KR20130088997A

KR20130088997A - 생캐비어 추출물 및 발효추출물을 이용한 육모, 발모, 탈모방지 및 두피 개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20130088997A
Application number: KR1020120010302A
Authority: KR
Inventors: 이충우; 양수옥; 유병국; 강영기
Original assignee: 주식회사 유로코스텍
Priority date: 2012-02-01
Filing date: 2012-02-01
Publication date: 2013-08-09

Abstract

본 발명은 생캐비어(Caviar) 추출물 및 발효추출물의 유효성분을 함유하는 조성물에 관한 것으로, 보다 자세하게는 생캐비어 추출물과 생캐비어에 고초균, 유산균 및 효모를 이용하여 생성된 발효물 및 그것의 유효성분을 함유하는 육모 및 발모효과 또는 탈모방지, 두피 개선 효과를 가지는 피부외용 약학 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다. 생캐비어 추출물 및 발효추출물의 유효성분을 함유하는 화장료 조성물은 피부 자극 유발 가능성이 낮고, 육모, 발모, 모발생장 촉진, 모발재생, 탈모방지, 두피개선 효과를 발휘한다.

생캐비어 추출물, 생캐비어 발효추출물, 오메가-3, 육모, 발모, 탈모방지, 두피개선, 화장료

Description

생캐비어 추출물 및 발효추출물을 이용한 육모, 발모, 탈모방지 및 두피 개선용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for hair growth and restoration from Caviar extracts and its fermentation}

본 발명은 생캐비어 추출물 및 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 육모, 발모, 탈모방지 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 두피의 생리활성과 우수한 피부 활력을 가지는 두피 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

철갑상어의 알인 캐비어(Caviar)에는 나이가 들면서 부족해지기 쉬운 오메가-3와 같은 필수 지방산이 피부에 영양과 수분을 공급해주며, 피부노화 방지와 건조로부터 피부를 보호해 주는 역할과 두피 케어에도 우수한 효능을 가지고 있다. 또한, 캐비어에 함유되어 있는 단백질내 유효인자 성분은 외부로부터의 자극을 보호해 주며, 각종 보습 및 항노화 성분이 있어 부드럽고, 유연한 피부를 조성하는 역할을 한다. 고초균, 유산균 및 효모를 이용한 발효공정을 통해 생성된 생캐비어 발효추출물은 생체에 적합한 영양공급을 해주어 예민해지기 쉬운 두피를 보호하고, 피부의 탄력 또한 지속적으로 개선 및 유지시켜주므로 손상된 두피 표면의 문제가 되는 요인을 해결해줄 뿐만 아니라 육모, 발모, 모발생장 촉진, 발모재생 및 탈모방지에 탁월한 기능을 발휘하는 두피 개선용 화장료로 제공된다.

고가, 희귀성의 고부가가치 천연 원료의 부족상황에서 이를 극복하기 위한 새로운 조성물 개발이 전 세계적인 관심사로 대두되고 있는 가운데, 철갑상어의 알인 캐비어는 인간의 필수 영양소인 저지방 고단백 영양분을 다량 함유하고 있어 새로운 시장 창출 가능성이 예상된다.

철갑상어는 담수어류 중에서 가장 크며 뼈가 없고 연골로 되어 있으며, 4억 5천년∼3억 5천년 전에 출현하여 가장 오래된 유일한 생존 어류이다. 철갑상어는 대부분 러시아의 카스피해, 아좁해, 흑해, 발틱해 등에 분포하고 있고, 소하성 어류로서 어미가 바다에서 성장한 후, 산란하기 위해 강에 올라와 강 상류에서 산란하며, 새끼는 바다로 다시 내려가 성숙될 때까지 성장한다. 산란은 매년하지 않으며, 일생에 몇 번만 산란한다. 그렇기 때문에 인공 부화 기술을 발전시켰으며, 이를 이용한 대량 생산방식의 번식방법이 가능하게 되었다. 철갑상어의 알인 캐비어는 주로 세 종류의 Beluga, Ossetra, Sevruga 철삽상어를 양식하며 산란기 전에 채집한다.

캐비어는 단백질, 지방, 당, 비타민, 미네랄 등의 영양 성분으로 구성되어 있고, 특히, 칼로리가 낮으며 단백질 함량이 높은 완벽한 영양식품으로서 보고되어 있다. 러시아인들은 단백질 함량이 높음에도 불구하고 소화가 쉽게 되기 때문에 캐비어를 수술환자의 회복을 위해 이용하고, 소아의 구루병 등을 예방하고 치료하는데 이용하기도 한다. 캐비어에 함유된 단백질은 수용성의 글루타믹 액시드, 아스파틱 액시드, 루신, 이소루신, 라이신, 알라닌, 세린, 아르기닌 등의 아미노산들이 안정적으로 균형을 이루고 있다. 이러한 특징으로 인해 캐비어의 단백질들은 피부 및 모발과 강한 친화력을 가지고, 아미노산들은 세포 대사의 필수 요소로서 작용한다고 밝혀져 있다. 캐비어 Protein 구조는 전 세계 어느 종의 동·식물 천연 물질과 비교해보아도 인체내 피부 구조와 비슷한 점을 가지고 있어서 피부 흡수 능력과 영양 보충 능력을 주는 우수한 물질로 알려져 있다. 특히, 기존의 다른 천연 성분과 달리 피부에 침투되는 흡수 능력이 우수하고, 지치고 피로도가 높아진 피부노화 및 탈모현상에 대한 두피 회복력에도 탁월한 효과를 발휘한다고 전해지고 있다.

본 발명의 고초균, 유산균, 효모를 이용한 생캐비어 발효추출물은 캐비어의 우수한 품질과 효능을 보다 안정적으로 유지하고 보존할 수 있다. 이러한 특징으로 캐비어의 구성성분의 Protein은 두피와 긴밀한 친화성을 지니고 있어 세포 필수 대사 요소로서 작용한다고 말할 수 있다. 또, 진피의 지질막을 재생시키는 역할은 대부분 지방 성분인데, 캐비어에는 지용성 및 수용성 비타민 요소들을 모두 포함하고 있다. 다시 말하자면, 본 발명의 생캐비어 추출물 및 발효추출물은 피부재생 관련 두피와 큰 친화력을 가지고 있어 탈모로 인한 불안감과 극심한 스트레스를 해소해주는 선도적인 두피 화장료로 활용될 수 있을 것이다.

탈모(Alopecia)는 정상적으로 모발이 존재해야 할 부위에 모발이 없는 상태를 말하며, 일반적으로 두피의 성모(굵고 검은 머리털)가 빠지는 것을 의미한다. 탈모의 기전은 아직 정확하게 밝혀져 있지 않지만, 대체적으로 호르몬 불균형 등 내분비계의 이상, 자율 신경계, 혈액 순환장애 등 순환계의 이상에 의한 과도한 피지 생성, 모근의 영양 결핍, 알레르기, 세균 감염 및 유전적 요인, 질병상태, 노화 등이 주원인으로 추정되어 왔으며, 최근에는 복잡한 환경에서 오는 정신적 스트레스, 대기 오염, 음식물 등도 탈모에 영향을 미쳐서 30세 이전에도 탈모 환자가 늘어나고 있다. 탈모는 임상적으로 흉터가 형성되는 것과 형성되지 않는 두 종류로 나눌 수 있으며, 흉터가 형성되는 탈모는 모낭이 파괴되므로 모발의 재생이 되지 않는 반면, 흉터가 형성되지 않는 탈모는 모낭이 유지되므로 증상부위가 사라진 후에 모발이 재생된다. 여성형 탈모도 있지만 빈도와 심각성이 남성형 탈모에서 많다. 남성과 여성이 이렇듯 탈모에 있어서 차이를 보이는 것은 체모의 변화를 결정짓는 성호르몬인 안드로젠과 에스트로젠 때문인 것으로 밝혀져 왔다. 여성의 경우, 여성호르몬인 에스트로젠이 줄어드는 상황에서 탈모가 일어날 수 있으며, 남성의 안드로젠성 탈모증이 나타나는 것은 안드로젠의 과다분비로 인해 에스트로젠의 작용이 억제되는 현상으로 유전과 남성 호르몬인 안드로젠, 그리고 노화가 가장 큰 원인으로 복합적으로 작용한다. 남성형 탈모가 일어나려면 일단은 탈모유전자가 있어야 하지만 탈모유전자가 있다고 해서 모두 탈모가 일어나는 것은 아니며 탈모유전자가 없다고 하더라도 나이가 들게 되면 일부의 모낭에서 축소가 일어나게 되므로 탈모가 시작된다. 탈모는 시작되는 시기도 개인마다 다르며 그 개인의 유전자의 조합과 남성 호르몬의 농도에 따라 달라지는 복잡한 과정이라고 볼 수 있다.

두피 노화는 자외선, 염증, 환경인자, 연령의 증가 등에 의한 프리라디칼의 활성화로 야기될 수 있고, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망이 파괴되고, 모낭 세포 및 조직이 손상되어 노화가 촉진될 수 있다. 이로 인하여, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 두피 세포 및 조직이 파괴되고, 결국 탈모 현상이 나타난다. 따라서, 프리라디칼을 소거하여 모낭세포의 세포막을 보호하고, 이미 손상 받은 모낭 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생시키고 증식시켜야 빠르게 회복되어 건강한 두피를 유지할 수 있다.

여러 종류의 탈모증에서도 가장 대표적인, 안드로젠성 탈모증은 유전적 소인과 남성 호르몬에 의해 발생하는 흔한 탈모 질환으로, testosteron으로부터 5α-reductase에 의해 생성되는 dihydrotestosterone(DHT)에 의해 탈모가 발생하는 것으로 알려져 있다. 모낭의 점진적인 소형화가 특징적이며, 휴지기 모발의 비율 증가와 성장기기간의 감소로 인해 임상적으로는 두피의 전두부 및 두정부 모발이 점차 가늘어지고 앞머리선이 후퇴하게 된다. 과거 안드로젠성 탈모증은 정상적인 노화현상으로 생각하기도 하였고 백인의 경우 성인 남자의 50％ 이상에서 안드로젠성 탈모증을 보이지만, 한국인은 백인에 비하여 연령별로 10∼20％ 정도 낮게 나타나는 등 발생률이 상대적으로 낮았다. 그러나 최근 우리나라를 비롯한 동양에서도 안드로젠성 탈모증의 발생이 과거와는 다르게 크게 증가하고 있다. 이에 따라 안드로젠성 탈모증에 대한 관심과 치료 수요도 급증하고 있다. 현재까지 안드로젠성 탈모증의 치료 약제로는 경구 finasteride복용 제제와 미녹시딜 도포제가 미국 식품 의약안전청(FDA)의 승인을 받아 사용되고 있다. 이 중 미녹시딜은 piperidinopyrimidine 유도체로 현재 안드로겐성 탈모증의 치료에 가장 많이 사용되는 발모제이다. 모발의 성장에 대한 미녹시딜의 작용기전은 명확히 밝혀져 있지는 않지만 말초혈관에 작용하며 국소적 혈류증가를 유발하고 직접적으로 모낭상피에 작용하여 모발의 성장을 유도하며, 칼륨 통로에 의해 모낭을 활성화시키고 면역 반응의 조절자로서 작용하여 모발의 성장을 촉진시키는 것으로 추정되고 있다. 미녹시딜을 포함한 기존 약제들의 치료 효과가 항상 만족스러운 것은 아니고 또한 많은 새로운 약제들이 개발되고 있으나 과학적으로 그 치료 효과를 검증하지 않은 경우가 많으므로, 새로운 치료제의 개발과 효과의 객관적인 검증을 위한 지속적인 연구가 필요하다.

본 발명의 생캐비어 추출물 및 발효추출물은 육모 및 발모 재생용 조성물로서, 기존 미녹시딜 제제와 유사한 탈모치료의 효과를 갖는 두피 개선용 조성물이다. 생캐비어 추출물 및 발효 추출물은 피부 생리 활성과 흡수력을 높이고, 두피에서의 증발을 지연시켜 모낭 내에 오래 존재하도록 하며 국소 작용을 높여주는 항안드로젠 효과가 있어 미녹시딜 단독보다 효과가 더 좋을 것으로 기대된다.

본 발명의 목적은 생캐비어 추출물 및 발효추출물의 유효성분을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 육모, 발모, 모발생장 촉진, 발모재생, 탈모방지에 탁월한 기능을 발휘하는 두피 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다. 보다 상세하게는 캐비어 추출물 및 캐비어에 별도의 염장처리 과정을 거치지 않은 생캐비어를 여러 복합균주를 활용한 발효물을 이용하여, 유효성분의 효과를 더욱 증대시키며 안정화시킨 제형을 사용하는 두피 개선용 화장료의 제공을 목적으로 한다.

본 발명에 따른 캐비어 추출의 방법은, 염장처리 과정을 수반하지 않은 생캐 비어 일반추출법과 염장처리 과정을 수반한 염장 캐비어 일반추출법을 사용하였다. 추출방법은 (a) 생캐비어에 80℃로 가온된 물을 혼합한 후, 교반하는 단계; (b)상온까지 자연 냉각시키는 단계를 포함한다. 상기 방법으로 얻어진 생캐비어 일반추출물은 발효공정을 통하여 생캐비어 발효추출물을 취득할 수 있다. 보다 자세하게, 발효방법은 (a) 고초균을 이용하여 생캐비어를 발효시키는 공정; (b) 유산균과 효모를 이용하여 생캐비어를 발효시키는 공정; 및 (C) 생캐비어에 고초균과 복합 미생물(유산균, 효모) 중 하나 또는 둘 이상을 혼합하여 발효시키는 공정을 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기 방법으로 얻어진 발효물은 숙성하는 단계를 거칠 수 있으며, 이로부터 얻은 발효물 또는 그 발효물을 다시 일부 또는 전부 감압농축 및 동결건조하여 얻은 농축물, 또는 발효물 및 농축액 중에 함유되고 있는 주 효과를 발휘하는 화학물질 그 자체를 포함한다.

상기의 발효공정은 고초균 및 발효 미생물(유산균, 효모) 중 하나 또는 둘 이상인 것을 특징으로 한다. 배양액을 pH 4.0-5.0 내지 5.0-7.5 로 조정하고, 미리 배양된 고초균, 유산균, 효모를 각각 10⁷- 10⁸ CFU/mL 농도가 되도록 첨가한 후, 25℃ 내지 50℃ 온도에서 18시간 내지 120시간 배양하였다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기의 추출물 및 발효물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않고 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유하는 것도 무방하다. 상기 생캐비어 추출물 및 발효추출물은 조성물 전체에 대하여 동결건조 중량 기준 0.001 내지 95 중량％로 조성물에 존재할 수 있 다. 이하 본 발명을 하기 위해 실시예와 비교예 및 실험예를 통하여 상세하게 설명하나, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 제시된 것일 뿐, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명에서는 캐비어 추출물 및 발효추출물를 함유하는 조성물의 육모, 발모, 모발 생장 촉진, 발모 재생, 탈모방지 효과를 확인하기 위하여 모낭세포의 활성도, 마우스 모발성장 촉진효과, 탈모환자를 대상으로 한 육모실험을 실시하였고, 항산화 및 염증성 사이토카인 발현 억제 실험을 통해 외부환경에 의한 프리라디칼 생성 억제 및 모낭세포의 세포막 보호를 통한 두피 개선 효과를 확인하였다.

상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 생캐비어의 추출물 및 발효추출물의 추출방법은, 생캐비어에 별도의 염장처리 과정을 거치지 않고 고초균 및 발효 미생물(유산균, 효모) 중 하나 또는 둘 이상을 접종하여 단독 또는 혼합한 발효방법을 이용한다는 특징이 있다. 이를 통해, 유효성분을 파괴하지 않으면서, 잡균에 의한 오염 및 좋지 않은 발효취를 효과적으로 줄일 수 있다. 본 발명의 생캐비어로부터 추출한 오메가-3 복합 성분을 함유한 두피 개선용 화장료 조성물은 항산화 효과, 항염 효과, 피부 재생 촉진 효과가 우수한 것으로 확인되어 두피 활성화는 물론, 피부 노화방지와 주름을 개선하는 효과가 우수하다. 이러한 효과로 인하여 상기 방법으로 얻어진 생캐비어 추출물 및 발효추출물은 항노화 및 두피 재생 활성 촉진, 우수한 육모 및 발모 외용제를 목적으로 하는 화장품, 식품, 의약분야 등에서 유용하게 사용될 수 있다.

＜실시예 1＞ 생캐비어 고초균 발효물의 제조

생캐비어에 10배 양의 80℃ 증류수를 혼합 및 교반하여 용해한 후, 얻어진 추출물을 상온까지 자연 냉각시킨다. 배양액 pH를 5.0-7.5 로 조정하고, 미리 배양된 고초균을 10⁷-10⁸ CFU/mL 농도가 되도록 첨가한 후, 25℃ 내지 50℃ 온도에서 18시간 내지 120시간 배양하였다. 발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 고초균의 기능상실을 유도하였다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하거나, 여과된 상등액을 사용하였다.

＜실시예 2＞ 생캐비어 발효 미생물(유산균 및 효모) 발효물의 제조

생캐비어에 10배 양의 80℃ 증류수를 혼합 및 교반하여 용해한 후, 얻어진 추출물을 상온까지 자연 냉각시킨다. 배양액 pH를 4.0-5.0 내지 5.0-7.5 로 조정하고, 미리 배양된 유산균과 효모를 각각 10⁷-10⁸ CFU/mL 농도가 되도록 첨가한 후, 25℃ 내지 50℃ 온도에서 18시간 내지 120시간 배양하였다. 발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 유산균 및 효모의 기능상실을 유도하였다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하거나, 여과된 상등액을 사용하였다.

＜실시예 3＞ 생캐비어 복합 발효물의 제조

생캐비어에 10배 양의 80℃ 증류수를 혼합 및 교반하여 용해한 후, 얻어진 추출물을 상온까지 자연 냉각시킨다. 배양액 pH를 4.0-5.0 내지 5.0-7.5 로 조정하 고, 미리 배양된 고초균, 유산균, 효모를 각각 10⁷-10⁸ CFU/mL 농도가 되도록 첨가한 후, 25℃ 내지 50℃ 온도에서 18시간 내지 120시간 배양하였다. 발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 고초균 및 유산균, 효모의 기능상실을 유도하였다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하거나, 여과된 상등액을 사용하였다.

＜비교예 1＞ 생캐비어 일반추출물의 제조

대조군으로 사용된 생캐비어 일반 추출물은 발효 공정 없이 동일한 추출 공정을 통해 수득하였다. 즉, 생캐비어의 10배 양의 80℃ 증류수를 혼합 및 교반하여 용해한 후, 얻어진 추출물을 상온까지 자연 냉각시킨다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하거나 여과된 상등액을 생캐비어 일반추출물로 사용하였다.

＜비교예 2＞ 염장 캐비어 일반추출물의 제조

대조군으로 사용된 염장 캐비어 추출물은 발효 공정 없이 염장과정만 추가한 후, 동일한 추출 공정을 통해 수득하였다. 즉, 생캐비어에 5％의 소금을 뿌려 조미하고, 10배 양의 80℃ 증류수를 혼합 및 교반하여 용해한 후, 얻어진 염장 추출물을 상온까지 자연 냉각시킨다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하거나 여과된 상등액을 염장 캐비어 일반추출물로 사용하였다.

＜실험 예 1＞ DPPH법을 이용한 항산화 효과 측정

생캐비어 발효추출물의 항산화 활성을 측정하기 위하여, DPPH(2.2-diphenyl- 1-picryl hydrezyl) 라디칼 소거능을 사용하였다.

500 uM DPPH (2.2-diphenyl-1-picryl hydrezyl) 용액을 에칠 알콜에 녹여 여과한 후 즉시 사용하였다. 제조된 DPPH 용액과 시료 용액을 1:1로 혼합하여 격렬하게 섞은 후, 상온 암소에 20 분간 방치하였다. Microplate reader (Chromate, USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정한 후, 하기 수학식 1를 통해 DPPH 라디칼 제거율(％)을 산출하였다. 이때 라디칼을 제거하는 양성 대조군(positive control)으로 1 mM의 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였다.

표 1 에 나타난 바와 같이 비교예 1의 생캐비어 일반추출물은 비교예 2의 염장과정을 거친 일반추출물에 비해 항산화 활성이 증가한 것을 확인할 수 있었다. 또한, 실시예 1 - 실시 3의 생캐비어 발효추출물을 비교해 볼 때, 실시예 1과 실시예 2은 비슷한 수준으로 항산화 활성을 보이는 한편, 실시예 3의 고초균, 유산균, 효모의 혼합 균주로 이용한 발효물은 각각의 발효물보다 강한 항산화능이 있음을 알 수 있었다.

DPPH 라디칼 제거율(scavenging, ％) = (A - B) / A x 100

상기 식에서, A는 공시험액에서 얻은 흡광도이고, B는 검액에서 얻은 흡광도임

표 1. 생캐비어 추출물 및 발효추출물의 항산화 활성

＜실험 예 2 ＞ 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과

본 실험예는 실시예 및 비교예에서 수득한 생캐비어 추출물 및 발효 추출물의 자외선 조사에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제효과를 평가하기 위하여 사람의 표피조직에서 분리한 섬유아세포(Fibroblast)를 24-well 시험 플레이트에 5 × 104 개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 well을 PBS로 1회 세척하고 각 well에 500㎕의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선B(UVB) 램프 (Model : TL 20/40W, UV B 12.7W, (주)한성 자외선, korea)를 이용하여 자외선 10mJ/㎠를 조사한 후 PBS를 덜어내고 무혈청 배지 350㎕를 첨가하였다. 여기에 시료을 처리한 후 5시간 동안 배양하였다. 배양 상층액을 150㎕ 취하여 IL-1α를 정량함으로서 생캐비어 추출물 및 발효 추출물의 염증성 사이토카인 발현억제효과를 판단하였다. IL-1α의 양은 효소면역분석법(Enzyme-linked Immunosorbent Assay)을 이용하여 정량화하였으며, 수학식 2를 통해 IL-1α의 생성율을 산출하였다.

염증성 사이토카인 발현 억제율(％)= [1-(St-Bo)/(Bt-Bo)] X 100

Bo: 자외선 조사하지 않고 시료 처리하지 않은 well의 IL-1α생성량

Bt: 자외선 조사하고 시료를 처리하지 않은 well의 IL-1α생성량

St: 자외선 조사하고 시료를 처리한 well의 IL-1α생성량

실험결과 비교예 1의 염장과정을 거치지 않은 일반추출물은 비교예 2의 염장과정을 거친 일반추출물에 비해 염증성 사이토카인 발현 억제를 확인할 수 있었으며, 발효추출물은 일반추출물에 비해 자외선에 의한 염증성 사이토카인인 IL-1α의 생성을 효과적으로 방어함을 알 수 있었다(표 2).

표 2. 생캐비어 추출물 및 발효 추출물의 염증성 사이토카인 발현 억제효과

＜실험 예 3＞ 마우스 모발성장 효과 시험

본 실험예는 실시예 및 비교예에서 수득한 캐비어 일반추출물(비교예 1 내지 비교예 2) 및 생캐비어 발효추출물(실시예 1 - 실시예 3) 5％를 함유하는 30％ 에탄올(ethanol) 용액을 제조하여 시험에 사용하였다. 모발성장 효과 시험은 생후 47～53일의 마우스(ICR)를 사용하여 등 부위 털을 제거하고, 등 부위가 깨끗한 것을 골라 물질군마다 10마리를 사용하여 다음날부터 매일 실시예 및 비교예의 시험물질을 개체당 100㎖씩 도포하였다. 시간 경과에 따른 모발의 길이 및 모발 성장 정도 를 모제거 후 복원 정도에 따라 점수를 부가하여 각각 비교하였다. 모발성장 정도를 비교하기 위하여, 대조군으로는 30％ 알코올 용액을 각 개체에 도포하여 성장 상태를 관찰하였다. 실험결과, 생캐비어 추출물 및 발효추출물에서 우수한 모발성장 촉진효과를 확인하였다(표 3).

표 3. 생캐비어 추출물 및 발효추출물 마우스 모발성장 효과

＜실험 예 4＞ 모낭세포의 활성도 평가

세포주는 사이언스엘(SCIENCELL)사에서 구매한 인간 모유두세포(Human Dermal papilla cell)을 이용하였다. 세포배양은 중간엽세포 배지(Mesenchymal Cell Medium)를 사용하여, 5％ CO2 배양기에서 배양하였다.

상기 실시예 및 비교예의 발모 및 육모 조성물의 모유두세포 생장 촉진 효과를 알아보기 위해 MTT 분석법을 수행하였다. MTT 분석법은 다음과 같은 방법으로 수행하였다. 우선 100 dish에 전배양한 인간 모유두세포를 트립신을 이용하여 떼어낸 후, 혈색소계(Hemacytometer)를 이용하여 세포수를 세어 10⁵cell/㎖ 이 되도록 맞췄다.

96 웰 플레이트에 상기 모유두 세포액 100㎕(Well당 10⁴cell)를 넣고, 1일간 배양했다. 상기 실시예 및 비교예에서 제조한 발모 및 육모 조성물 시료를 중간엽세포 배지에 2％가 되도록 희석한 후, 각 시료를 1일간 배양한 세포가 있는 96 well에 첨가하여 각 시료의 첫 단계 농도가 1％가 되도록 하였다. 96 well의 100㎕의 시료액을 1/2로 계단희석(serial dilution)하여 시료당 18 well까지 희석하여 각 실시예 및 비교예의 발모 및 육모 조성물의 처리 농도가 0.001％ 가 되도록 하였다. 시료를 처리한 96 well을 37℃, 5％ CO2하에서 1일간 배양한 후, 0.1mg(20㎕ of 5mg/㎖)의 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide)용액을 모든 well에 첨가하였다. 37℃에서 4시간 더 배양한 후, 배지를 모두 제거했다. 각각의 well에 DMSO 200㎕씩을 가하여, 생성된 포르마잔 염(formazan salt)이 완전히 녹을 수 있도록 했다. 마이크로플레이트 판독기(Microplate reader)로 492nm에서 흡광도를 측정한 후, 모유두 세포의 생장 정도를 판단하였다.

실험결과 생캐비어 발효추출물은 비교예 1 내지 비교예 2의 일반추출물에 비해 모낭세포의 활성이 훨씬 증가함을 확인할 수 있었으며, 생캐비어 복합 발효물은 양성 대조군으로 사용한 미녹시딜 수준 이상으로 모낭세포의 활성이 우수하였다(표 4).

표 4. 생캐비어 추출물 및 발효추출물 모낭세포의 활성도

＜실험 예 5＞ 탈모 환자 대상 육모 실험

탈모환자에 대한 효과를 알아보기 위하여 탈모증이 있는 환자를 대상으로 상기 실시예 및 비교예 의 발모 및 육모 조성물에 대하여 임상 시험을 실시하였다.

피험자로서 만 20세 이상의 성인 남녀 중 남성형 탈모증이 있는 사람을 대상으로 하였다. 시험은 상기 실시예 및 비교예의 발모 및 육모 조성물 각각에 대해 5명씩 탈모 부위에 1일 2～3 회 분무하는 방식으로 실시하였으며, 60일 후에 평가를 행하고 도포 부위의 발모상태를 관찰하여 효과의 판정은 사진 판정 소견 및 자각 증상 개선 정도를 표 5 의 평가 척도에 따라 5 단계로 평가하였다. 그 결과는 하기 표 6 에 나타내었다.

표 5. 탈모 환자 대상 육모 개선 실험 판정기준

표 6. 생캐비어 추출물 및 발효 추출물의 육모 개선정도

표 6 의 결과에서 보여지듯이 비교예 1 내지 비교예 2의 캐비어 일반추출물보다 발효공정을 통한 생캐비어 발효추출물에서 탈모 방지 및 발모, 육모 효과가 상당히 증대되었다. 상기에서 살펴본 바와 같이 고초균이나 유산균 및 효모로 복합 발효한 추출물을 사용시 그 효과의 상승작용은 기존의 미녹시딜과 대등한 정도로 우수하였다. 또한, 임상시험에서의 사용기간 동안 대상자 전원에게서 어떠한 부작용도 발견되지 않아 인체에도 안전한 것으로 나타났다.

Claims

생캐비어 발효추출물을 함유한 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.
생캐비어 추출물을 함유한 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.
제 1항에 있어서, 생캐비어 추출물에 고초균과 발효 미생물로 복합 발효시킨 것을 특징으로 하는 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물..
제 1항에 있어서, 고초균인 것을 특징으로 하는 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.
제 1 항 내지 3항에 있어서, 상기 발효 미생물은 유산균, 효모 및 이들의 혼합 균주로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.
제 1항 내지 2항에 있어서, 생캐비어 추출물 및 발효추출물의 건조 중량을 기준으로 조성물 전체에 대해 0.001 내지 95 중량％ 를 함유하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1항 내지 2항에 있어서, 생캐비어 추출물 및 발효추출물을 함유하거나 각각의 유효성분을 함유하는 것을 특징으로 하는 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 화장품, 의약품, 피부외용제 조성물.
제 1항에 있어서, 생캐비어 발효물을 함유하는 나노캡슐, 마이크로캡슐, 나노좀 등의 제형으로 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.
제 1항 내지 2항에 있어서, 화장수, 젤, 로션, 에센스, 연고, 크림, 패치, 분무제, 정제, 환제, 시럽, 분말, 수중유(O/W)형 또는 유중수(W/O)형으로 제형화 되는 것을 특징으로 하는, 생캐비어 추출물 및 발효추출물을 함유하는 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.
제 1항 내지 2항에 있어서, 약제학적 또는 화장학적으로 허용되는 담체 또는 첨가제를 추가로 함유하여 단위투여 제형으로 제형화 되는 조성물.
경구 제제형인 것을 특징으로 하는 발모, 육모, 탈모방지, 두피 개선용 조성물.