KR20130015608A - Composition for skin promotion containing melanin as active ingredient - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition containing melanin for preventing and relieving skin irritation is provided to regulate the expression of inflammatory cytokine and to prevent and treat skin irritation such as dermatitis, skin dryness, smarting, itching, and burning sensation. CONSTITUTION: A cosmetic composition for preventing and treating skin irritation contains 0.01-10 wt% of melanin as an active ingredient. Melanin is derived from a Mucuna pruriens extract. Melanin suppresses the expression of inflammatory cytokine by all-trans retinoic acid. Melanin is prepared by pretreating the Mucuna pruriens extract at pH 8-10 and oxidizing at 15-35 deg. C. for 3-5 days. The cosmetic composition is manufactured in the form of a lotion, a nutrition cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing foam, a pack, or a body lotion. [Reference numerals] (AA) MCP-1 expressed amount(pg/ml); (BB) 500ppm, embodiment 1; (CC) 100ppm, embodiment 2; (DD) 1ppm comparative embodiment 1; (EE) 1uM comparative embodiment 2; (FF) Control group

Description

멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부 개선 조성물{Composition for skin promotion containing melanin as active ingredient}Composition for skin promotion containing melanin as active ingredient

본 발명은 피부의 자극을 완화하여 피부를 개선하는 피부 자극 예방 및 완화용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing and alleviating skin irritation, which alleviates skin irritation and improves skin.

피부는 신체 중 가장 큰 기관으로 항상 외부와 접하고 있으면서 여러 가지 자극이나 건조한 환경으로부터 생체를 보호하는 보호막의 역할을 하고 있으며, 다른 기관에 비하여 새로운 세포의 생성과 소멸이 활발히 일어나는 기관이다. 또한, 물리적인 찰과상으로부터 보호하고, 몸 안에 가지고 있는 물의 손실을 막아주며 태양으로부터 나오는 해로운 자외선으로부터 보호해주고, 몸의 체온을 조절해주는데 매우 중요한 역할을 담당하고 있다.The skin is the largest organ in the body and is always in contact with the outside, acting as a protective shield to protect the living body from various irritation or dry environments. It is an organ in which new cells are actively produced and destroyed compared to other organs. It also plays a very important role in protecting the body from physical abrasions, preventing the loss of water in the body, protecting it from harmful ultraviolet rays from the sun, and regulating the body's body temperature.

한편, 민감성 피부란 일반적인 피부와 비교하여 상대적으로 피부 반응이 잘 유발되는 경우를 말한다. 여러 가지 설문조사에 따르면 30-50%의 소비자가 스스로를 민감한 피부라고 여기고 있다. 그러나 민감성 피부의 증상 및 원인이 명확하게 밝혀져 있지는 않으나 일반적으로 민감성 피부를 가진 사람들은 화장품, 스트레스, 대기 오염 등 외부적 환경에 의한 영향을 쉽게 받는다. 이러한 영향은 홍반 등의 염증성 반응 및 피부 건조, 거칠어짐 등 육안적으로 확인할 수 있는 변화뿐만 아니라 따가움, 화끈거림, 가려움 등의 주관적인 느낌까지 매우 다양한 형태로 나타난다. 민감성 피부를 구분하는 시험으로서, 따가움 화끈거림 등을 유발한다고 알려진 젖산(lactic acid)이나 DMSO를 처리하여 민감성 피부를 분류하는 예도 있다(Kligman et al., Dermatoses, 1988, 36, 45-49).Meanwhile, sensitive skin refers to a case where skin reactions are relatively well induced as compared with general skin. According to several surveys, 30-50% of consumers consider themselves sensitive skin. However, although the symptoms and causes of sensitive skin are not clearly identified, people with sensitive skin are generally affected by external environment such as cosmetics, stress, and air pollution. These effects appear in a wide variety of forms, from inflammatory reactions such as erythema and changes to the naked eye such as skin dryness and roughness, as well as subjective feelings such as stinging, burning and itching. As a test to distinguish sensitive skin, there is an example of classifying sensitive skin by treatment with lactic acid or DMSO, which is known to cause stinging and burning (Kligman et al., Dermatoses, 1988, 36, 45-49).

지금까지의 저자극성 피부용 화장품들은 자극을 일으킬 여지가 있는 유효성분을 제거하여 접촉성 피부염, 알러지성 피부염 등을 일으키지 않도록 개발되어 왔다. 그러나 환경적, 심리적 요인에 의해 민감성 피부 보유자들의 화장품에도 유효성분들의 사용이 요구된다. 이에 화장품 업계에서는 사이토카인 및 염증성 매개물질의 조절에 의해 면역반응을 완화시키며, 피부 장벽 강화 기능, 피부 보호 기능을 통해 피부 자극을 완화시키려는 시도들이 있어 왔다. 구체적인 예로 염증성 매개물질의 조절 및 민감성 피부의 역반응 조절의 브레디키닌 길항제(bradykinin antagonist; USP 5,849,312 참조)가 있으며, 사이토카인 중 하나인 TNF-α 저해제를 민감성 피부용 제제로 적용한 예(USP 5,851,556)가 있다.Until now, hypoallergenic skin cosmetics have been developed so as not to cause contact dermatitis, allergic dermatitis, etc. by removing the active ingredients that may cause irritation. However, due to environmental and psychological factors, the use of active ingredients is also required for cosmetics of sensitive skin owners. In the cosmetic industry, there have been attempts to alleviate the immune response by controlling cytokines and inflammatory mediators, and to alleviate skin irritation through skin barrier enhancement and skin protection. Specific examples include the bradykinin antagonist (see USP 5,849,312) for the control of inflammatory mediators and for the control of adverse reactions of sensitive skin. have.

일반적으로 자극반응이나 염증반응의 기전을 살펴보면, 사람의 각질형성 세포나 랑게르한스 세포에서는 외부의 물질에 의해 다양한 사이토카인을 만들어 방출할 수 있다. 이러한 사이토카인은 인체 내 면역 체계 활성화 촉진 물질로서 피부의 자극유발이나 국소적인 염증반응의 진행에 필수적이다(J Appl Toxicol 16:65-70, 1996). 실제로 자극성 접촉 피부염에서 인터루킨-6(Interleukin-6;IL-6), 인터루킨-1(Interleukin-1;IL-1), 종양 괴사인자-α(Tumor necrosis factor-α; TNF-α)의 증가가 보고된바 있다(Contact Dermatitis 35:355-60, 1996, Dec). In general, looking at the mechanism of stimulation or inflammatory response, human keratinocytes or Langerhans cells can be produced and released from various cytokines by external substances. These cytokines are essential for promoting immune system activation in the human body and are essential for skin irritation and local inflammatory reactions (J Appl Toxicol 16: 65-70, 1996). Indeed, increased irleukin-6 (IL-6), interleukin-1 (IL-1), and tumor necrosis factor-α (TNF-α) in irritant contact dermatitis It has been reported (Contact Dermatitis 35: 355-60, 1996, Dec).

이에, 본 발명자들은 피부 자극에 대한 연구를 진행한 결과, 멜라닌 색소가 우수한 피부 자극 예방 및 완화 효능을 나타냄을 발견하였다. 나아가, 천연 추출물 중 우단콩 추출물로부터 유래한 멜라닌 색소가 우수한 피부 자극 예방 및 완화 효능을 나타냄을 발견하였다. 보다 상세하게는 신경전달물질인 도파민의 전구체인 L-도파(L-DOPA)가 함유되어 있는 우단콩 추출물에서 유래한 멜라닌 색소를 효과적으로 이용하기 위하여 연구한 결과, 염증성 반응 경로에 관계된 염증성 사이토카인인 IL-8 및 MPC-1 인자가 피부자극의 형성 과정에 관여하며, 이들 염증성 매개분자의 발현 조절에 의해 역반응을 조절하여 피부 자극을 예방하고 완화시키는 효과를 가질 수 있음을 발견하였다. Accordingly, the present inventors have conducted a study on skin irritation, and found that melanin pigments exhibit excellent skin stimulation prevention and alleviation effects. Furthermore, it was found that melanin pigment derived from velvet bean extract among natural extracts exhibits excellent skin irritation prevention and alleviating effects. More specifically, the study was conducted to effectively use melanin pigment derived from velvet bean extract containing L-DOPA, a precursor of the neurotransmitter dopamine, and the inflammatory cytokines involved in the inflammatory response pathway. It has been found that IL-8 and MPC-1 factors are involved in the formation of skin irritation and may have an effect of preventing and alleviating skin irritation by controlling adverse reactions by controlling the expression of these inflammatory mediators.

따라서, 본 발명의 목적은 피부 자극을 예방 및 완화시키는 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a functional cosmetic composition that prevents and alleviates skin irritation.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소를 포함하는 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for preventing and alleviating skin irritation, including melanin pigment derived from velvet bean extract.

본 발명에 의해 제공되는 멜라닌 색소, 나아가 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소를 포함하는 화장료 조성물은 여러 가지 자극으로부터 피부를 보호하며, 염증성 사이토카인의 발현을 조절하여 피부염, 피부 건조, 피부 거칠어짐, 따가움, 가려움, 화끈거림 등 과 같은 피부자극을 예방 및 완화시킨다.The cosmetic composition comprising a melanin pigment provided by the present invention, and also a melanin pigment derived from velvet bean extract, protects the skin from various stimuli, and regulates the expression of inflammatory cytokines such as dermatitis, skin dryness, rough skin, stinging, Prevents and relieves skin irritation such as itching and burning.

도 1은 시험예 1에서의 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2의 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인(MCP-1)의 발현양을 나타낸 것이다.
도 2는 시험예 2에서의 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2의 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인(IL-8)의 발현양을 나타낸 것이다.FIG. 1 shows the expression levels of inflammatory cytokines (MCP-1) against alltrans retinoic acid of Examples 1 and 2 and Comparative Examples 1 and 2 in Test Example 1. FIG.
Figure 2 shows the expression levels of inflammatory cytokines (IL-8) to the all-trans retinoic acid of Examples 1 and 2, Comparative Examples 1 and 2 in Test Example 2.

본 발명의 화장료 조성물은 멜라닌 색소를 유효성분으로 포함한다. 본 발명에서 사용되는 멜라닌 색소는 천연 추출물에서 유래한 것이 바람직하고, 나아가 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소가 더 바람직하다.Cosmetic composition of the present invention contains melanin pigment as an active ingredient. The melanin pigment used in the present invention is preferably derived from a natural extract, and more preferably a melanin pigment derived from velvet bean extract.

본 발명에서 사용하는 우단콩(Mucuna pruriens)은 콩과 식물로서 아프리카, 인도 및 카리브해에서 많이 발생하는 식물이다. 또한, 전통적으로 혈당을 낮추어 주며 우단콩 추출물에는 도파민의 전구체인 L-도파가 함유되어 있고, 이는 도파민이라는 신경전달물질로 전환되어 성장호르몬을 자극하는 효과가 있는 한편, 파킨슨병의 치료에 사용되는 것으로 알려져 있다. Mucuna pruriens used in the present invention is a legume which is a plant that occurs a lot in Africa, India and the Caribbean. In addition, it lowers blood sugar traditionally, and velvet bean extract contains L-dopa, a precursor of dopamine, which is converted into a neurotransmitter called dopamine, which stimulates growth hormone and is used to treat Parkinson's disease. It is known.

본 발명은 멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물에 포함하는 상기 멜라닌 색소는 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소인 것이 바람직하며, 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10 중량%로 포함되는 것이 바람직하다.The present invention provides a cosmetic composition for preventing and alleviating skin irritation comprising melanin pigment as an active ingredient. In addition, the melanin pigment contained in the cosmetic composition of the present invention is preferably a melanin pigment derived from velvet bean extract, it is preferably included in 0.01 to 10% by weight relative to the total weight of the composition.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 우단콩 추출물은 업계에서 통상적으로 사용하는 추출법을 이용하여 제조할 수 있다. 보다 상세하게는, 햇볕에 말린 우단콩을 분쇄하여 분말로 만들고 4℃의 온도에서 24시간 동안 탈이온 증류수에 담근 후 원심분리기로 분리시킨 후, 그 상청액을 감압 하에 동결 건조시켜 제조하는 것이 바람직하다.The velvet bean extract included in the cosmetic composition of the present invention can be prepared using an extraction method commonly used in the industry. More specifically, it is preferable to prepare the dried velvet soybean powder into powder, soak in deionized distilled water for 24 hours at a temperature of 4 ° C., separate with a centrifuge, and then freeze-dried the supernatant under reduced pressure. .

본 발명의 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소는 우단콩 추출물을 pH8~10의 조건에서 전처리하고 3~5일간 15~35℃에서 산화하여 제조된 것이 바람직하다.
Melanin pigment derived from velvet soybean extract of the present invention is preferably prepared by pretreating velvet soybean extract under the condition of pH 8 ~ 10 and oxidized at 15 ~ 35 ℃ for 3 to 5 days.

한편, 본 발명의 멜라닌 색소, 특히 우단콩 추출물에서 유래한 멜라닌 색소는 올트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid)에 의한 염증성 사이토카인의 발현을 조절하여 이를 억제시킴으로써 피부 자극을 예방 및 완화시키는 효과를 제공한다. Meanwhile, the melanin pigment of the present invention, in particular the melanin pigment derived from velvet bean extract, prevents and alleviates skin irritation by controlling and inhibiting the expression of inflammatory cytokines by all-trans retinoic acid. To provide.

본 발명의 조성물은 외형제 조성물로서 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 보디로션, 보디크림, 보디오일, 보디에센스 등의 화장료 제형을 가질 수 있다. 또한, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투과형 제형을 갖는 화장료 조성물 일 수 있다. 또한, 각각의 제형에 있어서 다른 성분들은 기타 외용제의 종류 또는 사용목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합 할 수 있다.
The composition of the present invention is not particularly limited in its formulation as an external appearance composition, for example, softening longevity, astringent longevity, nourishing longevity, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing cream, cleansing foam, Cosmetic formulations such as cleansing water, packs, powders, body lotions, body creams, body oils, body essences, and the like. It can also be a cosmetic composition having a transdermal penetration formulation such as lotion, ointment, gel, cream, patch or spray. In addition, other components in each formulation may be appropriately selected and blended by those skilled in the art without difficulty depending on the type or purpose of use of other external preparations.

이하 본 발명을 하기 실시예 및 시험예에 의거하여 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예 및 시험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 예로 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail based on the following Examples and Test Examples. However, these examples and test examples are only for helping the understanding of the present invention, the scope of the present invention is not limited to these examples.

[참고예] 우단콩 추출물의 제조 Reference Example Preparation of Velvet Extract

햇볕에 말린 우단콩을 분쇄하여 분말로 만들었다. 이를 4℃의 온도에서 24시간 동안 탈이온 증류수에 담근 후 20분 동안 원심분리기로 분리시킨 후, 그 상청액을 감압 하에 동결 건조시켜 제조하였다.
Sun-dried velvet beans were ground to powder. It was prepared by soaking in deionized distilled water for 24 hours at a temperature of 4 ℃ and then separated by centrifugation for 20 minutes, the supernatant was freeze-dried under reduced pressure.

[제조예]우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소의 제조Preparation Example Preparation of Melanin Pigment from Velvet Extract

상기 참고예에서 제조한 우단콩 추출물 파우더를 1% 농도로 정제수에 용해한 후, 염기용액으로 수산화나트륨 수용액을 사용하여 pH 8-10로 조정하였다. 이를 교반하면서 5일간 실온에서 산화하여, 0.3-0.5%의 멜라닌 용액을 수득하였다.
The velvet bean extract powder prepared in the reference example was dissolved in purified water at a concentration of 1%, and then adjusted to pH 8-10 using an aqueous sodium hydroxide solution as a base solution. It was oxidized at room temperature for 5 days with stirring to obtain a 0.3-0.5% melanin solution.

[시험예 1]MCP-1의 발현양 측정 Test Example 1 Measurement of Expression of MCP-1

케라티노사이트(HaCa T cell line) 에 상기 제조예에서 제조한 멜라닌 용액을 적정농도로 처치하여, 피부 자극원의 하나인 올트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid, ATRA))에 대한 염증성 사이토카인(MCP-1)의 발현양을 측정하였다.
Inflammatory cytokines against all-trans retinoic acid (ATRA), one of the skin irritants, were treated with keratinocytes (HaCa T cell line) in the melanin solution prepared in the above preparation at an appropriate concentration. The expression level of (MCP-1) was measured.

구체적인 시험방법은 하기와 같다. Specific test methods are as follows.

HaCa T 세포를 96 웰플레이트(well plate, 2.0 X 104 cell/well)에 심고 24시간 동안 배양하였다. HaCa T 단분자막을 200ul의 인산완충식염수(PBS)(제조사; Lonza)로 세 번에 걸쳐 세척하고, 200ul의 무혈청 DMED(Dulbecco's modified eagle medium)를 24시간 동안 첨가하였다. 24시간의 혈청기아상태(serum starvation) 후, HaCa T 단분자막을 인산완충식염수로 세 번에 걸쳐 세척하고 150ul의 1% 배지 함유 FBS(FBS containing media)를 첨가하였다.
HaCa T cells were planted in 96 well plates (2.0 × 10 4 cells / well) and incubated for 24 hours. HaCa T monomolecules were washed three times with 200ul of phosphate buffered saline (PBS) (manufactured by Lonza) and 200ul of serum free Dulbecco's modified eagle medium (DMED) was added for 24 hours. After 24 hours of serum starvation, the HaCa T monolayer was washed three times with phosphate buffered saline and 150ul of FBS containing media (FBS) was added.

실시예Example 1 및 2 1 and 2

HaCa T 세포들은 항자극 시약으로서, 50ul으로 희석된 상기 제조예에서 제조한 멜라닌 용액 500ppm(실시예 1)과 상기 제조예에서 제조한 멜라닌 용액 100ppm(실시예 2)으로 10분 동안 각각 처리하고, 1% 배지 함유 FBS에서 항자극 처리 세포로 희석되었으며, 24시간 동안 배양된 50ul의 1uM의 올트랜스 레티노산(제조사: Sigma-Aldrich, St. Louis, USA)을 첨가하였다.
HaCa T cells were treated with an anti-irritant reagent for 10 minutes with 500 ppm of melanin solution prepared in Preparation Example (Example 1) and 100 ppm of melanin solution prepared in Preparation Example (Example 2) diluted to 50ul, 50 ul of 1 uM of alltrans retinoic acid (manufactured by Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) was added and diluted with anti-stimulated cells in 1% medium containing FBS.

비교예Comparative example 1 One

HaCa T 세포들을 50ul으로 희석된 히드로코르티손 1ppm으로 10분 동안 처리하고, 1% 배지 함유 FBS에서 항자극 처리세포로 희석되고 24시간 동안 배양된 50uL의 1uM의 올트랜스 레티노산을 첨가하였다. 그리고 상기 실시예 1 및 2와 동일한 방법으로 405nm에서 흡수도를 측정하였다.
HaCa T cells were treated with 1 ppm of 50 ppm hydrocortisone diluted for 10 min, and 50 uL of 1 uM of alltrans retinoic acid diluted with anti-stimulatory cells in 1% medium containing FBS and incubated for 24 hours was added. And the absorbance was measured at 405nm in the same manner as in Examples 1 and 2.

비교예Comparative example 2 2

상기 실시예 1 및 2에서 사용된 HaCa T세포에 어느 항자극 시약도 처리하지 않은 상태로 상기와 동일한 50uL의 1uM의 올트랜스 레티노산을 첨가하였다.
To the HaCa T cells used in Examples 1 and 2 were added the same 50uL of 1uM all-trans retinoic acid without any anti-stimulatory reagents.

대조군Control group

상기 실시예 1 및 2에서 사용된 HaCa T세포에 어느 항자극 시약도, 올트랜스 레티노산도 첨가하지 않았다.
No anti-stimulatory reagent or all-trans retinoic acid was added to the HaCa T cells used in Examples 1 and 2 above.

상기 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2, 대조군의 상청액을 수집하고 MCP-1(Monocyte Chemoattractant Protein-1) (상품명: BD OptEIATM; 제조사: BD Biosciences, New Jersey, USA)용 사이토카인 ELISA를 수행하였다. 2,2'-아지노-비스-3-에틸벤즈티아졸린-6-술폰산(2,2'-azino-bis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (제조사: Sigma-Aldrich)와의 접합체를 배양 후 SoftMax?Pro 5 (제조사: Molecular device, Sunnyvale, USA)를 사용하여 405nm에서 흡수도를 측정하였다.
Examples 1 and 2, Comparative Examples 1 and 2, the supernatant of the control was collected and cytokine ELISA for MCP-1 (Monocyte Chemoattractant Protein-1) (trade name: BD OptEIA ™ ; manufacturer: BD Biosciences, New Jersey, USA) Was performed. After incubating the conjugate with 2,2'-azino-bis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid (manufactured by Sigma-Aldrich) Absorbance was measured at 405 nm using SoftMax® Pro 5 (manufactured by Molecular device, Sunnyvale, USA).

모든 샘플들은 3중으로 시험하였으며, MCP-1의 발현양은 pg/ml로 나타내었다. 발현양 및 자극 감소율(%)은 다음의 식으로 계산되었다.All samples were tested in triplicate and the expression level of MCP-1 was expressed in pg / ml. Expression amount and stimulus reduction rate (%) were calculated by the following equation.

Figure pat00001
Figure pat00001

측정 결과 및 상기 식 1로 계산한 자극 감소율(%)을 하기의 표 1에 나타내었다(도 1 참조).Measurement results and percent reduction in stimulation calculated by Equation 1 are shown in Table 1 below (see FIG. 1).

처치농도Treatment concentration 사이토카인 발현양(pg/ml)Cytokine Expression (pg / ml) 자극 감소율(%)% Irritation reduction 실시예 1Example 1 500ppm500 ppm 950.2950.2 96.6096.60 실시예 2Example 2 100ppm100 ppm 1104.71104.7 82.1382.13 비교예 1Comparative Example 1 1ppm1 ppm 1027.61027.6 86.7586.75 비교예 2Comparative Example 2 1uM1 uM 1898.81898.8 -- 대조군Control group -- 894.7894.7 --

상기 표 1에 나타난 결과로부터, HaCa T 세포에 적정 농도의 멜라닌 색소 용액을 처치할 경우 피부 자극원의 하나인 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인인 MCP-1의 발현이 유의적으로 감소한다는 사실을 ELISA를 통해 확인할 수 있었다. 또한, 멜라닌 색소 용액의 처치 농도가 증가하면 염증성 사이토카인 MCP-1의 발현의 억제 정도가 커짐을 알 수 있었다.
From the results shown in Table 1, the treatment of HaCa T cells with the appropriate concentration of melanin pigment solution significantly reduced the expression of MCP-1, an inflammatory cytokine against all-trans retinoic acid, one of the skin irritants. It could be confirmed by ELISA. In addition, it was found that increasing the treatment concentration of the melanin pigment solution increases the degree of suppression of the expression of the inflammatory cytokine MCP-1.

[시험예 2] IL-8의 발현양 측정Test Example 2 Measurement of Expression of IL-8

상기 시험예 1과 동일한 실시예 1 및 2, 비교예 1 및 2, 대조군을 제조하였다. 그리고 이의 상청액을 수집하고 IL-8((BD OptEIATM; BD Biosciences, New Jersey, USA))용 사이토카인 ELISA를 수행하였다. 그리고 동일한 방법으로 2,2'-아지노-비스-3-에틸벤즈티아졸린-6-술폰산(제조사: Sigma-Aldrich)와의 접합체를 배양 후 SoftMax?Pro 5 (제조사: Molecular device, Sunnyvale, USA) 를 사용하여 405nm에서 흡수도를 측정하였다. Examples 1 and 2, Comparative Examples 1 and 2, and the same control group as Test Example 1 were prepared. And supernatants thereof were collected and subjected to cytokine ELISA for IL-8 ((BD OptEIA ™ ; BD Biosciences, New Jersey, USA)). In the same manner, after incubating the conjugate with 2,2'-azino-bis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid (manufactured by Sigma-Aldrich), SoftMax® Pro 5 (manufactured by Molecular device, Sunnyvale, USA) Absorbance at 405 nm was measured.

모든 샘플들은 3중으로 시험하였으며, MCP-1의 발현양은 pg/ml로 나타내었다. 발현 수준 및 자극 감소율(%)는 상기 식 1로 계산되었다.
All samples were tested in triplicate and the expression level of MCP-1 was expressed in pg / ml. Expression level and percent reduction in stimulation were calculated by Equation 1 above.

측정 결과 및 자극 감소율(%)을 하기의 표 2에 나타내었다(도 2 참조).Measurement results and stimulation reduction rate (%) are shown in Table 2 below (see FIG. 2).

처치농도Treatment concentration 사이토카인 발현양(pg/ml)Cytokine Expression (pg / ml) 자극 감소율(%)% Irritation reduction 실시예 1Example 1 500ppm500 ppm 415.8415.8 83.983.9 실시예 2Example 2 100ppm100 ppm 603.8603.8 26.326.3 비교예 1Comparative Example 1 1ppm1 ppm 407.7407.7 86.686.6 비교예 2Comparative Example 2 1uM1 uM 711.8711.8 -- 대조군Control group -- 360.4360.4 --

상기 표 2에 나타난 결과로부터, HaCa T 세포에 적정 농도의 멜라닌 색소 용액을 처치할 경우 피부 자극원의 하나인 올트랜스 레티노산에 대한 염증성 사이토카인인 IL-8의 발현이 유의적으로 감소한다는 사실을 ELISA를 통해 확인할 수 있었다. 또한, 멜라닌 색소 용액의 처치 농도가 증가하면 염증성 사이토카인 IL-8의 발현의 억제 정도가 커짐을 알 수 있었다.
From the results shown in Table 2, the treatment of HaCa T cells with an appropriate concentration of melanin pigment solution significantly reduced the expression of IL-8, an inflammatory cytokine against all-trans retinoic acid, one of the skin irritants. It could be confirmed by ELISA. In addition, it was found that increasing the treatment concentration of the melanin pigment solution increased the degree of suppression of the expression of the inflammatory cytokine IL-8.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 하기의 제형예와 같이 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
The cosmetic composition according to the present invention may be prepared as in the following formulation example, but is not limited thereto.

[제형예 1] 영양화장수Formulation Example 1 Nutritional Cosmetics

하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조할 수 있다.According to the composition shown in Table 3 it can be prepared by the conventional method.

원료명Raw material name 함량(중량%)Content (% by weight) 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 4.04.0 히알루론산 추출물Hyaluronic acid extract 5.05.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소Melanin pigment derived from velvet bean extract 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / Capric Triglycerides 8.08.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl Glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 세테아릴 알코올Cetearyl Alcohol 1.01.0 방부제antiseptic 적량Suitable amount 향incense 적량Suitable amount 색소Pigment 적량Suitable amount 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 2] 영양로션[Formulation Example 2] Nutrition lotion

하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양로션을 제조할 수 있다.Nutritional lotion may be prepared according to the composition shown in Table 4 in a conventional manner.

원료명Raw material name 함량(중량 %)Content (% by weight) 정제수Purified water 잔량Balance 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 5.05.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소Melanin pigment derived from velvet bean extract 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / Capric Triglycerides 3.03.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl Glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 방부제antiseptic 적량Suitable amount 향incense 적량Suitable amount 색소Pigment 적량Suitable amount 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1

[제형예 3] 영양크림[Formulation Example 3] Nourishing cream

하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조할 수 있다.Nutritional creams may be prepared by conventional methods according to the composition described in Table 5.

원료명Raw material name 함량(중량 %)Content (% by weight) 글리세린glycerin 3.03.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 7.07.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소Melanin pigment derived from velvet bean extract 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / Capric Triglycerides 3.03.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl Glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 방부제antiseptic 적량Suitable amount 향incense 적량Suitable amount 색소Pigment 적량Suitable amount 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 4] 마사지 크림[Formulation Example 4] Massage cream

하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조할 수 있다.Massage creams may be prepared in a conventional manner according to the composition described in Table 6.

원료명Raw material name 함량(중량 %)Content (% by weight) 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 4.04.0 유동파라핀Liquid paraffin 45.045.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소Melanin pigment derived from velvet bean extract 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / Capric Triglycerides 3.03.0 밀납Wax 4.04.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl Glucoside 1.51.5 세스퀴 올레인산 소르비탄Sesqui oleic acid sorbitan 0.90.9 바세린Vaseline 3.03.0 방부제antiseptic 적량Suitable amount 향incense 적량Suitable amount 색소Pigment 적량Suitable amount 파라핀paraffin 1.51.5 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 5] 팩[Formulation Example 5] Pack

하기 표 7에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 팩을 제조할 수 있다.The pack can be prepared according to the composition described in Table 7 below in a conventional manner.

원료명Raw material name 함량(중량 %)Content (% by weight) 글리세린glycerin 4.04.0 폴리비닐알콜Polyvinyl alcohol 15.015.0 히알루론산 추출물Hyaluronic acid extract 5.05.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 알란토인Allantoin 0.10.1 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소Melanin pigment derived from velvet bean extract 1.01.0 노닐 페닐에테르Nonyl Phenyl Ether 0.40.4 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 방부제antiseptic 적량Suitable amount 향incense 적량Suitable amount 색소Pigment 적량Suitable amount 에탄올ethanol 6.06.0 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 6] 연고[Formulation Example 6] ointment

하기 표 8에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조할 수 있다.Ointments can be prepared according to the compositions described in Table 8 below in a conventional manner.

원료명Raw material name 함량(중량 %)Content (% by weight) 글리세린glycerin 8.08.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 4.04.0 유동파라핀Liquid paraffin 15.015.0 베타글루칸Beta Glucan 7.07.0 카보머Carbomer 0.10.1 우단콩 추출물 유래 멜라닌 색소Melanin pigment derived from velvet bean extract 1.01.0 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드Caprylic / Capric Triglycerides 3.03.0 스쿠알란Squalane 1.01.0 세테아릴 글루코사이드Cetearyl Glucoside 1.51.5 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.40.4 세테아릴 알코올Cetearyl Alcohol 1.01.0 방부제antiseptic 적량Suitable amount 향incense 적량Suitable amount 색소Pigment 적량Suitable amount 밀납Wax 4.04.0 정제수Purified water 잔량Balance

Claims (7)

멜라닌 색소를 유효성분으로 포함하는 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.Cosmetic composition for skin irritation prevention and alleviation comprising melanin pigment as an active ingredient. 제 1항에 있어서, 상기 멜라닌 색소는 우단콩(Mucuna pruriens) 추출물 유래 멜라닌 색소인 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.According to claim 1, wherein the melanin pigment is Mucuna pruriens ) Cosmetic composition for preventing and alleviating skin irritation, which is a melanin pigment derived from an extract. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 멜라닌 색소는 올트랜스 레티노산(all-trans retinoic acid)에 의한 염증성 사이토카인의 발현을 억제시키는 것인 피부 자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing and alleviating skin irritation according to claim 1 or 2, wherein the melanin pigment inhibits the expression of inflammatory cytokines by all-trans retinoic acid. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 멜라닌 색소는 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10중량%로 포함되는 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.The cosmetic composition of claim 1 or 2, wherein the melanin pigment is contained in an amount of 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the composition. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 멜라닌 색소는 상기 우단콩 추출물을 pH 8~10의 조건에서 전처리하고 3~5일간 15~35℃에서 산화하여 제조된 것인 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.According to claim 1 or 2, wherein the melanin pigment is prepared by pretreating the velvet bean extract under the condition of pH 8 ~ 10 and oxidized at 15 ~ 35 ℃ for 3 to 5 days cosmetics for skin irritation prevention and alleviation Composition. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징폼, 팩 및 바디로션 중에서 선택된 어느 하나의 화장료 제형을 갖는 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물.The cosmetic for preventing and alleviating skin irritation according to claim 1 or 2, wherein the cosmetic formulation has any one of a cosmetic formulation selected from flexible cosmetics, nourishing cosmetics, nourishing cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing foam, pack and body lotion. Composition. 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투과형 제형을 갖는 피부자극 예방 및 완화용 화장료 조성물 The cosmetic composition for preventing and alleviating skin irritation according to claim 1 or 2, having a transdermal permeable formulation such as a lotion, ointment, gel, cream, patch or spray.
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