KR20150062624A - 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물 및 꽈배기모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백, 항산화 등의 효과를 월등히 나타낼 수 있는 화장료 조성물을 제공한다.

Description

꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물 및 꽈배기모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 {Cosmetic Composition Comprising Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss Extract, Undaria peterseniana Extract and Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh Extract}

본 발명은 꼬시래기 추출물(Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss Extract), 넓미역 추출물(Undaria peterseniana Extract) 및 꽈배기모자반 추출물(Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh Extract)을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물 또는 이들의 혼합 추출물을 화장료 베이스에 유효 성분으로 함유함으로써 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백, 항산화 등의 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람은 누구나 건강하게 그리고 예쁘고 젊어 보이고 싶은 욕망과 정성이 대단하여 이에 시간과 노력을 아끼지 않는다. 따라서 많은 사람들이 운동이나 약재를 통해 건강 유지와 예방 및 치료를 행하고 있고, 또한 미의 추구를 위해 많은 화장품 제품이 생산되고 판매되고 있다. 시대가 발전함에 따라 건강하고 여유로운 삶이 요구되고 있는 가운데 아름다워지고자 하는 소비자의 욕구가 지속적으로 증가함에 따라 기능성 화장품에 관한 관심이 더욱 높아지고 있다. 옛날에는 화학 성분의 화장품이 대세였지만 최근에는 웰빙 시대의 도래로 피부에 대한 관심이 증폭되어 자극이 심한 화학 성분의 화장품보다 저자극성이면서 화장료로서의 효능을 기대할 수 있는 다양한 천연 재료를 사용한 기능성 화장품(Cosmeceuticals)들이 제조되고 있다. 화장품법 제2조 제1항 및 제2항에서 화장품이라 함은 인체를 청결 및 미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키거나 피부, 모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 물품으로서 인체에 대한 작용이 경미한 것으로 피부의 미백, 주름개선, 보호 등에 도움을 주는 제품이라 정의하고 있다.

한편, 해조류(海藻類, seaweed)는 전체 수산물 생산량 중 약 25%를 차지하는 대규모 수산자원으로서 식용, 약용, 사료 및 식품산업의 원료로서 많이 이용되어 왔으며, 최근에는 건강 기능성 효과가 밝혀지면서 본격적인 식량자원으로 활용하려는 움직임이 활발해지고 있다. 해조류의 주요 특징은 비타민이나 무기질이 풍부하다는 점을 들 수 있으며, 이 중 비타민은 B1, B2, C 및 나이아신(Niacin) 등이 다량 함유되어 있고, 무기질은 갈조류에 많이 함유되어 있어서 미역, 다시마, 톳 등은 무기질의 좋은 공급원이 된다. 또한, 해조류에는 비타민이나 무기질 외에 생리활성을 나타낼 수 있는 타우린(taurine), n-3 지방산, 알긴산(alginic acid), 후코이단(fucoidan), 라미나린 (laminarin), 펙틴(pectin) 및 식이섬유 등 다양한 기능성 성분이 포함되어 있다. 따라서 여러 추출방법을 이용하여 건강 개선 식품이나 의약품 등으로도 이용되고 있으며, 미백 또는 노화방지 등의 효과를 나타내어 화장료 원료로도 다양하게 응용되고 있다. 해조류의 유용성분 및 그 효능을 표 1에 나타내었다.

성분		효능	비고
미네랄	요오드	신진대사 증진, 체력회복, 해독작용 정장작용, 생체 방어능력 향상 촉진, 탈모 예방, 피부 트러블 예방	다시마 등 갈조류
	칼슘	뇌신경계 활동 촉진, 골다공증 예방	갈조류 및 홍조류
	칼륨	고혈압 억제효과	갈조류
	철분	빈혈 예방, 면역유지, 모발건조 예방	갈조류 및 홍조류
	마그네슘	혈관확장, 충혈 및 신경과민, 심장병 및 신장결석 예방	각종 해조류
	셀레늄	항암효과, 활성산소 제거 및 항산화효과, 혈관질환 치유, 면역기능 강화, 피부트러블 예방	각종 해조류
다당류	알긴산	콜레스테롤 저하, 고혈압 저하, 장내 효소의 활성화, 유해 물질의 제거, 정장작용, 항암작용, 다이어트 효과, 노화 억제	다시마, 미역 등의 갈조류
	퓨코이단	암세포 억제 효과, 항콜레스테롤 작용, 동맥경화 및 심장병 예방, 뇌졸중 예방, 면역증강 효과	미역, 다시마, 모자반
	라미나린	동맥경화 예방, 고지혈증 예방, 심장병 치료효과	갈조류
비타민	A	눈의 건강유지, 항암작용, 황산화 작용, 성장촉진, 건강한 피부 및 모발 유지, 알레르기질환개선	김, 파래, 청각
	C,E	피부 트러블 예방, 항산화 효과	김, 톳

상기와 같이 해조류에는 미네랄, 다당류 및 비타민 등의 유용 성분들로 인하여 다양한 효능을 기대할 수 있다. 특히, 피부에 적용시 피부 트러블 예방, 항산화 효과 및 건강한 피부 유지 등 피부에 효능이 우수하다. 이렇게 다양한 방면으로 우수한 효능을 갖고 있는 해조류는 3면이 바다이기 때문에 해양 자원이 풍부한 우리나라의 지리적 환경을 고려하여, 해조류를 포함한 해양 자원으로부터 화장품의 소재에 대한 연구의 필요성이 증대되고 있다.

해조류 추출물을 이용한 화장품 조성물에 관련된 종래 특허로는 한국공개특허공보 10-2013-0016660 A「모자반, 우뭇가사리, 톳으로 구성된 해조류 추출물을 함유하는 항알러지, 진정 및 보습 효과가 우수한 화장료 조성물」, 한국등록특허공보 10-1191095 B1 「구멍쇠미역 추출물을 함유하는 화장료 조성물 제조방법 및 이로부터 제조된 화장료 조성물」, 한국공개특허공보 10-2012-0000251 A 「다시마 추출물을 포함하는 화장료 조성물」, 한국등록특허공보 10-0745023 B1 「참보라색우무 추출물을 이용한 여드름 피부용 화장료 조성물」 등이 다수 존재한다. 그러나 아직까지 꼬시래기, 넓미역 및 꽈배기모자반의 추출물을 주요성분으로 포함한 화장료 조성물은 존재하지 않는 실정이다.

한국공개특허공보 10-2013-0016660 A 한국등록특허공보 10-1191095 B1 한국공개특허공보 10-2012-0000251 A 한국등록특허공보 10-0745023 B1

본 발명자들은 다양한 천연 추출물 중 해양 자원을 소재로 한 추출물을 이용하여 피부 주름 개선, 피부 보습, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 개선, 피부 미백, 피부 항산화 등 피부에 적용 시 효과가 우수한 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 다양한 해양 자원의 중에서 해조류인 꼬시래기(Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss), 넓미역(Undaria peterseniana) 및 꽈배기모자반(Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh) 중에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하여 화장료 조성물에 적용할 경우, 저농도에서도 우수한 항산화 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 멜라닌 생성 기작에 중요한 효소인 티로시나제(tyrosinase)의 활성을 억제하고, 멜라닌 생성을 억제하여 현저한 미백 효과를 나타내는 것을 확인하였다. 따라서 상기 추출물을 화장료 조성물에 적용시 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백 및 항산화 효과를 나타냄을 입증함으로써 피부에 우수한 효과를 나타낼 수 있다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백 및 항산화 효과를 나타내는 추출물을 제공하는 데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 상술한 추출물을 포함하는 피부 주름 개선, 피부 보습, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 개선, 피부 미백, 피부 항산화용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명은 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물 및 꽈배기모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 화장료 조성물은 꼬시래기(Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss), 넓미역(Undaria peterseniana) 및 꽈배기모자반(Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh) 중에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유한다.

상기 추출물은 물, 메탄올, 에탄올, 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 및 이들의 혼합 용매 중에서 선택된 용매로 추출하여 얻어진 추출물이다.

상기 추출물은 50 내지 120℃에서 1 내지 10시간 동안 열수추출하거나, 5 내지 40℃에서 1 내지 5일 동안 유기용매에 침지하여 추출하는 방법 중에서 선택된 적어도 하나의 추출 방법을 사용하여 추출된다.

상기 추출물은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 내지 30.0중량% 포함하고, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10.0중량% 포함한다.

상기 추출물은 피부 주름 개선, 피부 보습 및 피부 미백용이다.

상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이를 포함하는 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형을 갖는다.

본 발명의 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물은 저농도에서도 우수한 항산화 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 멜라닌 생성 기작에 중요한 효소인 티로시나제(tyrosinase)의 활성을 억제하고 멜라닌 생성을 억제하여 현저한 미백 효과를 나타내며, 상기 추출물을 유효 성분으로 화장료 베이스에 포함하였을 때 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백 및 항산화 효과를 나타내어 피부 화장료 조성물로서의 효과가 우수하다.

도 1은 실시예 1 내지 3인 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물의 DPPH 소거능 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 실시예 1 내지 3인 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물의 SOD 유사활성 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 실시예 1 내지 3인 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물의 티로시나제 효소 저해 활성 측정 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 실시예 1 내지 3인 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물, 꽈배기모자반 추출물의 B16F1 멜라노마 세포 내 멜라닌 생합성 억제 효과 결과를 나타낸 그래프이다.

본 발명은 꼬시래기 추출물, 넓미역 추출물 및 꽈배기모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에서 '추출물'이라 함은 꼬시래기, 넓미역, 꽈배기모자반을 용매를 이용하여 열수추출하거나, 유기용매에 침지하여 추출하는 방법 중에서 선택된 적어도 하나의 추출 방법을 사용하여 추출한 다음, 여과하여 추출물을 수득하거나, 또는 여과한 후 회전 진공 증발기(Rotary vacuum evaporator)로 농축함으로써 용매를 최대한 증발시킨 후 동결 건조하여 수득한 추출물을 의미한다.

꼬시래기(Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss)는 홍조식물 꼬시래기과의 해조류로 장흥, 완도, 해남, 진도에서는 꼬시락이라 하며, 부산근처에서는 망둑어를 꼬시래기라고 부르기도 한다. 직경 1-3㎜의 줄기가 보통 20cm 정도 성장하며 최대 2-3m까지 자란다. 몸통은 작은 쟁반 모양의 뿌리에서 모여나고 원기둥 모양이다. 촘촘하게 깃꼴로 갈라지고 가지는 한쪽으로 치우쳐 나기도 한다. 몸에서 뻗어나온 가지는 지름 1~2mm 정도의 철사 모양으로 검은빛을 띤 자주색 또는 짙은 갈색이다. 조간대의 돌, 조개껍데기 등에 붙어 사는데, 특히 강물이 바다로 흘러 드는 얕은 바닷가의 자갈이나 말뚝 등에서 번식하며, 외해(外海)의 암초 위에서도 자란다. 특히 내만에서는 큰 군락을 이루며 민물이 흘러 드는 곳에는 간혹 매우 큰 개체들이 있다. 서식장소에서 떨어진 몸통과 가지는 바다 속 어디나 떠돌아다닐 수 있고, 그 사이의 생장이 빨라서 보통의 붙어 사는 식물체보다 더 커진다. 식용하거나 한천을 만드는 데 우뭇가사리와 섞어 쓴다. 채취된 것들은 건조시켜서 보관한다. 뜨거운 물에 데치면 붉은색을 띠는 색소인 피코피린이 파괴되고, 녹색을 띠는 색소인 클로로필만 남아 녹색으로 바뀐다. 초봄부터 늦가을까지가 제철이다. 지방과 탄수화물의 함량이 낮고 칼슘과 식이섬유를 다량 함유하고 있으며 체내 중금속배출 등의 효과도 있다고 한다.

넓미역(Undaria peterseniana)은 갈조식물 다시마목 미역과의 해조류로 분포지역은 일본과 우리나라의 제주도의 우도 등지이다. 뿌리는 섬유상이며 줄기는 길이 5~10cm 또는 30cm에 달하고 폭은 10~15mm 하부는 편원이며 중앙부 이상은 편압이고 양측에서 좁은 날개가 생긴다. 줄기의 상부는 잎으로 된다. 잎은 넓은 긴 대상이며 그 기부는 쐐기꼴 또는 심장형이고 길이 1~3.5m, 폭 25~30cm이며 그 짧은것은 긴 타원형인 것도 있다. 중대부는 좀 두터우며 미역처럼 융기하지 않으나 넓으며 더러는 폭이 10cm쯤되는 수도 있다. 자낭군은 중대부에 따라 하부에서 차차 상부로 형성되고 잎의 양면을 덮게 된다. 점심대의 깊은 곳에 있다. 엽상부의 주름과 크기는 서식처에 따라 차가 많고 외양성은 크고 주름이 적으나 조용한 곳에 생육하는 것은 매우 번무하고 엽상부가 둥글고 주름이 많다. 동계에 유체가 나타나고 다음해 초하까지는 성숙한다. 유주자를 방출하고 나면 엽체의 끝 부분에서부터 고폐하기 시작하고 8월 까지는 완전히 유실된다. 성숙하면 중대부의 양면에 유쥬자낭이 형성되고 그 중 어떤것은 중대부 뿐만 아니라 경상부의 양측에 주름이 생기고 그곳에서도 형성된다. 유쥬자의 방출성기는 5월 하순에서 6월 상순까지(수온 18.0~23.5℃)다.

꽈배기모자반(Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh)은 갈조류의 모자반목 모자반과에 속하며 한국과 일본에 주로 분포하고 조간대 하부로부터 수심이 깊은 곳까지 서식하며 단단한 바위 기질에 붙어 자란다. 몸의 길이는 2~3m에 달하며, 생육하는 환경에 따라 외형의 변화가 매우 심하고 줄기가 꼬여 있는 형태로 되어있다.

본 발명은 꼬시래기(Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss), 넓미역(Undaria peterseniana) 및 꽈배기모자반(Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh) 중에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유한다.

본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 추출물은 물, 메탄올, 에탄올, 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 및 이들의 혼합 용매 중에서 선택된 용매로 추출할 수 이있다.

본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기 추출물은 50 내지 120℃에서 1 내지 10시간 동안 열수추출하거나, 5 내지 40℃에서 1 내지 5일동안 유기용매에 침지하여 추출하는 방법 중에서 선택된 적어도 하나의 추출 방법을 사용하여 추출하는 것이 추출물의 수율을 가장 효과적으로 향상시킬 수 있는 측면에서 바람직하다.

본 발명의 바람직한 양태에 따르면, 상기와 같은 방법으로부터 추출된 추출물은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 내지 30.0중량%를 포함할 수 있고, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10.0중량%를 포함할 수 있다. 상기 추출물이 미백 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 미만일 경우에는 본 발명의 목적인 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백 및 항산화 효과를 충분히 얻을 수 없기 때문에 피부 화장료로서의 기능이 떨어지고, 30.0중량%를 초과하는 경우에는 세포 독성으로 인한 안전성의 문제점이 있다.

상기와 같은 방법으로부터 제조된 추출물은 피부 주름 개선, 피부 보습 효과, 피부 탄력 개선, 피부결 개선, 피부 밝기 효과, 미백 및 항산화 효과가 우수하기 때문에 피부 주름 개선, 피부 보습, 피부 미백용의 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이를 포함하는 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형일 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

[실시예]

실시예 1. 꼬시래기 추출물 제조

실시예 1-1. 열수추출물

꼬시래기를 취하여 총 중량에 대해 5배의 정제수를 각각 넣고 105℃에서 5시간 가온 추출하였다. 추출공정이 종료되면 거름종이(Whatman paper No. 1)로 거르고, 물을 제거하기 위해 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축한 후 이어서 동결 건조함으로써 건조중량 기준 꼬시래기 열수 추출물 18.56g를 수득하였다.

실시예 1-2. 80% 메탄올 추출물

꼬시래기를 취하여 총 중량에 대해 3배의 추출용매(80% 메탄올)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하여 메탄올 용매를 최대한 증발시킨 후, 동결 건조하여 건조중량 기준 꼬시래기 80% 메탄올 추출물 24.95g를 수득하였다.

실시예 1-3. 70% 에탄올 추출물

꼬시래기를 취하여 각각 총 중량에 대해 3배의 추출용매(70% 에탄올)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하여 에탄올 용매를 최대한 증발시킨 후, 동결 건조하여 꼬시래기의 70% 에탄올 추출물 36.12g(건조중량)을 얻었다.

실시예 1-4. 30% 부틸렌글리콜 추출물

꼬시래기를 취하여 총 중량에 대해 50배의 추출용매(30% 부틸렌글리콜)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하여 꼬시래기의 30% 부틸렌글리콜 추출물 3.873kg(고형분 약 3.7%)을 얻었다.

실시예 2. 넓미역 추출물 제조

실시예 2-1. 열수추출물

넓미역을 취하여 총 중량에 대해 5배의 정제수를 각각 넣고 105℃에서 5시간 가온 추출하였다. 추출공정이 종료되면 거름종이(Whatman paper No. 1)로 거르고, 물을 제거하기 위해 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축한 후 이어서 동결 건조함으로써 건조중량 기준 넓미역 열수추출물 19.52g를 수득할 수 있었다.

실시예 2-2. 80% 메탄올 추출물

넓미역을 취하여 총 중량에 대해 3배의 추출용매(80% 메탄올)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하여 메탄올 용매를 최대한 증발시킨 후, 동결 건조하여 건조중량 기준 넓미역 80% 메탄올 추출물 26.13g를 수득할 수 있었다.

실시예 2-3. 70% 에탄올 추출물

넓미역을 취하여 총 중량에 대해 3배의 추출용매(70% 에탄올)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하여 에탄올 용매를 최대한 증발시킨 후, 동결 건조하여 넓미역의 70% 에탄올 추출물 35.76g(건조중량)을 얻었다.

실시예 2-4. 30% 부틸렌글리콜 추출물

넓미역을 취하여 총 중량에 대해 50배의 추출용매(30% 부틸렌글리콜)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하여 넓미역의 30% 부틸렌글리콜 추출물 4.091kg(고형분 약 3.9%)을 얻었다.

실시예 3. 꽈배기모자반 추출물 제조

실시예 3-1. 열수추출물

꽈배기모자반을 취하여 총 중량에 대해 5배의 정제수를 각각 넣고 105℃에서 5시간 가온 추출하였다. 추출공정이 종료되면 거름종이(Whatman paper No. 1)로 거르고, 물을 제거하기 위해 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축한 후 이어서 동결 건조함으로써 건조중량 기준 꽈배기모자반 열수추출물을 20.12g를 수득할 수 있었다.

실시예 3-2. 80% 메탄올 추출물

꽈배기모자반을 취하여 총 중량에 대해 3배의 추출용매(80% 메탄올)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하여 메탄올 용매를 최대한 증발시킨 후, 동결 건조하여 건조중량 기준 꽈배기모자반읠 80% 메탄올 추출물 27.48g를 수득할 수 있었다.

실시예 3-3. 70% 에탄올 추출물

꽈배기모자반을 취하여 총 중량에 대해 3배의 추출용매(70% 에탄올)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 3회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과한 다음, 회전 진공 증발기(rotary vacuum evaporator)로 농축하여 에탄올 용매를 최대한 증발시킨 후, 동결 건조하여 꽈배기모자반의 70% 에탄올 추출물 34.23g(건조중량)을 얻었다.

실시예 3-4. 30% 부틸렌글리콜 추출물

꽈배기모자반을 취하여 총 중량에 대해 50배의 추출용매(30% 부틸렌글리콜)을 가하였다. 이를 25℃에서 72시간 동안 진탕추출하는 공정을 1회 진행한 뒤 추출액을 거름종이로 여과하여 꽈배기모자반의 30% 부틸렌글리콜 추출물 3.967kg(고형분 약 4.0%)을 얻었다.

실험예 1. DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) 소거능에 의한 항산화 효과

상기 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 꼬시래기 추출물, 실시예 2-1, 2-2, 2-3, 2-4의 넓미역 추출물, 실시예 3-1, 3-2, 3-3, 3-4의 꽈배기모자반 추출물에 대한 항산화 효과를 측정하였다. 시료에 대한 전자공여능(전자를 공급할 수 있는 능력) 측정은 각 추출물의 농도별 용액 100㎕ 에 5ㅧ10^-4M의 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) 100㎕ 를 넣고, 1분간 교반한 후, 25℃ 인큐베이터에서 30분간 반응시켜 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하는 방법으로 진행하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가구와 대조구의 흡광도 감소율로 나타내었다.

항산화 효과에 대한 결과는 하기 표 2 및 도 1에 나타내었다.

실시예	농도㎍/㎖	DPPH scavenging effect(%)
실시예 1-1	100㎍/㎖	87%
실시예 1-2	100㎍/㎖	93%
실시예 1-3	100㎍/㎖	98%
실시예 1-4	0.1%	85%
실시예 2-1	100㎍/㎖	90%
실시예 2-2	100㎍/㎖	92%
실시예 2-3	100㎍/㎖	89%
실시예 2-4	0.1%	96%
실시예 3-1	100㎍/㎖	94%
실시예 3-2	100㎍/㎖	82%
실시예 3-3	100㎍/㎖	87%
실시예 3-4	0.1%	90%

상기 표 2 및 도 1에 나타난바와 같이 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 꼬시래기 추출물, 실시예 2-1, 2-2, 2-3, 2-4의 넓미역 추출물, 실시예 3-1, 3-2, 3-3, 3-4의 꽈배기모자반 추출물 모두 100㎍/㎖ 또는 0.1%에서 80%이상의 DPPH 소거능력을 나타나 우수한 항산화 효과를 갖는 것으로 파악되었다.

실험예 2. SOD(Superoxide dismutase) 유사활성 측정

SOD 유사활성은 다음과 같이 실시하였다. 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 꼬시래기 추출물, 실시예 2-1, 2-2, 2-3, 2-4의 넓미역 추출물, 실시예 3-1, 3-2, 3-3, 3-4의 꽈배기모자반 추출물에 시료용액 20㎕에 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 분석 키트(SOD assay kit-WST) 내 더블류에스티 작업용액(WST working solution) 200㎕을 넣어 교반한 후, 다시 효소작업용액(Enzyme working solution) 20㎕를 넣어 혼합하고, 37℃ 인큐베이터에서 20분간 반응시켜 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 실험 대조구로는 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(Superoxide dismutase, 100units)을 사용하였으며, 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 유사활성은 시료용액의 첨가구와 대조구의 흡광도 감소율로 나타내었다.

SOD(Superoxide dismutase) 유사활성 측정에 대한 결과는 하기 표 3 및 도 2에 나타내었다.

실시예	농도	SOD-like inhibition activity(%)
실시예 1-1	10㎍/㎖	90%
실시예 1-2	10㎍/㎖	87%
실시예 1-3	10㎍/㎖	96%
실시예 1-4	0.01%	99%
실시예 2-1	10㎍/㎖	94%
실시예 2-2	10㎍/㎖	83%
실시예 2-3	10㎍/㎖	80%
실시예 2-4	0.01%	91%
실시예 3-1	10㎍/㎖	84%
실시예 3-2	10㎍/㎖	97%
실시예 3-3	10㎍/㎖	92%
실시예 3-4	0.01%	90%

상기 표 3 및 도 2에 나타난바와 같이 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 꼬시래기 추출물, 실시예 2-1, 2-2, 2-3, 2-4의 넓미역 추출물, 실시예 3-1, 3-2, 3-3, 3-4의 꽈배기모자반 추출물 모두 10㎍/㎖ 또는 0.01%에서 SOD유사활성이 80%이상으로 나타나 우수한 항산화 효과를 갖는 것으로 파악되었다.

실험예 3. 티로시나제 효소 저해 활성 효과 측정(Tyrosinase assay)

티로시나제(Tyrosinase) 저해활성 측정은 티로시나제의 작용 결과 생성되는 도파크롬(DOPA chrome)을 비색법에 의해 측정하는 야기(Yagi) 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 즉, 반응구는 96-well plate 내 0.1M 인산완충액(phosphate buffer(pH 6.5)) 110㎕에 1.5mM 엘-티로신(L-Tyrosine) 용액(in 0.1M 인상완충액(pH 6.5) 40㎕ 및 시료용액 10㎕를 넣은 후, 머쉬룸 티로시나제(mushroom tyrosinase) (2000unit/㎖) 10㎕를 첨가하여 37℃에서 10분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 도파크롬을 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 490nm에서 측정하였다.

티로시나제 효소 저해 활성 효과 측정에 대한 결과는 하기 표 4 및 도 3에 나타내었다.

실시예	농도	Tyrosinase inhibition effect(%)
실시예 1-1	50㎍/㎖	34%
실시예 1-2	50㎍/㎖	44%
실시예 1-3	50㎍/㎖	52%
실시예 1-4	0.05%	40%
실시예 2-1	50㎍/㎖	39%
실시예 2-2	50㎍/㎖	48%
실시예 2-3	50㎍/㎖	42%
실시예 2-4	0.05%	55%
실시예 3-1	50㎍/㎖	43%
실시예 3-2	50㎍/㎖	36%
실시예 3-3	50㎍/㎖	54%
실시예 3-4	0.05%	50%

상기 표 4 및 도 3에 나타난 바와 같이 상기 표 2 및 도 2에 나타난바와 같이 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 꼬시래기, 실시예 2-1, 2-2, 2-3, 2-4의 넓미역, 실시예 3-1, 3-2, 3-3, 3-4의 꽈배기모자반 추출물 모두 50㎍/㎖ 또는 0.05%에서 티로시나제 억제 효과를 갖는 것으로 파악되었다.

실험예 4. B16F1 멜라노마 세포 내 멜라닌 생합성 억제 효과 측정

마우스 유래 B16F1 멜라노마(melanoma) 내 멜라닌(melanin) 생합성을 억제하는 효과를 측정하기 위하여 다음과 같이 실험을 진행하였다. 즉, B16F1(melanoma)을 10% FBS-DMEM에 배양한 후, 이를 취하여 세포농도를 5.0ㅧ104cell/㎖로 조정한 세포액을 조제한 후, 이를 지름 60mm의 플레이트에 2㎖씩 분주하고, 이를 37℃, 5% CO2인큐베이터에서 24시간 배양시켰다. 24시간 배양 후, 배지를 제거한 후, 10% FBS-DMEM로 조제한 시료 200㎕와 10% FBS-DMEM 1.8㎖을 다시 첨가하여 동일 조건에서 72시간 배양 시켰다. 이때 10% FBS-DMEM만을 사용한 실험구를 대조구로 사용하였으며, 양성대조구는 동일 농도의 알부틴을 사용하였다. 72시간 배양한 후, 각 플레이트 내의 용액 내 멜라닌 생성량을 측정하기 위하여 용액을 배지 1㎖씩 넣은 후 마이크로튜브(microtube)에 옮겼다. 마이크로튜브에서 세포만 모으기 위하여 원심분리를 2회 반복 실시하였다.(10,000rpm/10분) 원심분리가 끝나면 마이크로튜브 내 용액을 제거한 후 뚜껑을 열고 70℃에서 1시간 건조를 하고, 1N NaOH 400㎕ 넣고 70℃에서 10분간 반응시켰다. 반응이 끝나면 5분간 용액과 세포가 잘 섞어준 후 100㎕씩 취하여 96-well plate에 분주 후 490nm에서 흡광도를 측정하였다.

멜라닌 생합성 억제 효과에 대한 결과는 하기 표 5와 도 4에 나타내었다.

실시예	농도	Melanin inhition effect(%)
실시예 1-1	100㎍/㎖	37%
실시예 1-2	100㎍/㎖	40%
실시예 1-3	100㎍/㎖	44%
실시예 1-4	0.1%	35%
실시예 2-1	100㎍/㎖	32%
실시예 2-2	100㎍/㎖	47%
실시예 2-3	100㎍/㎖	45%
실시예 2-4	0.1%	39%
실시예 3-1	100㎍/㎖	34%
실시예 3-2	100㎍/㎖	41%
실시예 3-3	100㎍/㎖	49%
실시예 3-4	0.1%	37%

상기 표 5 및 도 4 에 나타난 바와 같이 실시예 1-1, 1-2, 1-3, 1-4의 꼬시래기 추출물, 실시예 2-1, 2-2, 2-3, 2-4의 넓미역 추출물, 실시예 3-1, 3-2, 3-3, 3-4의 꽈배기모자반 추출물 모두 100㎍/㎖ 또는 0.1%에서 B16F1 멜라노마 세포 내 멜라닌 생성합성을 억제 효과를 갖는 것으로 파악되었다.

이하, 본 발명에 의한 꼬시래기(Gracilariaverrucosa(Hudson)Paperfuss) 추출물, 넓미역 (Undaria peterseniana) 추출물, 및 꽈배기모자반 (Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh) 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 실험예를 보다 상세하게 설명하나, 상기 화장료 조성물은 여러 가지 추출물로 응용 가능하고, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

[처방예]: 화장료 조성물의 처방예

처방예 1-1 : 유연화장수

실시예 1-4, 2-4, 3-4의 추출물을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방 예는 다음과 같다.

	성분	함량(중량%)
1	실시예 (1-4)	0.1
2	실시예 (2-4)	0.1
3	실시예 (3-4)	0.1
4	폴리옥시에칠렌경화피마자유	0.5
5	글리신	3.0
6	디포타슘글리시리제이트	0.1
7	1,3-부틸렌 글리콜	3.0
8	소듐히아루로네이트	0.1
9	에탄올	5.0
10	항산화제	0.1
11	트리에탄올아민	0.1
12	EDTA	0.1
13	방부제	적량
14	정제수	잔량

소듐히아루로네이트는 프로펠러믹서(3000rpm)로 정제수에 분산하여 1% solution 상태로 준비하였다. 소듐히아루로네이트를 제외한 원료 1내지8은 프로펠러믹서를 사용하여 수상 용해조에 500rpm으로 균일화 시키고 75℃에서 가온하여 완전 용해 한 후, 실온으로 냉각하였다. 다음으로, 별도의 용해조에 원료 9내지11을 완전 용해하여 상기 수상 용해조에 투입하고 교반 혼합하였다. 여기에 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 투입하여 충분히 교반 혼합하여, 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 함유한 유연화장수를 제조 하였다.

처방예 1-2 : 영양화장수

실시예 1-4, 2-4, 3-4의 추출물을 함유한 화장료 중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다.

	성분	함량(중량%)
1	실시예 (1-4)	0.1
2	실시예 (2-4)	0.1
3	실시예 (3-4)	0.1
4	글리세린	7.0
5	소르비탄스테아레이트 슈크로오즈코코에이트	2.0
6	미네랄 오일	4.0
7	트리옥타노인	1.0
8	스테아릭에씨드	1.0
9	글리세릴 스테아레이트	0.5
10	소르비탄모노스테아레이트	1.0
11	디메치콘	0.5
12	항산화제	0.3
13	트리에탄올아민	0.1
14	카보머	0.2
15	EDTA	0.1
16	방부제	적량
17	정제수	잔량

프로펠러믹서를 이용하여 카보머를 4000rpm으로 분산하여 2% solution상태로 준비하였다. 수상 용해조에 원료 1내지6을 투입하여 호모믹서(2000rpm)로 교반하여 분산 후, 75℃까지 가온하였다. 유상 용해조에 원료 7내지14을 투입하여 75℃까지 가온 용해하였다. 그 다음 수상 용해조에 용해된 유상을 투입하여 유화(3000rpm/5분)시킨 후, 실온으로 냉각하였다. 여기에 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 투입하여 충분히 교반 혼합하여, 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 함유한 영양화장수를 제조 하였다.

처방예 1-3 : 에센스

실시예 1-4, 2-4, 3-4의 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 처방 예는 다음과 같다.

	성분	함량(중량%)
1	실시예 (1-4)	0.1
2	실시예 (2-4)	0.1
3	실시예 (3-4)	0.1
4	글리세린	5.0
5	1,3-부틸렌 글리콜	2.0
6	폴리에칠렌 글리콜	2.0
7	카보머	1.0
8	소듐히아루로네이트	0.1
9	글리신	3.0
10	폴리아크릴아마이드	2.0
11	히드록시에칠셀룰로이즈	0.2
12	에탄올	3.0
13	항산화제	0.3
14	트리에탄올아민	0.1
15	폴리옥시에칠렌경화피마자유	1.0
16	EDTA	0.1
17	방부제	적량
18	정제수	잔량

소듐히아루로네이트, 히드록시에칠셀룰로이즈는 각각 정제수에 프로펠러믹서(2000rpm)로 분산하여 1% solution상태로 준비하였다. 또 카보머는 정제수에 프로펠러믹서(4000rpm)로 분산하여 2% solution상태로 준비하였다. 한편, 수상 용해조에 원료 1내지12를 투입하여 호모믹서(2000rpm)로 교반하여 분산 후, 75℃까지 가온하였고, 가온 된 수상을 다시 실온으로 냉각하였다. 별도의 용해조에 원료 13내지15를 완전 용해시킨 후, 상기 수상 용해조에 투입하여 교반 혼합하였다. 여기에 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 투입하여 충분히 교반 혼합하여, 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 함유한 에센스를 제조 하였다.

처방예 1-4 : 영양크림

실시예 1-4, 2-4, 3-4의 추출물을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방 예는 다음과 같다.

	성분	함량(중량%)
1	실시예 (1-4)	0.1
2	실시예 (2-4)	0.1
3	실시예 (3-4)	0.1
4	1,3-부틸렌글리콜	3.0
5	글리세린	3.0
6	하이드로제네이티드 레시친	1.0
7	옥틸도데카놀	3.0
8	트리옥타노인	2.0
9	스테아릭에씨드	1.5
10	세토스테아릴알콜	2.0
11	폴리솔베이트60	1.5
12	소르비탄세스퀴올레이트	2.0
13	디메치콘	3.0
14	항산화제	0.3
15	산탄검	0.2
16	트리에탄올아민	0.1
17	EDTA	0.1
18	방부제	적량
16	정제수	잔량

수상용해조에 원료 1 내지 8을 투입하여 호모믹서(2000 rpm)로 교반하여 분산 후, 75℃까지 가온하였다. 또 유상 용해조에 원료 9내지16을 투입하여 80℃까지 가온 용해하였다. 수상 용해조에 용해된 유상을 투입하여 유화(3000 rpm/10분)시킨 후, 실온으로 냉각하였다. 여기에 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 투입하여 충분히 교반 혼합하여, 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 함유한 영양크림을 제조 하였다.

처방예 1-5 : 팩

실시예 1-4, 2-4, 3-4의 추출물을 함유한 화장료 중 팩의 처방 예는 다음과 같다.

	성분	함량(중량%)
1	실시예 (1-4)	0.1
2	실시예 (2-4)	0.1
3	실시예 (3-4)	0.1
4	글리세린	7.0
5	1,3-부틸렌글리콜	3.0
6	스쿠알렌	3.0
7	디메치콘	3.0
8	소듐히아루로네이트	0.1
9	글리신	2.0
10	폴리아크릴아마이드	5.0
11	항산화제	0.3
12	트리에탄올아민	0.1
13	EDTA	0.1
14	방부제	적량
15	정제수	잔량

별도의 용해조에 원료1내지8을 완전 용해 시켜 교반 혼합 하고, 여기에 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 투입하여 충분히 교반 혼합하여 실시예 1-4, 2-4, 3-4을 함유한 팩을 제조 하였다.

[시험예] : 화장료 조성물의 사용예

시험예 1. 보습효과 측정

30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1-4를 4주간 사용하게 한 후 피부 보습의 변화를 수분함유량 측정기(Corneometer, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 보습의 변화를 측정하였다. 총 20명의 평균값을 통하여 계산하였으며, 보습 변화 값이 높을수록 보습효과가 높음을 의미한다. 결과는 하기 표 11에 나타내었다.

시험예 2. 탄력효과 측정

30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1-4를 4주간 사용하게 한 후 피부 탄력의 변화를 탄력 측정기(Cutometer, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 탄력의 변화를 측정하였다. 총 20명의 평균값을 통하여 계산하였으며, 탄력 변화(R2)값이 높을수록 탄력효과가 높음을 의미한다. 결과는 하기 표 11에 나타내었다.

시험예 3. 피부결개선효과 측정

30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1-4를 4주간 사용하게 한 후 피부결 측정기(Visioscan, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 피부결의 변화를 측정하였다. 결과는 하기 표 11에 나타내었다.

시험예 4. 주름개선효과 측정

30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1-4를 4주간 양쪽 눈가주름 부위에 사용하게 한 후 눈가 주름 주형(replica)을 영상분석법으로 피부미세주름측정기(SV600, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 주름의 깊이를 측정하였다. 결과는 하기 표 11에 나타내었다.

시험예 5. 피부밝기개선효과 측정

30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1-4를 4주간 사용하게 한 후 분광측색계(Spectrophotometer CM600-d, Conicalminolta)하여 피부색을 L값으로 측정하였다. 결과는 하기 표 11에 나타내었다.

	보습	탄력	피부결	주름	피부밝기
도포 전	23.44	0.4876	25.97	10.22	50.91
도포 2주 후	32.97	0.5085	27.6	9.82	54.65
도포 4주 후	37.51	0.5534	32.12	9.45	57.02
개선율(2주 후)	40.66	4.29	6.28	3.91	7.35
개선율(4주 후)	60.03	13.49	23.68	7.53	12.00

상기 표 11에 나타난 바와 같이 처방예 1-4 사용 4주 후에 보습, 탄력, 피부결, 주름, 피부밝기 개선 효과가 있음을 알 수 있었다.

Claims (7)

1. 꼬시래기(Gracilaria verrucosa (Hudson) Paperfuss), 넓미역(Undaria peterseniana) 및 꽈배기모자반(Sargassum siliquastrum (Mertens) C. Agardh) 중에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서,
   상기 추출물은 물, 메탄올, 에탄올, 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 부탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 및 이들의 혼합 용매 중에서 선택된 용매로 추출하여 얻어진 추출물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
3. 제 1 항에 있어서,
   상기 추출물은 50 내지 120℃에서 1 내지 10시간 동안 열수추출하거나, 5 내지 40℃에서 1 내지 5일동안 유기용매에 침지하여 추출하는 방법 중에서 선택된 적어도 하나의 추출 방법을 사용하여 추출된 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
4. 제 1 항에 있어서,
   상기 추출물은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 내지 30.0중량% 포함하는 것을 특징으로 화장료 조성물.
   
5. 제 1 항에 있어서,
   상기 추출물은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 10.0중량% 포함하는 것을 특징으로 화장료 조성물.
   
6. 제 1 항에 있어서,
   상기 추출물은 피부 주름 개선, 피부 보습, 피부 미백용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
7. 제 1 항에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이를 포함하는 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
   
   
   

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