KR20150095012A - 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물 - Google Patents

코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20150095012A
KR20150095012A KR1020140016024A KR20140016024A KR20150095012A KR 20150095012 A KR20150095012 A KR 20150095012A KR 1020140016024 A KR1020140016024 A KR 1020140016024A KR 20140016024 A KR20140016024 A KR 20140016024A KR 20150095012 A KR20150095012 A KR 20150095012A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
composition
atopic dermatitis
lotion
skin
expression
Prior art date
Application number
KR1020140016024A
Other languages
English (en)
Inventor
이경은
남진주
염종경
김한곤
Original Assignee
코스맥스 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 코스맥스 주식회사 filed Critical 코스맥스 주식회사
Priority to KR1020140016024A priority Critical patent/KR20150095012A/ko
Publication of KR20150095012A publication Critical patent/KR20150095012A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 코디세핀(cordycepin, 3'-deoxyadenosine) 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 코디세핀 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물의 경우, TSLP(thymic stromal lymphopoietin)와 염증유발 사이토카인 발현을 억제하고, PPARα(peroxisome proliferator-activators α) 발현을 증가시킴으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선할 수 있다.

Description

코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물{Composition for skin external application of treatment or prevention atopic dermatitis comprising cordycepin}
본 발명은 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 하기 화학식 1의 코디세핀 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure pat00001
아토피 피부염은 심한 가려움증을 가지는 만성의 염증성 피부상태를 나타내는 피부 질환으로 대게 영·유아기간에 나타나 어른이 되어서도 지속 되거나 일생 동안 지속 되기도 한다. 어린이의 10-20%, 어른에게서는 1-3%의 유발률을 보이고, 이는 지난 30년간 2-3배 증가하였고, 최근에는 성인에서도 유발률이 증가하는 추세이다. 이런 아토피 피부염으로 인해 불면, 정서장애, 학습장애 및 사회적 활동의 어려움 등이 나타날 수 있는데, 유전적인 요소와 함께 면역학적, 생리학적 생화학적 유발 등의 복합적인 요인이 관여하는 것으로 알려져 있고 현재까지는 그 원인이 명확하게 밝혀져 있지 않다(박영립 등, 대한피부연구학회지, 2007, 14(3), 67-72).
아토피 피부염의 70-80%를 차지하는 외인성 피부염은 IgE 관련 면역 기전에 의해 발생 되는데, 이 경우 T세포 이상에 의한 지연성 면역 반응이 관여한다는 보고들이 많다. 아토피 피부염이 발생한 부위에는 대식세포, Th 림프구, 비만세포 등 면역관련 세포의 침윤이 크게 증가한다. 아토피 피부염의 피부는 아토피 피부염 환자의 경우 혈중 IgE의 농도가 높은데 이는 Th2 세포의 수가 증가하며 이 세포가 분비한 IL-4, 13 등 Th2 사이토카인의 B 림프구 자극을 통해 IgE분비를 촉진하기 때문이다. 특히 초기 아토피 피부염의 경우 IL-4, IL-13이 중요하게 작용한다(Donald Y.M. Leung et al., J Clin Invest. 2004, 113, 651-657).
근래의 보고에 의하면 thymic stromal lymphopoietin (TSLP)가 아토피 피부염에 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 이는 아토피 피부염 환자의 각질형성세포에서는 TSLP의 농도가 증가 한데 반해, 다른 피부염에서는 그 농도가 정상과 비슷하여 아토피 피부염에 특이한 인자로 알려지고 있다. TSLP는 물리·화학적인 자극에 노출된 각질형성세포에서 증가한 pro-inflammatory cytokine과 Th2 cytokine에 의해 증가한다(Eric B. Brandt et al. J Clin Cell Immunol, 2011, 2(3)). 이렇게 증가한 TSLP는 CD11c+ 수지상 세포를 활성화 시키고, 활성화된 수지상세포는 T세포로부터 Th2 사이토카인의 분비를 촉진시킨다. 또한 감각뉴런다발을 자극하여 간지러움을 유발함으로써 아토피 피부염을 심화시킨다(Sarah R et al., Cell, 155, 285-295).
또한, 아토피 피부염에 대한 최근 연구를 보면, 대사조절 핵수용체 중에 하나인 PPARα(peroxisome proliferator-activators α)를 활성화하는 물질이 아토피 피부염을 개선 시키는 것으로 보고되었다. Chiba 등은 NC/Nga 마우스에 집먼지 진드기를 도포하여 아토피 피부염을 유도한 모델에서 PPARα 활성화제가 아토피 피부염을 개선하고, 표피 두께의 증가 및 진피에서의 염증세포를 감소시키며, IgE의 증가도 억제 시키는 등의 아토피 피부염에 대해 좋은 효과를 보고하였다. 반면 PPARβ/γ에서는 PPARα와 같은 유의한 효과는 나타나지 않았다(Chiba et al., Allergy, 2012, 67(7), 936-942). 또한, 옥사졸론(oxazolone)을 도포한 아토피 유도 마우스 모델에서 글루코코르티코이드와 함께 PPARα 활성화제를 함께 처치하였을 때 글루코코르티코이드 도포에 따른 피부장벽 기능 이상을 예방하는 것으로 보고하였다. 이것은 무엇보다 PPARα의 활성이 글로코코티코이드 지속 도포에 따른 피부염의 재발이 나타나는 것을 예방하는 것으로 보고하고 있다(Hatano et al., J Invest Dermatol, 2011, 131(9), 1845-1852).
아토피 피부염의 치료를 위해서는 보습제를 꾸준히 바르고, 심할 때는 스테로이드 연고나 항히스타민제를 처방한다. 이는 일시적으로 증상을 완화해주는 효과는 있으나 스테로이드 호르몬제를 장기간 사용하게 되면 피부가 위축되거나 모세혈관이 확장될 수 있고, 오히려 피부장벽기능의 약화 및 골다공증 유발 등의 부작용을 초래할 수 있다. 이에 중간강도의 효과를 주는 국소 면역 조절제로서 사이클로스포린 A, FK506 등이 개발되어 각광받고 있다. 따라서 아토피 치료에는 뛰어난 효과는 있으면서 부작용은 적은 새로운 기작의 아토피 치료제의 개발이 요구되고 있다.
동충하초는 곰팡이의 일종인 동충하초균의 포자 또는 균사가 겨울 기간 동안 곤충의 몸속에 서식하면서 양분을 흡수하여 발육증식하면서 숙주 곤충을 파괴시킨 후, 온도, 습도가 높아지는 여름이 되면 곤충의 표피에 자실체를 형성하는 일종의 약용버섯으로, 곤충의 몸 밖으로 식물체가 자라나는 모습에서 그 명칭이 유래 되었다. 예로부터 약용으로 알려진 동충하초는 박쥐나방과의 유충에서 나온 시넨시스 동충하초를 지칭하는 것이지만, 오늘날에는 곤충 외에도 거미, 균류 등에서 나오는 버섯을 모두 총칭하여 부른다. 그 외에도 누에번데기 동충하초(C. militaris), 매미다발 동충하초(C. sobolifera), 균핵 동충하초(C. ophioglossoides), 유충흑색다발 동충하초(C. martialis), 및 노랑다발 동충하초(C. bassiona)등이 알려져 있다(Su CH. et al., Mycotaxon, 26, 337-344, 1986).
코디세핀(cordycepin, 3'-deoxyadenosine)은 항암작용으로 널리 알려져 있는 동충하초의 지표성분으로 이외에도 항균 활성 효과(한국공개특허 10-2009-0098732), 면역증강효과(한국공개특허 10-2005-0051179), 항당뇨(한국공개특허 10-2005-0063164) 및 불면증 개선 효과(한국공개특허 10-2012-0059207)등 다양한 생물학적 효과가 보고되고 있다. 그러나 코디세핀의 아토피 피부염 개선 효과에 대해서는 아직 보고된 바가 없다.
이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 연구 노력한 결과, 코디세핀 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물의 경우, TSLP와 염증유발 사이토카인 발현을 억제하고, PPARα 발현을 증가시킴으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선할 수 있음을 확인하고, 본　발명을 완성하게 되었다.
(특허문헌 1) KR10-2009-0098732 A
(특허문헌 2) KR10-2005-0051179 A
(특허문헌 3) KR10-2005-0063164 A
(특허문헌 4) KR10-2012-0059207 A
따라서, 본 발명의 주된 목적은 TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 발현과 염증유발 사이토카인 발현을 억제하고, PPARα 발현을 증가시킴으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선 효과를 갖는 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 코디세핀 또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
상기 코디세핀은 하기 화힉식 1을 가지며, 당업계에 공지된 방법에 따라 합성되거나 상업적으로 정제된 상태로 구입하여 사용할 수 있다.
[화학식 1]
Figure pat00002
코디세핀(cordycepin, 3'-deoxyadenosine)은 항암작용으로 널리 알려져 있는 동충하초의 지표성분으로 이외에도 항균 활성, 면역증강, 항당뇨 및 불면증 개선 효과 등이 보고되어 있다. 그러나 코디세핀의 아토피 피부염 개선 효과에 대해서는 아직 보고된 바가 없으며 이에, 본 발명자들은 연구노력한 결과 코디세핀이 아토피 피부염 치료, 예방 및 개선 효과가 있다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명에서 상기 용어“약학적으로 허용가능한”이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 이들 염은 물이나 유기 용매 또는 이들 두 용매의 혼합물 중에서 적절한 염기 또는 산의 화학량론을 반응시켜 제조하는 것이다. 일반적으로, 본 발명에 따른 약제학적으로 허용되는 염으로는 무기 염기와의 염, 유기 염기와의 염, 무기산과의 염, 유기산과의 염 및 염기성 또는 산성 아미노산과의 염이 포함된다. 무기 염기와의 염은 예를 들면 나트륨염 및 칼륨염과 같은 알카리 금속염, 칼슘염 및 마그네슘염과 같은 알카리 토금속염, 알루미늄 염 및 암모늄염이 포함된다. 유기 염기와의 염으로는 트리메틸아민, 트리에틸아민, 피리딘, 피콜린, 2,6-루티딘, 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 사이클로헥실아민, 디사이클로헥실아민 및 N,N'-디벤질에틸렌디아민과의 염을 예로 들 수 있다. 무기산과의 염의 예로는 염산, 붕산, 푸마르산, 옥살산, 타르타르산, 말레산, 시트르산, 석신산, 말산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산 또는 p-톨루엔설폰산과의 염이 포함된다. 염기성 아미노산과의 염은 예를 들면 아르기닌, 라이신 및 오르니틴이 포함된다. 산성 아미노산과의 염의 예로는 아스파트산 및 글루탐산과의 염을 들 수 있다. 본 발명의 염은 예컨대 이온 교환과 같은 통상적인 방법에 의해 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 코디세핀을 총 중량 대비 0.001 ~ 30.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 TSLP 발현을 저해함으로써 아토피 피부염을 개선하는 것을 특징으로 한다.
TSLP는 사이토카인에 속하는 단백질로 항원전달세포의 활성을 통해 T 세포 성숙에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 또한, 근래의 보고에 의하면 TSLP는 아토피 피부염에 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있는데, 이는 아토피 피부염 환자의 각질형성세포에서는 TSLP의 농도가 증가하는데 반해, 다른 피부염에서는 정상과 비슷하여 아토피 피부염에 특이한 일자로 알려져 있다. 따라서, 본 발명자들은 아토피 피부염과 직·간접적으로 관련 있는 TSLP의 발현을 저해함으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선할 수 있는 것을 실험을 통해 확인하였다.
더욱 구체적으로, 본 발명의 실험예에 따르면, TSLP를 유도하는 사이토카인인 IL-4와 함께 코디세핀을 처리한 결과, IL-4에 의해 과발현된 TSLP가 코디세핀의 농도에 따라 현저하게 억제되는 것을 확인하였다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 조성물은 IL-4에 의해 증가된 TSLP의 발현을 저해함으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선할 수 있음을 의미한다(실험예 3).
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 염증유발 사이토카인 발현을 억제함으로써 아토피 피부염을 개선하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 실험예에 따르면, 본 발명의 조성물은 염증 유발 사이토카인인 TNF-α, IL-6 및 IL-1β 사이토카인을 저해하는 것을 확인하였다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 조성물은 상기 염증 유발 사이토카인을 저해함으로써 또는 Th2를 저해하여 TSLP의 발현도 저해함으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선할 수 있음을 의미한다(실험예 1, 2 및 3).
본 발명에 있어서, 상기의 조성물은 PPARα 발현을 증가시킴으로써 아토피 피부염을 개선하는 것을 특징으로 한다.
PPARα(peroxisome proliferator-activators α)는 피부의 표피에서 각질형성세포 분화촉진/증식억제, 지질대사를 통한 피부장벽기능 향상, 염증의 억제 및 상처회복에 있어 중요한 기능을 하고 있으며, 자외선에 의한 염증매개체의 생성 억제와 홍반 생성 억제 작용도 보고되었다, 그 결과 PPARα 수용체의 활성화는 자극 및 알레르기 접촉 피부염의 동물모델에서 염증반응을 감소시키는 작용함을 보여주었다. 피부에 대한 여러 가지 광범위한 장점들로 인하여 PPARα는 건선, 아토피 피부염, 여드름, 피부암 등의 흔한 피부질환에 중요한 치료 타겟이 되고 있다. 따라서 본 발명자들은 아토피 피부염의 개선과 관련 있는 PPARα의 발현을 증가시킴으로써 아토피 피부염을 치료, 예방 및 개선할 수 있는 것을 실험을 통해 확인하였다(실험예 4).
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 연고, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 한다. 또한, 액상, 크림상, 페이스트상, 고체상 등 다양한 성상으로 적용가능하다.
본 발명의 실시예에 따르면, 본 발명의 실시예 1에서 추출한 코디세핀을 함유하는 크림을 제조하여 아토피 피부염 환자를 선별하여 평가한 결과, 코디세핀을 함유하는 크림(제형예 1)을 도보한 부위가 기제 크림(비교 제형예)를 도포한 부위에 비하여 더 호전된 것을 확인하였다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 조성물을 함유하는 피부 외용제의 경우, 아토피 피부염 개선에 효과가 있다는 것을 알 수 있다(실험예 5).
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명은 동충하초 조추출물로부터 분리된 코디세핀을 아토피 피부염 예방 및 개선을 위해 사용하는 새로운 용도를 제공한다.
본 발명의 코디세핀을 얻기 위한 동충하초 조추출물은 동충하초를 채집하여 건조하고 분말화 한 후, 시료 중량의 약 1 내지 20배에 달하는 부피의 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 저급 알코올의 극성 용매 또는 이들의 혼합용매로 60~100℃에서 약 0.1 내지 12시간, 바람직하게는 1 내지 6시간 동안 교반 추출, 열수추출, 냉침추출, 가온추출, 환류냉각추출 또는 초음파추출 등의 추출방법을 사용하여, 환류냉각 추출한 후 수득한 추출액을 여과, 감압 농축하여 얻을 수 있다.
또한, 본 발명의 동충하초 비극성 용매 가용 추출물은 상기에서 얻은 동충하초 조추출물을 헥산, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 글리세린, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜 또는 에테르로부터 선택된 용매, 바람직하게는 클로로포름 또는 에틸아세테이트를 가한 후 추출 분획하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 수득할 수 있다.
본 발명에 따른 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물은 아토피 피부염의 병리적인 면역 기전인 TSLP 발현을 효과적으로 억제하고 PPARα발현 증가시켜 궁극적으로 아토피 피부염의 예방 개선 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다.
도 1은 코디세핀 처리 시 TNF-α발현에 미치는 영향을 측정한 실험예 1의 결과에 대한 그래프이다.
도 2는 코디세핀 처리 시 IL-6 발현에 미치는 영향을 측정한 실험예 1의 결과에 대한 그래프이다.
도 3은 코디세핀 처리 시 IL-1β 발현에 미치는 영향을 측정한 실험예 1의 결과에 대한 그래프이다.
도 4는 코디세핀 처리 시 IL-4 발현에 미치는 영향을 측정한 실험예 2의 결과에 대한 그래프이다.
도 5는 코디세핀 처리 시 TSLP 발현에 미치는 영향을 측정한 실험예 3의 결과에 대한 그래프이다.
도 6은 코디세핀 처리 시 PPARα 발현에 미치는 영향을 측정한 실험예 4의 결과에 대한 그래프이다.
도 7은 코디세핀 함유 제형 도포시 아토피 피부염 개선에 미치는 영향을 확인한 실험예 5의 결과에 대한 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1: 코디세핀의 분리 및 동정
코디셉스 밀리타리스 동충하초는 경동시장(서울, 한국)에서 구입한 것을 건조하여 사용하였다.
상기 건조시킨 동충하초를 분말 화 한 후, 10㎖의 80% 에탄올을 가하여 80℃에서 3시간 동안 3회 환류냉각 열탕 추출을 실시하고, 40℃에서 감압농축장치로 농축하여 에탄올 조추출물을 제조하였다.
상기 에탄올 조추출물은 증류수에 용해하여 부탄올을 1:1의 비율로 혼합하여 이상간 분배를 3회 반복하고, 부탄올 추출물을 감압, 농축, 건조하였다.
상기 건조물에 대해, 실리카겔 크로마토그래피(용매계: 플로로포름/메탄올=7:3)를 수행하여 활성 분획을 다시 감압, 건조한 다음, 소량의 메탄올에 20㎕/㎖의 농도로 용해시켜 밀리포아로 여과하여 HPLC로 활성물질을 분취하였다. 활성물질은 하기 화학식 1에 나타내었다.
[화학식 1]
Figure pat00003

실험예 1: Pro - inflammatory 저해 효과 평가
코디세핀의 pro-inflammatory 발현 저해 효과를 평가하기 위해 사람의 각질형성세포주(Human immortalized keratinocyte, HaCaT)에서의 TNF-α, IL-6, 및 IL-1β의 발현량을 측정하였다.
HaCaT는 10% fetal bovine serum (FBS)과 항생제가 들어있는 DMEM 배양액을 사용하여 5% CO2가 공급되는 37℃ 배양기에서 배양하였다. 세포를 6 웰 플레이트(well plate)에 분주하고 배양 24시간 후, 인산 완충 식염수 용액(PBS)로 세척하고, 각 웰에 FBS를 넣지 않은 DMEM 배지에 LPS와 함께 실시예 1에서 얻은 코디세핀을 최종 농도가 각각 1, 10 μg/ml가 되도록 희석시켜 각 웰에 첨가하였다.
이후 4시간 더욱 배양하고, 세포내 mRNA를 추출하여 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA를 타겟 주형(primer) 및 시아닌 염료인 SYBR 그린(green) 마스터 혼합물(master mix)을 사용하여 실시간(real-time) 중합효소 연쇄반응(PCR)을 실시하여 최종적으로 TNF-α, IL-6, 및 IL-1β 의 유전자 발현 정도를 평가하였다.
그 결과, 도 1 내지 도 3에 나타낸 바와 같이, LPS에 의해 과발현된 TNF-α, IL-6, 및 IL-1β이 코디세핀 1, 10 μg/ml 처리에 따라 현저하게 억제됨을 확인할 수 있었다.
실험예 2: Th2 cytokine 저해 효과 평가
상기의 시험예 1에 기술한 방법과 동일한 방법으로 세포를 배양한 후, 6 웰에 세포를 분주하고 24 시간 후, LPS와 함께 코디세핀을 처리하였다. 4시간 후 실험예 1에 기술한 대로 cDNA를 합성하고 PCR을 실시하여 최종적으로 IL-4의 유전자 발현 정도를 평가하였다.
그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, LPS에 의해 과발현된 IL-4이 코디세핀 1, 10 μg/ml 처리에 따라 현저하게 억제됨을 확인할 수 있었다.
실험예 3: TSLP 저해 효과 평가
상기의 시험예 1에 기술한 방법과 동일한 방법으로 세포를 배양한 후, 6웰에 세포를 분주하고 24 시간 후, IL-4와 함께 코디세핀을 처리하였다. 4 시간 후 실험예 1에 기술한 대로 cDNA를 합성하고 PCR을 실시하여 최종적으로 TSLP의 유전자 발현 정도를 평가하였다.
그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이, IL-4에 의해 과발현된 TSLP가 코디세핀 1, 10 μg/ml 처리에 따라 현저하게 억제됨을 확인할 수 있었다.
실험예 4: PPAR α 발현 증가 효과 평가
상기의 시험예 1에 기술한 방법과 동일한 방법으로 세포를 배양한 후, 6웰에 세포를 분주하고 24 시간 후, 코디세핀 또는 GW7647(PPARα agonist)을 처리하였다. 24 시간 후 실험예 1에 기술한 대로 cDNA를 합성하고 PCR을 실시하여 최종적으로 TSLP의 유전자 발현 정도를 평가하였다.
그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이, PPARα가 코디세핀 1, 10 μg/ml 처리에 따라 현저하게 증가됨을 확인할 수 있었다.
제형예 1 및 비교 제형예 : 크림제의 제조
상기 실시예 1에서 얻은 추출물을 함유하는 크림제를 제조하기 위해의 표 1과 같은 조성성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였으며, 각각 제형예 1 및 비교제형예로 하였다.
성분(함량: 중량%) 제형예 1 비교제형예
실시예1 0.1 -
글리세릴스테아레이트/피이지-100스테아레이트 2.0 2.0
폴리솔베이트60 0.5 0.5
소르비탄 스테아레이트 0.5 0.5
피토스쿠알란 5.0 5.0
호호바 오일 3.0 3.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 10.0 10.0
알로에 버터 3.0 3.0
밀납 1.0 1.0
스테아릴 알코올 0.5 0.5
베헤릴 알코올 0.5 0.5
스테아린산 0.5 0.5
글리세린 7.0 7.0
부틸렌 글리콜 5.0 5.0
카르복시 비닐폴리머 0.2 0.2
아르기닌 0.3 0.3
디메치콘 0.5 0.5
방부제 미량 미량
향료 미량 미량
정제수 잔량 잔량
실험예 5: 코디세핀 성분이 함유된 크림제의 아토피 호전 효과(시험자의 전반적 평가: Investigator Global Assessment , IGA )
상기 실험예 1-4의 시험물질의 아토피 억제 효과를 확인하고자 만 2세부터 40세 사이의 아토피피부염으로 진단된 36명의 피검자를 선별하여 평가하였다. 피검자의 신체 한쪽에는 제형예 1의 크림을, 반대쪽에는 기제 크림만을(대조부위) 하루 2회씩 4주간 도포하였다.
도포 전과 4주간 도포 후 아토피 개선 효과는 홍반, 구진, 태선, 표피박리 등에 대해 하기의 표 2의 평가 기준을 가지고 크림을 바르기 전과 후에 전완부 내측을 전반적으로 평가하였다(Investigator global assessment, IGA).
등급 호전 정도
-1 악화 됨
0 변화 없음
1 약간 호전됨
2 호전됨
3 매우 호전됨
그 결과 코디세핀을 함유한 제형예 1의 크림을 도포한 부위(좌측 상지)가 기제 크림을 도포한 부위(우측상지)에 비하여 IGA 점수가 통계적으로 유의하게 호전되었다. 그 결과는 도 7에 나타낸다.
도 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 외용제 조성물은 아토피 증상을 효과적으로 완화시키는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
제형예 2 : 로션제의 제조
상기 실시예 1에서 얻은 성분을 함유하는 로션제를 하기의 표 3에 나타낸 조성 성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
코디세핀 0.1
글리세린 3.0
부틸렌 그리콜 2.0
C14-22알코올/C12-20알킬글루코사이드 2.0
모노스테아린산글리세린 0.5
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 10.0
유동파라핀 5.0
카르복시 비닐폴리머 0.2
트리에탄올아민 0.2
방부제 미량
향료 미량
정제수 잔량
제형예 3: 연고제의 제조
실시예 1에서 얻은 성분을 함유하는 연고제를 하기의 표 4에 나타낸 바와 같은 조성 성분 및 조성비에 따라 통상적인 방법으로 제조하였다.
성분 함량(중량%)
코디세핀 0.1
밀납 10.0
폴리솔페비트60 1.5
솔비탄세스퀴올레이트 0.8
유동파라핀 40.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 4.0
글리세린 5.0
부틸렌 글리콜 3.0
카르복시 비닐폴리머 0.2
트리에탄올아민 0.2
방부제 미량
향료 미량
정제수 잔량

Claims (6)

  1. 하기 화학식 1의 코디세핀 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물.
    [화학식 1]
    Figure pat00004

  2. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 코디세핀을 총 중량 대비 0.001 ~ 30.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 TSLP(thymic stromal lymphopoietin) 발현을 저해함으로써 아토피 피부염을 개선하는 것을 특징으로 하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 PPARα(peroxisome proliferator-activators α) 발현을 증가시킴으로써 아토피 피부염을 개선하는 것을 특징으로 하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 염증유발 사이토카인 발현을 억제함으로써 아토피 피부염을 개선하는 것을 특징으로 하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 연고, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물.
KR1020140016024A 2014-02-12 2014-02-12 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물 KR20150095012A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020140016024A KR20150095012A (ko) 2014-02-12 2014-02-12 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020140016024A KR20150095012A (ko) 2014-02-12 2014-02-12 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20150095012A true KR20150095012A (ko) 2015-08-20

Family

ID=54058162

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020140016024A KR20150095012A (ko) 2014-02-12 2014-02-12 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20150095012A (ko)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106822169A (zh) * 2017-01-22 2017-06-13 中国人民解放军第三军医大学 虫草素在制备预防和/或治疗放射损伤以及制备肿瘤放疗增敏的药物中的应用
KR20180046244A (ko) * 2016-10-27 2018-05-08 주식회사 엘지생활건강 코디세핀을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
WO2018151442A1 (ko) * 2017-02-17 2018-08-23 서강대학교 산학협력단 아토피의 개선, 예방 또는 치료용 조성물

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180046244A (ko) * 2016-10-27 2018-05-08 주식회사 엘지생활건강 코디세핀을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
CN106822169A (zh) * 2017-01-22 2017-06-13 中国人民解放军第三军医大学 虫草素在制备预防和/或治疗放射损伤以及制备肿瘤放疗增敏的药物中的应用
WO2018151442A1 (ko) * 2017-02-17 2018-08-23 서강대학교 산학협력단 아토피의 개선, 예방 또는 치료용 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10130670B2 (en) Composition for treating or preventing inflammatory skin disease, comprising, as active ingredient, immature citrus fruit extract, or synephrine or salt thereof
RU2423139C2 (ru) КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ Actinidia, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
US20100111927A1 (en) Compositions Comprising Actinidia and Methods of Use Thereof
KR20130129868A (ko) 곰보배추의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, stat3 매개 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20150095012A (ko) 코디세핀을 유효성분으로 함유하는 아토피 치료 또는 예방용 피부 외용제 조성물
Choi et al. Fermented Platycodon grandiflorum extract alleviates TNF-α/IFN-γ-induced inflammatory response in HaCaT cells and modulates immune balance on 1-chloro-2, 4-dinitrobenzene-induced atopic dermatitis in NC/Nga mice
KR20220166642A (ko) 장수만리화 추출물을 포함하는 아토피 피부염 치료용 또는 피부 장벽 강화용 또는 노화 방지용 조성물
KR101892626B1 (ko) 달맞이꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 질환의 예방 또는 개선용 조성물
KR101705354B1 (ko) 고사리삼 알코올 추출물을 포함하는 피부 염증 예방 또는 치료용 조성물
KR102272237B1 (ko) 천연물을 포함하는 아토피성 피부 개선 및 피부 보습용 조성물
KR20090111445A (ko) 생맥산과 그 가감방의 피부질환의 예방 및 치료용, 또는면역증강용 약학 조성물 및 건강기능식품
KR102209969B1 (ko) 절패모의 추출물을 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물
KR102271471B1 (ko) 며느리배꼽을 포함하는 알레르기성 질환의 예방 및 치료용 조성물
KR102170815B1 (ko) 지방산 또는 지방산 유도체를 포함하는 보습 또는 항아토피용 조성물
KR102034436B1 (ko) 베트남 후피향 추출물을 포함하는 아토피 피부염 치료 및 예방용 조성물
KR102309982B1 (ko) 곡정초 추출물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 피부 외용제 조성물
KR101819670B1 (ko) 피부질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101746158B1 (ko) 은시호 추출물을 포함하는 아토피 피부염을 개선시키기 위한 조성물 및 그의 용도
KR102385221B1 (ko) 피부염 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR102297607B1 (ko) 며느리배꼽을 포함하는 아토피 피부 개선 및 피부 보습용 조성물
KR102068612B1 (ko) 플라티필론을 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물
KR101987364B1 (ko) 땅콩 지상부 추출물 및 분획물을 포함하는 피부염 치료용 조성물 및 그의 용도
KR101231446B1 (ko) 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 또는 비알러지성 피부 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품
KR101856034B1 (ko) 적산파채 추출물을 포함하는 피부염 치료용 조성물 및 그의 용도
KR101986008B1 (ko) 레스베라트롤 쌀 또는 레스베라트롤 캘러스 추출물을 포함하는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
N231 Notification of change of applicant
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application