KR20090032583A - ALPINIA OFFICINARUM EXTRACT FOR INHIBITING OF 5alpha;-REDUCTASE ACTIVITY AND COSMETIC COMPOSITION FOR INHIBITING OF SEBUM SECRETION OR IMPROVING OF ACNES - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 양강 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 양강 추출물을 함유하는 피지 분비 억제 또는 여드름 개선 화장료에 관한 것이다.The present invention relates to a 5α-reductase inhibitor, characterized in that it contains a Yang Yang extract. The present invention also relates to sebum secretion inhibiting or acne-improving cosmetics containing a Yang Yang extract.
5α-리덕테이즈(5α-reductase)는 피지선, 모낭, 전립선, 부고환 등의 남성 호르몬 반응성 조직에 존재하며, 남성 호르몬들 중 하나인 테스토스테론(Testosterone)을 다이하이드로테스토스테론(Dihydrotestosterone:DHT)으로 환원시키는데 관여하는 효소로서 그 전환에는 엔에이디피에이치(NADPH)를 필요로 한다. 남성 성충동, 골격근 증가, 남성외부생식기, 음낭 성장, 정자 형성 등에는 테스토스테론이 관여하고, 여드름, 피지, 전립선비대증 등에는 다이하이드로테스토스테론이 해당 조직에서 관여한다(참고문헌:Diane et al; JID 775-778, 1995. Bruchovsky, N et al; JBC 243,2112~2121, 1968). 따라서, 5α-리덕테이즈 효소의 억제제를 사용하여 여드름 치료제 및 피지분비 억제제를 개발하려는 연구들이 활발히 진행되고 있다. 5α-reductase is present in testosterone-reactive tissues such as sebaceous glands, hair follicles, prostate, and epididymis, reducing testosterone, one of the testosterones, to dihydrotestosterone (DHT) As an enzyme involved, its conversion requires NDPH (NADPH). Testosterone is involved in male impulse, skeletal muscle increase, male external genitalia, scrotum growth, and sperm formation, and dihydrotestosterone is involved in acne, sebum, and prostatic hyperplasia (Diane et al; JID 775-). 778, 1995. Bruchovsky, N et al; JBC 243, 2112-2121, 1968). Therefore, studies are actively underway to develop acne therapy and sebum secretion inhibitors using inhibitors of 5α-reductase enzyme.
일반적으로 두피, 얼굴을 포함한 피부에서 피지는, 피부의 보습유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하고 있지만, 사춘기 이후에는 여드름을 유발 시킨다. 특히, 20대 이후의 여성의 경우에는 피지의 과잉 분비로 인해 피부 번들거림, 화장의 들뜸 및 모공이 넓어지는 등 미용면에서 많은 문제를 유발시킨다. 피지 과잉이 일어나는데는 여러가지 원인이 관여하고 있는데, 그 중에서도 가장 중요한 것은 피지선의 활성에 있어 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬의 하나인 다이하이드로테스토스테론의 양에 의해서 피지선의 세포가 활성화되어 피지 과분비가 일어난다고 알려져 있다. In general, sebum in the skin, including the scalp and face is responsible for maintaining the skin's moisturizing and microorganisms invasion, but after puberty causes acne. In particular, women in their 20s and later cause a lot of problems in terms of beauty, such as skin lingering, makeup lifting and pores widening due to the excessive secretion of sebum. Sebaceous excess is caused by various causes, the most important of which is the sebum gland is activated by the amount of dihydrotestosterone, one of the hormones involved in promoting sebum secretion in sebaceous gland activation It is known.
여드름은 하나의 원인이 아니라 여러 가지 원인이 복합적으로 관여하는데, 사춘기의 남성 호르몬 기능 항진으로 피지선의 분비가 왕성해지고 모낭의 상피세포가 이상을 일으켜 모낭이 막히고 이로 인해 여드름의 기본 병변인 면포가 형성된다. 모낭 내에 상주하는 균은 자유-지방산(free fatty acid)을 생성하여 모낭을 자극하여 염증을 유발한다. 이러한 여드름으로의 진행은 피지 과분비로인해 더욱 악화된다.Acne is not a single cause, but a combination of a number of causes, and pubertal hyperactivity of the sebaceous glands is active and epithelial cells in the hair follicles become abnormal, clogging the hair follicles, which causes the scalp, the primary lesion of acne, to form. do. Bacteria that reside in hair follicles produce free fatty acids that stimulate hair follicles to cause inflammation. This progression to acne is exacerbated by sebum oversecretion.
이러한 남성 호르몬 억제로 인한 여드름 치료를 위해, 종래에는 에스트로겐 등의 여성 호르몬을 사용하거나 5α-리덕테이즈 억제제를 이용해왔다. 그러나 이러 한 여성 호르몬제들은 여드름 치료 효과 외에, 피부 염증 발생, 호르몬 투여에 의한 부작용 발생 등이 보고되고 있어, 현재는 사용을 중단하거나 매우 극미량을 사용하고 있는 실정이다. 한편, 피지 과분비를 억제하는 여드름 치료제로 5α-리덕테이즈의 억제제인 아젤레익 산(azelaic acid)을 15~20 중량% 가량 함유한 제제로 시판되고 있다.For the treatment of acne due to such testosterone suppression, female hormones such as estrogen have been conventionally used or 5α-reductase inhibitors have been used. However, these female hormonal agents, in addition to the acne treatment effect, skin inflammation, side effects caused by the hormone has been reported, and is currently being used or very very small amount. On the other hand, it is commercially available as an agent containing 15 to 20% by weight of azelaic acid, an inhibitor of 5α-reductase, as an acne treatment agent that inhibits sebum oversecretion.
한편, 화장품 분야에서도 피지의 과분비는 화장품의 들뜸이나 모공이 넓어지게 되는 요인으로서 중요한 관심의 대상임에도 불구하고 그 연구는 미미한 실정이다. 현재 피지 억제 화장품은, 일시적으로 피지를 흡착시키는 다공성 파우더를 사용하거나, 기존에 피지를 억제한다고 알려진 생약 추출물인 아이비 추출물 등을 화장품 원료로 사용하고 있으나 그 효과는 미미하다. On the other hand, even in the cosmetic field, sebum oversecretion is a factor of interest as a factor causing the lifting of the cosmetics and widening of the pores, but the study is insignificant. Currently, sebum inhibiting cosmetics use a porous powder that temporarily adsorbs sebum or ivy extract, which is a herbal extract known to inhibit sebum, as a cosmetic raw material, but its effect is insignificant.
본 발명은, 이러한 현실을 감안하여 이미 알려져 있는 피지 억제 물질의 문제점을 극복하고자 하는 연구의 일환으로 천연물들 중에서 유효 물질을 검색하여, 5α-리덕테이즈의 저해 효과를 나타내는 천연물의 추출물을 찾고자 하였으며, 그 결과 이러한 천연물 추출물이 피지 분비 억제 또는 여드름 개선 효과가 있음을 확인 하였다.The present invention, in view of this reality, as part of the research to overcome the problems of the known sebum inhibitory substance was searched for an active substance among natural products, to find an extract of natural products showing the inhibitory effect of 5α-reductase. As a result, it was confirmed that these natural extracts have an effect of inhibiting sebum secretion or improving acne.
따라서, 본 발명은 양강 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제에 관한 것이다. Accordingly, the present invention relates to a 5α-reductase inhibitor, characterized in that it contains a Yang Yang extract.
또한, 본 발명은 5α-리덕테이즈에 의해 생성되는 다이하이드로테스토스테론으로 인한 부작용을 억제하기 위해 양강 추출물을 사용하는 방법에 관한 것이다. 이에 나아가 본 발명은 양강 추출물을 함유하는 피지 분비 억제 또는 여드름 개선 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention also relates to a method of using the Yang Yang extract to suppress the side effects caused by dihydrotestosterone produced by 5α-reductase. Furthermore, the present invention relates to a cosmetic composition having a sebum secretion inhibitory or acne-improving effect containing a Yang Yang extract.
본 발명자들은 피지 분비, 여드름 생성 등을 유발한다고 알려져 있는 다이하이드로테스토스테론의 양을 조절하고자, 다이하이드로테스토스테론을 촉매하는 효소인 5α-리덕테이즈의 활성을 억제하는 천연 추출물을 찾고자 노력하였다. The present inventors have tried to find a natural extract that inhibits the activity of 5α-reductase, an enzyme catalyzing dihydrotestosterone, in order to control the amount of dihydrotestosterone known to cause sebum secretion and acne production.
양강을 포함하여 200여종의 여러 천연 식물 추출물을 이용하여, 시험관내(in vitro)에서 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하는지를 실험한 결과 양강 추출물이 5α -리덕테이즈를 억제한다는 사실을 발견하였다. Using 200 different natural plant extracts, including Yanggang, we tested whether it inhibited the activity of 5α-reductase in vitro and found that Yanggang extract inhibited 5α-reductase. .
이를 기초로 하여, 본 발명자는 양강 추출물을 이용하여 피지 분비 감소, 여드름 개선효과를 실험한 결과, 양강 추출물이 우수한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. On the basis of this, the present inventors were able to confirm that the Yanggang extract showed an excellent effect as a result of experiments to reduce sebum secretion, acne improvement effect using the Yanggang extract.
따라서, 본 발명은 양강 추출물을 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하는데 사용하고자 하며, 나아가 이러한 추출물을 피지 분비 감소 및 여드름을 개선하는데 사용하고자 한다. Therefore, the present invention intends to use the Yang Yang extract to inhibit the activity of 5α-reductase, and furthermore to use such extract to reduce sebum secretion and improve acne.
양강(일명 고량강, 학명: Alpinia officinarum -맞습니다)은 높이 100cm에 이르는 생강과(Zingiberaceae)의 다년생 초본으로 가을에 캐서 잔뿌리를 다듬고 햇볕에 말려 생강과 같은 방향성 건위약으로 쓰인다. 한의에서 복통, 관란 구토 , 설사, 식체에 효과가 있다. 씨는 홍두구라고 하며, 약효는 양강과 같고 또 주독을 푼다. 뿌리줄기에 0.5~1%의 정유가 있는데 티네올, 디알파-피넨, 계피산메틸에스테르 등입니다. 또한 매운맛을 내는 갈란골이라는 물질이 있다. Yanggang (aka Goryang River, scientific name: Alpinia) officinarum (right ) is a perennial herb of the Zingiberaceae, reaching up to 100 cm in height, trimmed in the casserole in the autumn, and dried in the sun and used as a fragrant horsor such as ginger. It is effective in abdominal pain, vomiting, diarrhea and planting. Seed is called Hongdugu, and the medicinal effect is the same as Yanggang, and unpacks the poison. There are 0.5 ~ 1% essential oils in the root stem, such as tinenol, dialpha-pinene and methyl cinnamic acid ester. There is also a substance called spicy galangol.
본 발명의 화장료에 함유되는 양강 추출물은 양강의 가지, 잎, 뿌리, 열매, 근경 또는 전초로부터 통상적인 추출방법에 의하여 추출된다. 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 양강 추출물은 줄기, 뿌리 및 잎으로부터 추출된다.Yangjiang extract contained in the cosmetic of the present invention is extracted by the conventional extraction method from the branches, leaves, roots, fruits, rhizome or outpost of the Yanggang. According to a preferred embodiment of the present invention, the Yang Yang extract is extracted from stems, roots and leaves.
본 발명의 화장료 조성물에 이용되는 양강 추출물은, 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 얻어질 수 있고, 바람직하게는 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또 는 함수 저급 알코올 (예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름 또는 (f) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 얻은 것이다. 보다 바람직하게는, 추출 용매는 에탄올이며, 가장 바람직하게는 약 70% 에탄올이다. 추출의 재료가 되는 식물 추출물은 식물의 가지 또는 잎은 이를 건조하여 사용하거나 또는 그대로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 건조하여 사용하는 것이다. 건조법으로는 자연 건조 또는 열풍 건조법을 이용할 수 있다. Yangjiang extract used in the cosmetic composition of the present invention can be obtained through a variety of methods known in the art, preferably (a) water, (b) anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (eg : Methanol, ethanol, propanol, butanol and the like), (c) acetone, (d) ethyl acetate, (e) chloroform or (f) 1,3-butylene glycol. More preferably, the extraction solvent is ethanol, most preferably about 70% ethanol. The plant extract, which is a material for extraction, may be used by drying the branch or leaves of the plant or as it is, and preferably by drying. As a drying method, natural drying or a hot air drying method can be used.
한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출용매 뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 식물 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.On the other hand, it will be apparent to those skilled in the art that the extract of the present invention can be obtained not only the above-described extraction solvent, but also plant extracts having substantially the same effect using other extraction solvents.
또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물 뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 식물 추출물에 포함되는 것이다. 본 발명의 식물 추출물들은 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.(추출방법에 대해 추가했습니다)In addition, the extract of the present invention includes not only the extract by the above-mentioned extraction solvent, but also the extract that has undergone a conventional purification process. Obtained by various additional purification methods, such as, for example, separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity). The fraction is also included in the plant extract of the present invention. The plant extracts of the present invention may be prepared in powder form by additional processes such as distillation under reduced pressure, freeze drying or spray drying (addition to extraction method).
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 양강 추출물의 양은 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001~10중량%이다. 양강 추출물의 양이 0.0001중량% 미만 이면, 양강 추출물에 의한 효과가 크게 감소되고, 10중량%를 초과하는 경우에는 오히려 피부 자극을 초래할 수 있고, 제형상의 문제점이 있다. 보다 바람직하게는, 상기 양강 추출물의 양은 0.5~5%이며, 가장 바람직하게는 1.0~3.0중량%이다. According to a preferred embodiment of the present invention, the amount of the Yanggang extract is 0.0001 to 10% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition. If the amount of Yang Yang extract is less than 0.0001% by weight, the effect by the Yang Yang extract is greatly reduced, if it exceeds 10% by weight can cause skin irritation, there is a problem in formulation. More preferably, the amount of the Yanggang extract is 0.5 to 5%, most preferably 1.0 to 3.0% by weight.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 양강 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the Yangtze extract as an active ingredient, and include, for example, conventional auxiliaries such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings, and Carrier.
본 발명의 피지 분비 감소 또는 여드름 개선용 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말, 파운데이션, 유탁액과 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형활 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다. The sebum secretion reducing or acne improving composition of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powder soaps, It may be formulated into surfactant-containing cleansing, oils, powders, foundations, emulsions and foundations, wax foundations, sprays, and the like, but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oils, vegetable oils, waxes, paraffins, starches, trachants, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide may be used as carrier components. Can be.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카 본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, and especially in the case of spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, Propellant such as propane / butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid carrier diluents such as water, ethanol or propylene glycol, suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystals Soluble cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.(일반적인 제형에 관한 내용 추가했습니다)When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, an isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide. Ether sulfates, alkylamidobetaines, fatty alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters can be used.
이하, 제조예 및 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발 명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Preparation Examples and Experimental Examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, it is to those skilled in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention. Will be self-evident.
이상에서 상세히 설명하였듯이, 본 발명에 의해 제공되는 양강 추출물은 5α-리덕테이즈 저해효과가 우수할 뿐만 아니라, 이를 함유한 화장료 조성물을 사람에게 사용했을 때 피지 분비 감소 및 여드름 개선 효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 양강 추출물은 제품에 영향을 미치지 않는 농도에서 피지 분비 억제 및 여드름 완화 효과가 있으므로 피지 분비 억제 화장료 또는 여드름 완화 화장료에 유효농도로 사용할 수 있다. As described in detail above, the Yanggang extract provided by the present invention not only has an excellent 5α-reductase inhibitory effect, but also has a sebum secretion and an acne-improving effect when a cosmetic composition containing the same is used in humans. Therefore, the Yanggang extract according to the present invention has sebum secretion suppression and acne alleviating effect at a concentration that does not affect the product can be used as an effective concentration in sebum secretion cosmetics or acne relief cosmetics.
제조예1 : 양강 추출물 제조Preparation Example 1: Preparation of Yanggang Extract
곱게 자른 양강의 줄기 뿌리 및 잎을 1kg을 에틸 알코올과 물이 7:3(v/v)으로 혼합된 수용액에 5일 동안 침전 시키고, 300메쉬에 여과한 다음, 진공 감압 농축기를 이용하여 80℃에서 농축 시켰다. 이렇게 하여 얻어진 양강 파우더를 다시 제품에 적용하기 용이하게 1,3-부틸렌 글리콜에 용해시켰다.1 kg of finely chopped stem roots and leaves were precipitated in an aqueous solution mixed with ethyl alcohol and water at 7: 3 (v / v) for 5 days, filtered over 300 mesh, and then vacuum dried at 80 ° C. using a vacuum concentrator. Concentrated in. The obtained Yanggang powder was dissolved in 1,3-butylene glycol for easy application to the product again.
실험예 : 양강 추출물의 5α-리덕테이즈 활성 저해 효과 시험Experimental Example: 5α-Reductase activity inhibitory effect test of Yanggang extract
양강 추출물이 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하는 억제제인지를 확인하고자 본 실험을 실시하였다. This experiment was carried out to determine whether the Yanggang extract is an inhibitor that inhibits the activity of 5α-reductase.
< 효소액의 제조><Production of enzyme solution>
24시간 절식한 성숙한 스트레그 돌리 랫드(Sprogue-Dawley rat)(생후 7~8주)을 디에틸이서(diethylether)로 치사시키고 나서, 간장(liver)을 얼음 냉각한 크랩스-링거 포스페이트 완충액(Krebs-Ringer phosphate buffer)(pH 7.2)로 관류하였다. 여기에 5배량의 얼음 냉각한 트리스 에이치시엘 완충액(Tris-HCL buffer, pH7.2)를 가하여 균질화하고, 900Xg, 10분간 원심 분리하였다. 상층을 5000Xg, 10분간 원심분리하고, 그상층을 9000Xg, 10분간 원심분리할 때 얻은 상층을 효소액으로 사용했다. 효소액은 80℃에서 동결보존하였다. A 24-hour fasted Sprogue-Dawley rat (7-8 weeks of age) was killed with diethylether, and then the liver was ice-cold Craps-Ringer phosphate buffer (Krebs). Perfusion with Ringer phosphate buffer (pH 7.2). To this was added 5 times ice-cold Tris HSI buffer (Pris-HCL buffer, pH 7.2), homogenized, and centrifuged at 900Xg for 10 minutes. The upper layer was centrifuged at 5000Xg for 10 minutes, and the upper layer obtained when the upper layer was centrifuged at 9000Xg for 10 minutes was used as the enzyme solution. The enzyme solution was cryopreserved at 80 ° C.
< 5α-리덕테이즈의 저해 작용 ><Inhibitory Activity of 5α-Reductase>
트리스 에이치시엘 완충액(pH 7.2)1.0ml에 테스토스테론 (500ug/ml) 0.3ml, 제조예 1에서 준비된 양강 추출물을 0.1, 0.2, 0.5, 1%의 농도로 0.2ml을 및 효소액 1.0ml을 혼화하고, NADPH (0.77mg/ml) 0.5ml을 가하여 반응을 개시하고, 37℃ 에서 30분간 배양 하였다. 디클로로메탄(Dichloromethane) 5ml을 가하여 반응을 정지시켜, 내부 표준물질(p-hydroxybenzoicacid n-hexyl ester, 0.1mg/ml) 0.5ml을 가하여 10분간 진탕하고, 3000rpm에서 10분간 원심분리 하였다. 상층을 제거한 후, 디클로로메탄층을 남기고, 여기에 메탄올(methanol) 5ml을 가하여 고속 액체크로마토그래피(HPLC)용 샘플로 사용하였다. 0.3 ml of testosterone (500 ug / ml), 0.2 ml of the Yangtze extract prepared in Preparation Example 1 at a concentration of 0.1, 0.2, 0.5, 1% and 1.0 ml of enzyme solution were mixed with 1.0 ml of Tris Hciel buffer (pH 7.2), 0.5 ml of NADPH (0.77 mg / ml) was added to initiate the reaction, and incubated at 37 ° C for 30 minutes. 5 ml of dichloromethane was added to stop the reaction. 0.5 ml of an internal standard (p-hydroxybenzoic acid n-hexyl ester, 0.1 mg / ml) was added thereto, shaken for 10 minutes, and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes. After the upper layer was removed, a dichloromethane layer was left, and 5 ml of methanol was added thereto and used as a sample for high performance liquid chromatography (HPLC).
저해율(%) =% Inhibition =
cont 0 : NADPH를 가하기 전에 디클로로메탄을 가해서 반응을 일으키지 않도록 한 것cont 0: Add dichloromethane before adding NADPH to avoid reaction
cont 1 : 시험액을 가할 때와 같은 방법으로 행한 것cont 1: the same method as for the addition of test solution
표 1에서 보는 바와 같이 양강 추출물은 5α-리덕테이즈의 활성을 억제하여, 5α-리덕테이즈와 관련된 남성 호르몬 디하이드로스테론의 생성량을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있었다. As shown in Table 1, Yang Yang extract was found to have an effect of inhibiting the activity of 5α-reductase, inhibiting the amount of testosterone dihydrosterone associated with 5α-reductase.
실험예Experimental Example 2 : 면포 억제 시험 2: cotton cloth suppression test
토끼의 귀에 면포 유발물질을 처리하면 1주일 경과 후부터는 면포가 커지는데 일반적으로 면포가 커지는 것은 여드름의 염증이 일어나기 전단계와 같은 양상이다. 면포가 커지면서 모공 내에는 피지가 과량 들어 있게 되고 이로 인해 모공도 정상적인 상태보다 커지게 된다. 따라서, 면포 발생 실험은 사람에서의 여드름 효과와는 다소 다르지만 현재로서 가장 여드름과 유사한 양상을 보이는 실험 모델이다. Treating a cotton-causing agent in the rabbit's ears will cause the cotton to grow after one week, but the larger cotton usually looks the same as before acne's inflammation. As the scalp grows, there is an excess of sebum in the pores, which causes the pores to become larger than normal. Thus, the scum outbreak experiment is somewhat different from the acne effect in humans, but it is the experimental model that is most similar to acne at present.
제조예 1에서 준비된 양강 추출물이 면포 억제 능력이 있는지 확인하고자 아래와 같은 실험을 실시하였다. In order to check whether the Yanggang extract prepared in Preparation Example 1 has a cotton cloth suppression ability, the following experiment was performed.
흰토끼의 귀에 면포 유발 물질인 50% 올레익산/파라핀 오일을 200ul씩 하루 1번 도포하여 면포를 유발시킴과 동시에, 제조예 1에서 준비된 양강 추출물을 화장품 원료이며 면포를 유발하지 않는 1,3-BG에 1%로 녹여, 하루에 2번 200ul씩 도포하였다. 대조군으로 올레익산을 처리하고 양강 추출물을 바르지 않은 군(대조군)으로 설정하여 실험하였다. 면포의 수는 면포의 크기가 0.2mm 이상되는 것을 기준으로 삼았다. 면포 발생 부위의 조직을 0.8mm절편하여 각질을 벗겨낸 후, 광학현미경으로 면포의 크기를 측정하였다. A~E는 면포의 크기를 측정하기 위해 절편 한 조직에서 전체 면포들 중 면포가 잘 발달된 것들 중에서 무작위로 6개를 선정해 면포 크기를 측정한 것이다. 그 결과는 표 2에 나타나 있다.Applying 200ul of 50% oleic acid / paraffin oil, which is a cotton-causing substance, to the rabbit's ears once a day to induce cotton cloth, and the Yanggang extract prepared in Preparation Example 1 is a cosmetic raw material and does not cause cotton cloth. Dissolved in 1% in BG, 200ul was applied twice a day. Oleic acid was treated as a control and Yanggang extract was tested by setting it as a non-control group (control). The number of cotton cloth was based on the size of the cotton cloth being 0.2 mm or more. After exfoliation of the tissue of the scleroderma site by 0.8 mm, the size of the scrim was measured by an optical microscope. In order to measure the size of the cotton, A ~ E was measured randomly by selecting six randomly selected ones from among the whole cotton fabrics in one tissue. The results are shown in Table 2.
상기 표 2에서 알 수 있듯이 본 발명에 따른 양강 추출물이 면포의 발생을 억제하는 효과가 있음을 확인 할 수 있었다. 즉 면포의 수와 크기가 적게 발생하는 것은 양강 추출물이 피지의 분비를 적게 유발시켜 여드름으로의 진행을 억제하는 것을 확인할 수 있는 결과였다. As can be seen in Table 2, it was confirmed that the Yanggang extract according to the present invention has an effect of suppressing the generation of cotton cloth. In other words, the less number and size of cotton cloth was confirmed that the Yangyang extract induced sebum secretion to inhibit the progression to acne.
실험예Experimental Example 3 : 피지 분비 억제 효과 3: sebum secretion inhibitory effect
양강 추출물의 피지 분비 억제 효과가 있는지를 확인하기 위해 피지 분비량이 많은 20대 남녀 20명을 대상으로 A, B 두 그룹으로 나누어 아래와 같은 실험을 실시 하였다. A 그룹에는 양강 추출물이 함유된 제형예 1의 유연 화장수를, B 그룹에는 양강 추출물이 함유되지 않은 일반 화장수(대조군)를 매일 아침, 저녁 세안 후 4주간 사용하도록 하였다. 피지 측정은 세안 후 30분간 항온, 항습실에서 안정시킨 후 피지측정기(Sebumeter)를 이용하여, 이마에서 피지량을 측정하였다. 양강 추출물을 사용하기 전 피지량을 초기값으로 설정하였다. 양강 추출물이 함유된 유연 화장수(제형예 1)를 지속적으로 사용하면서 매주 1회 4주간 피지량의 변화를 측정하였다. 초기값과 비교하여 양강 추출물을 함유한 유연 화장수의 피지 억제 효능 여부를 판정하였는데 그 결과는 표 3에 나타나 있다.In order to determine whether sebum secretion inhibitory effect of sesame leaves extract, 20 men and women in their 20s with high sebum secretion were divided into two groups, A and B, and the following experiment was conducted. In group A, the flexible lotion of Formulation Example 1 containing the Yanggang extract was used, and the general lotion (control group) containing no Yang extract was used every morning and evening for 4 weeks after washing. Sebum measurement was stabilized in a constant temperature and humidity room for 30 minutes after washing the face, and then sebum was measured on the forehead by using a sebumeter. Sebum amount was set to the initial value before using the Yanggang extract. The change of sebum amount was measured once a week for 4 weeks while continuously using the flexible lotion containing the Yanggang extract (Formulation Example 1). In comparison with the initial value, it was determined whether the sebum inhibitory effect of the flexible lotion containing the Yanggang extract was shown in Table 3.
상기 표3에 나타난 결과와 같이 양강 추출물을 함유한 유연 화장수는 피지 분비를 감소시킴으로써 결과적으로 피지의 과잉분비로 인해 여드름이 발생되는 것을 방지할 수 있을 것으로 생각되어진다.As shown in Table 3, the flexible lotion containing the Yang Yang extract is thought to be able to prevent the occurrence of acne due to sebum oversecretion by reducing sebum secretion.
실험예 4 : 여드름 개선 효과Experimental Example 4: Acne Improvement
여드름이 발생한 남녀 10명으로 대상으로 제형예1의 처방에 따른 유연 화장수를 아침, 저녁으로 4주간 얼굴 전체에 고루 바르도록 하였다. 효과의 판정은 시험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 1~3점으로 평가하도록 하였다. Ten men and women with acne were subjected to the flexible lotion according to the formulation of Formulation Example 1 evenly applied to the entire face for four weeks in the morning and evening. The effect was judged by 1 to 3 points depending on the degree of feeling felt by the person who participated in the test.
시험전Before the test 상태의 평가 Assessment of status
1 = 여드름 조금 있음 2 = 여드름 약간 있음 3 = 여드름 심함1 = some acne 2 = some acne 3 = severe acne
여드름 효과 판정Acne Effect Determination
- : 효과 거의 없음 + : 약간의 효과 있음-: Almost no effect +: Slight effect
++ : 많이 완화 +++ : 완전히 치유됨++: Relaxed a lot +++: Completely healed
상기의 표 4에서 알 수 있듯이 양강 추출물이 함유된 유연 화장수를 4주간 사용한 결과 대다수의 피험자들이 여드름이 개선되었다고 답하였다.As can be seen in Table 4, the majority of the subjects answered that acne was improved as a result of using the flexible lotion containing the Yang Yang extract for 4 weeks.
실험예 5. 양강 추출물의 안전성 평가- 스팅시험(Stinging test)Experimental Example 5. Safety Evaluation of Yanggang Extract-Stinging Test
피검자 15명을 대상으로 시험하였으며, 연령분포는 25세 ~ 33세이며, 평균연령은 31.5세였다. 스팀 발생기를 사용하여 15분간 충분히 발한(Sweating)시키고 나서 충분량의 시료를 손에 묻혀 제형예 4의 영양 크림에서 실시예 1, 비교예 1을 각각 왼쪽과 오른쪽의 코 주위 및 뺨을 중심으로 강하게 비빈다. 스팅 등급(Stinging grade)은 적용 후 자극 반응이 나타나는 시간에 따라 30초 이내에 나타나는 경우를 강한 스팅(Intense stinging), 2.5분 중간 스팅(Mild stinging), 5분 적절한(Moderate stinging) 그리고 8분 이내에 나타나는 경우를 지연된 스팅(Delayed stinging)으로 분류하여 평가하여 표5에 나타내었다.The subjects were tested for 15 subjects. The age distribution ranged from 25 to 33 years with an average age of 31.5 years. After 15 minutes of sweating using a steam generator, a sufficient amount of the sample is applied to the hands, and the nutrient cream of Formulation Example 4 is strongly rubbed around Example 1 and Comparative Example 1 around the left and right noses and cheeks, respectively. . Sting grade refers to intense stinging, 2.5 minutes mild stinging, 5 minutes moderate stinging and within 8 minutes depending on the time of stimulus response after application. The cases were classified into delayed stings and evaluated in Table 5.
상기 표5에서 확인할 수 있듯이, 양강 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물에 의한 피부 자극이 없음을 스팅 테스트를 통해 알 수 있다. As can be seen in Table 5, it can be seen through the Sting test that there is no skin irritation by the cosmetic composition of the present invention containing the Yanggang extract.
제형예 1: 유연 화장수 Formulation Example 1 Flexible Lotion
양강 추출물을 함유한 화장료 중 유연 화장수의 제형예는 다음과 같다.Formulation examples of the flexible lotion in the cosmetic containing the Yanggang extract is as follows.
제형예 2: 수렴 화장수Formulation Example 2: Convergence Lotion
양강 추출물을 함유한 화장료 중 수렴 화장수의 제형예는 다음과 같다.An example of the formulation of the astringent lotion in the cosmetic containing the Yanggang extract is as follows.
제형예 3: 영양 화장수Formulation Example 3: Nutritional Lotion
양강 추출물을 함유한 화장료 중 영양 화장수의 제형예는 다음과 같다.An example of the formulation of the nutritional lotion in the cosmetic containing the Yanggang extract is as follows.
제형예 4: 영양 크림Formulation Example 4: Nutrition Cream
양강 추출물을 함유한 화장료 중 영양 크림의 제형예는 다음과 같다.An example of the formulation of a nourishing cream in cosmetics containing the Yanggang extract is as follows.
제형예 5Formulation Example 5
양강 추출물을 함유한 화장료 중 맛사지 크림의 제형예는 다음과 같다.An example of the formulation of the massage cream in the cosmetic containing the Yanggang extract is as follows.
제형예 6: 에센스Formulation Example 6: Essence
양강 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 제형예는 다음과 같다.Formulation examples of the essence in the cosmetic containing the Yanggang extract is as follows.
제형예 7: 팩Formulation Example 7: Pack
양강 추출물을 함유한 화장료 중 팩의 제형예는 다음과 같다.Formulation examples of the pack in the cosmetic containing the Yanggang extract is as follows.
Claims (5)
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