KR20140131193A - 태반성장인자를 표적으로 하는 모발 성장 조절 방법 및 조성물 - Google Patents

Abstract

본원은 태반성장인자를 포함하는 모발 생장기 증가용 약학적 조성물, 화장용 조성물 및 태반성장인자를 표적으로 하는 모발 생장기 증대용 화합물 스크리닝 방법을 개시한다.
본원에 따른 조성물 및 방법은 태반성장인자의 조절을 통해 모발의 주기 중 생장기 기간을 증대시켜, 탈모의 개선, 완화, 치료 등에 유용하게 사용될수 있다.

Description

태반성장인자를 표적으로 하는 모발 성장 조절 방법 및 조성물 {Method and Composition for regulating hair growth targeting placental growth factor}

본원은 탈모증의 예방 또는 개선용 조성물 및 방법에 관한 것이다.

현재 선진국은 빠르게 고령화 사회로 진입하고 있으며, 탈모증은 전형적인 노화현상의 하나로 50대 이상 남성에서 50%이상 발생하고 있다. 노화성 탈모는 대부분의 노인이 겪고 있는 문제로 이에 대한 치료법은 삶의 질의 향상과 더불어 절실히 요구된다. 탈모증은 머리나 신체에서 털이 소실되는 것을 말하는 것으로, 현재 탈모증을 치료하는 방법은 크게 약물적 치료와 수술적인 방법이 있으나 많은 한계가 있다. 예를 들어 미녹시딜은 혈관확장을 통해, 프로페시아는 남성호르몬의 억제를 통해 탈모를 치료하고 있지만, 이와 같은 약은 모발의 성장주기에 근거한 근본적인 치료법이 아닐뿐더러 약을 이용한 치료는 털의 손실을 막아줄 수 있지만 치료를 중단하였을 경우, 더욱 빠르게 모발 손실을 일으킬 수 있으며, 모발 이식은 이식할 수 있는 모발 수의 제약 때문에 치료에 어려움이 있다.

미국특허 제6773881호는 모발성장을 조절하는 방법에 관한 것으로 VEGF 조절을 통한 모발성장 촉진 물질의 스크리닝 방법을 개시한다.

미국특허 제6844326호는 탈모증치료 방법에 관한 것으로 사이클린 의존성 카이나제 억제제인 p21을 이용한 탈모 치료 방법을 개시한다.

따라서 모발 생장주기 및 탈모 기전의 이해를 기반으로 하여 모발 성장을 촉진시키거나 모발 주기에서 생장기 시기의 모낭을 길게 유지시키는 물질에 치료제의 개발이 필요하다.

본 명세서 전체에 걸쳐 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

모발 생장주기 및 탈모 기전의 이해를 기반으로 하여 모발 성장을 촉진시키거나 모발 주기에서 생장기 시기의 모낭을 길게 유지시킬 수 있는 방법 또는 조성물을 제공하고자 한다.

한 양태에서 본원은 태반성장인자를 포함하는 모발 생장기 증가용 약학적 조성물을 제공한다.

본원에 사용되는 상기 태반성장인자는 본원에 따른 활성을 나타내는 한 다양한 종류 및 형태가 사용될 수 있으며, 예를 들면 전장, 활성 단편, 태반성장인자 수용체 결합부위 또는 태반성장인자 펩타이드모방체가 사용될 수 있다.본원에 따른 다른 바람직한 구현예에서 상기 태반성장인자는 태반성장인자 1 내지 4 중 하나 이상, 특히 태반성장인자 1, 2, 또는 4, 더욱 특히 태반성장인자 -2 또는 4가 사용된다.

본원에 따른 모발은 신체의 다양한 부위에 존재하는 것으로, 예를 들면 두피, 안면, 상기 두피 및 안면을 제외한 등, 다리, 가슴, 겨드랑이와 같은 신체 부위의 모발을 포함하는 것이나, 이로 제한하는 것은 아니다.

본원에 따른 생장기 증가용 조성물은 모낭의 생장기 증가가 필요한 다양한 질환, 상태 등 또는 발모제로서 사용될 수 있으며, 예를 들면 탈모증의 완화, 개선, 예방 또는 치료에 사용될 수 있다. 예를 들면 남성형탈모증, 여성형탈모증, 원형탈모증, 휴지기탈모증, 성장기탈모증, 항암치료 유발성탈모증, 약물 유발성 탈모증, 발모벽에 사용될 수 있으나, 이로 제한하는 것은 아니다.

다른 측면에서 본원은 또한 모발 생장기를 조절하는 물질의 스크리닝 방법을 제공한다. 본원에 따른 일 구현예에서 상기 방법은 시험물질을 제공하는 단계; 모낭 또는 모낭유래 세포를 제공하는 단계; 상기 모낭 또는 모낭유래 세포를 시험물질로 처리하는 단계; 및 상기 시험물질이 상기 모낭 또는 모낭유래 세포의 PLGF를 조절하는지 여부를 평가하는 단계를 포함하며, 상기 평가하는 단계는 대조군과 비교하여 PLGF의 발현 또는 활성을 상향 조절하는 물질을 후보물질로 선별한다.

본원에 따른 스크리닝 방법에 의해 선별된 물질은 다양한 신체 부위에 존재하는 모발 예를 들면 두피, 안면, 상기 두피 및 안면을 제외한 등, 다리, 가슴, 겨드랑이와 같은 신체 부위의 모발에 효과가 있다.

본원에 따른 방법에서 상기 PLGF의 발현의 상향 조절은 전사단계, 번역단계, 또는 전사 및 번역단계에서의 조절, 또는 PLGF의 활성을 증가시키는 것을 포함하는 것이다.

다른 측면에서 본원은 또한 본원에 따른 조성물 또는 태반성장인자 또는 그 유사체를 포함하는 모발 생장기 증가용 화장용 조성물을 포함하며, 화장용 조성물을 그 사용형태에 따라 다양한 제형으로 제조될 수 있다.

본원에 따른 PLGF의 조절을 통한 모발 생장기 증대 조성물 및 방법은 모발 생장주기 및 탈모 기전의 이해를 기반으로 하여 모발 성장을 촉진시키거나 모발 주기에서 생장기 시기의 모낭을 길게 유지시킬 수 있어, 탈모의 개선, 완화 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.

도 1a는 엑스 비보 상태의 모낭기관을 배양에서 PLGF가 모발길이 성장에 미치는 영향을 나타낸 결과이다. 모낭의 길이는 스테레오 현미경을 이용하여 배양 4일 및 8일째 촬영한 결과(a) 및 이를 그래프 (b)로 나타내었다. 결과는 평균 ± SE(Standard Error)로 나타냈다. *P는 대조군 대비 <0.05이다. 그래프 각 선에 기재된 숫자는 대조군과 대비한 비를 퍼센트로 나타낸 것이다.
도 1b는 PLGF에 의한 모기질 케라티노사이트의 증식 유도를 나타내는 것으로, 세 명의 대상체 유래의 털망울의 케라티노사이트에 대한 면역형광 분석 결과이다. Ki67 양성은 붉은 색, DAPI로 염색된 핵은 파란색으로 표시되며, 정량 분석을 위해 Ki67 양성 세포의 수를 세어 DAPI 염색된 세포수에 대하여 적정화(normalize)하였다. 결과는 평균 ± SE로 나타냈다. *P는 대조군 대비 <0.05이다. 스케일 바는 100μm이고, 현미경 촬영 배율은 x200이다.
도 2a는 PLGF에 의한 hDPC의 증식 및 모발 성장 유도와 관련된 다양한 유전자의 mRNA 발현 증가를 나타내는 것으로, hDPC를 50 ng/mL PLGF로 처리한 후, 30분(a) 및 24시간 (b)째 총 RNA를 추출하여 정량 실시간 PCR (중합효소연쇄반응)로 분석한 결과이다.
도 2b는 PLGF에 의한 hDPC의 증식 및 모발 성장 유도와 관련된 다양한 유전자의 mRNA 발현 증가를 나타내는 것으로, hDPC를 50 ng/mL PLGF로 24시간 처리한 후에 총 RNA를 추출하여 역전사 PCR로 분석한 결과이다.
도 3a는 PINGS에 의한 hDPC의 생존기간 증가를 나타내는 것으로, hDPC를 표시된 양의 PLGF로 처리한 후, 24시간(a) 및 72시간 (b)째 웨스턴블랏으로 분석한 결과이다.
도 3b는 PINGS에 의한 hDPC의 생존기간 증가를 나타내는 것으로, hDPC를 1μM LY294002 (Akt -Protein Kinase B- 억제제, a) 또는 PD98059 (ERK - Extracellular signal-regulated kinase- 억제제, b)로 각각 48시간 및 24시간 동안 처리한 후에 총 RNA를 추출하여 실시간 정량 PCR로 분석한 결과이다. *P는 대조군 대비 <0.05이다.
도 4a는 PLGF에 의한 모낭 성장 촉진 및 생장기 기간 증가 효과를 나타내는 것으로 대조군, PLGF 또는 미녹시딜로 각각 처리 후 5일째 수득한 피부 시료에 대한 H&E 염색을 통한 조직분석 (a) 및 모낭 길이 (b) 및 피부 두께(c)를 측정한 결과이다. 각 막대그래프에 표시된 숫자는 대조군과 대비하여 변화한 비를 퍼센트로 나타낸 것이며, 결과는 평균 ± SE로 나타냈고, *P는 대조군 대비 <0.01이다. 스케일 바는 100μm이고, 현미경 촬영 배율은 x200이다.
도 4b는 PLGF에 의한 모낭 성장 촉진 및 생장기 기간 증가 효과를 나타내는 것으로 대조군, PLGF 또는 미녹시딜로 각각 처리 후 21일째 수득한 피부 시료에 대한 H&E 염색을 통한 조직분석 (a) 및 모낭 직경 (b) 및 세포사멸 (c)을 측정한 결과이다. 모낭직경은 “Auber" 선으로 불리는 가장 두꺼운 부분을 측정하였으며, 세포사멸여부는 모낭의 케라티노사이트를 이용하여 TUNEL 방법으로 측정하였으며, TUNEL 양성 세포는 초록색 형광으로 표시된다. 각 막대그래프에 표시된 숫자는 대조군과 대비하여 변화한 비를 퍼센트로 나타낸 것이며, 결과는 평균 ± SE로 나타냈고, *P는 대조군 대비 <0.01이다. 스케일바는 100μm이고, 현미경 촬영 배율은 x200이다.
도 5는 PLGF에 의한 생장기 모발 성장 촉진 효과를 나타내는 것으로, 탈모가 유도된 C57BL/6 마우스를 대조군, PLGF 또는 미녹시딜로 처리한 후 (a), 41일째, 피부조직에 대한 H&E 염색을 통한 분석 (b) 및 모발주기 스코어 (c) 및 피부 두께 (d)를 측정한 결과이다. 모발주기 스코어는 배정된 값 (telogen=1, anagen I 내지 VI = 2 내지 7)을 사용하여 측정하였으며, 피부 두께는 표피로부터 피하지방까지의 두께를 측정한 것이다. 결과는 평균 ± SE로 나타냈고, *P는 대조군 대비 <0.05, **P는 대조군 대비 <0.01이다. 스케일바는 100μm이고, 현미경 촬영 배율은 x200이다.

본원은 태반성장인자의 감소가 탈모와 관련성이 있다는 발견에 근거한 것으로, 태반성장인자의 처리에 의해 발모가 촉진되고, 모발주기 중 생장기의 기간이 증대되며 및 모발 두께가 향상되는 것을 발견하였다.

따라서 한 양태에서 본원은 태반성장인자를 표적으로 하는 모발 성장 및 모발 두께의 조절방법에 관한 것이다. 본 방법은 태반성장인자의 유전자 발현 조절 및/또는 태반성장인자 단백질의 생산/농도 증가 및/또는 활성을 조절하는 것에 관한 것이다.

본원에서 조절 (modulation)이란, 유전자의 mRNA로의 전사 증가, 또는 전사된 mRNA의 단백질로의 번역 조절, 및/또는 단백질의 생물학적 기능의 활성 조절을 포함하는 것으로 일 구현예에서는 상향 조절을 의미한다. 나아가 조절이란, 인비트로 상태에서의 조절, 인비보 상태에서의 조절, 엑스비보 상태에서의 조절을 모두 포함하는 것이다.

모낭(Hair follicle)은 매우 복잡한 해부학적 구조와 분화시스템을 가지고 있다. 모낭은 털세움근(Arrector pili)과 피지샘(Sebaceous gland)의 관(duct)이 부착된 부위를 기준으로 누두부(Infundibulum), 협부(Isthmus), 하부(Inferior segment)로 구분된다. 맨 아래 부분에 위치하는 모근 부위에는 진피유두(Dermal papilla; DP)와 모기질(Hair matrix) 부분이 존재한다. 하부(Inferior segment) 부위는 다시 안쪽에서부터 털줄기(Hair shaft), 속뿌리싸개(Inner root sheath; IRS), 겉뿌리싸개(Outer root sheath; ORS), 및 진피집(Dermal sheath)으로 구성된다. 생장기 동안에 모기질세포(Hair matrix cell)는 활발히 분열하여 털을 생성한다. 이때 털집 하부의 모기질 쪽으로 돌출된 진피유두(Dermal papilla)는 털집 형성에 매우 중요하여 만일 진피유두부를 제거하면 털집이 털줄기를 생산하는 능력을 잃어버리게 된다.

성장하는 모발은 성장주기가 있으며, 크게 생장기(Anagen phase), 퇴행기(Catagen phase) 및 휴지기 (Telogen phase)로 구성된다. 생장기는 모발의 성장이 일어나는 시기이고, 퇴행기는 모발의 성장이 느려지는 시기이며, 휴지기는 모발의 성장이 멈춰있는 시기이다. 인간 두피는 모발의 85~90%는 생장기, 1% 미만은 퇴행기, 14%는 휴지기에 있다. 생장기를 거쳐 퇴행기가 시작되면 모기질에서 세포분열과 멜라닌 생성이 중지되고, 털망울(Hair bulb)은 수축되며, 겉뿌리싸개는 진피 유두와 분리된다. 털이 위로 이동하면서 털집의 하부는 소퇴되어 섬유성막으로 둘러싸인 상피세포의 가는 끈 모양의 상피세포색 (Strand of epithelial cell)을 남기고, 속뿌리싸개의 성장도 멈추고, 털줄기의 하부는 겉뿌리싸개에서 형성된 케라틴(Keratin)에 둘러싸이게 되는데 이를 곤봉털(Club hair)이라 부른다. 이러한 모발성장의 주기적 변화는 모낭의 표피 및 진피 성분의 빠른 변화 및 재구축을 초래한다.

본원에 따른 PLGF의 조절을 통한 모발 성장 및 모발 두께의 조절은 특히 모낭 성장주기 중 특히 생장기의 기간을 증대시킨다. 따라서 다른 측면에서 본원은 태반성장인자를 포함하는 모발 생장기 증가용 약학적 조성물을 제공한다.

여기서 증대란 생장기의 기간이 PLGF가 조절되지 않은 경우와 비교하여 증가한 것으로, 예를 들면 약 5% 이상, 특히 10% 이상, 더욱 특히 20% 이상 증가한 것이나, 이로 제한하는 것은 아니며, 당업자라면, 목적에 적절한 범위를 설정할 수 있을 것이다. 또는 모발수의 증대로부터 추정할 수 있다.

본원에 따른 조성물은 탈모의 완화, 개선, 예방, 또는 치료에 효과가 있다. 본원에서 사용된 용어 "치료" , “완화” 또는 “개선” 이란 본원 조성물의 투여로 관련 질환의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본원이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.

본원에서 사용한 "대상체"라는 용어는 질환의 예방, 치료, 관찰 또는 실험 대상인 동물, 특히 포유류, 더욱 특히는 인간이다.

본원에서 사용한 "예방, 개선 또는 치료적 유효량"이라는 용어는, 목적하는 효과를 나타내기에 충분한 양으로, 탈모의 정도 및/또는 병용되는 기타 약물에 따라 달라질 수 있으며, 예를 들어 모발수 증대와 같은 발모 촉진, 탈모증상의 경감, 진행의 억제, 중증도의 감소 등을 포함하여 연구자, 의사 또는 기타임상의에 의해 결정될 수 있는 대상체에서 생물학적 또는 의약적 반응을 유도해내는 유효성분을 포함하는 약학조성물의 양을 의미한다.

태반성장인자는 VEGF (혈관내피세포성장인자) 서브 패밀리의 일원으로 VEGF와 42%의 상동성을 가지며, 발생과정에서 혈관신생에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. PLGF는 주로 임신기간 동안 태반의 트로포블라스트에서 많이 발현되나, 다른 조직 예를 들면 미엘로사이트, 민무늬근육세포, 내피전구세포 등에서도 발현되며, 세포내에서 세포막, 세포질 또는 분비된 형태로 존재한다. PLGF는 발현과정에서 대체 스플라이싱 기전 (alternative splicing)에 의해 PLGF-1 (131개 아미노산 aa), 2 (152개 aa), 3 (203개 aa) 및 4의 세 종류의 아이소형태의 단백질이 생성된다. 이 중 PLGF-2 및 4는 상당히 염기성인 헤파린 결합능을 갖는 21개의 아미노산을 C-말단쪽에 포함한다. 마우스의 경우에는 PLGF-2에 상응하는 한 가지 형태의PLGF만이 존재한다. PLGF와 관련된 사항은 예를 들면 Bate, Biochem Soc Trans. 2011 December; 39(6): 1576-1582을 참조할 수 있다.

본원의 조성물에는 본원에 따른 효과를 나타내는 한 다양한 천연 또는 합성된 태반성장인자 또는 그 등가물이 포함될 수 있다. 등가물이란 태반성장인자의 활성을 가지고 있는 변형체, 변이체, 유사체 또는 유도체를 포함하는 것으로, 천연 또는 합성된 것일 수 있다. 예를 들면 전장의 PLGF는 물론, 이의 활성 단편, 이의 수용체에의 결합부위, 또는 기타 활성부위, 또는 일부 핵산 또는 아미노산의 변이된 것을 포함하는 것이며, 재조합 단백질은 물론, 펩타이드모방체를 포함하는 것이다. 펩티드모방체는 천연 유래의 펩타이드를 구조적 및/또는 활성의 측면에서 모방한 물질로 하나 이상의 비 펩타이드성 또는 펩타이드에서는 발견되지 않는 비천연 화학구조 및 결합을 포함하는 물질을 의미한다.

본원에는 다양한 유래 및 형태의 PLGF가 사용될 수 있으며, 특히 포유류 유래의 것이 바람직하며, 특히 인간유래의 것이 바람직하다. 인간유래의 태반성장인자는 공지되어 있으며, 예를 들면 유전자 서열은 NM_002632 (PlGF-2), 단백질 서열은 (NP_002623.2) 로 공지되어 있다. 또한 PLGF 1 내지 4가 사용될 수 있으며, 본원에 따른 일 구현예에서는 PLGF 1 또는 2 또는 그 혼합물, 특히 PLGF-2, 특히 인간유래 PLGF-2가 사용된다.

본원에는 태반성장인자의 mRNA 및/또는 단백질 수준에서의 발현을 증가 및/또는 태반성장인자의 활성을 증가시키는 다양한 물질이 포함될 수 있다.

다른 측면에서 본원은 태반성장인자를 포함하는 모발 생장기 증가용 약학적 조성물을 제공한다. 본원에 따른 조성물은 모발 생장기의 증가를 통한 발모 촉진, 다양한 탈모증의 완화, 개선, 예방 또는 치료를 위해 사용될 수 있으며, 상기 조성물이 적용될 수 있는 범위는 탈모가 발생한 부위라면 특별히 제한되지 않으며, 바람직하게는 두피, 안면 또는 기타 신체부위 예를 들면 겨드랑이, 가슴 등에 사용될 수 있으며 다양한 투여 경로, 예를 들면 전신 또는 국소, 특히 국소 투여, 경구, 경피, 또는 주사, 특히 경피 경로로 투여될 수 있다. 또한 본원에 따른 조성물은 PLGF의 증가 또는 활성화를 유도하여 모낭의 생장기 증가를 통한 발모를 촉진하는 것으로, 모낭의 생장기 증가가 필요한 다양한 질환, 상태 등 또는 발모제로서 사용될 수 있으며, 예를 들면 남성형탈모증, 여성형탈모증, 원형탈모증, 휴지기탈모증, 성장기탈모증, 항암치료 유발성탈모증, 약물 유발성 탈모증, 발모벽에 사용될 수 있으나, 이로 제한하는 것은 아니다.

본원에 따른 치료제 또는 약학 조성물은 일반적으로 사용되는 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 적합한 형태로 제형화될 수 있다. "약학적으로 허용되는"이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증 등과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로즈 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올, 리포좀 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있으며, 표적 기관에 특이적으로 작용할 수 있도록 표적 기관 특이적 항체 또는 기타 리간드를 상기 담체와 결합시켜 사용할 수 있다. 더 나아가 당해 기술분야의 적정한 방법으로 또는 레밍턴의 문헌(Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제형화할 수 있다.

본원의 조성물의 투여방법은 특별히 이에 제한되는 것은 아니며, 공지된 억제제의 투여방법을 적용할 수 있으며, 목적하는 방법에 따라 비경구 투여(예를 들어 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여가 바람직하며, 비경구 투여의 경우 피부에 도포 또는 붙이는 패치형태로 투여할 수 있으며, 다른 경로 및 수단을 배제하는 것은 아니다. 전형적인 약물의 경우 투약단위체는, 예를 들어 약 0.001mg 내지 100mg를 포함하나 상기 범위의 이하 및 이상의 범위를 배제하는 것은 아니다. 일일 투여량은 약 0.1㎍ 내지 10g 일 수 있으며, 하루 일회 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다.

투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 중증도 등에 따라 그 범위가 매우 다양하며, 공지된 투여량을 적용할 수 있다.

본원에 따른 약학 조성물의 치료적 유효량은 약 0.1 내지 500μg/Kg 특히 약 10 내지 약 400μg/Kg의 양으로 사용될 수 있다.

투여량은 대상체의 조건 예를 들면 연령, 체중 및 식이, 제제의 강도, 질환 상태의 진행, 및 투여 방식 및 시간 및 구체적 PLGF 조절제에 따라 가변적일 것이다. 투여될 최적의 투여량은 당해 기술분야의 통상을 지식을 가진 자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본원의 약학 성물은 상술한 유효성분 이외에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 또는 유효성분의 용해성 및/또는 흡수성을 유지/증가시키는 화합물을 추가로 함유할 수 있다. 또한 본원의 조성물은 탈모의 예방 및/또는 개선을 위하여 단독으로, 또는 수술, 약물치료 및 생물학적반응조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.

다른 양태에서 본원은 상술한 바와 같은 본원에 따른 조성물 또는 태반성장인자를 포함하는 모발 생장기 기간의 증가용 화장용 조성물을 개시하며, 함량은 목적하는 제품의 구체적 용도 또는 제형 등에 따라 달라질 수 있으나, 전체 조성물 중에 약 0.1 내지 30 % (w/v)로 함유될 수 있으며, 약 5 내지 25 % (w/v), 약 5 내지 20 % (w/v)로 포함될 수 있거나 또는 약 100μg - 500μg/kg, 특히 약 300μg의 양으로 사용될 수 있다.

본원의 화장 조성물은 상기 유효성분 이외에 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.

또한 본원의 화장 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 적절한 다양한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 모발팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본원 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.

본원 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될수 있다.

본원 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리움 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다. 바람직한 투여 유형에 따르면, 본 발명의 조성물은 최소한 하나의 약학적으로 허용되는 부형제, 특히 피부학적으로 허용 가능한 부형제를 포함할 수 있다.

또한, 상기 각 제형의 피부용 조성물에 있어서, 상기한 필수 성분 이외의 다른 성분들은 기타 피부용 조성물 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 선정하여 배합할 수 있다.

본원에 따른 조성물은, 본 분야의 숙련가에게 알려진 보조제인, 증점제, 보존제, 향료, 착색제, 화학 또는 무기염류 필터, 보습제, 열 온천수 등에서 선택되는 최소한 하나의 보조제를 또한 포함할 수 있다. 예들 들면 화장품에 통상 사용되는 보존제는, 항균 활성을 가지는 분자, 예를들면 카프릴 유도체 (카프릴로일글리신 및 글리세릴 카프릴레이트), 예를들면 헥산디올 및 소듐 레불리네이트, 아연 및 구리 유도체 (글루콘 산염 및 PCA), 피토스핑고신 및 이의 유도체, 벤조일 페록사이드, 피록톤올아민, 아연 피리치온 및 셀레늄 황화물, 에코나졸, 케토코나졸, 또는 국소용 항생제 예를 들면 에리트로마이신 및 클린다마이신을 들 수 있다.

다른 측면에서 본원은 또한 모발 생장기를 조절하는 물질의 스크리닝 방법을 제공한다. 본원에 따른 일 구현예에서, 상기 방법은 시험물질을 제공하는 단계; 모낭 세포를 제공하는 단계; 상기 모낭 세포를 시험물질로 처리하는 단계; 및 상기 시험물질이 상기 모낭 케라티노사이트의 PLGF를 조절하는지 여부를 평가하는 단계를 포함하며, 상기 평가하는 단계는 대조군과 비교하여 PLGF의 발현 또는 활성을 상향 조절하는 물질을 후보물질로 선별하는 단계를 포함할 수 있다.

본원에서 "시험물질"은 PLGF의 유전자 및/또는 단백질 수준에서의 발현 또는 활성을 증가시킬 것으로 기대되는 물질을 의미하여, 예를 들면 저분자량 화합물, 고분자량 화합물, 화합물들의 혼합물(예컨대, 천연 추출물 또는 세포 또는 조직 배양물), 또는 바이오의약품(예컨대, 단백질, 항체, 펩타이드, DNA, RNA, PNA), 또는 당 및 지질 등을 포함하나 이로 한정하는 것은 아니다.

상기 시험물질은 합성 또는 천연 화합물의 라이브러리로부터 얻을 수 있으며 이러한 화합물의 라이브러리를 얻는 방법은 당업계에 공지되어 있다. 합성 화합물 라이브러리는 Maybridge Chemical Co.(UK), Comgenex(USA), Brandon Associates(USA), Microsource(USA) 및 Sigma-Aldrich(USA)에서 상업적으로 구입 가능하며, 천연 화합물의 라이브러리는 Pan Laboratories(USA) 및 MycoSearch(USA)에서 상업적으로 구입 가능하다. 시험 물질은 당업계에 공지된 다양한 조합 라이브러리 방법에 의해 얻을 수 있으며, 예를 들어, 생물학적 라이브러리, 공간 어드레서블 패러럴 고상 또는 액상 라이브러리(spatially addressable parallel solid phase or solution phase libraries), 디컨볼루션이 요구되는 합성 라이브러리 방법, “1-비드 1-화합물” 라이브러리 방법, 그리고 친화성 크로마토그래피 선별을 이용하는 합성 라이브러리 방법에 의해 얻을 수 있다. 분자 라이브러리의 합성 방법은, DeWitt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90, 6909, 1993; Erb et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 91, 11422, 1994; Zuckermann et al., J. Med. Chem. 37, 2678, 1994; Cho et al., Science 261, 1303, 1993; Carell et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33, 2059, 1994; Carell et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33, 2061; Gallop et al., J. Med. Chem. 37, 1233, 1994 등에 개시되어 있다.

또한 예를 들면 바이올로직스가 스크리닝에 사용될 수 있다. 바이올로직스는 세포 또는 바이오분자를 일컫는 것으로, 바이오분자란, 단백질, 핵산, 탄수화물, 지질 또는 생체내 및 생체외에서 세포 시스템 등을 이용하여 생산된 물질을 일컫는 것이다. 바이오분자를 단독으로 또는 다른 바이오분자 또는 세포와 조합으로 제공될 수 있다. 바이오분자는 예를 들면, 폴리뉴클레오타이드, 펩타이드, 항체, 또는 기타 혈장에서 발견되는 단백질 또는 생물학적 유기물질을 포함하는 것이다.

본원의 방법에 사용되는 모낭 또는 모낭 유래 세포는 모낭기관 자체, 모낭에서 유래된 모유두 세포, 케라티노사이트, 특히 모발 매트릭스 케라티노사이트 및 상기 세포로부터 확립된 세포주 예를 들면 ORS (outer root sheath)가 사용될 수 있으나, 이로 제한하는 것은 아니다.

상기 시험물질로 처리된 경우, 처리되지 않은 대조군과 비교하여, PLGF의 발현 및/또는 활성이 증가된 경우, 상기 시험물질을 모발 생장기를 조절하는 후보물질로 선별한다. 대조군과 비교 약 10% 이상, 약 20% 이상, 약 30% 이상, 약 40% 이상, 약 50% 이상, 약 60% 이상, 약 70% 이상, 약 80% 이상, 약 90% 이상, 또는 약 100% 이상, 또는 이 이상을 증가된 것을 후보물질로 선별할 수 있다. 이러한 후보물질은 임상실험 등을 거쳐 모발 생장기 조절제로 개발될 수 있거나, 또는 화장용 조성물 중의 성분으로 포함될 수 있다.

또한 상기 시험물질로 처리된 경우, 처리되지 않은 대조군과 비교하여, PLGF의 발현 및/또는 활성이 증가된 경우는 직접 또는 간접적으로 측정될 수도 있다.

PLGF의 발현의 상향 조절은 예를 들면 mRNA 및/또는 cDNA 및 단백질 수준에서의 조절, 예를 들면 전사단계, 번역단계, 또는 전사 및 번역단계에서의 조절을 포함하는 것이며, PLGF의 발현 또는 활성은 당업계에 공지된 방법으로 측정될 수 있다. 예를 들면 mRNA/cDNA는 노던블랏, 역전사 PCR, 정량 PCR 방법을 통해 측정할 수 있으며, 단백질은 조직을 이용한 면역형광분석, 웨스턴블랏 등을 통해 측정할 수 있으며, 활성은 예를 들면 PLGF의 이의 수용체에의 결합여부 및 결합에 의한 공지된 다운스트림의 단백질 발현 또는 활성 여부를 측정하여 결정될 수 있을 것이다. 예를 들면 PLGF는 VEGFR1(Flt-1) 또는 뉴로필린1과 결합하여, VEGFR1 양성 세포를 활성화시키고, 이어 생존과 관련된 Akt 경로, 증식과 관련된 MAPK 신호전달 경로, Protein Kinase C 경로 등을 활성화시키는 것으로 알려져 있다.

또한 예를 들면 모낭 길이, 피부의 두께, 모발의 두께 또는 기타 본원 실시예에 기재된 방법을 포함하여, 당업계에 공지된 다양한 방법을 사용하여 측정될 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위해서 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 본 발명이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예

실험 방법

1. 모낭기관 및 모유두 세포 배양 :

자원자의 두피조직으로부터, 모낭을 분리하여 Williams' E 배지(Invitrogen, USA)를 이용하여 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 배양하였다.

모유두 세포는 모낭기관에서 말단에 위치하는 모유두 부분을 분리하여, 10% 소태아혈청을 포함하는 DMEM 배지 (Invitrogen)를 이용하여 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 배양하였다. 모유두 세포는 모낭의 매트릭스 케라티노사이트를 조절하고, 모낭의 매트릭스 케라티노사이트는 모낭성장에 관여를 하는 것으로 알려져 있다.

PLGF가 모낭의 길이 성장에 미치는 효과를 측정하기 위해 음성대조군 (Con, PBS 중의 0.1% 소혈청알부민), 태반성장인자-2 (10ng/mL 또는 50ng/mL)(R&D Systems, USA) 또는 미녹시딜(MXN, 2mg/ml, 양성대조군, Sigma-Aldrich, USA)를 8일 동안 처리하였다.

모낭의 길이는 스테레오 현미경(Olympus stereo microscope)을 이용하여 상기 물질 추가 후 배양 4일 및 8일째 촬영하였다.

2. mRNA 발현 분석 : 상기와 같이 배양한 모유두 세포에 태반성장인자 (50ng/mL)를 30분 또는 24시간 처리한 후, 총 RNA를 추출하여, RevertAid First Strand cDNA 합성 키트 (Thermo Scientific, USA)를 제조자의 방법대로 사용하여 cDNA를 합성하고, 실시간 정량 PCR을 이용하여 모발 세포 증식에 관련된 유전자인 IGF-1, HGF, VEGF와 모발 성장 활성에 관련된 유전자인 Versican, alkaline phosphatase의 mRNA발현을 조사하였다. 역전사 PCR은 SYBR Green RT-PCR 시약 키트를 제조자의 방법대로 사용하였으며, 정량 실시간 PCR은 정량 PCR 장비 (ABI 7500, Applied Biosystmes, USA)에서 SYBR PCR Master Mix를 제조자의 방법대로 사용하였다. PCR에 사용된 조건은 95℃ 초기 10분 반응 후, 95℃ 15초 및 50℃ (어닐링 및 신장) 1분으로 총 40주기를 수행하였으며 사용된 프라이머는 다음과 같다.

[표 1]

3. 단백질 분석 : 상기와 같이 배양한 모유두 세포에 태반성장인자 (10ng/mL 또는 50ng/mL)를 3시간, 24시간, 또는 72시간 처리한 후, 세포증식과 세포사멸에 관련 있는 유전자인, P-ERK, P-Akt, Bcl2, CyclinD1의 단백질의 발현을 하기 항체를 사용하여 웨스턴블랏으로 측정하였다: anti-total ERK, anti-phosphorylated ERK, anti-total Akt, anti-phosphorylated Akt, anti-Bcl2, anti-cyclin D1 (Cell Signaling Technology, USA), anti-ß-actin (Santa Cruz Biotechnology, USA),

4. 동물 실험 : 7주령의 암컷 마우스 (C57BL/6 마우스, 체중 18 내지 20g)는 코아텍(대한민국)에서 구입하였다. 마우스는 케이지당 4-5 마리를 일반적 사육 조건하에서 사육하였으며, 수돗물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였다. 첫 번째 동물실험에서는 총 32마리의 모발세포 주기가 휴지기에 접어든 C57BL/6 마우스에서, 모발성장 촉진 효과를 살펴보기 위하여, 휴지기 마우스의 등부위의 털을 종전에 기술한 바와 같이 뽑았다 (Paus R et al., The American journal of pathology 144:719-341, 1994). 요약하면, 왁스/로신 혼합물을 녹인 후 등에 발라, 굳힌 후에 벗겨내어 휴지기 시기의 털을 제거하였으며, 제거된 털의 부위는 생장기 시기의 모낭시기로 synchronization되게 된다. 털뽑기를 시행한 다음날부터, 하루에 두 번씩, 마우스 태반성장인자 (10μg/mL)(R&D systems) 또는 양성대조군으로 미녹시딜(2mg/ml)을 피내 주사하였다.

태반성장인자를 주입 후, 5일 째 조직검사를 시행하여 모낭의 길이를 측정하고 피부의 두께를 측정함으로써 모발 성장 촉진효과를 관찰하였다. 21일 째 조직검사를 시행하여 모구(hair bulb)의 두께를 측정하고, 세포사멸 정도의 파악을 위해, 하기 기술하는 TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) 분석을 시행하여 양성 세포 수를 측정함으로써 태반성장인자가 모낭의 생장기 시기를 장기간 유지시키는지를 여부를 측정하였다.

두 번째 동물실험에서는 총 14마리의 모발세포 주기가 휴지기에 접어든, 8주령의 C57BL/6 마우스에서, 태반성장인자가 모낭의 생장기를 유발하는지 살펴보기 위해, 휴지기 마우스의 등 부분의 털을 면도기를 사용하여 털을 제거하였다. 제거된 털의 부위는 대략 4주간 휴지기 시기로 유지되게 되고, 털을 제거한 다음날부터, 하루에 두 번씩, 태반성장인자 (10μg/mL) 또는 양성대조군으로 미녹시딜(2mg/ml)을 피내 주사하였다. 실험에 사용한 모든 마우스의 등 부위는 탈모 후 41일까지 카메라로 촬영하였고 (Canon, PowerShot S51S, Japan), 헤마톡실린 및 에오신 염색을 통한 조직학적 염색에 대한 분석은 이미지 분석 프로그램((Image J, NIH, USA)을 통해 수행하였다. 마우스에서 채취한 조직의 파라핀 절편(5μm)을 제조한 후 헤마톡실린 및 에오신 (H&E) 염색을 수행하여 조직의 형태를 관찰하였다. 모발주기스코어 (Hair Cycle Score, HCS)을 종전에 기술된 바와 같이 측정 하였다 (Maurer M et.al, The American journal of pathology 150:1433-41, 1997). 요약하면, 무작위로 추출한 모낭에 대한 모발 주기(telogen=1, anagen I 내지 VI = 2 내지 7)을 사용하여 결정하고 점수를 부여하였다. 마우스 그룹당 HCS는 그룹당 선정된 모낭의 모발 점수를 합한 후, 선정된 모낭 개수로 나눈 값인 평균값을 의미한다. 마우스 그룹당 최소 70개의 모낭을 평가하였다.

5. 면역형광염색 : 세포증식을 관찰하기 위하여 세포 증식 마커인 Ki67 항체 (DAKO, Carpinteria, USA)로 세포를 염색한 후술하는 바와 같이 면역형광 염색을 수행하였다.

또한 세포사멸이 발생한 세포를 측정하기 위한 TUNEL 염색 (In Situcell death detection kit, fluorescein, Roche Diagnostics, Germany)은 종전에 기술된 바와 같이 수행하였다 (Yoon SY et al., PloS one 6:e28474, 2011). DAPI 마운팅키트(Vector Laboratories, USA)로 핵을 카운터염색하였다. TUNEL 염색된 세포의 이미지는 the Leica Application Suite Advanced Fluorescence Software (LAS AF, Leica Microsystems, Heerbrugg, Switzerland)를 사용하여 얻었다. 세포사멸의 경우 정량적 분석을 위해 모낭의 털망울에 있는 TUNEL 양성 세포의 수를 측정하였으며, 마우스 그룹 당 80개의 모낭을 관찰하였다.

실시예 1 PLGF 처리에 의한 모낭 길이 증가

상술한 바와 같이 인간 유래 모낭을 배양 한 후 PLGF 로 처리한 결과 태반성장인자를 처리한 군에서 모낭의 길이가 음성대조군에 비해 유의하게 증가하였다 (도 1a 참조). 또한 세포 증식 표지 마커인 Ki67 항체 염색한 결과, 대조군과 비교시, 태반성장인자를 PLGF로 처리한 군에서 모낭의 세포증식이 유의하게 증가한 것으로 나타났다 (도 1b 참조).

이는 태반성장인자가 혈관계가 존재하지 않을 때에도 직접적으로 모발성장을 촉진하는 효과를 갖는 것을 나타내는 것이다.

실시예 2 PLGF에 의한 hDPC의 증식 및 모발 성장 유도와 관련된 다양한 유전자의 발현 변화

PLGF에 의한 hDPC (인간 모유두 세포)의 증식 및 모발 성장 유도와 관련된 다양한 유전자의 mRNA 발현 증가를 관찰하기 위해 상술한 바와 같이 배양한 모낭세포에 50 ng/mL PLGF로 처리한 후, 30분(a) 및 24시간 (b)째 총 RNA를 추출하여 정량 실시간 PCR 및 역전사 PCR로 분석하였다. 그 결과 모발 세포 증식에 관련된 유전자인 IGF-1(Insulin growth factor 1), HGF(Human growth factor), VEGF (Vascular endothelial growth factor)의 mRNA 발현이 증가하고, 모발 성장 활성에 관련된 유전자인, VCAN (Versican, 세포외매트릭스 프로테오글리칸) 및 alkaline phosphatase의 mRNA 발현이 증가한 것으로 나타났다 (도 2a 및 2b 참조).

또한 도 3a 및 3b에 나타난 바와 같이 PLGF를 처리한 결과 hDPC의 생존기간이 유의하게 증가하였다. 즉 hDPC를 표시된 양의 PLGF로 처리한 후, 24시간(a) 및 72시간 (b)째 웨스턴블랏으로 분석한 결과 모유두 세포에 태반성장인자 (10ng/mL 또는 50ng/mL)를 처리한 결과 세포증식에 촉진하는 유전자인 P-ERK, CyclinD1의 단백질 발현이 증가하였다. 나아가 hDPC를 1μM의 LY294002 (Akt 억제제, Invitrogen) 또는 PD98059 (ERK 억제제, Sigma-Aldrich)로 각각 48시간 및 24시간 동안 처리한 후에 총 RNA를 추출하여 실시간 정량 PCR로 분석한 결과, Flt-1 (VEGF Receptor 1 코딩 유전자) 또는 PLGF의 mRNA 발현이 유의하게 줄어드는 것을 관찰하였다.

이는 태반성장인자가 세포사멸을 억제시키고, 세포 증식을 유도하는 것을 나타내는 것이다.

실시예 3 PLGF에 의한 모낭 성장 촉진 및 생장기 기간 증대 효과

PLGF가 모낭 성장 및 생장기 기간 증대에 미치는 효과를 측정하기 위하여 상술한 바와 같이 마우스의 휴지기 시기의 털을 왁스를 이용하여 뽑아서 제거하였으며, 제거된 털의 부위는 생장기 시기의 모낭시기로 동기화(synchronization)되게 된다. 털뽑기를 시행한 다음날부터, 마우스의 등에 PLGF 또는 미녹시딜로 각각 처리 후 5일째 및 21일째 수득한 피부 시료에 대한 H&E 염색을 통한 조직분석 및 모낭 길이 및 피부 두께를 측정하였다. 그 결과 태반성장인자 주입 후 5일 째 태반성장인자를 주입한 군에서 모낭의 길이가 대조군에 비해 유의하게 증가하고 피부의 두께 또한 증가 하였으며, 생장기에서는 피부의 두께가 증가하므로, 이는 태반성장인자 처리군에서 모발의 성장이 촉진되고, 생장기로 유도된 것을 나타낸다 (도 4a 참조). 또한 21일째 조직검사 결과, 태반성장인자를 주입한 군에서 대조군에 비해 모구(hair bulb)의 두께가 증가하고, 세포사멸을 의미하는 TUNEL의 양성 세포수가 감소하였으며, 이는 태반성장인자 처리군에서 모낭의 생장기 시기를 길게 유지시키는 것을 나타낸다 (도 4b 참조).

실시예 4 PLGF에 의한 모발 성장 촉진 효과

PLGF가 모발을 생장기 시기로 유도하는 지를 살펴보기 위하여, 휴지기 마우스의 등 부분 피부를 면도기를 사용하여 털을 제거하였다. 제거된 털의 부위는 대략 4 주간 휴지기 시기로 유지되게 된다, 털을 제거한 다음날부터, C57BL/6 마우스의 등에 대조군, PLGF 또는 미녹시딜로 처리한 후, 41일째, 피부조직에 대한 H&E 염색을 통한 분석 및 모발주기 스코어 및 피부 두께를 측정하였다.

그 결과 도 5에 나타난 바와 같이, PLGF로 처리된 군에서는 음성대조군과 비교하여 모낭의 생장기 시기가 유의성 있게 유도되었으며, 피부두께도 두꺼워 진 것으로 나타났다. 이는 태반성장인자가 생장기 시기의 모낭을 유도하는 것을 나타내는 것이다.

이상에서 본원의 예시적인 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본원의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본원의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본원의 권리범위에 속하는 것이다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.

Claims (10)

1. 태반성장인자를 포함하는 모발 생장기 증가용 약학적 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서, 상기 태반성장인자는 인간유래로 태반성장인자 1 내지 4 중 하나 이상인, 모발 생장기 증가용 약학적 조성물.
   
3. 제 1 항에 있어서, 상기 태반성장인자는 전장, 활성 단편, 태반성장인자 수용체 결합부위 또는 태반성장인자 펩타이드모방체인, 모발 생장기 증가용 약학적 조성물.
   
4. 제 1 항에 있어서, 상기 모발은 두피, 안면, 상기 두피 및 안면을 제외한 등, 다리, 가슴, 겨드랑이와 같은 신체 부위의 모발인, 모발 생장기 증가용 약학적 조성물.
   
5. 제 1 항에 있어서, 상기 생장기 증가용 조성물은 발모 촉진 또는 탈모의 완화, 개선, 예방 또는 치료에 사용되는 것인, 조성물.
   
6. 모발 생장기를 조절하는 물질의 스크리닝 방법으로, 상기 방법은
   시험물질을 제공하는 단계;
   모낭 또는 모낭유래 세포를 제공하는 단계;
   상기 모낭 또는 모낭유래 세포를 시험물질로 처리하는 단계; 및
   상기 시험물질이 상기 모낭 또는 모낭유래 세포의 PLGF를 조절하는지 여부를 평가하는 단계를 포함하며, 상기 평가하는 단계는 대조군과 비교하여 PLGF의 발현또는 활성을 상향 조절하는 물질을 후보물질로 선별하는 것인, 모발 생장기 조절 물질의 스크리닝 방법.
   
7. 제 6 항에 있어서, 상기 모낭은 모낭기관, 상기 모낭유래 세포는 모유두 세포 또는 케라티노사이트인, 모발 생장기 조절 물질의 스크리닝 방법.
   
8. 제 6 항에 있어서, 상기 모발은 두피, 안면, 상기 두피 및 안면을 제외한 등, 다리, 가슴, 겨드랑이와 같은 신체 부위의 모발인, 모발 생장기 증가용 약학적 조성물.
9. 제 6 항에 있어서, 상기 PLGF의 발현의 상향 조절은 전사단계, 번역단계, 또는 전사 및 번역단계에서의 조절인 것인, 모발 생장기 조절 물질의 스크리닝 방법.
   
10. 제 1 항에 따른 조성물을 포함하는 모발 생장기 증가용 화장용 조성물.

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