KR20100014324A

KR20100014324A - 호흡 검사를 기초로 한 병원체 미생물 검출 방법

Info

Publication number: KR20100014324A
Application number: KR1020097015103A
Authority: KR
Inventors: 마야 제르망 안토니우 캄푸자노
Original assignee: 마야 제르망 안토니우 캄푸자노
Priority date: 2006-12-17
Filing date: 2007-12-14
Publication date: 2010-02-10
Also published as: AR064365A1; BRPI0721153A2; US20080146956A1; CL2007003659A1; JP2010513904A; EP2102652A1; WO2008075171A1; GT200900169A; CN101641597A; CO5840255A1; PE20081384A1; JP4988857B2; CA2677559A1; UY30797A1; MX2009006560A

Abstract

본 발명은 유레아 호흡 검사를 기초로한 위식이지장 관에서 헬리코박터 필로리의 검출 및 진단 방법과 상기 방법을 수행하기 위한 키트를 제공한다. 상기 방법은 개체 또는 환자로부터 1차 기초 호흡 시료를 채집하는 단계, 상기 개체에게 탄소 표지된 유레아 용액을 제공하는 단계, 바로 뒷따르는 새로운 독립적인 단계로, 개체에게 적량의 물을 주어 개체의 구강에 모든 잔류 유레아를 씻어내는 단계 및 5분 이상 지난 후 2차 호흡 시료를 채집하는 단계를 포함한다.

Description

호흡 검사를 기초로 한 병원체 미생물 검출 방법{A METHOD BASED ON A BREATH TEST FOR THE DETECTION OF PATHOGEN MICROORGANISMS}

본 발명은 병원체 미생물을 검출하기 위한 호흡 시료 채집 및 분석에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 위십이지장관에서 헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori) 검출 및 진단을 위한, 호흡 시료 채집을 기초로 한 방법과, 상기 채집물로 이를 수행하기 위한 키트를 제공한다.

헬리코박터 필로리는 주로 위식이지장 질환, 예컨대 위 궤양, 식이지장 궤양, 소화불량, 위의 비-호지킨 림프종 및 위암과 관련있다. 또한, 위장관내 헬리코박터 필로리의 존재는 다른 질환, 예컨대 만성적인 두드러기, 철 결핍성 빈혈, 특발성 혈소판 감소성 자반증 등과 관련있다. 헬리코박터 필로리와 관련있는 질환의 리스트는 점점 증가하고 있다.

유레아 호흡 검사은 헬리코박터 필로리를 진단하는 믿을만한 방법이다. 그러나, 현재의 유레아 호흡 검사 골드 표준 프로토콜에는 시트르산 용액의 섭취가 요구된다(미국 특허 6,171,811, De Bengoa Vallejo, A.). 또한, 상기 프로토콜은 구강에 고착된 미생물로 인한 잔류 유레아 및 유레아제 활성으로 인해, 위음성을 보일 수 있다. 유레아 호흡 검사에서 시트르산 용액의 섭취는, 위 공복화의 지연 이 상기 용액으로 인해 야기되기 때문에, 부분적으로 정당화된다. 그러나, 위 공복화의 지연은 시트르산 용액 섭취와 관련있는 것으로 확인되지 않았다(Shiotani, A.S. et al., Aliment Pharmacol . Ther ., 15:1763-1767, 2001 참조). 더욱이, 유레아 호흡 검사를 수행하는 동안에 시트르산 용액을 섭취한 환자는 시험 전에 항-산의 필수 현탁물 때문에 위식이지장 증상이 악화되고, 이들이 얼마간의 산을 마신다면 증상이 더 악화될 것이라는 합리적인 믿음으로 인해, 상기 용액 섭취에 저항한다. 또한, 시트르산의 로드(load) 섭취는 특히 어린이들에게서 구역질과 구토를 유발할 수 있다. 또한, 환자는 시트르산 용액의 높은 하중(load)과 나쁜 미감에 대해 불만을 표명한다. 아울러, 시트르산에 알레르기 반응을 보이는 환자는 현재의 골드 표준 유레아 호흡 검사를 수행할 수 없다.

본 발명은 시트르산 용액이 필요하지 않으며, 또한 구강내 잔류성 유레아의 존재를 해결하는, 유레아 호흡 검사를 기초로한 방법을 제공한다. 본 발명의 방법은 어떠한 부작용없이 또는 위 질환 증상의 어떠한 악화 없이, 수분 후에 환자가 집에 갈 수 있도록 하는 프로토콜을 제공한다. 아울러, 본 발명의 방법은 신뢰할 수 있거나, 또는 시트르산 용액의 섭취가 요구되는 현재의 유레아 호흡 검사 프로토콜 보다 신뢰할 수 있다.

본 발명은 유레아 호흡 시료를 채집하기 위한 쉽고 신뢰할 수 있는 방법을 포함하는 방법을 제공한다. 유레아 호흡 시료의 쉽고 신뢰할 수 있는 채집은 광범위한 유행병 연구를 촉진시켜, 헬리코박터 필로리와 증가되고 있는 질병 리스트와의 잠재적인 관련성을 검증할 수 있을 것이다.

발명의 개요

본 발명은 유레아 호흡 검사를 기초로한 위식이지장 관에서 헬리코박터 필로리의 검출 및 진단 방법과 상기 방법을 수행하기 위한 키트를 제공한다.

상기 방법은 개체 또는 환자로부터 1차 기초 호흡 시료를 채집하는 단계, 상기 개체에게 탄소 표지된 유레아 용액을 제공하는 단계, 바로 뒷따르는 새로운 독립적인 단계로, 개체에게 적량의 물을 주어 개체의 구강에 모든 잔류 유레아를 씻어내는 단계 및 5분 이상 지난 후 2차 호흡 시료를 채집하는 단계를 포함한다.

개체에게 적량의 물을 제공하는 독립적인 단계는, 구강내 모든 잔류하는 탄소 표지된 유레아를 씻어내고, 탄소 표지된 유레아가 신속하게 확산되어 헬리코박터 필로리 유레아제에 의해 분해되기에 최적인 수용액 환경을 위장(gastric cavity)에 제공하여, 잠재적인 위양성 결과를 없애는, 2가지 목적을 갖는다.

본 발명의 과제 및 다른 이점은 도면에 대한 내용과 본 발명의 상세한 설명 및 청구항에서 보다 명확해질 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명의 과제는 호흡 검사를 기초로한, 하기 단계를 포함하는 병원체 미생물 검출 방법을 제공하는 것이며, 검출 또는 진단하는 병원체 미생물은 헬리코박터 필로리이다:

A. 개체의 1차 기초 호흡 시료를 채집하는 단계;

B. 1차 기초 호흡 시료를 채집한 후 바로 개체에게 표지된 탄소가 함유된 유레아 용액을 경구 제공하는 단계;

C. 표지된 탄소가 함유된 유레아 용액을 제공한 후 즉시 상기 개체에게 적량의 물을 제공하는 단계;

D. 적량의 물을 제공한 후 결정된 시간 후에 2차 호흡 시료를 채집하는 단계;

E. 1차 및 2차 호흡 시료에 존재하는 표지된 탄소의 양을 측정 및 분석하는 단계.

본 발명에 따른 방법의 바람직한 일 측면에 있어서, 적량의 물은 100 내지 250 ml이다. 그러나, 본 발명에 따른 방법의 가장 바람직한 예에서, 적량의 물은 200 ml이다.

개체에게 적량의 물을 적시(상기 개체에게 탄소 표지된 유레아 용액을 제공한 후 바로)에 제공하는 신규한 독립적인 단계는, 탄소 표지된 유레아 잔류물 모두를 구강에서 씻어 버려, 따라서 구강에 고착되어 있는 미생물의 유레아제로 인한 위양성 가능성을 없앤다. 또한, 적량의 물은 일단 위장에서 최적의 위내 수용액과 탄소 표지된 유레아의 동질적인 위내 분포를 제공하여, 따라서 탄소 표지된 유레아가 헬리코박터 필로리의 유레아제에 의해 가수분해된다.

본 발명에 따른 방법의 다른 바람직한 측면에 있어서, 표지된 탄소를 포함하는 유레아 용액은 15 - 50 ml이며, 표지된 탄소를 포함하는 유레아는 15 - 50 mg이며, 유레아의 표지된 탄소는 C-13이다. 유레아 용액과 탄소 표지된 유레아 둘다, 특정 양은, 전술한 범위내에서, 호흡 시료가 수집되는 개체의 체중에 따라 결정된다. 어린이는 범위에서 낮은 부분에 있는 양이 필요하지만, 성인의 경우 범위의 상위 부분에 위치한 양이 필요할 것이다.

C-13 표지된 유레아는 바람직하기로는, 상업적으로 널리 이용가능한, 분말 형태이다.

본 발명의 목적에 있어, 개체는 그 위장관에 헬리코박터 필로리 존재에 대해 검사받는 환자 또는 사람이다.

본 발명에 따른 방법의 또다른 측면에서, 2차 호흡 시료는 적량의 물을 개체에게 제공한 지 적어도 4분 59초이 지난 시점에 채집한다. 본 발명에 따른 방법의 이러한 측면에 대한 가장 바람직한 예로, 2차 호흡 시료는 적량의 물을 개체에게 제공한 지 10분 후에 채집한다.

본 발명의 두번째 과제는, 호흡 검사 수단에 의해 병원체 미생물을 검출하기 위한 키트(도 1)를 제공하는 것으로, 상기 키트는 하기를 포함하며,

a. 물 함유 용기(1)(도 1);

b. 탄소 표지된 유레아 함유 용기(2);

c. 호흡 검사를 개시하고 탄소 표지된 유레아를 섭취시키기 전에 1차 호흡 시료를 채집하기 위한 제1 용기(3);

d. 호흡 검사 종료 시에 적량의 물을 섭취시킨 후 2차 호흡 시료를 채집하기 위한 제2 용기(4).

상기 제1 용기와 제2 용기는 바늘형 센서가 들어갈 수 있는 메카니즘의 마개(3A 및 4A) 가 있으며, 검출 또는 진단할 병원체 미생물은 헬리코박터 필로리이다.

적절하게 구분되는 제1 용기와 제2 용기에 각각 채집한 1차 및 2차 시료는, 가스 크로마토래피와 가스 분광측정에 의해 C-13의 양을 분석하여 결정한다.

본 발명에 따른 키트의 일 측면에 있어서, 탄소 표지된 유레아 함유 용기는 탄소 표지된 유레아를 15 내지 50 mg으로 포함하고 있으며, 탄소 표지된 유레아는 물에 용해되어 있으며, 탄소 표지된 유레아를 용해하는 물의 양은 15 내지 50 ml이며, 유레아에서 표지된 탄소는 C-13이다. 가장 바람직한 예에서, 탄소 표지된 유레아의 양은 50 mg이다.

본 발명에 따른 키트의 다른 바람직한 측면에 있어서, 물 함유 용기는 물을 200 - 250 ml 포함한다. 그러나, 본 발명에 따른 키트의 가장 바람직한 예에서, 물의 적량은 200 ml이다.

본 발명의 다른 바람직한 키트의 예로서, 물 함유 용기는 200 내지 250 ml의 물을 함유한다. 그러나, 가장 바람직한 예로, 물의 적정량은 200 ml이다.

본 발명에 따른 다른 키트의 다른 예로서, 키트는 1차 호흡 시료 및 2차 호흡 시료를 제1 용기 및 제2 용기에 채집하는 1쌍의 수단을 포함한다. 본 발명에 따른 키트의 바람직한 예로서, 1차 호흡 시료 및 2차 호흡 시료를 제1 용기 및 제2 용기에 채집하는 수단은 1쌍의 스트로(6)이다.

본 발명에 사용되는 용기는, 밀폐될 수 있는 임의의 용기로 정의된다. 본 발명의 바람직한 예에서, 용기는 튜브형 용기이다.

본 발명에 따른 키트의 하나 이상의 예로서, 카트리지(7)는 물 함유 용기, 탄소 표지된 유레아, 제1 용기, 제2 용기 및 1쌍의 스트로를 포함한다.

본 명세서는 본 발명의 바람직한 구현예를 나타낸 것으로서, 하기 청구의 범위에 포함된 기본 사상 및 원칙을 벗어나지 않는 범위에서 발명의 형태 및 내용의 일부를 추가로 변형할 수 있는 것으로 이해될 것이다.

도 1은 본 발명의 방법을 수행하기 위한 키트 및 그 구성 성분을 나타낸 것이다.

재료 및 방법

환자: 시험군은 위장관에 대해 증상이 없는 건강한 지원자 70명을 구성되었다. 1993년의 콜롬비아 보건국 결의안 8430 및 헬싱키 선언(Helsinki declaration)에 따라, 본 연구는 생물학적, 생리적, 정신적 또는 사회적 위험성이 없는 연구로 분류된다.

탄소 표지된 유레아 호흡 검사:

프로토콜 1: 적어도 8시간을 절식시킨 후, 1차 기초 호흡 시료를 채집하였다(t₀); 1회 섭취량으로, 15 ml의 물에 용해된 50 mg ¹³C 표지된 유레아를 환자에게 경구 투여한 직후; 200 ml의 물을 환자에게 경구 투여시키고; 10 (t₁₀), 20 (t₂₀) 및 30 (t₃₀) 분이 지난 후에, 호흡 시료를 채집하였다.

프로토콜 2: 적어도 8시간을 절식시킨 후, 1차 기초 호흡 시료를 채집하였 다(t₀); 1회 섭취량으로, 15 ml의 물에 용해된 50 mg ¹³C 표지된 유레아를 환자에게 경구 투여한 직후; 4.2 g의 탈수(dehydrated) 시트르산과 함께 200 ml의 물을 환자에게 경구 투여시키고; 10 (t₁₀), 20 (t₂₀) 및 30 (t₃₀) 분이 지난 후에, 호흡 시료를 채집하였다.

참고 표준 프로토콜: 콜롬비아 환경에서 표준화된 유럽 프로토콜을, 100%에 가까운 감수성 및 특이성으로 광범위하게 검증된 표준 프로토콜로 하였다. 침습적인 시험, 예컨대, 생검, 배양 및 내시경 검사를 수행하는 것이 비윤리적인 것으로 생각되지는 않는다. 표준 프로토콜은 다음의 방법으로 수행되었다: 적어도 8시간을 절식시킨 후, 100 ml의 물에 용해된 4.2의 시트르산을 환자에게 투여한 후; 10분이 지나서, 1쌍의 기초 호흡 시료를 채집하였다 (t₀); 30 ml의 물에 용해된 100 mg ¹³C 표지된 유레아를 환자에게 투여하고 나서; 30분이 지난 후에, 1쌍의 포스트-유레아 호흡 시료를 채집하였다.

헬리코박터. 피롤리에 의한 감염의 정의 : 헬리코박터 필로리에 의한 감염 상태는, 상업용 키트 (TAU-KIT® Isomed S.L., 스페인 마드리드)를 이용하여, 표준 프로토콜에 따른 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사을 통하여 정의되었다. 본 시험에 대해 국제적으로 검증된 기준에 따라, 분광계(ABCA, Europa Scientific, Cheshire, 영국)를 사용하여, 콜롬비아 메달린에 위치한 Laboratorio Clinico Hematologico S.A.에서 시료 분석을 수행하였다; 양성 결과는 ¹³CO₂ 델타(σ¹³CO₂)와 동일 또는 우수한 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사에 대한 값이었다. 결과는 기준선에 대한 델타(DOB)로 나타내었다. 프로토콜 각각에 대한 컷오프 지점은 시간 간격의 차이에 따라 (10, 20 및 30 분), 0.5 내지 5.5으로 변하였다. 각 프로토콜의 효능은 ROC 곡선으로 평가하였다.

통계 분석 : 기술적인 분석에서, 절대 및 상대적인 분포가 정성적인 변수에 대해 사용되었다. 레쥬메(Resume) 지시자가 정량적인 변수에 대해 사용되었다. 데이터에 대한 정상성 기준(normality criteria)이 샤피로-윌크(Shapiro-Wilk) 검정으로 확립되었고, 이를 기초로, t-student 검정 및 윌콕슨 부호 범위 검정( Wilcoxon sign range test)이 독립된 중앙값 간의 차이점을 확립시키는데 적용되었다. 독립 X² 검정이 정량적 변수들 간의 관계를 분석하는데 이용되었다. p < 0.05 값은 통계적으로 유효한 것으로 간주되었다. 또한, 감수성, 특이성, 양성 예측치, 음성 예측치, 유효성 지수(validity index), 유덴 지수(Youden index), RV+(verisimilitude reason for positive results), 및 RV-(verisimilitude reason for negative results)를 측정하였다. 얻어진 데이터의 가공 및 분석은 SPSS (Statistical Product for Service Solutions) 버전 12.0, 및 EPIDATE 버전 3.0 프로그램을 이용하여 수행되었다.

결과 : 본 연구에서, 70명의 무증상 개체(24명의 남성 및 46명의 여성)가 관 련이 되었는데, 상기 개체는 남성의 경우 평균 연령이 39.63세(SD + 12.58)이고, 여성의 경우 평균 연령이 34.33세(SD + 10.17)였다(신뢰도95%임). 남성과 여성의 평균 연령 간에 유의성 있는 차이는 없었다 (t-Student = 1.905; p = 0.061).

표준 프로토콜에 의하면, 46명(65.7%)의 개체가 헬리코박터 필로리에 대해 양성이었고, 24명(34.3%)의 개체가 헬리코박터 필로리에 대해 음성이었다. 성별에 따라, 17명(70.8%)의 남성 및 29명(63%)의 여성이 헬리코박터 필로리에 대해 양성이었다. 여성과 남성 간에 유의한 통계적인 차이는 없었다 (X² = 0.425; p = 0.515). 프로토콜 I 및 II에 의한 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

표 1. ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사. 프로토콜 I 및 II에 대해, 상이한 컷오프 지점 (10, 20 또는 30분)에서의 유효성 지수(indice de validez), 유덴 지수(indice Youden), RV+ 및 RV-. Laboratorio Clinico Hematologico S.A.(콜롬비아 메달린) 2006.

프로토콜 I에 대한 최적의 컷오프 지점은 10분에서, 2.0 및 2.5 델타 (둘 모두에 대해 100%); 20 분에서, 1.5, 2.0, 및 2.5 델타 (셋 모두에 대해 100%); 30 분에서, 1.5 델타 (100%)이고; 프로토콜 II에 대해서는, 10분에서, 2.0 델타 (98.57%); 20 분에서, 2.0 델타 (98.57%), 30 분에서, 2.5 델타 (98.57%)이다. 유덴 지수에 따른, ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사 효능의 평가는, 프로토콜 I이 최적의 수행 지점에서 완벽한 진단 시험이라는 점을 보여준다. 프로토콜 I 및 II가 헬리 코박터 필로리에 감염된 개체를 양성으로 분류할 확률이 높다는 것을 의미하는 RV+를 조사하여 효능을 확인할 수 있으며, 이와는 반대로 RV-는 프로토콜 I 및 II가 헬리코박터 필로리에 비-감염된 개체를 양성으로 분류하여 제로(0) 값에 가까워진 확률이 있음을 의미한다.

표 2는, 10, 20 및 30 분의 최적 수행 컷오프 지점에서, 프로토콜 I에 대한 진단 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사이 100%의 감수성을 가짐을 보여준다. 이와는 대조적으로, 10, 20 및 30 분의 최적 수행 컷오프 지점에서, 프로토콜 II에 대한 진단 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사은 97.83%의 감수성을 가진다. 프로토콜 I 및 프로토콜 II 모두에 대한 특이성은 100%였다.

신뢰도 95%로, 10 분 (X² = 0.9857; p = 0.3208), 20 분 (X² = 0.9699; p = 0.3247), 및 30 분 (X² = 0.9857; p = 0.3208)에서, 프로토콜 I 및 프로토콜 II 간의 통계적인 유의한 차이는 없었다. 10분 및 30 분에서, 2가지 프로토콜에 대한 결과는 유사하였다.

표 2. ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사. 프로토콜 I 및 II에 대해, 상이한 컷오프 지점 (10, 20 또는 30분)에서의 감수성(Sensibilidad), 특이성(Especificidad), 양성 예측치(Valor Predictivo +), 및 음성 예측치(Valor Predictivo -). Laboratorio Clinico Hematologico S.A.(콜롬비아 메달린) 2006.

ROC 면적(그래프 1)에 의하면, 프로토콜 I에 따른 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사는 민감도 및 특이도 모두 1인 완벽한 테스트이다.

그래프 1. 프로토콜 I 및 II에 대해 10, 20, 30분에서의 ROC 커브의 비교. Laboratorio Clinico Hematologico S.A.; Medelin, 2006

민감도( Sensibilidad ), 특이도( Especificidad )

표 3과 그래프 2는 H. pylori 양성 및 음성 환자들에 대해 프로토콜 I 및 II에 대해 10, 20 및 30 분에서 컷오프(cutoff) 포인트 값 [δ¹³CO₂]을 나타낸다.

표 3. 프로토콜 I 및 II에 대해 헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori)에 대해 양성 및 음성인 환자들의 10, 20 및 30 분에서 δ¹³CO₂ 값의 분포. Laboratorio Clinico Hematologico S.A.; Medelin, 2006

양성(Positivo), 음성(Negativos), 매질(Media), 평균(Mediana), 표준편차(Desviacion Estandar), 최소값(Minimo), 최대값(Maximo), 하위 1/4(cuartel inferior), 상위 1/4(Cuartel Superior)

그래프 2. 프로토콜 I 및 II 에 대해 10, 20 및 30 분에서 헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori) 양성(Positivos) 및 음성(Negativos) 환자들의 DOB 값. Laboratorio Clinico Hematologico S.A.; Medelin, 2006

표 3과 그래프 2 또한 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사를 보여주는데, 프로토콜 I에서 헬리코박터 필로리 감염된 환자들의 10분일 때δ¹³CO₂ 평균은 13.64인 반면, 프로토콜 II에 대한 δ¹³CO₂ 평균은 12.02 였다. 이 두 값들 사이에 통계적으로 유의한 차이는 없었다(Wilcoxon, p=0.121). 대조적으로, 20분과 30분에서는, 통계적으로 유의한 차이가 있었다 (Wilcoxon, p는 각각 0.006 및 0.001 이었다).

또한, 표 3과 그래프 2는 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사에 대해, 프로토콜 I에서 비감염 대상자에 대해서는 10분일 때δ¹³CO₂ 평균이 0.51인 반면, 프로토콜 II에 대한 δ¹³CO₂ 평균은 0.32 였다. 이 두 값들 사이에 10, 20, 및 30 분에서, 통계적으로 유의한 차이는 없었다(Wilcoxon p는 각각, p=0.710, p=0.440 및 p=0.346 이었다).

토의: 결과는 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사의 일부로서 시트르산의 사용은 필요하지 않을 수 있음을 나타낸다. 프로토콜 I의 민감도 및 특이도는 또한, 구강 내에 고정된 다른 가능한 유레아제 생성 박테리아와 잔류 ¹³C 표지된 유레아의 접촉을 피하기 위해 캡슐 및 내시경 위내 주입 대신, 적정량의 물을 피검자에게 주는 새로운 독립적인 단계가 적절한 대안이 될 수 있음을 제시한다. 10분일 때의 프로토콜 I에 대한 결과는 또한, 적정량의 물을 피검자에게 주는 새로운 독립적인 단계가 위장관 내 헬리코박터 필로리 유레아제에 의한 빠른 ¹³C 표지된 유레아의 소멸에 대한 최적 조건을 부여할 수도 있음을 제시한다. 이 연구의 결과는 또한 ¹³C 표지된 유레아의 50 mg 투여량이, 표 2에 나타난 바와 같이, 민감도, 특이도, 양성 예측도 및 음성 예측도에 대한 최적 조건을 가지는 테스트에 적합함을 제시한다.

¹³C 표지된 유레아 호흡 검사로부터의 시트르산의 제거는, ¹³C 표지된 유레아를 포함하는 수성 용액이 무색, 무취, 무미 및 무해하다는 점에서, 보다 용인 가능한 테스트가 될 수 있게 한다.

결론적으로, 프로토콜 I은, 보다 줄어든 지속 시간 및 ¹³C 표지된 유레아의 양도 감소되어 더 쉽고 훨씬 용인 가능한 ¹³C 표지된 유레아 호흡 검사를 제공한다. 프로토콜 I의 테스트를 위한 시료들의 수집은 원격적으로 수행될 수 있으며, 또한 수집된 시료는 피검자 호흡 내 ¹³C 양에 부정적인 영향을 미치지 않고 상온에서 수 개월 동안 저장될 수 있기 때문에 우편으로 보내질 수도 있다. 프로토콜 I은 헬리코박터 필로리의 광범위한 박멸 및 역학 조사에 대규모로 사용될 있는 테스트를 제공한다.

Claims

호흡 검사를 기초로 한 병원체 미생물의 검출 방법으로서,

A. 개체의 1차 기초 호흡 시료를 채집하는 단계;

B. 1차 기초 호흡 시료를 채집한 후 바로 개체에게 표지된 탄소가 함유된 유레아 용액을 경구 제공하는 단계;

C. 표지된 탄소가 함유된 유레아 용액을 제공한 후 즉시 상기 개체에게 적량의 물을 제공하는 단계;

D. 적량의 물을 제공한 후 결정된 시간 후에 2차 호흡 시료를 채집하는 단계;

E. 1차 및 2차 호흡 시료에 존재하는 표지된 탄소의 양을 측정 및 분석하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 적량의 물이 100 mg 내지 250 mg인 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 탄소 표지된 유래아 용액이 15 내지 50 ml이고, 상기 탄소 표지된 유레아가 15 내지 50 mg이고, 상기 유레아의 표지된 탄소가 C-13인 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 2차 호흡 시료가 적량의 물을 개체에게 제공한 다음 적어도 4분 59초 지난 후에 채집되는 것을 특징으로 하는 방법.
제1항에 있어서, 상기 병원체 미생물이 헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori)인 것을 특징으로 하는 방법.
호흡 검사 수단에 의해 병원체 미생물을 검출하기 위한 키트로서,

상기 키트는

a. 물 함유 용기;

b. 탄소 표지된 유레아 함유 용기;

c. 호흡 검사를 개시하고 탄소 표지된 유레아를 섭취시키기 전에 1차 호흡 시료를 채집하기 위한 제1 용기;

d. 호흡 검사 종료 시에 적량의 물을 섭취시킨 후 2차 호흡 시료를 채집하기 위한 제2 용기를 포함하며,

상기 제1 용기와 제2 용기는 바늘형 센서가 들어갈 수 있는 메카니즘의 마개가 있는 것을 특징으로 하는 키트.
제6항에 있어서, 상기 탄소 표지된 유레아 함유 용기는 탄소 표지된 유레아를 15 내지 50 mg으로 포함하며, 탄소 표지된 유레아는 물에 용해되어 있으며, 탄소 표지된 유레아를 용해하는 물의 양은 15 내지 50 ml인 것을 특징으로 하는 키 트.
제6항에 있어서, 상기 탄소 표지 유레아는 C-13으로 표지된 것을 특징으로 하는 키트.
제6항에 있어서, 상기 물 함유 용기는 물을 200 - 250 ml 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.
제6항에 있어서, 상기 키트는 1차 호흡 시료와 2차 호흡 시료를 제1 용기 및 제2 용기에 각각 채집하기 위한 한쌍의 수단을 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.
제10항에 있어서, 상기 1차 호흡 시료와 2차 호흡 시료를 채집하기 위한 수단은 한쌍의 스트로인 것을 특징으로 하는 키트.
제11항에 있어서, 상기 물 함유 용기, 상기 탄소 표지된 유레아 함유 용기, 상기 제1 용기, 상기 제2 용기 및 한쌍의 스트로는 카트리지내에 들어 있는 것을 특징으로 하는 키트.
제10항에 있어서, 상기 병원체 미생물이 헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori)인 것을 특징으로 하는 키트.