KR20140020685A

KR20140020685A - 신규한 락토코쿠스 종 균주 및 이의 용도

Info

Publication number: KR20140020685A
Application number: KR1020120088050A
Authority: KR
Inventors: 노문철; 박찬선; 이우송; 이승웅; 오현미
Original assignee: 한국생명공학연구원
Priority date: 2012-08-10
Filing date: 2012-08-10
Publication date: 2014-02-19
Also published as: KR101599769B1

Abstract

본 발명은 신규한 균주인 수탁번호 KCTC 12170BP의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L; 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 약학조성물; 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 락토코쿠스 종 KR-050L 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)에 대한 활성저해용 조성물; 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 식품, 식품첨가제, 사료 또는 사료첨가제; 및 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 개인위생용품을 제공하는 것이다.

Description

신규한 락토코쿠스 종 균주 및 이의 용도{A novel Lactococcus sp. strain and use thereof}

본 발명은 신규한 균주인 수탁번호 KCTC 12170BP의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L; 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 약학조성물; 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 락토코쿠스 종 KR-050L 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)에 대한 활성저해용 조성물; 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 식품, 식품첨가제, 사료 또는 사료첨가제; 및 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 개인위생용품을 제공하는 것이다.

인터루킨-6(interleukin-6; IL-6)는 B 세포 자극인자 2(B cell stimulatory factor 2) 또는 인터페론-β2(interferon-β2; INF-β2)로도 불리는 사이토카인(cytokine)이다. IL-6는 B 임파구의 활성화에 관여하는 분화인자로서 발견되었다. 그 후, 여러 가지 세포의 기능에 영향을 미치는 다기능 사이토카인이라는 것이 밝혀졌다. IL-6는 세포막 위에 존재하는 두 종류의 단백질을 매개로 그 생물학적 활성을 전달하는데, 하나는 IL-6가 결합하는 단백질인 IL-6 수용체이며, 다른 하나는 gp130이다. IL-6 수용체는 세포막을 관통하여 발현되어 있는 분자량 약 80 kDa의 막결합형 단백질이며, gp130은 비리간드 결합성의 시그널 전달에 속하는 분자량 약 130 kDa의 막단백질이다. IL-6는 먼저 IL-6 수용체와 IL-6/IL-6 수용체 복합체를 형성하고, 이어서 gp130과 결합한다. 리간드와 수용체들의 결합 후, 세포 내에서는 인산전이반응(transphosphorylation)에 의해 JAK2(Janus kinase 2)가 활성화된다. 활성화된 JAK2에 의해 수용체 세포질 도메인(cytoplasmic domain)의 여러 타이로신 잔기(tyrosine residues)가 인산화(phosphorylation)되고 이는 SH2나 다른 인산타이로신 결합 모티프(phosphotyrosine binding motif)를 가지고 있는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)과 같은 세포질(cytoplasm) 내 단백질의 도킹 사이트(docking site) 역할을 하게 된다. 수용체의 세포질 도메인에 결합한 STAT3은 JAK2에 의해 인산화된 후 수용체로부터 분리된다. 활성화된 STAT3은 세포질 내에서 서로 결합하여 동종(homo-) 또는 이종이합체(heterodimer)를 이룬 후 핵 내로 들어가 목적 유전자의 인식 서열(recognition sequence)에 결합하여 전사(transcription)를 증가시킨다.

이러한 IL-6에 의해 유도되는 신호전달체계는 염증성 질환 및 여러 암질환에 관여함이 보고되어 있으며, 따라서 IL-6에 의해 유도되는 신호전달체계의 억제는 상기 질환들의 예방 또는 치료에 유용하다. 현재, IL-6의 신호전달체계를 억제하는 기능에 대한 연구는 항 IL-6 R 항체가 가장 많이 연구되고 있다. 상기 항 IL-6 항체의 류마티스성 관절염에 대한 활액세포 성장억제가 보고되었고, 이 외에 형질구증가증, 고면역글로불린혈증, 빈혈, 신염, 악액질, 목출업자 질병 및 맥관증식신염과 같은 IL-6 산물에 기여하는 질병의 치료제로서 개시된 바 있다. 다발성경화증, 포도막염, 만성 갑상선염, 지연과민증, 접촉피부염 및 아토피성 피부염과 같은 민감성 T 세포 관련 질병의 예방 또는 치료제로서 및 전신홍반루푸스 치료제로서 기술되어 있다. 또한 크론병 치료제로서 기술한 특허에서는 활성성분으로서 항 IL-6 R 항체를 개시하였다. 상기 항 IL-6 R 항체는 또한 췌장염 치료제, 건선 치료제의 활성성분으로도 보고되었다. 추가로, 연소성 특발성 위축증 치료제의 활성성분으로도 개시되었다. 그러나, 이들 단백질은 외래 단백질로서 인지될 수 있는 에피토프를 가질 수 있으며, 치료제로 사용될 경우 여전히 면역원성일 수 있다. 그러나, 단백질이 아닌 소분자 화합물(small molecule compound)들은 이러한 면역체계에 인지되지 않으므로 현재 많은 연구가 이루어지고 있다.

또한 암질환과 관련하여 IL-6 신호전달체계는 중간 매개인자인 STAT3과 많은 관련이 있다. 이는 골수종, 유방암종, 전립선암, 뇌종양, 두경부암종, 흑색종, 백혈병 및 림프종, 특히 만성 골수성 백혈병 및 다발성 골수종을 포함하여 여러 형태의 암에 관여하는 것으로 보고되어 있다. 쥐 및 인간 전립선암 양쪽에서 유래된 세포들은 구조적으로 활성화된 STAT3을 갖는 것으로 밝혀졌으며, STAT3은 일부 급성 백혈병 및 T 세포 림프종에서 구조적으로 활성화되는 것으로 밝혀졌다. 흥미롭게도, STAT3은 만성 림프성 백혈병에서 세린 잔기 위에 구조적으로 인산화되는 것으로 밝혀졌다. STAT3은, 다발성 골수종을 가진 환자로부터의 골수 단핵 세포 및 배양액 양쪽 모두에서, 골수종 종양 세포에서 구조적으로 활성인 것으로 밝혀졌다. 이러한 세포는 Fas-매개 세포고사에 내성이며 높은 수준의 Bcl-xL을 발현한다. STAT3 신호전달은 세포고사에 대한 내성을 부여함으로써 골수종 종양 세포의 생존을 위해 필수적인 것으로 밝혀졌다. 한편, 최근에는 췌장암을 비롯한 Ras에 의해 유도되는 암 환자군에서 이상적으로 IL-6가 분비되고, IL-6를 제거함으로써 Ras에 의한 종양 세포의 성장 및 혈관생성을 억제할 수 있을 뿐만 아니라 종양의 크기를 감소시킬 수 있음이 보고되었다. 또한, EGFR이 변이된 폐 선암(lung adenocarcinoma)에서 IL-6의 과발현으로 인해 STAT3이 활성화됨이 밝혀짐에 따라, IL-6에 의한 gp130/JAK/STAT3 경로가 항암치료에 있어서 새로운 타겟으로 부상하고 있다.

한편, 인터루킨-11(interleukin-11; IL-11)은 IL-6 패밀리에 속하는 염증성 사이토카인으로 IL-6와 거의 같은 신호전달체계를 갖는 것으로 조혈, 면역반응, 염증 및 각종 암세포에서 그 발현이 증가되어 암 진행에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 최근 IL-11이 그 수용체인 IL-11Rα와 gp130에 결합하여 위암, 대장암에서 세포 증식 및 암 침윤을 촉진시키는 작용을 하는 것으로 보고되었고, IL-11/STAT3 신호에 의해 smad7이 활성화되고 동시에 TGFβ 시그널을 유도하는 smad 활성제(activator)가 차단됨으로써 종양발생 프로그램(oncogenic program; 항 세포자멸사 유전자(antiapoptotic gene), 혈관형성촉진 유전자(proangiogenic gene), 증식 유전자(proliferative gene))이 활성화되어 염증 관련 위종양이 유도됨이 보고되었다. 따라서, IL-11에 의한 gp130/JAK/STAT3 경로가 항암치료에 있어서 새로운 타겟으로 부상하고 있다.

본 발명자들은 천연자원 가운데 신규 젖산균 락토코쿠스 종 KR-050L(Lactococcus sp. KR-050L) 균주를 발견하였으며, 이의 추출물 및 분획물을 이용하여 IL-6에 의해 활성화되는 염증 관련 전사인자인 STAT3의 전사활성 및 인산화를 저해하는 것을 확인하였다. 또한 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 추출물 및 이의 분획물은 IL-6에 의해 유도되는 신호전달체계를 저해하는 활성이 우수하므로, IL-6로 인해 유발되는 염증성 질환 및 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 활용가능함을 확인하고 이에 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 하나의 목적은 수탁번호 KCTC 12170BP의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)에 대한 활성저해용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 식품, 식품첨가제, 사료 또는 사료첨가제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 개인위생용품을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 수탁번호 KCTC 12170BP의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L을 제공한다.

본 발명의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) 균주는 각종 김치 및 젓갈 등과 같은 발효식품으로부터 최초로 분리 동정한 균주로, 다양한 실험을 통해 선별된 향과 맛이 좋은 우수한 균주이다. 단세포는 단축 0.6 내지 0.8 μm 및 장축 0.8 내지 1.5 μm의 크기를 갖는 구균타입(cocci type; 도 1)으로, 균총은 MRS 아가 배지에서 원형의 집락(circular colony)을 형성하며 연한 크림색을 띤다. 상기 선별한 신규 균주의 유전자(서열목록 1)를 분석하여 표준균주 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis)와 높은 상동성을 갖는 균주임을 확인하여 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L라 명명하였으며, 한국생명공학연구원 생물자원센터(Korean Collection for Type Culture; KCTC)에 2012년 3월 21일자로 기탁하고, 수탁번호 KCTC 12170BP를 부여받았다.

본 발명에서 "락토코쿠스 종(Lactococcus sp.)"은 일명 젖산균이라 불리는 스트렙토코쿠스 그룹 N1 속(genus Streptococcus Group N1)에 포함되는 락트산(젖산) 박테리아 속 균주이다. 글루코스 발효의 주된 또는 유일한 생산물로서 일종의 생산물, 예를 들어 락트산을 생산하는 호모퍼멘터(homofermentor)로 알려져 있다. 이러한 특성은 pH, 글루코스 농도 및 영양제한 등의 배양조건을 조절함으로 변화시킬 수 있다. 단독으로, 쌍으로 또는 사슬형태로 발견되는 그램양성(gram-positive), 카탈라제 음성(catalase-negative), 비운동성 구균(non-motile cocci)으로, 7℃ 이하의 저온에서 성장하는 것으로 알려진 균주이다. 현재까지 하기의 7개 종이 밝혀져 있다: L. lactis, L. garvieae, L. plantarum, L. raffinolactis, L. piscium, L. chungangensis 및 L. fujiensis. 이들 균주는 치즈, 요구르트 등의 발효 유제품을 생산하는 낙농산업에 널리 사용되고 있다. 특히 산업적 유제품 발효에 널리 사용되는 것은 L. lactis이다. 유제품 발효에 사용되기 위해서는 오염성 박테리아의 성장을 억제할 수 있도록 우유를 빠르게 산성화하여 발효산물의 pH를 강하시켜야 할 뿐 아니라 최종 생산 제품의 풍미 즉, 맛과 향을 좋게 할 수 있어야 한다. 또한 산업적 규모로 이용하기 위해서는 저렴한 비용으로 쉽게 성장, 증식시킬 수 있는 것이어야 한다.

또 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 약학조성물을 제공한다.

본 발명의 용어 "배양액"은 락토코쿠스 종 KR-050L이 시험관 내에서 성장 및 생존할 수 있도록 영양분을 공급할 수 있는 배지에 상기 균주를 일정기간 배양하여 얻는 상기 균주, 이의 대사물, 여분의 영양분 등을 포함하는 전체 배지를 의미하나, 균주 배양 후 균주를 제거한 배양액도 포함한다. 한편, 상기 배양액 중 균체를 제거한 액체를 "상등액"이라고도 하며, 배양액을 일정시간 가만히 두어 하층에 가라앉은 부분을 제외한 상층의 액체만을 취하거나, 여과를 통해 균체를 제거하거나, 배양액을 원심분리하여 하부의 침전을 제거하고 상부의 액체만을 취하여 획득할 수 있다. 상기 "균체"는 본 발명의 균주 자체를 의미하는 것으로 발효식품으로부터 분리하여 선별한 균주 자체 또는 상기 균주를 배양하여 배양액으로부터 분리한 균주를 포함한다. 상기 균체는 배양액을 원심분리하여 하층에 가라앉은 부분을 취하여 획득할 수 있고, 또는 중력에 의해 배양액의 하층으로 가라앉으므로 일정 시간동안 가만히 두었다가 상부의 액체를 제거함으로써 획득할 수 있다.

상기 IL-6 또는 IL-11에 의해 유발되는 염증성 질환은 골관절염(osteoarthritis), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 골다공증(osteoporosis), 형질구증가증(plasmacytosis), 고면역글로불린혈증(hyperimmunoglobulinemia), 빈혈(anemia), 신염(nephritis), 악액질(cachexia), 목축업자 질병, 맥관증식신염(vascular proliferative nephritis), 다발성경화증(multiple sclerosis), 포도막염(uveitis), 만성 갑상선염(chronic thyroiditis), 지연과민증(delayed-type hypersensitivity), 접촉피부염(contact dermatitis), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 전신홍반루푸스(systemic lupus erythematosus), 크론병(Crohn's disease), 췌장염(pancreatitis), 건선(psoriasis), 연소성 특발성 위축증(arcus idiopathic atrophy), 당뇨병(diabete mellitus) 및 알츠하이머(Alzheimer's disease)일 수 있다. 또한 상기 IL-6 또는 IL-11에 의해 유발되는 암은 췌장암(pancreatic cancer), 유방암(breast cancer), 전립선암(prostatic cancer), 뇌종양(brain tumor), 두경부암종(head and neck cancer), 흑색종(melanoma), 골수종(myeloma), 백혈병(leukemia), 림프종(lymphoma), 간암(hepatoma), 위암(gastric cancer), 결장암(colon cancer), 골암(bone cancer), 자궁암(uterine cancer), 난소암(ovarian cancer), 직장암(rectal cancer), 식도암(esophageal cancer), 소장암(small intestine tumor), 항문부근암(anal cancer), 나팔관암종(fallopian tube carcinoma), 자궁내막암종(endometrial carcinoma), 자궁경부암종(cervical carcinoma), 질암종(vaginal carcinoma), 음문암종(vulva carcinoma), 호지킨병(Hodgkin's disease), 방광암(bladder cancer), 신장암(renal cancer), 수뇨관암(ureteral cancer), 신장세포암종(renal cell carcinoma), 신장골반암종 및 중추신경계(central nervous system) 종양일 수 있다.

본 발명의 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액의 추출물은 에틸아세테이트(ethyl acetate; EtOAc) 또는 에탄올(ethanol, ethyl alcohol; EtOH)로 추출한 추출물일 수 있다. 나아가, 본 발명의 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액의 분획물은 에틸아세테이트 추출물을 메탄올로 분획한 분획물일 수 있다.

바람직하게, 락토코쿠스 종 KR-050L을 수 일간 배양하고 얻은 배양액을 원심분리하여 균체와 상등액을 분리한 후 각각에 해당부피의 2 내지 20배, 바람직하게는 3 내지 5배 부피의 비극성 용매(예를 들어, 에틸아세테이트)를 이용하여 20 내지 40℃, 바람직하게는 실온에서, 12시간 내지 4일, 바람직하게는 3일간 추출할 수 있다. 추출 방법은 냉침추출, 환류냉각추출 또는 초음파추출 등의 공지의 방법을 제한없이 이용할 수 있다. 바람직하게는 냉침추출로 1회 내지 5회 연속 추출하여 감압여과할 수 있다. 이후, 여과추출물을 진공회전농축기로 20 내지 40℃, 바람직하게는 실온에서 감압농축하고 물, C1 내지 C6 저급알콜 또는 이들의 혼합용매로 분획하여, 수용성 또는 저급알콜 가용성 조추출물을 수득할 수 있다.

본 발명의 구체적인 실시예에 따르면, 락토코쿠스 종 KR-050L 균체 에틸아세테이트 추출물 또는 이의 100% 메탄올 분획물(도 3), 락토코쿠스 종 KR-050L 상등액 에틸아세테이트 추출물 및 이의 메탄올 분획물, 바람직하게는 40 내지 100% 메탄올 분획물(도 4) 및 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액 동결건조물의 에틸아세테이트 및 에탄올 추출물(도 5)이 농도의존적으로 STAT3 활성을 저해시킬 수 있음을 확인하였다.

본 발명의 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 약학조성물은 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액의 추출물, 락토코쿠스 종 KR-050L 균체 또는 상등액의 추출물 또는 이들의 분획물을 바람직하게는 고형분을 기준으로 총 중량의 0.0001 내지 10 중량% 포함할 수 있으며, 보다 바람직하게는 0.001 내지 1 중량% 포함할 수 있다.

또한 본 발명의 약학조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 용어 "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제, 부형제, 윤활제 등 당업계에 공지된 것이라면 제한없이 사용할 수 있다. 또한 본 발명의 약학조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 나아가, 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태의 피부 외용제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 젖산균 락토코쿠스 sp. KR-050L 추출물 및 분획물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

한편, 본 발명의 약학조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 용어 "투여"란, 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

상기 용어 "개체"란 IL-6 또는 IL-11에 의해 유발되는 염증성 질환 또는 암이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 바람직하게는, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.

상기 용어 "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 바람직하게 본 발명의 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액의 추출물, 락토코쿠스 종 KR-050L 균체 또는 상등액의 추출물 또는 이들의 분획물은 고형분을 기준으로 1일 0.0001 내지 100 mg/체중 kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 mg/체중 kg으로 투여할 수 있다. 투여는 상기 권장 투여량을 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)에 대한 활성저해용 조성물을 제공한다.

본 발명의 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물은 IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)에 대한 저해활성을 갖는다. 따라서, IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3의 활성저해용 조성물로 사용될 수 있다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 식품, 식품첨가제, 사료 또는 사료첨가제를 제공한다.

상기 식품은 건강기능식품 뿐만 아니라, 인간이 널리 통상적으로 매일 섭취하는 일반적인 식품을 포함하는 것이다. 건강기능식품으로서 이용될 경우 식품학적으로 허용 가능한 담체 또는 첨가제와 함께 당해 기술분야에 공지되어 있는 통상적인 건강기능식품의 제형으로 제제화될 수 있다. 상기 건강기능식품은 예를 들어 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 현탁액, 에멀젼, 시럽제, 액제, 엑스제, 차, 젤리, 또는 음료 등으로 제조될 수 있다.　상기 식품학적으로 허용 가능한 담체 또는 첨가제는 제조하고자 하는 제형의 제조에 당해 기술분야에서 사용 가능한 것으로 공지되어 있는 임의의 담체 또는 첨가제가 이용될 수 있다.

바람직하게 상기 식품은 마아가린, 지방 지속성(fat continuous) 또는 물 지속성(water continuous) 또는 양쪽 지속성(bicontinuous) 스프레드, 지방 감소된 스프레드, 초콜렛, 또는 초콜렛 코팅 또는 초콜렛 속(fillings) 또는 베이커리 속과 같은 과자류, 아이스크림, 아이스크림 코팅, 아이스크림 함유물, 드레싱, 마요네즈, 요구르트, 치즈, 크림 대체물, 건조 스프, 드링크, 시리얼 바, 소스, 스낵바, 유제품, 임상 영양식품 또는 소아 제제로 사용할 수 있다. 보다 바람직하게는 발효식품일 수 있으며, 발효식품의 예로는 김치, 채소발효물, 된장, 간장, 청국장, 젓갈, 발효된 유제품(발효유, 요구르트, 치즈) 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

사료 첨가제로서 이용될 경우, 본 발명의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물은 20 내지 90wt% 고농축액이거나 분말 또는 과립형태로 제조될 수 있다. 상기 사료 첨가제는 구연산, 후말산, 아디픽산, 젖산, 사과산 등의 유기산이나 인산나트륨, 인산칼륨, 산성 피로인산염, 폴리인산염(중합인산염) 등의 인산염이나, 폴리페놀, 카테킨, 알파-토코페롤, 로즈마리 추출물, 비타민 C, 녹차 추출물, 감초 추출물, 키토산, 탄닌산, 피틴산 등의 천연 항산화제 중 어느 하나 또는 하나 이상을 추가로 포함할 수 있다. 사료로서 이용될 경우, 상기 조성물은 통상의 사료 형태로 제제화될 수 있으며, 통상의 사료 성분을 함께 포함할 수 있다.

상기 사료 첨가제 및 사료는 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩, 및 해바라기를 주성분으로 하는 사료; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조 성분 등을 더 포함할 수 있으며, 이외에도 영양 보충제, 소화 및 흡수 향상제, 성장 촉진제 등을 추가로 포함할 수 있다.

상기 사료 첨가제는 동물에게 단독으로 투여하거나 식용 담체 중에서 다른 사료 첨가제와 조합하여 투여할 수도 있다. 또한, 상기 사료 첨가제는 탑 드레싱으로서 또는 이들을 동물 사료에 직접 혼합하거나 또는 사료와 별도의 경구 제형으로 용이하게 동물에게 투여할 수 있다. 상기 사료 첨가제를 동물 사료와 별도로 투여할 경우, 당해 기술분야에 잘 알려진 바와 같이 약제학적으로 허용 가능한 식용 담체와 조합하여, 즉시 방출 또는 서방성 제형으로 제조할 수 있다. 이러한 식용 담체는 고체 또는 액체, 예를 들어 옥수수 전분, 락토오스, 수크로오스, 콩 플레이크, 땅콩유, 올리브유, 참깨유 및 프로필렌글리콜일 수 있다. 고체 담체가 사용될 경우, 사료 첨가제는 정제, 캡슐제, 산제, 트로키제 또는 함당정제 또는 미분산성 형태의 탑 드레싱일 수 있다. 액체담체가 사용될 경우, 사료 첨가제는 젤라틴 연질 캡슐제, 또는 시럽제나 현탁액, 에멀젼제, 또는 용액제의 제형일 수 있다.

상기 사료는 동물의 식이 욕구를 충족시키는데 통상적으로 사용되는 임의의 단백질-함유 유기 곡분을 포함할 수 있다. 이러한 단백질-함유 곡분은 통상적으로 옥수수, 콩 곡분, 또는 옥수수/콩 곡분 믹스로 주로 구성되어 있다.

또한, 상기 사료 첨가제 및 사료는 보조제, 예를 들어 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용액 촉진제 등을 함유할 수 있다. 상기 사료 첨가제는 침투, 분무 또는 혼합하여 동물의 사료에 첨가하여 이용될 수 있다.

본 발명의 사료 또는 사료 첨가제는 포유류, 가금 및 어류를 포함하는 다수의 동물 식이에 적용할 수 있다. 상기 포유류로서 돼지, 소, 양, 염소, 실험용 설치 동물, 및 실험용 설치 동물 뿐만 아니라, 애완 동물(예: 개,고양이) 등에게 사용할 수 있으며, 상기 가금류로서 닭, 칠면조, 오리, 거위, 꿩, 및 메추라기 등에도 사용할 수 있고, 상기 어류로서 송어 등에 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 개인위생용품을 제공한다.

바람직하게 상기 개인위생용품은 비누, 화장품, 물티슈, 휴지, 샴푸, 피부 크림, 얼굴 크림, 치약, 립스틱, 향수, 메이크-업, 파운데이션, 볼터치, 마스카라, 아이섀도우, 선스크린 로션, 모발 손질 제품, 에어프레쉬너 겔 또는 세정 겔일 수 있다.

본 발명은 신규한 젖산균 락토코쿠스 종 KR-050L(Lactococcus sp. KR-050L) 균주에 관한 것으로, 상기 락토코쿠스 종 KR-050L은 맛과 향이 우수하며, IL-6 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3에 대한 저해활성을 나타내므로, IL-6 또는 IL-11에 의해 유발되는 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 조성물로 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 실시양태에 의한 락토코쿠스 종 KR-050L(Lactococcus sp. KR-050L)의 전자현미경 사진이다.
도 2는 본 발명의 실시양태에 의한 락토코쿠스 종 KR-050L의 유전자 서열을 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 실시양태에 의한 락토코쿠스 종 KR-050L 균체의 에틸아세테이트 추출물 및 이의 컬럼크로마토그래피 분획에 대한 IL-6 유도 루시퍼라제 발현에 대한 저해활성을 나타낸 도이다.
도 4는 본 발명의 실시양태에 의한 락토코쿠스 종 KR-050L 상등액의 에틸아세테이트 추출물 및 이의 컬럼크로마토그래피 분획에 대한 IL-6 유도 루시퍼라제 발현에 대한 저해활성을 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 실시양태에 의한 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액 동결건조물의 에틸아세테이트 및 에탄올 조추출물에 대한 IL-6 유도 루시퍼라제 발현에 대한 저해활성을 나타낸 도이다.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1: 젖산균 균주의 분리 및 선별

자연계로부터 젖산균 균주를 분리하기 위하여 각종 김치와 젓갈 등의 발효식품으로부터 시료를 수집하였다. 채취한 시료의 상등은 멸균수를 혼합하여 희석한 후 30℃에서 30분간 진탕한 후, 한천평판희석법(agar plate dilution method)으로 10⁴배까지 희석하여 희석액 0.1 ml를 MRS-Agar 배지(표 1)에 분주하여 배지 전면에 고르게 도말하였다. 이를 30℃ 항온기에서 3 내지 5일간 배양한 후 나타난 단일 집락(single colony)의 형태학적 분석을 통해 젖산균 균주만을 순수하게 분리하여 다시 MRS-Agar 사면 배지에 배양한 후 20% 글리세롤에 현탁시킨 후 -70℃ 냉동고에 보관하여 사용하였다. 각각의 집락은 탈지분유 8%가 함유된 배양액에 접종하여 배양한 후 검사를 통하여 맛과 향이 우수한 균주를 최종적으로 선별하였다(표 2).

실시예 2: 선별한 균주의 동정

선별한 균주의 계통분류학적인 위치를 확인하기 위하여 16S 리보솜 RNA 유전자(16S ribosomal RNA gene)의 내부 전사 간격자(internal transcribed spacer) 1, 5.8S 리보솜 RNA 유전자 및 내부 전사 간격자 2를 포함하는 571 bp의 염기서열을 분석하였다. 선별한 균주로부터 16S rDNA 분절 5'-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3'(서열목록 2)을 프라이머 세트로 하여 PCR을 수행함으로 증폭시킨 후, 증폭산물을 정제하여 자동염기서열 분석장치(Applied Biosystems model 373A automatic sequencer)와 분석키트(BigDye Terminator Cycle Sequencing kit, Perkin-Elmer Applied Biosystems)를 이용하여 염기서열을 분석하였다. 최종 선별한 균주의 16S rDNA를 유전자은행의 블라스트 프로그램을 이용하여 상동성을 분석한 결과 표준균주인 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis)와 높은 상동성을 나타내는 것을 확인하였다(서열목록 1; 도 2). 또한, 다양한 생화학적 방법을 이용하여 분리된 젖산을 분석한 결과, 표준균주인 락토코쿠스 락티스와 높은 유사성을 갖는 것을 확인할 수 있었다(표 3). 따라서, 본 발명의 균주는 락토코쿠스 락티스와 높은 상동성을 갖는 것으로 최종 확인되었으며, 본 발명의 젖산균 균주를 락토코쿠스 종 KR-050L(Lactococcus sp. KR-050L)로 동정 및 명명하였으며, 이를 대전광역시 유성구 과학로 125에 위치한 한국생명공학연구원 생물자원센터(Korean Collection for Type Culture; KCTC)에 2012년 3월 21일자로 기탁하고, 수탁번호 KCTC 12170BP를 부여받았다.

실시예 3: 내산성 실험

상기 실시예 1에서 분리하여 선별한 락토코쿠스 종 KR-050L 균주를 멸균된 MRS 액체배지에 접종하였다. 30℃에서 24시간 동안 배양 후 9000 rpm에서 25분간 원심분리하여 균주를 회수하였다. 이후, HCl로 pH를 3.0으로 조절한 MRS 액체배지에 회수한 분리 균주를 1.9×10⁹ CFU/ml 농도로 접종하여 30℃에서 90분간 배양하였다. 락토코쿠스 종 KR-050L 균주 접종 후 90분간 배양하면서 30분마다 각각의 시료를 회수하여 멸균 생리 식염수에 희석하여 MRS 평판배지에 도말한 다음 30℃에서 72시간 동안 배양한 후 평판배지 위의 집락 수를 계수하여 생존 생균 수를 측정하였다(표 4).

실시예 4: 내담즙성 실험

상기 실시예 1에서 분리하여 선별한 락토코쿠스 종 KR-050L 균주의 내담즙성을 시험하기 위하여, 황소담즙(oxgall)을 각각 1, 2, 3 및 4% 포함하는 MRS 배지를 제조하여 인공 담즙액으로 사용하였다. 담즙산에 대한 내성은 위에서의 산성조건에 대한 저항성과 더불어 활생균(probiotics) 미생물이 갖추어야 할 기본적인 특성 중 하나이다.

본 발명의 분리된 락토코쿠스 종 KR-050L을 30℃에서 24시간 동안 배양한 후 9000 rpm에서 25분간 원심분리하여 균체를 회수하였다. 회수한 균체를 0.01M의 인산완충염용액(phosphate buffered saline; PBS)로 2회 세척하여 상등액과 동량으로 1 내지 4% 황소담즙을 포함하는 MRS 배지를 첨가하여 30℃에서 3시간 동안 배양하였고, 이후 0.85% 염완충액으로 단계적으로 희석하여 MRS 한천에 도말하고 생육하는 락토코쿠스 종 KR-050L 균주의 집락 수를 측정하여 생존율을 산출하였다. 그 결과, 담즙액을 처리한 후 초기 접종균수에 비해 생균 수가 감소하는 경향을 보이기는 하나 내담즙성을 소유한 것으로 판단되었다(표 5).

실시예 5: 락토코쿠스 종 KR -050L 추출물 및 분획물의 제조

<5.1> 락토코쿠스 종 KR -050L의 배양 및 동결건조

본 발명의 젖산균 락토코쿠스 종 KR-050L은 1차적으로 MRS 배지를 사용하여 배양하였고, 2차 본 배양은 탈지유(skim milk)를 6 내지 8% 포함하는 배지에 1% 농도로 접종한 후 30℃에서 48시간 동안 배양하였다. 배양액의 일부를 동결건조시킨 후, 상기 동결건조시료를 분취하여 각각 에틸아세테이트(ethyl acetate; EtOAc) 또는 에탄올(ethanol; EtOH)을 가하여 6시간 동안 추출하였다. 상기 추출물을 여과 후 감압 농축하여 EtOAc 및 EtOH 조추출물을 수득하였다.

<5.2> 락토코쿠스 종 KR -050L 균체의 에틸아세테이트 추출물 제조

상기 <5.1>의 배양액을 원심분리하여 균체 및 상등액으로 분리하였다. 분리된 균체에 EtOAc를 가하고 6시간 동안 초음파처리하였다. 이를 여과하여 얻은 EtOAc 추출물을 감압농축하여 EtOAc 조추출물을 수득하였다. 한편, 상등액에는 동량의 EtOAc를 가하여 혼합하여 분획하고, 상기 과정을 3회 반복하여 수가용성 분획물과 EtOAc 가용성 분획물을 얻은 후, EtOAc 가용성 분획물을 감압농축하여 EtOAc 가용성 추출물을 수득하였다.

<5.3> 메탄올 분획물의 제조

상기 <5.2>에서 수득한 상등액의 EtOAc 가용성 분획물은 40% 메탄올(methanol; MeOH)에 녹여 ODS-SPE 카트리지에 로딩한 후, MeOH과 물이 혼합된 용매계(40% MeOH, 60% MeOH, 80% MeOH, 100% MeOH)를 이동상으로 하여 컬럼크로마토그래피를 수행하여 최종적으로 4개의 메탄올 소분획물을 획득하였다.

실시예 6: 락토코쿠스 종 KR -050L 균체 및 배양액의 추출물 및 이의 분획물 의 IL -6에 의해 유도되는 STAT3 의 전사활성 억제효과

본 발명의 락토코쿠스 종 KR-050L의 추출물 및 이의 분획물의 IL-6에 의해 유도되는 STAT3의 발현 억제 효과를 측정하기 위하여 하기의 실험을 수행하였다.

<6.1> 형질전환체 제조

Hep3B 세포(ATCC HB-8064)에 pStat3-Luc와 pcDNA3.1 (+)(Clontech laboratories, Palo Alto, CA, USA)를 리포펙타민 플러스(lipofectamin plus)(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)로 함께 형질감염시켰다. 이틀 후부터 하이그로마이신(hygromycin)을 100 μg/ml의 농도로 처리하여 루시퍼라제가 안정하게 발현되는 클론을 획득하였다. 상기 획득한 클론에서 루시퍼라제가 안정하게 발현하는 것을 루시퍼라제 측정법을 통해 확인하였다.

<6.2> IL -6 반응성 STAT3 리포터 유전자 검사

상기 형질감염시킨 세포를 DMEM(GIBCO 119950965)으로 무혈청 배양(serum starvation)하고 시료를 각각 하기와 같이 1시간 동안 처리한 후 10 ng/ml의 IL-6(R&D system, USA)을 첨가하여 12시간 동안 배양하였다: 1. 음성대조군 (비처리군); 2. 양성대조군 (IL-6 10 ng/ml); 및 추출물 및 분획물 (10, 30, 60 μg/ml).

상기 배양한 세포를 PBS로 세척하고 50 μl의 용해 완충용액(luciferase assay system, Promega, USA)을 가하여 20분간 교반한 후, 30 내지 100 μl의 루시퍼라제 기질(luciferase assay system, Promega, USA)을 넣고 5분 내에 루미노미터(luminometer; EG&G BERTHOLD, USA)로 발색정도를 측정하였다.

락토코쿠스 종 KR-050L 균체 및 배양액의 EtOAc 추출물 및 1차 컬럼크로마토그래피로부터 수득한 분획에 대한 IL-6 유도 STAT3 루시퍼라제 활성을 측정한 결과, 상기 추출물 및 분획물에 대한 농도 의존적인 저해활성을 나타냈다(도 3 및 4). 또한, 젖산균 락토코쿠스 종 KR-050L의 배양액을 동결건조한 시료를 EtOAc 또는 EtOH로 추출하여 농축한 추출물 및 PBS로 녹인 시료에 대하여 IL-6에 의해 유도되는 STAT3 루시퍼라제 활성을 측정한 결과, EtOAc 및 EtOH 추출물에 대해서는 농도 의존적인 저해활성을 나타냈으나, PBS로 녹인 시료에서는 저해활성이 나타나지 않았다(도 5).

한국생명공학연구원 생물자원센터

KCTC12170BP

20120321

<110> Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology <120> A novel Lactococcus sp. strain and use thereof <130> PA120712/KR <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1409 <212> DNA <213> Lactococcus sp. KR-050L <400> 1 tgcagttgag cgctgaagtt ggtacttgta ccgactggat gagcagcgaa cgggtgagta 60 acgcgtgggg aatctgcctt tgagcggggg acaacatttg gaaacgaatg ctaataccgc 120 ataaaaactt taaacacaag ttttaagttt gaaagatgca attgcatcac tcaaagatga 180 tcccgcgttg tattagctag ttggtgaggt aaaggctcac caaggcgatg atacatagcc 240 gacctgagag ggtgatcggc cacattggga ctgagacacg gcccaaactc ctacgggagg 300 cagcagtagg gaatcttcgg caatggacga aagtctgacc gagcaacgcc gcgtgagtga 360 agaaggtttt cggatcgtaa aactctgttg gtagagaaga acgttggtga gagtggaaag 420 ctcatcaagt gacggtaact acccagaaag ggacggctaa ctacgtgcca gcagccgcgg 480 taatacgtag gtcccgagcg ttgtccggat ttattgggcg taaagcgagc gcaggtggtt 540 tattaagtct ggtgtaaaag gcagtggctc aaccattgta tgcattggaa actggtagac 600 ttgagtgcag gagaggagag tggaattcca tgtgtagcgg tgaaatgcgt agatatatgg 660 aggaacaccg gtggcgaaag cggctctctg gcctgtaact gacactgagg ctcgaaagcg 720 tggggagcaa acaggattag ataccctggt agtccacgcc gtaaacgatg agtgctagat 780 gtagggagct ataagttctc tgtatcgcag ctaacgcaat aagcactccg cctggggagt 840 acgaccgcaa ggttgaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg 900 tggtttaatt cgaagcaacg cgaagaacct taccaggtct tgacatactc gtgctattcc 960 tagagatagg aagttccttc gggacacggg atacaggtgg tgcatggttg tcgtcagctc 1020 gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccctattgt tagttgccat 1080 cattaagttg ggcactctaa cgagactgcc ggtgataaac cggaggaagg tggggatgac 1140 gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg ctacacacgt gctacaatgg atggtacaac 1200 gagtcgcgag acagtgatgt ttagctaatc tcttaaaacc attctcagtt cggattgtag 1260 gctgcaactc gcctacatga agtcggaatc gctagtaatc gcggatcagc acgccgcggt 1320 gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc ccgtcacacc acgggagtgg gagtacccga 1380 agtaggtgcc taaccgcagg agggcgctc 1409 <210> 2 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 16S rDNA fragment <400> 2 tccgtaggtg aacctgcgg 19

Claims

수탁번호 KCTC 12170BP의 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L.
제1항의 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 또는 암의 예방 또는 치료용 약학조성물.
제2항에 있어서,
상기 염증성 질환 또는 암은 IL-6 또는 IL-11에 의해 유발되는 것이 특징인 약학조성물.
제3항에 있어서,
상기 염증성 질환은 골관절염(osteoarthritis), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 골다공증(osteoporosis), 형질구증가증(plasmacytosis), 고면역글로불린혈증(hyperimmunoglobulinemia), 빈혈(anemia), 신염(nephritis), 악액질(cachexia), 목축업자 질병, 맥관증식신염(vascular proliferative nephritis), 다발성경화증(multiple sclerosis), 포도막염(uveitis), 만성 갑상선염(chronic thyroiditis), 지연과민증(delayed-type hypersensitivity), 접촉피부염(contact dermatitis), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 전신홍반루푸스(systemic lupus erythematosus), 크론병(Crohn's disease), 췌장염(pancreatitis), 건선(psoriasis), 연소성 특발성 위축증(arcus idiopathic atrophy), 당뇨병(diabete mellitus) 및 알츠하이머(Alzheimer's disease)로 구성되는 군으로부터 선택되는 질환인 것인 약학조성물.
제3항에 있어서,
상기 암은 췌장암(pancreatic cancer), 유방암(breast cancer), 전립선암(prostatic cancer), 뇌종양(brain tumor), 두경부암종(head and neck cancer), 흑색종(melanoma), 골수종(myeloma), 백혈병(leukemia), 림프종(lymphoma), 간암(hepatoma), 위암(gastric cancer), 결장암(colon cancer), 골암(bone cancer), 자궁암(uterine cancer), 난소암(ovarian cancer), 직장암(rectal cancer), 식도암(esophageal cancer), 소장암(small intestine tumor), 항문부근암(anal cancer), 나팔관암종(fallopian tube carcinoma), 자궁내막암종(endometrial carcinoma), 자궁경부암종(cervical carcinoma), 질암종(vaginal carcinoma), 음문암종(vulva carcinoma), 호지킨병(Hodgkin's disease), 방광암(bladder cancer), 신장암(renal cancer), 수뇨관암(ureteral cancer), 신장세포암종(renal cell carcinoma), 신장골반암종 및 중추신경계(central nervous system) 종양으로 구성되는 군으로부터 선택되는 암인 것인 약학조성물.
제2항에 있어서,
상기 추출물은 에틸아세테이트(ethyl acetate; EtOAc) 또는 에탄올(ethanol, ethyl alcohol; EtOH)로 추출한 것인 약학조성물.
제2항에 있어서,
상기 분획물은 에틸아세테이트 추출물을 메탄올로 분획한 것인 약학조성물.
제2항에 있어서,
락토코쿠스 종 KR-050L 배양액의 추출물, 락토코쿠스 종 KR-050L 균체 또는 상등액의 추출물 또는 이들의 분획물을 고형분을 기준으로 총 중량의 0.001 내지 1 중량% 포함하는 것인 약학조성물.
제1항의 락토코쿠스 종 KR-050L 배양액, 균체 또는 상등액, 이들의 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 IL-6(interleukin-6) 또는 IL-11에 의해 유도되는 STAT3(signal transducers and activators of transcription 3)에 대한 활성저해용 조성물.
제1항에 기재된 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 식품, 식품첨가제, 사료 또는 사료첨가제.
제10항에 있어서,
식품은 발효식품인 것이 특징인 식품, 식품첨가제, 사료 또는 사료첨가제.
제1항에 기재된 락토코쿠스 종(Lactococcus sp.) KR-050L 또는 이의 배양물을 포함하는 개인위생용품.
제12항에 있어서,
비누, 화장품, 물티슈, 휴지, 샴푸, 피부 크림, 얼굴 크림, 치약, 립스틱, 향수, 메이크-업, 파운데이션, 볼터치, 마스카라, 아이섀도우, 선스크린 로션, 모발 손질 제품, 에어프레쉬너 겔 및 세정 겔로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 개인위생용품.