KR20120076352A - 증식성 질환의 치료에 유용한 피라지닐피리딘 - Google Patents

증식성 질환의 치료에 유용한 피라지닐피리딘 Download PDF

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KR20120076352A
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폴 에이. 바산티
청 후
키스 비. 피스터
마르틴 센드치크
제임스 서튼
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노파르티스 아게
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Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다. 또한, CDK 억제제에 의해 조절되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물의 사용 방법이 제공된다.
<화학식 I>

Description

증식성 질환의 치료에 유용한 피라지닐피리딘 {PYRAZINYLPYRIDINES USEFUL FOR THE TREATMENT OF PROLIFERATIVE DISEASES}
관련 출원에 대한 상호-참조
본원은 35 U.S.C. §119(e) 하에 2009년 9월 4일 출원된 U.S. 가출원 일련 번호 61/275,938 및 2009년 12월 28일 출원된 U.S. 가출원 일련 번호 61/284,962 (이들은 그 전문이 본원에 참조로 포함됨)을 우선권 주장한다.
발명의 분야
본 발명은 신규 클래스의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물, 및 키나제의 억제에 의해 조절될 수 있는 이상 세포 신호전달 경로와 관련된 질환 또는 장애, 특히 CDK9의 억제에 의해 조절될 수 있는 이상 세포 신호전달 경로와 관련된 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하기 위한 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.
단백질 키나제는 세포 내에서 다양한 신호 전달 과정을 제어하는 역할을 하는, 구조적으로 관련된 효소의 거대 패밀리를 구성한다 (문헌 [Hardie, G. and Hanks, S. The Protein Kinase Facts Book, I and II, Academic Press, San Diego, Calif.: 1995]). 단백질 키나제는, 그의 구조 및 촉매 기능의 보존을 근거로 공통의 조상 유전자로부터 진화한 것으로 여겨진다. 대부분의 모든 키나제들은 유사한 250-300의 아미노산 촉매 도메인을 함유한다. 키나제는 이들이 인산화시키는 기질 (예를 들어, 단백질-티로신, 단백질-세린/트레오닌, 지질 등)에 의해 여러 패밀리로 분류될 수 있다. 일반적으로 이들 각각의 키나제 패밀리에 해당하는 서열 모티프가 확인되었다 (예를 들어, 문헌 [Hanks, S. K., Hunter, T., FASEB J. 1995, 9, 576-596]; [Knighton et al., Science 1991, 253, 407-414]; [Hiles et al., Cell 1992, 70, 419-429]; [Kunz et al., Cell 1993, 73, 585-596]; [Garcia-Bustos et al., EMBO J. 1994, 13, 2352-2361] 참조).
많은 질환들이 상기 기재된 단백질 키나제-매개 사건에 의해 촉발되는 비정상적 세포 반응과 관련이 있다. 이들 질환은 자가면역 질환, 염증성 질환, 골 질환, 대사 질환, 신경계 및 신경변성 질환, 암, 심혈관 질환, 알레르기 및 천식, 알츠하이머병, 바이러스성 질환 및 호르몬-관련 질환을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 따라서, 의약 화학에서는 치료제로서 효과적인 단백질 키나제 억제제를 발견하기 위해서 실질적으로 노력하고 있다.
시클린-의존성 키나제 (CDK) 복합체는 관심의 대상이 되는 표적인 키나제의 클래스이다. 이들 복합체는 적어도 촉매 (CDK 그 자체) 및 조절 (시클린) 서브유닛을 포함한다. 세포 주기 조절을 위해 보다 중요한 일부 복합체에는 시클린 A (CDK1 (cdc2로도 공지됨) 및 CDK2), 시클린 B1-B3 (CDK1) 및 시클린 D1-D3 (CDK2, CDK4, CDK5, CDK6), 시클린 E (CDK2)가 포함된다. 이들 각각의 복합체는 세포 주기의 특정 단계에 관여한다. 부가적으로, CDK7, 8 및 9는 전사 조절에 관여한다.
CDK는 세포 주기 진행 및 세포 전사에 관여하는 것으로 보이며, 성장 조절의 실패는 질환에서의 비정상적 세포 증식과 연관된다 (예컨대, 문헌 [Malumbres and Barbacid, Nat. Rev. Cancer 2001, 1:222] 참조). 시클린-의존성 키나제의 활성 증가 또는 일시적인 비정상적 활성화는 인간 종양의 발생을 초래하는 것으로 나타났다 (문헌 [Sherr C. J., Science 1996, 274: 1672-1677]). 사실상, 인간 종양 발생은 일반적으로 CDK 단백질 그 자체 또는 그의 조절인자의 변경과 관련된다 (문헌 [Cordon-Cardo C., Am. J. Pat1/701. 1995; 147: 545-560]; [Karp J. E. and Broder S., Nat. Med. 1995; 1: 309-320]; [Hall M. et al., Adv. Cancer Res. 1996; 68: 67-108]).
CDK7 및 9는 각각 전사 개시 및 신장에서 핵심적인 역할을 하는 것으로 여겨진다 (예를 들어, 문헌 [Peterlin and Price. Cell 23: 297-305, 2006], [Shapiro. J. Clin. Oncol. 24: 1770-83, 2006] 참조). CDK9의 억제는 항아폽토시스 단백질 (예컨대, Mcl1) 전사의 하향조절을 통한 조혈 계통의 종양 세포에서의 아폽토시스의 직접적 유도와 연관되어 왔다 (문헌 [Chao, S.-H. et al. J. Biol. Chem. 2000;275:28345-28348]; [Chao, S.-H. et al. J. Biol. Chem. 2001;276:31793-31799]; [Lam et al. Genome Biology 2: 0041.1-11, 2001]; [Chen et al. Blood 2005;106:2513]; [MacCallum et al. Cancer Res. 2005;65:5399]; 및 [Alvi et al. Blood 2005;105:4484]). 고형 종양 세포에서, CDK9 활성의 하향조절에 의한 전사 억제는 세포 주기 CDK, 예를 들어 CDK1 및 2의 억제와 상승 작용을 일으켜, 아폽토시스를 유도한다 (문헌 [Cai, D.-P., Cancer Res 2006, 66:9270]). CDK9 또는 CDK7을 통한 전사의 억제는 외투 세포 림프종에서 짧은 반감기를 갖는 mRNA, 예를 들어 시클린 D1의 전사에 의존적인 종양 세포 유형에 대한 선택적 비-증식성 효과를 가질 수 있다. 몇몇 전사 인자, 예컨대 Myc 및 NF-kB는 그의 프로모터에 선택적으로 CDK9를 동원하고, 그의 신호전달 경로의 활성화에 의존적인 종양은 CDK9 억제에 민감할 수 있다.
소분자 CDK 억제제는 또한 심혈관 장애, 예컨대 재협착 및 아테롬성동맥경화증, 및 이상 세포 증식에 의한 기타 혈관 장애의 치료에 사용될 수 있다. 풍선 혈관성형술에 따른 혈관 평활근 증식 및 내막 과증식은 시클린-의존성 키나제 억제제 단백질의 과다-발현에 의해 억제된다. 더욱이, 퓨린 CDK2 억제제인 CVT-313 (Ki = 95 nM)은 래트에서 80 ％ 초과로 신생혈관내막 형성을 억제하였다.
CDK는 호중구-매개 염증에서 중요하고, CDK 억제제는 동물 모델에서 염증의 치유를 촉진한다 (문헌 [Rossi, A.G. et al., Nature Med. 2006, 12:1056]). 따라서, CDK9 억제제를 비롯한 CDK 억제제는 항염증제로서 작용할 수 있다.
특정 CDK 억제제는 형질전환되지 않은 정상 세포의 세포 주기 진행을 억제하는 그의 능력을 통해, 화학보호제로서 유용하다 (문헌 [Chen, et al. J. Natl. Cancer Institute, 2000; 92: 1999-2008]). 세포 독성제를 사용하기 전에 CDK 억제제로 암 환자를 사전-치료하는 것은 일반적으로 화학요법과 관련된 부작용을 감소시킬 수 있다. 정상적으로 증식하는 조직은 선택적 CDK 억제제의 작용에 의해 세포독성 효과로부터 보호된다.
이에 따라, 단백질 키나제, 예컨대 CDK1, CDK2, CDK3, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8 및 CDK9, 뿐만 아니라 이들의 조합의 억제제를 개발하는 것이 매우 필요하다.
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure pct00001
상기 식에서,
R1은 -(CH2)0-2-헤테로아릴, -(CH2)0-2-아릴, C1-8 알킬, C3-8 분지형 알킬, C3-8 시클로알킬 및 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기는 각각 독립적으로 임의로 치환되고;
R2는 수소, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4-알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
R4는 수소, 할로겐, 5 내지 7원 헤테로시클릴-R14 및 A6-L-R9로부터 선택되고;
R5는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 히드록실, CN, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, C3-4 시클로알킬, C3-4 시클로 할로알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
R7은 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, O-C1-3 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
A6은 O, SO2 및 NR8로부터 선택되고;
L은 C0-3-알킬렌, -CHD-, -CD2-, C3-6 시클로알킬, C3-6 시클로 할로알킬, C4-7-헤테로시클로알킬, C3-8 분지형 알킬렌 및 C3-8 분지형 할로알킬렌으로부터 선택되고;
R8은 수소, C1-4 알킬, C3-8 분지형-알킬 및 -C3-8 분지형 할로알킬로부터 선택되고;
R9는 수소, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬, -(CH2)0-2 헤테로아릴, (CH2)0-2-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기는 임의로 치환되고;
R14는 수소, 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-4-알킬, C3-6-분지형 알킬, C1-4-할로알킬, CF3, =O 및 O-C1-4-알킬로부터 선택된다.
바람직한 실시양태는
R1이 -(CH2)0-2-헤테로아릴 및 -(CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, -F, -Cl, -OH, -C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, C3-6 분지형 할로알킬, -C3-7 시클로 알킬, -C3-7 시클로 할로알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 할로알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 할로알킬, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 할로알킬, -O-C3-7 시클로 알킬, -O-C3-7 시클로 할로알킬, -O-(CH2)1-2-C3-6 시클로알킬-R14, -O-(CH2)1-2-C4-6 헤테로시클로알킬-R14, -NH-C1-4 알킬, -NH-C2-4 할로알킬, -NH-C3-8 분지형 알킬, -NH-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C3-7 시클로 알킬, -NH-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)O-C2-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 할로알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로 할로알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-O-C2-4 할로-알킬, -C(O)-O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 할로알킬, -C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-C1-4 알킬, -C(O)C2-4 할로알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 할로알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬, -SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -SO2-C3-5 시클로알킬 및 -SO2-C3-5 시클로 할로알킬, -C(O)-NR15R16 및 -SO2-NR15R16으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 추가로 여기서 임의의 2개의 상기 치환기가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 고리를 형성할 수 있고;
R2가 수소, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4-알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
R4가 수소, 할로겐, 5 내지 7원 헤테로시클릴-R14 및 A6-L-R9로부터 선택되고;
R5가 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, CN, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, C3-4 시클로알킬, C3-4 시클로 할로알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
R7이 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, O-C1-3 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
A6이 O, SO2 또는 NR8이고;
L이 C0-3-알킬렌, -CHD-, -CD2-, C3-6 시클로알킬, C3-6 시클로 할로알킬, C4-7-헤테로시클로알킬 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
R8이 수소, C1-4 알킬, C3-8 분지형-알킬 및 -C3-8 분지형 할로알킬로부터 선택되고;
R9가 수소, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬, -(CH2)0-2 헤테로아릴, (CH2)0-2-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 임의로 치환되고;
R14가 수소, 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-4-알킬, C3-6-분지형 알킬, C1-4-할로알킬, CF3, =O 및 O-C1-4-알킬로부터 선택되고;
R15 및 R16이 수소, 히드록실, 알킬, 분지형 알킬, 할로알킬, 분지형 할로알킬, 알콕시, 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고; 다르게는, R15 및 R16이 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 임의로 치환된 4 내지 6원 헤테로방향족 또는 비-방향족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있는
것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
추가의 바람직한 실시양태는
R1이 -(CH2)0-2-헤테로아릴 및 -(CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, F, Cl, -OH, -C1-4 알킬, -NH-C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, (CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -O-C1-4 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬, -O-(CH2)1-2-C3-6 시클로알킬-R14, -O-(CH2)1-2-C4-6 헤테로시클로알킬-R14, -SO2-NR15R16 및 -SO2-C3-5 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R2가 수소 및 할로겐으로부터 선택되고;
R4가 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 및 A6-L-R9로부터 선택되고; 여기서 각각의 상기 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 기가 R14로 치환되고;
R5가 수소, Cl, F 및 CF3으로부터 선택되고;
R7이 수소, F 및 Cl로부터 선택되고;
A6이 NR8이고;
L이 C0-3-알킬렌, -CD2- 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
R8이 수소 및 C1-4 알킬로부터 선택되고;
R9가 C1-3 알킬, C3-7 시클로알킬, C4-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-4 알킬, -(CH2)-피리딜, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)-페닐로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 수소, 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, -OH, CN, =O, C(O)-CH3, -O-C1-3 알킬, -O-C1-3 할로알킬, -O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-C(O)-C1-4 알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R14가 페닐, 할로겐, 히드록실, C1-2-알킬, CF3 및 수소로부터 선택되고;
R15 및 R16이 수소, 히드록실, 알킬, 분지형 알킬, 할로알킬, 분지형 할로알킬, 알콕시, 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고; 다르게는, R15 및 R16이 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 임의로 치환된 4 내지 6원 헤테로방향족 또는 비-방향족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있는
것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
또 다른 바람직한 실시양태는
R1이 C1-8 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬 및 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, -F, -OH, =O, -C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, C3-6 분지형 할로알킬, -C3-7 시클로 알킬, -C3-7 시클로 할로알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 할로알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 할로알킬, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 할로알킬, -O-C3-7 시클로 알킬, -O-C3-7 시클로 할로알킬, -O-(CH2)1-2-C3-6 시클로알킬-R14, -O-(CH2)1-2-C4-6 헤테로시클로알킬-R14, -NH-C1-4 알킬, -NH-C2-4 할로알킬, -NH-C3-8 분지형 알킬, -NH-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C3-7 시클로 알킬, -NH-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)O-C2-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 할로알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, -NH-SO2-C3-5 할로-시클로알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-O-C2-4 할로-알킬, -C(O)-O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 할로알킬, -C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-C1-4 알킬, -C(O)C2-4 할로알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 할로알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬, -SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -SO2-C3-5 시클로알킬, -SO2-C3-5 시클로 할로알킬, -C(O)-NR15R16 및 -SO2-NR15R16으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 추가로 여기서 임의의 2개의 상기 치환기가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 고리를 형성할 수 있고;
R2가 수소, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4-알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
R4가 수소, 할로겐, 5 내지 7원 헤테로시클릴-R14 및 A6-L-R9로부터 선택되고;
R5가 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, CN, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, C3-4 시클로알킬, C3-4 시클로 할로알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
R7이 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, O-C1-3 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
A6이 O, SO2 및 NR8로부터 선택되고;
L이 C0-3-알킬렌, -CHD-, -CD2-, C3-6 시클로알킬, C3-6 시클로 할로알킬, C4-7-헤테로시클로알킬, C3-8 분지형 알킬렌 및 C3-8 분지형 할로알킬렌으로부터 선택되고;
R8이 수소, C1-4 알킬, C3-8 분지형-알킬 및 -C3-8 분지형 할로알킬로부터 선택되고;
R9가 수소, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬, -(CH2)0-2 헤테로아릴, (CH2)0-2-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 임의로 치환되고;
R14가 수소, 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-4-알킬, C3-6-분지형 알킬, C1-4-할로알킬, CF3, =O 및 O-C1-4-알킬로부터 선택되고;
R15 및 R16이 수소, 히드록실, 알킬, 분지형 알킬, 할로알킬, 분지형 할로알킬, 알콕시, 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고; 다르게는, R15 및 R16이 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 임의로 치환된 4 내지 6원 헤테로방향족 또는 비-방향족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있는
것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명의 상기 측면의 추가의 바람직한 실시양태는
R1이 C1-8 알킬, C3-8 분지형 알킬, C3-8 시클로알킬 및 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, F, -OH, =O, -C1-4 알킬, -NH-C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, (CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -O-C1-4 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬 및 -SO2-C3-5 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R2가 수소 및 할로겐으로부터 선택되고;
R4가 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 및 A6-L-R9로부터 선택되고; 여기서 각각의 상기 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 기가 R14로 치환되고;
R5가 수소, Cl, F, 메틸 및 CF3으로부터 선택되고;
R7이 수소, F 및 Cl로부터 선택되고;
A6이 NR8이고;
L이 C0-3-알킬렌, -CD2- 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
R8이 수소 및 C1-4 알킬로부터 선택되고;
R9가 C1-3 알킬, C3-7 시클로알킬, C4-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-4 알킬, -(CH2)-피리딜, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)-페닐로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 수소, 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, OH, CN, =O, C(O)-CH3, -O-C1-3 알킬, -O-C1-3 할로알킬, -O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-C(O)-C1-4 알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R14가 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-2-알킬 및 수소로부터 선택되는
것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
본 발명의 상기 측면의 또 다른 바람직한 실시양태는
R1이 피페리디닐, 모르폴리닐, 1-메틸피페리디닐, 테트라히드로-피란, 피롤리디닐, 테트라히드로-푸란, 아제티딘, 피롤리딘-2-온, 아제판 및 1,4-옥사제판으로부터 선택되고, 여기서 상기 R1 기가 각각 독립적으로 F, OH, NH2, CO-메틸, -NH-메틸, 에틸, 플루오로-에틸, 트리플루오로-에틸, (CH2)2-메톡시, SO2-CH3, COO-CH3, SO2-에틸, SO2-시클로프로필, 메틸, SO2-CH-(CH3)2, NH-SO2-CH3, NH-SO2-C2H5, =O, CF3, (CH2)-메톡시, 메톡시, NH-SO2-CH-(CH3)2, -(CH2)-O-(CH2)2-메톡시 및 -O-CH-(CH3)2로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R2가 Cl 및 F로부터 선택되고;
R4가 A6-L-R9이고;
R5가 수소, Cl, 메틸로부터 선택되고;
R7이 수소, Cl 및 메틸로부터 선택되고;
A6이 NR8이고;
L이 C0-3-알킬렌, -CD2- 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
R8이 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R9가 C1-3 알킬, C4-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-4 알킬, -(CH2)-피리딜, 벤질, CD2-테트라히드로-피란, 테트라히드로-피란, 테트라히드로-티오피란 1,1-디옥시드, 피페리디닐, 피롤리딘-2-온, 디옥산, 시클로프로필, 테트라히드로푸란, 시클로헥실 및 시클로헵틸로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 F, OCHF2, CO-메틸, OH, 메틸, 메톡시, CN, 에틸 및 NH-CO-메틸로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되는
것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
특히 바람직한 실시양태에서
R1이 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 아제판 및 1,4-옥사제판으로부터 선택되고, 여기서 상기 R1 기가 각각 독립적으로 F, 메틸, CF3, 에틸, 플루오로-에틸, 트리플루오로-에틸, -(CH2)2-메톡시, -(CH2)-메톡시, 메톡시, =O, -(CH2)-O-(CH2)2-메톡시 및 -O-CH-(CH3)2로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R2가 Cl이고;
R4가 A6-L-R9이고;
R5가 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R7이 수소 및 메틸로부터 선택되고;
A6이 NR8이고;
L이 -CH2- 및 -CD2-로부터 선택되고;
R8이 수소 및 메틸로부터 선택되고;
R9가 피리딜, 벤질, 테트라히드로-피란, 디옥산 및 테트라히드로푸란으로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 F, OH, 메틸, 에틸, 메톡시 및 CN으로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되는
것인 화학식 I의 화합물이 제공된다.
바람직한 본 발명의 화학식 I의 화합물은 (S)-1-메탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (S)-1-에탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (S)-1-(2-메톡시-아세틸)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (S)-1-아세틸-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (1S,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (1R,3S)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (1R,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; [(1R,3S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-시클로펜틸]-카르밤산 메틸 에스테르; [(1S,3R)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-시클로펜틸]-카르밤산 메틸 에스테르; (S)-1-(프로판-2-술포닐)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; 1-메틸-5-옥소-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-이소부티르아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(2-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드; 테트라히드로-피란-4-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(5-플루오로-피리딘-3-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(4-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드; 모르폴린-2-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{3-메틸-6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-3-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-((R)-1-시클로헥실-에틸아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드; (R)-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (1R,3S)-3-아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; (1R,3R)-3-아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; 및 (3R,4S)-4-플루오로-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드로부터 선택된다.
본 발명은 그의 실시양태 중 하나에서 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure pct00002
상기 식에서,
R1은 C3-8 시클로알킬, (CH2)1-2 헤테로아릴 또는 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기이고, 여기서 상기 시클로알킬, 헤테로아릴 및 헤테로시클로알킬 기는 각각 독립적으로 -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NHC(O)-C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, C1-4 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, NH2, -SO2-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-SO2-C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
R2는 C1-4 알콕시 또는 할로겐이고;
A1은 N 또는 CR3이고;
A4는 N 및 CR6이고, 단 A1 및 A4 중 단지 하나가 N이고;
R3은 할로겐, C1-4 알콕시 또는 수소이고;
R4는 수소, 할로겐 또는 A6-L-R9이고;
R5는 수소, C1-4 알킬 또는 할로겐이고;
R6은 수소 또는 할로겐이고;
R7은 수소, C1-4 알킬 또는 할로겐이고;
A6은 NR8이고;
L는 C1-3-알킬렌 또는 C3-8분지형 알킬렌이고;
R8은 수소 또는 C1-4 알킬이고;
R9는 수소, 4 내지 8원 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 또는 아릴이고, 여기서 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 및 아릴 기는 할로겐, C1-4 알킬 또는 C1-4 할로알킬로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
바람직한 실시양태는 R1이 C3-8 시클로알킬, -(CH2)1-2 헤테로아릴 또는 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기이고, 여기서 상기 시클로알킬, 헤테로아릴 및 헤테로시클로알킬 기가 -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NHC(O)-C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, C1-4 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, NH2, -SO2-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬 또는 -NH-SO2-C1-4 알킬로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고; R2가 C1-4 알콕시 또는 할로겐이고; A1이 N이고; A4가 CR6이고; R4가 수소, 할로겐 또는 A6-L-R9이고; R5가 수소, C1-4 알킬 또는 할로겐이고; R6이 수소 또는 할로겐이고; R7이 수소, C1-4 알킬 또는 할로겐이고; A6이 NR8이고; L이 C1-3-알킬렌 또는 C3-8분지형 알킬렌이고; R8이 수소 또는 C1-4 알킬이고; R9가 수소, 4 내지 8원 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 또는 아릴이고, 여기서 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 및 아릴 기가 할로겐, C1-4 알킬 또는 C1-4 할로알킬로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되는 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.
추가의 바람직한 실시양태는 R1이 시클로헥실 또는 피페리디닐이고, 여기서 상기 시클로헥실 및 상기 피페리디닐이 각각 -NHC(O)-C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -C1-4 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -SO2-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-SO2-C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 치환기로 임의로 치환되고; R2가 할로겐이고; R4가 수소 또는 A6-L-R9이고; R5가 메틸, 수소 또는 할로겐이고; R6이 -OCH3, 수소 또는 할로겐이고; R7이 수소 또는 할로겐이고; A6이 NR8이고; L이 -CH2- 또는 C3-6 분지형 알킬렌이고; R8이 메틸 또는 수소이고; R9가 테트라히드로피란 또는 페닐이고, 여기서 상기 테트라히드로피란 및 페닐 기가 할로겐 또는 C1-2-알킬로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 치환기로 임의로 치환되는 것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
또 다른 바람직한 실시양태에서, R1이 C3-8 시클로알킬, -(CH2)1-2 헤테로아릴 또는 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기를 나타내고, 여기서 상기 시클로알킬, 헤테로아릴 및 헤테로시클로알킬 기가 -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NHC(O)-C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, C1-4 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, NH2, -SO2-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-SO2-C1-4 알킬로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고; R2가 C1-4 알콕시 또는 할로겐이고; A1이 CR3이고; A4가 N이고; R3이 할로겐, C1-4 알콕시 또는 수소이고; R4가 수소, 할로겐 또는 A6-L-R9이고; R5가 수소, C1-4 알킬 또는 할로겐이고; R7이 수소, C1-4 알킬 또는 할로겐이고; A6이 NR8이고; L이 C1-3-알킬렌 또는 C3-8 분지형 알킬렌이고; R8이 수소 또는 C1-4 알킬이고; R9가 수소, 4 내지 8원 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 또는 아릴이고, 여기서 헤테로시클로알킬, 헤테로아릴 및 아릴 기가 할로겐, C1-4 알킬 또는 C1-4 할로알킬로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되는 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다.
또 다른 바람직한 실시양태는, R1이 시클로헥실 또는 피페리디닐이고, 여기서 상기 시클로헥실 및 상기 피페리디닐이 각각 -NHC(O)-C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -C1-4 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -SO2-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-SO2-C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 임의로 치환되고; R2가 할로겐이고; R4가 수소 또는 A6-L-R9이고; R5가 메틸, 수소 또는 할로겐이고; R6이 수소 또는 할로겐이고; R7이 수소 또는 할로겐이고; A6이 NR8이고; L이 -CH2- 또는 C3-6 분지형 알킬렌이고; R8이 메틸 또는 수소이고; R9가 테트라히드로피란 또는 페닐이고, 여기서 상기 테트라히드로피란 및 페닐 기가 각각 독립적으로 1 내지 2개의 치환기 할로겐 또는 C1-2-알킬로 임의로 치환되는 것인 화학식 I의 화합물을 제공한다.
또 다른 실시양태는 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 사용하여 CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 또한, 또 다른 실시양태에서 CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한, 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 의약의 제조가 제공된다.
본 발명의 또 다른 측면은 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 사용하여 CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 바람직한 방법은 치료 유효량의 화학식 I의 화합물을 사용하는 것을 포함한다.
본 발명은 또한 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 또한, 또 다른 실시양태에서 CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 화학식 I의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도가 제공된다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 단백질 키나제를 본 발명의 화합물과 접촉시키는 것을 포함하는, 단백질 키나제 활성의 조절, 조정 또는 억제 방법을 제공한다. 적합한 단백질 키나제는 CDK1, CDK2, CDK3, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8 및 CDK9, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 바람직하게는, 단백질 키나제는 CDK1, CDK2 및 CDK9, 또는 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 또 다른 실시양태에서, 단백질 키나제는 세포 배양물 내에 존재한다. 또 다른 실시양태에서, 단백질 키나제는 포유동물 내에 존재한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 단백질 키나제-관련 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 제약상 허용되는 양의 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 단백질 키나제-관련 장애의 치료 방법을 제공한다. 적합한 단백질 키나제는 CDK1, CDK2, CDK3, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8 및 CDK9, 또는 이들의 조합을 포함한다 (바람직하게는, 단백질 키나제는 CDK1, CDK2 및 CDK9로 이루어진 군으로부터 선택되고, 보다 바람직하게는 단백질 키나제는 CDK9이다). 적합한 CDK 조합은 CDK4 및 CDK9; CDK1, CDK2 및 CDK9; CDK9 및 CDK7; CDK9 및 CDK1; CDK9 및 CDK2; CDK4, CDK6 및 CDK9; CDK1, CDK2, CDK3, CDK4, CDK6 및 CDK9를 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 제약상 허용되는 양의 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 암의 치료 방법을 제공한다. 치료에 적합한 암은 방광암, 두경부암, 유방암, 위암, 난소암, 결장암, 폐암, 뇌암, 후두암, 림프계암, 조혈계암, 비뇨생식관암, 위장암, 난소의 암, 전립선암, 위의 암, 골암, 소세포 폐암, 신경교종, 결장직장암 및 췌장암을 포함한다.
정의
본원에 사용된 용어 "단백질 키나제-관련 장애"에는 단백질 키나제, 예를 들어 CDK, 예컨대 CDK1, CDK2 및/또는 CDK9의 활성과 관련된 장애 및 상태 (예를 들어, 질환 상태)가 포함된다. 단백질 키나제-관련 장애의 비제한적인 예에는 비정상적 세포 증식 (단백질 키나제-관련 암 포함), 바이러스 감염, 진균 감염, 자가면역 질환 및 신경변성 장애가 포함된다.
용어 "치료하다", "치료되는", "치료하는" 또는 "치료"는 치료될 상태, 장애 또는 질환과 관련된 또는 그에 의해 유발된 하나 이상의 증상의 감쇠 또는 경감을 포함한다. 특정 실시양태에서, 치료는 단백질 키나제-관련 장애의 발생 후에 본 발명의 화합물을 활성화시켜 치료될 단백질 키나제-관련 장애와 관련된 또는 그에 의해 유발된 하나 이상의 증상을 감쇠 또는 경감시키는 것을 포함한다. 예를 들어, 치료는 장애의 한 증상 또는 여러 증상을 감쇠시킬 수 있거나, 또는 장애를 완전히 근절시킬 수 있다.
달리 언급되지 않는 한, 용어 "용도"는, 적절하게 편의상, 각각 하기하는 본 발명의 실시양태 중 임의의 하나 이상을 포함한다: 단백질 키나제-관련 장애의 치료에서의 용도; 이들 질환의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물의 제조에 있어서의 용도, 예를 들어 의약 제조에 있어서의 용도; 이들 질환의 치료에 본 발명의 화합물을 사용하는 방법; 본 발명의 화합물을 갖는, 이들 질환을 치료하기 위한 제약 제제; 및 이들 질환의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 화합물. 특히, 본 발명의 화합물의 사용이 바람직한 치료 대상 질환은 암, 염증, 심장 비대증 및 HIV 감염, 뿐만 아니라 단백질 키나제의 활성에 의존적인 질환으로부터 선택된다. 용어 "용도"는 또한 추적자 또는 표지자로 사용되도록 충분히 단백질 키나제와 결합하는 본원 조성물의 실시양태를 포함하며, 이에 따라 형광 또는 태그와 커플링되거나 방사성을 띠는 경우, 연구 시약, 또는 진단제 또는 조영제로 사용될 수 있다.
그 자체로서의 또는 또 다른 치환기의 일부로서의 용어 "알킬"은, 달리 언급되지 않는 한, 완전 포화 직쇄 (선형; 비분지형) 또는 분지쇄를 의미하며, 지정된 경우에는 명시된 탄소 원자의 수를 갖는다 (즉, C1-C10은 1 내지 10개의 탄소를 의미함). 예시적인 "알킬" 기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 이소부틸, sec-부틸, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸 등을 포함한다. 크기가 지정되지 않는 한, 본원에 언급된 알킬 기는 1 내지 10개의 탄소 원자, 전형적으로는 1 내지 8개의 탄소 원자, 바람직하게는 1 내지 6개 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 함유한다.
용어 "알콕시"는 -O-알킬을 지칭하며, 여기서 용어 알킬은 상기 정의된 바와 같다.
그 자체로서의 또는 다른 용어와의 조합에서의 용어 "시클로알킬"은, 달리 언급되지 않는 한, 알킬의 시클릭 버전을 나타낸다. 추가로, 시클로알킬은 융합된 고리를 함유할 수 있지만, 융합된 아릴 및 헤테로아릴 기는 제외한다. 시클로알킬 기는, 달리 나타내지 않는 한, 비치환된다. 시클로알킬의 예시적인 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 노르보르닐 등이다. 고리 크기가 지정되지 않는 한, 본원에 기재된 시클로알킬 기는 일반적으로 3 내지 10개의 고리원, 바람직하게는 3 내지 6개의 고리원을 함유한다.
그 자체로서의 또는 다른 용어와의 조합에서의 용어 "헤테로시클릭" 또는 "헤테로시클로알킬" 또는 "헤테로시클릴"은 1개 이상의 환상 탄소 원자, 및 O, N, P, Si 및 S로 이루어진 군으로부터, 바람직하게는 N, O 및 S로부터 선택된 1개 이상의 환상 헤테로원자를 함유하는 시클로알킬을 나타내고, 여기서 상기 고리는 방향족이 아니지만, 불포화를 함유할 수 있다. 헤테로시클릭 기의 질소 및 황 원자는 임의로 산화될 수 있고, 질소 헤테로원자는 임의로 4급화될 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 본원에서 논의된 헤테로시클릭 기는 3 내지 10개의 고리원을 함유하고, 1개 이상의 고리원은 N, O, P, Si 및 S로부터 선택된 헤테로원자이다. 바람직하게는, 3개 이하의 이들 헤테로원자가 헤테로시클릭 기에 포함되고, 일반적으로 2개 이하의 이들 헤테로원자가 헤테로시클릭 기의 단일 고리에 존재한다. 헤테로시클릭 기는 추가의 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 고리에 융합될 수 있다. 헤테로시클릭 기는 환상 탄소 또는 환상 헤테로원자에서 분자의 나머지 부분에 부착될 수 있다. 추가로, 헤테로시클릭은 융합된 고리를 함유할 수 있지만, 융합된 고리계의 일부로서 헤테로아릴 기를 함유하는 융합계는 제외한다. 헤테로시클릭 기의 예시적 예는 1-(1,2,5,6-테트라히드로피리딜), 1-피페리디닐, 2-피페리디닐, 3-피페리디닐, 4-모르폴리닐, 3-모르폴리닐, 테트라히드로푸란-2-일, 테트라히드로푸란-3-일, 테트라히드로티엔-2-일, 테트라히드로티엔-3-일, 1 -피페라지닐, 2-피페라지닐, 피페리딘-2-온, 아제판, 테트라히드로-2H-피라닐, 피롤리디닐, 메틸피롤리디논, 알킬피페리디닐, 할로알킬피페리디닐, 1-(알킬피페리딘-1-일)에타논 등을 포함한다.
용어 "아릴"은, 달리 언급하지 않는 한, 단일 고리 또는 함께 융합된 다중 고리 (예를 들어, 1 내지 3개의 고리)일 수 있는 방향족 탄화수소 기를 나타낸다. 아릴은 1개 이상의 융합된 고리가 완전 포화 (예를 들어, 시클로알킬) 또는 부분 불포화 (예를 들어, 시클로헥세닐)이지만, 헤테로시클릭 또는 헤테로방향족 고리가 아닌 융합된 고리를 포함한다. 아릴 기의 예시적 예는 페닐, 1-나프틸, 2-나프틸 및 테트라히드로나프틸을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은, 1개 이상의 고리가 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 방향족 고리이며 (즉, 이는 1개 이상의 헤테로방향족 고리를 함유함), 여기서 질소 및 황 원자가 산화될 수 있고, 질소 원자(들)가 4급화될 수 있는 것인 단일 고리 또는 융합된 고리를 포함하는 기를 지칭한다. 헤테로아릴 기는 환상 탄소 또는 환상 헤테로원자를 통하여 분자의 나머지 부분에 부착될 수 있고, 상기 모이어티가 비시클릭, 트리시클릭 또는 융합된 고리계인 경우에 이는 헤테로아릴 모이어티의 임의의 고리를 통하여 부착될 수 있다. 헤테로아릴 기는 융합된 고리를 함유할 수 있으며, 여기서 융합된 고리 중 하나는 방향족 또는 헤테로방향족이고 다른 융합된 고리(들)는 부분 불포화 (예를 들어, 시클로헥세닐, 2,3-디히드로푸란, 테트라히드로피라진 및 3,4-디히드로-2H-피란) 또는 완전 포화 (예를 들어, 시클로헥실, 시클로펜틸, 테트라히드로푸란, 모르폴린 및 피페라진)이다. 용어 헤테로아릴은 또한 방향족 및 헤테로방향족 고리계의 조합을 포함하는 융합된 고리계 (예를 들어, 인돌, 퀴놀린, 퀴나졸린 및 벤즈이미다졸)를 포함하도록 의도된다. 헤테로아릴 기의 예시적 예는 1-피롤릴, 2-피롤릴, 3-피롤릴, 3-피라졸릴, 2-이미다졸릴, 4-이미다졸릴, 피라지닐, 2-옥사졸릴, 4-옥사졸릴, 2-페닐-4-옥사졸릴, 5-옥사졸릴, 3-이속사졸릴, 4-이속사졸릴, 5-이속사졸릴, 2-티아졸릴, 4-티아졸릴, 5-티아졸릴, 2-푸릴, 3-푸릴, 2-티에닐, 3-티에닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피리미딜, 4-피리미딜, 5-벤조티아졸릴, 퓨리닐, 2-벤즈이미다졸릴, 5-인돌릴, 1-이소퀴놀릴, 5-이소퀴놀릴, 2-퀴녹살리닐, 5-퀴녹살리닐, 3-퀴놀릴 및 6-퀴놀릴이다. 각각의 상기 언급한 아릴 및 헤테로아릴 고리계에 대한 치환기는 하기 기재된 허용가능한 치환기의 군으로부터 선택된다.
용어 "할로" 또는 "할로겐"은 플루오린, 염소, 브로민 또는 아이오딘 원자를 나타낸다. 용어 "할로알킬"은 알킬 기의 1개 이상의 수소 원자가 동일하거나 상이한 것일 수 있는 할로겐 원자에 의해 대체된 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 나타낸다. 따라서, 용어 할로알킬은 모노-할로알킬, 디-할로알킬, 트리-할로알킬, 테트라-할로알킬 등, 뿐만 아니라 퍼-할로알킬을 포함한다. 접두어 "퍼할로"는 모든 이용가능한 원자가가 할로 기에 의해 대체된 각각의 기를 지칭한다. 예를 들어, "퍼할로알킬"은 -CCl3, -CF3, -CCl2CF3 등을 포함한다. 용어 "퍼플루오로알킬" 및 "퍼클로로알킬"은 모든 이용가능한 원자가가 각각 플루오로 및 클로로 기에 의해 대체된 퍼할로알킬의 하위세트이다. 퍼플루오로알킬의 예시적 예는 -CF3 및 -CF2CF3을 포함하고, 퍼클로로알킬 예시적 예는 -CCl3 및 -CCl2CCl3을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같은, "임의로 치환된"은 기재된 특정 기 또는 기들이 비-수소 치환기를 갖지 않을 수 있거나 (즉, 이는 치환되지 않을 수 있음), 또는 기 또는 기들이 하나 이상의 비-수소 치환기를 가질 수 있음을 나타낸다. 달리 명시되지 않는 한, 존재할 수 있는 이러한 치환기의 총 수는, 기재된 기의 비치환 형태 상에 존재하는 H 원자의 수와 동일하다. 전형적으로, 임의로 치환된 기는 4개 이하 (1 내지 4개)의 치환기를 포함할 것이다. 임의의 치환기가 이중 결합, 예컨대 카르보닐 산소 (=O)를 통해 부착된 경우, 상기 기는 치환된 기 상에서 두 개 이하의 이용가능한 원자가를 취하여, 포함될 수 있는 치환기의 총 수가 이용가능한 원자가의 수에 따라 감소한다. 적합한 임의의 치환기는 할로, C1-4알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4알킬, -NHC(O)-C1-4알킬, -C(O)-O-C1-4알킬, -O-C1-4알킬, -O-C1-4할로알킬, -C1-4알킬렌-O-C1-4할로알킬, -C1-4알킬렌-O-C1-4알킬, -NH-C1-4알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4알킬, -C(O)-O-C3-6 분지형 알킬, -C1-4할로알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2알킬, -C1-4-시클로알킬, -C1-4알킬렌-O-C1-4알킬, -NH2, -SO2-C1-4알킬, -NH-C(O)-C1-4알킬, 및 -NH-SO2-C1-4알킬, 히드록실, 니트로, 시아노, 옥소, -C(O)-C1-4알킬, -C(O)- 등을 포함한다.
달리 명시되지 않는 한, 용어 "본 발명의 화합물"은 화학식 I의 화합물, 그의 전구약물, 화합물 및/또는 전구약물의 제약상 허용되는 염, 및 화합물, 염 및/또는 전구약물의 수화물 또는 용매화물, 뿐만 아니라 모든 입체이성질체 (부분입체이성질체 및 거울상이성질체 포함), 호변이성질체 및 동위원소로 표지된 화합물 (중수소 치환 포함), 뿐만 아니라 본질적으로 형성된 모이어티 (예를 들어, 다형체, 용매화물 및/또는 수화물)를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은 본 발명의 화합물의 생리학적 효과 및 특성을 보유하는 염을 지칭하며, 이는 통상적으로 생물학적으로 또는 달리 바람직한 것이다.
본 발명의 화합물의 용어 "치료 유효량"은 대상체에게 투여되는 경우 (1) (i) 하나 이상의 CDK 효소에 의해 매개되거나, 또는 (ii) 하나 이상의 CDK 효소 활성과 관련되거나, 또는 (iii) 하나 이상의 CDK 효소 (예를 들어, RNA 폴리머라제 II)에 의해 (직접적으로 또는 간접적으로) 조절되는 단백질의 활성을 특징으로 하는 상태 또는 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 경감, 억제, 예방 및/또는 개선하는 데; 또는 (2) 하나 이상의 CDK 효소 (예를 들어, Mcl-1, 시클린 D, Myc 등)에 (직접적으로 또는 간접적으로) 의존적인 단백질의 발현을 감소 또는 억제하는 데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. 세포와 함께 사용되는 경우, 용어 "치료 유효량"은 세포, 또는 조직, 또는 비-세포 생물학적 물질, 또는 매체에 투여되는 경우 하나 이상의 CDK 효소에 의해 조절되는 단백질의 활성을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는 데; 또는 하나 이상의 CDK 효소에 (직접적으로 또는 간접적으로) 의존적인 단백질의 발현을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는 데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로, 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한 예를 들어 영장류 (예를 들어, 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
문맥에서 달리 정의되거나 또는 명백히 지시되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속한 분야의 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다.
상세한 설명
본원에 개시된 화합물은 하기 일반적인 방법 및 절차를 사용하여 용이하게 입수가능한 출발 물질로부터 제조할 수 있다. 전형적인 또는 바람직한 공정 조건 (즉, 반응 온도, 시간, 반응물의 몰비, 용매, 압력 등)이 주어진 경우, 달리 언급하지 않는 한 다른 공정 조건 또한 이용될 수 있음을 인지할 것이다. 최적의 반응 조건은 사용된 특정한 반응물 또는 용매에 따라 달라질 수 있지만, 이러한 조건은 통상적인 실험법에 따라 당업자에 의해 결정될 수 있다.
추가로, 당업자에게 명백한 바와 같이, 통상적인 보호기는 특정 관능기가 목적하지 않은 반응을 수행하지 않도록 하기 위해 필수적일 수 있다. 각종 관능기에 적합한 보호기 뿐만 아니라 특정 관능기를 보호 및 탈보호하는 데 적합한 조건이 당업계에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 수많은 보호기들이 문헌 [T. W. Greene and G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999] 및 그에 인용된 문헌들에 기재되어 있다.
하기 반응을 위한 출발 물질은 일반적으로 공지된 화합물이거나, 또는 공지된 절차 또는 그의 명백한 변형법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 다수의 출발 물질이 알드리치 케미칼 컴퍼니(Aldrich Chemical Co.) (미국 위스콘신주 밀워키), 바켐(Bachem) (미국 캘리포니아주 토랜스), 엠카-켐스(Emka-Chemce) 또는 시그마(Sigma) (미국 미주리주 세인트 루이스)와 같은 상업적 공급원들로부터 입수가능하다. 다른 물질들은 표준 문헌 서적, 예컨대 문헌 [Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-15 (John Wiley and Sons, 1991)], [Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1-5 and Supplementals (Elsevier Science Publishers, 1989)], [Organic Reactions, Volumes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991)], [March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4th Edition)], 및 [Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989)]에 기재된 절차 또는 그의 명백한 변형법에 의해 제조될 수 있다.
적절한 경우, 통상적 기법, 예컨대 침전, 여과, 결정화, 증발, 증류 및 크로마토그래피를 이용하여 다양한 출발 물질, 중간체, 및 바람직한 실시양태의 화합물을 단리 및 정제할 수 있다. 이들 화합물의 특성화는 통상의 방법, 예컨대 융점, 질량 스펙트럼, 핵자기 공명, 및 다양한 다른 분광학적 분석을 이용하여 수행될 수 있다.
본원의 개시내용의 기재는 화학 결합의 법칙 및 원칙과 일치하는 것으로 해석되어야 한다. 예를 들어, 임의의 주어진 위치에 치환기를 수용시키기 위해서 수소 원자를 제거하는 것이 필요할 수 있다. 더욱이, 가변기 (즉, "R 기")의 정의, 뿐만 아니라 본 발명의 화학식 (예컨대, 화학식 I 또는 II)의 결합 위치는 당업계에 공지된 화학 결합의 법칙과 일치할 것으로 이해해야 한다. 또한, 상기 기재된 본 발명의 화합물 모두는 각각의 원자의 원자가를 충족시키기 위해 필요에 따라 인접한 원자 및/또는 수소 사이의 결합을 추가로 포함할 것으로 이해해야 한다. 즉, 하기 유형의 원자 각각에 대하여 하기 총 결합 수를 제공하도록 결합 및/또는 수소 원자가 부가된다: 탄소: 4개의 결합, 질소: 3개의 결합, 산소: 2개의 결합; 및 황: 2개 내지 6개의 결합.
실시양태의 화합물은 일반적으로 당업자에게 친숙한 다수의 방법을 이용하여 제조할 수 있다.
본 발명의 화합물은 그 자체로 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 단리되고 사용될 수 있다. 다수의 경우에서, 본 발명의 화합물은 아미노 및/또는 카르복실 기 또는 그와 유사한 기의 존재에 의해 산 염 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다.
제약상 허용되는 산 부가염은 무기 산 및 유기 산과 형성될 수 있으며, 예를 들어 아세테이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 브로마이드/히드로브로마이드, 비카르보네이트/카르보네이트, 비술페이트/술페이트, 캄포르술포네이트, 클로라이드/히드로클로라이드, 클로르테오필로네이트, 시트레이트, 에탄디술포네이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 히푸레이트, 히드로아이오다이드/아이오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우릴술페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸술페이트, 나프토에이트, 납실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥타데카노에이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/히드로겐 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술포살리실레이트, 타르트레이트, 토실레이트 및 트리플루오로아세테이트 염이 있다.
염이 유도될 수 있는 무기 산에는, 예를 들어 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등이 포함된다. 염이 유도될 수 있는 유기산에는 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 술포살리실산 등이 포함된다. 제약상 허용되는 염기 부가염은 무기 및 유기 염기에 의해 형성될 수 있다.
염이 유도될 수 있는 무기 염기로는, 예컨대 암모늄 염 및 주기율 표의 열 I 내지 XII의 금속이 포함된다. 특정 실시양태에서, 염은 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 은, 아연 및 구리로부터 유도되고, 특히 적합한 염으로는 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염이 포함된다.
염을 유도체화 할 수 있는 유기 염기로는, 예를 들어 1급, 2급 및 3급 아민, 자연 발생의 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 시클릭 아민, 염기성 이온 교환 수지 등이 포함된다. 특정 유기 아민은 이소프로필아민, 벤자틴, 콜리네이트, 디에탄올아민, 디에틸아민, 리신, 메글루민, 피페라진 및 트로메타민을 포함한다.
본 발명의 제약상 허용되는 염은 통상의 화학적 방법에 의해 모 화합물, 염기성 또는 산성 모이어티로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 이들 화합물의 유리 산 형태를 화학량론적 양의 적절한 염기 (예컨대, Na, Ca, Mg 또는 K의 히드록시드, 카르보네이트, 비카르보네이트 등)과 반응시키거나, 또는 이들 화합물의 유리 염기 형태를 화학량론적 양의 적절한 산과 반응시켜 제조할 수 있다. 전형적으로, 이러한 반응은 물 또는 유기 용매, 또는 상기 둘의 혼합물 중에서 수행된다. 일반적으로, 실행 가능한 경우에 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴과 같은 비-수성 매질의 사용이 바람직하다. 추가의 적합한 염의 목록은, 예를 들어 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences", 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985)]; 및 ["Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)]에서 찾아볼 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 본원에 기재된 방법 또는 당업자에게 공지된 그의 변형법을 이용하여 합성될 수 있는 화합물의 동위원소 표지된 형태를 포함한다. 동위원소 표지된 화합물은, 본원에 주어진 화학식에 의해 도시된 구조를 갖되, 하나 이상의 원자가 선택된 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체되어 있다. 본 발명의 화합물 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예로는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36Cl, 125I가 포함된다. 본 발명에는, 본원에 정의된 바와 같은 각종 동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 3H, 13C, 및 14C와 같은 방사성 동위원소가 존재하는 화합물이 포함된다. 이러한 동위원소 표지된 화합물은 대사 연구 (14C 이용), 반응 속도 연구 (예를 들어, 2H 또는 3H 이용), 검출 또는 영상화 기술, 예컨대 약물 또는 기질 조직 분포 검정을 비롯한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 전산화 단층촬영술 (SPECT), 또는 환자에 대한 방사성 치료에서 유용하다. 특히, 18F 또는 표지된 화합물이 PET 또는 SPECT 연구에서 특히 바람직할 수 있다. 일반적으로, 동위원소 표지된 본 발명의 화합물 및 그의 전구약물은, 비-동위원소 표지된 시약을 용이하게 입수가능한 동위원소 표지된 시약으로 대체함으로써 하기에 기재된 반응식 또는 실시예 및 제조예에 개시된 절차를 수행하여 제조할 수 있다.
추가로, 보다 무거운 동위원소, 특히 중수소 (즉, 2H 또는 D)로의 치환은 보다 큰 대사 안정성, 예를 들어, 생체내 반감기 증가 또는 투여 요구량 감소 또는 치료 지수의 개선으로부터 특정한 치료적 이점을 제공할 수 있다. 이와 관련하여, 중수소는 화학식 I의 화합물의 치환기로 간주된다는 것을 이해하여야 한다. 이러한 보다 무거운 동위원소, 특히 중수소의 농도는 동위원소 농축 계수에 의해 정의될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "동위원소 농축 계수"는 동위원소 존재비 및 특정 동위원소의 천연 존재비 사이의 비율을 의미한다. 본 발명의 화합물 내의 치환기가 표시된 중수소인 경우, 이러한 화합물은 각 지정된 중수소 원자에 대하여 적어도 3500 (각각의 지정된 중수소 원자에서 52.5％의 중수소 혼입), 적어도 4000 (60％의 중수소 혼입), 적어도 4500 (67.5％의 중수소 혼입), 적어도 5000 (75％의 중수소 혼입), 적어도 5500 (82.5％의 중수소 혼입), 적어도 6000 (90％의 중수소 혼입), 적어도 6333.3 (95％의 중수소 혼입), 적어도 6466.7 (97％의 중수소 혼입), 적어도 6600 (99％의 중수소 혼입), 또는 적어도 6633.3 (99.5％의 중수소 혼입)의 동위원소 농축 계수를 갖는다.
일반적으로, 동위원소-표지된 화학식 I의 화합물은 기존에 사용되었던 비-표지된 시약 대신에 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하여 당업자에게 공지된 통상의 기술에 의해 또는 첨부하는 실시예 및 제조예에 기재된 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은, 달리 나타내지 않는 한, 이성질체, 예를 들어 본원의 화학식에 언급된 화합물의 모든 입체이성질체, 예를 들어 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 뿐만 아니라 모든 이형태체, 회전이성질체 및 호변이성질체를 포함한다. 본 발명은 개시된 임의의 키랄 화합물의 모든 거울상이성질체를, 실질적으로 순수한 좌선성 또는 우선성 형태로, 또는 라세미 혼합물로, 또는 임의의 비율의 거울상이성질체로 포함한다.
또한, 본원에 개시된 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 함유할 수 있다. 따라서, 원하는 경우, 이러한 화합물은 순수 입체이성질체, 즉 개별 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체로서, 또는 입체이성질체 풍부화 혼합물로서 제조 또는 단리될 수 있다. 이러한 모든 입체이성질체 (및 풍부 혼합물)는, 달리 나타내지 않는 한, 실시양태의 범위에 포함된다. 순수한 입체이성질체 (또는 풍부화된 혼합물)은 예를 들어 당업계에 널리 공지된 광학 활성 출발 물질 또는 입체 선택적인 시약을 이용하여 제조될 수 있다. 별법으로, 상기 화합물의 라세미 혼합물은, 예를 들어 키랄 칼럼 크로마토그래피, 키랄 분해제 등을 사용하여 분리할 수 있다.
입체화학이 화학 구조 또는 화학 명칭에 명백히 지시되지 않는 한, 화학 구조 또는 화학 명칭은 도시된 화합물의 모든 가능한 입체이성질체, 이형태체, 회전이성질체 및 호변이성질체를 포함하는 것으로 의도된다. 예를 들어, 키랄 탄소 원자를 함유하는 화합물은 (R) 거울상이성질체 및 (S) 거울상이성질체의 둘 모두, 뿐만 아니라 라세미 혼합물을 비롯한 거울상이성질체의 혼합물을 포함하는 것으로 의도되고, 2개의 키랄 탄소를 함유하는 화합물은 모든 거울상이성질체 및 부분입체이성질체 ((R,R), (S,S), (R,S) 및 (R,S) 이성질체 포함)를 포함하는 것으로 의도된다.
본 발명의 화합물은 본성적으로 또는 설계에 의해 제약상 허용되는 용매 (물 포함)와의 용매화물을 형성할 수 있으며; 따라서 본 발명은 용매화 형태 및 비용매화 형태를 둘 다 포함하는 것으로 의도된다. 용어 "용매화물"은 본 발명의 화합물 (그의 제약상 허용되는 염 포함)의 하나 이상의 용매 분자와의 분자 복합체를 지칭한다. 이러한 용매 분자는 수용자에게 무해한 것으로 공지되어 있는, 제약 업계에서 통상적으로 사용되는 것들, 예를 들어 물, 에탄올 등이다. 용어 "수화물"은 용매 분자가 물인 복합체를 지칭한다. 본원에 정의된 바와 같은, 본 발명의 화합물의 용매화물 및 수화물은 본 발명의 화합물 및 용매 (물 포함)를 포함하는 조성물로 고려된다.
본 발명의 화합물은 무정형 또는 다형체 형태로 존재할 수 있고; 따라서, 모든 물리적 형태는 본 발명의 범주 내에 포함되는 것으로 간주된다.
수소 결합을 위한 공여자 및/또는 수용자로서 작용할 수 있는 기를 함유하는 본 발명의 화합물, 즉 현 발명의 화합물은 적합한 공결정 형성체를 사용하여 공결정을 형성할 수 있다. 상기 공-결정은 공지된 공-결정 형성 절차에 의해 화학식 I의 화합물로부터 제조할 수 있다. 이러한 절차에는 분쇄, 가열, 공동-승화, 공동-용융, 또는 결정화 조건 하에 용액 중에서 화학식 I의 화합물을 공-결정 형성제와 접촉시키고 이에 의해 형성된 공-결정을 단리시키는 것을 포함한다. 적합한 공결정 형성제에는 WO 2004/078163에 기재된 것들이 포함된다. 따라서, 본 발명은 추가적으로 화학식 I의 화합물을 포함하는 공-결정을 제공한다.
본 발명의 화합물의 특정 용도에서, 화합물의 전구약물을 사용하는 것이 유리할 수 있다. 일반적으로, 전구약물은 생체내에서 본 발명의 화합물로 전환된다. 전구약물은, 전구약물을 대상체에게 투여한 후에 가수분해, 대사 등과 같은 생체내 생리 작용을 통해 본 발명의 화합물로 화학적으로 변형되는 활성 또는 불활성 화합물이다. 전구약물의 제조 및 사용과 관련된 적합성 및 기술은 당업자에게 공지되어 있다. 개념적으로, 전구약물은 2가지 비-배타적 카테고리인 생체전구체 전구약물 및 운반체 전구약물로 분류될 수 있다. 문헌 [The Practice of Medicinal Chemistry, Ch. 31-32 (Ed. Wermuth, Academic Press, San Diego, Calif., 2001)]을 참조한다. 일반적으로, 생체전구체 전구약물은 하나 이상의 보호기를 함유하여 상응하는 활성 약물 화합물에 비해 불활성이거나 또는 낮은 활성을 가지며, 대사 또는 가용매분해에 의해 활성 형태로 전환되는 화합물이다. 활성 약물 형태 및 임의의 방출된 대사 산물은 둘 다 허용가능하게 낮은 독성을 가져야 한다.
운반체 전구약물은 수송 모이어티를 함유하는 약물 화합물, 예를 들어 작용 부위(들)로의 흡수 및/또는 국부 전달을 개선하는 약물 화합물이다. 이러한 운반체 전구약물에 있어서, 약물 모이어티와 수송 모이어티 사이의 연결이 공유 결합이고, 전구약물이 불활성이거나 또는 약물 화합물보다 활성이 낮고, 임의의 방출된 수송 모이어티가 허용가능하게 비-독성인 것이 바람직하다. 수송 모이어티가 흡수 향상을 목적으로 하는 전구약물의 경우, 전형적으로 수송 모이어티의 방출이 빨라야 한다. 다른 경우에는, 저속 방출을 제공하는 모이어티, 예를 들어 특정 중합체 또는 기타 모이어티, 예컨대 시클로덱스트린을 이용하는 것이 바람직하다. 운반체 전구약물은, 예를 들어 하기 특성들 중의 한 가지 이상을 개선시키기 위해 사용될 수 있다: 증가된 친지성, 증가된 약리학적 효과 지속기간, 증가된 부위-특이성, 감소된 독성 및 유해 반응, 및/또는 약물 제제의 개선 (예를 들어, 안정성, 수용해도, 바람직하지 못한 감각수용성 또는 생리화학적 특성의 억제). 예를 들어, 친유성은 (a) 친유성 카르복실산 (예를 들어, 적어도 하나의 친유성 모이어티를 갖는 카르복실산)을 갖는 히드록실 기, 또는 (b) 친유성 알콜 (예를 들어, 적어도 하나의 친유성 모이어티를 갖는 알콜, 예를 들어 지방족 알콜)을 갖는 카르복실산 기의 에스테르화에 의해 증가될 수 있다.
예시적인 전구약물은, 예를 들어 유리 카르복실산의 에스테르, 티올의 S-아실 유도체, 및 알콜 또는 페놀의 O-아실 유도체이고, 여기서 아실은 본원에 정의된 바와 같은 의미를 갖는다. 적합한 전구약물은 대개, 생리적 상태 하에서의 가용매분해에 의해 모 카르복실산으로 전환될 수 있는 제약상 허용되는 에스테르 유도체, 예를 들어 저급 알킬 에스테르, 시클로알킬 에스테르, 저급 알케닐 에스테르, 벤질 에스테르, 일치환 또는 이치환된 저급 알킬 에스테르, 예컨대 ω-(아미노, 모노- 또는 디-저급 알킬아미노, 카르복시, 저급 알콕시카르보닐)-저급 알킬 에스테르, α-(저급 알카노일옥시, 저급 알콕시카르보닐 또는 디-저급 알킬아미노카르보닐)-저급 알킬 에스테르, 예컨대 피발로일옥시메틸 에스테르 및 당업계에서 통상적으로 사용되는 기타 등등이다. 또한, 아민은 생체내에서 에스테라제에 의해 절단되어 유리 약물 및 포름알데히드를 방출하는 아릴카르보닐옥시메틸 치환된 유도체로서 차폐된다 (문헌 [Bundgaard, J. Med. Chem. 2503 (1989)]). 또한, 산성 NH 기, 예를 들어 이미다졸, 이미드, 인돌 등을 함유하는 약물은 N-아실옥시메틸 기로 차폐된다 (문헌 [Bundgaard, Design of Prodrugs, Elsevier (1985)]). 히드록시 기는 에스테르 및 에테르로서 차폐된다. EP 039,051 (Sloan and Little)에는 만니히-염기 히드록삼산 전구약물, 그의 제조법 및 용도가 개시되어 있다.
전형적으로, 본 발명의 화합물은 제약 조성물로서 투여된다. 전형적인 제약 조성물은 본 발명의 화합물, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함한다. 본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제"에는 당업자에게 공지되어 있는 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등, 및 이들의 조합물이 포함된다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 상용적이지 않은 경우를 제외하고, 치료 또는 제약 조성물에서의 사용이 고려된다.
제약 조성물은 특정 투여 경로, 예컨대 경구 투여 및 비경구 투여 등을 위해 제제화될 수 있다. 또한, 본 발명의 제약 조성물은 고체 형태 (비제한적으로, 캡슐, 정제, 환제, 과립, 분말 또는 좌제 포함), 또는 액체 형태 (비제한적으로, 용액, 현탁액 또는 에멀젼 포함)로 제조될 수 있다. 제약 조성물은 멸균과 같은 통상적인 제약학적 작업에 적용될 수 있고/거나, 통상적인 불활성 희석제, 윤활제, 완충제, 뿐만 아니라 보조제, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.
전형적으로, 제약 조성물은 활성 성분을
a) 희석제, 예를 들어, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신;
b) 윤활제, 예를 들어 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 또한 정제의 경우에
c) 결합제, 예를 들어 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 원하는 경우에
d) 붕해제, 예를 들어 전분, 아가, 알긴산 또는 그의 나트륨 염, 또는 발포성 혼합물; 및/또는
e) 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제
와 함께 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐이다.
정제는 당업계에 공지된 방법에 따라 필름 코팅되거나 장용성 코팅될 수 있다.
경구 투여에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물을 정제, 로젠지, 수성 또는 유성 현탁액, 분산가능한 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르의 형태로 포함한다. 경구 사용을 위한 조성물은 제약 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조되고, 이러한 조성물은 제약상 우아하고 맛우수한 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 정제는 활성 성분을, 정제의 제조에 적합한 비독성의 제약상 허용되는 부형제와 혼합하여 함유할 수 있다. 이러한 부형제는, 예를 들어 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예를 들어 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예를 들어 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석이다. 정제는 코팅되지 않거나, 또는 공지된 기술에 의해 코팅되어 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시킴으로써 보다 장기간에 걸쳐 지속적인 작용을 제공한다. 예를 들어, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트와 같은 시간 지연 물질이 사용될 수 있다. 경구용 제제는, 활성 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합된 경질 젤라틴 캡슐, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩 오일, 액상 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합된 연질 젤라틴 캡슐로서 제공될 수 있다.
주사가능한 특정 조성물은 수성 등장성 용액 또는 현탁액이고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액으로부터 유리하게 제조된다. 상기 조성물은 멸균될 수 있고/거나, 보조제, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절용 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 뿐만 아니라, 이들은 또한 다른 치료상 유익한 물질을 함유할 수 있다. 상기 조성물들은 각각 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제조되며, 약 0.1 내지 75％, 또는 약 1 내지 50％의 활성 성분을 함유한다.
또한, 본 발명은 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물이 분해되는 속도를 감소시키는 하나 이상의 작용제를 포함할 수 있는 제약 조성물 및 투여 형태를 제공한다. 이러한 작용제 (본원에서 "안정화제"로 지칭됨)는 항산화제, 예컨대 아스코르브산, pH 완충제 또는 염 완충제 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 화학식 I의 화합물은, 예를 들어 하기 제공된 시험관내 및 생체내 시험에서 나타난 바와 같이 가치있는 약리학적 특성, 예를 들어 CDK 억제 특성을 나타내며, 이에 따라 치료용으로 제안된다.
치료/예방 방법 및 본원에 기재된 화합물 및 그의 제제의 용도와 관련하여 사용되는 경우, "를 필요로 하는" 개체란 치료할 상태를 갖는 것으로 진단받았거나 또는 이에 대하여 이미 치료받은 적이 있는 개체일 수 있다. 예방과 관련하여, 그를 필요로 하는 개체란 또한 상태에 대한 위험 (예를 들어, 상태의 가족력, 상태에 대한 위험을 암시하는 생활양식 요인 등)이 있는 개체일 수 있다. 전형적으로, 본 발명의 화합물의 투여 단계가 본원에 개시된 경우, 본 발명은 특정 치료를 필요로 하는, 투여될 개체 또는 대상체, 또는 치료할 특정 상태를 앓는 개체 또는 대상체를 식별하는 단계를 추가로 고려한다.
실시예
하기 실시예를 참조하여, 실시양태의 화합물을 본원에 기재된 방법 또는 당업자에게 공지된 다른 방법을 이용하여 합성하였다. 화합물 및/또는 중간체를 2695 세퍼레이션 모듈(Separation Module) (매사추세츠주 밀포드)이 장착된 워터스 밀레니엄(Waters Millenium) 크로마토그래피 시스템을 이용하는 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 특성화하였다. 분석용 칼럼은 역상 페노메넥스 루나(Phenomenex Luna) C18 5 μ, 4.6x50 mm (올테크(Alltech, 일리노이주 디어필드)로부터 입수)였다. 통상적으로 5％ 아세토니트릴/95％ 물로 시작하여 10분에 걸쳐 100％ 아세토니트릴로 진행되는 구배 용리를 사용하였다 (유량 2.5 mL/분). 모든 용매는 0.1％ 트리플루오로아세트산 (TFA)을 함유하였다. 화합물을 220 또는 254 nm에서의 자외선 광 (UV)의 흡광도로 검출하였다. HPLC 용매는 부르딕 앤 잭슨(Burdick and Jackson) (미시간주 무스테간) 또는 피셔 사이언티픽(Fisher Scientific) (펜실베이니아주 피츠버그)으로부터 입수하였다.
일부 예에서, 유리 또는 플라스틱 배킹된(backed) 실리카 겔 플레이트, 예를 들어 베이커-플렉스(Baker-Flex) 실리카 겔 1B2-F 가요성 시트를 사용한 박층 크로마토그래피 (TLC)로 순도를 평가하였다. TLC 결과는 자외선 광하에 또는 공지된 아이오딘 증기 및 기타 다양한 염색 기술을 이용하여 가시적으로 쉽게 검출하였다.
질량 분광측정 분석은 하기 LCMS 기기 상에서 수행하였다: 워터스 시스템(Waters System) (악퀴티(Acuity) UPLC 및 마이크로매스(Micromass) ZQ 질량 분광측정계; 칼럼: 악퀴티 HSS C18 1.8-마이크로미터, 2.1 x 50 mm; 구배: 1.8분 기간에 걸쳐 0.05 % TFA를 함유하는 물 중 5에서 95 %까지의 아세토니트릴; 유량 1.2 mL/분; 분자량 범위 200-1500; 콘 전압 20 V; 칼럼 온도 50℃). 모든 질량은 양성자화된 모 이온의 질량으로 기록하였다.
특이적 광학 회전
특이적 광학 회전은 20℃ 온도에서 100-mm 경로 길이의 원통형 유리 셀을 사용하여 오토폴(Autopol) IV 자동화 편광계 (루돌프 리서치 애널리티컬(Rudolph Research Analytical)) 상에서 측정하였다. 사용된 광의 파장은 589 나노미터 (나트륨 D 선)였다. 용매로 채워진 동일한 셀의 광학 회전을 블랭크로서 차감하였다. 최종 결과는 각각 10초에 걸친 2회 측정치의 평균이었다. 10 mg/ml 샘플 용액을 용매로서 MeOH를 사용하여 제조하였다.
GCMS 분석은 휴렛 팩커드(Hewlett Packard) 기기 (매스 셀렉티브 디텍터(Mass Selective Detector) 5973이 장착된 HP6890 시리즈(Series) 기체 크로마토그래피; 주입 부피: 1 ㎕; 초기 칼럼 온도: 50℃; 최종 칼럼 온도: 250℃; 램프 시간: 20 분; 기체 유량: 1 mL/분; 칼럼: 5 % 페닐 메틸 실록산, 모델 번호 HP 190915-443, 치수: 30.0 m x 25 m x 0.25 m) 상에서 수행하였다.
핵 자기 공명 (NMR) 분석은 배리안(Varian) 300 MHz NMR (캘리포니아주 팔로 알토) 또는 배리안 400 MHz MR NMR (캘리포니아주 팔로 알토)을 이용하여 일부 화합물에 대해 수행하였다. 스펙트럼 기준은 TMS 또는 화학적 이동이 공지되어 있는 용매였다. 일부 화합물 샘플은 승온에서 (예를 들어, 75℃) 구동시켜, 샘플 용해도 증가를 촉진하였다. 융점은 래보러터리 디바이시즈(Laboratory Devices) Mel-Temp 장치 (매사추세츠주 홀리스톤) 상에서 측정하였다.
정제용 분리는 레디셉(RediSep) 실리카 겔 카트리지 (텔레다인 이스코(Teledyne Isco), 네브라스카주 링컨) 또는 실리아셉(SiliaSep) 실리카 겔 카트리지 (실리사이클 인크.( Silicycle Inc.), 캐나다 퀘벡 시티)가 장착된 콤비플래쉬 Rf 시스템 (텔레다인 이스코, 네브라스카주 링컨)을 이용하여, 또는 실리카 겔 (230-400 메쉬) 충전재를 사용하는 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해, 또는 워터스(Waters) 2767 샘플 매니저(Sample Manager), C-18 역상 칼럼, 30X50 mm, 유량 75 mL/분을 사용하는 HPLC에 의해 수행하였다. 콤비플래쉬 Rf 시스템 및 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 사용되는 전형적인 용매는 디클로로메탄, 메탄올, 에틸 아세테이트, 헥산, 헵탄, 아세톤, 수성 암모니아 (또는 수산화암모늄) 및 트리에틸 아민이다. 역상 HPLC에 사용되는 전형적인 용매는 다양한 농도의 아세토니트릴 및 물 (0.1% 트리플루오로아세트산 함유)이다.
하기 약어는 하기 의미를 갖는다. 구체적으로 정의되지 않는 한, 약어는 그의 일반적으로 허용되는 의미를 가질 것이다.
약어
ACN : 아세토니트릴
BINAP : 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프틸
BOC-무수물 : 디-tert-부틸 디카르보네이트
bp : 비점
d : 일
DAST : 디에틸아미노황 트리플루오라이드
DBU : 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔
DCM : 디클로로메탄
DIEA : 디이소프로필에틸아민
DIPEA : N,N-디이소프로필에틸아민
DMAP : 4-디메틸아미노피리딘
DME : 1,2-디메톡시에탄
DMF : N,N-디메틸포름아미드
DMSO : 디메틸 술폭시드
dppf : 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센
eq : 당량
EtOAc : 에틸 아세테이트
EtOH : 에탄올
GCMS : 기체 크로마토그래피-질량 분광측정법
HATU : 2-(7-아자-1H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트
HPLC 또는 hplc : 고성능 액체 크로마토그래피
hr : 시간
hrs : 시간
KO-tBu : 칼륨 tert-부톡시드
LHMDS : 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드
MCPBA : 메타-클로로퍼옥시벤조산
MeOH : 메탄올
n.a. : 이용가능하지 않음
NaH : 수소화나트륨
NBS : N-브로모숙신이미드
NEt3 : 트리에틸아민
NMP : N-메틸-2-피롤리돈
Rt : 체류 시간
THF : 테트라히드로푸란
TLC : 박층 크로마토그래피
본 발명의 화합물은 당업자에게 공지된 절차 및 하기 요약된 반응식에 의해 합성될 수 있다.
<반응식 1>
Figure pct00003
반응식 1에 나타낸 바와 같이, 합성을 LG가 이탈기, 예컨대 F, Cl, OTf 등인 관능화된 피리딘 I로 출발할 수 있다. X는 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 피라진 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 가열하면서 (30-130℃) 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 IV 및 수산화암모늄 사이의 SNAR 반응으로 화합물 V를 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 V와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VI을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VII은 화합물 VI과 동일할 것이다.
<반응식 2>
Figure pct00004
또 다른 대안적 경로가 반응식 2에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피라진 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피리딘 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 가열하면서 (30-130℃) 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 IV 및 수산화암모늄 사이의 SNAR 반응으로 화합물 V를 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 V와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VI을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VII은 화합물 VI과 동일할 것이다.
<반응식 3>
Figure pct00005
또 다른 대안적 경로가 반응식 3에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피라진 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피리딘 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 보호기 PG를 제거하여 화합물 V를 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 V와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VI을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VII은 화합물 VI과 동일할 것이다.
<반응식 4>
Figure pct00006
또 다른 대안적 경로가 반응식 4에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피라진 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피리딘 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 보호기 PG를 제거하여 화합물 V를 수득할 수 있다. 가열하면서 (30-180℃) 염기성 조건 (DIEA, TEA, 루티딘, 피리딘)하에서, 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 V 및 관능화된 아민 NH2R1' 사이의 SNAR 반응으로 화합물 VI을 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 VI와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VII을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VIII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VIII은 화합물 VII과 동일할 것이다.
<반응식 5>
Figure pct00007
또 다른 대안적 경로가 반응식 5에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피리딘 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피라진 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 가열하면서 (30-180℃) 염기성 조건 (DIEA, TEA, 루티딘, 피리딘)하에서, 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 V 및 관능화된 아민 NH2R1' 사이의 SNAR 반응으로 화합물 V를 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VI을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VI은 화합물 V와 동일할 것이다.
<반응식 6>
Figure pct00008
또 다른 대안적 경로가 반응식 6에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피라진 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피리딘 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 가열하면서 (30-180℃) 염기성 조건 (DIEA, TEA, 루티딘, 피리딘)하에서, 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 V 및 관능화된 아민 NH2R1' 사이의 SNAR 반응으로 화합물 V를 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VI을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VI은 화합물 V와 동일할 것이다.
<반응식 7>
Figure pct00009
또 다른 대안적 경로가 반응식 7에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피라진 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피리딘 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VI을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VI은 화합물 V와 동일할 것이다.
<반응식 8>
Figure pct00010
또 다른 대안적 경로가 반응식 8에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피리딘 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피라진 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VI을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VI은 화합물 V와 동일할 것이다.
<반응식 9>
Figure pct00011
또 다른 대안적 경로가 반응식 9에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피리딘 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피라진 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 보호기 PG를 제거하여 화합물 V를 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 V와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VI을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VII은 화합물 VI과 동일할 것이다.
<반응식 10>
Figure pct00012
또 다른 대안적 경로가 반응식 10에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피리딘 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피라진 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 보호기 PG를 제거하여 화합물 V를 수득할 수 있다. 가열하면서 (30-180℃) 염기성 조건 (DIEA, TEA, 루티딘, 피리딘)하에서, 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 V 및 관능화된 아민 NH2R1' 사이의 SNAR 반응으로 화합물 VI을 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 VI와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VII을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VIII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VIII은 화합물 VII과 동일할 것이다.
<반응식 11>
Figure pct00013
또 다른 대안적 경로가 반응식 11에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피리딘 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피라진 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 가열하면서 (30-130℃) 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 IV 및 수산화암모늄 사이의 SNAR 반응으로 화합물 V를 수득할 수 있다. 가열하면서 (30-180℃) 염기성 조건 (DIEA, TEA, 루티딘, 피리딘)하에서, 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 V 및 관능화된 아민 NH2R1' 사이의 SNAR 반응으로 화합물 VI을 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 VI와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VII을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VIII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VIII은 화합물 VII과 동일할 것이다.
<반응식 12>
Figure pct00014
또 다른 대안적 경로가 반응식 12에 도시되어 있다. 합성은 X가 Cl, Br, I 또는 OTf와 같은 관능기일 수 있는 관능화된 피리딘 또는 피라진 I로 출발할 수 있다. 화합물 I은 다음에 의해 보론산 또는 보론산 에스테르 II로 전환될 수 있다:
1) PdCl2(dppf) DCM 부가물, 아세트산칼륨, 비스(피나콜레이토)디보론을 용매, 예컨대 THF, DMF, DME, DMA, 톨루엔 및 디옥산 중에서 30으로부터 120℃로 가열하고; 2) 용매, 예컨대 THF 또는 디에틸에테르 중에서 nBuLi 또는 LDA의 첨가에 의해 음이온 할로겐 교환을 수행하고, 이어서 음이온을 트리이소프로필 보레이트로 켄칭한다. 가수분해시, 보론산이 수득될 수 있다.
이어서, 화합물 II 및 관능화된 피리딘 III 사이의 스즈끼 교차-커플링 반응으로 비-헤테로아릴 중간체 IV를 수득한다. 가열하면서 (30-130℃) 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 IV 및 수산화암모늄 사이의 SNAR 반응으로 화합물 V를 수득할 수 있다. 가열하면서 (30-180℃) 염기성 조건 (DIEA, TEA, 루티딘, 피리딘)하에서, 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서의 V 및 관능화된 아민 NH2R1' 사이의 SNAR 반응으로 화합물 VI을 수득할 수 있다. 용매, 예컨대 DMF, THF, DMSO, NMP, 디옥산 중에서 염기, 예컨대 Et3N, iPr2NEt 또는 피리딘의 존재 하에 발생기의 아미노 피리딘 VI와 이탈기를 보유하는 아실 중간체를 커플링시켜, 화합물 VII을 수득할 수 있다. R1'가 R1과 동일하지 않은 경우, VIII을 수득하기 위해 추가의 관능적 조작이 필요하다. R1'가 R1과 동일한 경우, 화합물 VIII은 화합물 VII과 동일할 것이다.
중간체의 합성:
6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 합성
Figure pct00015
DMSO (14 mL) 중 2,6-디클로로피라진 (950 mg, 6.38 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (1.067 mL, 7.65 mmol) 및 (테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 (771 mg, 6.70 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 6 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, EtOAc (300 mL)로 희석하였다. 유기 층을 1N 수성 수산화나트륨 용액 (1x), 물 (3x), 및 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (1185 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00016
6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 대안적 제조:
DMSO (3 mL) 중 2,6-디클로로피라진 (300 mg, 2.014 mmol)의 용액에 (테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 히드로클로라이드 (366 mg, 2.416 mmol) 및 트리에틸아민 (0.674 mL, 4.83 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 4 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, EtOAc로 희석하였다. 유기 층을 3N 수성 수산화나트륨 용액 (1x), 물 (3x), 및 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (400 mg)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 직접 사용하였다.
Figure pct00017
6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 합성
Figure pct00018
단계 1: 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
밀봉된 튜브에 들은 DME (4.5 mL) 및 2M 수성 탄산나트륨 용액 (1.5 mL) 중 6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (272 mg, 1 mmol), 5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일보론산 (351 mg, 2.000 mmol), PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (82 mg, 0.100 mmol)의 혼합물을 103℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (약 25 mL) 및 MeOH (약 5 mL)로 희석하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 50/50에서 80/20]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (54 mg)을 수득하였다.
Figure pct00019
단계 2: 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
아르곤 하에 DMSO (1.8 mL) 중 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (50 mg, 0.155 mmol) 및 수성 수산화암모늄 용액 (30-35 중량%, 1.5 mL)의 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 125℃에서 210 분 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc 및 염수로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (41 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00020
6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 대안적 제조:
단계 1: 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
DME (25 mL) 및 2M 수성 탄산나트륨 용액 (10.67 mL) 중 6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (1620 mg, 7.11 mmol), 5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일보론산 (2246 mg, 12.81 mmol) 및 PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (465 mg, 0.569 mmol)의 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110 내지 115℃에서 90 분 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (약 30 mL) 및 MeOH (약 20 mL)로 희석하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 120 g, EtOAc/헵탄 = 20/80에서 75/25]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (891 mg)을 수득하였다.
Figure pct00021
단계 2: 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
DMSO (25 mL) 중 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (1090 mg, 3.38 mmol) 및 수성 수산화암모늄 용액 (30-35 중량%, 25 mL)의 혼합물을 밀봉된 강철 용기에서 135 내지 140℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (300 mL)로 희석하고, 물 (3x), 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄 = 75/25에서 100/0]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (930 mg)을 수득하였다.
Figure pct00022
6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 합성
Figure pct00023
단계 1: 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
6-클로로-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (3.2 g, 14.05 mmol), 5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일보론산 (4.19 g, 23.9 mmol) 및 2M 수성 탄산나트륨 (16 mL, 0.032 mmol)을 DME (47 mL) 중에 용해시켰다. 이어서, 반응물을 아르곤으로 3 분 동안 폭기하고, PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (1.15 g, 1.4 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 아르곤으로 추가로 2 분 동안 폭기하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 튜브에서 110℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 추가의 5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일보론산 (1.5 g, 8.6 mmol) 및 PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (0.620 g, 0.76 mmol)을 첨가하고, 반응물을 110℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (60 mL) 및 MeOH (20 mL)로 희석하고, 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 20/80에서 75/25]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (2.7 g)을 수득하였다.
Figure pct00024
단계 2: 5-브로모-6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (0.0901 g, 0.279 mmol)을 DMSO (1.13 mL) 및 물 (0.030 mL)의 혼합물 중에 용해시켰다. N-브로모숙신이미드 (0.055 g, 0.307 mmol)를 0℃에서 조금씩 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (25 mL)로 희석하고, 유기 층을 염수 (2x 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 100/0]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 5-브로모-6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (84.6 mg)을 수득하였다.
Figure pct00025
단계 3: 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
5-브로모-6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (0.814 g, 0.203 mmol), 칼륨 메틸트리플루오로보레이트 (0.037 g, 0.304 mmol), 및 인산칼륨 (0.258 g, 1.22 mmol)을 톨루엔 (2.3 mL) 및 물 (0.39 mL)의 혼합물 중에 용해시켰다. 이어서, 용액을 아르곤으로 5 분 동안 폭기하여 탈기하고, PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (0.033 g, 0.041 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 115℃에서 25 분 동안 가열하였다. 추가의 칼륨 메틸트리플루오로보레이트 (0.074 g, 0.608 mmol) 및 PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (0.033 g, 0.041 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 마이크로웨이브로 115℃에서 추가로 30 분 동안 가열하였다. 혼합물을 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 100/0]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (0.0258 g)을 수득하였다.
Figure pct00026
단계 4: 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
DMSO (3 mL) 중 6-(5-클로로-2-플루오로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (0.0338 g, 0.100 mmol) 및 수성 수산화암모늄 용액 (30-35 중량%, 3 mL)의 혼합물을 강철 용기에서 135℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (25 mL)로 희석하고, EtOAc (3x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수 (1x 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (0.0369 g)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 직접 사용하였다.
Figure pct00027
(R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-클로로피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 합성
Figure pct00028
단계 1: 2-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진의 제조
아르곤 하에 디옥산 (50 mL) 중 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (0.275 g, 0.300 mmol) 및 트리시클로헥실포스핀 (0.202 g, 0.720 mmol)의 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 2,6-디클로로피라진, 비스(피나콜레이토)디보론 (2.79 g, 11.00 mmol) 및 아세트산칼륨 (1.472 g, 15.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트의 박층을 통해 여과하였다. 여과물을 감압하에 농축시켜 조 2-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 정제 없이 사용하였다.
단계 2: (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-클로로피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
2M 수성 탄산나트륨 용액 (4.83 mL) 중 2-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진 (1.162 g, 4.83 mmol) 및 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-아이오도피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.5 g, 3.22 mmol) 및 PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (0.263 g, 0.322 mmol)의 혼합물을 아르곤으로 퍼징하였다. DME (10 mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 90℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, EtOAc (50 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물 및 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-클로로피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.1 g)를 수득하였다.
Figure pct00030
(R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-아이오도피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 합성
Figure pct00031
단계 1: 5-클로로-4-아이오도피리딘-2-아민의 제조
DMSO (70 mL) 중 5-클로로-2-플루오로-4-아이오도피리딘 (4.120 g, 16.00 mmol) 및 수성 수산화암모늄 용액 (32 중량%, 70 mL)의 혼합물을 밀봉된 강철 용기에서 90℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (450 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물 (3x) 및 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 5-클로로-4-아이오도피리딘-2-아민 (3.97 g)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00032
단계 2: (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-아이오도피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
0℃에서 디클로로메탄 (6 mL) 중 (R)-1-(tert-부톡시카르보닐)피페리딘-3-카르복실산 (1.081 g, 4.72 mmol)의 용액에 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (0.735 g, 5.50 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하고, 테트라히드로푸란 (6 mL) 중 5-클로로-4-아이오도피리딘-2-아민 (1.00 g, 3.93 mmol) 및 피리딘 (0.445 mL, 5.50 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (350 mL)로 희석하고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (1x), 물 (2x), 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 75/25]에 의해 정제하여 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-아이오도피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.80 g)를 수득하였다.
Figure pct00033
2,5-디플루오로피리딘-4-일보론산의 합성
Figure pct00034
-20℃에서 아르곤 하에 무수 테트라히드로푸란 (22 mL) 중 디이소프로필아민 (1.74 mL, 12.20 mmol)의 용액에 n-부틸리튬 (7.66 mL, 헥산 중 1.6M)을 10 분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 이어서, 새로이 형성된 LDA를 -78℃로 냉각시켰다. 무수 테트라히드로푸란 (3 mL) 중 2,5-디플루오로피리딘 (1.05 mL, 11.5 mmol)의 용액을 30 분에 걸쳐 천천히 첨가하고, 혼합물을 -78℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 무수 테트라히드로푸란 (8.6 mL) 중 트리이소프로필 보레이트 (5.90 mL, 25.4 mmol)의 용액을 적가하였다. 첨가가 완결되면, 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 교반을 추가로 1 시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 수성 수산화나트륨 용액 (4 중량%, 34 mL)으로 희석하였다. 분리된 수성 층을 0℃로 냉각시킨 다음, 6N 수성 히드로클로라이드 용액 (약 10 mL)을 사용하여 pH = 4로 천천히 산성화시켰다. 혼합물을 EtOAc (3x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디에틸에테르로 연화처리하여 2,5-디플루오로피리딘-4-일보론산 (808 mg)을 수득하였다.
(S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에탄아민의 합성
Figure pct00035
단계 1: (R,E)-2-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸렌)프로판-2-술핀아미드의 제조
디클로로에탄 (13 mL) 중 테트라히드로-2H-피란-4-카르브알데히드 (2.0 g, 17.52 mmol), (R)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (1.062 g, 8.76 mmol), 피리딘 4-메틸벤젠술포네이트 (0.110 g, 0.438 mmol) 및 황산마그네슘 (5.27 g, 43.8 mmol)의 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (R,E)-2-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸렌)프로판-2-술핀아미드 (1.9 g)를 수득하였다.
Figure pct00036
단계 2: (R)-2-메틸-N-((S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에틸)프로판-2-술핀아미드의 제조
0℃에서 디클로로메탄 (21.4 mL) 중 (R,E)-2-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸렌)프로판-2-술핀아미드 (0.93 g, 4.28 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 (테트라히드로푸란 중 2.0 M, 4.28 mL, 8.56 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (5 mL)으로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (R)-2-메틸-N-((S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에틸)프로판-2-술핀아미드 (910 mg)를 수득하였다.
Figure pct00037
단계 3: (S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에탄아민의 제조
MeOH (5 mL) 중 (R)-2-메틸-N-((S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에틸)프로판-2-술핀아미드 (400 mg, 1.714 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 히드로클로라이드 (5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 디에틸에테르 (10 mL)로 희석하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 디에틸에테르로 세척하여 조 (S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에탄아민 히드로클로라이드 염을 수득하였다. 히드로클로라이드 염을 물 (10 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 중화시켰다. 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (S)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에탄아민 (212 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00038
(R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일) 에탄아민의 합성
Figure pct00039
단계 1: (S,E)-2-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸렌)프로판-2-술핀아미드의 제조
디클로로에탄 (13 mL) 중 테트라히드로-2H-피란-4-카르브알데히드 (2.0 g, 17.52 mmol), (S)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (1.062 g, 8.76 mmol), 피리딘 4-메틸벤젠술포네이트 (0.110 g, 0.438 mmol) 및 황산마그네슘 (5.27 g, 43.8 mmol)의 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (S,E)-2-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸렌)프로판-2-술핀아미드 (1.50 g)를 수득하였다.
Figure pct00040
단계 2: (S)-2-메틸-N-((R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에틸)프로판-2-술핀아미드의 제조
0℃에서 디클로로메탄 (34.5 mL) 중 (S,E)-2-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸렌)프로판-2-술핀아미드 (1.5 g, 6.90 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 (1.646 g, 13.80 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (5 mL)으로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래프에 의해 정제하여 (S)-2-메틸-N-((R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에틸)프로판-2-술핀아미드 (1.40 g)를 수득하였다.
Figure pct00041
단계 3: (R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일) 에탄아민의 제조
MeOH (5 mL) 중 (S)-2-메틸-N-((R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에틸)프로판-2-술핀아미드 (400 mg, 1.714 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 히드로클로라이드 (5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 디에틸에테르 (10 mL)로 희석하였다. 침전물을 여과에 의해 수집하고, 디에틸에테르로 세척하여 조 (R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에탄아민 히드로클로라이드 염을 수득하였다. 히드로클로라이드 염을 물 (10 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 중화시켰다. 혼합물을 디클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (R)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)에탄아민 (200 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00042
(2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민의 합성
Figure pct00043
단계 1: (2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸 4-메틸벤젠술포네이트의 제조
디클로로메탄 (5 mL) 및 피리딘 (5 mL, 61.8 mmol) 중 (2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올 (1 g, 6.93 mmol)의 용액에 파라-톨루엔술포닐 클로라이드 (1.586 g, 8.32 mmol) 및 DMAP (0.042 g, 0.347 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 물 및 디클로로메탄으로 희석하였다. 분리된 유기 상을 0.2N 수성 히드로클로라이드 용액 (1x), 1N 수성 히드로클로라이드 용액 (2x), 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헥산 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸 4-메틸벤젠술포네이트 (2.05 g)를 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00044
단계 2: (2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민의 제조
강철 용기 내의 테트라히드로푸란 (25 mL) 중 (2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸 4-메틸벤젠술포네이트 (3 g, 10.05 mmol)의 용액을 -78 ℃에서 암모니아 (약 5.00 mL)로 응축시켰다. 혼합물을 강철 용기에서 125℃에서 약 18 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 강철 용기를 열고, 혼합물을 질소의 스트림 하에 실온으로 가온되도록 하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 수성 수산화나트륨 용액 (5 중량%)과 디클로로메탄 사이에 분배하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (1x)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성 수산화나트륨 용액 (5 중량%)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (2,2-디메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 (약 2.36 g)을 황색 액체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00045
(6,6-디메틸-1,4-디옥산-2-일)메탄아민의 합성
Figure pct00046
단계 1: 1-(알릴옥시)-2-메틸프로판-2-올의 제조
알릴산 알콜 (57.4 mL, 844 mmol)에 0℃에서 수소화나트륨 (광유 중 60 중량%, 2.43 g, 101 mmol)을 첨가하였다. 20 분 동안 교반한 후, 2,2-디메틸옥시란 (15 mL, 169 mmol)을 첨가하고, 용액을 밤새 환류하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 포화 수성 염화암모늄 용액으로 희석하고, 디에틸에테르 (3x)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 디에틸에테르를 제거하였다. 잔류물을 증류시켜 1-(알릴옥시)-2-메틸프로판-2-올 (12.3 g, 42 torr, bp 58-60℃)을 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00047
단계 2: 6-(아이오도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산의 제조
아세토니트릴 (400 mL) 중 1-(알릴옥시)-2-메틸프로판-2-올 (5.0 g, 38 mmol)의 용액에 중탄산나트륨 (19.5 g, 77 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 아이오딘 (11.7 g, 46.1 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 밤새 교반하였다. 혼합물에 트리에틸아민 (6.42 mL, 46.1 mmol) 및 추가의 아이오딘 (7.8 g, 30.7 mmol)을 첨가하고, 교반을 0℃에서 추가로 5 시간 동안 계속하였다. 혼합물에 탄산칼륨 (6.37 g, 46.1 mmol)을 첨가하고, 현탁액을 실온에서 약 3 일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 티오황산나트륨 용액 (200 mL) 및 EtOAc (300 mL)로 희석하였다. 분리된 수성 층을 EtOAc (2x)로 추출하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헥산 = 10/100에서 10/40]에 의해 정제하여 6-(아이오도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산을 황색 오일 (2.07 g)로서 수득하였다.
Figure pct00048
1-(알릴옥시)-2-메틸프로판-2-올 (1.63 g)을 회수하였다.
단계 3: 6-(아지도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산의 제조
무수 DMF (9 mL) 중 6-(아이오도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산 (1.80 g, 7.03 mmol)의 용액에 나트륨 아지드 (0.685 g, 10.5 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 80℃에서 2.5 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물 (30 mL) 및 EtOAc (30 mL)로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 (3x)로 세척하였다. 수성 층을 합하고, EtOAc (1x)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헥산 = 10/40에서 20/40]에 의해 정제하여 6-(아지도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산 (0.93 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00049
단계 4: (6,6-디메틸-1,4-디옥산-2-일)메탄아민의 제조
무수 테트라히드로푸란 (15 mL) 중 6-(아지도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산 (502 mg, 2.93 mmol)의 용액에 0℃에서 수소화알루미늄리튬의 용액 (테트라히드로푸란 중 1M, 3.81 mL)를 천천히 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 실온에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 황산나트륨 10수화물 (과량)을 천천히 첨가하고, 현탁액을 밤새 격렬히 교반하였다. 현탁액을 면을 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 (6,6-디메틸-1,4-디옥산-2-일)메탄아민 (410 mg)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00050
(5,5-디메틸-1,4-디옥산-2-일)메탄아민의 합성
Figure pct00051
단계 1: 2-(알릴옥시)-2-메틸프로판-1-올의 제조
알릴산 알콜 (57.4 mL) 중 2,2-디메틸옥시란 (15.0 mL, 169 mmol)의 용액에 과염소산 (70 중량%, 7.26 mL, 84 mmol)을 0℃에서 천천히 첨가하였다. 용액을 실온으로 가온하고, 1.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 희석하고, 디에틸에테르 (3x)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 디에틸에테르를 제거하였다. 잔류물을 증류시켜 2-(알릴옥시)-2-메틸프로판-1-올 (9.70 g, 38 torr, bp 74-76℃)을 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00052
단계 2: 5-(아이오도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산의 제조
아세토니트릴 (350 mL) 중 2-(알릴옥시)-2-메틸프로판-1-올 (5.0 g, 38.4 mmol)의 용액에 중탄산나트륨 (9.68 g, 115 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 아이오딘 (29.2 g, 115 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 6 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 티오황산나트륨 용액으로 희석하고, 감압 하에 농축시켜 대부분의 유기 용매를 제거하였다. 잔류물을 EtOAc (2x)로 추출하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헥산 = 10/100에서 10/40]에 의해 정제하여 6-(아이오도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산을 무색 오일 (7.04 g)로서 수득하였다.
Figure pct00053
단계 3: 5-(아지도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산의 제조
무수 DMF (13 mL) 중 5-(아이오도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산 (2.58 g, 10.1 mmol)의 용액에 나트륨 아지드 (0.982 g, 15.1 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 80℃에서 2.5 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물 (40 mL) 및 EtOAc (40 mL)로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 (3x)로 세척하였다. 수성 층을 합하고, EtOAc (1x)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헥산 = 10/40에서 50/50]에 의해 정제하여 6-(아지도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산 (1.61 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00054
단계 4: (5,5-디메틸-1,4-디옥산-2-일)메탄아민의 제조
무수 테트라히드로푸란 (20 mL) 중 5-(아지도메틸)-2,2-디메틸-1,4-디옥산 (810 mg, 4.73 mmol)의 용액에 0℃에서 수소화알루미늄리튬의 용액 (1.0 M 테트라히드로푸란, 6.2 mL)을 천천히 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 실온에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 황산나트륨 10수화물 (과량)을 천천히 첨가하고, 현탁액을 밤새 격렬히 교반하였다. 현탁액을 면을 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 (5,5-디메틸-1,4-디옥산-2-일)메탄아민 (673 mg)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00055
(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민의 합성
Figure pct00056
단계 1: 4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴의 제조
0 내지 5℃에서 테트라히드로푸란 (10 mL) 중 테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴 (2 g, 18.00 mmol)의 용액에 LHMDS (21.59 mL, 21.59 mmol)를 천천히 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 아이오도메탄 (3.37 mL, 54.0 mmol)을 천천히 첨가하고, 약 0℃에서 30 분 동안, 이어서 실온에서 약 2 시간 동안 교반을 계속하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 조심스럽게 1N 수성 히드로클로라이드 용액 (30 mL) 및 EtOAc (5 mL)로 희석하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디에틸에테르에 녹이고, 분리된 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴 (1.8 g)을 오렌지색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00057
단계 2: (4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민의 제조
테트라히드로푸란 (30 mL) 중 4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴 (1.8 g, 14.38 mmol)의 용액에 수소화알루미늄리튬 (테트라히드로푸란 중 1M 용액, 21.57 mL, 21.57 mmol)을 0℃에서 조심스럽게 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15 분 동안 교반하고, 실온으로 가온되도록 하고, 실온에서 추가로 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 물 (0.9 mL) [주의: 기체 발생!], 1N 수성 수산화나트륨 용액 (2.7 mL) 및 물 (0.9 mL)을 조심스럽게 첨가하였다. 혼합물을 30 분 동안 격렬히 교반하였다. 침전물을 여과하고, 테트라히드로푸란으로 헹구었다. 용액을 감압 하에 농축시켜 조 (4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 (1.54 g)을 황색빛 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00058
4-(아미노메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴의 합성
Figure pct00059
단계 1: 디히드로-2H-피란-4,4(3H)-디카르보니트릴의 제조
DMF (6 mL) 중 말로노니트릴 (0.991 g, 15 mmol), 1-브로모-2-(2-브로모에톡시)에탄 (3.83 g, 16.50 mmol) 및 DBU (4.97 mL, 33.0 mmol)의 혼합물을 85℃에서 3 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (25 mL)로 희석하고, 물 (2x 10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시키고, 고진공 하에 추가로 건조시켜 조 디히드로-2H-피란-4,4(3H)-디카르보니트릴 (1.65 g)을 밝은 갈색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00060
단계 2: 4-(아미노메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴의 제조
EtOH (15 mL) 중 디히드로-2H-피란-4,4(3H)-디카르보니트릴 (450 mg, 3.31 mmol)의 용액에 수소화붕소나트륨 (375 mg, 9.92 mmol)을 조금씩 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (30 mL)로 희석하고, 물 (10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 4-(아미노메틸)테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴 (388 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00061
톨루엔-4-술폰산 4-메톡시-테트라히드로-피란-4-일메틸 에스테르의 합성
Figure pct00062
단계 1: 1,6-디옥사스피로[2.5]옥탄의 제조
질소 분위기 하에 DMSO (20 mL) 중 트리메틸술포늄 아이오다이드 (3.27 g, 16 mmol)의 용액에 디히드로-2H-피란-4(3H)-온 (1.0 g, 10 mmol)을 첨가하였다. 혼합물에 DMSO (15 mL) 중 tert-부톡시드 (1.68 g, 15 mmol)의 용액을 천천히 첨가하고, 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL)로 천천히 희석하고, 디에틸에테르 (3x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 1,6-디옥사스피로[2.5]옥탄 (650 mg)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 직접 사용하였다.
Figure pct00063
단계 2: (4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일) MeOH의 제조
질소 하에 MeOH (10 mL) 중 1,6-디옥사스피로[2.5]옥탄 (600 mg, 5.26 mmol)의 용액에 0℃에서 캄포르술폰산 (50 mg, 0.21 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 (4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올 (707 mg)을 담황색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00064
단계 3: 톨루엔-4-술폰산 4-메톡시-테트라히드로-피란-4-일메틸 에스테르의 제조
피리딘 (4 mL) 중 (4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일) MeOH (300 mg, 2.05 mmol)의 용액에 실온에서 톨루엔술폰산 클로라이드 (430 mg, 2.25 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 디클로로메탄 (2 mL) 중에 용해시켰다. 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 12 g, EtOAc/헥산 = 0/100에서 30/70]로 정제하여 톨루엔-4-술폰산 4-메톡시-테트라히드로-피란-4-일메틸 에스테르 (360 mg)를 담황색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00065
(4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민의 합성
Figure pct00066
단계 1: 4,4-디메톡시테트라히드로-2H-피란의 제조
MeOH (1 mL) 중 디히드로-2H-피란-4(3H)-온 (501 mg, 5 mmol), 트리메틸 오르토포르메이트 (0.608 mL, 5.50 mmol) 및 톨루엔술폰산 1수화물 (2.85 mg, 0.015 mmol)의 혼합물을 밀봉된 튜브 중에서 80℃에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 감압 하에 농축시켜 조 4,4-디메톡시테트라히드로-2H-피란 (703 mg)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00067
단계 2: 4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴의 제조
디클로로메탄 (15 mL) 중 4,4-디메톡시테트라히드로-2H-피란 (0.703 g, 4.81 mmol) 및 염화주석(IV) (0.564 mL, 4.81 mmol)의 용액에 2-이소시아노-2-메틸프로판 (0.400 g, 4.81 mmol)을 -70℃에서 천천히 첨가하고, 혼합물을 실온으로 2 내지 3 시간에 걸쳐 가온되도록 하였다. 혼합물을 수성 중탄산나트륨 용액 (10 mL) 및 디클로로메탄 (20 mL)으로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 (3x 10 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴 (511 mg)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00068
단계 3: (4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민의 제조
실온에서 테트라히드로푸란 (10 mL) 중 수소화알루미늄리튬 (275 mg, 7.24 mmol)의 혼합물에 테트라히드로푸란 (10 mL) 중 4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-카르보니트릴 (511 mg, 3.62 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 환류 하에 3 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 물 (3 mL)을 조심스럽게 적가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 30 분 동안 교반하고, 여과하여 모든 고체를 제거하였다. 여과물을 황산나트륨 상에서 2 시간 동안 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 (370 mg)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00069
톨루엔-4-술폰산 1',1'-디옥소-헥사히드로-1-티오피란-4-일-메틸 에스테르의 합성
Figure pct00070
(1',1'-디옥소-헥사히드로-1-티오피란-4-일)-메탄올 (2.5 g, 15.22 mmol) (문헌 [Organic Process Research & Development 2008, 12, 892-895.]), 피리딘 (25 mL) 및 토실-Cl (2.90 g, 15.22 mmol)의 혼합물을 50℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헥산 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 톨루엔-4-술폰산 1',1'-디옥소-헥사히드로-1-티오피란-4-일-메틸 에스테르 (3.78 g)를 수득하였다.
Figure pct00071
1-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00072
단계 1: 1-tert-부틸 3-메틸 (3-플루오로피페리딘)-1,3-디카르복실레이트의 제조
LDA의 용액 [0℃에서 테트라히드로푸란 (6 mL) 중 BuLi (헥산 중 1.6M 용액, 5.14 mL, 8.22 mmol) 및 디이소프로필아민 (1.44 mL, 10.39 mmol)으로부터 새로 제조함]에 테트라히드로푸란 (8 mL) 중 1-tert-부틸 3-메틸 피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (2 g, 8.22 mmol)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 용액을 0℃에서 30 분 동안 교반한 다음 테트라히드로푸란 (12 mL) 중 N-플루오로벤젠술폰이미드 (3.24 g, 10.28 mmol)의 0℃ 용액으로 옮겼다. 반응 혼합물을 0℃에서 15 분 동안 교반한 다음, 실온에서 약 20 시간 동안 교반하였다. 전체 용매 부피를 감압 하에 대략 1/3로 감소시키고, EtOAc를 첨가하였다. 혼합물을 물, 0.1N 수성 히드로클로라이드 용액, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 EtOAc 중에 현탁시키고, 가만히 따랐다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]로 정제하여 1-tert-부틸 3-메틸 (3-플루오로피페리딘)-1,3-디카르복실레이트 (775 mg)를 무색 액체로서 수득하였다.
Figure pct00073
단계 2: 1-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로피페리딘-3-카르복실산의 제조
MeOH (6 mL) 중 1-tert-부틸 3-메틸 3-플루오로피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (250 mg, 0.957 mmol)의 용액에 2N 수성 수산화나트륨 용액 (6 mL, 12.00 mmol)을 천천히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 반응 혼합물을 산성화시키고, 디에틸에테르 (3x)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축시켜, 조 1-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로피페리딘-3-카르복실산 (215 mg)을 백색 고체로서 수득하였다. 조 물질을 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00074
(3R,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-플루오로피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00075
단계 1: (3S,4S)-벤질 3-플루오로-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
아르곤 하에 (트리플루오로메틸)벤젠 (84 mL) 중 (3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.0 g, 20.22 mmol)의 용액에 디이소프로필에틸아민 (53.0 mL, 303 mmol) 및 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (19.75 mL, 121 mmol)을 첨가하였다. 퍼플루오로부탄술포닐 플루오라이드 (PBSF) (9.09 mL, 50.5 mmol)를 5회 분량에 나누어 천천히 첨가하였다 (각각의 분량을 매 30분 이내에 첨가함). 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 유기 용액을 1N 수성 히드로클로라이드 용액 (2x), 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (2x) 및 물로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 120 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (3S,4S)-벤질 3-플루오로-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.8 g)를 수득하였다.
Figure pct00076
단계 2: (3R,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-플루오로피롤리딘-3-카르복실산의 제조
사염화탄소 (43.6 mL), 물 (65.3 mL) 및 아세토니트릴 (43.6 mL) 중 (3S, 4S)-벤질 3-플루오로-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.8 g, 15.24 mmol), 삼염화루테늄 (199 mg, 0.762 mmol), 과아이오딘산나트륨 (13.04 g, 61.0 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (200 mL) 및 물 (200 mL)로 희석하고, 여과하여 슬러를 제거하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (2x 200 mL)으로 세척하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세톤 (50 mL) 중에 용해시키고, 삼산화크로뮴 (3.05 g, 30.5 mmol) 및 1N 수성 황산 용액 (50 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (2x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3R,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-플루오로피롤리딘-3-카르복실산 (2.9 g)을 수득하였다.
Figure pct00077
(3S,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00078
단계 1: (3S,4S)-벤질 3-(4-메톡시벤조일옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
(3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (2.25 g, 9.10 mmol), p-아니스산 (1.66 g, 10.92 mmol), N1,N1,N2,N2-테트라메틸디아젠-1,2-디카르복스아미드 (2.350 g, 13.65 mmol), 벤젠 (18.20 mL) 및 트리부틸 포스핀 (3.37 mL, 13.65 mmol)의 혼합물을 닫힌 바이알 중에서 60℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 주위 온도로 냉각시키고, EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3S,4S)-벤질 3-(4-메톡시벤조일옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (2.58 g)를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00079
단계 2: (3S,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (30 mL) 중 조 (3S,4S)-벤질 3-(4-메톡시벤조일옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (2.58 g)의 용액에 1N 수성 수산화나트륨 용액 (30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3S,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.8 g)를 수득하였다.
Figure pct00080
단계 3: (3S,4S)-벤질 3-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
디클로로메탄 (14 mL) 중 (3S,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.8 g, 7.28 mmol)의 용액에 이미다졸 (0.842 g, 12.37 mmol) 및 tert-부틸클로로디페닐실란 (2.057 mL, 8.01 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, 셀라이트의 박층을 통해 여과하였다. 여과물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3S,4S)-벤질 3-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (2.4 g)를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00081
단계 4: (3S,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-피롤리딘-3-카르복실산의 제조
사염화탄소 (11.5 mL), 물 (17.2 mL) 및 아세토니트릴 (11.5 mL) 중 (3S,4S)-벤질 3-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.9 g, 8.03 mmol), 삼염화루테늄 (0.105 g, 0.401 mmol), 과아이오딘산나트륨 (6.87 g, 32.1 mmol)의 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄 (200 mL) 및 물 (200 mL)로 희석하고, 여과하여 슬러를 제거하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (2x 200 mL)으로 세척하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세톤 (50 mL) 및 삼산화크로뮴 (1.606 g, 16.06 mmol) 중에 용해시키고, 1N 수성 황산 용액 (50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (2x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3S,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)피롤리딘-3-카르복실산 (2.5 g)을 수득하였다.
Figure pct00082
(3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00083
단계 1: 벤질 2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트의 제조
디옥산 (1000 mL) 중 2,5-디히드로-1H-피롤 (30 g, 434 mmol)의 용액에 CbzOSu (130 g, 521 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 약 300 mL의 부피로 농축시키고, EtOAc (1000 mL)로 희석하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 벤질 2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (80.0 g)를 무색 오일로서 수득하였다. Rf = 0.6 (EtOAc/헥산 = 30:70).
Figure pct00084
단계 2: 벤질 6-옥사-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트의 제조
디클로로메탄 (540 mL) 중 벤질 2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (33 g, 163 mmol)의 용액에 MCPBA (77 중량%, 44 g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 탄산나트륨 용액 (500 mL)으로 희석하고, 생성된 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 벤질 6-옥사-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (29.5 g)를 황색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00085
단계 3: 트랜스-(±)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
-40℃에서 무수 THF (260 mL) 중 벤질 6-옥사-3-아자비시클로[3.1.0]헥산-3-카르복실레이트 (28.5 g, 130 mmol) 및 CuBr?SMe2 (26.7 g, 130 mmol)의 용액에 비닐 마그네슘 브로마이드 (THF 중 1.0 M 용액, 520 mL)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 -20℃로 2 시간 동안 가온하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (200 mL)으로 켄칭하고, EtOAc (500 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여, 트랜스-(±)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 라세미 혼합물 (15.5 g)을 황색 오일로서 수득하였다. Rf = 0.2 (EtOAc/헥산 = 30:70).
Figure pct00086
단계 4: (3S,4R)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 및 (3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 분할
양: {n-헥산: 에탄올: 메탄올} = {8: 2: 1} 중에 용해시킨 10 g; 200 mg/mL.
분석용 분리:
칼럼: 키랄팩 AD (20 um) 250 x 4.6 mm.
용매: n-헵탄: 에탄올: 메탄올 = 8: 1: 1.
유량: 1.0 mL/분; 검출: UV = 220 nm.
분획 1: 체류 시간: 9.16 분.
분획 2: 체류 시간: 13.10 분.
정제용 분리:
칼럼: 키랄팩 AD-정제용 (20 um) 5 cm x 50 cm.
용매: n-헵탄: 에탄올: 메탄올 = 8: 1: 1.
유량: 100 mL/분; 구동 당 주입량: 1000 mg/5 mL; 검출: UV = 220 nm.
분획 1: (3S,4R)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트. 갈색빛 액체. 수율: 4530 mg; ee = 99.5 % (UV, 220 nm).
분획 2: (3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트. 갈색빛 액체. 수율: 4117 mg; ee = 99.5 % (UV, 220 nm).
단계 5: (3R,4S)-벤질 3-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
디클로로메탄 (24 mL) 중 (3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.0 g, 12.13 mmol)의 용액에 이미다졸 (1.404 g, 20.62 mmol) 및 tert-부틸클로로디페닐실란 (3.43 mL, 13.34 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, 셀라이트의 박층을 통해 여과하였다. 여과물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3R,4S)-벤질 3-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (6.2 g)를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00087
단계 6: (3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)피롤리딘-3-카르복실산의 제조
사염화탄소 (18.2 mL), 물 (27.4 mL) 및 아세토니트릴 (18.2 mL) 중 (3R,4S)-벤질 3-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트, 삼염화루테늄 (0.167 g, 0.638 mmol), 과아이오딘산나트륨 (10.92 g, 51.1 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄 (200 mL) 및 물 (200 mL)로 희석하고, 여과하여 슬러를 제거하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (2x 200 mL)으로 세척하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세톤 (50 mL) 및 삼산화크로뮴 (2.55 g, 25.5 mmol) 중에 용해시키고, 1N 수성 황산 용액 (50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (2x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)피롤리딘-3-카르복실산 (3.5 g)을 수득하였다.
Figure pct00088
(3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00089
단계 1: (2S,4S)-4-메탄술포닐옥시-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르의 제조
디클로로메탄 (50 mL) 중 (2S,4S)-4히드록시-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (5.0 g, 20.39 mmol), N,N-디이소프로필-N-에틸아민 (3.16, 24.46 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (2.8 g, 24.46 mmol)의 혼합물을 23℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 (2S,4S)-4-메탄술포닐옥시-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (6.0 g)를 수득하였다.
Figure pct00090
단계 2: (2S,4S)-tert-부틸 2-(히드록시메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (31 mL) 중 (2S,4S)-4-메탄술포닐옥시-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (5.0 g)의 용액에 수소화붕소나트륨 (1.170 g, 30.9 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 환류 하에 3 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 포화 수성 염화암모늄 용액 (5 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물, 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하여 (2S,4S)-tert-부틸 2-(히드록시메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (4.0 g)를 수득하였다.
Figure pct00091
단계 3: (2S,4S)-tert-부틸 2-((tert-부틸디페닐실릴옥시)메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
디클로로메탄 (32.4 mL) 중 (2S,4S)-tert-부틸 2-(히드록시메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (4.0 g, 16.18 mmol)의 용액에 이미다졸 (1.872 g, 27.5 mmol) 및 tert-부틸클로로디페닐실란 (4.57 mL, 17.79 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, 셀라이트의 박층을 통해 여과하였다. 여과물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 (2S,4S)-tert-부틸 2-((tert-부틸디페닐실릴옥시)메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (6.0 g)를 수득하였다.
Figure pct00092
단계 4: (2S,4R)-tert-부틸 2-((tert-부틸디페닐실릴옥시)메틸)-4-시아노피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
DMF (50 mL) 중 (2S,4S)-tert-부틸 2-((tert-부틸디페닐실릴옥시)메틸)-4-메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (6 g, 11.24 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 시아나이드 (3.62 g, 13.49 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 약 18 시간 동안 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (2S,4R)-tert-부틸 2-((tert-부틸디페닐실릴옥시)메틸)-4-시아노피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.8 g)를 수득하였다.
Figure pct00093
단계 5: (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-(2-히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (30 mL) 중 (2S,4R)-tert-부틸 2-((tert-부틸디페닐실릴옥시)메틸)-4-시아노피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.8 g, 8.18 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (2.57 g, 9.81 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 23℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (50 mL) 중에 용해시켰다. 유기 용액을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-(2-히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.7 g)를 수득하였다.
단계 6: (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (20 mL) 중 (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (850 mg, 3.76 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (광유 중 60 중량%, 184 mg, 4.51 mmol)을 조심스럽게 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물에 메틸 아이오다이드 (0.470 mL, 7.51 mmol)를 첨가하고, 교반을 실온에서 3 시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 수성 포화 염화암모늄 용액 (50 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 조심스럽게 희석하였다. 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (100 mL) 중에 용해시켰다. 혼합물을 물 (2x 50 mL) 및 염수 (2x 100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 60/40]에 의해 정제하여 (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (560 mg)를 수득하였다.
Figure pct00094
단계 7: (3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카르복실산의 제조
닫힌 바이알 중 (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 2.497 mmol), 6N 수성 수산화나트륨 용액 (13.73 mL, 82 mmol) 및 EtOH (15 mL)의 혼합물을 80℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5까지 산성화시키고, 디클로로메탄 (3x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc 중에 용해시켰다. 유기 층을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카르복실산 (510 mg)을 수득하였다.
Figure pct00095
4-(tert-부톡시카르보닐)-2-메틸모르폴린-2-카르복실산의 합성
Figure pct00096
단계 1: 4-tert-부틸 2-메틸 모르폴린-2,4-디카르복실레이트의 제조
MeOH (15 mL) 중 4-(tert-부톡시카르보닐)모르폴린-2-카르복실산 (500 mg, 2.162 mmol)의 용액에 황산 (10 ㎕, 0.188 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 1N 수성 수산화나트륨 용액 (5 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc 중에 용해시켰다. 용액을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 4-tert-부틸 2-메틸 모르폴린-2,4-디카르복실레이트 (300 mg)를 수득하였다.
Figure pct00097
단계 2: 2-메틸-모르폴린-2,4-디카르복실산 4-tert-부틸 에스테르 2-메틸에스테르의 제조
테트라히드로푸란 (5 mL) 중 디이소프로필아민 (0.174 mL, 1.223 mmol)의 용액에 0℃에서 n-BuLi (0.764 mL, 1.223 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 테트라히드로푸란 (5 mL) 중 4-tert-부틸 2-메틸 모르폴린-2,4-디카르복실레이트 (300 mg, 1.223 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1 시간 동안 교반하고 실온으로 천천히 가온되도록 하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (5 mL)으로 희석하고, EtOAc (3x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 2-메틸-모르폴린-2,4-디카르복실산 4-tert-부틸 에스테르 2-메틸에스테르 (211 mg)를 수득하였다.
Figure pct00098
단계 3: 4-(tert-부톡시카르보닐)-2-메틸모르폴린-2-카르복실산의 제조
테트라히드로푸란 (10 mL) 중 2-메틸-모르폴린-2,4-디카르복실산 4-tert-부틸 에스테르 2-메틸에스테르 (290 mg, 1.118 mmol) 및 1N 수성 수산화나트륨 용액 (12 mL, 12.00 mmol)의 혼합물을 70℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켜 테트라히드로푸란을 제거하였다. 수용액을 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5까지 산성화시키고, EtOAc (3x 15mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하여 4-(tert-부톡시카르보닐)-2-메틸모르폴린-2-카르복실산 (155 mg)을 수득하였다.
Figure pct00099
(3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체의 혼합물] 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산 [트랜스 이성질체의 혼합물]의 합성
Figure pct00100
단계 1: 메틸 5-메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (30 mL) 중 메틸 5-메틸니코티네이트 (1.06 g, 7.01 mmol), Pd/C (10 중량%, 100 mg) 및 산화백금 (IV) (150 mg, 0.661 mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, MeOH (150 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 메틸 5-메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (1.5 g; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00101
단계 2: (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체] 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-5-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [트랜스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (40 mL) 중 조 메틸 5-메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (1.5 g, 7.01 mmol) 및 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%; 20 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (1.491 mL, 10.45 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 120 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 60/40]에 의해 정제하여 무색 오일로서의 시스 이성질체 (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (1.66 g), 및 무색 오일로서의 트랜스 이성질체 (3R,5R)-/(3S,5S)-5-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (1.52 g)을 수득하였다.
Figure pct00102
단계 3-a: (3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 제조
MeOH (4.5 mL) 및 물 (3 mL) 중 (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 (1.66 g, 5.70 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (1.5 mL, 9.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 혼합물을 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜, 시스 이성질체 (3R,5S)- 및 (3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (1.36 g)을 무색 오일로서 수득하였고, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00103
단계 3-b: (3R,5R)-/(3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산 [트랜스 이성질체]의 제조
MeOH (4.5 mL) 및 물 (3 mL) 중 (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 (1.55 g, 5.32 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (1.5 mL, 9.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜, 트랜스 이성질체 (3R,5R)- 및 (3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (1.22 g)을 무색 오일로서 수득하였고, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00104
(3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-메톡시피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00105
단계 1: (3R,4S)-벤질-3-메톡시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
DMF (25 mL) 중 (3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.3 g, 21.43 mmol)의 용액에 조심스럽게 수소화나트륨 (광유 중 60 중량%, 1.714 g, 42.9 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물에 메틸 아이오다이드 (4.29 mL, 68.6 mmol)를 30 분에 걸쳐 천천히 첨가하고, 교반을 25℃에서 추가로 18 시간 동안 계속하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (10 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (3R,4S)-벤질-3-메톡시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.0 g)를 수득하였다.
Figure pct00106
단계 2: (3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-메톡시피롤리딘-3-카르복실산의 제조
사염화탄소 (20 mL), 물 (20 mL) 및 아세토니트릴 (20 mL) 중 (3R,4S)-벤질-3-메톡시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (5 g, 19.13 mmol), 삼염화루테늄 (4.99 g, 19.13 mmol), 과아이오딘산나트륨 (16.37 g, 77 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (200 mL) 및 물 (200 mL)로 희석하고, 여과하여 슬러를 제거하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (2x 200 mL)으로 세척하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 아세톤 (50 mL) 중에 용해시키고, 삼산화크로뮴 (3.05 g, 30.5 mmol) 및 1N 수성 황산 용액 (50 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (2x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3R,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-메톡시피롤리딘-3-카르복실산 (2.7 g)을 수득하였다.
Figure pct00107
(3R,5R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00108
단계 1: (2R,4R)-4-(tert-부틸-디페닐-실라닐옥시)-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르의 제조
디클로로메탄 (35 mL) 중 (2R,4R)-4-히드록시-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (5.0 g, 20.22 mmol)의 용액에 이미다졸 (2.34 g, 34.4 mmol) 및 tert-부틸클로로디페닐실란 (5.71 mL, 22.24 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하고, 셀라이트의 박층을 통해 여과하였다. 여과물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (2R,4R)-4-(tert-부틸-디페닐-실라닐옥시)-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (10.9 g)를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00109
단계 2: (2R,4R)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (100 mL) 중 (2R,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (10.0 g, 20.68 mmol)의 용액에 수소화붕소나트륨 (1.564 g, 41.4 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 2 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 포화 수성 염화암모늄 용액 (5 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물, 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하여 (2R,4R)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.0 g)를 수득하였다.
Figure pct00110
단계 3: (2R,4R)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (25 mL) 중 (2R,4R)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (5.0 g, 10.97 mmol)의 용액에 조심스럽게 수소화나트륨 (0.316 g, 13.17 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물에 메틸 아이오다이드 (1.372 mL, 21.95 mmol)를 첨가하고, 교반을 23℃에서 183 시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 수성 포화 염화암모늄 용액 (10 mL) 및 EtOAc (100 mL)로 조심스럽게 희석하였다. 혼합물을 물 (2x 50 mL) 및 염수 (2x 100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 (2R,4R)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (4.7 g)를 수득하였다.
Figure pct00111
단계 4: (2R,4R)-tert-부틸 4-히드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (30 mL) 중 (2R,4R)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (4.60 g, 9.79 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (2.56 g, 9.79 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 23℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 400 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (2R,4R)-tert-부틸 4-히드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.0 g)를 수득하였다.
Figure pct00112
단계 5: (2R,4S)-tert-부틸 4-(4-메톡시벤조일옥시)-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
닫힌 바이알 중 (2R,4R)-tert-부틸 4-히드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1 g, 4.32 mmol), p-아니스산 (0.789 g, 5.19 mmol), N1,N1,N2,N2-테트라메틸디아젠-1,2-디카르복스아미드 (0.744 g, 4.32 mmol), 벤젠 (20 mL) 및 트리부틸 포스핀 (1.60 mL, 6.49 mmol)의 혼합물을 60℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (2R,4S)-tert-부틸 4-(4-메톡시벤조일옥시)-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.2 g)를 수득하였다.
Figure pct00113
단계 6: (2R,4S)-tert-부틸 4-히드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (20 mL) 중 (2R,4S)-tert-부틸 4-(4-메톡시벤조일옥시)-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.2 g, 3.28 mmol)의 용액에 3N 수성 수산화나트륨 용액 (20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 물 (50 mL)로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc (2x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (50 mL), 염수 (2x 100 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (2R,4S)-tert-부틸 4-히드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (600 mg)를 수득하였다.
Figure pct00114
단계 7: (2R,4S)-tert-부틸 2-(메톡시메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
디클로로메탄 (10 mL) 중 (2R,4S)-tert-부틸 4-히드록시-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (600 mg, 2.59 mmol), N,N-디이소프로필-N-에틸아민 (0.544 mL, 3.11 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (357 mg, 3.11 mmol)의 혼합물을 23℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (2R,4S)-tert-부틸 2-(메톡시메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (650 mg)를 수득하였다.
Figure pct00115
단계 8: (2R,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
DMF (15 mL) 중 (2R,4S)-tert-부틸 2-(메톡시메틸)-4-(메틸술포닐옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (910 mg, 2.94 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 시아나이드 (948 mg, 3.53 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (2x) 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (2R,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (250 mg)를 수득하였다.
Figure pct00116
단계 9: (3R,5R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카르복실산의 제조
닫힌 바이알 중 (2R,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-(메톡시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (250 mg, 1.040 mmol), 6N 수성 수산화나트륨 용액 (5.72 mL, 34.3 mmol) 및 EtOH (7 mL)의 혼합물을 85℃에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5까지 산성화시키고, 디클로로메탄 (3x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc 중에 용해시켰다. 유기 층을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3R,5R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-(메톡시메틸)피롤리딘-3-카르복실산 (210 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00117
1-(벤질옥시카르보닐)-5-플루오로피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 합성
Figure pct00118
단계 1: 1-벤질-5-히드록시피페리딘-3-카르복실산의 제조
MeOH (48 mL) 및 물 (24 mL) 중 5-히드록시피페리딘-3-카르복실산 (3 g, 20.67 mmol) 및 탄산칼륨 (4.41 g, 31.9 mmol)의 혼합물에 MeOH (2.00 mL) 중 벤질 브로마이드 (2.58 mL, 21.70 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 약 3 시간 동안 교반하였다. 휘발성 용매를 감압 하에 제거하고, 1N 수성 히드로클로라이드 용액 (약 100 mL)을 사용하여 나머지 용액을 조심스럽게 산성화시켰다. 수용액을 감압 하에 농축 건조시켰다. 잔류물을 MeOH (약 50 mL) 중에 현탁시키고, 여과하였다. 여과물에 MeOH 중 나트륨 메톡시드 (25 중량%, 6.8 g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 약 18 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 1-벤질-5-히드록시피페리딘-3-카르복실산을 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00119
단계 2: 메틸 1-벤질-5-히드록시피페리딘-3-카르복실레이트의 제조
클로로트리메틸실란 (17.11 mL, 134 mmol)을 MeOH (90 mL) 중 조 1-벤질-5-히드록시피페리딘-3-카르복실산 (4.5 g, 19.13 mmol)의 용액에 천천히 첨가하였다. 혼합물을 약 18 시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, 30 분, EtOAc/헵탄 = 20/80에서 70/30]에 의해 정제하여 메틸 1-벤질-5-히드록시피페리딘-3-카르복실레이트 (3.37 g, 71 %, 2 단계에 걸침)를 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00120
단계 3: (3S,5R)-/(3R,5S)-메틸 1-벤질-5-플루오로피페리딘-3-카르복실레이트 [시스 이성질체] 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-메틸 1-벤질-5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실레이트 [시스 이성질체]의 혼합물의 제조
-78℃에서 DCM (32 mL) 중 메틸 1-벤질-5-히드록시피페리딘-3-카르복실레이트 (2 g, 8.02 mmol)에 DAST (2.12 mL, 16.04 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 약 16 시간에 걸쳐 실온으로 천천히 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액으로 희석하였다. 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (2x)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40g, 30 분, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 메틸 1-벤질-5-플루오로피페리딘-3-카르복실레이트 [시스 이성질체] 및 메틸 1-벤질-5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실레이트 [시스 이성질체]의 혼합물 (1.80 g)을 약간 오렌지색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00121
단계 4: 메틸 5-플루오로피페리딘-3-카르복실레이트 아세트산 염 [시스 이성질체] 및 메틸 5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실레이트 아세트산 염 [시스 이성질체]의 혼합물의 제조
아세트산 (14 mL) 중 메틸 1-벤질-5-플루오로피페리딘-3-카르복실레이트 [시스 이성질체] 및 메틸 1-벤질-5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실레이트 [시스 이성질체]의 혼합물 (1.8 g, 7.16 mmol)에 Pd/C (10 중량%, 170 mg) 및 산화백금 (IV) (240 mg, 1.057 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 강철 용기에서 약 16 시간 동안 수소화시켰다 (압력: 1400 psi). 촉매를 셀라이트를 통해 여과하고, 투명한 용액을 감압 하에 농축시켜 메틸 5-플루오로피페리딘-3-카르복실레이트 아세트산 염 [시스 이성질체] 및 메틸 5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실레이트 아세트산 염 [시스 이성질체]의 조 혼합물을 약간 황색빛 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00122
단계 5: (3R,5S)-/(3S,5R)-5-플루오로-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체] 및 (3R,5R)/(3S,5S)-5-플루오로메틸-피롤리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (15 mL) 중 조 메틸 5-플루오로피페리딘-3-카르복실레이트 (1.584 g, 7.16 mmol) 아세트산 염의 혼합물에 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%, 약 7 mL)을 pH 약 8-9까지 첨가하였다. 벤질 클로로포르메이트 (1.145 mL, 8.02 mmol)를 천천히 첨가하고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, EtOAc로 희석하였다. 분리된 유기 상을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (2x)으로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, 16 분, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 분획 1: 1.005 g (이성질체 비율: 약 90:10); 분획 2: 459 mg (이성질체 비율: 약 50:50)을 수득하였다. 분획 2를 DMSO 중에 용해시키고, HPLC [약 50 mg/DMSO 1 mL]로 정제하였다. P1 및 P2의 분획을 수집하고, 동결건조시켜 1-벤질 3-메틸 5-플루오로피페리딘-1,3-디카르복실레이트의 시스 이성질체 및 트랜스 이성질체를 무색 오일로서 수득하였다.
분획 1/ 분획 P1: 5-플루오로-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체]
Figure pct00123
분획 P2: 5-플루오로메틸-피롤리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체]
Figure pct00124
단계 6: (3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-플루오로피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 제조
MeOH (10 mL) 중 분획 1 (5-플루오로-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체]; 500 mg, 1.693 mmol)의 용액에 2N 수성 수산화나트륨 용액 (10 mL)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 약 10 분 동안 교반하였다. 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 혼합물을 산성화시키고, 휘발성 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 EtOAc로 희석하였다. 분리된 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-플루오로피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 조 혼합물 (487 mg)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00125
(3S,5S)-/(3R,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 합성
Figure pct00126
MeOH (8 mL) 중 분획 P2 (5-플루오로메틸-피롤리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체]; 70 mg, 0.237 mmol)의 용액에 2N 수성 수산화나트륨 용액 (8 mL)을 천천히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 약 5 분 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 부분적으로 농축시키고, 1N 수성 히드로클로라이드 용액으로 산성화시키고, EtOAc로 희석하였다. 분리된 수성 층을 EtOAc (2x)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3S,5S)-/(3R,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(플루오로메틸)피롤리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 조 혼합물 (56 mg)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00127
(3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00128
단계 1: 메틸 5-(트리플루오로메틸)니코티네이트의 제조
MeOH (10 mL) 중 5-(트리플루오로메틸)니코틴산 (1.0 g, 5.08 mmol)의 용액에 티오닐 클로라이드 (0.926 mL, 12.69 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 45℃에서 18 시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 메틸 5-(트리플루오로메틸)니코티네이트 (736 mg)를 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00129
단계 2: 메틸 5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (11 mL) 중 메틸 5-(트리플루오로메틸)니코티네이트 (736 mg, 3.59 mmol), Pd/C (10 중량%, 36 mg) 및 산화백금 (IV) (52.5 mg, 0.231mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 20 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, MeOH (50 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 메틸 5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (936 mg; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00130
단계 3: (3R,5S)-/(3S,5R)-5-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체] 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-5-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [트랜스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (15 mL) 중 조 메틸 5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (953 mg, 3.61 mmol), 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%; 5.13 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (0.58 mL, 4.04 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수 용액으로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 30/70]에 의해 정제하여 백색 고체로서의 시스 이성질체 (3R,5S)-/(3S,5R)-5-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (296 mg), 및 오일로서의 트랜스 이성질체 (3R,5R)-/(3S,5S)-5-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (240 mg)을 수득하였다.
Figure pct00131
단계 4-a: (3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 제조
MeOH (0.9 mL) 및 물 (0.6 mL) 중 시스 이성질체 (3R,5S)-/(3S,5R)-1-벤질 3-메틸 5-(트리플루오로메틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (296 mg, 0.857 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (0.3 mL, 1.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1 시간 동안 교반하고 감압하에 약 0.5 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드 용액을 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜, (3R,5S)- 및 (3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산 (254 mg)의 혼합물을 무색 오일로서 수득하였고, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00132
단계 4-b: (3R,5R)-/(3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산 [트랜스 이성질체]의 제조
MeOH (0.75 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 트랜스 이성질체 (3R,5R)-/(3S,5S)-1-벤질 3-메틸 5-(트리플루오로메틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (1.55 g, 5.32 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (0.25 mL, 1.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고 감압하에 약 0.5 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드를 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3R,5R)-/(3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (218 mg)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00133
(3R,6S)-/(3S,6R)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-메틸피페리딘-3-카르복실산 및 (3R,6R)-/(3S,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-메틸피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00134
단계 1: 메틸 6-메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (16 mL) 중 메틸 6-메틸니코티네이트 (1.52 g, 10 mmol), Pd/C (10 중량%, 100 mg) 및 산화백금 (IV) (150 mg, 0.661 mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, MeOH (150 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜, 조 메틸 6-메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (2.5 g; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00135
단계 2: (3R,6S)-/(3S,6R)-6-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체] 및 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [트랜스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (40 mL) 중 조 메틸 6-메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (2.33 g, 10 mmol), 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%; 20 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (1.431 mL, 10.03 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 120 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 40/60]에 의해 정제하여 무색 오일로서의 시스 이성질체 (3R,6S)-/(3S,6R)-6-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (1.74 g), 및 고체로서의 트랜스 이성질체 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (0.725 g)을 수득하였다.
Figure pct00136
단계 3-a: (3R,6S)-/(3S,6R)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-메틸피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 제조
MeOH (4.5 mL) 및 물 (3 mL) 중 시스 이성질체 (3R,6S)-/(3S,6R)-6-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 (1.55 g, 4.84 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (1.5 mL, 9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드를 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜, (3R,6S)- 및(3S,6R)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-메틸피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (1.56 g)을 무색 오일로서 수득하였고, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00137
단계 3-b: (3R,6R)-/(3S,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-메틸피페리딘-3-카르복실산 [트랜스 이성질체]의 제조
MeOH (3 mL) 및 물 (2 mL) 중 트랜스 이성질체 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 (884 mg, 3.03 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (1.0 mL, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드를 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3R,6R)-/(3S,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-메틸피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (870 mg)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00138
4-(tert-부톡시카르보닐)-1,4-옥사제판-6-카르복실산의 합성
Figure pct00139
단계 1: tert-부틸 6-메틸렌-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트의 제조
DMF (50 mL) 중 수소화나트륨 (광유 중 60 중량%, 2.464 g, 61.6 mmol)에 3-클로로-2-(클로로메틸)프로프-1-엔 (3.5 g, 28.0 mmol)을 약 5℃ (빙조)에서 첨가하고, 테트라히드로푸란 (50 mL) 중 tert-부틸(2-히드록시에틸)카르바메이트 (4.51 g, 28.0 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 내지 30℃에서 약 2 시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시켜 테트라히드로푸란을 제거하였다. 생성된 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 tert-부틸 6-메틸렌-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트 (4 g)를 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00140
단계 2: tert-부틸 6-(히드록시메틸)-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (15 mL) 중 tert-부틸 6-메틸렌-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트 (3.2 g, 15.0 mmol)의 용액에 보란 테트라히드로푸란 (테트라히드로푸란 중 1M 용액, 13.50 mL)을 25℃에서 시린지를 통해 첨가하였다. 무색 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 3N 수성 수산화나트륨 용액 (5 mL, 15.00 mmol) 및 수성 과산화수소 (약 30 중량%, 2 mL, 19.6 mmol)를 순차적으로 첨가하였다. 수득한 백색 탁한 혼합물을 밤새 교반하고, 펜탄으로 희석하였다. 분리된 유기 층을 탄산칼륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 tert-부틸 6-(히드록시메틸)-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트 (2.6 g)를 무색 오일로서 수득하였다.
단계 3: tert-부틸 6-포르밀-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트의 제조
(15 mL) 중 tert-부틸 6-(히드록시메틸)-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트 (0.9 g, 3.89 mmol)의 용액에 데스-마르틴 퍼아이오디난 (1.650 g, 3.89 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 약 64 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (60 mL)으로 희석하고, 물, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 6-포르밀-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트 (0.45 g)를 거의 무색의 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 반응에 사용하였다.
단계 4: 4-(tert-부톡시카르보닐)-1,4-옥사제판-6-카르복실산의 제조
tert-부탄올 (5 mL) 중 tert-부틸 6-포르밀-1,4-옥사제판-4-카르복실레이트 (0.45 g, 1.963 mmol)의 혼합물에 0℃에서 물 (1 mL) 중 아염소산나트륨 (0.231 g, 2.55 mmol) 및 인산이수소나트륨 (0.306 g, 2.55 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 약 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 4-(tert-부톡시카르보닐)-1,4-옥사제판-6-카르복실산 (0.73 g)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00141
1-(tert-부톡시카르보닐)아제판-3-카르복실산의 합성
Figure pct00142
단계 1: 에틸 3-(알릴아미노)프로파노에이트의 제조
EtOH (50 mL) 중 알릴 아민 (2.62 mL, 35.0 mmol)의 용액에 25℃에서 에틸 아크릴레이트 (3.81 mL, 35.0 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 아르곤 하에 약 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 에틸 3-(알릴아미노)프로파노에이트 (5.5 g)를 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 2: 에틸 3-(알릴(tert-부톡시카르보닐)아미노)프로파노에이트의 제조
디클로로메탄 (50 mL) 중 에틸 3-(알릴아미노)프로파노에이트 (5.50 g, 35.0 mmol)의 용액에 순차적으로 디이소프로필아민 (6.11 mL, 35.0 mmol), DMAP (0.428 g, 3.50 mmol) 및 디-tert-부틸 디카르보네이트 (8.13 mL, 35 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 하에 실온에서 약 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 에틸 3-(알릴(tert-부톡시카르보닐)아미노)프로파노에이트 (9.12 g)를 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00143
단계 3: 에틸 2-((알릴(tert-부톡시카르보닐)아미노)메틸)펜트-4-에노에이트의 제조
테트라히드로푸란 (20 mL) 중 에틸 3-(알릴(tert-부톡시카르보닐)아미노)프로파노에이트 (2 g, 7.77 mmol)의 용액에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 (8.55 mL, 8.55 mmol)를 -78℃에서 천천히 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반하고, 알릴 아이오다이드 (0.787 mL, 8.55 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온되도록 하고, 교반을 16 시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 에틸 2-((알릴(tert-부톡시카르보닐)아미노)메틸)펜트-4-에노에이트 (2.15 g)를 갈색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00144
단계 4: 2,3,4,7-테트라히드로-아제핀-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르의 제조
아르곤 하에 디클로로메탄 (400 mL) 중 조 에틸 2-((알릴(tert-부톡시카르보닐)아미노)메틸)펜트-4-에노에이트 (2.15 g, 7.23 mmol)의 용액에 비스(트리시클로헥실포스핀)벤질리딘 루테늄(IV)클로라이드 (그럽스 I 촉매; 0.605 g, 0.723 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 (45 내지 65℃ 오일조 온도) 하에 약 5 시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 30/70]에 의해 정제하여 2,3,4,7-테트라히드로-아제핀-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (1.84 g)를 흑색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00145
단계 5: 아제판-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르의 제조
MeOH (40 mL) 및 테트라히드로푸란 (10 mL) 중 2,3,4,7-테트라히드로-아제핀-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (1.6 g, 5.94 mmol)의 용액에 Pd/C (10 중량%, 0.632 g)를 첨가하였다. 혼합물을 수소 (풍선) 하에 약 60 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 20/80]에 의해 정제하여 아제판-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (0.6 g)를 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 6: 1-(tert-부톡시카르보닐)아제판-3-카르복실산의 제조
테트라히드로푸란 (8 mL) 중 아제판-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-에틸 에스테르 (0.6 g, 2.211 mmol)의 용액에 1N 수성 수산화리튬 용액 (2.65 mL, 2.65 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반한 다음, 55℃로 16 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (10 mL)으로 희석하고, 1N 수성 수산화나트륨 용액 (2x 20 mL)으로 추출하였다. 수성 추출물을 10 % 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5까지 산성화시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 1-(tert-부톡시카르보닐)아제판-3-카르복실산 (0.4 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
Figure pct00146
1-벤질-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00147
단계 1: 1-페닐-N-(프로판-2-일리덴)메탄아민의 제조
아세톤 (4.65 g, 80 mmol) 및 염기성 알루미나 (15 g)의 잘 혼합된 혼합물에 부드러운 진탕 하에 벤질아민 (8.57 g, 80 mmol) 및 염기성 알루미나 (20 g)의 예비혼합된 혼합물을 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5 분 동안 손으로 진탕하고, 약 1.5 일 동안 정치시켰다. 혼합물을 디클로로메탄 (3x 15 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 60℃에서 고진공하에 1 일 동안 추가로 건조시켜, 조 1-페닐-N-(프로판-2-일리덴)메탄아민 (6.3 g)을 담황색 오일로서 수득하였고, 이를 직접 후속 단계에 사용하였다.
Figure pct00148
단계 2: N-벤질-2-메틸펜트-4-엔-2-아민의 제조
디에틸에테르 (20 mL) 중 1-페닐-N-(프로판-2-일리덴)메탄아민 (1.472 g, 10 mmol)의 용액에 알릴마그네슘 브로마이드 (테트라히드로푸란 중 1M 용액, 22 mL)를 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1 시간 동안 교반하고, 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액으로 희석하고, 분리된 수성 층을 디에틸에테르로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 N-벤질-2-메틸펜트-4-엔-2-아민 (1.75 g)을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
Figure pct00149
단계 3: 에틸 2-((벤질(2-메틸펜트-4-엔-2-일)아미노)메틸)아크릴레이트의 제조
아세토니트릴 (4 mL) 중 N-벤질-2-메틸펜트-4-엔-2-아민 (284 mg, 1.5 mmol)의 용액에 분말 탄산칼륨 (498 mg, 2.4 mmol) 및 에틸 2-(브로모메틸)아크릴레이트 (319 mg, 1.65 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 25/75]에 의해 정제하여 에틸 2-((벤질(2-메틸펜트-4-엔-2-일)아미노)메틸)아크릴레이트 (194 mg)를 투명한 액체로서 수득하였다.
Figure pct00150
단계 4: 에틸 1-벤질-6,6-디메틸-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-카르복실레이트의 제조
질소 분위기 하에 톨루엔 (6.5 mL) 중 에틸 2-((벤질(2-메틸펜트-4-엔-2-일)아미노)메틸)아크릴레이트 (194 mg, 0.644 mmol)의 용액에 p-톨루엔술폰산 1수화물 (135 mg, 0.708 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30 분 동안 50℃로 가열하고, (1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)-2-(이미다졸리딘일리덴)(디클로로페닐메틸렌)-(트리시클로헥실포스핀)루테늄 (제2 세대 그럽스 촉매, 27.3 mg)을 첨가하고, 55℃에서 5 시간 동안 가열을 계속하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 포화 수성 탄산나트륨 용액 (2 mL)으로 희석하고, 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 분리된 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄 = 10/90에서 25/75]에 의해 정제하여 에틸 1-벤질-6,6-디메틸-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-카르복실레이트 (117 mg)를 투명한 액체로서 수득하였다.
Figure pct00151
단계 5: 에틸 1-벤질-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실레이트의 제조
MeOH (5 mL) 중 1-벤질-6,6-디메틸-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-카르복실레이트 (117 mg, 0.428 mmol)의 용액에 마그네슘 (터닝, 41.6 mg, 1.712 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 33℃에서 5 시간 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액 (20 mL)과 디에틸에테르 (20 mL) 사이에 분배하였다. 분리된 수성 층을 디에틸에테르 (3x 10mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 에틸 1-벤질-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (115 mg)를 담황색 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 직접 사용하였다.
Figure pct00152
단계 6: 1-벤질-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실산의 제조
테트라히드로푸란 (1 mL), MeOH (1 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 1-벤질-6,6-디메틸-1,2,5,6-테트라히드로피리딘-3-카르복실레이트 (118 mg, 0.428 mmol) 및 수산화리튬 (102 mg, 4.28 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5-6까지 산성화시키고, EtOAc (5x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 1-벤질-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실산 (55 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00153
1-(tert-부톡시카르보닐)-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00154
단계 1: 메틸 6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실레이트의 제조
MeOH (1 mL) 중 메틸 1-벤질-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (55 mg, 0.210 mmol), 포름산암모늄 (66.3 mg, 1.052 mmol) 및 Pd/C (10 중량%, 물 50 중량%, 6 mg)의 혼합물을 70℃에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 여과하여 Pd/C 및 고체를 제거하였다. 여과물을 고진공 하에 농축시켜 조 메틸 6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (36 mg)를 담황색 액체로서 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 직접 사용하였다.
Figure pct00155
단계 2: 6,6-디메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-메틸 에스테르의 제조
테트라히드로푸란 (1.5 mL) 중 메틸 6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실레이트 (36.0 mg, 0.21 mmol) 및 트리에틸아민 (0.088 mL, 0.630 mmol)의 혼합물에 BOC-무수물 (0.059 mL, 0.252 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 35℃에서 밤새 교반하고, 감압 하에 농축시켜 조 6,6-디메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-메틸 에스테르 (61 mg)를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 3: 1-(tert-부톡시카르보닐)-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실산의 제조
테트라히드로푸란 (1 mL), MeOH (1 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 6,6-디메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 3-메틸 에스테르 (60 mg, 0.221 mmol) 및 수산화리튬 (5.30 mg, 0.221 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 대부분의 유기 용매를 제거하였다. 잔류물을 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5까지 산성화시키고, EtOAc (2x 20 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 1-(tert-부톡시카르보닐)-6,6-디메틸피페리딘-3-카르복실산 (21 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
1-(벤질옥시카르보닐)-6-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00156
단계 1: 에틸 6-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (30 mL) 중 에틸 6-(트리플루오로메틸)니코티네이트 (2.2 g, 10 mmol), Pd/C (10 중량%, 100 mg) 및 산화백금 (IV) (150 mg, 0.661 mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 24 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, MeOH (150 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 에틸 6-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (776 mg; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00157
단계 2: 6-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-에틸 에스테르 [4개 이성질체의 혼합물]의 제조
테트라히드로푸란 (15 mL) 중 조 에틸 6-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (766 mg, 3.4 mmol), 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%, 5 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (0.583 mL, 4.08 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 24 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 30/70]에 의해 정제하여 오일로서의 6-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-에틸 에스테르의 시스 및 트랜스 이성질체 혼합물 (826 mg)을 수득하였다.
Figure pct00158
단계 3: 1-(벤질옥시카르보닐)-6-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산 [4개 이성질체의 혼합물]의 제조
MeOH (1.8 mL) 및 물 (1.2 mL) 중 1-벤질 6-트리플루오로메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-에틸 에스테르 (823 mg, 2.38 mmol)에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (0.6 mL, 3.6 mmol)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 1.5 시간 동안 교반하고 감압하에 약 0.5 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드 용액을 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜, 1-(벤질옥시카르보닐)-6-(트리플루오로메틸)피페리딘-3-카르복실산 (782 mg, 4가지 이성질체의 혼합물)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00159
(3R,6R)-/(3S,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-에틸피페리딘-3-카르복실산 및 (3R,6S)-/(3R,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-에틸피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00160
단계 1: 메틸 6-에틸니코티네이트의 제조
테트라히드로푸란 (160 mL) 및 NMP (1 mL) 중 메틸 6-클로로니코티네이트 (5.0 g, 29.1 mmol), 제2철 아세틸아세토네이트 (1.0 g, 2.83 mmol)의 용액에 에틸마그네슘 브로마이드의 용액 (테트라히드로푸란 중 1M, 1.09 mL, 7.27 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 염화암모늄 용액으로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 분리된 유기 층을 포화 수성 염화암모늄 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 80 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 30/70]에 의해 정제하여 메틸 6-에틸니코티네이트 (2.48 g)를 오일로서 수득하였다.
단계 2: 메틸 6-에틸피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (30 mL) 중 메틸 6-에틸니코티네이트 (2.48 g, 15 mmol), Pd/C (10 중량%, 100 mg) 및 산화백금 (IV) (150 mg, 0.661 mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, MeOH (150 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜, 조 메틸 6-에틸피페리딘-3-카르복실레이트 (4.45 g; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00162
단계 3: (3R,6S)-/(3S,6R)-6-에틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체] 및 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-에틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [트랜스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (60 mL) 중 조 메틸 6-에틸피페리딘-3-카르복실레이트 (4.5 g, 15 mmol), 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%, 30 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (2.14 mL, 15 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 120 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 30/70]에 의해 정제하여 무색 오일로서의 시스 이성질체 (3R,6S)-/(3S,6R)-6-에틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (3.03 g), 및 고체로서의 트랜스 이성질체 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-에틸-피페리딘-1,3-di 카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (1.23 g)을 수득하였다.
Figure pct00163
단계 3-a: (3R,6R)-/(3S,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-에틸피페리딘-3-카르복실산 [트랜스 이성질체]의 제조
MeOH (3 mL) 및 물 (2 mL) 중 트랜스 이성질체 (3R,6R)-/(3S,6S)-1-벤질 3-메틸 6-에틸피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (1.23 g, 3.1 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (1.0 mL, 6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2.5 시간 동안 교반하고 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3R,6R)-/(3S,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-에틸피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (1.02 g)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00164
단계 3-b: (3R,6S)-/(3S,6R)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-에틸피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 제조
MeOH (3 mL) 및 물 (2 mL) 중 시스 이성질체 (3R,6S)-/(3S,6R)-1-벤질 3-메틸 6-에틸피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (0.92 g, 3.0 mmol)의 혼합물에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (1.0 mL, 6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1.5 시간 동안 교반하고 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 (3R,6S)-/(3S,6R)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-에틸피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (0.91 g)을 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00165
(3R,6S)-/(3S,6R)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-(메톡시메틸)피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00166
단계 1: 메틸 6-(히드록시메틸)니코티네이트의 제조
테트라히드로푸란 (33 mL) 및 EtOH (67 mL) 중 디메틸 피리딘-2,5-디카르복실레이트 (3.08 g, 15.78 mmol) 및 염화칼슘 (7.01 g, 63.1 mmol)의 혼합물에 수소화붕소나트륨 (1.493 g, 39.5 mmol)을 0℃에서 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음/물에 붓고, 디클로로메탄 (400 mL)으로 희석하고, 15 분 동안 격렬히 교반하였다. 분리된 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 메틸 6-(히드록시메틸)니코티네이트 (1.2 g)를 회백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00167
단계 2: 메틸 6-(클로로메틸)니코티네이트의 제조
디클로로메탄 (2 mL) 중 메틸 6-(히드록시메틸)니코티네이트 (250 mg, 1.496 mmol) 및 티오닐 클로라이드 (1 mL, 13.70 mmol)의 혼합물을 45℃에서 3 시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 (25 mL)에 녹이고, 초음파 처리하고, 감압 하에 농축시켰다. 이것을 3회 반복하고, 잔류물을 고진공 하에 건조시켜, 메틸 6-(클로로메틸)니코티네이트 (266 mg)를 수득하였으며, 이를 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00168
단계 3: 메틸 6-(메톡시메틸)니코티네이트의 제조
MeOH (2 mL) 중 메틸 6-(클로로메틸)니코티네이트 (250 mg, 1.347 mmol)의 용액에 나트륨 메톡시드 (MeOH 중 25중량%; 1 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 30 분 동안 가열하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (3x)으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 12 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하여 메틸 6-(메톡시메틸)니코티네이트 (129 mg)를 수득하였다.
Figure pct00169
단계 4: 메틸 6-(메톡시메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (10 mL) 중 메틸 6-(메톡시메틸)니코티네이트 (250 mg, 1.380 mmol) 및 산화백금 (IV) (100 mg, 0.440 mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 디클로로메탄 (50 mL)으로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 메틸 6-(메톡시메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (266 mg; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00170
단계 5: (3S,6R)-/(3R,6S)-6-메톡시메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [트랜스 이성질체] 및 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-메톡시메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (4 mL) 중 메틸 6-(메톡시메틸)피페리딘-3-카르복실레이트 (260 mg, 1.389 mmol) 및 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%; 약 4 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (0.297 mL, 2.083 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 12 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하여 트랜스 이성질체 (3S,6R)-/(3R,6S)-6-메톡시메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (256 mg) 및 시스 이성질체 (3R,6R)-/(3S,6S)-6-메톡시메틸-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (200 mg)을 수득하였다.
Figure pct00171
단계 6-a: (3S,6R)-/(3R,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-(메톡시메틸)피페리딘-3-카르복실산 [트랜스 이성질체]의 제조
MeOH (3 mL) 중 1-벤질 3-메틸 6-(메톡시메틸)피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (40 mg, 0.124 mmol)에 1N 수성 수산화나트륨 용액 (3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 12 시간 동안 교반하고, 감압하에 약 2 mL의 부피로 농축시켰다. 혼합물을 12N 히드로클로라이드를 사용하여 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3S,6R)-/(3R,6S)-1-(벤질옥시카르보닐)-6-(메톡시메틸)피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (35 mg)을 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00172
(3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-이소프로폭시피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00173
단계 1: (3R,4S)-벤질 3-이소프로폭시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
아세토니트릴 (30 mL) 중 (3R,4S)-벤질 3-히드록시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.0 g, 12.13 mmol)의 용액에 2-아이오도프로판 (20.6 g, 121 mmol) 및 산화은(I) (8.43 g, 36.4 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3R,4S)-벤질 3-이소프로폭시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (870 mg)를 수득하였다.
Figure pct00174
단계 2: (3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-이소프로폭시피롤리딘-3-카르복실산의 제조
사염화탄소 (10 mL), 물 (10 mL) 및 아세토니트릴 (10 mL) 중 (3R,4S)-벤질 3-이소프로폭시-4-비닐피롤리딘-1-카르복실레이트 (550 mg, 1.90 mmol), 삼염화루테늄 (496 mg, 1.90 mmol) 및 과아이오딘산나트륨 (1.63 g, 7.60 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (200 mL) 및 물 (200 mL)로 희석하였다. 혼합물을 여과하고, 분리된 수성 층을 디클로로메탄 (2x)으로 세척하였다. 모든 유기 층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 90/10]에 의해 정제하여 (3S,4R)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-이소프로폭시피롤리딘-3-카르복실산 (350 mg)을 수득하였다.
Figure pct00175
(3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00176
단계 1: (2S,4S)-4-(tert-부틸-디페닐-실라닐옥시)-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르의 제조
DCM (20 mL) 중 (2S,4S)-4-히드록시-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (2.54 g, 10.25 mmol)의 용액에 실온에서 이미다졸 (1.187 g, 17.43 mmol)에 이어서 tert-부틸클로로디페닐실란 (2.90 mL, 11.28 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (2S,4S)-4-(tert-부틸-디페닐-실라닐옥시)-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (4.9 g, 10.09 mmol, 98 % 수율)를 수득하였다.
Figure pct00177
단계 2: (2S,4S)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (50 mL) 중 (2S,4S)-4-(tert-부틸-디페닐-실라닐옥시)-피롤리딘-1,2-디카르복실산 1-tert-부틸 에스테르 2-메틸 에스테르 (5.6 g, 11.58 mmol)의 용액에 수소화붕소나트륨 (0.876 g, 23.16 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, EtOAc (100 mL)로 희석하였다. 혼합물을 물, 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 40 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 70/30]에 의해 정제하여 (2S,4S)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (3.9 g)를 수득하였다.
Figure pct00178
단계 3: (2S,4S)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (10 mL) 중 (2S,4S)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (1.3 g, 2.86 mmol)의 용액에 조심스럽게 수소화나트륨 (광유 중 60 중량%, 142 mg, 3.42 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물에 브로모 에틸 메틸 에테르 (0.714 g, 5.14 mmol)를 첨가하고, 교반을 25℃에서 18 시간 동안 계속하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (2S,4S)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (800 mg)를 수득하였다.
Figure pct00179
단계 4: (2S,4S)-tert-부틸 4-히드록시-2-((2-메톡시에톡시)메틸)-피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
테트라히드로푸란 (5 mL) 중 (2S,4S)-tert-부틸 4-(tert-부틸디페닐실릴옥시)-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (310 mg, 0.603 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 플루오라이드 (316 mg, 1.207 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 (2S,4S)-tert-부틸 4-히드록시-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (140 mg)를 수득하였다.
Figure pct00180
단계 5: (2S,4S)-tert-부틸 2-((2-메톡시에톡시)메틸)-4-(토실옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
피리딘 (5 mL) 중 (2S,4S)-tert-부틸 4-히드록시-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (140 mg, 0.508 mmol) 및 토실 클로라이드 (291 mg, 1.525 mmol)의 혼합물을 25℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (2x) 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 (2 mL) 중에 용해시키고, 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여, (2S,4S)-tert-부틸 2-((2-메톡시에톡시)메틸)-4-(토실옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (180 mg)를 수득하였다.
Figure pct00181
단계 6: (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-((2-메톡시에톡시)메틸)-피롤리딘-1-카르복실레이트의 제조
DMF (2 mL) 중 (2S,4S)-tert-부틸 2-((2-메톡시에톡시)메틸)-4-(토실옥시)피롤리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 0.419 mmol)의 용액에 테트라부틸암모늄 시아나이드 (343 mg, 1.26 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (123 mg)를 수득하였다.
Figure pct00182
단계 7: (3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-피롤리딘-3-카르복실산의 제조
닫힌 바이알 중 (2S,4R)-tert-부틸 4-시아노-2-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (123 mg, 0.433 mmol), 6N 수성 수산화나트륨 용액 (2 mL, 12 mmol) 및 EtOH (2 mL)의 혼합물을 85℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각되도록 하고, 1N 수성 히드로클로라이드 용액을 사용하여 pH 약 5까지 산성화시키고, 디클로로메탄 (3x 100 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc 중에 용해시켰다. 유기 층을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔]에 의해 정제하여 (3R,5S)-1-(tert-부톡시카르보닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)피롤리딘-3-카르복실산 (29 mg)을 수득하였다.
Figure pct00183
(3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메톡시피페리딘-3-카르복실산 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메톡시피페리딘-3-카르복실산의 합성
Figure pct00184
단계 1: 메틸 5-메톡시피페리딘-3-카르복실레이트 (시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)의 제조
아세트산 (18 mL) 중 메틸 5-메톡시니코티네이트 (1 g, 5.98 mmol), Pd/C (10 중량%, 90 mg) 및 산화백금 (IV) (135 mg, 0.595 mmol)의 혼합물을 강철 용기 중에서 수소 분위기 (200 psi) 하에 25℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, MeOH (100 mL)로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 농축시켜 조 메틸 5-메톡시피페리딘-3-카르복실레이트 (1.53 g; 시스 및 트랜스 이성질체의 혼합물)를 무색 오일로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00185
단계 2: (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메톡시-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [시스 이성질체] 및 (3R,5R)-/(3S,5S)-5-메톡시-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르 [트랜스 이성질체]의 제조
테트라히드로푸란 (38 mL) 중 조 메틸 5-메톡시피페리딘-3-카르복실레이트 (1.5 g, 6.06 mmol), 수성 탄산나트륨 용액 (10 중량%, 12 mL)의 혼합물에 벤질클로로포르메이트 (1.09 mL, 7.27 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 90 분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 추가로 30 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 120 g, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 50/50]에 의해 정제하여 무색 오일로서의 시스 이성질체 (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메톡시-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (441 mg), 및 무색 오일로서의 시스/트랜스 이성질체 5-메톡시-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (596 mg)을 수득하였다.
Figure pct00186
단계 3-a: (3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메톡시피페리딘-3-카르복실산 [시스 이성질체]의 제조
MeOH (1.44 mL) 및 물 (0.96 mL) 중 시스 이성질체 (3R,5S)-/(3S,5R)-5-메톡시-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 혼합물 (440 mg, 1.43 mmol)에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (0.48 mL, 2.88 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1 시간 동안 교반하고 감압하에 약 0.5 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드를 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 (3R,5S)-/(3S,5R)-1-(벤질옥시카르보닐)-5-메톡시피페리딘-3-카르복실산의 혼합물 (323 g)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00187
단계 3-b: 1-(벤질옥시카르보닐)-5-메틸피페리딘-3-카르복실산 [시스/트랜스 이성질체]의 제조
MeOH (1.95 mL) 및 물 (1.3 mL) 중 5-메톡시-피페리딘-1,3-디카르복실산 1-벤질 에스테르 3-메틸 에스테르의 시스/트랜스 이성질체의 혼합물 (596 mg, 1.94 mmol)에 6N 수성 수산화나트륨 용액 (0.65 mL, 3.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2 시간 동안 교반하고 감압하에 약 0.5 mL의 부피로 농축시켰다. 1N 히드로클로라이드를 사용하여 혼합물을 pH 약 4까지 산성화시키고, EtOAc로 희석하고, 10 분 동안 교반하였다. 분리된 유기 층을 염수 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 무색 오일로서의 1-(벤질옥시카르보닐)-5-메톡시피페리딘-3-카르복실산의 시스/트랜스 이성질체 혼합물 (530 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00188
합성 실시예:
실시예 3
(R)-1-(2-메톡시-에틸)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00189
(R)-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-카르복스아미드 (15 mg, 0.035 mmol), DMSO (0.5 mL), 탄산칼륨 (7.70 mg, 0.056 mmol) 및 1-브로모-2-메톡시에탄 (6.77 mg, 0.049 mmol)의 혼합물을 50℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, DMSO (0.5 mL)로 희석하고, 시린지 필터를 통해 여과하고, HPLC로 정제하였다. 분획을 수집하고, 동결건조시켜 (R)-1-(2-메톡시-에틸)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드 (10.4 mg)를 회백색 고체로서의 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00190
실시예 6
(S)-1-메탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00191
(S)-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)-피라진-2-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-카르복스아미드 (11 mg, 0.026 mmol), DCM (0.8 mL), 트리에틸아민 (5.34 ㎕, 0.038 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (2.4 ㎕, 0.031 mmol)의 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 휘발성 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 DMSO (0.9 mL) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하고, HPLC로 정제하였다. 분획을 수집하고, 동결건조시켜 (S)-1-메탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드 (7.4 mg)를 회백색 고체로서의 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00192
실시예 8
(S)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00193
단계 1: (S)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일) 피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
DCM (2.5 mL) 중 (S)-1-(tert-부톡시카르보닐)피페리딘-3-카르복실산 (252 mg, 1.1 mmol)의 용액에 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (147 mg, 1.1 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10 분 동안 교반하고, THF (5 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (320 mg, 1.0 mmol) 및 피리딘 (87 mg, 1.1 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 23℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물 (10 mL)로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc (2x 15 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 0/100에서 30/70]에 의해 정제하였다. 분획을 수집하고, 감압 하에 농축시켜 (S)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일) 피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다.
Figure pct00194
단계 2: (S)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 제조
디옥산 (2 mL) 중 (S)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일) 피페리딘-1-카르복실레이트 및 4M 히드로클로라이드 용액의 혼합물을 23℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (4 mL)으로 희석하고, 휘발성 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 EtOAc (3x 20 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켜 (S)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드 (300 mg)를 수득하였다.
Figure pct00195
실시예 9
(R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00196
단계 1: (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일) 피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
아세토니트릴 (1.5 mL) 및 NMP (0.5 mL) 중 (R)-1-(tert-부톡시카르보닐)피페리딘-3-카르복실산 (60.2 mg, 0.263 mmol) 및 HATU (143 mg, 0.375 mmol)의 혼합물을 약 30 분 동안 교반하였다. NMP (0.5 mL) 및 DIPEA (0.100 mL, 0.575 mmol) 중에 용해된 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (40 mg, 0.125 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밀봉된 튜브에서 70℃에서 약 16 시간 동안 가열하였다. 약 1 시간 동안 교반한 추가의 아세토니트릴 (0.6 mL) 및 NMP (0.200 mL) 중 (R)-1-(tert-부톡시카르보닐)피페리딘-3-카르복실산 (60.2 mg, 0.263 mmol), HATU (143 mg, 0.375 mmol), 및 DIPEA (0.100 mL, 0.575 mmol)를 첨가하고, 가열을 약 25 시간 동안 계속하였다. 혼합물을 EtOAc (약 40 mL)로 희석하였다. 유기 상을 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 염수로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DMSO (약 2.5 mL) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하고, HPLC로 정제하였다. 분획을 수집하고, 동결건조시켜 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (14.3 mg)를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00197
단계 2: (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 제조
MeOH (2 mL) 중 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (12 mg)의 용액에 디옥산 중 4M 히드로클로라이드 용액 (6 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 약 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, DMSO (1.3 mL) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하고, HPLC로 정제하였다. 분획을 수집하고, 동결건조시켜 (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염 (11.6 mg)으로서 수득하였다.
Figure pct00198
(R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 대안적 제조:
단계 1: (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
0℃에서 DCM (3 mL) 중 (R)-1-(tert-부톡시카르보닐)피페리딘-3-카르복실산 (495 mg, 2.158 mmol)의 용액에 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (336 mg, 2.52 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하고, THF (3 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (575 mg, 1.798 mmol) 및 피리딘 (0.204 mL, 2.52 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (300 mL)로 희석하고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (1x) 및 물 (2x)로 세척하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, EtOAc/헵탄]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (14.3 mg)를 수득하였다.
Figure pct00199
단계 2: (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 제조
(R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.798 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 히드로클로라이드 용액 (18 mL, 72.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, EtOAc (500 mL) 중에 용해시키고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (1x), 물 (2x) 및 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 24 g, DCM {1% 트리에틸아민}/MeOH = 100/0에서 92/8]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 아세토니트릴/물 (1/1) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하고, 동결건조시켜 (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드 (510 mg)를 수득하였다.
Figure pct00200
실시예 10
N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-2-메톡시-아세트아미드
Figure pct00201
DCM (0.3 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (21 mg, 0.066 mmol) 및 DIPEA (9.3 mg, 0.072 mmol)의 혼합물에 메톡시 아세틸클로라이드 (7.48 mg, 0.069 mmol)를 천천히 첨가하였다. 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 물 (0.5 mL)로 희석하고, 2 분 동안 격렬히 교반하였다. 휘발성 용매를 감압 하에 제거하고, 혼합물을 DMF (2 mL)로 희석하였다. HPLC로 정제하여 N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-2-메톡시-아세트아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염 (3 mg)으로서 수득하였다.
Figure pct00202
실시예 11
N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아세트아미드
Figure pct00203
DCM (0.3 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (21 mg, 0.066 mmol) 및 피리딘 (6.2 mg, 0.079 mmol)의 혼합물에 아세틸 클로라이드 (5.7 mg, 0.072 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 2 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 물 (0.5 mL)로 희석하였다. 휘발성 용매를 감압 하에 제거하고, 혼합물을 DMF (1.5 mL)로 희석하였다. HPLC로 정제하여 N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아세트아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염 (12 mg)으로서 수득하였다.
Figure pct00204
실시예 14
(R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(2-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드
Figure pct00205
단계 1: (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(2-플루오로벤질아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
DMSO (0.15 mL) 중 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-클로로피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (20 mg, 0.044 mmol) 및 (2-플루오로페닐)메탄아민 (22 mg, 0.177 mmol)의 혼합물을 90℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물 (0.05 mL)로 희석하였다. HPLC로 정제하여 (R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(2-플루오로벤질아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00206
단계 2: (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(2-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드의 제조
(R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(6-(2-플루오로벤질아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (트리플루오로아세트산 염)를 DCM (0.5 mL) 및 트리플루오로아세트산 (0.5 mL)의 혼합물 중에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 DMSO (0.2 mL) 중에 용해시키고, HPLC로 정제하여 (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(2-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염 (10 mg)으로서 수득하였다.
Figure pct00207
실시예 24
(R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{3-메틸-6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00208
단계 1: (3R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(3-메틸-6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트의 제조
아르곤 하에 DCM (0.50 mL) 중 (R)-1-(tert-부톡시카르보닐)피페리딘-3-카르복실산 (0.030 g, 0.133 mmol)의 용액에 0℃에서 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (0.020 mL, 0.021 g, 0.155 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하고, THF (0.50 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-5-메틸-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (0.0369 g, 0.111 mmol) 및 피리딘 (0.013 mL, 0.012 g, 0.155 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하고, 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (25 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 EtOAc (3x 25 mL)로 추출하고, 합한 유기 층을 염수 (1x 25 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 100/0]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 (3R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(3-메틸-6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)-피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.0331 g)를 수득하였다.
Figure pct00209
단계 2: (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{3-메틸-6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 제조
MeOH (0.2 mL) 중 (3R)-tert-부틸 3-(5-클로로-4-(3-메틸-6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)피페리딘-1-카르복실레이트 (33.1 mg, 0.061 mmol)의 용액에 디옥산 중 4M 히드로클로라이드 용액 (1.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 HPLC에 의해 정제하여 (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{3-메틸-6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다 (9.2 mg).
Figure pct00210
실시예 45
(S)-1-에탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00211
DCM (0.3 mL) 중 (S)-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-카르복스아미드 (20 mg, 0.05 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (10 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 23℃에서 약 2 분 동안 교반하였다. 에탄술포닐 클로라이드 (6 mg, 0.05 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밀봉된 바이알 중에서 23℃에서 45 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 DMF (2 mL) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하였다. HPLC로 정제하여 (S)-1-에탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00212
실시예 46
(S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-피페리딘-1-카르복실산 이소프로필 에스테르
Figure pct00213
DCM (0.3 mL) 중 (S)-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-카르복스아미드 (20 mg, 0.05 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (10 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 23℃에서 약 2 분 동안 교반하였다. 이소프로필 카르보노클로리데이트 (6.2 mg, 0.05 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밀봉된 바이알 중에서 23℃에서 45 분 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (0.1 mL)로 희석하고, 5 분 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 DMF (2 mL) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하였다. HPLC로 정제하여 (S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-피페리딘-1-카르복실산 이소프로필 에스테르를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00214
실시예 47
(S)-1-(2-메톡시-아세틸)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00215
DCM (0.3 mL) 중 (S)-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)피페리딘-3-카르복스아미드 (20 mg, 0.05 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (10 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 23℃에서 약 2 분 동안 교반하였다. 2-메톡시아세틸 클로라이드 (5.5 mg, 0.05 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 밀봉된 바이알 중에서 23℃에서 45 분 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (0.1 mL)로 희석하고, 5 분 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 DMF (2 mL) 중에 용해시키고, 시린지 필터를 통해 여과하였다. HPLC로 정제하여 (S)-1-(2-메톡시-아세틸)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00216
실시예 50
(1S,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00217
단계 1: (1S,3R)-3-아미노-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)시클로펜탄카르복스아미드의 제조
DCM (0.6 mL) 중 (1S,3R)-3-(tert-부톡시카르보닐아미노)시클로펜탄카르복실산 (64.5 mg, 0.28 mmol)의 용액에 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (30 mg, 0.225 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하고, THF (1.2 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (60 mg, 0.188 mmol) 및 피리딘 (16.3 mg, 0.21 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 조 tert-부틸 (1R,3S)-3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)시클로펜틸카르바메이트를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00218
단계 2: (1S,3R)-3-아미노-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)시클로펜탄카르복스아미드의 제조
조 tert-부틸 (1R,3S)-3-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일카르바모일)시클로펜틸카르바메이트에 디옥산 중 4M 히드로클로라이드 용액 (2 mL, 8.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 90 분 동안 교반하였다. 혼합물을 조심스럽게 포화 수성 중탄산나트륨 용액 (3 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, DMF (2 mL)로 희석하고, 초음파처리하고 (5 mL), 시린지 필터를 통해 여과하였다. HPLC로 정제하여 (1S,3R)-3-아미노-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)시클로펜탄카르복스아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염 (45 mg)으로서 수득하였다.
Figure pct00219
단계 3: (1S,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 제조
DCM (0.6 mL) 중 (1S,3R)-3-아미노-N-(5-클로로-4-(6-(((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)아미노)피라진-2-일)피리딘-2-일)시클로펜탄카르복스아미드 (I50B, 24 mg, 0.056 mmol) 및 트리에틸아민 (11.3 mg, 0.111mmol)의 혼합물에 메탄술포닐 클로라이드 (6.38 mg, 0.056 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 90 분 동안 교반한 후, 혼합물을 물 (0.6 mL)로 희석하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, DMF (1.4 mL)로 희석하였다. HPLC로 정제하여 (1S,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드 (12.8 mg)를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00220
실시예 57
N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-2-피리딘-3-일-아세트아미드
Figure pct00221
DCM (0.2 mL) 중 2-(피리딘-3-일)아세트산 (8.6 mg, 0.06 mmol)의 용액에 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (8.36 mg, 0.063 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 23℃에서 30 분 동안 교반하였다. 이 혼합물에 THF (0.4 mL) 중 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (20 mg, 0.06 mmol) 및 트리에틸아민 (0.012 mL)의 용액을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 23℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (0.2 mL)로 희석하고, 2 분 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 DMF (2 mL) 중에 용해시키고, 5 분 동안 초음파처리하였다. 혼합물을 시린지 필터를 통해 여과하고, HPLC로 정제하였다. 분획을 수집하고, 동결건조시켜 N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-2-피리딘-3-일-아세트아미드를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00222
실시예 59
테트라히드로-피란-4-카르복실산 (4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-5-트리플루오로메틸-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00223
단계 1: 4-아이오도-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민의 제조
NMP (2 mL) 중 2-클로로-4-아이오도-5-(트리플루오로메틸)피리딘 (600 mg, 1.952 mmol) 및 아세트산암모늄 (2.29 g, 29.7 mmol)의 혼합물을 110℃에서 17 시간 동안 가열한 다음, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc로 추출하고, 합한 유기 층을 물 (3x) 및 염수 (3x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 50/50]에 의해 정제하여 4-아이오도-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (215 mg)을 수득하였다.
단계 2: 4-(6-클로로피라진-2-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민의 제조
DME (4 mL) 및 2M 수성 탄산나트륨 용액 (2 mL) 중 4-아이오도-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (181 mg, 0.628 mmol) 및 2-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진 (453 mg, 1.884 mmol)의 용액에 PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (51.3 mg, 0.063 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 2 시간 동안 가열한 다음, 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하였다. 분리된 유기 층을 1M 수성 수산화나트륨 용액 (1x), 물 (1x) 및 염수 (2x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 50/50]에 의해 정제하여 4-(6-클로로피라진-2-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (98 mg)을 수득하였다.
Figure pct00224
단계 3: 6-(2-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
4-(6-클로로피라진-2-일)-5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-아민 (98 mg, 0.357 mmol), (테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 (45.2 mg, 0.393 mmol), DIPEA (0.093 mL, 0.535 mmol), 및 DMSO (0.2 mL)의 혼합물을 110℃에서 22 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 (1x) 및 염수 (2x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure pct00225
단계 4: 테트라히드로-피란-4-카르복실산 (4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-5-트리플루오로메틸-피리딘-2-일)-아미드의 제조
DCM (0.5 mL) 중 6-(2-아미노-5-(트리플루오로메틸)피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (14 mg, 0.040 mmol) 및 피리딘 (4.17 ㎕, 0.052 mmol)의 혼합물에 테트라히드로-2H-피란-4-카르보닐 클로라이드 (6.48 mg, 0.044 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 동결건조시켜 테트라히드로-피란-4-카르복실산 (4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-5-트리플루오로메틸-피리딘-2-일)-아미드 (5.9 mg)를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00226
실시예 60
N-(5-메틸-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-이소부티르아미드
Figure pct00227
단계 1: 4-아이오도-5-메틸피리딘-2-아민의 제조
NMP (3 mL) 중 2-플루오로-4-아이오도-5-메틸피리딘 (758 mg, 3.20 mmol) 및 아세트산암모늄 (5.0 g, 64.9 mmol)의 혼합물을 110℃에서 6 일 동안 가열한 다음, 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc 및 물로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 (3x) 및 염수 (2x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 50/50]에 의해 정제하여 4-아이오도-5-메틸피리딘-2-아민 (60 mg)을 수득하였다.
단계 2: 4-(6-클로로피라진-2-일)-5-메틸피리딘-2-아민의 제조
DME (1 mL) 및 2M 수성 탄산나트륨 용액 (0.5 mL) 중 4-아이오도-5-메틸피리딘-2-아민 (60 mg, 0.256 mmol), 2-클로로-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진 (247 mg, 1.025 mmol)의 용액에 PdCl2(dppf) CH2Cl2 부가물 (20.94 mg, 0.026 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 100℃에서 5 시간 동안 가열하고, 이어서 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하였다. 혼합물을 1M 수성 수산화나트륨 용액 (1x), 물 (1x) 및 염수 (2x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 4-(6-클로로피라진-2-일)-5-메틸피리딘-2-아민 (64 mg)을 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 3: 6-(2-아미노-5-메틸피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민의 제조
조 4-(6-클로로피라진-2-일)-5-메틸피리딘-2-아민 (55 mg, 0.25 mmol), (테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄아민 (57.6 mg, 0.500 mmol), DIPEA (0.087 mL, 0.500 mmol), 및 DMSO (0.2 mL)의 혼합물을 110℃에서 18 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc 및 물로 희석하였다. 분리된 유기 층을 물 (3x) 및 염수 (2x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, MeOH/DCM = 2/98에서 10/90]에 의해 정제하여 6-(2-아미노-5-메틸피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (31 mg)을 수득하였다.
Figure pct00228
단계 4: N-(5-메틸-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-이소부티르아미드의 제조
DCM (0.2 mL) 중 6-(2-아미노-5-메틸피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (8.0 mg, 0.027 mmol) 및 피리딘 (6.48 ㎕, 0.080 mmol)의 혼합물에 이소부티릴 클로라이드 (3.10 ㎕, 0.029 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 4 시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 동결건조시켜 N-(5-메틸-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-이소부티르아미드 (1.7 mg)를 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00229
실시예 64
(3R,4S)-4-플루오로-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
Figure pct00230
단계 1: (3R,4S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-4-플루오로-피롤리딘-1-카르복실산 벤질 에스테르의 제조
DCM (25 mL) 중 (3R,4S)-1-(벤질옥시카르보닐)-4-플루오로피롤리딘-3-카르복실산 (109 mg, 0.407 mmol) 및 1-클로로-N,N,2-트리메틸프로프-1-엔-1-아민 (71 mg, 0.532 mmol)의 혼합물을 밀봉된 튜브 중에서 0℃에서 30 분 동안 교반하였다. 혼합물을 6-(2-아미노-5-클로로피리딘-4-일)-N-((테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸)피라진-2-아민 (100 mg, 0.313 mmol) 및 피리딘 (49.5 mg, 0.625 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, EtOAc (30 mL)로 희석하고, 물 (3x) 및 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 [실리카 겔, 12 g, EtOAc/헵탄 = 25/75에서 75/25]에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 감압 하에 농축시켜 (3R,4S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-4-플루오로-피롤리딘-1-카르복실산 벤질 에스테르 (81 mg)를 회백색 고체로서 수득하였다.
Figure pct00231
단계 2: (3R,4S)-4-플루오로-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드의 제조
메탄올 (5 mL) 중 (3R,4S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-4-플루오로-피롤리딘-1-카르복실산 벤질 에스테르 (18 mg, 0.032 mmol) 및 Pd/C (10 중량%, 2 mg)의 혼합물을 실온에서 수소 분위기 (풍선) 하에 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 층을 통해 여과하고, EtOAc (5 mL)로 세척하였다. 여과물을 EtOAc (30 mL)로 희석하고, 물 (3x) 및 염수 (1x)로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 HPLC에 의해 정제하였다. 분획을 합하고, 동결건조시켜 (3R,4S)-4-플루오로-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드 (8 mg)를 회백색 고체로서의 그의 트리플루오로아세트산 염으로서 수득하였다.
Figure pct00232
하기 표 1에 상기 요약된 절차를 이용하면서 적절한 출발 물질을 사용함으로써 제조된 화합물의 목록을 제공하였다.
Figure pct00233
Figure pct00234
Figure pct00235
Figure pct00236
Figure pct00237
Figure pct00238
Figure pct00239
Figure pct00240
Figure pct00241
Figure pct00242
Figure pct00243
Figure pct00244
Figure pct00245
Figure pct00246
Figure pct00247
Figure pct00248
하기 표 2에 대표적인 화합물의 1H NMR 데이터를 제공하였다.
Figure pct00249
Figure pct00250
하기 표 3의 화합물을 상기 요약된 절차에 따르면서 적절한 출발 물질을 사용함으로써 제조할 수 있었다.
Figure pct00251
Figure pct00252
Figure pct00253
Figure pct00254
Figure pct00255
Figure pct00256
Figure pct00257
Figure pct00258
Figure pct00259
Figure pct00260
Figure pct00261
Figure pct00262
Figure pct00263
Figure pct00264
Figure pct00265
Figure pct00266
Figure pct00267
Figure pct00268
Figure pct00269
Figure pct00270
Figure pct00271
Figure pct00272
Figure pct00273
생물학적 방법
Cdk9/시클린T1 IMAP 프로토콜
본 발명의 화합물의 생물학적 활성을 하기 기재된 검정을 이용하여 결정할 수 있다.
Cdk9/시클린T1은 밀리포어(Millipore)로부터 구입하였다 (cat # 14-685). 검정에서의 최종 총 단백질 농도는 4nM이었다. 5TAMRA-cdk7티드 펩티드 기질, 5TAMRA-YSPTSPSYSPTSPSYSTPSPS-COOH를 몰레큘라 디바이시즈(Molecular Devices)로부터 구입하였다 (cat#R7352). 펩티드 기질의 최종 농도는 100nM이었다. ATP 기질 (아데노신-5'-트리포스페이트)은 로슈 디아그노스틱스(Roche Diagnostics)로부터 구입하였다 (cat#1140965). ATP 기질의 최종 농도는 6uM이었다. IMAP (포스포화학물질에 대한 고정화 금속 검정) 점진적 결합 시약을 몰레큘라 디바이시즈로부터 구입하였다 (cat#R8139). 형광 편광 (FP)을 검출에 이용하였다. 5TAMRA-cdk7티드 펩티드를, ATP 기질을 사용하여 Cdk9/시클린T1 키나제에 의해 인산화시켰다. 포스포-5TAMRA-cdk7티드 펩티드 기질을 IMAP 점진적 결합 시약과 결합시켰다. IMAP 점진적 결합 시약의 결합은 531nm의 여기 및 595nm의 FP 방출에서 측정된 5TAMRA-cdk7티드 펩티드의 형광 편광을 변화시켰다. 검정은 100mM 트리스, pH=7.2, 10mM MgCl2, 0.05% NaN3, 0.01% 트윈-20, 1mM 디티오트레이톨 및 2.5% 디메틸 술폭시드 중에서 수행하였다. IMAP 점진적 결합 시약을 몰레큘라 디바이시즈로부터의 100% 1X 용액 A (cat#R7285) 중에 1:800으로 희석하였다.
일반적 프로토콜은 하기와 같다: cdk9/시클린T1 10 uL에, 디메틸 술폭시드 중 시험 화합물 0.5 uL를 첨가하였다. 5TAMRA-cdk7티드 및 ATP를 혼합하였다. 5TAMRA-cdk7티드/ATP 믹스 10 uL를 첨가하여 반응을 시작하였다. 반응은 4.5 시간의 동안 진행하였다. IMAP 점진적 결합 시약 60 uL를 첨가하였다. 인큐베이션 >1시간 후, 플레이트를 퍼킨-엘머(Perkin-Elmer)로부터의 엔비전(Envision) 2101 상에서 판독하였다. 검정은 흑색 코닝(Corning) 플레이트 (cat#3573)를 이용하여 384-웰 포맷으로 구동하였다.
Cdk9/시클린T1 알파 스크린 프로토콜
전장 야생형 Cdk9/시클린 T1을 인비트로젠(Invitogen)으로부터 구입하였다 (cat#PV4131). 검정에서의 최종 총 단백질 농도는 1nM이었다. cdk7티드 펩티드 기질, 비오틴-GGGGYSPTSPSYSPTSPSYSPTSPS-OH는 터프츠 대학교 코어 퍼실리티(Tufts University Core Facility)로부터 구입한 주문형 합성물이었다. cdk7티드 펩티드 기질의 최종 농도는 200 nM이었다. ATP 기질 (아데노신-5'-트리포스페이트)은 로슈 디아그노스틱스로부터 구입하였다. ATP 기질의 최종 농도는 6uM이었다. 포스포-Rpb1 CTD (ser2/5) 기질 항체는 셀 시그널링 테크놀로지(Cell Signaling Technology)로부터 구입하였다. 항체의 최종 농도는 0.67 ug/mL이었다. 공여자 및 수용자 비드를 함유하는 알파 스크린 단백질 A 검출 키트를 퍼킨엘머 라이프 사이언시즈(PerkinElmer Life Sciences)로부터 구입하였다. 공여자 및 수용자 비드 둘 모두의 최종 농도는 15ug/mL이었다. 검출을 위해 알파 스크린을 이용하였다. 비오티닐화된 cdk7티드 펩티드를 ATP 기질을 사용하여 cdk9/시클린T1에 의해 인산화시켰다. 비오티닐화된 cdk7티드 펩티드 기질을 스트렙타비딘 코팅된 공여자 비드에 결합시켰다. 항체를 단백질 A 코팅된 수용자 비드에 결합시켰다. 비오티닐화된 cdk7티드 펩티드 기질의 인산화된 형태에 항체를 결합시킴으로써 공여자 및 수용자 비드가 근접하게 되었다. 680 nm에서의 공여자 비드의 레이저 조사로 수명이 짧은 단일선 산소 분자의 유동을 일으켰다. 공여자 및 수용자 비드가 근접하여 존재하는 경우, 공여자 비드의 조사에 의해 생성되는 반응성 산소는 수용자 비드에서의 발광/형광 캐스케이드를 개시하였다. 이러한 과정은 530-620 nm 범위의 출력을 갖는 고도로 증폭된 신호를 유발하였다. 검정은 50 mM Hepes, pH=7.5, 10 mM MgCl2, 0.1% 소 혈청 알부민, 0.01% 트윈-20, 1 mM 디티올트레이톨, 2.5% 디메틸 술폭시드 중에서 수행하였다. 50mM Hepes, pH=7.5, 18mM EDTA, 0.1% 소 혈청 알부민, 0.01% 트윈-20을 사용하여 중지 및 검출 단계를 통합하였다.
일반적 프로토콜은 하기와 같다: cdk9/시클린T1 5 uL에, 디메틸 술폭시드 중 시험 화합물 0.25 uL를 첨가하였다. Cdk7티드 펩티드 및 ATP를 혼합하였다. cdk7티드 펩티드/ATP 믹스 5 uL를 첨가하여 반응을 시작하였다. 반응을 5시간 동안 진행시켰다. Ab/알파 스크린 비드/중지-검출 완충제 10uL을 첨가하였다. 알파 스크린 비드는 항상 암실에서 유지되도록 주의하였다. 플레이트를 암실에서 실온에서 밤새 인큐베이션하여 검출물이 생성되도록 한 후, 판독하였다. 검정은 백색 폴리프로필렌 그라이너(Greiner) 플레이트를 이용하여 384-웰 포맷으로 구동하였다.
하기 표 4에 나타낸 데이터를 상기 기재된 검정 중 하나를 이용하여 생성하였다.
Figure pct00274
Figure pct00275
Figure pct00276

Claims (13)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    <화학식 I>
    Figure pct00277

    상기 식에서,
    R1은 -(CH2)0-2-헤테로아릴, -(CH2)0-2-아릴, C1-8 알킬, C3-8 분지형 알킬, C3-8 시클로알킬 및 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기는 각각 독립적으로 임의로 치환되고;
    R2는 수소, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4-알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R4는 수소, 할로겐, 5 내지 7원 헤테로시클릴-R14 및 A6-L-R9로부터 선택되고;
    R5는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 히드록실, CN, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, C3-4 시클로알킬, C3-4 시클로 할로알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R7은 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, O-C1-3 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    A6은 O, SO2 및 NR8로부터 선택되고;
    L은 C0-3-알킬렌, -CHD-, -CD2-, C3-6 시클로알킬, C3-6 시클로 할로알킬, C4-7-헤테로시클로알킬, C3-8 분지형 알킬렌 및 C3-8 분지형 할로알킬렌으로부터 선택되고;
    R8은 수소, C1-4 알킬, C3-8 분지형-알킬 및 -C3-8 분지형 할로알킬로부터 선택되고;
    R9는 수소, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬, -(CH2)0-2 헤테로아릴, (CH2)0-2-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기는 임의로 치환되고;
    R14는 수소, 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-4-알킬, C3-6-분지형 알킬, C1-4-할로알킬, CF3, =O 및 O-C1-4-알킬로부터 선택된다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1이 -(CH2)0-2-헤테로아릴 및 -(CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, -F, -Cl, -OH, -C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, C3-6 분지형 할로알킬, -C3-7 시클로 알킬, -C3-7 시클로 할로알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 할로알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 할로알킬, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 할로알킬, -O-C3-7 시클로 알킬, -O-C3-7 시클로 할로알킬, -O-(CH2)1-2-C3-6 시클로알킬-R14, -O-(CH2)1-2-C4-6 헤테로시클로알킬-R14, -NH-C1-4 알킬, -NH-C2-4 할로알킬, -NH-C3-8 분지형 알킬, -NH-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C3-7 시클로 알킬, -NH-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)O-C2-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 할로알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로 할로알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-O-C2-4 할로-알킬, -C(O)-O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 할로알킬, -C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-C1-4 알킬, -C(O)C2-4 할로알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 할로알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬, -SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -SO2-C3-5 시클로알킬 및 -SO2-C3-5 시클로 할로알킬, -C(O)-NR15R16 및 -SO2-NR15R16으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 추가로 여기서 임의의 2개의 상기 치환기가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 고리를 형성할 수 있고;
    R2가 수소, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4-알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R4가 수소, 할로겐, 5 내지 7원 헤테로시클릴-R14 및 A6-L-R9로부터 선택되고;
    R5가 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, CN, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, C3-4 시클로알킬, C3-4 시클로 할로알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R7이 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, O-C1-3 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    A6이 O, SO2 또는 NR8이고;
    L이 C0-3-알킬렌, -CHD-, -CD2-, C3-6 시클로알킬, C3-6 시클로 할로알킬, C4-7-헤테로시클로알킬 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
    R8이 수소, C1-4 알킬, C3-8 분지형-알킬 및 -C3-8 분지형 할로알킬로부터 선택되고;
    R9가 수소, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬, -(CH2)0-2 헤테로아릴, (CH2)0-2-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 임의로 치환되고;
    R14가 수소, 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-4-알킬, C3-6-분지형 알킬, C1-4-할로알킬, CF3, =O 및 O-C1-4-알킬로부터 선택되고;
    R15 및 R16이 수소, 히드록실, 알킬, 분지형 알킬, 할로알킬, 분지형 할로알킬, 알콕시, 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고; 다르게는, R15 및 R16이 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 임의로 치환된 4 내지 6원 헤테로방향족 또는 비-방향족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있는
    것인 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    R1이 -(CH2)0-2-헤테로아릴 및 -(CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, F, Cl, -OH, -C1-4 알킬, -NH-C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, (CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -O-C1-4 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬, -O-(CH2)1-2-C3-6 시클로알킬-R14, -O-(CH2)1-2-C4-6 헤테로시클로알킬-R14, -SO2-NR15R16 및 -SO2-C3-5 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    R2가 수소 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R4가 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 및 A6-L-R9로부터 선택되고; 여기서 각각의 상기 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 기가 R14로 치환되고;
    R5가 수소, Cl, F 및 CF3으로부터 선택되고;
    R7이 수소, F 및 Cl로부터 선택되고;
    A6이 NR8이고;
    L이 C0-3-알킬렌, -CD2- 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
    R8이 수소 및 C1-4 알킬로부터 선택되고;
    R9가 C1-3 알킬, C3-7 시클로알킬, C4-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-4 알킬, -(CH2)-피리딜, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)-페닐로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 수소, 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, -OH, CN, =O, C(O)-CH3, -O-C1-3 알킬, -O-C1-3 할로알킬, -O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-C(O)-C1-4 알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    R14가 페닐, 할로겐, 히드록실, C1-2-알킬, CF3 및 수소로부터 선택되고;
    R15 및 R16이 수소, 히드록실, 알킬, 분지형 알킬, 할로알킬, 분지형 할로알킬, 알콕시, 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고; 다르게는, R15 및 R16이 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 임의로 치환된 4 내지 6원 헤테로방향족 또는 비-방향족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있는
    것인 화합물.
  4. 제1항에 있어서,
    R1이 C1-8 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬 및 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, -F, -OH, =O, -C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, C3-6 분지형 할로알킬, -C3-7 시클로 알킬, -C3-7 시클로 할로알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 할로알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -(CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 할로알킬, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 할로알킬, -O-C3-7 시클로 알킬, -O-C3-7 시클로 할로알킬, -O-(CH2)1-2-C3-6 시클로알킬-R14, -O-(CH2)1-2-C4-6 헤테로시클로알킬-R14, -NH-C1-4 알킬, -NH-C2-4 할로알킬, -NH-C3-8 분지형 알킬, -NH-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C3-7 시클로 알킬, -NH-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)O-C2-4 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-8 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C3-8 분지형 할로알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 할로알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 할로알킬, NH-SO2-C3-5 시클로알킬, -NH-SO2-C3-5 할로-시클로알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-O-C2-4 할로-알킬, -C(O)-O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 할로알킬, -C(O)-O-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-C1-4 알킬, -C(O)C2-4 할로알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 할로알킬, -C(O)-C3-7 시클로 알킬, -NH-C(O)-O-C3-7 시클로 할로알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 할로알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 할로알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬, -SO2-C3-8 분지형 할로알킬, -SO2-C3-5 시클로알킬 및 -SO2-C3-5 시클로 할로알킬, -C(O)-NR15R16 및 -SO2-NR15R16으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 추가로 여기서 임의의 2개의 상기 치환기가 이들이 부착되어 있는 원자와 함께 고리를 형성할 수 있고;
    R2가 수소, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4-알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R4가 수소, 할로겐, 5 내지 7원 헤테로시클릴-R14 및 A6-L-R9로부터 선택되고;
    R5가 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, CN, -O-C1-4 알킬, -O-C1-4 할로알킬, C3-4 시클로알킬, C3-4 시클로 할로알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R7이 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, O-C1-3 알킬 및 할로겐으로부터 선택되고;
    A6이 O, SO2 및 NR8로부터 선택되고;
    L이 C0-3-알킬렌, -CHD-, -CD2-, C3-6 시클로알킬, C3-6 시클로 할로알킬, C4-7-헤테로시클로알킬, C3-8 분지형 알킬렌, C3-8 분지형 할로알킬렌으로부터 선택되고;
    R8이 수소, C1-4 알킬, C3-8 분지형-알킬 및 -C3-8 분지형 할로알킬로부터 선택되고;
    R9가 수소, C1-6 알킬, C3-8 시클로알킬, C3-8 분지형 알킬, -(CH2)0-2 헤테로아릴, (CH2)0-2-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)0-2-아릴로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 임의로 치환되고;
    R14가 수소, 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-4-알킬, C3-6-분지형 알킬, C1-4-할로알킬, CF3, =O 및 O-C1-4-알킬로부터 선택되고;
    R15 및 R16이 수소, 히드록실, 알킬, 분지형 알킬, 할로알킬, 분지형 할로알킬, 알콕시, 시클로알킬 및 헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되고; 다르게는, R15 및 R16이 이들이 부착되어 있는 질소 원자와 함께 임의로 치환된 4 내지 6원 헤테로방향족 또는 비-방향족 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있는
    것인 화합물.
  5. 제1항에 있어서,
    R1이 C1-8 알킬, C3-8 분지형 알킬, C3-8 시클로알킬 및 4 내지 8원 헤테로시클로알킬 기로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 각각 독립적으로 -NH2, F, -OH, =O, -C1-4 알킬, -NH-C1-4 알킬, -C1-4 할로알킬, -C3-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-2 알킬, -NH-C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C1-4 알킬, -NH-C(O)-C3-8 분지형 알킬, -O-C3-6 분지형 알킬, -NH-C(O)O-C1-4 알킬, -NH-SO2-C1-4 알킬, -NH-SO2-C3-8 분지형 알킬, -NH-SO2-C3-5 시클로알킬, (CH2)0-2-O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -O-C1-4 알킬, -C(O)O-C3-6 분지형 알킬, -C(O)C1-4 알킬, -C(O)-O-C1-4 알킬, -C(O)-C3-8 분지형 알킬, -C(O)-CH2-O-C1-4 알킬, -SO2-C1-4 알킬, -SO2-C3-8 분지형 알킬 및 -SO2-C3-5 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    R2가 수소 및 할로겐으로부터 선택되고;
    R4가 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 및 A6-L-R9로부터 선택되고; 여기서 각각의 상기 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐 기가 R14로 치환되고;
    R5가 수소, Cl, F, 메틸 및 CF3으로부터 선택되고;
    R7이 수소, F, Cl 및 메틸로부터 선택되고;
    A6이 NR8이고;
    L이 C0-3-알킬렌, -CD2- 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
    R8이 수소 및 C1-4 알킬로부터 선택되고;
    R9가 C1-3 알킬, C3-7 시클로알킬, C4-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-4 알킬, -(CH2)-피리딜, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬, (CH2)-4 내지 8원 헤테로시클로알킬 및 (CH2)-페닐로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 수소, 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, -OH, CN, =O, C(O)-CH3, -O-C1-3 알킬, -O-C1-3 할로알킬, -O-(CH2)2-3-O-C1-2 알킬, -C(O)-C1-4 알킬 및 -NH-C(O)-C1-4 알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    R14가 페닐, 할로겐, 히드록시, C1-2-알킬 및 수소로부터 선택되는
    것인 화합물.
  6. 제1항에 있어서,
    R1이 피페리디닐, 모르폴리닐, 1-메틸피페리디닐, 테트라히드로-피란, 피롤리디닐, 테트라히드로-푸란, 아제티딘, 피롤리딘-2-온, 아제판 및 1,4-옥사제판으로부터 선택되고, 여기서 상기 R1 기가 각각 독립적으로 F, OH, NH2, CO-메틸, -NH-메틸, 에틸, 플루오로-에틸, 트리플루오로-에틸, (CH2)2-메톡시, SO2-CH3, COO-CH3, SO2-에틸, SO2-시클로프로필, 메틸, SO2-CH-(CH3)2, NH-SO2-CH3, NH-SO2-C2H5, =O, CF3, (CH2)-메톡시, 메톡시, NH-SO2-CH-(CH3)2, -(CH2)-O-(CH2)2-메톡시 및 -O-CH-(CH3)2로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    R2가 Cl 및 F로부터 선택되고;
    R4가 A6-L-R9이고;
    R5가 수소, Cl 및 메틸로부터 선택되고;
    R7이 수소, Cl 및 메틸로부터 선택되고;
    A6이 NR8이고;
    L이 C0-3-알킬렌, -CD2- 및 C3-8 분지형 알킬렌으로부터 선택되고;
    R8이 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R9가 C1-3 알킬, C4-6 분지형 알킬, -(CH2)1-3-O-C1-4 알킬, -(CH2)-피리딜, 벤질, CD2-테트라히드로-피란, 테트라히드로-피란, 테트라히드로-티오피란 1,1-디옥시드, 피페리디닐, 피롤리딘-2-온, 디옥산, 시클로프로필, 테트라히드로푸란, 시클로헥실 및 시클로헵틸로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 F, OCHF2, CO-메틸, OH, 메틸, 메톡시, CN, 에틸 및 NH-CO-메틸로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되는
    것인 화합물.
  7. 제1항에 있어서,
    R1이 피페리디닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 아제판 및 1,4-옥사제판으로부터 선택되고, 여기서 상기 R1 기가 각각 독립적으로 F, 메틸, CF3, 에틸, 플루오로-에틸, 트리플루오로-에틸, -(CH2)2-메톡시, -(CH2)-메톡시, 메톡시, =O, -(CH2)-O-(CH2)2-메톡시 및 -O-CH-(CH3)2로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    R2가 Cl이고;
    R4가 A6-L-R9이고;
    R5가 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R7이 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    A6이 NR8이고;
    L이 -CH2- 및 -CD2-로부터 선택되고;
    R8이 수소 및 메틸로부터 선택되고;
    R9가 피리딜, 벤질, 테트라히드로-피란, 디옥산 및 테트라히드로푸란으로부터 선택되고, 여기서 상기 기가 F, OH, 메틸, 에틸, 메톡시 및 CN으로부터 각각 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의로 치환되는
    것인 화합물.
  8. 제1항에 있어서,
    (S)-1-메탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (S)-1-에탄술포닐-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (S)-1-(2-메톡시-아세틸)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (S)-1-아세틸-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (1S,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (1R,3S)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (1R,3R)-3-메탄술포닐아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    [(1R,3S)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-시클로펜틸]-카르밤산 메틸 에스테르;
    [(1S,3R)-3-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일카르바모일)-시클로펜틸]-카르밤산 메틸 에스테르;
    (S)-1-(프로판-2-술포닐)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; 및
    1-메틸-5-옥소-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
    로부터 선택되는 화합물.
  9. 제1항에 있어서,
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    N-(5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-이소부티르아미드;
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(2-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드;
    테트라히드로-피란-4-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(5-플루오로-피리딘-3-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-(4-플루오로-벤질아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드;
    모르폴린-2-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{3-메틸-6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-3-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (R)-피페리딘-3-카르복실산 {5-클로로-4-[6-((R)-1-시클로헥실-에틸아미노)-피라진-2-일]-피리딘-2-일}-아미드;
    (R)-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (1R,3S)-3-아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드;
    (1R,3R)-3-아미노-시클로펜탄카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드; 및
    (3R,4S)-4-플루오로-피롤리딘-3-카르복실산 (5-클로로-4-{6-[(테트라히드로-피란-4-일메틸)-아미노]-피라진-2-일}-피리딘-2-일)-아미드
    로부터 선택되는 화합물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료 방법에 사용하기 위한 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  11. CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
  12. CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, CDK9에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료 방법.
  13. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8415381B2 (en) * 2009-07-30 2013-04-09 Novartis Ag Heteroaryl compounds and their uses
WO2012101064A1 (en) * 2011-01-28 2012-08-02 Novartis Ag N-acyl pyrimidine biaryl compounds as protein kinase inhibitors
CN103339110A (zh) * 2011-01-28 2013-10-02 诺瓦提斯公司 作为cdk9抑制剂的取代的杂-联芳基化合物及其用途
WO2014106606A1 (en) * 2013-01-05 2014-07-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Nove phenyl/pyridine series substitued by hydroxyethylamino for the treatment of cancer
WO2015037716A1 (ja) 2013-09-12 2015-03-19 住友化学株式会社 含窒素飽和複素環化合物
JO3589B1 (ar) 2014-08-06 2020-07-05 Novartis Ag مثبطات كيناز البروتين c وطرق استخداماتها
AU2017345367A1 (en) 2016-10-20 2019-04-04 Pfizer Inc. Anti-proliferative agents for treating PAH
US20220383992A1 (en) 2018-07-17 2022-12-01 Kuano Ltd. Machine learning based methods of analysing drug-like molecules
CN114787142A (zh) * 2019-12-09 2022-07-22 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 作为周期蛋白依赖性激酶9抑制剂的化合物及其应用
GB202013419D0 (en) 2020-08-27 2020-10-14 Kuano Ltd Transition state 2020
CN115381824A (zh) * 2021-05-24 2022-11-25 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 周期蛋白依赖性激酶9抑制剂的用途
CN115381823A (zh) * 2021-05-24 2022-11-25 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 一种周期蛋白依赖性激酶9抑制剂的用途
CN115448874A (zh) * 2021-06-09 2022-12-09 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 固体形式的周期蛋白依赖性激酶9抑制剂及其用途

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT72878B (en) 1980-04-24 1983-03-29 Merck & Co Inc Process for preparing mannich-base hydroxamic acid pro-drugs for the improved delivery of non-steroidal anti-inflammatory agents
DE60136731D1 (de) * 2000-09-20 2009-01-08 Ortho Mcneil Pharm Inc Pyrazine derivate als tyrosin kinase modulatoren
JP2007524596A (ja) 2003-02-28 2007-08-30 トランスフォーム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 共結晶医薬組成物
US20100048597A1 (en) * 2006-12-22 2010-02-25 Novartis Ag Organic Compounds and Their Uses

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