KR20160081640A - Composition for preparing frozen food using the culture product of lactic acid bacteria, and frozen food using the culture product - Google Patents

Composition for preparing frozen food using the culture product of lactic acid bacteria, and frozen food using the culture product Download PDF

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Abstract

Provided is frozen food including fermented milk, which is low in calories and has enhanced taste and ice crystal properties. The present invention relates to frozen food including fermented milk, which includes fermented milk and psicose; and to a manufacturing method thereof. The frozen food including fermented milk can be manufactured by adding psicose to an ingredient used to manufacture fermented milk, or be manufactured by adding psicose in a liquid state or a powder state after a manufacturing process of fermented milk.

Description

발효유 냉동식품 제조용 조성물 및 이를 이용한 발효유 냉동식품{Composition for preparing frozen food using the culture product of lactic acid bacteria, and frozen food using the culture product}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a composition for preparing frozen foods of fermented milk and frozen foods using the same,

본 발명은 사이코스를 포함하는 유산균 발효유의 냉동 식품 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 자세하게는 사이코스를 포함하여, 저칼로리화, 식미개선 및 빙결정 특성을 개량한, 유산균 발효유 냉동식품과, 우유-함유 원료에 유산균을 배양하여 유산균 발효유를 얻고, 상기 유산균 발효유를 동결하여 제조하는 단계를 포함하는, 사이코스를 함유하는 발효유 냉동식품의 제조방법을 제공하는 것이다.
The present invention relates to a frozen food of fermented milk of lactic acid bacteria and a method for producing the fermented milk, and more particularly to a frozen food of fermented milk of lactic acid bacteria, Containing fermented milk to obtain a fermented milk fermented milk by culturing the lactic acid bacterium in a fermented milk containing a fermented milk containing the fermented milk, and freezing the fermented milk of the lactic acid bacterium.

최근 건강에 대한 관심이 증가하면서, 인체 내에서 여러 가지 유용한 생리 활성 물질을 분비하는 것으로 알려진 유산균을 첨가한 식품에 대한 연구가 이루어지고 있다. 유산균은 젖산 발효를 함으로써 식품의 부패를 방지하고, 박테리오신과 같은 항균 물질을 분비하여 식중독균을 억제하며, 사람의 장내 수소이온농도(pH)를 낮추어 장내 부패 세균의 증식을 억제하는 등 인체에 유익한 균으로 작용한다. Recently, as interest in health has increased, studies have been conducted on foods containing lactic acid bacteria known to secrete various useful physiologically active substances in the human body. Lactic acid bacteria prevent fermentation of lactic acid by fermenting food, secrete antimicrobial substances such as bacteriocin to inhibit food poisoning bacteria, lower the pH of human intestinal pH and inhibit the growth of intestinal bacteria. Lt; / RTI >

유산균 발효 유제품으로는 치즈, 버터밀크, 요구르트 등이 있으며, 최근에는 이들 중 다양한 기능성 요구르트가 널리 시판되고 있는데, 류코노스톡 속, 락토바실러스 속, 락토코커스 속의 유산균을 단독 또는 혼합 스타터로 접종하여 우유를 발효시킴으로써 기능성이 높은 유산균 발효 유제품이 출시되고 있다. Among the lactic acid bacteria fermented dairy products, there are cheese, buttermilk, yogurt, etc. Recently, a variety of functional yogurt has been widely marketed. Lactobacillus, lactobacillus, and lactococcus lactic acid bacteria are inoculated alone or as a mixed starter, Fermented dairy products having high functionality are being released.

유산균이 생균 형태로 포함되는 것이 일반적이므로 저장 또는 유통기간 동안 제품의 변질 문제를 해결할 필요가 있다. 또한, 발효유는 대부분은 액상 및 고상의 형태로 그대로 섭취하고 있어, 다양한 형태로 가공하여 용이하게 섭취할 수 있는 새로운 형태의 제품이 필요하다. Lactic acid bacteria are generally contained in the form of live bacteria, so it is necessary to solve the problem of deterioration of the product during storage or distribution. In addition, since most of the fermented milk is consumed in the form of liquid or solid, it needs a new type of product which can be processed into various forms and easily ingested.

이러한 요구에 부합하는 제품으로서 발효유 냉동식품, 예컨대 발효유 아이스크림, 스무디 등을 개발하였으나, 발효유의 식미 및 식감을 개선할 필요가 있으며, 또한 발효유 냉동식품의 섭취시 구용성 및 부드러운 식감을 구현할 필요가 있다. 따라서, 발효유 냉동식품의 저칼로리화, 식미개선 및 빙결정 특성을 개량한 제품의 개발에 대한 필요는 여전한 실정이다.
However, it is necessary to improve the taste and texture of the fermented milk. Further, it is necessary to realize the ease of use and soft texture at the time of ingesting the fermented milk frozen food . Therefore, there is a continuing need for the development of products that improve the low calorie, flavor and ice crystal characteristics of fermented milk frozen foods.

본 발명은 사이코스를 포함하여, 저칼로리화, 식미개선 및 빙결정 특성을 개량한, 유산균 발효유의 냉동식품을 제공하고자 한다. The present invention intends to provide a frozen food of fermented milk of lactic acid bacteria, which comprises low-calorie, improved flavor and improved ice crystal characteristics, including a psicose.

또한, 본 발명은 우유-함유 원료에 유산균을 배양하여 유산균 발효유를 얻고, 상기 유산균 발효유를 동결하여 제조하는 단계를 포함하는, 사이코스를 함유하는 발효유 냉동식품을 제공하는 것이다.
The present invention also provides a fermented milk frozen food containing a scicos comprising the step of culturing a lactic acid bacterium in a milk-containing raw material to obtain a fermented milk of lactic acid bacteria and freezing the fermented milk of the lactic acid bacteria.

본 발명에 따른 발효유 냉동식품은 발효유와 사이코스를 포함하는 발효유 냉동식품 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 사이코스를 발효유 제조를 위한 원료에 첨가하여 제조하거나, 발효유를 제조한 이후에 사이코스를 액상 또는 분말상으로 첨가하여 제조할 수도 있다. A fermented milk frozen food according to the present invention is a fermented milk frozen food comprising fermented milk and cicos, and a process for producing the fermented milk, Or in powder form.

본 발명에 따른 발효유 냉동식품은 사이코스를 포함하여 적한합 배합비의 조성물을 제공하여, 발효유 냉동식품의 빙결정을 작게 하고, 풍미 및 식미가 개선되며, 빙결정 크기를 작게 함으로써 융해가 용이하며, 뒷맛이 양호한 냉동식품을 얻을 수 있다. The fermented milk frozen food according to the present invention provides a composition with a proper combination ratio including a scoosus, thereby reducing the ice crystal of the fermented milk frozen food, improving the flavor and taste of the fermented milk frozen food, A frozen food having a good aftertaste can be obtained.

본 발명에 따른 발효유 냉동식품은, 상기 발효유와 당류를 포함하는 발효유 냉동식품 제조용 조성물을 동결하여 제조되며, 텍스쳐 분석기로 측정한 경도가 10,000 내지 20,000일 수 있다. 본 발명에 따라, 사이코스를 첨가한 제품은 백설탕과 액상과당을 사용한 제품에 비해서, 냉동식품의 녹는 속도가 빠르며, 소비자가 용이하게 신속히 섭취할 수 있으며, 구용성이 우수하다.The fermented milk frozen food according to the present invention is prepared by freezing the composition for preparing frozen foods containing fermented milk and saccharide, and has a hardness of 10,000 to 20,000 as measured by a texture analyzer. According to the present invention, the product to which the psicose is added has a faster dissolution rate of the frozen food than the product using the white sugar and the liquid fructose, can be easily consumed quickly, and is excellent in usability.

본 발명에 있어서, 발효유 냉동식품은 우유-함유 원료에 유산균을 접종하고 배양하여 얻어진 유산균 배양액에, 사이코스를 함유하는 당류를 첨가하여 냉동한 제품으로서, 다양한 조성으로 제조될 수 있다. 구체적으로, 발효유를 냉동한 것뿐만 아니라 유크림을 포함하는 발효유 아이스크림, 아이스크림의 예로는 유지방분(우유로부터 얻은 지방분을 말한다, 이하 같다) 6% 이상, 유고형분(유지방분과 무지유고형분을 합한 것을 말한다. 이하 같다) 16% 이상의 것으로 정의되는 좁은 의미의 아이스크림류, 유지방분 2% 이상, 유고형분 7% 이상의 아이스밀크류, 무지유고형분 2% 이상의 샤베트류, 조지방 2% 이하, 무지유고형분 10% 이상인 저지방 아이스크림, 및 조지방 5% 이상, 무지유고형분 5% 이상의 비유지방 아이스크림을 포함하며, 바람직하게는 동결건조시 빙결정 크기 등을 고려할 때, 유지방분(우유로부터 얻은 지방분을 말한다, 이하 같다) 6% 이상, 유고형분(유지방분과 무지유고형분을 합한 것을 말한다. 이하 같다) 16% 이상의 것으로 정의되는 좁은 의미의 아이스크림류이다. In the present invention, the fermented milk-frozen food is a frozen product obtained by adding a saccharide containing a saccharide to a lactic acid bacterium culture liquid obtained by inoculating a lactic acid bacterium into a milk-containing raw material and culturing, and may be manufactured in various compositions. Concretely, not only fermented milk is frozen but also fermented milk ice cream and ice cream including milk cream contain not less than 6% of milk fat (milk fat derived from milk), milk solids (milk fat and milk solids) Ice cream, which is defined as 16% or more, ice milk of 2% or more in fat content, 7% or more of milk solids, 2% or more of sorbitol milk solubles, 2% or less of crude fat, % Fat ice cream, and at least 5% crude fat and at least 5% non-fat milk solids. Preferably, the freeze-dried milk fat is free from milk fat, ) Of not less than 6%, milk solids (milk fat equivalent and non-fat milk solids combined) A device keurimryu.

상기 발효유는 다양한 우유-함유 원료에 유산균을 접종하고 배양하여 얻어진 유산균 배양액일 수 있다. 상기 우유-함유 원료는 우유-함유 원료는 생유, 저지방우유, 무지방우유, 환원유, 환원저지방우유 및 탈지분유로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며 유산균 배양이 적절히 수행되어 배양물을 얻을 수 있다면 특별히 한정하지 않는다.The fermented milk may be a lactic acid bacteria culture obtained by inoculating and culturing lactic acid bacteria in various milk-containing raw materials. The milk-containing raw material may be at least one selected from the group consisting of raw milk, low fat milk, non-fat milk, reduced milk, reduced low fat milk and skim milk powder, and cultured lactobacilli may be suitably obtained to obtain a culture There is no particular limitation.

본 발명에 따른 유산균 배양액을 제조하기 위한 유산균은 특별히 제한하지 않으며, 락토바실러스속 균주, 비피도박테리움속 균주, 스트렙토코커스속 유산균 등 다양한 종류의 유산균을 사용할 수 있으며, 이들 유산균은 단독 또는 2종 이상의 혼합물로 사용될 수 있다. 본 발명의 일예에 따른 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) 및 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum)로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 유산균일 수 있다.The lactic acid bacterium for producing the lactic acid bacterium according to the present invention is not particularly limited, and various types of lactic acid bacteria such as Lactobacillus sp., Bifidobacterium sp., Streptococcus sp. Lactic acid bacteria can be used. Can be used as the above mixture. The lactic acid bacterium according to an embodiment of the present invention may be selected from the group consisting of Lactobacillus acidophilus , Streptococcus thermophilus , and Bifidobacterium bifidum. [ 0033 ] The term " lactobacillus "

유산균 배양액 또는 발효물을 얻기 위해, 우유-함유 원료에 유산균을 접종하고, 배양하는 공정을 수행할 수 있으며, 각 공정의 구체적 조건은 사용하는 유산균 종류, 목적하는 발효 유제품 등 다양한 요소에 의해서 결정될 수 있으나, 특별히 한정하는 것은 아니다. In order to obtain a culture medium for lactic acid bacteria or a fermented product, lactic acid bacteria may be inoculated and cultured in a milk-containing raw material. The specific conditions of each step may be determined by various factors such as the type of lactic acid bacteria used and the desired fermented milk products However, it is not particularly limited.

상기 발효유 제조를 위한 원료에는 우유제품에 더하여 유지방 제품, 덱스크린, 변성전분, 유화제, 검류, 과일 추출물, 과일 분말, 향료 및 색소로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. The raw materials for preparing the fermented milk may further comprise at least one additive selected from the group consisting of milk products, milk products, deck screens, modified starch, emulsifiers, gums, fruit extracts, fruit powders, perfumes and pigments.

상기 유지방 제품은 유크림, 유버터 및 가공 유버터로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 본 발명에 따른 발효유 냉동식품에 유지방 제품을 첨가함으로써 영양가가 높으며 냉동 발효유의 고형감과 조직의 유연성을 부여함과 동시에 풍부한 풍미를 제공한다. 상기 조성물의 전체 고형분 100 중량부 기준으로, 상기 유지방 제품은 0.1 내지 20 중량부로 포함될 수 있다. The milk fat product may be at least one selected from the group consisting of milk cream, milk butter and processed milk butter. The fermented milk according to the present invention is improved in nutritive value by adding a milk fat product to the frozen food, and gives a solid feeling of frozen fermented milk and flexibility of the tissue and provides a rich flavor. Based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition, 0.1 to 20 parts by weight of the milk fat product may be included.

본 발명의 발효유 냉동식품중 포함되는 사이코스의 함량은 상기 조성물의 전체 고형분 100 중량부 기준으로, 0.5 내지 50 중량부일 수 있다. 상기 사이코스를 포함하는 당류는 상기 조성물의 전체 고형분 100 중량부 기준으로, 5 내지 50 중량부일 수 있다. The content of the scissors contained in the fermented milk frozen foods of the present invention may be 0.5 to 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition. The saccharide containing the cyclosporin may be 5 to 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition.

상기 사이코스는 단독 당류로 사용될 수 있으나, 다른 당류와 혼합하여 사용될 수도 있다. 상기 당류는 사이코스 이외에, 설탕, 물엿 및 고감미도 감미료로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함할 수 있으며, 예를 들면 설탕 및 물엿으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상과 사이코스의 혼합물일 수 있다. Saikosuke may be used as a single saccharide, but may be used in combination with other saccharides. The saccharide may further include at least one selected from the group consisting of sugar, millet, and high-intensity sweetener in addition to the psicose. For example, the saccharide may be a mixture of at least one selected from the group consisting of sugar and syrup, .

상기 고감미도 감미료는 아스파탐, 아세설팜 K, 사이클라민산 나트륨, 사카린 나트륨, 수크랄로스, 스테비아 감미료(스테비올 배당체, 효소처리 스테비아), 둘신, 타우마틴, 토마틴, 네오탐 및 모넬린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다. The high-intensity sweetener is preferably selected from the group consisting of aspartame, acesulfame K, sodium cyclamate, sodium saccharin, sucralose, stevia sweetener (steviol glycoside, enzyme treated stevia), dicin, tau martin, And the like.

예를 들면, 당류로서 사이코스, 물엿 및 설탕을 포함하는 경우, 상기 조성물의 전체 고형분 100 중량부 기준으로, 사이코스 0.1 내지 50 중량부, 물엿 0.5 내지 10 중량부, 및 설탕 0.5 내지 20 중량부로 포함할 수 있다. For example, when the saccharide includes sucrose, starch syrup, and sugar, 0.1 to 50 parts by weight of sucrose, 0.5 to 10 parts by weight of starch, 0.5 to 20 parts by weight of sugar, and 0.5 to 20 parts by weight of sucrose, .

상기 사용 가능한 설탕 종류는 특별한 제한이 없으며, 예컨대 백설탕, 흑설탕, 또는 황설탕 등이 사용될 수 있고, 그 외에도 당흡수율을 낮추거나 칼로리를 낮춘 기능성 설탕 조성물을 포함할 수 있다. 사용 가능한 고감미료는 천연감미료나 합성 감미료일 수가 있고, 예를 들면 아스파탐, 아세설팜 K, 사이클라민산 나트륨, 사카린 나트륨, 스쿠랄로스, 스테비아 감미료(스테비올 배당체, 효소처리 스테비아), 둘신, 타우마틴, 토마틴, 네오탐 및 모넬린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다. There is no particular limitation on the type of sugar that can be used. For example, white sugar, brown sugar, or yellow sugar can be used. In addition, a functional sugar composition that lowers sugar absorption or low calorie may be included. The high-boiling sweeteners which can be used are natural sweeteners and synthetic sweeteners, for example, aspartame, acesulfame K, sodium cyclamate, sodium saccharin, squalol, stevia sweetener (steviol glycoside, enzyme-treated stevia) Taurine, taurine, taurine, taurine, taurine, taurine, taurine, taurine,

본 발명에 따른 발효유 제조용 조성물에 포함되는 사이코스는 순도 90% 이상의 사이코스를 분말 또는 이를 이용하여 다양한 농도로 제조한 용액일 수 있다. 또한, 상기 사이코스는 사이코스 단독으로 사용하거나, 또는 추가의 다른 당류를 포함하는 혼합당일 수 있으며 혼합당의 예는 전체 혼합당의 고형분 100중량부를 기준으로 1 내지 99.9 중량부의 사이코스를 함유할 수 있으며, 추가적으로 과당, 포도당, 및 올리고당으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다. The saccharose contained in the composition for producing fermented milk according to the present invention may be a solution prepared by dissolving saccharose having a purity of 90% or more at various concentrations using the powder. Saikosu may be used alone or in combination with other saccharides. Examples of mixed sugars may contain from 1 to 99.9 parts by weight of Saikosu based on 100 parts by weight of solids in the total mixed sugar , And may further include at least one member selected from the group consisting of fructose, glucose, and oligosaccharides.

상기 사이코스 함유 혼합당의 구체적인 예는 혼합당의 전체 고형분 함량 100중량부를 기준으로, 사이코스 2 내지 55 중량부, 과당 30 내지 80 중량부 및 포도당 2 내지 60 중량부, 및 올리고당 0 내지 15 중량부를 포함하는 것일 수 있으며, 올리고당은 포함하지 않을 수도 있다. 상기 사이코스, 과당 및 포도당은 바람직하게는 모두 D형-이성질체인 것이다. Specific examples of the saccharide-containing mixed sugar include 2 to 55 parts by weight of psicose, 30 to 80 parts by weight of fructose, 2 to 60 parts by weight of glucose, and 0 to 15 parts by weight of oligosaccharide based on 100 parts by weight of the total solid content of the mixed sugar And may not include oligosaccharides. Saikos, fructose and glucose are preferably both D-isomer.

상기 사이코스는 화학적 합성, 또는 사이코스 에피머화 효소를 이용한 생물학적 방법으로 수행할 수 있으며, 바람직하게는 생물학적 방법으로 수행할 수 있다. 이에, 상기 사이코스는 사이코스 에피머화 효소, 상기 효소를 생산하는 균주의 균체, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 사이코스 생산용 조성물을, 과당-함유 원료와 반응하여 제조된 것일 수 있다. Saikosu can be carried out by chemical synthesis, or by biological methods using a cyclic epimerase, preferably by a biological method. Thus, the above-mentioned psicose includes at least one selected from the group consisting of psicose epimerase, cells of the strain producing the enzyme, culture of the strain, lysate of the strain, and extracts of the lysate or the culture The composition for producing psicose may be one prepared by reacting with a fructose-containing raw material.

본 발명의 일예에서, 생물학적 방법에 따라 사이코스를 제조하는 방법으로는 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 배양하고, 이로부터 얻어진 사이코스 에피머화 효소를 과당-함유 원료와 반응하여 생산할 수 있다. 상기 사이코스 에피머화 효소는 액상 반응 또는 고정화 효소를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다. In one embodiment of the present invention, a method for producing a scikos according to a biological method includes a method of culturing a strain producing a < RTI ID = 0.0 > cytokine < / RTI > epimerizing enzyme or a recombinant strain into which a gene encoding a scikos epimerase has been introduced, The course epimerase can be produced by reacting with a fructose-containing raw material. The above-mentioned cyclic epimerase can be carried out as a solid phase reaction using a liquid phase reaction or an immobilized enzyme.

또는, 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주 또는 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 유전자가 도입된 재조합 균주를 얻고, 균주의 균체, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 및 상기 파쇄물 또는 배양물의 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 사이코스 생산용 조성물을, 과당-함유 원료와 반응하여 제조될 수 있다. 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주의 균체를 이용하여 사이코스를 제조하는 경우 액상 반응 또는 고정화 균체를 이용한 고상 반응으로 수행될 수 있다.Alternatively, a strain producing a cytomegalovirus or a recombinant strain into which a gene encoding a cytomegalovirus is introduced is obtained, and the culture of the strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, and the lysate of the lysate or the culture Extract of the present invention can be produced by reacting a composition for producing a scorch, which comprises at least one member selected from the group consisting of a fructose-containing raw material, and a fructose-containing raw material. In the case of producing the cytosine using bacterial strains producing the Escherichia epimerase, the reaction can be carried out in the solid phase reaction using a liquid reaction or immobilized cells.

본 발명의 구체적 일예에서, 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 균주로는 높은 안정성을 가지면서도 고수율로 사이코스 에피머화 효소를 생산할 수 있는 균주일 수 있으며. 상기 재조합 균주는 다양한 숙주세포, 예컨대 대장균, 바실러스속 균주, 살모넬라속 균주 및 코리네박테리움속 균주 등을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 GRAS 균주인 코리네박테리움속 균주일 수 있으며, 코리네박테리움 글루타리쿰일 수 있다. In a specific example of the present invention, as a strain producing a psicose epimerase, it may be a strain capable of producing a psicose epimerase at a high yield while having high stability. The recombinant strain may be a variety of host cells such as Escherichia coli, Bacillus sp., Salmonella sp., And Corynebacterium sp., Preferably, a strain of the genus Corynebacterium, which is a GRAS strain, Lt; / RTI > glutaricum.

재조합 균주를 이용한 경우 사이코스 에피머화 효소는 다양한 균주에서 유래된 효소의 암호화 유전자를 사용할 수 있으며, 예를 들면 한국특허공개 2014-0021974에 기재된 트리포네마 프리미티아 유래 효소, 한국특허공개 2014-0080282에 기재된 루미노코코스 토르크 유래 효소 및 한국등록특허 10-1318422호에 기재된 클로스티리디움 신댄스 유래 효소일 수 있으며, 또한 엔시퍼 아드해렌스 유래 효소일 수 있다. 구체적인 일예에서, 본 발명에 따른 사이코스 에피머화 효소는 클로스티리디움 신댄스 유래 효소일 수 있으며, 예를 들면 서열번호 7의 아미노산 서열을 가지며, 서열번호 8 또는 서열번호 9 핵산서열을 포함한다. 서열번호 8의 핵산서열은 대장균 최적화 핵산서열이고, 서열번호 9은 코리네박테리움에 적합하게 변형된 핵산서열이다. In the case of using a recombinant strain, the gene encoding an enzyme derived from various strains can be used as a cytomegalic epimerase. For example, an enzyme derived from trifoneme primitia described in Korean Patent Publication No. 2014-0021974, Korean Patent Publication No. 2014-0080282 Or an enzyme derived from Clostridials dans according to Korean Patent No. 10-1318422, and may also be an enzyme derived from enciphered Halsen. In a specific example, the cytosine epimerase according to the present invention may be an enzyme derived from a clostridial synthase, for example, having an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, and a nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 8 or SEQ ID NO: 9. The nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 8 is an E. coli optimized nucleic acid sequence and the SEQ ID NO: 9 is a nucleic acid sequence modified appropriately to Corynebacterium.

본 발명의 일예에 따른 재조합 균주의 제조에 있어서, 상기 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 핵산서열의 상부에 위치하는 조절 서열을 사용하여 효소의 발현을 조절할 수 있으며, 조절서열은 전사 프로모터를 필수적으로 포함하며, 추가로 리보솜 결합 영역 및/또는 스페이서 서열 등을 포함할 수 있다. 상기 조절 서열을 구성하는 요소들은 직접 연결되거나 1개 내지 100개의 염기, 예를 들면 5개 내지 80 염기를 가지는 핵산서열의 링커를 하나 이상 포함하여 연결될 수 있다.In the production of the recombinant strain according to an embodiment of the present invention, the expression of the enzyme may be regulated using a regulatory sequence located on the upper side of the nucleic acid sequence encoding the above-mentioned cyclic epimerase, and the regulatory sequence is essentially a transcription promoter And may further include ribosome binding regions and / or spacer sequences, and the like. The elements constituting the regulatory sequence may be directly linked or linked by including one or more linkers of the nucleic acid sequence having 1 to 100 bases, for example, 5 to 80 bases.

일구체예에서, 상기 전사 프로모터는 코리네박테리움속 균주에서 사이코스 에피머화 효소를 암호화하는 핵산서열을 발현하는 핵산분자일 수 있으나, tac1, tac2, trc, sod 프로모터일 수 있다. sod 프로모터는 코리네박테리움 글루타리쿰에서 유래된 것이며, 바람직하게는 서열번호 1의 핵산서열을 코어영역으로 포함한다. trc 프로모터는 대장균 유래 프로모터로서 trp 프로모터과 lac UV5 프로모터의 조합으로 제조된 것이다. Tac1 프로모터는 대장균 유래 프로모터로서, trp 프로모터과 lac UV5 프로모터의 조합으로 제조된 것이다. Tac2 프로모터는 대장균 유래 프로모터로서, trp 프로모터과 lac UV5 프로모터의 조합으로 제조된 것으로서 상기 Tac1 프로모터의 서열을 변형하여 최적화한 형태이다. In one embodiment, the transcriptional promoter may be a nucleic acid molecule that expresses a nucleic acid sequence encoding a cyclic epimerase in a Corynebacterium sp. Strain, but may be a tac1, tac2, trc, or sod promoter. The sod promoter is derived from Corynebacterium glutaricum, and preferably comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 as a core region. The trc promoter is an Escherichia coli -derived promoter produced by a combination of the trp promoter and the lac UV5 promoter. The Tac1 promoter is an Escherichia coli-derived promoter, which is produced by a combination of the trp promoter and the lac UV5 promoter. The Tac2 promoter is an Escherichia coli-derived promoter, which is prepared by a combination of the trp promoter and the lac UV5 promoter, and is optimized by modifying the sequence of the Tac1 promoter.

상기 리보좀 결합 영역과 스페이서는 화학적으로 직접 연결되거나 그 중간에 링커 핵산서열을 개재하여 간적접으로 연결될 수 있다. 본 발명의 일예에서 리보좀 결합영역(ribosome binding region) 및 스페이서 서열은 5'부터 3'-말단으로 순차적으로 연결된 하나의 올리고뉴클레오타이드를 포함할 수 있다. 본 발명의 일예에 따른 프로모터 서열, 리보좀 결합 영역(ribosome binding region) 및 스페이서 서열의 핵산서열을 하기 표 1에 나타낸다. 표 1에서 이탤릭체 진하게 밑줄로 표시된 부분은 조절서열중, 리보솜 결합 영역, 스페이서 서열, 링커 서열등을 나타낸다.The ribosome binding region and the spacer may be chemically linked directly or indirectly via a linker nucleic acid sequence in between. In an embodiment of the present invention, the ribosome binding region and the spacer sequence may include one oligonucleotide sequentially connected to the 5 'to 3'-terminal. The nucleotide sequences of the promoter sequence, the ribosome binding region and the spacer sequence according to an embodiment of the present invention are shown in Table 1 below. In Table 1, italic and boldly underlined parts indicate the ribosome binding region, the spacer sequence, the linker sequence, and the like in the regulatory sequence.

서열
번호order
number 서열(5'--> 3')Sequences (5 '-> 3') 명명denomination 1One aagcgcc tcatcagcgg taaccatca cgggttcgggt gcgaaaaacc atgccataac aggaatgttc ctttcgaaaa ttgaggaagc cttatgccct tcaaccctac ttagctgcca attattccgg gcttgtgacc cgctacccgataaataggtc ggctgaaaaa tttcgttgca atatcaacaa aaaggcctat cattgggaggtgtcgcacca agtacttttg cgaagcgcca tctgacggat tttcaaaaga tgtatatgct cggtgcggaa acctac
gaaagga ttttttaccc atggctg tatacgaact cccagaactc gactacgcat acgac
gaaagga ttacaaa aagcgcc tcatcagcgg taaccatca cgggttcgggt gcgaaaaacc atgccataac aggaatgttc ctttcgaaaa ttgaggaagc cttatgccct tcaaccctac ttagctgcca attattccgg gcttgtgacc cgctacccgataaataggtc ggctgaaaaa tttcgttgca atatcaacaa aaaggcctat cattgggaggtgtcgcacca agtacttttg cgaagcgcca tctgacggat tttcaaaaga tgtatatgct cggtgcggaa acctac
gaaagga ttttttaccc atggctg tatacgaact cccagaactc gactacgcat acgac
gaaagga ttacaaa Sod promoter
Sod promoter
22 tgacaattaatcatcggctcgtatattgt gtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagaattcccggg gaaagga ttacaaa tgacaattaatcatcggctcgtatattgt gtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagaattcccggg gaaagga ttacaaa tac1 promoter
tac1 promoter
33 Tgacaattaatcatccggctcgtataatgt taacaatttgtggaattgtgagcggacacacaggaaacagaccatggaattcgagctcggtacccggg gaaagga ttacaaa Tgacaattaatcatccggctcgtataatgt taacaatttgtggaattgtgagcggacacacaggaaacagaccatggaattcgagctcggtacccggg gaaagga ttacaaa Tac2 promoter
Tac2 promoter
44 TgacaattaatcatcggcctcgtataatgtTgacaattaatcatcggcctcgtataatgt trc promoter
trc promoter
55 GaaaggaGaaagga Ribosome binding regionRibosome binding region 66 TtacaaaTtacaaa Spacer sequenceSpacer sequence

본 발명에 따른 사이코스 에피머화 효소는 효소활성 및 열안정성이 우수한 것이 바람직하고, 이에 본 발명의 구체예에서, 전사 프로모터 또는 조절서열은 사이코스 에피머화 효소를 코딩하는 유전자와의 조합이 중요하며, 본 발명에 사용된 사이코스 에피머화 효소와는 tac1, tac2, trc, sod 프로모터 모두 적정 이상의 단백질 발현을 제공할 수 있으며, sod 프로모터를 사용한 경우에는 단백질의 폴딩(folding)이 견고하여 열안정성이 높게 나타나는 결과를 얻을 수 있어 더욱 바람직하다.It is preferable that the cyclic epimerase according to the present invention is excellent in enzyme activity and thermal stability. Accordingly, in the embodiment of the present invention, the combination of the transcriptional promoter or the regulatory sequence with the gene encoding the cyclic epimerase is important , The tac1, tac2, trc, and sod promoters used in the present invention can provide more than adequate titers of protein expression, and when the sod promoter is used, folding of the protein is robust, It is more preferable to obtain a result which is high.

재조합 균주를 이용한 사이코스 생산방법등은 한국특허공개 2014-0021974, 한국특허공개 2014-0080282 및 한국등록특허 10-1318422호에 기재된 방법에 따라 수행될 수 있으나 특별히 한정되지 않는다. 상기 사이코스 생산 방법에 있어서, 효율적인 사이코스 생산을 위하여, 기질로서 사용되는 과당의 농도는 전체 반응물 기준으로 40 내지 75%(w/v), 예컨대, 50 내지 75%(w/v)일 수 있다. 과당의 농도가 상기 범위보다 낮으면 경제성이 낮아지고, 상기 범위보다 높으면 과당이 잘 용해되지 않으므로, 과당의 농도는 상기 범위로 하는 것이 좋다. 상기 과당은 완충용액 또는 물(예컨대 증류수)에 용해된 용액 상태로 사용될 수 있다.The method of producing a psicos using a recombinant strain can be carried out according to the method described in Korean Patent Publication Nos. 2014-0021974, 2014-0080282 and Korean Patent No. 10-1318422, but is not particularly limited. In the above-mentioned method of producing a scicos, the concentration of fructose used as a substrate may be 40 to 75% (w / v), for example, 50 to 75% (w / v) have. When the concentration of fructose is lower than the above range, economical efficiency is lowered. When the concentration of fructose is higher than the above range, fructose is not dissolved well, so that the concentration of fructose is preferably within the above range. The fructose may be used in the form of a solution dissolved in a buffer solution or water (e.g., distilled water).

본 발명에 따른 조성물은, 유화제, 변성전분, 덱스트린, 검류, 항료, 색소, 과일 추출물, 과일 분말 및 산도조절제로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.The composition according to the present invention may further comprise at least one additive selected from the group consisting of an emulsifier, modified starch, dextrin, gum, glue, pigment, fruit extract, fruit powder and acidity regulator.

본 발명의 구체예에서, 상기 조성물의 총고형분 함량 100 중량부를 기준으로, 생유 10 내지 60 중량부, 탈지분유 1 내지 10 중량부, 사이코스 0.5 내지 50중량부, 유지방제품 0.1 내지 20 중량부, 및 유화제 0.01 내지 5 중량부로 포함할 수 있다.In an embodiment of the present invention, 10 to 60 parts by weight of raw milk, 1 to 10 parts by weight of skim milk, 0.5 to 50 parts by weight of sucrose, 0.1 to 20 parts by weight of a milk fat product based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition, And 0.01 to 5 parts by weight of an emulsifier.

상기 유화제는 유크림(유지방)을 균일하게 분산시키는 기능을 수행하는 것으로서, 사용 가능한 유화제는 식품에 사용가능한 유화제라면 특별히 제한이 없으며, 예를 들면 비이온계 유화제, 양이온성 유화제, 양쪽성 유화제 등을 사용할 수 있으며, 구체적으로 레시틴, 모노글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린축합지방산에스테르, 및 폴리소르베이트계 유화제로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다. 상기 지방산은 탄소수 12 내지 20을 갖는 지방산일 수 있다. 구체적인 예로는, 지방산프로필렌 글리콜 에스테르, 글리세린지방산에스테르, 레시틴, 프로필렌글리콜 및 소르비탄지방산 에스테르로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며, 특히 지방산프로필렌 글리콜 에스테르, 글리세린지방산에스테르, 레시틴이 바람직하다.The emulsifier functions to uniformly disperse the milk cream (milk fat). The emulsifier that can be used is not particularly limited as long as it is an emulsifier that can be used in foods. Examples thereof include nonionic emulsifiers, cationic emulsifiers, amphoteric emulsifiers, And may specifically include at least one member selected from the group consisting of lecithin, monoglycerin fatty acid ester, polyglycerin condensed fatty acid ester, and polysorbate emulsifier. The fatty acid may be a fatty acid having 12 to 20 carbon atoms. Specific examples thereof may include at least one selected from the group consisting of fatty acid propylene glycol esters, glycerin fatty acid esters, lecithin, propylene glycol and sorbitan fatty acid esters, and particularly preferred are fatty acid propylene glycol esters, glycerin fatty acid esters and lecithin.

본 발명에 사용 가능한 변성전분은 산화전분(Oxidized Starch), 아세틸아디핀산이전분 (Acetylated Distarch Adipate), 아세틸인산이전분(Acetylated Distarch Phosphate), 옥테닐호박산나트륨전분(Starch Sodium Octenyl Succinate), 인산이전분(Distarch Phosphate), 인산일전분(Monostarch Phosphate), 인산화인산이전분(Phosphated Distarch Phosphate), 초산전분(Starch Acetate), 히드록시프로필인산이전분(Hydroxypropyl Distarch Phosphate) 및 히드록시프로필전분(Hydroxypropyl Starch) 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 본 발명의 냉동 발효유 제조용 조성물에 있어서, 변성전분은 전체 고형분 100 중량부 기준으로 0.1 내지 5 중량부로 포함될 수 있다.Modified starches usable in the present invention include starches such as oxidized starch, acetylated distarch adipate, acetylated distarch phosphate, starch sodium octenyl succinate, Phosphated Distarch Phosphate, Phosphated Distarch Phosphate, Starch Acetate, Hydroxypropyl Distarch Phosphate and Hydroxypropyl Starch Phosphate Starch Acetate, Hydroxypropyl Distarch Phosphate, ), And the like. In the composition for preparing frozen fermented milk according to the present invention, the modified starch may be contained in an amount of 0.1 to 5 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content.

본 발명의 냉동 발효유 제조용 조성물에 있어서, 덱스트린은 전체 고형분 100중량부 기준으로 0.1 내지 5 중량부로 포함될 수 있다. 상기 함량범위보다 지나치게 작은 경우 발효유 냉동식품 제조시 식감이 서걱거리는 조직이 되는 문제가 있고, 상기 범위를 초과하여 포함될 경우 발효유 냉동식품의 물성이 진득진득해져 늘어나는 조직이 되고, 맛을 약하게 하는 문제가 있어 바람직하지 않다. 덱스트린은 전분을 화학적 또는 효소적 방법으로 저분자화시킨 물질로, 일반 덱스트린, 말토덱스트린, 사이클로덱스트린, 아밀로덱스트린 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.In the composition for preparing frozen fermented milk according to the present invention, the dextrin may be contained in an amount of 0.1 to 5 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content. When the content of the fermented milk is less than the above-mentioned range, there is a problem that the texture of the fermented milk frozen food becomes a frosted tissue. When the fermented milk exceeds the above range, the properties of the fermented milk frozen food become more evident, Which is undesirable. Dextrin is a substance obtained by chemically or enzymatically reducing starch by low molecular weight and may include at least one selected from the group consisting of general dextrin, maltodextrin, cyclodextrin, amylodextrin, and the like.

검류는 낮은 농도에서도 높은 점성을 나타내는 혼종 다당류(heteropolysaccharides)의 일종인 검류는 식품공업에서 유화제, 안정제, 점착제, 팽윤제, 겔 형성제, 결합제 등으로 널리 이용된다. 검류는 물과 결합하여 점성용액이나 겔을 형성하는 친수성 물질이며, 같은 분자량을 가진 경우에 직쇄상의 검류가 가지를 많이 가진 검류보다 점도가 높은 것을 말한다. 상기 검류는 점도 조절제로 기능하며, 구체적인 예로는 셀룰로오스검, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 아라비아검, 트라가칸트검, 카라야검, 로커스트콩검, 타마린드콩검, 한천, 알긴산, 카라기난 및 젤란검으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 본 발명의 냉동 발효유 제조용 조성물에 있어서, 검류는 전체 고형분 100중량부 기준으로 0.1 내지 1.0 중량부로 포함될 수 있다. Gum, which is a type of heteropolysaccharides with high viscosity at low concentration, is widely used in the food industry as an emulsifier, stabilizer, adhesive, swelling agent, gel forming agent and binder. Sulfur is a hydrophilic substance that forms a viscous solution or gel when combined with water. In the case of having the same molecular weight, it means that the straight stream is more viscous than the gum with many branches. The gum functions as a viscosity modifier. Specific examples thereof include cellulose gum, carboxymethyl cellulose sodium, gum arabic, tragacanth gum, karaya gum, locust bean gum, tamarind soybean gum, agar, alginic acid, carrageenan and gellan gum It may be at least one selected. In the composition for preparing frozen fermented milk according to the present invention, the gum may be contained in an amount of 0.1 to 1.0 part by weight based on 100 parts by weight of the total solid content.

본 발명에 따른 발효유 냉동식품은 과일 추출물 또는 과일 분말 등을 첨가하여 제조할 수도 있다. The fermented milk frozen food according to the present invention may be prepared by adding fruit extract or fruit powder.

상기 산도조절제는 냉동 발효유 제조용 조성물의 최적 pH를 조절하여 식미, 식감 및 저장 안정성 등의 물성을 확보하기 위해 사용되며, 통상 식품에 사용 가능한 산도 조절제는 모두 사용할 수 있다. 산도조절제의 예로는 구연산, 젖산, 주석산, 푸마르산 등의 유기산과 그 염류, 탄산칼륨이나 탄산수소나트륨 등의 탄산염류, 인산과 그 염류 등이 있다.The pH adjusting agent is used to adjust the optimum pH of the composition for preparing frozen fermented milk to ensure physical properties such as taste, texture and storage stability. In general, any acidity adjusting agent that can be used in foods can be used. Examples of the acidity controlling agent include organic acids such as citric acid, lactic acid, tartaric acid, and fumaric acid and salts thereof, carbonates such as potassium carbonate and sodium hydrogen carbonate, and phosphoric acid and salts thereof.

본 발명의 냉동 발효유 제조용 조성물은 소망하는 향의 구현을 위하여 향료를 더욱 포함할 수 있으며, 향료의 사용량은 전체 냉동 발효유 제조용 조성물의 총고형분 중량을 100 중량부를 기준으로, 0.01 내지 5 중량부, 예컨대 0.5 내지 4 중량부 또는 1 내지 3 중량부로 포함될 수 있다. 상기 범위 미만으로 포함될 경우 소망하는 향의 구현 정도가 부족할 수 있고, 상기 범위를 초과하는 경우, 향이 강해져서 맛의 선호도가 떨어질 수 있으므로, 향료의 함량은 상기 범위로 하는 것이 좋다. The composition for preparing a frozen fermented milk according to the present invention may further include a flavor for realizing a desired flavor. The amount of the flavor to be used may be 0.01 to 5 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition for preparing whole frozen fermented milk, 0.5 to 4 parts by weight or 1 to 3 parts by weight. When the content is less than the above range, the desired degree of perfume may be insufficient. If the content exceeds the above range, the fragrance may become stronger and the taste preference may be lowered.

향료의 종류는 식용 가능한 향료이면 특별한 제한은 없으며, 예컨대, 딸기향, 바닐라향, 초코향, 녹차향, 사과향, 포도향, 블루베리향, 라즈베리향, 크랜베리향, 수박향, 오렌지향, 바나나향, 카라멜향, 피스타치오향, 밀크향, 요거트향, 레몬향, 밤향, 땅콩향, 커피향, 홍차향, 메론향, 곡물향, 고구마향, 배향, 팥향, 호두향, 아몬드향, 복수아향, 체리향, 호떡향, 토마토향, 소다향, 콜라향, 호박향, 옥수수향 등으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.The flavor is not particularly limited as long as it is an edible flavor, and examples thereof include strawberry flavor, vanilla flavor, chocolate flavor, green tea flavor, apple flavor, grape flavor, blueberry flavor, raspberry flavor, cranberry flavor, watermelon flavor, orange flavor, , Caramel, pistachio, milk, yogurt, lemon, chestnut, peanut, coffee, tea, melon, grain, sweet potato, oriental, And may be at least one selected from the group consisting of fragrance, flavor, tomato flavor, soda flavor, cola flavor, amber flavor, corn flavor and the like.

본 발명의 냉동 발효유 제조용 조성물은 소망하는 색의 구현을 위하여 색소를 더욱 포함할 수 있으며, 색소의 사용량은 전체 냉동 발효유 제조용 조성물의 총고형분 중량을 100종량부를 기준으로, 0.1 내지 5 중량부, 또는 0.5 내지 4 중량부 정도일 수 있으니, 소망하는 색상에 따라서 적절하게 조절 가능하다. The composition for preparing a frozen fermented milk according to the present invention may further contain a pigment for achieving a desired color. The amount of the pigment to be used may be 0.1 to 5 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solid content of the composition for preparing whole frozen fermented milk, May be about 0.5 to 4 parts by weight, and can be suitably adjusted according to a desired color.

색소의 종류는 식용 색소이면 특별한 제한은 없으며, 예컨대, 치자청색소, 스피룰리나색소 등의 청색 색소, 치자황색소, 심황색소, 안나토색소, 카로틴 등의 노란색 색소, 비트색소, 코치닐색소, 락색소, 홍국적색소, 안토시아닌, 파프리카추출색소 등의 붉은색 색소, 보라색은 적양배추색소, 자색고구마색소, 포도과피추출색소 등의 붉은색 색소, 카카오색소, 카라멜색소 등의 갈색 색소, 녹스피룰리나, 클로렐라색소 등의 녹색 색소 등으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 색소일 수 있다. 상기와 같은 여러 종류의 색소를 조합하여 다양한 색소를 만들 수 있다.There are no particular restrictions on the type of the coloring matter in the case of an edible coloring matter. For example, there are no particular restrictions on the coloring matter, and examples thereof include yellow coloring matters such as a blue coloring matter such as a blue coloring matter such as a blue coloring matter and a spirulina coloring matter, a yellow coloring matter such as a gardening coloring matter, Red pigment such as red pigment, red national pigment, anthocyanin and paprika extract pigment, purple color such as red cabbage color, red purple coloring matter such as red cabbage coloring, purple sweet potato coloring and grape skin extracting color, brown coloring matter such as cacao coloring and caramel coloring, Green pigment such as chlorella pigment, and the like. Various pigments can be made by combining various kinds of pigments as described above.

본 발명의 일예는 발효유와 사이코스를 포함하는 발효유 냉동식품의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 발효유 냉동식품은 발효유와 사이코스를 포함하며, 사이코스를 발효유 제조를 위한 원료에 첨가하여 제조하거나, 발효유를 제조한 이후에 사이코스를 액상 또는 분말상으로 첨가하여 제조할 수도 있다. An example of the present invention relates to a method for producing a fermented milk frozen food comprising fermented milk and cicos. The fermented milk frozen food according to the present invention may be prepared by adding fermented milk to the raw material for fermented milk or adding the fermented milk to the raw material for producing fermented milk or adding the fermented milk to the fermented milk in a liquid or powder form.

구체적으로, 상기 제조방법은, 우유-함유 원료에 유산균을 배양하여 발효유를 제조하고, 상기 사이코스를 함유하는 당류와 물을 이용하여 당시럽액을 제조하고, 상기 발효유와 당시럽액을 중량비(발효유: 당시럽액)로 60:40 내지 90:10의 혼합비로 혼합하여 혼합액을 제조하고, 및 상기 혼합액을 -20 내지 -70 ℃ 온도조건에서 동결하는 단계를 포함할 수 있다. Specifically, the production method is characterized in that lactic acid bacteria are cultured in a milk-containing raw material to prepare a fermented milk, a sugar syrup liquid is prepared using saccharides and water containing the sarcosine, and the fermented milk and the sugar syrup solution are mixed in a weight ratio Fermented milk: sugar syrup solution) at a mixing ratio of 60:40 to 90:10 to prepare a mixed solution, and freezing the mixed solution at a temperature of -20 to -70 ° C.

먼저, 발효유는 우유-함유 원료에 유산균을 접종하여 배양한 유산균 배양액으로서, 통상의 유산균 배양액 제조방법으로 수행할 수 있다. 먼저, 우유-함유 원료를 제조하는 공정으로서, 우유-함유 원료는 우유-함유 원료는 생유, 농축유, 전지분유, 탈지분유, 탈지 농축유, 저지방 우유, 무지방 우유, 환원유, 환원 저지방 우유 및 탈지분유로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 우유제품을 가열, 살균 및 냉각공정을 거쳐 제조할 수 있다. 상기 발효유 제조를 위한 원료에는 우유제품에 더하여 변성전분, 사이코스 등의 당류 및 유지방 제품을 추가로 포함할 수 있다. First, the fermented milk is a lactic acid bacterium culture liquid obtained by inoculating a milk-containing raw material with lactic acid bacteria inoculated, and can be carried out by a conventional method for producing a lactic acid bacterium culture liquid. A process for producing a milk-containing raw material, wherein the milk-containing raw material is selected from the group consisting of raw milk, concentrated milk, whole milk powder, skim milk powder, skim milk, low fat milk, And skim milk powder can be manufactured by heating, sterilizing and cooling the milk product. In addition to the milk product, the raw materials for the production of the fermented milk may further include modified starch, saccharides such as Cicos, and milk fat products.

본 발명의 냉동 발효유 제조용 조성물의 제조방법을 하기 일 예로서, 우유-함유 원료에 유산균을 접종하여 배양한 유산균 배양액과 사이코스를 함유하는 당시럽액을 제조하여 혼합하는 제조방법을 자세히 설명하고자 한다.The method for producing the composition for preparing frozen fermented milk according to the present invention will be described in detail with reference to a manufacturing method for preparing and mixing sugar syrup containing a culture medium of lactic acid bacteria cultured by inoculating lactic acid bacteria with milk- .

발효유를 얻는 공정으로서, 우유-함유 원료에 유산균을 접종하여 배양하여 유산균 발효유를 제조할 수 있다. 상기 원료에는 생유, 농축유, 전지분유, 탈지분유, 탈지 농축유, 저지방우유, 무지방 우유, 환원유, 환원 저지 방우유 및 탈지분유로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 우유제품에 더하여, 유지방 제품, 유화제, 변성전분, 및 덱스트린으로 이루어지는 군에서 1종 이상 추가로 포함할 수 있다. 상기 원료 혼합물을 원료의 완전 용해 및 변성전분 호화를 목적이며 70~75?에서 5 내지 15분간 가열 처리를 실시할 수 있다, As a process for obtaining fermented milk, fermented milk of lactic acid bacteria can be produced by inoculating lactic acid bacteria into a milk-containing raw material and culturing. The raw material may be at least one milk product selected from the group consisting of raw milk, concentrated milk, whole milk powder, skim milk powder, skim milk concentrate, low fat milk, skimmed milk, reduced milk, , An emulsifier, a modified starch, and a dextrin. The raw material mixture may be subjected to a heat treatment at 70 to 75 DEG C for 5 to 15 minutes for the purpose of complete dissolution of the raw material and gelatinization of the modified starch.

상기 가열처리된 원료 혼합물을 균질기를 이용하여 고압, 예컨대 150 내지 200Kg/cm2의 압력조건하에서 수행하여 균질액 제조할 수 있다. The heat-treated raw material mixture can be homogenized by using a homogenizer under high pressure, for example, under a pressure of 150 to 200 kg / cm 2 .

본 발명에 사용 가능한 균질기는 식품의 균질화에 사용되는 것이므로 무방하며, 균질화를 수행하여 더욱 작은 크기의 빙결정을 얻을 수 있으며, 균일하게 혼합된 원료를 제조하므로 냉동이 균일하게 이루어질 수 있다. Since the homogenizer usable in the present invention is used for homogenizing the food, the homogenization can be performed to obtain ice crystals having a smaller size, and homogeneously mixed raw materials can be prepared, thus freezing can be uniformly performed.

상기 균질화된 원료 혼합물을 90~95 ℃에서 5 내지 10분간 살균하며, 살균한 원료액을 38 내지 43℃로 냉각하여 유산균 배양에 사용한다. 살균 및 냉각액을 유산균으로 접종하여 배양하는 공정으로 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus), 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum)이 혼합된 Chr.-Hansen사(덴마크)의 ABT-5를 사용하였다.The homogenized raw material mixture is sterilized at 90 to 95 DEG C for 5 to 10 minutes, and the sterilized raw material solution is cooled to 38 to 43 DEG C and used for culturing the lactic acid bacteria. The lactic acid bacteria are selected from the group consisting of Lactobacillus acidophilus, Streptococcus thermophilus, and Bifidobacterium bifidum, which are mixed with lactic acid bacteria. - ABT-5 from Hansen (Denmark) was used.

유산균을 접종한 후 37~40 ℃ 발효기에서 pH가 4.0~4.6으로 감소할 때까지 발효기에서 배양시킨다. 배양액의 pH 4.0 미만일 경우 지난친 발효로 인해 유산균배양액의 점도와 젖산이 일정하지 못하며 식감 및 풍미를 저하시키고, pH4.6을 초과할 경우 유산균이 충분히 발효되지 못해 유산균배양액의 점도와 젖산이 일정하지 못하여 식감이 저하된다. 상기 배양된 발효유를 15~20 ℃로 냉각하여 준비한다. After inoculating the lactic acid bacteria, the fermenter is incubated at 37 ~ 40 ℃ until the pH is decreased to 4.0 ~ 4.6. When the pH of the culture solution is less than 4.0, the viscosity and lactic acid of the culture solution of lactic acid bacteria are not constant and the texture and flavor are decreased due to past fermentation. If the pH value is more than 4.6, the lactic acid bacteria can not sufficiently ferment, And the texture is deteriorated. The cultured fermented milk is cooled to 15 to 20 캜 and is prepared.

당시럽을 별도로 제조하여 발효유와 혼합하는 경우에는, 각종 당류 및 복합안정제 (검류, 덱스트린 및 산도조절제 포함를 물과 혼합하여 시럽액을 제조한다. 사이코스를 별도 시럽액으로 첨가하는 경우에는 상기 당류에는 사이코스를 포함하며, 추가의 당류를 포함하는 경우에는 과당, 설탕, 물엿 및 고감미도 감미료로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다. When sugar syrup is separately prepared and mixed with fermented milk, a variety of saccharides and complex stabilizers (including gum, dextrin and an acidity regulator are mixed with water to prepare a syrup liquid.) When sucrose is added as a separate syrup liquid, And may include at least one selected from the group consisting of fructose, sugar, starch syrup, and high-sweetness sweetener in the case of including additional saccharides.

상기 혼합당 시럽액을 90~95 ℃에서 5 내지 15분간 가열처리하여 살균하고, 살균한 당시럽액을 15 내지 20?로 냉각하여 준비한다. The mixed syrup solution is heat-treated at 90 to 95 ° C for 5 to 15 minutes to sterilize and the sterilized sugar syrup solution is cooled to 15 to 20 ° C.

상기 준비된 발효유와 당시럽액을 균일하게 혼합하여 냉동기에서 냉동하여 발효유 냉동제품을 제조할 수 있다. 용기에 혼합액을 충진하고, -20℃ ~ -70℃ 온도조건, 예를 들면 약 -40℃ 내지 -10 ℃의 온도 조건에서 급속 냉동기를 이용하여 1 내지 48 시간 동안 급속 냉동하는 방식으로 수행할 수 있다. 상기 제조된 발효유 냉동식품은 유통될 때까지 일반적으로 약 -10 ℃이하의 냉동고에서 보관할 수 있다.
The prepared fermented milk and sugar syrup liquid are uniformly mixed and frozen in a freezer to produce a fermented milk frozen product. The mixture is filled in a container and can be rapidly frozen for 1 to 48 hours using a rapid freezer under the temperature condition of -20 DEG C to -70 DEG C, for example, about -40 DEG C to -10 DEG C have. The prepared fermented milk frozen food can be generally stored in a freezer at about -10 ° C or lower until circulated.

본 발명은 유산균 발효유의 냉동식품 및 우유-함유 원료에 유산균을 배양하여 유산균 발효유를 얻고, 상기 유산균 발효유를 동결하여 제조하는 단계를 포함하는 발효유의 냉동식품의 제조방법에 곤한 것으로서, 본 발명에 따른 발효유 냉동식품은 사이코스를 포함하여, 저칼로리화, 식미개선 및 빙결정 특성을 개량한 우수한 식감을 갖는다.
The present invention relates to a method for producing frozen foods of fermented milk comprising culturing lactic acid bacteria in a frozen food of milk fermented milk and milk-containing raw materials to obtain fermented milk of lactic acid bacteria and freezing the fermented milk of lactic acid bacteria. Fermented milk frozen foods, including cicos, have a low calorific value, an improved taste and an improved texture of ice crystals.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 발효유 냉동식품의 제조공정를 보여주는 예시도면이다.
도 2은 본 발명에 사용되는 사이코스 시럽 제조를 위한 발현 재조합 벡터(pCES_sodCDPE)의 일예를 도시한 도면이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따른 발효유 냉동식품의 경도를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4 내지 도 7는 본 발명의 실시예 1 내지 4에서 제조한 발효유 냉동식품의 빙결정 사진을 나타낸다.
도 8 및 도 9는 설탕 또는 과당을 사용한 비교예 1 및 2에서 제조한 발효유 냉동식품의 빙결정 사진을 나타낸다.BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is an exemplary view showing a process for producing a fermented milk frozen food according to an embodiment of the present invention; FIG.
Fig. 2 is a diagram showing an example of an expression recombinant vector (pCES_sodCDPE) for producing a psicose syrup used in the present invention.
FIG. 3 is a graph showing the results of measuring the hardness of fermented milk frozen foods according to an embodiment of the present invention.
Figs. 4 to 7 show photographs of ice crystals of the fermented milk frozen foods prepared in Examples 1 to 4 of the present invention. Fig.
Figs. 8 and 9 show ice crystal photographs of the fermented milk frozen foods prepared in Comparative Examples 1 and 2 using sugar or fructose.

본 발명을 하기 실시예를 들어 더욱 자세히 설명할 것이나, 하기 실시예는 예시적으로 제공되는 것으로서, 본 발명의 보호범위를 한정하는 의도는 아니다.
The present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the following examples are offered by way of illustration and are not intended to limit the scope of protection of the present invention.

제조예Manufacturing example 1:  One: 사이코스의Saikos 제조  Produce

제조예Manufacturing example 1-1: 1-1: 사이코스Saikos 생산 균주의 제조 Production of production strains

크로스트리디움 신댄스(Clostridiuim scindens ATCC 35704)로부터 유래된 사이코스 에피머화 효소의 암호화 유전자(DPE gene; Gene bank: EDS06411.1)를, 대장균에 최적화하여 변형한 형태의 폴리뉴클리오티드로 합성하고 CDPE라 명명하다. 대장균에 최적화된 폴리뉴클리오티드(서열번호 2)와 pET21a 벡터로부터 확보한 sod 프로모터와 T7 터미네이터를 피씨알을 통해 각각의 주형으로 확보하였고, 이를 오버랩 피씨알(PCR) 법으로 하나의 주형으로 연결하여 T-vector cloning을 통해 pGEM T-easy vector에 클로닝하여, sod 프로모터(서열번호 1), 서열번호 8의 최적화 CDPE 서열 및 T7-터미네이터를 포함하는 폴리뉴클레오티드의 서열을 확인하였다. The DPE gene (Gene bank: EDS06411.1) derived from Clostridium scindens ATCC 35704 was synthesized as modified polynucleotides by optimizing E. coli for the Escherichia coli To name it CDPE. The polynucleotide optimized for Escherichia coli (SEQ ID NO: 2) and the sod promoter and T7 terminator obtained from the pET21a vector were obtained through PCR using each template, which was then ligated into a template by overlap PCR (PCR) And cloned into pGEM T-easy vector through T-vector cloning to confirm the sequence of the polynucleotide including the sod promoter (SEQ ID NO: 1), the optimized CDPE sequence of SEQ ID NO: 8 and the T7-terminator.

상기 확인된 전체 폴리뉴클레오티드를 제한효소 NotI과 XbaI(NEB)을 사용하여 발현벡터인 pCES208(J. Microbiol. Biotechnol., 18:639-647, 2008)의 동일한 제한효소 부위에 삽입하여 재조합 벡터 pCES208/사이코스 에피머화 효소(pCES_sodCDPE)를 제조하였다. 상기 제조된 재조합 벡터(pCES_sodCDPE)의 개열지도를 도 2에 개시하였다.The entire confirmed polynucleotide was inserted into the same restriction enzyme site of the expression vector pCES208 (J. Microbiol. Biotechnol., 18: 639-647, 2008) using restriction enzymes NotI and XbaI (NEB) to obtain a recombinant vector pCES208 / (PCES_sodCDPE) was prepared. The cleavage map of the prepared recombinant vector (pCES_sodCDPE) is shown in Fig.

상기 제조된 재조합 벡터(pCES_sodCDPE) 플라스미드를 전기천공법으로 을 최종농도 15ug/ml로 첨가한 LB 배지(트립톤 10g/L, NaCl 10g/L, 효모 추출물 5g/L) 4ml에 접종한 후, 배양조건 30℃ 및 250rpm에서 약 16시간 동안 배양하였다. 그리고 나서 상기 배양액 중 1ml을 수득하여 15ug/ml의 카나마이신을 포함하고 있는 100ml LB 배지에 접종하여 본 배양을 16시간 이상 진행하였다. Beadbeater를 이용하여 배양한 세포를 용해(lysis)시킨 후 상등액만 취득하여 샘플버퍼와 1 : 1로 혼합 후 100 ℃에서 5분간 가열한다. 준비한 샘플은 12% SDS-PAGE gel (조성 : running gel - 3.3 ml H2O, 4.0 ml 30% acrylamide, 2.5 ml 1.5M Tris buffer(pH 8.8), 100 ㎕ 10% SDS, 100 ㎕, 10% APS, 4 ㎕ TEMED / stacking gel - 1.4 ml H2O, 0.33 ml 30% acrylamide, 0.25 ml 1.0M Tris buffer(pH 6.8), 20 ㎕ 10% SDS, 20 ㎕ 10% APS, 2 ㎕ TEMED)에 180V로 약 50 분 동안 전기영동하여 단백질 발현을 확인하였다. CDPE의 발현을 SDS-PAGE gel상에서 확인 후 정확한 발현량의 측정을 위해 Ni-NTA resin을 이용한 His-tag정제 진행하여, 계산식(발현율(%) = (Purified protein(mg) / Total soluble protein(mg)) * 100)을 이용하여 발현율 계산하였다. 상기 제조된 형질전환 코리네박테리움 글루타리쿰은 전체 수용성 단백질을 16.62mg 및 정제된 효소 단백질 1.74 mg을 생산하였다.
The prepared recombinant vector (pCES_sodCDPE) plasmid was inoculated into 4 ml of LB medium (10 g / L of tryptone, 10 g / L of NaCl, 5 g / L of yeast extract) supplemented with 15 ug / ml of the final concentration by electroporation, Lt; 0 > C and 250 rpm for about 16 hours. Then, 1 ml of the culture was obtained and inoculated into 100 ml of LB medium containing 15 ug / ml kanamycin, and the cultivation was continued for 16 hours or more. After lysis of cells cultured with Beadbeater, only supernatant is obtained, mixed with sample buffer 1: 1, and heated at 100 ° C for 5 minutes. The prepared sample was subjected to electrophoresis on a 12% SDS-PAGE gel (composition: running gel - 3.3 ml H2O, 4.0 ml 30% acrylamide, 2.5 ml 1.5 M Tris buffer (pH 8.8) 20 μl 10% SDS, 20 μl 10% APS, 2 μl TEMED) at 180 V for about 50 minutes at room temperature The protein expression was confirmed by electrophoresis. After the expression of CDPE was confirmed on SDS-PAGE gel, the His-tag purification was performed using Ni-NTA resin to determine the precise expression level. The expression (%) = (Purified protein (mg) / Total soluble protein )) * 100). The transformed Corynebacterium glutaricum prepared above produced 16.62 mg of total soluble protein and 1.74 mg of purified enzyme protein.

제조예Manufacturing example 1-2:  1-2: 사이코스Saikos 시럽 제조  Manufacture of syrup

제조예 1-1에서 얻어진 사이코스 에피머화 효소를 생산하는 재조합 균주를 이용하여 과당으로부터 사이코스를 제조하고자, 균주 배양에서 원심분리로 세포를 회수하였다. Cells were recovered by centrifugation in a strain culture in order to produce a scissors from fructose using the recombinant strain producing the scuche epimerase obtained in Production Example 1-1.

그런 후에 상기 세포 현탁액에 최종 부피에 유화제(M-1695)를 0.05% (w/v) 처리하여 35 ℃에서 60 분간 처리하였다. 반응이 완료된 균체는 다시 원심분리기를 이용하여 유화제가 포함된 상등액은 제거한 뒤 균체를 회수하였다.Then, the cell suspension was treated with 0.05% (w / v) of an emulsifier (M-1695) in a final volume at 35 ° C for 60 minutes. After the completion of the reaction, the supernatant containing the emulsifier was removed using a centrifuge, and the cells were recovered.

고정화 비드 제조를 위하여, 상기 회수된 균체는 D.W.와 혼합하여 최종 균체 농도 5% (w/v)로 맞추고, 물에 용해된 4% (w/v) 알긴산과 회수된 균체 5%(w/v)를 1:1로 혼합하고, 혼합시 생성된 기포를 제거하기 위해 4 ℃에서 냉장 보관하였다. 상기 냉장 보관된 혼합액은 Neddle (내경 0.20~0.30mm)을 통해 혼합액이 사출되어 방울 형태로 형성되며 무게에 의해 낙하하게 되며, 낙하된 혼합액은 미리 제조된 100mM 염화칼슘 (CaCl2) 용액으로 떨어뜨려 경화시켜 구형 또는 타원형의 비드를(지름 2.0~2.2mm) 형성하였다. 상기 형성된 비드들은 100mM 염화칼슘 용액에 담그어 교반기에 의해 골고루 섞어지면서 더욱 경화되도록 하였다. For the preparation of the immobilized beads, the recovered cells were mixed with DW to a final cell concentration of 5% (w / v), mixed with 4% (w / v) alginic acid dissolved in water and 5% ) Were mixed at a ratio of 1: 1, and the mixture was stored at 4 ° C in order to remove the bubbles generated during mixing. The mixture solution was injected through a Neddle (inner diameter: 0.20 to 0.30 mm) and formed into a droplet shape. The mixture was dropped by weight. The dropped mixed solution was dropped into a 100 mM calcium chloride (CaCl 2 ) To form spherical or elliptical beads (diameter 2.0 to 2.2 mm). The formed beads were soaked in a 100 mM calcium chloride solution and mixed evenly by a stirrer so as to be further cured.

상기 혼합액이 모두 사출된 후에, 4~6시간 냉장 보관하면서 비드를 더욱 경화시킨 뒤에 새로운 100mM 염화칼슘 용액과 교체하여 냉장 상태에서 약 6시간 정도 경화를 시켰다. 경화가 완료된 비드는 걷어내 물기를 완전히 제거한 후, 비드 부피 대비 3배 부피의 물을 투입한 후 10분간 교반하고, 이러한 과정을 3회 처리하여 염화칼슘 용액을 제거하였다. 세척된 비드들은 망간 소킹을 위하여 물기를 완전 제거한 후, 10mM 망간이 포함된 40 brix (%) 반응 기질을 비드 부피 대비 3 배 부피로 투입한 후 10분간 교반하고, 이러한 처리를 3회 이상 처리하여 10mM 망간이 포함된 반응 기질로 교체하였다. 반응 기질은 pH 6.8~7.2로 3N NaOH에 의해 조절되며, 생산물의 종류에 따라 액상 과당 또는 결정 과당이 반응 기질이 될 수 있다. 10mM 망간이 포함된 반응 기질로 교체된 비드들은 반응조로 옮겨진 뒤, 반응 온도 50?에서 약 30~60분간 반응 하여 망간 및 과당으로 비드의 소킹 작업을 완료하였다. 소킹이 완료된 비드는 지름이 약 1.6~1.8mm로 줄어들며 강도 또한 증가하게 된다. 소킹이 완료된 비드들의 기질을 제거 후 고정화 반응 컬럼에 충진 후 사이코스 시럽 생산에 이용하였다. After all of the mixed solution was injected, the beads were further cured while refrigerated for 4 to 6 hours, and then replaced with a fresh 100 mM calcium chloride solution, and cured in a refrigerated state for about 6 hours. The hardened beads were completely removed from the beads, and then water having a volume three times the bead volume was added thereto. The beads were then stirred for 10 minutes. This process was repeated three times to remove the calcium chloride solution. The washed beads were completely removed for manganese soaking, and then a 40-brix (%) reaction substrate containing 10 mM of manganese was added thereto in a volume three times as large as the bead volume, followed by stirring for 10 minutes. And replaced with a reaction substrate containing 10 mM manganese. The reaction substrate is adjusted to pH 6.8 ~ 7.2 with 3N NaOH. Depending on the type of product, liquid fructose or crystalline fructose can be the reaction substrate. The beads were replaced with a reaction substrate containing 10 mM manganese. The beads were transferred to the reaction tank and reacted at a reaction temperature of 50 ° C for about 30 to 60 minutes to complete the sorbing of beads with manganese and fructose. The diameter of the finished bead decreases to 1.6 ~ 1.8mm and the strength also increases. The substrate of the beads which had been soaked was removed and the immobilized reaction column was filled and used for the production of the viscose syrup.

<고정화 컬럼 반응조건>&Lt; Immobilization column reaction conditions >

반응 온도: 컬럼 자켓 내부 온도 50 ℃Reaction temperature: Internal temperature of column jacket 50 ℃

기질 유속: 0.5 SV (space velocity L. h-1)Substrate flow rate: 0.5 SV (space velocity L. h-1)

반응 기질: 결정 과당 40 brix, pH 6.8~7.2, Mn2 + 무첨가Reaction Substrate: Crystalline fructose 40 brix, pH 6.8 ~ 7.2, Mn 2 + free

비드 제조: 2.5%(w/w) 균체, 2%(w/w) 알긴산 혼합 및 10mM Mn2 + soakingBead preparation: 2.5% (w / w) cells, 2% (w / w) alginic acid mixture and 10 mM Mn 2 + soaking

상기 고정화 반응 컬럼에, 원료 용액이 75 %의 고형분을 포함하고, 전체 고형분 함량이 100 중량부 일 때, 과당의 함량 92 중량부로 포함하는 원료를 제공하여 혼합당인 사이코스 시럽을 제조하였다. 즉, 상기 반응액으로부터 포도당: 과당: 사이코스: 올리고당의 중량비로 포도당:과당:사이코스:올리고당=6:67:25:2인 25(w/w)% 사이코스 시럽을 수득하여 하기 실시예에 사용하였다.
The above-mentioned immobilization reaction column was provided with a raw material containing 92% by weight of fructose when the raw material solution contained 75% of solid content and the total solid content was 100% by weight to prepare a mixed saccharose syrup. That is, 25 (w / w)% of psicose syrup of glucose: fructose: sucrose: oligosaccharide = 6: 67: 25: 2 was obtained from the reaction solution in the weight ratio of glucose: fructose: Lt; / RTI &gt;

제조예Manufacturing example 1-3:  1-3: 사이코스Saikos 분말 제조  Powder manufacturing

제조예 1-2에서 얻어진 사이코스 시럽을 유색 및 이온 성분 등의 불순물을 제거하기 위해 양이온 교환수지, 음이온 교환수지 및 양이온과 음이온교환수지가 혼합된 수지로 충진된 상온의 컬럼에 시간당 이온교환수지 2배 부피의 속도로 통액 시켜 탈염시킨 후, 칼슘(Ca2 +) 타입의 이온교환수지로 충진된 크로마토그래피를 이용하여 고순도의 사이코스 용액으로 분리 수득하였다. 상기 고순도 사이코스 시럽을 82 Bx 농도로 농축시키고, 과포화 상태가 되는 온도 35℃에서 서서히 온도 10℃까지 냉각시켜 결정을 생성시켰다. 상기 결정화 단계에서 수득된 사이코스 결정은 원심 탈수에 의해 모액을 제거하고 결정을 냉각수로 세척한 후, 건조하여 회수하였다. To remove impurities such as color and ion components, the psicose syrup obtained in Production Example 1-2 was added to a column at room temperature filled with a cation exchange resin, an anion exchange resin and a resin mixed with a cation and anion exchange resin, The solution was passed through at a speed of 2 times volume and desalted. Separately, the solution was separated into a high-purity scorch solution by chromatography packed with a calcium (Ca 2 + ) type ion exchange resin. The high-purity Psycorus syrup was concentrated to a concentration of 82 Bx, and the solution was cooled to a supercritical temperature of 35 캜 and then gradually cooled to a temperature of 10 캜 to produce crystals. The mother liquor obtained in the crystallization step was centrifugally dehydrated to remove the mother liquor, and the crystal was washed with cooling water, followed by drying and recovering.

실시예Example 1 내지 4: 발효유 냉동식품의 제조 1 to 4: Preparation of frozen foods of fermented milk

하기 표 2에 기재된 성분 및 조성으로 발효유를 제조하고, 이를 냉동하여 발효유 냉동식품을 제조하였다. 구체적으로, 비교예 1은 설탕을 사용하였고, 비교예 2는 액상과당을 사용하였고, 실시예 1과 실시예 2는 제조예 1-2에서 얻은 사이코스 25% 시럽을 사용하였고, 실시예 3은 제조예 1-3에서 얻은 사이코스 분말을 사용하였고, 실시예 4는 사이코스 25% 시럽과 난소화성 말토덱스트린을 사용하였다. 난소화성 말토덱스트린은 ㈜삼양제넥스 제품이고, 변성전분은 ㈜삼양제넥스의 "네오 HP"(상표명)이며, 유크림은 서울우유제품이고, 복합 유산균(ABT-5)는 Chr-Hansen 제품이다. 복합 안정제는 카라기난, 구아검, 로거스트콩검, 타마린드콩검, 덱스트린, 산도조절제(구연산 나트륨등)을 포함하는 복합제로 시판되는 것을 구입하여 사용하였다. 유화제로서 글리세린지방산에스테르를 사용하였다.Fermented milk was prepared from the components and compositions shown in Table 2 below and frozen to prepare fermented milk frozen foods. Specifically, the sugar of Comparative Example 1 was used, the liquid fructose of Comparative Example 2 was used, Examples 1 and 2 used the 25% sycrochic acid obtained in Production Example 1-2, Sikos powder obtained in Preparation Example 1-3 was used, and Example 4 used Sikos 25% syrup and indigestible maltodextrin. The ovarian maltodextrin is a product of Samyang Genex Co., Ltd .; the modified starch is "Neo HP" (trade name) of Samyang Genex Co., Ltd. The milk cream is Seoul milk product and the compound lactobacillus (ABT-5) is Chr-Hansen product. The complex stabilizer was purchased and used as a composite agent including carrageenan, guar gum, rogast bean gum, tamarind soybean gum, dextrin, and an acidity regulator (sodium citrate, etc.). A glycerin fatty acid ester was used as an emulsifier.

먼저, 유산균 배양액을 제조하고자, 표 2의 원유, 탈지분유, 유크림, 유화제(글리세린지방산에스테르) 및 변성전분을 혼합하여 혼합액을 제조하고, 원료의 완전 용해 및 변성전분의 호화를 위해 70 내지 75?에서 10분간 가열하였다. 그런 후에, 상기 가열된 원료액을 균질기(NIRO SOAVI(이탈리아))를 이용하여 200Kg/cm2의 압력을 가하여 균질액을 제조하고, 균질액을 90~95 ℃에서 10분간 살균하고 38 내지 43℃로 냉각하여 발효를 위한 원료액을 제조하였다. First, in order to prepare a culture solution of lactic acid bacteria, a mixed solution was prepared by mixing crude oil, skim milk powder, milk cream, emulsifier (glycerin fatty acid ester) and modified starch of Table 2, and mixed solutions of 70 to 75 For 10 minutes. Thereafter, the heated raw material liquid was subjected to a pressure of 200 kg / cm 2 using a homogenizer (NIRO SOAVI (Italy)) to prepare a homogenate, sterilized the homogenate at 90 to 95 ° C for 10 minutes, Lt; 0 &gt; C to prepare a raw material liquid for fermentation.

상기 원료액에 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus), 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum)이 혼합된 Chr.-Hansen사(덴마크)의 ABT-5를 접종하였다. 유산균을 접종한 후 37~40 ℃ 발효기에서 pH가 4.0~4.6으로 감소할 때까지 발효기에서 배양하였다. 상기 얻어진 배양액을 15~20 ℃로 냉각하여 유산균 배양액을 제조하였다. Lactic acid bacteria were added to the raw material liquid as follows: ABT (manufactured by Chr.-Hansen, Denmark) mixed with Lactobacillus acidophilus, Streptococcus thermophilus and Bifidobacterium bifidum -5 was inoculated. Lactic acid bacteria were inoculated and cultured in a fermenter until the pH of the fermenter was reduced to 4.0 ~ 4.6 at 37 ~ 40 ℃. The obtained culture solution was cooled to 15 to 20 캜 to prepare a lactic acid bacteria culture solution.

시럽액으로서, 하기 표 2의 조성에 따라 설탕, 과당, 사이코스등의 당류와, 복합안정제 및 수크랄로스(고감미료)를 혼합하여 혼합액을 제조하였다. 상기 혼합액을 90~95℃에서 5 내지 10분간 살균하고, 15 내지 20℃로 냉각하여 시럽액을 제조하였다. As a syrup liquid, a mixed liquid was prepared by mixing saccharides such as sugar, fructose, and psicose, a complex stabilizer and sucralose (high sweetening agent) according to the composition shown in Table 2 below. The mixed solution was sterilized at 90 to 95 ° C for 5 to 10 minutes and cooled to 15 to 20 ° C to prepare syrup liquid.

상기 냉각된 유산균배양액 70 중량%와 시럽액 30 중량%를 혼합하여 혼합액을 제조하고, 초저온 냉동고(Ultra-Low Temperature Freezer(OPERON)를 사용하여 -20 내지 -70℃ 온도조건에서 24시간 급속동결 후 -20℃ 냉동고에서 저장하였다.  The mixed liquor was prepared by mixing 70% by weight of the cooled lactic acid bacteria culture solution and 30% by weight of syrup liquid, and after rapid freezing for 24 hours at a temperature of -20 to -70 캜 using an ultra-low temperature freezer (OPERON) And stored at -20 [deg.] C freezer.

원재료명Ingredients 비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예 1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 실시예4Example 4 원유crude oil 45.000 45,000 45.000 45,000 45.000 45,000 45.000 45,000 45.000 45,000 45.000 45,000 탈지분유Skim milk powder 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 5.600 유크림Milk cream 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 6.500 유화제Emulsifier 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 변성전분(네오HP)Modified Starch (Neo HP) 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 0.300 난소화성말토덱스트린Indigestible maltodextrin -- -- -- -- -- 　3.0003.000 사이코스25%시럽Sikos 25% Syrup -- -- 10.000 10,000 20.000 20,000 -- 　17.00017,000 사이코스분말Saikosu powder -- -- -- -- 　15.00015,000 -- 백설탕 White sugar 15.000 15,000 -- 7.500 7.500 -- -- -- 액상과당Liquid fructose -- 20.000 20,000 -- -- -- -- 복합안정제Complex stabilizer 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 0.100 수크랄로스Sucralose -- -- -- -- 0.00750.0075 0.0050.005 복합유산균(ABT-5)Complex lactic acid bacteria (ABT-5) 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 정제수 Purified water 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 합 계Sum 100.000 100,000 100.000 100,000 100.000 100,000 100.000 100,000 100.000 100,000 100.000 100,000

비교예Comparative Example 1 내지 2: 발효유 냉동식품의 제조 1 to 2: Preparation of frozen foods of fermented milk

실시예 1과 실질적으로 동일한 방법으로 제조하되 사이코스 분말 대신에 비교예 1은 설탕 15중량%를 사용하고, 비교예 2는 액상과당 20중량%을 사용하였다. 표 2에 기재된 액상과당은 ㈜삼양제넥스 제품이며, 백설탕은 ㈜삼양사 제품이다.
Comparative Example 1 used 15% by weight of sugar, and Comparative Example 2 used 20% by weight of liquid fructose instead of Sikos powder, which was prepared in substantially the same manner as in Example 1. The liquid fructose listed in Table 2 is Samyang Genex Co., Ltd. and the white sugar is Samyang Corporation.

실험예Experimental Example 1: 발효유 냉동식품의 물성평가 1: Evaluation of properties of frozen foods of fermented milk

실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 2에서 얻어진 발효유 냉동식품에 대해서, 브릭스, pH, 산도, 점도 및 유산균수를 하기 방법으로 평가하여 그 결과를 표 2에 나타냈다. Bricks, pH, acidity, viscosity, and number of lactic acid bacteria were evaluated for the fermented milk frozen foods obtained in Examples 1 to 4 and Comparative Examples 1 and 2, and the results are shown in Table 2.

(1)Brix 측정(1) Brix measurement

브릭스는 ATAGO Digital refractometer RX-5000α(Japan)를 이용하여 측정하였다. 측정결과를 하기 표 3에 나타냈다.Bricks were measured using ATAGO digital refractometer RX-5000α (Japan). The measurement results are shown in Table 3 below.

(2) pH(2) pH

pH meter(Methrom 780 pH meter, Switzerland)를 이용하여 측정하였다. 측정결과를 하기 표 3에 나타냈다.and measured using a pH meter (Methrom 780 pH meter, Switzerland). The measurement results are shown in Table 3 below.

(3)산도 (3) pH

산도 측정은 시료를 10mL에 배양 후 산도는 시료를 10㎖씩 취하여 CO2를 제거한 증류수 10㎖를 가하여 0.1N NaOH로 pH가 8.5가 될 때까지 적정하여 다음식에 의하여 젖산의 산도로 환산하였다. 결과를 하기 표 3에 나타냈다.For acidity measurement, 10 ml of the sample was incubated, and 10 ml of the sample was taken. 10 ml of distilled water from which CO 2 had been removed was added, and titrated with 0.1 N NaOH until the pH reached 8.5. The results are shown in Table 3 below.

Figure pat00001
Figure pat00001

(4)점도(4) Viscosity

점도는 BROOKFIELD Rheometer DV-Ⅲ를 이용하여, spindle No=64, speed 30 rpm 및 측정온도 5℃ 조건하에서 측정하였다. 측정결과를 하기 표 3에 나타냈다.The viscosity was measured using a BROOKFIELD Rheometer DV-III under spindle No = 64, speed 30 rpm and measuring temperature 5 ℃. The measurement results are shown in Table 3 below.

(5) 유산균수 측정 (5) Measurement of the number of lactic acid bacteria

유산균 생균수는 요구르트 배양 후의 액상 제품과 냉동 후 고체상 제품을 비교하였다. 시료 25g을 무균적으로 채취한 후 멸균된 0.85% NaCl에 희석한 샘플 1 mL을 MRS 한천배지에 접종하여 37 ℃에서 48-96시간 배양한 후 나타나는 콜로니수를 측정하였다. 요구르트 배양 후 및 냉동 후 유산균 콜로니 수(단위:Log CFU/ml)를 계수하여 유산균의 수를 확인하였다. 유산균수 비교의 결과를 하기 표 4에 기재하였다. The viable counts of lactic acid bacteria were compared between the liquid product after yogurt culture and the solid product after freezing. 25 g of the sample was aseptically collected and 1 mL of a sample diluted with sterilized 0.85% NaCl was inoculated on an MRS agar medium and cultured at 37 ° C for 48-96 hours. The number of colonies was counted. After the yoghurt culture and after freezing, the number of lactic acid bacteria colonies (unit: Log CFU / ml) was counted to confirm the number of lactic acid bacteria. The results of the comparison of the number of lactic acid bacteria are shown in Table 4 below.

구분division 고형분 함량(%)Solid content (%) pHpH 산도Acidity 점도(cP)Viscosity (cP) 비교예1Comparative Example 1 26.1826.18 4.3784.378 0.8330.833 2,8292,829 비교예2Comparative Example 2 26.8726.87 4.3744.374 0.8320.832 2,8602,860 실시예 1Example 1 26.7626.76 4.3734.373 0.8350.835 2,8592,859 실시예2Example 2 26.4926.49 4.3784.378 0.8330.833 2,8392,839 실시예 3Example 3 26.6426.64 4.3684.368 0.8320.832 2,8102,810 실시예 4Example 4 26.1526.15 4.3704.370 0.8320.832 2,8192,819

구분division 배양직후 생유산균수
(Log CFU/ml)Number of lactic acid bacteria immediately after culture
(Log CFU / ml) 냉동직후의 생유산균수
(Log CFU/ml)Number of lactic acid bacteria immediately after freezing
(Log CFU / ml) 비교예1Comparative Example 1 9.989.98 9.889.88 비교예2Comparative Example 2 9.989.98 10.1010.10 실시예 1Example 1 9.989.98 9.909.90 실시예2Example 2 9.989.98 9.819.81 실시예 3Example 3 9.989.98 9.789.78 실시예 4Example 4 9.989.98 10.0410.04

상기 표 3 및 4에 나타낸 바와 같이, 당류의 종류에 따라 품질 비교한 결과유의적인 차이가 발생되지 않았으며, 이는 발효유의 냉동식품을 제조하는 과정에서, 원료로 이용되는 발효유의 품질은 당류 종류별로 물성이 유사하고, 브릭스, pH, 산도, 점도 및 유산균수가 제품의 품질규격의 변화를 초래하지 않는다.
As shown in Tables 3 and 4, there was no significant difference in quality between the types of saccharides. In the process of producing frozen foods of fermented milk, the quality of the fermented milk used as the raw material was classified according to kinds of saccharides The physical properties are similar, and the bricks, pH, acidity, viscosity and number of lactic acid bacteria do not cause changes in product quality standards.

실험예Experimental Example 3: 발효유 냉동식품의 경도평가 3: Evaluation of hardness of fermented milk frozen foods

실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 2의 발효유 냉동식품을 20℃ 및 75 RH% 조건에서 보관하면서 0, 10분, 20분, 30분으로 10분 간격으로 시료를 채취하여 경도를 측정하였다. 경도는 텍스쳐 분석기(Texture analyzer)로 측정하였으며, 구체적 측정조건은 Test Speed=1.1mm/s, Post Speed=10.0mm/s, Distance = 15.0mm 및 Trig.Force=5g, 및 Probe= P0.5S SPHERICAL STAINLESS이었다. 상기 경도 측정결과는 하기 표 5 및 도 3에 나타냈다. 하기 표 5에서 경도 감소율은 다음과 같은 수식에 따라 계산되었다.The fermented milk frozen foods of Examples 1 to 4 and Comparative Examples 1 and 2 were stored at 20 ° C and 75% RH, and samples were taken at intervals of 10 minutes, 0 minutes, 10 minutes, 20 minutes and 30 minutes, respectively. The hardness was measured with a texture analyzer. Specific measurement conditions were Test Speed = 1.1 mm / s, Post Speed = 10.0 mm / s, Distance = 15.0 mm and Trig.Force = 5 g, and Probe = P0.5S SPHERICAL STAINLESS. The hardness measurement results are shown in Table 5 and FIG. In Table 5, the hardness reduction rate was calculated according to the following formula.

구분division 비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예 1Example 1 실시예2Example 2 실시예 3Example 3 실시예 4Example 4 0분0 minutes 33,48233,482 20,63220,632 19,42819,428 18,69118,691 17,03617,036 13,35313,353 10분10 minutes 6,6096,609 6,5946,594 4,3094,309 4,2624,262 4,0674,067 4,2204,220 20분20 minutes 2,5672,567 2,3982,398 2,2932,293 1,7121,712 1,6291,629 1,9391,939 30분30 minutes 1,6831,683 1,5001,500 1,4261,426 816816 795795 458458

상기 표 5 및 도 3의 결과에 나타낸 바와 같이, 실시예 및 비교예 제품 모두 보관기간이 경과하면서 경도가 감소하는 경향을 나타냈으며 이는 20℃에서 냉동식품이 서서히 녹으면서 나타내는 현상이다. 또한 보관기간이 경과하면서 비교예 1 및 2의 제품은 상대적으로 경도의 감소폭이 적은 경향을 나타나며, 실시예 1 내지 4의 제품은 상대적으로 경도의 감소폭이 크게 되어 비교예에 비해 낮은 경도를 나타냈다. 따라서, 사이코스를 첨가한 실시예 제품은 백설탕과 액상과당을 사용한 비교예 제품에 비해서, 냉동식품의 녹는 속도가 빠르며, 소비자가 용이하게 신속히 섭취할 수 있으며, 구용성이 우수함을 알 수 있었다.
As shown in the results of Table 5 and FIG. 3, the hardness of each of the products of the Examples and Comparative Examples tended to decrease with the lapse of storage period, which is a phenomenon that occurs when the frozen food slowly melts at 20 ° C. In addition, products of Comparative Examples 1 and 2 tend to have a relatively small reduction in hardness while the storage period has elapsed, and the products of Examples 1 to 4 exhibit a relatively small reduction in hardness, which is lower than that of Comparative Example. Thus, it can be seen that the product of the Example with the addition of psicose has a faster dissolution rate of the frozen food than the product of the Comparative Example using the white sugar and the liquid fructose, and can be easily consumed quickly and easily by the consumer.

실험예Experimental Example 3: 발효유 냉동식품의  3: Fermented milk of frozen food 빙결정Ice crystal 특성 평가 Character rating

냉동식품의 빙결정(ice crystal)은 짧은 시간에 빙결정 크기가 작고, 균일한 분포를 가지는 것이 바람직하다. 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 2의 발효유 냉동식품의 빙결정 상태를 -20℃ 냉동저장후 확인하였다. 실시예 1 내지 4의 빙결정의 상태 사진을 도 4 내지 도 7에 기재하였고, 비교예 1 및 2의 빙결정의 상태 사진을 도 8 및 도 9에 나타냈다. It is preferable that the ice crystal of frozen foods has a small ice crystal size and a uniform distribution in a short time. The ice crystal states of the fermented milk frozen foods of Examples 1 to 4 and Comparative Examples 1 and 2 were confirmed after refrigerated storage at -20 캜. Figs. 4 to 7 show photographs of the frost definition states of Examples 1 to 4, and Figs. 8 and 9 show photographs of the freezing state of Comparative Examples 1 and 2.

도 4 내지 도 7에 나타낸 바와 같이, 설탕 사용한 비교예 1, 및 액상과당을 사용한 비교예 2에 비해서, 실시예 1내지 4의 제품은 빙결정 크기가 작았다. 아래 표 6에 실험군별로 표면 최대 결정크기를 첨부하였다.As shown in Fig. 4 to Fig. 7, the products of Examples 1 to 4 had smaller ice crystal sizes than those of Comparative Example 1 using sugar and Comparative Example 2 using liquid fructose. Table 6 below shows the maximum surface size for each experimental group.

구분division 표면 최대결정의 직경 (mm)Diameter of the surface maximum crystal (mm) 비교예1Comparative Example 1 2828 비교예2Comparative Example 2 2727 실시예 1Example 1 2323 실시예 2Example 2 1111 실시예 3Example 3 44 실시예 4Example 4 55

빙결정이 크면 발효유 냉동식품의 조직이 거칠어 지고, 성분 내 고형분의 분포가 균일하지 못하게 된다. 사이코스를 이용한 실시예 1 내지 4의 제품은 비교예 1, 2에 비해 상대적으로 빙결정 크기가 작아 최대 빙결정 생성대를 통과하는 시간이 비교예 1 내지 2 보다 짧은 것으로 판단된다. 이로 인해 작은 결정이 많이 생겼고, 이러한 사이즈가 작은 빙결정이 제품에 고르게 분포하여 발효유 냉동식품 내 기타 고형분과의 조화가 잘 이루어짐에 따라 빙결정에 의한 날카로운 식감이 감소하고, 이에 발효유 냉동식품 조직의 거침성이 줄어들어 부드러움 맛을 증가시키는 것이다.
If the ice crystal is large, the texture of the fermented milk frozen food becomes rough and the distribution of the solid content in the ingredient becomes uneven. It was judged that the products of Examples 1 to 4 using the psicose had a relatively smaller ice crystal size than that of Comparative Examples 1 and 2, and the time to pass through the maximum ice crystal generation zone was shorter than that of Comparative Examples 1 and 2. As a result of this, a lot of small crystals are formed, and ice crystals having such a small size are uniformly distributed in the product, so that the sharp texture of the ice crystals is reduced as the fermented milk is well harmonized with other solid contents in the frozen food, Reduces the coarseness and increases the tenderness.

실험예Experimental Example 4: 냉동 발효유의 관능평가 4: Sensory evaluation of frozen fermented milk

관능평가 패널은 관능평가를 위해 전문적으로 훈련된 20~40대 남녀10명으로 하였으며, 조화감, 청량감, 후미, 날카로운 맛, 신맛, 단맛, 부드러움 및 전체기호도에 대해 5점 척도법으로 하기 5개 항목에 대해서 1점부터 5점까지 부여하게 하였다. 구체적 평가기준은 다음과 같으며, 평가결과는 하기 표 7에 나타냈다.The sensory evaluation panel was composed of 10 male and female students in their 20s and 40s who were trained professionally for sensory evaluation. The sensory evaluation panel was composed of 5 items for the harmony, cooling sensation, aft, sharp taste, sourness, sweetness, softness, To 1 point to 5 points. The concrete evaluation criteria are as follows, and the evaluation results are shown in Table 7 below.

[평가항목] [Evaluation Items]

전체기호도 : (매우 나쁘다(1점)-매우 좋다(5점))Overall likelihood: (very bad (1 point) - very good (5 points))

조화감: (전혀 조화롭지 않다(1점)-매우 조화롭다 (5점))Harmony sense: (Not at all harmonious (1 point) - Very harmonious (5 points))

청량감 : (매우 텁텁하다(1점)-매우 청량감 있다(5점))Cool feeling: (very tough (1 point) - very cool feeling (5 points))

후미: (전혀 후미가 없다(1점)-매우 후미가 있다 (5점))Fumi: (There is no aft at all (1 point) - There is a very aft (5 points))

날카로운맛 : (전혀 날카로움이 없다(1점)-매우 날카로움이 있다 (5점))Sharp flavor: (No sharpness at all (1 point) - Very sharp (5 points))

신맛: (신맛이 전혀 없다 (1점)-신맛이 매우 강하다 (5점))Sour: (There is no sourness at all (1 point) - Sour is very strong (5 points))

단맛: (단맛이 전혀 없다(1점)-단맛이 매우 강하다 (5점))Sweetness: (There is no sweetness at all (1 point) - Sweetness is very strong (5 points))

부드러움: (전혀 부드럽지 않다(1점)-매우 부드럽다 (5점))Softness: (not soft at all (1 point) - very soft (5 points))

평가항목Evaluation items 비교예1Comparative Example 1 비교예2Comparative Example 2 실시예 1Example 1 실시예2Example 2 실시예 3Example 3 실시예 4Example 4 전체 기호도Overall likelihood 3.73.7 3.83.8 44 4.14.1 4.24.2 4.24.2 조화감Harmony 3.73.7 3.93.9 3.93.9 44 4.24.2 4.14.1 청량감Refreshing feeling 2.72.7 2.62.6 2.82.8 3.13.1 3.53.5 2.82.8 후미맛Flavor 3.43.4 3.23.2 33 2.82.8 2.62.6 2.72.7 날카로운 맛A sharp taste 3.23.2 3.53.5 3.13.1 33 33 2.82.8 신맛Sour taste 2.82.8 2.82.8 2.72.7 2.82.8 2.92.9 2.82.8 단맛sweetness 44 4.14.1 4.14.1 44 4.14.1 44 부드러움Softness 44 3.83.8 44 44 4.14.1 4.24.2

관능평가 항목중에서 신맛, 단맛, 부드러움은 비교예 1 내지 2 및 실시예 1 내지 4가 유의적인 차이를 보이지 않았다.Among the sensory evaluation items, the sourness, sweet taste, and softness of Comparative Examples 1 to 2 and Examples 1 to 4 showed no significant difference.

관능평가 항목중에서 전체기호도, 조화감, 청량감, 후미에서 나오는 안 좋은 발효취, 날카로운 맛은 실시예 1 내지 4가 비교예 1 내지 2보다 개선됨을 알 수 있다. 이는 전체적으로 사이코스를 첨가한 발효유 냉동식품에서 청량감은 증가하고, 후미 및 날카로운 맛은 감소하여 전체기호도가 향상됨을 확인할 수 있다.It can be seen that among the sensory evaluation items, Examples 1 to 4 are more improved than Comparative Examples 1 and 2 in terms of overall taste, harmony, refreshing feeling, bad fermentation taste and sharp taste from the back. As a result, it was confirmed that the sensation of coolness was increased in the fermented milk frozen foods with the addition of psicose as a whole, and the taste and sharp taste were decreased.

<110> SAMYANG GENEX CORPORATION <120> Composition for preparing frozen food using the culture product of lactic acid bacteria, and frozen food using the culture product <130> DPP20147108KR <160> 9 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 356 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sod promoter (6) <400> 1 aagcgcctca tcagcggtaa ccatcacggg ttcgggtgcg aaaaaccatg ccataacagg 60 aatgttcctt tcgaaaattg aggaagcctt atgcccttca accctactta gctgccaatt 120 attccgggct tgtgacccgc tacccgataa ataggtcggc tgaaaaattt cgttgcaata 180 tcaacaaaaa ggcctatcat tgggaggtgt cgcaccaagt acttttgcga agcgccatct 240 gacggatttt caaaagatgt atatgctcgg tgcggaaacc tacgaaagga ttttttaccc 300 atggctgtat acgaactccc agaactcgac tacgcatacg acgaaaggat tacaaa 356 <210> 2 <211> 93 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Tac1 promoter (4) <400> 2 tgacaattaa tcatcggctc gtatattgtg tggaattgtg agcggataac aatttcacac 60 aggaaacaga attcccgggg aaaggattac aaa 93 <210> 3 <211> 112 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Tac2 promoter (4) <400> 3 tgacaattaa tcatccggct cgtataatgt taacaatttg tggaattgtg agcggacaca 60 caggaaacag accatggaat tcgagctcgg tacccgggga aaggattaca aa 112 <210> 4 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Trc promoter (1) <400> 4 tgacaattaa tcatcggcct cgtataatgt 30 <210> 5 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ribosome binding region <400> 5 gaaagga 7 <210> 6 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Spacer sequence <400> 6 ttacaaa 7 <210> 7 <211> 289 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of an enzyme protein originated from Clostridium scindens <400> 7 Met Lys His Gly Ile Tyr Tyr Ala Tyr Trp Glu Gln Glu Trp Ala Ala 1 5 10 15 Asp Tyr Lys Arg Tyr Val Glu Lys Ala Ala Lys Leu Gly Phe Asp Ile 20 25 30 Leu Glu Val Gly Ala Ala Pro Leu Pro Asp Tyr Ser Ala Gln Glu Val 35 40 45 Lys Glu Leu Lys Lys Cys Ala Asp Asp Asn Gly Ile Gln Leu Thr Ala 50 55 60 Gly Tyr Gly Pro Ala Phe Asn His Asn Met Gly Ser Ser Asp Pro Lys 65 70 75 80 Ile Arg Glu Glu Ala Leu Gln Trp Tyr Lys Arg Leu Phe Glu Val Met 85 90 95 Ala Gly Leu Asp Ile His Leu Ile Gly Gly Ala Leu Tyr Ser Tyr Trp 100 105 110 Pro Val Asp Phe Ala Thr Ala Asn Lys Glu Glu Asp Trp Lys His Ser 115 120 125 Val Glu Gly Met Gln Ile Leu Ala Pro Ile Ala Ser Gln Tyr Gly Ile 130 135 140 Asn Leu Gly Met Glu Val Leu Asn Arg Phe Glu Ser His Ile Leu Asn 145 150 155 160 Thr Ser Glu Glu Gly Val Lys Phe Val Thr Glu Val Gly Met Asp Asn 165 170 175 Val Lys Val Met Leu Asp Thr Phe His Met Asn Ile Glu Glu Ser Ser 180 185 190 Ile Gly Asp Ala Ile Arg His Ala Gly Lys Leu Leu Gly His Phe His 195 200 205 Thr Gly Glu Cys Asn Arg Met Val Pro Gly Lys Gly Arg Thr Pro Trp 210 215 220 Arg Glu Ile Gly Asp Ala Leu Arg Glu Ile Glu Tyr Asp Gly Thr Val 225 230 235 240 Val Met Glu Pro Phe Val Arg Met Gly Gly Gln Val Gly Ser Asp Ile 245 250 255 Lys Val Trp Arg Asp Ile Ser Lys Gly Ala Gly Glu Asp Arg Leu Asp 260 265 270 Glu Asp Ala Arg Arg Ala Val Glu Phe Gln Arg Tyr Met Leu Glu Trp 275 280 285 Lys <210> 8 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> modified nucleic acid sequence (1) of the enzyme protein of SEQ ID NO: 7 <400> 8 atgaaacacg gtatctacta cgcgtactgg gaacaggaat gggcggcgga ctacaaacgt 60 tacgttgaaa aagcggcgaa actgggtttc gacatcctgg aagttggtgc ggcgccgctg 120 ccggactact ctgcgcagga agttaaagaa ctgaaaaaat gcgcggacga caacggtatc 180 cagctgaccg cgggttacgg tccggcgttc aaccacaaca tgggttcttc tgacccgaaa 240 atccgtgaag aagcgctgca gtggtacaaa cgtctgttcg aagttatggc gggtctggac 300 atccacctga tcggtggtgc gctgtactct tactggccgg ttgacttcgc gaccgcgaac 360 aaagaagaag actggaaaca ctctgttgaa ggtatgcaga tcctggcgcc gatcgcgtct 420 cagtacggta tcaacctggg tatggaagtt ctgaaccgtt tcgaatctca catcctgaac 480 acctctgaag aaggtgttaa attcgttacc gaagttggta tggacaacgt taaagttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaagaa tcttctatcg gtgacgcgat ccgtcacgcg 600 ggtaaactgc tgggtcactt ccacaccggt gaatgcaacc gtatggttcc gggtaaaggt 660 cgtaccccgt ggcgtgaaat cggtgacgcg ctgcgtgaaa tcgaatacga cggtaccgtt 720 gttatggaac cgttcgttcg tatgggtggt caggttggtt ctgacatcaa agtttggcgt 780 gacatctcta aaggtgcggg tgaagaccgt ctggacgaag acgcgcgtcg tgcggttgaa 840 ttccagcgtt acatgctgga atggaaataa 870 <210> 9 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> modified nucleic acid sequence(2) of the enzyme protein of SEQ ID NO:7 <400> 9 atgaagcacg gcatctacta cgcatactgg gagcaggagt gggcagcaga ctacaagcgc 60 tacgttgaga aggcagcaaa gctgggcttc gacatcctgg aggttggcgc agcaccactg 120 ccagactact ccgcacagga ggttaaggag ctgaagaagt gcgcagacga caacggcatc 180 cagctgaccg caggctacgg cccagcattc aaccacaaca tgggctcctc cgacccaaag 240 atccgcgagg aggcactgca gtggtacaag cgcctgttcg aggttatggc aggcctggac 300 atccacctga tcggcggcgc actgtactcc tactggccag ttgacttcgc aaccgcaaac 360 aaggaggagg actggaagca ctccgttgag ggcatgcaga tcctggcacc aatcgcatcc 420 cagtacggca tcaacctggg catggaggtt ctgaaccgct tcgagtccca catcctgaac 480 acctccgagg agggcgttaa gttcgttacc gaggttggca tggacaacgt taaggttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaggag tcctccatcg gcgacgcaat ccgccacgca 600 ggcaagctgc tgggccactt ccacaccggc gagtgcaacc gcatggttcc aggcaagggc 660 cgcaccccat ggcgcgagat cggcgacgca ctgcgcgaga tcgagtacga cggcaccgtt 720 gttatggagc cattcgttcg catgggcggc caggttggct ccgacatcaa ggtttggcgc 780 gacatctcca agggcgcagg cgaggaccgc ctggacgagg acgcacgccg cgcagttgag 840 ttccagcgct acatgctgga gtggaagtaa 870 <110> SAMYANG GENEX CORPORATION <120> Composition for preparing frozen food using the culture product          of lactic acid bacteria, and frozen food using the culture          product <130> DPP20147108KR <160> 9 <170> Kopatentin 1.71 <210> 1 <211> 356 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> The sod promoter (6) <400> 1 aagcgcctca tcagcggtaa ccatcacggg ttcgggtgcg aaaaaccatg ccataacagg 60 aatgttcctt tcgaaaattg aggaagcctt atgcccttca accctactta gctgccaatt 120 attccgggct tgtgacccgc tacccgataa ataggtcggc tgaaaaattt cgttgcaata 180 tcaacaaaaa ggcctatcat tgggaggtgt cgcaccaagt acttttgcga agcgccatct 240 gacggatttt caaaagatgt atatgctcgg tgcggaaacc tacgaaagga ttttttaccc 300 atggctgtat acgaactccc agaactcgac tacgcatacg acgaaaggat tacaaa 356 <210> 2 <211> 93 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> The Tac1 promoter (4) <400> 2 tgacaattaa tcatcggctc gtatattgtg tggaattgtg agcggataac aatttcacac 60 aggaaacaga attcccgggg aaaggattac aaa 93 <210> 3 <211> 112 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> The Tac2 promoter (4) <400> 3 tgacaattaa tcatccggct cgtataatgt taacaatttg tggaattgtg agcggacaca 60 caggaaacag accatggaat tcgagctcgg tacccgggga aaggattaca aa 112 <210> 4 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> The Trc promoter (1) <400> 4 tgacaattaa tcatcggcct cgtataatgt 30 <210> 5 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Ribosome binding region <400> 5 gaaagga 7 <210> 6 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Spacer sequence <400> 6 ttacaaa 7 <210> 7 <211> 289 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> amino acid sequence of an enzyme protein originated from          Clostridium scindens <400> 7 Met Lys His Gly Ile Tyr Tyr Ala Tyr Trp Glu Gln Glu Trp Ala Ala   1 5 10 15 Asp Tyr Lys Arg Tyr Val Glu Lys Ala Ala Lys Leu Gly Phe Asp Ile              20 25 30 Leu Glu Val Gly Ala Ala Pro Leu Pro Asp Tyr Ser Ala Gln Glu Val          35 40 45 Lys Glu Leu Lys Lys Cys Ala Asp Asp Asn Gly Ile Gln Leu Thr Ala      50 55 60 Gly Tyr Gly Pro Ala Phe Asn His Asn Met Gly Ser Ser Asp Pro Lys  65 70 75 80 Ile Arg Glu Glu Ala Leu Gln Trp Tyr Lys Arg Leu Phe Glu Val Met                  85 90 95 Ala Gly Leu Asp Ile His Leu Ile Gly Gly Ala Leu Tyr Ser Tyr Trp             100 105 110 Pro Val Asp Phe Ala Thr Ala Asn Lys Glu Glu Asp Trp Lys His Ser         115 120 125 Val Glu Gly Met Gln Ile Leu Ala Pro Ile Ala Ser Gln Tyr Gly Ile     130 135 140 Asn Leu Gly Met Glu Val Leu Asn Arg Phe Glu Ser His Ile Leu Asn 145 150 155 160 Thr Ser Glu Glu Gly Val Lys Phe Val Thr Glu Val Gly Met Asp Asn                 165 170 175 Val Lys Val Met Leu Asp Thr Phe His Met Asn Ile Glu Glu Ser Ser             180 185 190 Ile Gly Asp Ala Ile Arg His Ala Gly Lys Leu Leu Gly His Phe His         195 200 205 Thr Gly Glu Cys Asn Arg Met Val Pro Gly Lys Gly Arg Thr Pro Trp     210 215 220 Arg Glu Ile Gly Asp Ala Leu Arg Glu Ile Glu Tyr Asp Gly Thr Val 225 230 235 240 Val Met Glu Pro Phe Val Arg Met Gly Gly Gln Val Gly Ser Asp Ile                 245 250 255 Lys Val Trp Arg Asp Ile Ser Lys Gly Ala Gly Glu Asp Arg Leu Asp             260 265 270 Glu Asp Ala Arg Arg Ala Val Glu Phe Gln Arg Tyr Met Leu Glu Trp         275 280 285 Lys     <210> 8 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> Modified nucleic acid sequence (1) of the enzyme protein of SEQ          ID NO: 7 <400> 8 atgaaacacg gtatctacta cgcgtactgg gaacaggaat gggcggcgga ctacaaacgt 60 tacgttgaaa aagcggcgaa actgggtttc gacatcctgg aagttggtgc ggcgccgctg 120 ccggactact ctgcgcagga agttaaagaa ctgaaaaaat gcgcggacga caacggtatc 180 cagctgaccg cgggttacgg tccggcgttc aaccacaaca tgggttcttc tgacccgaaa 240 atccgtgaag aagcgctgca gtggtacaaa cgtctgttcg aagttatggc gggtctggac 300 atccacctga tcggtggtgc gctgtactct tactggccgg ttgacttcgc gaccgcgaac 360 aaagaagaag actggaaaca ctctgttgaa ggtatgcaga tcctggcgcc gatcgcgtct 420 cagtacggta tcaacctggg tatggaagtt ctgaaccgtt tcgaatctca catcctgaac 480 acctctgaag aaggtgttaa attcgttacc gaagttggta tggacaacgt taaagttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaagaa tcttctatcg gtgacgcgat ccgtcacgcg 600 ggtaaactgc tgggtcactt ccacaccggt gaatgcaacc gtatggttcc gggtaaaggt 660 cgtaccccgt ggcgtgaaat cggtgacgcg ctgcgtgaaa tcgaatacga cggtaccgtt 720 gttatggaac cgttcgttcg tatgggtggt caggttggtt ctgacatcaa agtttggcgt 780 gacatctcta aaggtgcggg tgaagaccgt ctggacgaag acgcgcgtcg tgcggttgaa 840 ttccagcgtt acatgctgga atggaaataa 870 <210> 9 <211> 870 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> Modified nucleic acid sequence (2) of the enzyme protein of SEQ ID          NO: 7 <400> 9 atgaagcacg gcatctacta cgcatactgg gagcaggagt gggcagcaga ctacaagcgc 60 tacgttgaga aggcagcaaa gctgggcttc gacatcctgg aggttggcgc agcaccactg 120 ccagactact ccgcacagga ggttaaggag ctgaagaagt gcgcagacga caacggcatc 180 cagctgaccg caggctacgg cccagcattc aaccacaaca tgggctcctc cgacccaaag 240 atccgcgagg aggcactgca gtggtacaag cgcctgttcg aggttatggc aggcctggac 300 atccacctga tcggcggcgc actgtactcc tactggccag ttgacttcgc aaccgcaaac 360 aaggaggagg actggaagca ctccgttgag ggcatgcaga tcctggcacc aatcgcatcc 420 cagtacggca tcaacctggg catggaggtt ctgaaccgct tcgagtccca catcctgaac 480 acctccgagg agggcgttaa gttcgttacc gaggttggca tggacaacgt taaggttatg 540 ctggacacct tccacatgaa catcgaggag tcctccatcg gcgacgcaat ccgccacgca 600 ggcaagctgc tgggccactt ccacaccggc gagtgcaacc gcatggttcc aggcaagggc 660 cgcaccccat ggcgcgagat cggcgacgca ctgcgcgaga tcgagtacga cggcaccgtt 720 gttatggagc cattcgttcg catgggcggc caggttggct ccgacatcaa ggtttggcgc 780 gacatctcca agggcgcagg cgaggaccgc ctggacgagg acgcacgccg cgcagttgag 840 ttccagcgct acatgctgga gtggaagtaa 870

Claims (15)

우유-함유 원료에 유산균을 배양하여 제조되는 유산균 발효유와 당류를 포함하며, 상기 당류는 사이코스를 포함하는 것인, 발효유 냉동식품 제조용 조성물.
A composition for fermented milk frozen foods, comprising fermented milk of a lactic acid bacterium produced by culturing a lactic acid bacterium in a milk-containing raw material, and a saccharide, wherein the saccharide comprises a cyclosporin.
제 1 항에 있어서, 상기 사이코스는, 상기 조성물의 총고형분 함량 100 중량부를 기준으로, 0.5 내지 50 중량부로 포함되는 것인 조성물.
2. The composition of claim 1, wherein the cosmetic composition comprises 0.5 to 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the total solids content of the composition.
제 1 항에 있어서, 상기 사이코스는 분말 또는 액상인 조성물.
The composition of claim 1, wherein the psicose is in powder or liquid form.
제 1 항에 있어서, 상기 사이코스는 혼합당의 총고형분 100 중량부 기준으로 사이코스 1 내지 99.9 중량부로 포함하고, 과당, 포도당 및 올리고당으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 당류를 추가로 포함하는 혼합당인 조성물.
[Claim 2] The method according to claim 1, wherein the cyclosporin is contained in 1 to 99.9 parts by weight of cyclosporine based on 100 parts by weight of the total solid content of the mixed sugar, and further comprises at least one saccharide selected from the group consisting of fructose, glucose and oligosaccharide Composition.
제 4 항에 있어서, 상기 사이코스는 혼합당의 총고형분 100 중량부 기준으로 사이코스 2 내지 55 중량부, 과당 30 내지 80 중량부 및 포도당 2 내지 60 중량부로 포함하는 혼합당인 조성물.
5. The composition according to claim 4, wherein the Saicos is from about 2 to about 55 parts by weight, about 30 to about 80 parts by weight of fructose, and from about 2 to about 60 parts by weight of glucose, based on 100 parts by weight of the total solid content of the mixed sugar.
제 1 항에 있어서, 상기 당류는 과당, 물엿, 설탕 및 고감미도 감미료로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함하는 조성물.
The composition according to claim 1, wherein the saccharide further comprises at least one member selected from the group consisting of fructose, starch syrup, sugar and high-intensity sweetener.
제 1 항에 있어서, 상기 우유-함유 원료는 생유, 농축유, 전지분유, 탈지분유, 탈지 농축유, 저지방우유, 무지방우유, 환원유, 환원저지방우유 및 탈지분유로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인 조성물.
The milk-containing raw material according to claim 1, wherein the milk-containing raw material is selected from the group consisting of raw milk, concentrated milk, whole milk powder, skim milk powder, skim milk fat, low fat milk, skim milk, reduced milk, reduced low fat milk, &Lt; / RTI &gt;
제 1 항에 있어서, 상기 조성물은 유지방 제품, 덱스트린, 변성전분, 유화제, 검류, 과일 추출물, 과일 분말, 향료 및 색소로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 첨가제를 추가로 포함하는 조성물.
The composition according to claim 1, wherein the composition further comprises at least one additive selected from the group consisting of a milk fat product, dextrin, modified starch, emulsifier, gum, fruit extract, fruit powder, fragrance and pigment.
제 8 항에 있어서, 상기 조성물의 총고형분 함량 100 중량부를 기준으로, 생유 10 내지 60 중량부, 탈지분유 1 내지 10 중량부, 사이코스 0.5 내지 50중량부, 유지방제품 0.1 내지 20 중량부, 및 유화제 0.01 내지 5 중량부로 포함하는 조성물.
[Claim 10] The composition according to claim 8, which comprises 10 to 60 parts by weight of raw milk, 1 to 10 parts by weight of skim milk, 0.5 to 50 parts by weight of sucrose, 0.1 to 20 parts by weight of a milk fat product, 0.01 to 5 parts by weight of an emulsifier.
제 9 항에 있어서, 상기 조성물의 총고형분 함량 100 중량부를 기준으로, 변성전분 0.1 내지 5 중량부, 난소화성 말토덱스트린 0.1 내지 5 중량부 및 검류 0.01 내지 1.0 중량부를 추가로 포함하는 조성물.
The composition of claim 9, further comprising 0.1 to 5 parts by weight of modified starch, 0.1 to 5 parts by weight of indigestible maltodextrin and 0.01 to 1.0 parts by weight of gum, based on 100 parts by weight of the total solids content of the composition.
제1항 내지 제10항중 어느 한항에 따른 발효유와 당류를 포함하는 발효유 냉동식품 제조용 조성물을 동결하여 제조되며, 텍스쳐 분석기로 측정한 경도가 10,000 내지 20,000인 발효유 냉동식품.
A fermented milk frozen food product prepared by freezing a fermented milk frozen food composition comprising fermented milk and saccharide according to any one of claims 1 to 10 and having a hardness of 10,000 to 20,000 as measured by a texture analyzer.
제1항 내지 제10항중 어느 한항에 따른 발효유와 당류를 포함하는 발효유 냉동식품 제조용 조성물을 -20℃ ~ -70℃ 온도조건에서 동결하는 단계를 추가로 포함하는 발효유 냉동식품의 제조방법.
A method for producing a fermented milk frozen food, which further comprises a step of freezing the composition for preparing frozen foods containing fermented milk and saccharide according to any one of claims 1 to 10 at a temperature of -20 ° C to -70 ° C.
제12항에 있어서, 상기 제조방법은,
우유-함유 원료에 유산균을 배양하여 발효유를 제조하고,
상기 사이코스를 함유하는 당류와 물을 이용하여 당시럽액을 제조하고,
상기 발효유와 당시럽액을 중량비로 60:40 내지 90:10의 혼합비로 혼합하여 혼합액을 제조하고, 및
상기 혼합액을 -20℃ 내지 -70℃ 온도조건에서 동결하는 단계를 포함하는
발효유 냉동식품의 제조방법.
13. The method according to claim 12,
Lactic acid bacteria are cultured in a milk-containing raw material to prepare a fermented milk,
A sugar syrup liquid was prepared using saccharides containing the above-mentioned saccharides and water,
Mixing the fermented milk and sugar syrup solution in a weight ratio of 60:40 to 90:10 to prepare a mixed solution, and
And freezing the mixed solution at a temperature condition of -20 DEG C to -70 DEG C
Process for the production of fermented milk frozen foods.
제12항에 있어서, 상기 제조방법은,
우유-함유 원료에 사이코스를 첨가하고 유산균을 배양하여 발효유를 제조하고, 상기 발효유를 -20℃ 내지 -70℃ 온도조건에서 동결하는 단계를 포함하는 발효유 냉동식품의 제조방법.
13. The method according to claim 12,
A method for producing a fermented milk frozen food comprising the steps of: adding cicose to a milk-containing raw material, culturing the lactic acid bacterium to prepare fermented milk, and freezing the fermented milk at a temperature of -20 ° C to -70 ° C.
제14항에 있어서, 상기 동결단계를 수행하기 전에,
과당, 물엿, 설탕 및 고감미도 감미료로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 추가 당류와 물을 이용하여 당시럽액을 제조하고, 상기 발효유와 당시럽액을 혼합하여 혼합액을 제조하는 공정을 추가로 수행하는 것인 제조방법.15. The method of claim 14, wherein before performing the freezing step,
A step of preparing a sugar syrup liquid by using at least one additional saccharide selected from the group consisting of fructose, starch syrup, sugar and high-sweetness sweetener, and water, and mixing the fermented milk and sugar syrup liquid to prepare a mixed solution &Lt; / RTI &gt;
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