CN115299347A - 植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种植物生长调节剂在提高山豆根组培苗生物碱和黄酮含量中的应用。本发明将山豆根组培苗于添加含有6‑苄基腺嘌呤、吲哚乙酸、激动素的MS培养基中继代培养产生丛生芽,接着取丛生芽接种到含吲哚乙酸的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后转移至添加有植物生长调节剂的生根培养基中进行生根培养,即得山豆根组培苗。本发明利用植物生长调节剂调节山豆根组培苗生长和主要活性成分积累,在不影响其正常生长的前提下,提高其主要活性成分含量,为山豆根资源的保护和人工栽培提供技术支撑。
Description
技术领域
本发明属于山豆根组培苗领域。更具体地说,本发明涉及一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用。
背景技术
山豆根是广西著名的道地药材和常用大宗中药,又称广豆根,为豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根和根茎。山豆根自然生长缓慢,由于长期砍伐,其野生资源逐年减少,已被列入《国家重点保护野生植物名录》,二级;《世界自然保护联盟濒危物种红色名录》,易危。山豆根是治疗肝炎、咽喉肿痛、抗肿瘤、痔疮、暗疮、皮肤病等近30种中成药产品的主要原料,广泛用于诸多配方药中。山豆根旺盛的需求也推动了山豆根种植技术的快速发展,山豆根的种植规模也越来越大。然而山豆根的种植存在着生长缓慢、种植周期长、产量低等问题,难以满足人们日益增长的需求。组培苗具有繁殖快速,节省土地资源等特点,然而目前的山豆根组培苗中的的活性物质生物碱和黄酮含量低,影响了山豆根组培苗的开发利用。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
本发明的一个目的是提供一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用,其能够利用植物生长调节剂提高山豆根组培苗中的生物碱和黄酮活性物质的含量。
为了实现本发明的这些目的和其它优点,提供了一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用,其利用植物生长调节剂提高山豆根组培苗生物碱和黄酮的含量。
优选的是,所述植物生长调节剂为吲哚乙酸、萘乙酸或者生根粉中的一种。
优选的是,将山豆根组培苗于添加含有6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸、激动素的MS培养基中继代培养产生丛生芽,接着取丛生芽接种到含吲哚乙酸的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后转移至添加有植物生长调节剂的生根培养基中进行生根培养,即得山豆根组培苗。
优选的是,6-苄基腺嘌呤的浓度为1-5mg/L、吲哚乙酸的浓度为0.1-0.5mg/L、激动素的浓度为0.1-0.5mg/L。
优选的是,壮苗培养培养时,吲哚乙酸的浓度为0.5-2mg/L。
优选的是,植物生长调节剂为吲哚乙酸时,吲哚乙酸浓度为1-3mg/L;植物生长调节剂为萘乙酸时,萘乙酸浓度为1-3mg/L;植物生长调节剂为生根粉时,生根粉浓度为1-3mg/L。
优选的是,生根培养的温度为22-28℃,光照时间10-15h/d。
优选的是,生根培养基为添加蔗糖和琼脂的1/2MS培养基,蔗糖浓度为20-40g/L,琼脂浓度为4-6g/L。
本发明至少包括以下有益效果:
第一、本发明通过添加适当植物生长调节剂以有利于山豆根组培苗生长和次生代谢产物的合成和积累。
第二、本发明利用植物生长调节剂调节山豆根组培苗生长和主要活性成分积累,在不影响其正常生长的前提下,提高其主要活性成分含量,为山豆根资源的保护和人工栽培提供技术支撑。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为植物生长调节剂对山豆根苦参碱含量积累的处理结果图;
图2为植物生长调节剂对山豆根氧化苦参碱含量积累的处理结果图;
图3为植物生长调节剂对山豆根红车轴草甘含量积累的处理结果图;
图4为植物生长调节剂对山豆根高丽槐素含量积累的处理结果图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
需要说明的是,下述实施方案中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得;在本发明的描述中,需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“设置”应做广义理解,例如,可以是固定相连、设置,也可以是可拆卸连接、设置,或一体地连接、设置。对于本领域的普通技术人员而言,可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。术语“横向”、“纵向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,并不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用,其利用植物生长调节剂提高山豆根组培苗生物碱和黄酮的含量。
在另一种技术方案中,所述植物生长调节剂为吲哚乙酸、萘乙酸或者生根粉。
在另一种技术方案中,将山豆根组培苗于添加含有6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸、激动素的MS培养基中继代培养产生丛生芽,接着取丛生芽接种到含吲哚乙酸的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后转移至添加有植物生长调节剂的生根培养基中进行生根培养,即得山豆根组培苗。
在另一种技术方案中,6-苄基腺嘌呤的浓度为1-5mg/L、吲哚乙酸的浓度为0.1-0.5mg/L、激动素的浓度为0.1-0.5mg/L。
在另一种技术方案中,壮苗培养培养时,吲哚乙酸的浓度为0.5-2mg/L。
在另一种技术方案中,植物生长调节剂为吲哚乙酸时,吲哚乙酸浓度为1-3mg/L;植物生长调节剂为萘乙酸时,萘乙酸浓度为1-3mg/L;植物生长调节剂为生根粉时,生根粉浓度为1-3mg/L。
在另一种技术方案中,生根培养的温度为22-28℃,光照时间10-15h/d。
在另一种技术方案中,生根培养基为添加蔗糖和琼脂的1/2MS培养基,蔗糖浓度为20-40g/L,琼脂浓度为4-6g/L
<实施例1>
一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用
将山豆根组培苗于添加6-苄基腺嘌呤(6-BA)3.0mg/L+吲哚乙酸(IAA)0.3mg/L+激动素(KT)0.3mg/L的MS培养基中继代后产生大量丛生芽,接着取丛生芽接种到吲哚乙酸(IAA)1.0mg/L的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后以生根培养基即1/2MS培养基+30.0g/L蔗糖+4.5g/L琼脂粉+2mg/L吲哚乙酸进行生根培养,培养温度为25℃,光照时间为12h/d,持续培养,即得富含生物碱和黄酮活性物质的山豆根。
<实施例2>
一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用
将山豆根组培苗于添加6-苄基腺嘌呤(6-BA)3.0mg/L+吲哚乙酸(IAA)0.3mg/L+激动素(KT)0.3mg/L的MS培养基中继代后产生大量丛生芽,接着取丛生芽接种到吲哚乙酸(IAA)1.0mg/L的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后以生根培养基即1/2MS培养基+30.0g/L蔗糖+4.5g/L琼脂粉+2mg/L奈乙酸(NAA)进行生根培养,培养温度为25℃,光照时间为12h/d,持续培养,即得富含生物碱和黄酮活性物质的山豆根。
<实施例3>
一种植物生长调节剂在山豆根组培苗中的应用
将山豆根组培苗于添加6-苄基腺嘌呤(6-BA)3.0mg/L+吲哚乙酸(IAA)0.3mg/L+激动素(KT)0.3mg/L的MS培养基中继代后产生大量丛生芽,接着取丛生芽接种到吲哚乙酸(IAA)1.0mg/L的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后以生根培养基即1/2MS培养基+30.0g/L蔗糖+4.5g/L琼脂粉+2mg/L生根粉(ABT)进行生根培养,培养温度为25℃,光照时间为12h/d,持续培养,即得富含生物碱和黄酮活性物质的山豆根。
<效果试验>
将山豆根组培苗于添加6-苄基腺嘌呤(6-BA)3.0mg/L+吲哚乙酸(IAA)0.3mg/L+激动素(KT)0.3mg/L的MS培养基中继代后产生大量丛生芽,接着取丛生芽接种到吲哚乙酸(IAA)1.0mg/L的MS培养基中进行壮苗培养,使山豆根组培苗木质化程度提高,然后以添加植物生长调节剂的1/2MS培养基进行生根培养,植物生长调节剂的种类与浓度设计设计如下表1所示:
表1
生根培养时,以1/2MS培养基+30.0g·L-1蔗糖+4.5g·L-1琼脂粉为基质,分别施加不同种类或浓度植物生长调节剂处理,即以不添加任何植物生长调节剂的培养基为对照组(T0),以分别添加不同种类或浓度植物生长调节剂的培养基为处理组(T1(CIAA=1mg/L)、T2(CIAA=2mg/L)、T3(CIAA=3mg/L)、T4(CNAA=1mg/L)、T5(CNAA=2mg/L)、T6(CNAA=3mg/L)、T7(CABT=1mg/L)、T8(CABT=2mg/L)、T9(CABT=3mg/L),在温度(25±3)℃,光照时间12h/d的条件下培养,持续培养,获得山豆根组培苗。
一、植物生长调节剂对山豆根生长性状的处理效果
生长性状结果如表2所示。
表2植物生长调节剂对山豆根生长性状的处理结果
叶数(片/株):总叶数/植株总数;
株高(cm/株):总株高/植株总数;
根长(cm/株):总根长/植株总数;
根直径(mm/株):总根直径/植株总数;
生根率(%):总生根株数/植株总数×100;
根干重(mg/株):总根干重/植株总数。
从表2结果可知,植物生长调节剂对山豆根组培苗生长情况影响较大,在NAA、IAA和ABT三种植物生长调节剂中,NAA和ABT的生根效果优于IAA。在添加植物生长调节剂培养的山豆根组培苗中,以T9处理的根长最佳,T5次之,T6处理最短;生根率以T0处理最佳,T2处理次之,T4处理最低;根干重以T5处理的最佳,T9次之,T2处理最低,其中T5处理的根干重是对照组(T0)的2.19倍,T9处理的根干重是对照组(T0)的1.73倍。由此可见,培养基中添加适当植物生长调节剂(T5(CNAA=2mg/L))时,山豆根组培苗生根情况最好,且较不加植物生长调节剂的处理有显著差异。
二、植物生长调节剂对山豆根生物碱和黄酮含量积累的处理效果
植物生长调节剂对山豆根组培苗生物碱和黄酮的含量积累产生显著的影响。如图1所示,在NAA、IAA和ABT三种植物生长调节剂中,IAA对苦参碱含量积累的促进作用最大,其次是ABT;当IAA浓度为2mg/L,苦参碱的积累量达到最大值。如图2所示,NAA、IAA和ABT三种植物生长调节剂对氧化苦参碱积累都有显著的促进作用,其中T1、T2、T3、T5和T8处理的氧化苦参碱含量显著高于对照(T0);当NAA浓度为2mg/L,氧化苦参碱的含量最高。如图3所示,在植物生长调节剂培养的山豆根组培苗中,IAA和NAA促进红车轴草甘的积累,当IAA浓度为2mg/L,红车轴草甘的含量达到最大值。如图4所示,在植物生长调节剂处理下,高丽槐素含量均显著低于对照(T0),由此可见当不添加植物生长调节剂时,有利于促进高丽槐素的积累。
对比分析生物碱和黄酮积累情况,并综合山豆根组培苗生长性状指标,添加植物生长调节剂2mg/L NAA最适合山豆根组培苗生长和有效成分积累,可作为山豆根组培苗规模化生产次生代谢产物的重要调控因子。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Claims (8)
1.植物生长调节剂在提高山豆根组培苗生物碱和黄酮含量中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述植物生长调节剂为吲哚乙酸、萘乙酸或者生根粉中的一种。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,将山豆根组培苗于添加含有6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸、激动素的MS培养基中继代培养产生丛生芽,接着取丛生芽接种到含吲哚乙酸的MS培养基中进行壮苗培养,提高山豆根组培苗木质化程度,然后转移至添加有植物生长调节剂的生根培养基中进行生根培养,即得山豆根组培苗。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,6-苄基腺嘌呤的浓度为1-5mg/L、吲哚乙酸的浓度为0.1-0.5mg/L、激动素的浓度为0.1-0.5mg/L。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,壮苗培养培养时,吲哚乙酸的浓度为0.5-2mg/L。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,植物生长调节剂为吲哚乙酸时,吲哚乙酸浓度为1-3mg/L;植物生长调节剂为萘乙酸时,萘乙酸浓度为1-3mg/L;植物生长调节剂为生根粉时,生根粉浓度为1-3mg/L。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,生根培养的温度为22-28℃,光照时间10-15h/d。
8.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,生根培养基为添加蔗糖和琼脂的1/2MS培养基,蔗糖浓度为20-40g/L,琼脂浓度为4-6g/L。
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