KR20110097462A

KR20110097462A - 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR20110097462A
Application number: KR1020100017311A
Authority: KR
Inventors: 신현규; 이호영; 이준경; 하혜경
Original assignee: 한국 한의학 연구원
Priority date: 2010-02-25
Filing date: 2010-02-25
Publication date: 2011-08-31
Also published as: WO2011105657A1

Abstract

본 발명은 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 산두근 추출물은 아토피를 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있으며, 이에 따라 상기 산두근 추출물을 아토피의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 식품 조성물 및 화장료 조성물 등 다양한 분야에 응용할 수 있다.

Description

산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법{Composition for preventing or treating of atopic diseases comprising extract of sophorae tonkinensis radix as active ingredient and method for preparation the same}

본 발명은 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

아토피는 유전적, 환경적, 면역학적 원인으로 인하여 피부의 가장 바깥에 위치한 피부 보호벽인 각질층에 이상이 생겨서 발생하는 질환이다. 아토피 소인에 의한 알레르기 질환으로 알레르기성 피부염, 알레르기성 비염, 천식, 알레르기성 결막염, 아토피성 두드러기 등이 있으며, 이들 질환은 단독으로 또는 다른 질환과 동시에 나타날 수 있다.

아토피의 정확한 병리 생리는 아직까지 완전히 이해되고 있지 않지만 유전적 소인과 함께 면역학적, 비면역학적 기전이 관여한다고 보고 있다. 아토피 피부염의 대부분을 차지하는 외인성 아토피 피부염은 IgE와 연관된 면역 기전에 의해 발생되는데 특정 allergen에 대한 즉시형 면역반응보다는 T세포 이상에 의한 지연성 면역 반응이 관여한다는 보고들이 많다. 또한, 최근에는 B세포로 부터 IgE의 생성을 유도하는 Il-4등 Th2 관련 cytokine들이 아토피의 원인이라고 보고되고 있다(JS Kang et al., Ihhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC/Nga mice. Intl Immunopharm. (2008) 8. 1475-1480).

아토피의 중증도 평가에는 증상의 유도 및 증상을 악화시키는 물질인 "TARC(thymus and activation-regulated chemokine)"의 수치를 측정하는 것이 일반적이다. TARC는 CC chemikines에 속하는 71개의 아미노산으로 구성된 단백질로 말초혈액 단핵세포, 단핵구, 대식세포, 흉선세포, 가지세포, 혈관내피세포, 기관지 내피세포에서 생산되어 사람의 T세포에 화학주성을 유발시키며, 기억 T세포 (memory T cells) 사이의 인테그린 의존성 점착성(integrin-dependent adhesion)을 유도는 물론 혈소판의 형태 변화, 교원질이나 섬유소원의 점착, 응집, 칼슘 유입 등에 영향을 준다고 알려진 물질이다. 아토피성 피부염에서는 다양한 자극에 의해 피부 각질세포 등으로부터 TARC의 생산이 유도 및 증가되며, 이때 생산된 TARC가 병변 국소 부위로 Th2 세포들을 불러들여 알러지 반응을 항진시킴으로써 아토피성 피부염의 병태가 형성되며, 증상이 악화된다고 알려져 있다(YR Pokhare et al., Sopungyangjae-Tang Inhibits Development of Dermatitis in NC/Nga Mice. eCAM (2008) 5(2) 179-180).

한편, 산두근(Sophorae Tonkinensis Radix)은 한방에서 알려진 약재 중 하나로서, 한의학적으로 소염, 해열, 간기능 보호, 항암, 항궤양, 항부정맥, 항진균 작용이 있다고 알려져 있다. 이와 관련된 특허로, 대한민국 공개번호 제10-2006-0037120호에는 산두근 추출물의 호흡기 질환에 대한 효능을 기재하고 있고, 대한민국 공개번호 제10-2006-0037120호에는 산두근 추출물의 골다공증에 대한 효능을 기재하고 있고, 미국특허 제7,381,429호에는 Sophara 종의 추출물의 호르몬 결핍에 따른 질병을 기재하고 있으나, 상기 문헌들은 산두근 추출물의 아토피에 대한 효능에 대해서는 기재하고 있지 않다.

이에 본 발명자는 다양한 약재의 추출물에 대한 연구결과, 종래 알려진 산두근의 효능과 달리, 산두근 추출물이 시험관내 실험(in vitro) 및 생체 내 실험(in vivo)에 의하여 아토피의 예방 또는 치료에 효능이 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 산두근 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 아토피의 예방 또는 치료에 유용한 조성물을 제공하기 위한 것이다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 식품 조성물 또는 화장료 조성물을 제공하기 위한 것이다.

또한, 본 발명은 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공하기 위한 것이다.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "산두근"은, 콩과에 속한 작은 관목인 광두근(Sophora subprostrata C_HUN et T. C_HEN)의 뿌리와 뿌리줄기를 의미한다.

상기 산두근은, 한방에서는 맛이 쓰고 차며 청열해독(淸熱解毒), 소종이인(消腫利咽)의 효능이 있다고 알려져 있고, 한의학적으로 소염, 해열, 간기능 보호, 항암, 항궤양, 항부정맥, 항진균 작용이 있다고 알려져 있다. 또한, 상기 산두근에 포함된 성분으로는 알카로이드(alkaloids), 플라보노이드(flavonoids) 및 카페익산(caffeic acid) 유도체 등을 함유하고 있다고 알려져 있다. 그러나, 산두근의 아토피에 대한 효능에 대해서는 알려져 있지 않다.

본 발명에서 사용되는 용어 "추출물"은, 산두근으로부터 액체의 용매를 사용하여 분리된 특정 성분을 의미한다. 상기 용매로는 물, C₁ 내지 C₄ 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 유효성분을 효율적으로 추출하기 위하여 메탄올, 에탄올 또는 이들과 물의 혼합물로 추출하는 것이 바람직하다. 메탄올과 에탄올의 농도는 10 내지 90%가 바람직하며, 50 내지 70%인 것이 보다 바람직하나 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 사용되는 용어 "아토피"는, 만성적이고 재발성의 염증성 피부질환으로 소양증(가려움증)과 피부건조증, 특징적인 습진을 동반하는 질병을 의미한다. 본 발명에 따른 산두근 추출물은 이러한 질병의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은, 상기 산두근 추출물을 포함하는 조성물의 투여로 아토피의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 또한, 본 발명에서 사용되는 용어 "치료"는, 상기 산두근 추출물을 포함하는 조성물의 투여로 아토피의 증세가 호전되거나 완치되는 모든 행위를 의미한다.

또한, 본 발명은 상기 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물을 제공한다.

상기 약학적 조성물은, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화 하여 사용될 수 있고, 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품 조성물을 제공한다.

상기 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.

또한, 상기 식품 조성물은 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 껌류, 아이스크림류, 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 중 어느 하나의 형태일 수 있다.

상기 식품 조성물은, 아토피의 예방 또는 개선용 식품 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 조형물을 이용하여 제조할 수 있는 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 제한되는 바가 없으며, 예를 들면, 화장수, 영양로션, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩 등의 제형을 가질 수 있다. 또한, 각 제형에 있어서, 산두근 추출물 외에 다른 성분들을 기타 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 따라 임의로 선정하여 배합할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 배합되는 성분에는 유지성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 산화방지제, pH 조정제, 알코올, 색소, 향료 등이 있다. 유지 성분은 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 사용할 수 있다. 보습제는 수용성 저분자 보습제, 지용성 저분자 보습제, 수용성 고분자 보습제, 지용성 고분자 보습제 등을 사용할 수 있다. 에몰리언트제로는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레트테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아린산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 예시할 수 있다. 계면활성제는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 사용할 수 있다. 알코올은 세테아릴 알코올 등을 사용할 수 있다.

상기 화장료 조성물은, 아토피의 예방 또는 개선용 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명은 산두근을 추출용매로 추출하여 추출액을 제조하는 단계; 및 상기 추출액을 건조하는 단계를 포함하는 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 용매로는 물, C₁ 내지 C₄ 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 유효성분을 효율적으로 추출하기 위하여 메탄올, 에탄올 또는 부탄올로 추출하는 것이 바람직하며, 그 중 70% 에탄올 및 메탄올을 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 산두근 추출물은 아토피를 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 이에 따라 상기 산두근 추출물을 아토피의 예방 또는 치료용 조성물 등 다양한 분야에 응용할 수 있다.

도 1은, Prostaglandin E₂(PGE₂) 생성량 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 2는, Nitric oxide (NO) 생성량 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 3은, Human TARC 생성량 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 4은, 산두근 추출물과 대조약물을 투여한 후, NC/Nga mice의 아토피를 사진 촬영(육안 평가)한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는, 산두근 추출물과 대조약물을 투여한 후, NC/Nga mice의 아토피를 EASI에 의한 관능평가의 결과를 나타낸 것이다.
도 6는, 산두근 추출물과 대조약물을 투여한 후, NC/Nga mice의 조직 검사의 결과를 나타낸 것이다. 도면의 좌측은 귀 피부의 조직검사 결과이고, 우측은 등 피부의 조직검사 결과이다.
도 7은, 산두근 추출물과 대조약물을 투여한 후, 혈중 IgE level의 결과를 나타낸 것이다.
도 8은, 산두근 추출물과 대조약물을 투여한 후, histamine level의 결과를 나타낸 것이다.

이하，본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 더욱 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐，실시예에 의하여 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

실시예 1 : 산두근 추출물의 제조

산두근(국내산, H-MAX) 50 g을 취하여 10배 (w/v)에 해당하는 추출용매(70% 에탄올)로 추출하여 추출액을 제조하였으며, 추출액을 감액 농축 후 동결건조하여 추출물을 제조하였다(11.715 g). 추출물의 수율은 하기 표 1과 같다.

추출용매	방법	수율(%)
70% 에탄올	sonication 90min × 3회	23.46%

실험예 1 : 세포독성 실험

상기 실시예 1에서 제조된 산두근 추출물의 세포독성을 확인하기 위하여, 하기의 실험을 수행하였다.

먼저, Murin macrophage Raw 264.7 cell을 3 × 10³ cells/well, Human keratinocyte cell line인 HaCat cell을 1 × 10³ cells/well로 96 well plate에 분주한 후, 상기 실시예 1에서 제조된 산두근 추출물을 1×10^-3 ~ 1×10⁰ mg/ml 농도로 처리하였다.

다음으로, 24시간 배양 후 tetrazolium salt인 CCK-8 kit(Cell Counting Kit-8, Dojindo Laboratories, Tokyo, Japan) solution을 첨가하여 4시간 더 배양하고 ELISA reader(Ceres UV 900C, Bio-tech instrument, U.S.A.)를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. Control well의 흡광도에 대한 약물첨가 well의 흡광도의 비를 %로 계산하였고, 여러 well의 평균값을 사용하였다. 계산식은 다음과 같다.

% = {(약물첨가 well의 Abs_450nm 평균값) - (Blank well의 Abs_450nm 평균값)}/{(Control well의 Abs_450nm 평균값) - (Blank well의 Abs_450nm 평균값)} × 100

그 결과 산두근 추출물은 murin macrophage Raw 264.7 cell에서 100 ㎍/ml로 처리시 126.45±4.76%로 향후 항염증 실험 진행시 100 ㎍/ml까지 처리하였다. Human keratinocyte HaCaT cell에서는 50 ㎍/ml 처리시 91.62±0.54 %로 HaCaT cell을 이용한 활성 실험에서 50 ㎍/ml까지 처리하였다.

실험예 2 : 항염증 효능 실험

(1) Prostaglandin E₂(PGE₂) 생성량 측정

상기 실시예 1에서 제조된 산두근 추출물의 항염증 효능을 하기와 같이 확인하였다. 염증과 관련하여, 활성이 증가하는 cyclooxygenase(COX)의 활성을 측정하기 위하여 COX의 산물인 PGE₂의 생성량 측정하였다. 시료의 처리로 PGE₂의 생성량이 감소하면 COX의 활성이 억제된 것으로 항염증 효능을 검증하였다.

먼저, Raw 264.7 세포를 48 well plate에 분주하였다. 분주된 세포들은 CO₂ incubator 내에서 16시간 배양하여 바닥에 부착시켰다. 음성대조군(negative control)에는 배지만 처리하였고, 양성대조군(positive control)과 약물 처리군에는 LPS를 1 ㎍/ml가 되도록 처리하였다. 양성 대조군으로 indomethacine(Sigma Chemical Co, MO, U.S.A.)를 사용하였고, 약물 처리군에는 산두근 추출물을 여러 가지 농도로 처리하였다. 모든 well의 최종 DMSO농도는 1%가 되도록 처리하였다.

다음으로, 18시간 배양 후 arachidonic acid의 최종농도가 30 μM이 되도록 처리한 후 상층액을 분리하고 PGE2 생성량 측정하였다. PGE₂ 수치는 Prostaglandin E2 Biotrak Enzymeimmunoassay (EIA) System (Amersham Biosciences, UK)의 방법에 따라 시행하였으며, 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정 결과를 도 1에 나타내었으며, Mean±S.E.M.(standard error of mean)로 나타내었다. 실험결과 자료의 통계처리는 SYSTAT 프로그램을 이용하여 일원배치분산분석(one-way ANOVA)을 실시하고 각 군 간의 차이를 검증하기 위하여 Bonferroni multiple comparison test를 이용하여 사후분석을 실시하였다. 통계학적인 유의수준은 p<0.05로 하였으며, LPS와 비교하여 *; p<0.05, **; p<0.01로 표시하였다.

도 1에 나타난 바와 같이, 양성 대조군으로 사용된 indomethacine의 농도 의존적으로 PGE₂ 생성량이 감소됨을 확인하였다. 산두근 추출물을 농도별로 처리한 경우에는, 양성 대조군보다 우수하게 PGE₂에 대한 억제 효과를 나타내었다. 특히 산두근 추출물 100 ㎍/ml로 처리(3.82±0.71 ng/ml)하면 유발군인 LPS 처리군(9.20±0.45 ng/ml)보다 약 98% 억제됨을 확인하였다.

(2) Nitric oxide (NO) 생성량 측정

상기 실시예 1에서 제조된 산두근 추출물의 항염증 효능을, 하기와 같이 Nitric oxide synthase(NOS)의 활성화에 의해 생성되는 NO의 양을 측정하여 확인하였다.

먼저, Raw 264.7 세포를 48 well plate에 분주하였고, 분주된 세포들은 CO₂ incubator내에서 16시간 배양하여 바닥에 부착시켰다. 음성대조군(negative control)에는 배지만 처리하였고, 양성대조군(positive control)과 약물 처리군에는 LPS를 1 ㎍/ml가 되도록 처리하였다. 양성 대조군으로 NOS inhibitor인 L-NMMA (Sigma Chemical Co, MO, U.S.A.)를 사용하였고, 약물 처리군에는 산두근 추출물을 여러 가지 농도로 처리하였다. 모든 well에 최종 DMSO농도는 1%가 되도록 처리하였다.

다음으로, 18시간 배양 후 상층액을 분리하고 NO 생성량 측정하기 위해 Griess reagent를 이용하였으며, 535 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과를 Mean±S.E.M.(standard error of mean)로 도 2에 나타내었다. 실험결과 자료의 통계처리는 SYSTAT 프로그램을 이용하여 일원배치분산분석(one-way ANOVA)을 실시하고 각 군 간의 차이를 검증하기 위하여 Bonferroni multiple comparison test를 이용하여 사후분석을 실시하였다. 통계학적인 유의수준은 p<0.05로 하였으며, LPS와 비교하여 *; p<0.05, **; p<0.01로 표시하였다.

도 2에 나타난 바와 같이, Raw 264.7 cell에 LPS 1 ㎍/ml을 처리(14.22±0.42 μM)하면 정상군(0.20±0.06 μM)보다 약 70배 이상 NO가 증가하는 것을 확인하였고, 양성대조군 L-NMMA 처리군은 농도 의존적으로 NO분비량이 억제됨을 확인하였다. 산두근 추출물 처리군은 전체적으로 NO의 분비량이 양성 대조군만큼 억제되었고 추출물 농도 100 ㎍/ml에서 유발군의 약 48%(7.58±0.31 μM)로 NO 생성에 대한 억제 효과가 있음을 확인하였다.

실험예 3 : 아토피 관련 인자 발현 변화

상기 실시예 1에서 제조된 산두근 추출물이 아토피 관련 인자의 발현에 대한 효과를 하기의 실험으로 확인하였다.

HaCaT cell 1×10⁶ cell을 6 well에 분주한 후, TNF-α와 IFN-γ를 각각 10 ng/ml씩 처리한 후, 산두근 추출물 각각 12.5, 25 및 50 ㎍/ml로 처리하였고, 대조군으로는 sylimarin 및 foskolin을 사용하였다. 24시간 후 상층액에서의 hTARC를 EIA 방법으로 검색하였으며, 그 결과를 Mean±S.E.M.(standard error of mean)로 도 3에 나타내었다. 실험결과 자료의 통계처리는 SYSTAT 프로그램을 이용하여 일원배치분산분석(one-way ANOVA)을 실시하고 각 군 간의 차이를 검증하기 위하여 Bonferroni multiple comparison test를 이용하여 사후분석을 실시한다. 통계학적인 유의수준은 p<0.05로 하였다. TNF-α/IFN-γ(TI)와 비교하여 *; p<0.05, **; p<0.01로 표시하였다.

도 3에 나타난 바와 같이, 대조군으로 사용된 sylimarin(5.25±0.50 ng/ml)과 foskolin(8.66±0.76 ng/ml)은 유발군 TNF-α/IFN-γ(54.65±1.70 ng/ml) 보다 약 150배, 140배의 억제율을 나타내었다. 또한 산두근 추출물은 농도 의존적으로 hTARC level억제 하는 것을 확인하였다. 산두근 추출물 25 ㎍/ml에서 12%(50.35±2.14 ng/ml), 50 ㎍/ml에서 110%(17.63±1.17 ng/ml)의 hATRC level 억제를 나타내어 항아토피 기전을 나타내었다.

실험예 4 : NC/Nga mice를 이용한 아토피 치료 효과

(1) NC/Nga mice에서의 아토피 유발

실험 동물인 수컷 8주령의 NC/Nga mice(중앙실험동물, 한국)를 공급받아 2주간 순화를 시키고 실험에 사용하였다. 본 발명에 사용한 알레르겐(allergen)은 집먼지 진드기 추출물인 Biostir®(Japan)를 사용하였다. 실험 전 mice의 등과 귀 주위를 제모하고 1주일에 2회씩 Biostir를 4주간 도포하여 실험을 진행 하였다. 산두근 추출물은 5 mg/200㎕/mouse를 사용하였고, 대조약물은 비스테로이드계인 0.1% tacrolimus(Protopic　 Astellas, NY)을 50 mg/mouse로 제모한 등과 양쪽귀에 처리하였다.

(2) 육안 평가 및 관능 평가

산두근 추출물과 대조약물을 투여한 후, NC/Nga mice의 아토피성 피부염을 사진 촬영(육안 평가) 및 아토피성 피부염에 일반적으로 사용되는 EASI(The eczema area and severity index)로 관능평가를 실시하였다. 발적 및 출혈, 가피 형성 및 건조, 부종, 찰과 및 조직 결손을 채점하였으며, 각각의 현상에 대해 0 ~ 3점을 채점한 후 합산하여 종합적인 관능평가 지수인 EASI를 결정하였다. 4주간 집먼지 진드기로 유발하면서 주 1회 사진 촬영 및 관능 평가를 실시하였다.

사진 촬영(육안 평가)을 위하여, NC/Nga mice에 집먼지 진드기 추출물을 함유한 Biostir®을 처리한 후 4주간 진행상황을 사진을 찍어 관찰하였다. 그 결과, 아토피 유발군은 2주 후부터 피부 결손 및 건조 정도가 심해지고 3주 후부터는 출혈로 인한 상처가 많아졌다. 대조군으로 사용된 Protopic®연고(0.1% tacrolimus)는 정상군에 비해 피부 가피 및 찰과증이 치료되지 않음을 확인하였다. 반면, 산두근 추출물 처리군에서는 3주 정도에, 유발된 아토피 질환이 감소하는 것을 육안으로 확인할 수 있었다. 상기 결과를 도 4에 나타내었다.

또한, EASI에 의한 관능평가를 도 4에 나타내었다. 도 5에 나타난 바와 같이, 산두근 추출물 처리군은 통계적으로 유의성 있게 EASI가 감소하는 것을 확인할 수 있었다.

(3) 조직 검사

상기 관능 평가 종료 후, 귀와 등 피부를 떼어내어 10% 포르말린으로 고정하여 조직학적 검사를 진행하였으며, 피부 두께와 변화를 관찰하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.

도 6에 나타난 바와 같이, 산두근 추출물이 유발군이 Biostir®과 대조군인 Protopic®과 비교하여 피부 두께 및 변화가 정상군과 유사함을 확인할 수 있었다.

(4) 혈중 IgE, Histamine 생성량 측정

아토피 유발 NC/Nga mouse에 4주간 산두근 추출물을 5 mg/200㎕/mouse로 도포한 후 혈장을 분리하여 혈중 IgE level(ELISA법, Bethyl laboratoris, U.S.A), 및 histamine level을 정량(ELISA법, Oxford Ltd. U.S.A)하였다. 혈중 IgE level의 결과는 도 7에, histamine level의 결과는 도 8에 나타내었으며, Mean±S.E.M.(standard error of mean)로 나타내었다. 실험결과 자료의 통계처리는 SYSTAT 프로그램을 이용하여 일원배치분산분석(one-way ANOVA)을 실시하고 각 군 간의 차이를 검증하기 위하여 Bonferroni multiple comparison test를 이용하여 사후분석을 실시한다. 통계학적인 유의수준은 p<0.05로 하였다. 유발군인 Biostir®와 비교하여 *; p<0.05로 표시하였다.

도 7에 나타난 바와 같이, 아토피 유발군이 음성 대조군에 비해 IgE의 level이 3배 상승하였음을 확인하였다. 대조군에서는 육안으로 관찰한 바와 같이 IgE의 감소를 확인하지 못하였으나, 산두근 추출물에서는 유발군에 비해 통계적으로 유의성 있게 감소됨을 확인하였다.

또한, 도 8에 나타난 바와 같이, 혈중 Histamine level은 유발군이 정상군에 비해 Histamine이 증가함을 확인하였고 산두근 추출물 처리군에서는 통계적인 유의성이 나타나지 않았지만 Histamine 억제에 대한 경향성이 나타남을 알 수 있었다.

상기 결과에 따라, 산두근 추출물은 아토피 치료에 효과적인 치료제로 사용될 수 있음을 확인할 수 있었다.

Claims

산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 산두근 추출물은 산두근을 물, C₁ 내지 C₄ 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하여 제조되는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물.
제2항에 있어서, 상기 산두근 추출물은 메탄올 또는 에탄올로 추출하여 제조되는 것을 특징으로 하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 개선용 식품 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
산두근을 추출용매로 추출하여 추출액을 제조하는 단계; 및
상기 추출액을 건조하는 단계를 포함하는 산두근 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.
제7항에 있어서, 상기 추출 용매는 물, C₁ 내지 C₄ 알코올 또는 이들의 혼합용매인 것을 특징으로 하는 제조방법.
제7항에 있어서, 상기 추출 용매는 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 제조방법.