KR20100045621A - 유기물 분해능이 우수한 바실러스속 균주 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 산림 부식토양 및 생활하수에서 분리 동정한 유용미생물 균주에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 유기물, 단백질, 지질 분해능이 우수한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주에 관한 것이다.
상기 본 발명에 의한 바실러스속 균주는 토양중에 함유된 유기물, 단백질, 지질을 빠르게 저분자로 분해하여 작물체 흡수를 용이하도록 하는 효과가 있다.
미생물, 바실러스, 유기물 분해, 아밀레이즈, 프로테이즈, 리페이즈

Description

유기물 분해능이 우수한 바실러스속 균주 {Bacillus sp. having improved organic matter decomposing activity}
본 발명은 산림 부식토양 및 생활하수에서 분리 동정되었으며, 유기물, 단백질, 지질 분해능이 우수한 유용미생물 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주에 관한 것이다.
최근 화학비료의 과도한 남용으로 인하여 토양 염류집적 및 환경오염 문제가 발생하게 되었으며 이를 극복하기 위하여 화학비료를 대체할 수 있는 친환경 농자재로서 퇴비 및 유기질 비료의 시용이 점차 늘고 있는 실정이다. 그러나 상기 유기질 비료에 함유된 유기물은 분자량이 크기 때문에 작물체가 직접 흡수할 수 없어 미생물에 의해 저분자화로 분해되어야 뿌리를 통하여 흡수할 수 있게 된다.
상기 유기물을 분해할 수 있는 미생물로는 대한민국 등록특허 제343197호에서 이용한 토양균군, 대한민국 등록특허 제363798호의 칸디다속(Candida sp.), 등록특허 제424419호의 바실러스속(Bacillus sp. GENO-200 KCCM 10263) 균주 및 등록특허 제817708호의 할로모나스속 균주 등이 공지되어있다. 그러나 상기 등록특허 제343197호의 토양균군은 여러 미생물에 의해 복합적인 단계로 유기물을 분해하고, 등록특허 제363798호의 칸디다속 균주는 아포를 형성하지 않아 토양중 생존력이 떨어지는 문제점이 있으며, 등록특허 제424419호의 바실러스속 균주는 음식물 쓰레기에 포함되어 있는 유기물을 분해시켜 악취 및 쓰레기량을 줄이는 효과가 있으며, 등록특허 제817708호의 할로모나스속 균주는 갯벌에서 분리된 내염성 할로모나스속 균주에 관한 것이다.
본 발명자들은 유기물 분해능이 우수한 미생물을 선발하기 위하여 산림 부식 토양 및 음식물 찌꺼기 배출이 많은 생활하수로부터 시료를 채취하고, 상기 시료에서 유기물, 단백질, 지질 분해능이 우수하고 아포를 형성하여 내열성이 우수한 바실러스속 균주를 직접 분리 및 동정하였다. 상기 바실러스속 균주는 신규한 균주로서 한국생명공학연구원 생물자원센터에 균주를 기탁하고, 기탁번호 KCTC 13328(바실러스속 HSB801) 및 KCTC 13330(바실러스속 HSB803)를 부여받았다.
본 발명은 유기물, 단백질, 지질 분해능이 우수하며 아포를 형성하여 내열성이 우수한 유용미생물을 탐색 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 산림 부식토양 및 생활하수에서 선발된 유기물, 단백질, 지질 분해능이 우수한 유용미생물 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주를 제공한다.
본 발명에 의한 에 의한 토양 중 유기물을 빠르게 분해하여 작물체 흡수를 용이하도록 하는 효과가 있는 미생물
유용미생물 분리
산림 부식토양 및 생활하수에서 샘플을 채취하고, 아포 형성균을 선발하기 위하여 이를 80℃에서 10분 처리한 후, 이를 뉴트리언트 한천 배지(Nutrient agar medium, Difco사)에 희석평판 배양을 실시하였으며, 생성된 콜로니(colony)를 획득하여 뉴트리언트 한천 배지에 획선배양 하였다.
아밀레이즈(amylase) 생성능
아밀레이즈 생성능을 평가하기 위하여 수용성 전분이 1%로 포함된 뉴트리언트 한천 배지에 본 발명에 의한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주를 획선으로 접종하여 30℃에서 배양하였다.
48 시간 경과 후, 콜로니 주위에 도 1과 같이 투명대(clear-zone)가 형성되었으며, 상기 투명대의 반경을 측정하여 이를 표 1에 나타냈다.
프로테이즈(protease) 생성능
프로테이즈 생성능을 평가하기 위하여 스킴밀크(skim-milk)가 1%로 포함된 뉴트리언트 한천 배지에 본 발명에 의한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주와 프로테이즈를 생성한다고 알려진 공시균 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis KCTC 3014) 균주를 획선 접종하여 30℃에서 배양하였다.
24 시간 경과 후, 콜로니 주위에 도 2a 및 2b와 같이 투명대(clear-zone)가 형성되었으며, 상기 투명대의 반경을 측정하여 이를 표 1에 나타냈다.
리페이즈(lipase) 생성능
리페이즈 생성능을 평가하기 위하여 트리부티린(trybutirin)이 1%로 포함된 뉴트리언트 한천 배지에 본 발명에 의한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주를 획선으로 접종하여 28℃에서 배양하였다.
72 시간 경과 후, 콜로니 주위에 형성된 투명대(clear-zone)를 측정하여 이를 표 1에 나타냈다.
Figure 112008505303200-PAT00001
균주 동정
본 발명에 의한 바실러스 균주들을 솔젠트(주)에 16S rDNA 영역의 염기서열 분석을 의뢰하였다. 염기서열 분석 결과를 비교 검색한 결과 100% 일치되는 염기서열이 검색되지 않았으며 Bacillus sp. 신균주로 동정되었다. 분석 의뢰한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801, KCTC 13328) 및 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803, KCTC 13330) 균주의 16S rDNA 염기서열은 도 3a 및 3b에 나타냈다.
도 1은 본 발명에 의한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801 KCTC 13328)에 의해 수용성 전분이 분해되어 나타난 투명대이고,
도 2a는 본 발명에 의한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801 KCTC 13330)에 의해 스킴밀크가 분해되어 나타난 투명대이고,
도 2b는 공시균주인 바실러스 서브틸리스 KCTC 3014(Bacillus subtilis KCTC 3014)에 의해 스킴밀크가 분해되어 나타난 투명대이고,
도 3a는 본 발명에 의한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801 KCTC 13328)의 16S rDNA 염기서열이고,
도 3b는 본 발명에 의한 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803 KCTC 13330)의 16S rDNA 염기서열이다.

Claims (2)

  1. 아밀레이즈 및 프로테이즈를 분비하여 토양중 유기물 분해 활성이 우수한 바실러스속 HSB801(Bacillus sp. HSB801 KCTC 13328) 균주.
  2. 아밀레이즈 및 프로테이즈를 분비하여 토양중 유기물 분해 활성이 우수한 바실러스속 HSB803(Bacillus sp. HSB803 KCTC 13330) 균주.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101432425B1 (ko) * 2013-01-27 2014-08-22 전남대학교산학협력단 연안 갯벌과 갯지렁이로부터 동정된 복수의 균주 속 미생물을 포함하는 유기물 정화제
KR102176078B1 (ko) 2020-06-09 2020-11-09 이정복 유기물 중 탄수화물과 단백질 및 섬유소에 대한 분해능을 갖는 신규 미생물 바실러스 서브틸리스 bs300 균주를 포함하여 배양하는 고체배양 방법

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