KR20150000448A

KR20150000448A - Formulations of deoxycholic acid and salts thereof

Info

Publication number: KR20150000448A
Application number: KR1020147006855A
Authority: KR
Inventors: 로버트 에밀 호지; 제프리 더글라스 웹스터; 로버트 엠. 모리어티
Original assignee: 키쎄라 바이오파마슈티컬즈 인코포레이티드
Priority date: 2011-08-23
Filing date: 2011-08-23
Publication date: 2015-01-02
Also published as: KR101919269B1; IN2014CN02188A; PH12016501175A1; KR20190119677A; CR20140053A; KR20170075016A; SG2014013205A; MX2014001495A; CN108619089A; AU2011375432B2; IL230547A; AU2018202807A1; CA2842177A1; KR101751585B1; NZ620040A; BR112014000547A2; IL230547A0; ZA201401027B; KR102034606B1; JP5919597B2

Abstract

본 출원은 약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 데옥시콜린산의 염을 포함하는 수용성 약제학적 조성물로서, 상기 조성물은 침전에 대비하여 안정화되도록 약 8.1부터 약 8.5까지의 pH로 유지되는, 조성물에 관한 것이다. 또한 본 명세서에서는, 침전에 대비하여 약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 데옥시콜린산의 염을 포함하는 수용성 약제학적 조성물을 안정화하는 방법들로서, 약 8.1부터 약 8.5까지의 용액의 pH를 유지하는 단계를 포함하는, 방법이 개시된다.The present application is directed to a water-soluble pharmaceutical composition comprising from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v of a salt of deoxycholic acid, wherein the composition comprises from about 8.1 to about 8.5 RTI ID = 0.0 > pH. < / RTI > Also provided herein are methods of stabilizing a water soluble pharmaceutical composition comprising from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v of a salt of deoxycholic acid for precipitation, &Lt; / RTI > maintaining the pH of the solution in the solution.

Description

데옥시콜린산 및 그의 염들의 제형물들 {Formulations of deoxycholic acid and salts thereof}Formulations of deoxycholic acid and salts thereof < RTI ID = 0.0 >

본 발명은 매우 낮은 농도들의 데옥시콜린산 ("DCA")의 염을 포함하는 수용성 약제학적 제형물들로서, DCA의 침전이 실질적으로 저해되도록 pH가 유지되는, 제형물들에 관한 것이다. 바람직한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 완충되어 조성물이 주사에 적합하도록 생리학적으로 허용가능한 pH를 유지한다.The present invention is a water-soluble pharmaceutical formulation comprising salts of very low concentrations of deoxycholic acid ("DCA"), wherein the pH is maintained such that the precipitation of DCA is substantially inhibited. In a preferred embodiment, the pharmaceutical composition is buffered to maintain a physiologically acceptable pH such that the composition is suitable for injection.

최근에 발표된 문헌은 DCA의 수용성 용액들이 생체내에서 지방성 축적물들 내로 주입될 때 지방을 제거하는 성질들을 가지는 것으로 보고하고 있다 (국제특허출원 제 WO 2005/117900호 및 제 WO 2005/112942호, 미국 특허출원 제 US2005/0261258호; 제 US2005/0267080호; 제 US2006/127468호; 및 제 US2006/0154906호를 참조하라). 지방 조직으로 주입된 DCA는 원하는 심미적 결과들을 제공하도록 세포용해 기작을 통하여 지방 세포들을 분해한다.Recently published literature reports that aqueous solutions of DCA have the properties of removing fats when they are injected into fatty deposits in vivo (International Patent Applications WO 2005/117900 and WO 2005/112942, US Patent Application No. US2005 / 0261258; US2005 / 0267080; US2006 / 127468; and US2006 / 0154906). DCA injected into adipose tissue degrades adipocytes through a cell lysis mechanism to provide desired aesthetic results.

DCA의 수용성 제형물들의 장점들에도 불구하고, 선택적으로 벤질 알코올을 포함하는 수용성 용액들에서 DCA의 낮은 농도는 일정 기간 동안 보관 이후에 침전물을 형성하는 것으로 관찰되어 왔다. 놀랍게도, DCA 농도가 더 낮아질수록 용액의 pH에서 임의의 유의한 변화에도 불구하고 침전의 속도가 더욱 높아지는 것으로 관찰되어 왔다. 매우 낮은 농도에서 이러한 침전은 DCA의 피하 주사들의 경우에 침전물이 역-지시되기 (counter-indicated) 때문에 상용화에 대한 문제점이 된다.Despite the advantages of water soluble formulations of DCA, low concentrations of DCA in aqueous solutions, optionally containing benzyl alcohol, have been observed to form precipitates after storage for a period of time. Surprisingly, it has been observed that the lower the DCA concentration, the higher the rate of precipitation despite any significant changes in the pH of the solution. At very low concentrations, this precipitation is a problem for commercialization because the precipitate is counter-indicated in the case of subcutaneous injections of DCA.

각각의 치료 요법에서, 최신의 DCA의 수용성 제형물들의 임상시험들은 치료될 지방 축적을 정의하는 서로 다른 부위들 내로 적은 양들의 수용성 제형물의 복수 회 주사들을 사용한다.In each therapeutic regimen, clinical trials of water-soluble formulations of modern DCA use multiple injections of small amounts of aqueous formulation into different sites defining the fat accumulation to be treated.

명백한 바, 이러한 치료들에 사용되는 DCA의 수용성 제형물들은 DCA의 침전으로부터 발생하는 문제점들과 겹친다. 다시 말하면 일정 기간 동안 보관될 때 처음에 맑은 DCA의 수용성 용액이, 이들 용액들의 pH가 데옥시콜린산의 pKa 초과인 약 7.50 및 약 8.0 사이 범위라는 사실에도 불구하고 DCA의 시판에 적절한 농도들에서 침전물을 형성할 것이라는 점이다.Clearly, the aqueous formulations of DCA used in these treatments overlap with problems arising from the precipitation of DCA. In other words, the aqueous solutions of clear DCA initially stored when stored for a certain period of time, despite the fact that the pH of these solutions is between about 7.50 and about 8.0, which is above the pKa of deoxycholic acid, It will form a precipitate.

따라서, 적어도 2개월의 보관기간 동안 침전에 대비하여 데옥시콜린산 및 그의 염의 낮은 농도 수용성 용액들을 안정화하기 위한 필요성이 존재한다.
Thus, there is a need to stabilize low-concentration aqueous solutions of deoxycholic acid and its salts against precipitation for at least two months of storage.

놀랍게도, 약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 농도들에서 데옥시콜린산 염의 수용성 용액들은 용액의 pH를 약 8 초과로 조절하여, 바람직하게는 약 8.1부터 약 8.5까지의 생리학적으로 허용가능한 pH로부터 안정화될 수 있는 것으로 관찰되었다. 바람직하게, pH는 완충액들을 사용하여 본 범위 이내로 유지된다.Surprisingly, aqueous solutions of deoxycholic acid salt at concentrations of from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v can be prepared by adjusting the pH of the solution to greater than about 8, preferably from about 8.1 to about 8.5 It has been observed that it can be stabilized from a physiologically acceptable pH. Preferably, the pH is maintained within this range using buffers.

이에 따라, 그의 조성물 관점들의 하나에서, 본 발명은 약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 농도로 데옥시콜린산의 염 및 선택적으로 보존제 유효량의 벤질 알코올로 필수적으로 구성되는 수용성 제형물들로서, 상기 제형물들은 처음에 형성된 맑은 용액의 pH를 침전에 대비하여 약 8.1부터 약 8.5까지의 pH로 조절하여 안정화되는, 제형물들에 관한 것이다. 또 다른 구현예에서, 본 발명은 약 0.5% w/v부터 약 1% w/v까지의 농도로 데옥시콜린산의 염 및 선택적으로 보존제 유효량의 벤질 알코올로 필수적으로 구성되는 수용성 제형물로서, 상기 제형물들은 처음에 형성된 맑은 용액의 pH를 침전에 대비하여 약 8.1부터 약 8.5까지의 pH로 조절하여 안정화되는, 제형물에 관한 것이다.Thus, in one of its composition aspects, the present invention provides a composition comprising a salt of deoxycholic acid and optionally a preservative-effective amount of benzyl alcohol in a concentration of from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v As water-soluble formulations, the formulations are stabilized by adjusting the pH of the initially formed clear solution to a pH of about 8.1 to about 8.5 against precipitation. In another embodiment, the invention is a water soluble formulation consisting essentially of a salt of deoxycholic acid and optionally a preservative effective amount of benzyl alcohol in a concentration of from about 0.5% w / v to about 1% w / v, The formulations are stabilized by adjusting the pH of the initially formed clear solution to a pH of about 8.1 to about 8.5 against precipitation.

또 다른 구현예에서, 본 발명은In yet another embodiment,

약 8.3의 pH로 완충된 무균의 수용성 용액;A sterile, aqueous solution buffered to a pH of about 8.3;

약 0.5% w/v 또는 약 1% w/v의 데옥시콜린산의 염;About 0.5% w / v or about 1% w / v of deoxycholic acid;

선택적으로 보존제 유효량의 벤질 알코올; 및Optionally a preservative effective amount of benzyl alcohol; And

약 1% w/v의 염화나트륨:About 1% w / v sodium chloride:

으로 필수적으로 구성된 수용성 제형물로서, 상기 조성물은 침전에 대비하여 안정한, 제형물에 관한 것이다.&Lt; / RTI > wherein the composition is stable against settling.

본 명세서에서는, 데옥시콜린산의 염의 수용성 조성물을 보관 동안 침전에 대비하여 안정화하는 방법으로서, 데옥시콜린산 염의 농도는 데옥시콜린산 염의 양이 약 0.4 % w/v부터 2% w/v 미만까지의 범위인 경우일 때 지방 세포들을 용해하는 데 효과적인 양이 되고, 상기 방법은As used herein, a method for stabilizing a water-soluble composition of a salt of deoxycholic acid against precipitation during storage, wherein the concentration of deoxycholic acid salt is from about 0.4% w / v to 2% w / v , The method is effective for dissolving the adipocytes when in the range of < RTI ID = 0.0 >

데옥시콜린산 염의 수용성 용액을 그의 pKa 초과의 초기 pH에서 형성하는 단계;Forming an aqueous solution of deoxycholic acid salt at an initial pH above its pKa;

수용성 용액의 pH를 약 8.1부터 약 8.5까지의 pH로 조절하는 단계; 및Adjusting the pH of the aqueous solution to a pH of about 8.1 to about 8.5; And

선택적으로 약 8.1부터 약 8.5까지로 pH를 유지하기에 충분한 양의 완충액을 포함시키는 단계:Optionally including an amount of buffer sufficient to maintain a pH from about 8.1 to about 8.5:

를 포함하는 방법도 역시 개시된다.Are also disclosed.

본 명세서에서는 본 발명에 따른 조성물을 상기 세포에 투여하는 단계를 포함하는, 지방 세포를 용해하는 방법도 역시 개시된다.
Also disclosed herein is a method of dissolving adipocytes, comprising administering to the cells a composition according to the present invention.

도 1은 소듐 데옥시콜레이트가 없는 물 및 0.9% w/v 벤질 알코올의 수용성 조성물이, 바이오프렌 관삽입 (tubing) 입자들일 것으로 추정되는 단지 미량의 침전물을 포함하는 점을 나타낸 것이다 (67배 확대).
도 2는 물, 0.5% w/v 소듐 데옥시콜레이트 및 0.9% w/v 벤질 알코올의 수용성 조성물이 데옥시콜레이트 결정들일 것으로 추정되는 유의한 양들의 침전물을 포함하는 점을 나타낸 것이다 (67배 확대).
도 3은 물, 1% w/v 소듐 데옥시콜레이트 및 0.9% w/v 벤질 알코올의 수용성 조성물이, 0.5% w/w의 소듐 데옥시콜레이트의 조성물보다 더 적기는 하더라도 유의한 양들의 침전물을 포함하는 점을 나타낸 것이다. 이전과 같이, 침전물은 데옥시콜레이트 결정들일 것으로 추정된다.
도 4는 물, 2% w/v 소듐 데옥시콜레이트 및 0.9% w/v 벤질 알코올의 수용성 조성물이 유의한 양들의 침전물을 포함하지만 도 2 및 도 3에서 관찰된 것보다 실질적으로 더 적은 점을 나타낸 것이다 (67배 확대).Figure 1 shows that water-free compositions of sodium deoxycholate-free water and 0.9% w / v benzyl alcohol contain only trace amounts of sediment that are believed to be bioprene tube tubing particles (67x magnification ).
Figure 2 shows that water-soluble compositions of water, 0.5% w / v sodium deoxycholate and 0.9% w / v benzyl alcohol contain significant amounts of precipitate presumed to be deoxycholate crystals (67 times magnification ).
Figure 3 shows that a water-soluble composition of water, 1% w / v sodium deoxycholate and 0.9% w / v benzyl alcohol has significant amounts of precipitates, even though less than the composition of 0.5% w / w sodium deoxycholate . As before, the precipitate is assumed to be deoxycholate crystals.
Figure 4 shows that the aqueous composition of water, 2% w / v sodium deoxycholate, and 0.9% w / v benzyl alcohol contains significant amounts of precipitate but is substantially less than that observed in Figures 2 and 3 (67 times magnification).

본 명세서에서 사용되는 바, 소정의 용어들은 다음의 정의된 의미들을 가진다.As used herein, certain terms have the following defined meanings.

범위들을 포함하는 모든 수적인 명명법들 (designation), 예로 pH, 온도, 시간, 농도 및 분자량은 0.1의 증분들로 (+) 또는 (-) 변화되는 근사치들이다. 명백하게 항상 진술되지는 않더라도, 모든 수적인 명명법들은 용어 "약 (about)"에 의해 선행되는 것으로 이해되어야 한다. 용어 "약"은 "X + 0.1" 또는 "X - 0.1"과 같은 "X"의 소수의 증분들에 추가하여 정확한 수치 "X"도 역시 포함한다. 명백하게 항상 진술되지는 않더라도, 본 명세서에서 기술된 반응시약들은 단지 예시적인 것이고 이러한 것의 동등물들이 당해 기술분야에서 숙지된 것으로도 역시 이해되어야 한다.All numerical designations including ranges, such as pH, temperature, time, concentration and molecular weight, are approximations that are varied (+) or (-) with increments of 0.1. Although not explicitly stated at all times, all numerical nomenclature should be understood to be preceded by the term "about ". The term "about" also includes an exact number "X" in addition to a small number of increments of "X ", such as" X + 0.1 & Although not explicitly stated at all times, the reaction reagents described herein are merely illustrative and equivalents thereof should be understood as well known in the art.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "포함하는 (comprising)"은 조성물들 및 방법들이 인용된 요소들을 포함하지만, 다른 것들을 배제하지 않는다는 점을 의미하려고 한다.As used herein, the term " comprising "is intended to mean that the compositions and methods include the recited elements, but do not preclude others.

조성물들 및 방법들을 정의하는 데 사용될 때 "필수적으로 구성되는 (consisting essentially of)"은 임의의 활성 성분들을 배제하는 것을 의미하려고 한다. "활성 성분 (active ingredient)"은 질환의 진단, 치유, 경감, 치료, 또는 예방에서 약학적 활성 또는 기타 직접적 효과를 공급하거나 인간 신체의 구조 또는 임의의 기능에 영향을 주려는 물질이다. 따라서, 예를 들면 본 명세서에서 정의된 바와 같은 요소들로 필수적으로 구성되는 조성물은 분리 및 정제 방법으로부터 나온 미량의 오염물들 그리고 포스페이트 완충된 식염수, 보존제들 등과 같은 약제학적으로 허용가능한 담체들을 배제하지는 못할 것이지만, 인산분해효소들, 및 단백질들과 같은 효소들은 배제할 것이다. 이러한 단백질의 비-제한적인 예들은 헤파린, 및 알부민 등이다."Consisting essentially of" when used to define compositions and methods, is meant to exclude any active ingredients. An "active ingredient" is a substance that is intended to provide pharmaceutical activity or other direct effect in diagnosing, curing, alleviating, treating, or preventing a disease or affecting the structure or any function of the human body. Thus, for example, compositions that consist essentially of elements such as those defined herein do not exclude minor contaminants from the separation and purification process and pharmaceutically acceptable carriers such as phosphate buffered saline, preservatives, and the like Unfortunately, enzymes such as phosphatases, and proteins will be excluded. Non-limiting examples of such proteins are heparin, albumin, and the like.

"구성되는 (consisting of)"은 다른 성분들의 미량보다 많은 요소들을 배제하고, 본 발명의 조성물들을 투여하는 실질적인 방법 단계들을 의미하려고 한다. 이들 전환 용어들 각각에 의해 정의되는 구현예들은 본 발명의 범주 내에 속한다."Consisting of" is intended to mean the actual method steps of excluding more elements than minor amounts of the other components and administering the compositions of the present invention. Implementations defined by each of these transition terms are within the scope of the present invention.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "데옥시콜린산의 염" 또는 "그의 염"은 양이온으로서 알칼리 금속 또는 암모니움 이온을 가지는 (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-디하이드록시-10,13-디메틸헥사데카하이드로-1H-고리펜타[a]페난트렌-17-일)펜타노에이트의 약제학적으로 허용가능한 염들을 말한다. 알칼리 금속염들이 바람직하고, 소듐 염들은 더욱 바람직하다.As used herein, the term "salt of deoxycholic acid" or "salt thereof" refers to (4R) -4 - ((3R, 5R, 10S, 12S, 13R, 17R) -3,12-dihydroxy-10,13-dimethylhexadecahydro-1H-cyclopenta [a] phenanthrene-17-yl) pentanoate. Alkali metal salts are preferred, and sodium salts are more preferred.

소듐 데옥시콜레이트 또는 소듐 (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-디하이드록시-10,13-디메틸헥사데카하이드로-1H-고리펜타[a]페난트렌-17-일)펜타노에이트는 2010년 12월 17일 제출된 "데옥시콜린산의 정제 방법들 (Methods for the purification of deoxycholic acid)"이라는 명칭을 가진 국제특허출원 제 PCT/US2010/061150호에서 개시된 방법들에 따라 제조될 수 있다.((3R, 5R, 10S, 12S, 13R, 17R) -3,12-dihydroxy-10,13-dimethylhexadecahydro-1H- ] Phenanthrene-17-yl) pentanoate is described in International Patent Application No. PCT / US2010, entitled " Methods for the Purification of Deoxycholic Acid ", filed Dec. 17, / 061150. &Lt; / RTI >

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "수용성 약제학적 제형물 (aqueous pharmaceutical formulation)"은, 바람직하게는 주사기로부터 피하 주사를 통해 환자에게 투여하기에 적합한 물에 녹인 데옥시콜린산 또는 그의 염의 조성물을 말한다.As used herein, the term "aqueous pharmaceutical formulation" refers to a composition of deoxycholic acid or its salts, preferably dissolved in water, suitable for administration to a patient via subcutaneous injection from a syringe .

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "완충액"은 약산 및 그의 짝염기 또는 약염기 및 그의 짝산의 혼합물을 포함하는 수용성 용액을 말한다. 완충액은 적은 양의 산 또는 염기가 이에 첨가될 때 용액의 pH가 아주 조금 변화하는 성질을 가진다. 완충액 용액들은 광범위하게 다양한 화학적 적용들에서 거의 일정한 수치로 pH를 유지하는 수단으로서 사용된다. 적합한 완충액들의 예들로는 포스페이트 완충액들 및 문헌에 알려진 것들을 포함한다 (예를 들면, Troy, D.B., ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 제 21판, Lippincott Williams & Wilkins을 참조하라).As used herein, the term "buffer" refers to an aqueous solution comprising a mixture of a weak acid and a weak or weak base and a weak acid. The buffer has the property that the pH of the solution changes slightly when a small amount of acid or base is added thereto. Buffer solutions are used as a means to maintain pH at nearly constant levels in a wide variety of chemical applications. Examples of suitable buffers include phosphate buffers and those known in the literature (see, for example, Troy, DB, ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21th Edition, Lippincott Williams & Wilkins) .

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "염기"는 용액에서 7 초과의 pH를 가지는 다양한 전형적인 물-용해성 화합물들, 분자들 또는 이온들을 말한다. 이러한 화합물들, 분자들 또는 이온들은 산으로부터 양성자를 흡수할 수 있거나 비공유 쌍의 전자들을 산으로 줄 수 있다. 적합한 염기들의 예들로는 문헌에 알려진 것들과 같은, 금속 카보네이트들 및 바이카보네이트들, 예를 들면 소듐 카보네이트, 칼슘 카보네이트, 마그네슘 카보네이트, 아연 카보네이트, 및 소듐 바이카보네이트 등; 그리고 금속 하이드록사이드들, 예를 들면 소듐 하이드록사이드, 및 포타슘 하이드록사이드 등을 포함한다 (예를 들면, Troy, D.B., ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 제 21판, Lippincott Williams & Wilkins을 참조하라).As used herein, the term "base" refers to various typical water-soluble compounds, molecules or ions having a pH of greater than 7 in solution. These compounds, molecules or ions can absorb protons from the acid or can give electrons of a non-covalent pair to the acid. Examples of suitable bases include metal carbonates and bicarbonates such as sodium carbonate, calcium carbonate, magnesium carbonate, zinc carbonate, and sodium bicarbonate, such as those known in the literature; And metal hydroxides such as sodium hydroxide and potassium hydroxide (see, for example, Troy, DB, ed. (2005) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, , &Lt; / RTI > Lippincott Williams & Wilkins).

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "금속 카보네이트들"은 CO₃ ^-2의 금속 염을 말한다. 예를 들면, 소듐 카보네이트, 칼슘 카보네이트, 마그네슘 카보네이트, 및 아연 카보네이트 등.As used herein, the term "metal carbonates" refers to a metal salt of CO ₃ ^-2 . For example, sodium carbonate, calcium carbonate, magnesium carbonate, and zinc carbonate.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "금속 바이카보네이트들"은 HCO₃ ^-의 금속 염을 말한다. 예를 들면, 소듐 카보네이트 등.As used herein, the term "metal bicarbonates" refers to metal salts of HCO ₃ ^- . For example, sodium carbonate and the like.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "금속 하이드록사이드들"은 ^-OH의 금속 염을 말한다. 예를 들면, 소듐 하이드록사이드, 및 포타슘 하이드록사이드 등.As used herein, the term "metal hydroxides" refers to the metal salt of ^- OH. For example, sodium hydroxide, and potassium hydroxide.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "무균의 물 (sterile water)" 또는 "주사용 물 (water for injection)"은 정균제 (bacteriostat), 항미생물성 제제 또는 첨가된 완충액을 전혀 포함하지 않는 주사용 물의 무균의 비발열원성 제조물을 말한다. 일반적으로, 첨가물들의 삼투 농도는 적어도 112 mOsm/리터 (세포외 체액의 정상적 삼투도 - 280 mOsm/리터의 5분의 2)가 전부이다.As used herein, the term "sterile water" or "water for injection" refers to a water-in-oil emulsion containing no bacteriostat, antimicrobial agent, Refers to sterile, non-pyrogenic preparations. Generally, the osmolality of the additives is at least 112 mOsm / liter (normal osmolality of extracellular fluid - 280 mOsm / liter two-fifths).

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "벤질 알코올"은 화합물

을 말한다.As used herein, the term "benzyl alcohol"

.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "침전"은 용액에서 고체의 형성을 말하고 젤 형성과는 바로 구별된다.As used herein, the term "precipitate" refers to the formation of a solid in solution and is immediately distinguishable from gel formation.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "용액"은 용매에 용해된 둘 이상의 물질들을 포함하는 실질적으로 균질한 혼합물을 말한다.As used herein, the term "solution" refers to a substantially homogeneous mixture comprising two or more materials dissolved in a solvent.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "실질적으로 침전을 저해하다" 및 "침전을 저해하다"는 적어도 1개월로부터 적어도 1년까지의 시간 범위의 기간 동안 균질도를 유지하도록 대부분 또는 모든 가시적인 침전을 저해하는 것을 의미한다.As used herein, the terms "substantially inhibit precipitation" and "inhibit precipitation" include most or all of the visible precipitations to maintain homogeneity over a period of time ranging from at least one month to at least one year It means to inhibit.

본 명세서에서 사용되는 바, 용어 "균질도에 대한 상대 표준 편차" 또는 "H _E "는 균질도의 표준 편차를 평균의 절대 수치로 나누어 획득된 수치를 말한다. 10 미만의 H _E 는 매우 좋은 균질도를 가리킨다.
As used herein, the term "relative standard deviation for homogeneity" or "H _E " refers to the numerical value obtained by dividing the standard deviation of the homogeneity by the absolute value of the mean. H _E less than 10 indicates a very good homogeneity.

제형물들Formulations

전달을 위한 바람직한 배지에서 약물 조성물의 화학적 및 물리적 안정성에 대한 지식은 소중하다. 더욱 길게 말하면, 조성물의 안정성은 시판되는 산물의 보관기간을 말할 것이다. 약제학적 조성물에서 활성 성분은 환자에게 투여될 때 요구된 농도가 되는 것이 바람직하다.Knowledge of the chemical and physical stability of the drug composition in the preferred medium for delivery is valuable. Stated more fully, the stability of the composition will refer to the shelf life of a commercially available product. It is preferred that the active ingredient in the pharmaceutical composition be the concentration required when administered to a patient.

하기 논의에서, 소듐 데옥시콜레이트는 단지 설명적 목적들로 재인용되고 데옥시콜린산의 기타 약제학적으로 허용가능한 염들이 소듐 염과 상호교환적으로 사용될 수 있는 것으로 이해된다.In the following discussion, sodium deoxycholate is recited for illustrative purposes only and it is understood that other pharmaceutically acceptable salts of deoxycholic acid may be used interchangeably with the sodium salt.

지방을 용해하도록 환자에게 소듐 데옥시콜레이트의 투여를 위한 현재까지의 임상적인 방법들은 데옥시콜린산의 염의 양이 지방 세포들을 용해하기에 충분한 (약 0.4% w/v 이상) 낮은 농도의 데옥시콜린산의 염의 수용성 용액 (예로, < 2% w/v)의 피하 주사를 통한 투여를 포함한다. 이러한 농도들에서, 낮은 농도는 신체에서 지방 축적들의 효과적이고 안전한 제거를 위해 유익한 것으로 확인되어 왔다. 그러나, 수용성 배지에 넣은 소듐 데옥시콜레이트의 이러한 상대적으로 낮은 농도들에서는 침전물이 형성되는 것으로 관찰되었다. 본 침전은 소듐 데옥시콜레이트의 수용성 용액들의 제한된 보관기간을, 심지어 저온들 (3 내지 5℃)에서도 유발한다. 한 가지 구현예에서, 소듐 염은 또 다른 알칼리 금속염으로 대체될 수 있다.Current clinical methods for the administration of sodium deoxycholate to patients to dissolve fat include the use of deoxycholic acid at a low concentration of deoxycholic acid salt sufficient to dissolve fat cells (about 0.4% w / v or higher) (E.g., < 2% w / v) of an aqueous solution of a salt of cholic acid. At these concentrations, low concentrations have been found to be beneficial for the effective and safe removal of fat deposits in the body. However, precipitates were observed to form at these relatively low concentrations of sodium deoxycholate in aqueous media. This precipitation causes a limited shelf life of aqueous solutions of sodium deoxycholate, even at low temperatures (3 to 5 占 폚). In one embodiment, the sodium salt may be replaced by another alkali metal salt.

소듐 데옥시콜레이트의 수용성 용액들의 이러한 불안정성은 약 5% 내지 약 16% w/v의 농도로 소듐 데옥시콜레이트의 수용성 용액의 제조, 및 의사에게 사용 직전에 소듐 데옥시콜레이트 용액의 약제학적 조성물을 희석하게 하는 것에 의해 극복될 수 있다. 본 희석 방법은 보관 안정성 및 효과적인 환자 투여 둘 다를 허용하는 데 효과적인 한편, 일상적인 사용의 방법으로서 특히 많아야 약 2 mL의 무균의 주사가능한 용액이 요구되는 경우라면 이상적이지 않다. 더구나, 현재의 임상적 계획들은 치료 세션 당 50회까지의 주사들을 포함하고 있다.Such instability of aqueous solutions of sodium deoxycholate can be achieved by preparing an aqueous solution of sodium deoxycholate at a concentration of from about 5% to about 16% w / v, and by mixing the pharmaceutical composition of the sodium deoxycholate solution It can be overcome by diluting. While this method of dilution is effective to permit both storage stability and effective patient administration, it is not ideal as a method of routine use, especially when at most about 2 mL of sterile injectable solution is required. Moreover, current clinical schemes include up to 50 injections per treatment session.

약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 범위의 농도에서 소듐 데옥시콜레이트의 수용성 제형물들은 용액의 pH를 조절하여 안정화될 수 있는 것으로 확인되어 왔다. 본 발명은 약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 범위의 데옥시콜린산의 염 및 선택적으로 보존제 유효량의 벤질 알코올 및/또는 pH 조절 완충액과 같은 약제학적으로 허용가능한 부형제로 필수적으로 구성된 수용성 제형물로서, 상기 제형물은 약 8.1부터 약 8.5까지의 pH로 유지되는, 제형물에 관한 것이다.It has been found that aqueous formulations of sodium deoxycholate at concentrations ranging from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v can be stabilized by adjusting the pH of the solution. The present invention provides a pharmaceutical composition comprising a salt of deoxycholic acid in a range of from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v and optionally a pharmaceutically acceptable excipient such as a preservative effective amount of a benzyl alcohol and / Wherein the formulation is maintained at a pH of from about 8.1 to about 8.5, wherein the formulation is an essentially water soluble formulation.

또 다른 구현예에서, 수용성 제형물은 적당한 양의 물의 첨가에 의해 바로 재구성되는 안정한 조성물을 제공하도록 동결건조된다. 본 구현예에서, 본 발명은 선택적으로 동결건조 보조제를 더 포함하는 상기에 기술된 바와 같은 동결건조된 조성물들을 포함한다.In another embodiment, the water soluble formulations are lyophilized to provide a stable composition that is reconstituted directly by the addition of an appropriate amount of water. In this embodiment, the present invention optionally includes lyophilized compositions as described above, further comprising a lyophilization aid.

한 가지 구현예에서, 수용성 제형물은 약 0.5% w/v의 데옥시콜린산의 염을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 수용성 제형물은 약 1% w/v의 데옥시콜린산의 염을 포함한다.In one embodiment, the water soluble formulations comprise about 0.5% w / v of a salt of deoxycholic acid. In another embodiment, the water soluble formulations comprise about 1% w / v of a salt of deoxycholic acid.

심화 구현예에서, 수용성 제형물에 사용된 물은 무균의 물이다. 보다 심화 구현예에서, 보존제 유효량의 벤질 알코올은 약 0.9%의 벤질 알코올이고 제형물의 pH는 약 8.3이다. 한 가지 구현예에서, 상기 염은 알칼리 금속염이다. 또 다른 구현예에서, 상기 염은 소듐 염이다.In the deepening embodiment, the water used in the aqueous formulation is sterile water. In a further embodiment, the preservative effective amount of benzyl alcohol is about 0.9% benzyl alcohol and the pH of the formulation is about 8.3. In one embodiment, the salt is an alkali metal salt. In another embodiment, the salt is a sodium salt.

한 가지 구현예에서, 본 명세서에서 개시된 약제학적 제형물들은 인간 내로 주사에 적합하다. 주사 방법은 피하 주사와 같은 임의의 유형의 주사, 뿐만 아니라 기타 형태들의 주사일 수 있다.In one embodiment, the pharmaceutical formulations disclosed herein are suitable for injection into humans. The injection method may be any type of injection, such as subcutaneous injection, as well as other types of injection.

본 발명의 한 가지 바람직한 관점에서, 수용성 제형물에서 데옥시콜린산 염의 침전은 적어도 약 6개월의 기간 동안 저해된다. 또 다른 관점에서, 침전은 적어도 약 1년의 기간 동안 저해된다. 보다 또 다른 관점에서, 침전은 적어도 약 2년의 기간 동안 저해된다.In one preferred aspect of the invention, the precipitation of deoxycholic acid salt in aqueous formulations is inhibited for a period of at least about 6 months. In another aspect, the precipitation is inhibited for at least about a year. In yet another aspect, the precipitation is inhibited for a period of at least about two years.

다양한 온도들, 예를 들면 상온 또는 저온들에서 보관될 때, 제형물은 증가된 보관기간을 가질 수 있는 것으로 참작된다. 소정의 구현예들에서, 조성물은 약 17℃부터 약 27℃까지의 온도에서 보관된다. 일정 구현예들에서, 제형물의 온도는 약 25℃부터 약 37℃까지의 온도로 증가된다. 다른 구현예들에서, 제형물은 약 2℃부터 약 8℃까지의 온도에서 보관된다.It is contemplated that the formulations may have increased shelf life when stored at various temperatures, e. G. At ambient or low temperatures. In certain embodiments, the composition is stored at a temperature from about 17 [deg.] C to about 27 [deg.] C. In certain embodiments, the temperature of the formulation is increased to a temperature of from about 25 캜 to about 37 캜. In other embodiments, the formulation is stored at a temperature from about 2 DEG C to about 8 DEG C.

소정의 구현예들에서, 제형물의 pH는 약 8.1부터 약 8.5까지의 범위를 가진다. 한 가지 구현예에서, 조성물의 pH는 약 8.1, 또는 대안적으로 약 8.2, 또는 대안적으로 약 8.3, 또는 대안적으로 약 8.4, 또는 대안적으로 약 8.5이다. 바람직한 구현예에서, 제형물의 pH는 약 8.3이다.In certain embodiments, the pH of the formulation ranges from about 8.1 to about 8.5. In one embodiment, the pH of the composition is about 8.1, or alternatively about 8.2, or alternatively about 8.3, or alternatively about 8.4, or alternatively about 8.5. In a preferred embodiment, the pH of the formulation is about 8.3.

한 가지 구현예에서, pH는 염기의 사용에 의해 확립된다. 임의의 염기가 소듐 데옥시콜레이트와 반응하지 않고 환자에게 위해를 초래하지 않는 경우라면 조성물의 pH를 증가시키는 데 사용될 수 있는 것으로 참작된다. 일정 구현예들에서, 염기는 금속 카보네이트들, 금속 바이카보네이트들, 금속 하이드록사이드들, 또는 그들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 염기들의 예들로는, 이에 제한되는 것은 아니지만 소듐 카보네이트, 칼슘 카보네이트, 마그네슘 카보네이트, 아연 카보네이트, 소듐 바이카보네이트, 소듐 하이드록사이드, 및 포타슘 하이드록사이드 또는 그들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 염기를 포함한다. 한 가지 구현예에서, 염기는 소듐 하이드록사이드이다.In one embodiment, the pH is established by use of a base. It is contemplated that any base can be used to increase the pH of the composition if it does not react with sodium deoxycholate and does not pose a risk to the patient. In certain embodiments, the base is selected from the group consisting of metal carbonates, metal bicarbonates, metal hydroxides, or mixtures thereof. Examples of bases include, but are not limited to, bases selected from the group consisting of sodium carbonate, calcium carbonate, magnesium carbonate, zinc carbonate, sodium bicarbonate, sodium hydroxide, and potassium hydroxide or mixtures thereof. In one embodiment, the base is sodium hydroxide.

소정의 경우들에서, 조성물의 pH는 완충액을 사용한 보관 동안 원하는 pH에서 유지될 수 있다. 다양한 완충액들이 당해 기술분야에서 숙지되어 있고 원하는 pH에서 완충화 능력을 가지는 임의의 완충액이 본 명세서에서 개시된 제형물들에서 사용될 수 있는 것으로 참작된다. 한 가지 구현예에서, 완충액은 포스페이트 완충액이다. 조성물에서 포스페이트의 양은 원하는 pH 및 염 농도를 제공하도록 결정될 수 있다. 한 가지 구현예에서, 조성물은 약 10 mM 포스페이트 완충액을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 조성물은 약 10 mM 이염기 소듐 포스페이트 완충액을 포함한다.In certain cases, the pH of the composition may be maintained at the desired pH during storage with the buffer. It is contemplated that various buffers are well known in the art and any buffer having buffering capacity at the desired pH can be used in the formulations disclosed herein. In one embodiment, the buffer is a phosphate buffer. The amount of phosphate in the composition may be determined to provide the desired pH and salt concentration. In one embodiment, the composition comprises about 10 mM phosphate buffer. In a preferred embodiment, the composition comprises about 10 mM dibasic sodium phosphate buffer.

일정 구현예들에서, 조성물은 증가된 용해도, 보존가능성 (preservability)과 같은 원하는 성질들을 가진 조성물을 달성하게 돕도록 또는 등장성 용액을 제공하도록 적어도 하나의 부형제를 포함한다. 이러한 부형제들은 당해 기술분야에서 숙지되어 있다. 한 가지 구현예에서, 조성물은 약 1% w/v의 염화나트륨을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 조성물은 약 0.9% w/v의 벤질 알코올을 포함한다. 일정 구현예들에서, 조성물은 약 0.9% w/v의 벤질 알코올 및 약 1% w/v의 염화나트륨을 포함한다.In certain embodiments, the composition comprises at least one excipient to aid in achieving a composition having desired properties such as increased solubility, preservability, or to provide an isotonic solution. Such excipients are well known in the art. In one embodiment, the composition comprises about 1% w / v sodium chloride. In another embodiment, the composition comprises about 0.9% w / v benzyl alcohol. In certain embodiments, the composition comprises about 0.9% w / v benzyl alcohol and about 1% w / v sodium chloride.

일정 구현예들에서, 조성물의 pH는 염기의 사용에 의해 확립되고, 선택적으로 완충액의 사용에 의해 유지된다.In certain embodiments, the pH of the composition is established by use of a base, and is optionally maintained by the use of a buffer.

바람직한 구현예에서, 본 발명은In a preferred embodiment,

약 8.3의 pH의 포스페이트 완충액;A phosphate buffer at a pH of about 8.3;

약 0.5% w/v 또는 약 1% w/v의 소듐 데옥시콜레이트;About 0.5% w / v or about 1% w / v sodium deoxycholate;

보존제 유효량의 벤질 알코올; 및A preservative effective amount of benzyl alcohol; And

약 1% w/v의 염화나트륨:About 1% w / v sodium chloride:

을 포함하는 안정화된 조성물로서, 조성물은 침전에 대비하여 안정화되는, 조성물을 제공한다.&Lt; / RTI > wherein the composition is stabilized against precipitation.

심화 구현예에서, 포스페이트 완충액은 10 mM 이염기 소듐 포스페이트 완충액이다.In a further embodiment, the phosphate buffer is 10 mM dibasic sodium phosphate buffer.

한 가지 구현예에서, 벤질 알코올의 보존제 유효량은 약 0.9% w/v이다.In one embodiment, the preservative effective amount of benzyl alcohol is about 0.9% w / v.

본 명세서에서 개시된 제형물들은 실질적으로 데옥시콜린산의 염의 침전을 저해하기에 충분한 pH에서 유지되는 물에서 데옥시콜린산 염을 약 0.4 w/v부터 약 2% w/v 미만까지로 포함한다. 침전의 양 또는 조성물의 균질도는 다양한 방법들을 사용하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 이것은 조성물을 분광분석측정기로 조명화에 의한 광 분산을 사용하여 정량적으로 측정될 수 있다. 또는 대안적으로, 균질도는 용액의 시각적 투명도를 육안으로 관찰하여 정성적으로 측정될 수 있다. 일정 구현예들에서, 조성물은 약 5% 미만의 균질도에 대한 상대 표준 편차를 가진다. 대안적으로, 조성물은 약 4%, 또는 대안적으로 약 3%, 또는 대안적으로 약 2%, 또는 대안적으로 약 1% 미만의 균질도에 대한 상대 표준 편차를 가진다.The formulations disclosed herein comprise from about 0.4 w / v to less than about 2% w / v deoxycholate in water that is maintained at a pH sufficient to inhibit precipitation of salts of deoxycholic acid. The amount of precipitation or the homogeneity of the composition can be measured using various methods. For example, this can be quantitatively measured using light dispersion by illumination of the composition with a spectrophotometer. Alternatively, the homogeneity can be measured qualitatively by observing the visual transparency of the solution visually. In certain embodiments, the composition has a relative standard deviation for homogeneity of less than about 5%. Alternatively, the composition has a relative standard deviation of about 4%, or alternatively about 3%, or alternatively about 2%, or alternatively less than about 1% homogeneity.

또 다른 구현예에서, 본 발명은In yet another embodiment,

약 0.5% w/v 또는 1% w/v의 소듐 데옥시콜레이트;About 0.5% w / v or 1% w / v sodium deoxycholate;

약 0.9% w/v의 벤질 알코올; 및About 0.9% w / v benzyl alcohol; And

약 1% w/v의 염화나트륨:About 1% w / v sodium chloride:

으로 필수적으로 구성된 조성물로서, 조성물은 침전에 대비하여 안정한, 조성물에 관한 것이다.Wherein the composition is stable against precipitation.

또 다른 구현예에서, 본 발명은In yet another embodiment,

약 0.9% w/v의 벤질 알코올; 및About 0.9% w / v benzyl alcohol; And

약 1% w/v의 염화나트륨:About 1% w / v sodium chloride:

으로 구성된 조성물로서, 조성물은 침전에 대비하여 안정한, 조성물에 관한 것이다.&Lt; / RTI > wherein the composition is stable against precipitation.

일정 구현예들에서, 본 명세서에서의 용액들은 지질들, 인지질들, 또는 포스파티딜콜린을 포함하지 않는다. 일정 구현예들에서, 본 명세서에서의 용액들은 5% w/w, w/v 또는 v/v까지의 지질들, 상세하게 인지질들, 또는 보다 상세하게 포스파티딜콜린을 포함한다. 바람직하게, 사용된 지질들의 양은 소듐 데옥시콜레이트 또는 또 다른 데옥시콜린산 염의 양 이하이다.In certain embodiments, the solutions herein do not include lipids, phospholipids, or phosphatidylcholine. In certain embodiments, the solutions herein include lipids up to 5% w / w, w / v or v / v, in particular phospholipids, or more specifically phosphatidylcholine. Preferably, the amount of lipids used is less than or equal to the amount of sodium deoxycholate or another deoxycholic acid salt.

일정 구현예들에서, 본 발명의 수용성 약제학적 조성물은: 항-미생물성 제제들, 혈관수축제들, 항-혈전성 제제들, 항-응집성 제제들, 우울증 억제제들, 항-염증성 제제들, 마취제들, 분산제들, 항-분산성 제제들, 침투 증진제들, 스테로이드들, 안정제들, 근육 완화제들, 및 항-설사제들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 두 번째 치료적 제제를 더 포함할 수 있다. 일정 구현예들에서, 용액은 500 mL까지의 용액을 포함하는 용기에 둔다. 이러한 용기는 주사기 또는 주사기-로딩가능한 용기일 수 있다.In certain embodiments, the water soluble pharmaceutical composition of the present invention is a pharmaceutical composition comprising: an anti-microbial agent, a vasoconstrictor agent, an anti-thrombogenic agent, an anti-coagulant agent, a depressor inhibitor, May further comprise a second therapeutic agent selected from the group consisting of anesthetics, dispersants, anti-dispersing agents, penetration enhancers, steroids, stabilizers, muscle relaxants, and anti- . In certain embodiments, the solution is placed in a container containing up to 500 mL of the solution. Such a container may be a syringe or a syringe-loadable container.

일정 구현예들에서, 제형물들은 정식의 (orthogonal) 기작에 의해 지방의 살상을 초래하는 것으로 알려진 분자를 더 포함한다. 이러한 분자들은, 이에 제한되는 것은 아니지만 BIBP-3226 (암젠사 (Amgen)), BIBO-3304 (뵈링거 인겔하임사 (Boehringer Ingleheim)), BMS-192548 및 AR-H040922 (브리스톨-마이어스 스퀴브사 (Bristol-Myers Squibb)), LY-357897 (엘리 릴리사 (Eli Lilly)), 1229U91 및 GW438014S (글락소스미스클라인사 (GlaxoSmithKline)), JNJ-5207787 (존슨 & 존슨사 (Johnson & Johnson)), Lu-AA-44608 (룬드벡사 (Lundbeck)), MK-0557 (머크사 NPY), NGD-95-1 (뉴로젠사 (Neurgogen)), NLX-E201 (뉴로로직스사 (Neurologix)), CGP-71683 (노바티스사 (Novartis)), PD-160170 (파이저사 (Pfizer)), SR-120819A, BIIE0246, 및 S.A.0204 (사노피 아벤티스사 (Sanofi Aventis)), S-2367 (쉬온글리사 (Shiongli)), NPY 수용체 길항제들인 디하이드로피리딘 (dihydropyridine) 및 디하이드로피리딘 유도체들, NPY 수용체 길항제들인 이중고리 화합물들, 카바졸 NPY 수용체 길항제들, 및 NPY 수용체 길항제들인 삼중고리 화합물들과 같은 NPY 수용체 길항제들을 포함하는, 신경펩타이드 Y (NPY)를 포함한다 (예로, 국제특허출원 제 WO 2006/133160호 및 미국 특허 제 U.S. 6,313,128호를 참조하라). 또한 흰색 지방 혈관구조로 귀소하는 CKGGRAKDC 펩타이드와 같은 지방 선택적인 전구-세포사멸성 (pro-apoptotic) 펩타이드들도 참작된다 (Kolonin M.G. et al., Nat. Med., 2004, 10(6): 625-32를 참조하라).In certain embodiments, the formulations further comprise molecules known to cause the killing of fat by an orthogonal mechanism. These molecules include but are not limited to BIBP-3226 (Amgen), BIBO-3304 (Boehringer Ingleheim), BMS-192548 and AR-H040922 (Bristol-Myers Squibb -Myers Squibb), LY-357897 (Eli Lilly), 1229U91 and GW438014S (GlaxoSmithKline), JNJ-5207787 (Johnson & Johnson) (Neurologix), CGP-71683 (Novartis < (R) >), NK-0560 (Lundbeck), MK-0557 (Merck NPY), NGD-95-1 (Novartis), PD-160170 (Pfizer), SR-120819A, BIIE0246 and SA0204 (Sanofi Aventis), S-2367 (Shiongli), NPY receptor antagonists Dihydropyridine and dihydropyridine derivatives, double ring compounds which are NPY receptor antagonists, carbazole NPY receptor antagonists, and NPY receptor antagonists Includes, neuropeptide Y (NPY) comprising a NPY receptor antagonist, such as the Li compound used (see for example, International Patent Application No. WO 2006/133160 and U.S. Patent No. US 6,313,128). Also contemplated are lipo-selective pro-apoptotic peptides, such as the CKGGRAKDC peptide, which is introduced into the white fat-blood vessel structure (Kolonin MG et al ., Nat. Med., 2004, 10 (6): 625-32).

본 발명의 또 다른 관점은 데옥시콜린산 (DCA)와 같은 지방-탈락 (adipo-ablative) 담즙산들을 지방 세포들을 살상하는 제제들과 혼합하는 것에 관한 것이다. 한 가지 관점에서, 본 발명은 정식의 기작에 의해 지방을 살상하도록 초래하는 분자를 데옥시콜레이트 주입물 내로 혼합하는 단계에 의해 데옥시콜레이트 주사들의 심미적인 효과들을 증진시키는 수단을 참작한다. 이러한 후보 분자들의 예들로는, 이에 제한되는 것은 아니지만 신경펩타이드 (NPY) 길항제들 및 지방 선택적인 전구-세포사멸성 펩타이드들을 포함한다. 지방 세포 살상이 원하는 효과들을 매개하는 데 요구될 수 있기 때문에, 지방 살상 능력을 가진 제제의 효과들은 강력한 지방 세포 살상 효과들을 가진 분자의 첨가를 통해 증진될 수 있다. 추가적으로, 살상하도록 혈관 구조에 대한 접근을 요구하는 분자들 (모세혈관들의 내강 측면 상에 발현된 단백질들과 결합하는 소정의 전구-세포사멸성 펩타이드들과 같음)은 데옥시콜레이트가 혈관 누출을 초래할 수 있기 때문에 이들 단백질들에 대한 접근성을 얻을 수 있다. 따라서, 이러한 제제들은 잠재적으로 소수의 치료적 분야들에서 몸매 만들기 (body contouring)를 매개하도록 더욱 강력한 수단을 만드는 데옥시콜레이트와 상승적 작용 (synergistic)을 할 수 있다.Another aspect of the present invention relates to mixing adipo-ablative bile acids, such as deoxycholic acid (DCA), with agents that kill fat cells. In one aspect, the present invention takes into account means for enhancing the aesthetic effects of deoxycholate injections by mixing the molecules that result in fat-killing by a formal mechanism into deoxycholate injectables. Examples of such candidate molecules include, but are not limited to, neuropeptide (NPY) antagonists and lipo-selective pro-apoptotic peptides. Since fat cell killing may be required to mediate desired effects, effects of lipid-killing agents may be enhanced through the addition of molecules with potent fat cell killing effects. Additionally, molecules (such as certain pro-apoptotic peptides that bind proteins expressed on the luminal side of capillaries) require access to the vasculature to kill, leading to deoxycholates causing vascular leakage It is possible to gain access to these proteins. Thus, these agents may synergistically with oxycholates in making potent means to mediate body contouring in potentially a few therapeutic areas.

NPY 길항제들의 예들로는, 이에 제한되는 것은 아니지만 BIBP-3226 (암젠사), BIBO-3304 (뵈링거 인겔하임사), BMS-192548 및 AR-H040922 (브리스톨-마이어스 스퀴브사), LY-357897 (엘리 릴리사), 1229U91 및 GW438014S (글락소스미스클라인사), JNJ-5207787 (존슨 & 존슨사), Lu-AA-44608 (룬드벡사), MK-0557 (머크사 NPY), NGD-95-1 (뉴로젠사), NLX-E201 (뉴로로직스사), CGP-71683 (노바티스사), PD-160170 (파이저사), SR-120819A, BIIE0246, 및 S.A.0204 (사노피 아벤티스사), S-2367 (쉬온글리사), NPY 수용체 길항제들인 디하이드로피리딘 및 디하이드로피리딘 유도체들, NPY 수용체 길항제들인 이중고리 화합물들, 카바졸 NPY 수용체 길항제들, 및 NPY 수용체 길항제들인 삼중고리 화합물들과 같은 NPY 수용체 길항제들을 포함한다. 예로, 국제특허출원 제 WO 2006/133160호 및 미국 특허 제 U.S. 6,313,128호를 참조하라.Examples of NPY antagonists include but are not limited to BIBP-3226 (Amgen), BIBO-3304 (Boehringer Ingelheim), BMS-192548 and AR-H040922 (Bristol-Myers Squibb), LY-357897 (GlaxoSmithKlee), JNJ-5207787 (Johnson & Johnson), Lu-AA-44608 (Lundbeck), MK-0557 (Merck NPY), NGD-95-1 (Sanofi-aventis), S-2367 (Shionogi), NLX-E201 (NeuroLogic), CGP-71683 (Novartis), PD-160170 And NPY receptor antagonists such as tri-cyclic compounds which are NPY receptor antagonists, dihydropyridine and dihydropyridine derivatives, double ring compounds which are NPY receptor antagonists, carbazole NPY receptor antagonists, and NPY receptor antagonists . For example, International Patent Application No. WO 2006/133160 and U.S. Pat. 6,313,128.

대표적인 지방 선택적인 전구-세포사멸성 펩타이드들은, 이에 제한되는 것은 아니지만 흰색 지방 혈관구조로 귀소하는 CKGGRAKDC 펩타이드를 포함한다. Kolonin M.G. et al., Nat. Med., 2004, 6월 10(6): 625-32를 참조하라.Exemplary lipo-selective pro-apoptotic peptides include, but are not limited to, CKGGRAKDC peptides that are introduced into the white lipid vasculature. Colon MG et al ., Nat. Med., 2004, June 10 (6): 625-32.

소듐 데옥시콜레이트 또는 소듐 (4R)-4-((3R,5R,10S,12S,13R,17R)-3,12-디하이드록시-10,13-디메틸헥사데카하이드로-1H-고리펜타[a]페난트렌-17-일)펜타노에이트는 2010년 12월 17일 제출된 "데옥시콜린산의 정제 방법들"이라는 명칭을 가진 국제특허출원 제 PCT/US2010/061150호에서 개시된 방법들에 따라 제조될 수 있다. 데옥시콜린산의 다른 염들은 당업자에 의해 마찬가지로 제조될 수 있다.
((3R, 5R, 10S, 12S, 13R, 17R) -3,12-dihydroxy-10,13-dimethylhexadecahydro-1H- ] Phenanthrene-17-yl) pentanoate was prepared according to the methods described in International Patent Application No. PCT / US2010 / 061150 entitled " Methods for Purification of Deoxycholic Acid ", filed Dec. 17, 2010 . Other salts of deoxycholic acid may be similarly prepared by those skilled in the art.

방법들Methods

본 명세서에서는, 데옥시콜린산 염의 수용성 조성물을 보관 동안 침전에 대비하여 안정화하는 방법들로서, 데옥시콜린산 및 그의 염의 농도는 데옥시콜린산 염의 양이 약 0.4 % w/v부터 2% w/v 미만까지의 범위인 경우일 때 지방 세포들을 용해하는 데 효과적인 양이 되고,As used herein, the concentration of deoxycholic acid and its salts is such that the amount of deoxycholic acid salt is from about 0.4% w / v to 2% w / v, v < / RTI > to < RTI ID = 0.0 >

를 포함하는, 방법들도 역시 개시된다.Are also disclosed.

본 발명의 한 가지 관점에서, 본 명세서에서 개시된 방법들은 데옥시콜린산 염의 제형물을 침전에 대비하여 바람직하게 적어도 약 6개월의 기간 동안 안정화한다. 또 다른 관점에서, 본 방법들은 데옥시콜린산 염의 제형물을 침전에 대비하여 적어도 약 1년의 기간 동안 안정화한다. 보다 또 다른 관점에서, 본 방법들은 데옥시콜린산 염의 제형물을 침전에 대비하여 적어도 약 2년의 기간 동안 안정화한다.In one aspect of the invention, the methods disclosed herein stabilize the formulation of deoxycholic acid salt for a period of preferably at least about 6 months against precipitation. In another aspect, the methods stabilize the formulation of deoxycholic acid salt for a period of at least about one year against sedimentation. In yet another aspect, the methods stabilize the formulation of deoxycholic acid salt for a period of at least about two years in preparation for precipitation.

용액의 pH는 데옥시콜린산 또는 그의 염이 용액으로 유지되게 허용하도록 물에서 약 0.4 % w/v부터 2% w/v 미만까지의 농도로 데옥시콜린산 또는 그의 염의 침전을 저해할 수 있는 것으로 확인되어 왔다. 한 가지 구현예에서, pH는 염기의 사용에 의해 확립된다. 임의의 염기가 소듐 데옥시콜린산 또는 그의 염과 반응하지 않는 경우라면 조성물의 pH를 증가시키는 데 사용될 수 있는 것으로 참작된다. 일정 구현예들에서, 염기는 금속 카보네이트들, 금속 바이카보네이트들, 금속 하이드록사이드들, 또는 그들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 염기들의 예들로는, 이에 제한되는 것은 아니지만 소듐 카보네이트, 칼슘 카보네이트, 마그네슘 카보네이트, 아연 카보네이트, 소듐 바이카보네이트, 소듐 하이드록사이드, 및 포타슘 하이드록사이드 또는 그들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 염기를 포함한다. 한 가지 구현예에서, 염기는 소듐 하이드록사이드이다.The pH of the solution is such that it can inhibit the precipitation of deoxycholic acid or its salt at a concentration of from about 0.4% w / v to less than 2% w / v in water to allow deoxycholic acid or its salt to remain in solution . In one embodiment, the pH is established by use of a base. It is contemplated that any base can be used to increase the pH of the composition if it does not react with sodium deoxycholic acid or its salts. In certain embodiments, the base is selected from the group consisting of metal carbonates, metal bicarbonates, metal hydroxides, or mixtures thereof. Examples of bases include, but are not limited to, bases selected from the group consisting of sodium carbonate, calcium carbonate, magnesium carbonate, zinc carbonate, sodium bicarbonate, sodium hydroxide, and potassium hydroxide or mixtures thereof. In one embodiment, the base is sodium hydroxide.

소정의 구현예들에서, pH는 약 8.1부터 약 8.5까지의 범위를 가진다. 한 가지 구현예에서, 조성물의 pH는 약 8.1, 또는 대안적으로 약 8.2, 또는 대안적으로 약 8.3, 또는 대안적으로 약 8.4, 또는 대안적으로 약 8.5이다. 바람직한 구현예에서, 수용성 용액의 pH는 약 8.3이다.In certain embodiments, the pH ranges from about 8.1 to about 8.5. In one embodiment, the pH of the composition is about 8.1, or alternatively about 8.2, or alternatively about 8.3, or alternatively about 8.4, or alternatively about 8.5. In a preferred embodiment, the pH of the aqueous solution is about 8.3.

소정의 경우들에서, 조성물의 pH는 완충액의 사용과 함께 유지되는 것이 필요할 수 있다. 다양한 완충액들이 당해 기술분야에서 숙지되어 있고 원하는 pH에서 완충화 능력을 가지는 임의의 완충액이 본 명세서에서 개시된 제형물들에 사용될 수 있는 것으로 참작된다. 한 가지 구현예에서, 완충액은 포스페이트 완충액이다. 원하는 pH 및 염 농도를 제공하는 데 요구되는 포스페이트의 양이 당해 기술분야에서 잘 알려진 방법들을 사용하여 계산될 수 있다. 한 가지 구현예에서, 조성물은 약 10 mM 포스페이트 완충액을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 포스페이트 완충액은 10 mM 이염기 소듐 포스페이트 완충액이다.In certain cases, the pH of the composition may need to be maintained with use of the buffer. It is contemplated that various buffers are well known in the art and any buffer having buffering capacity at the desired pH can be used in the formulations disclosed herein. In one embodiment, the buffer is a phosphate buffer. The amount of phosphate required to provide the desired pH and salt concentration can be calculated using methods well known in the art. In one embodiment, the composition comprises about 10 mM phosphate buffer. In another embodiment, the phosphate buffer is 10 mM dibasic sodium phosphate buffer.

소정의 경우들에서, pH는 염기의 사용에 의해 확립되고, 선택적으로 완충액의 사용에 의해 유지된다.In some cases, the pH is established by use of a base and is optionally maintained by the use of a buffer.

한 가지 구현예에서, 본 명세서에서 개시된 방법들은 인간 내로 주사에 적합한 제형물들을 제공한다. 주사의 방법은 피하 주사와 같은 임의의 유형의 주사, 뿐만 아니라 기타 형태들의 주사일 수 있다. 따라서, 일정 구현예들에서, 수용성 용액은 무균의 물 또는 주사용 물 (WFI)를 포함한다.In one embodiment, the methods disclosed herein provide formulations suitable for injection into humans. The method of injection may be any type of injection, such as subcutaneous injection, as well as other types of injection. Thus, in certain embodiments, the aqueous solution comprises sterile water or injectable water (WFI).

한 가지 관점에서, 하나 이상의 부형제들은 제형물에 존재하는 데옥시콜린산염의 용해도를 유지하거나, 보존가능성을 증가시키는 데 사용되는 것일 수 있다. 한 가지 구현예에서, 본 방법은 약 1% w/v의 벤질 알코올을 첨가하는 단계를 포함한다. 일정 구현예들에서, 제형물들은 등장성 용액을 달성하는 것을 돕도록 적어도 하나의 부형제도 역시 포함한다. 이러한 부형제는 당해 기술분야에서 숙지되어 있다. 한 가지 구현예에서, 본 방법은 약 1% w/v의 염화나트륨을 첨가하는 단계를 포함한다. 한 가지 구현예에서, 본 방법은 약 1% w/v의 벤질 알코올 및 약 1% w/v의 염화나트륨 둘 다를 첨가하는 단계를 포함한다. 일정 구현예에서, 본 방법은 약 0.9% w/v의 벤질 알코올 및 약 0.9% w/v의 염화나트륨 둘 다를 첨가하는 단계를 포함한다. 본 명세서에서 개시된 방법들을 사용하여, 약 2% w/v 미만의 데옥시콜린산 염을 포함하는 수용성 용액은 실질적으로 데옥시콜린산 염의 침전을 저해하기에 충분한 pH로 유지된다. 침전의 양 또는 조성물의 균질도는 다양한 방법들을 사용하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 이것은 조성물을 분광분석측정기에 의해 조명을 통한 광 분산을 사용하여 정량적으로 측정될 수 있다. 또는 대안적으로, 균질도는 용액의 시각적 투명도를 육안으로 단순하게 관찰하여 정성적으로 측정될 수 있다. 일정 구현예들에서, 본 방법은 약 5% 미만의 균질도에 대한 상대 표준 편차를 가지는 약제학적 조성물을 제공한다. 대안적으로, 약 4%, 또는 대안적으로 약 3%, 또는 대안적으로 약 2%, 또는 대안적으로 약 1% 미만의 균질도에 대한 상대 표준 편차.In one aspect, one or more excipients may be used to maintain the solubility of the deoxycholate present in the formulation, or to increase the preservability. In one embodiment, the method comprises adding about 1% w / v benzyl alcohol. In certain embodiments, the formulations also include at least one excipient to help achieve an isotonic solution. Such excipients are well known in the art. In one embodiment, the method comprises adding about 1% w / v sodium chloride. In one embodiment, the method comprises adding both about 1% w / v benzyl alcohol and about 1% w / v sodium chloride. In certain embodiments, the method comprises adding both about 0.9% w / v benzyl alcohol and about 0.9% w / v sodium chloride. Using the methods disclosed herein, an aqueous solution comprising less than about 2% w / v of deoxycholic acid salt is maintained at a pH substantially sufficient to inhibit precipitation of deoxycholic acid salt. The amount of precipitation or the homogeneity of the composition can be measured using various methods. For example, this can be quantitatively measured using optical dispersion through illumination with a spectrophotometric instrument. Alternatively, the homogeneity can be measured qualitatively by simply observing the visual transparency of the solution with the naked eye. In certain embodiments, the method provides a pharmaceutical composition having a relative standard deviation for homogeneity of less than about 5%. Alternatively, relative standard deviation for homogeneity of about 4%, or alternatively about 3%, alternatively about 2%, or alternatively less than about 1%.

보관 온도는 제형물에서 데옥시콜린산 염의 용해도를 유지하는 데 도와줄 수 있다. 소정의 구현예들에서, 보관 온도는 약 17℃부터 약 27℃까지의 범위이다. 일정 구현예들에서, 보관 온도는 약 25℃ 내지 약 37℃의 범위이다. 다른 구현예들에서, 보관 온도는 약 2℃부터 약 8℃까지의 범위이다.The storage temperature can help to maintain the solubility of the deoxycholic acid salt in the formulation. In certain embodiments, the storage temperature ranges from about 17 DEG C to about 27 DEG C. In certain embodiments, the storage temperature ranges from about 25 캜 to about 37 캜. In other embodiments, the storage temperature ranges from about 2 DEG C to about 8 DEG C.

제형물에서 데옥시콜린산의 염의 농도는 약 0.5% w/v, 또는 대안적으로 약 0.7% w/v, 또는 대안적으로 약 1% w/v, 또는 대안적으로 약 1.2% w/v, 또는 대안적으로 약 1.4% w/v, 또는 대안적으로 약 2% w/v 미만인 것으로 참작된다. 바람직한 구현예에서, 데옥시콜린산의 염은 소듐 데옥시콜레이트이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 조성물은 0.5% w/v의 소듐 데옥시콜레이트를 포함한다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 조성물은 1% w/v의 소듐 데옥시콜레이트를 포함한다.The concentration of deoxycholic acid in the formulation is about 0.5% w / v, or alternatively about 0.7% w / v, or alternatively about 1% w / v, or alternatively about 1.2% w / v , Or alternatively about 1.4% w / v, or alternatively less than about 2% w / v. In a preferred embodiment, the salt of deoxycholic acid is sodium deoxycholate. In another preferred embodiment, the composition comprises 0.5% w / v sodium deoxycholate. In another preferred embodiment, the composition comprises 1% w / v of sodium deoxycholate.

한 가지 구현예에서, 수용성 제형물은 지방 세포들로 분리되어 투여되는 다수의 개별 용액들 내로 나뉜다. 예를 들면, 수용성 제형물은 5, 10, 15, 20, 25 또는 30개의 분리된 용액들, 소정의 경우들에서 50개까지의 분리된 용액들로 나뉜다.In one embodiment, the water-soluble formulations are divided into a plurality of individual solutions administered separately into adipocytes. For example, water-soluble formulations can be divided into 5, 10, 15, 20, 25 or 30 separate solutions, in some cases up to 50 separate solutions.

바람직한 구현예에서, 데옥시콜린산의 염은 소듐 데옥시콜레이트이다. 본 발명의 방법들은 피하 주사들을 포함하기 때문에, 체임버, 플런저 및 주사 바늘을 포함하는 주사기도 역시 제공되고, 여기에서 체임버는 본 발명의 제형물을 포함한다. 바람직하게, 체임버는 적어도 2 mL, 바람직하게는 많아야 4 mL의 제형물을 보유하기에 충분하다.In a preferred embodiment, the salt of deoxycholic acid is sodium deoxycholate. Because the methods of the present invention include subcutaneous injections, also a syringe comprising a chamber, a plunger and a needle is also provided, wherein the chamber comprises the formulation of the present invention. Preferably, the chamber is sufficient to hold at least 2 mL, preferably at most 4 mL of the formulation.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 하기 도식 1에서 나타난 바와 같이 보호된 시판되는 9-α,17-β-디하이드록시-5-α-안드로스탄-3-온으로부터 DCA의 합성을 제공한다.In another embodiment, the present invention provides the synthesis of DCA from protected 9-alpha, 17- beta -dihydroxy-5-aandostan-3-one protected as shown in Scheme 1 below.

도식 1: DCA의 합성 Scheme 1 : Synthesis of DCA

시판되는 9-α,17-β-디하이드록시-5-α-안드로스탄-3-온의 9-α,17-β 하이드록시기들은 하이드록시기들 중 하나는 재생되는 한편 다른 하이드록시기는 여전히 보호되는 조건들 하에서 제거될 수 있는 하이드록실 보호기들로서 차별적으로 보호된다. 이러한 차별적인 보호작용은 정식의 (orthogonal) 보호라고 언급되며 잘 알려진 반응시약들 및 반응 조건들을 사용한다. 한 가지 예에서, 하나의 하이드록시기는 아세틸기로서 보호되는 한편, 다른 하이드록시기는 벤질기로서 보호된다. 각 기는 다른 하이드록실 보호기가 그대로 보유되는 반응 조건들 하에서 선택적으로 제거될 수 있다.The 9-alpha, 17- beta hydroxy groups of commercially available 9- [alpha], 17- [beta] -dihydroxy-5-alpha -androstan-3-one have one of the hydroxy groups being regenerated while the other hydroxy group But are differentially protected as hydroxyl protecting groups that can be removed under still protected conditions. This differential protective action is referred to as orthogonal protection and uses well known reaction reagents and reaction conditions. In one example, one hydroxy group is protected as an acetyl group while the other hydroxy group is protected as a benzyl group. Each group can be selectively removed under reaction conditions in which the other hydroxyl protecting group is retained intact.

상대적으로 입체구조적으로 보호된 9-α-하이드록실기는 해당 기의 제거 이전에 참작된 반응들이 입체적 방해로 인해 이러한 위치에서 저해될 것 같기 때문에 보호될 필요가 없을 수 있는 것으로 참작된다. 상관없이, 본 하이드록실기의 보호는 본 기가 탈수화를 통한 하이드록실기의 제거가 기대될 때까지 그대로 유지되는 점이 적당하게 보장된다.The relatively stereostructically protected 9-a-hydroxyl groups are considered to be protected, since the reactions considered prior to the removal of that group are likely to be inhibited at this location due to steric hindrance. Regardless, the protection of the present hydroxyl groups is reasonably ensured to remain intact until removal of the hydroxyl groups through dehydration is expected.

정식으로 보호된 9-α,17-β-디하이드록시-5-α-안드로스탄-3-온, 화합물 1의 3-온 기는 소듐 보로하이드라이드와 같은 통상적인 환원제로 환원되어, 3-α-하이드록시 유도체를 제공하고, 이는 다음으로 보다 또 다른 정식의 보호기로 보호되어 화합물 2를 제공한다.The 3-on group of the compound 1 is reduced with a conventional reducing agent such as sodium borohydride to give 3-α, 17-? -Dihydroxy-5? -Androstan- -Hydroxy < / RTI > derivative, which is then protected with yet another formula protecting group to provide compound 2. < RTI ID = 0.0 >

화합물 2의 17-위치에서 하이드록실 보호기는 다음으로 선택적으로 제거되고 재생된 하이드록실기는 다음으로 CrO₃와 같은 적합한 산화 반응시약으로 산화되어 17-케토 유도체, 화합물 3를 제공한다. 화합물 3에서 17-케토기는 1,2-디하이드록시에탄 또는 1,3-디하이드록시프로판과의 반응과 같은 표준 케탈화 (ketalization)조건들 하에서 케탈로서 보호되어 (단지 설명적 목적으로 1,2-디하이드록시에탄으로의 케탈 형성을 설명함) 화합물 4를 제공한다.Hydroxyl protecting group from the 17-position of Compound (2) is a hydroxyl group, and then by the selective removal of being reproduced is then oxidized by a suitable oxidation reagent such as CrO ₃ provides a 17-keto derivative, Compound (3). The 17-keto group in compound 3 is protected as a ketal under standard ketalization conditions such as the reaction with 1,2-dihydroxyethane or 1,3-dihydroxypropane (only for illustrative purposes 1 and provides a 2-D, it described the formation of a ketal with hydroxy ethane) compound 4.

9-α-하이드록실의 탈보호는 필요에 따라 산-촉매화된 제거가 9,10-불포화 유도체, 화합물 5를 제공하는 조건들 하에서 해당 하이드록실기의 탈수화로 이어진다. 12-케토기의 생성은 크롬산 또는 TBHP (터르-부틸 하이드로퍼옥사이드) 및 NaOCl와 같은 산화 반응시약들로 화합물 5의 알릴성 산화에 의해 달성되고 화합물 6을 제공한다. 예를 들면, 미국 특허출원 일련번호 제 61/348,686호를 참조하라. 대안적으로, 알릴성 산화는 촉매로서 약 2 내지 5 당량의 TBHP 및 약 0.3 내지 0.5 당량의 CuI를 사용하여 달성된다. 반응은 아세토니트릴과 같은 용매에서 40℃로 약 40 내지 55시간 동안 수행된다. TBHP의 느린 일정량씩 첨가는 더욱 효과적인 산화를 가져온다. 형성된 산물은 화합물 6 및 해당하는 알릴성 알코올의 혼합물을 포함한다. 산물 혼합물은 다음으로 PCC로 산화되어 화합물 6을 제공한다.Deprotection of the 9- alpha -hydroxyl leads to the dehydration of the corresponding hydroxyl group under conditions which, if necessary, provide acid-catalyzed removal of the 9,10-unsaturated derivative, compound 5 . The formation of the 12-keto group is accomplished by allylic oxidation of compound 5 with oxidation reagents such as chromic acid or TBHP (tert-butyl hydroperoxide) and NaOCl and provides compound 6 . See, for example, U.S. Patent Application Serial No. 61 / 348,686. Alternatively, allylic oxidation is achieved using about 2 to 5 equivalents of TBHP as catalyst and about 0.3 to 0.5 equivalents of CuI. The reaction is carried out in a solvent such as acetonitrile at 40 DEG C for about 40 to 55 hours. The slow addition of TBHP leads to more effective oxidation. The formed product comprises a mixture of compound 6 and the corresponding allylic alcohol. The product mixture is then oxidized to PCC to provide compound 6. [

10% Pd/C 및 H₂와 같은 표준 조건들 하에서 화합물 6의 수소화는 화합물 7을 제공한다. LiAl(OBu^t)₃H와 같은 반응시약들로 화합물 7에서 12-케토기의 환원은 12-하이드록시 유도체, 화합물 8을 제공한다. 포타슘 tert-부톡사이드와 같은 염기의 존재 시 에틸트리페닐포스포니움 브롬을 사용하는 것과 같은 표준 위티그 (Wittig) 조건들 하에서 화합물 8의 올레핀화 (olefination)는 화합물 9를 제공한다. 루이스산의 존재 시 메틸 아크릴레이트와 같은 알킬 아크릴레이트의 첨가는 화합물 10을 제공하고, 여기에서 R은 메틸과 같은 알킬기이다. 화합물 10에서 이중결합의 환원은 다시 Pd/C 및 H₂와 같은 표준 수소화 조건들 하에서 진행하여 화합물 11을 제공한다. LiOH와 같은 염기로의 가수분해로 이어지는 3-OR₃의 탈보호는 DCA, 화합물 12를 제공한다.Hydrogenation of compound 6 under standard conditions such as 10% Pd / C and H ₂ provides compound 7 . Reduction of the 12-keto group in compound 7 with reaction reagents such as LiAl (OBu ^t ) ₃ H provides a 12-hydroxy derivative, compound 8 . Olefination of compound 8 under standard Wittig conditions such as using ethyltriphenylphosphonium bromide in the presence of a base such as potassium tert-butoxide provides compound 9 . Addition of an alkyl acrylate such as methyl acrylate in the presence of a Lewis acid provides compound 10 , wherein R is an alkyl group such as methyl. Reduction of the double bond in compound 10 proceeds again under standard hydrogenation conditions such as Pd / C and H ₂ to provide compound 11 . Deprotection of 3-OR ₃ leading to hydrolysis with a base such as LiOH provides DCA, compound 12 .

화합물 12 (미가공 DCA)는 메탄올 세척으로 더욱 정제되었고 에탄올로부터 재결정화되었다. 이것은 CH₂Cl₂ (25 부피)에 녹인 2 mol% MeOH로 희석되었고 35 내지 37℃로 1시간 동안 가열되었다. 슬러지는 28 내지 30℃로 식히도록 허용되었고 여과되었다. 필터 케이크는 CH₂Cl₂ (5 부피)로 세척되었고 DCA를 얻도록 진공 하에 40℃에서 건조되었다.Compound 12 (crude DCA) was further purified by methanol washing and recrystallized from ethanol. This was diluted with 2 mol% MeOH in CH ₂ Cl ₂ (25 vol) and heated to 35-37 ° C for 1 h. The sludge was allowed to cool to 28-30 < 0 > C and was filtered. The filter cake was washed with CH ₂ Cl ₂ (5 vol) and dried at 40 ° C under vacuum to obtain DCA.

DCA는 10% DI 물 / EtOH (12 부피)에 녹였고, 셀라이트 위로 연마 (polish) 여과되었으며, 10% DI 물 / EtOH (3 부피)로 세척되었다. 그 결과 얻은 15 부피의 여과물은 DI 물 (30 부피)에 첨가되었고 얇은 흰색 슬러지가 얻어졌다. 슬러지는 24시간 동안 수집되었고, 여과되었으며, DI 물 (20 부피)로 세척되었고, DCA를 얻도록 진공 하에 40℃에서 건조되었다.DCA was dissolved in 10% DI water / EtOH (12 volumes), polish filtered over celite and washed with 10% DI water / EtOH (3 volumes). The resulting 15 volume filtrate was added to DI water (30 vol) and a thin white sludge was obtained. The sludge was collected for 24 hours, filtered, washed with DI water (20 vol) and dried under vacuum at 40 ° C to obtain DCA.

DCA의 소듐 데옥시콜레이트와 같은 약제학적으로 허용가능한 염으로 전환은 통상적인 조건들을 통해 진행된다. 대안적으로, DCA로의 소듐 데옥시콜레이트와 같은 DCA의 약제학적으로 허용가능한 염의 전환도 역시 통상적인 조건들을 통해 진행된다.Conversion to a pharmaceutically acceptable salt such as sodium deoxycholate of DCA proceeds through conventional conditions. Alternatively, the conversion of a pharmaceutically acceptable salt of DCA, such as sodium deoxycholate to DCA, also proceeds through conventional conditions.

또 다른 구현예에서, 본 발명은In yet another embodiment,

약 8.1 내지 약 8.5의 pH를 가지는 완충된 수용성 용액을 포함하고, 또한 약 0.5%의 소듐 데옥시콜레이트 및 약 0.9%의 벤질 알코올을 더 포함하는:A buffered aqueous solution having a pH of about 8.1 to about 8.5, and further comprising about 0.5% sodium deoxycholate and about 0.9% benzyl alcohol.

안정화된 제형물로서, 제형물은 침전에 대비하여 안정화되고, 소듐 데옥시콜레이트는 도식 1에 따라 제조되는, 제형물을 제공한다.As a stabilized formulation, the formulation is stabilized against precipitation, and sodium deoxycholate is prepared according to Scheme 1. < tb > < TABLE >

또 다른 구현예에서, 본 발명은In yet another embodiment,

약 8.1 내지 약 8.5의 pH를 가지는 완충된 수용성 용액을 포함하고, 또한 약 1%의 소듐 데옥시콜레이트 및 약 0.9%의 벤질 알코올을 더 포함하는:A buffered aqueous solution having a pH of about 8.1 to about 8.5, and further comprising about 1% sodium deoxycholate and about 0.9% benzyl alcohol.

안정화된 제형물로서, 제형물은 침전에 대비하여 안정화되고, 소듐 데옥시콜레이트는 도식 1에 따라 제조되는, 제형물을 제공한다.
As a stabilized formulation, the formulation is stabilized against precipitation, and sodium deoxycholate is prepared according to Scheme 1. < tb >< TABLE >

실시예들Examples

실시예들에서 및 그 밖에 본 명세서에서, 약어들은 다음의 의미들을 가진다.
In the examples and elsewhere herein, abbreviations have the following meanings.

Mg = 밀리그램Mg = milligram

mL = 밀리리터mL = milliliters

Mm = 밀리미터Mm = millimeter

mM = 밀리몰라mM = millimole

T = 시간T = time

UV = 자외선UV = ultraviolet

v/v = 부피/부피v / v = volume / volume

w/v = 무게/부피 (g/mL)w / v = weight / volume (g / mL)

w/w = 무게/무게w / w = weight / weight

WFI = 주사용 물WFI = water for injection

mOsm = 밀리삼투몰
mOsm = milli-osmole mall

본 발명은 다음의 실시예들에 대한 참조에 의해 더 잘 이해되고, 이는 순수하게 본 발명의 예시적인 것으로 의도된다.
The present invention is better understood by reference to the following examples, which are intended to be purely exemplary of the invention.

실시예Example 1 One

소듐 Sodium 데옥시콜레이트의Deoxycholate 용액으로부터 농도 의존적 침전 Concentration-dependent precipitation from solution

서로 다른 농도에서 소듐 데옥시콜레이트의 용액들은 보관 1주 이후에 침전 형성에 대해 평가되었다. 결과들은 도 1 내지 도 4에 도시되고, 물 및 0.9% w/v 벤질 알코올만을 포함하는 수용성 용액으로 소듐 데옥시콜레이트의 약 0.5% 및 약 1% (w/v) 농도에서, 유의한 양의 침전물이 형성되어 피하 주사들을 위한 조성물로서 용액의 사용을 저해할 수 있다. 도 1 내지 도 4의 시각적 관찰에 의해, 침전의 양은 하기에 도표화된 바와 같이 순위가 매겨질 수 있다.Solutions of sodium deoxycholate at different concentrations were evaluated for precipitation formation after one week of storage. The results are shown in Figures 1 to 4 and show that at about 0.5% and about 1% (w / v) concentration of sodium deoxycholate with a water soluble solution containing only water and 0.9% w / v benzyl alcohol, Precipitates may form to inhibit the use of the solution as a composition for subcutaneous injections. By visual observation of Figures 1 to 4, the amount of precipitation can be ranked as tabulated below.

침전 순위는 "0"이 투명한 용액을 말하고 "10"은 육안으로 바로 가시적인 실질적인 침전을 나타내는 혼합물을 말하는 것으로 추정된다.It is presumed that the precipitation order refers to a solution in which "0" is a transparent solution and "10" refers to a mixture that shows a substantial sediment that is directly visible to the naked eye.

이러한 관찰은 테스트된 농도 범위들에서, 침전 현상들이 실질적으로 데옥시콜레이트 농도에 의해 영향을 받았던 점을 보여준다. 침전에 미치는 pH의 효과를 확인하기 위하여, 용액들의 pH가 표 2에서 제공된 바와 같이 측정되었고, 이는 용액들의 pH가, 특히 1% 및 2% 용액들의 경우에 실질적으로 동일한 점을 보여준다. 더욱 희석된 용액 (0.5% 또는 1%)이 더욱 농축된 용액 (2%)보다 더 많은 침전을 제공하는 소듐 데옥시콜레이트의 역전된 수용성 용해도는 놀라운 관찰이고 침전 현상들이 용액들의 pH가, 특히 1% 및 2% 용액들의 경우에 다시 실질적으로 동일하기 때문에 pH와 직접적으로 관련되지 않은 증거도 역시 된다.This observation shows that, at the tested concentration ranges, precipitation phenomena were substantially affected by deoxycholate concentration. To confirm the effect of pH on the precipitation, the pH of the solutions was measured as provided in Table 2, which shows that the pH of the solutions is substantially the same, especially in the case of 1% and 2% solutions. The reversed aqueous solubility of sodium deoxycholate, which provides more precipitation than a more dilute solution (0.5% or 1%) than a more concentrated solution (2%), is a surprising observation, Evidence that is not directly related to pH is also true because again in the case of% and 2% solutions it is substantially the same.

이에 따라, 본 발명은 데옥시콜린산 용액들의, 희석된 0.4%부터 2% (w/v) 미만까지의 염의 놀라운 침전은 용액 pH를 증가시키는 단계에 의해, 이러한 용액들이 피하 주사들에 유용한 정도로 저해되는 점을 제공한다.
Thus, the present invention demonstrates that the surprising precipitation of salts from diluted 0.4% to less than 2% (w / v) of deoxycholic acid solutions can be achieved by increasing the solution pH to such an extent that these solutions are useful for subcutaneous injections Provide a point of inhibition.

실시예Example 2 2

벤질 알코올의 존재 및 부재 시 소듐 In the presence and absence of benzyl alcohol, sodium 데옥시콜레이트Deoxycholate ( ( APIAPI ) ) 제형물들Formulations

1. 소듐 포스페이트 (10 mM), 염화나트륨 (75 내지 90 mM), 벤질 알코올 (0.9%), 데옥시콜린산, pH 8.3을 포함하는 소듐 데옥시콜레이트 (0.5% 및 1%)의 조성물이 제조되었다.1. A composition of sodium deoxycholate (0.5% and 1%) comprising sodium phosphate (10 mM), sodium chloride (75-90 mM), benzyl alcohol (0.9%), deoxycholic acid, pH 8.3 was prepared .

2. 벤질 알코올이 없는 소듐 포스페이트의 등장성 조성물이 자유산 형태, 즉 다음과 같은 데옥시콜린산을 사용하여 제조되었다.
2. An isotonic composition of benzyl alcohol-free sodium phosphate was prepared using the free acid form, i.e., deoxycholic acid as follows.

a. 10 a. 10 mgmg // mLmL 로 100 To 100 mLmL 등장성 배치들의 제조 Manufacture of isotonic batches

1.0 g의 데옥시콜린산 (DCA)이 염기성 용액이 70 mL 물, 142 mg 무수 이염기 포스페이트 및 267 μL의 10 M NaOH과 함께 만들어진 이후에만 용액에 첨가되었다. API가 용액으로 첨가되는 데 약 20분이 걸렸다. 용액의 pH는 11.1이었다. HCl의 신속한 첨가는 일정의 침전을 유발하는 것으로 알려졌으며, 그래서 225 μL의 1 M HCl가 천천히 첨가되어 용액을 pH 8.3로 맞추었다. 용액은 추가 15분 동안 혼합되도록 허용되었다. 물로 부피를 100 mL까지 맞춘 이후에, 삼투도는 51 mOsm가 되는 것으로 확인되었다. 859 mg의 NaCl의 첨가는 삼투도를 305 mOsm까지로 맞추었다.1.0 g of deoxycholic acid (DCA) was added to the solution only after the basic solution was made with 70 mL of water, 142 mg of anhydrous dibasic phosphate and 267 μL of 10 M NaOH. It took about 20 minutes for the API to be added as a solution. The pH of the solution was 11.1. The rapid addition of HCl was known to cause a constant precipitation, so 225 μL of 1 M HCl was added slowly to bring the solution to pH 8.3. The solution was allowed to mix for an additional 15 minutes. After adjusting the volume to 100 mL with water, the osmosis was found to be 51 mOsm. The addition of 859 mg NaCl adjusted the osmosis to 305 mOsm.

이와 같이 제조된 용액은 적당한 양의 무균의 물의 첨가에 의해 재구성될 수 있는 동결건조된 산물을 제공하도록 선택적으로 동결건조될 수 있다. 이에 따라, 본 발명은 또한 본 명세서에서 개시된 용액들의 동결건조된 산물들을 제공한다.
The solution thus prepared can be optionally lyophilized to provide a lyophilized product that can be reconstituted by the addition of an appropriate amount of sterile water. Accordingly, the present invention also provides lyophilized products of the solutions disclosed herein.

b. 10 b. 10 mgmg // mLmL 로 1000 To 1000 mLmL 등장성 배치들의 제조 Manufacture of isotonic batches

(상기) 섹션 a로부터 얻은 결과들은 10배로 증가될 때 완벽하게 규모가 증가되지 않았다. 900 mL의 물에, 1.4 g 무수 이염기 소듐 포스페이트, 8.6 g NaCl, 및 2.7 mL 10 M NaOH가 첨가되었다. 다음으로 10.0 g의 DCA가 첨가되었고 30분 동안 투명하게 혼합되도록 허용되었다. 용액의 pH는 10.4이었다. 1.5 mL의 1 M HCl가 천천히 첨가되었고 5분 동안 혼합되도록 허용되었다. 최종 pH는 8.1이었다. 추가 20 μL의 10 M NaOH가 pH를 8.3으로 맞추도록 첨가되어야 하였다. 물로 1000 mL까지 부피를 맞춘 이후에, 삼투도는 314 mOsm이었다.The results obtained from section a (above) were not fully scaled up by a factor of ten. To 900 mL of water, 1.4 g of anhydrous dibasic sodium phosphate, 8.6 g of NaCl, and 2.7 mL of 10 M NaOH were added. Next, 10.0 g of DCA was added and allowed to mix transparently for 30 minutes. The pH of the solution was 10.4. 1.5 mL of 1 M HCl was slowly added and allowed to mix for 5 minutes. The final pH was 8.1. An additional 20 μL of 10 M NaOH was added to adjust the pH to 8.3. After adjusting the volume to 1000 mL with water, the degree of permeation was 314 mOsm.

1 M HCl의 첨가 과정 동안 pH 변화의 관찰들을 기초로 하여, 10 mg/mL API로 1000 mL 배치들의 경우에, 단지 1.0 mL의 1 M HCl가 즉시 첨가되고 다음으로 적은 부피들의 산으로 천천히 적정되어야 하는 점이 결정되었다. 1000 mL의 10 mg/mL API를 위한 제안된 첨가의 순서는 표 3에 정리된다.
On the basis of observations of pH changes during the addition of 1 M HCl, in the case of 1000 mL batches with a 10 mg / mL API, only 1.0 mL of 1 M HCl is added immediately and then slowly titrated with a small volume of acid . The order of the proposed additions for 1000 mL of 10 mg / mL API is summarized in Table 3.

c. 5 c. 5 mgmg // mLmL 로 100 To 100 mLmL 등장성 배치들의 제조 Manufacture of isotonic batches

0.50 g의 데옥시콜린산 (DCA)은 염기성 용액이 70 mL 물, 142 mg 무수 이염기 포스페이트 및 134 μL의 10 M NaOH과 함께 만들어진 이후에만 용액에 첨가되었다. API가 용액으로 첨가되는 데 약 20분이 걸렸다. 용액의 pH는 10.7이었다. HCl의 신속한 첨가는 일정의 침전을 유발하는 것으로 알려졌으며, 그래서 115 μL의 1 M HCl가 천천히 첨가되어 용액을 pH 8.3로 맞추었다. 용액은 추가 15분 동안 혼합되도록 허용되었다. 물로 부피를 100 mL까지 맞춘 이후에, 삼투도는 39 mOsm가 되는 것으로 확인되었다. 859 mg의 NaCl의 첨가는 삼투도를 294 mOsm까지로 맞추었다.
0.50 g of deoxycholic acid (DCA) was added to the solution only after the basic solution was made with 70 mL of water, 142 mg of anhydrous dibasic phosphate and 134 μL of 10 M NaOH. It took about 20 minutes for the API to be added as a solution. The pH of the solution was 10.7. Rapid addition of HCl was known to cause constant precipitation, so 115 μL of 1 M HCl was slowly added to adjust the solution to pH 8.3. The solution was allowed to mix for an additional 15 minutes. After adjusting the volume to 100 mL with water, the osmosis was found to be 39 mOsm. Addition of 859 mg of NaCl adjusted the osmosis to 294 mOsm.

d. 5 d. 5 mgmg // mLmL 로 1000 To 1000 mLmL 등장성 배치들의 제조 Manufacture of isotonic batches

(상기) 섹션 c로부터 얻은 결과들은 10배로 증가될 때 완벽하게 규모가 증가되지 않았다. 900 mL의 물에, 1.4 g 무수 이염기 소듐 포스페이트, 8.6 g NaCl, 및 1.3 mL 10 M NaOH가 첨가되었다. 다음으로 5.0 g의 DCA가 첨가되었고 30분 동안 투명하게 혼합되도록 허용되었다. 용액의 pH는 8.6이었다. 350 μL의 1 M HCl만이 첨가된 이후에, pH는 8.0으로 강하되었다. 추가 25 μL의 10 M NaOH가 pH를 8.4로 맞추도록 첨가되어야 하였다. 물로 1000 mL까지 부피를 맞춘 이후에, 삼투도는 305 mOsm이었다. 1 M HCl의 첨가 과정 동안 pH 변화의 관찰들을 기초로 하여, 5 mg/mL API로 1000 mL 배치들의 경우에, 용액은 적은 부피들의 1 M HCl로 천천히 적정되어야 하는 점이 결정되었다. 1000 mL의 5 mg/mL를 위한 제안된 첨가의 순서는 표 3에 정리된다. 표 3은 등장성 1000 mL 무-벤질 알코올 제형물의 첨가 순서 (왼편부터 오른편까지)를 나타낸다.The results from Section c (above) were not fully scaled up by a factor of ten. To 900 mL of water, 1.4 g of anhydrous dibasic sodium phosphate, 8.6 g of NaCl, and 1.3 mL of 10 M NaOH were added. Next, 5.0 g of DCA was added and allowed to mix transparently for 30 minutes. The pH of the solution was 8.6. After only 350 μL of 1 M HCl was added, the pH dropped to 8.0. An additional 25 μL of 10 M NaOH was added to adjust the pH to 8.4. After adjusting the volume to 1000 mL with water, the permeability was 305 mOsm. Based on observations of pH changes during the course of the addition of 1 M HCl, it was determined that in the case of 1000 mL batches with 5 mg / mL API, the solution should be slowly titrated with small volumes of 1 M HCl. The order of the proposed addition for 1000 mL of 5 mg / mL is summarized in Table 3. Table 3 shows the order of addition (from left to right) of an isotonic 1000 mL no-benzyl alcohol formulation.

Claims

약 0.4% w/v부터 약 2% w/v 미만까지의 데옥시콜린산의 염 및 약제학적으로 허용가능한 부형제로 필수적으로 구성된 침전 안정한 수용성 조성물로서, 상기 조성물은 약 8.1부터 약 8.5까지의 pH로 유지되는, 조성물.A precipitated stable aqueous composition essentially consisting of from about 0.4% w / v to less than about 2% w / v of a salt of deoxycholic acid and a pharmaceutically acceptable excipient, wherein the composition has a pH of from about 8.1 to about 8.5 &Lt; / RTI >

제 1항에 있어서,
상기 데옥시콜린산의 염은 약 0.5% w/v부터 약 1% w/v까지의 양으로 존재하는, 조성물.The method according to claim 1,
Wherein the salt of deoxycholic acid is present in an amount from about 0.5% w / v to about 1% w / v.

제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 데옥시콜린산의 염은 약 0.5% w/v의 양으로 존재하는, 조성물.3. The method according to claim 1 or 2,
Wherein the salt of deoxycholic acid is present in an amount of about 0.5% w / v.

제 1항 또는 제 2항에 있어서,
상기 데옥시콜린산의 염은 약 1% w/v의 양으로 존재하는, 조성물.3. The method according to claim 1 or 2,
Wherein the salt of deoxycholic acid is present in an amount of about 1% w / v.

제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 부형제는 용매, 완충액, 보존제, 동결건조 보조제, 또는 그들의 조합인, 조성물.5. The method according to any one of claims 1 to 4,
Wherein the excipient is a solvent, a buffer, a preservative, a freeze-drying adjuvant, or a combination thereof.

제 5항에 있어서,
상기 부형제는 무균의 물과 같은 용매인, 조성물.6. The method of claim 5,
Wherein the excipient is a solvent such as sterile water.

제 5항에 있어서,
상기 부형제는 벤질 알코올과 같은 보존제인, 조성물.6. The method of claim 5,
Wherein the excipient is a preservative such as benzyl alcohol.

제 7항에 있어서,
상기 보존제는 0.9%의 벤질 알코올인, 조성물.8. The method of claim 7,
Wherein the preservative is 0.9% benzyl alcohol.

제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 약 8.3의 pH를 가지는, 조성물.9. The method according to any one of claims 1 to 8,
Wherein the composition has a pH of about 8.3.

제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 염은 알칼리 금속염인, 조성물.10. The method according to any one of claims 1 to 9,
Wherein the salt is an alkali metal salt.

제 10항에 있어서,
상기 알칼리 금속염은 소듐인, 조성물.11. The method of claim 10,
Wherein the alkali metal salt is sodium.

약 8.3의 pH로 완충된 무균의 수용성 용액;
약 0.5% w/v의 소듐 데옥시콜레이트;
약 0.9% w/v의 벤질 알코올; 및
약 1% w/v의 염화나트륨:
으로 필수적으로 구성된 침전 안정한 수용성 조성물.A sterile, aqueous solution buffered to a pH of about 8.3;
About 0.5% w / v sodium deoxycholate;
About 0.9% w / v benzyl alcohol; And
About 1% w / v sodium chloride:
&Lt; RTI ID = 0.0 > and / or < / RTI >

약 8.3의 pH로 완충된 무균의 수용성 용액;
약 1% w/v의 소듐 데옥시콜레이트;
약 0.9% w/v의 벤질 알코올; 및
약 1% w/v의 염화나트륨:
으로 필수적으로 구성된 침전 안정한 수용성 조성물.A sterile, aqueous solution buffered to a pH of about 8.3;
About 1% w / v sodium deoxycholate;
About 0.9% w / v benzyl alcohol; And
About 1% w / v sodium chloride:
&Lt; RTI ID = 0.0 > and / or < / RTI >

제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 데옥시콜린산은 다음의 도식에 따라 합성되는, 조성물:

14. The method according to any one of claims 1 to 13,
Wherein the deoxycholic acid is synthesized according to the following scheme:

제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항의 조성물을 지방 세포에 투여하는 단계를 포함하는, 지방 세포를 용해하는 방법.15. A method for dissolving adipocytes, comprising the step of administering the composition of any one of claims 1 to 14 to adipocytes.