KR20100054379A - 루틴 포접체, 제조방법 및 이를 포함하는 노화방지용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 루틴 포접체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 노화방지용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 루틴을 사이클로덱스트린계 화합물로 포접한 루틴 포접체, 및 이의 제조방법과 이를 유효성분으로 포함하여 루틴 단독에 비해 세포증식 및 콜라겐 증식 효능이 우수한 효과를 갖는 노화방지용 화장료로서의 용도에 관한 것이다.
루틴, 사이클로덱스트린, 포접, 추출, 노화방지
Description
본 발명은 루틴 단독에 비해 세포증식 및 콜라겐 증식 효능이 우수하여 노화방지용 화장료로서 적용 가능한 루틴 포접체, 제조방법 및 이의 용도에 관한 것이다.
기능성 화장품 및 기능성 식품의 관심도가 세계적으로 증가하면서 천연 식물, 동물 추출물을 이용하여 기능성 소재를 발굴하려는 시도가 증가하고 있다.
루틴(rutin)은 운향과의 루타속 식물에서 발견된 플라보노이드의 하나로, 일명 비타민 P로도 알려져 있다. 비타민 P는 혈관의 저항성을 강하게 하여 뇌출혈을 예방하는 중요한 성분으로 보고되어 있고, 혈관계 질환의 치료제로서 혈관의 지나친 투과성을 억제하는 약리효과도 가지고 있음이 공지되어 있다. 또한, 비타민 P가 비타민 C의 생리적인 기능인 체내 결합조직의 주성분인 콜라겐의 합성에 필요한 프롤린 및 리신의 히드록실화 반응, Fe2+를 Fe3+로 전환시키는 시토크롬 C의 산화- 환원 반응, 혈액 중 백혈구의 증가에 따른 면역강화 기능 등에도 크게 관여하고 있다는 것은 공지된 사실이다.
루틴은 옥수수, 고구마, 망고, 당근, 토마토, 시금치, 케일, 메밀 등에 함유되어 있다. 이에 이들 식물 또는 과일 등으로부터 루틴을 추출하기 위한 다양한 방법이 수행되고 있으며, 그 중 유기용매를 이용한 유기용매 추출법이 가장 널리 알려져 있다.
대한민국특허등록 제0154582호는 메밀 중에 루틴의 함량이 소량인 점을 감안하여 발아를 통한 루틴의 함량이 증가된 메밀 추출액을 제조하는 방법을 제안하고 있고, 대한민국특허등록 제115448호는 루틴의 함량이 증가된 메밀 발효액을 제조하는 방법을 제시하고 있으며, 대한민국특허공개 제2007-14412호는 메밀을 40∼80%의 에탄올 수용액으로 가열 환류하여 루틴을 추출하고 있다.
이러한 유기용매 추출법은 후속으로 다공성 흡착수지 및 재결정을 통해 정제함으로써 고순도 루틴의 추출이 가능하다. 그러나 추출에 이용되는 유기용매의 종류에 따라 추출된 루틴의 안정성에 영향을 줄 수 있으며, 각종 유기용매에 의해 다른 색소 등과 같은 이물질의 추출로 그 순도가 현저히 떨어지는 단점이 있다.
따라서 추출 수율을 필연적으로 높이기 위해서는 여러 단계의 여과 정제 과정을 거쳐야만 하고, 추출용매의 가격이 고가여서 용매의 회수를 위한 별도의 공정이 필요로 하는 등 제조비용이 다소 높아지는 문제가 있다. 또한 무독성, 무용매 추출 성분들이 식품, 화장품 등으로 활용범위가 확대되고 있는 실정에서 여러 유기용매에 의한 추출방법은 바람직하지 못한 방법으로 평가되고 있다.
또한 열수 및 다양한 수용액을 이용한 추출방법은 대량의 추출수를 사용해야하고 그 수율이 상당히 낮은 편이며, 고농도 분리를 위해 적당한 수지가 충진된 컬럼을 사용하는 등의 분리공정을 거쳐야 하고 투입된 보조 물질의 제거를 위해 별도의 여과 정제 공정이 필요하다는 단점이 있다.
따라서 유기용매를 사용하지 않고 간단한 공정으로 난용성인 루틴을 분리하는 방법의 개발은 루틴뿐만이 아니라 천연 식물성 플라보노이드들의 산업적 활용도를 증대시킬 것으로 기대되어, 그 확립이 절실히 요구되고 있다.
본 발명의 목적은 식물로부터 추출된 루틴의 이용 가능성을 높이기 위한 루틴 포접체를 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 다른 목적은 유기용매를 사용하지 않고도 각종 식물로부터 루틴을 고함량 및 고순도로 추출할 수 있는 제조방법을 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 또다른 목적은 상기 루틴 포접체의 노화방지용 화장료 조성물로서의 용도를 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은,
루틴을 사이클로덱스트린계 화합물로 포접한 루틴 포접체(rutin inclusion complex)를 제공한다.
또한 본 발명은
루틴 함유 원료와 사이클로덱스트린계 화합물 수용액을 혼합하여 포접체를 형성하는 단계;
상기 포접체가 포함된 용액에 응집제를 첨가하여 용액과 포접체를 분리하는 단계; 및
상기 얻어진 포접체를 회수하는 단계
를 포함하는 루틴 포접체의 제조방법을 제공한다.
또한 본 발명은 상기 루틴 포접체를 포함하는 노화방지용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 루틴 포접체는 루틴 단독에 비해 세포증식 및 콜라겐 증식 효능이 우수하여 노화방지용 화장료로서 사용이 가능하다.
또한 본 루틴 포접체의 제조방법은 분자 인식기능이 있는 사이클로덱스트린계 화합물을 사용함으로서 단순한 공정을 거쳐 고함량의 루틴을 고순도로 얻을 수 있고, 유기용매가 아닌 물을 사용함으로써 추가 공정이 필요 없어 환경 친화적인 뿐만 아니라 인체에도 무해한 잇점이 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 루틴 포접체는 루틴이 사이클로덱스트린계 화합물로 포접된 구조를 갖는다.
상기 루틴은 하기 화학식 1로 표시되며, 운향과의 루타속 식물에서 발견된 플라보노이드의 하나로 후에 콩과의 회화나무(Sophora japonica)의 꽃봉오리, 마디풀과의 메밀(Fagopyrum esculentum)의 식물에서 추출된다.
상기 루틴을 포접하기 위한 사이클로덱스트린계 화합물은 분자인식 기능이 있어, 환상형의 도넛 구조로 이루어져 있고, 내측에 소수성 공동을, 분자 외부에는 친수성을 갖는 독특한 특성을 가지고 있다. 이러한 특성으로 인해 내측 공동에 각종 소수성 유기 화합물을 인식하여 우수한 물성의 포접체를 형성하여 불안정한 물질을 안정화하거나 용해도의 변화에 의한 용도 확대뿐 아니라, 특정 물질만을 인식하여 용이하게 분리할 수 있는 특징이 있다.
상기 사이클로덱스트린계 화합물은 이 분야에서 공지된 유도체, 중합체, 등이 사용가능하며, 바람직하기로 알파-사이클로덱스트린, 베타-사이클로덱스트린, 감마-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린, 카르복시메틸 사이클로덱스트린, 메틸카르복시메틸 사이클로덱스트린, 아미노 사이클로덱스트린, 포도당을 부가한 분지형 사이클로덱스트린, 사이클로덱스트린 중합체 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종이 가능하다. 더욱 바람직하기로는 베타 사이클로덱스트린이나 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린이 사용될 수 있다.
이러한 루틴 포접체는
루틴 함유 원료와 사이클로덱스트린계 화합물 수용액을 혼합하여 포접체를 형성하는 단계;
상기 포접체가 포함된 용액에 응집제를 첨가하여 용액과 포접체를 분리하는 단계; 및
상기 얻어진 루틴 포접체를 회수하는 단계를 거쳐 제조된다.
도 1은 본 발명에 의한 루틴의 추출방법을 단계별로 나타낸 도면이다. 이하, 도 1을 참조하여, 본 발명에 의한 루틴의 추출방법을 단계별로 더욱 상세히 설명한다.
먼저, 루틴 함유 원료와 사이클로덱스트린계 화합물 수용액을 혼합하여 포접체를 형성한다.
상기 원료는 회화나무 봉우리 또는 메밀을 세척 및 건조 후 분쇄하여 얻은 분말 상태인 것을 사용하는 것이 바람직하며, 이외에 루틴 함유량이 높은 다른 식물체 또는 가공품의 사용이 가능하다.
상기 사이클로덱스트린계 화합물 수용액은 물에 사이클로덱스트린계 화합물은 1 내지 50%(중량/부피)의 농도로 용해시켜 제조한다. 만약 농도가 상기 범위 미만인 경우에는 포접율이 현저히 떨어져 추출효율이 낮아지며, 이와 반대로 상기 범위를 초과하는 경우 더 이상 추출효율이 증가하지 않아 경제적인 측면에서 50% 이하인 것이 바람직하다.
특히 사이클로덱스트린계 화합물의 사용을 위한 물의 채용은 메탄올이나 에 탄올과 같은 유기용매를 사용한 경우보다 인체에 무해하며, 포접체 내 잔류하는 유기용매의 제거를 별도로 수행할 필요가 없다. 또한 사용 후 재사용을 위한 후처리 공정이 별도로 필요 없어 환경적으로도 유익하며, 전체적인 공정비용이 저감되는 잇점이 있다.
이때 루틴 함유 원료와 사이클로덱스트린계 화합물을 이용하여 5 내지 36시간, 더욱 바람직하게는 10 내지 20시간 동안, 50 내지 100℃의 온도에서 교반하면서 포접체를 형성한다. 만약 그 시간이 상기 범위 미만인 경우에는 추출효율이 떨어지며, 이와 반대로 상기 시간을 초과하는 경우 추출 효율이 시간에 비례하여 증가하지 않고 거의 포화하므로 비용면에서 36시간을 초과하지 않는 것이 바람직하다.
이러한 포접 단계에서 사이클로덱스트린계 화합물의 첨가량, 포접 화합물의 형성 방법 및 조건들은 본 발명의 실시자에 의해 다양하게 변형될 수 있다. 또한 사이클로덱스트린과 루틴의 포접방법은 단순교반, 가열 이외에도 용매첨가 및 증발법, 초음파 처리, 반죽법 등의 방법이 사용될 수 있다. 특히 본 발명에서는 베타 사이클로덱스트린이나 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린을 이용하였을 때 상대적으로 좋은 추출 수율을 나타냄을 확인하였다.
다음으로, 상기 포접체가 포함된 용액에 응집제를 첨가하여 용액과 포접체를 분리한다.
상기 응집제는 단순한 가교 또는 변성에 의해 추출 목적인 루틴 이외의 다른 물질들, 즉 단백질 또는 다당류의 불용성 응집물을 형성할 수 있는 것이면 어느 것이나 사용될 수 있다. 대표적으로, CaCl2, CaSO4, MgCl2, MgSO4, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종; 아세트산, 락트산, 구연산, 옥살산, 시트르산, 또는 이들의 혼합물인 유기산; 인산, 황산, 질산, 불산, 염산 또는 이들의 혼합물인 무기산; 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종이 가능하다.
상기 응집제를 포접체가 포함된 용액에 약 0.1 내지 2%(중량/부피)를 첨가하여 현탁액을 형성하고, 여과 또는 원심분리 등을 통해 포접체를 함유한 상등액을 분리한다. 이때 응집제의 함량이 상기 범위 미만이면 포접 화합물과 쉽게 분리되지 않는 경향이 있으며, 이와 반대로 상기 범위를 초과하면 상기 루틴 포접체가 함께 침전되어 그 수율이 낮아질 수가 있다.
다음으로, 상기 얻어진 포접체를 회수하여 사이클로덱스트린계 화합물로 포접된 루틴 포접체를 얻는다.
상기 회수는 응집제의 첨가에 의해 분리된 포접체 용액 중 상등액을 취하여 상등액을 진공 감압 농축하고 건조하여 분말형의 포접체를 얻는다. 이러한 포접체는 루틴이 고함량으로 함유되어 있으며, 특히 사이클로덱스트린계 화합물로 인해 높은 수용성을 나타내 여러 분야에 적용이 가능이 가능하다.
필요한 경우 본 발명에 따른 루틴 포접체는 루틴을 역추출하여 사이클로덱스 트린계 화합물로부터 분리될 수 있다. 이러한 분리는 열수 또는 저급 알코올을 첨가하여 사이클로덱스트린 포접체로부터 루틴을 역추출하고 여과 또는 원심분리하여 얻어진 상등액을 회수하여 건조하는 과정을 통해 고함량의 루틴을 분리한다.
일예로, 포접체 용액을 진공 감압농축하여 얻어진 농축액에 저급 알코올을 이용하여 포접체로부터 루틴을 추출한다. 상기 저급 알코올은 에탄올, 메탄올이 가능하며, 필요에 따라 아세톤 등의 유기용매와 혼합사용이 가능하다. 이때 추출 효율을 고려하여 상기 저급 알코올로는 70 내지 100% 농도의 에탄올 수용액을 사용하여 70℃에서 1 내지 3시간 동안 수행하는 것이 바람직하다.
전술한 바의 단계를 포함하는 본 발명에 따른 포접체의 제조방법은 유기용매를 사용하여 다단계로 추출하거나 수지가 충진된 컬럼을 사용하여 고함량으로 분리하는 것이 아니라, 사이클로덱스트린계 화합물의 분자 인식 능력을 이용하여 포접체를 형성하는 단일 추출 과정을 거쳐 고함량으로 루틴을 분리할 수 있다.
이러한 포접체는 다양한 분야에 적용이 가능하며, 특히 루틴의 세포 증가 및 콜라겐 형성 촉진 효과에 의해 화장료, 그중 노화방지를 위한 화장료 조성물로 바람직하게 적용이 가능하다. 특히 본 발명의 루틴 포접체는 루틴 단독의 경우보다 세포 증식 및 콜라겐 증식 효능이 우수함을 확인하였다.
이때 루틴 포접체는 전체 조성물 중 0.001 내지 10 중량%의 함량으로 포함되는 것이 바람직하고, 만약 그 함량 미만일 경우에는 기대효과가 나타나기 어렵고, 상기 함량을 초과하는 경우에는 효과가 더 이상 증가하지 않는다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 포접체 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예와 시험예를 기재한다. 그러나 하기한 예는 본 발명의 바람직한 일 예일 뿐 본 발명이 하기한 예에 한정되는 것은 아니다.
(실시예 1)
반응기에 회화나무 꽃봉오리 분쇄물 5g과 베타-사이클로덱스트린 수용액 100ml(5%, 중량/부피)를 주입하여 50℃에서 12시간 동안 반응시켜 포접체 용액을 제조하였다.
상기 포접체 용액에 CaCl2 0.2%을 첨가한 다음, 50℃에서 1시간 교반하여 용액과 포접체를 분리시켰다. 이어 반응액을 여과 장치로 여과하고, 얻어진 여과액을 농축 후 건조하여 포접체를 제조하였다. 이때 분석을 위해, 상기 농축 과정의 여과액을 에탄올에 녹여 사용하였다.
(실시예 2)
회화나무 꽃봉오리 분쇄물 20kg를 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린이 30% 포함된 이온수 100L 와 혼합하고 50℃를 유지하며 20시간 동안 루틴을 추출하였다.
여기에 CaCl2를 1% 투여하여 혼합하고 다시 50℃에서 1시간 동안 교반한 뒤 곧바로 침전물을 제거하고 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액을 진공감압 농축하여 동결 건조하여 루틴 포접체를 회수하였다.
상기 루틴 포접체 내 루틴의 함량은 사용된 회화나무 꽃봉오리 중량 대비 25%로 확인되었다.
(실시예 3)
회화나무 꽃봉오리 대신에 메밀 분말을 사용하고 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린을 10% 사용한 것을 제외하고는, 실시예 2와 동일한 방법으로 추출을 수행하였다.
상기 제조된 루틴 포접체 내 루틴의 함량은 사용된 메밀 중량 대비 1%로 확인되었다.
(비교예 1)
반응기에 회화나무 꽃봉오리 분쇄물 5g에 100ml의 메탄올을 첨가한 후, 50℃에서 24시간 동안 반응시켜 루틴을 추출하였다. 얻어진 메탄올 추출물을 농축시킨 후, HP20이 충진된 컬럼에서 분리한 다음 다시 메탄올로 용출시켰다.
용출된 추출물 내 메탄올을 증류한 후 효소로 처리하고 저온에서 침전시켜 회수하여 에탄올에 녹인 후 분석에 사용하였다.
(비교예 2)
메탄올 대신 70% 농도의 에탄올을 사용한 것을 제외하고, 상기 비교예 1과 동일하게 수행하였다.
(비교예 2)
메탄올 대신 물을 사용한 것을 제외하고, 상기 비교예 1과 동일하게 수행하였다.
(실험예 1)
(루틴 추출 수율 평가)
상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 방법을 통해 루틴 추출 수율을 확인하기 위해 각 추출액을 고성능 액체크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 분석하였다.
HPLC는 μBondapak C18 컬럼으로 2.5% 아세트산:메탄올:아세토니트릴=35:5:10(v/v/v) 조성의 용액에 1 ml/min의 유속으로 사용하여 확인하였다. 검출기는 355nm로 설정하여 흡광도를 분석하였으며, 얻어진 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2는 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 방법을 통해 루틴 추출 수율을 보여주는 그래프이다. 이때 CD는 사이클로덱스트린을 의미한다.
도 2를 참조하면, 실시예 1의 경우 에탄올을 단독으로 사용한 비교예 2의 추출 수율과 거의 동등한 수준으로 루틴을 추출할 수 있으며, 메탄올, 또는 물을 단독으로 사용한 비교예 1 및 3보다 높은 루틴 추출 수율을 나타내었다. 이러한 결과를 통해 사이클로덱스트린을 이용하여 포접한 경우 높은 수율로 루틴의 추출이 가능함을 알 수 있다.
(실험예 2)
(적합한 사이클로덱스트린 선정)
루틴을 포접하기 위한 물질로서 여러 종류의 사이클로덱스트린계 화합물들을 사용하여 상기 실시예 1과 동일하게 수행하여 루틴 포접체를 얻었다. 상기 얻어진 루틴 포접체에 따른 추출 수율 HPLC 분석 방법을 사용하여 측정한 후, 얻어진 결과를 도 3에 나타내었다. 이때 도 3에서, None은 물을 사용한 경우, CD는 사이클로덱스트린을, CMCD는 카르복시메틸 베타-사이클로덱스트린을, HPCD는 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린을, MCMCD는 메틸카르복시메틸 베타-사이클로덱스트린을, ACD는 아미노 베타-사이클로덱스트린을 의미한다.
도 3은 다양한 사이클로덱스트린계 화합물을 사용하여 얻어진 루틴 포접체의 추출 수율을 보여주는 그래프이다. 도 3을 참조하면, 사이클로덱스트린계 화합물을 이용하여 루틴을 포접한 결과 최소 80% 수준으로 포접이 가능하였으며, 그 중에 서도 베타-사이클로덱스트린과 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린의 추출율이 우수함을 알 수 있다.
(시험예 1)
(세포 증식능 평가)
본 발명에 의해 제조된 루틴 포접체의 세포 증식능을 알아보기 위해 섬유아세포 증식능을 측정하였다.
2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media)배지에서 배양한 사람의 섬유아세포를 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 5,000세포/well가 되도록 분주하였다.
이때 시료로 실시예 3에서 제조한 포접체(루틴 함량 30%)를 사용하고, 대조군으로 루틴, 레타놀, 토코페롤, 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린을 사용하였다. 상기 각 시료의 최종농도가 1 mg/ml이 되도록 조정하여 이를 섬유아세포에 처리하고 다시 4일 동안 배양하였다.
시료들의 배양을 완료한 후 0.2% MTT(3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltertazolium bromide) 용액을 각 웰(well)당 50㎕씩 첨가하고, 다시 37℃에서 4시간동안 배양한 후 생성된 포르마잔(formazan)을 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 사용하여 용해시켰다. 상기 용해된 포르마잔의 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)를 이용하여 570 nm에서 측정하였으며, 얻어진 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
시료농도(%) | 실시예 3* | 루틴 | 레티놀 | 토코페롤 | HPCD |
3 X 10-7 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
3 X 10-6 | 105 | 100 | 100 | 100 | 100 |
3 X 10-5 | 106 | 102 | 101 | 102 | 100 |
3 X 10-4 | 121 | 102 | 103 | 103 | 105 |
3 X 10-3 | 145 | 108 | 109 | 119 | 105 |
3 X 10-2 | 139 | 115 | 109 | 108 | 107 |
3 X 10-1 | 132 | 120 | 96 | 102 | 104 |
*실시예 3에 포함된 루틴 농도를 시료 농도로 함. HPCD : 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린 |
표 1은 포접체 및 루틴, 레티놀, 토코페롤, 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린(HPCD)의 농도에 따른 세포 생존율을 보여주는 결과이다.
상기 표 1을 참조하면, 처리한 시료 모두 농도에 따라 세포 생존율이 약간 증가하는 경향을 보였으며, 특히 본 발명에 따른 루틴 포접체의 경우 저농도에서도 세포 증식이 현저하게 향상됨을 알 수 있다. 이러한 결과는 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린/루틴의 포접체가 단순히 물질의 안정화나 용해성 변화 뿐 아니라 이러한 특성을 통해 세포 또는 생체에 작용시 효율성을 변화시킬 수 있다는 것을 의미한다.
(시험예 2)
(콜라겐 증식능 평가)
본 발명에 의해 제조된 루틴 포접체의 콜라겐 증식능을 알아보기 위해 하기와 같이 실시하였다.
콜라겐 합성정도의 측정은 인체 섬유아세포를 24공 평판 배양기에 배양한 후, 세포증 식에 사용한 시료와 동일한 시료를 사용하여 배양배지에 1/10씩 순차적으로 희석하여 첨가하였다. 이때 시료로는 비타민 C, 토코페롤, 루틴, 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린 및 실시예 3에서 제조된 포접체를 사용하였다.
배양 3일째 10%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM배지를 각 well당 0.5㎖씩 첨가한 후 L[2, 3, 4, 5-3H]-프롤린 10μCi를 첨가하였다. 24시간 후 각 well에 들어있는 배지와 세포들을 긁어모아 5% 트리클로로아세트산(TCA; Trichloroacetic acid) 용액에 넣어 수세한 후 2개의 시험관에 분주하고, 1개의 시험관에는 타입 I 콜라게나제(type I collagenase) 1 unit/㎕를 넣고 37℃ 온도에서 90분간 배양하였으며, 다른 시험관은 4 ℃에서 보관하였다.
그 후 모든 시험관에 50% TCA를 0.05㎖씩 첨가하고 4℃에서 20분간 방치한 후 각각 12,000rpm에서 10분간 원심분리하여 각각의 상등액과 침전물을 액체 신틸레이션 계수기(LSC; Liquid Scintillation Counter)로 디피엠(dpm; decay per minute) 값을 얻어 하기 수학식 1에 의거하여 콜라겐 생합성 값(RCB; Relative Collagen Biosynthesis)을 구하고, 그 결과를 하기 표 2 에 나타내었다.
시험 물질 | 농도(%) | ||
3x10-6 | 3x10-5 | 3x10-4 | |
실시예 3의 루틴 포접체* | 115% | 139% | 135% |
토코페롤 | 104% | 109% | 110% |
비타민 C | 106% | 110% | 96% |
루틴 | 102% | 111% | 114% |
하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린 | 100% | 103% | 103% |
*실시예 3에 포함된 루틴 농도를 시료 농도로 함. |
상기 표 2를 참조하면, 본 발명에 따른 실시예 3의 포접체는 다른 물질들에 비해 높은 콜라겐 증식율을 보였으며, 상기 콜라겐 증식율은 포접체의 농도가 증가할수록 향상됨을 알 수 있다. 특히, 포접체의 경우 루틴을 단독으로 사용한 경우의 세포 증식 정도에 비해 훨씬 향상된 결과를 보여준다.
이하 본 발명의 실시예 1에서 제조된 루틴 포접체를 함유한 화장료 조성물의 구성을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 본 발명의 조성물이 이들 제형예에 한정되는 것은 아니다.
(제형예 1) 유연화장수(스킨로션)
배합성분 | 중량% |
실시예 1의 포접체 | 1.0 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 2.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
피이지-12 노닐페닐에테르 | 0.2 |
폴리솔베이트 80 | 0.4 |
에탄올 | 10.0 |
트리에탄올아민 | 0.1 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
(제형예 2) 영양화장수(밀크로션)
배합성분 | 중량% |
실시예 1의 포접체 | 1.0 |
스쿠알란 | 4.0 |
밀납 | 4.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 |
솔비탄세스퀴올레이트 | 1.5 |
유동파라핀 | 0.5 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 5.0 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
(제형예 3) 마사지크림
배합성분 | 중량% |
실시예 1의 포접체 | 1.0 |
밀납 | 10.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 |
피이지 60 경화피마자유 | 2.0 |
솔비탄세스퀴올레이트 | 0.8 |
유동파라핀 | 40.0 |
스쿠알란 | 4.0 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 4.0 |
글리세린 | 5.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
(제형예 4) 팩
배합성분 | 중량% |
실시예 2의 포접체 | 1.0 |
폴리비닐알콜 | 12.0 |
소듐카르복시메틸셀룰로오스 | 0.2 |
글리세린 | 5.0 |
알란토인 | 0.1 |
에탄올 | 6.0 |
피이지-12 노닐페닐에테르 | 0.3 |
폴리솔베이트 60 | 0.3 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
본 발명에 의해 제조된 루틴 포접체는 세포증식 및 콜라겐 형성을 촉진하여 노화방지 기능의 화장료 조성물로 사용된다.
도 1은 본 발명에 의한 루틴 포접체의 제조방법을 보여주는 순서도이다.
도 2는 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 방법을 통해 루틴 추출 수율을 보여주는 그래프이다.
도 3은 다양한 사이클로덱스트린계 화합물을 사용하여 얻어진 루틴 포접체의 추출 수율을 보여주는 그래프이다.
Claims (11)
- 루틴을 사이클로덱스트린계 화합물로 포접한 루틴 포접체(rutin inclusion complex).
- 제1항에 있어서,상기 루틴은 회화나무 봉우리, 메밀, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종의 원료로부터 추출된 것인 루틴 포접체.
- 제1항에 있어서,상기 사이클로덱스트린계 화합물은 알파-사이클로덱스트린, 베타-사이클로덱스트린, 감마-사이클로덱스트린, 하이드록시프로필 베타-사이클로덱스트린, 카르복시메틸 사이클로덱스트린, 메틸카르복시메틸 사이클로덱스트린, 아미노 사이클로덱스트린, 포도당을 부가한 분지형 사이클로덱스트린, 사이클로덱스트린 중합체 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종인 것인 루틴 포접체.
- 루틴 함유 원료와 사이클로덱스트린계 화합물 수용액을 혼합하여 포접체를 형성하는 단계;상기 포접체가 포함된 용액에 응집제를 첨가하여 용액과 포접체를 분리하는 단계; 및상기 얻어진 포접체를 회수하는 단계를 포함하여 제조되는 것인 루틴 포접체의 제조방법.
- 제4항에 있어서,상기 루틴 함유 원료는 회화나무 봉우리, 메밀, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종을 사용하는 것인 루틴 포접체의 제조방법.
- 제4항에 있어서,상기 사이클로덱스트린계 화합물 수용액은 1 내지 50%의 농도(부피)로 사용하는 것인 루틴 포접체의 제조방법.
- 제4항에 있어서,상기 포접체의 형성은 50 내지 100℃에서 5 내지 36시간 동안 교반하여 수행하는 것인 루틴 포접체의 제조방법.
- 제4항에 있어서,상기 응집제는 CaCl2, CaSO4, MgCl2, MgSO4, 아세트산, 락트산, 구연산, 옥살산, 시트르산, 인산, 황산, 질산, 불산, 염산 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종을 사용하는 것인 루틴 포접체의 제조방법.
- 제4항에 있어서,상기 응집제는 포접체가 포함된 용액에 대해 0.1 내지 2%(w/v)의 양으로 사용하는 것인 루틴 포접체의 제조방법.
- 루틴을 사이클로덱스트린계 화합물로 포접한 루틴 포접체(rutin inclusion complex)를 포함하는 노화방지용 화장료 조성물.
- 제10항에 있어서,상기 루틴 포접체는 전체 조성물 중 0.001 내지 10 중량%의 함량으로 포함되는 것인 노화방지용 화장료 조성물.
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KR20150066828A (ko) * | 2013-12-09 | 2015-06-17 | 주식회사 엘지생활건강 | 포접 화합물을 포함하는 기능성 조성물 |
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Cited By (5)
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---|---|---|---|---|
KR20150066828A (ko) * | 2013-12-09 | 2015-06-17 | 주식회사 엘지생활건강 | 포접 화합물을 포함하는 기능성 조성물 |
KR20190036907A (ko) * | 2017-09-28 | 2019-04-05 | (주)아모레퍼시픽 | 친환경 추출 기술을 이용한 영지 추출물의 제조 방법과 그에 의해 제조된 영지 추출물 및 이를 함유하는 항노화 화장료 조성물 |
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