 및 13N으로의 치환은 기질 수용체 점유율을 검사하기 위한 양전자 방출 단층촬영(PET) 연구에 유용할 수 있다. 화학식 (I)의 동위원소-표지된 화합물은 일반적으로, 이전에 사용되던 비-표지 시약 대신 적절한 동위원소-표지 시약을 사용하여, 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상적인 기술에 의해, 또는 첨부된 실시예 및 제조예에 기재되어 있는 것과 유사한 과정에 의해 제조될 수 있다.
포유 동물의 질환을 치료하기 위한 치료 용도에서, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물은 경구로, 비경구로, 국소로, 직장으로, 경점막으로, 또는 장으로 투여될 수 있다. 비경구 투여는 전신 효과를 생성하는 간접 주사 또는 환부에 직접 주사를 포함한다. 국소 투여는 국소 적용에 의해 접근하기 용이한 피부 또는 장기, 예를 들면 눈 또는 귀의 치료를 포함한다. 또한, 전신 효과를 생성하는 경피 전달을 포함한다. 직장 투여는 좌제 형태를 포함한다. 바람직한 투여 경로는 경구 및 비경구이다.
화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 이의 산 부가 염 및 염기 부가 염을 포함한다. 적합한 산 부가 염은, 무독성 염을 형성하는 산으로부터 형성된다. 그 예는 아세테이트, 아디페이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 바이카보네이트/카보네이트, 바이설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 사이클라메이트, 에디셀레이트, 에실레이트, 포메이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 하이벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 하이드로요오다이드/요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-납실레이트, 니코티네이트, 나이트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/수소 포스페이트/이수소 포스페이트, 피로글루타메이트, 사카레이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 탄네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트라이플루오로아세테이트 및 크시노포에이트(xinofoate) 염을 포함한다.
적합한 염기 부가 염은 무독성 염을 형성하는 염기로부터 형성된다. 예는 알루미늄, 아르기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 다이에틸아민, 다이올아민, 글리신, 리신, 마그네슘, 메글루민, 올아민, 칼륨, 나트륨, 트로메타민 및 아연 염을 포함한다.
또한, 산 및 염기의 헤미염, 예를 들면 헤미설페이트 및 헤미칼슘 염이 형성될 수 있다. 적합한 염에 대한 리뷰는 문헌[Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002)]을 참조한다.
화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물의 약학적으로 허용되는 염은 각각 하기의 3가지 방법 중 하나 이상에 의해 제조될 수 있다: (i) 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물을 목적 산 또는 염기와 반응시킴으로써; (ii) 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물의 적합한 전구체로부터 산-반응성 또는 염기-반응성 보호기를 제거함으로써, 또는 목적 산 또는 염기를 사용하여 적합한 환형 전구체(예를 들면, 락톤 또는 락탐)을 개환시킴으로써; 또는 (iii) 적절한 산 또는 염기와의 반응에 의해 또는 적합한 이온 교환 칼럼에 의해 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물의 하나의 염을 또 다른 염으로 전환시킴으로써. 상기 3가지 방법은 모두 전형적으로 용액 내에서 수행된다. 생성된 염은 침전될 수 있고, 여과에 의해 수집될 수 있거나, 용매를 증발시켜 회수될 수 있다. 생성된 염의 이온화도는 완전 이온화로부터 거의 비이온화까지 달라질 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 당해 분야에 널리 공지된 방법, 예를 들면 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정-제조, 분말화, 에멀젼화, 캡슐화, 포획화, 동결건조 공정 또는 분무 건조에 의해 제조될 수 있다.
본 발명에 따라 사용하기 위한 약학 조성물은, 활성 화합물을 약학적으로 사용될 수 있는 제제로 가공하는 단계를 촉진하는 부형제 및 보조제를 포함하는 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체를 사용하여 통상적인 방식으로 제형화될 수 있다. 적절한 제형은 선택된 투여 경로에 의존적이다. 약학적으로 허용되는 부형제 및 담체는 일반적으로 당업자에게 공지되어 있고, 따라서 본 발명에 포함된다. 상기 부형제 및 담체는, 예를 들면, 문헌["Remington's Pharmaceutical Sciences" Mack Pub. Co., New Jersey (1991)]에 기재되어 있다. 본 발명의 제형은 단기-작용, 신속-방출, 장기-작용 및 지연-방출되도록 고안될 수 있다. 따라서, 약학 제형은 또한 제어 방출 또는 느린 방출을 위해 제형화될 수 있다.
본 발명에 사용하기 적합한 약학 조성물은, 활성 성분이 의도된 목적, 즉, 질환 또는 질병의 억제 또는 치료를 달성하기에 충분한 양으로 함유된 조성물을 포함한다. 더욱 구체적으로, 치료 효과량은 치료될 개체의 생존을 연장하거나 질환 증상/신호를 예방하거나 완화하거나 개선하는데 효과적인 화합물의 양을 의미한다.
약학 조성물 및 단위 투여 형태 중의 활성 성분(이는, 본 발명의 화합물임)의 양은 투여 방식, 특정 화합물의 효능 및 목적 농도에 따라 광범위하게 달라질 수 있거나 조정될 수 있다. 치료 효과량의 결정은 당업자의 능력 이내이다. 일반적으로, 활성 성분의 양은 조성물 중 0.01 중량% 내지 99 중량%이다.
일반적으로, 활성 성분의 투여량의 치료 효과량은 약 0.01 내지 약 100 mg/체중 kg/일, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 10 mg/체중 kg/일, 더욱 바람직하게는 약 0.3 내지 3 mg/체중 kg/일, 더욱더 바람직하게는 약 0.3 내지 1.5 mg/체중 kg/일의 범위 내이다. 투여량이 각각의 개체의 요건 및 치료될 장애 또는 질환의 중증도에 따라 달라질 수 있음을 이해해야 한다.
바람직한 투여량은 편리하게는 단일 투여량 또는 적절한 간격으로(예를 들면, 하루에 2, 3, 4회 이상의 하위-투여로) 투여되는 분할 투여로 제공될 수 있다. 하위-투여 그 자체는, 예를 들면 다수의 별개의 느슨하게 간격을 둔 투여로(예컨대, 취입기로부터의 다중 흡입으로 또는 다수의 방울을 눈에 적용함으로써) 추가로 나눠질 수 있다.
또한, 투여된 초기 투여량이, 목적하는 혈장 농도를 신속하게 달성하기 위해 상기 상한치를 초과하여 증가될 수도 있음을 이해해야 한다. 한편으로, 초기 투여량은 적정량보다 적을 수 있고, 일일 투여량은 특정 상황에 따라 치료 과정 동안 계속해서 증가될 수도 있다. 필요에 따라, 일일 투여량은 예를 들면 하루에 2 내지 4회 투여하기 위해 다중 투여량으로 나눠질 수도 있다.
본 발명은 또한, 상기 정의된 바와 같은 임의의 용도, 방법 또는 조성물을 제공하며, 이때 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물은, 또다른 약리학적 활성 화합물, 특히 하기 열거되는 기능적으로-정의된 부류 또는 특정 화합물 중 하나와 조합으로 사용된다. 이러한 제제는, 당업자에게 공지된 표준 제약 관행에 따라, 동일한 또는 별도의 투여 형태의 일부로서, 동일하거나 상이한 투여 경로를 통해, 및 동일하거나 상이한 투여 스케줄로 투여될 수 있다.
화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물과의 병용 요법에 사용하기에 적합한 제제는, 설파살라진, 메살라진, 프레드니손, 아자티오프린, 인플릭시맵, 아달리무맙, 벨리무맙, 베세르톨리주맙, 나탈리주맙, 베돌리주맙, 하이드로코르티손, 부데소나이드, 사이클로스포린, 타크롤리무스, 펙소페나딘, 6-머캅토푸린, 메토트렉세이트, 우르소데옥시콜산, 오베티콜산, 항히스타민, 리팜핀, 프레드니손, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 하이드로클로로퀸, 모페틸, 나트륨 마이코페놀레이트, 타크롤리무스, 레플루노마이드, 클로로퀸 및 퀸아크린, 탈리도마이드, 리툭산, NSAID, 솔루메드롤, 데포메드롤 및 덱사메타손을 포함한다.
화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물과의 병용 요법에 사용하기에 적합한 다른 제제는, 5-리폭시게나제 활성화 단백질(FLAP) 길항제; 류코트리엔 길항제(LTRA), 예컨대 LTB4, LTC4, LTD4, LTE4, CysLT1 또는 CysLT2의 길항제, 예를 들어 몬테루카스트 또는 자피르루카스트; 히스타민 수용체 길항제, 예컨대 히스타민 제1형 수용체 길항제 또는 히스타민 제2형 수용체 길항제, 예를 들어 로라티딘, 펙소페나딘, 데스로라티딘, 레보세티리진, 메타피릴렌 또는 세티리진; α1-아드레날린수용체 효능제 또는 α2-아드레날린수용체 효능제, 예를 들어 페닐에프린, 메톡사민, 옥시메타졸린 또는 메틸노르에프린; 무스카린성 M3 수용체 길항제, 예를 들어 티오트로피움 또는 이프라트로피움; 이중 무스카린성 M3 수용체 길항제/β2 효능제; PDE 억제제, 예컨대 PDE3 억제제, PDE4 억제제 또는 PDE5 억제제, 예를 들어 테오필린, 실데나필, 바르데나필, 타달라필, 이부딜라스트, 실로밀라스트 또는 로플루밀라스트; 크로모글리크산나트륨 또는 나트륨 네도크로밀; 사이클로옥시게나제(COX) 억제제, 예컨대 비-특이적 억제제(예를 들어, 아스피린 또는 이부프로펜) 또는 특이적 억제제(예를 들어, 셀레콕시브 또는 발데콕시브); 글루코코르티코스테로이드, 예를 들어 플루티카손, 모메타손, 덱사메타손, 프레드니솔론, 부데소니드, 시클레소니드 또는 베클라메타손; 항염증성 단일클론 항체, 예를 들어 인플릭시맙, 아달리무맙, 타네주맙, 라니비주맙, 베바시주맙 또는 메폴리주맙; β2 효능제, 예를 들어 살메테롤, 알부테롤, 살부타몰, 페노테롤 또는 포르모테롤, 특히 장기-작용 β2 효능제; 인티그린 길항제, 예를 들어 나탈리주맙; 부착 분자 억제제, 예컨대 VLA-4 길항제; 키닌 B1 또는 B2 수용체 길항제; 면역억제제, 예컨대 IgE 경로의 억제제(예를 들어, 오말리주맙) 또는 사이클로스포린의 억제제; 매트릭스 메탈로프로테아제(MMP) 억제제, 예컨대 MMP-9 또는 MMP-12의 억제제; 타키키닌 NK1, NK2 또는 NK3 수용체 길항제; 프로테아제 억제제, 예컨대 엘라스타제, 키마제 또는 카테옵신 G의 억제제; 아데노신 A2a 수용체 효능제; 아데노신 A2b 수용체 길항제; 우로키나아제 억제제; 도파민 수용체 효능제(예를 들어, 로피니롤), 특히 도파민 D2 수용체 효능제(예를 들어, 브로모크립틴); NFκB 경로의 조절제, 예컨대 IKK 억제제; 사이토카인 신호전달 경로의 추가의 조절제, 예컨대 JAK 키나아제, syk 키나아제, p38 키나아제, SPHK-1 키나아제, Rho 키나아제, EGF-R 또는 MK-2의 억제제; 점액용해제, 점액활성제 또는 진해제; 항생제; 항바이러스제; 백신; 케모카인; 상피 나트륨 채널(ENaC) 차단제 또는 상피 나트륨 채널(ENaC) 억제제; 뉴클레오티드 수용체 효능제, 예컨대 P2Y2 효능제; 트롬복산 억제제; 니아신; 5-리폭시게나제(5-LO) 억제제, 예를 들어 질류톤; 부착 인자, 예컨대 VLAM, ICAM 또는 ELAM; CRTH2 수용체 (DP2) 길항제; 프로스타글란딘 D2 수용체 (DP1) 길항제; 조혈 프로스타글란딘 D2 신타아제(HPGDS) 억제제; 인터페론-β; 가용성 인간 TNF 수용체, 예를 들어 에타네르셉트; HDAC 억제제; 포스포이노시타이드 3-키나아제 감마(PI3Kγ) 억제제; 포스포이노시타이드 3-키나아제 델타(PI3Kδ) 억제제; CXCR-1 또는 CXCR-2 수용체 길항제; IRAK-4 억제제; 및 TLR-4 또는 TLR-9 억제제(구체적으로 명명된 화합물의 약학적으로 허용가능한 염 및 상기 구체적으로 명명된 화합물 및 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물 포함)를 포함한다.
따라서, 본 발명은 본원에 기술된 하나 이상의 화합물의 효과량을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체(예컨대, 인간 또는 비인간 포유 동물)에서 JAK와 관련된 질환, 증상 또는 장애를 치료하거나 예방하는 방법을 제공한다. 치료될 수 있는 적합한 개체는 가축 또는 야생 동물, 반려 동물, 예컨대 개, 고양이, 말 등; 가축, 예컨대 소 및 다른 반추 동물, 돼지, 가금류, 토끼 등; 영장류, 예를 들면, 원숭이, 예컨대 붉은털 원숭이 및 시노몰구스(게잡이 원숭이 또는 긴꼬리 원숭이로도 공지됨) 원숭이, 마모셋, 타마린, 침팬치, 마카쿠 등; 및 설치류, 예컨대 래트, 마우스, 저빌, 기니 피그 등을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 상기화합물은 약학적으로 허용되는 형태로, 임의적으로 약학적으로 허용되는 담체로 투여된다
JAK 경로의 선택적인 표적화 또는 JAK 키나아제(특히, TYK2)의 조절이 치료적으로 유용한 것으로 고려되는 장애는, 특히, 관절염, 천식, 자가면역 질환, 암 또는 종양, 당뇨병, 특정 안구 질환, 장애 또는 증상, 염증, 장내 염증, 알레르기 또는 증상, 신경퇴행성 질환, 건선 및 이식 거부를 포함한다. TYK2의 선택적인 억제가 유익할 수 있는 질환은 하기에서 더욱 상세하게 논의된다.
따라서, 화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 및 이의 약학 조성물은, 예컨대 하기의 다양한 질환 또는 질병을 치료하는데 사용될 수 있다:
관절염, 예컨대 류마티스 관절염, 청소년 관절염 및 건선성 관절염;
자가면역 또는 염증성 질환 또는 장애, 예를 들어 하시모토 갑상선염, 자가면역 용혈성 빈혈, 악성 빈혈의 자가면역 위축성 위염, 자가면역 뇌척수염, 자가면역 고환염, 굿패스쳐병, 자가면역 혈소판감소증, 교감신경성 안염, 중증 근무력증, 그레이브스병, 원발성 담즙 간경변증, 자가면역 간염, 원발성 경화 담관염, 만성 공격성 간염, 비-알코올성 지방간 질환, 비-알코올성 지방간염 궤양성 대장염 및 막성 사구체병증, 전신 홍반성 루푸스, 류마티스성 관절염, 건선성 관절염, 쇠그렌병, 라이터 증후군, 다발성 근염, 피부 근염; 아이카르디-고우티에레스 증후군 및 제1형 인터페론 과발현의 다른 멘델 유전질환을 비롯한 제1형 인터페론병증; 전신 경화증, 결절성 다발성 동맥염, 다발성 경화증, 재발 이장성 다발성 경화증, 원발성 진행성 다발성 경화증, 속발성 진행성 다발성 경화증 및 물집유사천포창, 및 추가의 자가면역 질환(이는, O-세포(체액) 기반 또는 T-세포 기반일 수 있음), 예컨대 코간 증후군, 강직성 척추염, 베게너 육아종증, 자가면역 탈모, 제1형 또는 또는 소아 발병 당뇨병, 또는 갑상샘염;
암 또는 종양, 예컨대 식이성/위장간 암, 결장암, 간암, 피부암, 예컨대 비만 세포 종양 및 편평 세포 암종, 유방암 및 유선암, 난소암, 전립선암, 림프종, 백혈병, 예컨대 급성 골수성 백혈병 및 만성 골수성 백혈병, 신장암, 폐암, 근육암, 골암, 방광암, 뇌암, 흑색종, 예컨대 경구 흑색종 및 전이성 흑색종, 카포시육종, 골수종, 예컨대 다발성 골수종, 골수증식성 질환, 증식성 당뇨병성 망막증 또는 혈관형성-관련된 질환, 예컨대 고형 종양;
당뇨병, 예컨대 I형 당뇨병 및 당뇨병 합병증;
안구 질환, 장애 또는 증상, 예컨대 눈의 자가면역 질환, 각결막염, 춘계 결막염, 포도막염, 예컨대 베쳇병과 관련된 포도막염 및 렌즈-유도된 포도막염, 각막염, 헤르페스성 각막염, 원추 각막염, 각막 상피 장애, 각막혼탁, 안구 수포창, 잠식성각막 궤양, 공막염, 그레이브스 안병증, 포그트-코야나기-하라다 증후군, 건조성 각결막염(안구 건조증), 플릭테뉼, 홍채모양체염, 유육종증, 내분비 안질, 교감성 안구염, 알레르기성 결막염 또는 안구 신혈관 형성;
장 염증, 예컨대 크론병, 궤양성 대장염, 염증성 장 질환, 셀리악병, 직장염, 호산구성 위장염 또는 비만세포증;
신경퇴행성 질환, 예컨대 운동 뉴런증, 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축성 측색 경화증, 헌팅톤병, 뇌경색, 또는 외상성 손상, 뇌졸중, 글루타메이트 신경독성 또는 저산소증에 의해 야기된 신경퇴행성 질환; 뇌졸중 시 허혈성/재관류 손상, 심근 허혈증, 신장 허혈증, 심근 경색, 심장 비대증, 아테롬성경화증 및 동맥경화증, 장기 저산소증 또는 혈소판 응집;
피부 질환, 증상 또는 장애, 예컨대 아토피성 피부염, 습진, 건선, 경피증, 소양증 또는 다른 소양성 질환, 백반증, 탈모;
알레르기 반응, 예컨대 포유 동물에서의 알레르기성 피부염(예컨대 말 알레르기성 질환, 예컨대 물림 과민증), 여름 습진, 말의 피부 가려움증, 식노, 염증성 기도 질환, 순환성 기도 폐색, 기도 과민성 또는 만성 폐쇄성 폐 질환;
천식 및 다른 폐색성 기도 질환, 예컨대 만성 또는 고질적 천식, 만년 천식, 기관지염, 기관지 천식, 알레르기성 천식, 내인성 천식, 외인성 천식 또는 먼지 천식; 및
이식 거부, 예컨대 췌장 섬 이식 거부, 골수 이식 거부, 이식편대숙주병, 장기 및 세포 이식 거부, 예컨대 골수, 연골, 각막, 심장, 추간판, 섬, 신장, 팔, 간, 폐, 근육, 근아세포, 신경, 췌장, 피부, 소장 또는 기도, 또는 이종 이식.
화학적 합성
당업자는, 하기 반응식에 개시된 실험 조건이, 도시된 전환을 수행하기에 적합한 예시적인 조건이며, 화학식 (I)의 화합물의 제조에 사용되는 정확한 조건을 변경하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다. 또한, 본 발명의 목적하는 화합물을 제공하기 위해, 하기 반응식에 기술된 것과 상이한 순서로 전환을 수행하거나 하나 이상의 전환을 개질하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다.
화학식 (I)의 모든 유도체는, 하기 제시되는 일반 방법에 기술된 절차에 의해 또는 이의 관행적인 개질에 의해 제조될 수 있다. 본 발명은 또한, 본원에 사용된 임의의 신규한 중간체에 더하여, 화학식 (I)의 유도체를 제조하기 위한 이러한 절차 중 임의의 하나 이상을 포함한다. 당업자는, 하기 반응이 열적으로 또는 초음파 조사 하에 가열될 수 있음을 이해할 것이다.
또한, 본 발명의 목적하는 화합물을 제공하기 위해, 하기 반응식에 기술된 것과 상이한 순서로 전환을 수행하거나 하나 이상의 전환을 개질하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다.
하기 경로(실시예 및 제조예에서 언급된 경로 포함)는, 화학식 (I)의 화합물의 합성 방법을 예시하는 것이다. 당업자는, 본 발명의 화합물 및 이의 중간체가, 본원에 구체적으로 기술된 것 이외의 방법에 의해, 예를 들어 본원에 기술된 방법의 개조에 의해, 예컨대 당분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있음을 이해할 것이다. 합성, 작용기 상호전환, 보호기의 사용 등에 대한 적합한 안내는, 예를 들어 문헌["Comprehensive Organic Transformations" by RC Larock, VCH Publishers Inc. (1989)]; 문헌[Advanced Organic Chemistry" by J. March, Wiley Interscience (1985)]; 문헌["Designing Organic Synthesis" by S Warren, Wiley Interscience (1978)]; 문헌["Organic Synthesis - The Disconnection Approach" by S Warren, Wiley Interscience (1982)]; 문헌["Guidebook to Organic Synthesis" by RK Mackie and DM Smith, Longman (1982)]; 문헌["Protective Groups in Organic Synthesis" by TW Greene and PGM Wuts, John Wiley and Sons, Inc. (1999)]; 문헌["Protecting Groups" by PJ, Kocienski, Georg Thieme Verlag (1994)]; 및 상기 표준 작업의 임의의 엡데이트된 버전을 참조한다.
또한, 통상의 기술자는 바람직하지 않은 부반응을 방지하도록, 본 발명의 화합물의 합성의 임의의 단계에서 1개 이상의 감수성 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다. 특히, 아미노 기 또는 카르복실산 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있다. 본 발명의 화합물의 제조에서 사용된 보호기는 통상적인 방식으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 기의 제거 방법을 또한 기술하는, 문헌['Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora W Greene and Peter G M Wuts, third edition, (John Wiley and Sons, 1999)], 특히 상기 문헌의 7장("Protection for the Amino Group") 및 5장("Protection for the Carboxyl Group")에 기술된 것을 참조하며, 상기 문헌을 본원에 참고로 인용한다.
하기 일반적인 합성 방법에서, 달리 명시되지 않는 한, 치환기는, 상기 화학식 (I)의 화합물에 대해 상기 정의된 바와 같다.
용매들의 비가 제시되는 경우, 그 비는 부피에 의한 것이다.
본 발명의 화합물은, 유사한 구조의 화합물의 제조에 대해 당분야에 공지된 임의의 방법에 의해 제조할 수 있다. 특히, 본 발명의 화합물은, 하기 반응식을 참조하여 기술된 절차에 의해, 또는 하기 실시예에 기술된 특정 방법에 의해, 또는 이와 유사한 방법에 의해 제조할 수 있다.
당업자는, 하기 반응식에 개시된 실험 조건이, 도시된 전환을 수행하기에 적합한 예시적인 조건이며, 화학식 (I)의 화합물의 제조에 사용되는 정확한 조건을 변경하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다.
당업자는 또한, 바람직하지 않은 부반응을 방지하기 위해, 본 발명의 화합물의 임의의 합성 단계에서 하나 이상의 민감성 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다. 특히, 아미노기 또는 카복실산 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있다. 본 발명의 화합물의 제조에서 사용된 보호기는 통상적인 방식으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 기의 제거 방법을 또한 기술하는, 문헌['Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora W Greene and Peter G M Wuts, third edition, (John Wiley and Sons, 1999)], 특히 상기 문헌의 7장("Protection for the Amino Group") 및 5장("Protection for the Carboxyl Group")에 기술된 것을 참조하며, 상기 문헌을 본원에 참고로 인용한다.
화학식 (I)의 모든 유도체는, 하기 제시되는 일반 방법에 기술된 절차에 의해 또는 이의 관행적인 개질에 의해 제조될 수 있다. 본 발명은 또한, 본원에 사용된 임의의 신규한 중간체에 더하여, 화학식 (I)의 유도체를 제조하기 위한 이러한 절차 중 임의의 하나 이상을 포함한다. 당업자는, 하기 반응이 열적으로 또는 초음파 조사 하에 가열될 수 있음을 이해할 것이다.
또한, 본 발명의 목적하는 화합물을 제공하기 위해, 하기 반응식에 기술된 것과 상이한 순서로 전환을 수행하거나 하나 이상의 전환을 개질하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다. 하기 반응식은 본 발명의 화합물을 합성하는데 유용한 대표적인 방법이다. 이러한 반응식이 임의의 방식으로 본 발명의 범주를 구속하지는 않는다.
제 1 방법에 따라, 화학식 (I)의 화합물은, 하기 반응식 1에 예시되는 바와 같이, 화학식 (A), (B), (C) 및 (D)의 화합물로부터 제조할 수 있다.
[반응식 1]
Figure pct00009
반응식 1에서는, 화학식 (Bi)의 화합물(이때, Y=Hal)을, 적합한 염기(예컨대, K2CO3) 및 적합한 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2)의 존재 하에, 적합한 용매(예컨대, 다이옥산) 중에서, 적합한 보로네이트(예컨대, B2(Pin)2)로 처리함으로써, 화학식 (Bii)의 화합물(Y=B(OR*)2)의 화합물로 전환시킨다. 당업자는 또한, 대안적 커플링 파트너, 금속 및 용매 조합을 포함하는 대안적 유기금속 커플링 전략이 사용될 수 있음을 알 것이다. 화학식 (Bii)의 화합물은, 전술된 바와 같이 제조하고 단리하거나, 동일 반응계 내에서 단리 없이 당업자가 잘 이해하는 순차적 교차-커플링 전략으로 제조할 수 있다. 따라서, 화학식 (Bii)의 화합물을, 적합한 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2)의 존재 하에, 적합한 염기(예컨대, K2CO3)를 사용하여, 적합한 용매(예컨대, 다이옥산) 중에서, 실온 내지 환류 온도의 적합한 온도에서, 화학식 (A)의 화합물로 교차-커플링시킨다. 화학식 (C)의 생성 화합물을, 적합한 금속 촉매(예컨대, Pd(PPh3)4)를 사용하여, 적합한 용매(예컨대, MeCN) 중에서, 실온 또는 승온에서, 적합한 이탈 기를 함유하는 화학식 (D)의 화합물(예컨대, Bu3Sn 또는 (Pin)2B)로 교차-커플링시킨다.
제 2 방법에 따라, 화학식 (I)의 화합물을 또한, 화학식 (F)의 화합물을 화학식 (B)의 화합물로 유기금속성 교차-커플링 반응시켜 제조할 수 있다(하기 반응식 2).
[반응식 2]
Figure pct00010
화학식 (Bi)의 화합물(이때, Y=Hal)을, 적합한 염기(예컨대, K2CO3) 및 적합한 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2)의 존재 하에, 적합한 용매(예컨대, 다이옥산) 중에서, 적합한 보로네이트(예컨대, B(Pin)2)로 처리하여, 화학식 (Bii)의 화합물(Y=B(OR*)2)로 전환시킨다. 당업자는 또한, 대안적 커플링 파트너, 금속 및 용매 조합을 포함하는 대안적 유기금속성 커플링 전략이 사용될 수 있음을 알 것이다. 화학식 (Bii)의 화합물은, 전술된 바와 같이 제조하고 단리하거나, 동일 반응계 내에서 단리 없이 당업자가 잘 이해하는 순차적 교차-커플링 전략으로 제조할 수 있다. 따라서, 화학식 (Bii)의 화합물을, 적합한 촉매(예컨대, Pd(dppf)Cl2)의 존재 하에, 적합한 염기(예컨대, K2CO3)를 사용하여, 적합한 용매(예컨대, 다이옥산) 중에서, 실온 내지 환류 온도의 적합한 온도에서, 화학식 (F)의 화합물로 교차-커플링시킨다.
제 3 방법에 따라, 화학식 (I)의 화합물을 화학식 (G)의 화합물의 알킬화, 아실화, 설폰일화 등에 의해 제조한다(하기 반응식 3).
[반응식 3]
Figure pct00011
제 4 방법에 따라, 화학식 (I)의 화합물을, 적합한 비-친핵성 염기(예컨대, DBU)의 존재 하에, 적합한 용매(예컨대, MeCN) 중에서, 적합한 온도에서, 화학식 (H)의 화합물을 화학식 (J)의 화합물로 마이클(Michael) 부가 반응시켜 제조한다(하기 반응식 4).
[반응식 4]
Figure pct00012
하기 반응식 5는, 화학식 (F)의 화합물의 제조 방법을 예시한다. 화학식 (Ei)의 다이에스터를, 적합한 용매(예컨대, MeCN) 중에서, 화학식 (K)의 알킬화제 및 염기(예컨대, K2CO3)로 처리한다. 이어서, 화학식 (Eii)의 생성 다이에스터를 NH4OAc의 존재 하에, 적합한 용매(예컨대, EtOH) 중에서, 승온에서 고리화시켜, 화학식 (Eiii)의 이환형 헤테로사이클릭 화합물을 수득한다. 화학식 (Eiii)의 화합물을, 적합한 염기(예컨대, LiOH)를 사용하여, 적합한 용매(예컨대, MeOH) 중에서, 화학식 (Eiv)의 화합물로 가수분해시킨다. 화학식 (Eiv)의 생성 카복실산을, 적합한 용매(예컨대, 설폴란) 중에서, 승온(예컨대 280℃)에서, 열적으로 탈카복실화시킨다. 화학식 (Ev)의 생성 화합물을, 적합한 용매(예컨대, MeCN) 중에서, 적합한 온도(예컨대, 환류 온도)에서, 적합한 시약(예컨대, POCl3)으로 처리함으로써 염소화시켜, 화학식 (F)의 화합물을 수득한다.
[반응식 5]
Figure pct00013
하기 반응식 및 서술된 설명은, 본 발명의 화합물의 제조에 대한 일반적인 세부사항을 제공한다. 본 발명의 화합물을, 유사한 구조의 화합물을 제조하기 위한 당분야에 공지된 임의의 방법으로 제조할 수 있다. 특히, 본 발명의 화합물을, 하기 반응식에 대해 기술된 절차에 의해, 또는 하기 실시예에 기술된 특정 방법에 의해, 또는 이와 유사한 방법에 의해 제조할 수 있다.
당업자는, 하기 반응식에 개시된 실험 조건이, 도시된 전환을 수행하기에 적합한 예시적인 조건이며, 화학식 (I)의 화합물의 제조에 사용되는 정확한 조건을 변경하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다.
당업자는 또한, 바람직하지 않은 부반응을 방지하기 위해, 본 발명의 화합물의 임의의 합성 단계에서 하나 이상의 민감성 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있음을 이해할 것이다. 특히, 아미노기 또는 카복실산 기를 보호하는 것이 필요하거나 바람직할 수 있다. 본 발명의 화합물의 제조에서 사용된 보호기는 통상적인 방식으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 기의 제거 방법을 또한 기술하는, 문헌['Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora W Greene and Peter G M Wuts, third edition, (John Wiley and Sons, 1999)], 특히 상기 문헌의 7장("Protection for the Amino Group") 및 5장("Protection for the Carboxyl Group")에 기술된 것을 참조하며, 상기 문헌을 본원에 참고로 인용한다.
화학식 (I) 및 (Ia) 내지 (If)의 모든 유도체는, 하기 제시되는 일반 방법에 기술된 절차에 의해 또는 이의 관행적인 개질에 의해 제조될 수 있다. 본 발명은 또한, 본원에 사용된 임의의 신규한 중간체에 더하여, 화학식 (I)의 유도체를 제조하기 위한 이러한 절차 중 임의의 하나 이상을 포함한다. 당업자는, 하기 반응이 열적으로 또는 초음파 조사 하에 가열될 수 있음을 이해할 것이다.
본 발명의 화합물의 합성을 수행함에 있어서, 당업자는, 반응의 진행을 모니터링하여 반응이 계속되어야 하는지 또는 목적하는 생성물을 수득하기 위한 분리정제를 수행할 준비가 되었는지를 결정하기 위하여, 분리정제 이전에 반응 혼합물을 샘플링하고 분석할 필요가 있음을 알 것이다. 반응 혼합물을 분석하기 위한 통상의 방법은 박막 크로마토그래피(TLC), 액체 크로마토그래피/질량 분광법(LCMS), 및 핵 자기 공명(NMR)을 포함한다.
당업자는 또한, 또한 본 발명의 화합물이 부분입체 이성질체 또는 기하 이성질체(예를 들어, 사이클로알칸 고리 상의 시스 및 트랜스 치환)의 혼합물로서 제조될 수 있음을 인지할 것이다. 이들 이성질체는 표준 크로마토그래피 기술, 예컨대 실리카 겔 상의 정상 상 크로마토그래피, 역상 분취용 고압 액체 크로마토그래피 또는 초임계 유체 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다. 당업자는 또한, 본 발명의 몇몇 화합물이 키랄이고, 따라서 거울상 이성질체들의 라세미 또는 비-라세미 혼합물로서 제조될 수 있음을 인지할 것이다. 거울상 이성질체의 분리를 위한 몇몇 방법이 이용가능하고, 당업자에게 널리 공지되어 있다. 거울상 이성질체의 관행적인 분리를 위한 바람직한 방법은, 키랄 고정상을 사용하는 초임계 유체크로마토그래피이다.
실험 섹션
달리 언급되는 경우를 제외하고는, 반응을 질소 대기 하에 수행하였다. 250 내지 400 메쉬 실리카 겔을 사용하고 가압 질소(약 10 내지 15 psi)를 사용하여 실리카 겔 상의 크로마토그래피를 수행함으로써, 칼럼을 통해 용매를 유도하였다("플래시 크로마토그래피"). 제시되는 경우, 용액 및 반응 혼합물을 진공 하에 회전 증발시켜 농축하였다.
본원에서의 명명은 IUPAC(International Union of Pure and Applied Chemistry)에 기술된 바와 같이 표현되며, 명칭은 켐바이오드로우 울트라(ChemBioDraw Ultra) 13.0(퍼킨 엘머(Perkin Elmer))을 사용하여 생성되었다.
하기 비제한적인 제조예 및 실시예는 본 발명의 화합물 및 염을 예시한다. 하기 개시되는 실시예 및 제조예 및 전술된 반응식에서, 하기 약어, 정의 및 분석 절차를 참조할 수 있다. 당분야에 통상적인 다른 약어가 또한 사용될 수 있다. 표준 IUPAC 명명법이 사용되었다.
AcOH는 아세트산이고;
수성은 수성이고;
Boc는 3급-부톡시카보닐이고;
br는 넓음이고;
염수는, 물 중 염화 나트륨의 포화된 용액이고;
t-Bu는 3급-부틸이고;
n-BuLi는 n-부틸리튬이고;
℃는 섭씨이고;
Cbz는 카보벤질옥시이고;
CDCl3는 중수소치환된-클로로폼이고;
CDI는 1,1'-카보닐다이이미다졸이고;
"진한"은, (시약에 대해) 진한 것이고;
Cs2CO3는 세슘 카보네이트이고;
δ는 화학적 이동(shift)이고;
d는 이중항이고;
DBU는 1,8-다이아자바이사이클로[5.4.0]운데크-7-엔이고;
DCM은 다이클로로메탄이고;
DHP는 3,4-다이하이드로-2H-피란이고;
DIPEA는 N,N-다이이소프로필에틸아민이고;
DMAP는 4-다이메틸아미노피리딘이고;
DMF는 N,N-다이메틸폼아마이드이고;
DMSO는 다이메틸 설폭사이드이고;
Et2O는 다이에틸 에터이고;
EtOAc는 에틸 아세테이트이고;
EtOH는 에탄올이고;
(EtO)2P(O)CH2CN은 다이에틸(시아노메틸)포스포네이트이고;
g는 그램이고;
GCMS는 기체 크로마토그래피 질량 분광법이고;
HCl은 염산이고;
HCO2H는 폼산이고;
HPLC는 고성능 액체 크로마토그래피이고;
hr는 시간이고;
H2SO4는 황산이고;
K2CO3는 탄산 칼륨이고;
KH2PO4는 칼륨 이수소 포스페이트이고;
K2HPO4는 칼륨 일수소 포스페이트이고;
K3PO4는 칼륨 포스페이트(3염기성)이고;
KOAc는 칼륨 아세테이트이고;
L은 리터이고;
LCMS는 액체 크로마토그래피 질량 분광법이고;
LiBr은 리튬 브로마이드이고;
LiOH는 리튬 하이드록사이드이고;
m은 다중항이고;
M은 몰농도이고;
MeCN은 아세토나이트릴이고;
MeOH는 메탄올이고;
mg는 밀리그램이고;
MgSO4는 마그네슘 설페이트이고;
MHz는 메가헤르츠이고;
min은 분이고;
mL은 밀리리터이고;
mmol은 밀리몰이고;
mol은 몰이고;
MS m/z는 질량 스펙트럼 이온 피크이고;
MTBE는 메틸 t-부틸 에터이고;
NaBH(OAc)3는 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드이고;
Na2CO3는 탄산 나트륨이고;
NaHCO3는 중탄산 나트륨이고;
NaH2PO4는 나트륨 이수소 포스페이트이고;
Na2HPO4는 나트륨 일수소 포스페이트이고;
NaI는 나트륨 요오다이드이고;
NaIO4는 나트륨 페리오데이트이고;
NaOAc는 나트륨 아세테이트이고;
NaOCl은 나트륨 하이포클로라이트이고;
NaOH는 수산화 나트륨이고;
NH3는 암모니아이고;
NH4Cl은 암모늄 클로라이드이고;
NH4OH는 암모늄 하이드록사이드이고;
NH4OAc는 암모늄 아세테이트이고;
NMR은 핵 자기 공명이고;
OsO4는 오스뮴 테트록사이드이고;
Pd/C는 탄소 상 팔라듐이고;
Pd(dppf)Cl2는 1,1-비스(다이페닐포스피노)페로센 팔라듐(II) 다이클로라이드(CAS: 72287-26-4)이고;
Pd(dppf)Cl2·DCM은 1,1-비스(다이페닐포스피노)페로센 팔라듐(II) 다이클로라이드; 다이클로로메탄과의 착체(CAS: 95464-05-4)이고;
Pd(OAc)2는 팔라듐 아세테이트이고;
Pd(PPh3)4는 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐이고;
PMB-Cl은 (4-메톡시)벤질 클로라이드이고;
POCl3는 인(V) 옥시클로라이드이고;
ppm은 백만분의 1부이고;
psi는 제곱 인치 당 파운드이고;
PTSA는 파라-톨루엔설폰산이고;
PyHBr3는 피리딘 하이드로브로마이드 퍼브로마이드이고;
PyHCl은 피리딘 하이드로클로라이드이고;
q는 사중항이고;
Rt는 체류 시간이고;
Rh2(OAc)4는 로듐(II) 아세테이트 이량체이고;
RuCl3 수화물은 루테늄(II) 클로라이드 수화물이고;
s는 단일항이고;
SOCl2는 티오닐 클로라이드이고;
t는 삼중항이고;
TBAB는 테트라부틸암모늄 브로마이드이고;
TEA는 트라이에틸아민이고;
TFA는 트라이플루오로아세트산이고;
THF는 테트라하이드로퓨란이고;
TMSCl은 클로로트라이메틸실란이고;
μL은 마이크로리터이고;
μmol은 마이크로몰이고;
XPhos Pd G2는 클로로(2-다이사이클로헥실포스피노-2',4",6"-트라이이소프로필-1,1"-바이페닐)[2-(2"-아미노-1,1"-바이페닐)]팔라듐(II); CAS 1310584-14-5이다.
1H 핵 자기 공명(NMR) 스펙트럼은, 모든 경우, 제시된 구조와 일치하였다. 특징적인 화학적 이동(δ)은, 주요 피크의 지정에 대한 통상적인 약어를 사용하여, 테트라메틸실란으로부터의 다운필드 ppm으로 제시된다: 예컨대, s, 단일항; d, 이중항; t, 삼중항; q, 사중항; m, 다중항; br, 넓음. 하기 약어가 통상적인 NMR 용매에 대해 사용되었다: CD3CN, 중수소치환된-아세토나이트릴; CDCl3, 중수소치환된-클로로폼; DMSO-d6, 중수소치환된-다이메틸설폭사이드; 및 CD3OD, 중수소치환된-메탄올. 적절한 경우, 호변 이성질체가 NMR 데이터 내에서 기록될 수 있으며; 몇몇 교환가능한 양성자는 가시적이지 않을 수 있다.
질량 스펙트럼은, 전자 충격 이온화(EI), 전기분무 이온화(ESI) 또는 대기압 화학적 이온화(APCI)를 이용하여 기록되었다. 관찰된 이온은 MS m/z로서 보고되었고, 화합물의 양이온 [M]+, 화합물과 양성자 [MH]+, 또는 화합물과 나트륨 이온 [MNa]+일 수 있다. 몇몇 경우, 관찰된 이온만, [MH-(소실된 토막)]+로서 보고되는 토막 이온일 수 있다. 관련되는 경우, 보고된 이온은 염소 동위원소(35Cl 및/또는 37Cl), 브롬 동위원소(79Br 및/또는 81Br) 및 주석 동위원소(120Sn)로 지정된다.
화합물을 정제하기 위해 TLC, 크로마토그래피, 또는 HPLC가 사용되는 경우, 당업자는, 목적하는 화합물을 정제하기 위한 임의의 적절한 용매 또는 용매들의 조합을 선택할 수 있다. 크로마토그래피 분리(HPLC 제외)는, 달리 언급되지 않는 한, 실리카 겔 흡착제를 사용하여 수행하였다.
모든 반응은, 달리 언급되지 않는 한, 질소 대기 하에, 연속 교반을 사용하여 수행하였다. 몇몇 경우, 반응의 개시 이전에 반응물을 질소 또는 아르곤 기체로 퍼지하였다. 이 경우, 질소 또는 아르곤 기체를 혼합물의 액상을 통해 대략적인 규정된 시간 동안 버블링하였다. 사용되는 용매는 상업적 무수 등급이었다. 모든 출발 물질은 시판되는 제품이었다. 몇몇 경우, 명료함을 돕기 위해, 화학적 초록 서비스(Chemical Abstracts Service, CAS) 식별 번호가 제공된다. 몇몇 경우, 별표(*)로 표시된 바와 같이, 보고된 문헌 절차에 따라 출발 물질을 제조하였다. 본원에서 용어 "농축된"이 일반적으로, 전형적으로 회전 증발기의 사용에 의해 달성되는, 감압 하의 용매의 증발 실시를 지칭함이 당업자에게 자명할 것이다.
GCMS 조건
칼럼: 12m x 0.2mm, HP-1 메틸 실록산, 0.33 μm 필름, 1.0 ml/min 칼럼 유동.
방법: 7.6 min: 초기 오븐 온도 105℃; 0.1 min 유지; 7.6 min에 300℃ 종료점으로 30℃/min 램프; 또는 7.6 min: 초기 오븐 온도 60℃; 0.1 min 유지; 7.6 min에 320℃ 종료점으로 40℃/min 램프; 또는 5.1 min: 초기 오븐 온도 40℃; 0.1min 유지; 5.1min에 150℃ 종료점으로 30℃/min 램프.
GC 주입구 파라미터: 전면 주입구, 분할 30:1, He, 8 psi 압력, 250℃ 주입기, 33.9 ml/min 총 유동.
MSD 조정: 230℃ 소스 온도, 150℃ 쿼드(Quad) 온도, 280℃ 옥스2(Aux2) 온도.
주입 부피: 1.0 μL.
시스템 구성요소: 애질런트(Agilent) 5973 질량 선택적 검출기를 갖는 애질런트 5890 GC 오븐.
LCMS 조건
산: 워터스 액큐어티(Waters Acquity) HSS T3, 2.1 mm x 50 mm, C18, 1.7 ㎛; 칼럼 온도 60℃.
염기: 워터스 액큐어티 UPLC BEH, 2.1 mm x 50 mm, C18, 1.8 ㎛; 칼럼 온도 60℃.
이동상 A: 물 중 0.1% 폼산(v/v); 이동상 B: 아세토나이트릴 중 0.1% 폼산(v/v).
이동상 A: 물 중 0.1% 암모니아(v/v); 이동상 B: 아세토나이트릴 중 0.1% 암모니아(v/v).
구배 프로파일: 1.5 min 작업: 초기 조건: 초기로부터 0.0 내지 0.1min에 A-95%:B-5%; 유지; 0.1-1.0min에 걸쳐 A-5%:B-95%로 선형 램프; 1.0-1.1min로부터 A-5%:B-95%에서 유지; 1.1-1.5min에 초기 조건으로 복귀.
정제 방법(PM)
실시예의 화합물을, 달리 기술되지 않는 한, 하기 참조되는 정제 방법(PM) 중 하나에 따라 정제하였다:
정제 방법 A: [아젤라 베누실(Agella venusil) ASB C18 150x21.2mmx5μm, 물(0.225% 폼산) 중 16% MeCN으로부터 물(0.225% 폼산) 중 36% MeCN으로]를 사용하는 분취용 HPLC.
정제 방법 B: [페노메넥스 게미니(Phenomenex Gemini) C18 250x21.2mmx8um 또는 150mmx25mmx5μm; 물(0.1% 암모니아) 중 16-55% MeCN으로부터 물(0.1% 암모니아) 중 36-60% MeCN으로]를 사용하는 분취용 HPLC.
정제 방법 C: [YMC-액투스 트라이아트(Actus Triart) C18 150x30μm, 물(0.1 % 암모니아) 중 24% MeCN으로부터 물(0.1 % 암모니아) 중 44% MeCN으로]를 사용하는 키랄 크로마토그래피.
정제 방법 D: [페노메넥스 게미니 C18 250x21.2mmx8μm, 물(암모니아 pH=10) 중 25% MeCN으로부터 물(암모니아 pH=10) 중 45% MeCN으로]를 사용하는 분취용 HPLC, 및 이어서, [AS 250x25mm I.D. 20 μM 칼럼, 50-80 mL/min으로 초임계 CO2: EtOH 또는 IPA(0.05% 수성 암모니아)(70:30)]를 사용하는 키랄 크로마토그래피.
정제 방법 E: [페노메넥스 게미니 C18 250x21.2mmx8μm, 물(0.225% 암모니아) 중 25% MeCN으로부터 물(0.225% 암모니아) 중 45% MeCN]을 사용하는 분취용 HPLC, 및 이어서, [AD 250mmx30mmx20μm 칼럼 및 180 mL/min으로 이동상 A: 초임계 CO2 및 이동상 B: MeOH(0.1% 암모니아)(A:B 50:50)]를 사용하는 키랄 크로마토그래피.
정제 방법 F: 100% DCM으로부터 12% MeOH(1% NH4OH)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피.
정제 방법 G: DCM:MeOH:NH3(97:2:1)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 및 이어서 분취용 HPLC.
정제 방법 H: [칼럼: 워터스 엑스브릿지(Waters XBridge) C18 19mmx100mm, 5μ; 이동상 A: 물 중 0.03% 암모늄 하이드록사이드(v/v); 이동상 B: 아세토나이트릴 중 0.03% 암모늄 하이드록사이드(v/v); 25 mL/min의 유속으로 5-20% B로부터 40-100% B로]를 사용하는 분취용 HPLC.
정제 방법 I: [칼럼: 워터스 선파이어(Waters Sunfire) C18 19mmx100mm, 5μ; 이동상 A: 물 중 0.05% TFA(v/v); 이동상 B: 아세토나이트릴 중 0.05% TFA(v/v); 6.75 min에서 20% B로부터 40% B로, 이어서 7 min에 30 mL/min의 유속으로 100% B로]를 사용하는 분취용 HPLC.
특정 회전
하기 수학식 1에 기초한 특정 회전을 무단위 수치로서 보고한다:
[수학식 1]
[α] = (100·α)/(l·c)
상기 식에서, 농도(c)는 g/l00 mL 단위이고, 경로 길이(l)는 데시미터 단위이다. 특정 회전((deg·mL)/(g·dm))의 단위는 내포되며(implicit), 상기 보고된 값에 포함되지 않는다.
제조예 1
에틸 1-(시아노메틸)-1H-피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00014
; 및
에틸 1-(시아노메틸)-1H-피라졸-5-카복실레이트
Figure pct00015
DMF(12 L) 중의 Cs2CO3(2100 g, 6.44 mol)의 현탁액에, 에틸 1H-피라졸-3-카복실레이트(750 g, 5.36 mol), 및 이어서 2-클로로아세토나이트릴(450 g, 5.96 mol)를 가하고, 이 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 이 반응물을 물(12 L)에 붓고, EtOAc(5 x 5 L)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 염수(2 x 5 L)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하여 잔사를 수득하고, 이를 크로마토그래피로 정제하여, 황색 오일로서의 에틸 1-(시아노메틸)-1H-피라졸-3-카복실레이트(398 g, 39%) 및 에틸 1-(시아노메틸)-1H-피라졸-5-카복실레이트(680 g)를 수득하였다. 상기 에틸 1-(시아노메틸)-1H-피라졸-5-카복실레이트를 MTBE(15 L)에 용해시키고, 염수로 세척하고(3 x 5 L), 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 상기 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(489 g, 51%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.49 (s, 1 H), 6.82 (s, 1 H), 5.45 (s, 2 H), 4.29 (q, 2 H), 1.29 (t, 3 H).
LCMS m/z = 180.1 [MH]+
제조예 2
에틸 1-(2-아미노-2-옥소에틸)-1H-피라졸-5-카복실레이트
Figure pct00016
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
TFA(1.2 L) 중의 에틸 1-(시아노메틸)-1H-피라졸-5-카복실레이트(제조예 1, 235.5 g, 1.32 mol)의 용액에, 진한 H2SO4(377 mL, 7.04 mol)를 약 25℃에서 가했다. 이 반응 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반한 후, 병행 반응물과 합치고, 농축하여, 대부분의 상기 TFA를 제거하였다. 잔사를 빙수(5 L)에 붓고, EtOAc(5 L)로 추출하였다. 수성 상을 추가로 EtOAc(10 x 5 L)로 추출하고, 합친 EtOAc 추출물을 포화된 수성 NaHCO3(2 x 10 L)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(477 g, 92%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.60 (s, 1 H), 6.93 (s, 1 H), 5.90 (br. s, 1 H), 5.71 (br. s, 1 H), 5.27 (s, 2 H), 4.35 (q, 2 H), 1.37 (t, 3 H).
LCMS m/z = 198.2 [MH]+
제조예 3
피라졸로[1,5-a]피라진-4,6(5H,7H)-다이온
Figure pct00017
EtOH(56 L) 중의 에틸 1-(2-아미노-2-옥소에틸)-1H-피라졸-5-카복실레이트(제조예 2, 466 g, 2.17 mol)의 용액에, THF(4 L) 중의 NaOtBu(498 g, 5.20 mol)를 약 25℃에서 가했다. 첨가 동안 백색 현탁액이 발생하였으며, 이어서 이 혼합물을 약 70℃로 약 16시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 약 25℃로 냉각하고, 12 M 수성 HCl(500 mL)을 사용하여 약 pH 6로 산성화시켜, 백색 현탁액을 형성시켰다. 이 혼합물을 농축하여, (염화 나트륨과 혼합된) 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(783 g). 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.82 (s, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 6.97 (s, 1 H), 5.19 (s, 2 H).
LCMS m/z = 152.1 [MH]+
제조예 4
4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진
Figure pct00018
3개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
피라졸로[1,5-a]피라진-4,6(5H,7H)-다이온(제조예 3, 278 g, 1.14 mol)을 약 25℃에서 POCl3(1.84 kg, 12 mol)에 가하고, 이어서 PyHCl(131 g, 1.14 mol)을 가했다. 이 반응 혼합물을 약 120℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 약 25℃로 냉각하고, 농축하여, 대부분의 POCl3를 제거하였다. 각각의 잔사를 EtOAc(2 L)로 희석하고, 3개의 EtOAc 추출물을 합치고, 약 25℃에서 1 M 수성 NaH2PO4(7.5 L)에 붓고, 셀라이트(Celite)(등록상표)의 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 EtOAc(3 x 2 L)로 세척하고, 모든 여액을 합치고, 수성 상으로부터 분리하였다. 수성 상을 MTBE(10 L)로 추출하였다. 합친 EtOAc 및 MTBE 추출물을 염수(2 x 5 L)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하고, 생성물을 석유 에터(300 mL)로 마쇄하고, 여과하였다. 필터 케이크를 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(110 g, 22%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.42 (s, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 6.93 (s, 1 H).
LCMS m/z = 189.8 [MH]+ (37Cl 동위원소)
제조예 5
1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온
Figure pct00019
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
1-메틸피라졸(750 g, 9.16 mol) 및 아세트산 무수물(1.7 kg, 16.67 mol)의 혼합물에, 진한 H2SO4(75 g, 0.75 mol)를 약 20℃에서 가했다. 이 반응 혼합물을 약 150℃에서 약 3시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 이 두개의 혼합물을 합치고, 빙수(15 L)에 붓고, 20% 수성 NaOH를 사용하여 약 pH 10으로 조절하고, DCM(4 x 10 L)으로 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 갈색 오일로서 수득하였다(1240 g, 72%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.86 (s, 1 H), 7.84 (s, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 2.40 (s, 3 H).
GCMS m/z = 109.0 [M-CH3]+
제조예 6
2-브로모-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온
Figure pct00020
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
DCM(12 L) 및 에탄올(3 L) 중의 1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(제조예 5, 620 g, 5 mol)의 용액에, PyHBr3(1.6 kg, 5 mol)를 약 15℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 15℃에서 약 18시간 동안 교반하였다. 이 2개의 반응 혼합물을 합치고, 물(10 L)로 켄칭하고, 분리하고, 수성 상을 DCM(4 x 10 L)으로 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 약 69 L의 용매를 제거하였다. 잔사를 석유 에터로 희석하고(5 L), 약 15℃에서 약 30분 동안 교반하고, 이 혼합물을 여과하였다. 침전물을 건조하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(1.73 kg, 85%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (s, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 4.17 (s, 2 H), 3.93 (s, 3 H).
LCMS m/z = 203.1 [MH]+ (79Br 동위원소)
제조예 7
다이에틸 1-(2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트
Figure pct00021
2개의 반응을 병행으로 수행하였다.
DMF(8 L) 중의 2-브로모-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(제조예 6; 500 g, 2.46 mol) 및 다이에틸-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트(580 g, 2.73 mol)의 혼합물에, Cs2CO3(1050 g, 3.23 mol)를 약 20℃에서 가했다. 약 18시간 후, 이 2개의 반응 혼합물을 합치고, 물(10 L)로 희석하고, DCM(3 x 10 L)으로 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(1.53 kg, 93%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.96 (s, 2 H), 7.46 (s, 1 H), 5.86 (s, 2 H), 4.45 (q, 2 H), 4.32 (q, 2 H), 3.99 (s, 3 H), 1.44 (t, 3 H), 1.36 (t, 3 H).
LCMS m/z = 335.0 [MH]+
제조예 8
에틸 4-하이드록시-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트
Figure pct00022
3개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
에탄올(6 L) 중의 다이에틸 1-(2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트(제조예 7; 510 g, 1.52 mol)의 용액에, NH4OAc(352 g, 4.57 mol)를 약 20℃에서 가했다. 이 혼합물을 오토클레이브 내에서 약 130℃에서 약 24시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 약 50℃로 냉각하고, 합치고, 여과하였다. 침전물을 건조하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(1090 g, 83%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.35 (br. s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 4.34 (q, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 1.33 (t, 3 H).
LCMS m/z = 288.0 [MH]+
제조예 9
4-하이드록시-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실산
Figure pct00023
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
MeOH(10 L) 중의 에틸 4-하이드록시-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(제조예 8, 545 g, 1.9 mol)의 현탁액에, 1 M 수성 NaOH(5.75 L)를 약 20℃에서 가했다. 약 30분 후, 이 현탁액은 투명한 용액이 되었으며, 이를 약 20℃에서 약 18시간 동안 계속 교반하였다. 이 반응 혼합물을 12 M 수성 HCl(650 mL)을 사용하여 약 pH 2로 조절하고, 합치고, 농축하여, 대부분의 MeOH를 제거하였다. 잔사를 여과하고, 침전물을 건조하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(1040 g, 100%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 13.25 (br. s, 1 H), 11.67 (s, 1 H), 8.34 (s, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 3.88 (s, 3 H).
LCMS m/z = 260.0 [MH]+
제조예 10
6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-올
Figure pct00024
5개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
4-하이드록시-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실산(제조예 9, 85 g, 0.328 mol)을 분획들로 나누어, 예열된 설폴란(800 mL)에 약 280℃에서 가했다. 이 5개의 반응 혼합물을 약 280℃에서 약 2시간 동안 교반하고, 약 25℃로 냉각하고, 약 18시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 합치고, 이 혼합물을, 석유 에터-EtOAc(10:1 내지 0:1), 및 이어서 DCM-MeOH(10:1)로 용리하는 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(490 g, 75%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.45 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 6.99 (s, 1 H), 3.88 (s, 3 H).
LCMS m/z = 216.0 [MH]+
제조예 11
4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진
Figure pct00025
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
MeCN(7.5 L) 중의 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-올(제조예 10, 307 g, 1.43 mol)의 현탁액에, POCl3(2006 g, 13 mol)를 약 25℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 85℃에서 약 48시간 동안 가열하였다. 이 반응 혼합물을 합치고, 여과하였다. 침전물을 EtOAc로 세척하고, 진공 하에 건조하였다. 건조된 침전물을 크로마토그래피로 정제하여, 황색 고체를 수득하고, 이를 DCM에 용해시키고(15 L), 1 M 수성 NaHCO3(5 L)로 세척하였다. 상기 DCM을 농축하여, 약 13 L의 용매를 제거하고, 잔사를 MTBE(2 L) 및 석유 에터(2 L)로 희석하였다. 이 혼합물을 여과하고, 침전물을 건조하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(385 g, 58%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.22 (s, 1 H), 8.27 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.02 (s, 1 H), 3.88 (s, 3 H).
LCMS m/z = 233.8 [MH]+ (35Cl 동위원소)
제조예 12
1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-카복실산
Figure pct00026
파트 1: 3개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
MeCN(160 mL) 중의 에틸 1H-피라졸-4-카복실레이트(16 g, 110 mmol)의 교반된 용액에, PMB-Cl(85.8 g, 548 mmol) 및 K2CO3(23.7 g, 171 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 환류 하에 약 18시간 동안 가열하였다. 이 3개의 배취를 냉각하고, 합치고, 여과하였다. 여액을 농축하여, 에틸 1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-카복실레이트를 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
파트 2: 3개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
THF(150 mL) 및 MeOH(150 mL) 중의 조질 에틸 1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-카복실레이트(파트 1, 50.0 g, 96 mmol)의 교반된 용액에, 물(75 mL) 중의 LiOH(10 g, 238 mmol)의 용액을 가했다. 이 혼합물을 약 60℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 이 3개의 배취를 합치고, 증발 건조하였다. 잔사를 물(800 mL) 및 MeOH(150 mL)로 희석하고, EtOAc(2 x 500 mL)로 세척하였다. EtOAc 추출물을 버리고, 이 수용액을 6 M 수성 HCl로 약 pH 2로 산성화시키고, EtOAc(2 x 800 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 염수(500 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(33.0 g, 2단계에 대해 83%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.34 (br. s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 7.23 (m, 2 H), 6.89 (m, 2 H), 5.26 (s, 2 H), 3.72 (s, 3 H).
제조예 13
1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-카보닐 클로라이드
Figure pct00027
SOCl2(40 mL) 중의 1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-카복실산(제조예 12, 25.0 g, 110 mmol)의 용액을 약 60℃에서 약 5시간 동안 교반하였다. 이 용액을 농축하여, 표제 화합물을 갈색 오일로서 수득하고(27.0 g, 100%), 이를 추가의 정제 또는 특성분석 없이 사용하였다.
제조예 14
N-메톡시-1-(4-메톡시벤질)-N-메틸-1H-피라졸-4-카복스아마이드
Figure pct00028
DCM(200 mL) 중의 N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(26.3 g, 269 mmol) 및 TEA(131.0 g, 1.29 mol)의 용액에, DCM(50 mL) 중의 1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-카보닐 클로라이드(제조예 13, 27.0 g, 108 mmol)의 용액을 천천히 가했다. 첨가가 완료된 후, 이 반응 혼합물을 약 20℃에서 약 5시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 DCM(150 mL) 및 물(300 mL)로 희석하였다. 합친 DCM 추출물을 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 갈색 오일로서 수득하고(20.0 g, 67%), 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.99 (s, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.22 (d, 2 H), 6.89 (d, 2 H), 5.25 (s, 2 H), 3.81 (s, 3 H), 3.69 (s, 3 H), 3.31 (s, 3 H).
LCMS m/z = 275.0 [MH]+
제조예 15
1-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온
Figure pct00029
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
THF(120 mL) 중의 N-메톡시-1-(4-메톡시벤질)-N-메틸-1H-피라졸-4-카복스아마이드(제조예 14, 10.0 g, 36.3 mmol)의 용액에, 에터 중 3 M 메틸마그네슘 브로마이드(24.2 mL)를 약 0℃에서 적가하였다. 이 반응 혼합물을 약 25℃로 가온하고, 약 5시간 동안 교반하였다. 이 반응물을, 포화된 수성 NH4Cl(100 mL)을 가하여 켄칭하고, EtOAc(2 x 200 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 이 2개의 실험으로부터의 농축된 잔사를 합치고, 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(10.0 g, 60%)을 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.47 (s, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.25 (m, 2 H), 6.90 (m, 2 H), 5.27 (s, 2 H), 3.72 (s, 3 H), 2.34 (s, 3 H).
LCMS m/z = 231.7 [MH]+
제조예 16
2-브로모-1-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온
Figure pct00030
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
DCM(96 mL) 및 EtOH(24 mL) 중의 1-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(제조예 15, 8.0 g, 34.7 mmol)의 용액에, PyHBr3(13.3 g, 41.7 mmol)를 약 20℃에서 가했다. 이 반응 혼합물을 약 25℃에서 약 18시간 동안 유지하고, 물(100 mL)로 켄칭한 후 합치고, EtOAc(2 x 300 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 황색 고체를 수득하였다. 이를 MTBE(100 mL)로 마쇄하여, 표제 화합물(15.0 g, 70%)을 황색 고체로서 수득하였다. 마쇄액을 농축하여, 약간 불순한 추가적인 샘플(5.0 g, 23%)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.99 (s, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 7.23 (m, 2 H), 6.92 (m, 2 H), 6.92 (m, 2 H), 5.25 (s, 2 H), 4.15 (s, 2 H), 3.81 (s, 3 H).
LCMS m/z = 333.0 [MNa]+ (81Br 동위원소)
제조예 17
다이메틸 1-(2-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트
Figure pct00031
DMF(20 mL) 중의 다이메틸 1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트(1 g, 5 mmol) 및 2-브로모-1-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(제조예 16, 2.18 g, 7.06 mmol)의 혼합물에, Cs2CO3(2.3 g, 7.06 mmol)를 약 20℃에서 가했다. 약 2일 후, 이 혼합물을 농축 건조하였다. 잔사를 DCM에 용해시키고, 포화된 수성 NH4Cl로 1회 세척하였다. 상기 DCM을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 EtOAc(20 mL) 중에서 약 20℃에서 약 18시간 동안 교반하였다. 형성된 고체를 여과하고, 건조하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.38 g, 60%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.96 (s, 1 H), 7.82 (s, 1 H), 7.42 (s, 1 H), 7.24 (d, 2 H), 6.93 (d, 2 H), 5.80 (s, 2 H), 5.27 (s, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 3.84 (s, 3 H), 3.83 (s, 3 H).
LCMS m/z = 413.1 [MH]+
제조예 18
메틸 4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트
Figure pct00032
; 및
에틸 4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트
Figure pct00033
6개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
6개의 바이알 각각에, 다이메틸 1-(2-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트(제조예 17, 300 mg, 0.73 mmol), NH4OAc(336 mg, 4.37 mmol) 및 EtOH(6 mL)를 가했다. 이 혼합물을 마이크로파 조사 하에 약 150℃에서 약 2시간 동안 가열하고, 이어서 약 20℃로 냉각하고, 약 1시간 동안 교반하고, 여과하였다. 합친 고체를 건조하여, 상기 두 표제 화합물들의 혼합물을 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(1.61 g).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 　11.65 (br. s., 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.07 (s, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 7.26 (d, 2 H), 6.93 (d, 2 H), 5.75 (s, 1 H), 5.28 (s, 2 H), 3.86 (s, 3 H), 3.74 (s, 3 H). 　이는, 주요 성분인 메틸 에스터이다.
LCMS m/z = 380.1 [MH]+, 394.1 [MH]+
제조예 19
4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실산
Figure pct00034
MeOH(10 mL) 중의 메틸 4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트 및 에틸 4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트(제조예 18, 524 mg, 약 1.38 mmol)의 혼합물의 용액에, 1 M 수성 NaOH(4.83 mL)를 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 18시간 동안 유지한 후, 추가로 1 M 수성 NaOH(1.38 mL)를 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 추가로 약 24시간 동안 유지하였다. 상기 MeOH를 증발시키고, 잔사를 물(2 mL)로 희석하고, 모든 고체가 용해될 때까지 약 40℃에서 교반하였다. 이 용액을 12 M 수성 HCl로 산성화시키고, 약 0℃에서 약 10분 동안 교반하였다. 생성된 침전물을 여과하고, 침전물을 물로 세척하였다. 고체를 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 수득하였다(487 mg, 96%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.65 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.18 (m, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 7.25 - 7.32 (m, 4 H), 6.95 (m, 2 H), 5.28 (s, 2 H), 3.78 (s, 3 H).
LCMS m/z = 366.0 [MH]+
제조예 20
6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸[1,5-a]피라졸-4-올
Figure pct00035
3개의 반응을 병행으로 수행하였다.
샘플 1:
4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸[1,5-a]피라진-2-카복실산(제조예 19, 40 mg, 0.11 mmol)을, 황백색 고체가 용융되어 진한 갈색 액체로 변할 때까지, 약 350℃에서 약 10초 동안 가열하였다.
샘플 2:
4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸[1,5-a]피라진-2-카복실산(제조예 19, 120 mg, 0.33 mmol)을, 황백색 고체가 용융되어 진한 갈색 액체로 변할 때까지, 약 350℃에서 약 15초 동안 가열하였다.
샘플 3:
4-하이드록시-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸[1,5-a]피라진-2-카복실산(제조예 19, 310 mg, 0.85 mmol)을, 황백색 고체가 용융되어 진한 갈색 액체로 변할 때까지, 약 350℃에서 약 15초 동안 가열하였다.
3개의 배취를 모두 냉각하고, 합치고, 톨루엔으로 2회 농축하여, 표제 화합물을 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.43 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.88 (d, 1 H), 7.28 (d, 2 H), 6.99 (d, 1 H), 6.94 (d, 2 H), 5.28 (s, 2 H), 3.76 (s, 3 H).
LCMS m/z = 322.1 [MH]+
제조예 21
4-클로로-6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진
Figure pct00036
6-(1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-올(제조예 20, 390 mg, 1.21 mmol), PyHCl(143 mg, 1.21 mmol) 및 POCl3(10 mL)를 약 120℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 수성 NaH2PO4 용액으로 처리하여, 약 pH 4를 유지하였다. 생성 용액을 약 20℃에서 약 10분 동안 교반하고, DCM으로 3회 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고, 농축하여, 표제 화합물을 갈색 고체로서 수득하였다(300 mg, 72%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.74 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.22 (m, 2 H), 7.45 (m, 2 H), 6.92 - 7.02 (m, 3 H), 3.88 (s, 2 H), 2.15 (s, 3 H).
LCMS m/z = 340.0 [MH]+
제조예 22
3급-부틸 4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트
Figure pct00037
1,4-다이옥산(10.0 mL) 중의 4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 4, 700 mg, 3.72 mmol), 3급-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트(1100 mg, 3.72 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(3 mL, 6 mmol)의 용액을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하였다. 여기에, 비스(트라이-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(96.1 mg, 0.19 mmol)을 가하고, 이 반응물을 약 20℃에서 약 18시간 동안 유지하였다. 용매를 농축하여, 호박색 잔사를 수득하고, 이를 DCM 중에 취하고, 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(710 mg, 60%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.82 (m, 1 H), 8.44 (m, 3 H), 8.14 (s, 1 H), 1.60 (s, 9 H).
LCMS m/z = 220.1 [MH-BOC]+
제조예 23
3급-부틸 4-(6-비닐피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트
Figure pct00038
1,4-다이옥산(30 mL) 중의 3급-부틸 4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트(제조예 22, 700 mg, 2.19 mmol) 및 트라이부틸(비닐)스탄난(694 mg, 2.19 mmol)의 용액을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 XPhos Pd G2(344 mg, 0.44 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 55℃로 약 18시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(449 mg, 66%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.79 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 8.07 (d, 1 H), 6.95 (dd, 1 H), 6.77 (dd, 1 H), 6.43 (dd, 1 H), 5.52 (dd, 1 H), 1.74 (s, 9 H).
LCMS m/z = 312.3 [MH]+
제조예 24
3급-부틸 4-(6-폼일피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트
Figure pct00039
1,4-다이옥산(9 mL) 및 물(3 mL) 중의 3급-부틸 4-(6-비닐피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트(제조예 23; 446 mg, 1.43 mmol) 및 2,6-루티딘(767 mg, 7.16 mmol)의 용액을 약 0℃로 냉각하고, NaIO4(1530 mg, 7.16 mmol) 및 4% 수성 OsO4 용액(0.54 mL)을 가했다. 이 혼합물을 약 20℃로 약 3시간 동안 가온하였다. 고체를 여과 제거하고, 에터로 세척하였다. 합친 1,4-다이옥산 및 에터를 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(289 mg, 65%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 10.20 (s, 1 H), 9.01 (s, 1 H), 8.85 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.30 (d, 1 H), 7.08 - 7.12 (m, 1 H), 1.73 (s, 9 H).
LCMS m/z = 314.2 [MH]+
제조예 25
3급-부틸 €-4-(6-((하이드록시이미노)메틸)피라진[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트
Figure pct00040
하이드록실아민 HCl(112 mg, 1.58 mmol)을 MeOH(20 mL) 중의 3급-부틸 4-(6-폼일피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트(제조예 24, 450 mg, 1.44 mmol), 및 Na2CO3(196 mg, 1.58 mmol)의 혼합물에 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 1.5시간 동안 유지하였다. 이 혼합물을 농축하고, 물(30 mL)을 가하고, 이 혼합물을 약 5분 동안 교반한 후, 고체를 여과하고, 건조하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(325 mg, 69%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 10.46 (br. s., 1 H), 9.53 (s, 1 H), 8.81 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.41 (s, 1 H), 8.19 (d, 1 H), 7.03 (d, 1 H), 1.73 (s, 9 H).
LCMS m/z = 329.2 [MH]+
제조예 26
(3-(4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)이속사졸-5-일)메탄올
Figure pct00041
나트륨 하이포클로라이트 용액(약 12% 내지 15%, 0.19 mL 약 3.0 mmol)를 DCM(5 mL) 중의 3급-부틸 (E)-4-(6-((하이드록시이미노)메틸)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트(제조예 25, 200 mg, 0.61 mmol) 및 프로파길 알코올(171 mg, 3.05 mmol)의 용액에 약 0℃에서 적가하였다. 이 혼합물을 약 20℃로 약 18시간 동안 가온하였다. 생성 고체를 여과하여, 표제 화합물을 수득하였다(115 mg, 67%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.14 (s, 1 H), 8.56 (s, 2 H), 8.31 (d, 1 H), 7.50 (d, 1 H), 7.09 (s, 1 H), 4.57 - 4.75 (m, 2 H).
LCMS m/z = 283.1 [MH]+
제조예 27
3-(시아노메틸렌)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00042
THF(250 mL) 중의 3-옥소사이클로부탄-1-카보나이트릴*(CAS: 20249-16-5, 14.5 g, 152 mmol)의 용액을 THF(300 mL) 중의 (EtO)2P(O)CH2CN(31.1 g, 175 mmol), LiBr(19.9 g, 229 mmol) 및 TEA(30.9 g, 305 mmol)의 혼합물에 약 25℃에서 가했다. 약 16시간 후, 이 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 오일로서 수득하였다(16.01 g, 89%).
* 문헌[Synthetic Communications 2005, 35, 657 - 662]을 참조한다.
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 5.38 (s, 1 H), 3.30 - 3.43 (m, 2 H), 3.16 - 3.30 (m, 3 H).
LCMS m/z = 119.1 [MH]+
실시예 1
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)이속사졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00043
DBU(89.0 mg, 0.58 mmol)를 MeCN(4 mL) 중의 (3-(4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)이속사졸-5-일)메탄올(제조예 26; 55.0 mg, 0.19 mmol) 및 3-(시아노메틸렌)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 27; 23.0 mg, 0.19 mmol)의 용액에 가했다. 이 반응물을 질소로 퍼지하고, 약 20℃에서 약 20시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 EtOAc(5 mL)와 1 M 수성 NaH2PO4(5 mL) 사이에 분배하였다. 상기 EtOAc를 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(5 mg, 6%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.26 (m, 1 H), 8.92 (m, 1 H), 8.54 (m, 1 H), 8.40 (m, 1 H), 7.52 (m, 1 H), 7.14 (m, 1 H), 5.55 (br s, 1 H), 4.70 (s, 2 H), 3.60 (m, 3 H), 3.42 - 3.45 (m, 2 H), 2.78 - 2.83 (m, 2 H).
LCMS m/z = 401.4 [MH]+
제조예 28
3급-부틸 3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트
Figure pct00044
MeCN(100 mL) 중의 3급-부틸 3-(시아노메틸렌)아제티딘-1-카복실레이트(CAS 1153949-11-1, 7.00 g, 36.1 mmol)의 용액에, 4-피라졸보론산 피나콜 에스터(7.71 g, 39.7 mmol) 및 DBU(2.75 g, 18.0 mmol)를 약 25℃에서 가했다. 약 18시간 후, 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(11 g, 78%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.92 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 4.40 (m, 2 H), 4.21 (m, 2 H), 3.52 (s, 2 H), 1.44 (s, 9 H), 1.32 (s, 12 H).
LC-MS m/z = 333.0 [MH-C4H8] +
제조예 29
3급-부틸 3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)아제티딘-1-카복실레이트
Figure pct00045
1,4-다이옥산(5 mL) 중의 3급-부틸 3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트(제조예 28, 362 mg, 0.93 mmol) 및 4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 4; 167 mg, 0.89 mmol)의 용액에, 2 M 수성 K3PO4(1.40 mL)를 약 25℃에서 가했다. 이 혼합물을 아르곤으로 약 2분 동안 퍼지하고, 비스(트라이-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(94.3 mg, 0.184 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 DCM으로 희석하고, 분리하고, 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(295 mg, 75%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.42 (s, 1 H), 8.41 (s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 8.10 (d, 1 H), 7.02 (d, 1 H), 4.54 (d, 2 H), 4.31 (d, 3 H), 3.33 (s, 2 H), 1.49 (s, 9 H).
LCMS m/z = 358.1 [MH-C4H8]+
제조예 30
2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-(사이클로프로필메틸)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00046
파트 1
DCM(13.5 mL) 중의 3급-부틸 3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)아제티딘-1-카복실레이트(제조예 29, 0.56 g, 1.35 mmol)의 용액에, TFA(7 mL)를 약 25℃에서 가했다. 약 4시간 후, 이 혼합물을 농축 건조하여, 2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(578 mg, 약 100%)을 황색 고체로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
파트 2
DMF(13.5 mL) 중의 2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(파트 1, 1.35 mmol) 및 브로모메틸사이클로프로판(365 mg, 2.71 mmol)의 용액에, TEA(548 mg, 5.41 mmol)를 약 25℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 50℃에서 약 14시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 용액을 물로 희석하고(20 mL), EtOAc로 추출하였다(3 x 20 mL). 합친 EtOAc 추출물을 염수로 세척하고(30 mL), 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(314 mg, 63%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.39 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.27 (s, 1 H), 8.08 (d, 1 H), 7.02 (d, 1 H), 3.78 - 3.84 (m, 2 H), 3.59 (d, 2 H), 3.42 (s, 2 H), 2.45 (d, 2 H), 0.77 - 0.87 (m, 1 H), 0.48 - 0.55 (m, 2 H), 0.14 (q, 2 H).
LCMS m/z = 367.9 [MH]+ (35Cl 동위원소)
제조예 31
에틸 3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-카복실레이트
Figure pct00047
에틴일트라이부틸스탄난(50 g, 158 mmol)을 톨루엔(500 mL) 중의 에틸다이아조아세테이트(19.9 g, 175 mmol)의 용액에 약 25℃에서 가했다. 이 용액을 약 100℃에서 약 16시간 동안 가열하고, 이어서 농축하여, 조 생성물(110 g)을 황색 오일로서 수득하였다. 이를, 에틴일트라이부틸스탄난(22 g, 70 mmol) 및 에틸다이아조아세테이트(8.76 g, 77 mmol)을 사용하여 수행된 등가 반응으로부터의 조 생성무로가 합치고, 합친 잔사를 알루미나 상의 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(42 g, 61%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 10.28 (br. s., 1 H), 6.84 - 6.99 (m, 1 H), 4.41 (q, 2 H), 1.47 - 1.67 (m, 6 H), 1.41 (t, 3 H), 1.28 - 1.39 (m, 6 H), 1.04 - 1.24 (m, 6 H), 0.90 (t, 9 H).
LCMS m/z 431.2 [MH]+ (120Sn 동위원소).
제조예 32
(3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-일)메탄올
Figure pct00048
THF(200 mL) 중의 에틸 3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-카복실레이트(제조예 31, 6000 mg, 13.98 mmol)를 THF(200 mL) 중의 리튬 알루미늄 하이드라이드(3108 mg, 83.9 mmol)의 교반된 현탁액에 약 -10℃에서 가했다. 약 4시간 후, 비등이 멈출 때까지, 이 혼합물을 Na2SO4 십수화물로 약 -10℃에서 켄칭하였다. 이 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 THF(500 mL) 및 DCM(5 x 500 mL)으로 세척하였다. 합친 여액을 농축하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(4460 mg, 82%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 10.35 (br. s., 1 H), 6.28 - 6.43 (m, 1 H), 4.75 (s, 2 H), 1.49 - 1.60 (m, 6 H), 1.29 - 1.39 (m, 6 H), 1.08 - 1.15 (m, 6 H), 0.87 - 0.93 (m, 9 H).
LCMS m/z = 388.9 [MH]+ (120Sn 동위원소)
실시예 2
2-(1-(사이클로프로필메틸)-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00049
2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-(사이클로프로필메틸)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 30, 204 mg, 0.55 mmol) 및 3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-일)메탄올(제조예 32, 215 mg, 0.55 mmol)의 용액에, 1,4-다이옥산(5.5 mL) 중의 XPhos Pd G2(43.6 mg, 0.055 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 110℃에서 약 4시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 증발 건조시키고, 잔사를, 2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-(사이클로프로필메틸)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 30, 110 mg, 0.27 mmol) 및 3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-일)메탄올(제조예 32, 105 mg, 0.27 mmol)을 사용하는 등가 반응으로부터의 잔사와 합쳤다. 합친 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(112 mg, 31%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.66 (s, 1 H), 8.64 - 8.69 (m, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H), 8.06 (d, 1 H), 6.94 (d, 1 H), 6.67 (s, 1 H), 4.80 (s, 2 H), 3.80 (d, 2 H), 3.62 (d, 2 H), 3.41 (s, 2 H), 2.44 (d, 2 H), 0.76 - 0.86 (m, 1 H), 0.46 - 0.53 (m, 2 H), 0.10 - 0.16 (m, 2 H).
LCMS m/z 430.1 [MH]+
제조예 33
2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00050
DCM(20 mL) 중의 3급-부틸 3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)아제티딘-1-카복실레이트(제조예 29, 485 mg, 1.17 mmol)의 용액에, TFA(6 mL)를 약 0℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 4시간 동안 교반하였다. 이 용액을 농축하였다. 잔사를, 진한 NH4OH(약 0.5 mL)를 사용하여 약 pH 9로 조절하고, 물(10 mL)과 DCM(30 mL) 사이에 분배하였다. 이 수용액을 DCM(3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(300 mg, 81%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.91 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.20 (d, 1 H), 7.40 (d, 1 H), 4.90 (d, 2 H), 4.66 (d, 2 H), 3.72 (s, 2 H).
LCMS m/z 313.9 [MH]+ (35Cl 동위원소)
제조예 34
2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-에틸아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00051
나트륨 아세테이트(314 mg, 3.82 mmol) 및 아세트알데하이드(842 mg, 19.1 mmol)를 MeOH(6 mL) 중의 2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 33, 120 mg, 0.38 mmol)의 용액에 가하고, 이 혼합물을 약 4시간 동안 교반하였다. 이어서, NaBH(OAc)3(243 mg, 1.15 mmol)를 가하고, 이 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 이상 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(115 mg, 88%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.41 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.29 (s, 1 H), 8.10 (d, 1 H), 7.04 (d, 1 H), 3.79 (d, 2 H), 3.59 (d, 2 H), 3.43 (s, 2 H), 2.65 (q, 2 H), 1.06 (t, 3 H).
LCMS m/z = 342.1 [MH]+ (35Cl 동위원소)
실시예 3
2-(1-에틸-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00052
1,4-다이옥산(5 mL) 중의 2-(3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-에틸아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 34, 100 mg, 0.29 mmol)의 용액에, 3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-일)메탄올(제조예 32, 136 mg, 0.35 mmol) 및 XPhos Pd G2(23.0 mg, 0.029 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 110℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 HPLC로 추가로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(59 mg, 46%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 13.21 (s, 0.5 H), 12.93 (s, 0.5 H), 9.23 (s, 0.5 H), 9.07 (s, 1 H), 8.6 - 8.89 (m, 1 H), 8.69 (s, 0.5 H), 8.47 (s, 0.5 H), 8.26 (s, 1 H), 7.47 - 7.53 (m, 1 H), 6. - 9-6.94 (m, 1 H), 5.35 (s, 0.5 H), 5.35 (s, 0.5 H), 4.50 - 4.57 (m, 2 H), 3.68 - 3.71 (m, 2 H), 3.57 - 3.54 (m, 4 H), 3.17 - 3.16 (m, 0.5 H), 2.57 - 2.54 (m, 2 H), 0.96 - 0.93 (m, 3 H). 이 스펙트럼은 구별가능한 호변 이성질체들의 존재와 일치하였다.
LCMS m/z = 404.3 [MH]+
제조예 35
2-사이클로부틸리덴아세토나이트릴
Figure pct00053
건조 THF(40 mL) 중의 (EtO)2P(O)CH2CN(4.48 g, 25.2 mmol), LiBr(1.96 g, 22.6 mmol) 및 TEA(2.28 g, 22.6 mmol)의 혼합물을 약 25℃에서 약 2시간 동안 교반하였다. 여기에, THF(5 mL) 중의 사이클로부탄온(1.58 g, 22.6 mmol)의 용액을 약 25℃에서 가했다. 약 16시간 후, 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(1.2 g, 57%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.11 (사중항), 2.93 - 3.05 (m), 2.82 - 2.92 (m), 2.04 - 2.17 (m).
제조예 36
2-(1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00054
MeCN(15 mL) 중의 2-사이클로부틸리덴아세토나이트릴(제조예 35, 200 mg, 2.15 mmol) 및 4-피라졸보론산 피나콜 에스터(458 mg, 2.36 mmol)의 혼합물에, DBU(981 mg, 6.44 mmol)를 가했다. 이 반응물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하고, 이어서 약 50℃로 약 24시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(150 mg, 24%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: m 7.89 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 3.09 (s, 2 H), 2.68 - 2.80 (m, 2 H), 2.45 - 2.55 (m, 2 H), 2.01 - 2.10 (m, 2 H), 1.33 (s, 12 H).
LCMS m/z = 287.9 [MH]+
실시예 4
2-(1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00055
1,4-다이옥산(4.3 mL) 중의 2-(1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 36, 129 mg, 0.45 mmol) 및 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 100 mg, 0.43 mmol)의 혼합물에, 2 M 수성 K3PO4(0.85 mL) 및 PdCl2(dppf)(15.7 mg, 0.021 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 1분 동안 퍼지하고, 이 반응 혼합물을, 1,4-다이옥산(2 mL) 중의 2-(1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 36, 20 mg, 0.07 mmol) 및 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 19. mg, 0.083 mmol), 2 M 수성 K3PO4(0.14 mL) 및 PdCl2(dppf)(2.5 mg, 0.0035 mmol)를 사용하여 수행된 등가 반응 생성물 합쳤다. 합친 반응 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하였다. 이 화합물을 HPLC로 추가로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(22 mg, 12%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.68 (s, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 8.07 (d, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.21 (d, 1 H), 3.97 (s, 3 H), 3.94 - 3.99 (m, 1 H), 3.37 (s, 2 H), 3.35 - 3.39 (m, 1 H), 2.84 - 2.95 (m, 2 H), 2.54 (ddd, 2 H), 2.05 - 2.21 (m, 2 H).
LCMS m/z = 358.9 [MH]+
제조예 37
2-((1r,3s)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00056
; 및
2-((1s,3r)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00057
DBU(4.25 mL, 28.4 mmol)를 MeCN(80 mL) 중의 2-(3-메톡시사이클로부틸리덴)아세토나이트릴(제조예 90, 3.50 g, 28.4 mmol) 및 4-브로모피라졸(4.18 g, 28.4 mmol)의 용액에 약 25℃에서 가했다. 약 18시간 후, 이 혼합물을 NaH2PO4(17.04 g, 142 mmol)에 붓고, 상들을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc로 2회 추출하고, 합친 EtOAc 추출물을 농축하였다. 과잉의 4-브로모피라졸을, DCM:THF(100:0 내지 95:5)로 용리하는 크로마토그래피로 정제하였다. 이 물질을 추가로, 에터:헵탄으로 용리하는 크로마토그래피로 정제하여, 하기를 수득하였다:
백색 고체로서의 2-((1r,3s)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(트랜스 이성질체, 2.19 g, 28%):
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.62 (s, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 3.99 (tt, 1 H), 3.30 (s, 3 H), 3.12 (s, 2 H), 2.96 - 3.04 (m, 2 H), 2.44 - 2.51 (m, 2 H);
LCMS m/z = 270.0 [MH]+ (79Br 동위원소); 및
무색 오일로서의 2-((1s,3r)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(시스 이성질체, 5.00 g, 65%):
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.60 (s, 1 H), 7.53 (s, 1 H), 4.00 (사중항, 1 H), 3.29 (s, 3 H), 2.99 (s, 2 H), 2.85 - 2.96 (m, 2 H), 2.56 - 2.67 (m, 2 H);
LCMS m/z = 270.0 [MH]+ (79Br 동위원소).
제조예 38
2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴.
Figure pct00058
1,4-다이옥산(33 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 37, 트랜스 이성질체, 3399 mg, 12.58 mmol), 비스(피나콜레이토)이붕소(3510 mg, 13.8 mmol) 및 칼륨 아세테이트(3700 mg, 37.7 mmol)의 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 XPhos Pd G2(1980 mg, 2.52 mmol)를 약 25℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 65℃에서 약 4시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 고체를 수득하였다. 이 고체에, EtOAc(10 mL) 및 헵탄(40 mL)을 가하고, 이 혼합물을 약 25℃에서 약 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(1.95 g, 49%).
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 7.91 (s, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 3.98 (tt, 1 H), 3.28 (s, 3 H), 3.17 (s, 2 H), 2.98 - 3.07 (m, 2 H), 2.45 - 2.53 (m, 2 H), 1.31 (s, 12 H).
LCMS m/z = 318.0 [MH]+
제조예 39
2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00059
1,4-다이옥산(25 mL) 중의 2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 38, 1950 mg, 6.15 mmol), 4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 4, 1160 mg, 6.15 mmol) 및 2 M 수성 K3PO4(9.22 mL)의 용액을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 비스(트라이-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(157 mg, 0.31 mmol)를 약 25℃에서 가했다. 약 2시간 후, 이 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 상들을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 EtOAc 및 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 고체를 수득하고, 이를 DCM 및 헵탄의 따듯한(약 40℃) 혼합물로부터 재결정화하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(1.12 g, 53%). 여액을 농축하고, 크로마토그래피로 정제하여, 추가의 표제 화합물(1.01 g, 47%)을 수득하였다.
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: m 8.39 (d, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.09 (d, 1 H), 7.03 (dd, 1 H), 4.04 - 4.10 (m, 1 H), 3.33 (s, 3 H), 3.25 (s, 2 H), 3.09 - 3.17 (m, 2 H), 2.53 - 2.61 (m, 2 H).
LCMS m/z = 343.1 [MH]+ (35Cl 동위원소)
제조예 40
3,5-다이브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00060
3,5-다이브로모피라졸*(CAS: 67460-86-0, 18.0 g, 79.7 mmol) 및 DHP(30 mL)의 용액에 CF3COOH(73 mg, 0.64 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 95℃에서 약 12시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 NaOH(96 mg, 2.4 mmol)로 켄칭하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(11.5 g, 46%)을 수득하였다.
* 문헌[Justus Liebigs Annalen der Chemie 1959, 625, 55 - 65]을 참조한다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.35 (s, 1 H), 5.42 (d, 1 H), 4.05 (m, 1 H), 3.65 (m, 1 H), 2.38 - 2.48 (m, 1 H), 2.11 (m, 1 H), 1.90 (m, 1 H), 1.62 - 1.77 (m, 3 H).
LCMS m/z = 226.7 [MH-THP] + (79Br, 81Br 동위원소)
제조예 41
3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-카복실산
Figure pct00061
n-BuLi(2.5 M, 15.8 mL, 39.5 mmol)를 THF(87 mL) 중의 3,5-다이브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(제조예 40, 9.4 g, 30.0 mmol)의 용액에 약 -78℃에서 적가하였다. 이 혼합물을 약 -78℃에서 약 2시간 동안 유지하였다. 내부 반응 온도를 약 -65℃ 미만으로 유지하면서, CO2 용액(CO2를 약 -70℃에서 무수 THF(100 mL) 내로 20분 동안 버블링하고, 이 온도에서 약 1.5시간 동안 교반함으로써 제조됨)을 적가하였다. 이어서, 이 혼합물을 약 -70℃에서 약 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을, 1 M 수성 HCl을 사용하여 약 0℃에서 약 pH 4로 조절하고, EtOAc로 추출하였다(3 x 100 mL). 합친 EtOAc 추출물을 염수로 세척하고(2 x 50 mL), 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(5.0 g, 60%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 6.99 (s, 1 H), 6.17 (dd, 1 H), 3.90 (d, 1 H), 3.49 - 3.66 (m, 2 H), 2.12 - 2.28 (m, 1 H), 1.91 - 2.04 (m, 1 H), 1.83 - 1.92 (m, 1 H), 1.58 - 1.70 (m, 1 H), 1.45 - 1.57 (m, 2 H).
제조예 42
3급-부틸 (3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-일)카바메이트
Figure pct00062
다이페닐포스포릴 아자이드(10 g, 36.4 mmol)를 t-부탄올(60.6 mL) 중의 3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-카복실산(제조예 41, 5 g, 18.17 mmol) 및 DIPEA(6.4 mL, 37.0 mmol)의 용액에 가했다. 이 혼합물을 약 45℃에서 약 30분 동안 가열하고, 이어서 약 5시간 동안 가열 환류시켰다. 이 혼합물을 EtOAc(300 mL)로 희석하고, 포화된 수성 NaHCO3(3 x 100 mL) 및 염수(2 x 100 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 오일로서 수득하였다(3.36 g, 53%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.64 (br. s., 1 H), 6.26 (s, 1 H), 5.44 (dd, 1 H), 3.84 (d, 1 H), 3.55 - 3.70 (m, 1 H), 2.08 - 2.20 (m, 1 H), 1.91 - 2.00 (m, 1 H), 1.75 (dd, 1 H), 1.54 - 1.64 (m, 1 H), 1.48 - 1.53 (m, 2 H), 1.46 (s, 9 H).
LCMS m/z = 367.9 [MNa]+ (79Br 동위원소)
제조예 43
3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-5-(다이Boc)-아미노-1H-피라졸
Figure pct00063
DMAP(27 mg, 0.22 mmol)를 DCM(4 mL) 중의 3급-부틸 (3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-5-일)카바메이트(제조예 42, 390 mg, 1.13 mmol), 다이-3급-부틸 다이카보네이트(492 mg, 2.25 mmol) 및 TEA(0.47 mL, 3.38 mmol)의 용액에 약 20℃에서 가했다. 약 18시간 후, 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(450 mg, 89%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.42 (s, 1 H), 5.15 (m, 1 H), 4.02 (m, 1 H), 3.60 (m, 1 H), 2.40 (m, 1 H), 2.15 (m, 1 H), 1.88 (m, 1 H), 1.58 - 1.76 (m, 3 H), 1.48 (s, 18 H).
LCMS m/z = 467.9 [MNa]+ (79Br 동위원소)
제조예 44
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-(다이Boc)-아미노-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00064
1,4-다이옥산(3.5 mL) 중의 KOAc(110 mg, 1.06 mmol), 비스(피나콜레이토)이붕소(164 mg, 0.64 mmol), 3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-5-(다이Boc)-아미노-1H-피라졸(제조예 43, 191 mg, 0.43 mmol) 및 XPhos Pd G2(55 mg, 0.07 mmol)의 혼합물을 약 65℃로 약 3.5시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 약 25℃로 냉각하고, 2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시-사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 39, 68 mg, 0.20 mmol)을 가하고, 이 혼합물을 질소로 퍼지한 후, 2 M 수성 K3PO4(0.53 mL, 1.06 mmol) 및 XPhos Pd G2(55 mg, 0.07 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 80℃에서 약 3시간 동안 가열하였다. 이 반응물을 염수로 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 이 EtOAc 추출물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(91 mg, 32%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.08 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.09 (d, 1 H), 6.97 (d, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 5.26 (dd, 1 H), 4.02 - 4.11 (m, 2 H), 3.64 (t, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 3.25 (s, 2 H), 3.12 - 3.20 (m, 2 H), 2.55 - 2.62 (m, 2 H), 2.17 - 2.25 (m, 1 H), 1.93 (dd, 1 H), 1.58 - 1.82 (m, 4 H), 1.45 (s, 18 H).
LCMS m/z = 674.5 [MH]+
제조예 45
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-아미노-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00065
TFA(2 mL)를 무수 DCM(1 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-(다이Boc)-아미노-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)-아세토나이트릴(제조예 44, 91 mg, 0.13 mmol)에 약 20℃에서 가했다. 약 1시간 후, 이 혼합물을 농축하였다. 여기에 DCM을 가하고, 이어서, 이 용액의 pH가 염기성이 될 때까지, 포화된 수성 NaHCO3를 가했다. 상들을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(50 mg, 95%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.53 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 6.96 (br. s., 1 H), 6.01 (br. s., 1 H), 4.33 (br. s., 1 H), 4.05 (m, 1 H), 3.31 (s, 3 H), 3.25 (s, 2 H), 3.11 (dd, 2 H), 2.55 (dd, 2 H).
LCMS m/z = 390.3 [MH]+
실시예 5
N-(3-(4-(1-((1r,3s)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-5-일)아세트아마이드
Figure pct00066
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-아미노-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시-사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 45, 39 mg, 0.1 mmol)를 반응 튜브 내에 두고, 이어서 이를 배기하고, 질소로 3회 재충전하였다. 여기에 무수 DCM(1 mL)을 가했다. 상기 튜브를 약 0℃로 냉각한 후, N-메틸모폴린(11 mg, 0.11 mmol) 및 아세틸 클로라이드(8.6 mg, 0.11 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 18시간에 걸쳐 약 25℃로 가온하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 MeOH(2 mL)에 용해시켰다. 여기에 K2CO3(30 mg, 0.22 mmol)를 약 0℃에서 가했다. 약 3시간 후, 이 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(30 mg, 63%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.80 (s, 1 H), 8.75 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.09 (d, 1 H), 7.23 (d, 1 H), 6.88 (s, 1 H), 4.02 - 4.12 (m, 1 H), 3.81 (s, 3 H), 3.34 (s, 2 H), 3.15 - 3.24 (m, 2 H), 2.48 - 2.59 (m, 2 H), 2.21 (s, 3 H).
LCMS m/z = 432.2 [MH]+
제조예 46
에틸 5-(4-(1-((1r,3s)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00067
1,4-다이옥산(5.8 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 39, 200 mg, 0.58 mmol) 및 에틸 3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-카복실레이트(제조예 31, 300 mg, 0.70 mmol)의 용액을 질소로 퍼지하고, XPhos Pd G2(45.9 mg, 0.058 mmol)를 약 25℃에서 가했다. 이 반응물을 약 80℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 혼합물을 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(220 mg, 84%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 14.09 (s, 1 H), 9.39 (s, 1 H), 9.10 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.30 (d, 1 H), 7.59 (d, 1 H), 7.53 (d, 1 H), 4.33 (q, 2 H), 4.01 (dd, 1 H), 3.44 (s, 3 H), 3.22 (s, 2 H), 3.14 - 3.20 (m, 2 H), 2.43 - 2.48 (m, 2 H), 1.34 (t, 3 H).
LCMS m/z = 447.2 [MH]+
실시예 6
5-(4-(1-((1r,3s)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-N-메틸-1H-피라졸-3-카복스아마이드
Figure pct00068
EtOH 용액 중 30% MeNH2(35 mL) 중의 에틸 5-(4-(1-((1r,3s)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복실레이트(제조예 46, 100 mg, 0.22 mmol)의 용액을 약 20℃에서 마이크로파 튜브 내에 밀봉하였다. 약 16시간 후, 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(62 mg, 58%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 9.00 (s, 1 H), 8.91 (s, 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.37 (br. s., 1 H), 7.26 (s, 1 H), 4.61 (s, 1 H), 4.04 - 4.15 (m, 1 H), 3.37 (s, 3 H), 3.33 (s, 2 H), 3.18 - 3.26 (m, 2 H), 2.95 (s, 3 H), 2.56 (dd, 2 H).
LCMS m/z = 432.1 [M+H]+
제조예 47
3급-부틸 3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트
Figure pct00069
바이알에, 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 150 mg), 3급-부틸 3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트(제조예 28, 374 mg, 0.96 mmol), 2 M 수성 Na2CO3(0.96 mL) 및 1,4-다이옥산(4 mL)을 넣었다. 이 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 PdCl2(dppf)(93.7 mg, 0.13 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 마이크로파 조사 하에 약 120℃에서 약 1시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(233 mg, 79%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.03 (s, 1 H), 8.95 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.20 (d, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.46 (s, 1 H), 4.54 (d, 2 H), 4.25 (d, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 3.67 (s, 2 H), 1.42 (s, 9 H).
LCMS m/z = 460.2 [MH]+
제조예 48
2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00070
TFA(1 mL)를 DCM(5 mL) 중의 3급-부틸 3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트(제조예 47, 233 mg, 0.51 mmol)에 약 25℃에서 가했다. 약 90분 후, 이 혼합물을 농축하였다. 잔사를 톨루엔으로 2회 농축하고, 이어서 진공 하에 건조하였다. 잔사를 MeOH에 용해시키고, 중합체 지지된 카보네이트 수지 층에 통과시켰다. 용리된 용액을 농축하여, 표제 화합물(200 mg, 약 100%)을 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.12 (s, 1 H), 9.06 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.22 (d, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 7.50 (d, 1 H), 4.68 - 4.77 (m, 2 H), 4.35 - 4.40 (m, 2 H), 3.93 (s, 2 H), 3.91 (s, 3 H).
LCMS m/z = 360.5 [MH]+
실시예 7
2,2'-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1,3-다이일)다이아세토나이트릴
Figure pct00071
DIPEA(132 μL, 0.76 mmol)를 DMF(2 mL) 중의 2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 48, 91 mg, 0.25 mmol)의 용액에 가했다. 여기에 브로모아세토나이트릴(36 mg, 0.30 mmol)을 약 25℃에서 가했다. 약 18시간 후, 이 반응물을 진한 NH4OH로 켄칭하고, 약 25℃에서 약 10분 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 DCM으로 희석하였다. 상기 DCM을 포화된 수성 NH4Cl로 2회 세척하고, 이어서 포화된 수성 Na2CO3로 2회 세척하였다. 상기 DCM을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(68 mg, 68%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.77 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.45 (s, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 8.08 - 8.10 (m, 2 H), 7.25 (d, 1 H), 4.01 (d, 2 H), 3.98 (s, 3 H), 3.86 (d, 2 H), 3.78 (s, 2 H), 3.54 (s, 2 H).
LCMS m/z = 399.3 [MH]+
실시예 8
2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-(메틸설폰일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00072
DCM(20 mL) 중의 2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 48, 120 mg, 0.27 mmol) 및 TEA(331 mg, 3.27 mmol)의 용액에, 메탄설폰일 클로라이드(313 mg, 2.73 mmol)를 약 0℃에서 가했다. 이어서, 이 혼합물을 약 10℃에서 약 1시간 동안 교반한 후, 농축하였다. 잔사를 HPLC를 사용하여 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(39 mg, 33%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.05 (s, 1 H), 8.99 (s, 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.21 (d, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 7.47 (d, 1 H), 4.65 (d, 2 H), 4.30 (d, 2 H), 3.91 (s, 3 H), 3.70 (s, 2 H), 3.14 (s, 3 H).
LCMS m/z = 437.9 [MH]+
실시예 9
2-(1-(사이클로프로필설폰일)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00073
DCM(10 mL) 중의 2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 48, 100 mg, 0.25 mmol)의 혼합물에, TEA(153 mg, 1.52 mmol) 및 사이클로프로판설폰일 클로라이드(107 mg, 0.76 mmol)를 약 0℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 16시간 동안 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(60 mg, 46%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.05 (s, 1 H), 9.00 (s, 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.21 (d, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.46 (d, 1 H), 4.69 (d, 2 H), 4.32 (d, 2 H), 3.91 (s, 3 H), 3.70 (s, 2 H), 2.85 (m, 1 H), 0.96 - 1.09 (m, 4 H).
LCMS m/z = 464.0 [MH]+
실시예 10
2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-프로피오닐아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00074
DCM(5 mL) 중의 2-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 48, 90 mg, 0.23 mmol)의 용액에, TEA(69 mg, 0.68 mmol) 및 프로피온산 무수물(59 mg, 0.45 mmol)을 가했다. 이 반응물을 약 20℃에서 약 30분 동안 교반하고, 이어서 농축하고, 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(28 mg, 30%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.05 (s, 1 H), 8.97 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.37 (s, 1 H), 8.21 (d, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.46 (d, 1 H), 4.80 (d, 1 H), 4.52 (dd, 2 H), 4.23 (d, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 3.70 (s, 2 H), 2.16 (q, 2 H), 0.99 (t, 3 H).
LCMS m/z 416.0 [MH]+
제조예 49
2-(3-(벤질옥시)사이클로부틸리덴)아세토나이트릴
Figure pct00075
LiBr(0.270 g, 3.12 mmol) 진공 하에 두고, 이어서 질소로 재충전하고, THF(28 mL), 및 이어서 (EtO)2POCH2CN(0.53 mL, 3.12 mmol) 및 TEA(0.79 mL, 5.67 mmol)를 가했다. 생성 용액을 약 20℃에서 약 45분 동안 교반하고, 이어서 건조 THF(3 mL) 중의 3-(벤질옥시)사이클로부탄온(500 mg, 2.84 mmol)의 용액을 가했다. 약 5시간 후, 이 혼합물을 EtOAc(100 mL)에 붓고, 상기 EtOAc를 포화된 수성 NH4Cl(3 x 50 mL)로 3회 세척하고, 염수(25 mL)로 세척하였다. 이 EtOAc 추출물을 건조하고(MgSO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 처리하여, 표제 화합물을 수득하였다(480 mg, 85%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.29 - 7.43 (m, 5 H), 5.24 (사중항, 1 H), 4.45 - 4.53 (m, 2 H), 4.19 (사중항, 1 H), 3.18 - 3.29 (m, 1 H), 3.03 - 3.13 (m, 1 H), 2.86 - 3.00 (m, 2 H).
제조예 50
2-(3-하이드록시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00076
탄소 상 팔라듐 하이드록사이드(20% Pd, 습윤, 430 mg)를 THF(6.5 mL)중의 2-(3-(벤질옥시)사이클로부틸리덴)아세토나이트릴(제조예 49, 430 mg, 2.16 mmol)의 용액에 가했다. 이 혼합물을 강(steel) 반응기 내에서 수소(100 psi) 하에 가압하고, 약 20℃에서 약 1시간 동안 교반하였다. 추가의 탄소 상 팔라듐 하이드록사이드(20% Pd, wet, 430 mg)를 가하고, 이 혼합물을 수소(100 psi) 하에 재가압하고, 약 1.5시간 이상 동안 교반하였다. 이 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 농축하여, 시스 및 트랜스 이성질체들의 혼합물로서의 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(240 mg, 100%).
이성질체 1: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 4.52 (사중항, 1 H), 2.63 - 2.74 (m, 2 H), 2.19 - 2.28 (m, 4 H), 2.07 - 2.17 (m, 1 H), 1.83 (br. s, 1 H).
이성질체 2: 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 4.14 - 4.25 (m, 1 H), 2.55 - 2.64 (m, 2 H), 2.48 (dd, 4 H), 1.83 (br. s, 1 H), 1.67 - 1.79 (m, 1 H).
제조예 51
2-(3-옥소사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00077
건조 THF(1.8 mL) 중의 2-(3-하이드록시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 50, 50 mg, 0.45 mmol) 의 용액에, 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(CAS: 87413-09-0, 216 mg, 0.49 mmol)을 가했다. 이 바이알을 주위 대기 하에 밀봉하고, 약 50℃에서 약 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 Et2O(10 mL) 및 이어서 포화된 수성 NaHCO3(4 mL)로 희석하였다. 여기에 나트륨 티오설페이트 오수화물(954 mg, 3.82 mmol)을 가하고, 모든 고체가 용해될 때까지, 이 혼합물을 약 10분 동안 격렬히 교반하였다. 상들을 분리하고, 수성 상을 Et2O로 한번 더 추출하였다. 합친 Et2O 추출물을 건조하고(MgSO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(27 mg, 55%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 3.23 - 3.37 (m, 2 H), 2.89 - 3.01 (m, 2 H), 2.75 - 2.89 (m, 1 H), 2.69 (d, 2 H).
13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ: 203.6, 117.6, 52.3, 23.1, 20.6.
제조예 52
2-(3-(시아노메틸)사이클로부틸리덴)아세토나이트릴
Figure pct00078
제조예 35의 방법을 사용하고, 2-(3-옥소사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 51, 70 mg, 0.64 mmol), (EtO)2POCH2CN(213 mg, 1.15 mmol), LiBr(100 mg, 1.15 mmol) 및 TEA(0.27 mL, 1.92 mmol)를 사용하여, 표제 화합물(75mg, 89%)을 제조하였다. 표제 화합물을 다음 반응(실시예 11 및 12)에 직접 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.25 (m, 1 H), 3.10 - 3.30 (m, 2 H), 2.80 (m, 3 H), 2.60 (m, 2 H).
GCMS m/z = 132 [M]+
제조예 53
6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진
Figure pct00079
용액을 통해 질소 스트림을 버블링하면서, Pd(dppf)Cl2(5.01 g, 6.85 mmol)를 1,4-다이옥산(30 mL) 및 톨루엔(30 mL) 중의 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 8 g, 34 mmol), 3급-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-카복실레이트(12.1 g, 41.1 mmol) 및 2 M 수성 K2CO3(34.2 mL)의 혼합물에 약 10℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 100℃에서 약 16시간 동안 교반하고, 이어서 약 10℃에서 약 48시간 동안 유지하였다. 이 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 회색 오일로서 수득하였다(6.3 g, 69%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.97 (s, 1 H), 8.72 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.15 (d, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 7.36 (d, 1 H), 3.91 (s, 3 H).
LCMS m/z = 265.8 [MH]+
실시예 11
2,2'-((1s,3s)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1,3-다이일)다이아세토나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00080
; 및
실시예 12
2,2'-((1r,3r)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1,3-다이일)다이아세토나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00081
DBU(34 mg, 0.22 mmol)를 MeCN(4.8 mL) 중의 2-(3-(시아노메틸)사이클로부틸리덴)아세토나이트릴(제조예 52, 32 mg, 0.24 mmol) 및 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 53, 53 mg, 0.20 mmol)의 슬러리에 가했다. 이 혼합물을 약 50℃에서 약 16시간 동안 가열하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 시스/트랜스 이성질체의 1:1 혼합물로서의 표제 화합물의 혼합물(80 mg, 83%)을 수득하였다. 이성질체들을 HPLC로 분리하여, 하기를 수득하였다:
고체로서의 2,2'-((1s,3s)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1,3-다이일)다이아세토나이트릴(시스 이성질체, 27 mg, 36%):
1H NMR (500 MHz, 9:1 CDCl3-CD3OD) δ: 8.45 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 7.99 (d, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 6.93 (s, 1 H), 3.95 (s, 3 H), 3.72 (s, 2 H), 3.18 (s, 2 H), 2.81 - 2.91 (m, 2 H), 2.72 - 2.81 (m, 1 H), 2.72 - 2.81 (m, 1 H), 2.64 - 2.72 (m, 2 H), 2.61 (d, 2 H);
LCMS m/z = 399.1 [MH]+; 및
고체로서의 2,2'-((1r,3r)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로-부탄-1,3-다이일)다이아세토나이트릴(트랜스 이성질체, 14 mg, 18%):
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.49 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 8.05 (d, 1 H), 7.96 (m, 2 H), 6.95 (d, 1 H), 4.00 (s, 3 H), 3.75 (br. s., 1 H), 3.15 - 3.25 (m, 2 H), 3.11 (s, 2 H), 2.88 (tt, 1 H), 2.64 (d, 2 H), 2.48 - 2.59 (m, 2 H);
LCMS m/z = 399.1 [MH] +
제조예 54
2-(3-(벤질옥시)사이클로부틸리덴)아세토나이트릴
Figure pct00082
건조 THF(500 mL) 중의 (EtO)2P(O)CH2CN(24.1 g, 136 mmol)의 용액에, LiBr(11.8 g, 136 mmol) 및 TEA(18.4 g, 182 mmol)를 가하고, 생성 혼합물을 약 20℃에서 약 1시간 동안 교반하였다. 여기에, 3-(벤질옥시)사이클로부탄-1-온(16.00 g, 90.8 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 20시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 액체로서 수득하였다(18 g, 99%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.29 - 7.40 (m, 5 H), 5.24 (dt, 1 H), 4.45 - 4.53 (m, 2 H), 4.19 (사중항, 1 H), 3.19 - 3.29 (m, 1 H), 3.03 - 3.13 (m, 1 H), 2.86 - 3.00 (m, 2 H).
LCMS m/z = 200.1 [MH]+
제조예 55
2-(3-(벤질옥시)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
(시스 및 트랜스 이성질체들의 혼합물)
Figure pct00083
DBU(1.448 g, 9.4 mmol)를 MeCN(6.38 mL) 중의 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 53, 313 mg, 1.18 mmol) 및 2-(3-(벤질옥시)사이클로부틸리덴)아세토나이트릴(제조예 54, 470 mg, 2.36 mmol)의 용액에 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 18시간 동안 교반하고, 이어서 이를 수성 NaH2PO4 용액에 부어, 약 5의 pH를 유지하였다. 이 혼합물을 DCM으로 3회 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(474 mg, 86%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.67 - 8.72 (m, 2 H), 8.63 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 8.04 - 8.10 (m, 2 H), 7.25 - 7.42 (m, 5 H), 4.53 (s, 2 H), 4.24 - 4.34 (m, 1 H), 3.97 (s, 3 H), 3.29 (s, 2 H), 2.92 - 3.02 (m, 2 H), 2.77 - 2.88 (m, 2 H).
LCMS m/z = 465.3 [MH]+
실시예 13
2-((1s,3r)-3-하이드록시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00084
; 및
실시예 14
2-((1r,3s)-3-하이드록시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00085
나트륨 요오다이드를 완전 가열 상태로 5분 동안 가열하여 건조하고, 이어서, 사용 전에 질소 하에 약 25℃로 냉각하였다. 건조된 NaI(1.21 g, 8.1 mmol)를 약 20℃에서 MeCN(12 mL) 중의 (2-(3-(벤질옥시)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 55, 377 mg, 0.81 mmol)의 교반된 용액에 가하고, 이어서 TMSCl(1.05 mL, 8.1 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 50℃에서 약 18시간 동안 교반하였다. NaI 및 TMSCl 둘 다의 추가 분획을 가하고, 이 혼합물을 약 50℃에서 추가로 약 8시간 동안 유지하였다. 냉각시킨 혼합물을, 나트륨 티오설페이트 오수화물(10.1 g, 40.6 mmol)을 함유하는 빙냉 포화된 수성 NaHCO3에 붓고, EtOAc로 3회 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 농축하여, 2개의 표제 화합물의 혼합물을 수득하였다. 이 혼합물을 크로마토그래피로 정제하여, 하기를 수득하였다:
2-((1s,3r)-3-하이드록시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(트랜스 이성질체, 80 mg, 26%):
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.72 (s, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.42 (s, 1 H), 8.24 (s, 1 H), 8.05 - 8.10 (m, 2 H), 7.24 (d, 1 H), 4.34 - 4.44 (m, 1 H), 3.98 (s, 3 H), 3.35 (s, 2 H), 3.22 - 3.28 (m, 2 H), 2.49 (dd, 2 H).
LCMS m/z = 375.4 [MH]+; 및
2-((1r,3s)-3-하이드록시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(시스 이성질체, 180 mg, 59%):
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.67 (s, 1 H), 8.62 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.07 (d, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.04 - 8.06 (m, 1 H), 7.21 (d, 1 H), 4.41 (사중항, 1 H), 3.97 (s, 3 H), 3.28 (s, 2 H), 2.95 - 3.04 (m, 2 H), 2.68 - 2.78 (m, 2 H).
LCMS m/z = 375.4 [MH]+
실시예 15
2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00086
; 및
실시예 16
2-((1s,3r)-3-메톡시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00087
THF(0.2 mL) 중의 2-((1s,3r)-3-하이드록시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴과 2-((1r,3s)-3-하이드록시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(실시예 13 및 14, 시스 및 트랜스 이성질체들의 혼합물, 48 mg, 0.13 mmol)의 혼합물의 용액을 테트라부틸암모늄 브로마이드(TBAB, 126 mg, 0.38 mmol), 1 M 수성 NaOH(1.02 mL) 및 다이메틸 설페이트(6 μL)로 순차적으로 처리하였다. 이 반응 바이알을 밀봉하고, 약 20℃에서 약 1시간 동안 격렬히 교반하였다. 추가의 다이메틸 설페이트(14 μL) 및 TBAB(10 mg)를 가하고, 이 반응물을 약 20℃에서 약 2시간 동안 유지하였다. 이 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하고, 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 시스 및 트랜스 이성질체들의 혼합물을 수득하였다. 이를 HPLC로 추가로 정제하여, 하기를 수득하였다:
고체로서의 2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(트랜스 이성질체, 10 mg, 20%):
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.61 (d, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.05 (d, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 3.99 - 4.08 (m, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.27 (s, 5 H), 3.13 - 3.21 (m, 2 H), 2.45 - 2.53 (m, 2 H).
LCMS m/z = 389.1 [MH]+; 및
고체로서의 2-((1s,3r)-3-메톡시-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(시스 이성질체, 17 mg, 33%):
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.60 (d, 1 H), 8.49 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 8.04 (d, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.12 (dd, 1 H), 4.03 (사중항, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.26 (s, 3 H), 3.19 (s, 2 H), 2.89 - 2.97 (m, 2 H), 2.65 - 2.74 (m, 2 H).
LCMS m/z = 389.1 [MH]+
제조예 56
벤질 (R)-2-메틸-3-옥소아제티딘-1-카복실레이트
Figure pct00088
파트 1
Et2O(150 mL) 중의 N,4-다이메틸-N-나이트로소벤젠설폰아마이드(다이아잘드(Diazald)(등록상표), 21.25 g, 99.19 mmol)의 용액을 2-(2-에톡시에톡시)에탄올(30 mL) 및 물(10 mL) 중의 KOH(6 g, 106.9 mmol)의 용액에 약 70℃에서 적가하였다. 이 혼합물을 약 70℃에서 가열하고, 드라이아이스/아세톤 응축기를 사용하여, 다이아조메탄의 에터성 용액(100 mL, 66 mmol의 다이아조메탄을 함유하는 것으로 추정됨)을 증류에 의해 황색 액체로서 수집하고, 파트 2에 즉시 사용하였다.
파트 2
에틸 클로로포메이트(2.430 g, 22.4 mmol)를 THF(50 mL) 중의 Cbz-D-알라닌(5.00 g, 22.4 mmol) 및 TEA(2.27 mg, 22.4 mmol의 용액에 약 -15℃에서 적가하였다. 이 반응 혼합물을 약 0℃로 가온하고, 파트 1으로부터의 다이아조메탄 용액(100 mL, 약 66 mmol)을 적가하고, 약 20℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 이 반응 혼합물을 물(10 mL)로 켄칭하고, EtOAc(2 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 다이아조-케톤 중간체(4.5 g, 81%)를 황색 고체로서 수득하였다. 이 물질을 파트 3에 사용하였다.
파트 3
DCM(450 mL) 중의 파트 2의 다이아조-케톤 중간체(4.50 g, 18.2 mmol)의 용액에, TEA(18 mg, 0.18 mmol) 및 Rh2(OAc)4(40 mg, 0.091 mmol)를 약 0℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 물(50 mL)로 켄칭하고, 상기 DCM 상을 분리하고, 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(1.20 g, 30%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.34 - 7.38 (m, 5 H), 5.18 (m, 2 H), 5.03 (m, 1 H), 4.65 - 4.81 (m, 2 H), 1.49 (d, 3 H).
GCMS m/z = 219 [M]+
제조예 57
벤질 (R)-3-(시아노메틸렌)-2-메틸아제티딘-1-카복실레이트
Figure pct00089
THF(10 mL) 중의 LiBr(166 mg, 1.92 mmol) 및 TEA(277 mg, 2.74 mmol)의 혼합물에, (EtO)2P(O)CH2CN(339 mg, 1.92 mmol)를 약 25℃에서 가했다. 약 2.5시간 후, THF(2 mL) 중의 벤질 (R)-2-메틸-3-옥소아제티딘-1-카복실레이트(제조예 56, 300 mg, 1.37 mmol)를 약 25℃에서 가하고, 이 혼합물을 약 16시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, E/Z 올레핀 이성질체들의 혼합물로서 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(290 mg, 87%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.33 - 7.40 (m, 5 H), 5.36 (m, 1 H), 5.10 - 5.17 (m, 2 H), 4.97 (m, 1 H), 4.63 - 4.77 (m, 2 H), 1.50 - 1.67 (m, 3 H).
제조예 58
벤질 (2R)-3-(시아노메틸)-2-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트
Figure pct00090
MeCN(15 mL) 중의 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 53, 268 mg, 1.01 mmol)의 용액에, 벤질 (R)-3-(시아노메틸렌)-2-메틸아제티딘-1-카복실레이트(제조예 57, 294 mg, 1.21 mmol) 및 DBU(77 mg, 0.51 mmol)를 약 15℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 7시간 동안 교반한 후, EtOAc(50 mL)로 희석하고, 1 M 수성 시트르산(15 mL) 및 이어서 염수(15 mL)로 세척하였다. 이 EtOAc 추출물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다(500 mg, 97%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.49 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 8.05 (d, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.33 - 7.40 (m, 5 H), 6.93 (d, 2 H), 5.15 (s, 2 H), 4.87 (m, 1 H), 4.61 (d, 1 H), 4.26 (d, 1 H), 4.01 (s, 3 H), 3.27 (s, 2 H), 1.69 (d, 3 H).
LCMS m/z = 530.1 [M+Na]+
제조예 59
2-((2R)-2-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00091
MeCN(16 mL) 중의 NaI(2.36 g, 15.8 mmol)의 혼합물에, TMSCl(2 mL, 15.8 mmol)을 약 0℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 15℃에서 약 4시간 동안 교반하였다. 여기에 MeCN(4 mL) 중의 벤질 (2R)-3-(시아노메틸)-2-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1-카복실레이트(제조예 58, 400 mg, 0.79 mmol)의 용액을 약 0℃에서 가했다. 약 15℃에서 약 3시간 동안 계속 교반하였다. 이 혼합물을 약 10℃로 냉각하고, TEA(2 mL)를 가하여 켄칭하였다. 이 혼합물을 농축하였다. 잔사를 EtOAc(20 mL) 및 MeOH(2 mL)에 용해시키고, 존재하는 고체를 여과에 의해 제거하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 TLC로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(200 mg, 68%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.06 (s, 1 H), 9.03 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.22 (d, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.47 (s, 1 H), 5.09 (m, 1 H), 4.74 (d, 1 H), 4.24 (d, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 2.99 (s, 2 H), 1.65 (d, 3 H).
LCMS m/z = 374.0 [MH]+
실시예 17
2-((2R,3S)-2-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)아제티딘-3-일)아세토나이트릴
Figure pct00092
DMF(5 mL) 중의 2-((2R)-2-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴(제조예 59, 200 mg, 0.43 mmol)의 용액에, 2,2,2-트라이플루오로에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(298 mg, 1.29 mmol) 및 DIPEA(332 mg, 2.57 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 10℃에서 약 36시간 동안 교반한 후, EtOAc(30 mL)로 희석하고, 염수(15 mL)로 세척하였다. 이 EtOAc 추출물을 농축하고, 잔사를 HPLC로 정제하여, 부분입체 이성질체들의 혼합물로서의 표제 화합물(80 mg, 41%)을 황색 고체로서 수득하였다. 이를 HPLC로 추가로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(41.8 mg, 21%, 94.7% ee).
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.59 (s, 1 H), 8.45 (s, 1 H), 8.36 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.04 (d, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 7.09 - 7.13 (m, 1 H), 3.92 - 3.96 (m, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 3.84 - 3.89 (m, 1 H), 3.77 - 3.84 (m, 1 H), 3.38 (s, 2 H), 3.28 - 3.43 (m, 1 H), 3.15 (dq, 1 H), 1.36 (d, 3 H).
LCMS m/z = 456.2 [MH]+
실시예 18
2-((1r,3r)-1-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(1H-피라졸-5-일)사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00093
THF(10 mL) 중의 LiBr(70 mg, 0.81 mmol) 및 TEA(205 mL, 1.47 mmol)의 용액에, (EtO)2P(O)CH2CN(143 mg, 0.81 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 30분 동안 교반하고, 3-(1H-피라졸-5-일)사이클로부탄-1-온(제조예 99, 100 mg, 0.74 mmol)을 가하고, 이 혼합물을 약 20℃에서 약 18시간 동안 유지하였다. 이 반응 용액의 약 30%를 취하고, MeCN(5 mL) 중의 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 53, 58 mg, 0.22 mmol) 및 DBU(110 mL, 0.73 mmol)를 가했다. 약 20℃에서 약 20시간 동안 교반을 유지하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(6 mg, 6%)을 수득하였다.
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ: 8.85 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 8.10 (s, 2 H), 7.60 (br. s., 1 H), 7.28 (d, 1 H), 6.32 (d, 1 H), 3.95 - 4.04 (m, 3 H), 3.69 - 3.78 (m, 1 H), 3.33 - 3.43 (m, 2 H), 2.77 - 2.89 (m, 2 H).
LCMS m/z = 425.4 [MH]+
실시예 19
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00094
1,4-다이옥산(7.5 mL) 중의 (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 91, 539 mg, 1.72 mmol) 및 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 350 mg, 1.5 mmol)의 용액에, 2 M 수성 K3PO4 (2.25 mL)를 약 25℃에서 가했다. 이 혼합물을 질소 하에 두고, 이어서 XPhos Pd G2(11.8 mg, 0.0150 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 40℃에서 약 6시간 동안 가열하고, 이어서 이를 약 80℃로 가열하여, 침전된 생성물을 용해시켰다. 약 80℃에서 온도를 유지하면서, 수성 층을 제거하고, 이어서 상기 1,4-다이옥산 상을 EtOH(70 mL, 약 50℃로 사전 예열됨)에 가했다. 이 혼합물을 약 50℃에서 약 10분 동안 교반한 후, 열을 제거하였다. 약 25℃에서 약 18시간 동안 계속 교반하였다. 고체를 여과하고, EtOH(2 x 25 mL)로 세척하고, 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(483 mg, 84%).
mp 217 - 220℃.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.02 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.65 - 3.59 (m, 1H), 3.57 (s, 2H), 3.26 - 3.16 (m, 2H), 2.88 (m, 2H).
13C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ: 145.21, 142.50, 140.09, 137.15, 133.80, 131.39, 129.54, 129.24, 121.94, 121.03, 120.33, 117.69, 114.55, 99.94, 59.62, 39.28, 36.90, 27.42, 14.64.
LCMS m/z = 384.2 [MH]+
실시예 20
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00095
1,4-다이옥산(47.1 mL) 중의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 91, 3.38 g, 10.8 mmol) 및 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 2.20 g, 9.4 mmol)의 용액에, 2 M 수성 K3PO4(14.1 mL)를 가했다. 이 혼합물을 통해 질소를 약 25℃에서 약 5분 동안 버블링하고, 이어서 XPhos Pd G2(37.0 mg, 0.047 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 40℃에서 약 18시간 동안 가열하고, 이어서 이를 약 80℃로 가열하여, 침전된 생성물을 용해시켰다. 약 80℃에서 온도를 유지하면서, 수성 층을 제거하고, 이어서 상기 1,4-다이옥산 상을 EtOH(471 mL, 약 50℃로 사전 예열됨)에 가했다. 이 혼합물을 약 50℃에서 약 10분 동안 교반한 후, 열을 제거하였다. 약 25℃에서 약 6시간 동안 계속 교반하였다. 고체를 여과하고, EtOH(2 x 25 mL), 물( 2 x 50 mL), 및 EtOH(2 x 25 mL)로 세척하였다. 침전물을 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(3.61 g, 74%).
모든 물질이 용해될 때까지, 표제 화합물(500 mg, 1.30 mmol)을 1,4-다이옥산(6.5 mL) 중에서 약 80℃로 가열하였다. 여기에 1,2-비스(다이페닐포스피노)에탄(7.8 mg, 0.019 mmol)을 가하고, 약 80℃에서 약 4시간 동안 계속 가열하고, 이어서 상기 1,4-다이옥산 상을 EtOH(58.7 mL, 약 50℃로 사전 예열됨)에 가했다. 추가로 6.5 mL의 예열된 EtOH를 사용하여 상기 반응 용기를 세척하였다. 이 혼합물을 열을 제거하였다. 약 25℃에서 약 18시간 동안 계속 교반하였다. 고체를 여과하고, EtOH(2 x 5 mL), 물(5 mL), 이어서 EtOH(3 x 5 mL)로 세척하였다. 침전물을 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(450 mg, 90%).
융점: 213 - 215℃.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.02 (s, 1 H) 8.92 (s, 1 H) 8.52 (s, 1 H) 8.37 (s, 1 H) 8.19 (s, 1 H) 8.16 (s, 1 H) 7.45 (s, 1 H) 3.91 (s, 3 H) 3.55 - 3.65 (m, 1 H) 3.52 (s, 2 H) 3.22 - 3.38 (m, 2 H) 2.85 - 3.00 (m, 2 H).
13C NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ: 145.17, 142.46, 140.20, 137.13, 133.78, 131.38, 129.82, 129.51, 122.28, 121.13, 120.33, 117.30, 114.54, 99.91, 61.51, 39.26, 36.26, 29.65, 16.05.
LCMS m/z = 384.1 [MH]+.
제조예 60
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00096
; 및
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00097
MeCN(28.8 mL) 중의 3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(600 mg, 2.88 mmol) 및 3-(시아노메틸렌)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 27, 341 mg, 2.88 mmol)의 용액에, DBU(439 mg, 2.88 mmol)를 약 20℃에서 가했다. 약 18시간 후, 약 20℃에서, 이 혼합물을 EtOAc 및 10% 수성 K2HPO4에 부었다. 상기 EtOAc를 분리하고, 수성 상을 EtOAc로 2회 더 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 염수로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 하기를 수득하였다:
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(트랜스 이성질체, 325 mg, 35%):
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.79 (s, 1 H), 3.17 - 3.28 (m, 3 H), 3.16 (s, 2 H), 2.81 - 2.89 (m, 2 H), 2.39 (s, 3 H), 1.32 (s, 12 H),
LCMS m/z = 327.2 [MH]+; 및
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(시스 이성질체, 171 mg, 18%):
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.75 (s, 1 H), 3.18 - 3.28 (m, 1 H), 3.08 - 3.18 (m, 2 H), 3.05 (s, 2 H), 2.93 - 3.02 (m, 2 H), 2.39 (s, 3 H), 1.32 (s, 12 H),
LCMS m/z = 327.2 [MH]+
실시예 21
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(3-메틸-4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00098
1,4-다이옥산(4.3 mL) 중의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 60, 트랜스 이성질체, 209 mg, 0.64 mmol)의 용액에, 4-클로로-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 11, 150 mg, 0.64 mmol) 및 2 M 수성 K3PO4(0.96 mL)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 XPhos Pd G2(101 mg, 0.13 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 40℃에서 약 2시간 동안 가열하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 EtOAc에 용해시키고, 상기 EtOAc를 물로 세척하였다. 수성 상을 EtOAc로 2회 더 추출하고, 이어서 DCM으로 1회 추출하였다. 합친 EtOAc 및 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 고체를 수득하고, 이를 MeCN으로부터 재결정화하여, 표제 화합물을 수득하였다(120 mg, 47%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.00 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 3.55 (사중항, 1 H), 3.48 (s, 2 H), 3.22 - 3.30 (m, 2 H), 2.84 - 2.93 (m, 2 H), 2.63 (s, 3 H).
LCMS m/z = 398.3 [MH]+
제조예 61
4-브로모-1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸
Figure pct00099
THF(30 mL) 중의 4-브로모-1-메틸-1H-피라졸-3-메탄올(720 mg, 3.77 mmol)의 용액에, DHP(951 mg, 11.3 mmol) 및 PTSA(14 mg, 0.075 mmol)를 가했다. 이 용액을 약 50℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(1.0 g, 84%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.37 (s, 1 H), 4.81 (t, 1 H), 4.74 (d, 1 H), 4.46 (d, 1 H), 3.96 - 4.03 (m, 1 H), 3.88 (s, 3 H), 3.56 - 3.63 (m, 1 H), 1.80 - 1.93 (m, 1 H), 1.59 - 1.78 (m, 3 H), 1.48 - 1.57 (m, 2 H).
LCMS m/z = 190.7 [MH-THP]+
제조예 62
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00100
파트 1
1,4-다이옥산(10 mL) 중의 4-브로모-1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸(제조예 61, 200 mg, 0.73 mmol)의 용액에, KOAc(313 mg, 3.19 mmol) 및 비스(피나콜레이토)이붕소(405 mg, 1.59 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 5분 동안 퍼지한 후, Pd(dppf)Cl2(78 mg, 0.11 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 90℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하여, 1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸의 불순한 샘플을 흑색 오일로서 수득하고(234 mg), 이를 추가의 정제 없이 하기 파트 2에 사용하였다.
파트 2
1,4-다이옥산(3.0 mL) 중의 (1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 75, 85 mg, 0.25 mmol), 1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(파트 1, 81 mg, 0.25 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(1.0 mL)의 혼합물을 아르곤으로 약 2분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(39 mg, 0.050 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 약 45℃에서 약 45분 동안 가열하였다. 상기 1,4-다이옥산 상을 수성 상으로부터 분리하고, 이를 EtOAc(5 mL)로 추가로 추출하였다. 합친 1,4-다이옥산 및 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(50 mg, 40%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.92 (s, 1 H), 8.45 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.07 - 8.10 (m, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 6.96 (d, 1 H), 5.02 (d, 1 H), 4.87 - 4.91 (m, 1 H), 4.70 (m, 1 H), 4.59 (d, 1 H), 4.51 (d, 1 H), 3.99 (s, 3 H), 3.51 - 3.62 (m, 2 H), 3.34 - 3.44 (m, 1 H), 3.29 (s, 2 H), 2.99 (m, 2 H), 1.80 - 1.96 (m, 3 H), 1.68 - 1.80 (m, 3 H).
LCMS m/z = 498.3 [MH]+
실시예 22
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(3-(하이드록시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00101
PTSA(10 mg, 0.052 mmol)를 MeOH(10 mL) 중의 (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 62, 50 mg, 0.10 mmol)의 용액에 가했다. 이 반응 혼합물을 약 20℃에서 약 18시간 동안 유지하였다. 침전된 고체를 여과하여, 표제 화합물을 수득하였다(20 mg, 48%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.00 (s, 1 H), 8.91 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.22 (d, 1 H), 7.47 (d, 1 H), 5.41 (br. s., 1 H), 4.66 (s, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.54 - 3.62 (m, 1 H), 3.52 (s, 2 H), 3.28 - 3.34 (m, 2 H), 2.90 - 2.98 (m, 2 H).
LCMS m/z = 414.4 [MH]+
제조예 63
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00102
파트 1
1,4-다이옥산(10 mL) 중의 4-브로모-1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸(200 mg, 0.97 mmol)의 용액에, KOAc(285 mg, 2.90 mmol), 및 비스(피나콜레이토)이붕소(368 mg, 1.45 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 5분 동안 퍼지한 후, Pd(dppf)Cl2(70.8 mg, 0.097 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 90℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하여, 불순한 1-메틸-3-나이트로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸을 백색 오일로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 파트 2에 사용하였다.
파트 2
1,4-다이옥산(6.0 mL) 중의 (1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 75, 130 mg, 0.38 mmol), 1-메틸-3-나이트로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(파트 1, 97 mg, 0.38 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(2.0 mL)의 혼합물을 아르곤으로 약 2분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(60.6 mg, 0.077 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 45℃에서 약 45분 동안 가열하였다. 1,4-다이옥산 상을 수성 상으로부터 분리하고, 이를 EtOAc(10 mL)로 추가로 추출하였다. 합친 1,4-다이옥산 및 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(120 mg, 72%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.10 (s, 1 H), 8.90 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 8.32 (d, 1 H), 7.56 (br. s., 1 H), 4.05 (s, 3 H), 3.54 - 3.60 (m, 1 H), 3.51 (s, 2 H), 3.18 - 3.29 (m, 2 H), 2.88 - 2.98 (m, 2 H).
LCMS m/z = 429.4 [MH]+
실시예 23
(1r,3r)-3-(4-(6-(3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00103
EtOH(3 mL) 및 물(0.5 mL) 중의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-3-나이트로-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 63, 120 mg, 0.28 mmol)의 용액에, NH4Cl(90 mg, 1.68 mmol) 및 철 분말(50 mg, 0.90 mmol)을 가했다. 이 반응물을 약 60℃에서 약 18시간 동안 교반한 후, 철 분말의 추가적인 부분 및 NH4Cl을 가했다. 이 혼합물을 약 100℃에서 약 3시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 뜨거운 EtOH(20 mL)을 가했다. 용해되지 않은 고체는 여과에 의해 제거하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(10 mg, 9%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.74 (s, 1 H), 8.67 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.08 (d, 1 H), 7.94 (s, 1 H), 7.24 (d, 1 H), 3.77 (s, 3 H), 3.47 - 3.55 (m, 1 H), 3.43 (s, 2 H), 3.34 - 3.41 (m, 2 H), 2.98 (dd, 2 H).
LCMS m/z = 399.4 [MH]+
제조예 64
3,5-다이브로모-1-메틸-1H-피라졸
Figure pct00104
THF(30 mL) 중의 3,5-다이브로모피라졸(6.5 g, 28.7 mmol)의 용액을 THF(45 mL) 중의 NaH(2.88 g, 미네랄 오일 중 60%, 71.9 mmol)의 빙냉 현탁액에 적가하였다. 이 혼합물을 약 0℃에서 약 1시간 동안 교반하였다. 여기에 요오도메탄(5.37 mL, 86.3 mmol)을 가하고, 이 혼합물을 약 0℃에서 약 3시간 동안 교반하고, 이어서 약 15℃에서 약 2시간 동안 계속 교반하였다. 이 혼합물을 포화된 수성 NH4Cl(20 mL)에 붓고, EtOAc(40 mL)로 추출하였다. 이 EtOAc 추출물을 염수로 세척하고(20 mL), 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(5.5 g, 79%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.31 (s, 1 H), 3.87 (s, 3 H).
LCMS m/z = 240.6 [MH]+ (79Br, 81Br 동위원소)
제조예 65
3-브로모-1-메틸-1H-피라졸-5-카복실산
Figure pct00105
THF(30 mL) 중의 3,5-다이브로모-1-메틸-1H-피라졸(제조예 64, 3.0 g, 12.5 mmol)의 용액을 n-BuLi(2.5 M, 6.25 mL, 15.6 mmol)로 약 -70℃에서 적가 처리하였다. 이 온도에서 약 30분 동안, 내부 온도를 약 -65℃ 미만으로 유지하면서, THF 중 CO2 용액(30 mL)을 적가하였다. 이 혼합물을 이 온도에서 약 1시간 동안 교반하고, 이어서 이 반응 혼합물을 1 M 수성 HCl(50 mL)에 붓고, 이 혼합물을 부분적으로 농축하여, 상기 THF의 대부분을 제거하였다. 수성 층을 DCM(50 mL)으로 추출하였다. DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(2.1 g, 81%).
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 13.70 (br s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.04 (s, 3H).
LCMS m/z = 206.9 [MH]+ (81Br 동위원소)
제조예 66
3급-부틸 (3-브로모-1-메틸-1H-피라졸-5-일)카바메이트
Figure pct00106
다이페닐포스포릴 아자이드(18.8 g, 68.5 mmol)를 t-부탄올(114 mL) 중의 5-브로모-2-메틸-2H-피라졸-3-카복실산(제조예 65, 7.02 g, 34.2 mmol) 및 DIPEA(11.9 mL, 68.5 mmol)의 용액에 가했다. 이 혼합물을 약 45℃에서 약 30분 동안 교반하고, 이어서 약 5시간 동안 가열 환류시켰다. 냉각시킨 혼합물을 EtOAc(60 mL)로 희석하고, 포화된 수성 NaHCO3(2 x 30 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하였다. 이 EtOAc 추출물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(4.80 g, 51%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 6.28 (br s, 1H), 6.18 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 1.50 (s, 9H).
LCMS m/z = 221.7 [MH-C4H8]+ (81Br 동위원소)
제조예 67
3-브로모-1-메틸-5-(다이Boc)-아미노-1H-피라졸
Figure pct00107
다이-3급-부틸 다이카보네이트(1.58 g, 7.24 mmol)를 DCM(40 mL) 중의 3급-부틸 (3-브로모-1-메틸-1H-피라졸-5-일)카바메이트(제조예 66, 2.0 g, 7.24 mmol), TEA(4.04 mL, 29.0 mmol), 및 DMAP(177 mg, 1.45 mmol)의 용액에 가했다. 이 혼합물을 약 20℃에서 약 18시간 동안 교반하였다. 여기에 물(25 mL)을 가하고, 이 혼합물을 DCM(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(1.85 g, 67)%.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.06 - 6.20 (m, 1 H), 3.64 (s, 3 H), 1.44 (s, 18 H).
LCMS m/z = 378.2 [MH]+ (81Br 동위원소)
실시예 24
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-아미노-1-메틸-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00108
파트 1
1,4-다이옥산(15 mL) 중의 3-브로모-1-메틸-5-(다이Boc)-아미노-1H-피라졸(제조예 67, 1200 mg, 3.19 mmol), KOAc(988 mg, 9.57 mmol) 및 비스(피나콜레이토)이붕소(1210 mg, 4.78 mmol)의 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(502 mg, 0.64 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 약 65℃에서 약 3.5시간 동안 가열한 후, 이어서 2-((1s,3r)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로-부틸)아세토나이트릴(제조예 100, 1090 mg, 3.19 mmol), 2 M 수성 K3PO4(4.78 mL) 및 XPhos Pd G2(502 mg, 0.64 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 아르곤으로 다시 퍼지하고, 이어서 약 80℃에서 약 1시간 동안 가열하였다. 여기에 EtOAc를 가하고, 상들을 분리하였다. 수성 상을 EtOAc로 2회 더 추출하고, 합친 EtOAc 추출물을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 모노- 및 다이-BOC 중간체의 혼합물(710 mg, 36%)을 수득하고, 이를 파트 2에 사용하였다.
파트 2
TFA(6 mL, 80 mmol)를 DCM(6 mL) 중의 파트 1의 모노- 및 다이-BOC 중간체(710 mg, 1.18 mmol)의 용액에 약 20℃에서 가했다. 약 1시간 후, 이 혼합물을 농축하였다. 여기에 DCM을 가하고, 이어서 포화된 수성 NaHCO3를 충분히 가하여, 상기 용액의 pH를 염기성으로 만들었다. 상들을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 2회 더 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 파트 1의 화합물(220 mg, 0.36 mmol) 및 TFA(2 mL, 30 mmol)를 사용하는 등가 반응의 생성물을, 상기 반응으로부터의 물질과 합치고, 합친 샘플을 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다(470 mg, 99%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.81 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.21 (d, 1 H), 7.44 (d, 1 H), 5.33 (br. s, 2 H), 3.94 - 4.02 (m, 1 H), 3.62 (s, 3 H), 3.44 (s, 2 H), 3.21 (s, 3 H), 3.14 - 3.20 (m, 2 H), 2.39 - 2.45 (m, 2 H).
LCMS m/z = 404.5 [MH]+
제조예 68
다이에틸 4-브로모-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트
Figure pct00109
진한 질산과 빙초산의 혼합물(12.0 mL, 5:95 v/v) 중의 1H-피라졸-3,5-다이카복실산 다이에틸 에스터(4.0 g, 18.85 mmol) 및 N-브로모석신이미드(4.03 g, 22.6 mmol)의 혼합물을 약 120℃에서 약 20분 동안 마이크로파 조사에 의해 가열하였다. 총 13.0 g(61.26 mmol)의 1H-피라졸-3,5-다이카복실산 다이에틸 에스터 출발 물질을 이러한 방식으로 병행 배취로 처리하였다. 생성된 갈색 조 반응 혼합물을 합치고, 물(260 mL)에 붓고, 충분한 NaHCO3로 처리하여, 상기 용액의 pH를 염기성으로 만들었다. 이 혼합물을 EtOAc(3 x 300 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(17.0 g, 95%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.79 (br. s., 1 H), 4.44 (q, 4 H), 1.42 (t, 6 H).
LCMS m/z = 290.7 [MH]+ (79Br 동위원소)
제조예 69
다이에틸 4-브로모-1-(2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트
Figure pct00110
MeCN(140 mL) 중의 4-브로모-1H-피라졸-3,5-다이카복실산 다이에틸 에스터(제조예 68, 9.66 g, 33.18 mmol) 및 2-브로모-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-에탄온(제조예 6, 6.0 g, 29.55 mmol)의 용액을 K2CO3(5.31 g, 38.40 mmol)로 처리하고, 이 반응 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 여기에 물(100 mL)을 가하고, 이 혼합물을 EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(10.0 g, 82%).
1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.95 (s, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 5.82 (s, 2 H), 4.43 (q, 2 H), 4.36 (q, 2 H), 3.96 (s, 3 H), 1.45 (t, 3 H), 1.35 (t, 3 H).
LCMS m/z = 436.8 [MNa]+ (81Br 동위원소)
제조예 70
다이에틸 4-메틸-1-(2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3,5-다이카복실레이트
Figure pct00111
DMF(133.0 mL) 중의 K2CO3(11.0 g, 79.9 mmol) 및 4-브로모-1H-[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-1H-피라졸-3,5-다이카복실산 다이에틸 에스터(제조예 69, 11.0 g, 26.62 mmol)의 혼합물을 약 25℃에서 질소로 퍼지한 후, Pd(dppf)Cl2(1950 mg, 2.66 mmol) 및 트라이메틸보록신(10.0 g, 79.9 mmol)을 가하고, 이 용액을 약 110℃에서 약 5시간 동안 가열하였다. 냉각된 반응물을 EtOAc(100 mL)로 희석하고, 생성 혼합물을 염수(2 x 100 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(5.45 g, 50%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.92 (s, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 5.78 (s, 2 H), 4.41 (q, 2 H), 4.28 (q, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 2.58 (s, 3 H), 1.39 (t, 3 H), 1.31 (t, 3 H).
LCMS m/z = 348.9 [MH]+
제조예 71
에틸 4-하이드록시-3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실레이트
Figure pct00112
4-메틸-[2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-1H-피라졸-3,5-다이카복실산 다이에틸 에스터(제조예 70, 5.35 g, 15.36 mmol)를 건조 EtOH(15 mL)와 혼합하고, 농축하였다. 생성 고체를 EtOH(40 mL)에 용해시키고, NH4OAc(3.55 g, 46.1 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 오토클레이브 내에서 약 130℃에서 약 8시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 이 혼합물을 여과하고, 침전물을 건조하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(3.40 g, 73%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.45 (br. s., 1 H), 8.27 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 4.31 (m, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 2.61 (s, 3 H), 1.24 - 1.40 (m, 3 H).
LCMS m/z = 301.8 [MH]+
제조예 72
4-하이드록시-3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실산
Figure pct00113
리튬 하이드록사이드 일수화물(1.42 g, 33.9 mmol)을 THF(50 mL), MeOH(50 mL) 및 물(25 mL) 중의 4-하이드록시-3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실산 에틸 에스터(제조예 71, 3.40 g, 11.3 mmol)의 현탁액에 가했다. 이 혼합물을 약 60℃에서 약 4시간 동안 교반하였다. 냉각시킨 혼합물을 농축하고, 물(50 mL)을 가했다. 이 혼합물의 pH를, 12 M 수성 HCl을 가하여 약 2로 조절하였다. 생성된 침전물을 여과하고, 물(50 mL)로 세척하고, 이어서 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 고체로서 수득하였다.
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.90 - 13.20 (br. s, 1 H), 11.40 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.02 (m, 2 H), 3.90 (s, 3 H), 2.60 (s, 3 H).
LCMS m/z = 301.8 [MH]+, 323.8 [MNa]+
제조예 73
3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진-4-올
Figure pct00114
4-하이드록시-3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진-2-카복실산(제조예 72, 2.58 g, 9.44 mmol)을, 예열된 설폴란(18.9 mL)에, 약 280℃에서 분획들로 나누어 가했다. 첨가가 완료되면, 이 혼합물을 약 280℃에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 냉각시킨 혼합물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피(석유 에터:EtOAc(100:0 내지 50:50), 이어서 DCM:MeOH(91:9)로 용리)로 직접 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(1.50 g, 69%).
1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.20 (s, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 2.40 (s, 3 H).
제조예 74
4-클로로-3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진
Figure pct00115
MeCN(60.0 mL) 중의 3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진-4-올(제조예 73, 1.40 g, 6.11 mmol)의 현탁액에 POCl3(4.68 g, 30.5 mmol)를 가했다. 이 반응 혼합물을 약 80℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 이 혼합물을 물(200 mL)에 약 25℃에서 부었다. 이 혼합물을, 포화된 수성 NaHCO3(200 mL)를 가함으로써 약 pH 9로 조절하고, 이어서 EtOAc로 추출하였다(5 x 100 mL). 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 HPLC로 추가로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(163 mg, 11%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.37 (s, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 3.96 (s, 3 H), 2.57 (s, 3 H).
LCMS m/z = 247.7 [MH]+ (35Cl 동위원소)
실시예 25
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00116
1,4-다이옥산(9 mL) 중의 4-클로로-3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 74, 98 mg, 0.40 mmol) 및 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 91, 247 mg, 0.79 mmol)의 용액에 2 M 수성 K3PO4(0.59 mL)를 약 25℃에서 가하고, 이 혼합물을 질소로 약 2분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(62.3 mg, 0.079 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 3분 동안 퍼지하고, 이어서 약 80℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하고, 이어서 HPLC로 추가로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다(56 mg, 36%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ: 8.98 (s, 1 H), 8.94 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.27 (s, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 7.98 (s, 1 H), 3.90 (s, 3 H), 3.52 - 3.57 (m, 3 H), 3.19 - 3.26 (m, 2 H), 2.91 - 2.97 (m, 2 H), 3.06 (s, 3 H).
LCMS m/z = 398.0 [MH]+
제조예 75
(1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00117
1,4-다이옥산(10 mL) 중의 4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 4, 350 mg, 1.86 mmol), (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴, (제조예 91, 트랜스 이성질체, 581 mg, 1.86 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(2.79 mL)의 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지한 후, 비스(트라이-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(48.0 mg, 0.093 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 2시간 동안 유지한 후, 이어서 여과하였다. 침전물을 Et2O로 세척하고, 건조하였다. 여액을 농축하고, Et2O로 마쇄하고, 여과하고, Et2O로 세척하고, 건조하였다. 2가지 침전물을 합쳐서, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(605 mg, 96%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.05 (d, 1 H), 8.93 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.32 (d, 1 H), 7.61 (d, 1 H), 3.55 - 3.62 (m, 1 H), 3.54 (s, 2 H), 3.24 - 3.32 (m, 2 H), 2.89 - 3.00 (m, 2 H).
LCMS m/z = 338.2 [MH]+
실시예 26
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-메틸-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00118
파트 1
1,4-다이옥산(3.0 mL) 중의 (1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 75, 85 mg, 0.25 mmol), 3-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(제조예 93, 73 mg, 0.25 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(1.0 mL)의 혼합물을 아르곤으로 약 2분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(39.6 mg, 0.050 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 45℃에서 약 45분 동안 가열한 후, 냉각하고, 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(26 mg, 22%)을 수득하고, 파트 2에 직접 사용하였다.
LCMS m/z = 384.3 [MH-THP]+
파트 2
TFA(1 mL)를 DCM(2 mL) 중의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(26 mg, 0.055 mmol)의 용액에 가했다. 이 반응 혼합물을 약 50℃로 약 1시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 톨루엔(각각의 경우 5 mL)으로 2회 농축하였다. 잔사를 이어서 크로마토그래피로 정제하여, 고체를 수득하고, 이를 에터로 추가로 마쇄하여, 표제 화합물을 수득하였다(8 mg, 38%).
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.87 (s, 1 H), 8.66 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.15 (d, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 6.73 (s, 1 H), 3.46 (dd, 1 H), 3.36 (s, 2 H), 3.32 - 3.41 (m, 2 H), 2.98 (dd, 2 H), 2.37 (s, 3 H).
LCMS m/z = 384.4 [MH]+
실시예 27
2-((1s,3r)-1-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00119
1,4-다이옥산(2 mL) 중의 2-((1s,3r)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 82, 100 mg, 0.29 mmol), 및 (3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-일)메탄올(제조예 32, 113 mg, 0.29 mmol)의 용액을 아르곤으로 5분 동안 퍼지하고, 이어서 XPhos Pd G2(45.9 mg, 0.058 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 80℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 생성된 침전물을 여과하고, 1,4-다이옥산 및 Et2O로 세척하고, 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(62 mg, 53%).
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.86 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H), 8.44 (s, 1 H), 8.13 (d, 1 H), 7.21 (d, 1 H), 6.85 (s, 1 H), 4.65 (d, 2 H), 4.05 (사중항, 1 H), 3.27 (s, 3 H), 3.21 (s, 2 H), 2.90 - 2.99 (m, 2 H), 2.67 - 2.76 (m, 2 H).
LCMS m/z = 405.3 [MH]+
실시예 28
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00120
1,4-다이옥산(2 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 39; 1000 mg, 2.92 mmol) 및 (3-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-5-일)메탄올(제조예 32, 1130 mg, 2.92 mmol)의 용액을 아르곤으로 5분 동안 퍼지하고, 이어서 XPhos Pd G2(45.9 mg, 0.058 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 80℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 침전물을 여과하고, 이어서 크로마토그래피로 정제하여, 황백색 고체를 수득하였다. 고체를, 완전히 용해될 때까지, 충분히 비등하는 EtOH 중에서 가열하고, 이어서 약 20℃에서 약 18시간 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 결정질 고체로서 수득하였다(507 mg, 43%).
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 11.48 (br. s.), 8.89 (s), 8.65 (s), 8.46 (s), 8.15 (d), 7.23 (s), 6.87 (s), 4.67 (d), 4.08 (사중항), 3.31 (s), 3.30 (s), 3.15 - 3.25 (m), 2.53 (dd).
LCMS m/z = 405.3 [MH]+
제조예 76
에틸 5-(트라이부틸스탄일)이속사졸-3-카복실레이트
Figure pct00121
TEA(0.69 mL, 4.95 mmol)를 Et2O(10 mL) 중의 에틸 2-클로로-2-(하이드록시이미노)아세테이트(500 mg, 3.30 mmol) 및 에틴일트라이부틸스탄난(1040 mg, 3.30 mmol)의 빙냉 용액에 적가하였다. 이 반응 혼합물을 약 20℃로 가온하고, 약 18시간 동안 유지하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(810 mg, 57%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.80 (s, 1 H), 6.77 - 6.84 (m, 1 H), 4.45 (q, 2 H), 1.51 - 1.63 (m, 6 H), 1.43 (t, 3 H), 1.34 (dq, 6 H), 1.15 - 1.26 (m, 6 H), 0.90 (t, 9 H).
LCMS m/z = 454.2 [MNa]+ (120Sn 동위원소)
제조예 77
에틸 5-(4-(1-((1r,3r)-3-시아노-1-(시아노메틸)사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)이속사졸-3-카복실레이트
Figure pct00122
1,4-다이옥산(3 mL) 중의 (1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 75, 110 mg, 0.33 mmol) 및 에틸 5-(트라이부틸스탄일)이속사졸-3-카복실레이트(제조예 76, 140 mg, 0.33 mmol)의 용액을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 XPhos Pd G2(51.2 mg, 0.065 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 100℃에서 약 5시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다(66 mg, 45%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.44 (s, 1 H), 9.02 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.42 (d, 1 H), 7.65 (d, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 4.44 (q, 2 H), 3.54 - 3.63 (m, 1 H), 3.53 (s, 2 H), 3.26 - 3.36 (m, 2 H), 2.90 - 2.98 (m, 2 H), 1.37 (t, 3 H).
LCMS m/z = 443.3 [MH]+
실시예 29
5-(4-(1-((1r,3r)-3-시아노-1-(시아노메틸)사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)이속사졸-3-카복스아마이드
Figure pct00123
메탄올(3 mL) 중의 에틸 5-(4-(1-((1r,3r)-3-시아노-1-(시아노메틸)사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)이속사졸-3-카복실레이트(제조예 77, 54 mg, 0.12 mmol)의 용액을 메탄올 중 암모니아 기체의 7 M 용액(2 mL, 14 mmol)으로 처리하였다. 이 반응 용기를 단단히 밀봉하고, 이 혼합물을 약 95℃에서 약 18시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 침전물을 여과하고, EtOAc 및 이어서 Et2O로 세척하고, 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(45 mg, 89%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.36 (s, 1 H), 9.01 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H), 8.41 (d, 1 H), 8.21 (br. s, 1 H), 7.91 (br. s, 1 H), 7.64 (d, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 3.55 - 3.62 (m, 1 H), 3.53 (s, 2 H), 3.26 - 3.35 (m, 2 H), 2.90 - 2.98 (m, 2 H).
LCMS m/z = 414.3 [MH]+
제조예 78
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-(다이Boc)-아미노-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00124
1,4-다이옥산(4 mL) 중의 3-브로모-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-5-(다이Boc)-아미노-1H-피라졸(제조예 43, 233 mg, 0.52 mmol), KOAc(162 mg, 1.57 mmol), 및 비스(피나콜레이토)이붕소(199 mg, 0.78 mmol)의 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(82.1 mg, 0.10 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 65℃에서 약 3.5시간 동안 가열하였다. 약 20℃로 냉각한 후, 2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로-부틸)아세토나이트릴(제조예 39, 125 mg, 0.36 mmol), 2 M 수성 K3PO4(0.783 mL) 및 XPhos Pd G2(82.1 mg, 0.10 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 아르곤으로 다시 퍼지하고, 이어서 약 80℃에서 약 1시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 이 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 상들을 분리하였다. 수성 상을 EtOAc로 2회 추출하고, 합친 EtOAc 추출물을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 투명한 오일로서 수득하였다(220 mg, 62%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.08 (s, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.09 (d, 1 H), 6.97 (d, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 5.26 (dd, 1 H), 4.03 - 4.11 (m, 2 H), 3.64 (t, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 3.25 (s, 2 H), 3.11 - 3.19 (m, 2 H), 2.55 - 2.63 (m, 2 H), 2.21 (m, 1 H), 1.93 (dd, 1 H), 1.59 - 1.84 (m, 4 H), 1.45 (s, 18 H).
LCMS m/z = 674.5 [MH]+
실시예 30
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(3-아미노-1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00125
TFA(3 mL)를 DCM(2 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-(6-(5-(다이Boc)-아미노-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 78, 220 mg, 0.33 mmol)의 용액에 약 20℃에서 가했다. 이 온도에서 약 1시간 후, 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 DCM 및 포화된 수성 NaHCO3에 용해시켜, pH가 염기성이 되도록 하였다. 상기 DCM을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하고, 잔사를 크로마토그래피 및 이어서 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(17 mg, 13%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.89 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.54 (s, 1 H), 8.17 - 8.18 (m, 1 H), 7.34 (s, 1 H), 6.22 (s, 1 H), 4.09 - 4.12 (m, 1 H), 3.39 (s, 3 H), 3.22 - 3.27 (m, 2 H), 2.56 - 2.60 (m, 2 H).
LCMS m/z = 390.3 [MH]+
제조예 79
(4-브로모-1-메틸-1H-피라졸-3-일)메탄올
Figure pct00126
나트륨 보로하이드라이드(3.4 g, 90 mmol)를 무수 EtOH(150 mL) 중의 에틸 4-브로모-1-메틸-1H-피라졸-3-카복실레이트(4.2 g, 18 mmol)의 용액에 약 5℃에서 가했다. 이어서, 이 혼합물을 약 50℃에서 약 16시간 동안 가열한 후, EtOAc(100 mL) 및 물(100 mL)을 가했다. 상기 EtOAc를 분리하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(1.05 g, 31%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.84 (s, 1 H), 5.01 (td, 1 H), 4.33 (d, 2 H), 3.77 (s, 3 H).
LCMS m/z = 192.7 [MH]+ (81Br 동위원소)
제조예 80
4-브로모-1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸
Figure pct00127
THF(30 mL) 중의 (4-브로모-1-메틸-1H-피라졸-3-일)메탄올(제조예 79, 1.00 mg, 5.23 mmol)의 용액에, DHP(1.32 g, 15.7 mmol) 및 PTSA(19.9 mg, 0.10 mmol)를 가했다. 이 용액을 약 50℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(1.02 g, 71%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.36 (s, 1 H), 4.80 (t, 1 H), 4.73 (d, 1 H), 4.45 (d, 1 H), 3.95 - 4.03 (m, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 3.53 - 3.64 (m, 1 H), 1.78 - 1.93 (m, 1 H), 1.60 - 1.77 (m, 3 H), 1.45 - 1.60 (m, 2 H).
LCMS m/z = 174.6 [MH-THP]+
제조예 81
1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00128
DMF(12 mL) 중의 4-브로모-1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸(제조예 80, 330 mg, 1.20 mmol)의 용액에, 비스(피나콜레이토)이붕소(457 mg, 1.8 mmol) 및 KOAc(353 mg, 3.6 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 2분 동안 퍼지한 후, Pd(dppf)Cl2(87.8 mg, 0.12 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 90℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 혼합물을 셀라이트(등록상표)의 패드를 통해 여과하고, 필터를 메탄올(15 mL)로 세척하였다. 여액을 농축하여, 불순한 표제 화합물(1.17 g)을 어두운색 검으로서 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 실시예 31의 다음 단계에 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.61 (s, 1 H), 4.75 - 4.77 (m, 1 H), 4.50 - 4.57 (m, 2 H), 4.03 - 4.10 (m, 1 H), 3.91 - 3.98 (m, 1 H), 3.89 (s, 3 H), 1.81 - 1.90 (m, 1 H), 1.61 - 1.76 (m, 3 H), 1.49 - 1.56 (m, 2 H), 1.30 (s, 12 H).
LCMS m/z = 239.1 [MH-THP]+
실시예 31
2-((1r,3s)-1-(4-(6-(3-(하이드록시메틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00129
파트 1
1,4-다이옥산(2.5 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시-사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 39, 80 mg, 0.23 mmol), 1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(제조예 81, 376 mg, 1.17 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(0.35 mL)의 혼합물을 XPhos Pd G2(18.4 mg, 0.023 mmol)로 처리하고, 이 혼합물을 질소로 퍼지하였다. 이 혼합물을 약 60℃에서 약 20시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 검으로서 수득하였다. 이 샘플을, 1,4-다이옥산(3.5 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 39, 120 mg, 0.35 mmol), 1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(제조예 81, 564 mg, 1.75 mmol), 2 M 수성 K3PO4(0.525 mL), 및 XPhos Pd G2(13.8 mg, 0.023 mmol)를 사용하여 수행된 등가 반응으로부터의 생성물과 합쳐, (1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(6-(1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴을 150 mg(51%)의 총 수율로 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 파트 2에 사용하였다.
파트 2
TFA(1 mL)를 DCM(3 mL) 중의 2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(6-(1-메틸-3-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(파트 1, 150 mg, 0.30 mmol)의 빙냉 용액에 가했다. 이 혼합물을 얼음 중에서 약 2시간 동안 냉각하면서 교반하고, 이어서 농축하였다. 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다(53 mg, 38%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 8.87 (s, 1 H), 8.69 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 8.13 (d, 1 H), 7.28 (d, 1 H), 4.83 (s, 2 H), 4.05 - 4.14 (m, 1 H), 3.96 (s, 3 H), 3.37 (s, 2 H), 3.34 (s, 3 H), 3.18 - 3.27 (m, 2 H), 2.53 - 2.62 (m, 2 H).
LCMS m/z = 419.1 [MH]+
제조예 82
2-((1s,3r)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
Figure pct00130
파트 1
톨루엔(9 mL) 중의 2-((1s,3r)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 37, 시스 이성질체, 400 mg, 1.48 mmol)의 용액에, 비스(피나콜레이토)이붕소(564 mg, 2.22 mmol) 및 KOAc(436 mg, 4.44 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소로 약 3분 동안 퍼지한 후, Pd(dppf)Cl2(108 mg, 0.15 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 다시 질소로 약 3분 동안 퍼지하고, 이어서 약 110℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 불순한 2-((1s,3r)-3-메톡시-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(500 mg)을 연황색 오일로서 수득하고, 이를 파트 2에 사용하였다.
파트 2
1,4-다이옥산(10 mL) 중의 2-((1s,3r)-3-메톡시-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(파트 1, 470 mg, 1.48 mmol) 및 4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 4, 279 mg, 1.48 mmol), 및 2 M 수성 K2CO3(2.22 mL)의 용액을 질소로 약 2분 동안 퍼지한 후, Pd(dppf)Cl2(108 mg, 0.15 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 다시 질소로 약 3분 동안 퍼지하고, 이어서 약 90℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(130 mg, 26%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.40 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.27 (s, 1 H), 8.08 (d, 1 H), 7.00 (s, 1 H), 4.05 (사중항, 1 H), 3.30 (s, 3 H), 3.10 (s, 2 H), 3.00 (m, 2 H), 2.75 (m, 2 H).
LCMS m/z = 343.2 [MH]+ (35Cl 동위원소)
제조예 83
에틸 5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00131
1,4-다이옥산(5 mL) 중의 2-((1s,3r)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 82, 120 mg, 0.35 mmol) 및 에틸 5-(트라이부틸스탄일)-1H-피라졸-3-카복실레이트(제조예 31, 150 mg, 0.35 mmol)의 용액을 XPhos Pd G2(13.8 mg, 0.017 mmol)로 처리하고, 이 혼합물을 질소로 약 2분 동안 퍼지하였다. 이 혼합물을 약 110℃에서 약 2시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(180 mg).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.05 (br. s., 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.02 (s, 1 H), 6.88 (s, 1 H), 4.44 - 4.50 (m, 2 H), 4.08 (t, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.13 (s, 2 H), 3.00 - 3.08 (m, 2 H), 2.75 - 2.83 (m, 2 H), 1.46 (t, 3 H).
LCMS m/z = 447.1 [MH]+
실시예 32
5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복스아마이드
Figure pct00132
MeOH(2 mL) 중의 에틸 5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복실레이트(제조예 83, 100 mg, 0.22 mmol)의 용액을, 메탄올 중 암모니아 기체의 4 M 용액(1 mL)으로 처리하였다. 이 반응 용기를 단단히 밀봉하고, 이 혼합물을 약 60℃에서 약 16시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(23 mg, 25%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 13.79 (br. s., 1 H), 9.31 (br. s., 1 H), 9.00 (br. s., 1 H), 8.67 (br. s., 1 H), 8.28 (d, 1 H), 7.56 (br. s., 2 H), 7.39 (br. s., 1 H), 7.25 - 7.35 (m, 1 H), 4.08 (사중항, 1 H), 3.44 (s, 2 H), 3.21 (s, 3 H), 2.79 - 2.90 (m, 2 H), 2.63 - 2.73 (m, 3 H).
LCMS m/z = 440.1 [MNa]+
제조예 84
2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-2H-1,2,3-트라이아졸
Figure pct00133
DCM(724 mL) 중의 1H-1,2,3-트라이아졸(15 g, 220 mmol)의 혼합물에, DHP(21.9 g, 261 mmol) 및 PTSA(0.374 g, 2.17 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 18시간 동안 유지한 후, NaOH(96 mg, 2.39 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 1시간 동안 교반하고, 이어서 여과하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(18 g, 54%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.68 (s, 2 H), 5.74 (dd, 1 H), 4.00 - 4.08 (m, 1 H), 3.69 - 3.81 (m, 1 H), 2.36 - 2.51 (m, 1 H), 2.02 - 2.20 (m, 2 H), 1.61 - 1.81 (m, 3 H).
제조예 85
2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2H-1,2,3-트라이아졸
Figure pct00134
펜탄(200 mL) 중의 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(24 g, 129 mmol)의 용액에, 4,4'-다이-3급-부틸-2,2'-바이피리딘(0.315 g, 1.18 mmol) 및 (1,5-사이클로옥타다이엔)(메톡시)이리듐(I) 이량체(234 mg, 0.35 mmol)를 가했다. 이 용액은 신속히 적색이 되었고, 기체 발생이 관찰되었다. 약 15분 후, 2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-2H-1,2,3-트라이아졸(제조예 84, 18 g, 117 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 6시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 고체로서 수득하였다(26 g, 79%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.99 (s, 1 H), 5.81 (dd, 1 H), 4.07 (d, 1 H), 3.67 - 3.78 (m, 1 H), 2.41 - 2.55 (m, 1 H), 2.02 - 2.16 (m, 2 H), 1.60 - 1.80 (m, 3 H), 1.37 (s, 12 H).
LCMS m/z = 113.9 [MH-C2H2N]+
제조예 86
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-2H-1,2,3-트라이아졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00135
1,4-다이옥산(4 mL) 중의 (1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 75, 300 mg, 0.89 mmol), 2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-2H-1,2,3-트라이아졸(제조예 85, 248 mg, 0.89 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(1 mL)의 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지한 후, XPhos Pd G2(140 mg, 0.18 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 50℃에서 약 1시간 동안 교반하고, 이어서 냉각하고, EtOAc로 희석하였다. 상들을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 EtOAc 및 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 투명한 검으로서 수득하였다(384 mg, 95%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.02 (s, 1 H), 8.41 (s, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.13 (d, 1 H), 7.00 (d, 1 H), 5.81 (dd, 1 H), 4.06 - 4.12 (m, 1 H), 3.77 - 3.87 (m, 1 H), 3.35 - 3.47 (m, 3 H), 3.30 (s, 2 H), 2.95 - 3.04 (m, 2 H), 2.45 - 2.59 (m, 1 H), 2.12 - 2.24 (m, 2 H), 1.69 - 1.87 (m, 3 H).
LCMS m/z = 455.3 [MH]+
제조예 87
(1r,3r)-3-(4-(6-(2H-1,2,3-트라이아졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00136
MeOH(5 mL) 중의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-2H-1,2,3-트라이아졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 86, 384 mg, 0.84 mmol)의 현탁액을 PTSA(16.1 mg, 0.084 mmol)로 처리하였다. 이 혼합물을 약 60℃에서 약 3.5시간 동안 가열하였다. 고체를 용해시켜 균질 용액을 형성한 후, 백색 고체가 침전되었다. 추가로 약 1시간 동안 계속 가열하였다. 이 혼합물을 약 0℃로 약 30분 동안 냉각시키고, 여과하였다. 침전물을 MeOH로 세척하고, 진공 하에 건조하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(204 mg, 65%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.05 (s, 1 H), 8.97 (s, 1 H), 8.72 (br. s., 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 7.56 (s, 1 H), 3.55 - 3.62 (m, 1 H), 3.53 (s, 2 H), 3.22 - 3.30 (m, 2 H), 2.89 - 3.00 (m, 2 H).
LCMS m/z = 371.3 [MH]+
실시예 33
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00137
DMF(1 mL) 중의 (1r,3r)-3-(4-(6-(2H-1,2,3-트라이아졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 87, 100 mg, 0.27 mmol) 및 K2CO3(75 mg, 0.54 mmol)의 혼합물에, 요오도메탄(0.034 mL, 0.540 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 2시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM으로 2회 세척하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피 및 이어서 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(40 mg, 39%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.19 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.15 (d, 1 H), 7.03 (s, 1 H), 4.22 (s, 3 H), 3.35 - 3.46 (m, 3 H), 3.30 (s, 2 H), 2.99 (d, 2 H).
LCMS m/z = 385.4 [MH]+
실시예 34
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-1-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00138
; 및
실시예 35
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-1-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00139
DBU(327 mg, 2.15 mmol)를 MeCN(15 mL) 중의 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-(1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 53, 190 mg, 0.72 mmol) 및 3-(시아노메틸렌)-1-메틸사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 89, 142 mg, 1.07 mmol)의 용액에 가하고, 이 혼합물을 약 50℃에서 약 4시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 잔사를 수득하고, 이를 추가로 TLC로 정제하여, 2가지 표제 화합물의 혼합물(200 mg, 70%)을 갈색 고체로서 수득하였다. 이 이성질체들의 혼합물을 HPLC로 분리하여, 하기를 수득하였다:
연분홍색 고체로서의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-1-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(트랜스 이성질체, 24 mg 8%):
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.36 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.26 - 8.31 (m, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 7.79 (d, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 6.87 (d, 1 H), 3.66 (s, 3 H), 3.10 (s, 2 H), 2.80 - 2.92 (m, 4 H), 1.25 (s, 3 H);
LCMS m/z = 398.0 [MH]+ 및 420.0 [MNa]+; 및
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-1-메틸-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(시스 이성질체, 24 mg, 8%):
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ: 8.68 (s, 1 H), 8.63 (s, 1 H), 8.44 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 8.05 (d, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.15 (d, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.47 - 3.55 (m, 2 H), 3.19 (s, 2 H), 2.74 - 2.82 (m, 2 H), 1.63 (s, 3 H).
LCMS m/z = 398.0 [MH]+ 및 419.9 [MNa]+
제조예 88
1-메틸-3-옥소사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00140
파트 1
THF(30 mL) 중의 다이이소프로필아민(1.30 g, 12.9 mmol)의 용액에, 2.5 M n-BuLi(5.15 mL)를 약 0℃에서 가했다. 이 용액을 약 0℃에서 약 30분 동안 교반한 후, 약 -78℃로 냉각하였다. 3-메틸렌사이클로부탄-1-카보나이트릴(1.00 g, 10.74 mmol)을 가하고, 이 용액을 약 -78℃에서 약 1시간 동안 교반하였다. 이 용액에 요오도메탄(1.98 g, 14.0 mmol)을 약 -78℃에서 가하고, 이어서 이 혼합물을 약 20℃로 가온하고, 이 온도에서 약 0.5시간 동안 유지하였다. 여기에, 포화된 수성 NH4Cl(30 mL)을 가하고, 이 혼합물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 농축하여, 1-메틸-3-메틸렌사이클로부탄-1-카보나이트릴을 연황색 오일로서 수득하였다(1.1 g, 96%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 4.90 - 4.98 (m, 2 H), 3.23 - 3.35 (m, 2 H), 2.64 - 2.75 (m, 2 H), 1.55 (s, 3 H).
파트 2
DCM(20 mL), MeCN(20 mL) 및 물(40 mL)의 혼합물 중의 1-메틸-3-메틸렌사이클로부탄-1-카보나이트릴(1.10 g, 10.3 mmol) 및 RuCl3 수화물(50.9 mg, 0.23 mmol)의 혼합물에, NaIO4(8.78 g, 41.1 mmol)를 소분획들로 나누어 약 5℃에서 가했다. 이어서, 이 혼합물을 약 25℃에서 약 17시간 동안 교반하였다. 수성 상을 분리하고, DCM(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 상기 DCM 추출물을 DCM-MeCN 상과 합치고, 건조하고(Na2SO4), 이어서 약 10 g의 실리카 겔을 통해 여과시켰다. 상기 실리카 겔을 DCM(50 mL)으로 세척하였다. 여액을 농축하여, 표제 화합물을 갈색 오일로서 수득하였다(0.80 g, 71%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 3.71 (m, 2 H), 3.14 (m, 2 H), 1.71 (s, 3 H).
제조예 89
3-(시아노메틸렌)-1-메틸사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00141
THF(20 mL) 중의 1-메틸-3-옥소사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 88, 0.80 g, 7.0 mmol), (EtO)2P(O)CH2CN(1.43 g, 8.06 mmol), LiBr(0.955 g, 11.0 mmol) 및 TEA(1.48 g, 14.7 mmol)의 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 여기에 물(30 mL)을 가하고, 이 혼합물을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(0.65 g, 70%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.34 (m, 1 H), 3.47 (m, 2 H), 2.98 (m, 2 H), 1.60 (s, 3 H).
GCMS m/z = 131 [M-H]+
제조예 90
2-(3-메톡시사이클로부틸리덴)아세토나이트릴
Figure pct00142
파트 1
12개의 동일한 반응을 하기와 같이 병행으로 수행하였다:
각각의 반응에 대해, 100 mL의 밀봉된 튜브에, 메톡시에텐(37 g, 637 mmol), DIPEA(9.88 g, 76.4 mmol), 및 아세틸 클로라이드(5 g, 60 mmol)를 약 -30℃에서 투입하였다. 이어서, 이 혼합물을 약 70℃에서 약 5시간 동안 가열하였다. 12개의 반응물들을 합치고, 1 M 수성 HCl(2 x 100 mL) 및 포화된 수성 NaHCO3(2 x 100 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하여, 3-메톡시사이클로부탄-1-온의 조질 시편을 흑색 오일로서 수득하였다(27 g, 37%). 이 물질은, 1H NMR로 판단시 약 50% 순수하였으며, 이를 추가의 정제 없이 파트 2에 사용하였다.
파트 2
2개의 동일한 반응을 병행으로 수행하였다.
THF(200 mL) 중의 LiBr(13.4 g, 154 mmol) 및 TEA(39 mL, 280 mmol)의 혼합물에, (EtO)2P(O)CH2CN(26 g, 147 mmol)을 약 0℃에서 가했다. 약 25℃에서 약 2시간 동안 계속 교반하였다. 이 혼합물에, THF(40 mL) 중의, 파트 1에서 제조된 3-메톡시사이클로부탄-1-온(13 g, 약 70 mmol)의 용액을 약 0℃에서 가했다. 이어서, 이 혼합물을 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 이 2개의 반응 혼합물을 합치고, 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 오일로서 수득하였다(9.2 g, 56%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.25 (m, 1 H), 4.05 (m, 1 H), 3.30 (s, 3 H), 3.25 (m,1 H), 3.10 (m, 1 H), 2.85 (m, 2 H).
LCMS m/z = 124.08 [MH]+
제조예 91
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00143
; 및
(1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
(시스 이성질체)
Figure pct00144
MeCN(43 L) 중의 4-(4,4,5,5,-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.3 kg, 6.67 mol)의 용액에 3-시아노메틸렌)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 27, 953 g, 8 mol) 및 DBU(3.06 kg, 20.1 mol)를 약 20℃에서 가했다. 약 20℃에서 약 16시간 동안 계속 교반하였다. 이 혼합물을 1 M 수성 KH2PO4(10 L)에 붓고, EtOAc(5 x 5 L)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 하기를 수득하였다:
백색 고체로서의 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(트랜스 이성질체, 610 g, 30%):
융점: 137 - 140℃;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.90 (s, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 3.21 - 3.28 (m, 3 H), 3.19 (s, 2 H), 2.86 - 2.94 (m, 2 H), 1.33 (s, 12 H);
13C NMR (101 MHz, CD3OD) δ: 147.54, 136.49, 122.49, 117.11, 84.96, 61.93, 37.52, 30.47, 25.28, 25.18, 17.21;
LCMS m/z = 313.1 [MH]+; 및
황백색 고체로서의 (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(시스 이성질체, 250 g, 12%):
융점: 95 - 98℃;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.86 (s, 2 H), 3.24 - 3.31 (m, 1 H), 3.13 - 3.21 (m, 2 H), 3.07 (s, 2 H), 2.96 - 3.04 (m, 2 H), 1.34 (s, 12 H);
13C NMR (101 MHz, CD3OD) δ: 147.43, 135.94, 121.94, 117.37, 84.98, 75.96, 60.10, 37.95, 28.42, 25.29, 16.16;
LCMS m/z = 313.1 [MH]+.
제조예 92
5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00145
; 및
3-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00146
3-메틸피라졸(1.00 g, 12.18 mmol), DHP(1.54 g, 18.3 mmol) 및 TFA(0.007 mL, 0.089 mmol)의 혼합물을 약 85℃에서 약 4시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 약 20℃로 냉각하고, NaH(오일 중 60%, 20 mg, 0.5 mmol)를 가했다. 약 20℃에서 약 18시간 동안 계속 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 하기를 수득하였다:
오일로서의 5-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(400 mg, 20%):
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.45 (d, 1 H), 6.05 (d, 1 H), 5.24 - 5.30 (m, 1 H), 4.00 - 4.08 (m, 1 H), 3.61 - 3.70 (m, 1 H), 2.41 - 2.55 (m, 1 H), 2.35 (s, 3 H), 2.08 - 2.18 (m, 1 H), 1.93 - 2.02 (m, 1 H), 1.65 - 1.77 (m, 2 H), 1.55 - 1.64 (m, 1 H);
GCMS m/z = 166.1 [M]+; 및
오일로서의 3-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(352 mg, 15%):
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.48 (d, 1 H), 6.08 (d, 1 H), 5.29 (dd, 1 H), 4.08 (dt, 1 H), 3.64 - 3.74 (m, 1 H), 2.30 (s, 3 H), 2.07 - 2.18 (m, 1 H), 1.98 - 2.07 (m, 2 H), 1.64 - 1.77 (m, 3 H);
GCMS m/z = 166.1 [M]+.
제조예 93
3-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00147
헥산 중 n-BuLi의 2.5 M 용액(0.44 mL, 1.10 mmol)을 THF(2 mL) 중의 3-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(제조예 92, 200 mg, 1.10 mmol)의 용액에 약 -70℃에서 가했다. 이 혼합물을 이 온도에서 약 10분 동안 교반한 후, 2-이소프로폭시-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(214 mg, 1.15 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 -70℃에서 약 1시간 이상 동안 유지하고, 이어서 약 20℃로 가온하고, 농축하여, 약 65%의 미반응된 3-메틸-1-(테트라하이드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸과 혼합된 표제 화합물을 수득하였다. 이 혼합물을 추가의 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.51 (s, 1 H), 5.76 (dd, 1 H), 4.01 - 4.12 (m, 1 H), 3.59 - 3.74 (m, 1 H), 2.37 - 2.51 (m, 2 H), 2.29 (s, 3 H), 1.97 - 2.18 (m, 1 H), 1.62 - 1.76 (m, 2 H), 1.47 - 1.62 (m, 1 H), 1.33 (s, 12 H).
GCMS m/z = 292.2 [M]+
제조예 94
3-(벤질옥시)-N-메톡시-N-메틸사이클로부탄카복스아마이드
Figure pct00148
DCM(1.5 L) 중의 3-(벤질옥시)사이클로부탄카복실산(324 g, 1.57 mol)의 용액에, CDI(280 g, 1.73 mol)를 분획들로 나누어 가했다. 이 혼합물을 약 2시간 동안 가열 환류시킨 후, N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(183.7 g, 1.88 mol) 및 TEA(261 mL, 1.88 mol)를 가했다. 이 혼합물을 약 3시간 동안 추가로 가열 환류시키고, 이어서 약 25℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 상기 DCM을 포화된 수성 K2CO3로 세척하고, 건조하고(K2CO3), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(298 g, 76%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.24-7.38 (m, 5 H), 4.37 (s, 2 H), 4.06 - 4.15 (m, 1 H), 3.61 (s, 3 H), 3.09 (s, 3 H), 2.96 (s, 1 H), 2.30 - 2.40 (m, 2 H), 2.09 - 2.22 (m, 1 H), 1.95 - 2.07 (m, 1 H).
제조예 95
1-[3-(벤질옥시)사이클로부틸]에탄온
Figure pct00149
THF(1.5 L) 중의 3-(벤질옥시)-N-메톡시-N-메틸사이클로부탄카복스아마이드(제조예 94, 298 g, 1.2 mol)의 용액에, 메틸마그네슘 브로마이드(1.3 mol)의 용액을 약 -20℃에서 적가하였다. 메틸마그네슘 브로마이드의 첨가가 완료된 후, 냉각 욕을 제거하고, 이 혼합물을 약 25℃로 가온하였다. 이어서, 0.5 M 수성 HCl(2.5 L)을 가하고, 이 혼합물을 Et2O(1 L + 500 mL)로 추출하였다. 합친 Et2O 추출물을 물로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(194 g, 79%)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.24 - 7.38 (m, 5 H), 4.35 (s, 2 H), 3.90 - 3.99 (m, 0.5 H), 3.16 - 3.24 (m, 0.5 H), 2.75 - 2.87 (m, 1 H), 2.31 - 2.40 (m, 2 H), 2.06 - 2.15 (m, 1 H), 2.04 (s, 1.5 H), 1.99 (s, 1.5 H), 1.87 - 1.97 (m, 1 H).
제조예 96
1-[3-(벤질옥시)사이클로부틸]-3-(다이메틸아미노)프로프-2-엔-1-온
Figure pct00150
DMF(500 mL) 중의 1-[3-(벤질옥시)사이클로부틸]에탄온(제조예 95, 194 g, 0.95 mol)의 용액에, 다이메틸폼아마이드 다이메틸 아세탈(285 g, 2.4 mol)을 가했다. 이 혼합물을 약 110℃에서 약 12시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하여, 표제 화합물을 수득하고, 이를 정제 또는 추가의 특성분석 없이 사용하였다.
제조예 97
5-[3-(벤질옥시)사이클로부틸]-1H-피라졸
Figure pct00151
MeOH(500 mL) 중의 1-[3-(벤질옥시)사이클로부틸]-3-(다이메틸아미노)프로프-2-엔-1-온(제조예 96, 110 g, 0.42 mol)의 용액에, 하이드라진 수화물(30 g, 0.6 mol)을 가했다. 이 혼합물을 약 12시간 동안 가열 환류시키고, 이어서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(79 g, 82%)을 수득하고, 이를 정제 또는 추가의 특성분석 없이 사용하였다.
제조예 98
3-(1H-피라졸-5-일)사이클로부탄올
Figure pct00152
2 L의 수소화 플라스크 중에서, 메탄올(800 mL) 중의 5-[3-(벤질옥시)사이클로부틸]-1H-피라졸(제조예 97, 79 g, 0.35 mol)의 용액에, 탄소 상 팔라듐(10% Pd, 16 g)을 가했다. 이 혼합물을 수소(30 psi) 하에 가압하고, 이 혼합물을 약 60℃에서 약 12시간 동안 진탕하였다. 추가의 탄소 상 팔라듐(10% Pd, 16 g)을 가하고, 약 10시간 계속 수소화시켰다. 이 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(46 g, 96%)을 수득하고, 이를 정제 또는 추가의 특성분석 없이 사용하였다.
제조예 99
3-(1H-피라졸-5-일)사이클로부탄-1-온
Figure pct00153
DCM(50 mL) 중의 옥살릴 클로라이드(7.8 mL, 0.09 mol)의 용액에, 약 -78℃에서 DCM(50 mL) 중의 DMSO(12.7 mL, 0.18 mol)의 용액을 적가하였다. 이 혼합물을 약 30분 동안 교반하고, 이어서 이 온도에서 3-(1H-피라졸-5-일)사이클로부탄올(제조예 98, 13.7 g, 0.09 mol)을 적가하였다. 생성 혼합물을 약 30분 동안 유지한 후, 약 30분 동안 유지한 후, TEA(25 mL, 0.18 mol)를 적가하였다. 냉각 욕을 제거하고, 이 혼합물을 약 25℃로 가온하고, 이 온도에서 약 3시간 동안 유지하였다. 이어서, K2CO3 수용액(100 mL)을 가했다. 상기 DCM을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 추출하였다. 합친 DCM 추출물을 물로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(7.4 g, 55%)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.56 (s, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 6.21 (d, 1 H), 3.46 - 3.68 (m, 1 H), 3.37 - 3.46 (m, 2 H), 3.15 - 3.25 (m, 2 H).
LCMS m/z = 137.1 [MH]+
제조예 100
2-((1r,3s)-1-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00154
파트 1
1,4-다이옥산(33 mL) 중의 2-((1r,3s)-1-(4-브로모-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴(제조예 37, 트랜스 이성질체, 3399 mg, 12.58 mmol)의 용액에, 비스(피나콜레이토)이붕소(3510 mg, 13.8 mmol) 및 KOAc(3700 mg, 37.7 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지하고, 약 30분 동안 유지한 후, XPhos Pd G2(1980 mg, 2.52 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 65℃에서 약 4시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하였다. 생성물을 EtOAc(10 mL)와 함께 약 25℃에서 교반하고, 이어서 헵탄(40 mL)을 가하고, 약 30분 동안 결정화가 일어나도록 하고, 침전물을 여과하고, 건조하여, 2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴을 백색 고체로서 수득하였다(1950 mg, 49%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.91 (s, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 3.98 (tt, 1 H), 3.29 (s, 3 H), 3.17 (s, 2 H), 2.97 - 3.07 (m, 2 H), 2.44 - 2.53 (m, 2 H), 1.33 (s, 12 H).
LCMS m/z = 318.0 [MH]+
파트 2
1,4-다이옥산(25 mL) 중의 2-((1r,3s)-3-메톡시-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부틸)아세토나이트릴(파트 1, 1950 mg, 6.15 mmol), 4,6-다이클로로피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 4, 1160 mg, 6.15 mmol), 및 2 M 수성 K3PO4(9.22 mL)의 용액을 아르곤으로 약 5분 동안 퍼지한 후, 비스(트라이-t-부틸포스핀)팔라듐(0)(157 mg, 0.31 mmol)을 가했다. 이 혼합물을 약 25℃에서 약 2시간 동안 교반하였다. 냉각시킨 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 상들을 분리하였다. 수성 상을 DCM으로 2회 추출하였다. 합친 EtOAc 및 DCM 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 DCM에 용해시키고(20 mL), 모두 용해될 때까지 약 40℃에서 가열하고, 이어서 헵탄(10 mL)을 가하고, 약 30분 동안 결정화가 일어나도록 하고, 침전물을 여과하고, 건조하여, 표제 화합물을 황백색 고체로서 수득하였다(1120 mg, 53%). 여액을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 추가로 표제 화합물(640 mg, 30%)을 수득하였다.
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.39 (d, 1 H), 8.38 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 8.08 (d, 1 H), 7.03 (dd, 1 H), 4.03 - 4.10 (m, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 3.25 (s, 2 H), 3.08 - 3.16 (m, 2 H), 2.53 - 2.60 (m, 2 H).
LCMS m/z = 343.3 [MH]+ (35Cl 동위원소)
제조예 101
에틸 5-메틸-1-(2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3-카복실레이트
Figure pct00155
에틸 3-메틸-1H-피라졸-5-카복실레이트(92 mg, 0.6 mmol), 2-브로모-1-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(제조예 6, 134 mg, 0.66mmol) 및 K2CO3(104 mg, 0.75 mmol)를 MeCN( 2 mL) 중에 합치고, 이 현탁액을 약 40℃에서 약 16시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 여액을 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다(125 mg, 5.5%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.86 (s, 2 H), 6.73 (s, 1 H), 5.65 (s, 2 H), 4.26 (q, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 2.32 (s, 3 H), 1.31 (t, 3 H).
LCMS m/z = 277.1 [MH]+
제조예 102
2-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-올
Figure pct00156
EtOH(5 mL) 중의 에틸 5-메틸-1-(2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-1H-피라졸-3-카복실레이트(제조예 101, 125 mg, 0.45 mmol)의 용액에, NH4OAc(105 mg, 1.06 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 마이크로파 조사 하에 약 105℃에서 약 4시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 EtOH에 용해시키고, 다시 농축하여, 표제 화합물을 수득하였다(110 mg, 85%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.25 (s, 1 H), 8.01 (s, 1 H), 7.97 (s, 1 H), 6.76 (s, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 2.34 (s, 3 H).
LCMS m/z = 230.0 [MH]+
제조예 103
4-클로로-2-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진
Figure pct00157
2-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-올(제조예 102)을 POCl3에 현탁시키고, 약 120℃에서 약 6시간 동안 가열하였다. 이 용액을 농축하여, 표제 화합물의 불순한 샘플을 수득하고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
LCMS m/z = 248.0 [MH]+ (35Cl 동위원소)
실시예 36
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(2-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
(트랜스 이성질체)
Figure pct00158
조질 4-클로로-2-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진(제조예 103, 100 mg, 0.40 mmol), (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 91, 132 mg, 0.42 mmol), Pd(dppf)Cl2·DCM(16.5 mg, 0.02 mmol), 및 K2CO3(167 mg, 1.21 mmol)의 혼합물을 1,4-다이옥산(2.5 mL) 및 물(0.5 mL)의 혼합물 중에 합쳤다. 이 혼합물을 질소로 약 5분 동안 퍼지하고, 이어서 약 90℃에서 약 3시간 동안 가열하였다 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 크로마토그래피 및 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다(5.6 mg, 2단계에 걸쳐 3%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.37 (s, 1 H), 8.33 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 6.68 (s, 1 H), 3.99 (s, 3 H), 3.32 - 3.42 (m, 3 H), 3.27 (s, 2 H), 2.93 - 3.02 (m, 2 H), 2.56 (s, 3 H).
LCMS m/z = 398.0 [MH]+
제조예 104
3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-1H-피라졸
Figure pct00159
100 mL 환저 플라스크에, 1-메틸-1H-피라졸-3-올(1.40 g, 14.3 mmol), DMF(30 mL), 및 K2CO3(3.94 g, 28.5 mmol)를 가했다. 마지막으로, 이 혼합물에 4-메톡시벤질 클로라이드(2.32 mL, 17.1 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 약 60℃에서 약 8시간 동안 가열하였다. 이어서, 이 혼합물을 물(80 mL)로 희석하고, EtOAc(60 mL x 3)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 염수(60 mL x 2)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다(2.6 g, 83%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.38 (d, 2 H), 7.13 (d, 1 H), 6.91 (d, 2 H), 5.64 (d, 1 H), 5.11 (s, 2 H), 3.82 (s, 3 H), 3.76 (s, 3 H).
LCMS m/z = 218.9 [MH]+
제조예 105
4-요오도-3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-1H-피라졸
Figure pct00160
100 mL 환저 플라스크에, 3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-1H-피라졸(제조예 104, 1.0 g, 4.58 mmol) 및 MeCN(20 mL)을 가하고, 약 30분 동안 유지한 후, 이 혼합물에 세륨 암모늄 나이트레이트(1.51 g, 2.75 mmol) 및 요오드(698 mg, 2.75 mmol)를 가했다. 이 갈색 혼합물을 약 20℃에서 약 1시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 5% 수성 나트륨 바이설파이트(50 mL)로 켄칭하고, EtOAc(40 mL x 3)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 녹색 오일로서 수득하였다.
(800 mg, 51%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.40 (d, 2 H), 7.19 (s, 1 H), 6.91 (d, 2 H), 5.18 (s, 2 H), 3.82 (s, 3 H), 3.77 (s, 3 H).
제조예 106
3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸
Figure pct00161
100 mL 환저 플라스크에, 4-요오도-3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-1H-피라졸(제조예 105, 800 mg, 2.32 mmol) 및 THF(16 mL)를 가하고, 이어서 이 혼합물에 이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 1.3 M, 2.15 mL, 2.79 mmol)를 약 -10℃에서 적가하였다. 이 혼합물을 약 -18℃ 내지 10℃의 온도에서 약 45분 동안 교반하였다. 이 혼합물에, 2-이소프로폭시-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(649 mg, 3.49 mmol)을 약 -10℃에서 가하고, 이 혼합물을 약 15℃로 약 1.5시간 동안 가온하였다. 이 혼합물에, 추가로 이소프로필마그네슘 클로라이드(THF 중 1.3 M, 0.72 mL, 0.93 mmol) 및 2-이소프로폭시-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란(216 mg, 1.16 mmol)을 약 -15℃에서 가했다. 이 혼합물을 약 15℃로 약 1시간 동안 가온하였다. 이 혼합물을 EtOAc로 희석하고(40 mL), 포화된 수성 NH4Cl(30 mL) 및 염수(30 mL)로 세척하고, 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다(600 mg, 75%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.40 - 7.45 (m, 3 H), 6.88 (d, 2 H), 5.24 (s, 2 H), 3.81 (s, 3 H), 3.73 (s, 3 H), 1.31 (s, 12 H).
LCMS m/z = 345.1 [MH]+
제조예 107
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
Figure pct00162
25 mL 환저 플라스크에, (1r,3r)-3-(4-(6-클로로피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 75, 300 mg, 0.88 mmol), 3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(제조예 106, 367 mg, 1.07 mmol), 다이옥산(16 mL), XPhos Pd G2(140 mg, 0.178 mmol) 및 2 M 수성 K3PO4(3.55 mL, 7.11 mmol)를 가했다. 이 혼합물을 질소 하에 두고, 이어서 약 60℃에서 약 4시간 동안 가열하였다. 이 혼합물을 물(70 mL)로 희석하고, EtOAc(50 mL x 3)로 추출하였다. 합친 EtOAc 추출물을 건조하고(Na2SO4), 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(450 mg, 98%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.92 (s, 1 H), 8.57 (s, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 8.16 (d, 1 H), 7.50 (d, 2 H), 7.45 (s, 1 H), 7.00 (d, 2 H), 5.29 (s, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 3.82 (s, 3 H), 3.55 - 3.59 (m, 1 H), 3.52 (s, 2 H), 3.25 - 3.32 (m, 2 H), 2.94 (dd, 2 H).
LCMS m/z = 542.1 [MNa]+
실시예 37
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(트랜스 이성질체)
Figure pct00163
(1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(3-((4-메톡시벤질)옥시)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(제조예 107, 450 mg, 0.86 mmol) 및 TFA(13 mL)를 약 10℃에서 약 4시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 농축하고, 잔사를 DCM(40 mL) 및 MeOH(40 mL)로 희석하고, 고체 NaHCO3로 중화시켰다. 이 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하고, 잔사를 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다(54 mg, 16%).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 10.76 (br. s., 1 H), 8.92 (s, 1 H), 8.71 (s, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.18 (d, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.45 (d, 1 H), 3.73 (s, 3 H), 3.55 - 3.62 (m, 1 H), 3.53 (s, 2 H), 3.25 - 3.33 (m, 2 H), 2.90 - 2.99 (m, 2 H).
LCMS m/z = 400.1 [MH]+
생물학적 평가
본 발명의 화합물들을 시험관내 방법으로 평가하여, JAK 키나아제(TYK2, JAK1, JAK2, JAK3)를 억제하는 이들 각각의 능력을 결정하였다.
분석 포맷
마이크로유체 분석을 사용하여 인간 JAK 억제 활성을 결정하여, JAK 계열의 4개의 일원(JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2) 각각의 재조합 인간 키나아제 도메인에 의한 합성 펩타이드의 인산화를 모니터링하였다. 반응 혼합물은 1 μM의 형광 표지된 합성 펩타이드, 겉보기 Km 미만의 농축액, 및 1 mM ATP를 함유하였다. 각각의 분석 조건을, 20% 내지 30%의 인산화된 펩타이드 생성물의 전환률을 수득하도록 효소 농도 및 실온 배양 시간에 대해 최적화시켰다. EDTA를 함유하는 정지 완충액을 첨가하여 반응을 종결시켰다. 랩칩(LabChip) 3000 이동성 변화 기술(캘리퍼 라이프 사이언스(Caliper Life Science))을 이용하여, 각각의 분석 반응을 샘플링하여 인산화 수준을 결정하였다. 이 기술은, 형광 표지된 기질 및 생성물의 직접적인 검출을 가능하게 하는 분리-기반 기술이다. 분리는 각각의 펩타이드 기질에 대해 최적화된 진공 압력 및 전기장 강도의 조합에 의해 제어된다.
분석 프로토콜
1mM ATP에서의 JAK 캘리퍼 효소 분석
화합물을 384-웰 플레이트에 첨가하였다. 반응 혼합물은 10 mM HEPES, pH 7.4, 10 mM MgCl2, 0.01% BSA, 0.0005% 트윈(Tween) 20, 1 mM ATP 및 1 μM 펩타이드 기질을 함유하였다. JAK1 및 TYK2 분석은 1 μM의 IRStide 펩타이드(5FAM-KKSRGDYMTMQID)를 함유하였고, JAK2 및 JAK3 분석은 1 μM의 JAKtide 펩타이드(FITCKGGEEEEYFELVKK)를 함유하였다. 20 nM JAK1, 1 nM JAK2, 1 nM JAK 또는 1 nM TYK2 효소를 첨가하여 분석을 개시하고, JAK1의 경우 3시간 동안, JAK2의 경우 60분 동안, JAK3의 경우 75분 동안 또는 TYK2의 경우 135분 동안 실온에서 배양하였다. 효소 농도 및 배양 시간을 각각의 새로운 효소 프렙에 대해 최적화시키고, 20% 내지 30% 인산화가 보장되도록 시간 경과에 따라 약간 변형시켰다. 상기 분석을, 15 μL의 180 mM HEPES, pH 7.4, 20 mM EDTA, 및 0.2% 코팅 시약 3으로 정지시켰다. 분석 플레이트를 캘리퍼 라이프 사이언스 LC3000 기기 상에 놓고, 각각의 웰을 적절한 분리 조건을 사용하여 샘플링하여, 비인산화된 및 인산화된 펩타이드를 측정하였다.
데이터 분석
캘리퍼 라이프 사이언시스로부터의 HTS 웰 어날라이저(HTS Well Analyzer) 소프트웨어를 사용하여 데이터를 수집하였다. 데이터 분석을 위한 데이터 결과물은, 피크 높이에 대해 계산된 전환된 생성물 퍼센트이다(하기 수학식 1).
[수학식 1]
% 전환된 생성물 = 100×((생성물)/(생성물 + 기질))
각각의 화합물 농도에서의 퍼센트 효과를, 각각의 분석 플레이트 내에 함유된 양성 및 음성 대조군 웰에 기초하여 계산하였다(하기 수학식 2). 양성 대조군 웰은, 배경에 필적하는 인산화 수준을 생성하는(즉, JAK1, JAK2, JAK3 또는 TYK2를 완전히 억제하는), 포화 농도의 대조군 화합물을 함유하였다. 음성 대조군 웰은, 분석에서 기준선 활성을 설정하는데 사용된(즉, JAK1, JAK2, JAK3 또는 TYK2를 억제하지 않는) DMSO 단독(화합물 웰과 동일한 농도)을 함유하였다.
[수학식 2]
% 효과 = 100×((샘플 웰 - 음성 대조군)/(양성 대조군 - 음성 대조군))
퍼센트 효과를 화합물 농도 화합물에 대해 플롯팅하였다. 비-구속성 S자형 곡선을 4 파라미터 로지스틱 모델을 사용하여 핏팅하고, 50% 억제에 요구되는 화합물 농도(IC50)를 결정하였다(하기 수학식 3).
[수학식 3]
y = ((max - min)/(1 + ((x/IC50)^s))) + min
상기 식에서, max는 최대 점근선(완전 억제)이고, min은 최소 점근선(억제 없음)이고, s는 기울기 인자이다.
IC50 값은 각각의 화합물에 대해 nM으로 보고된다:
표 1. JAK 캘리퍼 데이터
Figure pct00164
Figure pct00165
Figure pct00166
선택된 화합물을, 인간 전혈 유동 세포측정법 분석에서 IL-12 신호전달을 억제하는 이의 능력에 대해 평가하였다. IL-12는 TYK2 및 JAK2를 통해 신호를 전달한다.
인간 전혈 IL-12 유도된 STAT4 인산화 분석
시험 물품을 DMSO 중 30 mM 모액으로 제조하였다. 11-포인트 2.5 연속 희석물을, 10 mM의 상부 농도로 DMSO 중에 생성시켰다. 4 μL의 상기 시험 물품 용액을 96 μL의 PBS에 첨가하여, 400 μM의 상부 농도로 추가 희석을 수행하였다. 인간 전혈을, 건강한 공여자로부터 정맥 천자를 통해, 나트륨 헤파린을 함유하는 바큐테이너(Vacutainer) 수집 튜브(카탈로그 번호 366480; 벡톤 디킨슨(Becton Dickinson), 뉴저지주 프랭클린 레이크스)에 수집하였다. 혈액을 사용 전에 37℃로 가온하였다. 인간 전혈을 96-웰, 깊은-웰, V-바닥 플레이트에 부분표본화하고(90 mL/웰), 11가지 상이한 농도(0.2% DMSO 최종)의 화합물로 37℃에서 60분 동안 처리하였다. 이어서, IL-12(5 mL/웰; 최종, 5 ng/mL)로 15분 동안 시험접종하였다. 샘플을 따뜻한 1X 용해/고정 완충액(700 mL/웰)으로 처리하여 활성화를 종결시키고, 37℃에서 20분 동안 추가로 배양하여 적혈구를 용해시켰다. 플레이트를 300 x g에서 5분 동안 원심분리하고, 상청액을 흡인하고, 세포를 800 mL/웰의 염색 완충액(0.5% 소 태아 혈청 및 0.01% 나트륨 아자이드를 함유하는 PBS)으로 세척하였다. 세척된 세포 펠릿을 350 mL/웰의 미리 냉각시킨 90% 메탄올로 재현탁시키고, 4℃에서 30분 동안 배양하였다. 플레이트를 300 x g에서 5분 동안 원심분리하고, 90% 메탄올을 함유하는 상청액을 흡인하고, 800 mL/웰의 염색 완충액으로 세포를 세척하였다. 세포 펠릿을, 항-pSTAT4-알렉사플루오르647(AlexaFluor647)을 함유하는 염색 완충액에 재현탁시키고(1 대 150 희석, 150 mL/웰), 실온에서 밤새 암실에서 배양하였다.
샘플을 96-웰 U-바닥 플레이트에 옮기고, HTS 플레이트 로더(비디 바이오사이언시스(BD Biosciences))가 장착된 에프에이씨에스칼리버(FACSCalibur) 또는 엘에스알포르테사(LSRFortessa) 상에서 유동 세포측정법 분석을 수행하였다. 림프구 집단을 pSTAT4의 히스토그램 분석을 위해 게이팅하였다. 비자극된 세포를 사용하여 배경 형광을 한정하고, 약 0.5% 게이팅된 집단을 포함하도록 피크의 가장 아래 부분에 게이트를 두었다. 히스토그램 통계적 분석을 셀퀘스트(CellQuest)(상표명) 프로 버전 5.2.1(비디 바이오사이언시스) 또는 에프에이씨디바(FACSDiva) 버전 6.2(비디 바이오사이언시스) 소프트웨어를 사용하여 수행하였다. 포스포 STAT4의 수준을 측정하는 상대 형광 단위(RFU)를, 양성 집단 퍼센트와 그의 평균 형광을 곱하여 계산하였다. 11가지 화합물 농도(각각의 농도에서 1회씩)로부터의 데이터를 하기 수학식 4에 기초하여 대조군의 백분율로서 정규화하였다:
[수학식 4]
대조군의 % = 100 x (A - B)/(C - B)
상기 식에서,
A는, 본 발명의 화합물 및 IL-12를 함유하는 웰로부터의 RFU이고,
B는, IL-12 및 본 발명의 화합물의 부재 하의 웰로부터의 RFU(최소 형광)이고,
C는, IL-12만 함유하는 웰로부터의 RFU(최대 형광)이다.
억제 곡선 및 IC50 값을 프리즘(Prism) 버전 5 소프트웨어(그래프패드(GraphPad), 캘리포니아주 라졸라)를 사용하여 결정하였다.
표 2. 인간 전혈 IL-12 데이터
Figure pct00167

Claims (29)

  1. 하기 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00168

    상기 식에서,
    A, A' 및 A"는 독립적으로 O, C=O, C-R' 또는 N-R"이고, 이때 R' 및 R"는 독립적으로 H, 아미노, -NR7COR6, COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-일 수 있고, R"는 존재하거나 부재할 수 있고, 원자가 법칙이 허용하는 경우에 존재하고, A, A' 및 A" 중 1개 이하는 O 또는 C=O이고;
    R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고;
    R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R2는, H, C1-C6 알킬-, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
    X는 C-R3 또는 N이고, 이때 R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고;
    R4 및 R5는 독립적으로 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬) 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    하기 화학식 (Ia)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00169

    상기 식에서,
    A, A' 및 A"는 독립적으로 O, C=O, C-R' 또는 N-R"이고, 이때 R' 및 R"는 독립적으로 H, 아미노, -NR7COR6, COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)일 수 있고, R"는 존재하거나 부재할 수 있고, 원자가 법칙이 허용하는 경우에 존재하고, A, A' 및 A" 중 1개 이하는 O 또는 C=O이고;
    R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고;
    R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
    R2는 H, C1-C6 알킬-, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
    R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고;
    R4 및 R5는 독립적으로 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬)-, 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이다.
  3. 하기 화학식 (Ib)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00170

    상기 식에서,
    R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R0 및 R는 독립적으로 H, Br, Cl, F, 또는 C1-C6 알킬이고;
    R1은 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
    R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시, 하이드록시(C1-C6 알킬), 페닐(C1-C6 알킬), 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
    R3은 H 또는 C1-C6 알킬일 수 있고;
    R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)이고;
    R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이다.
  4. 제 3 항에 있어서,
    R"가 C1-C6 알킬이고, R5가 H인, 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    하기 화학식 (Ic)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00171

    상기 식에서,
    R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬-), 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -NR7COR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
    R3은 H, C1-C6 알킬, 아미노, 시아노, 또는 C1-C6 알콕시-이고;
    R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬)-, 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이다.
  6. 제 5 항에 있어서,
    R"가 C1-C6 알킬이고, R5가 H인, 화합물.
  7. 제 1 항에 있어서,
    하기 화학식 (Id)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00172

    상기 식에서,
    R"는 H, -COR6, -CONR7R8, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬-, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
    R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬-, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이다.
  8. 제 7 항에 있어서,
    R"가 C1-C6 알킬이고, R5가 H인, 화합물.
  9. 제 1 항에 있어서,
    하기 화학식 (Ie)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00173

    상기 식에서,
    R2는 H, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕시-, 하이드록시(C1-C6 알킬)-, 페닐(C1-C6 알킬)-, 폼일, 헤테로아릴, 헤테로사이클릭, -COR6, -OCOR6, -COOR6, -CONR7R8, 및 -(CH2)n-W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 이때 W는 시아노, 하이드록시, C3-C8 사이클로알킬, -SO2NR7R8, 또는 -SO2-R9이고, R9는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클릭이고, 상기 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릭, 또는 헤테로아릴 각각은 비치환되거나 할로, 시아노, 하이드록시, 또는 C1-C6 알킬로 치환될 수 있고;
    R6, R7 및 R8은, 각각 독립적으로, H, C1-C6 알킬, C1-C4 알콕시(C1-C6 알킬), 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 상기 C1-C6 알킬은 임의적으로 할로, CN 또는 하이드록시로 치환되거나; 또는 R7 및 R8은, 이들에 결합된 원자와 함께, 5원 또는 6원 고리를 형성하고, 상기 고리는 임의적으로 할로, 하이드록시, CN, 또는 C1-C6 알킬로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이다.
  10. 제 9 항에 있어서,
    R2가 -(CH2)n-W이고, 이때 W는 시아노이고, n은 1, 2 또는 3인, 화합물.
  11. 제 1 항에 있어서,
    하기 화학식 (If)의 구조를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물:
    Figure pct00174

    상기 식에서,
    R"는 H, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이고;
    R5는 H, 아미노, C1-C6 알킬, 또는 하이드록시(C1-C6 알킬)-이다.
  12. 제 11 항에 있어서,
    R"가 C1-C6 알킬이고, R5가 H인, 화합물.
  13. 제 1 항에 있어서,
    (1r,3r)-3-(4-(6-(3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
    2,2'-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1,3-다이일)다이아세토나이트릴;
    2-((1s,3r)-1-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴;
    5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복스아마이드;
    (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)이속사졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
    (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
    (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
    (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴;
    2-((1r,3s)-1-(4-(6-(3-아미노-1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴;
    2-(1-에틸-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴;
    (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-3-옥소-2,3-다이하이드로-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴(트랜스 이성질체); 및
    (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴
    로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  14. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 (1r,3r)-3-(4-(6-(3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-(시아노메틸)사이클로부탄-1-카보나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  15. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 2,2'-(3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-1,3-다이일)다이아세토나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  16. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 2-((1s,3r)-1-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  17. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 5-(4-(1-((1s,3r)-1-(시아노메틸)-3-메톡시사이클로부틸)-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-6-일)-1H-피라졸-3-카복스아마이드인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  18. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)이속사졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  19. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  20. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 (1s,3s)-3-(시아노메틸)-3-(4-(6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  21. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 (1r,3r)-3-(시아노메틸)-3-(4-(3-메틸-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)사이클로부탄-1-카보나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  22. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 2-((1r,3s)-1-(4-(6-(3-아미노-1H-피라졸-5-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)-3-메톡시사이클로부틸)아세토나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  23. 제 1 항에 있어서,
    상기 화합물이 2-(1-에틸-3-(4-(6-(5-(하이드록시메틸)-1H-피라졸-3-일)피라졸로[1,5-a]피라진-4-일)-1H-피라졸-1-일)아제티딘-3-일)아세토나이트릴인,
    화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  24. 제 1 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물, 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물.
  25. Tyk2 억제제가 처방되는 질환 또는 증상의 치료 방법으로서,
    상기 치료가 필요한 개체에게, 치료 효과량의 제 1 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법.
  26. 염증 또는 자가면역 증상을 겪는 개체에게, 치료 효과량의 제 1 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 투여하는 것을 포함하는, 염증 또는 자가면역 증상의 치료 방법.
  27. 염증, 자가면역 질환, 전신 홍반성 루푸스, 홍반성 신염, 원판성 루푸스, 피부 루푸스, 중추 신경계 루푸스, 류마티스성 관절염, 건선성 관절염, 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 천식, 알레르기성 천식, 제1형 당뇨병, 다발성 근염, 피부 근염; 아이카르디-고우티에레스(Aicardi-Goutieres) 증후군 및 제1형 인터페론 과발현의 다른 멘델 유전질환을 비롯한 제1형 인터페론병증(interferonopathy); 다발성 경화증, 원발성 진행성 다발성 경화증, 재발 이장성(relapsing remitting) 다발성 경화증, 원발성 담즙 담관염으로도 공지된 원발성 담즙 간경변, 원발성 경화 담관염, 자가면역 간염, 비-알코올성 지방간 질환, 비-알코올성 지방간염, 건선, 피부 근염, 경피증, 아토피성 피부염, 백반증, 원형 탈모, 척추증, 강직성 척추염, 알츠하이머병, 및 신경-염증으로부터 선택되는 질병 또는 증상의 치료 방법으로서,
    상기 질병 또는 증상을 겪는 개체에게, 치료 효과량의 제 1 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 투여하는 것을 포함하는 치료 방법.
  28. 자가면역 또는 염증 질환 증상을 겪는 개체에게, 치료 효과량의 제 1 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 상기 화합물 또는 상기 염의 약학적으로 허용가능한 용매화물을 투여하는 것을 포함하는, 자가면역 또는 염증 질환 증상의 치료 방법.
  29. 제 28 항에 있어서,
    상기 증상이, 예를 들어 소양증(pruritis) 및 피로(fatigue)로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
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