KR20140128066A - Novel biphenyldiamide derivative, pharmaceutically acceptable salt thereof or optical isomer thereof, preparation method thereof and pharmaceutical composition for prevention or treatment of Hepatitis C virus related liver disease containing the same as an active ingredient - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a novel biphenyldiamide derivative, a pharmaceutically acceptable salt or optical isomer thereof, a method for producing same, and a pharmaceutical composition containing the same as an active ingredient for preventing or treating hepatitis C virus-associated liver diseases. The biphenyldiamide derivative according to the present invention has excellent antiviral activity and medicinal effect with high bioavailability by being absorbed quickly into the body, and also no cytotoxicity or cardiotoxicity, and enables combined administration with other drugs so that many different therapeutic methods can be applicable, thereby being able to be useful as a pharmaceutical composition for preventing or treating liver diseases caused by hepatitis C virus such as acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis, and hepatocellular cancer.

Description

신규한 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Novel biphenyldiamide derivative, pharmaceutically acceptable salt thereof or optical isomer thereof, preparation method thereof and pharmaceutical composition for prevention or treatment of Hepatitis C virus related liver disease containing the same as an active ingredient}TECHNICAL FIELD The present invention relates to a novel biphenyl diamide derivative, a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof, a process for producing the same, and a pharmaceutical composition for preventing or treating hepatitis C virus- or an optical isomer thereof, a preparation method thereof and a pharmaceutical composition for prevention or treatment of hepatitis C virus-related liver disease,

본 발명은 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a novel biphenyl diamide derivative, a pharmaceutically acceptable salt or an optical isomer thereof, a process for producing the same, and a pharmaceutical composition for preventing or treating hepatitis C virus-related liver disease containing the same as an active ingredient will be.

C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus, HCV)는 플라비바이러스과(Flaviviridae)의 헤파시바이러스 속(hepacivirus genus)으로 분류되는 RNA 바이러스로서, 1989년에 미국에서 발견되었다.
Hepatitis C virus (HCV) is an RNA virus classified as a hepacivirus genus of the Flaviviridae, which was discovered in the United States in 1989.

상기 C형 간염 바이러스(HCV)에 의한 감염은 수혈 및 지역 특이적 전염(community-acquired)에 의해 발생되고, 신장 투석에 의해 약 70% 정도가 감염되는 것으로 보고되었다. 일단 C형 간염 바이러스에 감염이 되면 약 20% 정도가 5년 내에 간경화를 수반한 급성 간염을 일으키게 되고 간암으로 전이되는 것으로 알려져 있다(비특허문헌 1 및 비특허문헌 2). 이러한 높은 만성 감염률은 RNA 바이러스에서 보기 드문 일로서 C형 간염 바이러스가 높은 비율의 간암을 일으키는 매개체임을 보여주는 증거이다. 최근에는 모든 혈액에 대해서 C형 간염 바이러스 검사가 잘 이루어지고 있어 수혈로 인한 감염은 현저히 줄어들었지만, 지역 특이적 감염은 이에 대한 관리가 효과적으로 이루어지지 않아 그 감염률이 높으므로 전 세계적으로 중요한 문제로 대두되고 있다.
It is reported that the hepatitis C virus (HCV) infection is caused by transfusion and community-acquired, and about 70% is infected by kidney dialysis. Once infected with the hepatitis C virus, about 20% of the cases are known to cause acute hepatitis accompanied by cirrhosis within five years and metastasis to liver cancer (Non-Patent Document 1 and Non-Patent Document 2). This high rate of chronic infection is an uncommon event in RNA viruses and is evidence that hepatitis C virus is a mediator of high rates of liver cancer. In recent years, hepatitis C virus (HBV) has been successfully screened for all blood, and infection due to blood transfusion has been significantly reduced. However, since local infection is not effectively managed and infection rate is high, .

한편, 역학적으로 볼 때 C형 간염 바이러스는 B형 간염 바이러스(HBV)와 달리 전 세계에 골고루 분포되어 있으며 전 세계 인구의 1.5% 내지 2%가 감염된 것으로 보고되고 있다. C형 간염 바이러스에 감염되면 만성 간염으로 진행되는 것이 특징인데 간경화 및 간암으로 전이되는 확률이 B형 간염보다 상당히 높다. C형 간염 바이러스는 분류학적으로도 B형 간염 바이러스와는 전혀 다른 바이러스과에 속하기 때문에 B형 간염 바이러스 백신으로는 예방이 불가능하다. 또한, 현재 C형 간염 바이러스 감염에 대한 치료제로, 인터페론과 항바이러스제인 리바비린(ribavirin) 병용요법이 사용되고 있으나(비특허문헌 3), 유전형에 따라 반응이 현저히 다르고 효과가 극히 미약하며, 병용요법에 사용되는 두 약제의 부작용이 클 뿐만 아니라 고가이다. 따라서, 보다 효과적인 새로운 항C형 간염 바이러스제의 개발이 요구되고 있다.
Epidemiologically, unlike hepatitis B virus (HBV), hepatitis C virus is spread all over the world and it is reported that 1.5% to 2% of the world's population is infected. Hepatitis C virus infection is characterized by progression to chronic hepatitis. The probability of liver metastasis and liver metastasis is significantly higher than that of hepatitis B virus. Because hepatitis C virus is taxonomically different from the hepatitis B virus, it can not be prevented by the hepatitis B virus vaccine. In addition, interferon and ribavirin combination therapy as anti-hepatitis C virus infections are currently used (Non-Patent Document 3), but the reaction is remarkably different depending on the genotype and the effect is extremely weak, The side effects of the two drugs used are large as well as high. Therefore, development of a more effective new anti-C hepatitis virus agent is required.

상기의 문제를 극복하기 위하여 연구된 현재까지 항C형 간염 바이러스제는 C형 간염 바이러스의 생애주기의 특정 단계를 차단함으로써 항C형 간염 바이러스 약제의 약리활성이 발현되는 특징을 갖는다.To date, the anti-C hepatitis virus agent has been characterized in that pharmacological activity of anti-C hepatitis virus drugs is expressed by blocking certain stages of the life cycle of hepatitis C virus.

C형 간염 바이러스의 생애주기는 다음와 같다. 숙주 세포(Host cell)의 표면에 부착된 HCV는 엔도사이토시스(endocytosis)에 의해 숙주 세포 내에 침입한다. 이후, 숙주 세포 내에 침입한 C형 간염 바이러스 게놈 RNA로부터 약 3천 개의 아미노산 잔기로 구성된 전구체 단백질이 생성된다. C형 간염 바이러스 게놈 또는 숙주 세포의 시그널 펩티다아제(signal peptidase)로 인코딩된(encoded) NS3 및 NS4 프로테아제와 함께 반응하여 캡시드 단백질(capsid protein), 엔벨로프 단백질(envelope protein), NS3 및 NS4 프로테아제, NS 5B RNA 중합효소(Polymerase) 같은 약 10종의 바이러스 단백질이 생성된다. NS 2B 중합효소로 복제된 게놈 RNA는 α-글루코시다아제(α-glucosidase)로 중개된 캡시드 단백질 및 엔벨로프 단백질과 결합하여 바이러스 입자가 된다. C형 간염 바이러스 입자는 숙주 세포로부터 배출된다(비특허문헌 4).
The life cycle of hepatitis C virus is as follows. HCV attached to the surface of the host cell invades into the host cell by endocytosis. Thereafter, a precursor protein consisting of about 3,000 amino acid residues is generated from the hepatitis C virus genome RNA that has invaded into the host cell. The hepatitis C virus genome or the NS3 and NS4 protease encoded by the signal peptidase of the host cell to produce capsid protein, envelope protein, NS3 and NS4 protease, NS5B About 10 virus proteins such as RNA polymerase are produced. The genomic RNA replicated by the NS 2B polymerase binds to the capsid protein and envelope protein mediated by α-glucosidase and becomes a viral particle. The hepatitis C virus particles are released from the host cells (Non-Patent Document 4).

상기의 C형 간염 바이러스 생애주기의 특정 단계를 차단함으로써 항C형 간염 바이러스 활성을 나타내는 약제는 HCV 생애주기에 근거하여 RNA 중합효소 억제제-유형, 프로테아제 억제제-유형, α-글루코시다아제 억제제-유형 및 기타 유형으로 분류된다. 예를 들면, MK-7009(Merck)과 R7128(Pharmasset/Roche) 등의 RNA 중합효소 억제제 유형은 임상시험 1상에 있고, VCH-759(Virochem), R1626(Roche), 발로피시타빈(valopicitabine, Idenix)는 임상시험 2상에 있다. 또한, 프로테아제 억제제 유형 중 ITMN-191(R-7227, InterMune/Roche)는 임상시험 1상에 있고, TMC435350(Medivir/Tibotec)은 임상시험 2상이며, 보세프레비어(Boceprevir(SCH 503034), Schering)과 텔라프레비어(Telaprevir, Vertex)는 임상시험 3상에 있다. 아울러, 사이클로필린 억제제 유형인 DEBIO-025(DEBIO)와 글루코시다아제 I 억제제 유형인 셀고시비어(celgosivir, MIGEBIX)는 임상시험 2상에 있다(비특허문헌 5 및 비특허문헌 6).
Agents that exhibit anti-hepatitis C virus activity by blocking certain stages of the hepatitis C virus life cycle described above may be classified as either an RNA polymerase inhibitor-type, a protease inhibitor-type, an [alpha] -glucosidase inhibitor- And other types. For example, RNA polymerase inhibitor types such as MK-7009 (Merck) and R7128 (Pharmasset / Roche) are on Phase 1 of clinical trials and include VCH-759 (Virochem), R1626 (Roche), valopicitabine Idenix) is on clinical trial 2. In addition, among the protease inhibitor types, ITMN-191 (R-7227, InterMune / Roche) is on clinical trial 1, TMC435350 (Medivir / Tibotec) is on clinical trial 2, Boceprevir (SCH 503034), Schering ) And Telaprevir (Vertex) are on Phase 3 of the trial. In addition, the cyclophilin inhibitor type DEBIO-025 (DEBIO) and the glucosidase I inhibitor type celgosivir (MIGEBIX) are on clinical trial 2 (Non-Patent Document 5 and Non-Patent Document 6).

그러나, 임상시험이 진행되고 있는 상기 항C형 간염 바이러스 약제에 대하여 내성을 갖는 바이러스의 출현이 이미 보고되고 있으므로, 종래에 알려진 항C형 간염 바이러스 약제와는 다른 기작으로 항C형 간염 바이러스 효과를 나타내는 새로운 항C형 간염 바이러스 약제의 개발이 절실히 요구되고 있다.
However, since the appearance of a virus having resistance to the hepatitis C hepatitis virus drug which has undergone clinical trials has already been reported, a hepatitis C virus effect as a mechanism different from the known hepatitis C virus hepatitis virus The development of new anti-hepatitis C virus drugs is urgently required.

이에, 본 발명자들은 세포 및 심장독성이 적고, C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 활성이 우수한 항C형 간염 바이러스제를 개발한 결과, 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체가 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 활성이 우수하고, 세포 및 심장독성이 없음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
Accordingly, the present inventors have developed an anti-C hepatitis virus agent having low cell and cardiac toxicity and excellent antiviral activity against hepatitis C virus. As a result, it has been found that the novel biphenyl diamide derivative has antiviral activity against hepatitis C virus And no cell and cardiac toxicity, and completed the present invention.

Davis et al, New. Engl. J. Med., 321 (1989) 1501;Davis et al, New. Engl. J. Med., 321 (1989) 1501; Alter et al, Leonard et al., Current Pespective in Hepatology, (1989) p.83;Alter et al., Leonard et al., Current Pespective in Hepatology, (1989) p. 83; Hayashi N., et al., J. Gastroenterol., 41,(2006), 17;Hayashi N., et al., J. Gastroenterol., 41, (2006), 17; Manns MP., et al., Nat. Rev. Drug. Discov., 6,(2007), 991;Manns MP., Et al., Nat. Rev. Drug. Discov., 6, (2007), 991; Kronenberger B., et al., Clin Liver Dis., 12,(2008), 529.Kronenberger B., et al., Clin Liver Dis., 12, (2008), 529.

본 발명의 목적은 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a novel biphenyl diamide derivative, a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof.

본 발명의 다른 목적은 상기 화합물의 제조방법을 제공하는데 있다.Another object of the present invention is to provide a method for producing the above compound.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 화합물을 유효성분으로 포함하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는데 있다.It is still another object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating hepatitis C virus-related liver disease comprising the compound as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적은 상기 화합물을 유효성분으로 포함하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는데 있다.
Another object of the present invention is to provide a health functional food for preventing or ameliorating hepatitis C-associated liver disease comprising the compound as an active ingredient.

상기 목적을 달성하기 위하여,In order to achieve the above object,

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 제공한다:The present invention provides a novel biphenyl diamide derivative represented by the following formula 1, a pharmaceutically acceptable salt or an optical isomer thereof:

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

(상기 화학식 1에서, R1, R2 및 X는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).
(In the above formula (1), R 1 , R 2 And X are as defined herein.

또한, 본 발명은 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,The present invention also relates to a process for producing a compound represented by the formula (1)

화학식 2로 표시되는 벤지딘과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1);Reacting a benzidine represented by the formula (2) with a compound represented by the formula (3) to prepare a compound represented by the formula (4) (step 1);

상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 탈보호화제와 반응시켜 화학식 5로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2); 및Reacting the compound of Formula 4 prepared in Step 1 with a deprotecting agent to prepare a compound represented by Formula 5 (Step 2); And

상기 단계 2에서 제조된 화학식 5의 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체를 제조하는 단계(단계 3);를 포함하는 것을 특징으로 하는 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체의 제조방법을 제공한다:Reacting a compound of formula (5) prepared in step 2 with a carboxylic acid of formula (6) to prepare a biphenyl diamide derivative represented by formula (1) (step 3) Biphenyl diamide derivatives of the general formula < RTI ID = 0.0 >

[반응식 1][Reaction Scheme 1]

Figure pat00002
Figure pat00002

(상기 반응식 1에 있어서, R1, R2, X 및 PG는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).
(In the above Reaction Scheme 1, R 1 , R 2 , X and PG are as defined herein).

나아가, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다:Furthermore, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of hepatitis C virus-related hepatitis, comprising a biphenyldiamide derivative represented by the following formula 1, a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient do:

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00003
Figure pat00003

(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).
(Wherein R 1 , R 2 and X are as defined herein).

또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 식품학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다:The present invention also provides a health functional food for preventing or ameliorating hepatitis C-related liver disease, which comprises a biphenyl diamide derivative represented by the following formula (1), a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient do:

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00004
Figure pat00004

(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).
(Wherein R 1 , R 2 and X are as defined herein).

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 활성이 우수하고, 인체에 빠르게 흡수되어 높은 생체 이용률로 약효를 발휘할 뿐만 아니라, 세포독성 및 심장독성이 없으므로, 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 C형 간염 바이러스에 의해 발병되는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변, 간세포성 암과 같은 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
The biphenyl diamide derivative according to the present invention is excellent in antiviral activity against hepatitis C virus, rapidly absorbed into human body and exhibits its drug efficacy with high bioavailability, and is free from cytotoxicity and cardiac toxicity. Therefore, The pharmaceutical composition containing the compound of the present invention may be useful as a pharmaceutical composition for preventing or treating liver diseases such as acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis, hepatocellular carcinoma, which are caused by hepatitis C virus.

도 1은 실험예 1에 따른 각 실시예 화합물별 루시페라아제 형광 발광을 통한 루시페라아제 활성률을 도시한 그래프이다;
도 2는 실험예 3에서 실시예 4의 화합물을 경구 투여 및 정맥 투여한 후, 측정된 약물 투여 시간에 따른 혈장 내 약물 농도를 도시한 그래프이다;
도 3은 실험예 3에서 측정된 약물 투여 시간에 따른 혈장 내 약물 농도 결과를 이용하여 비구획 약물동태학 매개변수(noncompartmental pharmacokinetic parameter)를 도시한 그래프이다.1 is a graph showing the luciferase activity rate through luciferase fluorescence for each compound of Example according to Experimental Example 1;
FIG. 2 is a graph showing drug concentration in blood plasma according to measured drug administration time after oral administration and intravenous administration of the compound of Example 4 in Experimental Example 3; FIG.
FIG. 3 is a graph showing noncompartmental pharmacokinetic parameters using plasma drug concentration results according to the drug administration time measured in Experimental Example 3. FIG.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 제공한다:The present invention provides a novel biphenyl diamide derivative represented by the following formula 1, a pharmaceutically acceptable salt or an optical isomer thereof:

Figure pat00005
Figure pat00005

상기 화학식 1에서,In Formula 1,

R1은 수소; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시; 비치환 또는 할로겐, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-C4의 알콕시로 치환된 C6-C12의 아릴; 또는 C1-C4의 알콕시카보닐로 치환된 아미노이고;R 1 is hydrogen; Linear or branched alkyl of C1-C4; Straight or branched alkoxy of C1-C4; C6-C12 aryl substituted by unsubstituted or halogen, C1-C4 straight or branched chain alkyl, C1-C4 alkoxy; Or amino substituted by C1-C4 alkoxycarbonyl;

R2는 수소; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시; 또는 1 이상의 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 C1-C4의 알콕시카보닐로 치환된 아미노이고;R 2 is hydrogen; Linear or branched alkyl of C1-C4; Straight or branched alkoxy of C1-C4; Or amino substituted by at least one C1-C4 straight chain or branched alkyl or C1-C4 alkoxycarbonyl;

상기 R1 및 R2는 이들이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께, 질소(N) 원자, 산소(O) 원자 및 황(S) 원자로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 5 내지 7 원자 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고; 및R 1 and R 2 together with the carbon atom to which they are bonded form a 5- to 7-membered ring containing at least one heteroatom selected from the group consisting of a nitrogen (N) atom, an oxygen (O) atom and a sulfur (S) Lt; / RTI > may form heterocycloalkyl; And

X는 산소(O) 원자, 황(S) 원자 또는 메틸렌(CH2)이다.
X is an oxygen (O) atom, a sulfur (S) atom or methylene (CH 2 ).

바람직하게는, 상기 R1은 수소; 메틸; 에틸; 프로필; 메톡시; 에톡시; 페닐; 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, 메틸, 에틸, 프로필, 메톡시 또는 에톡시로 치환된 페닐; 메톡시카보닐아미노; 에톡시카보닐아미노; 또는 프로폭시카보닐아미노이고;Preferably, R < 1 > is hydrogen; methyl; ethyl; profile; Methoxy; Ethoxy; Phenyl; Phenyl substituted with fluoro, chloro, bromo, iodo, methyl, ethyl, propyl, methoxy or ethoxy; Methoxycarbonylamino; Ethoxycarbonylamino; Or propoxycarbonylamino;

R2는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, tert-부틸, 메톡시, 에톡시, 메틸아미노, 다이메틸아미노, 에틸아미노, 다이에틸아미노, 프로필아미노, 메톡시카보닐아미노 에톡시카보닐아미노 또는 프로폭시카보닐아미노이고;R 2 is selected from the group consisting of hydrogen, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert-butyl, methoxy, ethoxy, methylamino, dimethylamino, ethylamino, diethylamino, propylamino, methoxycarbonylaminoethoxy Carbonylamino or propoxycarbonylamino;

상기 R1 및 R2는 이들이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께, 헤테로사이클로알킬을 형성하는 경우, 피롤리딘, 테트라하이드로퓨란, 테트라하이드로티오펜, 피페리딘 또는 테트라하이드로-2H-파이란을 형성할 수 있고; 및Wherein R 1 and R 2 are taken together with the carbon atoms to which they are attached, when forming a heterocycloalkyl, pyrrolidine, tetrahydrofuran, tetrahydro-thiophene, piperidine, or to form a tetrahydro -2H- Failan Can be; And

X는 황(S) 원자 또는 메틸렌(CH2)이다.
X is a sulfur (S) atom or methylene (CH 2 ).

더욱 바람직하게는, 상기 R1은 수소, 페닐 또는 메톡시카보닐아미노이고;More preferably, the R 1 is hydrogen, phenyl or methoxy-carbonyl amino;

R2는 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 다이메틸아미노, 다이에틸아미노 또는 메톡시카보닐아미노이고;R 2 is methyl, isopropyl, tert-butyl, dimethylamino, diethylamino or methoxycarbonylamino;

상기 R1 및 R2는 이들이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께, 헤테로사이클로알킬을 형성하는 경우, 테트라하이드로퓨란을 형성할 수 있고; 및R 1 and R 2 together with the carbon atoms to which they are attached can form tetrahydrofuran if they form heterocycloalkyl; And

X는 황(S) 원자 또는 메틸렌(CH2)이다.
X is a sulfur (S) atom or methylene (CH 2 ).

가장 바람직하게는, 상기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체는 다음과 같다:Most preferably, the biphenyl diamide derivative represented by the above formula (1) is as follows:

(1) 다이메틸 (2R,2'R)-1,1'-((2S, 2'S)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(3-메틸-1-옥소부탄-2,1-다이일)다이카바메이트;(1) Synthesis of dimethyl (2R, 2'R) -1,1 '- ((2S, 2'S) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidin-2,1-diyl)) bis (3-methyl-1-oxobutane-2,1-diyl) dicarbamate;

(2) (S,2S,2'S)-N,N'-(바이페닐-4,4'-다이일)비스(1-((S)-2-(다이메틸아미노)-2-페닐아세틸)피롤리딘-2-카복스아마이드);(2) (S, 2S, 2'S) -N, N '- (biphenyl-4,4'- Pyrrolidine-2-carboxamide);

(3) (S,2S,2'S)-N,N'-(바이페닐-4,4'-다이일)비스(1-((S)-2-(다이에틸아미노)-2-페닐아세틸)피롤리딘-2-카복스아마이드);(3) Synthesis of (S, 2S, 2'S) -N, N '- (biphenyl-4,4'- Pyrrolidine-2-carboxamide);

(4) 다이메틸 (1S,1'S)-2,2'-((2S, 2'S)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(2-옥소-1-페닐에탄-2,1-다이일)다이카바메이트(4) Synthesis of dimethyl (1S, 1'S) -2,2 '- ((2S, 2'S) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) ) Bis (pyrrolidine-2,1-diyl)) bis (2-oxo-1-phenylethane-2,1-diyl) dicarbamate

(5) (R,2S,2'S)-N,N'-(바이페닐-4,4'-다이일)비스(1-((R)-테트라하이드로퓨란-2-카보닐)피롤리딘-2-카복스아마이드;(5) Synthesis of (R, 2S, 2'S) -N, N '- (biphenyl-4,4'- 2-carboxamide;

(6) 다이메틸 (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'R)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(1-옥소프로판-2,1-다이일)다이카바메이트;(6) Synthesis of dimethyl (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidin-2,1-diyl)) bis (1-oxopropane-2,1-diyl) dicarbamate;

(7) 다이메틸 (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'R)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(3,3-다이메틸-1-옥소부탄-2,1-다이일)다이카바메이트;(7) Synthesis of dimethyl (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidine-2,1-diyl)) bis (3,3-dimethyl-1-oxobutane-2,1-diyl) dicarbamate;

(8) 다이메틸 (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'R)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(3-메틸-1-옥소부탄-2,1-다이일)다이카바메이트; 또는(8) Synthesis of dimethyl (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidin-2,1-diyl)) bis (3-methyl-1-oxobutane-2,1-diyl) dicarbamate; or

(9) 다이메틸 (1S,1'S)-2,2'-((4R,4'R)-4,4'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(티아졸리딘-4,3-다이일))비스(2-옥소-1-페닐에탄-2,1-다이일)바이카바메이트.
(9) Synthesis of dimethyl (1S, 1'S) -2,2 '- ((4R, 4'R) -4,4'- (biphenyl- Oxomethylene) bis (thiazolidin-4,3-diyl)) bis (2-oxo-1-phenylethane-2,1-diyl) bicarbamate.

본 발명에 따른 화학식 1의 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 다이카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산, 아세트산, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산과 같은 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 나이트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 다이하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 다이나이트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.The derivative of formula (I) according to the present invention can be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt. As the salt, an acid addition salt formed by a pharmaceutically acceptable free acid is useful. Acid addition salts include those derived from inorganic acids such as hydrochloric acid, nitric acid, phosphoric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, nitrous acid or phosphorous acid, and aliphatic mono- and dicarboxylates, phenyl-substituted alkanoates, hydroxyalkanoates, Derived from organic acids such as acetic acid, benzoic acid, citric acid, lactic acid, maleic acid, gluconic acid, methanesulfonic acid, 4-toluenesulfonic acid, tartaric acid, fumaric acid, and the like. Such pharmaceutically innocuous salts include, but are not limited to, sulfate, pyrosulfate, bisulfate, sulfite, bisulfite, nitrate, phosphate, monohydrogenphosphate, dihydrogenphosphate, metaphosphate, pyrophosphate chloride, bromide, Butyrate, caprate, heptanoate, propiolate, oxalate, malonate, succinate, succinate, maleic anhydride, maleic anhydride, , Sebacate, fumarate, maleate, butyne-1,4-dioate, hexane-1,6-dioate, benzoate, chlorobenzoate, methylbenzoate, dynitrobenzoate, hydroxybenzoate, Methoxybenzoate, phthalate, terephthalate, benzenesulfonate, toluene sulfonate, claw Benzenesulfonate, xylenesulfonate, phenylacetate, phenylpropionate, phenylbutyrate, citrate, lactate,? -Hydroxybutyrate, glycolate, maleate, tartrate, methanesulfonate, propanesulfonate, naphthalene- 1-sulfonate, naphthalene-2-sulfonate, mandelate and the like.

본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 화학식 1의 유도체를 유기용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조하여 제조되거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조하거나 유기용매 하에서 결정화시켜셔 제조할 수 있다.The acid addition salt according to the present invention can be obtained by a conventional method, for example, by dissolving a derivative of Chemical Formula 1 in an organic solvent such as methanol, ethanol, acetone, methylene chloride, acetonitrile, , Or may be prepared by drying, or after the solvent and excess acid are distilled off under reduced pressure, followed by drying or crystallization in an organic solvent.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은 염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.In addition, bases can be used to make pharmaceutically acceptable metal salts. The alkali metal or alkaline earth metal salt is obtained, for example, by dissolving the compound in an excess amount of an alkali metal hydroxide or an alkaline earth metal hydroxide solution, filtering the insoluble compound salt, and evaporating and drying the filtrate. At this time, it is preferable for the metal salt to produce sodium, potassium or calcium salt. The corresponding silver salt is also obtained by reacting an alkali metal or alkaline earth metal salt with a suitable silver salt (for example, silver nitrate).

본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체 및 이의 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물, 수화물, 광학 이성질체 등을 모두 포함한다.
The present invention includes not only the biphenyl diamide derivative represented by the above formula (1) and pharmaceutically acceptable salts thereof, but also possible solvates, hydrates, optical isomers and the like which can be prepared therefrom.

또한, 본 발명은 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,The present invention also relates to a process for producing a compound represented by the formula (1)

화학식 2로 표시되는 벤지딘과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1);Reacting a benzidine represented by the formula (2) with a compound represented by the formula (3) to prepare a compound represented by the formula (4) (step 1);

상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 탈보호화제와 반응시켜 화학식 5로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2); 및Reacting the compound of Formula 4 prepared in Step 1 with a deprotecting agent to prepare a compound represented by Formula 5 (Step 2); And

상기 단계 2에서 제조된 화학식 5의 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체를 제조하는 단계(단계 3);를 포함하는 것을 특징으로 하는 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체의 제조방법을 제공한다:Reacting a compound of formula (5) prepared in step 2 with a carboxylic acid of formula (6) to prepare a biphenyl diamide derivative represented by formula (1) (step 3) Biphenyl diamide derivatives of the general formula < RTI ID = 0.0 >

[반응식 1][Reaction Scheme 1]

Figure pat00006
Figure pat00006

(상기 반응식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 화학식 1에서 정의한 바와 같고; 및 PG는 아민 보호기이다).
(In the above Reaction Scheme 1, R 1 , R 2 and X are as defined in Chemical Formula 1; and PG is an amine protecting group).

이하, 상기 제조방법을 각 단계별로 보다 상세히 설명한다.
Hereinafter, the above manufacturing method will be described in more detail in each step.

먼저, 본 발명에 따른 상기 단계 1은 화학식 2로 표시되는 벤지딘과 화학식 3으로 표시되는 화합물의 커플링 반응을 수행하여 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다. 보다 구체적으로는 아마이드화제 존재하에서, 화학식 2로 표시되는 벤지딘의 아민기와 화학식 3으로 표시되는 화합물의 카르복실산기의 아마이드화 반응을 수행하여 커플링 생성물인 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.First, step 1 according to the present invention is a step of performing a coupling reaction between a benzidine represented by the general formula (2) and a compound represented by the general formula (3) to prepare a compound represented by the general formula (4). More specifically, the amidation reaction of the amine group of the benzidine represented by the formula (2) and the carboxylic acid group of the compound represented by the formula (3) is carried out in the presence of an amidating agent to prepare a coupling product, .

상기 아마이드화제(amide reagent)는 다이이소프로필에틸아민(DIPEA), 트라이에틸아민(TEA) 또는 다이메틸아미노피리딘(DMAP)와 함께 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스(다이메틸아미노)-포스포니움헥사플루오로포스페이트(Py-BOP), O-벤조트리아졸-N,N,N,N-테트라메틸-유로니움-헥사플루오로-포스페이트(HBTU), 2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸유로니움헥사플루오로포스페이트(HATU), 하이드록시벤조트리아졸(HOBt), 다이사이클로헥실카르보디이미드(DCC), 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC) 또는 카르보닐다이이미다졸(CDI)을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC)를 사용할 수 있다.The amide reagent may be prepared by reacting benzotriazol-1-yl-oxy-tris (dimethylamino) - t-butoxycarbonyl with diisopropylethylamine (DIPEA), triethylamine (TEA) or dimethylaminopyridine Tetraethyl-uronium-hexafluorophosphate (HBTU), 2- (7-aza-1H) -quinolinone 1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HATU), hydroxybenzotriazole (HOBt), dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1 Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) or carbonyldiimidazole (CDI) ) Carbodiimide (EDC) can be used.

또한, 반응 유기용매로는 메탄올, 다이메틸포름아마이드, 테트라하이드로퓨란, 다이클로로메탄, 톨루엔 등을 이용하여 반응을 수행할 수 있고, 바람직하게는 다이클로로메탄을 사용할 수 있다.
As the reaction organic solvent, a reaction may be carried out using methanol, dimethylformamide, tetrahydrofuran, dichloromethane, toluene or the like, preferably dichloromethane.

다음으로, 본 발명에 따른 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 탈보호화제와 반응시켜 화학식 5로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다. 보다 구체적으로는 상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물에 포함되어 있는 아민 보호기(PG)를 탈보호화제를 이용하여 탈보호화 반응시킴으로써 아민 보호기가 탈보호화된 화학식 5로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.Next, step 2 according to the present invention is a step of reacting the compound of formula (4) prepared in step 1 with a deprotecting agent to prepare a compound represented by formula (5). More specifically, the amine protecting group (PG) contained in the compound of formula (4) prepared in step 1 is deprotected using a deprotecting agent to prepare a compound represented by formula (5) wherein the amine protecting group is deprotected to be.

이때, 화학식 4의 화합물에 포함되어 있는 아민 보호기(PG)로는 t-부톡시카보닐(Boc), 9H-플로렌-9-일메톡시카보닐(Fmoc), 트라이틸(trityl), 벤질, 클로로아세틸, 벤질옥시카보닐, p-메톡시벤질옥시카보닐, 포밀, 트라이플루오로아세틸, p-톨루엔술포닐, 벤젠술포닐, 메탄술포닐, p-니트로벤질옥시카보닐, 2,2,2-트라이클로로에톡시카보닐, 알릴옥시카보닐(Alloc) 등 일 수 있으며, 바람직하게는 t-부톡시카보닐(Boc) 일 수 있다.Examples of the amine protecting group (PG) contained in the compound of Formula 4 include t-butoxycarbonyl (Boc), 9H-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl (Fmoc), trityl, benzyl, Acetyl, benzyloxycarbonyl, p-methoxybenzyloxycarbonyl, formyl, trifluoroacetyl, p-toluenesulfonyl, benzenesulfonyl, methanesulfonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl, 2,2,2 - trichloroethoxycarbonyl, allyloxycarbonyl (Alloc), and the like, preferably t-butoxycarbonyl (Boc).

또한, 본 발명에 따른 상기 단계 2의 탈보호화 조건은 보호화된 보호기에 따라 통상적으로 사용되는 비보호화 조건을 사용할 수 있다.
In addition, the deprotection conditions of the step 2 according to the present invention can use an unprotected condition that is conventionally used according to a protected protecting group.

다음으로, 본 발명에 따른 상기 단계 3은 상기 단계 2에서 제조된 화학식 5의 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산의 커플링 반응을 수행하여 바이페닐다이아마이드 유도체를 제조하는 단계이다. 보다 구체적으로는 아마이드화제 존재 하에서 상기 단계 2에서 탈보호화된 화학식 5로 표시되는 화합물의 아민기와 화학식 6으로 표시되는 카르복실산기의 아마이드화 반응을 수행하여 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.Next, step 3 according to the present invention is a step of preparing a biphenyl diamide derivative by performing a coupling reaction of the compound of formula (5) prepared in step 2 and the carboxylic acid represented by formula (6). More specifically, the step of amidating the amine group of the compound represented by the formula (5) deprotected in the step 2 and the carboxylic acid group represented by the formula (6) in the presence of an amidating agent to prepare a compound represented by the formula .

상기 아마이드화제(amide reagent)는 다이이소프로필에틸아민(DIPEA), 트라이에틸아민(TEA) 또는 다이메틸아미노피리딘(DMAP)와 함께 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스(다이메틸아미노)-포스포니움헥사플루오로포스페이트(Py-BOP), O-벤조트리아졸-N,N,N,N-테트라메틸-유로니움-헥사플루오로-포스페이트(HBTU), 2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸유로니움헥사플루오로포스페이트(HATU), 하이드록시벤조트리아졸(HOBt), 다이사이클로헥실카르보디이미드(DCC), 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC), 또는 카르보닐다이이미다졸(CDI)을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC)를 사용할 수 있다.The amide reagent may be prepared by reacting benzotriazol-1-yl-oxy-tris (dimethylamino) - t-butoxycarbonyl with diisopropylethylamine (DIPEA), triethylamine (TEA) or dimethylaminopyridine Tetraethyl-uronium-hexafluorophosphate (HBTU), 2- (7-aza-1H) -quinolinone 1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HATU), hydroxybenzotriazole (HOBt), dicyclohexylcarbodiimide (DCC), 1 Ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC), or carbonyldiimidazole (CDI) Propylcarbodiimide (EDC) can be used.

또한, 반응 유기용매로는 메탄올, 다이메틸포름아마이드, 테트라하이드로퓨란, 다이클로로메탄, 톨루엔 등을 이용하여 반응을 수행할 수 있고, 바람직하게는 다이클로로메탄을 사용할 수 있다.
As the reaction organic solvent, a reaction may be carried out using methanol, dimethylformamide, tetrahydrofuran, dichloromethane, toluene or the like, preferably dichloromethane.

나아가, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다:Furthermore, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of hepatitis C virus-related hepatitis, comprising a biphenyldiamide derivative represented by the following formula 1, a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient do:

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00007
Figure pat00007

(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
(Wherein R 1 , R 2 and X are the same as defined in the above formula (1)).

본 발명에 따른 상기 C형 간염 바이러스 관련 간질환은 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변, 간세포성 암 등을 들 수 있다.
The hepatitis C virus-related liver diseases according to the present invention include acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma.

본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체는 항C형 바이러스 활성을 평가한 결과, 발광 효소 유전자를 포함하는 C형 간염 바이러스를 접종한 간암 세포에 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물을 1 μM 농도로 처리한 실험에서 C형 간염 바이러스는 화학식 1의 화합물에 의해서 억제되어 0.00%의 형광발광하는 것으로 나타났다(실험예 1 참조). 또한, 복제된 C형 간염 바이러스에 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물을 처리한 실험에서 항바이러스 활성을 나타내는 EC50은 450 nM 이하로 확인되었으며, 특히 실시예 2 및 실시예 4에서 제조된 화합물은 각각 0.55 nM 및 1.7 nM의 낮은 EC50 값을 갖는 것으로 확인되었다(실험예 2 참조). 이로부터 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 활성이 우수한 것을 알 수 있다.The biphenyl diamide derivatives represented by formula (1) according to the present invention were evaluated for anti-C virus activity. As a result, the compound of formula (1) according to the present invention was administered to liver cancer cells inoculated with hepatitis C virus containing the luciferase gene In the experiment treated with 1 μM concentration, the hepatitis C virus was inhibited by the compound of formula (1) and showed fluorescence emission of 0.00% (see Experimental Example 1). In addition, the EC 50 exhibiting antiviral activity was confirmed to be 450 nM or less in the experiment in which the compound of Chemical Formula 1 according to the present invention was treated with the replication-competent hepatitis C virus. Particularly, the compound prepared in Example 2 and Example 4 Were found to have low EC 50 values of 0.55 nM and 1.7 nM, respectively (see Experimental Example 2). From the results, it can be seen that the compound of formula (1) according to the present invention has excellent antiviral activity against hepatitis C virus.

또한, 본 발명에 따른 화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체에 대한 약물동력학 실험 결과, 상기 화합물은 2시간 내에 혈중 최대 농도에 도달하였으며, 이의 생체 이용률은 20%인 것으로 확인되었다. 이로부터 본 발명에 따른 화합물의 약리활성이 우수한 것을 알 수 있다(실험예 3 참조).In addition, as a result of pharmacokinetics of the biphenyl diamide derivative of Formula 1 according to the present invention, the compound reached the maximum concentration in blood within 2 hours, and its bioavailability was found to be 20%. From this, it can be seen that the compound according to the present invention has excellent pharmacological activity (see Experimental Example 3).

나아가, 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 혈장세포 및 hERG 효소를 이용한 세포 및 심장독성 평가에서 높은 혈장세포 생존률 및 낮은 hERG 억제활성을 나타내어 세포 및 심장독성이 없어 인체에 안전한 것을 알 수 있다(실험예 4 및 실험예 5 참조).Furthermore, the compound of formula (I) according to the present invention shows high plasma cell viability and low hERG inhibitory activity in the evaluation of cells and cardiac toxicity using plasma cells and hERG enzyme, and is safe for human body due to no toxicity to cells and heart Example 4 and Experimental Example 5).

따라서, 본 발명에 따른 화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체는 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 활성이 우수하고, 세포 및 심장에 대한 독성이 없어 인체에 안전할 뿐만 아니라, 인체 내 약리활성이 우수하고 타약물과 병용투여가 가능하여 다양한 치료 방법의 적용이 가능하므로, 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 C형 간염 바이러스에 의하여 발병하는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변, 간세포성 암과 같은 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Accordingly, the biphenyl diamide derivative of formula (I) according to the present invention is excellent in antiviral activity against hepatitis C virus, is not toxic to cells and heart and is safe for human body, has excellent pharmacological activity in human body Since various therapeutic methods can be applied in combination with other drugs, the pharmaceutical composition containing the same as an active ingredient can be used as an effective ingredient in the treatment of acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis, hepatocellular carcinoma The present invention also relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating liver diseases.

본 발명의 조성물을 의약품으로 사용하는 경우, 상기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 임상투여 시에 다양한 하기의 경구 또는 비경구 투여 형태로 제제화되어 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.When the composition of the present invention is used as a medicament, the pharmaceutical composition containing the biphenyl diamide derivative represented by the above formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient may be administered orally or parenterally May be formulated and administered in a form of oral administration, but the present invention is not limited thereto.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭시르제, 트로키제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/ 또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 또는 그의 마그네슘염 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 또한, 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다.
Examples of formulations for oral administration include tablets, pills, light / soft capsules, liquids, suspensions, emulsions, syrups, granules, elixirs and troches, (E.g., silica, talc, stearic acid or a magnesium salt or a calcium salt and / or polyethylene glycol), and the like. The tablets may also contain binders such as magnesium aluminum silicate, starch paste, gelatin, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and / or polyvinylpyrrolidine, optionally mixed with starch, agar, alginic acid or its sodium salt The same disintegrating or boiling mixture and / or absorbing agent, coloring agent, flavoring agent and sweetening agent.

상기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체를 유효성분으로 하는 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사를 주입하는 방법에 의한다.The pharmaceutical composition comprising the biphenyl diamide derivative represented by Formula 1 as an active ingredient can be administered parenterally. The parenteral administration can be carried out by injecting subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection, or intrathoracic injection All.

이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.In order to formulate the composition for parenteral administration, the biphenyl diamide derivative of the above formula (1) or a pharmaceutically acceptable salt thereof is mixed with water or a stabilizer or a buffer to prepare a solution or suspension, which is then mixed with an ampule or vial unit May be prepared in dosage forms. The compositions may contain sterilized and / or preservatives, stabilizers, wettable or emulsifying accelerators, adjuvants such as salts and / or buffers for the control of osmotic pressure, and other therapeutically useful substances, Or may be formulated according to the coating method.

상기 화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물의 인체에 대한 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 바람직하게는 0.01 내지 200 ㎎/㎏/일의 양으로 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격을 1일 수회, 바람직하게는 1일 1회 내지 3회로 분할하여 경구 또는 비경구적 경로를 통해 투여할 수 있다.
The dosage of the pharmaceutical composition containing the biphenyl diamide derivative of Formula 1 as an active ingredient may be varied depending on the age, body weight, sex, dosage form, health condition and disease severity of the patient, May be administered via an oral or parenteral route by dividing a predetermined time interval several times a day, preferably once or three times a day, according to the judgment of a doctor or pharmacist in an amount of 0.01 to 200 mg / kg / day.

또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 식품학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다:The present invention also provides a health functional food for preventing or ameliorating hepatitis C-related liver disease, which comprises a biphenyl diamide derivative represented by the following formula (1), a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient do:

[화학식 1][Chemical Formula 1]

Figure pat00008
Figure pat00008

(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다).
(Wherein R 1 , R 2 and X are the same as defined in the above formula (1)).

본 발명에 따른 상기 C형 간염 바이러스 관련 간질환으로는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변, 간세포성 암 등을 들 수 있다.
The hepatitis C virus-related liver diseases according to the present invention include acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis, hepatocellular carcinoma, and the like.

본 발명에 따른 건강기능식품은 C형 간염 바이러스에 의하여 발병되는 간질환의 예방 또는 개선을 목적으로 상기 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 식품학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 식품, 음료 등의 건강기능 식품에 첨가할 수 있다.The health functional food according to the present invention can be used for preventing or ameliorating liver disease caused by hepatitis C virus, by using the biphenyl diamide derivative, a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as a food, It can be added to functional foods.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of the foods to which the above substances can be added include dairy products including dairy products, meat, sausage, bread, biscuits, rice cakes, chocolate, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen and other noodles, gums, ice cream, Beverages, alcoholic beverages and vitamin complexes, dairy products, and dairy products, all of which include health functional foods in a conventional sense.

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 식품학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체는 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The biphenyl diamide derivative, its pharmaceutically acceptable salt or an optical isomer thereof according to the present invention can be added directly to the food or can be used together with other food or food ingredients, and can be suitably used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to the intended use (for prevention or improvement). Generally, the amount of the compound in the health functional food may be 0.1 to 90 parts by weight based on the total weight of the food. However, in the case of long-term intake intended for health and hygiene purposes or for the purpose of controlling health, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range.

본 발명의 건강기능성 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 다이사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(예를 들면, 타우마틴, 스테비아 추출물 등) 및 합성 향미제(예를 들면, 사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능식품 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.The health functional beverage of the present invention is not particularly limited to the other ingredients other than the above-mentioned compounds as essential ingredients in the indicated ratios and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients such as ordinary beverages. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Daisakaride, for example Maltose, sucrose etc; And polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. Natural flavors (e.g., tau martin, stevia extract, etc.) and synthetic flavorings (e.g., saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used as flavorings other than those described above. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 healthy function foods of the present invention.

상기 외에 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 식품학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(예를 들면, 치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. In addition to the above, the health functional food containing the biphenyl diamide derivative according to the present invention, a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient can be used as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors (Such as cheese, chocolate, etc.), pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols , A carbonating agent used in carbonated drinks, and the like. In addition, the health functional food of the present invention may contain natural fruit juice and pulp for the production of fruit juice drinks and vegetable drinks.

이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명에 따른 건강기능식품 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
These components may be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so important, but is generally selected in the range of 0.1 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the health functional food according to the present invention.

이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following Examples and Experimental Examples.

<< 제조예Manufacturing example 1> (S)-2-( 1 > (S) -2- ( 메톡시카보닐아미노Methoxycarbonylamino )-3-) -3- 메틸부타논산의Methylbutanoic acid 제조 Produce

Figure pat00009
Figure pat00009

L-발린(valine, 3.9 g, 33.29 mmol)이 용해된 1M의 소듐하이드록사이드 수용액(33 ml, 33 mmol)에 소듐카보네이트(1.83 g, 17.2 mmol)를 첨가하고, 얼음물을 이용하여 냉각시켰다. 냉각된 반응 혼합물에 메틸 글로로포르메이트(2.8 ml, 36.1 mmol)를 천천히 적가한 다음, 적가가 완료되면 얼음물을 제거하여 상온으로 등온하여 3.25시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응생성물을 에테르(17 ml)로 3 차례 세척하고, 물층을 얼음물을 이용하여 냉각시킨 후, 염산(conc. HCl)으로 pH 1 내지 2로 산성화하였다. 산성화된 수용액층을 다이클로로메탄(17 ml)으로 3 차례 추출하고, 추출된 유기층을 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시킨 후 여과하였다. 여과된 유기층을 감압농축하고 별도의 정제없이 백색 고체의 목적화합물(5 g, 86%)을 얻었다.Sodium carbonate (1.83 g, 17.2 mmol) was added to a IM aqueous sodium hydroxide solution (33 ml, 33 mmol) in which L-valine (3.9 g, 33.29 mmol) was dissolved and cooled with ice water. Methyl chloroformate (2.8 ml, 36.1 mmol) was slowly added dropwise to the cooled reaction mixture, and after the dropwise addition was completed, the ice water was removed, and the mixture was stirred at room temperature for 3.25 hours. The reaction product was then washed three times with ether (17 ml), the water layer was cooled with ice water and acidified to pH 1-2 with hydrochloric acid (conc. HCl). The acidified aqueous layer was filtered and was extracted three times with dichloromethane (17 ml), drying the extracted organic layer with magnesium sulfate (MgSO 4). The filtered organic layer was concentrated under reduced pressure to obtain the desired compound (5 g, 86%) as a white solid without further purification.

1H NMR(400 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 12.51 (br s, 1H), 7.32 (d, 1H), 3.84 (t, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.03 (m, 1H), 0.88 (d, J=12, 6H).
 1 H NMR (400 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 12.51 (br s, 1H), 7.32 (d, 1H), 3.84 (t, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.03 (m , &Lt; / RTI &gt; 1H), 0.88 (d, J = 12, 6H).

<< 제조예Manufacturing example 2> (R)-2-( 2 > (R) -2- ( 메톡시카보닐아미노Methoxycarbonylamino )-3-) -3- 메틸부타논산의Methylbutanoic acid 제조 Produce

Figure pat00010
Figure pat00010

상기 제조예 1에서 L-발린(valine, 3.9 g, 33.29 mmol)을 사용하는 대신에 D-발린(valine, 586 mg, 5 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 제조에 1과 동일한 방법으로 수행하여 백색 고체의 목적화합물(760 mg, 87%)을 얻었다.Except that D-valine (586 mg, 5 mmol) was used instead of L-valine (3.9 g, 33.29 mmol) in Preparation Example 1, (760 mg, 87%) as a white solid.

1H NMR(400 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 12.54 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 3.84 (t, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.03 (m, 1H), 0.87 (d, 6H).
 1 H NMR (400 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 12.54 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 3.84 (t, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.03 (m, 1H), 0.87 (d, 6H).

<< 제조예Manufacturing example 3> (R)-2-( 3 > (R) -2- ( 다이메틸아미노Dimethylamino )-2-페닐아세트산의 제조) -2-phenylacetic acid

Figure pat00011
Figure pat00011

메탄올(4.5 ml)에 D-페닐글라이신(1.51 g, 10 mmol), 포름알데하이드(5 ml, 37 중량% 수용액) 및 1N의 염산(4.5 ml)가 용해된 혼합물을 10% Pd/C(310 mg, 0.3 mmol)가 현탁된 메탄올(1.5 ml)에 첨가하고, 수소 가스(H2 풍선)를 주입하여 밤샘 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 셀라이트(Celite) 여과하고 여과된 혼합물을 감압농축하였다. 농축된 혼합물을 이소프로판올로 재결정하여 백색 침상 염산염 형태의 목적화합물(1.84 g, 89%)을 얻었다. A mixture of D-phenylglycine (1.51 g, 10 mmol), formaldehyde (5 ml, 37 wt% aqueous solution) and 1N hydrochloric acid (4.5 ml) dissolved in methanol (4.5 ml) was treated with 10% Pd / C , 0.3 mmol) was added to suspended methanol (1.5 ml), and hydrogen gas (H 2 balloon) was injected and stirred overnight. The reaction mixture was then filtered through Celite and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The concentrated mixture was recrystallized from isopropanol to obtain the desired compound (1.84 g, 89%) in the form of a white needle hydrochloride.

1H NMR(600 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 7.43-7.39 (m, 5H), 4.47 (s, 1H), 2.43 (s, 6H).
 1 H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ,? = 2.5 ppm): 7.43-7.39 (m, 5H), 4.47 (s, 1H), 2.43 (s, 6H).

<< 제조예Manufacturing example 4> (R)-2-( 4 > (R) -2- ( 다이에틸아미노Diethylamino )-2-페닐아세트산의 제조) -2-phenylacetic acid

Figure pat00012
Figure pat00012

메탄올(13 ml)에 D-페닐글라이신(756 mg, 5 mmol)을 용해시킨 혼합물을 얼음물로 냉각시키고, 소듐시아노보로하이드라이드(786 mg, 12.5 mmol)를 수 분동안 나눠서 첨가한 후, 5분 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 아세트알데하이드(1.3 ml, 22.5 mmol)를 천천히 적가하고 저온으로 유지하면서 45분 동안 교반한 다음, 상온으로 등온하여 6.5시간 동안 교반하였다. 교반을 유지하면서 얼음물을 이용하여 냉각시키고, 염산(conc. HCl)을 적가하여 반응물의 pH를 1.5 내지 2.0으로 산성화하였다. 산성화된 반응 혼합물을 천천히 상온으로 등온시키면서 밤샘 교반하여 반응을 종결시키고, 생성된 반응생성물을 여과하여 부유물을 제거하였다. 여과된 여액을 감압증류하여 농축시키고, 에탄올로 재결정하여 백색 염산염 형태의 목적화합물(625 mg, 60%)을 얻었다.A mixture of D-phenylglycine (756 mg, 5 mmol) dissolved in methanol (13 ml) was cooled with ice water and sodium cyanoborohydride (786 mg, 12.5 mmol) was added in portions for several minutes, Lt; / RTI &gt; Acetaldehyde (1.3 ml, 22.5 mmol) was slowly added dropwise to the reaction mixture, stirred for 45 minutes while keeping it at a low temperature, and was then stirred at room temperature for 6.5 hours. The mixture was cooled with ice water while maintaining the stirring, and the pH of the reaction was acidified to 1.5 to 2.0 by adding hydrochloric acid (conc. HCl) dropwise. The acidified reaction mixture was slowly stirred at room temperature while being stirred overnight, and the reaction product was filtered to remove suspended matters. The filtrate was concentrated under reduced pressure, and the residue was recrystallized from ethanol to obtain 625 mg (60%) of the title compound as a white hydrochloride salt.

1H NMR(600 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.77 (br s, 1H), 7.72 (m, 2H), 7.51 (m, 3H), 5.33 (s, 1H), 3.17 (app br s, 2H), 3.01 (app br s, 2H), 1.20 (app br s, 6H).
 1 H NMR (600 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 10.77 (br s, 1H), 7.72 (m, 2H), 7.51 (m, 3H), 5.33 (s, 1H), 3.17 (app br s, 2H), 3.01 (app br s, 2H), 1.20 (app. br s, 6H).

<< 제조예Manufacturing example 5> (R)-2-( 5 > (R) -2- ( 메톡시카보닐아미노Methoxycarbonylamino )-2-페닐아세트산의 제조) -2-phenylacetic acid

Figure pat00013
Figure pat00013

상기 제조예 1에서 L-발린(valine, 3.9 g, 33.29 mmol)을 사용하는 대신에 D-페닐글라이신(1.5 g, 10 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 제조에 1과 동일한 방법으로 수행하여 백색 고체의 목적화합물(760 mg, 87%)을 얻었다.Except that D-phenylglycine (1.5 g, 10 mmol) was used instead of L-valine (3.9 g, 33.29 mmol) in Preparation Example 1, To obtain the desired compound (760 mg, 87%) as a white solid.

1H NMR(600 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 12.79 (br s, 1H), 7.96 (d, J=12, 1H), 7.40-7.29 (m, 5H), 5.13 (d, J=12, 1H), 3.55 (s, 3H).
 1 H NMR (600 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 12.79 (br s, 1H), 7.96 (d, J = 12, 1H), 7.40-7.29 (m, 5H), 5.13 (d, J = 12, 1H), 3.55 (s, 3H).

<< 제조예Manufacturing example 6> (S)-2-( 6> (S) -2- ( 메톡시카보닐아미노Methoxycarbonylamino )) 프로파논산의Propanoic 제조 Produce

Figure pat00014
Figure pat00014

상기 제조예 1에서 L-발린(valine, 3.9 g, 33.29 mmol)을 사용하는 대신에 L-알라닌(0.89 g, 10 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 제조에 1과 동일한 방법으로 수행하여 무색 오일의 목적화합물(0.83 g, 56%)을 얻었다.The procedure of Preparation 1 above was repeated except that L-alanine (0.89 g, 10 mmol) was used instead of L-valine (3.9 g, 33.29 mmol) To obtain the title compound (0.83 g, 56%) as an oil.

1H NMR(600MHz, δ=7.26 ppm, CDCl3): 10.00 (br s, 1H), 5.49 (d, J=12, 1H), 4.38 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 1.45 (d, J=12, 3H).
 1 H NMR (600 MHz,? = 7.26 ppm, CDCl 3 ): 10.00 (br s, 1 H), 5.49 d, J = 12,3H).

<< 제조예Manufacturing example 7> (S)-2-(2- 7 >. (S) -2- (2- 메톡시Methoxy -2--2- 옥소에틸Oxoethyl )-3,3-) -3,3- 다이메틸부타논산의Of dimethylbutanoic acid 제조 Produce

Figure pat00015
Figure pat00015

상기 제조예 1에서 L-발린(valine, 3.9 g, 33.29 mmol)을 사용하는 대신에 L-tert-류신(0.656 g, 5 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 제조에 1과 동일한 방법으로 수행하여 백색 고체의 목적화합물(0.67 g, 71%)을 얻었다.Except that L-tert-leucine (0.656 g, 5 mmol) was used instead of L-valine (3.9 g, 33.29 mmol) in Preparation Example 1, To obtain the desired compound (0.67 g, 71%) as a white solid.

1H NMR(600MHz, δ=7.26 ppm, CDCl3): 9.57 (br s, 1H), 5.31 (d, 1H), 4.20 (d, 1H), 3.70 (s, 3H), 1.03 (s, 9H).
 1 H NMR (600MHz, δ = 7.26 ppm, CDCl 3): 9.57 (br s, 1H), 5.31 (d, 1H), 4.20 (d, 1H), 3.70 (s, 3H), 1.03 (s, 9H) .

<< 제조예Manufacturing example 8> (S)-3-( 8 > (S) -3- ( terttert -- 부톡시카보닐Butoxycarbonyl )) 티아졸리딘Thiazolidine -4--4- 카르복실산의Carboxylic acid 제조 Produce

Figure pat00016
Figure pat00016

아세토나이트릴(50 ml), 트라이에틸아민(26 ml) 및 증류수(50 ml)의 혼합용액에 L-티오프롤린(10 g, 75 mmol)을 용해시킨 혼합용액을 0℃으로 냉각시킨 다음, 다이-tert-부틸다이카보네이트(21.3 g, 98 mmol)를 첨가하고, 상온으로 천천히 등온하면서 18시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응생성물을 증류하여 아세토나이트릴을 제거하고, 1N 염산을 이용하여 pH 2로 산성화하였다. 산성화된 반응생성물을 에틸아세테이트로 추출하고, 추출된 유기층을 소금물로 세척한 후, 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시켰다. 건조된 유기층을 여과하고, 여과된 유기층을 감압증류하여 용매가 제거된 목적화합물(17 g, 97%)을 얻었다.A mixed solution of L-thioproline (10 g, 75 mmol) dissolved in a mixed solution of acetonitrile (50 ml), triethylamine (26 ml) and distilled water (50 ml) was cooled to 0 ° C, -tert-butyl dicarbonate (21.3 g, 98 mmol) was added and stirred for 18 hours while slowly warming to room temperature. Thereafter, the reaction product was distilled to remove acetonitrile and acidified to pH 2 with 1N hydrochloric acid. The acidified reaction product was extracted with ethyl acetate, washing the extracted organic layer with brine and then dried over magnesium sulfate (MgSO 4). The dried organic layer was filtered, and the filtered organic layer was distilled under reduced pressure to obtain the target compound (17 g, 97%) from which the solvent had been removed.

1H NMR(600 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 12.87 (s, 1H), 4.62-4.52 (m, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 3.36 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 1.38-1.34 (app br s, 9H); 1 H NMR (600 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 12.87 (s, 1H), 4.62-4.52 (m, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 3.36 ( m, 1 H), 3.10 (m, 1 H), 1.38 - 1.34 (app br s, 9 H);

13C NMR(600 MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 171.85, 152.59, 79.94, 61.01, 48.56, 33.95, 27.85.
 13 C NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 171.85, 152.59, 79.94, 61.01, 48.56, 33.95, 27.85.

<< 실시예Example 1>  1> 다이메틸Dimethyl (2R,2'R)-1,1'-((2S, 2'S)-2,2'-( (2R, 2'R) -1,1 '- ((2S, 2'S) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (3-(3- 메틸methyl -1-옥소부탄-2,1--1-oxobutane-2,1- 다이일Dai )) 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

Figure pat00017
Figure pat00017

단계 1: (2S,2'S)-Step 1: (2S, 2 ' S) - 다이die -- terttert -부틸 2,2'-(- butyl 2,2 '- ( 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 다이피롤리딘Dipyrrolidine -1--One- 카르복실레이트의Carboxylate 제조 Produce

메틸렌클로라이드(38 ml)에 N-Boc-L-프롤린(8 g, 86.3 mmol), 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC, 19 g, 99 mmol) 및 벤지딘(benzidine, 7 g, 38 mmol)을 용해시키고, 상온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응생성물을 메틸렌클로라이드 및 물을 이용하여 층분리하고, 분리된 유기층을 1N의 염산과 소금물을 이용하여 세척한 다음, 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시켰다. 건조된 상기 유기층을 여과하고, 감압증류하여 별도의 정제없이 갈색 고체의 목적화합물(20.7 g, 94%)을 얻었다. N-Boc-L-proline (8 g, 86.3 mmol), 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC, 19 g, 99 mmol) and Benzidine (7 g, 38 mmol) was dissolved and stirred at room temperature for 2 hours. After that, the reaction product separation layer using methylene chloride and water, and the separated organic layer was washed with a 1N hydrochloric acid and brine then dried over magnesium sulfate (MgSO 4). The dried organic layer was filtered and distilled under reduced pressure to obtain the title compound (20.7 g, 94%) as a brown solid without further purification.

[α]d = -93.1˚(c=10 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -93.1 [deg.] (c = 10 mg / mL in MeOH);

1H NMR(300 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.06 (s, 2H), 7.69-7.59 (dd, 8H), 4.24 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 2.21 (m, 2H), 1.85 (m, 6H), 1.41-1.28 (app br s, 18H)l; 1 H NMR (300 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 10.06 (s, 2H), 7.69-7.59 (dd, 8H), 4.24 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 2.21 ( m, 2 H), 1.85 (m, 6 H), 1.41 - 1.28 (app br s, 18 H) 1;

13C NMR(300 MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 171.53, 153.17, 138.23, 134.45, 126.39, 119.58, 78.45, 60.39, 46.58, 31.04, 28.13, 27.95, 23.43; 13 C NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 171.53, 153.17, 138.23, 134.45, 126.39, 119.58, 78.45, 60.39, 46.58, 31.04, 28.13, 27.95, 23.43;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C32H42N4O6:579.3177; found 579.3152.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 32 H 42 N 4 O 6 : 579.3177; found 579.3152.

단계 2: Step 2: 다이메틸Dimethyl (2R,2'R)-1,1'-((2S, 2'S)-2,2'-( (2R, 2'R) -1,1 '- ((2S, 2'S) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (3-(3- 메틸methyl -1--One- 옥소부탄Oxobutane -2,1-다이일)-2, &lt; / RTI & 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

메틸렌클로라이드(1 ml) 및 트라이플루오로아세트산(1 ml)의 혼합용매에 상기 단계 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 용해시키고 상온에서 5시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 감압증류하여 휘발물질들을 모두 제거하고, 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC, 119 mg, 0.62 mmol), 상기 제조예 1에서 제조된 화합물(100 mg, 0.572 mmol), 다이이소프로필에틸아민(DIPEA, 208 μl, 1.192 mmol) 및 메틸렌클로라이드(1 ml)를 상기 반응 혼합물이 담겨 있는 반응용기에 4분 동안 첨가하고, 상온에서 75분 동안 교반하였다. 교반이 완료되면, 반응생성물을 메틸렌클로라이드와 물을 이용하여 층분리하고, 분리된 유기층을 물로 세척하였다. 세척된 유기층을 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시키고 여과한 다음, 여과된 유기층을 감압건조하였다. 건조된 반응생성물을 컬럼크로마토그래피(실리카겔, 에틸아세테이트/n-헥산)로 정제하여 백색 고체의 목적화합물(60 mg, 36%)을 얻었다.The compound (138 mg, 0.238 mmol) prepared in the above Step 1 was dissolved in a mixed solvent of methylene chloride (1 ml) and trifluoroacetic acid (1 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 5 hours. Thereafter, the reaction mixture was distilled under reduced pressure to remove all the volatile materials, and 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC, 119 mg, 0.62 mmol) The prepared compound (100 mg, 0.572 mmol), diisopropylethylamine (DIPEA, 208 μl, 1.192 mmol) and methylene chloride (1 ml) were added to the reaction vessel containing the reaction mixture for 4 minutes, Stir for 75 minutes. When the stirring was completed, the reaction product was layered using methylene chloride and water, and the separated organic layer was washed with water. Dry the washed organic layer over magnesium sulfate (MgSO 4) and filtered, followed by drying under reduced pressure the organic layer was filtered. The dried reaction product was purified by column chromatography (silica gel, ethyl acetate / n-hexane) to obtain the target compound (60 mg, 36%) as a white solid.

[α]d=-167.2o (c=10 mg/mL in MeOH); [α] d = -167.2 o ( c = 10 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.07 (s, 2H), 7.63-7.54 (dd, 8H), 7.31 (d, 2H), 4.43 (m, 2H), 4.01 (t, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.61 (m, 2H), 3.5 (s, 6H), 2.13 (m, 2H), 1.89 (m, 8H), 0.92 (d, 6H), 0.86 (d, 6H); 1 H NMR (400 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 10.07 (s, 2H), 7.63-7.54 (dd, 8H), 7.31 (d, 2H), 4.43 (m, 2H), 4.01 ( 2H), 3.80 (m, 2H), 3.61 (m, 2H), 3.5 (s, 6H), 2.13 (m, 2H), 1.89 , 6H);

13C NMR(400 MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.39, 170.37, 156.79, 138.25, 134.32, 126.39, 119.34, 60.21, 57.95, 51.43, 47.23, 29.87, 29.47, 24.67, 18.91, 18.63; 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 170.39, 170.37, 156.79, 138.25, 134.32, 126.39, 119.34, 60.21, 57.95, 51.43, 47.23, 29.87, 29.47, 24.67, 18.91, 18.63;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C36H48N6O8:699.3306; found 693.3572.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 36 H 48 N 6 O 8: 699.3306; found 693.3572.

<< 실시예Example 2> (S,2S,2'S)-N, 2> (S, 2S, 2'S) -N, N'N ' -(- ( 바이페닐Biphenyl -4,4'--4,4'- 다이일Dai )) 비스Bis (1-((S)-2-((1 - ((S) -2- ( 다이메틸아미노Dimethylamino )-2-)-2- 페닐아세틸Phenylacetyl )) 피롤리딘Pyrrolidine -2--2- 카복스아마이드Carboxamide )의 제조)

Figure pat00018
Figure pat00018

상기 실시예 1의 단계 2에서 제조예 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 사용하는 대신에 제조예 3에서 제조된 화합물(100 mg, 0.56 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(40 mg, 25%)을 얻었다.Except that the compound prepared in Preparation Example 3 (100 mg, 0.56 mmol) was used instead of the compound prepared in Preparation Example 1 (138 mg, 0.238 mmol) in Step 2 of Example 1 The objective compound (40 mg, 25%) was obtained by carrying out the same processes as in Example 1.

[α]d = -201.3˚(c=19 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -201.3 [deg.] (c = 19 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.09 (s, 2H), 7.68-7.60 (dd, 8H), 7.46-7.29 (m, 10H), 4.37 (m, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.87 (m, 2H), 3.45 (m, 2H), 2.16 (s, 12H), 2.16-1.97 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 2H); 1 H NMR (400 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 10.09 (s, 2H), 7.68-7.60 (dd, 8H), 7.46-7.29 (m, 10H), 4.37 (m, 2H), 2H), 3.87 (m, 2H), 3.45 (m, 2H), 2.16 (s, 12H), 2.16-1.97 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 2H);

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.51, 169.14, 138.32, 134.32, 129.07, 129.01, 128.23, 127.86, 126.40, 119.39, 71.44, 60.57, 47.19, 42.93, 29.23, 24.51; 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 170.51, 169.14, 138.32, 134.32, 129.07, 129.01, 128.23, 127.86, 126.40, 119.39, 71.44, 60.57, 47.19, 42.93, 29.23, 24.51;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C42H48N6O4:701.3810; found 701.3774.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 42 H 48 N 6 O 4 : 701.3810; found 701.3774.

<< 실시예Example 3> (S,2S,2'S)-N, 3> (S, 2S, 2'S) -N, N'N ' -(- ( 바이페닐Biphenyl -4,4'--4,4'- 다이일Dai )) 비스Bis (1-((S)-2-((1 - ((S) -2- ( 다이에틸아미노Diethylamino )-2-)-2- 페닐아세틸Phenylacetyl )) 피롤리딘Pyrrolidine -2--2- 카복스아마이드Carboxamide )의 제조)

Figure pat00019
Figure pat00019

단계 1: (2S,2'S)-다이-Step 1: (2S, 2 ' S) -Dia- terttert -부틸 2,2'-(- butyl 2,2 '- ( 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I ))비스()) Bis 옥소메틸렌Oxomethylene )) 다이피롤리딘Dipyrrolidine -1--One- 카르복실레이트의Carboxylate 제조 Produce

메틸렌클로라이드(38 ml)에 N-Boc-L-프롤린(8 g, 86.3 mmol), 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC, 19 g, 99 mmol) 및 벤지딘(benzidine, 7 g, 38 mmol)을 용해시키고, 상온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 후, 반응생성물을 메틸렌클로라이드 및 물을 이용하여 층분리하고, 분리된 유기층을 1N의 염산과 소금물을 이용하여 세척한 다음, 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시켰다. 건조된 상기 유기층을 여과하고, 감압증류하여 별도의 정제없이 갈색 고체의 목적화합물(20.7 g, 94%)을 얻었다. N-Boc-L-proline (8 g, 86.3 mmol), 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC, 19 g, 99 mmol) and Benzidine (7 g, 38 mmol) was dissolved and stirred at room temperature for 2 hours. After that, the reaction product separation layer using methylene chloride and water, and the separated organic layer was washed with a 1N hydrochloric acid and brine then dried over magnesium sulfate (MgSO 4). The dried organic layer was filtered and distilled under reduced pressure to obtain the title compound (20.7 g, 94%) as a brown solid without further purification.

[α]d = -93.1˚(c=10 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -93.1 [deg.] (c = 10 mg / mL in MeOH);

1H NMR(300 MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.06 (s, 2H), 7.69-7.59 (dd, 8H), 4.24 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 2.21 (m, 2H), 1.85 (m, 6H), 1.41-1.28 (app br s, 18H)l; 1 H NMR (300 MHz, DMSO -d 6, δ = 2.5 ppm): 10.06 (s, 2H), 7.69-7.59 (dd, 8H), 4.24 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 2.21 ( m, 2 H), 1.85 (m, 6 H), 1.41 - 1.28 (app br s, 18 H) 1;

13C NMR(300 MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 171.53, 153.17, 138.23, 134.45, 126.39, 119.58, 78.45, 60.39, 46.58, 31.04, 28.13, 27.95, 23.43; 13 C NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 171.53, 153.17, 138.23, 134.45, 126.39, 119.58, 78.45, 60.39, 46.58, 31.04, 28.13, 27.95, 23.43;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C32H42N4O6:578.31044; found 579.3152.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 32 H 42 N 4 O 6 : 578.31044; found 579.3152.

단계 2: Step 2: 다이메틸Dimethyl (2R,2'S)-1,1'-((2R,2'R)-2,2'-( (2R, 2'S) -1,1 '- ((2R, 2'R) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (3-(3- 메틸methyl -1-옥소-1-oxo 부탄butane -2,1--2,1- 다이일Dai )) 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

메틸렌클로라이드(1 ml) 및 트라이플루오로아세트산(1 ml)의 혼합용매에 상기 단계 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 용해시키고 상온에서 5시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 감압증류하여 휘발물질들을 모두 제거하고, 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드(EDC, 119 mg, 0.62 mmol), 상기 제조예 4에서 제조된 화합물(100 mg, 0.485 mmol), 다이이소프로필에틸아민(DIPEA, 208 μl, 1.192 mmol) 및 메틸렌클로라이드(1 ml)를 상기 반응 혼합물이 담겨 있는 반응용기에 4분 동안 첨가하고, 상온에서 75분 동안 교반하였다. 교반이 완료되면, 반응생성물을 메틸렌클로라이드와 물을 이용하여 층분리하고, 분리된 유기층을 물로 세척하였다. 세척된 유기층을 마그네슘설페이트(MgSO4)로 건조시키고 여과한 다음, 여과된 유기층을 감압건조하였다. 건조된 반응생성물을 컬럼크로마토그래피(실리카겔, 에틸아세테이트/n-헥산)로 정제하여 백색 고체의 목적화합물(34 mg, 22%)을 얻었다.The compound (138 mg, 0.238 mmol) prepared in the above Step 1 was dissolved in a mixed solvent of methylene chloride (1 ml) and trifluoroacetic acid (1 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 5 hours. Thereafter, the reaction mixture was distilled under reduced pressure to remove all volatile substances, and 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC, 119 mg, 0.62 mmol) The prepared compound (100 mg, 0.485 mmol), diisopropylethylamine (DIPEA, 208 μl, 1.192 mmol) and methylene chloride (1 ml) were added to the reaction vessel containing the reaction mixture for 4 minutes, Stir for 75 minutes. When the stirring was completed, the reaction product was layered using methylene chloride and water, and the separated organic layer was washed with water. Dry the washed organic layer over magnesium sulfate (MgSO 4) and filtered, followed by drying under reduced pressure the organic layer was filtered. The dried reaction product was purified by column chromatography (silica gel, ethyl acetate / n-hexane) to obtain the target compound (34 mg, 22%) as a white solid.

[α]d = 181.3˚(c=23 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = 181.3 [deg.] (c = 23 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.08 (s, 2H), 7.68-7.60 (dd, 8H), 7.43-7.26 (m, 10H), 4.70 (s, 2H), 4.43 (m, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.39 (q, 2H), 2.67-2.59 (m, 4H), 2.54-2.45 (m, 4H), 2.11-1.97 (m, 4H), 1.89-1.78 (m, 4H), 0.91 (t, 12H); 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 2.5 ppm): 10.08 (s, 2H), 7.68-7.60 (dd, 8H), 7.43-7.26 (m, 2H), 3.81 (m, 2H), 3.39 (q, 2H), 2.67-2.59 (m, 4H), 2.54-2.45 (m, 4 H), 0.91 (t, 12 H);

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.51, 169.84, 138.29, 137.54, 134.31, 129.09, 128.07, 127.47, 126.38, 119.38, 66.20, 60.45, 47.07, 43.17, 29.22, 24.58, 12.60; 13 C NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 39.52 ppm): 170.51, 169.84, 138.29, 137.54, 134.31, 129.09, 128.07, 127.47, 126.38, 119.38, 66.20, 60.45, 47.07, 43.17, 29.22, 24.58, 12.60 ;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C46H56N6O4:757.4436; found 757.4392.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 46 H 56 N 6 O 4 : 757.4436; found 757.4392.

<< 실시예Example 4>  4> 다이메틸Dimethyl (1S,1'S)-2,2'-((2S, 2'S)-2,2'-( (1S, 1'S) -2,2 '- ((2S, 2'S) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (2-옥소-1-(2-oxo-1- 페닐에탄Phenyl ethane -2,1--2,1- 다이일Dai )) 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

Figure pat00020
Figure pat00020

상기 실시예 1의 단계 2에서 제조예 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 사용하는 대신에 제조예 5에서 제조된 화합물(100 mg, 0.485 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(53 mg, 46%)을 얻었다.Except that the compound prepared in Preparation Example 5 (100 mg, 0.485 mmol) was used instead of the compound (138 mg, 0.238 mmol) prepared in Preparation Example 1 in Step 2 of Example 1 The target compound (53 mg, 46%) was obtained by carrying out the same processes as in Example 1.

[α]d = -226.3˚ (c=30 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -226.3 [deg.] (c = 30 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 9.95 (s, 2H), 7.74-7.58 (m, 9H), 7.51-7.30 (m, 10H), 7.14 (app br s, 1H), 5.51 (d, 2H), 4.42 (app br d, 2H), 3.83 (app br s, 2H), 3.55 (s, 6H), 3.20 (app br d, 2H), 2.04-1.79 (m, 8H); 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 2.5 ppm): 9.95 (s, 2H), 7.74-7.58 (m, 9H), 7.51-7.30 2H), 5.51 (d, 2H), 4.42 (app br d, 2H), 3.83 (app br s, 2H), 3.55 (s, ;

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.22, 168.35, 156.07, 138.09, 137.17, 134.43, 128.58, 128.03, 127.84, 126.36, 119.57, 60.69, 56.68, 51.63, 46.94, 29.33, 24.25; 13 C NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 39.52 ppm): 170.22, 168.35, 156.07, 138.09, 137.17, 134.43, 128.58, 128.03, 127.84, 126.36, 119.57, 60.69, 56.68, 51.63, 46.94, 29.33, 24.25 ;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C42H44N6O8:761.3293; found 761.3263.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 42 H 44 N 6 O 8 : 761.3293; found 761.3263.

< 실시예 5> (R,2S,2'S)-N, N' -( 바이페닐 -4,4'- 다이일 ) 비스 (1-((R)- 테트라하이드로퓨란 -2- 카보닐 ) 피롤리딘 -2- 카복스아마이드의 제조 <Example 5> (R, 2S, 2 'S) -N, N '- ( biphenyl-4,4'-di-yl) bis (1 - ((R) - te bit la dihydro-furan-2-carbonyl) Preparation of pyrrolidine- 2 -carboxamide

Figure pat00021
Figure pat00021

상기 실시예 1의 단계 2에서 제조예 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 사용하는 대신에 (R)-(+)-테트라하이드로퓨란-2-카르복실산(83 μl, 0.863 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(101 mg, 49%)을 얻었다.(R) - (+) - tetrahydrofuran-2-carboxylic acid (83 μl, 0.863 mmol) instead of using the compound prepared in Preparation Example 1 (138 mg, 0.238 mmol) in Step 2 of Example 1 ), The target compound (101 mg, 49%) was obtained.

[α]d = -152.9˚ (c=26 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -152.9 [deg.] (c = 26 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.21 (s, 2Htrans 또는 2Hcis), 10.05 (s, 2Htrans 또는 2Hcis), 7.67-7.59 (dd, 8H), 4.79 (d, 2Htrans 또는 2Hcis), 4.58 (t, 2Htrans 또는 2Hcis), 4.42 (d, 2Htrans 또는 2Hcis), 4.30 (t, 2Htrans 또는 2Hcis), 3.83-3.68 (m, 5Htrans/5Hcis), 3.58-3.37 (m, 3Htrans /3Hcis), 2.13-1.75 (m, 16Htrans /16Hcis); 1 H NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 2.5 ppm): 10.21 (s, 2H trans or cis 2H), 10.05 (s, 2H trans or 2H cis), 7.67-7.59 (dd, 8H), 4.79 ( d, 2H trans or cis 2H), 4.58 (t, 2H trans or cis 2H), 4.42 (d, 2H trans or cis 2H), 4.30 (t, 2H trans or cis 2H), 3.83-3.68 (m, 5H trans / 5H cis ), 3.58-3.37 (m, 3H trans / 3H cis ), 2.13-1.75 (m, 16H trans / 16H cis );

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.78, 170.52, 170.29, 170.13, 138.21, 134.31, 126.50, 126.43, 126.38, 126.31, 119.77, 119.44, 76.22, 76.08, 68.38, 68.18, 60.37, 59.77, 46.99, 46.62, 32.09, 29.16, 28.22, 25.32, 25.05, 24.62, 21.80; 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 170.78, 170.52, 170.29, 170.13, 138.21, 134.31, 126.50, 126.43, 126.38, 126.31, 119.77, 119.44, 76.22, 76.08, 68.38, 68.18, 60.37 , 59.77, 46.99, 46.62, 32.09, 29.16, 28.22, 25.32, 25.05, 24.62, 21.80;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C36H38N4O6:575.2864; found 575.2839.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 36 H 38 N 4 O 6: 575.2864; found 575.2839.

<< 실시예Example 6>  6> 다이메틸Dimethyl (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'R)-2,2'-( (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (1-(One- 옥소프로Oxopro 판-2,1-다이일)Di-yl) 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

Figure pat00022
Figure pat00022

상기 실시예 1의 단계 2에서 제조예 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 사용하는 대신에 제조예 6에서 제조된 화합물(100 mg, 0.514 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(69 mg, 47%)을 얻었다.Except that the compound prepared in Preparation Example 6 (100 mg, 0.514 mmol) was used instead of the compound (138 mg, 0.238 mmol) prepared in Preparation Example 1 in Step 2 of Example 1 The target compound (69 mg, 47%) was obtained by carrying out the same processes as in Example 1.

[α]d = +19.7˚ (c=23 mg/mL in CHCl3); [α] d = + 19.7˚ ( c = 23 mg / mL in CHCl 3);

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5ppm): 10.00 (s, 2H), 7.63-7.55 (dd, 8H), 7.32 (d, 2H), 4.43 (m, 2H), 4.30 (t, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.58 (m, 2H), 3.49 (s, 6H), 2.14 (m, 2H), 1.96 (m, 6H), 1.18 (d, 6H); 1 H NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 2.5ppm): 10.00 (s, 2H), 7.63-7.55 (dd, 8H), 7.32 (d, 2H), 4.43 (m, 2H), 4.30 (t 2H), 3.65 (m, 2H), 3.58 (m, 2H), 3.49 (s, 6H), 2.14 (m, 2H), 1.96 (m, 6H), 1.18

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 171.30, 170.80, 156.65, 138.59, 134.73, 126.73, 119.81, 60.62, 51.74, 48.36, 47.11, 29.70, 25.08, 17.19; 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 171.30, 170.80, 156.65, 138.59, 134.73, 126.73, 119.81, 60.62, 51.74, 48.36, 47.11, 29.70, 25.08, 17.19;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C32H40N6O8:637.2980; found 637.2949.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 32 H 40 N 6 O 8: 637.2980; found 637.2949.

<< 실시예Example 7>  7> 다이메틸Dimethyl (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'R)-2,2'-( (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (3,3-(3,3- 다이메틸Dimethyl -1--One- 옥소부탄Oxobutane -2,1--2,1- 다이일Dai )) 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

Figure pat00023
Figure pat00023

상기 실시예 1의 단계 2에서 제조예 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 사용하는 대신에 제조예 7에서 제조된 화합물(100 mg, 0.531 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(38 mg, 24%)을 얻었다.Except that the compound prepared in Preparation Example 7 (100 mg, 0.531 mmol) was used instead of the compound (138 mg, 0.238 mmol) prepared in Preparation Example 1 in Step 2 of Example 1 The objective compound (38 mg, 24%) was obtained by carrying out the same processes as in Example 1.

[α]d = -116.3˚ (c=33 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -116.3 [deg.] (c = 33 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 10.11 (s, 2H), 7.66-7.57 (dd, 8H), 7.09 (d, 2H), 4.48 (m, 2H), 4.23 (d, 2H), 3.79 (m, 2H), 3.63 (m, 2H), 3.54 (s, 6H), 2.18 (m, 2H), 2.00 (m, 2H), 1.89 (m, 4H), 0.98 (s, 18H); 1 H NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 2.5 ppm): 10.11 (s, 2H), 7.66-7.57 (dd, 8H), 7.09 (d, 2H), 4.48 (m, 2H), 4.23 (d 2H), 3.79 (m, 2H), 3.63 (m, 2H), 3.59 (s, 18H);

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.38, 169.58, 156.87, 138.27, 134.34, 126.41, 119.34, 60.24, 59.12, 51.48, 47.94, 34.46, 29.50, 26.37, 24.81; 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 170.38, 169.58, 156.87, 138.27, 134.34, 126.41, 119.34, 60.24, 59.12, 51.48, 47.94, 34.46, 29.50, 26.37, 24.81;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C38H52N6O8:721.3919; found 721.3882.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 38 H 52 N 6 O 8 : 721.3919; found 721.3882.

<< 실시예Example 8>  8> 다이메틸Dimethyl (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'R)-2,2'-( (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2' - 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 피롤리딘Pyrrolidine -2,1--2,1- 다이일Dai )))) 비스Bis (3-(3- 메틸methyl -1-옥소부탄-2,1--1-oxobutane-2,1- 다이일Dai )) 다이카바메이트의Dicarbamate 제조 Produce

Figure pat00024
Figure pat00024

상기 실시예 1의 단계 2에서 제조예 1에서 제조된 화합물(138 mg, 0.238 mmol)을 사용하는 대신에 제조예 2에서 제조된 화합물(100 mg, 0.572 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(69 mg, 42%)을 얻었다.Except that the compound (100 mg, 0.572 mmol) prepared in Preparation Example 2 was used instead of the compound (138 mg, 0.238 mmol) prepared in Preparation Example 1 in Step 2 of Example 1, The target compound (69 mg, 42%) was obtained by carrying out the same processes as in Example 1.

[α]d = -164.4˚(c=47 mg/mL in MeOH);[[alpha]] d = -164.4 [deg.] (c = 47 mg / mL in MeOH);

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5ppm): 10.11 (s, 2H), 7.67-7.58 (dd, 8H), 7.32 (d, 2H), 4.48 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.54 (s, 6H), 2.18 (m, 2H), 1.94 (m, 8H), 0.96 (d, 6H), 0.90 (d, 6H); 1 H NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 2.5ppm): 10.11 (s, 2H), 7.67-7.58 (dd, 8H), 7.32 (d, 2H), 4.48 (m, 2H), 4.05 (t (D, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 3.54 (s, 6H), 2.18 6H);

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 170.39, 170.37, 156.79, 138.26, 134.33, 126.38, 119.36, 60.22, 57.95, 51.42 47.24, 29.88, 29.46, 24.67, 18.92, 18.61; 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 170.39, 170.37, 156.79, 138.26, 134.33, 126.38, 119.36, 60.22, 57.95, 51.42 47.24, 29.88, 29.46, 24.67, 18.92, 18.61;

LC/MS: Anal. Calcd. For [M+H]+ C36H48N6O8:693.3606; found 693.3577.
LC / MS: Anal. Calcd. For [M + H] + C 36 H 48 N 6 O 8: 693.3606; found 693.3577.

<< 실시예Example 9>  9> 다이메틸Dimethyl (1S,1 (1S, 1 S'S ' )-2,2'-((4R,4'R)-4,4'-() -2,2 '- ((4R, 4'R) -4,4' - ( 바이페닐Biphenyl -4,4'-다이일비스(-4,4'-diylbis ( 아잔다이일Azandai I )))) 비스Bis (( 옥소메틸렌Oxomethylene )) 비스Bis (( 티아졸리딘Thiazolidine -4,3--4,3- 다이일Dai )))) 비스Bis (2-옥소-1-페(2-oxo-1- 닐에Neil 탄-2,1-Tan-2,1- 다이일Dai )) 바이카바메이트의Bicarbamate 제조 Produce

Figure pat00025
Figure pat00025

상기 실시예 3의 단계 1에서 N-Boc-L-프롤린(8 g, 86.3 mmol)을 사용하는 대신에 L-티오프롤린(5 g, 37.5 mmol)을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 수행하여 목적화합물(25 mg, 14%)을 얻었다.Example 1 was repeated except that L-thioproline (5 g, 37.5 mmol) was used instead of N-Boc-L-proline (8 g, 86.3 mmol) in step 1 of Example 3 above. The title compound (25 mg, 14%) was obtained by carrying out the same procedure.

1H NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=2.5 ppm): 9.89 (s, 2H), 7.93 (d, 2H), 7.73-7.16 (m, 18H), 5.64 (d, 2H), 4.87 (m, 4H), 4.53 (d, 2H), 3.58 (s, 6H), 3.31 (s, 2H), 3.20-3.16 (m, 2H); 1 H NMR (400MHz, DMSO- d 6, δ = 2.5 ppm): 9.89 (s, 2H), 7.93 (d, 2H), 7.73-7.16 (m, 18H), 5.64 (d, 2H), 4.87 (m , 4H), 4.53 (d, 2H), 3.58 (s, 6H), 3.31 (s, 2H), 3.20-3.16 (m, 2H);

13C NMR(400MHz, DMSO-d6, δ=39.52 ppm): 168.32, 167.90, 156.36, 137.76, 136.26, 134.68, 128.66, 128.25, 128.11, 126.42, 119.78, 63.18, 56.81, 51.76, 48.98, 33.08.
 13 C NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ,? = 39.52 ppm): 168.32, 167.90, 156.36, 137.76, 136.26, 134.68, 128.66, 128.25, 128.11, 126.42, 119.78, 63.18, 56.81, 51.76, 48.98,

<< 실험예Experimental Example 1> 본 발명에 따른 화합물에 대한 항C형 간염 바이러스 감염 효과의 평가 1 1 > Evaluation of the effect of the hepatitis C virus infection on the compounds according to the present invention 1

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들의 항C형 간염 바이러스 활성을 평가하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
The following experiments were conducted to evaluate the activity of anti-hepatitis C virus of biphenyl diamide derivatives according to the present invention.

먼저, 12개의 세포배양 웰을 가진 세포 배양판에 간암 세포주인 huh7.5.1 세포를 각 웰 당 약 5만 개씩 분주하였다. 분주된 세포는 10% (v/v)의 FBS(Fetal Bovine Serum SH30406.02, Hyclone Co.) 및 1% (v/v)의 항생제(페니실린/스트렙토마이신 용액 SV30010, Hyclone Co.)를 첨가한 DMEM 배양액(둘코스 개량 이글 배양액 12800-017, GIBCO Co.)을 이용하여 37℃의 6.0% 이산화탄소 세포 배양기(CO2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) 안에서 24시간 동안 배양하여 세포를 플레이트 바닥에 부착시켰다. 그 후, 리포터(reporter)로써 레닐라 루시페라아제 유전자(Remilla luciferase gene)를 가진 C형 간염 바이러스(JFH-5aFlucm4, PLoS One. 2011;6(8):e228808.)를 3시간 동안 분주된 세포에 접종하였다. 3시간의 바이러스 접종이 끝나면, 세포 배양액을 제거하고 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 9에서 제조된 화합물을 각각 1 μM의 농도로 배양액에 첨가하여 만든 새로운 세포 배양액을 각 웰에 주입하고, 37℃의 6.0% 이산화탄소 세포 배양기(CO2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) 안에서 3일 동안 배양하였다. 감염 3일 후에, 세포 배양액은 세포독성을 측정하기 위하여 따로 모아두고, 세포는 인산 완충 용액(PBS, phosphate Buffered Saline)으로 세척하고 100 μL의 1X 간접 분해 버퍼(passive lysis buffer, E1941)를 처리하여 용해시켰다. 용해된 세포액(10 μL)을 레닐라 루시페라아제 분석 시스템(Renilla Luciferase assay system, Promega, E2820)의 레닐라 루시페라아제 분석 시약(50 μL)에 주입하고 혼합하여 루미노미터(Luminometer, GLOMAX 20/20 Luminometer, Promega)에서 루시페라아제 측정(Luciferase measure) 프로그램을 이용하여 10초 동안 발광량(luminescence)을 측정하였다. 이때, 각각의 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 9의 화합물을 처리한 처리군 및 무처리군의 발광량을 3회씩 측정하여 그 평균을 비교 분석하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.First, huh7.5.1 cells, a hepatocellular cell line, were divided into 50,000 cells per well in a cell culture plate having 12 cell culture wells. Dissociated cells were supplemented with 10% (v / v) FBS (Fetal Bovine Serum SH30406.02, Hyclone Co.) and 1% (v / v) antibiotics (penicillin / streptomycin solution SV30010, Hyclone Co.) The cells were cultured for 24 hours in a 6.0% carbon dioxide cell incubator (CO 2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) at 37 ° C using a DMEM culture medium (Ducos-modified Eagle culture solution 12800-017, GIBCO Co.) And attached to the floor. Then, hepatitis C virus (JFH-5aFlucm4, PLoS One. 2011; 6 (8): e228808.) With the Remilla luciferase gene as a reporter was inoculated into the cells for 3 hours Respectively. After 3 hours of virus inoculation, the cell culture medium was removed, and a new cell culture medium prepared by adding the compounds prepared in Examples 1 to 9 according to the present invention to the culture medium at a concentration of 1 [mu] M was injected into each well, And incubated for 3 days in a 6.0% carbon dioxide cell incubator (CO 2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) at 37 ° C. After 3 days of infection, the cell culture medium was collected separately to measure cytotoxicity. Cells were washed with phosphate buffered saline (PBS) and treated with 100 μL of 1X indirect lysis buffer (E1941) . The lysed cell lysate (10 μL) was injected into the Renilla luciferase assay reagent (50 μL) of the Renilla Luciferase assay system (Promega, E2820) and mixed to obtain a luminometer (GLOMAX 20/20 Luminometer, Promega) using luciferase measure program for 10 seconds. At this time, the luminescence amounts of the treated and untreated groups treated with the compounds of Examples 1 to 9 according to the present invention were measured three times, and their average was compared and analyzed. The results are shown in FIG.

또한, 각 화합물의 세포독성을 측정하기 위하여 세포독성 분석 키트(cytotoxicity assay kit, Lonza, LT07-117)의 사용법에 따라 각 웰 당 배양한 배지 20 μL를 취하고 AK 검출 시약(AK detection reagent, ToxiLight® Non-destructive Cytotoxicity Bio Assay Kit LT07-117, Lonza Co., 100 μL)을 첨가하여 5분 동안 방치한 다음 빅터3(VICTOR3 TM wallaac 1420-051 Multiabel plate Counter, PerkinElmer Inc. Boston, MA, USA)로 월락 1420 워크스테이션(Wallac 1420 workstation) 프로그램을 이용하여 565 nm 파장에서, 1초 동안 발광하는 정도를 측정하였다. 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 9의 화합물 처리군 및 무처리군의 발광량을 비교분석하였다.
In order to measure the cytotoxicity of each compound, 20 μL of the culture medium per well was used according to the method of cytotoxicity assay kit (Lonza, LT07-117) and AK detection reagent (ToxiLight® Non-destructive Cytotoxicity Bio Assay Kit LT07-117 , Lonza Co., was added to 100 μL) and allowed to stand for 5 minutes Victor 3 (VICTOR 3 TM wallaac 1420-051 Multiabel plate Counter, PerkinElmer Inc. Boston, MA, USA) Using a Wallac 1420 workstation program at a wavelength of 565 nm for 1 second. The light emitting amounts of the compound treatment group and the non-treatment group of Examples 1 to 9 according to the present invention were compared and analyzed.

도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 간암 세포주에 존재하는 C형 간염 바이러스에 대하여 항바이러스 효과가 있는 것으로 나타났다. 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 9에서 제조된 화합물을 1 μM로 처리한 경우 C형 간염 바이러스의 억제활성이 약 50% 이상 있는 것으로 나타났으며, 특히 실시예 2, 3, 4, 7, 8 및 9에서 제조된 화합물들의 형광발광 활성은 0.00%로 나타나 항바이러스 효과가 현저히 우수한 것으로 확인되었다. 또한, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체의 세포독성 실험 결과, 1 μM의 농도로 처리한 경우 세포독성이 없는 것으로 확인되었으며 25 μM의 농도로 처리할 경우에는 세포독성를 확인하는 키트의 형광이 565 nm에서 발광하는 것으로 확인되어 세포독성이 있는 것으로 알 수 있다. 이로부터, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 효과가 우수한 것을 알 수 있으며, 세포독성이 낮아 바이페닐다이아마이드 유도체로 인한 부작용이 없는 것을 알 수 있다.
As shown in FIG. 1, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention have an antiviral effect against hepatitis C virus present in liver cancer cell lines. More specifically, when the compounds prepared in Examples 1 to 9 according to the present invention were treated with 1 μM, the inhibitory activity of hepatitis C virus was found to be about 50% or more. In particular, in Examples 2 and 3 , 4, 7, 8 and 9 showed a fluorescence activity of 0.00%, indicating that the antiviral effect was remarkably excellent. As a result of the cytotoxicity test of the biphenyl diamide derivative according to the present invention, it was confirmed that there was no cytotoxicity when treated at a concentration of 1 μM. When treated at a concentration of 25 μM, the fluorescence of the kit for confirming cytotoxicity was 565 nm and it is found to be cytotoxic. From these results, it can be seen that the biphenyl diamide derivative according to the present invention has an excellent antiviral effect against hepatitis C virus, and has low cytotoxicity and no side effects due to biphenyl diamide derivatives.

따라서, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들은 C형 간염 바이러스에 대하여 항C형 간염 바이러스 효과가 우수하고, 인체에 무해하므로, C형 간염 바이러스에 의해 발병되는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 또는 간세포성 암과 같은 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention have excellent anti-C hepatitis virus effect against hepatitis C virus and are harmless to the human body. Therefore, acute hepatitis C, chronic hepatitis C , Liver diseases such as liver cirrhosis or hepatocellular carcinoma.

<< 실험예Experimental Example 2> 본 발명에 따른 화합물에 대한 항C형 간염 바이러스 감염 효과의 평가 2 2 > Evaluation of the effect of anti-hepatitis C virus infection on the compounds according to the present invention 2

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들의 항C형 간염 바이러스 활성을 평가하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
The following experiments were conducted to evaluate the activity of anti-hepatitis C virus of biphenyl diamide derivatives according to the present invention.

먼저, 12개의 세포배양 웰을 가진 세포 배양판에 C형 간염 바이러스의 복제 및 번역과정을 측정할 수 있는 리플리콘(replicon)인 NK/R2AN을 가진 huh7.5.1 세포를 각 웰 당 약 5만 개 정도를 분주하였다. 분주된 세포는 최종농도가 10%(v/v)의 FBS(Fetal Bovine Serum SH30406.02, Hyclone Co.), 1%(v/v)의 항생제(페니실린/스트렙토마이신 용액 SV30010, Hyclone Co.) 및 G418(600 μg/mL, Calbiochem)을 첨가한 DMEM 배양액(둘코스 개량 이글 배양액 12800-017, GIBCO Co.)을 이용하여 37℃, 6.0% 이산화탄소 세포 배양기(CO2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) 안에서 24시간 동안 배양하여 세포를 플레이트 바닥에 부착시켰다. 그 후, 세포를 키우고 있던 세포 배양액은 제거하고 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 8에서 제조된 화합물을 각각 40 pM 내지 1μM의 농도로 배양액에 첨가하여 만든 새로운 세포 배양액을 각 웰에 주입하고, 37℃의 6.0% 이산화탄소 세포 배양기(CO2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) 안에서 3일 동안 배양하였다. 감염 3일 후에, 세포 배양액은 세포독성을 측정하기 위하여 따로 모아두고, 세포는 인산 완충 용액(PBS, phosphate Buffered Saline)으로 세척하고 100 μL의 1X 간접 분해 버퍼(passive lysis buffer, E1941)를 처리하여 용해시켰다. 용해된 세포액(10 μL)을 레닐라 루시페라아제 분석 시스템(Renilla Luciferase assay system, Promega, E2820)의 레닐라 루시페라아제 분석 시약(50 μL)에 주입하고 혼합하여 루미노미터(Luminometer, GLOMAX 20/20 Luminometer, Promega)에서 루시페라아제 측정(Luciferase measure) 프로그램을 이용하여 10초 동안 발광량(luminescence)을 측정하였다. 이때, 각각의 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 8의 화합물을 처리한 처리군 및 무처리군의 발광량을 3회씩 측정하여 그 평균을 비교 분석하였으며, 각 화합물의 농도에 따른 발광량을 시그마 플롯 프로그램(sigma plot program)을 이용하여 최대 50% 유효농도(hal maximal effective concentration, EC50)을 계산하여 하기 표 1에 나타내었다. 이때, 계산된 EC50이 100pm 미만인 경우에는 A; 100 pm - 1 nM인 경우에는 B; 1 nM - 100 nM인 경우에는 C; 및 100 nM를 초과하는 경우에는 D로 나누어 등급 표시하였다.First, huh7.5.1 cells with NK / R2AN replicon, which can measure the replication and translation process of hepatitis C virus, were added to cell culture plates with 12 cell culture wells at about 50,000 Respectively. Divided cells were treated with antibiotics (penicillin / streptomycin solution SV30010, Hyclone Co.) at a final concentration of 10% (v / v) FBS (Fetal Bovine Serum SH30406.02, Hyclone Co.) (CO 2 Incubator 311, manufactured by Forma Scientific Co, Inc) at 37 ° C using a DMEM culture medium (Ducose-modified eagle culture solution 12800-017, GIBCO Co.) supplemented with G418 (600 μg / mL, Calbiochem) Lnc. USA) for 24 hours to attach the cells to the bottom of the plate. Thereafter, the cell culture medium in which the cells were grown was removed, and the new cell culture medium prepared by adding the compounds prepared in Examples 1 to 8 according to the present invention to the culture medium at a concentration of 40 pM to 1 μM was injected into each well , And incubated for 3 days in a 6.0% carbon dioxide cell incubator (CO 2 Incubator 311, Forma Scientific Co, Lnc. USA) at 37 ° C. After 3 days of infection, the cell culture medium was collected separately to measure cytotoxicity. Cells were washed with phosphate buffered saline (PBS) and treated with 100 μL of 1X indirect lysis buffer (E1941) . The lysed cell lysate (10 μL) was injected into the Renilla luciferase assay reagent (50 μL) of the Renilla Luciferase assay system (Promega, E2820) and mixed to obtain a luminometer (GLOMAX 20/20 Luminometer, Promega) using luciferase measure program for 10 seconds. At this time, the luminescence amounts of the treated and untreated groups treated with the compounds of Examples 1 to 8 according to the present invention were measured three times, and their average was compared and analyzed. The luminescence amount according to the concentration of each compound was measured by a sigma plot The maximum maximal effective concentration (EC 50 ) was calculated using a program (sigma plot program) and is shown in Table 1 below. At this time, if the calculated EC 50 is less than 100 pm, A; 100 pm - 1 nM; C for 1 nM-100 nM; And D when it is more than 100 nM.

또한, 각 화합물의 세포독성을 측정하기 위하여 세포독성 분석 키트(cytotoxicity assay kit, Lonza, LT07-117)의 사용법에 따라 각 웰 당 배양한 배지 20 μL를 취하고 AK 검출 시약(AK detection reagent, ToxiLight® Non-destructive Cytotoxicity Bio Assay Kit LT07-117, Lonza Co., 100 μL를 첨가하여 5분 동안 방치한 다음 빅터3(VICTOR3 TM wallaac 1420-051 Multiabel plate Counter, PerkinElmer Inc. Boston, MA, USA)로 월락 1420 스테이션(Wallac 1420 workstation) 프로그램을 이용하여 565 nm 파장에서, 1초 동안 발광하는 정도를 측정하였다. 본 발명에 따른 실시예 1 내지 실시예 8의 화합물 처리군 및 무처리군의 발광량을 비교분석하였다.In order to measure the cytotoxicity of each compound, 20 μL of the culture medium per well was used according to the method of cytotoxicity assay kit (Lonza, LT07-117) and AK detection reagent (ToxiLight® in Non-destructive Cytotoxicity Bio Assay Kit LT07-117 , Lonza Co., it was added to 100 μL was allowed to stand for 5 minutes Victor 3 (VICTOR 3 TM wallaac 1420-051 Multiabel plate Counter, PerkinElmer Inc. Boston, MA, USA) The degree of light emission for 1 second at a wavelength of 565 nm was measured using a Wallac 1420 workstation program. The light emission amounts of the compound treatment group and the no treatment group of Examples 1 to 8 according to the present invention were compared Respectively.

50% 저해 농도 등급50% inhibition concentration grade 실시예 1Example 1 DD 실시예 2Example 2 BB 실시예 3Example 3 CC 실시예 4Example 4 AA 실시예 5Example 5 DD 실시예 6Example 6 -- 실시예 7Example 7 CC 실시예 8Example 8 CC

상기 표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들은 C형 간염 바이러스에 대하여 우수한 항바이러스 효과가 있는 것으로 확인되었다. 보다 구체적으로, 실시예 2, 3, 4, 7 및 8에서 제조된 화합물은 EC50 값이 1 nM 이하로 나타나 항바이러스 효과가 뛰어난 것으로 나타났으며, 특히 실시예 4에서 제조된 화합물의 경우 EC50값이 100 pm 미만으로 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 활성이 현저히 뛰어난 것으로 확인되었다. 또한, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체의 세포독성 실험 결과, 25 μM의 농도로 처리할 경우에는 세포독성를 확인하는 키트의 형광이 565 nm에서 발광하는 것으로 확인되어 세포독성이 있는 것으로 알 수 있다. 이로부터, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 현저히 낮은 농도에서도 C형 간염 바이러스에 대한 항바이러스 효과가 우수한 것을 알 수 있으며, 세포독성이 낮아 바이페닐다이아마이드 유도체로 인한 부작용이 없는 것을 알 수 있다.
As shown in Table 1, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention were found to have excellent antiviral effect against hepatitis C virus. More specifically, the compounds prepared in Examples 2, 3, 4, 7, and 8 showed an EC 50 value of 1 nM or less, showing excellent antiviral effect. Especially, in the case of the compound prepared in Example 4, EC 50 value was less than 100 pm, it was confirmed that the antiviral activity against hepatitis C virus was remarkably excellent. In addition, as a result of the cytotoxicity test of the biphenyl diamide derivative according to the present invention, when it was treated at a concentration of 25 μM, the fluorescence of the kit for confirming cytotoxicity was confirmed to be emitted at 565 nm, . From these results, it can be seen that the biphenyl diamide derivative according to the present invention has an excellent antiviral effect against hepatitis C virus even at a significantly low concentration, and has low cytotoxicity and no side effects due to biphenyl diamide derivative have.

따라서, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들은 C형 간염 바이러스에 대하여 상당히 낮은 농도에서도 항C형 간염 바이러스 효과가 현저히 우수할 뿐만 아니라 인체에 무해하므로, C형 간염 바이러스에 의해 발병되는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 또는 간세포성 암과 같은 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention are remarkably excellent in anti-C hepatitis virus effect even at a very low concentration against hepatitis C virus, and are harmless to the human body. Therefore, the acute C-type Hepatitis, chronic hepatitis C, liver cirrhosis, or hepatocellular carcinoma.

<< 실험예Experimental Example 3> 약물의 약리활성 평가 3> Assessment of Pharmacological Activity of Drugs

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체의 약물동태(pharmacokinetic) 변화를 통한 약물의 약리활성을 평가하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
The following experiment was conducted to evaluate the pharmacological activity of the drug through the pharmacokinetic change of the biphenyl diamide derivative according to the present invention.

수컷 마우스에 대하여 경구 및 정맥투여를 수행하여 약물동태 변화를 확인하였다. 실시예 4에서 제조된 화합물을 2.5 mg/ml의 농도로 용해시킨 후, 경구 투여의 경우, 구강으로 용해된 약물을 5 mg/kg로 투여하고 경정맥으로부터 정해진 시간에 채혈하였으며, 정맥투여의 경우, 수컷 마우스의 경정맥 및 대퇴정맥에 관을 삽입하여 대퇴정맥으로 용해된 약물을 5 mg/kg로 투여하고, 정해진 시간에 채혈을 하였다. 채혈된 혈액을 원심분리하여 혈장을 분리하고, 적정 유기용매를 사용하여 혈장 및 뇨 시료를 전처리한 후, LC-MS/MS로 농도를 분석하였다. 이때, LC-MS/MS는 질량분석기(Mass spectrometry, Agilent 6460 QQQ, Agilent), LC 램프(Agilent 1260, Agilent), 오토샘플러(Agilent 1260, Agilent) 및 자료 분석 시스템(Peak Sample Data System, Analyst 1.4.2, Applied Biosystems)을 사용하여 측정하였으며, 측정 조건은 다음과 같다; 시료 주입량: 10μl, 유속: 0.3 ml/min, 컬럼: 3 μm의 C18 컬럼(50 mm × 2.0 mm, 12 nm, YMC), 용출용매: 아세토니트릴:10 mM 암모니움포메이트 완충용액=90:10 (v/v) 및 MS/MS 조건: MRM 모드: HCV(m/z 761.81→70.1), IS(이미프라민, m/z 281.2→86.2). 경구 및 정맥 투여 후 분석된 약물의 혈중 농도-시간 결과값으로부터, WinNonlin(Pharsight, USA)을 이용하여 비구획 약물동태학 매개변수(noncompartmental pharmacokinetic parameter)를 산출하였으며, 그 결과를 하기의 표 2, 도 2 및 도 3에 나타내었다.Oral and intravenous administration to male mice was performed to confirm the pharmacokinetic changes. The compound prepared in Example 4 was dissolved at a concentration of 2.5 mg / ml. In the case of oral administration, the drug dissolved in the oral cavity was administered at 5 mg / kg and blood was collected from the jugular vein at a predetermined time. A tube was inserted into the jugular vein and femoral vein of a male mouse, and the drug dissolved in the femoral vein was administered at 5 mg / kg, and blood was collected at a predetermined time. Plasma was separated by centrifugation of collected blood, plasma and urine samples were pretreated with appropriate organic solvent, and then analyzed by LC-MS / MS. The LC-MS / MS was analyzed using a mass spectrometer (Agilent 6460 QQQ, Agilent), an LC lamp (Agilent 1260, Agilent), an autosampler (Agilent 1260, Agilent) .2, Applied Biosystems). The measurement conditions were as follows; (50 mm x 2.0 mm, 12 nm, YMC) eluting solvent: acetonitrile: 10 mM ammonium formate buffer solution = 90: 10 v / v) and MS / MS conditions: MRM mode: HCV (m / z 761.81 → 70.1), IS (imipramine, m / z 281.2 → 86.2). Noncompartmental pharmacokinetic parameters were calculated from the blood concentration-time results of the drugs analyzed after oral and intravenous administration using WinNonlin (Pharsight, USA), and the results are shown in Tables 2, 2 and 3.

매개변수parameter 정맥주사Intravenous injection 경구투여Oral administration Tmax (시간)T max (time) -- 2 ± 1.732 ± 1.73 Cmax (μg/ml)C max (μg / ml) -- 0.188 ± 0.05180.188 ± 0.0518 T1 /2 (시간)T 1/2 (hours) 4.09 ± 3.064.09 ± 3.06 15 ± 9.515 ± 9.5 AUC0 -t (μg·hr/ml)AUC 0- t (μg · hr / ml) 9.16 ± 1.039.16 ± 1.03 1.83 ± 0.5651.83 + - 0.565 AUC0 -∞ (μg·hr/ml) AUC 0 -∞ (μg · hr / ml) 9.37 ± 1.069.37 ± 1.06 2.5 ± 0.4982.5 ± 0.498 CL (L/kg/hr)CL (L / kg / hr) 0.538 ± 0.05950.538 ± 0.0595 -- Vss (L/kg)V ss (L / kg) 1.31 ± 0.1441.31 + 0.144 -- Ft (%)F t (%) 2020 --

상기 표 2, 도 2 및 도 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 생체 내에서 우수한 약물 효과를 나타내는 것으로 확인되었다. 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 약물 투여 후 24시간까지의 AUC0 - 24값은 정맥 투여한 경우 9.16 μg/ml, 경구 투여한 경우 1.83 μg/ml로 나타났으며, 무한시간까지의 AUC0 -∞값은 정맥 투여한 경우 9.37μg/ml, 경구 투여한 경우 2.5 μg/ml인 것으로 나타났다. 또한, 경구 투여한 경우의 혈장 내 약물의 최대농도(Cmax)는 0.188 μg/ml로 확인되었으며, 약물의 농도가 최대에 이르는데 걸리는 시간(Tmax)은 2시간으로 확인되었다. 나아가, 상기 측정값들로부터 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체의 생체 이용률은 20%인 것으로 확인되었다. 이로부터, 본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 생체 내에 투여되고 2시간이 경과되었을 때 그 농도가 최대가 되며, 생체 이용률이 20%에 달하는 우수한 약물 효과를 발휘하는 것을 알 수 있다.
As shown in Tables 2, 2 and 3, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention were found to exhibit excellent drug effects in vivo. More specifically, the AUC 0 - 24 value of the biphenyl diamide derivative according to the present invention was 9.16 μg / ml in the case of intravenous administration and 1.83 μg / ml in the case of oral administration up to 24 hours after the administration of the drug, The AUC 0 -∞ up to time was 9.37 μg / ml for intravenous administration and 2.5 μg / ml for oral administration. In addition, the maximum concentration (C max ) of the drug in the plasma was 0.188 μg / ml when administered orally, and the time (T max ) required to reach the maximum concentration of the drug was 2 hours. Furthermore, the bioavailability of the biphenyl diamide derivative according to the present invention was found to be 20% from the above measured values. From this, it can be seen that the compound of the formula (1) according to the present invention exhibits a maximum drug concentration when administered within 2 hours and exhibits an excellent drug effect with a bioavailability of 20%.

따라서, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들은 생체 내에 빠른 속도로 흡수되고, 생체 내에서 높은 생체 이용률로 약물 효과를 발휘하여 약리활성이 우수하므로, C형 간염 바이러스에 의해 발병되는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 또는 간세포성 암과 같은 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention are rapidly absorbed in vivo and exhibit pharmacological effects with high bioavailability in vivo. Therefore, the acute hepatitis C virus , Chronic hepatitis C, liver cirrhosis or hepatocellular carcinoma.

<< 실험예Experimental Example 4>  4> hERGhERG 리간드Ligand 결합 분석 Bond analysis

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들의 심장독성으로 인한 부작용 발생여부를 평가하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
The following experiment was conducted to evaluate the occurrence of side effects due to cardiac toxicity of the biphenyl diamide derivatives according to the present invention.

돌연사는 체내에 흡수된 약물들의 hERG 포타슘 채널 저해를 통한 심전도 QT 간격(electrodardiogram(ECG) QT interval)의 증가로 인하여 유발되는 심장독성(TdPa, 심실부정맥) 때문에 발생된다. 이에, 본 발명에 따른 실시예 4에서 제조된 화합물의 Herg 저해활성을 hERG와 높은 친화력을 갖는 적색형광 hERG 채널 리간드 검출제를 이용한 형광 분극화도를 측정을 통하여 평가하였다. 이때, 대조군으로써 hERG 억제제인 아스테미졸(astemizole)을 동일한 방법으로 수행하여 hERG 저해 활성을 비교평가하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다.Sudden death is caused by cardiac toxicity (TdPa, ventricular arrhythmia) caused by an increase in the electrocardiogram QT interval (ECG QT interval) through hERG potassium channel inhibition of drugs absorbed into the body. Thus, the Herg inhibitory activity of the compound prepared in Example 4 according to the present invention was evaluated by measuring fluorescence polarization degree using a red fluorescent hERG channel ligand detecting agent having high affinity with hERG. At this time, astemizole, a hERG inhibitor, was used as a control in the same manner to compare hERG inhibitory activities. The results are shown in Table 3.

억제률 (μM)Inhibition rate (μM) 실시예 Example 9.89.8 대조군Control group 0.00190.0019

상기 표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 hERG에 대한 저해효과가 낮은 것을 알 수 있다. 보다 구체적으로, 본 발명에 따른 실시예 4에서 제조된 화합물을 hERG에 처리하였을 경우, 실시예 4의 화합물과 hERG의 세포막의 결합이 잘 형성되지 않으므로 실시예 4의 화합물과 대비하여 hERG와 친화력이 높은 적색형광 hERG 채널 리간드 검출제가 hERG 세포막에 결합하여 높은 분극화도를 나타내었으며, 실시예 4의 화합물의 분극화도를 통하여 측정된 hERG의 억제 유효농도는 9.8 μM인 것으로 나타났다. 반면, hERG의 저해제로서 알려져 있는 아스테미졸을 사용한 대조군의 경우 hERG의 억제 유효농도는 0.0019 μM으로, 본 발명에 따른 실시예 4의 화합물에 비하여 약 5160배의 높은 저해활성이 있는 것으로 나타났다. 이로부터, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 hERG에 대한 억제 활성이 현저히 낮으므로 돌연사를 유발하는 심장독성에 대한 부작용이 없는 것을 알 수 있다.
As shown in Table 3, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention have a low inhibitory effect on hERG. More specifically, when the compound prepared in Example 4 according to the present invention was treated with hERG, the binding between the compound of Example 4 and the cell membrane of hERG was not well formed, so that the hERG affinity was higher than that of Example 4 The high red fluorescence hERG channel ligand detection agent bound to the hERG cell membrane and showed a high degree of polarization, and the inhibitory effective concentration of hERG measured by the polarization degree of the compound of Example 4 was found to be 9.8 μM. On the other hand, in the control group using astemizole, which is known as an inhibitor of hERG, the inhibitory effective concentration of hERG was 0.0019 μM, which is about 5160 times higher than that of the compound of Example 4 according to the present invention. From this, it can be seen that the biphenyl diamide derivative according to the present invention has a remarkably low inhibitory activity against hERG, and thus has no adverse effect on cardiac toxicity that causes sudden death.

따라서, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체들은 hERG을 저해하는 효과가 현저히 낮으므로 hERG의 저해로 인하여 유발되는 심장독성 등의 부작용이 없으므로, C형 간염 바이러스에 의해 발병되는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 또는 간세포성 암과 같은 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention have a remarkably low effect of inhibiting hERG, so that there is no side effect such as cardiac toxicity caused by inhibition of hERG. Therefore, the hepatitis C virus, acute hepatitis C, Hepatitis C, liver cirrhosis, or hepatocellular carcinoma.

<< 실험예Experimental Example 5> 혈장 안정성 평가 5> Evaluation of plasma stability

본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체의 생체 내 세포독성을 평가하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
In order to evaluate the cytotoxicity of the biphenyl diamide derivative according to the present invention in vivo, the following experiment was conducted.

먼저, 본 발명에 따른 실시예 4에서 제조된 화합물을 다이메틸설폭사이드에 5 μM이 되도록 용해시켜 시료용액을 제조하였다. pH 7.4의 인산완충용액과 혈장을 1:1로 혼합시킨 혈장 용액(495 μl)을 96-웰 플레이트의 각 웰에 주입하고, 상기에서 제조된 시료용액(5 μl)을 주입하였다. 그 후 상기 플레이트의 리드(lid)를 덮고 오비탈 쉐이커(orbital shaker)를 이용하여 37℃에서 100 rpm으로 0.5시간, 1시간, 4시간 동안 진탕배양하고, 0℃-5℃의 아세토나이트릴을 플레이트에 첨가하여 반응을 종결시켰다. 이때, 시료용액을 처리하고 경과시간이 0시간인 경우는 혈장용액이 있는 플레이트에 시료용액을 주입함과 동시에 아세토나이트릴를 주입하여 반응을 종결시켰다. 반응이 종결된 상기 플레이트를 냉동보관한 다음, 10분 동안 3000 rpm에서 원심분리하였다. 원심분리가 완료되면 상등액(100 μl)을 96-웰 분석 플레이트에 주입하여 LC-MS/MS 분석을 수행하였다. 0시간 경과한 경우의 측정값을 기준으로 각 시료처리 경과시간에 따른 측정값을 대비하여 처리시간에 따른 혈장 생존률을 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.First, a sample solution was prepared by dissolving the compound prepared in Example 4 according to the present invention to 5 μM in dimethylsulfoxide. A plasma solution (495 μl) in which phosphate buffer solution of pH 7.4 and 1: 1 of plasma was mixed was injected into each well of a 96-well plate, and the sample solution (5 μl) prepared above was injected. Thereafter, the lid of the plate was covered and incubated with shaking at 100 rpm for 0.5 hour, 1 hour, and 4 hours at 37 ° C using an orbital shaker, and acetonitrile at 0 ° C to -5 ° C was added to plate &Lt; / RTI &gt; to terminate the reaction. At this time, when the sample solution was treated and the elapsed time was 0 hours, the sample solution was injected into the plate with the plasma solution, and the reaction was terminated by injecting acetonitrile. The plate, in which the reaction was terminated, was cryopreserved and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes. Upon completion of centrifugation, supernatant (100 [mu] l) was injected into the 96-well assay plate for LC-MS / MS analysis. The plasma survival rate according to the treatment time was calculated by comparing the measured value according to the elapsed time of each sample based on the measured value when the elapsed time was 0 hours, and the results are shown in Table 4 below.

0.5시간 경과 후의
생존률(%)After 0.5 hour
Survival rate (%) 1시간 경과 후의
생존률(%)After 1 hour
Survival rate (%) 4시간 경과 후의
생존율(%)After 4 hours
Survival rate (%) 실시예 4Example 4 ＞99> 99 ＞99> 99 ＞99> 99

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 생체 내 세포독성이 없는 것으로 확인되었다. 보다 구체적으로, 마우스 혈장에 본 발명에 따른 실시예 4의 화합물을 처리하고 4시간이 경과된 후에도 마우스 혈장의 생존률은 99% 이상인 것으로 나타났다. 이로부터, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 생체 내 세포독성이 없는 것을 알 수 있다.
As shown in Table 4, the biphenyl diamide derivatives according to the present invention were found not to be cytotoxic in vivo. More specifically, the mouse plasma was found to have a survival rate of 99% or more even after 4 hours of treatment with the compound of Example 4 according to the present invention in mouse plasma. From this, it can be seen that the biphenyl diamide derivative according to the present invention is not cytotoxic in vivo.

따라서, 본 발명에 따른 바이페닐다이아마이드 유도체는 생체 내 세포에 대한 세포독성이 없어 인체에 안전하므로, C형 간염 바이러스에 의해 발병되는 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 또는 간세포성 암과 같은 간질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
Therefore, the biphenyl diamide derivative according to the present invention has no cytotoxicity against cells in vivo and is safe for the human body. Therefore, the biphenyl diamide derivative according to the present invention can be used for the treatment of acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis or hepatocellular carcinoma And can be usefully used as a pharmaceutical composition for preventing or treating the same liver disease.

한편, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체는 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 상기 바이페닐다이아마이드 유도체를 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
Meanwhile, the biphenyl diamide derivative represented by the formula (1) according to the present invention can be formulated into various forms according to the purpose. Hereinafter, some formulations containing the biphenyl diamide derivative according to the present invention as an active ingredient are exemplified, and the present invention is not limited thereto.

<< 제제예Formulation example 1>  1> 산제의Sanje 제조 Produce

화학식 1의 화합물 2 g2 g &lt; RTI ID = 0.0 &gt;

유당 1 gLactose 1 g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
The above components were mixed and packed in airtight bags to prepare powders.

<< 제제예Formulation example 2> 정제의 제조 2> Preparation of tablets

화학식 1의 화합물 100 ㎎100 mg of the compound of formula (1)

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg of magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.

<< 제제예Formulation example 3> 캡슐제의 제조 3> Preparation of capsules

화학식 1의 화합물 100 ㎎100 mg of the compound of formula (1)

옥수수전분 100 ㎎Corn starch 100 mg

유당 100 ㎎Lactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 ㎎2 mg of magnesium stearate

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
After mixing the above components, the capsules were filled in gelatin capsules according to the conventional preparation method of capsules.

<< 제제예Formulation example 4> 주사제의 제조 4> Preparation of injection

화학식 1의 화합물 100 ㎎100 mg of the compound of formula (1)

만니톨 180 ㎎180 mg mannitol

Na2HPO4ㆍ2H2O 26 ㎎Na 2 HPO 4 .2H 2 O 26 mg

증류수 2974 ㎎2974 mg of distilled water

통상적인 주사제의 제조방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 함유시켜 주사제를 제조하였다.
According to the conventional method for preparing an injectable preparation, an injectable preparation was prepared by incorporating the aforementioned components in the amounts indicated.

<< 제제예Formulation example 5> 건강식품의 제조 5> Manufacture of health food

화학식 1의 화합물 1000 ㎎1000 mg of the compound of formula (1)

비타민 혼합물 적량Vitamin mixture quantity

비타민 A 아세테이트 70 ㎍70 [mu] g of vitamin A acetate

비타민 E 1.0 ㎎Vitamin E 1.0 mg

비타민 0.13 ㎎0.13 mg of vitamin

비타민 B2 0.15 ㎎0.15 mg of vitamin B2

비타민 B6 0.5 ㎎0.5 mg vitamin B6

비타민 B12 0.2 ㎍0.2 [mu] g vitamin B12

비타민 C 10 ㎎10 mg vitamin C

비오틴 10 ㎍Biotin 10 μg

니코틴산아미드 1.7 ㎎Nicotinic acid amide 1.7 mg

엽산 50 ㎎50 mg of folic acid

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎Calcium pantothenate 0.5 mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity

황산제1철 1.75 ㎎1.75 mg of ferrous sulfate

산화아연 0.82 ㎎0.82 mg of zinc oxide

탄산마그네슘 25.3 ㎎Magnesium carbonate 25.3 mg

제1인산칼륨 15 ㎎15 mg of potassium phosphate monobasic

제2인산칼슘 55 ㎎Secondary calcium phosphate 55 mg

구연산칼륨 90 ㎎Potassium citrate 90 mg

탄산칼슘 100 ㎎100 mg of calcium carbonate

염화마그네슘 24.8 ㎎24.8 mg of magnesium chloride

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

<< 제제예Formulation example 6> 건강 음료의 제조 6> Manufacture of health drinks

화학식 1의 화합물 1000 ㎎1000 mg of the compound of formula (1)

구연산 1000 ㎎Citric acid 1000 mg

올리고당 100 g100 g of oligosaccharide

매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g

타우린 1 gTaurine 1 g

정제수를 가하여 전체 900 ㎖Purified water was added to a total of 900 ml

통상의 건강 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2l 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강 음료 조성물 제조에 사용하였다.The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was stirred and heated at 85 ° C for about 1 hour. The resulting solution was filtered and sterilized in a sterilized 2 liter container, Was used in the preparation of the composition.

상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호 도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Although the composition ratio is relatively mixed with the ingredient suitable for the favorite drink, it is also possible to arbitrarily modify the blending ratio according to the regional or national preference such as the demand class, demand country, use purpose, and the like.

<< 제제예Formulation example 7> 기타 건강식품의 제조 7> Manufacture of other health food

7-1. 음료의 제조7-1. Manufacturing of beverages

꿀 522 ㎎Honey 522 mg

치옥토산아미드 5 ㎎5 mg &lt; RTI ID = 0.0 &gt;

니코틴산아미드 10 ㎎Nicotinic acid amide 10 mg

염산리보플라빈나트륨 3 ㎎3 mg of sodium riboflavin hydrochloride

염산피리독신 2 ㎎Pyridoxine hydrochloride 2 mg

이노시톨 30 ㎎Inositol 30 mg

오르트산 50 ㎎Orthoic acid 50 mg

화학식 1의 화합물 0.48-1.28 ㎎0.48-1.28 mg of the compound of Formula 1

물 200 ㎖200 ml of water

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.
A beverage was prepared using the above-mentioned composition and content by a conventional method.

7-2. 7-2. 츄잉껌의Of chewing gum 제조 Produce

껌베이스 20 %Gum base 20%

설탕 76.36-76.76 %Sugar 76.36-76.76%

화학식 1의 화합물 0.24-0.64 %Compounds of formula (1) 0.24-0.64%

후르츠향 1 %Fruit flavor 1%

물 2 %Water 2%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.
Chewing gum was prepared using the above-mentioned composition and content by a conventional method.

7-3. 캔디의 제조7-3. Manufacture of candy

설탕 50-60 %Sugar 50-60%

물엿 39.26-49.66 %Starch syrup 39.26-49.66%

화학식 1의 화합물 0.24-0.64 %Compounds of formula (1) 0.24-0.64%

오렌지향 0.1 %Orange fragrance 0.1%

상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 캔디를 제조하였다.
The composition and the content of the candy were prepared using a conventional method.

7-4. 밀가루 식품의 제조7-4. Manufacture of flour food products

화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체를 0.5 내지 5 중량부를 밀가루 100 중량부에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
0.5 to 5 parts by weight of a biphenyl diamide derivative represented by the formula (1) was added to 100 parts by weight of wheat flour, and bread, cake, cookies, crackers and noodles were prepared by using the mixture to prepare a health improving food.

7-5. 유제품(7-5. dairy product( dairydairy productsproducts )의 제조)

화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체를 5 내지 10 중량부를 우유 100 중량부에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
5 to 10 parts by weight of a biphenyl diamide derivative represented by the formula (1) was added to 100 parts by weight of milk, and various dairy products such as butter and ice cream were prepared using the milk.

7-6. 7-6. 선식의Solar 제조 Produce

현미 30 % Brown rice 30%

율무 15 %Yulmu 15%

보리 20 %Barley 20%

들깨 7 % Perilla 7%

검정콩 7 % Black soybeans 7%

검은깨 7 %Black sesame 7%

화학식 1의 화합물 3 %3% &lt; tb &gt;

영지 0.5 %Manure 0.5%

지황 0.5 %0.5%

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화 시켜서 건조한 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메시의 분말로 제조하였다. 검은콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조한 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메시의 분말로 제조하였다. 분말로 분쇄된 곡물류 및 종실류와 본 발명의 화학식 1의 바이페닐다이아마이드 유도체를 상기와 같은 비율로 배합하여 제조하였다.Brown rice, barley, glutinous rice, and yulmu were alphalized by a known method and dried, and the powder was prepared into a powder having a particle size of 60 mesh by a pulverizer. Black beans, black sesame seeds, and perilla seeds were steamed and dried by a known method, and then powdered with a particle size of 60 meshes by a grinder. The grains and seeds pulverized by the powder were mixed with the biphenyl diamide derivative of the present invention represented by the formula (1) in the above ratios.

Claims (9)

하기 화학식 1로 표시되는 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체:
[화학식 1]
Figure pat00026

(상기 화학식 1에서,
R1은 수소; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시; 비치환 또는 할로겐, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-C4의 알콕시로 치환된 C6-C12의 아릴; 또는 C1-C4의 알콕시카보닐로 치환된 아미노이고;
R2는 수소; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시; 또는 1 이상의 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 C1-C4의 알콕시카보닐로 치환된 아미노이고;
상기 R1 및 R2는 이들이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께, 질소(N) 원자, 산소(O) 원자 및 황(S) 원자로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 5 내지 7원자 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고; 및
X는 산소(O) 원자, 황(S) 원자 또는 메틸렌(CH2)이다).
A novel biphenyl diamide derivative represented by the following formula (1), a pharmaceutically acceptable salt or an optical isomer thereof:
[Chemical Formula 1]
Figure pat00026

(In the formula 1,
R 1 is hydrogen; Linear or branched alkyl of C1-C4; Straight or branched alkoxy of C1-C4; C6-C12 aryl substituted by unsubstituted or halogen, C1-C4 straight or branched chain alkyl, C1-C4 alkoxy; Or amino substituted by C1-C4 alkoxycarbonyl;
R 2 is hydrogen; Linear or branched alkyl of C1-C4; Straight or branched alkoxy of C1-C4; Or amino substituted by at least one C1-C4 straight chain or branched alkyl or C1-C4 alkoxycarbonyl;
R 1 and R 2 together with the carbon atom to which they are bonded form a 5- to 7-membered ring containing at least one heteroatom selected from the group consisting of a nitrogen (N) atom, an oxygen (O) atom and a sulfur (S) Lt; / RTI &gt; may form heterocycloalkyl; And
X is an oxygen (O) atom, a sulfur (S) atom or methylene (CH 2 ).
제1항에 있어서,
상기 R1은 수소; 메틸; 에틸; 프로필; 메톡시; 에톡시; 페닐; 플루오로, 클로로, 브로모, 아이오도, 메틸, 에틸, 프로필, 메톡시 또는 에톡시로 치환된 페닐; 메톡시카보닐아미노; 에톡시카보닐아미노; 또는 프로폭시카보닐아미노이고;
R2는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, tert-부틸, 메톡시, 에톡시, 메틸아미노, 다이메틸아미노, 에틸아미노, 다이에틸아미노, 프로필아미노, 메톡시카보닐아미노, 에톡시카보닐아미노 또는 프로폭시카보닐아미노이고;
상기 R1 및 R2는 이들이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께, 헤테로사이클로알킬을 형성하는 경우 피롤리딘, 테트라하이드로퓨란, 테트라하이드로티오펜, 피페리딘 또는 테트라하이드로-2H-파이란을 형성할 수 있고; 및
X는 황(S) 원자 또는 메틸렌(CH2)인 것을 특징으로 하는 바이페닐다이아마이드 유도체.
The method according to claim 1,
R &lt; 1 &gt; is hydrogen; methyl; ethyl; profile; Methoxy; Ethoxy; Phenyl; Phenyl substituted with fluoro, chloro, bromo, iodo, methyl, ethyl, propyl, methoxy or ethoxy; Methoxycarbonylamino; Ethoxycarbonylamino; Or propoxycarbonylamino;
R 2 is selected from hydrogen, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert-butyl, methoxy, ethoxy, methylamino, dimethylamino, ethylamino, diethylamino, propylamino, methoxycarbonylamino Lt; / RTI &gt; is methoxycarbonylamino or propoxycarbonylamino;
Said R 1 and R 2 together with the carbon atoms to which they are attached form pyrrolidine, tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene, piperidine or tetrahydro-2H-pyran when forming heterocycloalkyl Have; And
Wherein X is a sulfur (S) atom or methylene (CH 2 ).
제1항에 있어서,
상기 R1은 수소, 페닐 또는 메톡시카보닐아미노이고;
R2는 메틸, 이소프로필, tert-부틸, 다이메틸아미노, 다이에틸아미노 또는 메톡시카보닐아미노이고;
상기 R1 및 R2는 이들이 결합되어 있는 탄소 원자와 함께, 헤테로사이클로알킬을 형성하는 경우 테트라하이드로퓨란을 형성할 수 있고; 및
X는 황(S) 원자 또는 메틸렌(CH2)인 것을 특징으로 하는 바이페닐다이아마이드 유도체.
The method according to claim 1,
Wherein R 1 is hydrogen, phenyl or methoxy-carbonyl amino;
R 2 is methyl, isopropyl, tert-butyl, dimethylamino, diethylamino or methoxycarbonylamino;
Said R 1 and R 2 taken together with the carbon atoms to which they are attached can form tetrahydrofuran if they form heterocycloalkyl; And
Wherein X is a sulfur (S) atom or methylene (CH 2 ).
제1항에 있어서,
상기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체:
(1) 다이메틸 (2R,2'R)-1,1'-((2S, 2'S)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(3-메틸-1-옥소부탄-2,1-다이일)다이카바메이트;
(2) (S,2S,2'S)-N,N'-(바이페닐-4,4'-다이일)비스(1-((S)-2-(다이메틸아미노)-2-페닐아세틸)피롤리딘-2-카복스아마이드);
(3) (S,2S,2'S)-N,N'-(바이페닐-4,4'-다이일)비스(1-((S)-2-(다이에틸아미노)-2-페닐아세틸)피롤리딘-2-카복스아마이드);
(4) 다이메틸 (1S,1'S)-2,2'-((2S, 2S')-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(2-옥소-1-페닐에탄-2,1-다이일)다이카바메이트
(5) (R,2S,2'S)-N,N'-(바이페닐-4,4'-다이일)비스(1-((R)-테트라하이드로퓨란-2-카보닐)피롤리딘-2-카복스아마이드;
(6) 다이메틸 (2S, 2'S)-1,1'-((2S,2R')-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(1-옥소프로판-2,1-다이일)다이카바메이트;
(7) 다이메틸 (2S,2S')-1,1'-((2S,2R')-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(3,3-다이메틸-1-옥소부탄-2,1-다이일)다이카바메이트;
(8) 다이메틸 (2S,2'S)-1,1'-((2S, 2'R)-2,2'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(피롤리딘-2,1-다이일))비스(3-메틸-1-옥소부탄-2,1-다이일)다이카바메이트; 및
(9) 다이메틸 (1S,1S')-2,2'-((4R,4'R)-4,4'-(바이페닐-4,4'-다이일비스(아잔다이일))비스(옥소메틸렌)비스(티아졸리딘-4,3-다이일))비스(2-옥소-1-페닐에탄-2,1-다이일)바이카바메이트;로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종인 것을 특징으로 하는 바이페닐다이아마이드 유도체.
The method according to claim 1,
The biphenyl diamide derivative represented by the above formula (1)
(1) Synthesis of dimethyl (2R, 2'R) -1,1 '- ((2S, 2'S) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidin-2,1-diyl)) bis (3-methyl-1-oxobutane-2,1-diyl) dicarbamate;
(2) (S, 2S, 2'S) -N, N '- (biphenyl-4,4'- Pyrrolidine-2-carboxamide);
(3) Synthesis of (S, 2S, 2'S) -N, N '- (biphenyl-4,4'- Pyrrolidine-2-carboxamide);
(4) Synthesis of dimethyl (1S, 1'S) -2,2 '- ((2S, 2S') - 2,2 '- (biphenyl- Methylene) bis (pyrrolidine-2,1-diyl)) bis (2-oxo-1-phenylethane-2,1-diyl) dicarbamate
(5) Synthesis of (R, 2S, 2'S) -N, N '- (biphenyl-4,4'- 2-carboxamide;
(6) Synthesis of dimethyl (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2R') - 2,2 '- (biphenyl- Methylene) bis (pyrrolidine-2,1-diyl)) bis (1-oxopropane-2,1-diyl) dicarbamate;
(7) Synthesis of dimethyl (2S, 2S ') - 1,1' - ((2S, 2R ') - 2,2' - (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidine-2,1-diyl)) bis (3,3-dimethyl-1-oxobutane-2,1-diyl) dicarbamate;
(8) Synthesis of dimethyl (2S, 2'S) -1,1 '- ((2S, 2'R) -2,2'- (biphenyl-4,4'-diyl bis (azodioyl) Oxomethylene) bis (pyrrolidin-2,1-diyl)) bis (3-methyl-1-oxobutane-2,1-diyl) dicarbamate; And
(9) Synthesis of dimethyl (1S, 1S ') - 2,2' - ((4R, 4'R) -4,4'- (biphenyl- (Oxomethylene) bis (thiazolidin-4,3-diyl)) bis (2-oxo-1-phenylethane-2,1-diyl) bicarbamate Lt; / RTI &gt;
하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,
화학식 2로 표시되는 벤지딘과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 탈보호화제와 반응시켜 화학식 5로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2); 및
상기 단계 2에서 제조된 화학식 5의 화합물과 화학식 6으로 표시되는 카르복실산을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체를 제조하는 단계(단계 3);를 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항의 신규한 바이페닐다이아마이드 유도체의 제조방법:
[반응식 1]
Figure pat00027

(상기 반응식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 제1항에서 정의한 바와 같고; 및
PG는 아민 보호기이다).
As shown in Scheme 1 below,
Reacting a benzidine represented by the formula (2) with a compound represented by the formula (3) to prepare a compound represented by the formula (4) (step 1);
Reacting the compound of Formula 4 prepared in Step 1 with a deprotecting agent to prepare a compound represented by Formula 5 (Step 2); And
Reacting a compound of formula (5) prepared in step 2 with a carboxylic acid of formula (6) to prepare a biphenyl diamide derivative represented by formula (1) (step 3) &Lt; / RTI &gt; A process for the preparation of a novel biphenyl diamide derivative,
[Reaction Scheme 1]
Figure pat00027

(In the above Reaction Scheme 1, R 1 , R 2 and X are the same as defined in claim 1; and
PG is an amine protecting group).
하기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물:
[화학식 1]
Figure pat00028

(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 제1항에서 정의한 바와 같다).
A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of hepatitis C virus-related hepatitis, comprising a biphenyl diamide derivative represented by the following formula (1), a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient:
[Chemical Formula 1]
Figure pat00028

(Wherein R 1 , R 2 and X are the same as defined in claim 1).
제6항에 있어서,
상기 C형 간염 바이러스 관련 간질환은 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 및 간세포성 암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 간질환인 것을 특징으로 하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
The method according to claim 6,
The hepatitis C virus-related liver disease is one or more liver diseases selected from the group consisting of acute hepatitis C, chronic hepatitis C, liver cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. A pharmaceutical composition.
하기 화학식 1로 표시되는 바이페닐다이아마이드 유도체, 이의 식품학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 광학 이성질체를 유효성분으로 함유하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 개선용 건강기능식품:
[화학식 1]
Figure pat00029

(상기 화학식 1에 있어서, R1, R2 및 X는 제1항에서 정의한 바와 같다).
A bifenamide derivative represented by the following formula (1), a pharmaceutically acceptable salt thereof or an optical isomer thereof as an active ingredient:
[Chemical Formula 1]
Figure pat00029

(Wherein R 1 , R 2 and X are the same as defined in claim 1).
제8항에 있어서,
상기 C형 간염 바이러스 관련 간질환은 급성 C형 간염, 만성 C형 간염, 간경변 및 간세포성 암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 간질환인 것을 특징으로 하는 C형 간염 바이러스 관련 간질환 예방 또는 개선용 건강기능식품.9. The method of claim 8,
The hepatitis C virus-related liver disease is one or more liver diseases selected from the group consisting of acute hepatitis C, chronic hepatitis C, cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Health functional food for.
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