KR20150002685A - 동맥경화성 혈관 질환을 치료하기 위한 방법 및 조성물 - Google Patents

동맥경화성 혈관 질환을 치료하기 위한 방법 및 조성물 Download PDF

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KR20150002685A
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솅-융 리우
우-체 웬
치-밍 첸
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골든 바이오테크놀러지 코포레이션
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Abstract

본 발명은 사이클로헥세논 화합물에 의해 동맥경화성 혈관 질환을 치료하기 위한 방법 및 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 방법에서 화합물은 PDGF 자극된 평활근 세포 증식 또는 이동을 억제시킨다. 일부 실시양태에서, 죽상동맥경화증은 관상 동맥 질환, 동맥류, 동맥경화증, 심근경색증, 색전증, 뇌졸중, 혈전증, 협심증, 혈관 플라크 염증, 혈관 플라크 파열, 가와사키병, 석회화 또는 염증과 관련된 것이다. 일부 실시양태에서, 화합물은 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물은 대상에서 정상 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤 수준을 유지시킨다.

Description

동맥경화성 혈관 질환을 치료하기 위한 방법 및 조성물{METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING ARTERIOSCLEROTIC VASCULAR DISEASES}
상호 참조
본 출원은 2012년 3월 26일에 제출된 미국 가출원 제61/615,794호, 및 2013년 3월 15일에 제출된 미국 가출원 제61/789,304호를 우선권으로 주장하며, 상기 출원은 각각 본원에서 참조로 인용된다.
죽상동맥경화증(이는 또한 동맥경화성 혈관 질환 또는 ASVD로도 알려져 있다)은 지방 물질, 예컨대, 콜레스테롤의 축적 결과로서 동맥 벽이 비후화되는 병증이다. 기능성 고밀도 지질단백질(HDL: high density lipoprotein)(아포A-1 밀라노(apoA-1 Milano) 참조)에 의한 지방 및 콜레스테롤의 대식 세포로부터의 적절한 제거 없이, 대개 대식세포 백혈구 세포의 축적에 의해 유발되고, 저밀도 지질단백질(콜레스테롤 및 트리글리세리드를 보유하는 혈장 단백질)에 의해 촉진되는, 동맥 벽 중의 만성 염증성 반응으로, 동맥혈 혈관에서 이환되는 증후군이다. 이는 통상 동맥의 경화 또는 퍼링(furring)으로 지칭된다. 이는 동맥내 다중 플라크 형성에 의해 유발된다. 죽상동맥경화증은 전체 동맥관계(artery tree)에서 이환되지만, 대개는 보다 큰 고혈압 혈관, 예컨대, 관상 동맥, 신장 동맥, 대퇴 동맥, 대뇌 동맥, 및 경동맥에서 이환된다.
저밀도 지질단백질(LDL: Low-density lipoprotein)은 가장 큰 것에서부터 가장 작은 것까지, 크기 순서대로 킬로미크론, VLDL, IDL, LDL, 및 HDL인 5가지 주요 지질단백질 중 하나이다. 연구 결과, LDL 입자(예컨대, LDL 중 LDL-c, 콜레스테롤)의 수준이 더 높을수록 건강상의 문제 및 심혈관 질환이 조장되는 것으로 나타났으며, 상기 입자는 대개 비공식적으로는 (빈번하게는 좋은 콜레스테롤 또는 건강한 콜레스테롤 입자로 지칭되는 HDL 입자와는 반대로) 나쁜 콜레스테롤 입자로 불린다.
죽상경화성 병변, 또는 죽상경화성 플라크는 2개의 광범위한 카테고리: 안정 및 불안정(이는 또한 취약성으로도 불린다)한 것으로 분류된다. 죽상경화성 병변의 병리 생물학적 성질은 매우 복잡하지만, 일반적으로는 무증상인 경향을 보이는 안정한 죽상경화성 플라크는 세포외 기질 및 평활근 세포가 풍부한 반면, 불안정한 플라크는 대식세포 및 포말 세포가 풍부하고, 동맥 내강(섬유 피막으로도 알려져 있다)으로부터 병변을 이격시키는 세포외 기질은 보통 약하고, 파열되기 쉽다. 섬유 피막이 파열되면, 혈전 형성성 물질, 예컨대, 콜라겐은 순환에 노출되고, 결국에는 내강에 혈전 형성이 유도된다. 형성시, 내강내 혈전은 동맥을 완전히 폐색시킬 수 있지만(즉, 관상 동맥 폐색), 좀 더 대개는 탈착되어 순환 내로 이동하고, 결국에는 보다 소형인 하류 분지를 폐색시켜 혈전색전증을 유발하게 된다(즉, 뇌졸중은 대개 경동맥에서의 혈전 형성에 의해 유발된다). 혈전색전증을 제외한, 만성 확장성 죽상경화성 병변은 내강의 완전한 폐쇄를 유발할 수 있다. 흥미롭게도, 만성 확장성 병변은 대개 내강 협착이 중증임에 따라 하류 조직(들)으로의 혈액 공급이 불충분하여 허혈을 유발할 때까지는 증상이 없다.
PDGF는 중간엽 기원의 세포에 대한 1차 미토겐 및 화학유인물질로서의 기능을 한다. PDGF 패밀리의 구성원은 배 발생 동안 중요한 역할을 하고, 성체에서는 결합 조직 유지에 기여한다. PDGF 신호전달의 탈조절은 죽상동맥경화증, 폐 고혈압 및 기관 섬유증과 연관이 있었다.
한 측면에서, 본원에서는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 죽상동맥경화증을 치료하는 방법을 제공한다:
Figure pct00001
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
또 다른 측면에서, 본원에서는 맥관계내 하나 이상의 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 것을 필요로 하는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상의 맥관계내 하나 이상의 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00002
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
또 다른 측면에서, 본원에서는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 염증 관련 동맥경화성 혈관 질환을 예방하거나, 또는 치료하는 방법을 제공한다:
Figure pct00003
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
또 다른 측면에서, 본원에서는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 C 반응성 단백질을 감소시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00004
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
한 측면에서, 본원에서는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00005
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
또 다른 측면에서, 본원에서는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 정상 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤 수준을 유지시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00006
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
참조 인용
본 명세서에서 언급된 모든 공개문헌, 특허, 및 특허 출원은 본원에서 마치 각각의 개별 공개문헌, 특허, 및 특허 출원이 구체적으로 및 개별적으로 참조로 인용된 것으로 명시된 것과 같은 정도로 본원에서 참조로 인용된다.
본 발명의 신규한 특징은 특히 첨부된 특허청구범위에 기술되어 있다. 본 발명의 원리가 사용되는, 예시적인 실시양태를 기술하는 하기의 상세한 설명, 및 첨부된 도면을 참조함으로써 본 발명의 특징 및 이점을 보다 잘 이해할 수 있을 것이다:
도 1은 마우스 혈관의 횡단면 사진을 도시한 것이다(문헌 [HSING-CHUN CHUNG, 2008 Dissertation, title, "Novel inhibitory effect of Antrodia camphorate on smooth muscle cell migration and carotid neointima formation in mice"]).
도 2a ~ 2b는 MTT 검정법(2a) 및 LDH 검정법(2b)을 통해 수득한, 상이한 농도의 화합물 1이 평활근 세포(A7r5)에 미치는 세포독성 효과의 예시적인 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 PDGF 처리된 평활근 세포(A7r5)의 증식을 억제시키는, 상이한 농도의 화합물 1의 예시적인 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 상이한 농도의 화합물 1에 노출된, PDGF 자극된 평활근 세포 이동을 24시간 동안 조사한 것의 예시적인 결과를 제공한다. * 10 ng/ml PDGF와 비교하여 P < 0.05.
도 5는 400 X 현미경하에 실시된, 화합물 1 처리 후 경동맥의 중막 구역에서의 병리학적 분석에 대한 예시적인 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 400 X 현미경하에 실시된, 화합물 1 처리 후 경동맥의 신생내막 구역에서의 병리학적 분석에 대한 예시적인 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 화합물 1로 처리된 죽상경화성 병변에 대한 예시적인 평가를 나타낸 것이다.
도 8은 현미경하에 실시된, 정상식이 및 고지방식이를 공급받은 ApoE 마우스에서 대동맥의 병리학적 분석에 대한 예시적인 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 화합물 1 처리를 받거나, 또는 처리를 받지 않은 ApoE 마우스에서 혈청 C 반응성 단백질(CRP: C-reactive protein) 수준에 대한 예시적인 평가를 나타낸 것이다.
도 10의 A∼B는 예시적인 사이클로헥세논 화합물 1에 의해 유도된 HepG2 세포주에서의 LDLR mRNA 발현의 결과를 나타낸 것이다. HepG2 세포주를 밤새도록 혈청 기아 상태로 만들고, 명시된 시간 간격으로 20 μM 화합물 1로 시험감염시켰다(1A). 이어서, 세포를 수집하고, RT-PCR에 의해 LDLR 및 GAPDH(내부 대조군)의 mRNA 발현 수준을 검출하였다. GAPDH에 대한 LDLR의 상대적인 발현 수준을 밀도측정에 의해 정량화하였다(1B). 실험은 3중으로 수행하였다. 막대는 평균 ± SEM으로 나타내었다. * 표시는 p < 0.05를 나타내고, ** 표시는 p < 0.01을 나타낸다.
도 11의 A∼B는 예시적인 사이클로헥세논 화합물 1이 HepG2 세포주에서 ERK1/2 인산화를 자극시키는 것에 관한 일례의 효과적인 결과를 나타낸 것이다(2A). HepG2 세포주를 밤새도록 혈청 기아 상태로 만들고, 1 h 동안 명시된 농도의 화합물 1로 시험감염시켰다. 이어서, 전체 세포 용해물을 포스포르-ERK1/2 항체로 면역블롯팅시키고, β 액틴 항체로 재프로빙하였다. 복제 막을 ERK1/2 항체로 프로빙하고(2b), β 액틴에 대한 p-ERK1/2의 상대적인 발현 수준을 밀도측정에 의해 정량화하였다. 실험은 3중으로 수행하였다. 막대는 평균 ± SEM으로 나타내었다.
죽상동맥경화증이 증상을 일으킬 때, 일부 증상, 예컨대, 협심증은 치료될 수 있다. 일반적으로는 예컨대, 금연 및 규칙적인 운동 실시와 같이 제약을 사용하지 않는 수단이 1차 치료 방법이다. 이들 방법이 효과가 없다면, 보통은 심혈관 질환 치료에 있어 의약을 사용하는 것이 다음 단계가 되며, 이는 개선되어 점점 더 장기간에 걸쳐 가장 효과적인 방법이 되고 있다. 죽상동맥경화증(또는 동맥경화성 혈관 질환)에 대한 일반 의약품으로는 스타틴으로 지칭되는 약제 군을 포함한다. 이는 단기간 또는 그보다 장기간의 바람직하지 못한 부작용은 비교적 적다. 일부 실시양태에서, 본 발명인 사이클로헥세논 화합물은 천연 생성물의 추출물로부터 수득되고, 이는 감소된 합병증 및/또는 부작용을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본원에서는 대상(예컨대, 인간)에게 본원에서 제공되는 사이클로헥세논 화합물을 투여함으로써 죽상동맥경화증을 치료하는 방법을 제공한다. 사이클로헥세논 화합물은 치료받은 대상에게 죽상동맥경화증 또는 그와 관련된 증상, 예컨대, 고 LDL 콜레스테롤에 대한 치료학적 이점을 제공한다(실시예 1-14 참조).
일부 실시양태에서, 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 죽상동맥경화증을 치료하는 방법을 제공한다:
Figure pct00007
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
일부 실시양태에서, 본 방법에서 화합물은 PDGF 자극된 평활근 세포 증식 또는 이동을 억제시킨다. 일부 실시양태에서, 죽상동맥경화증은 관상 동맥 질환, 동맥류, 동맥경화증, 심근경색증, 색전증, 뇌졸중, 혈전증, 협심증, 혈관 플라크 염증, 혈관 플라크 파열, 가와사키병, 석회화 또는 염증과 관련된 것이다. 일부 실시양태에서, 화합물은 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시킨다. 일부 실시양태에서, 화합물은 대상에서 정상 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤 수준을 유지시킨다. 일부 실시양태에서, 대상은 인간이다. 실시예 2-14를 참조할 수 있다.
일부 실시양태에서, 맥관계내 하나 이상의 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 것을 필요로 하는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상의 맥관계내 하나 이상의 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00008
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다. 일부 실시양태에서, 맥관계는 심장 동맥을 포함한다. 특정 실시양태에서, 맥관계는 대동맥을 포함한다. 일부 실시양태에서, 대상은 인간이다.
일부 실시양태에서, 본원에서 제공되는 사이클로헥세논 화합물은 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 치료학적 효과를 가진다. 실시예 8을 참조할 수 있다.
일부 실시양태에서, 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 염증 관련 동맥경화성 혈관 질환을 예방하거나, 또는 치료하는 방법을 제공한다:
Figure pct00009
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다. 일부 실시양태에서, 대상은 인간이다.
일부 실시양태에서, 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 C 반응성 단백질을 감소시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00010
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다. 일부 실시양태에서, 대상은 인간이다.
C 반응성 단백질(CRP)은 혈액 중에서 발견되는 단백질로서, 그의 수준은 염증에 대한 반응으로 상승한다(즉, C 반응성 단백질은 급성기 단백질이다). 그의 생리학적 역할은 C1Q 복합체를 통해 보체계를 활성화시키기 위하여 사멸 세포 또는 사멸화(dying) 세포(및 몇몇 박테리아 유형)의 표면 상에서 발현된 포스포콜린에 결합하는 것이다.
지질에 대한 가설을 따르면, 비정상적인 콜레스테롤 수준(고콜레스테롤혈증)- 즉, 보다 고농도의 LDL 및 보다 저농도의 기능성 HDL-은 동맥내 죽종 발생을 촉진시키는 바(죽상동맥경화증), 이는 심혈관 질환과 강력하게 관련되어 있다. 상기 질환 진행 과정을 통해 심근경색증(심장 마비), 뇌졸중, 및 말초 혈관 질환이 유발된다. HDL 입자의 콜레스테롤 함량보다는 보다 높은 혈중 LDL, 특히 보다 높은 LDL 입자 농도 및 보다 작은 LDL 입자 크기가 상기 진행 과정에 기여하는 바, LDL 입자(콜레스테롤)는 죽종 형성과 연관되기 때문에 종종 "나쁜 콜레스테롤"로 지칭된다.
지질단백질 분획, LDL, IDL 및 VLDL 수준 상승은 (죽상동맥경화증을 유발하기 쉬운) 죽종형성성인 것으로 간주된다. 전체 콜레스테롤 수준보다는 상기 분획의 수준이 죽상동맥경화증의 정도 및 진행 과정과 상관 관계가 있다. 반대로, 죽종 성장률이 여전히 높은 조건하에서 전체 콜레스테롤은 정상 한계 범위 내에 있을 수 있지만, 주로 소형 LDL 및 소형 HDL 입자로 구성될 수 있다. 그러나, 그에 반해, 임의의 주어진 전체 콜레스테롤 농도에 대하여, LDL 입자(LDL 콜레스테롤 또는 LDL-c) 개수가 적고(대개 큰 입자), 대부분의 HDL 입자는 큰 입자일 경우, 이때 죽종 성장률은 보통 낮고, 심지어는 음의 값이다.
비록 상기 언급된 시험 중 일부에 기초하면 보다 고위험군인 개체에서의 최신 상한은 70 mg/dL(1.8 mmol/L)인 것으로 간주될 수 있지만, 바람직한 LDL-c 수준은 100 mg/dL(2.6 mmol/L) 미만인 것으로 간주된다. 전체 콜레스테롤 대 HDL의 비-또 다른 유용한 척도-가 5:1 훨씬 미만인 것이 더 건강한 것으로 간주된다.
저밀도 지질단백질(LDL) 수용체(LDLR: low-density lipoprotein receptor)는 콜레스테롤을 순환으로부터 제거하기 위한 1차 경로이다(문헌 [Slater HR, et al., Thrombosis, and Vascular Biology 1984;4(6):604-13]). 간 세포 표면 상의 LDLR 발현이 인간 혈중 LDL 콜레스테롤(LDL-c)의 항상성을 조절한다. 간 LDLR 발현 증가는 수용체 매개 엔도사이토시스를 통해 혈중 LDL-c 제거를 개선시킨다(문헌 [Brown MS, et al., Science 1986 Apr 4;232(4746):34-47]; [Goldstein JL, et al., Nature 1990;343(6257):425-30]). LDLR 매개 간 흡수가 인간 LDL-c 제거 중 70% 초과를 담당하는 것으로 간주된다(문헌 [Brown MS, et al., Science 1986 Apr 4;232(4746):34-47]).
일부 실시양태에서, 본원에서는 대상(예컨대, 인간)에게 본원에서 제공되는 사이클로헥세논 화합물을 투여함으로써 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시키거나, 또는 정상 LDL 콜레스테롤 수준을 유지시키는 방법을 제공한다. 사이클로헥세논 화합물은 치료받은 대상에게 LDL 콜레스테롤을 정상 범위로 저하시키는 치료학적 이점을 제공한다(실시예 1, 10-14 참조). 일부 실시양태에서, 본 발명의 사이클로헥세논 화합물은 천연 생성물의 추출물로부터 수득되고, 합병증 및/또는 부작용을 감소시킨다. 일부 실시양태에서, 본 발명은 LDL 수용체를 유도함으로써 LDL 콜레스테롤을 저하시키거나, 또는 정상 LDL 콜레스테롤 수준을 유지시키는, 예시적인 사이클로헥세논 화합물(예컨대, 화합물 1)의 치료학적 및 예방적 잠재능을 제공한다.
일부 실시양태에서, 본 발명은 LDLR mRNA의 발현이 예시적인 사이클로헥세논 화합물(예컨대, 20 μM 농도의 화합물 1)에 의해 활성화된다는 것을 나타내는 결과를 제공한다. LDLR mRNA 발현 수준은 빠르면 화합물 1을 세포에 첨가한 후 2 h 경과하였을 때 증가되었다. 증가하여 4 h째에 유의적인 수준에 도달하였고, 실험 종결시, 최대 6 h까지 계속하여 증가하였다(실시예 10, 도 10의 A 및 10의 B 참조). 세포외 신호 조절 키나제(ERK1/2: extracellular signal-regulated kinase) 활성화는 간암종 세포에서 LDLR mRNA 안정화와 양의 상관관계를 가지고 있다(문헌 [Abidi P, Zhou Y, et al., Thrombosis, and Vascular Biology 2005;25(10):2170-6]; [Kong W, et al. Nat Med 2004;10(12): 1344-51]).
일부 실시양태에서, 면역블롯팅 결과에 기초하면, 보다 저농도 수준의 예시적인 사이클로헥세논 화합물(예컨대, 0.5 μM의 화합물 1)이 HepG2에서 ERK1/2의 활성화를 유도하는 데 충분하였다(실시예 11, 도 11의 A 및 도 11의 B 참조). 특정 실시양태에서, 예시적인 사이클로헥세논 화합물(예컨대, 화합물 1)은 인간 간암종 세포에서 ERK 의존성 경로를 통해 LDLR mRNA 발현을 상승시킨다.
일부 실시양태에서, 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시키거나, 또는 정상 LDL 콜레스테롤 수준을 유지시키는 방법을 제공한다:
Figure pct00011
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 수용체 발현을 유도한다. 일부 실시양태에서, 화합물은 간 LDLR 발현을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 수용체 발현을 유도한다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 간 LDLR 발현을 증가시킨다. 일부 실시양태에서, 대상은 인간이다. 특정 실시양태에서, 본 방법은 인간에서 LDL 콜레스테롤을 100 mg/dL(2.6 mmol/L) 미만인 수준으로 감소시키거나, 또는 유지시킨다(실시예 10-14. 42 참조).
일부 실시양태에서, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물은 임의의 적합한 출발 물질로부터 합성적으로 또는 반합성적으로 제조된다:
Figure pct00012
.
다른 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물은 발효 등에 의해 제조된다. 예를 들어, 일부 경우에, 화합물 1(이는 또한 안트로퀴노놀(Antroquinonol)™ 또는 "안트로크(Antroq)"로도 알려져 있다) 또는 화합물 3은 4-하이드록시-2,3-디메톡시-6-메틸사이클로헥사-2,5-디에논으로부터 제조된다. 비제한적인 예시적인 화합물은 하기에 예시되어 있다:
Figure pct00013
Figure pct00014
.
다른 실시양태에서, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물은 안트로디아 캄포라타(Antrodia camphorata)의 유기 용매 추출물로부터 단리된 것이다:
Figure pct00015
,
일부 실시양태에서, 유기 용매는 알콜(예컨대, 메탄올, 에탄올, 프로판올 등), 에스테르(예컨대, 메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트 등), 알칸(예컨대, 펜탄, 헥산, 헵탄 등), 할로겐화된 알칸(예컨대, 클로로메탄, 클로로에탄, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 등) 등으로부터 선택된다. 예를 들어, 예시적인 화합물 1-7은 유기 용매 추출물로부터 단리된다. 특정 실시양태에서, 유기 용매는 알콜이다. 특정 실시양태에서, 알콜은 에탄올이다. 일부 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물은 안트로디아 캄포라타의 수성 추출물로부터 단리된다.
일부 실시양태에서, R은 수소, C(=O)C3H8, C(=O)C2H5, 또는 C(=O)CH3이다. 일부 실시양태에서, R1은 수소 또는 메틸이다. 특정 실시양태에서, R2는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸 또는 헥실이다. 일부 실시양태에서, R3은 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸 또는 헥실이다. 일부 실시양태에서, R4는 할로겐, NH2, NHCH3, N(CH3)2, OCH3, OC2H5, C(=O)CH3, C(=O)C2H5, C(=O)OCH3, C(=O)OC2H5, C(=O)NHCH3, C(=O)NHC2H5, C(=O)NH2, OC(=O)CH3, OC(=O)C2H5, OC(=O)OCH3, OC(=O)OC2H5, OC(=O)NHCH3, OC(=O)NHC2H5, 또는 OC(=O)NH2이다. 일부 실시양태에서, R4는 C2H5C(CH3)2OH, C2H5C(CH3)2OCH3, CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), 5 또는 6원 락톤, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, 아릴, 및 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 및 C1-C8 할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된다. 특정 실시양태에서, R4는 CH2CH=C(CH3)2이다. 특정 실시양태에서, 화합물은
Figure pct00016
이다.
특정 제약 및 의학 용어
달리 언급되지 않는 한, 명세서 및 특허청구범위를 비롯한, 본 출원에서 사용되는 하기 용어들은 하기 주어지는 정의를 가진다. 명세서 및 첨부된 특허청구범위에서 사용되는 바, 단수 형태인 "하나("a," "an") 및 "그"라는 것은 문맥상 달리명백하게 명시되지 않는 한, 복수 개의 지시 대상을 포함한다. 달리 명시되지 않는 한, 질량 분광분석법, NMR, HPLC, 단백질 화학법, 생화학법, 재조합 DNA 기법 및 약리학적 방법과 같은 종래 방법이 사용된다. 본 출원에서, "또는" 또는 "및"의 사용은 달리 언급되지 않는 한, "및/또는"을 의미한다. 추가로, "포함하는"이라는 용어 뿐만 아니라, 다른 형태, 예컨대, "포함하다(include)," "포함하다(includes)," "포함된"이라는 용어를 사용하는 것은 한정적이지 않다. 본원에서 사용되는 섹션 표제는 단지 조직화 목적으로 사용된 것이며, 기술된 주제를 한정하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
"알킬" 기는 지방족 탄화수소 기를 의미한다. 알킬 기는 (어느 탄소-탄소 이중 결합 또는 탄소-탄소 삼중 결합도 함유하지 않는다는 것을 의미하는) 포화 알킬 기일 수 있거나, 알킬 기는 (1개 이상의 탄소-탄소 이중 결합 또는 탄소-탄소 삼중 결합을 함유한다는 것을 의미하는) 불포화 알킬 기일 수 있다. 포화 또는 불포화와는 상관없이, 알킬 모이어티는 분지쇄 또는 직쇄일 수 있다.
"알킬" 기는 1 내지 12개의 탄소 원자를 가질 수 있다(비록 본 정의가 수치 범위가 지정되지 않은 "알킬"이라는 용어의 존재 또한 포함하기는 하지만, 본원에서 제시될 때, 수치 범위, 예컨대, "1 내지 12"는 주어진 범위 내에 있는 각 정수를 의미하고; 예컨대, "1 내지 12개의 탄소 원자"란, 알킬 기가 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자 등, 최대 12개 이하의 탄소 원자(12개의 탄소 원자 포함)로 구성될 수 있다는 것을 의미한다). 본원에 기술된 화합물의 알킬 기는 "C1-C8 알킬" 또는 유사 명칭으로 지시될 수 있다. 오직 일례로서, "C1-C8 알킬"은 알킬 쇄에 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8개의 탄소 원자가 존재한다는 것을 나타낸다. 한 측면에서, 알킬은 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸, 및 t-부틸로 이루어진 군으로부터 선택된다. 전형적인 알킬 기는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, ter-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 헥실, 알릴, 부트-2-에닐, 부트-3-에닐, 사이클로프로필메틸, 사이클로부틸메틸, 사이클로펜틸메틸, 사이클로헥실메틸 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 한 측면에서, 알킬은 C1-C8 알킬이다.
"알킬렌"이라는 용어는 2가 알킬 라디칼을 의미한다. 상기 언급된 1가 알킬 기 중 임의의 것은 알킬로부터 제2 수소 제거(abstraction)에 의해 알킬렌이 될 수 있다. 한 측면에서, 알킬렌은 C1-C12 알킬렌이다. 또 다른 측면에서, 알킬렌은 C1-C8 알킬렌이다. 전형적인 알킬렌 기는 -CH2-, -CH(CH3)-, -C(CH3)2-, -CH2CH2-, -CH2CH(CH3)-, -CH2C(CH3)2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2- 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에서 사용되는 바, "아릴"이라는 용어는 고리를 형성하는 각각의 원자가 탄소 원자인 것인, 방향족 고리를 의미한다. 아릴 고리는 5, 6, 7, 8, 9개 또는 9개 초과의 탄소 원자에 의해 형성된다. 아릴 기는 임의적으로 치환된다. 한 측면에서, 아릴은 페닐 또는 나프탈레닐이다. 한 측면에서, 아릴은 페닐이다. 한 측면에서, 아릴은 C6-C10 아릴이다. 구조에 따라, 아릴 기는 모노라디칼 또는 디라디칼(즉, 아릴렌 기)일 수 있다. 한 측면에서, 아릴렌은 C6-C10 아릴렌이다. 예시적인 아릴렌으로는 페닐-1,2-엔, 페닐-1,3-엔, 및 페닐-1,4-엔을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
"방향족"이라는 용어는 4n+2 π 전자(여기서, n은 정수이다)를 포함하는 비국재화된 π 전자계를 가지는 평면 고리를 의미한다. 방향족 고리는 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 10개 초과의 탄소 원자에 의해 형성될 수 있다. 방향족은 임의적으로 치환된다. "방향족"이라는 용어는 카보사이클릭 아릴("아릴", 예컨대, 페닐) 및 헤테로사이클릭 아릴(또는 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족") 기(예컨대, 피리딘), 둘 모두를 포함한다. 상기 용어는 모노사이클릭 또는 융합된 고리 폴리사이클릭(즉, 탄소 원자로 이루어진 인접한 쌍을 공유하는 고리) 기를 포함한다.
"할로"라는 용어, 또는 별법으로, "할로겐" 또는 "할라이드"라는 용어는 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 의미한다.
"락톤"이라는 용어는 같은 분자 내의 알콜 기 -OH와 카복실산 기 -COOH의 축합 생성물로서 보여질 수 있는 사이클릭 에스테르를 의미한다. 다른 산소에 인접한 탄소 중 하나에의 케톤 기 =O와 함께, 2개 이상의 탄소 원자 및 단일 산소 원자로 구성된 폐쇄형 고리를 특징으로 한다.
"헤테로사이클" 또는 "헤테로사이클릭"이라는 용어는 고리(들) 내에 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하고, 여기서, 고리(들) 내의 각 헤테로원자는 O, S 및 N으로부터 선택되며, 여기서, 각 헤테로사이클릭 기는 그의 고리 시스템 중에 4 내지 10개의 원자를 가지되, 단, 임의의 고리는 2개의 인접한 O 또는 S 원자를 함유하지 않는 것인, 헤테로방향족 고리(이는 또한 헤테로아릴로도 알려져 있다) 및 헤테로사이클로알킬 고리(이는 또한 헤테로알리사이클릭(heteroalicyclic) 기로도 알려져 있다)를 의미한다. 비방향족 헤테로사이클릭 기(이는 또한 헤테로사이클로알킬로도 알려져 있다)는 그의 고리 시스템 중에 단 3개의 원자만을 가지는 기를 포함하지만, 방향족 헤테로사이클릭 기는 그의 고리 시스템 중에 5개 이상의 원자를 가져야 한다. 헤테로사이클릭 기는 벤조 융합된 고리 시스템을 포함한다. 3원 헤테로사이클릭 기의 예로는 아지리디닐이 있다. 4원 헤테로사이클릭 기의 예로는 아제티디닐이 있다. 5원 헤테로사이클릭 기의 예로는 티아졸릴이 있다. 6원 헤테로사이클릭 기의 예로는 피리딜이 있고, 10원 헤테로사이클릭 기의 예로는 퀴놀리닐이 있다. 비방향족 헤테로사이클릭 기의 예로는 피롤리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 디하이드로푸라닐, 테트라하이드로티에닐, 옥사졸리디노닐, 테트라하이드로피라닐, 디하이드로피라닐, 테트라하이드로티오피라닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 티옥사닐, 피페라지닐, 아지리디닐, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 호모피페리디닐, 옥세파닐, 티에파닐, 옥사제피닐, 디아제피닐, 티아제피닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피롤린-2-일, 피롤린-3-일, 인돌리닐, 2H-피라닐, 4H-피라닐, 디옥사닐, 1,3-디옥솔라닐, 피라졸리닐, 디티아닐, 디티올라닐, 디하이드로피라닐, 디하이드로티에닐, 디하이드로푸라닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 3-아자비사이클로[3.1.0]헥사닐, 3-아자비사이클로[4.1.0]헵타닐, 3H-인돌릴 및 퀴놀리지닐이 있다. 방향족 헤테로사이클릭 기의 예로는 피리디닐, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피라졸릴, 트리아졸릴, 피라지닐, 테트라졸릴, 푸릴, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 시놀리닐, 인다졸릴, 인돌리지닐, 프탈라지닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 이소인돌릴, 프테리디닐, 푸리닐, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 푸라자닐, 벤조푸라자닐, 벤조티오페닐, 벤조티아졸릴, 벤족사졸릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 나프티리디닐, 및 푸로피리디닐이 있다. 상기 기는 가능할 경우, C 부착형 또는 N 부착형일 수 있다. 예를 들어, 피롤로부터 유도된 기는 피롤-1-일(N 부착형) 또는 피롤-3-일(C 부착형)일 수 있다. 추가로, 이미다졸로부터 유도된 기는 이미다졸-1-일 또는 이미다졸-3-일(둘 모두 N 부착형) 또는 이미다졸-2-일, 이미다졸-4-일 또는 이미다졸-5-일(모두 C 부착형)일 수 있다. 헤테로사이클릭 기는 벤조 융합된 고리 시스템을 포함한다. 비방향족 헤테로사이클, 예컨대, 예컨대, 피롤리딘-2-온은 1 또는 2개의 옥소(=0) 모이어티로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 바, "알케닐"이라는 용어는 2-10개의 탄소를 함유하고, 2개의 수소 제거에 의해 형성된 1개 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 직쇄, 분지쇄, 또는 사이클릭(이 경우, 이는 또한 "사이클로알케닐"로도 알려져 있다) 탄화수소를 의미한다. 일부 실시양태에서, 구조에 따라, 알케닐 기는 모노라디칼 또는 디라디칼(즉, 알케닐렌 기)이다. 일부 실시양태에서, 알케닐 기는 임의적으로 치환된다. 알케닐의 예시적인 예로는 에테닐, 2-프로페닐, 2-메틸-2-프로페닐, 3-부테닐, 4-펜테닐, 5-헥세닐, 2-헵테닐, 2-메틸-1-헵테닐, 및 3-세세닐을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에서 사용되는 바, "알키닐"이라는 용어는 2-10개의 탄소를 함유하고, 4개의 수소 제거에 의해 형성된 1개 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는, 직쇄, 분지쇄, 또는 사이클릭(이 경우, 이는 또한 "사이클로알케닐"로도 알려져 있다) 탄화수소를 의미한다. 일부 실시양태에서, 구조에 따라, 알키닐 기는 모노라디칼 또는 디라디칼(즉, 알키닐렌 기)이다. 일부 실시양태에서, 알키닐 기는 임의적으로 치환된다. 알키닐의 예시적인 예로는 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에서 사용되는 바, "알콕시"라는 용어는 산소 원자를 통해 모체 분자 모이어티에 부착된, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 의미한다. 알콕시의 예시적인 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 2-프로폭시, 부톡시, tert-부톡시, 펜틸옥시, 및 헥실옥시를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에서 사용되는 바, "사이클로알킬"이라는 용어는 오직 탄소와 수소와 함유하고, 포화된, 부분적으로 불포화된, 또는 완전하게 불포화된 것을 포함하는 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 라디칼을 의미한다. 사이클로알킬 기는 3 내지 10개의 고리 원자를 가지는 기를 포함한다. 사이클릭의 대표적인 예로는 하기 모이어티를 포함하나, 이에 한정되지 않는다:
Figure pct00017
. 일부 실시양태에서, 구조에 따라, 사이클로알킬 기는 모노라디칼 또는 디라디칼(예컨대, 사이클로알킬렌 기)이다.
본원에서 사용되는 바, "할로알킬," "할로알케닐," "할로알키닐" 및 "할로알콕시"라는 용어는, 1개 이상의 수소가 할로겐 원자로 치환된, 알킬, 알케닐, 알키닐 및 알콕시 구조를 의미한다. 특정 실시양태에서, 2개 이상의 수소 원자가 할로겐 원자로 치환된 경우, 할로겐 원자는 서로 모두 동일한 것이다. 다른 실시양태에서, 2개 이상의 수소 원자가 할로겐 원자로 치환된 경우, 할로겐 원자는 서로 모두 동일한 것이 아니다. "플루오로알킬" 및 "플루오로 알콕시"라는 용어는 각각 할로가 불소인, 할로알킬 및 할로알콕시 기를 포함한다. 특정 실시양태에서, 할로알킬은 임의적으로 치환된다.
본원에서 사용되는 바, "글루코실"이라는 용어는 글루코실 기가 글루코스 환 상의 임의의 하이드록실 기를 통해 부착되어 있는, D 또는 L형 글루코실 기를 포함한다.
본원에서 사용되는 바, 제제, 조성물 또는 성분과 관련하여 "허용되는"이라는 용어는 치료받는 대상의 일반적인 건강 상태에 대해 지속적으로 유해한 효과를 미치지 않는다는 것을 의미한다.
안트로디아(Antrodia)는 메리필라세아에(Meripilaceae) 과에 속하는 진균 속이다. 안트로디아 종은 외부에 노출된 자실층과 함께 전형적으로는 성장하는 표면 상에서 편평하게 놓여 있거나 또는 퍼져 있는 자실체를 가지며; 가장자리는 좁은 받침대를 형성하도록 접혀질 수 있다. 대부분의 종은 온난한 북쪽 수림대에서 발견되고, 갈색 부패를 야기한다. 이 속에 속하는 종 중 일부는 의학적 특성을 가지며, 대만에서는 전통 의약으로서 사용되어 왔다.
본원에서 사용되는 바, "담체"라는 용어는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 혼입을 용이하게 하는, 상대적으로 비독성인 화학적 화합물 또는 작용제를 의미한다.
본원에서 사용되는 바, "공동 투여"라는 용어 등은 선택되는 치료제를 단일 환자에게 투여하는 것을 포함하는 것을 의미하고, 상기 작용제는 동시에 또는 다른 시점에 동일한 또는 상이한 투여 경로에 의해 투여되는 치료 요법을 포함하는 것으로 한다.
"희석제"라는 용어는 전달하기 전 관심 화합물을 희석하는 데 사용되는 화학적 화합물을 의미한다. 희석제는 또한 보다 안정한 환경을 제공할 수 있기 때문에 화합물을 안정화시키는데에도 사용될 수 있다. 포스페이트 완충처리된 염수 용액을 포함하나, 이에 한정되지 않는, (pH 조절 또는 유지를 제공할 수도 있는) 완충처리된 용액 중에 용해된 염이 당업계에서 희석제로서 사용된다.
본원에서 사용되는 바, "유효량" 또는 "치료학상 유효량"이라는 용어는 치료되는 질환 또는 병증의 증상 중 하나 이상을 어느 정도까지 완화시키는, 투여되는 작용제 또는 화합물의 충분한 양을 의미한다. 결과는 질환의 징후, 증상 또는 원인의 감소 및/또는 경감, 또는 생물 계통의 임의의 다른 원하는 변경일 수 있다. 예를 들어, 치료학적 용도를 위한 "유효량"은 질환 증상을 임상적으로 유의적으로 감소시키는 데 필요한, 본원에 개시된 화합물을 포함하는 조성물의 양이다. 임의의 개별 사례에서 적절한 "유효"량은 예컨대, 용량 단계식 증가 연구와 같은 기법을 사용하여 결정될 수 있다.
본원에서 사용되는 바, "증진시키다" 또는 "증진시키는"이라는 용어는 효능 또는 지속 기간에 있어서 원하는 효과를 증가시키거나 연장시키는 것을 의미한다. 따라서, 치료제의 효과를 증진시키는 것과 관련하여, "증진시키는"이라는 용어는 효능 또는 지속 기간에 있어서 계통에 대한 다른 치료제의 효과를 증가 또는 연장시킬 수 있는 능력을 의미한다. 본원에서 사용되는 바, "증진시키는 유효량"은 원하는 계통에서 또 다른 치료제의 효과를 증진시키기에 적절한 양을 지칭한다.
본원에 개시된 화합물의 "대사산물"은 상기 화합물이 대사되었을 때 형성되는 상기 화합물의 유도체이다. "활성 대사산물"이라는 용어는 상기 화합물이 대사되었을 때 형성되는 상기 화합물의 생물학상 활성인 유도체를 의미한다. 본원에서 사용되는 바, "대사된"이라는 용어는 특정 물질이 유기체에 의하여 변화되는 과정 전체(가수분해 반응 및 효소에 의하여 촉매화되는 반응을 포함하나, 이에 한정되지 않는다)를 의미한다. 따라서, 효소는 화합물에 대한 특이적인 구조 변경을 일으킬 수 있다. 예를 들어, 사이토크롬 P450은 다양한 산화 반응 및 환원 반응을 촉매화시키는 반면, 우리딘 디포스페이트 글루쿠로닐트랜스퍼라제는 활성화된 글루쿠론산 분자가 방향족 알콜, 지방족 알콜, 카복실산, 아민 및 유리 술프히드릴 기로 전달되는 것을 촉매화시킨다. 본원에 개시된 화합물의 대사산물은 임의로 숙주로의 화합물의 투여 및 상기 숙주로부터의 조직 시료의 분석에 의하여 또는 화합물과 간세포의 시험관내 인큐베이션 및 생성된 화합물의 분석에 의하여 확인된다.
본원에서 사용되는 바, "제약 조합물"이라는 용어는 1종 초과의 활성 성분의 혼합 또는 조합으로부터 생성된 생성물을 의미하고, 활성 성분의 고정 조합물 및 비고정 조합물, 둘 모두를 포함한다. "고정 조합물"이라는 용어는 활성 성분, 예컨대, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물) 및 보조 작용제, 둘 모두가 단일 엔티티 또는 투여 형태로 동시에 환자에게 투여되는 것을 의미한다. "비고정 조합물"이라는 용어는 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물) 및 보조 작용제가 구체적인 시간 제한에 대한 개입 없이, 동시에, 동시 발생적으로, 또는 순차적으로 별개의 엔티티로서 환자에게 투여되는 것을 의미하며, 여기서, 상기 투여는 환자의 체내에 두 화합물을 효과적인 수준으로 제공한다. 후자는 또한 칵테일 요법, 예컨대, 3종 이상의 활성 성분의 투여에도 적용된다.
"제약 조성물"이라는 용어는 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)과 다른 화학 성분, 예컨대, 담체, 안정제, 희석제, 분산화제, 현탁화제, 증점화제 및/또는 부형제의 혼합물을 의미한다. 제약 조성물은 유기체로의 상기 화합물의 투여를 용이하게 한다. 정맥내, 경구, 에어로졸, 비경구, 안구, 폐 및 국소 투여를 포함하나, 이에 한정되지 않는, 화합물을 투여하는 기법은 당업계에 다수 존재한다.
"대상" 또는 "환자"라는 용어는 포유동물을 포함한다. 포유동물의 예로는 하기 포유동물 강의 임의의 구성원을 포함하나, 이에 한정되지 않는다: 인간, 비인간 영장류, 예컨대, 침팬지 및 다른 유인원 및 원숭이 종; 농장 동물, 예컨대, 소, 말, 양, 염소, 돼지; 가축, 예컨대, 토끼, 개 및 고양이; 및 설치류, 예컨대, 래트, 마우스 및 기니아 피그 등을 비롯한 실험실용 동물. 한 실시양태에서, 포유동물은 인간이다.
본원에서 사용되는 바, "치료하다," "치료하는," 또는 "치료"라는 용어는 질환 또는 병증의 1종 이상의 증상을 경감시키거나, 완화시키거나, 호전시키는 것, 추가 증상을 예방하는 것, 질환 또는 병증을 억제시키는 것, 예컨대, 질환 또는 병증의 발병을 정지시키는 것, 질환 또는 병증을 완화시키는 것, 질환 또는 병증의 퇴행을 유발하는 것, 질환 또는 병증에 의하여 유발되는 병증을 완화시키는 것 또는 질환 또는 병증의 증상을 예방적으로 및/또는 치료학상 정지시키는 것을 포함한다.
투여 경로
적합한 투여 경로로는 경구, 정맥내, 직장, 에어로졸, 비경구, 안구, 폐, 경점막, 경피, 질, 귀, 비강 및 국소 투여를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 추가로, 단지 일례로, 비경구 전달은 근육내, 피하, 정맥내, 수질내 주사 뿐만 아니라, 경막내, 직접 심실내, 복강내, 림프내 및 비강내 주사를 포함한다.
특정 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 종종 데포(depot) 제제 또는 지속 방출형 제제로 기관 내로 직접 화합물을 주사하는 것을 통해, 전신 방식보다는 국소 방식으로 투여된다. 구체적인 실시양태에서, 장기 지속형 제제는 이식(예를 들어, 피하 또는 근육내로) 또는 근육내 주사에 의하여 투여된다. 추가로, 다른 실시양태에서, 약물은 표적화된 약물 전달 시스템, 예를 들어, 기관 특이적 항체로 코팅된 리포좀으로 전달된다. 상기 실시양태에서, 리포좀은 기관에 의하여 선택적으로 표적화되어 흡수된다. 추가의 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 고속 방출형 제제 형태로, 장기 방출형 제제 형태로 또는 중간 방출형 제제 형태로 제공된다. 추가의 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 국소 투여된다.
일부 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그는 비경구적으로 또는 정맥내로 투여된다. 다른 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그는 주사에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그는 경구적으로 투여된다.
제약 조성물/제제
일부 실시양태에서, 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 포함하는 제약 조성물을 제공한다:
Figure pct00018
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고;
n = 1∼12이다. 일부 실시양태에서, 조성물은 제약상 허용되는 부형제를 추가로 포함한다.
일부 실시양태에서, R은 수소, C(=O)C3H8, C(=O)C2H5, 또는 C(=O)CH3이다. 일부 실시양태에서, R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 또는 옥틸이다. 특정 실시양태에서, R1은 수소 또는 메틸이다. 특정 실시양태에서, R2는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸 또는 헥실이다. 특정 실시양태에서, R3은 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸 또는 헥실이다. 일부 실시양태에서, R4는 할로겐, NH2, NHCH3, N(CH3)2, OCH3, OC2H5, C(=O)CH3, C(=O)C2H5, C(=O)OCH3, C(=O)OC2H5, C(=O)NHCH3, C(=O)NHC2H5, C(=O)NH2, OC(=O)CH3, OC(=O)C2H5, OC(=O)OCH3, OC(=O)OC2H5, OC(=O)NHCH3, OC(=O)NHC2H5, 또는 OC(=O)NH2이다. 특정 실시양태에서, R4는 C2H5C(CH3)2OH, C2H5C(CH3)2OCH3, CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), 5 또는 6원 락톤, 아릴, 또는 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 및 C1-C8 할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된다. 특정 실시양태에서, R4는 CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), 5 또는 6원 락톤, 아릴, 또는 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8 알킬, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 및 C1-C8 할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된다.
특정 실시양태에서, 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
특정 실시양태에서, 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:
Figure pct00022
Figure pct00023
일부 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 제약 조성물로 제제화된다. 구체적인 실시양태에서, 제약 조성물은 활성 화합물을 제약상 사용될 수 있는 제제로 가공시키는 것을 용이하게 하는 부형제 및 보조제를 포함하는 하나 이상의 생리학상 허용되는 담체를 사용하는 종래 방식으로 제제화된다. 적절한 제제는 선택된 투여 경로에 의존한다. 임의의 제약상 허용되는 기법, 담체 및 부형제는 본원에 기술된 제약 조성물을 제제화하는 데 적합한 것으로서 사용된다: 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995)]; [Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975]; [Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980]; 및 [Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkinsl999)].
본원에서는 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물) 및 제약상 허용되는 희석제(들), 부형제(들) 또는 담체(들)를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 특정 실시양태에서, 기술된 화합물은 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)이 병용 요법에서와 같이 다른 활성 성분과 혼합되어 있는 제약 조성물로서 투여된다. 본원에서는 하기 병용 요법 섹션 및 본 개시내용 전역에 기재된 활성 물질의 모든 조합을 포함한다. 구체적인 실시양태에서, 제약 조성물은 하나 이상의 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 포함한다.
본원에서 사용되는 바, 제약 조성물이란 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)과 다른 화학 성분, 예컨대, 담체, 안정제, 희석제, 분산화제, 현탁화제, 증점화제, 및/또는 부형제의 혼합물을 의미한다. 특정 실시양태에서, 상기 제약 조성물은 유기체로의 상기 화합물의 투여를 용이하게 한다. 일부 실시양태에서, 본원에서 제공된 치료 방법 또는 사용 방법을 실시함에 있어서, 치료학상 유효량의 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)이 치료하고자 하는 질환 또는 병증을 앓는 포유동물에게 제약 조성물 형태로 투여된다. 구체적인 실시양태에서, 포유동물은 인간이다. 특정 실시양태에서, 치료학상 유효량은 질환의 중증도, 대상의 연령 및 상대적인 건강 상태, 사용된 화합물의 효능 및 다른 인자에 따라 달라진다. 본원에 기술된 화합물은 단독으로 사용되거나, 또는 혼합물의 성분으로서 하나 이상의 치료제와 함께 조합하여 사용된다.
한 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 수용액으로 제제화된다. 구체적인 실시양태에서, 수용액은 단지 일례로, 생리학상 화합성인 완충제, 예컨대, 행크액, 링거액 및 생리식염수 완충제로부터 선택된다. 다른 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 경점막 투여용으로 제제화된다. 구체적인 실시양태에서, 경점막 제제는 투과되는 장벽에 적합한 투과제를 포함한다. 본원에 기술된 화합물이 다른 비경구 주사용으로 제제화되는 다른 실시양태에서, 적절한 제제는 수성 또는 비수성 용액을 포함한다. 구체적인 실시양태에서, 상기 용액은 생리학상 화합성인 완충제 및/또는 부형제를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 경구 투여용으로 제제화된다. 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 비롯한, 본원에 기술된 화합물은 활성 화합물을 예컨대, 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 조합함으로써 제제화된다. 다양한 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 단지 일례로서, 정제, 분제, 환제, 당의정, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 엘릭시르, 슬러리, 현탁제 등을 포함하는 경구 투여 형태로 제제화된다.
특정 실시양태에서, 경구용 제약 제제는 하나 이상의 고체 부형제를 본원에 기술된 하나 이상의 화합물과 혼합하고, 임의적으로 생성된 혼합물을 분쇄하고, 원하는 경우, 적합한 보조제를 첨가한 후, 과립의 혼합물을 가공하여 정제 또는 당의정 코어를 얻음으로써 수득한다. 적합한 부형제로는 특히 충전제, 예컨대, 락토스, 수크로스, 만닛톨 또는 소르비톨을 비롯한 당; 셀룰로스 제제, 예컨대, 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분, 젤라틴, 트라가칸트 검, 메틸셀룰로스, 미정질 셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 소듐 카복시메틸셀룰로스; 또는 기타, 예컨대, 폴리비닐피롤리돈(PVP 또는 포비돈) 또는 인산칼슘이 있다. 구체적인 실시양태에서, 붕해제는 임의적으로 첨가된다. 붕해제는 단지 일례로, 가교결합된 크로스카멜로스 소듐, 폴리비닐피롤리돈, 아가, 알긴산 또는 그의 염, 예컨대, 알긴산나트륨을 포함한다.
한 실시양태에서, 투여 형태, 예컨대, 당의정 코어 및 정제에 하나 이상의 적합한 코팅이 제공된다. 구체적인 실시양태에서, 농축된 당 용액이 투여 형태를 코팅하는 데 사용된다. 상기 당 용액은 임의적으로 추가 성분, 예컨대, 단지 일례로, 아라비아 검, 활석, 폴리비닐피롤리돈, 카보폴 겔, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티탄, 락커 용액 및 적합한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 함유한다. 염료 및/또는 안료 또한 임의적으로 확인 목적으로 코팅물에 첨가된다. 추가로, 염료 및/또는 안료는 활성 화합물 용량의 상이한 조합의 특징을 규명하는 데 임의적으로 사용된다.
특정 실시양태에서, 치료학상 유효량의, 본원에 기술된 화합물 중 1종 이상은 다른 경구 투여용 형태로 제제화된다. 경구 투여용 형태는 젤라틴으로 제조된 푸쉬 핏(push-fit) 캡슐제 뿐만 아니라, 젤라틴 및 가소화제, 예컨대, 글리세롤 또는 소르비톨로 제조된 실링된 연질 캡슐제를 포함한다. 구체적인 실시양태에서, 푸쉬 핏 캡슐제는 하나 이상의 충전제와 혼합된 활성 성분을 함유한다. 충전제의 단지 일례로, 락토스, 결합제, 예컨대, 전분 및/또는 윤활제, 예컨대, 활석 또는 스테아린산 마그네슘 및 임의적으로 안정제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 연질 캡슐제는 적합한 액체에 용해되거나 현탁된 하나 이상의 활성 화합물을 함유한다. 적합한 액체로는 단지 일례로, 하나 이상의 지방 오일, 액체 파라핀 또는 액체 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 추가로, 안정제가 임의적으로 첨가된다.
다른 실시양태에서, 치료학상 유효량의, 본원에 기술된 화합물 중 1종 이상은 협측 또는 설하 투여용 형태로 제제화된다. 협측 또는 설하 투여용으로 적합한 제제로는 단지 일례로, 정제, 로젠지, 또는 겔제를 포함한다. 추가의 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 볼루스 주사 또는 연속 주입에 적합한 제제를 포함하는 비경구 주사용으로 제제화된다. 구체적인 실시양태에서, 주사용 제제는 단위 투여 형태(예컨대, 앰플로) 또는 다회 투약용 용기 내에 제공된다. 보존제는 임의적으로 주사 제제에 첨가된다. 추가의 다른 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 제약 조성물은 오일성 또는 수성 비히클 중의 멸균 현탁액, 용액 또는 에멀젼으로서 비경구 주사에 적합한 제형으로 제제화된다. 비경구 주사 제제는 임의적으로 제제화제, 예컨대, 현탁화제, 안정화제 및/또는 분산화제를 함유한다. 구체적인 실시양태에서, 비경구 투여용 제약 제제는 수용성 형태로 활성 화합물의 수용액을 포함한다. 추가의 실시양태에서, 활성 화합물의 현탁액은 적절한 오일성 주사 현탁액으로서 제조된다. 본원에 기술된 제약 조성물에서 사용하기에 적합한 친유성 용매 또는 비히클은 단지 일례로 지방 오일, 예컨대, 참깨유 또는 합성 지방산 에스테르, 예컨대, 에틸 올레에이트 또는 트리글리세리드 또는 리포좀을 포함한다. 특정의 구체적인 실시양태에서, 수성 주사 현탁액은 상기 현탁액의 점도를 증가시키는 물질, 예컨대, 소듐 카복시메틸 셀룰로스, 소르비톨 또는 덱스트란을 함유한다. 임의적으로, 상기 현탁액은 화합물의 용해도를 증가시켜 고도로 진한 용액이 제조될 수 있도록 하는 작용제 또는 적합한 안정제를 함유한다. 별법으로, 다른 실시양태에서, 활성 성분은 사용 전 적합한 비히클, 예컨대, 멸균 발열원 무함유 물로 재구성되는 분제 형태로 존재한다.
한 측면에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 본원에 기술되어 있거나, 당업계에 공지되어 있는 바와 같은 비경구 주사용 액제로서 제조되고, 자동 주사기로 투여된다. 자동 주사기, 예컨대, 미국 특허 번호 제4,031,893호, 제5,358,489호; 제5,540,664호; 제5,665,071호, 제5,695,472호 및 WO/2005/087297(상기 특허는 각각 그 개시내용이 본원에서 참조로 포함된다)에 개시되어 있는 것은 공지되어 있다. 일반적으로, 모든 자동 주사기는 주사되는 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 포함하는 용액의 부피를 함유한다. 일반적으로, 자동 주사기는 약물 전달용 바늘과 유체 소통하는 용액 보유용 저장소 뿐만 아니라, 상기 바늘을 자동으로 배치하고, 상기 바늘을 환자에게 삽입하고, 용량을 상기 환자에게 전달하는 기계 장치도 포함한다. 예시적인 주사기는 용액 1 mL당 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물) 약 0.5 ㎎ 내지 50㎎의 농도로 약 0.3 mL, 0.6 mL, 1.0 mL 또는 다른 적합한 부피의 용액을 제공한다. 각각의 주사기는 화합물 1회 용량만을 전달할 수 있다.
추가의 다른 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 국소적으로 투여된다. 본원에 기술된 화합물은 다양한 국소 투여용 조성물, 예컨대, 액제, 현탁제, 로션제, 겔제, 페이스트, 약물처리된 스틱, 밤(balm), 크림제 또는 연고제로 제제화된다. 상기 제약 조성물은 임의적으로 가용화제, 안정제, 긴장성 증진제, 완충제 및 보존제를 함유한다.
추가의 다른 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 경피 투여용으로 제제화된다. 구체적인 실시양태에서, 경피 제제는 경피 전달 장치 및 경피 전달 패치를 사용하고, 중합체 또는 접착제에 용해 및/또는 분산된 친유성 에멀젼 또는 완충처리된 수용액일 수 있다. 다양한 실시양태에서, 상기 패치는 제약 제제의 연속형, 박동형, 또는 맞춤형 전달용으로 구성된다. 추가의 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 경피 전달은 이온영동 패치 등에 의하여 달성된다. 특정 실시양태에서, 경피 패치는 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 조절 방식으로 전달한다. 구체적인 실시양태에서, 속도 조절 막을 사용하거나, 또는 상기 화합물을 중합체 매트릭스 또는 겔내에 포획시켜 흡수 속도를 저속화시킨다. 대체 실시양태에서, 흡수 증진제는 흡수를 증가시키는 데 사용된다. 흡수 증진제 또는 담체는 피부 통과를 보조하는 흡수가능한 제약상 허용되는 용매를 포함한다. 한 실시양태에서, 예를 들어, 경피 장치는 백킹 부재, 임의적으로 담체와 함께 상기 화합물을 함유하는 저장소, 임의적으로 연장된 기간 동안 상기 화합물을 조절 방식의 예정된 속도로 숙주의 피부에 전달하기 위한 속도 조절 장벽 및 상기 장치를 피부에 고정시키기 위한 수단을 포함하는 붕대 형태로 존재한다.
본원에 기술된 경피 제제는 당업계에 기술되어 있는 다양한 장치를 사용하여 투여될 수 있다. 예를 들어, 상기 장치로는 미국 특허 번호 제3,598,122호, 제3,598,123호, 제3,710,795호, 제3,731,683호, 제3,742,951호, 제3,814,097호, 제3,921,636호, 제3,972,995호, 제3,993,072호, 제3,993,073호, 제3,996,934호, 제4,031,894호, 제4,060,084호, 제4,069,307호, 제4,077,407호, 제4,201,211호, 제4,230,105호, 제4,292,299호, 제4,292,303호, 제5,336,168호, 제5,665,378호, 제5,837,280호, 제5,869,090호, 제6,923,983호, 제6,929,801호, 및 제6,946,144호의 것을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 기술된 경피 투여 형태는 당업계에서 통상적인 특정의 제약상 허용되는 부형제를 혼입할 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기술된 경피 제제는 3가지 이상의 성분: (1) 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 제제; (2) 투과 증진제; 및 (3) 수성 애주번트를 포함한다. 추가로, 경피 제제는 추가의 성분, 예컨대, 제한하는 것은 아니지만, 겔화제, 크림제 및 연고 베이스 등을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 경피 제제는 추가로 흡수를 증진시키고, 경피 제제가 피부로부터 제거되는 것을 방지하기 위한 직포 또는 부직포 백킹 물질을 포함한다. 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 경피 제제는 피부로의 확산을 촉진하기 위하여 포화 상태 또는 과포화 상태를 유지한다.
다른 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 흡입에 의한 투여용으로 제제화된다. 흡입에 의한 투여에 적합한 다양한 형태로는 에어로졸, 미스트 또는 분제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 제약 조성물은 적합한 추진제(예컨대, 예컨대, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적합한 가스)의 사용으로 가압식 팩 또는 분무기로부터 에어로졸 분무 제시의 형태로 편리하게 전달된다. 구체적인 실시양태에서, 가압식 에어로졸의 투여 단위는 계량된 양을 전달하기 위한 밸브를 제공함으로써 결정된다. 특정 실시양태에서, 상기 화합물과 적합한 분제 베이스, 예컨대, 락토스 또는 전분의 분제 믹스를 함유하는, 흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한, 예컨대, 단지 일례로, 젤라틴의 캡슐제 및 카트리지가 제제화된다.
비내 제제는 당업계에 공지되어 있고, 예를 들어, 미국 특허 번호 제4,476,116호, 제5,116,817호, 및 제6,391,452호(상기 특허는 각각 본원에서 구체적으로 참조로 포함된다)에 기술되어 있다. 상기 기법 및 당업계에 주지되어 있는 다른 기법에 따라 제조되는, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 포함하는 제제는 벤질 알콜 또는 다른 적합한 보존제, 불화탄소 및/또는 당업계에 공지되어 있는 다른 가용화제 또는 분산화제를 사용하여 염수 중 용액으로서 제조된다. 예를 들어, 문헌 [Ansel, H. C. et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Sixth Ed. (1995)]를 참조할 수 있다. 바람직하게, 상기 조성물 및 제제는 적합한 비독성 제약상 허용되는 성분과 함께 제조된다. 이들 성분은 출전, 예컨대, 당분야의 표준 참조인 문헌 [REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 21st edition, 2005]에서 살펴볼 수 있다. 적합한 담체를 선택하는 것은 원하는 비강 투여 형태, 예컨대, 액제, 현탁제, 연고제 또는 겔제의 정확한 성질에 의하여 크게 좌우된다. 비강 투여 형태는 일반적으로 활성 성분 이외에 다량의 물을 함유한다. 소량의 다른 성분, 예컨대, pH 조절제, 유화제 또는 분산화제, 보존제, 계면활성제, 겔화제 또는 완충화제 및 다른 안정화제 및 가용화제 또한 존재할 수 있다. 바람직하게, 비강 투여 형태는 비강 분비물과 등장성이어야 한다.
흡입에 의한 투여용인 경우, 본원에 기술된 화합물은 에어로졸, 미스트 또는 분제 형태로 존재할 수 있다. 본원에 기술된 제약 조성물은 적합한 추진제, 예컨대, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적합한 가스를 사용하여 가압식 팩 또는 분무기로부터 에어로졸 분무 제시의 형태로 편리하게 전달된다. 가압식 에어로졸의 경우, 투여 단위는 계량된 양을 전달하기 위한 밸브를 제공함으로써 결정될 수 있다. 본원에 기술된 화합물과 적합한 분제 베이스, 예컨대, 락토스 또는 전분의 분제 믹스를 함유하는, 흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한, 예컨대, 단지 일례로, 젤라틴의 캡슐제 및 카트리지가 제제화할 수 있다.
추가의 다른 실시양태에서, 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)은 통상적인 좌제 베이스, 예컨대, 코코아 버터 또는 다른 글리세라이드뿐 아니라, 합성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈, PEG 등을 함유하는 직장용 조성물, 예컨대, 관장제, 직장용 겔제, 직장용 발포체, 직장 에어로졸, 좌제, 젤리 좌제 또는 정체 관장제로 제제화된다. 상기 좌제 형태의 조성물에서, 임의적으로 코코아 버터와 함께 조합된, 저융점 왁스, 예컨대, 제한하는 것은 아니지만, 지방산 글리세라이드의 혼합물이 먼저 용융된다.
특정 실시양태에서, 제약 조성물은 활성 화합물을 제약상 사용될 수 있는 제제로 가공시키는 것을 용이하게 하는 부형제 및 보조제를 포함하는 하나 이상의 생리학상 허용되는 담체를 사용하는 임의의 통상적인 방식으로 제제화된다. 적절한 제제화는 선택된 투여 경로에 의존한다. 임의의 제약상 허용되는 기법, 담체 및 부형제는 임의적으로 적합한 것으로서 당업계에서 이해되어 있는 바와 같이 사용된다. 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 포함하는 제약 조성물은 통상적인 방식, 예컨대, 단지 일례로 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정 제조, 미분화, 유화, 캡슐화, 포획 또는 압착 공정에 의하여 제조될 수 있다.
제약 조성물은 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제 및 활성 성분으로서 본원에 기술된 1종 이상의 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 포함한다. 활성 성분은 유리 산 또는 유리 염기 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태로 존재한다. 추가로, 본원에 기술된 방법 및 제약 조성물은 결정질 형태(이는 또한 다형체로도 공지되어 있다)의 용도 뿐만 아니라, 동일한 유형의 활성을 가지는 이들 화합물들의 활성 대사산물의 용도도 포함한다. 본원에 기술된 화합물의 모든 호변이성질체가 본원에 제시된 화합물의 범주 내에 포함된다. 추가로, 본원에 기술된 화합물은 비용매화 형태 뿐만 아니라. 제약상 허용되는 용매, 예컨대, 물, 에탄올 등과의 용매화된 형태도 포함한다. 본원에서 제시된 화합물의 용매화된 형태 또한 본원에 개시된 것으로 간주된다. 추가로, 제약 조성물은 임의적으로 다른 의약 또는 제약 제제, 담체, 애주번트, 예컨대, 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절용 염, 완충제 및/또는 다른 치료학상 가치있는 물질을 포함한다.
본원에 기술된 화합물을 포함하는 조성물의 제조 방법은 상기 화합물을 하나 이상의 불활성의 제약상 허용되는 부형제 또는 담체와 함께 제제화하여 고체, 반고체 또는 액체를 형성하는 것을 포함한다. 고체 조성물로는 분제, 정제, 분산성 과립제, 캡슐제, 카세제 및 좌제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 액체 조성물은 화합물이 용해되어 있는 용액, 화합물을 포함하는 에멀젼 또는 본원에 개시된 화합물을 포함하는 리포좀, 미셀 또는 나노입자를 함유하는 용액을 포함한다. 반고체 조성물로는 겔제, 현탁제 및 크림제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본원에 기술된 제약 조성물의 형태는 액체 용액 또는 현탁액, 사용 전 액체 중의 용액 또는 현탁액으로 적합한 고체 형태, 또는 에멀젼을 포함한다. 이들 조성물은 또한 임의적으로 소량의 비독성 보조 물질, 예컨대, 습윤제 또는 유화제, pH 완충화제 등도 함유한다.
일부 실시양태에서, 적어도 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)을 포함하는 제약 조성물은 예시적으로 액체 형태를 취하며, 여기서, 작용제는 액제, 현탁제 또는 이들 둘 모두로 존재한다. 전형적으로, 상기 조성물이 액제 또는 현탁제로서 투여되는 경우, 작용제의 제1부는 용액에 존재하고, 작용제의 제2부분은 액체 매트릭스 중의 현탁제에 미립자 형태로 존재한다. 일부 실시양태에서, 액체 조성물은 겔 제제를 포함한다. 다른 실시양태에서, 액체 조성물은 수성 액체 조성물이다.
특정 실시양태에서, 제약 수성 현탁액은 현탁화제로서 하나 이상의 중합체를 포함한다. 중합체로는 수용성 중합체, 예컨대, 셀룰로스 중합체, 예컨대, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 및 수불용성 중합체, 예컨대, 가교결합된 카복실 함유 중합체를 포함한다. 본원에 기술된 특정 제약 조성물은 예를 들어, 카복시메틸셀룰로스, 카보머 (아크릴산 중합체), 폴리(메틸메타크릴레이트), 폴리아크릴아미드, 폴리카보필, 아크릴산/부틸 아크릴레이트 공중합체, 알긴산나트륨 및 덱스트란으로부터 선택되는 점막접착성 중합체를 포함한다.
제약 조성물은 또한 임의적으로 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 용해를 돕는 가용화제도 포함한다. "가용화제"라는 용어는 일반적으로 작용제의 미셀 용액 또는 참용액을 형성하는 작용제를 포함한다. 특정 허용되는 비이온성 계면활성제, 예를 들어, 폴리소르베이트 80은 안과용으로 허용되는 글리콜, 폴리글리콜, 예컨대, 폴리에틸렌 글리콜 400 및 글리콜 에테르와 같이, 가용화제로서 유용하다.
추가로, 제약 조성물은 임의적으로 임의적으로 산, 예컨대, 아세트산, 붕산, 시트르산, 락트산, 인산 및 염산; 염기, 예컨대, 수산화나트륨, 인산나트륨, 붕산나트륨, 시트르산나트륨, 아세트산나트륨, 락트산나트륨 및 트리스 하이드록시메틸아미노메탄; 및 완충제, 예컨대, 시트레이트/덱스트로스, 중탄산나트륨 및 염화암모늄을 비롯한, 하나 이상의 pH 조절제 또는 완충화제를 포함한다. 상기 산, 염기 및 완충제는 조성물의 pH를 허용되는 범위 내로 유지시키는 데 요구되는 양으로 포함된다.
추가로, 제약 조성물은 임의적으로 조성물의 몰랄삼투압농도를 허용되는 범위 내에서 유지되도록 하는 데 요구되는 양으로 하나 이상의 염을 포함한다. 상기 염은 나트륨, 칼륨 또는 암모늄 양이온 및 클로라이드, 시트레이트, 아스코르베이트, 보레?, 포스페이트, 비카보네이트, 술페이트, 티오술페이트 또는 비술파이트 음이온을 가지는 염을 포함하고; 적합한 염으로는 염화나트륨, 염화칼륨, 소듐 티오술페이트, 아황산수소나트륨 및 황산암모늄을 포함한다.
다른 제약 조성물은 임의적으로 미생물 활성을 억제시키기 위하여 하나 이상의 보존제를 포함한다. 적합한 보존제는 수은 함유 물질, 예컨대, 메르펜 및 티오메르살; 안정화된 이산화염소; 및 4차 암모늄 화합물, 예컨대, 벤즈알코늄 클로라이드, 세틸트리메틸암모늄 브로마이드 및 세틸피리디늄 클로라이드를 포함한다.
추가의 다른 제약 조성물은 물리적 안정성을 증진시키기 위하여 또는 다른 목적으로 하나 이상의 계면활성제를 포함한다. 적합한 비이온성 계면활성제로는 폴리옥시에틸렌 지방산 글리세리드 및 식물성 오일, 예컨대, 폴리옥시에틸렌(60) 수소화 피마자유; 및 폴리옥시에틸렌 알킬에테르 및 알킬페닐 에테르, 예컨대, 옥톡시놀 10, 옥톡시놀 40을 포함한다.
추가의 다른 제약 조성물은 필요할 경우, 화학 안정성을 증진시키기 위하여 하나 이상의 항산화제를 포함할 수 있다. 적합한 항산화제로는 단지 일례로 아스코르브산 및 소듐 메타비술파이트를 포함한다.
특정 실시양태에서, 제약 수성 현탁액 조성물은 단일 용량의 재밀폐가 불가능한 용기내에 포장된다. 별법으로, 다회 용량의 재밀폐가 가능한 용기가 사용되며, 이러한 경우, 전형적으로는 상기 조성물에 보존제를 포함한다.
대체 실시양태에서, 소수성 제약 화합물을 위한 다른 전달 시스템이 사용된다. 리포좀 및 에멀젼이 본원에서 전달 비히클 또는 담체의 예이다. 특정 실시양태에서, 유기 용매, 예컨대, N-메틸피롤리돈 또한 사용된다. 추가의 실시양태에서, 본원에 기술된 화합물은 지속 방출형 시스템, 예컨대, 치료제를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스의 사용을 통해 전달된다. 다양한 지속 방출형 물질이 본원에서 유용하다. 일부 실시양태에서, 지속 방출형 캡슐제는 수시간 내지 최대 24시간 동안 화합물을 방출시킨다. 치료제의 화학적 성질 및 생물학적 안정성에 따라 단백질 안정화를 위한 추가 전략법이 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본원에 기술된 제제는 하나 이상의 항산화제, 금속 킬레이팅제, 티올 함유 화합물 및/또는 다른 일반 안정화제를 포함한다. 상기 안전화제의 예로는 (a) 약 0.5% w/v 내지 약 2% w/v 글리세롤, (b) 약 0.1% w/v 내지 약 1% w/v 메티오닌, (c) 약 0.1% w/v 내지 약 2% w/v 모노티오글리세롤, (d) 약 1 mM 내지 약 10 mM EDTA, (e) 약 0.01% w/v 내지 약 2% w/v 아스코르브산, (f) 0.003% w/v 내지 약 0.02% w/v 폴리소르베이트 80, (g) 0.001% w/v 내지 약 0.05% w/v 폴리소르베이트 20, (h) 아르기닌, (i) 헤파린, j) 덱스트란 술페이트, (k) 사이클로덱스트린, (l) 펜토산 폴리술페이트 및 다른 헤파리노이드, (m) 2가 양이온, 예컨대, 마그네슘 및 아연; 또는 (n) 그의 조합물을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
병용 치료법
일반적으로, 병용 요법이 사용되는 실시양태에서, 본원에 기술된 조성물 및 다른 작용제는 같은 제약 조성물로 투여될 필요는 없고, 일부 실시양태에서, 이들은 물리적 및 화학적 특징이 상이하기 때문에, 다른 경로에 의해 투여된다. 일부 실시양태에서, 최초 투여는 확립된 프로토콜에 따라 수행되고, 이어서, 관찰되는 효과에 기초하여, 투여량, 투여 모드 및 투여 시간은 숙련된 임상의에 의해 변형된다.
일부 실시양태에서, 치료학상 유효 투여량은 약물이 치료 병용법으로 사용될 때, 달라진다. 병용 치료법은 추가로 환자의 임상 관리를 돕기 위해 다양한 시점에 개시 및 중단되는 주기적인 치료법을 포함한다. 본원에 기술된 병용 요법을 위해, 공동으로 투여되는 화합물의 투여량은 사용되는 공동 약물의 유형, 사용되는 구체적인 약물, 치료되는 질환, 장애, 또는 병증 등에 따라 달라진다.
일부 실시양태에서, 완화시키고자 하는 병증(들)을 치료, 예방, 또는 호전시키는 투여량 요법은 다양한 인자에 따라 변형된다는 것을 이해하여야 한다. 이러한 인자로는 대상이 앓고 있는 장애 뿐만 아니라, 대상의 연령, 체중, 성별, 섭식 및 의학적 상태에 따라 변형된다. 따라서, 다른 실시양태에서, 실제로 사용되는 투여량 요법은 광범위하게 달라지고, 그러므로, 본원에 기술된 투여량 요법으로부터 벗어날 수 있다.
죽상동맥경화증 치료에 적합한 다른 작용제와의 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 조합물을 포함하는 것으로 한다. 일부 실시양태에서, 죽상동맥경화증 치료에 적합한 작용제의 예로는 하기 스타틴, 예컨대, 아토르바스타틴, 플루바스타틴, 로바스타틴, 피타바스타틴, 프라바스타틴, 로수바스타틴, 심바스타틴, 그의 조합물 등; 감광제, 예컨대, 모텍사핀 루테튬; MK-0524A(니아신 ER 및 라로피프란트); 항산화제, 예컨대, AC3056; 항염증제, 예컨대, 스테로이드, 비스테로이드성 항염증성 약물, 예컨대, 아스피린, 이부프로펜, 및 나프록센 또는 다른 COX-2 억제제 등; ACAT 억제제, 예컨대, 팩티마이브(Pactimibe) 등; 간 X 수용체 효능제, 예컨대, 머크(Merck) T0901317 등; 또는 상기 화합물의 임의의 유도체 관련 작용제를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
일부 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물 및 본원에 기술된 죽상동맥경화증 치료용으로 적합한 다른 작용제로 이루어진 병용법은 다른 작용제를 이용하는 추가의 요법 및 치료 요법을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 추가의 요법 및 치료 요법은 죽상동맥경화증 치료를 위한 또 다른 작용제를 포함할 수 있다. 별법으로, 다른 실시양태에서, 추가의 요법 및 치료 요법은 죽상동맥경화증과 관련된 부속 병증, 또는 병용 요법에서 상기 작용제로부터의 부작용을 치료하는 데 사용되는 다른 작용제를 포함한다. 추가의 실시양태에서, 애주번트 또는 증진제는 본원에 기술된 병용 요법과 함께 투여된다.
다른 LDL 콜레스테롤 저하제(식이 보충제, 예컨대, 식물성 스테롤, 또는 치료제, 예컨대, 스타틴, 에제티미브, 니아신, 클로피브레이트 등)와의 화합물(즉, 본원에 기술된 사이클로헥세논 화합물)의 조합물을 포함하는 것으로 한다. 일부 실시양태에서, LDL 콜레스테롤 저하제의 예로는 스타틴을 포함한다. 일부 실시양태에서, 사이클로헥세논 화합물과, 본원에 기술된 다른 LDL 콜레스테롤 저하제의 병용법은 다른 작용제를 이용하는 추가의 요법 및 치료 요법을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 추가의 요법 및 치료 요법은 LDL 콜레스테롤을 저하시키는 또 다른 요법을 포함할 수 있다. 별법으로, 다른 실시양태에서, 추가의 요법 및 치료 요법은 LDL 콜레스테롤 관련 질환 또는 병증과 관련된 부속 병증, 또는 병용 요법에서 상기 작용제로부터의 부작용을 치료하는 데 사용되는 다른 작용제를 포함한다. 추가의 실시양태에서, 애주번트 또는 증진제는 본원에 기술된 병용 요법과 함께 투여된다.
일부 실시양태에서, 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그; 및 하나 이상의 LDL 콜레스테롤 저하제를 포함하는, 죽상동맥경화증 치료용 조성물을 제공한다:
Figure pct00024
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고; n = 1∼12이다.
일부 실시양태에서, 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그; 및 하나 이상의 스타틴을 포함하는, 죽상동맥경화증 치료용 조성물을 제공한다:
Figure pct00025
상기 식에서,
X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
m = 1∼12이고; n = 1∼12이다.
실시예
실시예 1. 예시적인 사이클로헥세논 화합물 제조
안트로디아 캄포라타로부터의 100 g의 균사체, 자실체 또는 그 둘 모두의 혼합물을 플라스크에 넣었다. 적절한 양의 물 및 알콜(70-100% 알콜 용액)을 플라스크에 첨가하고, 20-25℃에서 1시간 이상 동안 교반하였다. 용액을 필터 및 0.45 ㎛ 막을 통해 여과시키고, 여액을 추출물로서 수집하였다.
안트로디아 캄포라타의 여액에 대하여 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC: High Performance Liquid chromatography) 분석을 수행하였다. RP18 칼럼 상에서 분리를 수행하였고, 이동상은 메탄올(A) 및 0.3% 아세트산(B)으로 구성되었으며, 구배 조건은 95% - 20% B에서 0-10 min, 20%-10% B 10-20 min, 10%-10% B에서 20-35 min, 10%-95% B에서 35-40 min, 유속 1 ml/min이었다. UV-가시광선 검출기를 이용하여 칼럼 용출액을 모니터링하였다.
21.2 내지 21.4 min에 수집되는 분획을 수집하고, 농축시켜 연황색 액체 생성물인 화합물 5를 수득하였다. 화합물 5를 분석한 결과, 분자량이 408(분자식: C24H40O5)인 4-하이드록시-5-(11-하이드록시-3,7,11-트리메틸도데카-2,6-디에닐)-2,3-디메톡시-6-메틸사이클로헥스-2-에논인 것으로 밝혀졌다.
Figure pct00026
Figure pct00027
화합물 5: 4-하이드록시-5-(11-하이드록시-3,7,11-트리메틸도데카-2,6-디에닐)-2,3-디메톡시-6-메틸사이클로헥스-2-에논.
23.7 내지 24.0 min에 수집되는 분획을 수집하고, 농축시켜 연황색 액체 생성물인 화합물 7을 수득하였다. 화합물 7을 분석한 결과, 분자량이 422(분자식: C25H425)인 4-하이드록시-2,3-디메톡시-5-(11-메톡시-3,7,11-트리메틸도데카-2,6-디에닐)-6-메틸사이클로헥스-2-에논인 것으로 밝혀졌다.
Figure pct00028
Figure pct00029
.
화합물 7: 4-하이드록시-2,3-디메톡시-5-(11-메톡시-3,7,11-트리메틸도데카-2,6-디에닐)-6-메틸사이클로헥스-2-에논.
25 내지 30 min에 수집되는 분획을 수집하고, 농축시켜 연황갈색 액체 생성물인 4-하이드록시-2,3-디메톡시-6-메틸-5-(3,7,11-트리메틸도데카-2,6,10-트리에닐)사이클로헥스-2-에논(화합물 1)을 수득하였다. 화합물 1을 분석한 결과, 분자식은 C24H38O4이고, 분자량은 390이고, 융점은 48 내지 52℃인 것으로 밝혀졌다. NMR 스펙트럼은 하기와 같이 나타났다:
Figure pct00030
Figure pct00031
.
화합물 1: 4-하이드록시-2,3-디메톡시-6-메틸-5-(3,7,11-트리메틸도데카-2,6,10-트리에닐)사이클로헥스-2-에논.
동물 연구에서 화합물 1을 공급받은 래트의 뇨 시료로부터 화합물 1의 대사산물인 화합물 6을 수득하였다. 화합물 6은 분자량이 312(C16H24O6)인 4-하이드록시-2,3-디메톡시-6-메틸-5-(3-메틸-2-헥센산)사이클로헥스-2-에논인 것으로 확인되었다. 3,4-디하이드록시-2-메톡시-6-메틸-5-(3,7,11-트리메틸도데카-2,6,10-트리에닐)사이클로헥스-2-에논(분자량 376, C23H36O4)인 것으로 확인된 화합물 4는 화합물 1을 6시간 동안 40℃ 초과인 조건하에서 두었을 때 수득되었다.
Figure pct00032
.
별법으로, 예시적인 화합물은 4-하이드록시-2,3-디메톡시-6-메틸사이클로헥사-2,5-디에논 등으로부터 제조할 수 있다.
유사하게, 하기 구조를 가지는 다른 사이클로헥세논 화합물은 안트로디아 캄포라타로부터 단리되거나, 또는 적합한 출발 물질로부터 합성적으로 또는 반합성적으로 제조된다:
Figure pct00033
.
당업계의 숙련가는 상기와 같은 합성을 위해 적절한 조건을 쉽게 이용할 수 있을 것이다.
실시예 2. 래트 평활근 세포 모델
물질 및 방법
A7r5 세포주(래트 대동맥 평활근 세포)를 바이오리소스 컬렉션 앤드 리서치 센터(Bioresource Collection and Research Center: 대만)로부터 구입하였다.
Figure pct00034
2.1 MTT 검정법
세포 증식, 생존가능한 세포 비율(%), 및 세포독성을 측정하는 데에는 보통 MTT 검정법이 사용된다. MTT(3-[4,5-디메틸티아졸-2-일]2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드)는 살아있는 세포에 의해 흡수될 수 있고, 미토콘드리아에서 숙시네이트 테트라졸륨 리덕타제에 의해 자줏빛을 띤 청색으로 환원될 수 있는 황색 염료이다. 따라서, 포르마잔 형성은 세포의 생존율을 평가하고, 측정하는 데 사용될 수 있다. 가용화 용액(일반적으로 디메틸 술폭시드, 산성화된 에탄올 용액, 또는 희석된 염산 중 계면활성제 소듐 도데실 술페이트 용액)을 첨가하여 불용성 보라색 포르마잔 생성물을 용해시켜 착색 용액을 얻는다. 분광광도계에 의해 특정 파장(일반적으로 500 내지 600 nm)에서 측정하여 상기 착색 용액의 흡광도를 정량화할 수 있다. 생존 세포가 많을수록, 흡광도는 더 높다.
세포 생존율(%) = 실험군의 OD 값/대조군의 OD 값 x 100%.
절차
1. 세포 부착: 2 X 104개의 세포/ml/웰로 A7r5 세포를 24 웰 플레이트 상에 시딩하고, 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시켰다.
2. 투약: 500 ul/웰로 상이한 농도의 화합물 1을 1% FBS/DMEM을 함유하는 배양 배지 중에서 20시간 동안 전처리하였다. DMEM을 제거하고, 1% FBS/DMEM 중 PDGF를 첨가하고, 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시켰다.
3. MTT 검정법: 이어서, 암실 환경에서 플레이트의 각 웰에 50 ul/웰로 5 mg/ml MTT를 첨가하고, 3시간 동안 반응시켰다. 각 반응 혼합물을 500 ul/웰 DMSO에 첨가하고, 5분 동안 진동시켰다. ELISA 판독기에 의해 570 nm 파장에서의 흡광도에 기초하여 세포 생존율을 계산하였다.
2.2 락테이트 데하이드로게나제 ( LDH : Lactate Dehydrogenase ) 활성 검정법
세포는 다수의 락테이트 데하이드로게나제(LDH)를 가진다. 세포가 건강할 때에는 LDH가 세포막을 자유롭게 횡단하지 못한다. 그러나, 세포가 신속하게 팽윤되고, 그의 생리학적 기전을 중단하는 아포프토시스 또는 괴사로부터 유발되는 막 완전성 손실 이후에 LDH는 주변 배지로 방출된다. 배양 배지 중 LDH 활성은 사멸 세포의 개수에 정비례한다. 492 nm 파장에서 비색 방법을 사용함으로써 흡광도를 검출하기 위해 세포 생존능을 정량적으로 측정할 수 있다. 흡광도 값의 변화는 LDH가 락테이트를, NADH를 부수적으로 생산하면서 피루베이트로 전환시키는 것을 촉매화시킨다는 사실에 기인한다. 디아포라아제 및 테트라졸륨 염 INT의 존재하에서 NADH는 적색 포르마잔 생성물의 디아포라아제 촉매화된 생산을 구동시키는 데 사용된다. 본 실시예에서는 세포독성 검정용 키트(프로메가(Promega))를 사용하여 배양 배지 LDH 정량화 검정법을 수행하였다.
절차
1. 세포 부착: 2 X 104개의 세포/ml/웰로 A7r5 세포를 24 웰 플레이트 상에 시딩하고, 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시켰다.
2. 투약: 500 ul/웰로 상이한 농도의 화합물 1을 10% FBS/DMEM을 함유하는 배양 배지 중에서 제제화하고, 24시간 동안 인큐베이션시켰다. 각 웰의 배양 배지를 400 X g로 5분 동안 원심분리하고, 상청액(50 ㎕)을 또 다른 96 웰 플레이트로 옮겨 놓았다.
3. LDH 검정법: 50 ㎕의 기질 혼합 용액을 첨가하고, 암실하에 실온에서 30 min 동안 반응시켰다. 50 ㎕의 정지액을 첨가하여 반응을 종결시켰다. 490 nm 파장에서 ELISA 판독기에 의해 흡광도를 측정하였다.
2.3 상처 소양 검사( Wound scratching test )
절차
1. 세포 부착: A7r5 세포(5 X 106개의 세포/ml)를 6 웰 세포 배양 플레이트 상에 시딩하고, 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션시켰다.
2. 1 X PBS를 사용하여 웰을 2회에 걸쳐 세척하였다. 1% FBS를 함유하는 DMEM 배양 배지 중 상이한 농도의 화합물 1을 첨가하고, 20시간 동안 전처리하였다.
3. 멸균 200 ㎕ 피펫 팁에 의해 십자형 무세포 공간을 형성하고, 1 X PBS로 2회에 걸쳐 세척하였다.
4. PBS를 제거한 후, 1% FBS를 함유하는 DMEM 배양 배지 중 2 ml PDGF를 첨가하였다. PDGF 첨가 시점으로부터 각각 0, 6, 12 및 24시간째에 현미경에 의해 세포를 영상 촬영하였다.
실시예 3. 래트 죽상동맥경화증 모델
3.1 경동맥 결찰 모델
동맥은 혈액을 심장으로부터 멀리까지 운반하는 혈관이다. 경동맥은 혈액을 두부, 경부 및 뇌로 공급하는 혈관이다. 한 경동맥이 경부 양측에 위치한다. 우측 총경동맥은 완두 동맥으로부터 분기되어 경부 우측으로까지 뻗어있다. 좌측 총경동맥은 대동맥으로부터 분기되어 경부 좌측으로까지 뻗어있다. 각 경동맥은 갑상샘 상단 인근의 내부 및 외부 혈관으로 분기된다. (Hsing-Chun Chung)에 의한 연구에 따라(문헌 [Dissertation, 2008, Southern Taiwan University]), 신생내막 비후화를 유도하기 위해 마우스의 좌측 총경동맥에 대한 경동맥 결찰을 수행하였다.
본 실험에서는 체중이 약 25 g인 8주령된 C57BL/6J 수컷 마우스를 사용하였으며, 이는 국립 실험 동물 센터(National Laboratory Animal Center)로부터 구입하였다. 상기 마우스를 냉방 장치가 장착된 실내(18-26℃, 30%-70% 습도)에서 12시간 암기/12시간 명기 주기로 국방의학원의 실험 동물 센터(Laboratory Animal center of National Defense Medical Center)에서 유지시켰다.
1. 수술 3일 전 동물에게 위관 영양법에 의해 화합물 1을 제공하고, 28일 동안 위관 영양법에 의해 화합물 1을 계속해서 공급하였다.
2. 8주령된(C57BL/6J)(B6) 수컷 마우스를 펜토바르비탈(50 mg/kg (체중))로 마취시켰다. 경분기점 바로 옆 인근 부위에서 좌측 총경동맥을 6번 견봉합사에 의해 2회에 걸쳐 결찰시켰다.
3. 봉합 후, 동물에게 화합물 1을 제공하였다. 각 군당 8-10마리의 마우스를 희생시켰다. 경동맥 조직 및 혈액으로부터 시료를 수집하고, 처리군과 대조군의 비교 분석을 포함하는 추가 분석시까지 적절히 보관하였다.
3.2 래트 죽상동맥경화증 모델- ApoE 넉아웃 마우스
Apo KO 마우스를 잭슨 라보라토리(Jackson Laboratory)로부터 구입하고, 국립 실험 동물 센터에서 유지시켰다. 본 실험은 국방의학원의 실험 동물 센터에서 수행하였다. 8주령된 ApoE KO 마우스에게 오픈소스(OpenSource) 식이(40% 지방, 0.5% 콜레스테롤)를 공급하기 3일 전 예방적 약제 처치를 제공하고, 희생시킬 때까지 위관 영양법에 의해 계속해서 공급하였다. 실험하는 동안 혈청을 볼로부터 수집하고, 콜레스테롤, C 반응성 단백질(CRP) 및 혈청 중 ROS 함량 수준을 측정하였다.
실시예 4. 콜레스테롤 검정용 키트에 의한 혈청 콜레스테롤 측정
표준화된 콜레스테롤 시료 제조
Figure pct00035
절차
1. 50 ㎕의 희석된 콜레스테롤 표준 또는 50 ㎕의 적절하게 희석된 혈청을 첨가하였다.
2. 50 ㎕의 새로 제조된 하기 검정용 칵테일을 제조하였다:
a. 4,745 ㎕의 검정용 완충제
b. 150 ㎕의 콜레스테롤 검출기
c. 50 ㎕의 HRP
d. 50 ㎕의 콜레스테롤 옥시다제
e. 5 ㎕의 콜레스테롤 에스테라제
3. 암실하에 37℃에서 30 min 동안 인큐베이션시켰다.
4. 형광 검출기(여기: OD 530-580 nm; 방출: 585-595 nm)에 의해 형광을 측정하였다.
실시예 5: 효소 결합 면역흡착 검정법( ELISA : Enzyme - linked immunosorbent assay)에 의한 C 반응성 단백질 분석
먼저, 200 ㎕/웰의 차단용 완충제를 96 웰 ELISA 플레이트에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 100 ㎕/웰의 희석된 혈청 시료를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 인큐베이션시켰다. 이어서, 100 ㎕/웰의 검출용 항체를 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. 상기 언급된 각 인큐베이션 단계 종결시마다 웰을 400 ㎕/웰의 0.05PBS-T(세척용 완충제)로 6회에 걸쳐 세척하였다. 마지막으로, 100 ㎕/웰의 테트라메틸벤지딘(TMB)을 첨가하고, 암실에서 15분 동안 인큐베이션시키고, 50 ㎕의 정지액을 첨가하여 인큐베이션을 종결시켰다. 450 nm 파장에서 ELISA 판독기에 의해 각 웰의 흡광도를 판독하였다.
실시예 6: 조직형태
살아있는 동물로부터 절개된 조직을 즉시 10% 포르말린 용액에서 약 24시간 동안 고정시킨 후, 자동 조직 프로세서(티슈-프로세서(Tissue-processor: 일본))를 이용하여 탈수시켰다. 분산용 콘솔(티슈-테크(Tissue-Tek: 미국))에 의해 시료를 완전하게 용융된 파라핀에 포매시키는 단계를 수행하였다. 이어서, 시료를 4℃에서 15분 동안 냉각시켜 고형화시켰다. 파라핀 블록을 5 ㎛ 두께로 단일 세포층으로 절편화하였다. 파라핀 절편을 온수 수조에 놓고, 파라핀 절편을 꺼내어 유리 슬라이드에 플레이팅하였다. 슬라이드를 오븐하에 75℃에서 30분 동안 구워 파라핀을 용융시켰다. 파라핀을 제거하기 위해 슬라이드를 크실렌에 10분 동안 놓고, 이어서, 100% 에탄올 중에서 10분 동안 침지시켰다. 이어서, 슬라이드를 95%, 85%, 및 70% 에탄올 중에 10초 동안 놓고, 이어서, 흐르는 물에서 5분 동안 세정하여 재수화 단계를 수행하였다. 슬라이스를 헤마톡실린 용액(서기패스 컴퍼니(Surgipath Co.: 미국)) 중에 2시간 동안 침지시키고, 흐르는 물에서 1분 동안 세척한 후, 이어서, 산성 알콜(1 ℓ 70% 에탄올 중 1 ml의 진한 HCl) 중에서 1초 동안 침지시켰다. 슬라이드를 암모니아 용액 중에 1초 동안 딥핑한 후, 물로 10분 동안 세척하였다. 슬라이드를 에오신 용액 중에서 90초 동안 인큐베이션시키고, 70%, 80%, 90% 및 100% 에탄올을 통해 탈수시킨 후, 대기 건조시켰다. 조직 봉입제(히스토마운트 컴퍼니(Histomount Co.: 미국))를 이용하여 슬라이드를 봉입하였다. 결찰로 손상된 마우스 경동맥의 중막 및 신생내막 비후를 광학 현미경으로 검사하였다.
실시예 7: 혈관 평가
물질
하기 물질을 사용하였다.
1. 올림푸스(Olympus) 도립 위상차 현미경
2. CDF 480 영상화 포착 시스템
3. 메타 이미징 시리즈 5.0(Meta Imaging series 5.0).
결찰 후 마우스 혈관 구역의 측정 결과는 도 1에 제시되어 있다. EEL= 외탄력막(external elastic lamina); IEL = 내탄력막(internal elastic lamina); 중막 구역= EEL로 정의되는 구역 - IEL로 정의되는 구역; 신생내막 구역 = IEL로 정의되는 구역 - 내강 구역; N/M 비 = 신생내막 구역/중막 구역.
실시예 8: 데이터 평가 및 통계학적 분석
실험 데이터를 평균 ± S.E.로 제시하였다. N은 각 군의 동물의 마리수를 나타낸다. 크루스칼-윌리스(Kruskal-Wallis) 검정으로 데이터를 분석하였다. ANOVA에 의해 다요인 및 다중 군 데이터를 분석하였다. 모든 통계학적 분석에서는 SPSS 12.0(SPSS 인크. 시카고, III(SPSS Inc., Chicago, III))이 사용되었다. P 값 <0.05인 것이 통계학상 유의적인 것으로 간주되었다.
결과
8.1 화합물 1 은 평활근 세포에 대하여 어떤 세포독성도 보이지 않았다
평활근 세포에 대한 화합물 1의 잠재적인 세포독성을 테스트하였다. 상이한 농도(0 ㎍/ml-3 ㎍/ml 범위)의 화합물 1을 개별적으로 A7r5 세포 배양물에 첨가하고, 24시간 동안 인큐베이션시켜 세포 생존율 및 세포독성을 검사하였다. 도 2a/2b에 제시되어 있는 바와 같이, MTT 검정법(도 2a) 및 LDH 검정법(도 2b)을 통해 상이한 농도의 화합물 1이 평활근 세포(A7r5)에 미치는 세포독성 효과를 측정하였다. 상기 결과, 세포 정제는 약물 처리에 의해 어떤 영향도 받지 않았고, 어떤 세포독성도 관찰되지 않은 것으로 나타났다.
8.2 적절한 농도의 화합물 1 은 PDGF 자극된 평활근 세포 증식을 효과적으로 억제시켰다
화합물 1이 평활근 세포(A7r5 세포) 증식에 미치는 효과를 조사하였다. 상이한 농도(0.01 ㎍/ml-3 ㎍/ml 범위)의 화합물 1을 A7r5 세포 배양물에 첨가하였다. 20시간 동안 인큐베이션시킨 후, 혈소판 유래 성장 인자(PDGF: platelet-derived growth factor)를 첨가하고, 24시간 동안 인큐베이션시켜 평활근 세포 증식을 자극시켰다. MTT 검정법 및 상처 소양 검사에 의해 약물이 평활근 세포 증식에 미치는 효과를 관찰하였다.
MTT 검정법 결과, 화합물 1이 PDGF 자극된 평활근 세포 증식을 유의적으로 억제시킨 것으로 나타났다. 도 3에 제시되어 있는 바와 같이, 24시간 동안 PDGF와의 인큐베이션 후, 평활근 세포 증식이 화합물 1(3 ㎍/ml)의 처리군에서 약 50%만큼 효과적으로 감소되었다는 것이 MTT 검정법 결과를 통해 입증되었다.
8.3 적절한 농도의 화합물 1 은 PDGF 자극된 평활근 세포 이동을 효과적으로 억제시켰다
PDGF 자극된 세포의 이동 거리를 측정함으로써 상처 소양 검사에서 화합물 1의 평활근 세포(A7r5 세포) 이동 억제에 대해 조사하였다. 화합물 1 처리를 하지 않은 PDGF 자극된 세포 배양물을 양성 대조군으로 사용하였다. 상기 결과, PDGF에 의해 유도된 평활근 세포 이동은 화합물 1에 의해 용량에 의존하는 방식으로 억제된 것으로 나타났다. 도 4에 제시된 바와 같이, 화합물 1(3 ㎍/ml)로 처리한 결과, 평활근 세포 이동이 약 50% 감소한 것으로 나타났다.
8.4 화합물 1은 경동맥이 결찰된 마우스에서 신생내막 형성을 감소시켰다
수술 3일 전, 마우스에게 위관 영양법으로 화합물 1(60 mg/kg (체중))을 제공한 후, 경동맥 결찰에 의해 신생내막 비후화를 유도하였다. 화합물 1이 신생내막 형성에 미치는 효과를 연구하기 위해 마우스를 28일 동안 계속 처리하였다. 경동맥 결찰의 효과를 연구하기 위해서, 헤마톡실린 및 에오신 염색을 수행하여 결찰 후 경동맥의 중막 구역 및 신생내막 구역의 비후화를 조사하였고, 이는 각각 도 5 및 도 6에 제시된 바와 같았다. 내강 구역, 신생내막 구역, 중막 구역 및 신생내막/중막 비(N/M 비: Neointima/media ratio)에 기초하여 처리 효능을 평가하였다. 도 7에 제시된 바와 같이, 대조군에서 평균 N/M 비는 3.0보다 높았다. 그러나, 화합물 1로 처리된 마우스에서의 평균 N/M 비는 1.0으로 저하되었다. 신생내막 형성 감소는 통계학상 유의적이었다(p<0.001).
8.5 고지방식이를 공급받은 Apo KO 마우스의 대동맥궁에서 화합물 1 처리
도 8에 제시된 바와 같이, 고지방식이를 공급받은 apoE 결핍 마우스(C57BL/6J 배경)에서 대동맥궁 중 지방 줄무늬 및 콜레스테롤 침착, 포말 세포 형성, 평활근 세포 이동 및 불안정한 섬유성 플라크 형성이 관찰되었다. 고지방식이를 공급받고, 화합물 1(60 mg/kg (체중))을 위관 영양법으로 공급받은 apoE 결핍 마우스에서 혈중 콜레스테롤 양, C 반응성 단백질 및 ROS 함량을 측정하였다.
C 반응성 단백질(CRP)은 간에 의해 생산되는 독특한 단백질로서, 이는 폐렴균(pneumococcus)의 C 다당류와 반응하기 때문에 상기와 같은 명칭을 가지게 되었다. 급성 염증성 질환, 박테리아 감염, 조직 손상 또는 악성 종양에 대한 반응으로 CRP 수준은 상승하고, 급성 병증으로부터의 회복 후에는 빠르게 감소한다. 이는 급성기 반응물질 단백질로서 명명되고, 염증에 대한 마커이다. 따라서, 화합물 1로 처리된 ApoE 마우스에서 CRP의 수준을 측정하여 화합물 1에 의한 염증 치료를 평가하였다. 도 9에 제시된 바와 같이, 화합물 1은 ApoE 마우스에서 CRP 농도를 유의적으로 감소시켰다(p<0.05). 또한, 화합물 1로 처리된 마우스에서의 활성 산소 종(ROS: reactive oxygen species) 생성 또한 평가하였다.
실시예 9. 죽상동맥경화증 치료에서 화합물 1 의 효능 및 안전성 평가
1차 결과 척도:
8주 경과 후 신생내막 형성 변화[기간: 기준선으로부터 처리 8주 후까지의 변화]
2차 결과 척도:
용량을 단계적으로 증가시키면서 화합물 1의 안전성을 측정하였다(유해 사례 및 중증 유해 사례). 기간은 1년이었다.
기준
포함 기준: 2개 이상의 관련된 심혈관 위험 인자를 가졌을 때, 1차 예방인 배경에서 진단받은 IIa 또는 IIb형 원발성 고콜레스테롤혈증을 3개월 이상 동안 보이고, 및 (i) 지질을 저하시키는 모든 요법에 대해 그러한 요법을 받은 경험이 없거나, (ii) 스타틴으로 치료받은 경험이 있는(치료 중에 있거나, 또는 이전 8주 동안 중단한) 대상.
아암(Arms)
화합물 1: 실험. 개입: 약물: 화합물 1.
지정된 개입
약물: 화합물 1. 투여 형태 100 mg 캡슐제 bid X 28일 주기
(최대 1년 동안 연속 치료).
화합물 1을 복용한 환자에서 신생내막 형성이 감소될 수 있는지 여부로 결과를 제공하는 것으로 하였다. 본 실험을 통해 죽상동맥경화증을 치료하는 방법도 추가로 제공하였다.
실시예 10. HepG2 세포주 및 세포 배양물 제조 및 유지
HepG2 세포를 MEM 알파 배지(인비트로겐(Invitrogen)/기브코 BRL(Gibco BRL): 미국 뉴욕주 그랜드아일랜드) 중에서 배양하였다. 세포를, 10% 우태아 혈청(인비트로겐/기브코 BRL) 및 100 U/ml 스트렙토마이신 및 페니실린(인비트로겐/기브코 BRL)으로 보충된 배양 배지 중 37℃하에 5% CO2에서 배양하였다. 처리를 위해, 세포를 6.25 X 105개의 세포/ml/웰로 6 웰 플레이트에 시딩하였다. 그 다음날, 배지를 무혈청 배지를 교체하고, 세포를 24 h 동안 혈청 기아 상태로 만들었다. 화합물 1을 DMSO에 용해시키고, 무혈청 배지를 이용하여 필요한 농도로 희석시켰다. 이어서, 배양물을 명시된 기간 동안 희석된 화합물 1로 처리하였다. 처리 후, 세포를 냉 포스페이트 완충처리된 염수로 세척하고, 포스파타제 및 포르테아제 억제제를 함유하는 RIPA 용해 완충제를 이용하여 용해시켰다.
실시예 11: RT - PCR 에 의한 유전자 발현 검출
RT-PCR에 의해 LDLR mRNA 발현 수준을 정량적으로 분석하였다. 간 LDLR mRNA를 검출하기 위해, 트리졸(TRIzol)® 시약(인비트로겐: 미국 캘리포니아주 칼즈배드)을 이용하여 제조사의 권고 사항에 따라 HepG2로부터 전체 RNA를 추출하였다. 올리고(dT) 20 프라이머 및 슈퍼스크립트 III® 리버스 트랜스크립타제(Superscript III® Reverse Transcriptase)(인비트로겐: 미국 캘리포니아주 칼즈배드)를 이용하여 1 ㎍의 전체 RNA로부터 cDNA를 합성하였다. 아큐파워(Accupower) PCR 프리믹스(바이오니어(Bioneer)) 및 하기 프라이머: LDLR 정방향: 5' CTTTCAACACACAACAGCAGA 3'(서열 번호 1); LDLR 역방향: 5' TGACAGGGCAAAGGCTAAC 3'(서열 번호 2); GAPDH 정방향: 5' GGTATCGTGGAAGGACTCAT 3'(서열 번호 3); GAPDH 역방향: 5' CCTTGCCCACAGCCTTG 3'(서열 4)을 사용하여 PCR을 수행하였다. 이미지-프로 플러스(Image-Pro Plus) 소프트웨어(미디어 사이버네틱스(Media Cybernetics: 미국 메릴랜드주 실버 스프링))를 이용하여 PCR 생성물 강도를 정량화하였다.
실시예 12: 면역블롯 분석
브래드포드(Bradford) 검정법(시그마-알드리치(Sigma-Aldrich: 미국 미주리주 세인트 루이스))을 사용하여 측정된, 세포 용해물 중 6 ㎍의 전체 단백질을 12.5% SDS 폴리아크릴아미드 겔 상에서 분석하였다. 180 V의 일정한 전압하에 50분 동안아 전기영동을 수행하고, 280 mA의 일정한 전류하에 90분 동안 PVDF 막 상에서 이동시켰다. 3% BSA로 블롯을 차단시키고, 1:1,000의 항체 대 포스포-p44/42 (ERK1/2)(Thr202/Tyr204)(셀 시그날링 테크놀로지(Cell Signaling Technology: 미국)), p44/42MAPK(ERK1/2)(셀 시그날링 테크놀로지: 미국) 또는 β 액틴(시그마-알드리치: 미국 미주리주 세인트 루이스)의 희석액으로 프로빙시킨 후, 호스래디쉬 퍼옥시다제(HRP: horseradish-peroxidase)로 컨쥬게이트된 2차 항체로 프로빙시키고, 퍼옥시다제용 3,3'-디아미노벤지딘(DAB) 기질 키트(벡터 라보라토리즈(Vector Laboratories: 미국 캘리포니아주 벌링게임))에 의해 검출하였다. 이미지-프로 플러스 소프트웨어(미디어 사이버네틱스: 미국 메릴랜드주 실버 스프링)를 이용하여 면역반응성 밴드를 정량화하였다.
실시예 13: 화합물 1 로 처리한 이후의 골든 시리안 ( Syrian ) 햄스터에서의 혈장 지질단백질
수컷 시리안 햄스터의 혈장 중 지질단백질의 정량적 및 정질적 특징을 조사하였다. 수컷 시리안 햄스터는 국립 실험 동물 센터로부터 입수하였다. 본 실험에서는 전 연구 기간 동안에 걸쳐 체중이 100-120 g인 8주령된, 성적으로 성숙된 수컷 시리안 햄스터를 사용하였다. 상기 햄스터를 14 h 광주기로 냉방 장치가 장착된 실내(18-26℃, 30%-70% 습도)에서 유지시켰다. 햄스터는 사망 전날까지 물 및 사료에 자유롭게 접근할 수 있었다. 2주간의 순응화 후에, 동물의 체중을 측정하고, 통계학적으로 군별로 분류하였다(n=군당 10마리). 매주 동물의 체중을 측정하였다(비브라 DH-R 1500N(Vibra DH-R 1500N: 일본)). 사료 섭취량(g/케이지)을 계산하고 기록하였다. 화합물 1을 사료에 첨가하고, 8주 동안 실험 연구소가 제안하는 양보다 1, 2, 및 4배 더 많은 양으로 햄스터에게 제공하였다.
혈액 시료
EDTA 및 겐타마이신(최종 농도 각각 1 mg/ml 및 0.005%)을 함유하는 튜브 내로 혈액(2-3 ml/동물)을 채취하였다.
채혈 스케줄: 0 및 4주째, 안와 시료 채취를 사용하고; 8주째 희생물 시료 채취를 사용하였다.
혈액 시료 처리: 실온에서 2시간 동안 휴지기 후, 혈액 시료를 3,600 rpm으로 10분 동안 원심분리하여 분석용 혈청 시료를 수집하였다. 8주째 실험 종료 후, 동물을 이산화탄소로 마취시키고, 희생시켰다. 간 시료를 수집하고, 중량을 측정하고, 분할하고, 추가 단백질 및 효소 분석을 위해 -80℃에서 보관하였다. 실험 데이터를 평균 ± 표준 편차(S.D.: standard deviation)로 표시하였다. 각 실험군들 간의 데이터는 각 군 사이의 차이를 비교하기 위해 던컨(Duncan) 검정과 함께 일원 분산 분석(ANOVA: One-way analysis of variance)을 사용하여 분석하였다(p < 0.05).
지질단백질 단리
당업계에 공지되어 있는 초원심분리 밀도 구배 방법에 의해 등밀도 햄스터 및 인간 혈장 또는 혈청 지질단백질을 그의 수화된 밀도에 기초하여 소분획화시켰다. 벡크만(Beckman) SW41-Ti 회전자(등)의 울트라클리어(Ultraclear) 튜브에서 구배를 구성하였다. 초원심분리 완료시, 0.4 ml의 분획이 연속하여 수집되었다. 지질단백질 분획을, NaCl, HEPES, NaN3 EDTA 및 겐타마이신을 함유하는 용액(pH 7.4)에 대하여 4℃에서 24시간 동안 스펙트라포르(Spectrapor) 배관에서 철저하게 투석시켰다.
풀링된 햄스터 혈장 중 지질 농도를 기록하였다.
실시예 14: 화합물 1이 혈청 LDL 콜레스테롤 농도에 미치는 효과
본 연구의 주된 목적은 중간 정도의 고콜레스테롤혈증을 앓는 건강한 대상에서 사이클로헥세논 화합물(화합물 1)이 LDL 콜레스테롤 수준에 미치는 효과를 조사하고자 하는 것이었다.
연구 유형: 개입형
연구 디자인: 배정: 무작위화
종점 분류: 안전성/효능 연구
개입 모델: 평행 지정
맹검화(Masking): 이중 맹검(대상, 간병인, 연구원)
1차 목적: 치료
1차 결과 척도:
4개월째 혈중 LDL 콜레스테롤 수준의 기준선으로부터의 변화[기간: 4개월][안전성에 관한 사안으로서의 지정 여부: 지정되지 않음].
2차 결과 척도:
4개월째의 혈중 Vit. C, Vit. E, 폴리페놀 및 MDA 수준의 기준선으로부터의 변화{기간: 4개월][안전성에 관한 사안으로서의 지정 여부: 지정되지 않음].
Figure pct00036
적격성
연구에 적격한 연령: 18세 내지 55세.
연구에 적격한 성별: 두 성별 모두.
건강한 지원자 허용 여부: 허용.
기준
포함 기준: 남성 또는 여성, 18-55세.
연구 시작 전 3개월 이상의 기간 동안 체중이 안정적인 대상.
프로토콜에 따라 기꺼이 그를 준수할 수 있고, 그의 사전 동의서 작성에 동의한 대상.
사회 보장 제도에 가입한 대상.
본인 스스로 기꺼이 생체 임상의학 연구에 가담하는 국가 지원자 등록 명부에 포함될 용의가 있는 대상.
실시예 15: 비경구용 제제
주사에 의해 투여하기에 적합한 비경구용 제약 조성물을 제조하기 위해, 본원에 기술된 100 mg의 화합물 또는 그의 염을 DMSO에 용해시킨 후, 10 mL의 0.9% 멸균 염수와 혼합하였다. 혼합물을, 주사에 의해 투여하기에 적합한 투여 단위 형태로 혼입시켰다.
실시예 16: 경구용 제제
경구 전달용 제약 조성물을 제조하기 위해, 100 mg의 예시적인 화합물 1을 100 mg의 옥수수유와 혼합하였다. 혼합물을, 경구 투여용으로 적합한, 캡슐제 경구용 투여 단위로 혼입시켰다.
일부 경우에서, 100 mg의 본원에 기술된 화합물을 750 mg의 전분과 혼합하였다. 혼합물을, 경구 투여용으로 적합한, 예컨대, 경질 젤라틴 캡슐제 경구용 투여 단위로 혼입시켰다.
실시예 17: 설하용 (경질 로젠지 ) 제제
협측 전달용 제약 조성물, 예컨대, 경질 로젠지를 제조하기 위해, 100 mg의 본원에 기술된 화합물을, 1.6 mL의 묽은 옥수수 시럽, 2.4 mL 증류수, 및 0.42 mL 민트 추출물과 함께 혼합된, 420 mg의 분말형 당과 혼합하였다. 혼합물을 완만하게 혼합하고, 몰드에 부어 협측 투여용으로 적합한 로젠지를 제조하였다.
실시예 18: 흡입용 조성물
흡입 전달용 제약 조성물을 제조하기 위해, 20 mg의 본원에 기술된 화합물을 50 mg의 무수 시트르산 및 100 mL의 0.9% 염화나트륨 용액과 혼합하였다. 혼합물을, 흡입 투여용으로 적합한, 흡입 전달용 단위, 예컨대, 분무기 내로 혼입시켰다.
실시예 19: 직장용 겔 제제
직장 전달용 제약 조성물을 제조하기 위해, 100 mg의 본원에 기술된 화합물을 2.5 g의 메틸셀룰로스(1,500 mPa), 100 mg의 메틸파라펜, 5 g의 글리세린 및 100 mL의 정제수와 혼합하였다. 이어서, 생성된 겔 혼합물을, 직장 투여용으로 적합한, 직장 전달용 단위, 예컨대, 시린지 내로 혼입시켰다.
실시예 20: 국소용 겔 조성물
국소용 겔 제약 조성물을 제조하기 위해, 100 mg의 본원에 기술된 화합물을 1.75 g의 하이드록시프로필 셀룰로스, 10 mL의 프로필렌 글리콜, 10 mL의 이소프로필 미리스테이트 및 100 mL의 정제된 알콜 USP와 혼합하였다. 이어서, 생성된 겔 혼합물을, 국소 투여용으로 적합한, 용기, 예컨대, 튜브 내로 혼입시켰다.
실시예 21 : 안과용 액제 조성물
안과용 액제 제약 조성물을 제조하기 위해, 100 mg의 본원에 기술된 화합물을 100 mL의 정제수 중 0.9 g의 NaCl과 혼합하고, 0.2 ㎛ 필터를 사용하여 여과하였다. 이어서, 생성된 등장성 용액을, 안과 투여용으로 적합한, 안과 전달용 단위, 예컨대, 점안 용기 내로 혼입시켰다.
본원에서는 본 발명의 바람직한 실시양태가 제시되고 기술되었지만, 상기 실시양태는 단지 일례로서만 제공되었다는 것이 당업자에게는 자명할 것이다. 이에 본 발명으로부터 벗어남 없이 당업자에게는 다수의 변형, 변화, 및 치환이 이루어질 수 있을 것이다. 본원에 기술된 본 발명의 실시양태에 대한 다양한 대안이 본 발명을 실시하는 데 사용될 수 있다는 점을 이해하여야 한다. 하기 특허청구범위가 본 발명의 범주를 정의하고, 이러한 특허청구범위의 범주 내에 있는 방법 및 구조 및 그의 균등범위는 이에 포함되는 것으로 한다.

Claims (31)

  1. 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 죽상동맥경화증의 치료 방법:
    Figure pct00037

    상기 식에서,
    X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
    R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
    R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
    R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
    R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
    m = 1∼12이고;
    n = 1∼12이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 PDGF 자극된 평활근 세포 증식 또는 이동을 억제시키는 것인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 신생내막 형성을 감소시키는 것인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 죽상동맥경화증이 관상 동맥 질환, 동맥류, 동맥경화증, 심근경색증, 색전증, 뇌졸중, 혈전증, 협심증, 혈관 플라크 염증, 혈관 플라크 파열, 가와사키병, 석회화 또는 염증과 관련된 것인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시키는 것인 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 대상에서 정상 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤 수준을 유지시키는 것인 방법.
  7. 맥관계내 하나 이상의 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 것을 필요로 하는 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하며, 여기서, 뇌의 상기 세포 증식성 질환이 치료 또는 예방되는 것인, 대상의 맥관계내 하나 이상의 죽상경화성 병변의 생성 또는 진행을 억제시키는 방법:
    Figure pct00038

    상기 식에서,
    X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
    R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
    R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
    R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
    R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
    m = 1∼12이고;
    n = 1∼12이다.
  8. 제7항에 있어서, 맥관계가 심장 동맥을 포함하는 것인 방법.
  9. 제8항에 있어서, 맥관계가 대동맥을 포함하는 것인 방법.
  10. 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 염증 관련 동맥경화성 혈관 질환을 예방하거나, 또는 치료하는 방법:
    Figure pct00039

    상기 식에서,
    X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
    R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
    R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
    R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
    R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
    m = 1∼12이고;
    n = 1∼12이다.
  11. 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 C 반응성 단백질을 감소시키는 방법:
    Figure pct00040

    상기 식에서,
    X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
    R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
    R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
    R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
    R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
    m = 1∼12이고;
    n = 1∼12이다.
  12. 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤을 저하시키는 방법:
    Figure pct00041

    상기 식에서,
    X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
    R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
    R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
    R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
    R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
    m = 1∼12이고;
    n = 1∼12이다.
  13. 대상에게 치료학상 유효량의, 하기 구조를 가지는 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그를 투여하는 것을 포함하는, 대상에서 정상 저밀도 지질단백질(LDL) 콜레스테롤 수준을 유지시키는 방법:
    Figure pct00042

    상기 식에서,
    X 및 Y는 각각 독립적으로 산소, NR5 또는 황이고;
    R은 수소 또는 C(=O)C1-C8알킬이고;
    R1, R2, 및 R3은 각각 독립적으로 수소, 메틸 또는 (CH2)m-CH3이고;
    R4는 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 할로겐, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8알킬, C2-C8알케닐, C2-C8알키닐, C3-C8사이클로알킬, 및 C1-C8할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되고;
    R5 및 R6은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-C8알킬이고;
    R7은 C1-C8알킬, OR5 또는 NR5R6이고;
    m = 1∼12이고;
    n = 1∼12이다.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, 상기 화합물이 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 수용체 발현을 유도하는 것인 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 화합물이 간 LDLR 발현을 증가시키는 것인 방법.
  16. 제12항 또는 제13항에 있어서, 상기 방법이 대상에서 저밀도 지질단백질(LDL) 수용체 발현을 유도하는 것인 방법.
  17. 제16항에 있어서, 상기 방법이 간 LDLR 발현을 증가시키는 것인 방법.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그가 비경구적으로 또는 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  19. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그가 주사에 의해 투여되는 것인 방법.
  20. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 사이클로헥세논 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 대사산물, 용매화물 또는 프로드러그가 경구적으로 투여되는 것인 방법.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상이 인간인 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이 안트로디아 캄포라타(Antrodia camphorata)로부터 단리된 것인 방법.
  23. 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, R이 수소, C(=O)C3H8, C(=O)C2H5, 또는 C(=O)CH3인 방법.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, R1, R2, 및 R3이 각각 독립적으로 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 또는 옥틸인 방법.
  25. 제24항에 있어서, R1이 수소 또는 메틸인 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 수소 또는 메틸인 방법.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, R4가 할로겐, NH2, NHCH3, N(CH3)2, OCH3, OC2H5, C(=O)CH3, C(=O)C2H5, C(=O)OCH3, C(=O)OC2H5, C(=O)NHCH3, C(=O)NHC2H5, C(=O)NH2, OC(=O)CH3, OC(=O)C2H5, OC(=O)OCH3, OC(=O)OC2H5, OC(=O)NHCH3, OC(=O)NHC2H5, 또는 OC(=O)NH2인 방법.
  28. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, R4가 C2H5C(CH3)2OH, C2H5C(CH3)2OCH3, CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), 5 또는 6원 락톤, C1-C8 알킬, 아릴, 또는 글루코실이고, 여기서, 5 또는 6원 락톤, C1-C8 알킬, 아릴, 및 글루코실은 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 및 C1-C8 할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환되는 것인 방법.
  29. 제28항에 있어서, R4가 임의적으로 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, C1-C8 알킬, C2-C8 알케닐, C2-C8 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 및 C1-C8 할로알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 치환된 C1-C8 알킬인 방법.
  30. 제29항에 있어서, R4가 CH2CH=C(CH3)2인 방법.
  31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이
    Figure pct00043
    인 방법.
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2788598T3 (es) * 2012-11-21 2020-10-22 Golden Biotechnology Corp Métodos y composiciones para tratar enfermedades neurodegenerativas
CN107648282A (zh) * 2016-07-26 2018-02-02 北京大学 牛樟芝在防治心肌肥大及心肌纤维化中的应用
CN115607738B (zh) * 2022-10-31 2023-07-14 中国人民解放军陆军军医大学 基于仿生内皮细胞抗血栓功能的心血管植入物及其制备方法

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3598122A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
US3993073A (en) 1969-04-01 1976-11-23 Alza Corporation Novel drug delivery device
US3598123A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
US3710795A (en) 1970-09-29 1973-01-16 Alza Corp Drug-delivery device with stretched, rate-controlling membrane
US4069307A (en) 1970-10-01 1978-01-17 Alza Corporation Drug-delivery device comprising certain polymeric materials for controlled release of drug
US3731683A (en) 1971-06-04 1973-05-08 Alza Corp Bandage for the controlled metering of topical drugs to the skin
US3742951A (en) 1971-08-09 1973-07-03 Alza Corp Bandage for controlled release of vasodilators
US3996934A (en) 1971-08-09 1976-12-14 Alza Corporation Medical bandage
BE795384A (fr) 1972-02-14 1973-08-13 Ici Ltd Pansements
US3921636A (en) 1973-01-15 1975-11-25 Alza Corp Novel drug delivery device
US3993072A (en) 1974-08-28 1976-11-23 Alza Corporation Microporous drug delivery device
US3972995A (en) 1975-04-14 1976-08-03 American Home Products Corporation Dosage form
US4077407A (en) 1975-11-24 1978-03-07 Alza Corporation Osmotic devices having composite walls
US4031894A (en) 1975-12-08 1977-06-28 Alza Corporation Bandage for transdermally administering scopolamine to prevent nausea
US4031893A (en) 1976-05-14 1977-06-28 Survival Technology, Inc. Hypodermic injection device having means for varying the medicament capacity thereof
US4060084A (en) 1976-09-07 1977-11-29 Alza Corporation Method and therapeutic system for providing chemotherapy transdermally
US4201211A (en) 1977-07-12 1980-05-06 Alza Corporation Therapeutic system for administering clonidine transdermally
JPS5562012A (en) 1978-11-06 1980-05-10 Teijin Ltd Slow-releasing preparation
US4230105A (en) 1978-11-13 1980-10-28 Merck & Co., Inc. Transdermal delivery of drugs
US4291015A (en) 1979-08-14 1981-09-22 Key Pharmaceuticals, Inc. Polymeric diffusion matrix containing a vasodilator
US5116817A (en) 1982-12-10 1992-05-26 Syntex (U.S.A.) Inc. LHRH preparations for intranasal administration
US4476116A (en) 1982-12-10 1984-10-09 Syntex (U.S.A.) Inc. Polypeptides/chelating agent nasal compositions having enhanced peptide absorption
US5312325A (en) 1987-05-28 1994-05-17 Drug Delivery Systems Inc Pulsating transdermal drug delivery system
US5633009A (en) 1990-11-28 1997-05-27 Sano Corporation Transdermal administration of azapirones
US5695472A (en) 1993-05-27 1997-12-09 Washington Biotech Corporation Modular automatic or manual emergency medicine injection system
US5540664A (en) 1993-05-27 1996-07-30 Washington Biotech Corporation Reloadable automatic or manual emergency injection system
US5358489A (en) 1993-05-27 1994-10-25 Washington Biotech Corporation Reloadable automatic or manual emergency injection system
US5665378A (en) 1994-09-30 1997-09-09 Davis; Roosevelt Transdermal therapeutic formulation
US6923983B2 (en) 1996-02-19 2005-08-02 Acrux Dds Pty Ltd Transdermal delivery of hormones
US6929801B2 (en) 1996-02-19 2005-08-16 Acrux Dds Pty Ltd Transdermal delivery of antiparkinson agents
US6391452B1 (en) 1997-07-18 2002-05-21 Bayer Corporation Compositions for nasal drug delivery, methods of making same, and methods of removing residual solvent from pharmaceutical preparations
US5869090A (en) 1998-01-20 1999-02-09 Rosenbaum; Jerry Transdermal delivery of dehydroepiandrosterone
US6946144B1 (en) 1998-07-08 2005-09-20 Oryxe Transdermal delivery system
US7544189B2 (en) 2000-10-10 2009-06-09 Meridian Medical Technologies, Inc. Needle and hub assembly for automatic injector
TW200638867A (en) * 2005-05-06 2006-11-16 Golden Biotechnology Corp Incubation and application methods for the culture of antrodia camphorata
US7468932B2 (en) * 2005-05-13 2008-12-23 Pgs Americas, Inc. System for noise attenuation in marine seismic streamers
TW200829234A (en) * 2007-01-08 2008-07-16 Golden Biotechnology Corp Antrodia camphorata isophorone extract
CN101225066B (zh) * 2007-01-18 2010-09-22 国鼎生物科技股份有限公司 牛樟芝的环己烯酮萃取物
TWI394573B (zh) * 2007-06-14 2013-05-01 Golden Biotechnology Corp Application of Cynanchum auranthone Cyclohexenone Compounds in the Preparation of Drugs for Liver Protection
TWI394566B (zh) * 2009-09-09 2013-05-01 Golden Biotechnology Corp Used to inhibit the growth of ovarian cancer tumor cells of the cattle camphor cyclohexene ketone compounds
US8697086B2 (en) * 2010-01-19 2014-04-15 Chieh-Chou Yu Use of Antrodia camphorata for treating diseases

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