KR20180022930A - 마이크로바이옴-적합성 화장품 - Google Patents

Abstract

본 개시내용의 시스템 및 방법은 그 중에서도 "바이옴-친화성" 또는 "바이옴-적합성"인 것으로 고려될 수 있는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 제공한다. 본 개시내용의 시스템 및 방법은, 박테리아, 예를 들어 비병원성 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아와 조합되어 사용될 수 있고, 대상체에게 적용되는 제제 또는 조성물의 형태로 사용될 수 있는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 용도를 제공할 수 있다.

Description

마이크로바이옴-적합성 화장품

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2015년 7월 2일에 출원된 미국 가특허 출원 일련 번호 62/188,343 및 2015년 7월 6일에 출원된 미국 가특허 출원 일련 번호 62/189,105를 우선권으로 주장하며, 이들 각각의 전체 개시내용은 모든 목적을 위해 본원에 참조로 포함된다.

유익한 박테리아, 예를 들어 비병원성 박테리아는 병원성 박테리아의 성장을 저해하기 위해 사용될 수 있다. 박테리아 및 다른 미생물은 주위에 아주 흔하고, 대상체, 예를 들어 인간 및 동물 대상체에 자연적으로 존재한다. 박테리아는 모든 생명체 주위의 정상적인 부분이다. 소화관에서, 이들 박테리아는 정상적인 조건 하에 병원성이 아니며, 실제로 정상적인 장 내용물을 질환 유발 유기체에 덜 알맞게 만들어서 건강을 증진시킨다. 질환 예방은 수많은 방식으로 수행된다: 영양분을 소모하여 병원균에 대해 덜 남기고; 병원균에 알맞지 않은 pH 및 산소 분압과 같은 조건을 생성하고; 병원균에 대해 독성인 화합물을 생성하고; 이들 미생물이 병원균을 음식으로서 소모하고; 병원균이 이용가능한 물리적 공간을 적게 남기고; 특이적 결합 부위를 점유하여 병원균이 이용가능한 결합 부위를 덜 남긴다. 바람직한 박테리아의 존재는 질환 상태를 예방하는데 유용한 것으로 보인다.

관련 기술분야에서 대상체 상에서 또는 내에서 유익한 박테리아의 적어도 일부 수준을 유지 또는 지속시키는 제품, 예를 들어 화장품 제품을 제공하는 것이 요구된다. 이는 유익한 박테리아가 비-독립영양 박테리아, 예를 들어 병원성 박테리아의 성장을 조절 또는 저해하고/거나 대상체 상에서 적합한 마이크로바이옴을 유지시켜, 비병원성 박테리아가 제공할 수 있는 건강 증진의 이익을 얻도록 함으로써 수행될 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품을 제공한다. 완성된 화장품 제품은 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 포함할 수 있고, 하기 특성 중 하나 이상을 갖는다:

a) 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 보존제, 예를 들어 파라벤을 실질적으로 함유하지 않음;

b) 상기 최종 사용 용기가 역행성 흐름을 감소시키도록 구성됨;

c) 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이 방사선조사됨; 또는

d) 상기 화장품 제품이 하기 (i) 또는 (ii) 중 하나의 조성물로 본질적으로 이루어짐:

(i) 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스;

(ii) 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산.

일부 실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품은 a, b, c의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 가질 수 있으며, 상기 화장품 제품은 샴푸를 포함한다. 상기 완성된 화장품 제품은 a, b, c 및 d(i)의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 a, b, c의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 가질 수 있으며, 상기 화장품 제품은 클렌저, 예를 들어 바디 클렌저를 포함한다. 상기 완성된 화장품 제품은 a, b, c 및 d(ii)의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 가질 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품은 a의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 b의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 c의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 d(i)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 d(ii)의 특성을 가질 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품은 a 및 b의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 a 및 c의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 a 및 d(i)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 a 및 d(ii)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 b 및 c의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 b 및 d(i)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 b 및 d(ii)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 c 및 d(i)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 c 및 d(ii)의 특성을 가질 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품은 a, b 및 c의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 a, b 및 d(i)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 a, b 및 d(ii)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 b, c 및 d(i)의 특성을 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품은 b, c 및 d(ii)의 특성을 가질 수 있다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 방사선조사된 완성된 화장품 제품이다. 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 감마-방사선조사된 완성된 화장품 제품일 수 있다.

실시양태에서 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 부록 VI에 열거된 보존제를 실질적으로 함유하지 않을 수 있고, 예를 들어 부록 VI에 열거된 보존제 중 적어도 1가지, 2가지, 5가지, 10가지, 15가지, 20가지, 30가지, 40가지, 50가지 또는 모두를 실질적으로 함유하지 않을 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 약 500 ppb 미만의, 예를 들어 500 ppb 미만의 보존제를 가질 수 있다. 상기 화장품 제품 또는 화장품 제품은 약 500 ppb 미만의 부록 VI에 열거된 보존제, 예를 들어 500 ppb 미만의 부록 VI에 열거된 보존제를 가질 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 보존제를 포함하지 않을 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 부록 VI에 개시된 보존제를 포함하지 않을 수 있다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 미생물, 예를 들어 박테리아 또는 진균으로의 챌린지에 노출되는 경우, 예를 들어 U.S.P. 51, 항미생물 유효성 시험(Antimicrobial Effectiveness Testing)에 의해 결정 시 상기 미생물의 성장을 지원할 것이다. 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은, 처리, 예를 들어 멸균 처리 또는 보존제 첨가의 부재 하에, 예를 들어 U.S.P. 51, 항미생물 유효성 시험에 의해 측정 시 미생물 성장, 예를 들어 박테리아 또는 진균 성장을 지원한다. 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 보존제를 함유하지 않을 수 있고, 예를 들어 보존제 무함유일 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스를 포함하는 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산을 포함하는 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 본질적으로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 본질적으로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 제공한다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 향기, 색상, 점도, 거품 형성 및 거품 안정성, 접착력, 수분 보유, 수분 결합, pH 안정화, 클렌징, 증점화, 유연화, 컨디셔닝, 예를 들어 모발 또는 피부 컨디셔닝, 지질 층 강화, 장벽 형성, 또는 필름 형성 중 하나 이상을 제공하기 위해 첨가된 성분을 포함한다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 항산화제, 지방 물질/오일, 증점제, 유연제, 유화제, 광 차단제, 거품 형성제 및 거품 안정화제, 소포제, 보습제, 향기제, 계면활성제, 충전제, 격리제, 중합체, 산성화제 또는 염기성화제, 염료, 착색제, 안료, 펄화제, 불투명화제, 유기 또는 무기 입자, 점도 개질제, 클렌저, 접착제, 수분 결합제, pH 안정화제, 컨디셔너, 디탱글러, 생물 기재 계면활성제 클렌저, 지질 층 강화제, 피부 컨디셔너, 및 천연 모발 영양제, 예컨대 식물, 과일 추출물, 당 유도체 및/또는 아미노산, 가수분해된 단백질 또는 비타민 중 1종 이상을 포함한다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 하기 중 하나이다:

유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품은 샴푸이다. 샴푸는 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스를 포함할 수 있다. 샴푸는 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 본질적으로 이루어질 수 있다. 샴푸는 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 이루어질 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품은 포밍 바디 클렌저이다. 포밍 바디 클렌저는 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산을 포함할 수 있다. 포밍 바디 클렌저는 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 본질적으로 이루어질 수 있다. 포밍 바디 클렌저는 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 이루어질 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품이 컨디셔너일 수 있다. 컨디셔너는 히드록시프로필 셀룰로스, 양이온성 구아, 코코넛 오일 및 향기제를 포함할 수 있다. 컨디셔너는 히드록시프로필 셀룰로스, 양이온성 구아, 코코넛 오일 및 향기제로 본질적으로 이루어질 수 있다. 컨디셔너는 히드록시프로필 셀룰로스, 양이온성 구아, 코코넛 오일 및 향기제로 이루어질 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 멸균 처리될 수 있다. 멸균은 방사선조사를 포함할 수 있다. 멸균은 가열을 포함할 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 예를 들어 멸균성 보증 수준 시험에 의해 결정 시 멸균성일 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 99.9%의 박테리아가 사멸되거나 또는 세포 분열할 수 없는 것일 수 있다. 모든 박테리아, 포자, 곰팡이 및 진균 종이 사멸되거나 또는 세포 분열할 수 없는 것인 완성된 화장품 제품이 제공될 수 있다.

상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 99.9%의 박테리아가 세포 분열을 억제하기에 충분한 방사선 유도된 DNA 손상을 가진 것일 수 있다. 모든 박테리아, 포자, 곰팡이 및 진균 종이 세포 분열을 억제하기에 충분한 방사선 유도된 DNA 손상을 갖는 것인 완성된 화장품 제품이 제공될 수 있다.

실시양태에서, 최종 사용 용기는 개방되지 않은 것, 예를 들어 공장 밀봉이 파손되지 않은 것이다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 예를 들어 이온화 방사선에 의해, 예를 들어 감마선에 의해, 예를 들어 x-선에 의해, 예를 들어 동위원소, 예를 들어 코발트 60으로부터, 또는 자외선, 예를 들어 자외선 C (UVC)에 의해 방사선조사된 것이다. 방사선조사는 멸균 제품을 제공하기에 충분할 수 있다. 상기 멸균 제품은 예를 들어 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준(Sterility Testing Methods and Standards)에 의해 결정 시 U.S.P. 챕터 1211과 일치하는, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 것을 특징으로 할 수 있다.

멸균 제품은 예를 들어 U.S.P. 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균, 예를 들어 포자를 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 것인 완성된 화장품 제품이 제공될 수 있다.

성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 성장을 나타내지 않는다.

성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품은 성장을 나타내지 않을 수 있다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 산화제, 예를 들어 천연 발생 산화제, 자유 라디칼 스캐빈저, 또는 자유 라디칼 켄처로부터 선택된 외인성 첨가된 첨가제를 포함한다. 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 복수 종의 성분을 함유하고, 복수 종의 성분을 혼합한 후에 방사선조사한다. 상기 화장품 제품이 최종 사용 용기에 배치된 후에 완성된 화장품 제품을 방사선조사할 수 있다. 상기 최종 사용 용기가 밀폐된 후에 완성된 화장품 제품을 방사선조사할 수 있다. 상기 최종 사용 용기가 밀봉된 후에 완성된 화장품 제품을 방사선조사할 수 있다. 상기 최종 사용 용기가 밀폐되기 전에 완성된 화장품 제품을 방사선조사할 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사되었는지를 나타내는 지시기를 포함할 수 있다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 예를 들어 마이크로웨이브 오븐 또는 오토클레이브에 의해 가열된다. 가열은 멸균 제품을 제공하기에 충분할 수 있다. 멸균 제품은 예를 들어 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 할 수 있다.

멸균 제품은 예를 들어 U.S.P. 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 완성된 화장품 제품이 제공될 수 있다.

상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품이 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품은 성장을 나타내지 않는다.

상기 완성된 화장품 제품이 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품은 성장을 나타내지 않는다.

실시양태에서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 복수 종의 성분을 함유하고, 상기 복수 종의 성분을 혼합한 후에 가열한다. 상기 화장품 제품이 최종 사용 용기에 배치된 후에 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품을 가열할 수 있다. 상기 최종 사용 용기가 밀폐된 후에 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품을 가열할 수 있다. 상기 최종 사용 용기가 밀봉된 후에 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품을 가열할 수 있다. 상기 최종 사용 용기가 밀폐되기 전에 상기 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품을 가열할 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품은 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 가열되었는지를 나타내는 지시기를 포함할 수 있다. 제제화 동안에 또는 이후에, 예를 들어 혼합 또는 충전 이후에, 예를 들어 배치 이후에 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 121℃ 이상에서 적어도 15분 동안 가열할 수 있다.

제제화 동안에 또는 이후에, 예를 들어 혼합 또는 충전 이후에, 예를 들어 배치 이후에 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 140℉ 초과로 가열하지 않을 수 있다.

실시양태에서, 최종 사용 용기는 상기 최종 사용 용기로의 물질의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성된다. 최종 사용 용기는 상기 최종 사용 용기로의 물질, 예를 들어 상기 화장품 제품의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성될 수 있다. 최종 사용 용기는 상기 최종 사용 용기로의 물질, 예를 들어 오염물의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성될 수 있다. 오염물은 대기, 예를 들어 에어로졸, 또는 액체, 예를 들어 물, 또는 고체, 또는 기체일 수 있다. 최종 사용 용기는 상기 화장품 제품이 배치된 저장소, 및 상기 저장소로부터 상기 화장품 제품이 분배될 수 있는 디스펜서를 포함할 수 있고, 여기서 상기 디스펜서는 상기 저장소로의 물질의 역행성 흐름을 억제한다. 최종 사용 용기는 상기 화장품 제품이 배치된 저장소, 및 상기 저장소로부터 상기 화장품 제품이 분배될 수 있는 디스펜서를 포함할 수 있고, 여기서 상기 디스펜서는 상기 저장소로의 분배된 화장품 제품 또는 대기 에어로졸의 역행성 흐름을 억제한다. 최종 사용 용기는 상기 디스펜서 내에 및 상기 저장소의 근위에 배치된 제1 압력 활성화 밸브 및 상기 디스펜서 내에 및 상기 저장소의 원위에 배치된 제2 압력 활성화 밸브를 포함하는 역행성 흐름 방지 디스펜서이고, 여기서 상기 제1 밸브의 활성화 압력이 상기 제2 밸브의 활성화 압력보다 높다. 최종 사용 용기는 완성된 화장품 제품의 분배와 관련된 조작 방향과 반대 방향으로 화장품 제품이 이동하는 것을 방지하도록 구성된 역행 방지 메카니즘을 포함할 수 있다.

실시양태에서, 상기 최종 사용 용기 내 화장품 제품의 양은 X회 이하의 적용에 충분할 수 있고, 여기서 X는 약 1 내지 약 180회이다. 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양은 완성된 화장품 제품이 X회 이하의 적용에 충분하도록 선택될 수 있고, 여기서 X는 약 1 및 약 180회이다. 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양은 완성된 화장품 제품이 약 28일 이하의 사용에 충분하도록 선택될 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양은 10, 20, 30, 40 또는 50회 사용 또는 적용에 충분한 양과 동일하거나 또는 그보다 적을 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양은 완성된 화장품 제품이 Y회/사용 일로 X일 이하 동안 충분하도록 선택되고, 여기서 X가 약 2주 내지 약 6주이고, Y가 약 0회/사용 일 내지 약 6회/사용 일이다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 열화 기준 유통기한 날짜를 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 열화 기준 유통기한 날짜의 표시를 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 바이옴-적합성 기준 유통기한 날짜를 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 바이옴-적합성 기준 유통기한 날짜의 표시를 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 가질 수 있다. 완성된 제품은 예를 들어 일수 또는 주수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품은 제조, 충전, 밀봉, 운송, 시중 출시 또는 판매 중 하나의 날짜로부터 X일 미만인, 예를 들어 일수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있고, 여기서 X는 약 5-7일, 약 5-10일, 약 7-14일, 약 14-21일, 약 21-28일, 약 28-35일, 약 35-42일, 약 42-49일, 약 49-56일, 약 56-63일, 약 63-70일, 약 70-77일, 약 75-100일, 약 100-150일, 약 150-200일, 약 200-300일, 약 300-400일, 약 400-750일이다. 완성된 화장품 제품은 제조, 충전, 밀봉, 운송, 시중 출시 또는 판매 중 하나의 날짜로부터 X일 미만인, 예를 들어 일수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있고, 여기서 X는 약 28일, 예를 들어 28일, 또는 예를 들어 약 180일, 예를 들어 180일이다. 완성된 화장품 제품은 미리 선택된 기간, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉으로부터의 일수로 표현된, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있다. 완성된 제품은 미리 선택된 기간, 예를 들어 개방 또는 개봉 날짜로부터 X일 미만인 상기 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉으로부터의 일수로 표현된, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있고, 여기서 X는 약 5-7일, 약 5-10일, 약 7-14일, 약 14-21일, 약 21-28일, 약 28-35일, 약 35-42일, 약 42-49일, 약 49-56일, 약 56-63일, 약 63-70일, 약 70-77일, 약 75-100일, 약 100-150일, 약 150-200일, 약 200-300일, 약 300-400일, 약 400-750일이다. 완성된 화장품 제품은 미리 선택된 기간, 예를 들어 개방 또는 개봉 날짜로부터 X일 미만인 상기 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉으로부터의 일수로 표현된, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있고, 여기서 X는 약 28일, 예를 들어 28일이다. 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시는 미리 선택된 사용 또는 적용 횟수로 표현될 수 있다. 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시는 미리 선택된 사용 또는 적용 횟수로 표현될 수 있고, 여기서 상기 미리 선택된 횟수는 약 5-7, 약 5-10, 약 7-14, 약 14-21, 약 21-28, 약 28-35, 약 35-42, 약 42-49, 약 49-56, 약 56-63, 약 63-70, 약 70-77, 약 75-100, 약 100-150, 약 150-200, 약 200-300, 약 300-400, 약 400-750일이다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명을 가질 수 있다. 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명은 하기로 표현될 수 있다:

a) 시간의 단위, 예를 들어 미리 선택된 사건, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개봉 또는 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로부터의 일수; 또는

b) 사용 또는 적용 횟수.

완성된 화장품 제품은 a로 표현된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명을 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 b로 표현된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명을 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 a 및 b로 표현된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명을 가질 수 있다. 완성된 화장품 제품은 a 또는 b로 표현된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명을 가질 수 있다.

실시양태에서, 최종 사용 용기는 중합체, 예를 들어 폴리에틸렌 테레프탈레이트 (PET), 고밀도 폴리에틸렌 (HDPE), 폴리프로필렌, 폴리카르보네이트, 폴리테트라플루오로에틸렌 (테플론(teflon)®), 폴리비닐리덴 플루오라이드 (PVDF), 또는 셀룰로스계를 포함할 수 있다. 최종 사용 용기는 유리를 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품은 생존가능한 박테리아의 존재를 나타내는 센서, 예를 들어 산소 센서를 포함할 수 있다. 최종 사용 용기는 적어도 약 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100 퍼센트의 투과율로 최종 사용 용기를 통한 이온화 방사선, 예를 들어 감마선, 예를 들어 x-선, 예를 들어 동위원소, 예를 들어 코발트 60으로부터, 또는 자외선, 예를 들어 자외선 C (UVC)의 통과를 허용할 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도

a) 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 공급하고 (또는 피지명자가 공급하게 하고);

b) 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 하기를 제공하고 (또는 피지명자가 제공하게 하고):

i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 또는

ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지;

c) 임의적으로, 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하고 (또는 피지명자가 제공하게 하고),

이로써 완성된 화장품 제품을 유통시키는 것

을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 유통시키는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 상기 방법은

a) 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 공급하고;

b) 상기 최종 사용자에게 하기를 제공하고:

i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위; 또는

ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지;

c) 상기 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하고,

이로써 완성된 화장품 제품을 유통시키는 것

을 포함할 수 있다.

실시양태에서, 상기 방법은 본 개시내용에 걸쳐 기새된 완성된 화장품 제품을 포함하는 완성된 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 본원에 기재된 화장품 제품을 포함할 수 있다. 상기 첫번째 단위는 박테리아 또는 진균을 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다. 상기 첫번째 단위는 보존제를 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 완성된 화장품 제품을 포함할 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제로부터 선택된 화장품 제품을 포함한다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 샴푸를 포함한다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 포밍 바디 클렌저를 포함한다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 컨디셔너를 포함한다.

실시양태에서, 상기 방법은 상기 최종 사용자가 인터넷-기반 판로로부터 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 판매 또는 증정에 의해 공급받는 것을 포함할 수 있다. 최종 사용자는 비-인터넷-기반 판로, 예를 들어 점포로부터 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 판매 또는 증정에 의해 공급받을 수 있다. 상기 최종 사용자에게 제공하는 것은 상기 최종 사용자에게 i을 제공하는 것을 포함할 수 있다. 상기 최종 사용자에게 제공하는 것은 상기 최종 사용자에게 ii를 제공하는 것을 포함할 수 있다. 상기 최종 사용자에게 제공하는 것은 상기 최종 사용자에게 i 및 ii를 제공하는 것을 포함할 수 있다. 상기 제공은 미리 선택된 일수, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위의 권장 수명이 종료되기 전 1일 내지 약 28일, 예를 들어 3-7일 이내에 이루어질 수 있다. 상기 제공은 미리 선택된 일수, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 공급한 후 1일 내지 약 28일, 예를 들어 21-25일 이내에 이루어질 수 있다. 상기 제공은 미리 선택된 일수, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 첫번째 예상된 사용 이전 또는 이후에 1일 내지 약 28일 이내에 이루어질 수 있다. 상기 제공은 미리 선택된 일수, 예를 들어 1-28일, 예를 들어 3-7일의 유통기한 날짜 이내에 이루어질 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위는 본원에 기재된 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위는 박테리아 또는 진균을 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가 보존제를 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위는 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 하나로부터 선택된 화장품 제품을 포함한다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 샴푸를 포함할 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 포밍 바디 클렌저를 포함할 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 컨디셔너를 포함할 수 있다.

실시양태에서, 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에게 전달할 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 전달할 수 있다. 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 위치에 전달할 수 있다. 상기 통지를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 전화 통화에 의해, 예를 들어 녹음 메시지 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에게 전달할 수 있다. 상기 통지를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 전화 통화에 의해, 예를 들어 녹음 메시지 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 전달할 수 있다. 상기 통지를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 위치에 전달할 수 있다.

실시양태에서, 상기 방법은 c) 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하는 (또는 피지명자가 제공하게 하는) 것을 포함할 수 있다. 상기 정보는 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수락할 개체 (수집 개체)의 이름 또는 위치, 예를 들어 주소를 포함할 수 있다. 상기 방법은 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수용하도록 구성된 용기를 상기 최종 사용자 또는 피지명자에게 제공하는 것을 포함할 수 있다. 상기 용기에 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위가 제공될 수 있다. 상기 용기에 상기 통지가 제공될 수 있다. 상기 용기는 상기 수집 개체의 주소가 쓰인 우편 라벨을 포함할 수 있다. 상기 수집 개체는 리사이클러일 수 있다.

실시양태에서, 상기 방법은 d) 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품의 상기 후속 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하는 (또는 피지명자가 제공하게 하는) 것을 포함할 수 있다. 상기 정보는 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수락할 개체 (수집 개체)의 이름 또는 위치, 예를 들어 주소를 포함할 수 있다. 상기 방법은 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수용하도록 구성된 용기를 상기 최종 사용자 또는 피지명자에게 제공하는 것을 포함할 수 있다. 상기 용기에 완성된 화장품 제품의 후속 단위가 제공될 수 있다. 상기 용기에 상기 통지가 제공될 수 있다. 상기 용기는 상기 수집 개체의 주소가 쓰인 우편 라벨을 포함할 수 있다. 상기 수집 개체는 리사이클러일 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도

a) 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 수용하고;

b) i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 또는

ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지

를 수용하고;

c) 임의적으로, 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 수용하고,

이로써 완성된 화장품 제품을 수득하는 것

을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 수득하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 상기 방법은

최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 워시를 포함하는 상기 청구항 중 어느 한 항의 완성된 화장품 제품을 수득하고, 예를 들어 제조하고;

상기 완성된 제품의 최종 사용자에게 하기 중 하나 이상을 전달하는 것을 포함할 수 있다:

완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 바이옴-친화성, 예를 들어 바이옴-적합성임;

완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 예를 들어 열화, 예를 들어 바이옴-적합성을 기준으로 하여 표시된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명 이후에는 사용해서는 안되고,

여기서 상기 표시된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명은 하기로 표현됨:

(a) 시간의 단위, 예를 들어 미리 선택된 사건, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개봉 또는 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로부터의 일수; 또는

(b) 사용 또는 적용 횟수;

완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 X회 적용 후에 사용해서는 안되고, 예를 들어 여기서 X는 약 1 내지 약 180회임; 및

완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 X일 사용 후에, 예를 들어 Y회/사용 일로 X일 후에 사용해서는 안되고, 여기서 X는 약 (7일) 1주 내지 약 42일 (6주)이고, Y는 약 0회 사용/일 내지 약 10회 사용/일이고, 예를 들어 X일은 약 7-10, 10-13, 14-17, 18-21, 22-25, 26-29, 30-33, 34-37, 38-42일일 수 있고, Y는 약 0-1, 2-4, 5-7, 8-10회 사용/일일 수 있음.

실시양태에서, 상기 방법은 상기 완성된 화장품 제품을 운송하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도 최종 사용 용기에 화장품 제품을 배치하여, 충전된 최종 사용 용기를 형성하고; 상기 충전된 최종 사용 용기를 처리하여, 박테리아를 사멸 또는 불활성화시키고, 이로써 완성된 화장품 제품을 제공하는 것을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 제조하는 방법을 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 바이옴-친화성 성분 리스트로부터의 제1 성분, 예를 들어 계면활성제를 선택하고, 바이옴-친화성 성분 리스트로부터의 제2 성분, 예를 들어 습윤제를 선택하고, 상기 제1 및 제2 성분의 혼합물을 제공하고, 이로써 바이옴-친화성 화장품 제품을 제조하는 것을 포함하는, 바이옴-친화성 화장품 제품을 제조하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 상기 방법의 제1, 제2, 또는 제1 및 제2 성분은 표 3으로부터 선택된다. 상기 방법은 상기 완성된 화장품 제품의 바이옴-친화성 유통기한 날짜 또는 권장 수명을 결정하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 결정은 AOB의 생존가능성, 또는 AOB가 제1 및 제2 성분의 혼합물과 접촉한 후에 니트라이트를 생성하는 능력을 평가하는 것을 포함할 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도 각각 바이옴-친화성인 것으로 확인된 제1 및 제2 성분을 제공하고, 상기 제1 및 제2 성분을 조합하여, 혼합물을 형성하고, 상기 혼합물이 바이옴-친화성인지를 결정하고, 이로써 완성된 화장품 제품을 제조하는 것을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 제조하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 상기 결정은 AOB의 생존가능성, 또는 AOB가 제1 및 제2 성분의 혼합물과 접촉한 후에 니트라이트를 생성하는 능력을 평가하는 것을 포함할 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도

표 3으로부터 선택된 적어도 2종의 성분을 갖는 제품을 제공하고,

화장품 제품이 사용자의 피부 상에서 박테리아, 예를 들어 유익한 박테리아, 예를 들어 AOB에 대해 안전한지 여부의 평가를 획득하고,

이로써 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 제조하는 것

을 포함하는, 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 제조 (평가)하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 상기 평가는 AOB의 생존가능성, 또는 AOB가 제품과 접촉한 후에 니트라이트를 생성하는 능력을 평가하는 것을 포함할 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도

화장품 제품의 분취량을 시험 유기체, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아와 접촉시키고,

시험 유기체에 대한 화장품 제품의 효과를 평가하는 것을 포함하고,

상기 평가는 니트라이트를 생성하는 시험 유기체, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 능력에 대한 화장품 제품의 효과를 평가하는 것

을 포함하는 것인, 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 평가하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 상기 평가는 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력이 미리 선택된 기준을 충족하는지를 결정하는 것을 포함할 수 있다. 시험 유기체의 능력에 대한 화장품 제품의 효과의 평가는 완성된 화장품 제품이 "살아있는 시험 유기체를 갖는 것으로 시험되고 확정된" 것으로서 확인됨을 제공한다. 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력에 대한 화장품 제품의 효과의 평가는 완성된 화장품 제품이 "살아있는 암모니아 산화 박테리아를 갖는 것으로 시험되고 확정된" 것으로서 확인됨을 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도

암모니아 산화 박테리아 (AOB) 세포 현탁액을, 예를 들어 연속식 배양 시스템으로부터 수득하고;

세포 현탁액으로부터 AOB 세포를 수확하고;

보관 용액, 예를 들어 50 mM Na₂HPO₄ - 2 mM MgCl₂, pH 7.6을 포함하는 보관 용액 중에서 AOB 세포를 세척하고;

보관 용액 중에서 AOB 세포를 5.0 (~10¹⁰ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 현탁시키고;

약 4℃에서 AOB 세포를 보관하고;

미리 결정된 최종 농도로 부형제를 함유하는, 암모늄 (NH₄ ⁺), 예를 들어 50 mM 암모늄으로 보충된 10 ml AOB 배지 중에서 AOB 세포를 0.5 (~ 10⁹ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 희석하고;

첫번째 미리 결정된 기간 동안 30℃에서 인큐베이션하여, 인큐베이션된 배양물을 제공하고;

인큐베이션된 배양물의 분취량을 수집하고;

인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 측정하는 것

을 포함하는, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제를 선택하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 인큐베이션된 배양물의 분취량을 원심분리하여 상청액 및 박테리아 펠릿을 제공함으로써, 상청액을 제공할 수 있다. 상기 방법은 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 AOB 배지 중에서 박테리아 펠릿을 세척하고, NH₄ ⁺로 보충된 AOB 배지 중에서 박테리아 펠릿을 현탁시키고, NH₄ ⁺로 보충된 AOB 배지 중에서 박테리아 펠릿을 인큐베이션하고, 두번째 미리 결정된 기간에서 AOB 세포를 회복시켜, 회복된 AOB 세포 샘플을 제공하고, 회복된 AOB 세포 샘플을 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나에 대해 측정하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

실시양태에서, 상기 방법은 회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 세포 현탁액으로부터 AOB 세포를 수확하는 것은 세포 현탁액을 원심분리하는 것을 포함할 수 있다. 부형제의 미리 결정된 최종 농도는 약 0% 내지 약 100%이다. 첫번째 미리 결정된 기간은 약 1분, 약 10분, 약 60분, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 12시간 및 약 24시간 중 적어도 하나이다. 두번째 미리 결정된 기간은 약 1분, 약 10분, 약 60분, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 12시간, 약 24시간, 약 36시간, 약 48시간, 약 72시간, 약 96시간 중 적어도 하나이다.

본 개시내용은 그 중에서도 암모니아 산화 박테리아 (AOB)의 샘플을 수득하고, 첫번째 미리 결정된 기간 동안 AOB를 부형제와 접촉시켜, 인큐베이션된 배양물을 제공하고, 인큐베이션된 배양물의 분취량을 수집하고, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 측정하는 것을 포함하는, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제를 선택하는 방법을 제공한다.

실시양태에서, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제임을 확인하는 것을 포함할 수 있다.

실시양태에서, 상기 방법은 인큐베이션된 배양물로부터의 AOB를 NH₄ ⁺와 접촉시키고, 두번째 미리 결정된 기간 이후에 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나에 대해 회복된 AOB 세포 샘플을 측정하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 농도 중 적어도 하나를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값이 약 0.01 이상인 경우, 상기 OD₆₀₀ 값은 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제임을 확인시켜 줄 수 있다.

본 개시내용은 그 중에서도 화합물이 암모니아 산화 박테리아에 대해 친화성이라는 지식을 획득하고, 상기 화합물을 암모니아 산화 박테리아와 조합하여, 화장품 제품을 제공하는 것을 포함하는, 바이옴-친화성 조성물을 생성하는 방법을 제공한다.

본 개시내용은 그 중에서도 본 개시내용을 통해 기재된 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하는 것을 포함하는, 대상체 상에서 암모니아 산화 박테리아 (AOB)를 유지시키는 방법을 제공한다. 상기 방법은 대상체에게 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 대상체에게 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 대상체에게 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 포함할 수 있고, 여기서 AOB를 포함하는 제제를 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60분, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25시간, 2-5, 5-10, 10-15일, 3-4, 5-10주의 범위 중 대략 하나 사이에 적용한다. 상기 방법은 대상체에게 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 포함할 수 있고, 여기서 AOB를 포함하는 제제를 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60분, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25시간, 2-5, 5-10, 10-15일, 3-4, 5-10주의 범위 중 대략 하나 사이에 적용한다. 상기 방법은 이전 또는 이후에 바이옴-친화성이 아닌 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하지 않는 것을 포함할 수 있다. AOB 제제 및 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품 중 적어도 하나를 대상체의 미리 규정된 영역에 적용한다. 대상체의 미리 규정된 영역은 두부, 예를 들어 얼굴, 볼, 턱, 눈꺼풀, 입술, 코, 두피, 모발, 이마; 목; 겨드랑이; 팔; 손; 다리; 발; 가슴; 복부; 엉덩이; 음부 등의 부분 중 적어도 하나이다. AOB는 본원에 기재된 임의의 1종 이상의 AOB일 수 있다. AOB는 엔. 유트로파(N. eutropha) D23일 수 있다.

본 개시내용에 걸쳐, 천연 장미 히드로졸은 다마스크 장미꽃수로 지칭될 수 있고, 다마스크 장미꽃수는 천연 장미 히드로졸로 지칭될 수 있으며, 즉, 상기 두 용어는 본 개시내용에 걸쳐 상호 교환가능하다.

도 1A은 장미 향 있는 및 향 없는 포밍 비누와 함께 인큐베이션하고, 1분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 1B는 장미 향 있는 및 향 없는 포밍 비누와 함께 인큐베이션하고, 10분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 1C는 장미 향 있는 및 향 없는 포밍 비누와 함께 인큐베이션하고, 60분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 2A는 다양한 농도의 바디 워시와 함께 인큐베이션하고, 1분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 2B는 다양한 농도의 바디 워시와 함께 인큐베이션하고, 10분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 2C는 다양한 농도의 바디 워시와 함께 인큐베이션하고, 60분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 3A는 다양한 농도의 샴푸와 함께 인큐베이션하고, 1분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 3B는 다양한 농도의 샴푸와 함께 인큐베이션하고, 10분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 3C는 다양한 농도의 샴푸와 함께 인큐베이션하고, 60분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 4A는 컨디셔너와 함께 인큐베이션하고, 1분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 4B는 컨디셔너와 함께 인큐베이션하고, 10분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 4C는 컨디셔너와 함께 인큐베이션하고, 60분 인큐베이션 후에 엔. 유트로파 D23을 회복시킨 후에, 니트라이트 생성을 제시한다. 니트라이트 농도는 시간에 대해 플롯팅하였다.
도 5는 계면활성제 및 엔. 유트로파 D23과 이들의 적합성에 대한 연구의 표이다.

본 개시내용의 시스템 및 방법은 그 중에서도 "바이옴-친화성" 또는 "바이옴-적합성"인 것으로 고려될 수 있는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 제공한다. 본 개시내용의 시스템 및 방법은, 박테리아, 예를 들어 비병원성 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아와 조합되어 사용될 수 있고, 대상체에게 적용되는 제제 또는 조성물의 형태로 사용될 수 있는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 용도를 제공할 수 있다.

본 개시내용의 시스템 및 방법은 또한 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 제조, 품질 관리 시험, 및 생성물 또는 1종 이상의 성분과 박테리아, 예를 들어 비병원성 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아와의, 및 또는 대상체의 마이크로바이옴과의 적합성을 결정하기 위한 시험을 제공할 수 있다.

본 개시내용의 시스템 및 방법은 제품을 시중에 분배하고, 제품을 리필하고, 제품을 리사이클링하는 방법을 비롯하여, 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 시중 출시 및 유통시키기 위해 제공될 수 있다.

1. 정의

암모니아 산화 박테리아는 암모니아 또는 암모늄을 니트라이트로, 그리고 특정 조건 하에 일산화질소로 산화시킬 수 있는 박테리아를 지칭한다. 이는 소정의 속도로 수행될 수 있다. 상기 속도, 예를 들어 미리 결정된 속도는 적어도 50, 75, 125 또는 150 마이크로몰 NO₂ ^-/분, 예를 들어 약 100-150, 75-175, 75-125, 100-125, 125-150 또는 125-175 마이크로몰/분, 예를 들어 약 125 마이크로몰 NO₂ ^-/분의 속도로 암모늄 이온 (NH₄ ⁺) (예를 들어, 약 200 mM에서)에서 니트라이트 (NO₂ ^-)로의 전환을 지칭할 수 있다. 실시양태에서, 상기 속도, 예를 들어 미리 결정된 속도는 예를 들어 약 0.5의 OD를 갖는 연속식 배양의 경우 적어도 50, 75, 125 또는 150 나노몰 NO₂ ^-/분/ml, 예를 들어 약 100-150, 75-175, 75-125, 100-125, 125-150 또는 125-175 나노몰/분/ml, 예를 들어 약 125 나노몰 NO₂ ^-/분/ml의 속도로 암모늄 이온 (NH₄ ⁺) (예를 들어, 약 200 mM에서)에서 니트라이트 (NO₂ ^-)로의 전환을 지칭할 수 있다.

암모니아 산화 박테리아의 예에는 니트로소모나스 유트로파(Nitrosomonas eutropha) 균주, 예를 들어 D23 및 C91, 및 니트로소모나스, 니트로소코쿠스(Nitrosococcus), 니트로소스피라(Nitrosospira), 니트로소시스티스(Nitrosocystis), 니트로솔로부스(Nitrosolobus), 및 니트로소비브리오(Nitrosovibrio) 속의 다른 박테리아가 포함된다. D23 니트로소모나스 유트로파 균주는 2014년 4월 8일에 아메리칸 티슈 컬쳐 콜렉션 (American Tissue Culture Collection, ATCC) (미국 버지니아주 마나사스 유니버시티 불러바드 10801)에 수탁 번호 PTA-121157로 기탁된, AOB D23-100으로 명명되는 균주를 지칭한다. 수탁 번호 PTA-121157의 핵산 서열(들), 예를 들어 게놈 서열은 그의 전체가 본원에 참조로 포함된다. 특정 실시양태에서, 엔. 유트로파는 2015년 4월 15일에 출원된 PCT 출원 번호 PCT/US2015/025909에 기재된 균주이며, 상기 문헌은 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.

최적화된 니트로소모나스 유트로파 (엔. 유트로파)는 본원에서 사용될 때 최적화된 성장 속도; 최적화된 NH₄ ⁺ 산화 속도; 또는 NH₄ ⁺에 대한 최적화된 내성을 갖는 엔. 유트로파를 지창한다. 실시양태에서, 이는 적어도 1개의 뉴클레오티드, 예를 들어 암모니아 모노옥시게나제, 히드록실아민 옥시도리덕타제, 시토크롬 c554, 및 시토크롬 c_M552로부터 선택된 유전자에서의 뉴클레오티드에 있어서 천연 발생 엔. 유트로파와 상이하다. 상기 차이는 예를 들어 엔. 유트로파의 자발 발생 돌연변이, 유도된 돌연변이, 또는 직접적인 유전자 조작의 선택을 통해 발생할 수 있다. 실시양태에서, 이는 천연에서 함께 존재하지 않는 대립 유전자의 무리를 갖는다는 점에서 천연 발생 엔. 유트로파와 상이하다. 이들 차이는 피부 장애의 치료 또는 예방, 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환 또는 상태의 치료 또는 예방, 체취의 치료 또는 예방, 대상체에게 일산화질소를 공급하는 치료, 및 미생물 성장을 억제하는 치료 중 하나 이상을 제공할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "독립영양", 예를 들어 독립영양 박테리아는 영양분 공급원으로서 무기 물질을 이용하고 에너지 공급원으로서 광합성 또는 화학합성을 이용함으로써 스스로 자양분을 얻을 수 있는 임의의 유기체이다. 독립영양 박테리아는 다른 공급원으로부터 유래된 이산화탄소 및 ATP로부터, 암모니아의 니트라이트로의 공산화, 황화수소의 산화, 및 Fe2⁺에서 Fe3⁺로의 산화에 의해 유기 화합물을 합성할 수 있다_. 본 개시내용의 독립영양 박테리아는 감염을 유발할 수 없다.

본원에서 사용된 바와 같이, "무균성"은 다른 유기체를 실질적으로 함유하지 않는 유기체를 포함하는 조성물을 지칭한다. 예를 들어, 암모니아 산화 박테리아의 무균성 배양물은 암모니아 산화 박테리아 이외의 유기체를 실질적으로 함유하지 않는 배양물이다. 무균성 조성물은 유기체가 아닌 요소를 포함할 수 있으며, 예를 들어 이는 영양분 또는 부형제를 포함할 수 있다. 본원에서 논의된 암모니아 산화 박테리아의 임의의 실시양태, 제제, 조성물 또는 제형은 임의적으로 무균성인 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다.

일부 실시양태에서, "실질적으로 함유하지 않는"은 "실질적으로 함유하지 않는" 것으로 나타낸 항목을 검출하는데 이용되는 방법에 의해 검출 불가능한 것을 지칭한다. 예를 들어, "보존제가 실질적으로 함유하지 않는"은 보존제를 검출하는데 이용되는 방법에 의해 검출 불가능한 것을 지칭한다. "미생물을 실질적으로 함유하지 않는"은 다른 유기체를 검출하는데 이용되는 방법, 예를 들어 배양물의 플레이팅 및 콜로니 형태의 실험, 또는 보존된 유전자, 예컨대 16S RNA를 위한 PCR에 의해 검출 불가능한 것을 지칭한다.

최소 억제 농도 (MIC) 시험과 같은 시험을 수행할 수 있다. MIC는 미리 결정된 기간 동안 인큐베이션한 후에, 예를 들어 밤새 인큐베이션한 후에, 예를 들어 12시간 또는 24시간 인큐베이션한 후에 미생물의 가시적인 성장을 억제하는 항미생물제의 최저 농도로서 정의된다.

"배양"은 성장을 촉진하는, 즉, 세포 분열을 촉진하는 조건 하에 원하는 박테리아의 양을 생성하는 공정을 지칭한다. 상기 조건은 특정한 배양 배지, 설정 온도 범위 및/또는 진탕 속도를 포함할 수 있다. 박테리아는 액체 배양물 중에서 또는 플레이트, 예를 들어 아가 플레이트 상에서 배양할 수 있다.

완전 엔. 유로파에아(N. europaea) 배지는 Ensign et al., "In vitro activation of ammonia monooxygenase from Nitrosomonas europaea by copper." J Bacteriol. 1993 Apr;175(7):1971-80에 기재된 엔. 유로파에아 성장 배지를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "단리된"은 그의 원래 또는 본래 환경 (예를 들어, 천연 발생인 경우 천연 환경)으로부터 제거된 물질을 지칭한다. 예를 들어, 살아있는 동물에 존재하는 천연 발생 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드는 단리된 것이 아니지만, 인간의 개입에 의해 천연계에 공존하는 일부 또는 모든 물질로부터 분리된 동일한 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드는 단리된 것이다. 이러한 폴리뉴클레오티드는 벡터의 일부일 수 있고/거나 이러한 폴리뉴클레오티드 또는 폴리펩티드는 조성물의 일부일 수 있고, 이러한 벡터 또는 조성물이 천연에서 발견되는 환경의 일부가 아니라는 점에서 여전히 단리된 것일 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "최적화된 성장 속도"는 2015년 4월 15일에 출원된 PCT/US2015/025909에 기재된 바와 같이 배치 조건 하에 배양될 때 약 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10시간 미만의 배가 시간; 2015년 4월 15일에 출원된 PCT/US2015/025909에 기재된 바와 같이 케모스탓트 조건 하에 성장될 때 약 16, 18, 20, 22, 24 또는 26시간 미만의 배가 시간; 또는 약 1 또는 2일에 걸쳐 약 0.15에서부터 적어도 약 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7 또는 0.8까지의 OD600으로 성장 중 하나 이상을 지칭한다. 실시양태에서, 최적화된 성장 속도는 천연 발생 엔. 유트로파보다 적어도 10, 20, 30, 40 또는 50% 더 짧은 배가 시간을 갖는 것이다.

본원에서 사용된 바와 같이, "최적화된 NH₄ ⁺ 산화 속도"는 적어도 약 50, 75, 125, 또는 150 마이크로몰/분의 NH₃ 또는 NH₄ ⁺에서 NO₂ ^-로의 전환 속도를 지칭한다. 예를 들어, 상기 속도는 적어도 약 50, 75, 125 또는 150 마이크로몰/분의 NH₄ ⁺ (예를 들어, 약 200 mM에서)에서 NO₂ ^-로의 전환일 수 있다. 실시양태에서, 최적화된 NH₄ ⁺ 산화 속도는 천연 발생 엔. 유트로파보다 적어도 10, 20, 30, 40 또는 50% 더 빨리 NH₃ 또는 NH₄ ⁺가 NO₂ ^-로 전환되는 것이다. 실시양태에서, 상기 속도는 적어도 약 50, 75, 125 또는 150 나노몰/분/ml의 NH₃ 또는 NH₄ ⁺에서 NO₂ ^-로의 전환이다. 예를 들어, 상기 속도는 약 0.5의 OD를 갖는 연속식 배양의 경우 적어도 약 50, 75, 125 또는 150 나노몰/분/ml의 NH₄ ⁺ (예를 들어, 약 200 mM에서)에서 NO₂ ^-로의 전환일 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "NH₄ ⁺에 대한 최적화된 내성"은 적어도 약 24 또는 48시간 동안 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275 또는 300 mM 초과의 NH₃ 또는 NH₄ ⁺ 조건 하에 성장하는 능력을 지칭한다. 실시양태에서, NH₄ ⁺에 대한 최적화된 내성은 NH₃ 또는 NH₄ ⁺의 선택된 농도의 존재 하에 천연 발생 엔. 유트로파에 비해 적어도 10, 20, 30, 40 또는 50% 더 빨리 또는 적어도 10, 20, 30, 40 또는 50% 더 길게 성장하는 능력을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "조합하여" 투여되는 것은, 2가지 (또는 그 이상의) 상이한 치료를 대상체가 장애로 고통받는 과정 동안에 대상체에게 전달하는 것을 의미하며, 예를 들어 상기 2가지 이상의 치료는 대상체가 장애를 가진 것으로 진단된 후에 또는 장애가 치유 또는 제거되기 전에 전달된다. 일부 실시양태에서, 1가지 치료의 전달은 두번째 전달이 시작될 때 여전이 일어나고 있어서, 중복되도록 한다. 이는 본원에서 때때로 "동시에" 또는 "수반하여" 또는 "공동 전달"로서 지칭된다. 다른 실시양태에서, 1가지 치료의 전달은 다른 치료가 시작되기 전에 종료된다. 이는 때대로 "연속적인" 또는 "순차적 전달" 또는 "연이은 전달"로서 지칭된다. 어느 한 경우의 실시양태에서, 치료는 조합된 투여 때문에 더욱 효과적이다. 예를 들어, 두번째 치료가 더욱 효과적이고, 예를 들어 두번째 치료를 줄이면 동등한 효과가 확인되거나, 또는 첫번째 치료의 부재 하에 두번째 치료를 투여한 경우에 확인되는 것보다 두번째 치료가 더 큰 정도로 증상을 감소시키거나, 또는 첫번째 치료와 유사한 상황이 확인된다. 일부 실시양태에서, 장애와 관련된 증상 또는 다른 파라미터의 감소가 다른 치료의 부재 하에 전달된 1가지 치료에서 관찰되는 것보다 더 크도록 전달된다. 2가지 치료의 효과는 부분적으로 상가적이거나, 전체적으로 상가적이거나, 또는 상가적인 것보다 더 클 수 있다 (즉, 상승효과적). 전달된 첫번째 치료의 효과가 두번째가 전달될 때 여전히 검출가능하도록 전달할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "조합하여" 투여하는 것은 2가지 (또는 그 이상의) 상이한 제제, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품, 예를 들어 암모니아 산화 함유 제품을 주어진 기간에 걸쳐 대상체에게 전달하는 것을 의미한다. 2가지 이상의 상이한 제제는 동시에 또는 연속적으로 전달될 수 있다.

"천연 제품"은 적어도 부분적으로 천연으로부터 유래될 수 있는 제품일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있다. 이는 살아있는 유기체에 의해 생성된 것일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있고, 유기체 자체를 포함할 수 있다. 천연 제품은 전체 유기체 및 유기체의 일부 (예를 들어, 식물의 잎), 유기체로부터의 추출물, 유기체로부터의 유기 화합물, 유기체로부터의 정제된 유기 화합물을 포괄 또는 포함할 수 있다. 천연 제품은 발견된 유기 물질 및 세포, 예컨대 일차 대사산물 (아미노산, 탄수화물 및 핵산) 및 이차 대사산물 (제한된 범위의 종에서 발견된 유기 화합물, 예를 들어 폴리케티드, 지방산, 테르페노이드, 스테로이드, 페닐프로파노이드, 알칼로이드, 특수 아미노산 및 펩티드, 특수 탄수화물)일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있다. 천연 제품은 중합체성 유기 물질, 예컨대 셀룰로스, 리그닌 및 단백질일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있다.

천연 제품은 상업적 목적을 위한 생성물일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있으며, 화장품, 식이 보조제, 및 천연 공급원으로부터 생성된 식품을 지칭한다. 천연 제품은 치료적 이익을 가질 수 있는, 예를 들어 질환 또는 상태를 치료하는 약리학적 또는 생물학적 활성을 가질 수 있다. 천연 제품은 전형적인 의약, 화장품학적 목적을 위한 치료, 및 스파 치료에 포함될 수 있다. 본원에서 지칭되는 천연 제품은 1종 이상의 다른 성분, 예를 들어 부형제를 포함하는 제제 또는 제형에 도입되는, 천연 제품으로 기재된 임의의 1종 이상의 성분을 포함할 수 있다. 천연 제품으로 지칭되는 제제 또는 제형은 본원에 정의된 천연 제품 및 1종 이상의 추가 성분 또는 구성분을 포함할 수 있다. 본 개시내용에 걸쳐 논의되는 임의의 조성물, 제제 또는 제형은 1종 이상의 천연 제품일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "존재" 또는 "수준"은 성분, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아, 암모니아, 암모늄 이온, 우레아, 니트라이트 또는 일산화질소 중 임의의 1종 이상의 정성적인 또는 정량적인 양을 지칭할 수 있다. 존재 또는 수준은 0의 값 또는 성분이 존재하지 않음을 포함할 수 있다.

용어 "폴리펩티드", "펩티드" 및 "단백질" (단쇄의 경우)은 본원에서 아미노산 중합체를 지칭하기 위해 상호 교환적으로 사용된다. 중합체는 선형 또는 분지형일 수 있고, 이는 개질된 아미노산을 포함할 수 있고, 이는 비-아미노산에 의해 개재될 수 있다. 상기 용어는 또한 개질된 아미노산 중합체, 예를 들어 디술파이드 결합 형성, 글리코실화, 지질화, 아세틸화, 포스포릴화, 또는 임의의 다른 조작, 예컨대 표지화 성분과의 접합을 포괄한다. 폴리펩티드는 천연 공급원으로부터 단리될 수 있고, 진핵생물 또는 원핵생물 숙주로부터의 재조합 기술에 의해 생산될 수 있거나, 또는 합성 절차에 의한 생성물일 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "대상체"는 동물, 포유류, 인간, 비-인간 동물, 가축 동물, 또는 반려 동물을 포함할 수 있다. 용어 "대상체"는 인간 및 비-인간 동물, 예를 들어 척추동물, 대동물 및 영장류를 포함하는 것으로 의도된다. 특정 실시양태에서 대상체는 포유류 대상체이고, 특정 실시양태에서 대상체는 인간 대상체이다. 인간에 대한 적용이 명백히 예상되지만, 수의학적 적용, 예를 들어 비-인간 동물에 대한 적용 또한 본원에서 예상된다. 본 개시내용에서 용어 "비-인간 동물"에는 모든 척추동물, 예를 들어 비-포유류 (예컨대 조류, 예를 들어 닭; 양서류; 파충류) 및 포유류, 예컨대 비-인간 영장류, 가축으로 및 농업적으로 유용한 동물, 예를 들어 그 중에서도 양, 개, 고양이, 소, 돼지, 래트가 포함된다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "계면활성제"에는 두 액체 사이의 또는 액체와 고체 사이의 표면 장력 또는 계면 장력을 저하시킬 수 있는 음이온성, 양이온성, 비이온성 및 양쪽성 화합물이 포함된다. 계면활성제는 세정제, 습윤제, 유화제, 발포제 및 분산제로서 작용할 수 있다. 계면활성제는 부형제로 지칭될 수 있다. 계면활성제는 코카미도프로필 베타인 (콜라테릭(ColaTeric) COAB), 폴리에틸렌 소르비톨 에스테르 (예를 들어, 트윈 80 및 트윈 20), 에톡실화 라우릴 알콜 (로다서프(RhodaSurf) 6 NAT), 나트륨 라우레트 술페이트/라우릴 글루코시드/코카미도프로필 베타인 (플란타폰(Plantapon) 611 L UP), 나트륨 라우레트 술페이트 (예를 들어, 로다펙스(RhodaPex) ESB 70 NAT), 알킬 폴리글루코시드 (예를 들어, 플란타렌(Plantaren) 2000 N UP), 나트륨 라우레트 술페이트 (플란타렌 200), 닥터 브로너스 카스티야(Dr. Bronner's Castile) 비누, 닥터 브로너스 유아용 비누, 라우라민 옥시드 (콜라룩스 로(ColaLux Lo)), 나트륨 도데실 술페이트 (SDS), 폴리술포네이트 알킬 폴리글루코시드 (폴리수파네이트(PolySufanate) 160 P), 나트륨 라우릴 술페이트 (스테파놀-더블유에이 엑스트라 케이(Stepanol-WA Extra K)) 및 이들의 조합물 중 1종 이상을 단독으로 포함하거나, 또는 상기 열거된 것들, 또는 다른 계면활성제 또는 계면활성제-유사 화합물, 및 본 개시내용에 걸쳐 기재된 다른 화합물과 조합하여 포함할 수 있다. 닥터 브로너스 카스티야 비누 및 유아용 비누는 물, 유기 코코넛 오일, 수산화칼륨, 유기 올리브 오일, 유기 공정 거래 대마유, 유기 호호바 오일, 시트르산, 및 토코페롤을 포함한다.

계면활성제에는 나트륨 라우릴글루코시드 히드록시프로필술포네이트 (슈가®네이트(Suga®nate) 160NC), 라우라미도프로필 베타인 (콜라®테릭(Cola®Teric) LMB); 코카미도프로필 히드록시술타인 (콜라®테릭 CBS); 이나트륨 코코암포디아세테이트 (콜라®테릭 CDCX-LV); 나트륨 라우릴글루코시드 히드록시프로필 포스페이트 (슈가®팩스(Suga®Fax) D12)가 포함될 수 있다.

계면활성제에는 나트륨 라우로일 메틸 이세티오네이트 (이세룩스(Iselux)® LQ-CLR-SB); 나트륨 메틸 코코일 타우레이트 (퓨리액트(Pureact) WS Conc.); 아쿠아 (및) 나트륨 라우로일 메틸 이세티오네이트 (및) 코카미도프로필 베타인 (및) 나트륨 코코일 이세티오네이트 (및) 나트륨 메틸 올레오일 타우레이트 (이세룩스 ®SFS-SB)가 포함될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "트랜스제닉"은 DNA의 하나 이상의 외인성 부분을 포함하는 것을 의미한다. 외인성 DNA는 또 다른 유기체, 예를 들어 또 다른 박테리아, 박테리오파지, 동물 또는 식물로부터 유래된다.

본원에 사용된 용어 "완성된 화장품 제품"은 시중 출시할 준비가 된 및/또는 방출하기에 적합한 제품을 지칭한다. 예를 들어, 완성된 화장품 제품은 1종 이상의 성분을 함유하고 최종 사용자, 예를 들어 소비자에 의한 사용을 위해 제조 및 포장된 제품, 예를 들어 화장품 제품일 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 최종 사용자에 의해 사용될 최종 사용 용기에 배치된다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 임의의 특별한 순서로 제조, 혼합, 최종 사용 용기에 배치, 멸균, 시험 및 밀봉된 것 중 하나 이상일 수 있다.

완성된 화장품 제품의 "단위"는 최종 사용자에 의한 사용을 위해 또는 판매를 위해 개별 또는 완전 성분을 형성할 수 있는 완성된 화장품 제품의 단일 개체를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 단위는 단일 개체일 수 있지만, 더 크거나 또는 더 복잡한 전체 중 개별 성분을 형성할 수 있다. 실시양태에서, 단위는 판매를 위한 또는 최종 사용자에 의한 사용을 위한 화장품 제품을 함유하는 개별 최종 사용 용기일 수 있다.

본원에 사용된 용어 "최종 사용자"는 예를 들어 완성된 화장품 제품을 그 자신 또는 그녀 자신에게 적용함으로써 완성된 화장품 제품을 사용하게 될 사람, 또는 완성된 화장품 제품을 대상체, 예를 들어 또 다른 사람, 또는 동물, 예를 들어 반려 동물에게 제공하는 사람을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "권장 수명"은 완성된 화장품 제품의 제조자에 의해 제공될 수 있는 제안된 기간을 지칭한다. 권장 수명은, 상기 기간 동안 제품의 사용이 사용자에 대해 눈에 띄는 불리한 효과를 제공하지 않음을 정립하는 시험을 기준으로 할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "최종 사용 용기"는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 하우징하는 통을 지칭한다. 최종 사용 용기는 완성된 화장품 제품을 통으로부터 외부 환경으로 전달하는 것으로 허용할 수 있다. 특정 실시양태에서, 최종 사용 용기는 용기의 내용물의 역행성 흐름을 방지 또는 감소시킬 수 있다. 최종 사용 용기는 한방향 흐름 및/또는 0의 무용 부피를 제공하도록 구성될 수 있다.

최종 사용 용기는 용기의 내용물 및 외부 환경에 적합성인 임의의 적합한 물질로 구성될 수 있다. 예를 들어, 최종 사용 용기는 유리, 알루미늄 또는 1종 이상의 중합체, 예를 들어 고밀도 폴리에틸렌 중합체로 제조될 수 있다.

최종 사용 용기는 전달 시스템, 예를 들어 용기로부터의 내용물이 용기의 외부에 배치되는 것을 허용하는 시스템 또는 메카니즘을 포함할 수 있다. 예를 들어 전달 시스템은 예를 들어 펌프를 사용하는 디스펜서를 포함할 수 있다.

"마이크로바이옴"은 대상체의 표면, 예를 들어 대상체의 소화관, 입, 피부 및/또는 다른 곳에서 사는 집단, 예를 들어 1종 이상의 미생물을 지칭한다. 상기 집단은 대상체의 삶을 지탱하는 것과 관련된 하나 이상의 유익한 기능 및/또는 이익을 가질 수 있다.

본원에 사용된 용어 "보존제"는 미생물, 예를 들어 박테리아 또는 진균의 성장을 사멸시키거나 또는 억제하는 화합물을 지칭한다. 예시적인 보존제에는 본원에서 상세한 설명의 마지막에 부록 VI에 열거된 것들이 포함된다. 본원에서 언급된 보존제는 항-박테리아 보존제로 지칭될 수 있다. 본원에서 언급된 보존제는 항산화성 보존제로 지칭되지 않을 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이 "멸균성 보증 수준"은 단일 단위, 예를 들어 단일 화장품 제품, 예를 들어 단일 완성된 화장품 제품이 멸균된 후에 비멸균성일 확률이다. 멸균성 보증 수준 (SAL)은 약 10^-5 또는 10^-6일 수 있고, 이는 1/100,000의 기회 (10^-5의 경우) 또는 1/1,000,000의 기회 (10^-6의 경우)가 비멸균성 단위임을 의미한다. SAL은 또한 멸균 공정의 사멸 효능을 기재할 수 있다. 매우 유효한 멸균 공정은 매우 낮은 SAL, 예를 들어 10^-5 또는 10^-6을 갖는다.

본원에서 사용된 바와 같이 "질환 또는 상태의 치료"는 유사하지만 치료하지 않은 환자에 비해 질환 또는 상태의 적어도 하나의 증상의 중증도 또는 빈도를 감소시키는 것을 지칭한다. 치료는 또한 유사하지만 치료하지 않은 환자에 비해 질환 또는 상태의 진행을 멈추거나, 늦추거나 또는 역전시킬 수 있다. 치료는 질환 및/또는 하나 이상의 증상의 근본 원인을 다루는 것을 포함할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이 "치료 유효량"은 질환 또는 상태의 진행을 예방하는데 또는 퇴행을 유발하는데 충분한, 또는 질환 또는 상태의 증상을 경감시킬 수 있거나, 또는 원하는 결과를 달성할 수 있는 용량을 지칭한다. 치료 유효 용량은 예를 들어 박테리아의 수 또는 생존가능한 박테리아의 수 (예를 들어, CFU) 또는 박테리아의 질량 (예를 들어, 밀리그램, 그램 또는 킬로그램) 또는 박테리아의 부피 (예를 들어, mm³)로서 측정될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이 용어 "생존가능성"은 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아가 미리 결정된 속도로 암모니아, 암모늄 또는 우레아를 니트라이트로 산화시키는 능력을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 상기 속도는 적어도 50, 75, 125, 또는 150 마이크로몰 NO₂ ^-/분, 예를 들어 약 100-150, 75-175, 75-125, 100-125, 125-150 또는 125-175 마이크로몰/분, 예를 들어 약 125 마이크로몰 NO₂ ^-/분의 속도로 암모늄 이온 (NH₄ ⁺) (예를 들어, 약 200 mM에서)에서 니트라이트 (NO₂ ^-)로의 전환을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이 "활성화"는 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아에 대해 상대적으로 사용된다. 활성화는 암모니아 산화 박테리아를 잠재적으로 더욱 활성인 상태, 예를 들어 성장 상태로 둘 수 있는 임의의 작용을 지칭한다. 활성화는 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 니트라이트, 일산화질소 또는 일산화질소 전구체로의 전환을 일부 방식으로 보조하기 위해 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아를 자극하는 것을 지칭할 수 있다. 활성화는 박테리아 콜로니의 정립을 돕는 것, 예를 들어 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아가 다른 기존 박테리아와 경쟁하는 것을 허용하는 것을 지칭할 수 있다. 활성화는 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 지속가능성 및/또는 성장에 유리할 수 있는 환경을 제공하는 것을 지칭할 수 있다. 활성화는 환경 또는 표면에 대한 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 이용가능성을 가속시키는 것을 지칭할 수 있다. "활성화"는 "활성화된" 또는 "성장 상태"에 있는 암모니아 산화 박테리아를 제공할 수 있다. "활성화"는 활성화제의 사용에 의해 일어날 수 있다. 암모니아 산화 박테리아는 활성화제와 접촉하여 "활성화된" 또는 "성장" 상태의 암모니아 산화 박테리아를 제공할 수 있다. 이는 용기, 예를 들어 최종 사용 용기, 전달 디바이스, 또는 전달 시스템의 내부 또는 외부에서, 예를 들어 제1 챔버, 제2 챔버, 혼합 챔버, 제3 또는 추가 챔버, 또는 이들의 조합물의 내부에서 일어날 수 있다. 활성화제는 암모니아, 암모늄 이온 또는 우레아 중 적어도 하나일 수 있다. 활성화제는 암모늄 염, 예를 들어 염화암모늄 또는 황산암모늄일 수 있다. 활성화제, 예를 들어 암모늄 염, 예를 들어 염화암모늄 또는 황산암모늄의 농도는 약 10 마이크로몰 내지 약 100 밀리몰 범위일 수 있다. 특정 측면에서 활성화제, 예를 들어 암모늄 염, 예를 들어 염화암모늄 또는 황산암모늄의 농도는 약 0.5 mM 내지 약 50 mM 범위일 수 있다. 활성화제는 용액, 현탁액, 파우더, 예를 들어 결정질 형태, 배지, 완충제일 수 있거나, 또는 활성화제의 유지에 적합한 담체 중에 배치되거나 또는 담체로서 제공될 수 있다. 활성화제는 용기, 예를 들어 최종 사용 용기 내에 존재할 수 있거나, 또는 용기와 별도로, 예를 들어 또 다른 용기에 존재할 수 있다. 암모니아 산화 박테리아는 AOB를 원하는 상태, 예를 들어 보관 상태, 예를 들어 수성 현탁액, 겔, 또는 파우더 형태로 유지하기 위한 임의의 적합한 형태일 수 있다. 암모니아, 암모늄 이온 또는 우레아 중 적어도 하나는 암모니아 산화 박테리아의 성장을 촉진시키기 위한 배지 또는 완충제, 예를 들어 AOB 배지 또는 성장 배지 중에 있을 수 있다. 시간-방출 또는 제어된 방출 활성화제, 예를 들어 우레아를 활성화제로서 사용될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이 "작동"은 일부 작용이 일어나는 것, 예를 들어 과정이 시작하는 것 또는 무엇이 동작하는 것을 의미한다. 일부 실시양태에서, 작동은 용기, 예를 들어 최종 사용 용기의 장벽을 파손시키거나, 용기의 내용물을 혼합하거나, 또는 용기의 하나 이상의 내용물의 이동을 개시하거나, 예를 들어 용기의 하나 이상의 내용물을 용기의 외부, 예를 들어 표면 또는 환경으로 전달하는 것을 지칭할 수 있다. 일부 실시양태에서, 장벽의 작동은 제1 챔버와 제2 챔버의 내용물의 접촉, 예를 들어 제1 챔버의 내용물의 제어된 방출, 또는 제2 챔버로부터 내용물의 제어된 방출, 또는 이들 둘 다를 허용하는, 시간에 걸쳐 분해되는 1종 이상의 물질을 포함할 수 있다.

작동은 또한 용기, 예를 들어 최종 사용 용기의 내용물을 용기의 외부, 예를 들어 표면 또는 환경으로 전달하는 것을 허용하는 일부 작용을 의미할 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품을 함유하는 최종 사용 용기의 작동이 일어나는 경우, 완성된 화장품 제품을 용기의 외부로 전달하기 위해 용기의 밀봉을 파손시킬 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품을 함유하는 최종 사용 용기의 작동이 일어나는 경우, 완성된 화장품 제품을 용기의 외부로 전달하기 위해 용기를 개방할 수 있거나, 예를 들어 밸브를 개방할 수 있거나 또는 펌프를 작동시킬 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이 "장벽"은 용기의 내용물, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 예를 들어 용기의 제1 챔버와 제2 챔버 사이에서 통과를 방해하거나 분리된 채로 유지시키는 작용을 할 수 있는 임의의 구조 또는 형태를 의미할 수 있다. 장벽은 밸브, 예를 들어 체크 밸브, 여과 물질, 필름, 왁스, 지질, 중합체, 또는 제어 방출 물질, 예를 들어 느린 방출 물질의 형태일 수 있다. 장벽은 용기의 작동 시에 용기로부터의 내용물이 용기의 외부로 통과하는 것을 허용할 수 있는 물질 또는 구조일 수 있다. 장벽은 용기의 작동 시에 제1 챔버에서 제2 챔버로의 내용물의 통과, 제2 챔버에서 제1 챔버로의 내용물의 통과, 또는 이들 둘 다를 허용할 수 있는 물질 또는 구조일 수 있다. 작동 시에 예를 들어 장벽을 뚫거나, 구멍 내거나, 찌르거나, 천공시키거나, 관통시키거나, 분열시키거나, 비틀거나, 개방시키거나 또는 파열시킴으로써 장벽을 붕괴시킬 수 있다. 장벽은 용기의 하나 이상의 내용물과 접촉 시에 분해되지 않을 수 있는 밸브, 예를 들어 체크 밸브, 가요성 또는 비가요성 물질의 형태, 또는 용기의 하나 이상의 내용물과 접촉 시에 분해될 수 있는 가요성 또는 비가요성 물질, 여과기 물질의 형태일 수 있다. 장벽은 그의 목적에 적합한 임의의 물질, 예를 들어 통과를 방해하거나 또는 분리를 유지하도록 작용할 수 있는 물질, 예를 들어 중합체성 물질 또는 금속 물질로 제조될 수 있다.

장벽은 용기의 밀봉, 예를 들어 용기의 내용물, 예를 들어 완성된 화장품 제품이 용기 외부의 환경에 노출되는 것을 허용하지 않도록 및 용기의 외부에 있는 무언가가 용기의 내부, 예를 들어 완성된 화장품 제품에 들어 가는 것을 허용하지 않도록 용기의 밀봉을 제공할 수 있는 임의의 구조를 의미할 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용과 가장 관련이 있는 상태는 적어도 약 7.6의 pH, 암모니아, 미량 무기물, 산소 및 이산화탄소를 특징으로 하는 성장 상태, 예를 들어 최대 성장이다. 또 다른 상태는 약 7.4 이하의 pH를 특징으로 할 수 있거나 또는 이산화탄소의 부재를 특징으로 할 수 있다. 낮은 이산화탄소 상태 하에, 암모니아 산화 박테리아, 예를 들어 니트로소모나스는 계속해서 암모니아를 니트라이트로 산화시키고 ATP를 생성하지만, 단백질을 고정하고 생성하기 위한 이산화탄소가 결여되고, 예를 들어 충분한 이산화탄소가 결여되면, 대신에 에너지 저장 배지로서 사용되는 폴리포스페이트를 생성한다. 이는 암모니아 산화 박테리아가 소정의 기간 동안, 예를 들어 미리 결정된 기간 동안, 예를 들어 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7일, 1, 2, 3, 4주, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12개월, 1, 2, 3, 4 또는 5년 동안 "보관 상태"로 유지되는 것을 허용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 적어도 약 6개월 내지 약 1년 동안 보관 상태로 유지될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "성장 상태"는 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아가 적어도 약 7.6의 pH를 가질 수 있는 상태 또는 환경, 예를 들어 배지, 예를 들어 배양 배지, 예를 들어 성장 배지에 있는 것을 지칭한다. 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 1 마이크로몰 내지 1000 밀리몰일 수 있다. 미량 물질의 수준은 약 0.01 마이크로몰의 철 내지 200 마이크로몰의 철이다. 산소의 수준은 (예를 들어, 배지의) 약 5% 내지 100% 산소 포화도이다. 이산화탄소의 수준은 (예를 들어, 배지의) 약 20 ppm 내지 10% 포화도이다. 특정 측면에서, 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 10 마이크로몰 내지 100 밀리몰일 수 있다. 미량 물질의 수준은 약 0.1 마이크로몰의 철 내지 20 마이크로몰의 철이다. 산소의 수준은 약 5% 내지 100% 산소 포화도이다. 이산화탄소의 수준은 (예를 들어, 배지의) 약 200 ppm 내지 5% 포화도이다.

본원에서 사용된 바와 같이, "폴리포스페이트 로딩 상태"는 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아가 약 7.4 이하의 pH를 가질 수 있는 상태 또는 환경, 예를 들어 배지, 예를 들어 배양 배지, 예를 들어 성장 배지에 있는 것을 지칭한다. 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 1 마이크로몰 내지 2000 밀리몰이다. 미량 물질의 수준은 0.01 마이크로몰의 철 내지 200 마이크로몰의 철이다. 산소의 수준은 (예를 들어, 배지의) 약 0% 내지 100% O₂ 포화도이다. 이산화탄소의 수준은 약 0 내지 400 ppm 사이/미만이고, 포스페이트 수준은 약 1 마이크로몰 초과이다. 특정 측면에서, 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 10 마이크로몰 내지 200 밀리몰이다. 미량 물질의 수준은 0.1 마이크로몰의 철 내지 20 마이크로몰의 철이다. 산소의 수준은 약 5% 내지 100% O₂ 포화도이다. 이산화탄소의 수준은 약 0 내지 200 ppm 사이/미만이고, 포스페이트 수준은 약 10 마이크로몰 초과이다.

폴리포스페이트 로딩 상태의 목적은 AOB에게 충분한 암모니아, 암모늄 이온 및/또는 우레아를 제공하고, ATP를 생성할 수 있도록 O₂를 제공하는 것이지만, CO₂를 고정하기 위해 상기 ATP를 사용할 수 없고, 대신에 박테리아에 의해 저장될 수 있는 폴리포스페이트를 생성하기 위해 상기 ATP를 사용하도록 CO₂ 및 카르보네이트를 거부하는 것이다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "보관 상태"는 독립영양 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아가 약 7.4 이하의 pH (일부 실시양태에서, pH가 7.6 이하일 수 있음)를 갖는 상태 또는 환경, 예를 들어 배지, 예를 들어 배양 배지, 예를 들어 성장 배지에 있는 것을 지칭한다. 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 1 내지 1000 마이크로몰이다. 미량 물질의 수준은 약 0.1 내지 100 마이크로몰이다. 산소의 수준은 (예를 들어, 배지의) 약 0 내지 100% 포화도이다. 이산화탄소의 수준은 약 0 내지 800 ppm이다. 특정 측면에서, 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 10 내지 100 마이크로몰이다. 미량 물질의 수준은 약 1 내지 10 마이크로몰이다. 산소의 수준은 (예를 들어, 배지의) 약 0 내지 100% 포화도이다. 이산화탄소의 수준은 약 0 내지 400 ppm이다.

암모니아 산화 박테리아 (AOB)는 본 개시내용의 일부 실시양태에 따라 성장 상태 동안에 AOB 바이오매스를 생성한 다음, AOB를 폴리포스페이트 로딩 상태에 노출시킨 다음, 배지를 제거하고, AOB를 완충제, 예를 들어 보관 완충제 중에 재현탁시킴으로써 (즉, 보관 상태) 생성된다.

본원에서 지칭되는 바와 같이 "성장 배지" 또는 "AOB 배지"는 표 1 또는 표 2의 하기 성분을 포함한다:

표 1.

표 2.

본원에 사용된 바와 같이 "열화 기준 유통기한 날짜"는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 제품이 그의 의도된 목적에 적합하지 않게 일부 방식으로 분해될 것으로 예상되는 날짜이다. 일부 예에서, 이는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품이 분해되는 날짜일 수 있다. 제품이 분해되었다는 표시는 제품이 분해되었다는 일부 표시를 제공하는, 화장품 제품 또는 화장품 제품 포장, 예를 들어 최종 사용 용기 상에 또는 안에 있는 지시기에 의해 제공될 수 있다. 예를 들어, 이는 발색 지시기에 의해 달성될 수 있다.

본원에 사용된 바와 같이 "바이옴-적합성 기준 유통기한 날짜"는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 제품이 그의 의도된 목적에 적합하지 않게 일부 방식으로 오염되기 시작할 것으로 예상되는 날짜이다. 일부 예에서, 이는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품이 오염되기 시작한 날짜일 수 있다. 제품이 오염되기 시작했다는 표시는 제품이 오염되었다는 일부 표시를 제공하는, 화장품 제품 또는 화장품 제품 포장, 예를 들어 최종 사용 용기 상에 또는 안에 있는 지시기에 의해 제공될 수 있다. 예를 들어, 이는 발색 지시기에 의해 달성될 수 있다. 오염물은 제품을 그의 의도된 사용에 적합하지 않게 만들 수 있는 것을 지칭할 수 있으며, 제품의 밀봉 시에 및/또는 제품의 멸균 이후에 완성된 화장품 제품에 존재하지 않는 임의의 품목을 포함할 수 있다.

"바이옴-친화성"은 대상체의 마이크로바이옴의 최소 파괴를 허용할 수 있는 것, 예를 들어 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 지칭할 수 있다. 예를 들어, 바이옴-친화성은 적용 시점의 마이크로바이옴을 유지하고, 최소로 파괴하고/거나, 제품의 적용후 소정 기간 이후에 상기 마이크로바이옴으로 되돌리도록 허용할 수 있는, 대상체에 적용될 수 있는 제품을 지칭한다. 실시양태에서, 바이옴-친화성은 제품이 대상체의 암모니아 산화 박테리아의 최소 파괴를 허용할 수 있다는 점에서 암모니아 산화 박테리아-친화성인 것으로 지칭될 수 있다.

실시양태에서, "바이옴-친화성"은 "바이옴-적합성"으로 지칭될 수 있다.

"리사이클러"는 품목을 동일한 또는 상이한 형태로 재사용 또는 재개발할 수 있는 임의의 업체 또는 사람을 지칭한다. 리사이클러는 추가의 사용 또는 활성에 적용되거나 또는 적합할 수 있는 품목을 수락할 수 있다. 리사이클러는 추가의 처리 또는 사용을 위해 시스템을 통해 품목을 통과시킬 수 있다.

본 개시내용에 걸쳐, 제형은 조성물 또는 제제를 지칭할 수 있다.

표 3. 바이옴-친화성 제품의 잠재적인 성분

2. 화장품 제품

바이옴-친화성 또는 바이옴-적합성일 수 있는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품이 제공된다. 화장품 제품은 바이옴-친화성일 수 있는 1종 이상의 성분을 포함할 수 있다.

본 개시내용의 화장품 제품은 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 임의의 1종 이상일 수 있거나, 또는 이를 포함할 수 있거나, 또는 이에 배치될 수 있다.

화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 바디 클렌저, 컨디셔너를 포함하는 완성된 화장품 제품이 제공될 수 있다. 완성된 화장품 제품은 최종 사용 용기에 배치될 수 있다.

완성된 화장품 제품은 하기 특성 중 하나 이상을 가질 수 있다: (a) 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품에 보존제, 예를 들어 파라벤을 실질적으로 함유하지 않을 수 있다. (b) 최종 사용 용기가 역행성 흐름을 감소시키도록 구성될 수 있다. (c) 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이 멸균될 수 있다. 상기 멸균은 방사선조사, 예를 들어 감마선 방사선조사, 또는 가열 멸균을 포함할 수 있다. (d) 하기 (i) 및 (ii) 조성물 중 하나를 갖는다: (i) 화장품 제품이 점도 개질제, 1종의 클렌저/계면활성제, 2종의 클렌저/계면활성제, 습윤제, 피부 컨디셔너, 및 향기제를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나, 또는 그로 이루어질 수 있다.

상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 하기 조성물(들)을 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나, 또는 그로 이루어질 수 있다:

이 제품은 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 워시로 사용될 수 있다. 상기 제품은 100%를 만들기 위해 물을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 화장품 제품, 예를 들어 샴푸는 시트르산을 함유할 수 있거나 또는 함유하지 않을 수 있고, 시트르산은 pH 안정화가 필요하거나 또는 이를 원하는 경우에 요구될 수 있다.

(ii) 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 하기 조성물(들)을 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나, 또는 그로 이루어질 수 있다:

이 제품은 화장품 제품, 예를 들어 바디, 손 또는 얼굴을 위한 클렌저로 사용될 수 있다. 상기 제품은 100%를 만들기 위해 물을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 화장품 제품, 예를 들어 클렌저는 시트르산을 함유할 수 있거나 또는 함유하지 않을 수 있고, 시트르산은 pH 안정화가 필요하거나 또는 이를 원하는 경우에 요구될 수 있다.

다른 가수분해된 단백질이 사용될 수 있고, 벼, 콩 바오밥, 및 귀리가 포함될 수 있으나 이로 제한되지 않는다. 다른 향기제 대안이 고려될 수 있다.

완성된 화장품 제품은 본원에 기재된 특성 중 하나 이상 또는 모두를 가질 수 있다.

상기 성분을 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나, 또는 그로 이루어질 수 있는 모발 및/또는 피부 컨디셔너를 비롯한 다른 제품이 고려된다.

상기 제품은 100%를 만들기 위해 물을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 화장품 제품, 예를 들어 컨디셔너는 시트르산을 함유할 수 있거나 또는 함유하지 않을 수 있고, 시트르산은 pH 안정화가 필요하거나 또는 이를 원하는 경우에 요구될 수 있다.

하나 이상의 비제한적인 실시양태에 따라, 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품, 예를 들어 바이옴-친화성 샴푸는 하기 조성물(들)을 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나, 또는 그로 이루어질 수 있다:

하나 이상의 비제한적인 실시양태에 따라, 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품, 예를 들어 바이옴-친화성 얼굴 및/또는 바디 클렌저는 하기 조성물(들)을 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나, 또는 그로 이루어질 수 있다:

다양한 개시된 비제한적인 실시양태에 따라, 각각의 개별 성분의 양은 제품의 유사한 특성을 여전히 유지하면서 예를 들어 1%, 5% 또는 10%만큼 달라질 수 있다.

화장품 제품에 보존제를 함유하지 않을 수 있으며, 예를 들어 화장품 제품은 보존제를 포함하지 않는다. 보존제는 본원의 상세한 설명의 마지막에 있는 부록 VI에 열거된 화합물로서 확인될 수 있다. 최대한, 완성된 화장품 제품은 500 ppb 미만의 보존제, 예를 들어 부록 VI에 열거된 것들 중 하나 이상을 가질 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 100 ppb 미만의 보존제, 예를 들어 부록 VI에 열거된 것들 중 하나 이상을 가질 수 있다. "천연" 보존제로 사용될 수 있는 물질이 간략한 예로는 님 오일, 레몬 즙 또는 오일, 비 프로폴리스, 로즈마리 추출물, 그레이프프루트 종자 추출물, 시트르산, 알파 토코페롤 (비타민 E로도 공지됨), 소르브산칼륨, 페녹시에탄올, 살리실산, 벤조산나트륨, 소르브산, 식물 에센셜 오일 (타임, 오레가노, 레몬그라스, 라벤더, 로즈마리 등), 락트산이 포함된다.

최대한, 완성된 화장품 제품은 약 1 ppm 내지 10 ppb의 보존제, 예를 들어 부록 VI에 열거된 것들 중 하나 이상; 예를 들어 약 10 ppb 내지 50 ppb, 예를 들어 약 50 ppb 내지 100 ppb, 예를 들어 1000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200, 100, 50, 40, 10, 5, 1 ppb 미만의 1종 이상 보존제, 예를 들어 부록 VI에 열거된 1종 이상의 보존제를 가질 수 있다.

일부 실시양태에서, 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 보존제-무함유 특성은 본원에 개시된 시험을 통해 입증될 수 있다. 예를 들어, 1종 이상의 미생물, 예를 들어 미생물, 예를 들어 박테리아 또는 진균에 노출 시, 예를 들어 1종 이상의 미생물의 성장을 지원할 것이다. 예를 들어, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이 미생물, 예를 들어 박테리아 또는 진균으로의 챌린지에 노출되는 경우, 이는 미생물, 예를 들어 U.S.P. 51, 항미생물 유효성 시험 (USP31-NF26 제67면, 본원에 전문이 참조로 포함됨)에 의해 결정 시 상기 미생물의 성장을 지원할 것이다. 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은, 처리, 예를 들어 멸균 처리 또는 보존제 첨가의 부재 하에, 예를 들어 U.S.P. 51, 항미생물 유효성 시험에 의해 측정 시 미생물 성장, 예를 들어 박테리아 또는 진균 성장을 지원한다.

일부 실시양태에서, 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 보존제-무함유 특성은 치료, 예를 들어 멸균 처리 또는 보존제 첨가의 부재 하에 1종 이상 미생물, 예를 들어 미생물, 예를 들어 박테리아 또는 진균을 지원하는 것에 의해 입증될 수 있다.

특정 실시양태에서, 화장품 제품은 최종 사용 용기에 배치될 수 있고, 완성된 화장품 제품은 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다. 화장품 제품은 샴푸일 수 있다.

특정 실시양태에서, 화장품 제품은 최종 사용 용기에 배치될 수 있고, 완성된 화장품 제품은 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산을 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다. 화장품 제품은 클렌저일 수 있다.

특정 실시양태에서, 화장품 제품은 최종 사용 용기에 배치될 수 있고, 완성된 화장품 제품은 히드록시에틸 셀룰로스, 미리톨 313 C8-10 트리글리세리드, 코코-글루코시드 및 글리세릴 올레에이트, 폴리소르베이트-80, 및 천연 장미수를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다. 화장품 제품은 컨디셔너일 수 있다.

상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 향기, 색상, 점도, 거품 형성 및 거품 안정성, 접착력, 수분 보유, 수분 결합, pH 안정화, 클렌징, 증점화, 유연화, 컨디셔닝, 예를 들어 모발 또는 피부 컨디셔닝, 지질 층 강화, 장벽 형성, 또는 필름 형성 중 하나 이상을 제공하기 위해 첨가된 성분을 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 항산화제, 지방 물질/오일, 증점제, 유연제, 유화제, 광 차단제, 거품 형성제 및 거품 안정화제, 소포제, 보습제, 향기제, 계면활성제, 충전제, 격리제, 중합체, 산성화제 또는 염기성화제, 염료, 착색제, 안료, 펄화제, 불투명화제, 유기 또는 무기 입자, 점도 개질제, 클렌저, 접착제, 수분 결합제, pH 안정화제, 컨디셔너, 디탱글러, 생물 기재 계면활성제 클렌저, 지질 층 강화제, 피부 컨디셔너, 및 천연 모발 영양제, 예컨대 식물, 과일 추출물, 당 유도체 및/또는 아미노산, 가수분해된 단백질, 또는 비타민 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

3. 용기, 예를 들어 최종 사용 용기, 전달 디바이스

용기 및/또는 전달 디바이스, 예를 들어 용기, 예를 들어 전달 디바이스, 예를 들어 최종 사용 용기는 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 위한 하우징으로서 제공된다. 일부 실시양태에서, 용기 또는 전달 디바이스는 또한 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 예를 들어 표면 또는 대상체에게 전달하기 위한 목적으로 작용할 수 있다.

용기 및/또는 전달 디바이스는 본원에 개시된 임의의 화장품 제품을 보관 및/또는 전달하도록 구성될 수 있다. 화장품 제품은 추가의 성분과 함께 또는 없이 예를 들어 대상체의 부위, 환경 또는 표면에 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, 다른 성분은 화장품 제품의 전달이 시작됨과 동시에 또는 연속하여, 예를 들어 적어도 부분적으로 이전에 또는 적어도 부분적으로 이후에 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, 용기 또는 전달 디바이스는 전달 시스템을 포함할 수 있거나 또는 전달 시스템으로서 지칭될 수 있다. 일부 실시양태에서, 한 성분의 전달은 두번째 성분의 전달이 시작될 때에도 여전히 일어나고 있어서, 중복되도록 한다. 이는 본원에서 때때로 "동시에" 또는 "수반하여" 또는 "공동 전달"로 지칭된다. 다른 실시양태에서, 한 성분의 전달은 다른 치료의 전달이 시작되기 전에 종료된다. 이는 본원에서 때때로 "연속적인" 또는 "순차적 전달" 또는 "연이은 전달"로 지칭된다.

장벽은 용기의 내부와 외부 환경 사이의 유체 소통을 방지하기 위해 용기의 일부로서 또는 내부에 제공될 수 있다. 장벽은 밸브, 예를 들어 체크 밸브, 여과 물질, 필름, 왁스, 지질, 중합체, 제어 방출 물질, 예를 들어 겔, 및 용기의 내부와 외부 환경 사이의 영구적인 또는 일시적인 장벽을 제공할 수 있는 다른 물질의 형태를 가질 수 있다.

용기의 작동 시에, 장벽은 용기로부터 화장품 제품을 외부 환경 또는 대상체의 부위, 환경 또는 표면으로 배치하는 것을 허용하도록 붕괴되어, 화장품 제품과 대상체의 부위, 환경 또는 표면이 접촉하게 할 수 있다.

용기는 전달 시스템을 포함할 수 있다. 전달 시스템은 어플리케이터일 수 있거나 또는 화장품 제품의 내용물을 전달하도록 구성될 수 있다.

전달 시스템은 화장품 제품을 대상체의 표면으로, 예를 들어 피부 표면으로 전달하도록 구성될 수 있다. 화장품 제품은 전달을 개선시키거나 또는 원하는 표적 부위로의 위치화 또는 접촉을 개선시킬 수 있는 입자 또는 복수 종의 입자의 형태일 수 있다. 화장품 제품은 액체, 고체, 현탁액 또는 용액의 형태일 수 있다.

특정 실시양태에서, 전달 시스템은 용기 내부의 내용물을 표적 부위, 예를 들어 환경, 예를 들어 대상체의 표면, 예를 들어 대상체의 피부로 전달하기 위한 펌프를 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 용기는 단일-사용 용기일 수 있다. 용기에 내용물, 예를 들어 화장품 제품이 미리 로딩될 수 있거나 로딩되지 않을 수 있고 (예를 들어, 제조자 또는 사용자에 의해 로딩됨), 사용자, 예를 들어 소비자 또는 전문 의료진이 용기의 내용물을 표적 부위, 예를 들어 환경, 예를 들어 대상체의 표면, 예를 들어 대상체의 피부로 전달하기 위해 한번 사용될 수 있다.

다른 실시양태에서, 용기는 다중-사용 용기일 수 있고, 용기에 내용물, 예를 들어 화장품 제품이 미리 로딩될 수 있거나 로딩되지 않을 수 있고 (예를 들어, 제조자 또는 사용자에 의해 로딩됨), 사용자, 예를 들어 소비자 또는 전문 의료진이 용기의 내용물을 표적 부위, 예를 들어 환경, 예를 들어 대상체의 표면, 예를 들어 대상체의 피부로 전달하기 위해 한번 사용될 수 있다. 용기에 내용물, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아, 및 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아를 다시 로딩할 수 있고 (예를 들어, 제조자 또는 사용자에 의해 로딩됨), 사용자, 예를 들어 소비자 또는 전문 의료진이 용기의 내용물을 표적 부위, 예를 들어 환경, 예를 들어 대상체의 표면, 예를 들어 대상체의 피부로 전달하기 위해 다시 사용될 수 있다.

내용물, 예를 들어 화장품 제품을 미리 로딩하거나 다시 로딩하는 것은 용기의 내용물이 멸균되는 것을 보장하도록 멸균 공정을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 용기는 시린지, 보틀, 앰풀, 어플리케이터, 파우치, 예를 들어 스크루 탑을 가진 스파우트 파우치의 형태일 수 있다. 용기로부터 내용물이 분배되도록 보틀에 펌프가 부착될 수 있다. 용기는 에어로졸 스프레이 또는 미스트를 제공할 수 있다. 용기는 폐쇄부로 덮힌 개방구를 통해 내용물의 분배를 허용하는 짤 수 있는 용기일 수 있다. 용기는 스크루 유형 폐쇄부, 비유출 폐쇄부, 스냅 캡 폐쇄부, 또는 스냅 플랩 폐쇄부를 가질 수 있다. 용기는 내용물의 분배가 일어나는 분배 영역 위에 있는 오버 캡을 가질 수 있다. 폐쇄부는 완전히 제거가능하거나 또는 부분적으로 제거가능할 수 있고, 예를 들어 용기의 본체로부터 완전히 제거가능하거나 또는 힌지에 의해 부분적으로 제거가능하고 부착될 수 있다. 용기는 단일 사용 패키지, 예를 들어 내용물을 분배하기 위해 찢어서 개방하고 사용후 폐기될 수 있는 라미네이트 패킷일 수 있다.

용기, 예를 들어 최종 사용 용기는 물질, 예를 들어 화장품 제품의 상기 최종 사용 용기로의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성될 수 있다. 용기, 예를 들어 최종 사용 용기는 물질, 예를 들어 오염물의 상기 최종 사용 용기로의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성될 수 있다. 오염물은 대기, 예를 들어 에어로졸, 또는 액체, 예를 들어 물, 또는 고체, 또는 기체일 수 있다.

최종 사용 용기는 상기 화장품 제품이 배치된 저장소, 및 상기 저장소로부터 상기 화장품 제품이 분배될 수 있는 디스펜서를 포함할 수 있고, 여기서 상기 디스펜서는 물질의 상기 저장소로의 역행성 흐름을 억제한다.

최종 사용 용기는 상기 화장품 제품이 배치된 저장소, 및 상기 저장소로부터 상기 화장품 제품이 분배될 수 있는 디스펜서를 포함할 수 있고, 여기서 상기 디스펜서는 분배된 화장품 제품 또는 대기 에어로졸의 상기 저장소로의 역행성 흐름을 억제한다.

최종 사용 용기는 상기 디스펜서 내에 및 상기 저장소의 근위에 배치된 제1 압력 활성화 밸브 및 상기 디스펜서 내에 및 상기 저장소의 원위에 배치된 제2 압력 활성화 밸브를 포함하는 역행성 흐름 방지 디스펜서일 수 있고, 여기서 상기 제1 밸브의 활성화 압력이 상기 제2 밸브의 활성화 압력보다 높다.

최종 사용 용기는 완성된 화장품 제품의 분배와 관련된 조작 방향과 반대 방향으로 화장품 제품이 이동하는 것을 방지하도록 구성된 역행 방지 메카니즘을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 용기는 유기체, 예를 들어 미생물을 실질적으로 함유하지 않을 수 있다. 실시양태에서, 용기는 다른 유기체를 함유하지 않을 수 있다. 용기는 유기체, 예를 들어 미생물을 실질적으로 함유하지 않거나 또는 함유하지 않는 용기를 제공하기 위해 멸균될 수 있다.

용기는 파우더, 화장품, 크림, 스틱, 에어로졸, 고약, 와이프 또는 붕대에 배치될 수 있다. 용기는 파우더, 화장품, 크림, 스틱, 에어로졸, 고약, 와이프 또는 붕대로서 제공될 수 있다.

일부 실시양태에서, 용기는 지시기 성분을 포함할 수 있다. 지시기 성분은 용기의 내부와 미생물의 접촉시 색이 발현될 수 있는 발색 마커일 수 있다.

용기는 내용물, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 본원에 개시된 완성된 화장품 제품을 하우징하는데 적합한 임의의 물질로 구성될 수 있다. 예를 들어, 용기는 기체 교환, 물 및 빛 중 적어도 하나에 적어도 부분적으로 저항성이도록 구성 및 배열될 수 있다. 예를 들어, 용기는 유리 또는 중합체 물질로 구성될 수 있다.

최종 사용 용기는 중합체, 예를 들어 폴리에틸렌 테레프탈레이트 (PET), 고밀도 폴리에틸렌 (HDPE), 폴리프로필렌, 폴리카르보네이트, 폴리테트라플루오로에틸렌 (테플론®), 폴리비닐리덴 플루오라이드 (PVDF), 또는 셀룰로스계로 구성되거나 또는 이를 포함할 수 있다. 최종 사용 용기는 유리로 구성되거나 또는 이를 포함할 수 있다. 생존가능한 박테리아의 존재를 표시할 수 있는 센서, 예를 들어 산소 센서가 최종 사용 용기에 포함될 수 있다. 최종 사용 용기는 적어도 약 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100 퍼센트의 투과율로 최종 사용 용기를 통한 이온화 방사선, 예를 들어 감마선, 예를 들어 x-선, 예를 들어 동위원소, 예를 들어 코발트 60으로부터, 또는 자외선, 예를 들어 자외선 C (UVC)의 통과를 허용할 수 있다.

일부 실시양태에서, 1종 이상의 다른 유기체, 예컨대 암모니아 산화 박테리아가 용기에 포함될 수 있다. 락토바실루스(Lactobacillus), 스트렙토코쿠스(Streptococcus), 비피도박터(Bifidobacter) 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 속의 유기체가 용기에 제공될 수 있다. 암모니아 산화 박테리아를 위한 활성화제가 용기에 제공될 수 있다.

본원에 기재된 용기는 1종 이상의 화장품 제품을 전달하도록 적합화될 수 있다. 본원에 기재된 용기는 1종 이상의 치료용 제품을 적달하도록 적합화될 수 있다.

용기의 내용물을 포함하거나 포함하지 않는 용기, 전달 시스템 또는 전달 디바이스의 중량은 약 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500 또는 2000 그램 미만일 수 있다.

4. 화장품 제품의 분배/화장품 제품의 전달 방법

제품은 용기, 예를 들어 최종 사용 용기로부터 개별적인 부피 또는 양으로 분배될 수 있다. 용기는 용기의 각각의 작동에 대해 동일한 부피 또는 대략 동일한 부피를 분배할 수 있다. 제품은 예를 들어 약 0.1 ml 내지 약 5 ml의 개별적인 부피로 분배될 수 있다. 개별적인 부피는 예를 들어 약 0.1 ml, 0.2 ml, 0.25 ml, 0.3 ml, 0.4 ml, 0.5 ml, 0.6 ml, 0.7 ml, 0.75 ml, 0.8 ml, 0.9 ml, 1.0 ml, 1.1 ml, 1.2 ml, 1.4 ml, 1.5 ml, 1.6 ml, 1.8 ml, 2.0 ml, 2.25 ml, 2.5 ml, 2.75 ml, 3 ml, 3.25 ml, 3.5 ml, 3.75 ml, 4.0 ml, 5.0 ml, 6.0 ml, 7.0 ml, 8.0 ml, 9.0 ml 또는 10 ml일 수 있다.

용기는 용기의 각각의 작동에 대해 동일한 양 또는 대략 동일한 양을 분배할 수 있다. 제품은 예를 들어 약 0.1 그램 (g) 내지 약 5 g의 개별적인 양으로 분배될 수 있다. 개별적인 양은 예를 들어 약 0.1 g 0.2 g, 0.25 g, 0.3 g, 0.4 g, 0.5 g, 0.6 g, 0.7 g, 0.75 g, 0.8 g, 0.9 g, 1.0 g, 1.1 g, 1.2 g, 1.4 g, 1.5 g, 1.6 g, 1.8 g, 2.0 g, 2.25 g, 2.5, g, 2.75 g, 3 g, 3.25 g, 3.5 g, 3.75 g, 4.0 g, 5.0 g, 6.0 g, 7.0 g, 8.0 g, 9.0 g 또는 10 g일 수 있다.

용기는 제1 작동에 대해 제1 부피 또는 양 및 제2 작동에 대해 제2 부피 또는 양을 분배하도록 구성될 수 있다.

용기 중 화장품 제품의 전체 부피는 약 0.1 내지 약 100 액량 온스, 약 0.2 내지 약 50 액량 온스, 약 0.5 내지 약 25 액량 온스, 약 1.0 내지 약 10 액량 온스, 약 2.0 내지 약 7 액량 온스, 약 3 내지 약 5 액량 온스일 수 있다. 일부 실시양태에서, 부피는 약 3.4 액량 온스일 수 있다.

용기는 약 0.1 내지 약 100 액량 온스, 약 0.2 내지 약 50 액량 온스, 약 0.5 내지 약 25 액량 온스, 약 1.0 내지 약 10 액량 온스, 약 2.0 내지 및 약 7 액량 온스, 또는 약 3 내지 약 5 액량 온스를 함유하도록 구성될 수 있다. 일부 실시양태에서, 용기는 약 3.4 액량 온스를 함유하도록 구성될 수 있다. 용기는 1-챔버 용기, 또는 본원에 개시된 임의의 다른 용기일 수 있다.

5. 제품의 사용

제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품은 1회 (1 x)/일, 2회 (2 x)/일, 3회 (3 x)/일, 4 x/일, 5 x/일, 6 x/일, 7 x/일, 8 x/일 또는 그보다 많이 사용될 수 있다. 제품은 1 x/주, 2 x/주, 3 x/주, 4 x/주, 5 x/주, 6 x/주, 또는 7 x/주로 사용될 수 있다.

최종 사용 용기 중 화장품 제품의 양은 미리 결정된 양의 적용, 예를 들어 X회 이하의 적용에 충분할 수 있으며, X는 약 1 내지 약 60회, 예를 들어 약 1-3, 4-6, 7-9, 10-13, 14-17, 18-21, 22-25, 26-29, 30-33, 34-37, 38-41, 42-45, 46-49, 50-53, 54-57, 58-60회이다. 최종 사용 용기 중 화장품 제품의 양은 미리 결정된 양의 적용, 예를 들어 X회 이하의 적용에 충분할 수 있으며, 여기서 X는 약 1 내지 약 180회, 예를 들어 약 1-60, 61-120, 121-180회이다. 최종 사용 용기 중 화장품 제품의 양은 미리 결정된 양의 적용, 예를 들어 X회 이하의 적용에 충분할 수 있으며, X는 약 1 내지 약 750회, 예를 들어 약 1-100, 101-200, 201-300, 301-400, 401-500, 501-600, 601-750회이다.

완성된 화장품 제품 중 화장품 제품의 양은, 완성된 화장품 제품이 미리 결정된 양의 적용, 예를 들어 X회 이하의 적용에 충분하도록 선택될 수 있고, 여기서 X는 약 1 내지 180이다. 실시양태에서, X는 약 1 내지 약 180회, 예를 들어 약 1-60, 61-120, 121-180회일 수 있다. 최종 사용 용기 중 화장품 제품의 양은 미리 결정된 양의 적용, 예를 들어 X회 이하의 적용에 충분할 수 있으며, 여기서 X는 약 1 내지 약 750회, 예를 들어 약 1-100, 101-200, 201-300, 301-400, 401-500, 501-600, 601-750회이다.

예를 들어, 샴푸의 경우, 적용 횟수는 약 15-40회, 예를 들어 약 4주 동안 1회/일일 수 있다. 클렌저의 경우, 적용 횟수는 약 4주 동안 약 수회/일, 예를 들어 약 15-90회 적용일 수 있다.

완성된 화장품 제품 중 화장품 제품의 양은, 완성된 화장품 제품이 대략 미리 결정된 사용 횟수 이하로, 예를 들어 약 500-750회 사용, 200-500회 사용, 100-200회 사용, 50-100회 사용, 40-50회 사용, 30-40회 사용, 20-30회 사용, 10-20회 사용, 5-10회 사용, 또는 1-5회 사용으로 사용될 수 있도록 선택될 수 있다.

완성된 화장품 중 화장품 제품의 양은, 완성된 화장품 제품이 대략 미리 결정된 일수 이하로, 예를 들어 약 500-750일, 300-500일, 100-300일, 50-100일, 40-50일, 30-40일, 20-30일, 10-20일, 5-10일, 또는 1-5일로 사용될 수 있도록 선택될 수 있다. 미리 결정된 적용 횟수, 사용 횟수, 또는 일수는 약 28일 수 있다.

완성된 화장품 제품 중 화장품 제품의 양은, 완성된 화장품 제품이 Y회/사용 일로 X일 이하 동안 충분하도록 선택될 수 있으며, 여기서 X는 약 1일 내지 약 42일 (6 주)이고, Y가 약 0회 사용/일 내지 약 10회 사용/일이다. 예를 들어, X일은 약 1-6, 7-10, 10-13, 14-17, 18-21, 22-25, 26-29, 30-33, 34-37, 38-42일일 수 있고, Y는 약 0-1, 2-4, 5-7, 8-10회 사용/일일 수 있다.

완성된 화장품 제품은 유통기한 날짜를 가질 수 있다. 이는 날짜일 수 있고, 상기 날짜 이후에는 완성된 화장품 제품을 사용해서는 안되고, 예를 들어 이를 폐기해야 한다. 유통기한 날짜는 열화 기준 유통기한 날짜일 수 있다. 이 날짜는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 제품이 그의 의도된 목적에 적합하지 않게 일부 방식으로 분해되거나 또는 오염되기 시작할 것으로 예상되는 날짜일 수 있다. 일부 예에서, 이는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품이 분해되었거나 또는 오염되기 시작한 날짜일 수 있다. 제품이 분해되었거나 또는 오염되기 시작했다는 표시는 최종 사용 용기 상에 기호 또는 하나 이상의 적힌 글씨에 의해 제공될 수 있다. 실시양태에서, 화장품 제품 또는 화장품 제품 포장, 예를 들어 최종 사용 용기 상에 또는 내에 위치하는 지시기는 제품이 분해되었거나 또는 오염되기 시작했다는 일부 표시를 제공한다. 예를 들어, 이는 발색 지시기에 의해 달성될 수 있다.

유통기한 날짜는 바이옴-적합성 기준 유통기한 날짜일 수 있다. 이 날짜는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 제품이 그의 의도된 목적에 적합하지 않게 일부 방식으로 오염되기 시작할 것으로 예상되는 날짜일 수 있다. 일부 예에서, 이는 그 후에 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품이 오염되기 시작한 날짜일 수 있다. 제품이 오염되기 시작했다는 표시는 최종 사용 용기 상에 기호 또는 하나 이상의 적힌 글씨에 의해 제공될 수 있다. 실시양태에서, 화장품 제품 또는 화장품 제품 포장, 예를 들어 최종 사용 용기 상에 또는 내에 위치하는 지시기는 제품이 오염되었다는 일부 표시를 제공한다. 예를 들어, 이는 발색 지시기에 의해 달성될 수 있다. 오염물은 제품을 그의 의도된 사용에 적합하지 않게 만들 수 있는 것을 지칭할 수 있으며, 제품의 밀봉 시에 및/또는 제품의 멸균 이후에 완성된 화장품 제품에 존재하지 않는 임의의 품목을 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품은 유통기한 또는 수명의 표시를 가질 수 있다. 유통기한의 표시는 제품의 권장 수명일 수 있고, 이는 미리 선택된 기간일 수 있다. 미리 선택된 기간은 예를 들어 일수, 주수 또는 개월수로 표현된 시간의 단위로 표현될 수 있다.

완성된 화장품 제품은 제조, 충전, 밀봉, 멸균, 운송, 시중 출시 또는 판매 중 하나의 날짜로부터 X일 미만인, 예를 들어 일수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함할 수 있다. 실시양태에서, X는 약 5-7일, 약 5-10일, 약 7-14일, 약 14-21일, 약 21-28일, 약 28-35일, 약 35-42일, 약 42-49일, 약 49-56일, 약 56-63일, 약 63-70일, 약 70-77일, 약 75-100일, 약 100-150일, 약 150-200일, 약 200-300일, 약 300-400일, 약 400-750일일 수 있다. 특정 실시양태에서, X는 약 28일, 예를 들어 28일 (4주)일 수 있다.

실시양태에서, X는 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉, 또는 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로 지칭될 수 있다. 약 5-7일, 약 5-10일, 약 7-14일, 약 14-21일, 약 21-28일, 약 28-35일, 약 35-42일, 약 42-49일, 약 49-56일, 약 56-63일, 약 63-70일, 약 70-77일, 약 75-100일, 약 100-150일, 약 150-200일, 약 200-300일, 약 300-400일, 약 400-750일. 특정 실시양태에서, X는 약 28일, 예를 들어 28일일 수 있다.

실시양태에서, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시는 미리 선택된 사용 또는 적용 횟수로 표현될 수 있다. 상기 표시는 약 5-7, 약 5-10, 약 7-14, 약 14-21, 약 21-28, 약 28-35, 약 35-42, 약 42-49, 약 49-56, 약 56-63, 약 63-70, 약 70-77, 약 75-100, 약 100-150, 약 150-200, 약 200-300, 약 300-400, 약 400-750일의 미리 선택된 수로 표현될 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 하기로 표현되는 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명일 수 있다:

a) 시간의 단위, 예를 들어 미리 선택된 사건, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개봉 또는 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로부터의 일수; 또는

b) 사용 또는 적용 횟수.

제품은 박테리아-함유 제품, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아 (AOB) 함유 제품, 예를 들어 엔. 유트로파 함유 제품, 예를 들어 엔. 유트로파 D23 함유 제품과 함께, 예를 들어 조합하여 사용될 수 있다.

1종 이상의 화장품 제품, 예를 들어 본원에 개시된 완성된 화장품 제품을 사용하여 박테리아, 예를 들어 AOB, 예를 들어 엔. 유트로파, 예를 들어 엔. 유트로파 D23의 유지를 허용하는 방법이 제공될 수 있다.

상기 방법은 1종 이상의 화장품 제품 또는 화장품 제품, 예를 들어 본원에 개시된 완성된 화장품 제품의 사용 이전 또는 이후에 박테리아, 예를 들어 AOB, 예를 들어 엔. 유트로파, 예를 들어 엔. 유트로파 D23을 적용하는 것을 포함할 수 있다.

상기 방법은 화장품 제품을 사용하기 전에 소정 기간, 예를 들어 미리 결정된 기간 동안 대기시키는 것을 포함할 수 있다. 상기 기간은 생물-비친화성 화장품 제품이 사용되지 않는 기간을 포함할 수 있다.

화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 사용은 정기적으로, 예를 들어 매일, 매주, 매월, 또는 1-2일마다, 2-5일마다, 5-10일마다, 10-15일마다, 15 내지 30일마다 중 하나로 일어날 수 있다.

실시양태에서, 화장품 제품의 마지막 적용과 화장품 제품 및/또는 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 다음 적용 사이의 기간에 대상체에게 생물-비친화성 화장품 제품을 적용하지 않을 수 있다.

6. 제품의 멸균

사용을 위해, 예를 들어 판매를 위해 또는 소바지 사용을 위해 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 제조하도록 멸균을 이용할 수 있다. 제품을 제조 공정 중 하나 이상의 단계에서 멸균할 수 있다.

멸균은 방사선조사 또는 열에 의해 수행될 수 있다. 용기에 배치된 멸균된, 예를 들어 방사선조사된, 예를 들어 가열 멸균된 화장품 제품을 포함하는 완성된 화장품 제품이 제공될 수 있다. 용기는 바람직하게는 박테리아 방지 용기, 또는 외부 환경으로부터 밀봉될 수 있는 용기일 수 있다.

멸균, 예를 들어 가열 멸균 또는 방사선조사를 화장품 제품의 단일 성분, 화장품 제품 중 2종 이상의 성분의 혼합물, 또는 제품 중 혼합된 모든 성분에 대해 수행하여 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 제공할 수 있다. 멸균을 제조 공정 동안에 임의의 단계에서 수행할 수 있다. 예를 들어, 용기에 배치하기 전에, 예를 들어 시중 출시용 용기에 배치하기 전에 멸균을 수행할 수 있다. 화장품 제품 또는 화장품 제품의 1종 이상의 성분을 용기, 예를 들어 시중 출시용 용기에 배치한 후에 멸균을 수행할 수 있다. 화장품 제품을 용기, 예를 들어 시중 출시용 용기에 배치한 후에 시중 출시용 용기를 밀봉하기 전에 또는 후에 멸균을 수행할 수 있다.

완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품이 멸균성인 것으로 결정하는 것은 하기 기재된 바와 같이 측정될 수 있다. 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 99.9%의 모든 박테리아, 곰팡이, 진균 또는 바이러스가 사멸되거나 또는 세포 분열할 수 없을 때, 완성된 화장품 제품이 멸균성인 것으로 결정될 수 있다. 모든 박테리아, 곰팡이, 진균 또는 바이러스가 사멸되거나 또는 세포 분열할 수 없을 때, 완성된 화장품 제품이 멸균성인 것으로 결정될 수 있다. 약 10^-1, 10^-2, 10^-3, 10^-4, 10^-5, 10^-6, 10^-7, 10^-8, 10^-9 미만의 멸균성 보증 수준 (SAL)이 달성될 때, 완성된 화장품 제품이 멸균성인 것으로 결정될 수 있다. 방사선 유도된 DNA 손상이 세포 분열을 억제하기에 충분할 때, 완성된 화장품 제품이 멸균성인 것으로 결정될 수 있다. 실시양태에서, 멸균성은 모든 것, 예를 들어 모든 박테리아, 곰팡이, 진균 또는 바이러스가 사멸된, 예를 들어 주어진 시험 방법, 예를 들어 멸균성 보증 수준에 대한 한계의 측면에서 사멸된 절대적인 상태로 고려될 수 있다. 멸균 시험은 미국 약전 USP31-NF26, 제670면 <1211> (Pharmacopeial Forum: Volume No. 30(5), page 1729) "공정서 물품의 멸균화 및 멸균성 보증(Sterilization and Sterility Assurance of Compendial Articles)" 및 USP31-NF26, 제85면 <71> "멸균성 시험"에 설명된 바와 같이 수행할 수 있으며, 이들 각각은 전문이 본원에 참조로 포함된다. 최종 사용 용기가 개방되지 않았을 때, 예를 들어 공장 밀봉이 파손되지 않았을 때, 완성된 화장품 제품이 멸균성인 것으로 고려될 수 있다.

방사선조사, 예를 들어 감마 방사선조사를 화장품 제품의 단일 성분, 화장품 제품 중 2종 이상의 성분의 혼합물, 또는 제품 중 혼합된 모든 성분에 대해 수행하여 화장품 제품을 제공할 수 있다. 방사선조사는 제조 공정 동안 임의의 단계에서 수행될 수 있다. 예를 들어, 용기에 배치하기 전에, 예를 들어 시판용 용기에 배치하기 전에 방사선조사를 수행할 수 있다. 화장품 제품 또는 화장품 제품의 1종 이상의 성분을 용기, 예를 들어 시중 출시용 용기에 배치한 후에 방사선조사를 수행할 수 있다. 화장품 제품을 용기, 예를 들어 시중 출시용 용기에 배치한 후에 시중 출시용 용기를 밀봉하기 전에 또는 후에 방사선조사를 수행할 수 있다.

상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 예를 들어 이온화 방사선에 의해, 예를 들어 감마선에 의해, 예를 들어 x-선에 의해, 예를 들어 동위원소, 예를 들어 코발트 60으로부터, 또는 자외선, 예를 들어 자외선 C (UVC)에 의해 방사선조사될 수 있다. 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 멸균 제품을 충분히 제공하도록 방사선조사될 수 있다. 실시양태에서, 미국 약전에서 공정서 물품의 멸균화 및 멸균성 보증 챕터 1211에 정의된 바와 같이 (이전 문단에 언급되었으며, 그의 전문이 본원에 참조로 포함됨), "멸균성의 가장 엄격한 정의 내에서, 생존가능한 미생물이 시편으로부터 완전히 부재할 때에만, 시편이 멸균성인 것으로 간주될 것이다". 멸균 제품은 예를 들어 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준 (이전 문단에 언급되었으며, 그의 전문이 본원에 참조로 포함됨)에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 함유하지 않는, 예를 들어 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 할 수 있다. 예를 들어, 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 측정하였을 때, 상기 화장품 제품은 적절한 배양 배지 상에서 성장을 나타내지 않는다.

상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 산화제, 예를 들어 천연 발생 산화제, 자유 라디칼 스캐빈저, 또는 자유 라디칼 켄처로부터 선택된 외인성 첨가된 첨가제를 포함할 수 있다. 자유 라디칼 스캐빈저 또는 산화제를 멸균 절차의 일부로서 화장품 제품에 첨가할 수 있다. 자유 라디칼 스캐빈저 또는 산화제는 토코페롤, 토코트리에놀, 아스코르브산, 폴리페놀, 이소플라본, 코엔자임 Q10, 및 다른 유사한 화합물 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 자유 라디칼 스캐빈저 또는 산화제는 지용성 또는 수용성 자유 라디칼 스캐빈저, 또는 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품은 복수 종의 성분을 함유할 수 있고, 복수 종의 성분을 혼합한 후에 방사선조사될 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 상기 화장품 제품이 최종 사용 용기에 배치된 후에 방사선조사될 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 상기 최종 사용 용기가 밀폐된 후에 방사선조사될 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 상기 최종 사용 용기가 밀봉된 후에 방사선조사될 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 상기 최종 사용 용기가 밀폐되기 전에 방사선조사될 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품 또는 최종 사용 용기는 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사되었는지를 표시할 수 있는 지시기를 포함한다.

실시양태에서, 화장품 제품을 가공 시설에 보낼 수 있다. 운송을 위한 제품의 실행 생성, 스케줄, 가공, 인증 및 방출을 허용하는 로트 및 제품 코드를 제품에 제공할 수 있다. 적합한 조건 및 구성에 따라 제품을 캐리어에 로딩할 수 있다. 선량계를 캐리어 내에, 주변에 또는 외부에 둘 수 있다. 이어서, 제품을 방사선조사, 예를 들어 코발트 60, 예를 들어 코발트 60 소스 랙에 노출시킬 수 있다. 제품의 방사선조사가 완료된 후에 선량계를 분석하여, 필요한 선량이 전달되었음을 확인할 수 있다. 공정을 확인하기 위해 선량계를 제공할 수 있다. 공정 내역이 허용가능하고/거나 규격에 따른 것이면, 제품을 사용 또는 추가 유통을 위해 방출 및 운송할 수 있다.

실시양태에서, 방사선조사를 배치식 공정으로 수행할 수 있다. 다른 실시양태에서, 방사선조사를 연속식 공정으로 수행할 수 있다. 단일 단위, 또는 예를 들어 박스 단위로 포장된 다중 단위를 배치식 공정 또는 연속식 공정으로 방사선조사할 수 있다.

실시양태에서, 방사선 흡수 선량은 kGy로 제공된다. 예를 들어, 멸균을 제공하기 위해 흡수된 방사선은 약 10 kGy 내지 약 25 kGy일 수 있다. 실시양태에서, 흡수된 방사선은 약 15 kGy 내지 약 25 kGy일 수 있다.

실시양태에서, 약 10^-1, 10^-2, 10^-3, 10^-4, 10^-5, 10^-6, 10^-7, 10^-8, 10^-9 미만의 완성된 화장품 제품의 멸균성 보증 수준 (SAL)을 본원에 기재된 조건을 통해 달성할 수 있다. 실시양태에서, 10^-3 이상의 SAL을 달성할 수 있다.

노출 시간은 방사선조사되는 제품의 밀도에 따라 제공된다. 예를 들어, 제품의 단일 단위에 대한 노출 시간은 밀도의 차이 때문에 제품의 다중 단위의 노출 시간보다 적을 수 있다.

실시양태에서, 가열 멸균을 이용할 수 있다. 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 예를 들어 마이크로웨이브 오븐 또는 오토클레이브에 의해 가열할 수 있다. 가열은 멸균 제품을 제공하기에 충분할 수 있다. 멸균 제품은, U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 결정 시 U.S.P. 챕터 1211에 일치하는 (각각 상기 언급되었으며, 전문에 본원에 포함됨), 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 할 수 있다. 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 상기 미생물을 본원에 기재된 시험 방법에 의해 측정하였을 때, 상기 화장품 제품이 성장을 나타내지 않는 경우에, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이 멸균성인 것으로 결정될 수 있다.

실시양태에서, 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품은 복수 종의 성분을 함유할 수 있고, 상기 복수 종의 성분을 혼합한 후에 가열될 수 있다. 실시양태에서, 화장품 제품이 최종 사용 용기에 배치된 후에, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 가열한다. 실시양태에서, 상기 최종 사용 용기가 밀폐된 후에 완성된 화장품 제품을 가열한다. 실시양태에서, 상기 최종 사용 용기가 밀봉된 후에 완성된 화장품 제품를 가열한다. 실시양태에서, 상기 최종 사용 용기가 밀폐되기 전에 완성된 화장품 제품을 가열한다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품 또는 최종 사용 용기는 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 가열되었는지를 나타내는 지시기를 포함한다. 실시양태에서, 제제화 동안에 또는 이후에, 예를 들어 혼합 또는 충전 이후에, 예를 들어 배치 이후에, 또는 최종 사용 용기의 밀봉 이후에 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 121℃ 이상에서 적어도 15분 동안 가열한다. 제제화, 예를 들어 혼합 또는 충전 동안에 또는 이후에, 예를 들어 배치 이후에, 또는 최종 사용 용기의 밀봉 이후에 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 140℉ 초과로 가열하지 않을 수 있다. 이는 최종 사용 용기 및/또는 최종 사용 용기의 내용물, 예를 들어 화장품 제품이 140℉ 초과의 온도에서 분해되기 때문일 수 있다.

7. 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 제조 방법

화장품 제품을 최종 사용 용기에 배치하여 충전된 최종 사용 용기를 형성하는 것을 포함할 수 있는, 완성된 화장품 제품의 제조 방법이 제공된다. 이어서, 충전된 최종 사용 용기를 박테리아의 사멸 또는 불활성화를 위해 처리한 다음, 완성된 화장품 제품을 제공할 수 있다. 박테리아의 사멸 및 불활성화는 본원에 기재된 멸균 기술을 통해 달성될 수 있다.

바이옴-친화성 화장품 제품의 제조 및 제작을 허용하는 다른 방법이 제공될 수 있다. 상기 방법은 바이옴-친화성 성분의 리스트로부터 제1 성분, 예를 들어 클렌저 또는 계면활성제를 선택하고; 바이옴-친화성 성분의 리스트로부터 제2 성분, 예를 들어 점도 개질제를 선택하고; 상기 제1 및 제2 성분 (또는 더 많은 성분)의 혼합물을 제공하고, 이로써 바이옴-친화성 화장품 제품을 제조하는 것을 포함할 수 있다.

상기 방법은 바이옴-친화성 성분의 리스트로부터 제3 성분, 예를 들어 습윤제를 선택하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 바이옴-친화성 성분의 리스트로부터 제4 성분, 예를 들어 향기제를 추가로 선택하는 것을 포함할 수 있다. 선택될 수 있는 추가의 성분에는 예를 들어 제5, 제6 및 제7 성분, 예를 들어 컨디셔너, 지질 층 강화제, 및 유화제가 포함된다.

혼합물이 수득되면, 화장품 제품을 최종 사용 용기에 밀봉하기 전에 또는 후에 혼합물의 처리, 예를 들어 멸균을 수행할 수 있다.

각각 바이옴-친화성인 것으로 확인된 제1 및 제2 성분을 제공하는 방법 또한 제공될 수 있다. 상기 방법은 제1 및 제2 성분을 조합하여 혼합물을 형성하는 것을 포함할 수 있다. 혼합물이 바이옴-친화성인지를 결정하는 것은 본원에 개시된 방법을 통해 달성될 수 있으며, 이로써 완성된 화장품 제품을 제조할 수 있다.

화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 제조하는, 예를 들어 평가하는 추가의 방법이 제공될 수 있다. 상기 방법은 표 3으로부터 선택된 적어도 2종의 성분을 갖는 제품을 제공하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 화장품 제품이 사용자의 피부 상에서 박테리아, 예를 들어 유익한 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아에 대해 안전한지 여부의 평가를 획득하는 것을 포함할 수 있으며, 이로써 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 제공할 수 있다. 상기 평가는 화장품 제품 또는 화장품 제품 중 1종 이상의 성분과 접촉한 후에, 본원에 개시된 바와 같이 암모니아 산화 박테리아의 생존가능성, 또는 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력을 평가하는 것을 포함할 수 있다.

8. 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품, 또는 그의 성분의 시험

제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품, 또는 그의 성분에 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 함유하지 않음을 확인하기 위해 시험을 수행할 수 있다.

제품, 예를 들어 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품, 또는 그의 성분을 평가하는 방법은 제품의 일부, 예를 들어 분취량을 시험 유기체, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아와 접촉시키고, 시험 유기체에 대한 화장품 제품의 효과를 평가하는 것을 포함할 수 있다. 평가는 니트라이트를 생성하는 시험 유기체, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 능력에 대한 화장품 제품의 효과를 평가하는 것을 포함할 수 있다.

제품의 평가는 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력이 미리 선택된 기준을 충족하는지를, 예를 들어 적어도 본원에 개시된 실시예의 도면에 제시된 바와 같이 주어진 기간에 걸쳐 니트라이트를 생성하도록 회복하는 능력을 갖는지를 결정하는 것을 포함할 수 있다.

제품의 평가는 "바이옴-친화성인 것으로 시험되고 확정된" 또는 "생체적합성인 것으로 시험되고 확정된" 것으로 확인된 완성된 화장품 제품을 제공할 수 있다.

제품의 평가는 "살아있는 시험 유기체를 갖는 것으로 시험되고 확정된" 것으로 확인된 완성된 화장품 제품을 제공할 수 있다. 제품의 평가는 "살아있는 암모니아 산화 박테리아를 갖는 것으로 시험되고 확정된" 것으로 확인된 완성된 화장품 제품을 제공할 수 있다.

암모니아 산화 박테리아-친화성 성분을 선택하는 방법이 제공될 수 있다. 상기 방법은 암모니아 산화 박테리아 (AOB) 세포 현탁액을, 예를 들어 연속식 배양 시스템으로부터 수득하는 것을 포함할 수 있다. AOB 세포를 세포 현탁액으로부터 수확할 수 있고, 세포를 보관 용액으로 세척할 수 있다. 세포 현탁액으로부터 AOB 세포의 수확은 세포 현탁액을 원심분리하는 것을 포함할 수 있다. 보관 용액은 50 mM Na₂HPO₄ - 2 mM MgCl₂, pH 7.6을 포함할 수 있다. AOB 세포를 보관 용액 중에서 5.0 (~10¹⁰ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 현탁시킬 수 있고, 세포를 약 4℃에서 보관할 수 있다. 제품, 예를 들어 화장품 제품, 또는 성분, 예를 들어 부형제, 예컨대 표 3에 열거된 것들, 또는 임의의 다른 원하는 부형제를 미리 결정된 최종 농도로 함유하는, 암모늄 (NH₄ ⁺), 예를 들어 약 50 mM 암모늄으로 보충된 10 ml의 AOB 배지 중에서 AOB 세포를 0.5 (~ 10⁹ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 희석하고, 첫번째 미리 결정된 기간 동안 인큐베이션하여, 인큐베이션된 배양물을 제공할 수 있다. 인큐베이션은 약 30℃에서 일어날 수 있다. 인큐베이션된 배양물의 분취량을 수집할 수 있고, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중에서 니트라이트의 농도를 측정할 수 있다. 상청액은 배양물의 원심분리를 통해 상청액 및 박테리아 펠릿을 제공함으로써 수득될 수 있다.

본원에 개시된 AOB 배지를 암모늄 (NH₄ ⁺), 예를 들어 약 1, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 mM 또는 더 높은 농도의 암모늄으로 보충할 수 있다.

시간에 따른 니트라이트 측정값, 1개의 측정값 또는 1개 초과의 측정값에 기초하여, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중에서 니트라이트의 농도를 기준으로 제품 또는 성분, 예를 들어 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인할 수 있다.

상기 방법은 AOB 배지에서 박테리아 펠릿을 세척하고, NH₄ ⁺로 보충된 AOB 배지 중에서 박테리아를 현탁시키는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 NH₄ ⁺로 보충된 AOB 배지에서 박테리아 펠릿을 인큐베이션하고, 두번째 미리 결정된 기간에서 AOB 세포를 회복시켜, 회복된 AOB 세포 샘플을 제공하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 회복된 AOB 세포 샘플을 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나에 대해 측정할 수 있다.

회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나를 기준으로 제품 또는 성분, 예를 들어 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인할 수 있다.

실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아 (AOB)의 샘플을 수득하고, 첫번째 미리 결정된 기간 동안 제품 또는 성분, 예를 들어 부형제와 접촉시켜, 인큐베이션된 배양물을 제공하는 것을 포함하는, 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분을 선택하는 방법이 제공될 수 있다. 상기 방법은 인큐베이션된 배양물의 분취량을 수집하고, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중에서 니트라이트의 농도를 측정하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 인큐베이션된 배양물의 상청액 중에서 니트라이트의 농도를 기준으로 제품 또는 성분, 예를 들어 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

상기 방법은 인큐베이션된 배양물로부터의 AOB를 NH₄ ⁺와 접촉시키고, 두번째 미리 결정된 기간 이후에 회복된 AOB 세포 샘플을 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나에 대해 측정하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 회복된 AOB 세포 샘플에서의 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나를 기준으로 제품 또는 성분, 예를 들어 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

제품 또는 성분, 예를 들어 부형제의 미리 결정된 최종 농도는 약 0% 내지 약 100%일 수 있다. 첫번째 미리 결정된 기간은 약 1분, 약 10분, 약 60분, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 12시간 및 약 24시간 중 적어도 하나일 수 있다. 두번째 미리 결정된 기간은 약 1분, 약 10분, 약 60분, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 12시간, 약 24시간, 약 36시간, 약 48시간, 약 72시간, 약 96시간 중 적어도 하나일 수 있다.

시험된 성분, 부형제 또는 조성물에 따라, 측정된 니트라이트의 농도는 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분, 부형제 또는 조성물의 확인을 허용할 수 있다. 특정 실시양태에서, 측정된 니트라이트 생성은 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물로서 정성화하기 위해 특정 값 이상의 니트라이트 생성일 수 있다. 이 니트라이트 생성 농도는 인큐베이션된 배양물의 AOB와 NH₄ ⁺를 접촉시킨 후 특정한 기간에 측정할 수 있다. 상기 기간은 1분, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 120분에서일 수 있다. 상기 기간은 3, 4, 5, 10, 15, 20, 24, 36, 48, 72 또는 96시간 이상에서일 수 있다.

니트라이트 생성은 성분, 부형제 또는 조성물이 바이옴-친화성 성분으로 확인되도록 하기 위한, 특정 값 이상, 예를 들어 10 마이크로몰, 20, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 3000 마이크로몰 이상의 니트라이트 농도를 가질 수 있다.

실시양태에서, 48시간의 기간의 마지막에 측정된 1000 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성은 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물의 지표일 것이다. 다른 실시양태에서, 48시간의 기간의 마지막에 측정된 100 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성은 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물의 지표일 것이다. 다른 실시양태에서, 48시간의 기간의 마지막에 측정된 10 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성은 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물의 지표일 것이다.

바이옴-친화성 조성물을 생성하는 방법은 1종의 화합물 또는 1종 초과의 화합물이 암모니아 산화 박테리아에 대해 친화성이라는 지식을 획득하고, 상기 1종의 화합물 또는 1종 초과의 화합물을 최종 사용 용기에 포장하여, 제품, 예를 들어 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품을 제공하는 것을 포함할 수 있다.

바이옴-친화성 조성물을 생성하는 방법은 화합물이 암모니아 산화 박테리아에 대해 친화성이라는 지식을 획득하고, 상기 화합물을 암모니아 산화 박테리아와 조합하여, 화장품 제품을 제공하는 것을 포함할 수 있다.

9. 제품의 유통 방법

본원에 기재된 방법은 바이옴-친화성 완성된 화장품 제품의 유통 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 완성된 화장품 제품은 그 후에는 박테리아 오염의 위험이 허용되지 않는 미리 결정된 유효 수명을 갖는다. 본 개시내용의 방법은 최종 사용자 또는 가입자에게 그의 권장 유효 수명이 종료되었거나 거의 종료되었음에 대한 주기적인 통지를 제공하거나, 또는 완성된 화장품 제품의 새로운 단위를 제공한다. 임의적으로, 상기 방법은 "리사이클링" 기능을 포함한다.

완성된 화장품 제품의 유통 방법은 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 공급하거나 또는 피지명자가 공급하게 하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 최종 사용자 또는 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 및/또는 ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지 중 하나 또는 둘 다를 제공하거나 또는 피지명자가 제공하게 하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 임의적으로 최종 사용자 또는 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하거나 또는 피지명자가 제공하게 하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 이는 완성된 화장품 제품의 유통을 허용할 수 있다.

상기 방법은 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 제공하고, 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 후속 단위 또는 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지를 제공하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공함으로써, 완성된 화장품 제품을 유통시키는 것을 추가로 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 본원에 기재된 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 박테리아 또는 진균을 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 보존제를 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 임의의 1종 이상으로부터 선택된 화장품 제품을 포함할 수 있거나, 또는 이를 포함할 수 있거나, 또는 이에 배치될 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 샴푸를 포함할 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 포밍 바디 클렌저를 포함할 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위는 컨디셔너를 포함할 수 있다.

상기 방법은 최종 사용자에게 인터넷-기반 판로로부터 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 예를 들어 판매 또는 증정에 의해 공급하는 것을 제공할 수 있다. 상기 방법은 최종 사용자에게 비-인터넷-기반 판로, 예를 들어 점포로부터 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 예를 들어 판매 또는 증정에 의해 공급하는 것을 제공할 수 있다.

두번째 최종 사용자에게 i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 및/또는 ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지 중 하나 또는 둘 다를 제공하는 것은 미리 선택된 일수 이내에, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위의 공급 이후에, 또는 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위의 권장 수명의 종료 이전에 또는 제품의 첫번째 예상된 사용 이전에, 또는 첫번째 단위가 예를 들어 바이오센서에 의해 결정 시 감소된 수준의 활성에 도달하였을 때 이루어질 수 있다.

미리 선택된 일수는 이메일, 전자 어플리케이션, 예를 들어 스마트폰 어플리케이션, 또는 보틀 "도크"에 내장된 블루투스 중량 센서에 의해 계산될 수 있다.

미리 선택된 일수는 약 7일, 14,일, 21일, 28일, 35일, 또는 42일, 또는 약 5-7일, 8-11일, 12-15일, 16-19일, 20-23일, 24-27일, 28-31일, 32-35일, 36-39일, 40-43일일 수 있다.

완성된 화장품 제품의 두번째 단위 또는 후속 단위는 본원에 기재된 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 박테리아 또는 진균을 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 보존제를 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품의 후속 단위는 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 임의의 1종 이상으로부터 선택된 화장품 제품을 포함할 수 있거나, 또는 이를 포함할 수 있거나, 또는 이에 배치될 수 있다.

실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 샴푸를 포함할 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 포밍 바디 클렌저를 포함할 수 있다. 실시양태에서, 완성된 화장품 제품의 후속 단위는 컨디셔너를 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품을 임의의 적합한 수단에 의해 전달하여, 최종 사용자에게 제품을 제공할 수 있다. 예를 들어, 제품을 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에게 전달할 수 있다.

상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 전달할 수 있다.

상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 위치에 전달할 수 있다.

통지를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 전화 통화에 의해, 예를 들어 녹음 메시지 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에게 전달할 수 있다. 통지를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 전화 통화에 의해, 예를 들어 녹음 메시지 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 전달할 수 있다.

통지를 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 녹음 메시지에 의해, 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 위치에 전달할 수 있다.

완성된 화장품 제품의 리사이클링에 대한 선택권이 제공될 수 있다. 상기 방법은 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하는 (또는 피지명자가 제공하게 하는) 것을 포함할 수 있다.

상기 정보는 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수락할 개체 (수집 개체)의 이름 또는 위치, 예를 들어 주소를 포함할 수 있다.

상기 방법은 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수용하도록 구성된 용기를 상기 최종 사용자 또는 피지명자에게 제공하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 수용하도록 구성된 용기에 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위가 제공될 수 있다. 이 용기에 통지가 제공될 수 있다. 용기는 수집 기관, 예를 들어 리사이클러의 주소가 쓰인 우편 라벨을 포함할 수 있다.

상기 방법은 또한 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 첫번째 단위와 관련하여 상기 기재된 바와 같이, 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품의 상기 후속 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하는 (또는 피지명자가 제공하게 하는) 것을 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품을 수득하는 방법 또한 제공될 수 있으며, 상기 방법은 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 수용하는 것을 포함할 수 있다. 상기 수득 방법은 i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 및/또는 ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지를 수용하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 수득 방법은 임의적으로 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 수용함으로써, 완성된 화장품 제품을 수득하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

완성된 화장품 제품을 유통시키는 방법이 추가로 제공된다. 상기 방법은 상기 청구항들 중 어느 하나의 완성된 화장품 제품을 수득하는, 예를 들어 제조하는 것을 포함할 수 있고, 상기 완성된 화장품 제품은 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 메이크업, 예를 들어 아이라이너를 포함한다. 상기 방법은 상기 완성된 제품의 최종 사용자에게 하기 중 하나 이상을 전달하는 것을 포함할 수 있다: 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품이 바이옴-친화성, 예를 들어 바이옴-적합성임; 상기 완성된 화장품 제품 또는 상기 화장품 제품이 예를 들어 열화, 예를 들어 바이옴-적합성을 기준으로 표시된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명 이후에 사용해서는 안됨.

표시된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명은 본원에 기재된 바와 같이 표현될 수 있다. 예를 들어, 유통기한 날짜는 (a) 시간의 단위, 예를 들어 미리 선택된 사건, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개봉 또는 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로부터의 일수; 및/또는 (b) 사용 또는 적용 횟수로 표현될 수 있고/거나, 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 X회 적용 후에 사용해서는 안되고/거나, 상기 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 X일 사용 후에, 예를 들어 Y회/사용 일로 X일 후에 사용해서는 안되고, 여기서 X는 약 (7일) 1주 내지 약 42일 (6주)이고, Y는 약 0회 사용/일 내지 약 10회 사용/일이다. 예를 들어, X일은 약 7-10, 10-13, 14-17, 18-21, 22-25, 26-29, 30-33, 34-37, 38-42일일 수 있고, Y는 약 0-1, 2-4, 5-7, 8-10회 사용/일일 수 있다. 상기 방법은 상기 완성된 화장품 제품을 운송하는 것을 추가로 포함할 수 있다.

10. 암모니아 산화 박테리아와 함께 제품의 사용

본원에 개시된 제품은 대상체, 예를 들어 비병원성 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 사용자에게 비병원성 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 적용과 함께 사용될 수 있다.

대상체 상에서 암모니아 산화 박테리아 (AOB)를 유지하는 방법은 본 개시내용에 걸쳐 기재된 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 AOB를 포함하는 제제를 대상체에게 적용하는 것을 추가로 포함할 수 있다. 상기 방법은 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 AOB를 포함하는 제제를 대상체에게 적용하는 것을 포함할 수 있다.

상기 방법은 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 AOB를 포함하는 제제를 대상체에게 적용하는 것을 추가로 포함할 수 있고, 여기서 AOB를 포함하는 제제는 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60분, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25시간, 2-5, 5-10, 10-15일, 3-4, 5-10주의 범위 중 대략 하나 사이에 적용된다.

상기 방법은 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 AOB를 포함하는 제제를 대상체에게 적용하는 것을 추가로 포함할 수 있고, AOB를 포함하는 제제는 대상체에게 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60분, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25시간, 2-5, 5-10, 10-15일, 3-4, 5-10주의 범위 중 대략 하나 사이에 적용된다.

상기 방법은 이전 또는 이후에 생물-비친화성 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하지 않는 것을 포함할 수 있다.

본 개시내용의 방법 및 시스템 실시양태에서, AOB 제제 및 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품 중 적어도 하나를 대상체의 미리 규정된 영역에 적용한다. 대상체의 미리 규정된 영역은 두부, 예를 들어 얼굴, 볼, 턱, 눈꺼풀, 입술, 코, 두피, 모발, 이마; 목; 겨드랑이; 팔; 손; 다리; 발; 가슴; 복부; 엉덩이; 음부 등의 부분 중 적어도 하나일 수 있다.

본원에서 지칭되는 암모니아 산화 박테리아는 하기 섹션에 기재된다.

11. 암모니아 산화 박테리아 ( AOB )

본원에서 AOBs 또는 AOB로 지칭될 수 있는 독립영양 암모니아 산화 박테리아는 Alan B. Hooper and A. Krummel et al. Alan B. Hooper, Biochemical Basis of Obligate Autotrophy in Nitrosomonas europaea, Journal of Bacteriology, Feb 1969, p. 776-779. Antje Krummel et al., Effect of Organic Matter on Growth and Cell Yield of Ammonia-Oxidizing Bacteria, Arch Microbiol (1982) 133: 50-54에 기재된 바와 같은 절대적 독립영양 박테리아이다. 이들 박테리아는 호흡 사슬에서 중간 생성물로서 일산화질소 (NO)를 사용하여 암모니아에서 니트라이트로의 산화로부터만 모든 대사 에너지를 유도하고, 이산화탄소의 고정에 의해 사실상 모든 탄소를 유도한다. 이들은 몇몇 단순한 분자 이외의 탄소 공급원을 사용할 수 없다.

암모니아 산화 박테리아 (AOB)는 주변에서 널리 발견되고, 암모니아, 산소 및 미량 금속의 존재 하에 이산화탄소를 고정하여 증식할 것이다. AOB는 느리게 성장할 있으며, AOB가 증식하여 암모니아를 비독성 수준으로 감소시키기 전에 독성 수준의 암모니아가 어류 및 다른 유기체를 사멸시킬 수 있다. AOB의 느린 성장은 또한 피부에 적용되어 AOB가 생성하는 NO 및 니트라이트의 건강상의 이점을 지연시킬 수 있다.

상기 목적을 위해 성장하고 보관된 충분한 생존가능한 AOB로 수족관, 피부 및 공정을 보충하는 것이 바람직하다. AOB는 포자를 형성하지 않으며, 따라서 건조 상태에서 보관하면 생존가능성을 높이기 어렵고, 습윤 상태에서 보관하면 이들의 대사적 활성이 유지된다.

폐수 처리를 위해 AOB를 보관하는 동안 질화 능력의 쇠퇴가 예를 들어 Munz G, Lubello C, Oleszkiewicz JA. Modeling the decay of ammonium oxidizing bacteria. Water Res. 2011 Jan; 45(2): 557-64. Oi: 10.1016/j.watres.2010.09.022.에서 연구되었다.

니트로소모나스의 성장, 연장된 보관, 및 활성의 복원은 문헌 [Cassidy et al., U.S. 5,314,542]에 의해 논의되었고, 이들은 니트로소모나스를 성장시키고, 독성 폐기물을 제거하고, 1년 이하의 기간 동안 적절한 염도를 갖는 멸균수에서 보관한 다음, 완충제 (CaCO₃) 및 200 ppm의 암모늄을 첨가하여 재생시키고, 재생에 72시간이 걸리는 것을 개시한다.

본 개시내용은 AOB가 적은 이산화탄소를 갖지만 충분한 산소 및 암모니아를 갖는 조건에서 유지된다면, 이들이 약 1 배가 시간 (~10시간) 동안 폴리포스페이트를 축적한 다음, 그들의 보관 생존가능성, 보관 시간을 크게 연장시키고 완충제 및 암모니아의 첨가 및 비첨가 둘 다에서 그들의 재생을 가속시키는데 충분한 폴리포스페이트를 축적한다는 것을 제공한다.

충분히 보관된 폴리포스페이트의 존재는 AOB가 암모니아 및 산소의 부재 하에서도 ATP 자원을 이용하여 대사 활성을 유지할 수 있게 하고, 달리 치명적인 손상에서도 생존하게 할 수 있다.

절대적 독립영양 생물로서, AOB는 에너지를 사용하여 CO₂를 고정시키고 암모니아에서 니트라이트로의 산화에 의해 생성된 등가물을 감소시킴으로써 단백질을 합성한다. 성장은 암모니아, 산소, 무기물 및 이산화탄소를 필요로 한다.

니트로소모나스는 "Polyphosphate and Orthophosphate Content of Nitrosomonas europaea as a Function of Growth" by K.R. Terry and A.B. Hooper, Journal of Bacteriology, July 1970, p. 199-206, Vol. 103, No. I에 따라 몇몇 대사 상태로 존재할 수 있다.

본 개시내용에서 고려되는 AOB는 야생형 AOB와 관련된 돌연변이를 포함할 수 있다. 이들 돌연변이는 예를 들어 자발적으로 일어나거나, 무작위 돌연변이 유발에 의해 도입되거나 또는 표적화 돌연변이 유발에 의해 도입될 수 있다. 예를 들어, 야생형 AOB에 전형적으로 포함된 하나 이상의 유전자 또는 조절 DNA 서열이 AOB에 결여되어 있을 수 있다. AOB는 또한 시퀀싱된 균주 또는 야생형 균주에 대해 점 돌연변이, 치환, 삽입 및/또는 재배열을 포함할 수 있다. AOB는 최적화된 AOB의 정제된 제제일 수 있다.

특정 실시양태에서, AOB는 트랜스제닉이다. 예를 들어, 이는 야생형 암모니아 산화 박테리아에서 결여된 하나 이상의 유전자 또는 조절 DNA 서열을 포함할 수 있다. 더욱 특히, 암모니아 산화 박테리아는 예를 들어 리포터 유전자, 선별 유전자, 효소 코딩 유전자, 또는 프로모터 (예컨대 유도성 또는 억제성 프로모터)를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서 추가의 유전자 또는 조절 DNA 서열을 박테리아 염색체에 통합시키고, 일부 실시양태에서 추가의 유전자 또는 조절 DNA 서열을 플라스미드 상에 위치시킨다.

일부 바람직한 실시양태에서, AOB는 천연 발생 박테리아와 적어도 1개의 뉴클레오티드가 상이하다. 예를 들어, AOB는 관련 경로, 예를 들어 암모니아 대사 경로, 우레아 대사 경로, 또는 일산화질소 또는 일산화질소 전구체의 생성 경로의 일부인 유전자 또는 단백질이라는 점에서 천연 발생 박테리아와 상이할 수 있다. 더욱 특히, AOB는 예를 들어 경로의 요소의 수준 또는 활성을 증가시킴으로써 상기 경로의 활성을 상승시키는 돌연변이를 포함할 수 있다.

상기 언급된 돌연변이는 임의의 적합한 기술을 이용하여 도입될 수 있다. 돌연변이를 주어진 위치에 도입하기 위한 수많은 방법이 공지되어 있다. 예를 들어, 부위-지정 돌연변이 유발, 올리고뉴클레오티드-지정 돌연변이 유발, 또는 부위-특이적 돌연변이 유발을 이용할 수 있다. 특이적인 돌연변이 유발 프로토콜의 비제한적인 예는 예를 들어 Mutagenesis, pp. 13.1-13.105 (Sambrook and Russell, eds., Molecular Cloning A Laboratory Manual, Vol. 3, 3.sup.rd ed. 2001)에 기재되어 있다. 또한, 상업적인 업체로부터 입수가능한 널리 특성분석된 돌연변이 유발 프로토콜의 비제한적인 예에는 비제한적으로 얼터드 사이트(Altered Sites.RTM.) II 시험관내 돌연변이 유발 시스템 (프로메가 코퍼레이션(Promega Corp.), 위스콘신주 매디슨); 이래이저베이스(Erase-a-Base.RTM.) 시스템 (프로메가, 위스콘신주 매디슨); 진테일러(GeneTailor.TM.) 부위-지정 돌연변이 유발 시스템 (인비트로젠, 인크.(Invitrogen, Inc.), 캘리포니아주 칼스바드); 퀵체인지(QuikChange.RTM.) II 부위-지정 돌연변이 유발 키트 (스트라타젠(Stratagene), 캘리포니아주 라 졸라); 및 트랜스포머(Transformer.TM.) 부위-지정 돌연변이 유발 키트 (비디-클론텍(BD-Clontech), 캘리포니아주 마운틴 뷰)가 포함된다.

본 개시내용의 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 제제의 형태를 가질 수 있다. 암모니아 산화 박테리아는 본 개시내용의 화장품 제품과 함께 또는 조합하여 사용될 수 있다. 예를 들어, AOB 또는 AOB 제제는 화장품 제품과 별개인 제품의 형태를 가질 수 있거나, 또는 예를 들어 동일한 또는 상이한 최종 사용 용기에서 화장품 제품과 함께 제공될 수 있다.

AOB는 무균성일 수 있다. 암모니아 산화 박테리아의 제제, 예를 들어 제형, 예를 들어 조성물은 무균성 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다. 암모니아 산화 박테리아는 니트로소모나스, 니트로소코쿠스, 니트로소스피라, 니트로소시스티스, 니트로솔로부스, 니트로소비브리오, 및 이들의 조합물로부터 이루어진 군으로부터 선택된 속의 것일 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 상태 또는 질환을 적어도 부분적으로 치료하기 위한 농도 또는 양의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 암모니아 산화 박테리아의 제제는 표면, 예를 들어 피부 표면 상에서 박테리아의 양, 농도 또는 비율 또는 박테리아의 속을 변경, 예를 들어 감소 또는 증가시키기 위한 농도 또는 양의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 박테리아는 비병원성 또는 병원성, 또는 잠재적으로 병원성일 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 10⁸ 내지 약 10¹⁴ CFU/L를 포함할 수 있다. 상기 제제는 적어도 10⁸, 10⁹, 10¹⁰, 10¹¹, 2 x 10¹¹, 5 x 10¹¹, 10¹², 2 x 10¹², 5 x 10¹², 10¹³, 2 x 10¹³, 5 x 10¹³, 또는 10¹⁴; 또는 약 10⁸-10⁹, 10⁹-10¹⁰, 10¹⁰-10¹¹, 10¹¹-10¹², 10¹²-10¹³, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU/L를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 제제는 적어도 10⁸, 10⁹, 10¹⁰, 10¹¹, 2 x 10¹¹, 5 x 10¹¹, 10¹², 2 x 10¹², 5 x 10¹², 10¹³, 2 x 10¹³, 5 x 10¹³, 또는 10¹⁴; 또는 약 10⁸-10⁹, 10⁹-10¹⁰, 10¹⁰-10¹¹, 10¹¹-10¹², 10¹²-10¹³, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU/ml를 포함할 수 있다.

특정 측면에서, 상기 제제는 약 1 x 10⁹ CFU 내지 약 10 x 10⁹ CFU를 포함할 수 있다. 특정 측면에서, 상기 제제는 약 1 x 10⁹ CFU/L 내지 약 10 x 10⁹ CFU/L를 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 0.1 밀리그램 (mg) 내지 약 1000 mg의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 특정 측면에서, 상기 제제는 약 50 mg 내지 약 1000 mg의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 상기 제제는 약 0.1-0.5 mg, 0.2-0.7 mg, 0.5-1.0 mg, 0.5-2 mg, 0.5-5 mg, 2.5-5 mg, 2.5-7.0 mg, 5.0-10 mg, 7.5-15 mg, 10-15 mg, 15-20 mg, 15-25 mg, 20-30 mg, 25-50 mg, 25-75 mg, 50-75 mg, 50-100 mg, 75-100 mg, 100-200 mg, 200-300 mg, 300-400 mg, 400-500 mg, 500-600 mg, 600-700 mg, 700-800 mg, 800-900 mg, 900-1000 mg, 100-250 mg, 250-500 mg, 100-500 mg, 500-750 mg, 750-1000 mg, 또는 500-1000 mg을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 0.1 그램/리터 내지 약 1 그램/리터 범위의 암모니아 산화 박테리아 대 부형제, 예를 들어 제약상 허용가능한 부형제 또는 화장품용으로 허용가능한 부형제의 질량비를 포함할 수 있다. 상기 제제는 약 0.1-0.2, 0.2-0.3, 0.1-0.5, 0.2-0.7, 0.5-1.0, 또는 0.7-1.0 그램/리터 범위의 암모니아 산화 박테리아 대 부형제의 질량비를 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 인산이나트륨 및 염화마그네슘, 예를 들어 50 mM Na₂HPO₄ 및 2 mM MgCl₂를 포함하거나, 그로 본질적으로 이루어지거나 또는 그로 이루어진 완충제 용액 중의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다.

상기 제제는 약 0.1 내지 약 100 액량 온스, 약 0.2 내지 약 50 액량 온스, 약 0.5 내지 약 25 액량 온스, 약 1.0 내지 약 10 액량 온스, 약 2.0 내지 약 7 액량 온스, 약 3 내지 약 5 액량 온스의 부피를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 제제는 약 3.4 액량 온스의 부피를 포함할 수 있다.

상기 제제는 약 0.1 내지 약 100 액량 온스, 약 0.2 내지 약 50 액량 온스, 약 0.5 내지 약 25 액량 온스, 약 1.0 내지 약 10 액량 온스, 약 2.0 내지 약 7 액량 온스, 약 3 내지 약 5 액량 온스를 함유하도록 구성된 용기에 제공될 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 제제는 약 3.4 액량 온스를 함유하도록 구성된 용기이다. 용기는 1-챔버 용기, 또는 본원에 개시된 임의의 다른 용기일 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 성장 상태에 있을 수 있다. 성장 상태는 암모니아 산화 박테리아를 성장을 촉진할 수 있는 환경에 노출시킴으로써 제공될 수 있다. 성장 상태는 예를 들어 암모늄 이온 (NH₄ ⁺)에서 니트라이트 (NO₂ ^-)로 전환시키기 위해 암모니아 산화 박테리아를 즉각적으로 이용하는 것을 허용하는 환경에 암모니아 산화 박테리아가 있는 상태일 수 있다. 성장 상태는 약 7.6 초과의 pH를 갖는 환경에 암모니아 산화 박테리아를 제공하는 것을 포함할 수 있다. 성장 상태는 또한 섹션 1에 기재된 바와 같이 암모니아, 암모늄 이온 및/또는 우레아, 미량 무기물 및 충분한 산소 및 이산화탄소를 갖는 환경에 암모니아 산화 박테리아를 제공하는 것을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 폴리포스페이트 로딩 상태에 있을 수 있으며, 여기서 상태 또는 환경, 예를 들어 배지, 예를 들어 배양 배지, 예를 들어 성장 배지는 약 7.4 미만의 pH를 가질 수 있다. 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나의 수준은 약 10 마이크로몰 내지 200 밀리몰일 수 있다. 미량 물질의 수준은 0.1 마이크로몰의 철 내지 20 마이크로몰의 철일 수 있다. 산소의 수준은 약 5% 내지 100% 산소 포화도일 수 있다. 이산화탄소의 수준은 약 0 내지 200 ppm 사이/미만일 수 있고, 포스페이트 수준은 약 10 마이크로몰 초과일 수 있다. 폴리포스페이트 로딩 상태의 목적은 ATP를 생성할 수 있도록 AOB에게 암모니아 및 산소를 제공하지만, 이산화탄소를 고정하기 위해 상기 ATP를 사용할 수 없고, 대신에 저장될 수 있는 폴리포스페이트를 생성하기 위해 상기 ATP를 사용하도록 이산화탄소 및 카르보네이트를 거부하는 것일 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 보관 상태에 있을 수 있다. 보관 상태는 보관된 후에 재생될 수 있는 환경에 암모니아 산화 박테리아가 있는 것으로 정의될 수 있다. 보관 상태는 재생된 후에, 예를 들어 미리 결정된 기간 동안 성장 상태를 촉진시키는 환경에 둔 후에 암모니아 산화 박테리아를 이용하는 것을 허용하는 환경에 암모니아 산화 박테리아가 있는 상태일 수 있다. 재생을 위해 미리 결정된 기간은 72시간 미만일 수 있다. 예를 들어, 미리 결정된 기간은 약 75시간 미만, 또는 약 72시간 미만일 수 있다. 미리 결정된 기간은 적어도 부분적으로 암모니아 산화 박테리아에 대한 배가 시간의 약 0.2-10배, 0.3-5배, 0.5-3배, 0.5-1.5배, 또는 0.5 내지 1배의 기간을 기준으로 할 수 있다. 미리 결정된 기간은 적어도 부분적으로 암모니아 산화 박테리아에 대한 약 1 배가 시간의 기간을 기준으로 할 수 있다. 미리 결정된 기간은 약 8시간 내지 12시간일 수 있다. 미리 결정된 기간은 약 10시간일 수 있다. 미리 결정된 시간은 약 75시간, 72시간, 70시간, 68시간, 65시간, 60시간, 55시간, 50시간, 45시간, 40시간, 35시간, 30시간, 25시간, 20시간, 15시간, 10시간, 5시간, 4시간, 3시간, 2시간 또는 1시간 미만일 수 있다. 미리 결정된 기간은 약 5분 내지 5시간일 수 있다. 미리 결정된 기간은 약 5-10분, 10-15분, 15-20분, 20-25분, 25-30분, 30-45분, 45-60분, 60분 - 1.5시간, 1.5시간 - 2시간, 2시간 - 2.5시간, 2.5시간 - 3시간, 3시간 - 3.5시간, 3.5시간 - 4시간, 4시간 - 4.5시간, 4.5시간 - 5시간일 수 있다. 일부 실시양태에서, 미리 결정된 기간은 약 2시간일 수 있다.

보관 상태는 암모니아 산화 박테리아를 약 7.4 미만의 pH를 갖는 환경에 제공하는 것을 포함할 수 있다. 보관 상태는 또한 암모니아 산화 박테리아를 섹션 1에 기재된 바와 같이 암모니아, 암모니아 이온 및/또는 우레아, 미량 무기물, 산소, 및 저농도의 이산화탄소를 갖는 환경에 제공하는 것을 포함할 수 있다.

보관은 또한 4℃에서 수개월 동안 보관함으로써 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서 보관 완충제는 50 mM Na₂HPO₄ - 2 mM MgCl₂ (pH 7.6)을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 저온 보존될 수 있다. 1.25 ml의 암모니아 산화 박테리아 중간-로그 배양물을 2 ml의 동결 튜브 및 0.75 ml의 멸균성 80% 글리세롤에 첨가할 수 있다. 튜브를 조심스럽게 진탕시키고, 실온에서 15분 동안 인큐베이션하여, 세포에 의한 동결 방지제의 흡수를 가능하게 할 수 있다. 냉동 및 보관을 위해 튜브를 -80℃ 냉동고에 바로 보관할 수 있다.

배양물의 소생을 위해, 냉동된 원액을 얼음 상에서 10 - 20분 동안 해동시킨 다음, 8,000 x g 하에 3분 동안 4℃에서 원심분리할 수 있다. 펠릿을 2 ml AOB 배지에 현탁시킴으로써 세척한 후, 8,000 x g 하에 3분 동안 4℃에서 다시 원심분리하여, 동결 방지제의 잠재적인 독성을 감소시킬 수 있다. 펠릿을 2 ml의 AOB 배지에 재현탁시키고, 50 mM NH₄ ⁺를 함유하는 50 ml의 AOB 배지에 접종하고, 200 rpm에서 진탕시킴으로써 어두운 곳에서 30℃에서 인큐베이션할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 보관 상태의 암모니아 산화 박테리아 및/또는 폴리포스페이트 로딩 상태의 암모니아 산화 박테리아 및/또는 성장 상태의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 용기, 전달 시스템 또는 디바이스의 작동 시에, 보관 상태 또는 폴리포스페이트 로딩 상태에 있는 암모니아 산화 박테리아가 활성화제와 혼합될 수 있다. 활성화제는 적어도 약 7.6의 pH를 제공하기 위한 형태를 가질 수 있다. 활성화제는 암모니아, 암모늄 이온 및/또는 우레아, 미량 무기물 및 충분한 산소 및 이산화탄소를 제공하기 위한 형태를 가질 수 있다. 활성화제는 보관 상태 또는 폴리포스페이트 로딩 상태의 암모니아 산화 박테리아를 성장 상태로 재생시키거나 또는 적어도 부분적으로 재생시킬 수 있다. 보관 상태 (또는 폴리포스페이트 로딩 상태)로부터 암모니아 산화 박테리아를 재생시키는데 걸리는 시간은 미리 결정된 기간일 수 있다. 예를 들어, 미리 결정된 기간은 약 75시간 미만, 또는 약 72시간 미만일 수 있다. 미리 결정된 기간은 적어도 부분적으로 암모니아 산화 박테리아에 대한 배가 시간의 약 0.2-10배, 0.3-5배, 0.5-3배, 0.5-1.5배, 또는 0.5 내지 1배의 기간을 기준으로 할 수 있다. 미리 결정된 기간은 적어도 부분적으로 암모니아 산화 박테리아에 대한 약 1 배가 시간의 기간을 기준으로 할 수 있다. 미리 결정된 기간은 약 8시간 내지 12시간일 수 있다. 미리 결정된 기간은 약 10시간일 수 있다. 미리 결정된 시간은 약 75시간, 72시간, 70시간, 68시간, 65시간, 60시간, 55시간, 50시간, 45시간, 40시간, 35시간, 30시간, 25시간, 20시간, 15시간, 10시간, 5시간, 4시간, 3, 시간, 2시간 또는 1시간 미만일 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아, 암모늄 이온 및 우레아 중 적어도 하나를 니트라이트로 전환시키는 환경에 암모니아 산화 박테리아를 즉시 제공하는 반면에, 소정 기간에 걸쳐 보관 상태 및 폴리포스페이트 로딩 상태 중 적어도 하나에 있는 암모니아 산화 박테리아의 재생을 허용하도록, 용기는 성장 상태에 있는, 그리고 보관 상태 및 폴리포스페이트 로딩 상태 중 적어도 하나의 상태에 있는 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 이는 소정 기간에 걸쳐 보관된 암모니아 산화 박테리아의 제어 방출을 허용할 수 있다.

이론에 구애되지 않고, 암모니아 산화 박테리아를 적은 이산화탄소를 갖고 충분한 산소 및 암모니아를 갖는 상태 하에 또는 환경에서 유지시킴으로써, 이들은 미리 결정된 기간 동안, 예를 들어 약 1 배가 시간 동안, 예를 들어 약 8-12시간 동안, 예를 들어 약 10시간 동안 폴리포스페이트를 축적할 수 있다. 암모니아 산화 박테리아는 그들의 보관 생존가능성, 보관 시간을 연장시키고 그들의 재생을 가속시키는데 충분한 폴리포스페이트를 축적할 수 있다. 이는 완충제 및 암모니아의 첨가 및 비첨가 둘 다에서 일어날 수 있다.

충분한 보관 폴리포스페이트의 존재는 암모니아 산화 박테리아가 암모니아 및 산소의 부재 하에서도 ATP 자원을 이용하여 대사 활성을 유지할 수 있게 하고, 달리 치명적인 손상에서도 생존하게 할 수 있다.

ATP를 생성하기 위한 암모니아의 산화 공정은 2 단계를 갖는다. 첫번째 단계는 암모니아 모노옥시게나제 (Amo)에 의한 암모니아에서 히드록실아민으로의 산화이고, 이어서 히드록실아민 옥시도리덕타제 (Hao)에 의해 히드록실아민에서 니트라이트로 전환된다. 두번째 단계 (히드록실아민에서 니트라이트로의 전환)로부터의 전자를 사용하여 첫번째 단계 (암모니아에서 히드록실아민으로의 산화)를 작동시킬 수 있다.

암모니아 산화 박테리아가 Amo를 위한 전자를 생성하기 위해 히드록실아민을 갖지 않는 경우, Hao는 히드록실아민을 이용할 수 없다. 예를 들어, 아세틸렌은 암모니아에서 니트라이트로의 산화에서의 첫번째 단계인 암모니아에서 히드록실아민으로의 산화에서 중요한 효소를 비가역적으로 억제한다. AOB가 아세틸렌에 노출되면, Amo가 비가역적으로 억제되어, 히드록실아민이 생성될 수 있기 전에 새로운 효소가 합성되어야 한다. 정상적인 공동체 바이오필름 서식지에서, AOB는 다른 AOB (심지어 억제제에 대해 상이한 감수성을 갖는 상이한 균주)로부터의 히드록실아민을 공유하고 수용하여, 바이오필름은 개별 유기체에 비해 억제제, 예컨대 아세틸렌에 대해 더욱 내성인 경향이 있다. AOB는 심지어 히드록실아민의 부재 하에서도 새로운 Amo를 합성하기 위해 보관된 폴리포스페이트를 이용할 수 있다.

본원에서 논의된 암모니아 산화 박테리아의 임의의 실시양태, 제제, 조성물 또는 제형은 임의적으로 무균성 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있거나, 그로 본질적으로 이루어질 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다.

12. 암모니아 산화 박테리아의 생성 방법

다양한 암모니아 산화 박테리아, 예를 들어 니트로소모나스 종을 배양하는 방법이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 암모니아 산화 박테리아를 예를 들어 상기 표 1 또는 표 2에 기재된 배지를 이용하여 배양할 수 있다.

암모니아 산화 박테리아를 예를 들어 액체 배양물 중에서 또는 플레이트 상에서 성장시킬 수 있다. 적합한 플레이트는 1.2% R2A 아가, 1.2% 아가, 1.2% 아가로스, 및 1.2% 아가로스와 함께 0.3 g/L 피부베이트를 포함한다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 유기물 무함유 배지에서 배양할 수 있다. 유기물 무함유 배지를 사용하는 것의 한 이점은, 독립영양 박테리아에 의해 생성된 것을 제외하고는 종속 영양 박테리아가 대사하기 위한 기질이 결여되어 있다는 점이다. 성장된 배양물을 사용하는 것의 또 다른 이점은, 실질적인 니트라이트가 배양 배지에 축적되고, 이 니트라이트가 또한 종속 영양 박테리아를 억제하여 보관하는 동안 보존제로서 작용한다는 점이다.

일부 실시양태에서, 개선된, 예를 들어 최적화된 특성을 갖는 암모니아 산화 박테리아는 원하는 특성을 위해 번식 및 선별의 반복 과정에 의해 생성된다. 일부 실시양태에서, 선별 및 증식은 동시에 수행된다. 일부 실시양태에서, 선별은 50 mM, 75 mM, 100 mM, 125 mM, 150 mM, 175 mM, 200 mM, 225 mM, 250 mM, 275 mM, 또는 300 mM NH₄ ⁺, 예를 들어 적어도 200 mM NH₄ ⁺를 포함하는 반응 배지 (예를 들어, 완전 엔. 유로파에아 배지)에서 수행된다. 일부 실시양태에서, 증식 및/또는 선별의 기간은 적어도 1, 2, 3 또는 6개월이다. 실시양태에서, 증식 및/또는 선별의 기간은 적어도 1, 2, 4, 6, 8 또는 10년이다.

일부 측면에서, 암모니아 산화 박테리아는 상업적 규모로 제작된다. 일부 실시양태에서, 상업적 규모는 적어도 10,000, 20,000, 30,000, 50,000 또는 100,000 리터 (L)의 배양 배지 부피를 갖는 액체 배양 방법을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 박테리아를 생물반응기에서 생성한다. 생물반응기는 예를 들어 절연을 위한 열 자켓, 온도 센서, 및 가열 또는 냉각 부재를 사용하여 일정한 온도, 예를 들어 약 26-30℃에서 박테리아를 유지시킬 수 있다. 생물반응기는 암모니아, 우레아, 산소, 이산화탄소 및 다양한 무기물과 같은 영양분의 분배를 개선시키기 위해 배양물을 교반하는 장치를 가질 수 있다. 생물반응기는 또한 새로운 배지의 첨가를 위한 주입 튜브 및 세포 수집을 위한 배출 튜브를 가질 수 있다. 생물반응기는 또한 산소 및/또는 이산화탄소를 배양물에 분배하기 위한 통풍기를 가질 수 있다. 생물반응기는 예를 들어 배치식 반응기, 유가식 반응기 또는 연속식 반응기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 상업적 규모 생성은 약 10¹² CFU/리터에서 1,000 내지 100,000 L/일의 배치를 수득한다. 상업적 규모 생성은 예를 들어 1,000-5,000, 5,000-10,000, 10,000-50,000, 또는 50,000-100,000 L/일의 배치를 수득할 수 있다. 상업적 규모 생성은 예를 들어 1,000-5,000, 5,000-10,000, 10,000-50,000 또는 50,000-100,000 L/배치의 배치를 수득할 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 수율은 적어도 10⁸, 10⁹, 10¹⁰, 10¹¹, 2 x 10¹¹, 5 x 10¹¹, 또는 10¹², 또는 약 10¹⁰-10¹¹, 10¹¹-10¹², 10¹²-10¹³, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU/L의 농도이다. 일부 실시양태에서, 상기 수율은 적어도 10⁸, 10⁹, 10¹⁰, 10¹¹, 2 x 10¹¹, 5 x 10¹¹, 또는 10¹², 또는 약 10¹⁰-10¹¹, 10¹¹-10¹², 10¹²-10¹³, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU/ml의 농도이다.

전형적으로 상업적 규모 생성을 포함하는 일부 실시양태에서, 품질 관리 (QC) 시험 단계를 수행한다. QC의 일반적인 단계는 1) 암모니아 산화 박테리아를 배양하고, 2) 배양물 또는 그의 분취량에 대해 시험 단계를 수행하고, 3) 시험 단계로부터의 값을 수득하고, 임의적으로: 4) 수득한 값을 허용가능한 값의 기준 값 또는 범위와 비교하고, 5) 수득한 값이 허용가능한 기준 값 또는 범위를 충족시키는 경우, 배양물을 허용가능한 것으로 분류하고, 수득한 값이 허용가능한 기준 값 또는 범위를 충족하지 않는 경우, 배양물을 허용가능하지 않은 것으로 분류하는 것을 포함할 수 있다. 배양물이 허용가능한 것으로 분류된 경우에는, 배양물을 예를 들어 계속 성장하도록 할 수 있고/거나 수확하여 상업적 제품에 첨가할 수 있다. 배양물이 허용가능하지 않은 것으로 분류된 경우에는, 배양물을 예를 들어 안전하게 폐기시킬 수 있거나, 또는 결함을 바로 잡을 수 있다.

시험 단계는 배양물의 광학 밀도 (OD)를 측정하는 것을 포함할 수 있다. OD는 분광 광도계로 측정하여, 흡수되거나 산란된 빛과는 구별되는, 샘플을 통해 투과된 빛의 양에 대한 정보를 제공한다. 일부 실시양태에서, OD600 (예를 들어, 600 nm의 파장을 갖는 빛의 광학 밀도)를 측정할 수 있다. 이 측정치는 전형적으로 배지 중 세포의 농도를 나타내며, 높은 광학 밀도는 높은 세포 밀도에 상응한다.

시험 단계는 배양물의 pH를 측정하는 것을 포함할 수 있다. 암모니아 산화 박테리아 배양물의 pH는 질소 산화율을 나타내고, 또한 배양물이 오염 유기체를 포함하는지 여부를 나타낼 수 있다. pH는 예를 들어 전극 (예컨대, 수소 전극, 퀸히드론-전극, 안티모니 전극, 유리 전극)을 포함하는 pH-센싱 디바이스, 반도체를 포함하는 pH-센싱 디바이스, 또는 발색 지시기, 예컨대 pH 페이퍼를 사용하여 측정할 수 있다.

특정 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 생성은 다양한 품질 관리 단계를 수행하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 배지가 적절한 pH를 갖는지 여부, 배지가 충분히 낮은 수준의 폐기물을 갖는지 여부, 및/또는 배지가 충분히 높은 수준의 영양분을 갖는지 여부를 결정하기 위해 암모니아 산화 박테리아가 성장하는 배지를 시험할 수 있다. 또한, 오염 유기체의 존재에 대해 시험할 수 있다. 오염 유기체는 전형적으로 암모니아 산화 박테리아 이외의 유기체, 예를 들어 마이크로박테리움 종(Microbacterium sp.), 알칼리게나세아에(Alcaligenaceae) 박테리아, 카울로박터 종(Caulobacter sp.), 부르코델리아 물티보란스(Burkodelia multivorans), 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli), 클레브시엘라 뉴모니아에(Klebsiella pneumoniae) 및 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus)로부터 선택된 유기체이다. 예를 들어 DNA를 추출하고, 이를 증폭시키고, 보존된 유전자, 예컨대 16S rRNA를 시퀀싱함으로써 오염물에 대해 시험할 수 있다. 배양물을 아가 플레이트 상에 플레이팅하고, 콜로니 형태를 관찰함으로써 오염물에 대해 시험할 수 있다. 암모니아 산화 박테리아는 전형적으로 적색 콜로니를 형성하며, 따라서 적색이 아닌 콜로니는 종종 오염 유기체의 지표이다.

13. 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 조성물

본 개시내용은 그 중에서도 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 조성물, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제, 또는 암모니아 산화 박테리아의 정제된 제제를 제공한다. 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 조성물, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제, 또는 암모니아 산화 박테리아의 정제된 제제를 화장품 제품 또는 치료용 제품으로 제공할 수 있다. 상기 조성물은 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 천연 생성물을 포함할 수 있다.

일부 측면에서, 본 개시내용은 한정된 개수의 종을 갖는 조성물, 예를 들어 제제를 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 암모니아 산화 박테리아를 갖거나, 또는 더욱 구체적으로 암모니아 산화 박테리아의 한 속을 갖거나, 또는 더욱 구체적으로 암모니아 산화 박테리아의 한 종, 예를 들어 엔. 유트로파를 갖고, 다른 유형의 한 유기체를 갖고, 다른 유형의 유기체를 갖지 않는 조성물을 제공한다. 다른 예에서, 조성물은 암모니아 산화 박테리아를 갖거나, 또는 더욱 구체적으로 암모니아 산화 박테리아의 한 속을 갖거나, 또는 더욱 구체적으로 암모니아 산화 박테리아의 한 종, 예를 들어 엔. 유트로파를 갖고, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10가지 다른 유형의 유기체를 갖고, 다른 유형의 유기체를 갖지 않는다. 이러한 목적에 적합한 암모니아 산화 박테리아에는 니트로소모나스, 니트로소코쿠스, 니트로소스피라, 니트로소시스티스, 니트로솔로부스, 또는 니트로소비브리오 속의 것들이 포함된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아 이외에 1종 이상의 다른 유기체가 암모니아 산화 박테리아의 제제에 포함될 수 있다. 예를 들어, 락토바실루스, 스트렙토코쿠스, 비피도박터, 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 속의 유기체가 암모니아 산화 박테리아의 제제에 포함될 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 다른 유기체를 실질적으로 함유하지 않을 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 조성물, 예를 들어 제제는 암모니아 산화 박테리아 생존가능성을 지원하는 상태를 제공한다. 예를 들어, 조성물은 암모니아 산화 박테리아 성장 및 대사를 촉진시킬 수 있거나, 또는 본원에 기재된 바와 같이 생존가능한 암모니아 산화 박테리아가 회복될 수 있는 휴면 상태 (예를 들어, 냉동) 또는 보관 상태를 촉진시킬 수 있다. 조성물이 성장 또는 대사를 촉진시키는 경우, 이는 암모니아 산화 박테리아가 소모하는 물 및/또는 영양분을 예를 들어 암모늄 이온, 암모니아, 우레아, 산소, 이산화탄소, 또는 미량 무기물로서 함유할 수 있다.

암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 10⁸ 내지 약 10¹⁴ CFU/L를 포함할 수 있다. 상기 제제는 적어도 약 10⁸, 10⁹, 10¹⁰, 10¹¹, 2 x 10¹¹, 5 x 10¹¹, 10¹², 2 x 10¹², 5 x 10¹², 10¹³, 2 x 10¹³, 5 x 10¹³, 또는 10¹⁴; 또는 약 10⁸-10⁹, 10⁹-10¹⁰,10¹⁰-10¹¹, 10¹¹-10¹², 10¹²-10¹³, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU/L를 포함할 수 있다.

암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 10⁸ 내지 약 10¹⁴ CFU/ml를 포함할 수 있다. 상기 제제는 적어도 약 10⁸, 10⁹, 10¹⁰, 10¹¹, 2 x 10¹¹, 5 x 10¹¹, 10¹², 2 x 10¹², 5 x 10¹², 10¹³, 2 x 10¹³, 5 x 10¹³, 또는 10¹⁴; 또는 약 10⁸-10⁹, 10⁹-10¹⁰,10¹⁰-10¹¹, 10¹¹-10¹², 10¹²-10¹³, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU/ml를 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 0.1 밀리그램 (mg) 내지 약 100 mg의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 특정 측면에서, 상기 제제는 약 50 mg 내지 약 1000 mg의 암모니아 산화 박테리아를 포함할 수 있다. 상기 제제는 약 0.1-0.5 mg, 0.2-0.7 mg, 0.5-1.0 mg, 0.5-2 mg, 0.5-5 mg, 2.5-5 mg, 2.5-7.0 mg, 5.0-10 mg, 7.5-15 mg, 10-15 mg, 15-20 mg, 15-25 mg, 20-30 mg, 25-50 mg, 25-75 mg, 50-75 mg, 50-100 mg, 75-100 mg, 100-200 mg, 200-300 mg, 300-400 mg, 400-500 mg, 500-600 mg, 600-700 mg, 700-800 mg, 800-900 mg, 900-1000 mg, 100-250 mg, 250-500 mg, 100-500 mg, 500-750 mg, 750-1000 mg, 또는 500-1000 mg을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 약 0.1 그램/리터 내지 약 1 그램/리터 범위의 암모니아 산화 박테리아 대 부형제, 예를 들어 제약상 허용가능한 부형제 또는 화장품용으로 허용가능한 부형제의 질량비를 포함할 수 있다. 상기 제제는 약 0.1-0.2, 0.2-0.3, 0.1-0.5, 0.2-0.7, 0.5-1.0, 또는 0.7-1.0 그램/리터 범위의 암모니아 산화 박테리아 대 부형제의 질량비를 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제는 인산이나트륨 및 염화마그네슘, 예를 들어 50 mM Na₂HPO₄ 및 2 mM MgCl₂를 포함하거나, 그로 본질적으로 이루어지거나 또는 그로 이루어진 완충제 용액 중의 암모니아 산화 박테리아일 수 있다. 상기 제제는 예를 들어 약 0.1 내지 약 100 액량 온스, 약 0.2 내지 약 50 액량 온스, 약 0.5 내지 약 25 액량 온스, 약 1.0 내지 약 10 액량 온스, 약 2.0 내지 약 7 액량 온스, 약 3 내지 약 5 액량 온스의 미리 결정된 부피에서 완충제 중에 제공될 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 제제는 용기에 제공될 수 있다. 상기 제제는 약 3.4 액량 온스 또는 본원에 개시된 임의의 다른 부피를 함유하도록 구성된 용기에 제공될 수 있다. 상기 제제는 에어로졸화, 스프레이화 또는 미스트화될 수 있는 형태, 즉, 미스트의 형태일 수 있다.

암모니아 산화 박테리아를 1종 이상의 부형제, 예를 들어 1종 이상의 제약상 허용가능한 부형제 또는 화장품용으로 허용가능한 부형제와 조합할 수 있다. 일부 실시양태에서, "제약상 허용가능한 부형제"는 제약상-허용가능한 물질, 조성물 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 용매, 또는 캡슐화 물질을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 각각의 부형제는 제약 제제의 다른 성분과 상용성이고, 합리적인 이익/위험 비에 상응하게, 과도학 독성, 자극, 알러지 반응, 면역원성, 또는 다른 문제 또는 합병증이 없이 인간 및 동물의 조직 또는 장기와 접촉하여 사용하기에 적합하다는 측면에서 "제약상 허용가능한" 것이다. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, Pa., 2005; Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th ed.; Rowe et al., Eds.; The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2009; Handbook of Pharmaceutical Additives, 3rd ed.; Ash and Ash Eds.; Gower Publishing Company: 2007; Pharmaceutical Preformulation and Formulation, 2nd ed.; Gibson Ed.; CRC Press LLC: Boca Raton, Fla., 2009를 참조한다.

일부 실시양태에서, 화장품용으로 허용가능한 부형제는 화장품용으로 허용가능한 물질, 조성물 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 용매, 또는 캡슐화 물질을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 각각의 부형제는 화장품 제제의 다른 성분과 상용성이고, 합리적인 이익/위험 비에 상응하게, 과도학 독성, 자극, 알러지 반응, 면역원성, 또는 다른 문제 또는 합병증이 없이 인간 및 동물의 조직 또는 장기와 접촉하여 사용하기에 적합하다는 측면에서 화장품용으로 허용가능한 것이다

부형제, 예를 들어 제약상 허용가능한 부형제 또는 화장품용으로 허용가능한 부형제를 본 개시내용의 용기 및 키트에, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제 내에, 활성화제 내에 또는 하나 이상의 챔버, 예를 들어 용기의 제1 챔버, 제2 챔버 또는 혼합 챔버 내에 제공할 수 있다.

활성 성분, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아를 단독으로 투여하는 것이 가능하지만, 여러 실시양태에서 이는 제약 제형, 제제 또는 조성물, 또는 화장품 제형, 제제 또는 조성물 중에 존재한다. 따라서, 본 개시내용은 암모니아 산화 박테리아 및 제약상 허용가능한 부형제 또는 화장품용으로 허용가능한 부형제를 포함하는 제약 제형 (제제 또는 조성물) 또는 화장품 제형 (제제 또는 조성물)을 제공한다. 제약 조성물 및 화장품 조성물은 하기 기재된 바와 같은 제형의 형태를 가질 수 있다.

본원에 기재된 제약 및 화장품 제형 (예를 들어, 제제 또는 조성물)은 경구 (예를 들어, 위장관에 축적하는 방식으로 또는 그러한 목적을 위해), 비경구 (예컨대, 피하, 피내, 근육내, 정맥내 및 관절내), 흡입 (예컨대, 다양한 유형의 계량된 투여, 가압식 에어로졸, 네불라이저 또는 취입기에 의해 생성될 수 있는 미세 입자 분진 또는 미스트, 및 비내로 (코) 또는 폐를 통해 (폐)), 직장 및 국소 (예컨대, 피부, 경피, 경점막, 협측, 설하 및 안내) 투여에 적합한 것들을 포함하지만, 가장 적합한 경로는 예를 들어 수용자의 상태 및 장애에 따라 좌우될 수 있다.

제형 (예를 들어, 제제 또는 조성물)은 편리하게는 단위 투여 형태로 제시될 수 있고, 제약 또는 화장 분야에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 전형적으로, 상기 방법은 활성 성분 (예를 들어, 암모니아 산화 박테리아)을 1종 이상의 부성분을 구성하는 제약 또는 화장품용 담체와 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 상기 제형은 활성 성분과 액체 담체 또는 미분된 고체 담체 또는 이들 둘 다를 균일하고 긴밀하게 회합시킨 다음, 필요에 따라 원하는 제형으로 생성물을 성형함으로써 제조된다.

제형은 각각 미리 결정된 양의 암모니아 산화 박테리아를 함유하는 개별적인 단위, 예컨대 캡슐, 카세 또는 정제; 파우더 또는 과립; 수성 액체 또는 비수성 액체 중의 용액 또는 현탁액; 또는 수중유 액체 에멀젼 또는 유중수 액체 에멀젼으로 제시될 수 있다. 활성 성분은 또한 볼루스, 연약 또는 페이스트로 제시될 수 있다. 다양한 제약상 허용가능한 담체 및 그의 제형은 표준 제형화 논문, 예를 들어 Remington's Pharmaceutical Sciences by E. W. Martin에 기재되어 있다. 또한, Wang, Y. J. and Hanson, M. A., Journal of Parenteral Science and Technology, Technical Report No. 10, Supp. 42:2 S, 1988을 참조한다.

암모니아 산화 박테리아 조성물 또는 제제는 예를 들어 즉시 방출 또는 제어 (연장) 방출에 적합한 형태로 투여될 수 있다. 지속 방출 시스템의 적합한 예에는 적합한 중합체성 물질, 예를 들어 성형품, 예를 들어 필름 또는 마이크로캡슐 형태의 반투과성 중합체 매트릭스; 적합한 소수성 물질, 예를 들어 허용가능한 오일 중의 에멀젼; 또는 이온 교환 수지가 포함된다. 제어 (지속) 방출 시스템은 경구; 직장; 비경구; 수조내; 질내; 복강내; 국소, 예를 들어 파우더, 연고, 겔, 점적제 또는 경피 패치; 협측; 또는 스프레이로 투여될 수 있다.

투여를 위한 제제는 암모니아 산화 박테리아의 제어 방출을 제공하도록 적합하게 제제화될 수 있다. 예를 들어, 제형, 제제 또는 조성물은 생분해성 중합체, 다당류 젤리 및/또는 생체결합성 중합체, 또는 양친매성 중합체 중 하나 이상을 포함하는 입자의 형태를 가질 수 있다. 이들 조성물은 활성 물질의 제어 방출을 허용하는 특정한 생체적합성을 나타낸다. 미국 특허 번호 5,700,486을 참조한다. 제제는 제어 방출 물질을 포함할 수 있다.

본 개시내용의 특정한 예에서, 지속 방출 또는 제어 방출 시스템은 장벽으로 지칭될 수 있다.

예시적인 조성물, 예를 들어 제제는 예를 들어 벌크성 부여를 위한 미세결정질 셀룰로스, 현탁화제로서 알긴산 또는 알긴산나트륨, 점도 강화제로서 메틸셀룰로스, 인산이칼슘, 전분, 스테아르산마그네슘 및/또는 락토스 및/또는 다른 부형제, 결합제, 증량제, 붕해제, 희석제 및 윤활제, 만니톨, 락토스, 수크로스 및/또는 시클로덱스트린을 함유할 수 있는 현탁액을 포함할 수 있다. 이러한 제제는 또한 고분자량 부형제, 예컨대 셀룰로스 (아비셀) 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)을 포함할 수 있다. 이러한 제형은 또한 점막 접착력을 보조하기 위한 부형제, 예컨대 히드록시 프로필 셀룰로스 (HPC), 히드록시 프로필 메틸 셀룰로스 (HPMC), 나트륨 카르복시 메틸 셀룰로스 (SCMC), 말레산 무수물 공중합체 (예를 들어, 간트레즈(Gantrez)), 및 방출 제어제, 예컨대 폴리아크릴산 공중합체 (예를 들어, 카르보폴(Carbopol) 934)를 포함할 수 있다. 윤활제, 계면활성제, 활택제, 향미제, 착색제 및 안정화제 또한 조립 및 사용의 용이함을 위해 첨가될 수 있다. 계면활성제는 쯔비터 이온성 계면활성제, 비이온성 계면활성제, 또는 음이온성 계면활성제일 수 있다.

계면활성제는 코카미도프로필 베타인 (콜라테릭 COAB), 폴리에틸렌 소르비톨 에스테르 (예를 들어, 트윈 80), 에톡실화 라우릴 알콜 (로다서프 6 NAT), 나트륨 라우레트 술페이트/라우릴 글루코시드/코카미도프로필 베타인 (플란타폰 611 L UP), 나트륨 라우레트 술페이트 (예를 들어, 로다펙스 ESB 70 NAT), 알킬 폴리글루코시드 (예를 들어, 플란타렌 2000 N UP), 나트륨 라우레트 술페이트 (플란타렌 200), 닥터 브로너스 카스티야 비누, 닥터 브로너스 유아용 비누, 라우라민 옥시드 (콜라룩스 로), 나트륨 도데실 술페이트 (SDS), 폴리술포네이트 알킬 폴리글루코시드 (폴리수파네이트 160 P), 나트륨 라우릴 술페이트 (스테파놀-더블유에이 엑스트라 케이) 및 이들의 조합물 중 1종 이상을 단독으로 포함하거나, 또는 열거된 것들, 또는 다른 계면활성제 또는 계면활성제-유사 화합물과 함께 포함할 수 있다. 닥터 브로너스 카스티야 비누 및 유아용 비누는 물, 유기 코코넛 오일, 수산화칼륨, 유기 올리브 오일, 유기 공정 거래 대마유, 유기 호호바 오일, 시트르산, 및 토코페롤을 포함한다. 카스티야 비누, 예를 들어 닥터 브로너스 카스티야 비누, 및 여러 천연 및 유아용 비누는 물, 유기 또는 비유기 동물 또는 식물성 오일, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨, 유기 올리브 오일, 유기 공정 거래 대마유, 유기 호호바 오일, 시트르산, 및 토코페롤로 구성된다.

계면활성제에는 나트륨 라우릴글루코시드 히드록시프로필술포네이트 (슈가®네이트 160NC), 라우라미도프로필 베타인 (콜라®테릭 LMB); 코카미도프로필 히드록시술타인 (콜라®테릭 CBS); 이나트륨 코코암포디아세테이트 (콜라®테릭 CDCX-LV); 나트륨 라우릴글루코시드 히드록시프로필 포스페이트 (슈가®팩스 D12)가 포함될 수 있다.

계면활성제에는 나트륨 라우로일 메틸 이세티오네이트 (이세룩스® LQ-CLR-SB); 나트륨 메틸 코코일 타우레이트 (퓨리액트 더블유에스 콘크.); 아쿠아 (및) 나트륨 라우로일 메틸 이세티오네이트 (및) 코카미도프로필 베타인 (및) 나트륨 코코일 이세티오네이트 (및) 나트륨 메틸 올레오일 타우레이트 (이세룩스 ®SFS-SB)가 포함될 수 있다.

일부 실시양태에서, 계면활성제는 니트라이트 생성을 일으키는 양으로 암모니아 산화 박테리아와 함께 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 약 0.01 % 내지 약 10% 미만의 계면활성제를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 사용되는 계면활성제의 농도는 약 0.0001% 내지 약 10%일 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 계면활성제를 실질적으로 함유하지 않수 있다.

일부 실시양태에서, 제형, 예를 들어 제제는 암모니아 산화 박테리아의 효율을 개선시키거나, 또는 치료 또는 징후를 개선시킬 수 있는 다른 성분을 포함할 수 있다.

일부 실시양태에서, 킬레이터를 제제에 포함시킬 수 있다. 킬레이터는 또 다른 화합물, 예를 들어 금속과 결합할 수 있는 화합물일 수 있다. 킬레이터는 원치않는 화합물을 환경으로부터 제거하는데 도움이 될 수 있거나, 또는 특정한 화합물과 환경, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제, 예를 들어 부형제의 접촉을 감소시키거나 제거하기 위해 보호 방식으로 작용할 수 있다.

제형 (예를 들어, 제제)은 또한 항산화제, 완충제, 원치않는 박테리아의 성장을 방지하는 정균제, 용질, 및 현탁화제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균성 현탁액을 함유할 수 있다. 제형은 단위 용량 또는 다중 용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰풀 및 바이알로 제시될 수 있고, 사용 직전에 멸균성 액체 담체, 예를 들어 식염수 또는 주사용수의 첨가만을 요하는 냉동 건조 (동결 건조) 상태로 보관될 수 있다. 즉석 용액 및 현탁액을 이전에 기재된 종류의 파우더, 과립 및 정제로부터 제조할 수 있다. 예시적인 조성물에는 예를 들어 적합한 무독성의 제약상 허용가능한 희석제 또는 용매, 예컨대 만니톨, 1,3-부탄디올, 물, 링거액, 등장성 염화나트륨 용액, 또는 다른 적합한 분산화제 또는 습윤제 및 현탁화제, 예컨대 합성 모노- 또는 디글리세리드, 및 지방산, 예컨대 올레산, 또는 크레마포어(Cremaphor)를 함유할 수 있는 용액 또는 현탁액이 포함된다. 수성 담체는 예를 들어 약 3.0 내지 약 8.0의 pH, 약 3.5 내지 약 7.4, 예를 들어 3.5 내지 6.0, 예를 들어 3.5 내지 약 5.0의 pH를 갖는 등장성 완충제 용액일 수 있다. 유용한 완충제에는 시트르산나트륨-시트르산 및 인산나트륨-인산, 및 아세트산나트륨/아세트산 완충제가 포함된다. 일부 실시양태에서 조성물은 산화제를 포함하지 않는다.

포함될 수 있는 부형제에는 예를 들어 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민 또는 혈장 제제가 포함된다. 원하는 경우, 제약 조성물, 예를 들어 제제는 또한 미량의 무독성 보조 물질, 예컨대 습윤제 또는 유화제, 계면활성제, 보존제, 및 pH 완충화제 등, 예를 들어 시트르산나트륨, 아세트산나트륨 또는 소르비탄 모노라우레이트를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 부형제, 예를 들어 제약상 허용가능한 부형제 또는 화장품용으로 허용가능한 부형제는 접착 방지제, 결합제, 코팅, 붕해제, 충전제, 향미제, 착색제, 윤활제, 활택제, 흡착제, 보존제, 또는 감미제를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 부형제를 실질적으로 함유하지 않을 수 있다.

에어로졸 투여를 위한 예시적인 조성물에는 예를 들어 벤질 알콜 또는 다른 적합한 보존제, 생체이용률 개선을 위한 흡수 촉진제, 및/또는 다른 가용화제 또는 분산화제를 함유할 수 있는 식염수 중의 용액이 포함된다. 편리하게는 에어로졸 투여를 위한 조성물에서 암모니아 산화 박테리아는 적합한 추진제, 예를 들어 디클로로디플루오로-메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소, 질소, 또는 다른 적합한 기체를 사용하는 가압식 팩 또는 네불라이저로부터의 에어로졸 스프레이 제제의 형태로 전달될 수 있다. 가압식 에어로졸의 경우, 투여 단위는 계량된 양을 전달하기 위해 밸브를 제공함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어 젤라틴의 캡슐 및 카트리지는 암모니아 산화 박테리아 및 적합한 파우더 베이스, 예를 들어 락토스 또는 전분의 파우더 믹스를 함유하도록 제형화될 수 있다. 특정 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 작동기로도 공지된 에어로졸 어댑터를 통해 계량 투여 밸브로부터 에어로졸로서 투여된다. 임의적으로, 안정화제 또한 포함되고/거나 폐 깊숙이 전달을 위한 다공성 입자가 포함된다 (예를 들어, 미국 특허 번호 6,447,743 참조). 조성물 또는 제제는 에어로졸화, 스프레이화 또는 미스트화 될 수 있는 형태, 즉, 미스트 형태를 가질 수 있다. 암모니아 산화 박테리아의 제제는 인산이나트륨 및 염화마그네슘, 예를 들어 50 mM Na₂HPO₄ 및 2 mM MgCl₂를 포함하거나, 그로 본질적으로 이루어지거나 또는 그로 이루어진 완충제 용액 중의 암모니아 산화 박테리아일 수 있다.

제형은 담체, 예컨대 시어 또는 코코아 버터, 합성 글리세리드 에스테르 또는 폴리에틸렌 글리콜과 함께 제시될 수 있다. 이러한 담체는 전형적으로 상온에서 고체이지만, 암모니아 산화 박테리아를 방출하기 위해 체온에서는 액화 및/또는 용해된다.

국소 투여를 위한 예시적인 조성물에는 국소 담체, 예컨대 플라스티베이스 (Plastibase, 폴리에틸렌에 의해 겔화된 광물성 오일)가 포함된다. 일부 측면에서, 조성물, 예를 들어 제제 및/또는 부형제는 액체, 고체 또는 겔 중 하나 이상의 형태를 가질 수 있다. 예를 들어, 액체 현탁액에는 물, 식염수, 포스페이트-완충된 식염수, 또는 암모니아 산화 보관 완충제가 포함될 수 있으나 이로 제한되지 않는다.

겔 제형에는 아가, 실리카, 폴리아크릴산 (예를 들어 카르보폴®), 카르복시메틸 셀룰로스, 전분, 구아 검, 알기네이트, 점토 또는 키토산이 포함될 수 있으나 이로 제한되지 않는다. 일부 실시양태에서, 제형, 예를 들어 제제는 암모니아, 암모늄 이온, 예를 들어 염화암모늄 또는 황산암모늄, 및 우레아 중 하나 이상을 비롯한 이로 제한되지 않는 암모니아 공급원으로 보충될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아 조성물, 예를 들어 제제는 피부로 NO 투과를 개선시키기 위해 제형화된다. 겔-형성 물질, 예컨대 KY 젤리 또는 다양한 헤어 젤은 주위 공기로의 NO 손실에 대한 확산 장벽을 나타내며, 따라서 NO의 피부 흡수를 개선시킨다. 피부에서 NO 수준은 일반적으로 20 nM/L를 넘지 않는데, 이는 상기 수준이 GC를 활성화시키고 과잉 NO의 국부적 혈관 확장 및 산화적 파괴를 초래할 것이기 때문이다.

상기에서 특별하게 인용된 성분 외에도 본원에 기재된 제형, 예를 들어 제제는 해당 제형의 유형과 관련하여 관련 기술분야에서 전형적인 다른 작용제를 포함할 수 있음을 이해해야 한다.

제형, 예를 들어 제제, 예를 들어 조성물은 용기의 내용물을 포함하거나 포함하지 않고, 약 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 또는 2000 그램 미만일 수 있는 중량을 갖는 용기, 전달 시스템 또는 전달 디바이스에 제공될 수 있다.

적합한 단위 투여 제제는 암모니아 산화 박테리아의 상기 언급된 유효 용량 또는 그의 적절한 분획을 함유하는 것이다.

암모니아 산화 박테리아의 치료 유효량은 시간에 걸쳐 투여되는 단일 펄스 용량, 볼루스 용량 또는 펄스 용량으로서 투여될 수 있다. 따라서, 펄스 용량에서는 암모니아 산화 박테리아의 볼루스 투여가 제공되고, 소정 기간 이후에 암모니아 산화 박테리아가 대상체에게 투여된 후, 제2 볼루스 투여를 제공한다. 구체적이고 비제한적인 예에서, 펄스 용량은 하루에 걸쳐, 일주일에 걸쳐 또는 한달에 걸쳐 투여된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제, 예를 들어 제형, 예를 들어 조성물은 미리 결정된 일수 동안 적용될 수 있다. 이는 예를 들어 적어도 부분적으로 상태 또는 질환의 중증도, 치료에 대한 반응, 적용된 용량 및 투여 빈도를 기준으로 할 수 있다. 예를 들어, 제제는 약 1-3, 3-5, 5-7, 7-9, 5-10, 10-14, 12-18, 12-21, 21-28, 28-35, 35-42, 42-49, 49-56, 46-63, 63-70, 70-77, 77-84, 84-91일 동안 적용될 수 있다. 특정 측면에서, 제제는 약 16일 동안 적용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아의 제제, 예를 들어 제형, 예를 들어 조성물은 미리 결정된 횟수/일로 적용될 수 있다. 이는 예를 들어 적어도 부분적으로 상태 또는 질환의 중증도, 치료에 대한 반응, 적용된 용량 및 투여 빈도를 기준으로 할 수 있다. 예를 들어, 제제는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24회/일로 적용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 제제는 1회/일로 적용될 수 있다. 다른 실시양태에서, 제제는 2회/일로 적용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 특정한 일수 동안 첫번째 미리 결정된 양 및 특정한 일수 동안 두번째 미리 결정된 양으로 적용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 제제는 약 16일 동안 적용될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 약 1-3, 3-5, 5-7, 7-9, 5-10, 10-14, 12-18, 12-21, 21-28, 28-35, 35-42, 42-49, 49-56, 46-63, 63-70, 70-77, 77-84, 84-91일 동안, 예를 들어 약 1개월 동안, 약 2개월 동안, 약 3개월 동안 투여된다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 규정되지 않은 기간 동안, 예를 들어 1년 초과, 5년 초과, 10년 초과, 15년 초과, 30년 초과, 50년 초과, 75년 초과로 투여된다.

암모니아 산화 박테리아는 다양한 소비자 및 치료용 제품과 회합될 있으며, 이러한 제품의 예는 하기에 설명된다. 일부 실시양태에서, 제품과 회합된 암모니아 산화 박테리아를 제품과 혼합하고, 예를 들어 제품을 통해 균일하게 확산시키고, 일부 실시양태에서 제품과 회합된 암모니아 산화 박테리아를 제품 상에 층상화시킨다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 파우더와 회합시킨다. 파우더는 전형적으로 서로 부착되지 않고 기울였을 때 자유롭게 유동할 수 있는 작은 미립자 고체이다. 소비자 사용을 위한 예시적인 파우더에는 탈컴 파우더 및 일부 화장품 (예를 들어, 파우더 파운데이션, 예컨대 압축 파우더)가 포함된다. 다른 파우더는 암모니아 산화 박테리아 시스템 및 본 개시내용의 방법과 함께 사용하기 위해 고려될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 화장품과 회합된다. 화장품은 개인의 외관을 변경시키기 위해 의도된 국소 적용 물질, 예를 들어 액체 파운데이션, 파우더 파운데이션, 블러쉬 또는 립스틱일 수 있다. 화장품은 예를 들어 21 C.F.R.§ 720.4 하에 식품의약국 규정에 인용된 임의의 물질일 수 있다.

제제, 예를 들어 화장품은 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 적어도 하나로서 제공될 수 있거나 또는 그에 배치될 수 있다.

일부 실시양태에서, 제제, 예를 들어 화장품은 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 린스, 샴푸, 토닉, 페이스 파우더, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 구강 위생 제품, 구강 청결제, 목욕 비누, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체 중 적어도 하나로서 제공될 수 있거나 또는 그에 배치될 수 있다.

화장품 제형, 예를 들어 물, 광물성 오일, 착색제, 퍼퓸, 알로에, 글리세린, 염화나트륨, 중탄산나트륨, pH 완충제, UV 차단제, 실리콘 오일, 천연 오일, 비타민 E, 허브 농축물, 락트산, 시트르산, 탈크, 점토, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화아연, 전분, 우레아 및 에리소르브산, 또는 통상의 기술자에게 공지된 임의의 다른 부형제, 예컨대 본원에 개시된 것들 중에서 통상의 기술자에 의해 선택된 다른 성분이 제약 제형, 예를 들어 제제 또는 화장품 제제에 첨가될 수 있다.

일부 실시양태에서, 제제는 파우더, 화장품, 크림, 스틱, 에어로졸, 고약, 와이프 또는 붕대로서 제공되거나 또는 그에 배치될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 크림과 회합된다. 크림은 증점제를 포함하는 액체일 수 있으며, 일반적으로 피부에 균일하게 확산되는 것을 허용하는 점조도를 갖는다. 예시적인 크림에는 보습 로션, 얼굴 크림, 및 바디 로션이 포함된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 스틱과 회합된다. 스틱은 전형적으로 표면과 접촉하고 있을 때 스틱 내용물의 일부가 표면으로 이동하는 고체이다. 예시적인 스틱에는 탈취제 스틱, 립스틱, 스틱형 립밤, 및 선스크린 어플리케이터 스틱이 포함된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 에어로졸과 회합된다. 에어로졸은 전형적으로 기체, 예컨대 공기 중 미세 고체 입자 또는 미세 액체 비말의 콜로이드이다. 에어로졸은 암모니아 산화 박테리아 (및 임의적으로 담체)를 압력 하에 통에 넣은 다음, 내용물의 방출을 위해 밸브를 개방시킴으로써 생성될 수 있다. 용기는 암모니아 산화 박테리아 생존가능성에 적합성인 수준의 압력만을 발휘하도록 고안될 수 있다. 예를 들어, 높은 압력은 단시간 동안만 발휘될 수 있고/거나 압력은 생존가능성을 손상시키지 않을 정도로 충분히 낮을 수 있다. 에어로졸의 소비자 사용의 예에는 선스크린, 탈취제, 퍼퓸, 헤어스프레이 및 방충제가 포함된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 고약과 회합된다. 고약은 피부를 보호하거나 치유를 촉진시키기 위해 의도된, 액체 또는 크림-유사 점조도를 갖는 국소 적용 작용제일 수 있다. 고약의 예에는 화상 연고 및 피부 보습제가 포함된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 와이프와 조합되다. 와이프는 액체 또는 크림을 피부에 국소 적용하기에 적합한 가요성 물질일 수 있다. 와이프는 예를 들어 종이-기재 또는 천-기재일 수 있다. 예시적인 와이프에는 티슈 및 습식 와이프가 포함된다.

암모니아 산화 박테리아를 포함하는 조성물은 또한 1종 이상의 보습제, 탈취제, 향료, 착색제, 방충제, 클렌징제, 또는 UV-차단제를 포함할 수 있다.

예를 들어, 보습제는 피부 건조를 감소 또는 예방하는 작용제일 수 있다. 예시적인 보습제에는 습윤제 (예를 들어, 우레아, 글리세린, 알파 히드록시산 및 디메티콘) 및 연화제 (예를 들어, 라놀린, 광물성 오일 및 바셀린)가 포함된다. 보습제는 예를 들어 암모니아 산화 박테리아-함유 크림, 밤, 로션 또는 선스크린에 포함될 수 있다.

탈취제는 원치않는 냄새를 감소시키는 작용제일 수 있다. 탈취제는 냄새를 직접 중화시킴으로써, 땀을 예방함으로써 또는 냄새-발생 박테리아의 성장을 예방함으로써 작용할 수 있다. 예시적인 탈취제에는 알루미늄 이온 (예를 들어, 염화알루미늄 또는 알루미늄 클로로히드레이트), 시클로메티콘, 탈크, 베이킹 소다, 에센셜 오일, 광물 이온, 홉, 및 하마메리스가 포함된다. 탈취제는 전형적으로 스프레이 또는 스틱 방취제에 존재하고, 일부 비누 및 의류에서도 발견될 수 있다.

방충제는 곤충 및 다른 절지동물이 표면 상에 머무는 것을 방지하기 위해 표면 (예를 들어, 피부)에 적용될 수 있는 작용제일 수 있다. 방충제에는 DEET (N,N-디에틸-m-톨루아미드), p-메탄-3,8-디올 (PMD), 이카리딘, 네페탈락톤, 시트로넬라 오일, 님 오일, 늪도금양, 디메틸 카르베이트, 트리시클로데세닐 알릴 에테르, 및 IR3535 (3-[N-부틸-N-아세틸]-아미노프로피온산, 에틸 에스테르)가 포함된다.

클렌징제는 피부와 같은 표면으로부터 더러움 또는 원치않는 박테리아를 제거하는 작용제일 수 있다. 예시적인 클렌징제에는 막대 비누, 액체 비누 및 샴푸가 포함된다.

UV-차단제는 표면이 수용하는 자외선광의 양을 감소시키기 위해 표면에 적용될 수 있는 작용제일 수 있다. UV-차단제는 UV-A 및/또는 UV-B 선을 차단할 수 있다. UV 차단제는 UV를 흡수, 반사 또는 산란시킴으로써 기능할 수 있다. 예시적인 UV-차단제에는 흡수제, 예를 들어 호모살레이트, 옥티살레이트 (옥틸 살리실레이트로도 지칭됨), 옥시녹세이트 (옥틸 메톡시신나메이트 또는 OMC로도 지칭됨), 옥토크릴렌, 옥시벤존, 및 아보벤존, 및 반사기 (예를 들어, 이산화티타늄 및 산화아연)가 포함된다. UV-차단제는 전형적으로 선스크린에 존재하고, 피부 크림 및 일부 화장품에서도 발견될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 컨디셔너와 회합된다. 컨디셔너는 일반적으로 모발에 적용되어 그의 외관, 강도 또는 관리성을 개선시킬 수 있는 크림-유사 점조도를 갖는 물질을 지칭한다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 천과 회합된다. 천은 일반적으로 의류로 제조되기에 적합한, 예를 들어 착용자의 일상적인 움직임을 견디기에 충분한 물질 강도를 갖는 가요성 물질을 지칭한다. 천은 섬유, 직물 또는 니트일 수 있고, 이는 천연 발생 물질 또는 합성 물질로 제조될 수 있다. 예시적인 천 물질에는 면, 아마, 울, 라미, 실크, 데님, 가죽, 나일론, 폴리에스테르 및 스판덱스, 및 이들의 블렌드가 포함된다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 실과 회합된다. 실은 일반적으로 옷을 뜨거나 짜는데 적합한 길고 가는 방적된 가요성 물질을 지칭한다. 실은 예를 들어 울, 면, 폴리에스테르, 및 이들의 블렌드로 제조될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 쓰레드와 회합된다. 쓰레드는 일반적으로 바느질에 적합한 길고 가는 방적된 가요성 물질을 지칭한다. 쓰레드는 일반적으로 실보다 더 가는 직경을 갖는다. 쓰레드는 예를 들어 면, 폴리에스테르, 나일론, 실크, 및 이들의 블렌드로 제조될 수 있다.

의류, 예를 들어 신발, 신발 깔창, 파자마, 스니커즈, 벨트, 모자, 셔츠, 속옷, 운동복, 헬멧, 타월, 장갑, 양말, 붕대 등도 암모니아 산화 박테리아로 처리될 수 있다. 시트, 베개, 베개 주머니 및 담요를 비롯한 침구류 또한 암모니아 산화 박테리아로 처리될 수 있다. 일부 실시양태에서, 소정 기간 동안 씻을 수 없는 피부 영역 또한 암모니아 산화 박테리아와 접촉시킬 수 있다. 예를 들어, 치유 과정 동안 손상된 사지를 고정시키는 정형외과 캐스트에 둘러싸인 피부, 및 적절한 치유를 위해 건조하게 유지되어야 하는 손상부, 예컨대 꿰멘 창상부에 근접한 영역을 암모니아 산화 박테리아와 접촉시키는 것이 유리할 수 있다.

일부 측면에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아 또는 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 착용가능한 물품을 제공한다. 착용가능한 물품은 보행을 방해하지 않는 방식으로 사용자의 신체와 밀접하게 회합될 수 있는 가벼운 물품일 수 있다. 착용가능한 물품의 예에는 손목 시계, 손목 밴드, 헤어 밴드, 헤어 엘라스틱, 헤어 네트, 샤워 캡, 모자, 헤어 피스, 접착성 플라스틱 필름 및 패치, 접착성 마이크로니들 패치 및 어래이, 및 쥬얼리가 포함된다. 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 착용가능한 물품은 예를 들어 피부 장애의 치료 또는 예방, 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환 또는 상태의 치료 또는 예방, 체취의 치료 또는 예방, 대상체에게 일산화질소를 공급하는 치료, 또는 미생물 성장을 억제하는 치료 중 하나 이상을 제공하는 농도로 제공될 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 모발과 접촉하는 것으로 의도된 제품, 예를 들어 브러쉬, 빗, 샴푸, 컨디셔너, 헤어 밴드, 헤어 엘라스틱, 헤어 네트, 샤워 캡, 모자, 및 헤어 피스와 회합된다. 피부 표면과는 멀리 모발 상에 형성된 일산화질소는 모자, 스카프 또는 안면 마스크에 포획되어 흡입된 공기로 향하게 될 수 있다.

인간 대상체의 표면과 접촉하는 물품, 예컨대 기저귀는 암모니아 산화 박테리아와 회합될 수 있다. 기저귀는 실금 개체에 의해 생성된 소변 및 대변을 유지 및 함유하도록 고안된 것이기 때문에, 소변 및 대변 중의 우레아는 피부 및 대변 박테리아에 의해 가수분해되어 자극하는 유리 암모니아를 형성하여, 기저귀 발진을 초래할 수 있다. 우레아를 니트라이트 또는 니트레이트로 대사하는 박테리아, 예컨대 암모니아 산화 박테리아의 도입은 유리 암모니아의 방출을 피하게 할 수 있고, 유아 및 실금 성인 모두에 대해 건강한 피부를 유지하는데 도움이 될 수 있는 니트라이트 및 궁극적으로 NO를 방출할 수 있다. 기저귀에서 일산화질소의 방출은 또한 인간 대변에 존재하는 질환 유발 유기체에 대한 항미생물 효과를 가질 수 있다. 이 효과는 일회용 기저귀를 폐기물로서 폐기한 후에도 지속될 수 있고, 더러워진 일회용 기저귀와의 접촉을 통해 질환 전염의 발생을 감소시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 조성물을 포장한다. 포장은 제품을 소형화하거나 제품을 손상, 더러움 또는 분해로부터 보호하는 역할을 할 수 있다. 포장은 예를 들어 플라스틱, 종이, 판지 또는 목재를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 포장은 박테리아에 대해 불투과성이다. 일부 실시양태에서, 포장은 산소 및/또는 이산화탄소에 대해 투과성이다.

14. 암모니아 산화 박테리아를 이용하는 치료 방법

본 개시내용은 예를 들어 암모니아 산화 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제, 예를 들어 천연 제품 또는 강화된 천연 제품 (강화된 천연 제품은 암모니아 산화 박테리아, 예를 들어 외인성 암모니아 산화 박테리아로 강화된 것임), 또는 천연 제품 또는 강화된 천연 제품을 포함하는 조성물, 제제 또는 제형을 투여함으로써 암모니아 산화 박테리아를 사용하여 질환 및 상태를 치료하는 다양한 방법을 제공한다.

질환 및 상태를 치료하는데 사용될 수 있는 암모니아 산화 박테리아에는 본 출원에 기재된 모든 암모니아 산화 박테리아 조성물, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제, 천연 제품 또는 강화된 천연 제품, 또는 천연 제품 또는 강화된 천연 제품을 포함하는 조성물, 제제 또는 제형이 포함된다.

예를 들어, 본 개시내용은 상태 또는 질환의 치료 (예를 들어, 대상체의 피부 상에서 미생물 성장의 억제)를 위한 암모니아 산화 박테리아의 조성물의 용도를 제공한다. 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 사용하여 궤양 또는 궤양에서의 감염, 예를 들어 정맥 궤양, 예를 들어 다리 궤양, 예를 들어 정맥 다리 궤양, 예를 들어 당뇨병성 궤양, 예를 들어 당뇨병성 족부 궤양, 만성 창상, 좌창, 예를 들어 심상성 좌창, 주사비, 습진, 두드러기, 또는 건선을 치료할 수 있다.

본 개시내용의 암모니아 산화 박테리아는 피부 장애의 치료 또는 예방, 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환 또는 상태의 치료 또는 예방, 체취의 치료 또는 예방, 대상체로 일산화탄소 공급을 위한 치료, 또는 미생물 성장의 억제를 위한 치료를 위해 제공되거나 또는 그에 유용할 수 있다.

본 개시내용의 암모니아 산화 박테리아는 HIV 피부염, 궤양에서의 감염, 예를 들어 정맥 궤양, 예를 들어 다리 궤양, 예를 들어 정맥 다리 궤양, 예를 들어 당뇨병성 족부 궤양에서의 감염, 아토피성 피부염, 좌창, 예를 들어 심상성 좌창, 습진, 접촉성 피부염, 알러지 반응, 건선, 두드러기, 주사비, 피부 감염, 혈관 질환, 질 효모 감염, 박테리아성 질염, 성매개 질환, 심장 질환, 죽상 동맥경화증, 탈모증, 당뇨병에 대해 속발성인 또는 병상에서의 다리 궤양, 협심증, 특히 만성, 안정형 협심증, 허혈성 질환, 울혈성 심부전, 심근경색, 허혈 재관류 손상, 제엽염, 고혈압, 비대성 장기 변성, 레이노(Raynaud) 현상, 섬유증, 섬유성 장기 변성, 알러지, 자가면역 감작증, 말기 신장 질환, 비만, 발기부전, 폐렴, 원발성 면역결핍, 수포성 표피 박리증, 또는 암 중 적어도 하나의 치료를 위해 제공되거나 또는 그에 유용할 수 있다. 실시양태에서, 상태는 정맥 다리 궤양이다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 사용하여 대상체를 치료한다. "대상체"에는 동물, 포유류, 인간, 비-인간 동물, 가축 동물, 또는 반려 동물이 포함될 수 있다. 용어 "대상체"는 인간 및 비-인간 동물, 예를 들어 척추동물, 대동물, 및 영장류를 포함하는 것으로 의도된다. 특정 실시양태에서 대상체는 포유류 대상체이고, 특정 실시양태에서 대상체는 인간 대상체이다. 인간에 대한 적용이 명백히 예상되지만, 수의학적 적용, 예를 들어 비-인간 동물에 대한 적용 또한 본원에서 예상된다. 본 개시내용에서 용어 "비-인간 동물"에는 모든 척추동물, 예를 들어 비-포유류 (예컨대 조류, 예를 들어 닭; 양서류; 파충류) 및 포유류, 예컨대 비-인간 영장류, 가축으로 및 농업적으로 유용한 동물, 예를 들어 그 중에서도 양, 개, 고양이, 소, 돼지, 래트가 포함된다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 사용하여 다른 유기체의 성장을 억제한다. 예를 들어, 암모니아 산화 박테리아는 인간 피부의 장기간 콜로니화에 잘 적합화될 수 있고, 일부 실시양태에서 이는 피부 상에 바람직하지 않은 다른 박테리아와의 경쟁에서 우위에 있다. 바람직하지 않은 피부 박테리아에는 예를 들어 창상을 감염시키거나, 질환의 위험 또는 중증도를 증가시키거나 또는 냄새를 발생할 수 있는 것들이 포함된다. 바람직하지 않은 박테리아는 병원성 박테리아로 지칭될 수 있다. 특정한 바람직하지 않은 피부 박테리아, 예를 들어 잠재적 병원성 박테리아, 예를 들어 병원성 박테리아에는 스타필로코쿠스 아우레우스 (에스. 아우레우스(S. aureus)), 예를 들어 메티실린 내성 스타필로코쿠스 아우레우스, 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa) (피. 아에루기노사(P. aeruginosa)), 스트렙토코쿠스 피오게네스(Streptococcus pyogenes) (에스. 피오게네스), 아시네토박터 바우만니이(Acinetobacter baumannii) (에이. 바우만니이(A. baumannii)), 프로피오니박테리아(Propionibacteria), 및 스테노트로포모나스(Stenotrophomonas)가 포함된다. 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아는 예를 들어 희소한 영양분을 소모함으로써 또는 다른 유기체에 해로운 부산물을 생성함으로써, 예를 들어 바람직하지 않은 유기체의 성장에 도움이 되지 않는 수준으로 피부의 pH를 변화시킴으로써 다른 유기체와의 경쟁에서 우위에 있을 수 있다.

따라서, 본 개시내용은 그 중에서도 미생물 성장의 억제를 필요로 하는 인간에게 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 유효 용량을 국소 투여하는 것을 포함하는, 대상체의 피부 상에서 미생물 성장을 억제하는 방법을 제공한다. 유사하게, 본 개시내용은 대상체의 피부 상에서 미생물 성장을 억제하는데 사용하기 위한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 제공한다. 마찬가지로, 본 개시내용은 대상체의 피부 상에서 미생물 성장을 억제하기 위한 의약의 제조에서의 암모니아 산화 박테리아의 용도를 제공한다.

본 개시내용은 또한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 유효 용량을 대상체에게 근접하게 위치시키는 것을 포함하는, 대상체에게 일산화질소를 공급하는 방법을 제공한다. 유사하게, 본 개시내용은 대상체에게 일산화질소를 공급하는데 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 암모니아 산화 박테리아를 제공한다. 마찬가지로, 본 개시내용은 대상체에게 근접하게 위치시키는데 적합한 의약 또는 조성물의 제조에서의 암모니아 산화 박테리아의 용도를 제공한다.

본 개시내용은 또한 체취의 감소를 필요로 하는 대상체에게 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 유효 용량을 국소 투여하는 것을 포함하는, 체취를 감소시키는 방법을 제공한다. 유사하게, 본 개시내용은 대상체에서 체취의 감소를 위해 사용하기 위한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 제공한다. 마찬가지로, 본 개시내용은 체취의 감소를 위한 의약 또는 조성물의 제조에서의 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 용도를 제공한다.

본 개시내용은 또한 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에게 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 국소 투여하는 것을 포함하는, 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 유사하게, 본 개시내용은 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환의 치료에 사용하기 위한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 국소 제형을 제공한다. 마찬가지로, 본 개시내용은 낮은 니트라이트 수준과 관련된 질환의 치료를 위한 국소 의약의 제조에서의 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 용도를 제공한다.

본 개시내용은 또한 피부 장애 또는 피부 감염의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에게 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 국소 투여하는 것을 포함하는, 피부 장애 또는 피부 감염을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 유사하게, 본 개시내용은 대상체에서 피부 장애의 치료에 사용하기 위한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 제공한다. 마찬가지로, 본 개시내용은 피부 장애의 치료를 위한 의약의 제조에서의 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 용도를 제공한다. 실시양태에서, 피부 장애는 좌창, 예를 들어 심상성 좌창, 주사비, 습진, 건선 또는 두드러기이고, 피부 감염은 농가진이다.

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 사용하여 좌창, 예를 들어 심상성 좌창을 치료하고/거나 산성화 니트라이트 및 NO 생성을 통해 심상성 좌창과 관련된 프로피오니박테리움 좌창의 확산 및 증식을 제한 및/또는 억제하는 것이 제안된다.

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 사용하여 주사비를 치료하는 것이 NO 생성으로 인한 하향조절을 포함할 수 있음이 제안된다. 이는 인간 카텔리시딘 펩티드 LL-37이 그의 전구체 프로펩티드 hCAP18로부터 형성되는 것을 감소시킬 수 있는 카잘(Kazal)-유형 KLK5/KLK7 억제제(들)의 발현 때문일 수 있다.

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 본원에 기재된 치료적 유효 용량을 사용하여 습진 및/또는 아토피성 피부염을 치료하는 것이 NO 생성으로 인한 감염의 하향조절 및/또는 산성화 니트라이트 및 NO 생성을 통해 아토피 피부염에서 매우 높은 콜로니화 비율 및 피부 로드와 종종 관련이 있는 에스. 아우레우스 및 다른 피부 병원균의 확산 및 증식의 제한 및/또는 억제를 포함할 수 있음이 제안된다.

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 사용하여 건선을 치료하는 것이 NO 생성으로 인한 염증의 하향조절 및 인간 카텔리시딘 펩티드 LL-37 형성의 감소를 포함할 수 있음이 제안된다.

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 사용하여 건선을 치료하는 것이 NO 생성으로 인한 염증의 하향조절을 포함할 수 있음이 제안된다.

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 사용하여 농가진 또는 다른 피부 및 연조직 감염을 치료하는 것이 스타필로코쿠스 아우레우스 (에스. 아우레우스), 슈도모나스 아에루기노사 (피. 아에루기노사), 스트렙토코쿠스 피오게네스 (에스. 피오게네스), 아시네토박터 바우만니이 (에이. 바우만니이), 프로피오니박테리아, 및 스테노트로포모나스의 확산 및 증식의 제한 및/또는 억제를 포함할 수 있음이 제안된다.

본 개시내용은 또한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 치료적 유효 용량을 창상에 투여하는 것을 포함하는 창상 치유를 촉진시키는 방법을 제공한다. 유사하게, 본 개시내용은 창상의 치유에 사용하기 위한 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 제공한다. 마찬가지로, 본 개시내용은 창상의 치유를 위한 의약 또는 조성물의 제조에서의 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아의 용도를 제공한다.

본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 사용하여 치유 능력이 손상된 환자, 예를 들어 당뇨병 환자에서 창상 치유를 촉진시킬 수 있다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용은 질환 또는 장애, 예를 들어 피부 장애의 예방을 위해 본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 사용하는 방법이 제공된다. 특정 실시양태에서, 예방은 치료하지 않은 유사한 대상체에 비해 대상체에서 질환이 발생할 위험이 감소되는 것을 의미한다. 상기 위험이 0까지 감소될 필요는 없다.

일부 실시양태에서, 대상체의 피부 마이크로바이옴의 조성을 변화시키는 방법이 제공된다. 상기 방법은 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 제제를 피부 표면에 투여하는, 예를 들어 적용하는 것을 포함할 수 있다. 투여, 예를 들어 적용의 양 및 빈도는 피부 표면 상의 병원성 박테리아의 비율을 감소시키는데 충분하다. 대상체는 피부 표면 상에서 병원성 박테리아의 비율을 감소시키는 것이 필요한 대상체를 기준으로 선택될 수 있다.

감소된 목욕 빈도를 갖는 개체, 예컨대 우주 비행사, 잠수함 승무원, 군사 작전 중인 장병, 먼 위치에 있는 노동자, 난민, 병상에 있는 개체 및 여러 다른 개체는 피부 상에 암모니아 산화 박테리아를 유지시킴으로써 더 건강한 피부를 유지할 수 있다. 병상에 있는 개체와 관련하여, 일부 실시양태에서 암모니아 산화 박테리아는 불충분한 순환을 증가시킴으로써 욕창의 빈도 또는 중증도를 감소시킨다.

현대의 여러 퇴행성 질환이 NO 종의 결여에 의해 초래될 수 있고, 외부 피부 상의 암모니아 산화 박테리아가 확산에 의해 그들의 종을 공급할 수 있으며, 피부로 암모니아 산화 박테리아의 적용이 오래 지속되는 의학적 상태를 해결한다는 것이 이해된다. 특정 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아는 특히 음이온성 세정제가 외부 피부로부터 암모니아 산화 박테리아를 제거하는 현대의 목욕 방법을 상쇄시키기 위해 대상체에게 적용된다.

한 적합한 국소 적용 방법은 충분한 암모니아 산화 박테리아를 적용한 다음, 땀을 유도하도록 충분한 의류를 착용하는 것이다. 그러나, 여러 사람들은 그들의 현재 목욕 습관을 유지하면서 암모니아 산화 박테리아의 이점을 유도하기를 원할 것이며, 이러한 경우 박테리아의 배양물은 NO를 생성하기에 충분한 기질과 함께 적용될 수 있다. 이러한 목적을 위해 인간 땀의 무기 조성과 유사한 영양분 용액을 사용할 수 있다. 인간 땀과 유사한 배지에 적합화된 박테리아를 사용하면, 적용 시 적합화되는 시간이 최소화된다. 땀이 피부 표면 상에서 분비되면 증발하기 때문에, 높은 이온 강도를 갖는 배양 배지를 사용하는 것이 바람직하다. 인간 땀의 대략 2배인 농도가 적합하지만, 다른 조건 또한 고려된다. 이는 스프레이, 겔, 필름 형성 중합체 갤, 크림, 발포체, 또는 로션으로서 적용될 수 있다. 암모니아 산화 박테리아의 영양적 요구는 전형적으로 NH₃ 또는 우레아, O₂, CO₂ 및 무기물에 의해 충족된다. 일부 실시양태에서, 기질은 미량 무기물, 예컨대 철, 구리, 아연, 코발트, 몰리브데넘, 망가니즈, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 클로라이드, 포스페이트, 술페이트, 또는 이들의 임의의 조합물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 영양분 용액은 기질의 전달을 최적화하기 위해 pH 완충제 시스템을 함유할 것이다.

일부 실시양태에서, 본 개시내용은 암모니아 산화 박테리아를 포함하는 붕대를 창상에 적용함으로써 창상을 치료하는 방법을 제공한다. 또한, 이러한 붕대를 생성하는 방법이 제공된다. 붕대는 예를 들어 창상 근처의 손상되지 않은 피부에 붕대를 고정시키기 위한 접착성 부분 및 창상을 덮거나 씌우기 위한 연질의 가요성 부분을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 붕대는 암모니아 산화 박테리아 이외의 다른 유기체를 함유하지 않는다. 붕대를 창상에 적용하였을 때 산소 및 이산화탄소와 같은 기체가 암모니아 산화 박테리아에 도달하는 것을 허용하는 투과성 물질로 붕대를 제조할 수 있다. 특정 실시양태에서, 붕대는 암모니아 산화 박테리아를 위한 영양분, 예컨대 암모늄, 암모니아, 우레아, 또는 미량 무기물을 포함한다. 특정 실시양태에서, 붕대는 암모니아 산화 박테리아가 내성인 항생제를 포함한다. 항생제 내성은 하나 이상의 내인성 내성 유전자로부터 또는 하나 이상의 트랜스진으로부터 발생할 수 있다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 제제를 적용당 약 10⁸ - 10⁹ CFU, 10⁹ - 10¹⁰ CFU, 10¹⁰ - 10¹¹ CFU, 10¹¹-10¹² CFU, 10¹²-10¹³ CFU, 또는 10¹³-10¹⁴ CFU의 용량으로 투여한다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 약 10⁹-10¹⁰ CFU, 약 1 x 10⁹ - 5 x 10⁹, 1 x 10⁹ - 3 x 10⁹, 또는 1 x 10⁹ - 10 x 10⁹ CFU; 또는 약 10¹⁰-10¹¹ CFU, 예를 들어 약 1 x 10¹⁰ - 5 x 10¹⁰, 1 x 10¹⁰ - 3 x 10¹⁰, 또는 1 x 10¹⁰ - 2 x 10¹⁰ CFU; 또는 약 10¹¹-10¹² CFU, 예를 들어 약 1 x 10¹¹ - 5 x 10¹¹, 1 x 10¹¹ - 3 x 10¹¹, 또는 1 x 10¹¹ - 2 x 10¹¹ CFU; 또는 약 10¹²-10¹³ CFU, 예를 들어 약 1 x 10¹² - 5 x 10¹², 1 x 10¹² - 3 x 10¹², 또는 1 x 10¹² - 2 x 10¹² CFU; 또는 약 10¹³-10¹⁴ CFU, 예를 들어 약 1 x 10¹³ - 5 x 10¹³, 1 x 10¹³ - 3 x 10¹³, 또는 1 x 10¹³ - 2 x 10¹³ CFU의 용량으로 국소 투여한다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 약 1-2, 2-5, 5-10, 10-15, 12-18, 15-20, 20-25, 또는 25-50 ml/용량의 부피로 투여한다. 일부 실시양태에서, 용액은 약 10⁸-10⁹, 10⁹-10¹⁰, 또는 10¹⁰-10¹¹ CFU/ml의 농도를 갖는다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 15 ml 용량/일로 2회 투여하고, 여기서 각각의 용량은 10⁹ CFU/ml의 농도를 갖는다.

일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 하루에 1회, 2회, 3회 또는 4회 투여한다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 일주일에 1회, 2회, 3회, 4회, 5회 또는 6회 투여한다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 목욕 직후에 투여한다. 일부 실시양태에서, 암모니아 산화 박테리아를 수면 직전에 투여한다.

특정 측면에서, 본 개시내용은 암모니아 산화 박테리아 및 제2 요법을 포함하는 조합 요법을 제공한다. 예를 들어, 본 개시내용은 2가지 (또는 그보다 많은) 요법이 물리적으로 혼합된 물리적 혼합물을 제공한다. 다른 실시양태에서, 2가지 (또는 그보다 많은) 요법을 별도의 제형과 조합하여 투여한다. 제2 요법은 예를 들어 약제, 수술, 또는 관련 질환 또는 장애를 치료하는 임의의 다른 의학적 접근법일 수 있다. 하기 문단은 궤양, 예를 들어 정맥 궤양, 예를 들어 다리 궤양, 예를 들어 정맥 다리 궤양, 예를 들어 당뇨병성 궤양, 만성 창상, 좌창, 예를 들어 심상성 좌창, 주사비, 습진, 및 건선을 치료할 수 있는 조합 요법을 기재한다. 조합 요법은 본원에 기재된 용기 또는 전달 디바이스에 포함될 수 있거나, 또는 별도의 전달 디바이스를 사용하여 전달될 수 있다. 조합 요법은 용기 또는 전달 디바이스의 제1 챔버, 제2 챔버 또는 제3 챔버에 포함될 수 있다. 조합 요법은 정맥 다리 궤양을 치료할 수 있다.

예를 들어, 궤양, 예를 들어 정맥 궤양, 예를 들어 다리 궤양, 예를 들어 정맥 다리 궤양, 예를 들어 당뇨병성 궤양을 치료할 수 있는 조합 요법에서, 제2 요법은 예를 들어 창상 드레싱 (예를 들어, 흡수성 충전제, 히드로겔 드레싱, 또는 히드로콜로이드), 안지오텐신, 안지오텐신 유사체, 혈소판-풍부 피브린 요법, 고압 산소 요법, 음압 창상 요법, 변연 절제, 배농, 동맥 혈관 재형성, 고압 산소 요법, 저수준 레이저 요법, 및 비복근 후전을 포함할 수 있다. 조합 요법은 상기 언급된 치료 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

만성 창상을 치료할 수 있는 조합 요법에서, 제2 요법은 예를 들어 항생제 (예를 들어, 국소 또는 전신, 및 살균성 또는 정균성), 예컨대 페니실린, 세팔로스포린, 폴리믹신, 리파마이신, 리피아르마이신, 퀴놀론, 술폰아미드, 마크롤리드, 린코사미드, 테트라시클린, 시클릭 리포펩티드, 글리실시클린, 옥사졸리디논, 및 리피아르마이신; 안지오텐신, 안지오텐신 유사체; 변연 절제; 배농; 창상 관주; 음압 창상 요법; 열 적용; 동맥 혈관 재형성; 고압 산소 요법; 항산화제, 예컨대 아스코르브산, 글루타티온, 리포산, 카로텐, α-토코페롤, 또는 유비퀴놀; 저수준 레이저 요법; 비복근 후전; 성장 인자, 예컨대 혈관 내피 성장 인자, 인슐린-유사 성장 인자 1-2, 혈소판 유래된 성장 인자, 형질전환 성장 인자-β, 또는 표피 성장 인자; 자가 혈소판, 예컨대 1종 이상의 성장 인자, 예컨대 혈관 내피 성장 인자, 인슐린-유사 성장 인자 1-2, 혈소판 유래된 성장 인자, 형질전환 성장 인자-β, 또는 표피 성장 인자를 분비하는 것의 적용; 배양된 각질 세포의 이식; 동종 이식편; 콜라겐, 예를 들어 콜라겐을 포함하는 드레싱; 또는 프로테아제 억제제, 예컨대 SLPI를 포함할 수 있다. 조합 요법은 상기 언급된 치료 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

좌창, 예를 들어 심상성 좌창을 치료할 수 있는 조합 요법에서, 제2 요법은 예를 들어 투약 (예를 들어, 전신 또는 국소), 예컨대 벤조일 퍼옥시드, 항생제 (예컨대, 에리트로마이신, 클린다마이신, 또는 테트라시클린), 살리실산, 호르몬 (예를 들어, 프로게스틴, 예컨대 데소게스트렐, 노르게스티메이트 또는 드로스피레논 포함), 레티노이드, 예컨대 트레티노인, 아다팔렌, 타자로텐, 또는 이소트레티노인을 포함할 수 있다. 제2 요법은 또한 여드름 제거, 코르티코스테로이드 주사, 또는 외과적 절개와 같은 시술일 수 있다. 조합 요법은 상기 언급된 치료 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

주사비를 치료할 수 있는 조합 요법에서, 제2 요법은 예를 들어 항생제, 예를 들어 경구 테트라시클린 항생제, 예컨대 테트라시클린, 독시시클린, 또는 미노시클린, 또는 국소 항생제, 예컨대 메트로니다졸; 아젤라산; 알파-히드록시산; 처방될 수 있는 이소트레티노인; 백단유; 클로니딘; 베타-차단제, 예컨대 나돌롤 및 프로프라놀롤; 항히스타민 (예컨대, 로라타딘); 미르타자핀; 메틸술포닐메탄 또는 실리마린, 임의적으로 서로 조합하여; 레이저, 예컨대 피부과적 혈관 레이저 또는 CO₂ 레이저; 또는 광선 요법, 예컨대 강한 펄스 광선, 저수준 광선 요법 또는 광회춘술을 포함할 수 있다. 조합 요법은 상기 언급된 치료 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

습진을 치료할 수 있는 조합 요법에서, 제2 요법은 예를 들어 코르티코스테로이드, 예컨대 히드로코르티손 또는 클로베타솔 프로피오네이트, 면역억제제 (국소 또는 전신), 예컨대 피메크롤리무스, 타크롤리무스, 시클로스포린, 아자티오프린 또는 메토트렉세이트, 또는 자외선과 같은 광선 요법을 포함할 수 있다. 조합 요법은 상기 언급된 치료 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

건선을 치료할 수 있는 조합 요법에서, 제2 요법은 예를 들어 코르티코스테로이드, 예컨대 데속시메타손; 레티노이드; 콜 타르; 비타민 D 또는 그의 유사체, 예컨대 파리칼시톨 또는 칼시포트리올; 보습제 및 연화제, 예컨대 광물성 오일, 바셀린, 칼시포트리올, 데쿠발, 또는 코코넛 오일; 디트라놀; 또는 플루오시노니드를 포함할 수 있다. 조합 요법은 상기 언급된 치료 중 1종 이상을 포함할 수 있다.

15. 암모니아 산화 박테리아 치료를 개선하기 위한 실험 모델

본원에 기재된 암모니아 산화 박테리아를 (임의적으로 또 다른 요법과 함께) 포함하는 치료는 수많은 모델 시스템을 이용하여 개선될 수 있다. 이들 모델 시스템은 적합한 투여 용량 및 시기를 결정하기 위해 사용될 수 있다.

예를 들어, 만성 창상 및 궤양, 예를 들어 정맥 궤양, 예를 들어 당뇨병성 궤양, 또는 본원에 개시된 다른 궤양과 관련하여, 마우스 피부 자상 모델을 이용할 수 있다. 이들 장애를 위한 다른 모델에는 기니 피그 모델에서 조절된 피부 허혈, 토끼 귀 궤양 모델, 창상으로 칼슘의 적용, 또는 독소루비신의 국소 적용이 포함된다.

좌창, 예를 들어 심상성 좌창과 관련하여, (예를 들어) 멕시칸 헤어리스 도그 모델, 라이노 마우스 모델, 또는 토끼 귀 검정을 이용할 수 있다. 주사비와 관련하여, (예를 들어) LL-37을 마우스 피부 또는 시리아 햄스터 모델에 피내 주사하는 것을 이용할 수 있다. 습진과 관련하여, (예를 들어) 집먼지 진드기의 조 추출물 적용, 민감성 기니 피그의 귀에 디니트로클로로벤젠의 적용, 또는 NC/Nga 마우스를 이용할 수 있다. 건선과 관련하여, (예를 들어) 관련된 및 관련없는 건선 피부가 면역결핍 마우스로 이식된 이종이식 모델, SCID 마우스의 피부에 인터류킨 15에 대한 항체의 적용, 및 샤르핀^cpdm/샤르핀^cpdm 마우스 모델을 이용할 수 있다.

16. 치료적 이익의 메카니즘

이론에 구애되기를 바라진 않지만, 하기 메카니즘 중 하나 이상이 국제 출원 WO/2005/030147 (이는 전문이 본원에 참조로 포함됨)에서 확인되는 암모니아 산화 박테리아의 유익한 효과에 기여하는 것으로 믿어진다.

이들 박테리아의 유익한 측면을 이해하기 위해, 혈관신생을 이해하는 것이 도움이 된다. 외부 공기 중의 수백 마이크로미터 이내의 것을 제외한 모든 신체 세포는 혈액 공급으로부터 모든 대사 산소를 수용한다. 산소는 폐에서 혈액에 의해 흡수되고, 산소화된 헤모글로빈으로서 적혈구에 의해 말초 조직으로 운반되고, 여기서 이산화탄소로 교체되어, 폐로 다시 운반되어 배출된다. 산소는 그를 소모하는 세포에서 미토콘드리아에 도달할 때까지 적혈구로부터 혈장을 통해, 내피를 통해, 다양한 조직을 통해 확산되어야 한다. 인체는 약 5 리터의 혈액을 함유하며, 따라서 순환계의 부피는 신체의 부피에 비해 작다. 산소는 능동적으로 수송되지 않는다. 산소는 공기로부터 적혈구로, 적혈구로부터 세포로, 세포로부터 그를 소모하는 시토크롬 옥시다제로 농도 구배에 따라 수동적으로 확산된다. 소모 부위에서 산소의 농도는 신체 중에서 가장 낮고, O₂ 플럭스는 확산 저항성 및 농도 구배에 의해 결정된다. 모든 말초 조직으로 충분한 산소 공급을 달성하려면 모세관 크기 및 위치의 정교한 조절이 필요하다. 모세관들 사이의 간격이 커지면, 동일한 플럭스의 산소를 달성하기 위해 더 큰 농도 차이 및 따라서 시토크롬 옥시다제에서 더 낮은 O₂ 농도가 필요할 것이다. 모세관들 사이에 세포가 더 많으면, O₂ 수요가 더 커질 것이다. 모세관들 사이의 간격이 작아지면, 장기의 대사 기능을 수행하는 세포에 대해 이용가능한 공간이 적어질 것이다.

특정 측면에서, 암모니아 산화 박테리아로부터의 NO는 외부 피부에 의해 쉽게 흡수되고, 외부 피부는 헤모글로빈을 함유하지 않기 때문에 S-니트로소티올로 전환되는 것으로 이해된다. M. Stucker 등은 "The cutaneous uptake of atmospheric oxygen contributes significantly to the oxygen supply of human dermis and epidermis" (Journal of Physiology (2002), 538.3, pp. 985-994.)에서 외부 피부가 그의 모든 산소를 외부 공기로부터 수용한다는 것을 밝혔다. 이는 외부 피부는 본질적으로 적혈구를 함유하지 않음을 알 수 있기 때문에 매우 명백하다. 이들 층을 통해 혈장이 순환하는데, 이들이 살아 있으며 산소가 아닌 다른 영양분을 필요로 하기 때문이다. 형성된 S-니트로소티올은 안정하고, 신체를 통해 확산될 수 있으며, 진정한 NO의 부피 공급원 및 단백질 티올을 트랜스니트로소화하기 위한 NO 공급원이 된다.

일부 측면에서, 모세관 희박화는 NO의 불충분한 수준의 첫번째 지표 중 하나일 수 있음을 이해해야 한다. F. T. Tarek 등은 부족한 모세관 또는 모세관 희박화가 본태성 고혈압을 가진 사람에게서 흔히 확인됨을 밝혀냈다. (Structural Skin Capillary Rarefaction in Essential Hypertension. Hypertension. 1999;33:998-1001).

매우 많은 상태는 점점 부족해지는 모세관 밀도와 관련이 있다. 그 중 하나가 고혈압이며, 연구자들은 부족한 모세관이 본태성 고혈압을 가진 소아에서도, 당뇨병 환자에서도 확인되었음을 보고하였다. 당뇨병의 유의한 합병증이 고혈압, 당뇨병성 신장병, 당뇨병성 망막증, 및 당뇨병성 신경증이다. R. Candido 등은 마지막 두 가지 상태가 관찰된 증상 이전에 발병 부위로 혈류의 감소를 특징으로 함을 발견하였다. (Haemodynamics in microvascular complications in type 1 diabetes. Diabetes Metab Res Rev 2002; 18: 286-304.) 감소된 모세관 밀도는 비만과 관련이 있고, A Philip et al. in "Effect of Weight Loss on Muscle Fiber Type, Fiber Size, Capillarity, and Succinate Dehydrogenase Activity in Humans. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism Vol. 84, No. 11 4185-4190, 1999에서 밝혀진 바와 같이 단순한 체중 손실은 모세관 밀도를 증가시킨다.

연구자들은 원발성 레이노 현상 (PRP)에서 손톱 주름 모세관이 정상 대조군에 비해 (약간) 더 부족하고, 전신 경화증 (SSc)으로 진행된 환자에 비해 더 풍부하다는 것을 밝혀냈다. M. Bukhari, Increased Nailfold Capillary Dimensions In Primary Raynaud's Phenomenon And Systemic Sclerosis. British Journal of Rheumatology, Vol. 24 No 35: 1127-1131, 1996. 그들은 모세관 밀도가 35 루프/mm² (정상 대조군)에서 33 (PRP)으로, 17 (SSc)로 감소하였음을 발견하였다. 모세관 가지들 사이의 평균 거리는 대조군, PRP 및 SSc의 경우 각각 18μ, 18μ 및 30μ이었다.

특정 측면에서, 신체가 정상적으로 "저산소"를 감지하기 위해 사용하는 메카니즘은 모세관 밀도를 조절하는 신체 시스템에 영향을 미칠 수 있음을 이해해야 한다. 본 개시내용의 이 측면에 따라, "저산소"의 유의한 성분은 O2 수준의 감소에 의해서가 아니라 오히려 NO 수준의 증가에 의해 감지된다. 기저 NO 수준의 저하는 이러한 "저산소" 감지를 방해하고, 따라서 "저산소"를 통해 조절된 여러 신체 기능에 영향을 미친다. 예를 들어, 빈혈은 "충분하지 않은 헤모글로빈"으로 흔히 정의되고, 충분하지 않은 헤모글로빈의 한 결과는 "저산소"이며, 이는 "충분하지 않은 산소"로 정의된다. 일부 측면에 따라, 이들 공통된 정의는 두 상태의 일산화질소 매개된 측면을 설명하지 못한다.

휴식 시에는, 급성 정상혈량성 빈혈을 잘 견딜 수 있다. 적혈구 용적률에서 2/3 감소는 정맥 환류 PvO2에 최소한의 영향을 미치고, 이는 전신에 걸쳐 O₂ 분압 또는 전달의 감소가 아님을 나타낸다. Weiskopf et al. Human cardiovascular and metabolic response to acute, severe isovolemic anemia. JAMA 1998, vol 279, No. 3, 217-221. 50% 감소 (140에서 70g Hb/L로)에서, 평균 PvO2 (32명의 대상체에 대해)는 약 77%에서 약 74%로 감소하였다 (포화율). 혈중 O₂ 용량의 감소는 심박수가 63에서 85 bpm로 증가하면서 혈관 확장 및 심계항진에 의해 보상된다. 상기 보상이 효과적임을 쉽게 알 수 있지만, 메카니즘은 그렇지 않다. 전형적인 설명은 "저산소" 센서가 "저산소"를 검출하고 혈관 확장 및 심계항진으로 보상한다는 것이다. 그러나, "저산소"가 검출되지 않았다. 혈중 락테이트 (혐기성 호흡에 대한 마커)가 0.77에서 0.62 mM/L로 약간 감소하였고, 이는 혐기성 호흡이 적었고, "저산소"가 덜 하였음을 나타낸다. 정맥 환류 PvO2에서 3% 감소는 동일한 수준의 "저산소"이며, 이는 고도를 300 미터 상승시킴으로써 얻어지는 것과 같다 (전형적으로 심계항진을 일으키지 않음). 정맥 환류에서 O₂ 농도가 동일하게 유지되고, O₂ 소모가 동일하게 유지되면, 신체에서 O₂ 농도가 감소하는 곳이 없다. 정상혈량성 빈혈 동안의 보상은 O₂ 감지 때문에 일어나지 않을 수 있다.

따라서, 급성 정상혈량성 빈혈에서 관찰되는 혈관 확장은 혈관벽에서 증가된 NO 농도로 인한 것일 수 있다. NO는 전단 스트레스 및 다른 인자에 반응하여 혈관의 확장을 매개한다. NO 대사산물 수준에서 변화가 관찰되지 않았고, 이는 NO 생성률이 변하지 않고 동일한 파괴율로 지속되었기 때문이다. metHb가 Hb와 마찬가지로 NO에 결합하기 때문에, metHb 치환에 의한 "저산소" 보상이 관찰되지 않음이 이해될 수 있으며, 따라서 Hb를 제거하면서 metHb를 치환시키면 NO 농도가 증가하지 않는다.

일산화질소는 여러 대사 경로에서 소정의 역할을 한다. 기저 수준의 NO가 긴장 억제 반응을 나타내고, 이 기저 수준의 감소에 의해 이들 경로가 탈억제된다고 제안되었다. Zanzinger 등은 NO가 기저 교감신경 긴강을 억제하고 흥분선 반사를 약화시킨다고 보고하였다. (Inhibition of basal and reflex-mediated sympathetic activity in the RVLM by nitric oxide. Am. J. Physiol. 268 (Regulatory Integrative Comp. Physiol. 37): R958-R962, 1995.)

일부 측면에서, NO의 부피 공급원의 한 성분이 암모니아 산화 박테리아에 의해 외부 피부 상에서 생성된 NO로부터 적혈구 무함유 피부에서 생성된 저분자량 S-니트로소티올인 것으로 이해된다. 이들 저분자량 S-니트로소티올은 장기간 동안 안정하고, 혈장에서 자유롭게 확산 및 순환될 수 있다. 다양한 효소는 효소 부위에서 NO를 유리시키는 다양한 S-니트로소티올로부터 NO를 분할할 수 있다. 정상적인 생리학에서 혼란을 일으키는 것은 피부 상에서 AOB로부터 NO의 이러한 부피 공급원의 감소이다. 모세관으로부터 멀리서 NO를 생성하기 위해 S-니트로소티올을 사용하는 신체의 이점은 O₂가 S-니트로소티올로부터 NO의 생성을 필요로 하지 않는다는 것이다. 일산화질소 신타제 (NOS)로부터 NO의 생성은 O₂를 필요로 한다. S-니트로소티올의 충분한 배경을 이용하면, 심지어 무산소 영역에서도 NO가 생성될 수 있다. 또 다른 분자, 예컨대 시스테인 잔기의 티올 또는 헴의 철에 부착할 때에만 NO가 효과를 발휘하기 때문에, 유리 NO가 요구되지 않으며, 따라서 S-니트로소티올 및 트랜스니트로소화 효소가 존재하는 한 심지어 유리 NO의 부재 하에서도 NO의 효과는 트랜스니트로소화 반응에 의해 매개될 수 있다.

Frank 등은 정상 창상 치유에 동반되는 혈관신생이 부분적으로 증가된 일산화질소에 의해 유도된 상승된 VEGF에 의해 생성된다는 것을 밝혀냈다. (Nitric oxide triggers enhanced induction of vascular endothelial growth factor expression in cultured keratinocytes (HaCaT) and during cutaneous wound repair. FASEB J. 13, 2002-2014 (1999).)

NO는 암의 진행에서 소정을 역할을 하며, 이는 본원에 기재된 박테리아가 암 치료 및 예방 방법에 사용될 수 있음을 나타낸다. 특정한 측면에 따라, 세포가 DNA 복제에 있어서 오차의 위험이 큰 경우에, 저산소 동안에 NO의 존재는 저산소 스트레스 하에 있는 동안 세포가 분열하는 것을 방지하는 것으로 이해된다. 관련된 한 세포 기능은 세포 주기의 조절이다. 이는 세포가 DNA를 복제하고 이를 이중 염색체로 조립하고 분리하는 방법과 시기를 조절하는 조절 프로그램이다. 세포 주기의 조절은 매우 복잡하고, 완전히 이해되지 않는다. 그러나, 주기를 정지시킬 수 있고 상태가 개선될 때까지 분열을 멈추는 여러 시점이 세포 주기의 경로를 따라 존재한다고 공지되어 있다. p53 종양 억제 단백질은 세포 주기의 조절에서 중요한 단백질이며, 이는 DNA 손상을 비롯한 다양한 세포 스트레스 신호로부터 세포 정지 및 아폽토시스 둘 다를 개시하는 역할을 하고, p53은 Ashcroft et al. in "Stress Signals Utilize Multiple Pathways To Stabilize p53." (Molecular And Cellular Biology, May 2000, p. 3224-3233)에 의해 보고된 바와 같이 인간 암의 절반 이상에서 돌연변이된다. 저산소는 p53의 축적을 개시하고, 저산소가 세포 주기를 조절하는데 중요한 반면에, 저산소 단독은 p53 mRNA 이펙터 단백질의 하류 발현을 유도하는데 실패하고, 따라서 세포 주기를 정지시키는데 실패한다. Goda 등은 세포 정지의 저산소 유도가 저산소-유도 인자-1 (HIF-1α)을 필요로 한다고 보고하였다. (Hypoxia-Inducible Factor 1α Is Essential for Cell Cycle Arrest during Hypoxia. Molecular And Cellular Biology, Jan. 2003, p. 359-369.) Britta 등은 NO가 HIF-1α에 대한 주요 자극 중 하나임을 보고하였다. (Accumulation of HIF-1a under the influence of nitric oxide. Blood, 15 February 2001, Volume 97, Number 4.) 대조적으로, NO는 전사 활성 p53의 축적을 초래하고, 세포 주기의 정지를 초래하고, 아폽토시스를 초래한다. Wang et al., P53 Activation By Nitric Oxide Involves Down-Regulation Of Mdm2. THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 277, No. 18, Issue Of May 3, Pp. 15697-15702, 2002.

본 개시내용의 특정한 측면에서, 저산소 사멸을 초래하는 모세관 희박화를 방지함으로써 세포의 괴사성 사멸을 방지하면 자가면역 장애를 예방할 수 있는 것으로 이해된다. 세포를 만성 저산소에 노출시키면, 반응성 산소 종 (ROS)의 생성이 증가되고, 세포 대사 기구에 대한, 궁극적으로 세포의 DNA에 대한 손상이 증가된다. 감소된 대사 용량은 ROS로 인한 및 외인성 발암물질 노출로 인한 손상의 복구 능력을 감소시킬 것이다. 시간에 걸쳐 손상이 축적되고, 하기 세 가지 사건의 기회가 증가한다: 세포에서 암-예방 유전자가 결실되어 세포가 암성이 되거나, 세포가 괴사를 통해 사멸되거나, 또는 세포가 아폽토시스를 통해 사멸될 것이다. 세포가 괴사 또는 아폽토시스를 통해 사멸되면, 세포 파편이 그 부위에서 제거되어야 한다. 사멸된 세포는 수지상 세포 및 대식세포를 비롯한 면역 세포에 의해 식균된다. 이들 세포가 신체를 식균할 때, 이는 다양한 단백질 분해 효소에 의해 항원 단편으로 소화된 다음, 이들 항원이 주요 조직적합성 복합체 (MHC1, MHC2)에 부착되고, 항원-MHC 복합체가 T 세포와 상호작용하여 다양한 방식으로 T 세포를 활성화시키는 세포 표면으로 이동한다. 임의의 세포 손상은 다양한 방식으로 면역계를 자극하는 아주반트를 방출한다. 일반적으로, 괴사를 겪는 세포는 아폽토시스를 겪는 세포에 비해 더 큰 면역 반응을 자극한다. 따라서, 사멸된 및 사멸중인 세포로 면역 세포의 만성 노출은 자가면역 장애를 초래할 가능성이 있다.

특정 측면에서, 낮은 기저 NO가 섬유성 비대증을 초래하는 것으로 이해된다. 사멸된 세포가 제거되면, 새로운 세포가 그 자리를 용이하게 차지하지 못하는데, 그를 지원할 O₂가 충분하지 않기 때문이다. 임의의 이러한 새로운 세포는 동일한 운명을 겪을 것이다. 그 공간은 빈 채로 유지될 수 있고, 이 경우 장기가 수축하고, 모세관이 서로 더 가까워지고, 이제 새로운 세포에는 방금 손실된 세포에 의해 이전에 생성된 VEGF가 고갈되어, 모세관이 제거되고, 저산소 대역이 재형성된다. 이는 발병 조직의 전반적인 수축을 일으킬 수 있다. 섬유증을 지원하는 조직에서, 비교적 비활성인 콜라겐 섬유가 공간을 채울 수 있다. 해당 특정 기관에 대한 신체의 대사적 요구가 감소되지 않기 때문에, 장기는 더 크게, 그러나 이제 유의한 섬유질 함량으로 성장하도록 시도할 수 있다. 이는 예컨대 심장 및 간의 섬유성 비대증을 일으킬 수 있다. 신경 및 혈관의 삼차원 연결이 중요하기 때문에 뇌와 같은 일부 장기는 더 크거나 더 작아질 수 없고, 비대칭적으로 수축하는 뇌에 대해 연속해서 동시에 맵핑될 수 없다. 공간은 무언가로 충전되어야 하고, β-아밀로이드는 (다소 비활성이 아닌) 공간 충전제일 수 있다. 신피막 때문에 신장은 더 커질 수 없으며, 따라서 살아있는 세포의 수가 적어지고, 이들은 섬유성 조직으로 대체된다. 사멸된 세포가 제거되면, 조직이 수축하고, NO/O₂ 비가 다시 감소하고, 모세관이 다시 부족해지기 시작한다. 이는 레이노 현상으로 시작하여 모세관 희박화가 관찰되는 전신 경화증 및 원발성 쇼그렌 증후군으로 끝나는, 말기 신장 질환, 울혈성 심부전/심장 비대증, 원발성 담즙 간경화, 알츠하이머병, 죽상 동맥경화증, 염증성 장 질환, 비후성 반흔 형성, 및 다중 결합 조직 질환의 악순환을 일으킬 수 있다. Ferrini 등은 L-NAME을 이용하여 NOS의 만성 억제를 통해 기저 NO 수준을 감소시키면, 심장 및 신장의 전반적인 섬유증이 초래된다는 것을 밝혀냈다. (Antifibrotic Role of Inducible Nitric Oxide Synthase. Nitric Oxide: Biology and Chemistry Vol. 6, No. 3, pp. 283-294 (2002).) 낮은 기저 NO는 섬유성 비대증을 일으킬 수 있다.

특정 측면에서, 모세관 희박화가 대상체의 식욕을 조절하는 능력에 영향을 미치는 것으로 이해된다. 모세관 희박화는 고령의 인간 및 동물의 뇌에서 관찰된다. 모세관 희박화는 인슐린 유사 성장 인자-1을 비롯한 성장 인자의 순환의 감소와 관련이 있다. 성인의 뇌에서의 신경발생은 혈관신생과 공동으로 작용한다. 뇌가 여러 항상성 기능을 조절하기 때문에, 뇌의 요소들을 조절하기 위해 모세관들 사이의 증가된 확산 길이는 이들 종의 부적절한 혈중 농도로서 "해석"될 수 있다. 뇌에서 글루코스의 플럭스는 정상적인 대사 요구와 매우 유사하고, 여기서 글루코스 플럭스는 글루코스 소모에 비해 단지 50 내지 75% 더 높고, 혈액 뇌 장벽을 가로지르는 글루코스 수송체는 포화가능하고, 입체특이적이고, 에너지 또는 이온 구배와 무관하다. 대부분의 식욕 조절은 뇌를 통해 매개되고, 모세관 희박화는 적절한 혈중 농도의 "영양분" (또는 "영양분"에 비례하는 마커 화합물)을 불충분한 것으로 해석할 수 있다. 이는 비만의 한 원인일 수 있다.

특정 측면에 따라, 모세관 희박화는 비-인슐린 의존성 당뇨병의 원인일 수 있다. 비-인슐린 의존성 당뇨병 (NIDDM)은 대사 증후군 또는 제2형 당뇨병으로도 공지되어 있으며, 인슐린 내성을 특징으로 한다. 인슐린에 대한 신체의 민감성이 감소되고, 인슐린 수준이 증가한다. NIDDM 환자는 높은 혈중 글루코스, 높은 혈중 트리글리세리드를 갖고, 전형적으로 비만이고, 고혈압이며, 전형적으로 상당한 내장 지방을 갖는다.

NIDDM는 모세관 희박화가 원인일 수 있는 다른 증상을 동반한다. NIDDM가 있는 남성 및 NIDDM가 없는 남성, 비만인 남성 (BMI 29) 및 마른 남성 (BMI 24) (각각 10명)인 40명의 남성에 대한 연구에서, Konrad 등은 휴식 시 혈중 락테이트 수준이 NIDDM가 없는 마른 남성에서 1.78, NIDDM가 없는 비만인 남성에서 2.26, NIDDM가 있는 마른 남성에서 2.42, 및 NIDDM가 있는 비만인 남성에서 2.76 (mM/L)임을 보고하였다. (A-Lipoic acid treatment decreases serum lactate and pyruvate concentrations and improves glucose effectiveness in lean and obese patients with type 2 diabetes. Diabetes Care 22:280-287, 1999.) 락테이트는 혐기성 해당작용의 척도이다. 산화적 인산화를 통해 ATP를 생성하는데 O₂가 불충분한 경우, 세포는 혐기성 해당작용을 통해 ATP를 생성할 수 있다. 혐기성 해당작용의 한 생성물이 락테이트이며, 이는 세포로부터 배출되어야 하는데, 그렇지 않으면 pH가 저하되고 기능이 손상된다. 혈중 락테이트는 흔히 운동 연구에서 측정되는데, 여기서 증가는 최대 산화성 작업을 수행할 수 있는 작업량을 나타낸다. 휴식 시 높은 락테이트 수준은 휴식 시 증가된 혐기성 해당작용을 나타내며, 이는 모세관 희박화와 일치한다.

원발성 담즙 간경화는 레이노 현상, 소양증, 건조 증후군, 골다공증, 문맥 고혈압, 신경증 및 췌장 부전증과 관련이 있으며, 간 이상은 류마티스성 질환과 관련이 있다. 상승된 간 효소는 간 염증의 증상이며, 상승된 간 효소는 "무증상" 원발성 담즙 간경화의 초기 증상으로서 관찰된다. 따라서, 본원에 기재된 박테리아는 간 염증을 치료하기 위해 사용될 수 있다.

Torre 등은 알츠하이머병 (AD)이 저관류에 이어 신경 퇴행을 갖는 미세혈관 장애이며, 이는 부분적으로 불충분한 일산화질소 때문임을 보고하였다. (Review: Evidence that Alzheimer's disease is a microvascular disorder: the role of constitutive nitric oxide, Brain Research Reviews 34 (2000) 119-136.) 따라서, 본원에 기재된 박테리아를 이용하여 AD를 치료할 수 있다.

고혈압과 관련된 건강상 불리한 효과는 또한 낮은 기저 NO의 결과일 수 있다. 혈관 확장에 대한 감소된 반응은 또한 낮은 기저 NO와 일치한다. NO는 공급원으로부터 신호전달 효과를 갖는 센서 부위로 확산되는 확산성 분자이다. 낮은 NO 수준에서, 모든 NO 공급원은 더 많은 NO를 생성하여 특정한 거리에서 특정한 강도를 갖는 동등한 NO 신호를 생성해야 한다. NO는 삼차원적으로 확산되고, 해당 확산 범위 내에서의 전체 부피는 센서 위치에서 적절한 신호를 제공하는 수준으로 증가되어야 한다. 이는 공급원에서 및 공급원과 센서 사이에서 더 높은 NO 수준을 초래할 수 있다. 이어서, 공급원 근처에서 상승된 NO의 불리한 국부적 효과는 매우 낮은 NO 배경에서 발생할 수 있다. 이 시나리오가 실제로 발생한다는 일부 증거가 있다. 래트 췌도에서, Henningsson 등은 L-NAME에 의한 NOS의 억제가 iNOS의 유도를 통해 전체 NO 생성을 증가시켰음을 보고하였다. (Chronic blockade of NO synthase paradoxically increases islet NO production and modulates islet hormone release. Am J Physiol Endocrinol Metab 279: E95-E107, 2000.) NOS 활성을 증가시킴으로써 NO를 증가시키는 것은 어느 정도의 한계까지만 작동할 수 있다. NOS가 활성화되었지만, 충분한 테트라히드로바이오프테린 (BH4) 또는 L-아르기닌으로 보충되지 않으면, 이는 "탈커플링"되기 시작하여, NO 대신에 수퍼옥시드 (O2-)를 생성한다. 이어서, 이 O₂ ^-는 NO를 파괴할 수 있다. BH4 또는 L-아르기닌의 공급을 초과하는 수준으로 NO를 생성하려는 시도는 대신에 NO 수준을 감소시킬 수 있다. 이는 낮은 NO 수준이 NOS의 자극에 의해 악화되고, 탈커플링된 NOS가 죽상 동맥경화증, 말기 신장 질환, 알츠하이머병 및 당뇨병에서 관찰되는 것과 같은 국부적 반응성 산소 종 (ROS) 손상을 초래하는 상당한 O₂ ^-를 생성하는 경우에 긍정적인 피드백을 일으킬 수 있다.

본원에 기재된 박테리아는 또한 노화의 징후를 지연시키기 위해 사용될 수 있다. 칼로리 제한은 수명을 연장시키고, Holloszy는 임의적인 대조군의 음식물 섭취를 70%로 제한하면, 정주성 래트의 수명이 858일에서 1,051일까지 거의 25% 연장됨을 보고하였다. (Mortality rate and longevity of food restricted exercising male rats: a reevaluation. J. Appl. Physiol. 82(2): 399-403, 1997.) 칼로리 제한과 연장된 수명 사이의 관계가 널리 정립되어 있지만, 인과적 메카니즘은 아니다. Lopez-Torres 등은 래트에서 간 미토콘드리아 효소의 실험이 칼로리 제한과 연관된 복합체 I 활성의 감소로 인해 H₂O₂ 생성이 감소되었음을 보고하였다. (Influence Of Aging And Long-Term Caloric Restriction On Oxygen Radical Generation And Oxidative DNA Damage In Rat Liver Mitochondria. Free Radical Biology & Medicine Vol. 32 No 9 pp882-8899, 2002.) H₂O₂는 호흡하는 동안 미토콘드리아에 의해 생성된 주요 ROS인 O₂ ^-의 보상변화에 의해 생성된다. Kushareva 등에 의해 O₂ ^-의 주요 공급원이 숙시네이트 환원 부위인 복합체 III으로부터의 전자의 역류에 의해 NAD/NADH 산화환원 쌍을 촉매하는 복합체 I인 것으로 제안되었다. Beckman에 의해 제안된 노화의 자유 라디칼 이론은, 세포내 DNA, 항산화제 시스템 및 DNA 복구 시스템에 대한 자유 라디칼 손상이 나이가 들수록 축적되고, 결정적인 시스템이 복구될 수 없을 정도로 손상되면 사망이 발생한다고 주장하였다. (The Free Radical Theory of Aging Matures. Physiol. Rev. 78: 547- 581, 1998.)

추가의 메카니즘으로서, Vasa 등에 의해 NO가 텔로머라제를 활성화시키고 내피 세포의 노쇠를 지연시키는 것으로 입증되었다. (Nitric Oxide Activates Telomerase and Delays Endothelial Cell Senescence. Circ Res. 2000;87:540-542.) 낮은 기저 NO는 시토크롬 옥시다제의 탈억제에 의해 기저 대사율을 증가시킬 것이다. 증가된 기저 대사는 또한 세포 전환 및 성장 속도를 증가시킬 것이다. 모세관 희박화는 만성 저산소를 유도함으로써 자유 라디칼 손상을 증가시킬 수 있고, 또한 세포 전환을 증가시킬 수 있고, 이로써 두 메카니즘에 의해 노화가 가속될 수 있다.

일부 측면에서, 독립영양 암모니아 산화 박테리아가 알러지 및 자가면역 장애에 대해 보호 측면을 제공할 수 있는 것으로 이해된다. 가장 잘 공지된 자가면역 질환은 아마도 제1형 당뇨병이며, 이는 면역계에 의해 췌장에서 인슐린 생성 세포가 파괴됨으로써 발생한다. 습관성 유산 또한 자가면역 장애와 관련이 있으며, 양성 자가면역 항체의 개수는 습관성 유산의 횟수와 양의 상관 관계가 있다. 전신 경화증, 원발성 담즙 간경화, 자가면역 간염, 및 다양한 류마티스성 장애는 자가면역 장애의 다른 예이다. WO/2005/030147에 기재된 바와 같이 AOB의 적용은 알러지, 건초열을 감소시키는 것으로 관찰되었다.

AOB가 알러지 및 자가면역 장애에 대해 보호 효과를 발휘할 수 있는 한 메카니즘은 주로 NF-КB의 조절성 억제 및 면역 세포 활성화의 방지 및 염증 반응의 유도를 통해 일산화질소를 생성함으로써 이루어진다. NF-КB는 유전자 발현을 상향 조절하는 전사 인자이고, 이들 여러 유전자는 시토카인, 케모카인 및 다양한 부착 인자의 방출을 초래하는 유전자를 포함하는 염증 및 면역 반응과 관련이 있다. 이들 다양한 면역 인자는 그들의 방출 부위로 면역 세포의 이동을 일으켜 염증 반응을 초래한다. 구성적 NO 생성이 IΚBα 분해를 방지함으로써 IΚBα (NF-КB의 억제제)를 안정화시킴으로써 NF-КB를 억제하는 것으로 확인되었다.

Xu 등에 의해 NO 공여자의 투여가 래트에서 실험적 알러지성 뇌척수염의 진행을 예방하는 것으로 확인되었다. (SIN-1, a Nitric Oxide Donor, Ameliorates Experimental Allergic Encephalomyelitis in Lewis Rats in the Incipient Phase: The Importance of the Time Window. The Journal of Immunology, 2001, 166: 5810-5816.) 이 연구에서, NO 공여자의 투여가 중추 신경계로 대식세포의 침윤을 감소시키고, 혈중 단핵구 세포의 증식을 감소시키고, 혈중 단핵구 세포의 아폽토시스를 증가시켰음이 입증되었다. 이들 모든 결과는 유도된 자가면역 반응의 정도 및 중증도를 감소시킬 것으로 예상된다.

낮은 기저 NO는, 불충분한 기저 일산화질소의 결과로서 뇌에서의 새로운 연결이 불충분하게 형성되는 메카니즘을 통해 자폐증을 유발할 수 있다. 이론에 구애되기를 바라진 않지만, 일부 실시양태에서, 신경 연결의 형성이 NO에 의해 조절된다. 이러한 경우에, NO 확산 범위를 저하시키는 임의의 상태는 연결이 일어날 수 있는 뇌 요소의 부피 크기를 감소시킬 수 있다. 낮은 기저 NO 수준의 상태 하에 발달한 뇌는 NO의 감소된 유효 범위 때문에 더 작은 부피 요소로 배열될 수 있다.

자폐증 개체에서 나타나는 추가의 증상은 또한 증가된 음조 식별, 소화관 장애, 면역계 부전, 감소된 대뇌 혈류, 뇌의 증가된 글루코스 소모, 증가된 혈장 락테이트, 부착 장애 및 허밍을 비롯하여 원인으로서 낮은 NO를 나타낼 수 있다. 이러한 각각의 증상은 낮은 기저 NO 수준에 기인할 수 있다.

Takashi Ohnishi 등은 자폐증 개체가 감소된 혈류를 나타내었음을 보고하였다. (Takashi Ohnishi et al., Abnormal regional cerebral blood flow in childhood autism. Brain (2000), 123, 1838-1844.) J.M. Rumsey 등은 자폐증 개체가 증가된 글루코스 소모를 가졌음을 보고하였다. (Rumsey JM, Duara R, Grady C, Rapoport JL, Margolin RA, Rapoport SI, Cutler NR. Brain metabolism in autism. Resting cerebral glucose utilization rates as measured with positron emission tomography. Arch Gen Psychiatry, 1985 May;42(5):448-55 (abstract).) D.C. Chugani는 자폐증 개체가 증가된 혈장 락테이트 수준을 가졌음을 보고하였다. (Chugani DC, et al., Evidence of altered energy metabolism in autistic children. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 1999 May;23(4):635-41.) 이들 효과의 발생은 뇌에서 모세관 희박화의 결과일 수 있으고, 이는 혈류 및 O₂ 공급을 감소시킬 수 있으며, 이로써 뇌의 대사량 중 일부는 산화성 인산화 대신에 해당작용을 통해 생성될 수 있다.

B. A. Klyachko 등에 의해 일산화질소가 과분극 후에 이온 채널의 cGMP 변형을 통해 뉴런의 흥분성을 증가시키는 것으로 입증되었다. (Vitaly A. Klyachko et al., cGMP-mediated facilitation in nerve terminals by enhancement of the spike after hyperpolarization. Neuron, Vol. 31, 1015-1025, September 27, 2001.) C. Sandie 등은 NOS의 억제가 경악을 감소시킴을 밝혀냈다. (Carmen Sandi et al., Decreased spontaneous motor activity and startle response in nitric oxide synthase inhibitor-treated rats. European journal of pharmacology 277 (1995) 89-97.) 주의력 결핍 과잉행동 장애 (ADHD)는 자발성 고혈압 래트 (SHR) 및 나폴리 고흥분성 (NHE) 래트를 이용하여 모델링되었다. Raffaele Aspide 등에 의해 이들 두 모델은 급성 NOS 억제 기간 동안에 주의력 결핍이 증가하는 것으로 확인되었다. (Raffaele Aspide et al., Non-selective attention and nitric oxide in putative animal models of attention-deficit hyperactivity disorder. Behavioral Brain Research 95 (1998) 123-133.) 따라서, 본원의 박테리아는 ADHD의 치료에 사용될 수 있다.

M. R. Dzoljic에 의해 NOS의 억제는 또한 수면을 억제하는 것으로 확인되었다. (M. R. Dzoljic, R. de Vries, R. van Leeuwen. Sleep and nitric oxide: effects of 7-nitro indazole, inhibitor of brain nitric oxide synthase. Brain Research 718 (1996) 145-150.) G. Zoccoli는 대뇌 순환에서 급속 안구 운동 및 수면-각성 차이를 비롯하여 수면 동안에 확인된 수많은 생리학적 효과가 NOS의 억제시 변경됨을 보고하였다. (G. Zoccoli, et al., Nitric oxide inhibition abolishes sleep-wake differences in cerebral circulation. Am. J. Physiol. Heart Circ Physiol 280: H2598-2606, 2001.) L. Kapas 등에 의해 NO 공여자가 비-REM 수면을 촉진시키는 것으로 확인되었지만, 이러한 증가는 NO 공여자의 지속성에 비해 훨씬 더 길게 지속되며, 이는 아마도 반발 효과를 시사한다. (Levente Kapas et al., Nitric oxide donors SIN-1 and SNAP promote nonrapid-eye-movement sleep in rats. Brain Research Bullitin, vol 41, No 5, pp. 293-298, 1996. M. Rosaria et al., Central NO facilitates both penile erection and yawning. Maria Rosaria Melis and Antonio Argiolas. Role of central nitric oxide in the control of penile erection and yawning. Prog Neuro-Psychopharmacol & Biol. Phychiat. 1997, vol 21, pp 899-922.) P. Tani 등은 불면증이 아스퍼거(Asperger) 증후군을 가진 성인에서 자주 발견됨을 보고하였다. (Pekka Tani et al., Insomnia is a frequent finding in adults with Asperger's syndrome. BMC Psychiatry 2003, 3:12.) Y. Hoshino 또한 자폐증 소아에서 수면 장애를 관찰하였다. (Hoshino Y, Watanabe H, Yashima Y, Kaneko M, Kumashiro H. An investigation on sleep disturbance of autistic children. Folia Psychiatr Neurol Jpn. 1984;38(1):45-51. (abstract)) K.A. Schreck 등은 수면 장애의 중증도가 자폐증 증후군의 중증도와 상호 관련이 있음을 관찰하였다. (Schreck KA, et al., Sleep problems as possible predictors of intensified symptoms of autism. Res Dev Disabil. 2004 Jan-Feb;25(1):57-66. (abstract).) 따라서, 본원의 박테리아는 불면증의 치료에 사용될 수 있다.

W. D. Ratnasooriya 등은 수컷 래트에서 NOS의 억제가 전희 활동을 감소시키고, 성욕을 감소시키고, 임신 능력을 감소시킴을 보고하였다. (W. D. Ratnasooriya et al., Reduction in libido and fertility of male rats by administration of the nitric oxide (NO) synthase inhibitor N-nitro-L-arginine methyl ester. International journal of andrology, 23: 187-191 (2000).)

ATP 고갈 및 궁극적인 장기 부전을 특징으로 하는 외견상 이질적인 수많은 장애가 실제로는 기저 일산화탄소의 전반적인 결핍에 의해 유발되는 니트로페니아에 의해 "유발"될 수 있다. 이것이 심장에서 발생하는 경우에는, 팽창성 심근증이 초래된다. 이것이 뇌에서 발생하는 경우에는, 백질 과집중, 알츠하이머병, 혈관성 우울증, 혈관성 치매, 파킨슨병(Parkinson), 및 루이 소체 치매가 초래된다. 이것이 신장에서 발생하는 경우에는 말기 신장 질환이 초래되고, 이것이 간에서 발생하는 경우에는 원발성 담즙 간경화가 초래된다. 이것이 근육에서 발생하는 경우에는 섬유근통, 걸프전(Gulf War) 증후군, 또는 만성 피로 증후군이 초래된다. 이것이 장에서 발생하는 경우, 허혈정 장 질환이 초래된다. 이것이 췌장에서 발생하는 경우에는 먼저 제2형 당뇨병에 이어, 췌장의 만성 염증에 이어, 췌장의 자가면역 공격 (또는 췌장암)에 이어, 제1형 당뇨병이 초래된다. 이것이 결합 조직에서 발생하는 경우, 전신 경화증이 초래된다.

말기 신장 질환의 잔여 신장 모델에서, 신장의 일부를 (수술에 의해 또는 독소를 사용하여) 제거하고, 이는 나머지 부분의 대사량을 증가시킨다. 수퍼옥시드가 생성되어 NO를 감소시키고 신장 미토콘드리아로 O₂ 확산을 증가시킨다. 만성 과부하는 진행성 신장 모세관 희박화 및 진생성 신장 부전을 초래한다. 급성 신장 부전에서, 사람을 투석시키면 신장에 "휴식"이 제공되어 이를 회복시킬 수 있다. 횡문근변성 (미오글로빈을 혈류로 방출시키는 근육 손상)에 의해 유도된 급성 신부전에서, 신장 손상은 허혈성 손상을 특징으로 한다. 미오글로빈은 헤모글로빈과 같이 NO를 소거하고, 신장에서 혈관수축을 일으켜 허혈로 이어지게 된다. 미오글로빈은 또한 국부적 니트로페니아, 및 추가의 ATP 고갈을 초래하는 일련의 사건을 유도한다.

일부 측면에서, 낮은 NO 수준은 미토콘드리아 생합성을 감소시킨다. 감소된 미토콘드리아 밀도에서 동일한 ATP의 생성은 O₂ 소모가 증가되거나 기초 대사율을 가속시킬 것이다. 가속된 기초 대사율은 겸상 적혈구 빈혈, 울혈성 심부전, 당뇨병, 간경화, 크론(Crohn) 질환, 근위축성 측장 경화증, 비만, 말기 신장 질환, 알츠하이머, 및 만성 폐쇄성 폐 질환을 비롯한 수많은 상태에서 관찰된다.

다소 증가된 O₂ 소모가 생산적으로 사용될 수 있는 반면에, 이들 여러 상태에서 단백질 탈커플링 또한 상향 조절되고, 이는 증가된 대사율의 적어도 일부가 비효율성으로 인한 것임을 나타낸다. 단백질 탈커플링이 상향 조절되는 것으로 공지된 상태에는 비만 및 당뇨병이 포함된다.

더 낮은 O₂ 농도로 O₂를 소모하는 미토콘드리아가 적을 수록, O₂ 확산을 유도하는 O₂ 구배가 더 커져서, O₂ 확산 경로 길이가 증가하여 모세관 희박화가 초래될 것이고, 이는 팽창성 심근증, 고혈압, 제2형 당뇨병, 및 신장 고혈압에서 관찰된다.

Cu2+ 또는 세룰로플라스민 (CP) (성인 혈청에서 0.38 g/L로 존재하고, 0.32% Cu이고, 94%의 혈청 구리를 함유하는, 주요 Cu 함유 혈청 단백질)으로서의 구리는 NO 및 티올 함유 기 (RSH)로부터 S-NO-티올의 형성을 촉매한다. 혈장 중 Cu 함량은 다르며, 감염 상태에서는 증가된다. Berger 등은 피부의 1/3이 화상을 입은 환자에서 화상 삼출물 중 Cu 및 Zn 함량이 상당하였으며, 7일 내에 정상 신체 Cu 함량의 20 내지 40% 및 Zn 함량의 5 내지 10%가 손실되었음을 보고하였다. (Cutaneous copper and zinc losses in burns. Burns. 1992 Oct;18(5):373-80.) 환자 피부가 AOB에 의해 콜로니화되면, 우레아를 함유하는 창상 삼출물 및 AOB가 필요로 하는 Fe, Cu, 및 Zn이 NO 및 니트라이트로 전환되어, 대사적으로 챌린지된 창상에서 자원 (예컨대 O₂ 및 L-아르기닌)을 소모하지 않고 iNOS에 의해 NO의 국부 생성을 크게 보충한다. 창상 표면에서 AOB에 의한 NO 및 니트라이트의 높은 생성은 특히 파상풍, 가스 괴저 및 보툴리누스 중독을 유발하는 혐기성 박테리아, 예컨대 클로스트리디아에 의한 감염을 억제할 것으로 예상된다.

달리 지시되지 않는 한, 본 개시내용의 실시는 관련 기술분야의 기술 내에서 면역학, 분자 생물학 및 재조합 DNA 기술의 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 이러한 기술은 문헌에서 충분히 설명된다. 예를 들어 Sambrook, et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Current Edition); 및 Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel, et al. eds., current edition)을 참조한다.

실시예

바이옴-친화성 성분 및 제형 시험 방법

다양한 부형제를 이용하여 처리한 후 엔. 유트로파 D23의 회복

엔. 유트로파 D23 현탁액을 연속식 배양 시스템으로부터 수득하였다. 엔. 유트로파 D23 배양물을 10,000 x g 하에 20℃에서 15분 동안 원심분리함으로써 수확하였다. 수확한 세포를 AOB 보관 용액 (50 mM Na₂HPO₄ - 2 mM MgCl₂, pH 7.6)으로 세척하고, 4℃에서 보관하기 전에 보관 용액에서 5.0 (~10¹⁰ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 현탁시켰다. 각각의 부형제의 효과를 측정하기 위해, 엔. 유트로파 D23 세포 현탁액을 다양한 농도의 부형제 (0 내지 100%)를 함유하는 암모늄 (NH₄ ⁺)으로 보충된 10 ml AOB 배지 중에서 0.5 (~ 10⁹ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 희석하였다. 대조군 배양물은 동일한 부피의 부형제 희석제로만 보충하였다. 배양물을 30℃에서 인큐베이션하였다. 1분, 10분 & 60분 시점에서, 1 ml의 배양물을 수집하고, 17,000 x g항게 3분 동안 원심분리하였다. 상청액을 사용하여 그리스(Griess) 시약에 의해 니트라이트를 측정하였다. 수득한 박테리아 펠릿을 AOB 배지에서 세척하고, NH₄ ⁺로 보충된 10 ml AOB 배지에 현탁시키고, 궤도 진탕기 상에서 150 rpm에서 진탕시키면서 (직립 자세) 30℃에서 인큐베이션하였다. 부형제 처리로부터 엔. 유트로파 D23 세포의 회복을, 24시간 간격으로 수집된 샘플에서 OD₆₀₀ 값 & 니트라이트 축적을 측정함으로써 24 내지 48시간 동안 모니터링하였다.

시험된 성분, 부형제 또는 조성물에 따라, 측정된 니트라이트의 농도는 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물임을 확인시킬 수 있다. 특정 실시양태에서, 48시간 기간의 마지막에 측정된 1000 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성만이 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물임을 나타낼 것이다. 다른 실시양태에서, 48시간 기간의 마지막에 측정된 100 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성은 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물임을 나타낼 것이다. 다른 실시양태에서, 48시간 기간의 마지막에 측정된 10 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성은 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물임을 나타낼 것이다.

"+++"로 확인된 회복은 48시간 기간의 마지막에 측정된 1000 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성을 나타내고, 이는 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물을 제공할 수 있다. "++"로 확인된 회복은 48시간 기간의 마지막에 측정된 약 100 마이크로몰 내지 1000 마이크로몰의 니트라이트 생성을 나타내고, 이는 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물을 제공할 수 있다. "+"로 확인된 회복은 48시간 기간의 마지막에 측정된 약 10 내지 100 마이크로몰의 니트라이트 생성을 나타내고, 이는 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물을 제공할 수 있다. 회복 없음 "-"은 48시간 기간 내에 측정된 니트라이트 생성이 전혀 없거나 또는 실질적으로 없음, 예를 들어 10 마이크로몰 미만의 니트라이트 생성을 나타내고, 이는 대부분의 예에서 바이옴-친화성 성분, 부형제 또는 조성물임을 나타내지 않는다.

이 절차를 수용성 또는 수혼화성 성분에 적용할 수 있다. 유성 또는 비혼화성 성분 또는 제형의 경우, 시험 물질을 먼저 담체 비드 또는 메쉬에 흡착시킬 수있다. 이를 완충제로 세정한 다음, 비드 또는 메쉬를 박테리아 현탁액에 두고, 특정한 기간 동안 인큐베이션할 수 있다. 본래의 비드 또는 메쉬는 대조군으로서 인큐베이션할 수 있다. 시험 노출 기간의 마지막에, 상청액 박테리아 현탁액을 상기 논의된 가용성 시험 방법에 따라 활성 및 생존가능성에 대해 시험할 수 있다.

예를 들어 샴푸 및 클렌저의 경우에는, 시험을 10% 및 25%에서 수행하였는데, 이들이 전형적으로 사용하는 동안 대략 상기 비로 물로 희석되기 때문이다.

시험한 조성물은 하기 성분의 조성을 가졌다:

092214-004 장미 향 있는 포밍 비누 (도 1A-1C)

092014-003 향 없는 포밍 비누 (도 1A-1C)

092214-003 바디 워시 (도 2A-2C)

092214-001 샴푸 (도 3A-3C)

092214-002 컨디셔너 (도 4A-4C)

도 1A-1C에 제시된 바와 같이, 향 있는 및 향 없는 포밍 비누 둘 다에서 1분 인큐베이션 이후 니트라이트 생성이 달성되었다. 더 긴 기간 (10분 및 60분) 동안 인큐베이션한 후, 니트라이트 생성이 달성되었지만, 1분 인큐베이션 이후에 비해 적었다. 달성된 니트라이트 생성은 시험 샘플에서 회복된 AOB의 양과 상호관련이 있다.

도 2A-2B에 제시된 바와 같이, 바디 워시에서 1분 인큐베이션 이후 니트라이트 생성이 달성되었고, 이는 10% 및 25% 바디 워시 농도 둘 다에 대해 (25% 농도 샘플은 더 적은 니트라이트 생성을 가짐) 대조군 시험 샘플에 필적하였다. 증가된 인큐베이션 시간의 경우, 더 적은 니트라이트 생성이 달성되었다. 달성된 니트라이트 생성은 시험 샘플에서 회복된 AOB의 양과 상호관련이 있다.

도 3A-3B에 제시된 바와 같이, 샴푸에서 1분 인큐베이션 이후 니트라이트 생성이 달성되었고, 이는 10% 및 25% 바디 워시 농도 둘 다에 대해 (25% 농도 샘플은 더 적은 니트라이트 생성을 가짐) 대조군 시험 샘플에 필적하였다. 증가된 인큐베이션 시간의 경우, 더 적은 니트라이트 생성이 달성되었다. 달성된 니트라이트 생성은 시험 샘플에서 회복된 AOB의 양과 상호관련이 있다.

도 4A-4B에 제시된 바와 같이, 컨디셔너에서 1분 인큐베이션 이후 니트라이트 생성이 달성되었고, 이는 대조군 시험 샘플에 필적하였다. 증가된 인큐베이션 시간의 경우, 유사한 니트라이트 생성이 달성되었다. 달성된 니트라이트 생성은 시험 샘플에서 회복된 AOB의 양과 상호관련이 있다.

도 5의 표와 관련하여, 하기 표는 일부 시험 조성물의 성분을 기재한다:

10% S:P:L 및 25% S:P:L (백분율은 시험 조건을 나타냄)

"13% Gly Bet" (이 경우, 13%는 제형 자체를 나타냄)

13% Gly Bet - 5% 장미

도 5는 특정 계면활성제 또는 계면활성제 블렌드가 바이옴-친화성인 정도를 제시한다. 기호는 대조군과 비교한 니트라이트 생성과 관련이 있다.

"+++"로 확인된 회복은 48시간 기간의 마지막에 측정된 1000 마이크로몰 초과의 니트라이트 생성을 나타낸다. "++"로 확인된 회복은 48시간 기간의 마지막에 측정된 약 100 마이크로몰 내지 1000 마이크로몰의 니트라이트 생성을 나타낸다. "+"로 확인된 회복은 48시간 기간의 마지막에 측정된 약 10 내지 100 마이크로몰의 니트라이트 생성을 나타낸다. 회복 없음 "-"은 48시간 기간 내에 측정된 니트라이트 생성이 전혀 없거나 또는 실질적으로 없음, 예를 들어 10 마이크로몰 미만의 니트라이트 생성을 나타낸다.

부록 VI - ASEAN 화장품 문서

부록 VI - 파트 1 - 화장품 제품에서 사용하도록 허용된 보존제 리스트

부록 VI - 파트 1

허용된 보존제 리스트

부록 VI과 관련하여:

1. 보존제는 이러한 제품에서 미생물의 발달을 억제하는 주요 목적을 위해 화장품 제품에 첨가될 수 있는 물질이다.

2. 기호 (+)로 표시한 물질은 또한 제품의 제시로부터 명백한 다른 목적을 위해, 예를 들어 비누에서 탈취제로서 또는 샴푸에서 비듬 방지제로서, 이 부록에서 규정된 농도 이외의 농도로 화장품 제품에 첨가될 수 있다.

3. 화장품 제품의 제형에 사용되는 다른 물질 또한 항미생물 특성을 가질 수 있고, 따라서 예를 들어 여러 필수 오일 및 일부 알콜로서 제품의 보존에 도움이 될 수 있다. 이들 물질은 부록에 포함되지 않는다.

4. 이 리스트의 목적을 위해

- "염"은 양이온 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 암모늄 및 에탄올아민의 염, 음이온 클로라이드, 브로마이드, 술페이트, 아세테이트의 염을 의미하는 것으로 사용됨.

- "에스테르"는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 펜틸의 에스테르를 의미하는 것으로 사용됨.

5. 포름알데히드 또는 이 부록의 물질을 함유하고, 포름알데히드를 방출하는 모든 완성된 제품의 경우, 완성된 제품에서 포름알데히드의 농도가 0.05%를 초과하는 경우에는 "포름알데히드 함유"의 경고문이 표지되어야 한다.

<1211> 공정서 물품의 멸균화 및 멸균성 보증

이 정보 챕터는 멸균성이어야 하는 제품의 품질 관리와 관련된 개념 및 원칙에 대한 일반적인 설명을 제공한다. 멸균성 시험 <71>에 기재된 것으로부터 멸균성 시험 절차에서의 임의의 변형 또는 변화는 전체 멸균성 보증 프로그램의 맥락에서 검증되어야 하며, 이 챕터에 기재된 것에 대해 대안적인 방법으로 의도되지 않는다.

멸균성의 가장 엄격한 정의 내에서, 생존가능한 미생물이 시편으로부터 완전히 부재할 때에만, 시편이 멸균성인 것으로 간주될 것이다. 그러나, 이 절대적인 정의는 시험의 한계 때문에 현재 완성된 공정서 물품의 전체 로트에 적용될 수 없다. 절대적인 멸균성은 실제로 모든 완성된 물품의 완전한 파괴가 없이는 입증될 수 없다. 따라서, 멸균성인 것으로 지칭되는 로트의 멸균성은 오염된 단위 또는 물품의 가능성이 허용할만하게 희박한 경우인 확률적인 용어로 정의된다. 이러한 멸균성 보증 상태는 멸균 시험에만 의존해서가 아니라 해당되는 경우 적절한 현행의 양호한 제조 실무 하에 적절한 멸균 주기 및 후속적인 무균 가공의 이용을 통해서만 정립될 수 있다. 멸균 공정의 검증 및 인증에 대한 기본 원친을 하기에 열거한다:

1. 공정 장비가 필요한 파라미터 내에서 작동할 수 있음을 수립한다.

2. 중요한 제어 장비 및 계측기가 공정 장비에 대해 규정된 파라미터 내에서 작동할 수 있음을 입증한다.

3. 장비의 필요한 작동 범위를 나타내고 실제 또는 모의 제품을 사용하는 반복 주기를 수행한다. 상기 공정이 규정된 프로토콜 한계 내에서 수행되었고, 최종적으로 완료된 반복 공정에서 미생물 생존 가능성이 규정된 한계보다 크지 않음을 입증한다.

4. 일상적인 작업 동안 검증된 공정을 모니터링한다. 필요에 따라 주기적으로 장비를 재적격화 및 재인증한다.

5. 상기 프로토콜을 완료하고, 상기 단계 (1) 내지 (4)를 문서화한다.

무균 가공 절차를 검증하기 위한 프로그램의 원리 및 실행은 멸균 공정의 검증과 유사하다. 무균 가공에서, 최종 투여 형태의 성분을 별도로 멸균시키고, 완성된 물품을 무균 방식으로 조립한다.

멸균 공정 또는 무균 공정의 적절한 검증은 멸균 및 클린룸 기술 분야의 높은 수준의 지식을 필요로 한다. 멸균 파라미터에 있어서 현행의 허용가능하고 달성가능한 한계를 준수하기 위해, 온도 및 시간, 습도, 및 멸균 기체 농도, 또는 흡수된 방사선과 같은 중요한 파라미터를 조절하기에 적절한 계측기 및 장비를 이용하는 것이 필요하다. 여러 멸균 절차에서 검증 프로그램의 중요한 측면은 생물학적 지시기의 사용과 관련이 있다 (생물학적 지시기 <1035> 참조). 검증 및 인증된 공정은 주기적으로 재검증되어야 하지만, 재검증 프로그램이 원래 프로그램만큼 광범위할 필요는 없다.

하기 설명되는 전형적인 검증 프로그램은 증기 오토클레이브에 대해 고안된 것이지만, 상기 원리를 이 정보 챕터에서 논의된 다른 멸균 절차에 적용할 수 있다. 이 프로그램은 몇몇 단계를 포함한다.

설치 적격성 단계는 제어기 및 다른 계측기가 적절하게 고안되고 보정되었음을 수립하기 위해 의도된다. 증기, 물 및 공기와 같은 필요한 유틸리티의 적격성을 입증하는 파일이 문서화되어야 한다. 작업 적격성 단계는 빈 챔버가 프로토콜에서 규정된 모든 주요 챔버 위치에서 온도의 파라미터 내에서 기능함을 확인하기 위해 의도된다. 보통 다중 온도 센싱 디바이스를 이용하는 챔버에서 열 프로파일 기록, 즉 동시 온도를 진행하는 것이 적절하다. 빈 챔버에서 전형적인 허용가능한 온도 범위는 챔버 온도가 121°이상일 때 ±1°이다. 검증 프로그램의 확인 단계는 물질 또는 물품의 실제 멸균화이다. 이 결정은 물품의 샘플에 삽입된 온도 센싱 디바이스, 뿐만 아니라 적절한 농도의 적합한 시험 미생물이 첨가된 물품의 샘플, 또는 작동가능하게 완전히 로딩된 오토클레이브 원심분리에서 별도의 BI를 사용하는 것을 필요로 한다. 실제 물품으로의 열 전달 또는 침투의 유효성 및 노출 시간은 멸균 공정의 치사율을 측정하는 두 가지 주요 인자이다. 검증 프로그램의 최종 단계는 상기 프로그램 실행 시 진행된 지원 데이터의 문서화를 필요로 한다.

일반적으로, 오토클레이브에서 가공 시 멸균성인 것으로 지칭되는 마지막으로 멸균된 주사가능한 물품 또는 중요 디바이스는 10^-6 미생물 생존 확률에 이르고, 즉 생존가능한 미생물이 1백만분의 1 미만의 확률로 멸균된 물품 또는 투여 형태에 존재함을 보증한다. 열안정성 물품의 경우, 상기 접근법은 종종 10^-6 미생물 생존 확률 (과멸균)을 달성하기 위해 필요한 중요한 시간을 상당히 초과한다. 그러나, 방대한 열 노출이 손상 효과를 가질 수 있는 물품의 경우에는, 이러한 과멸균 접근법을 이용하는 것이 실현되지 않을 수 있다. 후자의 경우, 멸균 주기의 진행은 적합한 시간에 걸쳐 미리 멸균된 제품의 로트의 상당수에 대한 검사에 기초하여 제품의 미생물 부담에 대한 지식에 크게 의존한다.

D 값은 미생물 집단을 90% 또는 1 로그 주기로 (즉, 1/10의 생존 분율까지) 감소시키기 위해 필요한 시간 (분)이다. 따라서, 예를 들어 바실루스 스테아로써모필루스(Bacillus stearothermophilus) 포자의 BI 제제의 D 값이 전체 공정 파라미터 하에, 예를 들어 121°에서 1.5분인 경우, 이를 동일한 상태 하에 12분 동안 처리한다면, 치사율 투입이 8D라고 할 수 있다. 상기 투입을 제품에 적용하는 효과는 초기 미생물 부담에 따라 좌우된다. 멸균화에 대한 그의 내성이 BI와 동일하다고 가정할 때, 해당 제품의 미생물 부담이 10² 미생물이면, 2D의 치사율 투입은 1 (10° 이론적)의 미생물 부담을 수득하고, 추가의 6D는 10^-6의 계산된 미생물 생존 확률을 수득한다. (동일한 조건 하에, 12D의 치사율 투입은 전형적인 "과멸균" 접근법에서 사용될 수 있다.) 일반적으로, 검증된 멸균화 주기 하에 물품에 대해 달성된 생존 확률은 BI를 이용하여 발생할 수 있는 것과 완전한 상관관계가 있지 않다. 따라서, 유효한 사용을 위해, BI의 내성이 멸균된 제품의 천연 미생물 부담보다 커야한다. 이어서, 내열성이 BI와 동등한 것처럼 최악의 경우를 가정하여 미생물 부담을 처리하는 것이 적절하지만, 전형적인 미생물 부담 단리물의 최대 내성이 증기 멸균화를 위해 BI로서 종종 사용되는 이 종에서 확인된 정도의 내열성을 입증할 가능성은 없다. 상기 예에서, 제품이 10² 미생물의 미생물 부담을 갖는다면 12분 주기가 멸균화에 적합한 것으로 고려된다. 그러나, 상기 지시기가 원래 10⁶ 미생물 함량을 가졌다면, 실제로는 10^-2 확률의 생존이 예상될 수 있고; 즉, 1/100 BI는 긍정적인 결과를 수득할 수 있다. 이러한 유형의 상황은 적절한 BI의 선택에 의해 피할 수 있다. 대안적으로, 높은 함량의 지시기를 미리 결정된 허용가능한 카운트 감소를 기준으로 하여 사용할 수 있다.

이들 조건에서 바실루스 스테아로써모필루스 제제에 대해 결정되거나 검증된 D 값은 특정한 검증 프로그램이 변할 때 재정립되어야 한다. 생존 곡선의 결정 (생물학적 지시기 <1035> 참조), 또는 분획 주기 접근법으로 불리는 것을 이용하여, 특정한 멸균 절차에 대해 바람직한 생물학적 지시기의 D 값을 결정할 수 있다. 분획 주기 접근법을 이용하여 미생물 부담의 내성 또한 평가할 수 있다. 분획 주기는 미생물 카운트-감소 또는 분획 음성(fraction negative) 달성에 대해 연구된다. 이들 수를 이용하여 생성 조건 하에 공정의 치사율을 결정할 수 있다. 데이터는 적절한 멸균화 주기를 정립하기 위해 적격화된 생성 장비에서 이용될 수 있다. 적합한 생물학적 지시기, 예컨대 바실루스 스테아로써모필루스 제제는 일상적인 멸균화 동안에도 이용될 수 있다. 멸균성 보증을 위한 임의의 미생물 부담 방법은 다른 특성의 주기적인 감시 외에도 임의의 변화를 검출하기 위해 물품의 미생물 내성의 적절한 감시를 필요로 한다.

멸균 방법

이 정보 챕터에서, 여과에 의한 미생물 제거 및 무균 가공을 위한 지침을 비롯하여 5가지 최종 멸균 방법이 기재된다. 그러나, 현대의 기술 개발로 인해 추가의 절차가 사용되었다. 여기에는 (고온에서) 취입 성형, 포화 증기 및 UV 방사선조사 이외의 습열의 형태, 뿐만 아니라 무균 가공에서 온라인 연속 충전이 포함된다. 주어진 투여 형태 또는 성분에 대한 적절한 공정의 선택은 멸균 기술에 대한 높은 수준의 지식 및 멸균되는 물질에 대한 공정의 임의의 효과에 관한 정보를 필요로 한다. ¹

증기 멸균

압력 하에 포화 증기를 이용하는 열 멸균 공정은 오토클레이브로 지칭되는 챔버에서 수행한다. 이는 아마도 가장 널리 이용되는 멸균 공정이다. ² 기본적인 작동 원리는, 멸균 챔버에서 공기를 포화된 증기로 대체하고, 이는 벤트 또는 트랩에 의해 달성된다. 챔버로부터 및 물품 내로부터 공기를 더욱 효과적으로 대체하기 위해, 멸균 주기는 공기 및 증기 배출 단계를 포함할 수 있다. 주어진 제품 또는 성분에 대한 주기의 고안 또는 선택은 물질의 열 민감성, 물품으로 열 침투에 대한 지식, 및 검증 프로그램에서 기재된 다른 인자 (상기 참조)를 비롯한 수많은 인자에 따라 좌우된다. 121°의 온도를 사용하는 멸균 주기 파라미터의 기재와는 별개로, F₀ 개념이 적절할 수 있다. 121° 이외의 특정한 온도에서 F₀은 명시된 시간 동안 121°에서 제공된 것과 동등한 치사율을 제공하는데 필요한 시간 (분)이다. 일반적으로, 현대의 오토클레이브는 수년간 사용된 오래된 단위의 증기 감소 밸브에 비해 상당히 더 반응성인 제어 시스템을 이용하여 작동한다. 이들 오래된 단위가 이 챕터에서 논의되는 주기의 제어의 정확성 및 수준을 달성하기 위해, 이들 단위 상의 제어 장비 및 계측기를 업그레이드하거나 변형시키는 것이 필요할 수 있다. 이러한 변형은 챔버 및 증기 자켓이 계속된 안전한 사용을 위해 손상되지 않은 경우 및 열 분배를 방해하는 침착물이 제거될 수 있는 경우에만 보장된다.

건열 멸균

건열에 의한 약전 물품의 열 멸균 공정은 보통 상기 목적을 위해 특별히 고안된 오븐에서 배치식 공정에 의해 수행된다. 현대의 오븐에는 가열되고 여과된 공기가 공급되고, 대류 또는 방사선에 의해 챔버를 통해 균일하게 분배되고, 중요한 파라미터를 센싱, 모니터링 및 제어하기 위한 디바이스를 이용하는 송풍기 시스템을 사용한다. 건열 멸균 시설의 검증은 상기 기재된 증기 멸균기에서와 유사한 방식으로 수행된다. 멸균 성분을 위한 단위, 예컨대 정맥내 용액으로 의도된 용기를 사용하는 경우, 챔버에서 미립성 물질이 축적되는 것을 피하도록 주의해야 한다. 빈 챔버에서 전형적으로 허용가능한 온도 범위는 단위가 250° 이상에서 작동될 때 ±15°이다.

상기 기재된 배치식 공정 외에도, 통합된 연속식 무균 충전 및 밀봉 시스템의 일부로서 유리 제품을 멸균 및 탈발열화하기 위해 연속식 공정을 흔히 이용한다. 대류에 의해 또는 개방된 화염으로부터 열을 직접 전달함으로써 열을 분배할 수 있다. 연속식 시스템은 보통 체류 시간이 훨씬 짧기 때문에 배치식 공정에 대해 인용된 것보다 훨씬 더 높은 온도를 필요로 한다. 그러나, 생성물이 통과하는 동안 전체 온도 투입은 챔버 공정 동안에 달성된 것과 동등해야 한다. 연속식 공정 또한 보통 무균 충전 작업 이전의 급속 냉각 단계를 필요로 한다. 적격화 및 검증 프로그램에서, 짧은 체류 시간의 측면에서, 온도의 균일성에 대한 파라미터, 특히 체류 시간이 정립되어야 한다.

10^-12의 미생물 생존 확률은 열안정성 물품 또는 성분에 대해 달성가능한 것으로 고려된다. 건열 멸균을 검증 및 모니터링하기 위한 생물학적 지시기의 예는 바실루스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 포자의 제제이다. 건열은 유리 제품 또는 용기가 발열원 뿐만 아니라 생존가능한 미생물을 함유하지 않도록 하기 위해 빈번히 이용되기 때문에, 필요에 따라 발열원 챌린지는 예를 들어 처리되는 1종 이상의 물품을 1000 이상 USP 단위의 박테리아 내독소로 접종함으로써 검증 프로그램의 통합된 일부이어야 한다. 리물루스(Limulus) 용리물에 의한 시험을 이용하여, 내독소 물질이 원래 양의 1/1000 이하로 (3 로그 주기 감소) 불활성화되었음을 입증할 수 있다. 검증될 시험의 경우, 내독소의 원래 양, 및 허용가능한 불활성화 이후의 잔류량을 측정해야 한다. 내독소 검정에 대한 추가의 정보는 박테리아 내독소 시험 <85>를 참조한다.

기상 멸균

멸균될 물질이 증기 멸균 또는 건열 멸균 공정에서 얻어지는 고온을 견딜 수 없는 경우에는, 열에 대한 대안으로서 기상 멸균을 빈번히 선택한다. 일반적으로 기상 멸균에서 이용되는 활성제는 허용가능한 멸균 품질의 에틸렌 옥시드이다. 이러한 멸균제의 단점은 적합한 불활성 기체와 혼합되지 않을 경우 그의 높은 가연성, 그의 돌연변이 특성, 및 처리된 물질, 특히 클로라이드 이온을 함유하는 물질 중 독성 잔류물의 가능성이다. 일반적으로, 멸균 공정은 증기 오토클레이브와 유사하게 고안된 가압 챔버에서 수행되지만, 이 기체를 이용하는 살균기에 대해 고유한 추가의 특성이 적용된다 (하기 참조). 이 살균제를 이용하는 시설은 적합한 멸균후 탈기를 제공하고, 미생물 생존 모니터링을 가능하게 하고, 작업자가 잠재적으로 유해한 기체에 노출되는 것을 최소화하도록 고안되어야 한다. ³

에틸렌 옥시드 기체를 이용하는 멸균 공정의 적격화는 앞서 논의된 바와 같이 수행된다. 그러나, 온도 이외에도 습도, 진공/양압 및 에틸렌 옥시드 농도 또한 엄격히 제어해야하기 때문에 상기 프로그램은 다른 멸균 절차에 비해 더 포괄적이다. 중요한 결정은 전체 주기 동안에 챔버에서 모든 중요한 공정 파라미터가 적절함음 결정하는 것이다. 멸균될 물품에 적용되는 멸균 파라미터가 중요한 변수이기 때문에, 에틸렌 옥시드 챔버에 로드를 배치하기 전에 필요한 온도를 유지하는 시간을 최소화하기 위해 필요한 수분 함량을 달성하도록 로드를 사전에 컨디셔닝하는 것이 빈번히 권고된다. 검증 공정은 일반적으로 적절하게 (BI), 예컨대 바실루스 서브틸리스의 포자 제제로 접종된 제품을 이용한다. 검증을 위해, 이들은 전체 챔버 로드의 제품 또는 모의 제품에서 이용될 수 있다. 수분 및 기체 농도의 모니터링은 지식이 풍부하고 경험이 많은 개인만이 보정, 작동 및 유지할 수 있는 정교한 계측기의 사용을 필요로 한다. BI 또한 일상적인 작동을 모니터링하는데 사용될 수 있다.

이 챕터에서 나타낸 바와 같이, 접종된 제품 또는 접종된 모의 제품을 이용하여 에틸렌 옥시드 멸균 주기를 고안하는데 있어서 궁극적인 미생물 생존 확률을 정립하기 위해 BI를 분획 음성 방식으로 사용할 수 있다.

에틸렌 옥시드 멸균 공정의 주요 한계 중 하나는 기체가 멸균을 필요로 하는 가장 안쪽 제품 영역으로 확산되는 능력의 한계이다. 따라서, 패키지 고안 및 챔버 로딩 패턴은 기체 확산에 대해 최소 저항성이도록 결정되어야 한다.

이온화 방사선에 의한 멸균

가열 멸균을 견딜 수 없는 의료 디바이스의 급속한 확산 및 에틸렌 옥시드의 안전성에 대한 우려로 인해, 방사선 멸균의 적용이 증가되었다. 이는 약물 및 최종 투여 형태에도 적용가능한다. 방사선조사에 의한 멸균의 이점에는 낮은 화학 반응성, 낮은 측정가능 잔류물, 및 제어할 변수가 적다는 사실이 포함된다. 실제로, 방사선 멸균은 정확하게 측정될 수 있는 흡수된 방사선 선량을 기준으로 본질적으로 제어된다는 점에서 독특하다. 이러한 특성 때문에, 살균 용량을 결정하기 위한 새로운 절차가 개발되었다. 그러나, 이는 특히 추가의 제어 및 안전성 측정이 필요한지 여부와 관련하여 아직 검토 및 평가 중이다. 방사선조사는 온도를 최소한으로 상승시키지만, 특정 등급 및 유형의 플라스틱 및 유리에는 영향을 미칠 수 있다.

사용중인 두 가지 유형의 이온화 방사선은 방사성 동위원소 붕괴 (감마 방사선) 및 전자빔 방사선이다. 이들 경우에, 필요한 정도의 멸균성 보증을 수득하도록 정립된 방사선 선량이 최소 및 최대 선량 설정의 범위 내에서 멸균되는 물품의 특성이 허용가능하도록 해야 한다.

감마 방사선조사의 경우, 절차의 검증은 물품 물질 적합성의 정립, 제품 로딩 패턴의 정립, 및 멸균 용기에서 선량 맵핑의 완료 (최소 및 최대 선량 대역의 확인을 포함함), 타이머 설정의 정립, 및 필요한 멸균 선량의 전달의 입증을 포함한다. 또한, 전자빔 방사선조사의 경우, 전압, 전류, 컨베이어 속도 및 전자빔 스캔 치수의 온라인 제어가 검증되어야 한다.

감마 방사선 멸균의 경우, 손상 효과없이 견딜 수 있는 효과적인 멸균 선량이 선택되어야 한다. 예전부터 2.5 메가래드 (Mrad)의 흡수된 방사선이 선택되었지만, 일부 경우에는 디바이스, 약물, 및 완성된 투여 형태에 대해 적은 선량을 이용하는 것이 바람직하고 허용가능하다. 그러나, 다른 경우에, 더 높은 선량이 필수적이다. 특히 낮은 노출 수준의 효능을 검증하기 위해, 제품의 미생물 집단의 천연 방사선 내성의 크기 (개수, 정도 또는 둘 다)를 결정하는 것이 필요하다. 구체적인 제품 로딩 패턴이 정립되어야 하고, 흡수된 최소 및 최대 선량 분포가 화학적 선량계의 사용에 의해 결정되어야 한다. (이들 선량계는 보통 흡수된 방사선 에너지의 양을 직접적으로 기준으로 하여 색상 강화를 나타내는 염색된 플라스틱 실린더, 슬라이드 또는 사각형이고, 이들은 주의 깊은 보정이 필요하다.)

바람직한 흡수 선량의 설정은 내성 미생물의 순수한 배양물을 기준으로, 생물학적 지시기로서 예를 들어 바실루스 푸밀루스(Bacillus pumilus)의 포자로 접종된 제품을 이용하여 수행되었다. 분획 실험 주기 접근법은 생물학적 지시기의 D₁₀ 값을 측정하기 위해 이용되는 데이터를 제공한다. 이어서, 이 정보를 흡수된 방사선의 양의 외삽에 적용하여, 적절한 미생물 생존 확률을 정립한다. 감마 방사선 멸균에 대한 가장 최근의 절차는 멸균될 제품에 함유된 천연 이종성 미생물 부담의 방사선 내성에 대한 선량을 기준으로 한다. 이러한 절차가 현재 개선되고 있지만, 특히 유의한 수의 방사선 내성 유기체가 존재하는 경우에는 방사선 내성의 더욱 대표적인 평가를 제공할 수 있다. ⁴ 이들은 표준 내성 유기체, 예컨대 바실루스 푸밀루스로의 접종에서부터 생산 라인으로부터 취한 완성된 제품 샘플의 하위 공정 (준치사성) 선량 노출에 이르기까지 다양하다. 특정한 가설은 이들 모든 방법에 대해 공통된다. 물품에 존재하는 전체 미생물 집단이 일반적으로 방사선에 대한 감도가 상이한 미생물의 혼합물로 구성되지만, 물품을 전체 치사성 멸균 선량보다 적게 처리하는 단계는 덜 내성인 미생물 분획을 제거한다. 이로써, 방사선 내성에 대해 비교적 균질한 잔류 집단이 남게 되고, 잔류 집단을 이용하여 일관성 있고 재현가능한 측정 결과가 수득된다. 실험실 조작에 필요한 양은 이용된 특정 절차에 따라 좌우된다.

이러한 한 절차는 물품의 독립적으로 제작된 로트의 대표적인 샘플 상에서 미생물 집단의 계수를 필요로 한다. 미생물 집단의 내성은 결정되지 않고, 선량 설정은 제조자로부터 및 문헌으로부터 입수한 데이터로부터 유래된, 미생물 집단에 대해 할당된 임의의 표준 방사선 내성을 기준으로 한다. 선택된 내성의 분포는 멸균될 제품 상의 천연 미생물 집단에 비해 더 심각한 챌린지를 나타낸다고 가정한다. 그러나, 상기 가정은 실험에 의해 검증된다. 검증 이후, 적절한 방사선 멸균 선량을 표로부터 판독한다.

또 다른 더욱 정교한 방법은 미생물 집단의 계수를 필요로 하지 않지만, 해당 선량에서 방사선조사된 100개 중 대략 1개의 샘플이 비멸균성이 되도록 정립된 선량을 허용하기 위해 일련의 증분 선량 노출을 이용한다. 이는 궁극적인 멸균 선량이 아니지만, 잔류 미생물-내성 집단을 특성화하는 적절한 내성 인자를 이용하여 100개 중 1개의 비멸균성 샘플을 제공하는 선량으로부터 외삽에 의해 멸균 선량을 결정하는 것에 대한 기준을 제공한다. 결과가 계속해서 작동되는지 체크하기 위해 주기적인 검사를 수행한다.

더 많은 실험을 필요로 하고 미생물 배양물의 단리를 포함하는 더욱 정교한 절차에는 멸균 이하의 선량 (100개 중 1개의 비멸균성 샘플을 수득함)을 결정한 후에, 생존 미생물의 내성을 이용하여 멸균 선량을 결정하는 것이 포함된다. 또 다른 것은 샘플의 50% 이하가 비멸균성이 되게 하는 멸균 이하 증분 선량에서 시작하는 상이한 결정을 기준으로 한다. 이 선량에서 충분한 샘플의 방사선조사 후에, 수많은 미생물 단리물을 수득한다. 이들 각각의 방사선 내성을 결정한다. 이어서, 멸균 용량은 내성 결정 및 초기에 결정된 50% 멸균 선량을 이용하여 계산한다. 기재된 다른 방법들과 마찬가지로 이들 방법에 대해 검사 절차가 필요하다.

필요한 최소 방사선 선량을 결정하고, 상기 선량의 전달을 (화학적 또는 물리적 선량계에 의해) 확인하였으면, 멸균성 보증의 전체 검증 내에서 (여기에는 적용된 선량의 이러한 확인, 생물학적 지시기의 사용 및 다른 수단이 포함될 수 있음) 멸균된 물품의 방출이 실행된다.

여과에 의한 멸균

미생물 보유성 물질을 통한 여과는 함유된 미생물의 물리적 제거에 의해 열-민감성 용액의 멸균을 위해 빈번히 이용된다. 여과기 어셈블리는 일반적으로 불투과성 하우징 내로 밀봉되거나 클램핑된 다공성 매트릭스로 이루어진다. 여과기 매질 또는 물질의 유효성은 다공성 물질의 공극 크기에 따라 좌우되고, 여과기 매트릭스 상에서 또는 내에서 박테리아의 흡수, 및 체질 메카니즘에 따라 좌우될 수 있다. 체질이 상기 메카니즘의 더욱 중요한 성분임을 나타내는 일부 증거가 있다. 특히 석면을 함유하는 섬유-쉐딩 여과기는 대안적인 여과 절차가 가능하지 않는 한 피해야 한다. 섬유-쉐딩 여과기가 필요한 경우에는, 상기 공정이 초기 여과 단계의 하류에서 또는 이후에 도입된 비섬유-쉐딩 여과기를 포함하는 것이 의무적이다.

여과기 등급 - 여과기 막의 공극 크기는, 평균 공극 크기의 측정 및 크기 분포의 제시에 의해서가 아니라, 특정한 균주에 의해 대표되는 크기의 미생물을 보유하는 여과기 막의 능력을 반영하는 명목 등급에 의해 등급화된다. 멸균 여과기 막 (대부분의 오염 미생물을 제거하기 위해 사용되는 것)은 30 psi (2.0 bar) 이상의 압력 하에 막 표면의 평방 센티미터당 슈도모나스 디미누타(Pseudomonas diminuta , ATCC 19146) 균주의 10⁷ 미생물의 배양물 100%를 보유할 수 있는 막이다. 이러한 여과기 막은 제조자의 실무에 따라 명목상 0.22 μm 또는 0.2 μm로 등급화된다. ⁵ 이러한 여과기 막의 등급은 또한 여과에 의해 멸균되어야 하는 시약 또는 배지에 대해 구체화된다 ( 멸균성 시험 <71> 챕터에서 오일 및 오일성 용액 또는 연고 및 크림 하에 이소프로필 미리스테이트의 처리 참조). 큰 미생물만을 보유할 수 있는 박테리아 여과기 막 (분석용 여과기 막으로도 공지됨)은 0.45 μm의 명목 등급으로 표지된다. 0.45-μm 여과기 등급을 위한 권위있는 단일 방법이 명시되지 않았지만, 이 등급은 제조자들의 통상적인 실무에 따라 좌우되고; 0.45-μm 여과기는 세라티아 마르세센스(Serratia marcescens , ATCC 14756) 또는 피에스. 디미누타의 특정한 배양물을 보유할 수 있다. 사용된 시험 압력은 저압 (세라티아에 대해 5 psi, 0.33 bar, 또는 피에스. 디미누타에 대해 0.5 psi, 0.34 bar)에서부터 고압 (50 psi, 3.4 bar)에 이르기까지 다양하다. 이들은 덜 고갈된 미생물 보유가 필요한 멸균 시험에 대해 명시된다 ( 멸균성 시험 <71> 하에 검사될 제품의 멸균성에 대한 시험 섹션에서 막 여과 참조). 작은 미생물만으로 오염된 시험 시편의 확률은 적다. 매우 낮은 명목 등급을 갖는 여과기 막을 7 psi (0.7 bar)의 압력에서 아콜레플라즈마 레이드라위이(Acholeplasma laidlawii)의 배양물 또는 마이코플라즈마(Mycoplasma)의 다른 균주를 사용하여 시험할 수 있고, 명목상 0.1 μm 등급을 가질 수 있다. 등급이 다른 수단에 의해, 예를 들어 다양한 직경의 라텍스 구의 보유에 의해 등급화할 때, 미생물 보유 특성을 기준으로 한 명목 등급이 달라진다. 여과될 제품의 성질에 따라 특정한 목적을 위해 정확한 등급의 여과기를 선택하는 것은 사용자의 책임이다. 일반적으로, 사용자의 정립으로 여과 용량의 시험을 반복하는 것은 실현가능하지 않다. 미생물 챌린지 시험은 바람직하게는 제작된 여과기 막의 각각의 로트에서 제조자의 조건 하에 수행한다.

사용자는 제조에 사용된 여과 파라미터가 미생물 보유 효능에 상당한 영향을 미치는지 여부를 결정해야 한다. 여과 공정의 검증 시에 일부 다른 중요한 고려사항에는 제품 상용성, 약물, 보존제 또는 다른 첨가제의 흡착, 및 초기 유출 내독소 함량이 포함된다.

여과 공정의 유효성이 여과되는 용액의 미생물 부담에 의해서도 영향을 받기 때문에, 여과 절차의 다른 파라미터, 예컨대 압력, 유량, 및 여과기 단위 특성을 정립하는 것 외에도 여과 이전에 용액의 미생물학적 품질을 결정하는 것이 여과 공정의 검증의 중요한 측면이다. 따라서, 여과기 유지 능력을 설명하는 또 다른 방법은 로그 감소 값 (LRV)을 사용하는 것이다. 예를 들어, 명시된 균주의 10⁷ 미생물을 보유할 수 있는 0.2-μm 여과기는 명시된 조건에서 7 이상의 LRV을 가질 것이다.

최근에 여과에 의한 용액의 멸균 공정이 주로 막 여과기 기술의 개발 및 증대의 결과로서 새로운 수준의 숙달을 달성하였다. 이러한 부류의 여과기 매질은 보다 효과적인 표준화 및 품질 관리를 제공하고, 또한 사용 전후에 여과기 어셈블리의 성질 또는 특성을 확인하는 더 많은 기회를 사용자에게 제공한다. 막 여과기가 얇은 중합체성 필름이라는 사실은 여러 이점을 제공하지만, 자기 또는 소결된 물질과 같은 깊은 여과기와 비교 시 일부 단점 또한 제공한다. 대부분의 막 표면은 비어있거나 개방된 공간이기 때문에, 적절히 조립되고 멸균된 여과기는 높은 유량의 이점을 제공한다. 단점은 막이 보통 취약하기 때문에 어셈블리를 적절히 제조하였는지와 조립, 멸균 또는 사용하는 동안 막이 파열되지 않았는지를 결정하는 것이 필수적이라는 것이다. 선택된 하우징 및 여과기 어셈블리는 먼저 사용자에 의해 상용성 및 온전성에 대해 검증되어야 한다. 상이한 제조자에 의해 생산된 어셈블리와 여과기 막을 혼합하는 것이 가능할 수 있지만, 이들 하이브리드 어셈블리의 상용성이 먼저 검증되어야 한다. 추가로, 막 여과기의 제조자에 의해 이루어지는 다른 시험이 있으며, 보통 사용자는 이를 반복하지 않는다. 이들에는 미생물학적 챌린지 시험이 포함된다. 제작된 여과기 막의 각각의 로트에 대한 이들 시험의 결과는 기록을 위해 사용자가 제조자로부터 입수해야 한다.

멸균 공정의 여과는 보통 여과기 표면적의 평방 센티미터당 10⁷ 이상의 슈도모나스 디미누타 (ATCC 번호 19146) 현탁액의 검증된 챌린지를 기준으로 하여 0.2 μm 이하의 명목 공극 크기 등급의 막을 갖는 어셈블리를 이용하여 수행한다. 현재 이용가능한 막 여과기 매질에는 셀룰로스 아세테이트, 셀룰로스 니트레이트, 플루오로카르보네이트, 아크릴 중합체, 폴리카르보네이트, 폴리에스테르, 폴리비닐 클로라이드, 비닐, 나일론, 폴리테프, 및 심지어 금속 막이 포함되고, 이들은 내부 패브릭에 의해 강화 또는 지원될 수 있다. 막 여과기 어셈블리는 사용 전에 초기 온전성에 대해 시험해야 하지만, 단, 이러한 시험이 시스템의 유효성을 손상시키지 않고, 여과기 어셈블리가 전체 여과 절차에 걸쳐 그의 온정성을 유지하였음을 증명하기 위해 여과 공정이 완료된 후에 시험되어야 한다. 전형적인 사용 시험은 버블 포인트 시험, 확산 기류 시험, 압력 유지 시험, 및 순방향 유동 시험이다. 이들 시험은 미생물 보유와 상호 관련이 있어야 한다.

무균 가공

투여 형태로서 최종 충전된 용기 또는 최종 포장된 디바이스의 멸균이 로트에서 미생물 오염의 최소 위험을 보정하는 바람직한 공정이라는 일반적인 합의가 있지만, 최종적으로 멸균되지 않지만 일련의 무균 공정에 의해 제조되는 상당한 부류의 제품이 있다. 이들은 멸균성이거나 또는 중간 공정이 벌크 제품 또는 그의 성분에 생존가능한 미생물이 함유되지 않도록 생존가능한 미생물이 성분으로 도입되는 것을 방지하도록 고안된다. 이 섹션에서는 최종 투여 형태의 완성된 로트에서 미생물 오염의 최소 위험을 갖는 무균적으로 가공된 제품을 생산하는 것에 관한 원칙을 검토한다.

무균적으로 가공된 것으로 정의된 제품은 이 챕터 이전에 기재된 공정 중 하나에 의해 멸균된 성분으로 구성될 수 있다. 예를 들어, 벌크 제품이 여과가능한 액체인 경우 이는 여과에 의해 멸균되었을 수 있다. 최종의 빈 용기 성분은 아마도 열에 의해 멸균될 것이고, 유리 바이알의 경우에는 건열이 이용되고, 고무 폐쇄부의 경우에는 오토클레이브가 이용된다. 중요한 관심 대상인 영역은, 미리 멸균된 성분이 완성된 투여 형태를 생성하기 위한 조립 및 무균 충전 작업 동안에 노출되는 즉각적인 미생물 환경이다.

적절하게 고안, 검증 및 유지된 충전 및 다른 무균 가공 시설에 대한 요건은 주로 (1) 공기 공급 단위의 효과적인 유지를 허용하도록 적절히 고안된, 생존가능한 미생물을 함유하지 않는 공기 환경, 및 (2) 적절히 구비되고 가운을 입은 숙련된 작업자의 제공이다. 원하는 환경은 필요한 미생물학적 품질을 갖는 공기의 전달에 기여하는, 현재 이용가능한 높은 수준의 공기 여과 기술을 통해 달성될 수 있다. ⁶ 시설은 1차 (노출된 물품의 근처) 및 2차 (무균 가공이 수행되는 경우) 장벽 시스템을 포함한다.

적절히 고안된 무균 가공 시설 또는 무균 충전 영역의 경우, 빈번하게 위생 처리될 수 있는 벽 및 천장을 비롯한 비다공성의 평활한 표면; 작업자 및 멸균복의 보관을 위한 적절한 공간을 갖는 탈의실; 작업자를 위한 준비실과 최종 무균 가공실의 적절한 분리, 필요에 따라 에어락 및 에어 샤워와 같은 디바이스를 이용가능함; 방들 사이의 적절한 압력차, 가장 긍정적인 압력은 무균 가공실 또는 영역에 있음; 노출된 제품 또는 성분 및 그에 대한 여과된 공기 노출의 바로 근처에 적절한 공기 변화에 의한 층상 (단방향) 기류의 이용; 적절한 습도 및 온도 환경 제어; 및 문서화된 위생 처리 프로그램과 같은 특징이 고려되어야 한다. 예를 들어 가운, 장갑 및 다른 신체 덮개가 노출된 피부 표면을 실질적으로 덮도록, 위생 및 가운 기술에 대해 작업자를 적절히 숙련시켜야 한다.

무균 공정 및 시설의 인증 및 검증은 여과 시스템의 효율을 정립함으로써, 미생물학적 환경 모니터링 절차를 이용함으로써, 모의 제품으로서 멸균성 배양 배지를 가공함으로써 달성된다.

무균 시설의 모니터링은 주기적인 환경적 여과기 검사, 뿐만 아니라 일상적인 미립자 및 미생물학적 환경 모니터링 및 주기적인 멸균성 배양 배지 가공을 포함해야 한다.

로트의 멸균 시험

취해진 단위의 명시된 개수는 시험 결과의 유용성에 유의한 통계적 한계를 부과하기 때문에, 레퍼리 멸균성 시험은 로트에서 적은 백분율의 완성된 물품에서만 존재할 경우 미생물 오염을 검출할 수 없다는 것을 인식해야 한다. 그러나, 현재의 지식은 로트에서 완성된 모든 물품의 미생물학적 품질을 확인하기 위한 비파괴적인 대안을 제공하지 않기 때문에 이러한 고유의 한계를 인정해야 하며, 시편의 개수를 상당히 증가시키는 것은 실현가능한 선택사항이 아니다.

멸균성인 것으로 지칭되는 완성된 물품의 로트가 규격을 충족한다는 청구를 뒷받침하는 주요 수단은 실제 생산의 문서화, 및 로트의 멸균 기록, 및 멸균 공정이 정립된 제품 미생물 부담 또는 더 내성인 챌린지를 완전히 불활성화시키는 능력을 갖는다는 추가의 검증 기록으로 구성된다. 추가로, 멸균 절차 이후 노출된 제품과 관련된 임의의 가공 단계를 오염 방지를 위해 무균 방식으로 수행하는 것을 입증해야 한다. 제조 공정 멸균성 보증 검증 연구로부터 및 공정 과정의 제어로부터 유래된 데이터로부터, 로트가 오염된 단위를 함유할 가능성이 낮음을 (해당 로트로부터 배출된 완성된 단위로부터의 멸균 시험 결과와 비교함) 더 크게 보증한다고 판단되는 경우에는, 채택된 임의의 멸균성 시험 절차는 최소일 수 있거나 또는 일상적인 기준으로 처리될 수 있다. 그러나, 상기 모든 생성 기준이 충족되었다고 가정하면, 완성된 물품의 로트의 샘플에 대해 멸균 시험을 수행하는 것이 여전히 바람직할 수 있다. 이러한 멸균 시험은 보통 최종 제품 품질 관리 시험으로서 로트가 제작된 직후에 수행된다. ⁷ 제어에 있어서 이러한 방식으로 이용된 멸균성 시험을 멸균성 시험 <71> 하에 기재된 것과 혼동하지 않아야 한다. 매질, 접종물 및 시편 취급과 관련하여 상세한 절차는 동일할 수 있지만, 시험을 위해 선택된 단위의 개수 및/또는 인큐베이션 시간은 다를 수 있다. 상기 개수는 제공될 목적에 따라, 즉, 제조 시 멸균성 보증을 위해 모든 측정의 맥락에서 멸균 시험에 대한 의존성이 더 큰지 더 적은지 여부에 따라 선택되어야 한다. 또한, 보다 긴 인큐베이션 시간은 시험이 느린 성장 미생물에 대해 더 민감성이게 만든다. 배지를 위한 성장 촉진 시험에서, 이러한 느린 성장 미생물이 특히 제품 미생물 부담으로부터 단리된 경우 이는 다른 시험 균주에 포함되어야 한다. 부정적인 또는 만족스러운 멸균성 시험 결과는, 로트의 모든 생산 기록이 정리되고 멸균 또는 무균 공정이 효과적인 것으로 공지된 경우에, 로트의 품질에 관한 기존 증거를 추가로 뒷받침하는 역할만을 한다. 그러나, 제조 품질 관리에서 만족스럽지 않은 시험 결과는 추가의 조치가 필요함을 나타낸다 (성능, 관찰 및 해석 참조).

멸균성 시험 목적을 위한 로트의 정의 및 시편의 선택

물품은 챔버에서 또는 연속식 공정에서 최종적으로 멸균될 수 있다. 챔버 공정에서는, 수많은 물품을 제어된 조건 하에 예를 들어 증기 오토클레이브에서 동시에 멸균시켜, 멸균 시험의 목적을 위해 로트가 단일 챔버의 내용물로서 고려된다. 연속식 공정에서는, 물품을 개별적으로 연속하여 (예를 들어 전자 빔 방사선에 노출시킴으로써) 멸균시켜, 로트가 24시간 이하 동안 균일하게 멸균시킨 유사한 품목의 총 개수보다 많지 않은 것으로 고려된다.

무균 충전의 경우, 용어 "충전 작업"은 충전 어셈블리의 온전성에 영향을 미치는 중단 또는 변화없이 연속 24시간 이내에 동일한 벌크로부터 동일한 제품으로 무균적으로 충전된, 모든 관점에서 동일한 최종 용기의 그룹을 기재한다. 시험된 품목은 각각의 충전 어셈블리를 대표해야 하고, 전체 충전 작업을 통해 적절한 간격으로 선택되어야 한다. 단일 로트의 충전을 위해 각각 단일 또는 다중 충전 스테이션을 갖는 3개 초과의 충전 기계가 사용되는 경우, 최소 20개의 충전된 용기 (매질당 10개 이상)를 각각의 충전 기계에 대해 시험해야 하지만, 일반적으로 전체 개수가 100개 용기를 초과할 필요는 없다.

소형 로트의 경우, 무균 충전 또는 최종 멸균의 경우에, 로트에서 최종 용기의 개수가 20 내지 200개인 경우에는, 보통 용기 중 약 10%를 시험해야 한다. 로트에서 용기의 개수가 20개 이하인 경우에는, 2개 이상의 최종 용기를 시험해야 한다.

성능, 관찰 및 해석

멸균 시험을 위한 시설은 무균 가공 생산 시설에 비해 시험되는 물품에 대한 더 많은 미생물 챌린지를 제공하지 않아야 한다. 멸균 시험 절차는 높은 수준의 무균 기술이 숙련된 사람에 의해 수행되어야 한다. 이들의 시험 성능 기록은 문서화되어야 한다.

멸균 시험을 수행하기 위해 필요한 광범위한 무균 조작은 10^-3 정도의 확률로 제품과 관련이 없는 오염을 나타낼 수 있고, 이는 무균 작업의 전체 효율과 유사하고 무균적으로 가공된 물품의 미생물 생존 확률에 필적하는 수준이다. 이 수준의 확률은 보통 최종 멸균 공정에서 기인하는 것보다 훨씬 더 크며, 즉 1백만분의 1 또는 10 ^-6 미생물 생존 확률이다. 적절하게 멸균성인 것으로 알려진 완성된 물품은 시험 절차의 신뢰성에 대한 체크를 위해 음성 대조군으로서 주기적으로 사용되어야 한다. 바람직하게는, 시험을 수행하는 기술자는 그들이 음성 대조군을 시험하는지 몰라야 한다. 이들 시험에서, 허위 양성 빈도가 2%를 초과하지 않는 것이 바람직하다.

무균적으로 가공된 물품의 경우, 이러한 사실은 멸균성 시험 <71> 또는 보다 정교한 시험 하에 나타낸 시험의 일상적인 이용을 뒷받침한다. 생산 및 검증 문서화는 허용가능하고 완전해야 한다. 그러나, 효과적으로 최종 멸균된 제품의 경우, 보다 낮은 미생물 생존 확률은 멸균성 시험 <71> 하에 명시된 공정서의 절차에 비해 덜 광범위한 시험의 이용을 지시할 수 있거나 또는 심지어 이를 수행할 필요성을 배제할 수 있다. 이러한 최종 멸균의 멸균성 보증에 대해 추가된 신뢰는 적절히 검증되고 문서화된 멸균 공정에 따라 좌우된다. 멸균성 시험 단독은 대체되지 않는다.

품질 관리 시험의 해석 - 시험 단위의 작업에 대한 전반적인 책임 및 로트의 허용 또는 거부와 관련하여 시험 결과의 해석은, 미생물학에서 적절히 공식적으로 숙련되고, 샘플링과 관련하여 산업적인 멸균, 무균 가공 및 통계학적 개념의 지식을 가진 사람들의 손에 있어야 한다. 이 사람들은 공기의 미생물학적 품질 및 중요한 작업 표면이 일관되게 허용가능함을 보장하기 위해 시험 시설에서 환경 제어 프로그램에 관한 지식 또한 갖고 있어야 한다.

품질 관리 멸균성 시험 (공식 심사 시험 또는 변형된 시험에 따라)은 허위 양성 결과를 배제하기 위해 2개의 별도의 단계에서 수행할 수 있다. 첫번째 단계. 이용된 샘플링 계획과 무관하게, 미생물 성장에 대한 증거가 확인되지 않으면, 시험 결과는 로트 고유의 오염이 없음을 나타낼 수 있다.

미생물 성장이 확인되면, 두번째 단계를 진행한다 (첫번째 단계 시험이 무효하지 않은 경우). 첫번째 단계 시험으로서 이를 반복하기 위해 첫번째 단계 시험의 무효에 대한 증거는 시험 환경 및 그와 관련된 기록을 검토하여 얻을 수 있다. 음성 대조군에서 미생물 성장의 확인이 첫번째 단계 시험의 무효에 대한 유일한 근거로 고려될 필요는 없다. 두번째 단계를 진행할 때, 특히 로트 방출에 대한 시험 결과에 따라, 모든 적용가능한 생산 및 제어 기록에 대한 완전한 검토를 시작하고 문서화한다. 이 검토에서, 하기 사항을 고려해야 한다: (1) 제품에 적용가능한 검증된 멸균 주기의 모니터링 기록에 대한 체크, (2) 완성된 샘플 및 공정 과정의 샘플 둘 다에 대해 특정한 제품과 관련된 멸균성 시험 이력, 뿐만 아니라 지원 장비, 용기/폐쇄부, 및 멸균성 성분 (있는 경우)의 멸균 기록, 및 (3) 환경적 제어 데이터, 예컨대 배지 충전물로부터 수득된 것, 노출 플레이트, 여과 기록, 작업자, 가운, 장갑 및 의복 실무에 대한 임의의 위생 처리 기록 및 미생물 모니터링 기록.

상기 검토로부터 어떠한 단서도 찾을 수 없다면, 제품의 현행 미생물 프로파일을 가능한 변화에 대한 공지된 이력 프로파일에 대해 체크해야 한다. 기록은 원인이 될 수 있는 제품 성분의 공급원 또는 가공 과정의 절차에서의 임의의 변화에 대해 함께 체크되어야 한다. 결과에 따라, 극단적인 경우에는, 전체 제조 공정의 재검증이 고려되어야 할 수 있다. 두번째 단계의 경우, 시험에 사용하기 위한 시편의 특정한 개수를 명시하는 것이 가능하지 않다. 보통은, 멸균성 시험 <71> 하에 첫번 째 단계에 대해 명시된 개수 또는 다른 합리적인 개수의 두배를 선택한다. 각각의 시편으로부터 시험한 최소 부피, 배지 및 인큐베이션 기간은 첫번째 단계에 대해 나타낸 것과 동일하다.

두번째 단계에서 미생물 성장이 확인되지 않고, 적절한 기록의 문서화된 검토 및 지정된 제품 조사가 고유의 오염 가능성을 뒷받침하지 않는 경우, 로트는 멸균성 시험의 요건을 충족할 수 있다. 성장이 확인되면, 로트는 시험 요건을 충족하는데 실패한다. 첫번째 단계 시험에 대해 나타낸 바와 같이, 두번째 단계 시험은 적절한 증거를 이용하여 유사하게 무효화될 수 있고, 그러한 경우 두번째 단계 시험으로서 반복될 수 있다.

¹ 특히 멸균 주기 및 관련 주제의 개발 및 검증과 관련된 수많은 지침이 공개되어 있다. 이에는 Parenteral Drug Association, Inc. (PDA), Validation of Steam Sterilization Cycles (Technical Monograph No. 1), Validation of Aseptic Filling for Solution Drug Products (Technical Monograph No. 2), and Validation of Dry Heat Processes Used for Sterilization and Depyrogenation (Technical Monograph No. 3); 및 Pharmaceutical Manufacturers Association (PMA), Validation of Sterilization of Large-Volume Parenterals ―Current Concepts (Science and Technology Publication No. 25)가 있다. Health Industry Manufacturers Association (HIMA)에 의한 이들 연구에 대한 다른 기술 공보의 시리즈에는 Validation of Sterilization Systems (Report No. 78-4.1), Sterilization Cycle Development (Report No. 78-4.2), Industrial Sterility: Medical Device Standards and Guidelines (Document #9, Vol. 1), 및 Operator Training . . . . for Ethylene Oxide Sterilization, for Steam Sterilization Equipment, for Dry Heat Sterilization Equipment, and for Radiation Sterilization Equipment (Report Nos. 78-4.5 through 4.8)가 있다. Association for the Advancement of Medical Instrumentation (AAMI)에 의해 공개된 권고된 실무 지침에는 Guideline for Industrial Ethylene Oxide Sterilization of Medical Devices―Process Design, Validation, Routine Sterilization (No. OPEO-12/81) 및 Process Control Guidelines for the Radiation Sterilization of Medical Devices (No. RS-P 10/82)가 있다. 이들 상세한 공보는 이 챕터에 기재된 원칙 및 절차의 더욱 광범위한 처리를 위해 상의되어야 한다.

² 매질 또는 시약에 대해 공정서에 명시된 오토클레이브 주기는 달리 나타내지 않는다면 121°에서 15분 동안이다.

³ Ethylene Oxide, Encyclopedia of Industrial Chemical Analysis, 1971, 12, 317-340, John Wiley & Sons, Inc., and Use of Ethylene Oxide as a Sterilant in Medical Facilities, NIOSH Special Occupational Hazard Review with Control Recommendations, August 1977, U. S. Department of Health and Human Services, Public Health Service, Centers for Disease Control and Prevention, National Institute for Occupational Safety and Health, Division of Criteria Documentation and Standards Development, Priorities and Research Analysis Branch, Rockville, MD를 참조한다.

⁴ 이들 절차의 상세한 기재는 Association for the Advancement of Medical Instrumentation (AAMI)에 의해 Process Control Guidelines for Radiation Sterilization of Medical Devices (No. RS-P 10/82)의 표제를 갖는 문서로 공개되어 있다.

⁵ "Microbiological Evaluation of Filters for Sterilizing Liquids," Health Industry Manufacturers Association, Document No. 3, Vol. 4, 1982를 참조한다.

⁶ 이러한 제어된 작업 영역에 대해 입수가능한 공개된 표준에는 하기가 포함된다: (1) Federal Standard No. 209B, Clean Room and Work Station Requirements for a Controlled Environment, Apr. 24, 1973. (2) NASA Standard for Clean Room and Work Stations for Microbially Controlled Environment, publication NHB5340.2, Aug. 1967. (3) Contamination Control of Aerospace Facilities, U.S. Air Force, T.O. 00-25-203, 1 Dec. 1972, change 1-1, Oct. 1974.

⁷ 방사능 의약품 - 급속한 방사능 붕괴 때문에, 멸균성 시험을 완료하기 위해 일부 방사능 의약품의 방출 지연이 실현될 수 없다. 이러한 경우, 멸균 시험의 결과는 멸균성 보증에 대한 소급적인 확인 결과만을 제공하고, 따라서 제조 및 검증/인증 절차에서 정립된 주요 수단에 따라 좌우된다.

부가 정보 - Staff Liaison : Radhakrishna S Tirumalai , Ph .D., Scientist

Expert Committee : (MSA05) Microbiology and Sterility Assurance

USP31 -NF26 Page 670

Pharmacopeial Forum : Volume No. 30(5) Page 1729

Phone Number : 1-301-816-8339

<71> 멸균성 시험

^◆ 이 챕터의 일부는 유럽 약전 및/또는 일본 약전의 상응하는 내용과 일치하였다. 일치하지 않는 부분에 대해서는 이 사실을 명시하기 위해 기호 (^◆ _◆)로 표시하였다._◆

멸균성인 것으로 지칭되는 약전 물품이 멸균성 시험에 관한 개별 논문에 설명된 요건에 부합하는지 여부를 결정하기 위해 적용가능하다. 약전 물품은 제품의 성질이 가능한 경우 검사될 제품의 멸균성에 대한 시험 하에 막 여과 방법에 의해 시험해야 한다. 막 여과 기술이 적합하지 않은 경우에는, 검사될 제품의 멸균성에 대한 시험 하에 배양 배지의 직접 접종 방법을 이용한다. 멸균성 표지된 경로를 갖는 디바이스를 제외한 모든 디바이스는 배양 배지의 직접 접종 방법을 이용하여 시험한다. 관찰 및 결과의 해석 하에 재시험에 대한 조항이 포함되어 있다.

멸균 시험은 매우 정확한 절차이기 때문에, 결과의 정확한 해석을 보장하기 위해 절차의 무균성이 보장되어야 하는 경우에는, 인력이 적절히 숙련되고 자격을 갖추는 것이 중요하다. 멸균성 시험은 무균 조건 하에 수행된다. 이러한 조건을 달성하기 위해, 시험 환경은 멸균성 시험이 수행되는 방식으로 조정되어야 한다. 오염을 피하기 위해 취해진 조치는 이들이 시험에서 밝혀질 임의의 미생물에 영향을 미치지 않도록 하는 것이다. 시험이 수행되는 작업 조건은 작업 영역의 적절한 샘플링에 의해 및 적절한 제어를 수행함으로써 정기적으로 모니터링한다.

이들 약전 절차 자체는 제품의 배치가 멸균성이거나 멸균된 것임을 보장하기 위해 고안된 것은 아니다. 이는 주로 멸균 공정 또는 무균 가공 절차의 검증에 의해 수행된다.

물품에서 미생물 오염의 증거가 적절한 약전 방법에 의해 수득되는 경우, 상이한 결과가 대안적인 절차에 의해 수득되더라도, 그렇게 수득된 결과는 물품이 멸균성에 대한 시험의 요건을 충족하는데 실패하였다는 결정적인 증거이다. ^◆멸균 시험에 대한 추가의 정보에 대해서는 공정서 물품의 멸균화 및 멸균성 보증 <1211>을 참조한다._◆

배지

하기 기재된 시험을 위해 배지를 제조하거나, 또는 제조자 또는 분배자에 의해 지시된 바와 같이 재구성되는 경우 이들이 호기성균 , 혐기성균 및 진균의 성장 촉진 시험의 요건을 충전시키는 한, 탈수된 제형을 이용할 수 있다. 배지는 검증된 공정을 이용하여 멸균된다.

하기 배양 배지는 멸균성 시험에 적합한 것으로 확인되었다. 유체 티오글리 콜레이트 배지는 주로 혐기성 박테리아의 배양을 위해 의도된다. 그러나, 이는 호기성 박테리아 또한 검출할 것이다. 대두 -카세인 소화물 배지는 진균 및 호기성 박테리아 둘 다의 배양에 적합하다.

유체 티오글리콜레이트 배지

L-시스틴, 염화나트륨, 덱스트로스, 효모 추출물, 및 카세인의 췌장 소화물을 정제수와 혼합하고, 용액이 될 때까지 가열한다. 용액 중에 나트륨 티오글리콜레이트 또는 티오글리콜산을 용해시키고, 필요에 따라 1 N 수산화나트륨을 첨가하여, 멸균 이후 용액은 7.1 ± 0.2의 pH를 가질 것이다. 여과가 필요한 경우에는, 끓이지 않고 용액을 다시 가열하고, 습윤된 여과지를 통해 뜨거운 동안 여과한다. 레자주린 나트륨 용액을 첨가하고, 혼합하고, 인큐베이션 기간 마지막에 배지의 상부 절반 이하가 산소 흡수의 지표인 색상 변화를 나타내도록 배지의 표면 대 깊이의 비를 제공하는 적합한 통에 배지를 넣는다. 검증된 공정을 이용하여 멸균시킨다. 배지를 보관하는 경우, 2° 내지 25°의 온도에서 멸균성 기밀 용기에 보관한다. 배지의 상부 1/3 초과가 분홍색을 나타낸 경우, 분홍색이 사라질 때까지 수조에서 또는 자유 유동성 증기에서 용기를 가열함으로써 및 용기로 비멸균성 공기의 도입이 방지되도록 주의하면서 신속히 냉각시킴으로써 배지를 다시 보관할 수 있다.

유체 티오글리콜레이트 배지를 32.5 ± 2.5°에서 인큐베이션한다.

^◆대안적인 티오글리콜레이트 배지

유체 티오글리콜레이트 배지와 동일한 조성을 갖지만, 아가 및 레자주린 나트륨 용액은 제외된 혼합물을 제조하고, 상기 지시된 바와 같이 멸균시키고, 사용하기 전에 냉각시킨다. 멸균 이후 pH는 7.1 ± 0.2이다. 인큐베이션 기간 동안 혐기성 조건 하에 인큐베이션한다.

대안적인 유체 티오글리콜레이트 배지를 32.5 ± 2.5°에서 인큐베이션한다._◆

대두-카세인 소화물 배지

고체를 정제수에 용해시키고, 용액이 되도록 약간 가열한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 1 N 수산화나트륨에 의해 pH를 조정하여, 멸균 이후 7.3 ± 0.2의 pH를 가질 것이다. 필요한 경우 여과하여, 투명하게 하고, 적합한 용기에 분배하고, 검증된 절차를 이용하여 멸균시킨다. 즉시 사용으로 의도된 것이 아니라면 2° 내지 25°의 온도에서 멸균성 밀폐 용기에 보관한다.

대두-카세인 소화물 배지를 22.5 ± 2.5°에서 보관한다.

^◆페니실린 또는 세팔로스포린을 위한 배지

멸균성 시험 배지를 검사될 제품의 멸균성에 대한 시험 하에 배양 배지의 직접 접종 방법에서 사용하는 경우, 유체 티오글리콜레이트 배지 및 대두-카세인 소화물 배지의 제제를 다음과 같이 변형시킨다. 각각의 배지의 용기에 시험 하에 시편 중 항생제의 양을 불활성화시키는데 충분한 양의 β-락타마제를 무균적으로 전달한다. 페니실린- 또는 세팔로스포린-불활성화 능력에 대해 이전에 검정된 β-락타마제 제제를 이용하여 항생제를 불활성화시키기 위해 필요한 β-락타마제의 양을 결정한다. [비고 - 보충된 β-락타마제 배지는 막 여과 시험에서도 사용될 수 있다.]

대안적으로 (멸균 시험을 위해 사용된 것과 완전히 분리된 영역에서), 검증 시험 하의 방법에 따라 챌린지로서 100 미만의 콜로니-형성 단위 (cfu)의 스타필로코쿠스 아우레우스 ( 표 1 참조)를 사용하여 적절한 양의 β-락타마제가 배지에 도입되었는지를 확인한다. 접종된 배양물의 전형적인 미생물 성장은 β-락타마제 농도가 적절하다는 확인으로서 관찰되어야 한다._◆

표 1. 성장 촉진 시험 및 검증 시험에 사용하기에 적합한 시험 미생물의 균주

적합성 시험

사용된 배지는 검사될 제품에 대한 시험 이전에 또는 동시에 수행되는 하기 시험을 준수해야 한다.

멸균성

명시된 인큐베이션 온도에서 14일 동안 배지의 일부를 인큐베이션함으로써 배지의 각각의 멸균된 배치의 멸균성을 확인한다. 미생물의 성장이 일어나지 않는다.

호기성균, 혐기성균 및 진균의 성장 촉진 시험

미리 제조된 배지의 각각의 로트, 및 탈수된 배지로부터 또는 성분으로부터 제조된 배지의 각각의 배치를 시험한다 ^{◆ 1} _◆. 미생물의 적합한 균주는 표 1 에 나타내었다.

하기 종의 미생물 각각에 대한 배지의 별도의 부분을 이용하여 유체 티오글 리콜레이트 배지의 일부를 소량의 (100 cfu 이하) 하기 미생물과 함께 인큐베이션한다: 클로스트리디움 스포로게네스(Clostridium sporogenes), 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 및 스타필로코쿠스 아우레우스. ^◆ 대안적인 유체 티오글리콜레이트 배지의 일부를 소량의 (100 cfu 이하) 클로스트리디움 스포로게네스와 함께 인큐베이션한다._◆ 하기 종의 미생물 각각에 대한 배지의 별도의 부분을 이용하여 대두-카세인 소화물 배지의 일부를 소량의 (100 cfu 이하) 하기 미생물과 함께 인큐베이션한다: 아스페르길루스 니거(Aspergillus niger), 바실루스 서브틸리스, 및 칸디다 알비칸스(Candida albicans). 박테리아의 경우 3일 이하 동안 및 진균의 경우 5일 이하 동안 인큐베이션한다.

미생물의 명백한 가시적인 성장이 일어나는 경우 배지는 적합한 것이다.

^◆보관

제조된 배지를 밀봉되지 않은 용기에 보관하는 경우, 배지가 사용 시점의 2주 이내에 성장 촉진에 대해 시험되고, 발색 지시기 요건이 충족된다면, 이를 1개월 동안 사용할 수 있다. 밀폐된 용기에 보관하는 경우, 배지가 사용 시점의 3개월 이내에 성장 촉진에 대해 시험되고, 발색 지시기 요건이 충족된다면, 이를 1년 동안 사용할 수 있다._◆

^◆ 막 여과를 위한 유체의 희석 및 세정

유체 A

제제

동물 조직의 펩신 소화물 1 g을 물에 용해시켜 1 L로 만들고, 필요에 따라 투명하게 하기 위해 여과하거나 원심분리하고, pH를 7.1 ± 0.2로 조정한다. 용기에 분배하고, 검증된 공정을 이용하여 멸균시킨다.

페니실린 또는 세팔로스포린을 위한 제제

필요에 따라, 시험 시편의 용액을 여과한 후에 막 상의 임의의 잔류 항생제 활성을 불활성화시키는데 충분한 양의 멸균성 β-락타마제를 상기 제제에 무균적으로 첨가한다 (페니실린 또는 세팔로스포린을 위한 배지 참조).

유체 D

각각의 L의 유체 A에 1 mL의 폴리소르베이트 80을 첨가하고, pH를 7.1 ± 0.2로 조정하고, 용기에 분배하고, 검증된 공정을 이용하여 멸균시킨다. 레시틴 또는 오일을 함유하는 물품의 경우 또는 "멸균성 경로"로 표지된 디바이스의 경우 이 유체를 사용한다.

유체 K

동물 조직의 펩신 소화물 5.0 g, 소 추출물 3.0 g, 및 폴리소르베이트 80 10.0 g을 물에 용해시켜 1 L로 만든다. pH를 조정하여, 멸균 이후 6.9 ± 0.2의 pH를 수득한다. 용기에 분배하고, 검증된 공정을 이용하여 멸균시킨다._◆

검증 시험

하기 변형을 제외하고는 정확히 동일한 방법을 이용하여 검사될 제품의 멸균성에 대한 시험 하에 하기 기재된 바와 같이 시험을 수행한다.

막 여과

시험할 용기 또는 용기들의 내용물을 막에 전달한 후, 소량의 생존가능한 미생물 (100 cfu 이하)의 접종물을 여과기를 세정하기 위해 사용된 멸균 희석제의 최종 부분에 첨가한다.

직접 접종

(장선 및 수의학적 용도의 다른 수술용 봉합사: 가닥의 경우) 시험할 용기 또는 용기들의 내용물을 배양 배지에 전달한 후, 소량의 생존가능한 미생물 (100 cfu 이하)의 접종물을 배지에 첨가한다.

두 경우 모두, 호기성균 , 혐기성균 및 진균의 성장 촉진 시험 하에 상기 기재된 것과 동일한 미생물을 사용한다. 양성 대조군으로서 성장 촉진 시험을 수행한다. 배지 함유 용기 모두를 5일 이하 동안 인큐베이션한다.

인큐베이션 후에 미생물의 명백한 가시적인 성장이 제품이 없는 대조군 통과 가시적으로 비교 시 유사하게 수득되는 경우, 제품은 시험 조건 하에 항미생물 활성을 갖지 않거나, 또는 이러한 활성이 만족스럽게 제거되었다. 이어서, 멸균성 시험을 추가의 변형없이 수행할 수 있다.

시험될 제품의 존재 하에 명백히 가시적인 성장이 제품이 없는 대조군 통과 가시적으로 비교 시 수득되지 않는 경우, 제품은 시험 조건 하에 만족스럽게 제거되지 않은 항미생물 활성을 갖는다. 항미생물 활성을 제거하기 위해 조건을 변형하고, 검증 시험을 반복한다.

이 검증은 (a) 멸균성 시험을 새로운 제품에 대해 수행해야 할 때, 및 (b) 시험의 실험 조건이 변화되었을 때마다 수행된다. 검증은 검사될 제품의 멸균성에 대한 시험과 동시에 수행될 수 있다.

검사될 제품의 멸균성에 대한 시험

^◆시험될 물품의 개수

이 챕터 또는 개별 논문에서 달리 명시되지 않는다면, 표 3 에 명시된 개수의 물품을 시험한다. 각 물품의 함량이 충분한 양을 갖는 경우 ( 표 2 참조), 동등한 적절한 분량이 명시된 각 배지에 첨가되도록 이들을 분배할 수 있다. [비고 - 명시된 배지 중 2가지 이상을 이용하는 멸균 시험을 수행한다.] 각 물품이 각 배지에 대해 충분한 양을 함유하지 않는 경우, 표 3 에 나타낸 물품 개수의 2배를 사용한다._◆

표 2. 각 배지에 대해 사용될 최소량

표 3. 배치에서 물품의 개수와 관련하여 시험될 물품의 최소 개수

막 여과 기술을 이용하여 또는 검사될 제품으로 배양 배지의 직접 접종에 의해 시험을 수행할 수 있다. 적절한 음성 대조군이 포함된다. 막 여과 기술은 제품의 성질이 가능할 때마다 이용하며, 즉, 여과가능한 수성 제제, 알콜성 또는 오일성 제제, 및 수성 또는 오일성 용매와 혼화성인 또는 그에 가용성인 제제의 경우에 이용하되, 단, 이들 용매는 시험 조건에서 항미생물 효과를 갖지 않는다.

막 여과

미생물을 유지하는 유효성이 정립된, 0.45 μm 이하의 명목 공극 크기를 갖는 막 여과기를 사용한다. 셀룰로스 니트레이트 여과기는 예를 들어 수성, 오일성 및 약한 알콜성 용액에 대해 사용되고, 셀룰로스 아세테이트 여과기는 예를 들어 강한 알콜성 용액에 대해 사용된다. 특별히 적용된 여과기는 특정한 제품 (예를 들어, 항생제)에 대해 필요할 수 있다.

하기 기재된 기술은 직경이 약 50 mm인 막을 사용할 것을 가정한다. 상이한 직경을 갖는 여과기를 사용하는 경우에는, 희석액 및 세척액의 부피를 그에 따라 조정해야 한다. 여과 장치 및 막을 적절한 수단에 의해 멸균시킨다. 장치는 검사될 용액을 도입하여 무균 상태 하에 여과될 수 있도록 고안되고, 이는 배지로의 전달을 위해 막의 무균 전달을 허용하거나, 또는 배지를 장치 자체에 첨가한 후에 인큐베이션을 수행하는데 적합하다.

수용액

적절한 경우, 소량의 적합한 멸균 희석제, 예컨대 ^◆ 유체 A (막 여과를 위한 희석 및 세정 유체 참조)_◆를 장치 및 여과기에서 막 상에 전달한다. 희석제는 예를 들어 항생제의 경우에 적합한 중화 물질 및/또는 적절한 불활성화 물질을 함유할 수 있다.

필요에 따라, 선택된 멸균 희석제를 이용하여 검증 시험에 사용된 부피로 희석시킨 후에 시험될 용기 또는 용기들의 내용물을 막 또는 막들에 전달하지만, 표 2 및 3 에 기재된 검사될 제품의 양 이상을 사용한다. 즉시 여과한다. 제품이 항미생물 특성을 갖는 경우, 매번 검증 시험에 사용된 선택된 멸균 희석제의 부피를 여과함으로써 3회 이상 막을 세척한다. 심지어 검증하는 동안 세척 주기가 항미생물 활성을 완전히 제거하지 않는 것으로 입증되었더라도, 5회 200 mL의 세척 주기를 초과하지 않는다. 전체 막을 배양 배지에 전달하고, 2개의 동일한 부분으로 무균적으로 절단하고, 2개의 적합한 배지에 절반씩 전달하였다. 검증 시험에서와 같이 동일한 부피의 각각의 배지를 사용한다. 대안적으로, 배지를 장치의 막 상에 전달한다. 배지를 14일 이상 동안 인큐베이션한다.

가용성 고체 (항생제 제외)

각각의 배지에 대해 적합한 용매, 예컨대 ^◆ 유체 A (막 여과를 위한 희석 및 세정 유체 참조)_◆ 중에 희석된 제품의 표 2 및 3 에 기재된 양 이상을 사용하고, 선택된 용매에 적절한 막을 이용하여 수용액에 대해 상기 기재된 바와 같이 시험을 진행한다.

오일 및 오일성 용액

각각의 배지에 대해 표 2 및 3 에 기재된 검사될 제품의 양 이상을 사용한다. 충분히 낮은 점도를 갖는 오일 및 오일성 용액을 희석하지 않고 건조 막을 통해 여과할 수 있다. 점성 오일은 필요에 따라 적합한 멸균 희석제, 예컨대 시험 조건에서 항미생물 활성을 갖지 않는 것으로 확인된 이소프로필 미리스테이트로 희석할 수 있다. 오일을 그 자신의 중량에 의해 막을 통과하게 한 다음, 압력 또는 흡인을 서서히 적용하여 여과한다. 시험의 검증에 적합한 것으로 확인된 농도로 적합한 유화제, 예를 들어 10 g/L의 폴리소르베이트 80 ^◆(유체 K)_◆을 함유하는 적합한 멸균 희석제, 예컨대 ^◆ 유체 A (막 여과를 위한 희석 및 세정 유체 참조)_◆ 약 100 mL를 매번 여과함으로써 막을 적어도 3회 세척한다. 수용액에 대해 상기 기재된 바와 같이 막 또는 막들을 배양 배지 또는 배지들에 전달하거나, 그 반대로 전달하고, 동일한 온도에서 동일한 시간 동안 인큐베이션한다.

연고 및 크림

각각의 배지에 대해 표 2 및 3 에 기재된 검사될 제품의 양 이상을 사용한다. 지방 베이스 중의 연고 및 유중수 유형의 에멀젼을 상기 기재된 바와 같이 이소프로필 미리스테이트 중에서 1%로 희석할 수 있고, 필요에 따라 40° 이하로 가열할 수 있다. 예외적인 경우, 44° 이하로 가열할 필요가 있을 수 있다. 가능한 한 신속히 여과하고, 오일 및 오일성 용액에 대해 상기 기재된 바와 같이 진행한다.

^◆미리 충전된 시린지

부착된 멸균 니들이 없는 미리 충전된 시린지의 경우, 전달하기 전에 각 시린지의 내용물을 하나 또는 두개의 별도의 막 여과기 깔때기로 또는 별도의 풀링 통으로 배출시킨다. 별도의 멸균 니들이 부착된 경우, 시린지 내용물을 상기 나타낸 바와 같이 바로 배출시키고, 수용액에 대해 지시된 바와 같이 진행한다. 니들의 멸균성을 검증 시험 하의 직접 접종을 이용하여 시험한다.

항생제 이외의 주사용 고체

라벨 상에 지시된 바와 같이 시험 물품을 구성하고, 수용액 또는 오일 및 오일성 용액 중 적용되는 것에 대해 지시된 바와 같이 진행한다. [비고 - 필요한 경우, 과량의 희석제를 첨가하여 구성된 시험 물품의 구성 및 여과를 보조할 수 있다.]

주사용 항생제 고체

약국 벌크 패키지, < 5 g - 각각의 20개의 용기로부터 약 300 mg의 고체를 멸균성 500-mL 삼각 플라스크에 무균적으로 전달하고, 약 200 mL의 유체 A (막 여과를 위한 희석 및 세정 유체 참조)에 용해시키고, 혼합하거나; 또는 라벨에 표시된 바와 같이 각각의 20개의 용기를 구성하고, 약 300 mg의 고체에 해당하는 양의 액체 또는 현탁액을 멸균성 500-mL 삼각 플라스크에 전달하고, 약 200 mL의 유체 A에 용해시키고, 혼합한다. 수용액 또는 오일 및 오일성 용액 중 적용되는 것에 대해 지시된 바와 같이 진행한다.

약국 벌크 패키지, ≥5 g - 각각의 6개의 용기로부터 약 1 g의 고체를 멸균성 500-mL 삼각 플라스크에 무균적으로 전달하고, 약 200 mL의 유체 A에 용해시키고, 혼합하거나; 또는 라벨에 표시된 바와 같이 각각의 6개의 용기를 구성하고, 약 1 g의 고체에 해당하는 양의 액체를 멸균성 500-mL 삼각 플라스크에 전달하고, 약 200 mL의 유체 A에 용해시키고, 혼합한다. 수용액에 대해 지시된 바와 같이 진행한다.

항생제 고체, 벌크 및 블렌드

적절한 양의 용기로부터 충분한 양의 고체를 무균적으로 제거하고 ( 표 2 참조), 혼합하여 약 6 g의 고체에 해당하는 복합체를 수득하고, 멸균성 500-mL 삼각 플라스크에 전달한다. 약 200 mL의 유체 A에 용해시키고, 혼합한다. 수용액에 대해 지시된 바와 같이 진행한다.

멸균성 에어로졸 제품

가압식 에어로졸 형태의 유체 제품의 경우, 알콜-드라이 아이스 혼합물 중에서 적어도 -20°에서 약 1시간 동안 용기를 냉동시킨다. 실현가능한 경우, 용기를 무균적으로 개방하기 전에 추진제를 배출시키고, 내용물을 멸균성 풀링 통에 전달한다. 100 mL의 유체 D를 상기 풀링 통에 첨가하고, 조심스럽게 혼합한다. 수용액 또는 오일 및 오일성 용액 중 적용되는 것에 대해 지시된 바와 같이 진행한다.

멸균성 표지된 경로를 갖는 디바이스

10 이상의 경로 부피의 유체 D를 시험된 각각의 디바이스를 통해 무균적으로 통과시킨다. 적절한 멸균성 통에서 유체를 수집하고, 수용액 또는 오일 및 오일성 용액 중 적용되는 것에 대해 지시된 바와 같이 진행한다.

멸균성의 빈 시린지의 경우, 부착된 경우 멸균 니들을 통해 또는 시험의 목적을 위해 부착된 멸균 니들을 통해 멸균 희석제를 배럴에 넣고, 내용물을 멸균성 풀링 통에 전달한다. 상기 기재된 바와 같이 진행한다._◆

배양 배지의 직접 접종

달리 기재되지 않는다면, 제품의 부피가 배지 부피의 10% 이하로 되도록 표 2 및 3 에 기재된 검사될 제제의 양을 배양 배지에 직접 전달한다.

검사될 제품이 항미생물 활성을 갖는 경우, 적합한 중화 물질을 사용하거나 충분한 양의 배양 배지로 희석함으로써 이를 중화시킨 후에 시험을 수행한다. 큰 부피의 제품을 사용할 필요가 있는 경우에는, 후속적인 희석을 고려하는 방식으로 제조된 농축된 배양 배지를 사용하는 것이 바람직할 수 있다. 적절한 경우, 농축된 배지를 그의 용기 중의 제품에 직접 첨가할 수 있다.

오일성 액체

시험의 검증에 적절한 것으로 확인된 적합한 유화제, 예를 들어 10 g/L 농도의 폴리소르베이트 80이 첨가된 배지를 사용한다.

연고 및 크림

적합한 멸균 희석제, 예컨대 ^◆ 유체 A (막 여과를 위한 희석 및 세정 유체 참조)_◆ 중에서 선택된 유화제에 의해 유화시킴으로써 약 1/10로 희석하여 제조한다. 유화제를 함유하지 않는 배지에 희석된 제품을 전달한다.

접종된 배지를 14일 이상 동안 인큐베이션한다. 인큐베이션 기간 동안 배양물을 몇차례 관찰한다. 오일성 제품을 함유하는 배양물을 매일 조심스럽게 진탕시킨다. 그러나, 티오글리콜레이트 배지 또는 다른 유사한 배지를 혐기성 미생물의 검출에 대해 사용하는 경우, 혐기성 조건을 유지하기 위해 진탕 또는 혼합을 최소로 유지한다.

장선 및 수의학적 용도의 다른 수술용 봉합사

각각의 배지에 대해 표 2 및 3 에 기재된 제품의 양 이상을 사용한다. 무균 조치를 이용하여 밀봉된 패키지를 개방하고, 각 배양 배지에 대해 3개 부분의 가닥을 제거한다. 각각 30-cm 길이를 갖고, 가닥의 시작부, 중심부 및 말단부로부터 절단된 3개의 부분에 대해 시험을 수행한다. 새로 개방된 카세트 팩으로부터의 전체 가닥을 사용한다. 가닥의 각 부분을 선택된 배지에 전달한다. 시험될 물질을 적절히 커버하기에 충분한 배지를 사용한다 (20 mL 내지 150 mL).

^◆고체

표 2 및 3 에 나타낸 양 이상에 상응하는 양의 건조 고체 형태의 제품을 전달한다 (또는 즉석 용기에 멸균 희석제를 첨가함으로써 제품의 현탁액을 제조한다). 이렇게 수득한 물질을 200 mL의 유체 티오글리콜레이트 배지에 전달하고, 혼합한다. 유사하게, 동일한 양을 200 mL의 대두-카세인 소화물 배지에 전달하고, 혼합한다. 상기 지시된 바와 같이 진행한다.

정제된 면, 거즈, 수술용 드레싱 및 관련 물품

시험될 면, 권취된 거즈 붕대, 또는 큰 수술용 드레싱의 각각의 패키지로부터, 샘플의 가장 안쪽 부분으로부터 각각 100- 내지 500-mg의 2개 이상의 부분을 무균적으로 제거한다. 개별적으로 포함된 단일-사용 물질로부터, 전체 물품을 무균적으로 제거한다. 부분 또는 물품을 각각의 배지에 담그고, 상기 지시된 바와 같이 진행한다.

멸균성 디바이스

물품은 그대로 또는 해체하여 담글 수 있다. 디바이스 경로가 배지와도 접촉함을 보장하기 위해, 디바이스를 완전히 담그기에 충분한 배지 부피에서 배지당 적절한 개수의 단위를 담그고, 상기 지시된 바와 같이 진행한다. 매우 큰 디바이스의 경우에는, 환자와 접촉하게 되는 디바이스 부분을 완전히 담그기에 충분한 배지 부피에서 상기 부분을 담근다.

내부 루멘 및 외부가 멸균성일 필요가 있는 카테터의 경우, 배지가 전체 루멘과 접촉하도록 이를 조각으로 자르거나, 또는 루멘을 배지로 충전한 다음, 단위를 그대로 담근다._◆

관찰 및 결과의 해석

인큐베이션 기간 동안의 간격 및 그의 결론에서, 미생물 성장의 거시적 증거를 위해 배지를 검사한다. 시험될 물질이 배지를 탁하게 만들어 미생물 성장의 존재 또는 부재를 시각적 검사에 의해 용이하게 결정할 수 없는 경우에는, 인큐베이션 시작후 14일째에 배지의 일부 (각각 1 mL 이상)를 동일한 배지의 새로운 통에 전달한 다음, 원래의 통 및 전달 통을 4일 이상 동안 인큐베이션한다.

미생물 성장의 증거가 확인되지 않는 경우에는, 검사될 제품이 멸균성 시험에 따른 것이다. 미생물 성장의 증거가 확인되는 경우에는, 검사될 제품과 관련이 없는 원인으로 인해 시험이 무효한 것임이 명백히 입증되지 않는 한, 검사될 제품이 멸균성 시험에 따르지 않은 것이다. 시험은 하기 조건 중 하나 이상을 충족하는 경우에만 무효한 것으로 고려될 수 있다:

a. 멸균 시험 시설의 미생물학적 모니터링의 데이터에 결함이 있다.

b. 해당 시험 동안에 사용된 시험 절차의 검토 결과 결함이 나타난다.

c. 음성 대조군에서 미생물 성장이 확인된다.

d. 시험으로부터 단리된 미생물의 신원을 결정한 후, 이 종 (또는 이들 종)의 성장이 명백히 멸균성 시험 절차를 수행하는데 사용된 물질 또는 기술과 관련한 결함 때문일 수 있다.

시험이 무효한 것으로 선언되면, 원래 시험에서와 같이 동일한 개수의 단위를 사용하여 반복한다. 반복 시험에서 미생물 성장의 증거가 확인되지 않는 경우에는, 검사된 제품이 멸균성 시험에 따른 것이다. 반복 시험에서 미생물 성장이 확인되는 경우에는, 검사된 제품이 멸균성 시험에 따르지 않은 것이다.

멸균성 시험에 따르기 위해 필요한 비경구 제제, 안과용 제제 및 다른 비주 사용 제제에 대해 시험의 적용

막 여과 기술을 이용하는 경우, 가능하다면 용기의 전체 내용물, 그러나 표 2 및 3 에 나타낸 것 이상인 양을 사용하고, 필요한 경우, 적합한 멸균성 용액, 예컨대 ^◆ 유체 A (막 여과를 위한 희석 및 세정 유체 참조)_◆를 사용하여 약 100 mL로 희석한다.

배지의 직접 적용 기술을 이용하는 경우, 달리 정당화되고 승인되지 않는다면, 표 2 및 3 에 나타낸 양을 사용한다. 박테리아 및 진균 멸균성에 대한 시험은 검사될 제품의 동일한 샘플에 대해 수행한다. 단일 용기 중의 부피 또는 양이 시험을 수행하는데 불충분한 경우에는, 2개 이상의 용개의 내용물을 사용하여 상이한 배지를 접종시킨다.

^◆1 적절한 경우, 탈수된 배지의 동일한 로트로부터 제조된 상이한 배치의 주기적인 시험이 허용가능하다._◆

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<51> 항미생물 유효성 시험

항미생물 보존제는 미생물 성장으로부터 또는 제조 공정 동안 또는 이후에 부주의하게 도입된 미생물로부터 보호하기 위해 비멸균성 투여 형태에 첨가되는 물질이다. 다중-용량 용기에 포장된 멸균성 물품의 경우에는, 항미생물 보존제를 첨가하여, 개별 용량을 반복적으로 회수함으로써 도입될 수 있는 미생물 성장을 억제한다.

항미생물 보존제는 양호한 제조 실무에 대한 대체제로서, 또는 오로지 비멸균 제품의 생존가능한 미생물 집단을 감소시키거나 제조 동안 다중용량 제제의 예비 멸균 생물 부담을 제어하기 위해 사용되어서는 않된다. 공정서 투여 형태에서 항미생물 보존제는 통칙에서 성분 및 공정 하의 첨가된 물질에 대한 요건을 충족한다.

모든 유용한 항미생물제는 독성 물질이다. 환자의 최대 보호를 위해, 최종 포장된 제품에서 유효한 것으로 확인된 보존제의 농도는 인간에게 독성일 수 있는 수준보다 낮아야 한다.

제형의 활성 성분이 고유한 항미생물 활성을 갖는 경우, 첨가된 항미생물 보존제의 농도는 최소한으로 유지될 수 있다. 항미생물 유효성은 제품 고유의 것이건 또는 항미생물 보존제의 첨가로 인해 생성된 것이건 간에 다중-용량 용기에 포장된 모든 주사제 또는 항미생물 보존제를 함유하는 다른 제품에 대해 입증되어야 한다. 항미생물 유효성은 다중-용량 국소 및 경구 투여 형태 및 다른 투여 형태, 예컨대 안과용, 귀, 비강용, 관주 및 투석 유체 ( 제약 투여 형태 <1151> 참조)에 대해 입증되어야 한다.

이 챕터는 항미생물 보호의 유효성을 입증하기 위한 시험을 제공한다. 첨가된 항미생물 보존제는 라벨에 표기되어야 한다. 유효성에 대한 시험 및 기준은 제조자에 의해 유통된 원래의 개방되지 않은 용기 중의 제품에 적용된다.

제품 카테고리

시험의 목적을 위해, 공정서 물품을 4가지 카테고리로 나누었다 ( 표 1 참조). 이들 제품에 대한 항미생물 유효성의 기준은 투여 경로의 함수이다.

표 1. 공정서 제품 카테고리

시험 유기체

하기 미생물의 배양물을 사용한다¹ : 칸디다 알비칸스 (ATCC 번호 10231), 아스페르길루스 니거 (ATCC 번호 16404), 에스케리키아 콜라이 (ATCC 번호 8739), 슈도모나스 아에루기노사 (ATCC 번호 9027), 및 스타필로코쿠스 아우레우스 (ATCC 번호 6538). 시험에 사용된 생존가능한 미생물은 원래의 ATCC 배양물로부터 5회 넘게 계대배양 제거되지 않아야 한다. 시험의 목적을 위해, 하나의 계대배양은 정립된 배양물로부터 새로운 배지로 유기체의 전달로서 정의된다. 모든 전달을 카운트한다. 종자-로트 기술에서 유지된 유기체의 경우, 냉동, 해동 및 새로운 배지에서 재생의 각 주기가 하나의 전달로서 간주된다. 종자-스톡 기술은 배양물의 장기간 보관을 위해 이용되어야 한다. ATCC로부터 입수한 배양물은 지침에 따라 소생되어야 한다. 브로쓰에서 성장시키는 경우, 세포를 원심분리에 의해 펠릿화한다. 새로운 유지 브로쓰의 부피의 1/20로 재현탁시키고, 동일한 부피의 20% (물 중 v/v) 멸균성 글리세롤을 첨가한다. 아가 상에서 성장한 세포를 표면으로부터 10% 글리세롤 브로쓰로 스크랩할 수 있다. 적은 분취량의 현탁액을 멸균성 바이알에 분배한다. 액체 질소에서 또는 -50° 이하의 기계적 냉동실에서 바이알을 보관한다. 새로운 종자-스톡 바이알이 필요할 때에는, 이를 꺼내서 일련의 작업 배양물을 접종하기 위해 사용할 수 있다. 이어서, 이들 작업 배양물을 주기적으로 (박테리아 및 효모의 경우 매일) 사용하여 접종 배양을 시작할 수 있다.

배지

시험에 사용된 모든 배지는 성장 촉진에 대해 시험되어야 한다. 시험 유기체 하에 상기 나타낸 미생물을 사용한다.

접종물의 제조

시험에 대비하여, 명시된 각각의 미생물의 최근 생존 스톡 배양물로부터 적합한 부피의 고체 아가 배지의 표면을 접종한다. 접종물 배양을 위한 배양 조건은 표 2에 기재되어 있으며, 여기서 적합한 배지는 대두-카세인 소화물 또는 사부로드(Sabouraud) 덱스트로스 아가 배지이다 ( 미생물 한계 시험 <61> 참조).

박테리아 및 씨. 알비칸스 배양물을 수확하기 위해, 멸균 식염수 TS를 사용하고, 표면 성장을 세척하고, 이를 적합한 통에 수집하고, 충분한 멸균 식염수 TS를 첨가하여, 약 1 x 10⁸ 콜로니-형성 단위 (cfu) /ml의 미생물 카운트를 수득한다. 에이. 니거의 세포를 수확하기 위해, 0.05%의 폴리소르베이트 80을 함유하는 멸균 식염수 TS를 사용하고, 충분한 멸균 식염수 TS를 첨가하여, 약 1 x 10⁸ cfu/ml의 카운트를 수득한다.

대안적으로, 스톡 배양 유기체를 적합한 액체 배지 (즉, 대두-카세인 소화물 브로쓰 또는 사부로드 덱스트로스 브로쓰)에서 성장시키고, 세포를 원심분리에 의해 수확한 다음, 세척하고, 멸균 식염수 TS에 재현탁시켜, 약 1 x 10⁸ cfu/ml의 미생물 카운트를 수득한다. [비고 - 접종물 농도의 추정은 챌린지 미생물에 대한 탁도 측정에 의해 수행될 수 있다. 현탁액을 2시간 내로 사용하지 않는 경우에는, 이를 냉장 보관한다.]

표 2에 열거된 배지의 조건 및 미생물 회복 인큐베이션 시간을 이용하여 각각의 현탁액에서 cfu/ml의 수를 측정하여, 초기 cfu/ml 추정치를 확인한다. 이 값은 시험에서 사용된 접종물의 크기를 보정하는 역할을 한다. 박테리아 및 효모 현탁액은 수확 24시간 이내에 사용해야 하지만, 진균 제제는 냉장 하에 7일까지 보관될 수 있다.

절차

충분한 부피의 제품이 각 용기에서 이용가능하고, 제품 용기가 무균적으로 들어갈 수 있는 경우에는 (즉, 탄성 고무 스톱퍼를 통한 니들 및 시린지) 5개의 원래 용기에서, 또는 충분한 부피의 제품이 전달된 적합한 크기를 갖는 5개의 멸균된 캡이 있는 세균학적 용기에서 시험을 수행할 수 있다. 각 용기를 제조된 접종물 및 표준화된 접종물 중 하나로 접종하고, 혼합한다. 사용된 현탁액 접종물의 부피는 제품 부피의 0.5% 내지 1.0%이다. 제품 (카테고리 1, 2 및 3)에 첨가된 시험 미생물의 농도는, 접종후 시험 제제의 최종 농도가 1 x 10⁵ 내지 1 x 10⁶ cfu/ml 제품이 되도록 한다. 카테고리 4 제품 (제산제)의 경우에는, 접종후 시험 제제의 최종 농도가 1 x 10³ 내지 1 x 10⁴ cfu/ml 제품이 되도록 한다.

각각의 시험 제제에서 생존가능한 미생물의 초기 농도는 플레이트-카운트 방법에 의해 결정 시 표준화된 각각의 접종물에서 미생물의 농도를 기준으로 추정된다.

접종된 용기를 22.5 ± 2.5°에서 인큐베이션한다. 표 3에 명시된 적절한 간격에서 각각의 용기를 샘플링한다. 이러한 간격에서 외관상 관찰된 임의의 변화를 기록한다. 플레이트-카운트 절차에 의해 적용가능한 간격에서 각각의 시험 제제에 존재하는 cfu의 수를 결정한다 ( 미생물 한계 시험 <61> 하의 절차 참조). 플레이트 카운트에서 또는 플레이팅을 위해 제조된 적절한 희석액에서 특정한 항미생물의 불활성화제 (중화제)를 첨가한다. 이들 조건은 표 2에 열거된 배지의 조건 및 미생물 회복 인큐베이션 시간을 기반으로 하는 샘플에 대해 검증 연구로 결정된다. 시험 시작 시에 존재하는 cfu/ml의 계산된 농도를 이용하여, 적용가능한 시험 간격에서 각각의 미생물에 대한 cfu/ml 농도의 log₁₀ 값에서의 변화를 계산하고, 로그 감소에 대한 변화를 표현한다.

표 2. 접종물 제제에 대한 배양 조건

항미생물 유효성에 대한 기준

항미생물 유효성에 대한 요건은 표 3에 명시된 기준이 충족되는 경우에 충종된다 (통칙 하의 유의한 특성 및 내성 참조). 증가 없음은 측정된 이전 값보다 0.5 log₁₀ 단위 초과로 높지 않은 것으로 정의된다.

표 3. 시험된 미생물에 대한 기준

¹ 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(American Type Culture Collection, 미국 20110-2209 버지니아주 마나사스 유니버시티 불러바드 10801)으로부터 입수가능함 (http://www.atcc.org).

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참고문헌의 도입

본원에 언급된 모든 공보 및 특허는, 각각의 개별 공보 또는 특허가 구체적으로 및 개별적으로 참조로 포함되는 것으로 나타낸 것처럼 그들의 전문이 참조로 포함된다.

본 개시내용의 구체적인 실시양태가 논의되었지만, 상기 상세한 설명은 예시적인 것이고 제한적인 것은 아니다. 본 개시내용의 여러 변화는 이 상세한 설명 및 하기 청구항을 검토하면 통상의 기술자에게 명백해질 것이다. 본 개시내용의 전체 범위는 청구항을 그의 전체 등가물 범위와 함께 참조하고, 상세한 설명을 이러한 변화와 함께 참조하여 결정되어야 한다.

특정 실시양태는 하기 청구항 내에 있다.

Claims (219)

1. 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저를 포함하며, 하기 특성 중 하나 이상을 갖는, 완성된 화장품 제품:
   a) 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 보존제, 예를 들어 파라벤을 실질적으로 함유하지 않음;
   b) 상기 최종 사용 용기가 역행성 흐름을 감소시키도록 구성됨;
   c) 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이 방사선조사됨; 또는
   d) 상기 화장품 제품이 하기 (i) 또는 (ii) 중 하나의 조성물로 본질적으로 이루어짐:
   (i) 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스;
   (ii) 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산.
2. 제1항에 있어서, a, b, c의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 가지며, 화장품 제품이 샴푸를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
3. 제1항에 있어서, a, b, c의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 가지며, 화장품 제품이 클렌저, 예를 들어 바디 클렌저를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, a의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, b의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, c의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, d(i)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, d(ii)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, a 및 b의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, a 및 c의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, a 및 d(i)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
12. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, a 및 d(ii)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, b 및 c의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, b 및 d(i)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
15. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, b 및 d(ii)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
16. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, c 및 d(i)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
17. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, c 및 d(ii)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, a, b 및 c의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, a, b 및 d(i)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
20. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, a, b 및 d(ii)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, b, c 및 d(i)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
22. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, b, c 및 d(ii)의 특성을 갖는 완성된 화장품 제품.
23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 화장품 제품이 방사선조사된 완성된 화장품 제품인 완성된 화장품 제품.
24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 화장품 제품이 감마-방사선조사된 완성된 화장품 제품인 화장품 제품.
25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 부록 VI에 열거된 보존제를 실질적으로 함유하지 않는 것인, 예를 들어 부록 VI에 열거된 보존제 중 적어도 1가지, 2가지, 5가지, 10가지, 15가지, 20가지, 30가지, 40가지, 50가지 또는 모두를 실질적으로 함유하지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 약 500 ppb 미만의, 예를 들어 500 ppb 미만의 보존제를 갖는 것인 완성된 화장품 제품.
27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 약 500 ppb 미만의 부록 VI에 열거된 보존제, 예를 들어 500 ppb 미만의 부록 VI에 열거된 보존제를 갖는 것인 완성된 화장품 제품.
28. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 보존제를 포함하지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
29. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 부록 VI에 개시된 보존제를 포함하지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 미생물, 예를 들어 박테리아 또는 진균으로의 챌린지에 노출되는 경우, 예를 들어 U.S.P. 51, 항미생물 유효성 시험(Antimicrobial Effectiveness Testing)에 의해 결정 시 상기 미생물의 성장을 지원하는 것인 완성된 화장품 제품.
31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이, 처리, 예를 들어 멸균 처리 또는 보존제 첨가의 부재 하에, 예를 들어 U.S.P. 51, 항미생물 유효성 시험에 의해 측정 시 미생물 성장, 예를 들어 박테리아 또는 진균 성장을 지원하는 것인 완성된 화장품 제품.
32. 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스를 포함하는 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저.
33. 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산을 포함하는 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저.
34. 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 본질적으로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저.
35. 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 본질적으로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저.
36. 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저.
37. 완성된 화장품 제품이 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 이루어진 것인, 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 클렌저.
38. 제1항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 향기, 색상, 점도, 거품 형성 및 거품 안정성, 접착력, 수분 보유, 수분 결합, pH 안정화, 클렌징, 증점화, 유연화, 컨디셔닝, 예를 들어 모발 또는 피부 컨디셔닝, 지질 층 강화, 장벽 형성, 또는 필름 형성 중 하나 이상을 제공하기 위해 첨가된 성분을 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
39. 제1항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 항산화제, 지방 물질/오일, 증점제, 유연제, 유화제, 광 차단제, 거품 형성제 및 거품 안정화제, 소포제, 보습제, 향기제, 계면활성제, 충전제, 격리제, 중합체, 산성화제 또는 염기성화제, 염료, 착색제, 안료, 펄화제, 불투명화제, 유기 또는 무기 입자, 점도 개질제, 클렌저, 접착제, 수분 결합제, pH 안정화제, 컨디셔너, 디탱글러, 생물 기재 계면활성제 클렌저, 지질 층 강화제, 피부 컨디셔너, 및 천연 모발 영양제, 예컨대 식물, 과일 추출물, 당 유도체 및/또는 아미노산, 가수분해된 단백질, 또는 비타민 중 1종 이상을 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
40. 제1항 내지 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 하나인 완성된 화장품 제품.
41. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 샴푸를 포함하는 완성된 화장품 제품.
42. 제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 샴푸가 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 샴푸가 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 본질적으로 이루어진 것인 완성된 화장품 제품.
44. 제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 샴푸가 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 아단소니아 디기타타 (바오밥) 종자 단백질, 히드록시프로필셀룰로스로 이루어진 것인 완성된 화장품 제품.
45. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 포밍 바디 클렌저를 포함하는 완성된 화장품 제품.
46. 제1항 내지 제40항 및 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 포밍 바디 클렌저가 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산을 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
47. 제1항 내지 제40항, 제45항 및 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 포밍 바디 클렌저가 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 본질적으로 이루어진 것인 완성된 화장품 제품.
48. 제1항 내지 제40항 및 제45항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 포밍 바디 클렌저가 물, 코카미도프로필 베타인, 다마스크 장미꽃수, 데실 글루코시드, 피루스 말루스 (사과) 과일 추출물, 글리세린, 가수분해된 퀴노아, 히드록시프로필셀룰로스 및 시트르산으로 이루어진 것인 완성된 화장품 제품.
49. 제1항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 컨디셔너를 포함하는 완성된 화장품 제품.
50. 제1항 내지 제40항 및 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 컨디셔너가 히드록시프로필 셀룰로스, 양이온성 구아, 코코넛 오일 및 향기제를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
51. 제1항 내지 제40항, 제49항 및 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 컨디셔너가 히드록시프로필 셀룰로스, 양이온성 구아, 코코넛 오일 및 향기제로 본질적으로 이루어진 것인 완성된 화장품 제품.
52. 제1항 내지 제40항 및 제49항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 컨디셔너가 히드록시프로필 셀룰로스, 양이온성 구아, 코코넛 오일 및 향기제로 이루어진 것인 완성된 화장품 제품.
53. 제1항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품이 멸균 처리된 것인 완성된 화장품 제품.
54. 제1항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 멸균이 방사선조사를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
55. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 멸균이 가열을 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
56. 제1항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품이, 예를 들어 멸균성 보증 수준 시험에 의해 결정 시 멸균성인 완성된 화장품 제품.
57. 제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 99.9%의 박테리아가 사멸되거나 또는 세포 분열할 수 없는 것인 완성된 화장품 제품.
58. 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 99.9%의 박테리아가 세포 분열을 억제하기에 충분한 방사선 유도된 DNA 손상을 갖는 것인 완성된 화장품 제품.
59. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 개방되지 않은 것인, 예를 들어 공장 밀봉이 파손되지 않은 것인 완성된 화장품 제품.
60. 제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이, 예를 들어 이온화 방사선에 의해, 예를 들어 감마선에 의해, 예를 들어 x-선에 의해, 예를 들어 동위원소, 예를 들어 코발트 60으로부터, 또는 자외선, 예를 들어 자외선 C (UVC)에 의해 방사선조사된 것인 완성된 화장품 제품.
61. 제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방사선조사가 멸균 제품을 제공하기에 충분한 것인 완성된 화장품 제품.
62. 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 멸균 제품이, 예를 들어 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준(Sterility Testing Methods and Standards)에 의해 결정 시 U.S.P. 챕터 1211과 일치하는, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균, 예를 들어 포자를 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 것인 완성된 화장품 제품.
63. 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품이 성장을 나타내지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
64. 제1항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 산화제, 예를 들어 천연 발생 산화제, 자유 라디칼 스캐빈저 또는 자유 라디칼 켄처로부터 선택된 외인성 첨가된 첨가제를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
65. 제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 복수 종의 성분을 함유하고, 상기 복수 종의 성분을 혼합한 후에 방사선조사된 것인 완성된 화장품 제품.
66. 제1항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품이 최종 사용 용기에 배치된 후에 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사된 것인 완성된 화장품 제품.
67. 제1항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 밀폐된 후에 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사된 것인 완성된 화장품 제품.
68. 제1항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 밀봉된 후에 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사된 것인 완성된 화장품 제품.
69. 제1항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 밀폐되기 전에 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사된 것인 완성된 화장품 제품.
70. 제1항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 방사선조사되었는지를 나타내는 지시기를 포함하는 완성된 화장품 제품.
71. 제1항 내지 제70항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이, 예를 들어 마이크로웨이브 오븐 또는 오토클레이브에 의해 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
72. 제1항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 가열이 멸균 제품을 제공하기에 충분한 것인 완성된 화장품 제품.
73. 제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 멸균 제품이, 예를 들어 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 것인 완성된 화장품 제품.
74. 제1항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 U.S.P. 71 멸균성 시험 방법 및 표준에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품이 성장을 나타내지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
75. 제1항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 복수 종의 성분을 함유하고, 복수 종의 성분을 혼합한 후에 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
76. 제1항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품이 최종 사용 용기에 배치된 후에 완성된 화장품 제품이 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
77. 제1항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 밀폐된 후에 상기 완성된 화장품 제품이 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
78. 제1항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 밀봉된 후에 상기 완성된 화장품 제품이 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
79. 제1항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 밀폐되기 전에 상기 완성된 화장품 제품이 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
80. 제1항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 가열되었는지를 나타내는 지시기를 포함하는 완성된 화장품 제품.
81. 제1항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 제품이 제제화 동안에 또는 이후에, 예를 들어 혼합 또는 충전 이후에, 예를 들어 배치 이후에 121℃ 이상에서 적어도 15분 동안 가열된 것인 완성된 화장품 제품.
82. 제1항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 상기 최종 사용 용기로의 물질의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성된 것인 완성된 화장품 제품.
83. 제1항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 상기 최종 사용 용기로의 물질, 예를 들어 상기 화장품 제품의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성된 것인 완성된 화장품 제품.
84. 제1항 내지 제83항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 상기 최종 사용 용기로의 물질, 예를 들어 오염물의 역행성 흐름, 예를 들어 역류, 예를 들어 역진, 예를 들어 후방 이동을 억제하도록 구성된 것인 완성된 화장품 제품.
85. 제1항 내지 제84항 중 어느 한 항에 있어서, 오염물이 대기, 예를 들어 에어로졸, 또는 액체, 예를 들어 물, 또는 고체, 또는 기체인 완성된 화장품 제품.
86. 제1항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 상기 화장품 제품이 배치된 저장소, 및 상기 저장소로부터 상기 화장품 제품이 분배될 수 있는 디스펜서를 포함하고, 여기서 상기 디스펜서가 상기 저장소로의 물질의 역행성 흐름을 억제하는 것인 완성된 화장품 제품.
87. 제1항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 상기 화장품 제품이 배치된 저장소, 및 상기 저장소로부터 상기 화장품 제품이 분배될 수 있는 디스펜서를 포함하고, 여기서 상기 디스펜서가 상기 저장소로의 분배된 화장품 제품 또는 대기 에어로졸의 역행성 흐름을 억제하는 것인 완성된 화장품 제품.
88. 제1항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 상기 디스펜서 내에 및 상기 저장소의 근위에 배치된 제1 압력 활성화 밸브 및 상기 디스펜서 내에 및 상기 저장소의 원위에 배치된 제2 압력 활성화 밸브를 포함하는 역행성 흐름 방지 디스펜서이고, 여기서 상기 제1 밸브의 활성화 압력이 상기 제2 밸브의 활성화 압력보다 높은 것인 완성된 화장품 제품.
89. 제1항 내지 제88항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가, 완성된 화장품 제품의 분배와 관련된 조작 방향과 반대 방향으로 화장품 제품이 이동하는 것을 방지하도록 구성된 역행 방지 메카니즘을 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
90. 제1항 내지 제89항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 최종 사용 용기 내 화장품 제품의 양이 X회 이하의 적용에 충분하고, 여기서 X가 약 1 내지 약 180회인 완성된 화장품 제품.
91. 제1항 내지 제90항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양이, 완성된 화장품 제품이 X회 이하의 적용에 충분하도록 선택되고, 여기서 X가 약 1 및 약 180회인 완성된 화장품 제품.
92. 제1항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양이, 완성된 화장품 제품이 약 28일 이하의 사용에 충분하도록 선택된 것인 완성된 화장품 제품.
93. 제1항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양이, 완성된 화장품 제품이 Y회/사용 일로 X일 이하 동안 충분하도록 선택되고, 여기서 X가 약 2주 내지 약 6주이고, Y가 약 0회/사용 일 내지 약 6회/사용 일인 완성된 화장품 제품.
94. 제1항 내지 제93항 중 어느 한 항에 있어서, 열화 기준 유통기한 날짜를 갖는 완성된 화장품 제품.
95. 제1항 내지 제94항 중 어느 한 항에 있어서, 열화 기준 유통기한 날짜의 표시를 갖는 완성된 화장품 제품.
96. 제1항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 바이옴-적합성 기준 유통기한 날짜를 갖는 완성된 화장품 제품.
97. 제1항 내지 제96항 중 어느 한 항에 있어서, 바이옴-적합성 기준 유통기한 날짜의 표시를 갖는 완성된 화장품 제품.
98. 제1항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
99. 제1항 내지 제98항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이, 예를 들어 일수 또는 주수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
100. 제1항 내지 제99항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이, 제조, 충전, 밀봉, 운송, 시중 출시 또는 판매 중 하나의 날짜로부터 X일 미만인, 예를 들어 일수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하고, 여기서 X가 약 5-7일, 약 5-10일, 약 7-14일, 약 14-21일, 약 21-28일, 약 28-35일, 약 35-42일, 약 42-49일, 약 49-56일, 약 56-63일, 약 63-70일, 약 70-77일, 약 75-100일, 약 100-150일, 약 150-200일, 약 200-300일, 약 300-400일, 약 400-750일인 완성된 화장품 제품.
101. 제1항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이, 제조, 충전, 밀봉, 운송, 시중 출시 또는 판매 중 하나의 날짜로부터 X일 미만인, 예를 들어 일수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하고, 여기서 X가 약 28일, 예를 들어 28일인 완성된 화장품 제품.
102. 제1항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이 미리 선택된 기간, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉으로부터의 일수로 표현된, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
103. 제1항 내지 제102항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이 미리 선택된 기간, 예를 들어 개방 또는 개봉 날짜로부터 X일 미만인 상기 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉으로부터의 일수로 표현된, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하고, 여기서 X가 약 5-7일, 약 5-10일, 약 7-14일, 약 14-21일, 약 21-28일, 약 28-35일, 약 35-42일, 약 42-49일, 약 49-56일, 약 56-63일, 약 63-70일, 약 70-77일, 약 75-100일, 약 100-150일, 약 150-200일, 약 200-300일, 약 300-400일인 완성된 화장품 제품.
104. 제1항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이 미리 선택된 기간, 예를 들어 개방 또는 개봉 날짜로부터 X일 미만인 상기 완성된 화장품 제품의 개방 또는 개봉으로부터의 일수로 표현된, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하고, 여기서 X가 약 28일, 예를 들어 28일인 완성된 화장품 제품.
105. 제1항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시가 미리 선택된 사용 또는 적용 횟수로 표현되는 것인 완성된 화장품 제품.
106. 제1항 내지 제105항 중 어느 한 항에 있어서, 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시가 미리 선택된 사용 또는 적용 횟수로 표현되고, 여기서 미리 선택된 횟수가 약 5-7, 약 5-10, 약 7-14, 약 14-21, 약 21-28, 약 28-35, 약 35-42, 약 42-49, 약 49-56, 약 56-63, 약 63-70, 약 70-77, 약 75-100, 약 100-150, 약 150-200, 약 200-300, 약 300-400회인 완성된 화장품 제품.
107. 제1항 내지 제106항 중 어느 한 항에 있어서, 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명을 갖는 완성된 화장품 제품.
108. 제1항 내지 제107항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명이 하기로 표현되는 것인 완성된 화장품 제품:
     a) 시간의 단위, 예를 들어 미리 선택된 사건, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개봉 또는 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로부터의 일수; 또는
     b) 사용 또는 적용 횟수.
109. 제108항에 있어서, 상기 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명이 a로 표현되는 것인 완성된 화장품 제품.
110. 제108항에 있어서, 상기 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명이 b로 표현되는 것인 완성된 화장품 제품.
111. 제108항에 있어서, 상기 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명이 a 및 b로 표현되는 것인 완성된 화장품 제품.
112. 제108항에 있어서, 상기 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명이 a 또는 b로 표현되는 것인 완성된 화장품 제품.
113. 제1항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 중합체, 예를 들어 폴리에틸렌 테레프탈레이트 (PET), 고밀도 폴리에틸렌 (HDPE), 폴리프로필렌, 폴리카르보네이트, 폴리테트라플루오로에틸렌 (테플론(teflon)®), 폴리비닐리덴 플루오라이드 (PVDF) 또는 셀룰로스계를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
114. 제1항 내지 제112항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 유리를 포함하는 것인 완성된 화장품 제품.
115. 제1항 내지 제114항 중 어느 한 항에 있어서, 생존가능한 박테리아의 존재를 나타내는 센서, 예를 들어 산소 센서를 포함하는 완성된 화장품 제품.
116. 제1항 내지 제115항 중 어느 한 항에 있어서, 최종 사용 용기가 적어도 약 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 99 또는 100 퍼센트의 투과율로 최종 사용 용기를 통한 이온화 방사선, 예를 들어 감마선, 예를 들어 x-선, 예를 들어 동위원소, 예를 들어 코발트 60으로부터, 또는 자외선, 예를 들어 자외선 C (UVC)의 통과를 허용하는 것인 완성된 화장품 제품.
117. a) 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 공급하고 (또는 피지명자가 공급하게 하고);
     b) 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 하기를 제공하고 (또는 피지명자가 제공하게 하고):
     i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 또는
     ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지;
     c) 임의적으로, 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하고 (또는 피지명자가 제공하게 하고),
     이로써 완성된 화장품 제품을 유통시키는 것
     을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 유통시키는 방법.
118. 제117항에 있어서,
     a) 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 공급하고;
     b) 상기 최종 사용자에게 하기를 제공하고:
     i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위; 또는
     ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지;
     c) 상기 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하고,
     이로써 완성된 화장품 제품을 유통시키는 것
     을 포함하는 방법.
119. 제117항 또는 제118항에 있어서, 완성된 화장품 제품이 제1항 내지 제116항 중 어느 한 항의 완성된 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
120. 제117항 내지 제119항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가 본원에 기재된 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
121. 제117항 내지 제120항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가, 박테리아 또는 진균을 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
122. 제117항 내지 제121항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가, 보존제를 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
123. 제117항 내지 제122항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제로부터 선택된 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
124. 제123항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가 샴푸를 포함하는 것인 방법.
125. 제123항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가 포밍 바디 클렌저를 포함하는 것인 방법.
126. 제123항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위가 컨디셔너를 포함하는 것인 방법.
127. 제117항 내지 제126항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 최종 사용자가 인터넷-기반 판로로부터 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 판매 또는 증정에 의해 공급받는 것인 방법.
128. 제117항 내지 제127항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 최종 사용자가 비-인터넷-기반 판로, 예를 들어 점포로부터 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 판매 또는 증정에 의해 공급받는 것인 방법.
129. 제117항 내지 제128항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 최종 사용자에게 제공하는 것이 상기 최종 사용자에게 i을 제공하는 것을 포함하는 것인 방법.
130. 제117항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 최종 사용자에게 제공하는 것이 상기 최종 사용자에게 ii를 제공하는 것을 포함하는 것인 방법.
131. 제117항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 최종 사용자에게 제공하는 것이 상기 최종 사용자에게 i 및 ii를 제공하는 것을 포함하는 것인 방법.
132. 제117항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제공이 미리 선택된 일수, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위의 권장 수명이 종료되기 전 1-28일, 예를 들어 3-7일 이내에 이루어지는 것인 방법.
133. 제117항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제공이 미리 선택된 일수, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 공급한 후 1일 내지 약 28일, 예를 들어 21-25일 이내에 이루어지는 것인 방법.
134. 제117항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제공이 미리 선택된 일수, 예를 들어 완성된 화장품 제품의 첫번째 예상된 사용 이전 또는 이후에 1일 내지 약 28일 이내에 이루어지는 것인 방법.
135. 제117항 내지 제134항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가 본원에 기재된 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
136. 제117항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가, 박테리아 또는 진균을 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
137. 제117항 내지 제136항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가, 보존제를 함유하지 않거나 또는 실질적으로 함유하지 않는 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
138. 제117항 내지 제137항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가 유아용 제품, 예를 들어 유아용 샴푸, 유아용 로션, 유아용 오일, 유아용 파우더, 유아용 크림; 배스 제제, 예를 들어 배스 오일, 태블릿, 솔트, 버블 배스, 배스 캡슐; 아이 메이크업 제제, 예를 들어 아이브로우 펜슬, 아이라이너, 아이 섀도우, 아이 로션, 아이 메이크업 리무버, 마스카라; 향기 제제, 예를 들어 콜로뉴, 투왈렛 워터, 퍼퓸, 파우더 (더스팅 및 탈컴), 사쉐; 헤어 제제, 예를 들어 헤어 컨디셔너, 헤어 스프레이, 헤어 스트레이트너, 퍼머넌트 웨이브, 린스, 샴푸, 토닉, 드레싱, 헤어 그루밍 에이드, 웨이브 셋; 헤어 컬러링 제제, 예를 들어 헤어 염료 및 염색제, 헤어 틴트, 컬러링 헤어 린스, 컬러링 헤어 샴푸, 헤어 컬러 라이트너, 헤어 블리치; 메이크업 제제, 예를 들어 페이스 파우더, 파운데이션, 레그 및 바디 페인트, 립스틱, 메이크업 베이스, 루즈, 메이크업 픽사티브; 매니큐어링 제제, 예를 들어 베이스코트 및 언더코트, 큐티클 유연제, 네일 크림 및 로션, 네일 익스텐더, 네일 폴리시 및 에나멜, 네일 폴리시 및 에나멜 리무버; 구강 위생 제품, 예를 들어 세치제, 구강 청결제 및 구강 청량제; 목욕 비누, 예를 들어 포밍 바디 클렌저, 및 세정제, 방취제, 질 세정제, 여성 위생용 방취제; 쉐이빙 제제, 예를 들어 애프터쉐이브 로션, 수염 유연제, 탈컴, 프리쉐이브 로션, 쉐이빙 크림, 쉐이빙 비누; 피부 관리용 제제, 예를 들어 클렌징제, 제모제, 얼굴 및 목, 바디 및 손, 발 파우더 및 스프레이, 보습제, 야간용 제제, 페이스트 마스크, 피부 프레쉬너; 및 선탠용 제제, 예를 들어 겔, 크림 및 액체, 및 실내 태닝용 제제 중 하나로부터 선택된 화장품 제품을 포함하는 것인 방법.
139. 제138항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가 샴푸를 포함하는 것인 방법.
140. 제138항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가 포밍 바디 클렌저를 포함하는 것인 방법.
141. 제138항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위가 컨디셔너를 포함하는 것인 방법.
142. 제117항 내지 제141항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위가, 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에게 전달되는 것인 방법.
143. 제117항 내지 제142항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위가, 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 전달되는 것인 방법.
144. 제117항 내지 제143항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위가, 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 위치에 전달되는 것인 방법.
145. 제117항 내지 제144항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 통지가, 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 전화 통화에 의해, 예를 들어 녹음 메시지 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에게 전달되는 것인 방법.
146. 제117항 내지 제145항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 통지가, 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해, 예를 들어 전화 통화에 의해, 예를 들어 녹음 메시지 또는 문자 메시지에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 전달되는 것인 방법.
147. 제117항 내지 제146항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 통지가, 예를 들어 우편 또는 상업적 배송 개체에 의해, 또는 전자적으로, 예를 들어 인터넷 또는 전화기에 의해 상기 최종 사용자에 의해 지정된 위치에 전달되는 것인 방법.
148. 제117항 내지 제147항 중 어느 한 항에 있어서,
     c) 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하는 (또는 피지명자가 제공하게 하는) 것
     을 포함하는 방법.
149. 제117항 내지 제148항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 정보가 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수락할 개체 (수집 개체)의 이름 또는 위치, 예를 들어 주소를 포함하는 것인 방법.
150. 제117항 내지 제149항 중 어느 한 항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수용하도록 구성된 용기를 상기 최종 사용자 또는 피지명자에게 제공하는 것을 포함하는 방법.
151. 제150항에 있어서, 상기 용기에 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위가 제공되는 것인 방법.
152. 제150항 또는 제151항에 있어서, 상기 용기에 상기 통지가 제공되는 것인 방법.
153. 제150항 내지 제152항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 용기가, 상기 수집 개체의 주소가 쓰인 우편 라벨을 포함하는 것인 방법.
154. 제153항에 있어서, 상기 수집 개체가 리사이클러인 방법.
155. 제117항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서,
     d) 상기 최종 사용자 또는 상기 최종 사용자에 의해 지정된 개체, 예를 들어 두번째 최종 사용자에게 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품의 상기 후속 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 제공하는 (또는 피지명자가 제공하게 하는) 것
     을 포함하는 방법.
156. 제155항에 있어서, 상기 정보가 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수락할 개체 (수집 개체)의 이름 또는 위치, 예를 들어 주소를 포함하는 것인 방법.
157. 제155항 또는 제156항에 있어서, 완성된 화장품 제품의 상기 후속 단위를 예를 들어 그의 권장 수명 이후에 수용하도록 구성된 용기를 상기 최종 사용자 또는 피지명자에게 제공하는 것을 포함하는 방법.
158. 제157항에 있어서, 상기 용기에 완성된 화장품 제품의 후속 단위가 제공되는 것인 방법.
159. 제157항 또는 제158항에 있어서, 상기 용기에 상기 통지가 제공되는 것인 방법.
160. 제157항 내지 제159항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 용기가, 상기 수집 개체의 주소가 쓰인 우편 라벨을 포함하는 것인 방법.
161. 제160항에 있어서, 상기 수집 개체가 리사이클러인 방법.
162. a) 완성된 화장품 제품의 첫번째 단위를 수용하고;
     b) i) 상기 완성된 화장품 제품의 후속 단위, 또는 두번째 완성된 화장품 제품의 단위; 또는
     ii) 상기 첫번째 단위의 권장 수명이 종료에 도달하였다는 통지
     를 수용하고;
     c) 임의적으로, 완성된 화장품 제품, 예를 들어 권장 수명이 경과한 완성된 화장품 제품의 상기 첫번째 단위의 처분, 예를 들어 리사이클링에 대한 정보를 수용하고,
     이로써 완성된 화장품 제품을 수득하는 것
     을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 수득하는 방법.
163. 최종 사용 용기에 배치된 화장품 제품, 예를 들어 샴푸, 예를 들어 바디 워시를 포함하는 제1항 내지 제116항 중 어느 한 항의 완성된 화장품 제품을 수득하고, 예를 들어 제조하고;
     상기 완성된 제품의 최종 사용자에게 하기 중 하나 이상을 전달하는 것
     을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 유통시키는 방법:
     완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 바이옴-친화성, 예를 들어 바이옴-적합성임;
     완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 예를 들어 열화, 예를 들어 바이옴-적합성을 기준으로 하여 표시된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명 이후에는 사용해서는 안되고,
     여기서 상기 표시된 유통기한 날짜 또는 수명, 예를 들어 권장 수명은 하기로 표현됨:
     (a) 시간의 단위, 예를 들어 미리 선택된 사건, 예를 들어 상기 완성된 화장품 제품의 개봉 또는 상기 완성된 화장품 제품의 첫번째 사용으로부터의 일수; 또는
     (b) 사용 또는 적용 횟수;
     완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 X회 적용 후에 사용해서는 안되고, 예를 들어 여기서 X는 약 1 내지 약 180회임; 및
     완성된 화장품 제품 또는 화장품 제품은 X일 사용 후에, 예를 들어 Y회/사용 일로 X일 후에 사용해서는 안되고, 여기서 X는 약 (7일) 1주 내지 약 42일 (6주)이고, Y는 약 0회 사용/일 내지 약 10회 사용/일이고, 예를 들어 X일은 약 7-10, 10-13, 14-17, 18-21, 22-25, 26-29, 30-33, 34-37, 38-42일일 수 있고, Y는 약 0-1, 2-4, 5-7, 8-10회 사용/일일 수 있음.
164. 제163항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품을 운송하는 것을 추가로 포함하는 방법.
165. 최종 사용 용기에 화장품 제품을 배치하여, 충전된 최종 사용 용기를 형성하고;
     상기 충전된 최종 사용 용기를 처리하여, 박테리아를 사멸 또는 불활성화시키고,
     이로써 완성된 화장품 제품을 제공하는 것
     을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 제조하는 방법.
166. 바이옴-친화성 성분 리스트로부터의 제1 성분, 예를 들어 계면활성제를 선택하고;
     바이옴-친화성 성분 리스트로부터의 제2 성분, 예를 들어 습윤제를 선택하고;
     상기 제1 및 제2 성분의 혼합물을 제공하고, 이로써 바이옴-친화성 화장품 제품을 제조하는 것
     을 포함하는, 바이옴-친화성 화장품 제품을 제조하는 방법.
167. 제166항에 있어서, 상기 제1, 제2, 또는 제1 및 제2 성분이 표 3으로부터 선택되는 것인 방법.
168. 제166항 또는 제167항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품의 바이옴-친화성 유통기한 날짜 또는 권장 수명을 결정하는 것을 추가로 포함하는 방법.
169. 제168항에 있어서, 상기 결정이 AOB의 생존가능성, 또는 AOB가 제1 및 제2 성분의 혼합물과 접촉한 후에 니트라이트를 생성하는 능력을 평가하는 것을 포함하는 것인 방법.
170. 각각 바이옴-친화성인 것으로 확인된 제1 및 제2 성분을 제공하고;
     상기 제1 및 제2 성분을 조합하여, 혼합물을 형성하고;
     상기 혼합물이 바이옴-친화성인지를 결정하고, 이로써 완성된 화장품 제품을 제조하는 것
     을 포함하는, 완성된 화장품 제품을 제조하는 방법.
171. 제170항에 있어서, 결정이 AOB의 생존가능성, 또는 AOB가 제1 및 제2 성분의 혼합물과 접촉한 후에 니트라이트를 생성하는 능력을 평가하는 것을 포함하는 것인 방법.
172. 표 3으로부터 선택된 적어도 2종의 성분을 갖는 제품을 제공하고;
     화장품 제품이 사용자의 피부 상에서 박테리아, 예를 들어 유익한 박테리아, 예를 들어 AOB에 대해 안전한지 여부의 평가를 획득하고,
     이로써 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 제조하는 것
     을 포함하는, 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 제조 (평가)하는 방법.
173. 제172항에 있어서, 평가가 AOB의 생존가능성, 또는 AOB가 제품과 접촉한 후에 니트라이트를 생성하는 능력을 평가하는 것을 포함하는 것인 방법.
174. 화장품 제품의 분취량을 시험 유기체, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아와 접촉시키고;
     시험 유기체에 대한 화장품 제품의 효과를 평가하는 것
     을 포함하고,
     여기서 평가는 니트라이트를 생성하는 시험 유기체, 예를 들어 암모니아 산화 박테리아의 능력에 대한 화장품 제품의 효과를 평가하는 것을 포함하는 것인,
     화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 평가하는 방법.
175. 제174항에 있어서, 평가가, 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력이 미리 선택된 기준을 충족하는지를, 예를 들어 적어도 본원에 개시된 실시예의 도면에 제시된 바와 같이 주어진 기간에 걸쳐 니트라이트를 생성하도록 회복하는 능력을 갖는지를 결정하는 것을 포함하는 것인 방법.
176. 제174항 또는 제175항에 있어서, 시험 유기체의 능력에 대한 화장품 제품의 효과의 평가가, 완성된 화장품 제품이 "살아있는 시험 유기체를 갖는 것으로 시험되고 확정된" 것으로서 확인됨을 제공하는 것인 방법.
177. 제174항 내지 제176항 중 어느 한 항에 있어서, 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력에 대한 화장품 제품의 효과의 평가가, 완성된 화장품 제품이 "살아있는 암모니아 산화 박테리아를 갖는 것으로 시험되고 확정된" 것으로서 확인됨을 제공하는 것인 방법.
178. 암모니아 산화 박테리아 (AOB) 세포 현탁액을, 예를 들어 연속식 배양 시스템으로부터 수득하고;
     세포 현탁액으로부터 AOB 세포를 수확하고;
     보관 용액, 예를 들어 50 mM Na₂HPO₄ - 2 mM MgCl₂, pH 7.6을 포함하는 보관 용액 중에서 AOB 세포를 세척하고;
     보관 용액 중에서 AOB 세포를 5.0 (~10¹⁰ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 현탁시키고;
     약 4℃에서 AOB 세포를 보관하고;
     미리 결정된 최종 농도로 부형제를 함유하는, 암모늄 (NH₄ ⁺), 예를 들어 50 mM 암모늄으로 보충된 10 ml AOB 배지 중에서 AOB 세포를 0.5 (~ 10⁹ 세포/ml)의 최종 광학 밀도 (OD₆₀₀)로 희석하고;
     첫번째 미리 결정된 기간 동안 30℃에서 인큐베이션하여, 인큐베이션된 배양물을 제공하고;
     인큐베이션된 배양물의 분취량을 수집하고;
     인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 측정하는 것
     을 포함하는, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제를 선택하는 방법.
179. 제178항에 있어서, 인큐베이션된 배양물의 분취량을 원심분리하여 상청액 및 박테리아 펠릿을 제공함으로써, 상청액을 제공하는 것인 방법.
180. 제178항 또는 제179항에 있어서, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 추가로 포함하는 방법.
181. 제178항 내지 제180항 중 어느 한 항에 있어서,
     AOB 배지 중에서 박테리아 펠릿을 세척하고;
     NH₄ ⁺로 보충된 AOB 배지 중에서 박테리아 펠릿을 현탁시키고;
     NH₄ ⁺로 보충된 AOB 배지 중에서 박테리아 펠릿을 인큐베이션하고;
     두번째 미리 결정된 기간에서 AOB 세포를 회복시켜, 회복된 AOB 세포 샘플을 제공하고;
     회복된 AOB 세포 샘플을 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나에 대해 측정하는 것
     을 추가로 포함하는 방법.
182. 제178항 내지 제181항 중 어느 한 항에 있어서, 회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 추가로 포함하는 방법.
183. 제178항 내지 제182항 중 어느 한 항에 있어서, 세포 현탁액으로부터 AOB 세포를 수확하는 것이 세포 현탁액을 원심분리하는 것을 포함하는 것인 방법.
184. 제178항 내지 제183항 중 어느 한 항에 있어서, 부형제의 미리 결정된 최종 농도가 약 0% 내지 약 100%인 방법.
185. 제178항 내지 제184항 중 어느 한 항에 있어서, 첫번째 미리 결정된 기간이 약 1분, 약 10분, 약 60분, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 12시간 및 약 24시간 중 적어도 하나인 방법.
186. 제178항 내지 제185항 중 어느 한 항에 있어서, 두번째 미리 결정된 기간이 약 1분, 약 10분, 약 60분, 약 2시간, 약 4시간, 약 6시간, 약 12시간, 약 24시간, 약 36시간, 약 48시간, 약 72시간, 약 96시간 중 적어도 하나인 방법.
187. 암모니아 산화 박테리아 (AOB)의 샘플을 수득하고;
     첫번째 미리 결정된 기간 동안 AOB를 부형제와 접촉시켜, 인큐베이션된 배양물을 제공하고;
     인큐베이션된 배양물의 분취량을 수집하고;
     인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 측정하는 것
     을 포함하는, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제를 선택하는 방법.
188. 제187항에 있어서, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제임을 확인하는 것을 추가로 포함하는 방법.
189. 제188항에 있어서, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도가 적어도, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제인 것으로 확인되는 본원에 개시된 실시예의 도면에 제시된 바와 같은 것인 방법.
190. 제187항 내지 제189항 중 어느 한 항에 있어서,
     인큐베이션된 배양물로부터의 AOB를 NH₄ ⁺와 접촉시키고;
     두번째 미리 결정된 기간 이후에 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 축적 중 적어도 하나에 대해 회복된 AOB 세포 샘플을 측정하는 것
     을 추가로 포함하는 방법.
191. 제190항에 있어서, 회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값 및 니트라이트 농도 중 적어도 하나를 기준으로 부형제가 암모니아 산화 박테리아-친화성 성분임을 확인하는 것을 추가로 포함하는 방법.
192. 제191항에 있어서, 회복된 AOB 세포 샘플에서 OD₆₀₀ 값이, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제인 것으로 확인되는 약 0.01 초과인 방법.
193. 제191항에 있어서, 회복된 AOB 세포 샘플에서 니트라이트 농도가 적어도, 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제인 것으로 확인되는 본원에 개시된 실시예의 도면에 제시된 바와 같은 것인 방법.
194. 화합물이 암모니아 산화 박테리아에 대해 친화성이라는 지식을 획득하고;
     상기 화합물을 암모니아 산화 박테리아와 조합하여, 화장품 제품을 제공하는 것
     을 포함하는, 바이옴-친화성 조성물을 생성하는 방법.
195. 제1항 내지 제116항 중 어느 한 항의 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하는 것을 포함하는, 대상체 상에서 암모니아 산화 박테리아 (AOB)를 유지시키는 방법.
196. 제195항에 있어서, 대상체에게 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 추가로 포함하는 방법.
197. 제195항 또는 제196항에 있어서, 대상체에게 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 추가로 포함하는 방법.
198. 제195항 내지 제197항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체에게 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 추가로 포함하고, 여기서 AOB를 포함하는 제제를 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하기 이전에 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60분, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25시간, 2-5, 5-10, 10-15일, 3-4, 5-10주의 범위 중 대략 하나 사이에 적용하는 것인 방법.
199. 제195항 내지 제198항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체에게 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 AOB를 포함하는 제제를 적용하는 것을 추가로 포함하고, 여기서 AOB를 포함하는 제제를 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용한 이후에 약 1-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60분, 2-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25시간, 2-5, 5-10, 10-15일, 3-4, 5-10주의 범위 중 대략 하나 사이에 적용하는 것인 방법.
200. 제195항 내지 제199항 중 어느 한 항에 있어서, 이전 또는 이후에 바이옴-친화성이 아닌 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품을 적용하지 않는 것을 추가로 포함하는 방법.
201. 제195항 내지 제200항 중 어느 한 항에 있어서, AOB 제제 및 화장품 제품, 예를 들어 완성된 화장품 제품 중 적어도 하나가 대상체의 미리 규정된 영역에 적용되는 것인 방법.
202. 제201항에 있어서, 대상체의 미리 규정된 영역이 두부, 예를 들어 얼굴, 볼, 턱, 눈꺼풀, 입술, 코, 두피, 모발, 이마; 목; 겨드랑이; 팔; 손; 다리; 발; 가슴; 복부; 엉덩이; 음부 및 등의 부분 중 적어도 하나인 방법.
203. 제195항 내지 제202항 중 어느 한 항에 있어서, AOB가 엔. 유트로파(N. eutropha) D23인 방법.
204. 제1항에 있어서, a, b, c 및 d(i)의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 갖는 완성된 화장품 제품.
205. 제1항에 있어서, a, b, c 및 d(ii)의 특성 중 1가지, 2가지, 3가지, 4가지 또는 모두를 갖는 완성된 화장품 제품.
206. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 상기 완성된 화장품 제품이 보존제를 함유하지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
207. 제1항 내지 제56항 중 어느 한 항에 있어서, 모든 박테리아, 포자, 곰팡이 및 진균 종이 사멸되거나 또는 세포 분열할 수 없는 것인 완성된 화장품 제품.
208. 제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 모든 박테리아, 포자, 곰팡이 및 진균 종이 세포 분열을 억제하기에 충분한 방사선 유도된 DNA 손상을 갖는 것인 완성된 화장품 제품.
209. 제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 멸균 제품이, 예를 들어 USP 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균, 예를 들어 포자를 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 것인 완성된 화장품 제품.
210. 제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 USP 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품이 성장을 나타내지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
211. 제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 멸균 제품이, 예를 들어 USP 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 결정 시, 성장가능한 미생물, 예를 들어 박테리아, 예를 들어 진균을 실질적으로 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 것인 완성된 화장품 제품.
     74A. 제1항 내지 제73항 중 어느 한 항에 있어서, 성장가능한 미생물에 대한 챌린지 시, 예를 들어 상기 미생물을 USP 71에 기재된 표준 배양 방법에 의해 측정할 때, 상기 화장품 제품이 성장을 나타내지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
212. 제1항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화장품 제품 또는 완성된 화장품 제품이 제제화 동안에 또는 이후에, 예를 들어 혼합 또는 충전 이후에, 예를 들어 배치 이후에 또는 최종 사용 용기의 밀봉 이후에 140℉ 초과로 가열되지 않는 것인 완성된 화장품 제품.
213. 제1항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 화장품 제품 내 화장품 제품의 양이 10, 20, 30, 40 또는 50회 사용 또는 적용에 충분한 양과 동일하거나 또는 그보다 적은 것인 완성된 화장품 제품.
214. 제1항 내지 제100항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 완성된 제품이, 제조, 충전, 밀봉, 운송, 시중 출시 또는 판매 중 하나의 날짜로부터 X일 미만인, 예를 들어 일수로 표현된, 미리 선택된 기간 이후의 유통기한 또는 수명, 예를 들어 권장 수명의 표시를 포함하고, 여기서 X가 약 180일, 예를 들어 180일인 완성된 화장품 제품.
215. 제117항 내지 제133항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제공이 미리 선택된 일수, 예를 들어 1-28일, 예를 들어 3-7일의 유통기한 날짜 이내에 이루어지는 것인 방법.
216. 제174항에 있어서, 평가가, 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력이 미리 선택된 기준을 충족하는지를, 예를 들어 48시간의 인큐베이션 이후에 적어도 100 마이크로몰, 또는 100-1000 마이크로몰 범위인지를 결정하는 것을 포함하는 것인 방법.
217. 제174항에 있어서, 평가가, 니트라이트를 생성하는 암모니아 산화 박테리아의 능력이 미리 선택된 기준을 충족하는지를, 예를 들어 48시간의 인큐베이션 이후에 적어도 1000 마이크로몰인지를 결정하는 것을 포함하는 것인 방법.
218. 제188항에 있어서, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도가 인큐베이션 48시간 후에 측정 시 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제인 것으로 확인되는 약 100 내지 1000 마이크로몰인 방법.
219. 제188항에 있어서, 인큐베이션된 배양물의 상청액 중 니트라이트의 농도가 인큐베이션 48시간 후에 측정 시 암모니아 산화 박테리아-친화성 부형제인 것으로 확인되는 1000 마이크로몰 초과인 방법.

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