KR20130112322A - 슈퍼박테리아에 대한 항균 활성 및 항염증 활성을 나타내는 냉이 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 슈퍼박테리아에 대한 항균 활성, 및 항염증 활성을 가지는 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 탄저병균 및 항생제 내성균에 대한 항균 활성이 우수한 냉이 속 식물 추출물을 포함하는 항균용 조성물 및 항염증 활성이 우수한 냉이 속 식물 추출물을 포함하는 항염증용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 냉이 속 식물 추출물은 치사율이 높은 것으로 알려진 탄저균 및 항생제 내성균에 대하여 우수한 항균 활성 및 항염증 활성을 나타내므로 감염질환의 예방 또는 치료에 매우 유용하게 사용될 수 있고, 우수한 항염증 효과를 나타내므로 항염증용 조성물 또는 피부 외용제로 유용하게 이용할 수 있는 특징이 있다.
Description
본 발명은 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균 및 항염증 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 탄저균 및 항생제 내성 균주에 대한 항균 및 항염증 효과를 나타내는 냉이 속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다.
냉이 속(Capsella sp.) 식물은 십자화과(Brassicaceae)에 속하는 양귀비목으로서, 들이나 밭에서 자라며 4~5월에 꽃피는 두해살이풀이며 한국을 비롯하여 세계의 온대지방에 분포한다. 냉이는 한의학에서 뱃속을 고르게 하며 오장을 이롭게 하고, 간을 도와서 눈을 밝게 해주며 혈액순환과 혈압강하 등의 효과가 있다고 알려져 있고 냉이 전체의 추출물은 강력한 지혈 작용이 있어서 자궁 출혈, 폐출혈(각혈) 등의 지혈제로 사용되고 있다.
또한, 냉이의 항산화 효과, 식용부위에 따른 향기 성분 분석에 대한 연구도 활발하게 연구되고 있는데, 냉이는 단백질과 칼슘, 인, 철, 칼륨, 등을 주된 성분으로 함유하고 있고, 다른 엽채류에 비하여 단백질과 무기질이 풍부하며, 비타민이 100g 속에 A 830IU, B1 0.16mg, B2 0.28mg, 나이신 0.5mg, C 40mg이 함유되어 있다.
한편, 항생제(antibiotics)는 미생물이 생산하는 대사산물로 소량으로 다른 미생물의 발육을 억제하거나 사멸시키는 물질로서, 병원균에 의한 감염증을 치료하는 약물로서 감염 증세에 뛰어난 효능을 보이기 때문에 전 세계적으로 사용되고 있다.
항생제는 일반적으로 곰팡이류에서 추출된 항생물질로서는 페니실린(penicillin)계, 세팔로스포린(cephalosporin)계 등의 항균성 항생제와 그리세오풀빈(griseofulvin), 푸시딘(fucidin)과 같은 항진균성 항생제가 있으며, 세균류에서 추출한 항생물질로서는 매크로라이드(macrolide), 아미노글리코시드(aminoglycoside), 테트라사이클린(tetracycline) 류 및 클로람페니콜(chloramphenicol) 등의 마이신 류가 존재한다. 페니실린의 경우 다른 항생제에 비하여 부작용이 적으나 어떤 세균은 페니실린을 분해하는 효소를 생산하기도 하여, 인공적으로 합성한 메티실린(methicillin)이나 옥사실린(oxacillin)등이 함께 사용되고 있다.
현재까지 개발된 항생제 가운데 세계에서 가장 강력한 항생제는 반코마이신(vancomycin)으로, 페니실린의 대체약인 메티실린(methicillin)에 내성이 생긴 황색포도상구균이 퍼지자 1950년대에 개발하여 황색 포도상구균의 중증 감염증을 치료하는 데 사용해 왔다.
그러나, 항생제의 남용으로 인하여 병원균 스스로 저항할 수 있는 힘을 길러 그 내성이 점차로 강해져 어떤 항생제에도 저항할 수 있게 된 일명 슈퍼박테리아(super bacteria)가 1996년 일본에서 처음 등장함에 따라 항생제의 효과적인 사용에 문제가 발생하였다. 세균은 항생제를 극복할 수 있는 자연적인 돌연변이체가 될 수 있으며, 이 내성균들은 내성 유전자를 다른 세균들에게 전달시켜 주어 내성균의 확대는 신속하게 이루어질 수 있다. 슈퍼박테리아는 대표적으로 MRSA(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)와 더욱 강력한 항생제 저항성을 가지는 VRSA(Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus) 및 VRE(Vancomycin-resistant Enterococci)를 들 수 있고, 항생제 내성 박테리아의 경우 항생제에 내성을 가지고, 내성은 점차로 강해져 어떤 항생제에도 저항할 수 있게 되며, 미국에서만 한 해 약 1만9000명이 슈퍼박테리아라는 항생제 내성균에 의해 사망하고 있는 등 슈퍼박테리아에 대한 연구의 필요성이 증대되고 있다.
또한, 슈퍼박테리아의 경우 병원체가 신체 한 부분의 1차 병소에서 2차적으로 혈액 속으로 이동하는 증세인 균혈증에 의한 감염질환의 확대 또는 패혈증 등의 중증감염질환으로 악화될 수 있기 때문에 슈퍼 박테리아 항생제의 개발이 필요하다.
현재 슈퍼박테리아 항생제인 자이복스(Zyvox) 등이 시판되고 있으나, 자이복스(Zyvox) 등의 슈퍼박테리아 항생제는 부작용이 있으며 MRSA(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)균이 내성이 생기기 시작하여 약효가 급격히 떨어지고 있는 현실이며, 반코마이신, 페니실린, 메티실린 내성 균주 등 슈퍼박테리아에 대해 두루 효과를 가지는 슈퍼박테리아 항생제의 개발이 시급한 실정이다.
이에 따라, 최근에는 인체에 부작용을 미치지 않는 천연물로부터 슈퍼박테리아에 대한 항균활성을 갖는 새로운 물질을 분리하고자 하는 연구가 활발하게 이루어지고 있으나, 아직까지 천연소재인 냉이 속 식물이 슈퍼박테리아에 대한 항균 효과 및 항염증 활성이 있다는 내용에 대해서는 알려진 바가 없다.
이에 본 발명자들은 생체에 부작용이 없으면서 슈퍼박테리아에 대한 항균 및 항염증 활성을 나타내는 우수한 천연물질을 찾고자 모색하던 중, 냉이 속 식물의 추출물에 주목하여 이의 효과를 실험한 결과, 냉이 추출물이 슈퍼박테리아 뿐만 아니라 탄저병균에도 항균 및 항염증 활성을 나타낸다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 목적은 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탄저병균 또는 항생제 내성 균주에 대한 항균용 또는 항염증용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
이에 더하여 본 발명의 다른 목적은 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.
그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탄저병균 또는 항생제 내성 균주에 대한 항균용 또는 항염증용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 냉이 속 식물 추출물은 물 또는 유기용매를 첨가하여 가용 추출한 용매추출물일 수 있다.
본 발명의 다른 실시예에 있어서, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 및 메틸렌클로라이드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 있어서, 상기 항생제는 반코마이신(Vancomycin), 페니실린(Penicillin), 메티실린(Methicillin), 세팔로신(Cephalothin), 에리스로마이신(Erythromycin), 노플로삭신(Norfloxacin), 옥사실린(Oxacillin), 겐타마이신(Gentamicin), 클로람페니콜(Chloramphenicol), 설폰아마이드(Sulfonamides), 스트렙토마이신(Streptomycin), 및 테트라사이클린(Tetracyclin)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 있어서, 상기 균주는 장구균(Enterococcus sp.), 포도상구균(Staphylococcus sp.), 대장균(Escherichia coli), 폐렴간균(Klebsiella sp.), 및 살모넬라균(Salmonella sp.)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 본 발명에 따른 항균용 또는 항염증용 조성물을 포함하는 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 감염질환은 탄저병, 여드름, 아토피 피부염, 지루피부염, 모낭염, 화농증, 염증, 치주질환, 위질환, 식중독, 패혈증, 패혈성 쇼크, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염, 임균 감염, 및 수막구균 감염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 및 바디 세정제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 다른 실시예에 있어서, 상기 조성물은 연고 겔, 크림, 패취 및 분무제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 탄저균 및 항생제 내성균에 대하여 항균 활성뿐만 아니라 항염증 활성도 우수한 특징이 있으므로, 병원성 세균에 의한 탄저병, 항생제 내성균 감염으로 인하여 발생하는 패혈증, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염 등의 감염질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물로 사용될 수 있으며, 천연 항염증 제제로도 매우 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있다. 또한, 본 발명의 냉이 속 식물의 추출물은 항균 및 항염증 효과가 우수한 특징이 있으므로 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명에 따른 냉이(Capsellabursa - pastoris) 에탄올 추출물의 바실러스 안트라시스 균주와 반코마이신 내성균에 대한 항균 활성 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 냉이(Capsellabursa - pastoris) 에탄올 추출물의 항염증 효과를 녹차 추출물과 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 냉이(Capsellabursa - pastoris) 에탄올 추출물의 항염증 효과를 녹차 추출물과 비교하여 나타낸 그래프이다.
본 발명은 탄저병균 또는 항생제 내성 균주에 대한 항균 활성 및 항염증 활성을 가지는 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공함에 그 특징이 있다.
본 발명에서는 탄저병균 및 항생제 내성 균주에 대한 항균 활성 및 항염증 활성이 우수한 조성물을 제공하기 위한 주원료로서 냉이를 사용하였는데, 본 발명에서 사용할 수 있는 냉이는 시중에서 구할 수 있는 냉이 속(Capsella sp.) 식물이라면 모두 사용가능하며, 본 발명의 일실시예에서는 경동시장 약재상가에서 구입한 냉이(Capsellabursa - pastoris)를 사용하였다.
또한, 본 발명에 따른 냉이 추출물은 당 업계에 공지된 일반적인 천연으로부터 추출물을 수득하는 방법에 의해 제조될 수 있으며, 바람직하게는 각종 유기용매를 이용한 용매추출 방법을 통해 수득할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 냉이 추출물의 수득방법을 보다 상세하게 설명하면, 추출물의 제조에 사용되는 냉이 속 식물은 이에 제한되는 것은 아니나, 건조한 것을 사용하는 것이 바람직하며, 건조 방법으로는 양건, 음건, 열풍건조, 동결건조, 또는 자연건조 방법 등을 모두 사용할 수 있으나, 바람직하게는 열풍건조 또는 동결건조 하여 사용할 수 있다. 건조된 냉이는 추출 효율을 증대시키기 위해 분쇄기로 분쇄한 다음 물 또는 유기용매를 첨가한 다음 침출 과정을 수행하여 냉이 추출물을 수득할 수 있다. 상기 유기용매는 이에 제한되지는 않으나 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 또는 메틸렌클로라이드로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있고, 바람직하게 C1 내지 C5의 에탄올일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 95% 에탄올일 수 있다. 침출시킨 냉이는 감압 흡입 여과기를 이용하여 여액만 취한 후, 여과하여 얻어진 여액을 진공농축기로 농축하여 냉이의 에탄올 추출물을 수득할 수 있으며, 제조된 추출물은 진공 건조를 추가로 수행하여 분말 형태로 제조할 수도 있다.
본 발명의 일실시예에서는 에탄올에 냉이 속 식물을 첨가하고 실온에 방치하여 추출한 후 여과지로 여과하였으며, 에탄올을 제거하기 위해 여액을 농축기로 농축함으로써 냉이 속 식물의 에탄올 추출물을 제조하였다(실시예 1 참조). 이때, 상기 추출 과정은 에탄올 50 내지 10,000ml에 냉이 속 식물 50 내지 5,000g을 혼합한 후 22 내지 25℃의 온도에서 12 내지 72시간 동안 방치하는 과정일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기와 같이 제조된 냉이 속 식물 추출물은 세포에 대한 독성을 나타내지 않는 특징이 있다.
즉, 본 발명의 일실시예에 따르면, 냉이 추출물의 독성 효과를 알아보기 위해 다양한 농도의 냉이 추출물을 세포에 처리하고 MTT 분석을 수행한 결과, 세포 독성을 나타내지 않는 것을 확인하였다(실험예 2 참조).
따라서 본 발명의 냉이 추출물은 세포 독성을 나타내지 않는 특징이 있으므로 의약품, 화장품, 식품 등의 다양한 분야에 폭넓게 적용되어 활용될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 냉이 속 식물 추출물 탄저병균 및 항생제 내성 균주에 대한 항균 효과가 우수한 특징이 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 탄저병균(Bacillus sp.) 및 항생제 내성 장구균(Enterococcus sp.)과 같은 병원성 세균에 대한 냉이 속 식물 추출물의 항균 활성을 알아보기 위해, MIC(minimum inhibitory concentration) 테스트를 수행한 결과, 본 발명에 따른 냉이 추출물이 탄저병균(Bacillus sp.) 및 항생제 내성 장구균(Enterococcus sp.)에 대한 항균 활성이 우수한 것으로 나타났다(실험예 1 참조).
이에 더하여, 본 발명의 냉이 속 식물 추출물은 항염증 효과가 우수한 특징이 있다.
즉, 본 발명의 일실시예에 따르면, 세포에 염증 유발 물질(LPS)을 처리하고 냉이 추출물 유무에 따른 항염증 활성을 측정하기 위해 Griess 분석을 수행하여 염증반응의 결과물인 NO의 생성양을 측정한 결과, 냉이 추출물을 처리할 경우 NO의 생성양이 억제되는 것으로 나타났다(실험예 3 참조).
따라서, 본 발명은 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탄저병균 또는 항생제 내성 균주에 대한 항균용 또는 항염증용 조성물을 제공한다.
상기 항생제 내성 균주는 반코마이신(Vancomycin), 페니실린(Penicillin), 메티실린(Methicillin), 세팔로신(Cephalothin), 에리스로마이신(Erythromycin), 노플로삭신(Norfloxacin), 옥사실린(Oxacillin), 겐타마이신(Gentamicin), 클로람페니콜(Chloramphenicol), 설폰아마이드(Sulfonamides), 스트렙토마이신(Streptomycin), 또는 테트라사이클린(Tetracyclin)과 같은 항생제에 대한 내성을 가진 균주일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 항생제에 대한 내성을 가지는 균주는 그람음성균 또는 그람양성균일 수 있으며, 본 발명의 일실시예에서는 그람양성균을 사용했으나 이에 한정되는 것은 아니고, 구체적으로 상기 균주는, 장구균(Enterococcus sp.), 포도상구균(Staphylococcus sp.), 대장균(Escherichia coli), 폐렴간균(Klebsiella sp.), 또는 살모넬라균(Salmonella sp.)일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
나아가, 본 발명의 냉이 속 식물 추출물을 포함하는 항균용 조성물은 병원성 세균의 생육을 억제하거나 사멸시키기 위해 사용될 수 있으므로, 본 발명은 냉이 속 식물 추출물을 포함하는 조성물은 탄저균(Bacillus sp.) 또는 항생제 내성 균주 및 염증으로 인한 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 조성물이 예방 또는 치료할 수 있는 감염질환은 일반적인 감염질환들을 모두 포함하며, 이에 제한되지는 않으나 바람직하게는 탄저병, 여드름, 아토피 피부염, 지루피부염, 모낭염, 화농증, 염증, 치주질환, 위질환, 식중독, 패혈증, 패혈성 쇼크, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염, 임균 감염, 및 수막구균 감염일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 “예방”이란 본 발명의 조성물의 투여에 의해 감염질환을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미하며, “치료”란 본 발명의 조성물을 투여함으로써 감염질환에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에 따른 상기 약학적 조성물을 제제화할 경우, 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명로 표시되는 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다.
비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 상기 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 본 발명에 따른 화합물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 ㎏당 0.1 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 내지 10 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 세포 독성을 나타내지 않는 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 화장료 조성물로 이용되어 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 또는 바디 세정제 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한 상기 조성물은 의약용 조성물로 이용되어 연고 겔, 크림, 패취, 또는 분무제 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물로 사용 시, 화장료의 제형에 맞게 물질을 더 첨가할 수 있다. 이에 한정되는 것은 아니나 예를 들어, 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있고, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 또한 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되는데, 바람직하게는 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있으며, 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
나아가, 본 발명에 따른 상기 냉이 속(Capsella sp.) 식물의 추출물은 그 외 다양한 형태로 제제화될 수 있으며, 상기 제제로는 예를 들면, 이에 한정되지는 않으나 소독제, 살균 세정제 또는 식품 보존제가 포함된다.
상기 소독제는 본 발명의 냉이 속 식물의 추출물을 그대로 사용하거나 적합한 농도가 되도록 피부학적 및 약리학적으로 허용되는 희석제 또는 용매로 희석하여 제조할 수 있다. 상기 소독제는 생물체의 표면 바람직하게는, 포유동물의 피부 가장 바람직하게는 인간의 피부에 사용될 수 있다. 또한, 상기 소독제는 무생물체의 표면 예를 들면, 나무, 금속, 유리, 세라믹, 플라스틱, 종이 및 천의 표면에 사용될 수 있다. 상기 소독제는 침지, 면봉, 분무 및 브러싱을 포함하는 방법을 사용하여 상기 생물체 또는 무생물체의 표면에 처리할 수 있다. 바람직하게는, 상기 소독제는 상처표면, 수술 전 피부소독, 수술기구의 소독, 도관 소독 등의 용도로 병원과 일반 가정에서 사용할 수 있다.
또한, 상기 살균 세정제의 경우에는 본 발명에 따른 냉이 속 식물의 추출물 외에 세정제의 제조 분야에서 일반적으로 사용되는 하나 이상의 부형제 및 첨가제를 포함하여 당 분야의 공지의 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있다. 상기 살균 세정제는 주방용 또는 식품용으로 사용될 수 있으며, 주방용 살균 세정제에는 냉이 속 식물의 추출물 외에 음이온계 계면활성제, 비이온계 계면활성제, 양쪽성 계면활성제 등을 추가로 포함할 수 있다. 음이온계 계면활제의 예로는 알킬벤젠설포네이트, 알파올레핀설페이트, 소듐 또는 암모늄라우릴에테르설페이트 등이 있으며, 비온온계 계면활성제의 예로는 지방산 아미드, 알킬폴리글루코시드, 에톡시화 지방알콜계, 에톡시화 노닐 페놀계 등이 있다. 양쪽성 계면활성제의 예로는 베타인계 계면활성제, 아민 옥사이드 등이 있다. 상기 계면활성제 외에 향, 색소 및 물과 같은 희석제를 선택적으로 첨가할 수 있다.
식품용 살균 세정제의 경우에는 본 발명에 따른 냉이 속 식물의 추출물에 식품학적으로 허용되는 용매 또는 희석제를 추가로 첨가하여 적절한 농도로 희석함으로써 제조할 수 있다. 상기 식품용 살균 세정제는 예를 들어, 과일류, 어류 및 육류 등의 살균 및 세척에 사용될 수 있다.
식품 보존제는 식품류의 보존성을 증강시키기기 위한 목적으로 본 발명의 따른 냉이 속 식물의 뿌리 추출물에 식품학적으로 허용되는 용매 또는 희석제를 추가로 첨가하여 제조할 수 있다. 본 발명의 식품 보존제는 식품의 제조 공정시 원료와 함께 배합하거나 별도의 수용성 현탁액으로 제조하여 첨가할 수도 있다. 또한, 상기 본 발명에 따른 식품 보존제를 사용하여 대상 식품을 침지시키거나 본 발명의 식품 보존제를 대상 식품에 분무할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
<
실시예
1>
냉이(
Capsella
bursa
-
pastoris
)의 에탄올 추출물 제조
냉이(Capsella bursa - pastoris)의 에탄올 추출물을 제조하기 위해, 경동시장 약재상가에서 냉이를 구입하여 준비하였다. 세절한 냉이 100g을 95% 에탄올 1000ml과 혼합한 뒤 24℃에서 24시간 동안 방치하여 추출하였다. 추출물은 감압 흡입 여과기를 이용하여 슬러지와 용액으로 분리하고 용액만 취하였다. 이후 분리한 용액에서 에탄올을 제거하기 위해 농축기(Evaporator, Heidolph vv 2000)를 이용하였으며, 42℃에서 4배 농축하여 냉이 에탄올 추출물을 수득하였다.
<
실험예
1>
냉이(
Capsella
bursa
-
pastoris
) 에탄올 추출물의 항균 활성 측정
본 발명에 따른 냉이 추출물의 슈퍼박테리아에 대한 항균활성을 측정하기 위해 MIC(minimum inhibitory concentration) 테스트를 수행하였다. 실험에 사용된 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis) 균주는 ATCC(american type culture collection) 및 미국 육군 연구소(ARL : Army Research Laboratory)로부터 분양받았고, 반코마이신-내성 장구균(VRE: Vancomycin-resistant Enterococcus)은 중앙대학교 병원으로부터 분양받았다. 분양받은 균주들의 단일 콜로니를 각각 10ml의 영양배지(Nutrient broth)가 들어 있는 200ml 플라스크에 접종하고, 37℃에서 12시간동안 교반하면서 배양하였다. 그리고 10ml의 영양배지가 들어 있는 200ml 플라스크에 초기 흡광도(OD: Optical Density) 값이 0.1이 되도록 상기 배양액을 접종하여 7시간 동안 계대 배양하였다. 상기와 같은 방법으로 활성화된 각각의 시험 균주 배양액을 배양접시 당 균수가 2 X 108이 되도록 조절하여 60℃의 굳지 않은 영양한천배지 13ml와 함께 100μl 페트리접시에 부은 뒤 굳혔다. 이후 56℃ 배양기에서 24시간 동안 건조시켜 습기를 완전히 제거한 10mm 페이퍼 디스크(Toyo Roshi Kaisha, Ltd, Japan)를 상기 페트리접시 위에 올려놓고, 각각의 디스크에 냉이 에탄올 추출물을 100μl 씩 주입한 다음 37℃ 배양기에서 12시간 동안 배양하였다. 배양 후 생성된 세균의 생육저지대 즉, 투명환(Clear zone)을 확인하고 베니어 캘리퍼스(Vernier calipers)를 사용하여 직경을 측정하였다.
시험 미생물 | 그람염색 | 균주번호 | 입수처 | 투명환 직경(mm) | |
1 | 바실러스 안트라시스 | + | ATCC 14578 | ATCC | 15 |
2 | 바실러스 안트라시스 | + | ATCC 14185 | ATCC | 14 |
3 | 바실러스 안트라시스 | + | ATCC 14186 | ATCC | 16 |
4 | 바실러스 안트라시스 | + | Pasteur No.2 Army | 미국 육군 의학연구소 | 16 |
5 | 반코마이신 내성 장구균 | + | CAU8101 | 중앙대학교 병원 | 23 |
6 | 반코마이신 내성 장구균 | + | CAU8102 | 중앙대학교 병원 | 22 |
7 | 반코마이신 내성 장구균 | + | CAU8103 | 중앙대학교 병원 | 22 |
8 | 반코마이신 내성 장구균 | + | CAU8104 | 중앙대학교 병원 | 23 |
9 | 반코마이신 내성 장구균 | + | CAU8105 | 중앙대학교 병원 | 21 |
시험 미생물 | 냉이 에탄올 추출물의 농도 (mg/ml) | |||||||||||
224(E) | 112 | 56 | 28 | 14 | 7 | 3.5 | 1.75 | 0.875 | 0.4375 | 0.21875 | ||
1 | 바실러스 안트라시스 투명환 직경(mm) |
15(E) | 16 | 17 | 17 | 17 | 15 | 15 | 14 | - | - | - |
2 | 반코마이신 내성균 투명환 직경(mm) |
23(E) | 20 | 20 | 19 | 18 | 19 | 20 | 22 | 19 | 14 | 15 |
항균활성 측정 결과, 표 1에 나타난 바와 같이, 냉이 에탄올 추출물이 실험에 사용된 모든 바실러스 안트라시스 및 반코마이신-내성 장구균에 대해 항균 효과를 나타내는 것을 알 수 있다. 또한, 표 2 및 도 1에 나타난 바와 같이, 냉이 에탄올 추출물은 소량으로도 우수한 항균 효과를 나타내는 것을 알 수 있으며, 반코마이신-내성 장구균(Vancomycin-resistant enterococcus)에 대한 항균 활성이 특히 우수한 것으로 나타났다.
상기로부터 본 발명의 냉이 추출물은 우수한 항균활성을 나타내는 특징이 있으므로 항균용 조성물로 사용될 수 있음을 알 수 있다.
<
실험예
2>
냉이(
Capsella
bursa
-
pastoris
) 에탄올 추출물의 세포
생존능
관찰
본 발명에 따른 냉이 에탄올 추출물의 세포 독성을 관찰하기 위해, MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 분석을 수행하였다. 실험 세포로는 한국세포주은행(KCLB)에서 분양받은 RAW 264.7 세포를 사용하였으며, RAW 264.7 세포에 냉이 추출물을 0.001, 0.01, 및 0.1 mg/ml의 농도로 각각 처리하고, 대조군으로는 아무것도 처리하지 않은 군을 사용하여 24시간 배양하였다. 이후 MTT 시약을 최종 농도 0.5 mg/ml 가 되도록 투입하고 2시간 동안 반응시킨 다음 상등액을 제거하였다. 그리고 세포 내의 미토콘드리아에서 MTT 환원에 의해 생성된 formazan을 용해시키기 위해 DMSO를 첨가한 후 microplate reader 기기를 이용하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.
추출물 농도 (mg/ml) | ||||
0(대조군) | 0.001 | 0.01 | 0.1 | |
세포 생존율 | 100% | 100% | 100% | 100% |
RAW 264.7 세포에 냉이 추출물을 처리한 결과, 상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 냉이 추출물은 모든 농도에서 세포에 독성을 나타내지 않는 것으로 나타났다.
<
실험예
3>
냉이(
Capsella
bursa
-
pastoris
) 에탄올 추출물의 항염증 활성 측정
냉이 에탄올 추출물의 항염증 활성을 알아보기 위해, 일반적으로 항염증 효과가 우수한 것으로 알려져 있는 녹차 추출물과 비교하였다. 녹차 추출물은 냉이 추출법과 동일한 방법으로 추출하여 준비하였고, 염증반응의 산물인 NO(Nitric oxide)의 부산물인 nitrite 생성양을 측정하였다. 우선 RAW 264.7 세포를 5 x 105 cells/well이 되도록 24-well 배양접시 바닥에 부착시킨 뒤, DMEM + 10% FBS 배지에 24시간 배양하였다. 그 다음 배지를 제거하고 FBS가 없는 DMEM 배지를 넣어 3시간 동안 굶주리게(starvation) 하였다. 그리고 DMEM 배지에 냉이 추출물과 대조군인 녹차 추출물을 각각 0.01, 0.1, 및 1 mg/ml과 염증 유발 물질인 LPS(lipopolysaccharide) 0.1 μg/ml를 함께 처리하고 24시간 반응시켰다. 24시간 후 세포 배양 상등액 내에서 NO의 생성 정도를 측정하기 위해, Griess 분석을 수행하였으며, 96-well 배양접시에 세포 배양 상등액과 Griess 시약을 1:1로 혼합하여 넣고, 5분 동안 반응 시킨 후 microplate reader 기기를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
추출물 농도 (mg/ml) | |||
0.01 | 0.1 | 1 | |
냉이 | 41% | 91% | 100% |
녹차 | 8% | 45% | 85% |
그 결과, 표 4 및 도 2에 나타난 바와 같이, 냉이 추출물을 처리한 군의 경우 대조군인 녹차 추출물에 비해 소량으로도 현저하게 우수한 염증 억제율을 나타내는 것을 알 수 있다.
상기로부터 본 발명의 냉이 추출물은 우수한 항염증 활성이 알려져 있는 녹차 추출물보다 더 우수한 항염증 활성을 나타내는 특징이 있으므로, 항염증용 조성물로 사용될 수 있음을 알 수 있다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해되어야 한다.
Claims (10)
- 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탄저병균 또는 항생제 내성 균주에 대한 항균용 또는 항염증용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 냉이 속 식물 추출물은 물 또는 유기용매를 첨가하여 가용 추출한 용매추출물인 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제2항에 있어서,
상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 및 메틸렌클로라이드로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 항생제는 반코마이신(Vancomycin), 페니실린(Penicillin), 메티실린(Methicillin), 세팔로신(Cephalothin), 에리스로마이신(Erythromycin), 노플로삭신(Norfloxacin), 옥사실린(Oxacillin), 겐타마이신(Gentamicin), 클로람페니콜(Chloramphenicol), 설폰아마이드(Sulfonamides), 스트렙토마이신(Streptomycin), 및 테트라사이클린(Tetracyclin)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 균주는 장구균(Enterococcus sp.), 포도상구균(Staphylococcus sp.), 대장균(Escherichia coli), 폐렴간균(Klebsiella sp.), 및 살모넬라균(Salmonella sp.)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 감염질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 감염질환은 탄저병, 여드름, 아토피 피부염, 지루피부염, 모낭염, 화농증, 염증, 치주질환, 위질환, 식중독, 패혈증, 패혈성 쇼크, 심장 내막염, 장염, 뇌수막염, 골수염, 척추 카리에스, 폐렴, 골수염, 임균 감염, 및 수막구균 감염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 냉이 속(Capsella sp.) 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물.
- 제8항에 있어서,
상기 조성물은 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 메이크업 베이스, 파운데이션, 염모제, 샴푸, 린스 및 바디 세정제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제8항에 있어서,
상기 조성물은 연고 겔, 크림, 패취 및 분무제로 이루어지는 군으로부터 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는, 조성물.
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KR1020120034593A KR101390084B1 (ko) | 2012-04-03 | 2012-04-03 | 슈퍼박테리아에 대한 항균 활성 및 항염증 활성을 나타내는 냉이 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물 |
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- 2012-04-03 KR KR1020120034593A patent/KR101390084B1/ko active IP Right Grant
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