KR20070055414A

KR20070055414A - 피리미도티오펜 화합물

Info

Publication number: KR20070055414A
Application number: KR1020067004012A
Authority: KR
Inventors: 브리안 윌리암 디모크; 마틴 제임스 드라이스데일; 크리스토프 프로몬트; 알란 조단; 크사비어 바릴-앨론소
Original assignee: 베르날리스(캠브리지)리미티드; 디 인스티튜트 오브 캔써 리서치; 캔서 리서치 테크놀로지 리미티드
Priority date: 2003-08-29
Filing date: 2004-08-26
Publication date: 2007-05-30
Also published as: US20070043044A1; JP2007533611A; JP4783731B2; HK1095591A1; ES2559779T3; NO20061416L; KR101139314B1; US20100120767A1; BRPI0413861A; EP1675861A1; AU2004268820A1; NZ546044A; CA2537135A1; CA2537135C; EA009920B1; US7820658B2; EP1675861B1; EA200600509A1; WO2005021552A1; US8642594B2

Abstract

다음식(I)의 화합물은 생체 외 또는 생체 내의 HSP90 활성의 저해제이고, 특히 암치료에 사용한다:

상기식에서 R₂는 식 -(Ar¹)_m-(Alk¹)_p-(Z)_r-(Alk²)_s-Q의 기이고, 이 식에서 Ar¹은 임의로 치환되는 아릴 또는 헤테로아릴기이고, Alk¹과 Alk²는 임의로 치환되는 2가 C₁-C₃ 알킬렌 또는 C₂-C₃ 알켄일렌기이고, m, p, r과 s는 각각 0 또는 1이고, Z는 -O-, -S-, -(C=O)-, -(C=S)-, -SO₂-, -C(=O)O-, -C(=O)NR^A-, -C(=S)NR^A-, -SO₂NR^A-, -NR^AC(=O)-, -NR^ASO₂- 또는 -NR^A-(여기서 R^A는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬이다)이고, Q는 수소 또는 임으로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리기이다; R₃는 수소, 임의의 치환기 또는 임의로 치환된 (C₁-C₆)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고; R₄는 카르복실에스테르, 카르복스아미드 또는 술폰아미드기이다.

Description

피리미도티오펜 화합물 {PYRIMIDOTHIOPHENE COMPOUNDS}

본 발명은 HSP90 저해활성을 갖는 치환된 두 고리 티에노[2,3-d]피리미딘(여기서, '피리미도티오펜'이라 한다) 화합물, 암과 같은 HSP90 활성의 저해에 반응하는 질병에 대하여 이 화합물의 약제로서의 용도와 이 화합물을 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

분자 샤프롱은 단백질의 적당한 중첩과 형태를 유지하고, 단백질 합성과 분해 사이의 균형 조절을 결정한다. 이들은 세포증식과 고사(Jolly and Morimoto, 2000; Smith 등, 1998; Smith, 2001)와 같은 여러가지 세포 기능을 조절하는데 중요한 것으로 나타났다.

열충격 단백질( HSPs )

열충격, 알코올, 중금속과 산화성 스트레스를 포함한 여러가지 환경 스트레스에 세포를 노출시키면 통상 열충격 단백질(HSPs)로 알려져 있는 여러가지 샤프롱의 세포 축적을 가져온다. HSPs의 유도는 최초 스트레스 상해에 대한 세포를 보호하고 스트레스 내성 상태의 유지를 이끌고 회복을 강화한다. 그러나, HSPs는 중요한 세포단백질의 성장 리스트의 정확한 중첩, 분해, 배치와 기능을 조절하여 정상의 스트레스없는 증상하에 주요 분자 샤프롱 역할을 할 수 있음이 분명하다.

HSPs의 여러가지 대유전자군은 세포 발현, 기능과 배치에서 변화하는 개개의 유전자 생성물로 존재한다. 이들은 분자량에 따라 예를들어, HSP70, HSP90과 HSP27로 분류된다. 사람에 있어 몇가지 질병은 단백질의 부적합한 중첩의 결과에 따라 얻을 수 있다(Tytell 등, 2001; Smith 등, 1998 재조사). 그러므로, 분자 샤프롱 조직을 분쇄시키는 치료의 개발이 유익함이 증명이 되었다. 몇가지 증상(예를들어, 알츠하이머 질병, 프리온 질병과 헌팅톤 질병)에서 부적합하게 중첩된 단백질은 신경퇴행성 장애의 결과를 가져오는 단백질 응집을 일으킬 수 있다. 또한, 부적합하게 중첩된 단백질은 세포에서 비조절된 분자와 생리적 기능을 유도하므로서 야생형 단백질 기능의 손실을 가져온다.

또한, HSPs는 암에 포함된다. 예를들면, 종양 진행단계에 관계하는 HSPs의 특이 형태의 발현을 나타낸다(Martin 등, 2000; Conroy 등, 1996; Kawanishi 등, 1999; Jameel 등, 1992; Hoang 등, 2000; Lebeau 등, 1991). 여러가지 임계적 암유전자 경로에 HSP90의 포함과 항암활성을 갖는 어떠한 자연 생성물이 이러한 분자 샤프롱을 표적으로 하고 있는 발견의 결과에 따라 HSP 기능 저해가 암치료에 유용하다는 새로운 매혹적인 개념이 개발되었다. 현재 제일 분자 샤프롱 저해제를 임상 시험하고 있다.

HSP90

HSP90은 약 1-2%의 전체 세포 단백질을 구성하고, 통상 여러가지 다른 단백질 중 하나와 연관하여 이합체로서 세포에 존재한다(예를들어, Pratt, 1997 참조). 이는 세포 생존력에 필수적이고 이는 이 중 샤프롱 기능을 나타낸다(Young 등, 2001). 이들의 자연 형태는 열충격과 같은 여러가지 환경 스트레스에 의하여 변경된 후 많은 단백질과 상호작용하고, 적당한 단백질 중첩을 확보하고, 비-특이적 응집을 예방하므로서 세포 스트레스 반응에 중요한 역할을 한다(Smith 등, 1998). 더불어, 최근 결과에 따르면 HSP90이 돌연변이 단백질의 부적합한 중첩을 정정하여 돌연변이 작용에 대하여 완충적 역할을 하는 것으로 예상된다(Rutherford and Lindquist, 1998). 그러나, 또한 HSP90은 중요한 조절 역할을 갖는다. HSP90은 이의 소포체 동족체 GRP94와 함께 정상의 생리적 조건하에 몇몇 주요한 종속 단백질의 돌연변이와 형태 안정성을 유지하면서 세포에서 보조관리 역할을 한다.이들은 세그룹으로 세분화될 수 있다: (a)스테로이드 호르몬 수용체, (b)Ser/Thr 또는 티로신 키나아제(예를들어, ERBB2, RAF-1, CDK4와 LCK)와 (c)분명하게 비관계된 단백질, 예를들어, 돌연변이체 p53의 수집과 텔로머라아제의 촉매 소단위체. 이들 단백질 모두는 세포의 여러가지 생리적 및 생화학적 과정에서 주요한 조절역할을 한다. 새로운 HSP90 종속 단백질은 계속적으로 확인되고 있다.

사람에 있어 높게 보존되는 HSP90군은 네 유전자, 즉, 세포질 HSP90α와 HSP90β 동형체(Hickey 등, 1989), GRP94 소포체(Argon 등, 1999)와 HSP15/TRAP1 사립체 기질로 이루어진다(Felts 등, 2000). 군 멤버 모두는 유사한 작용방식을 가지지만, 세포내에서 그들의 배치에 따라 다른 종속 단백질에 결합되는 것으로 생각된다. 예를들어, ERBB2는 GRP94의 특이한 종속 단백질(Argon 등, 1999)로 알려져 있고, 타입1 종양 괴사 인자 수용체(TNFR1)와 RB는 둘다 TRAP1의 종속체(Song 등, 1995; Chen 등, 1996)로 나타난다.

HSP90은 종속과 조절 단백질의 범위(Smith, 2001)로 일련의 복합 상호작용에 관여한다. 정밀 분자 설명이 명시되어 유지되었지만, 지난 수년이상 행해진 생화학적 및 X-선 결정학적 연구(Prodromou 등, 1997; Stebbins 등, 1997)는 HSP90의 샤프롱 기능에 대한 증가된 상세한 인식을 제공했다.

이러한 문제점에 관한 종전의 논쟁에 따르면, HSP90은 ATP-의존 분자 사프롱(Prodromou 등, 1997)이고, 뉴클레오티드 결합영역의 이합체화는 ATP 가수분해에 필수적이고, 바꾸어 이는 샤프롱 기능(Prodromou 등, 2000a)에 있어 필수적임이 분명하다. ATP 결합은 N 말단영역이 '클램프 메카니즘'(Prodromou와 Pearl, 2000b)으로 알려져 있는 형태 스위치를 가져오는 서로 더 가깝게 접착하게 하는 환형 이합체 구조의 형성을 가져온다.

공지된 HSP90 저해제

발견된 HSP90 저해제의 첫째 종류에는 화합물 헤르비마이신 A와 겔다나마이신을 포함하는 벤조퀴논 안사마이신류가 있다. v-Src 암유전자(Uehare 등, 1985)에 의하여 형질전환된 섬유아세포의 악성표현형으로 전환한 다음 두 생체 외(Schulte 등, 1998)와 생체 내 동물 모델(Supko 등, 1995)에서 강한 항암활성을 나타냄을 알 수 있다.

면역침전과 친화성 기질 연구는 겔다나마이신 작용의 주 메카니즘이 HSP90에 결합하는 것을 포함함을 나타낸다(Whitesell 등, 1994; Schulte와 Neckers, 1998). 더우기 X-선 결정학적 연구에서는 겔다나마이신은 ATP 결합 부위에서 경합하고, HSP90의 내재성 ATPase 활성을 억제하는 것임을 나타낸다(Prodromou 등, 1997; Panaretou 등, 1998). 이것은 종속 단백질을 샤프롱할 수 있는 성숙한 다합체성 HSP90 복합체의 형성을 방지한다. 결과적으로 종속 단백질은 유비 퀴틴 프로테이솜 경로를 통하여 붕괴시키는 것을 목표로 한다. 17-알릴아미노, 17-데메톡시겔다나마이신(17AAG)은 종속 단백질 결핍에서 나오는 HSP90 저해의 성질과 세포 배양과 이종 이식 모델에서 항종양 활성을 갖지만(Schulte 등, 1998; Kelland 등, 1999), 겔다나마이신보다 상당히 적은 간세포 독성을 갖는다(Page 등, 1997). 17AAG는 현재 단계 1 임상 시험에서 평가되고 있다.

래디시콜은 v-Src와 v-Ha-Ras 형질 전환 섬유 아세포의 악성표현형을 역전시키는 것으로 나타내는 거대 고리 항생 물질이다(Kwon 등, 1992; Zhao 등, 1995). 이는 HSP90 저해의 결과로서 여러가지 신호 단백질을 붕괴시키는 것을 나타낸다(Schulte 등, 1998). X-선 결정학적 자료에서는 래디시콜이 HSP90의 N 말단 영역에 결합하고, 내재성 ATPase 활성을 저해하는 것을 나타낸다(Roe 등, 1998). 래디시콜은 화합물으 불안정한 화학적 성질로 인하여 항종양 활성이 부족하다.

쿠마린 항생물질은 HSP90에 상응하는 ATP 결합 부위에서 박테리아성 DNA 기라아제에 결합하는 것으로 알려져 있다. 쿠마린, 노보비오신은 HSP90의 카르복시 말단에, 즉, N-말단에서 결합하는 벤조퀴논 안사마이신과 래디시콜에 의하여 점유되는 다른 부위에 결합하는 것으로 나타났다(Marcu 등, 200b). 그러나, 이것은 HSP90 기능의 저해와 여러가지 HSP90-샤프롱 신호 단백질의 붕괴를 더 가져온다(Marcu 등, 2000a). 겔다나마이신은 노보비오신에 계속해서 HSP90에 결합할 수 없으며; 이것은 N와 C 말단 영역 사이에 어느 정도 상호작용이 존재해야만 하고, 두 부위가 HSP90 샤프롱 성절에 중요한 점으로 일치하는 것으로 예상된다.

푸린-주성분 HSP90 저해제, PU3는 ERBB2를 포함한 신호분자의 분열을 가져오고, 유방암 세포에서 세포순환정지와 분화를 일으키는 것으로 나타났다(Chiosis 등, 2001).

특허공보 WO 2004/050087과 WO 2004/056782는 HSP90 저해제인 공지된 종류의 피라졸 유도체에 관한 것이다.

치료 목적으로서의 HSP90

분자 샤프롱 HSP90은 종양의 표현형을 조종하는데 결정적으로 중요한 여러가지 신호 경로의 조절에 이의 포함과 어떠한 생물활성 자연 생성물이 HSP90 활성을 통하여 그들의 효과를 발휘하는 것의 발견으로 인하여 이는 현재 항암 약제 개발의 새로운 목표로서 평가되고 있다(Neckers 등, 1999).

겔다나마이신, 17AAG와 래디시콜 작용의 우세한 메카니즘에는 단백질의 N-말단 영역에 위치하는 ATP 결합 부위에서 HSP90에 결합하고, HSP90의 내재성 ATPase 활성의 저해를 유도하는 것이 포함된다(예를들어, Prodromou 등, 1997; Stebbins 등, 1997; Panaretou 등, 1998 참조).

HSP90 ATPase 활성의 저해는 공동-샤프롱의 보충을 방지하고, 이들 종속 단백질이 유비퀴틴 프로테아솜의 경로를 통하여 붕괴를 목표로 하는 HSP90 이종 복합체의 형성을 조장한다(예를들어, Neckers 등, 1999; Kelland 등, 1999 참조).

HSP90 저해제로 처리하면 세포 증식, 세포 순환 조절과 고사에 포함되는 중요한 단백질의 선택적 붕괴를 유도하며, 이 과정은 본질적으로 암에서 중요하다.

HSP90 기능의 저해는 세포 증식, 세포 순환 조절과 고사에 포함되는 중요한 신호 단백질의 선택적 붕괴를 일으키는 것으로 나타나고, 이 과정은 암에서 본질적으로 중요하고 통상 규제가 제한된다(예를들어, Hostein 등, 2001 참조). 임상에서 사용하기 위한 이러한 목표에 대하여 약제를 개발하는 매혹적인 근본 이유는 형질전환된 표현형과 연관되는 단백질을 동시에 소모시키므로서 강한 항종양 효과를 얻고, 암 대 정상 세포에 대한 치료적 이점을 성취하는데 있다. HSP90 저해의 이러한 결과 흐름은 세포 배양과 동물 모델에서 HSP90 저해제의 항종양 활성에 원인이 있는 것으로 믿는다(예를들어, Schulte 등, 1998; Kelland 등, 1000 참조).

본 발명은 예를들어, 암세포 증식을 저해시키기 위한 HSP90 저해제로서 치환된 티에노[2,3-d]피리미딘 화합물(여기서는 피리미도티오펜이라 한다)류의 용도에 관한 것이다. 하나의 환탄소 상에서 방향족 치환을 갖는 중심 피리미도티오펜 환이 본 발명에 관한 화합물의 특징을 나타내는 원리이다.

본 발명은 하나의 넓은 면에서 생체 외 또는 생체 내에서 HSP90 활성을 저해하는 조성물의 제조에 다음식(I)의 화합물, 이들의 염, N-산화물, 수화물 또는 용매화물을 사용하는 용도를 제공한다:

상기식에서

R₂는 다음식(IA)의 기이다:

-(Ar¹)_m-(Alk¹)_p-(Z)_r-(Alk²)_s-Q (IA)

이 식에서

Ar¹은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기이고,

Alk¹과 Alk²는 임의로 치환된 2가 C₁-C₃ 알킬렌 또는 C₂-C₃ 알켄일렌기이고,

m, p, r과 s는 각각 0 또는 1이고,

Z는 -O-, -S-, -(C=O)-, -(C=S)-, -SO₂-, -C(=O)O-, -C(=O)NR^A-, -C(=S)NR^A-, -SO₂NR^A-, -NR^AC(=O)-, -NR^ASO₂- 또는 -NR^A-(여기서 R^A는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬이다)이고,

Q는 수소 또는 임으로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리기이다;

R₃는 수소, 임의의 치환기 또는 임의로 치환된 (C₁-C₆)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고;

R₄는 카르복실에스테르, 카르복스아미드 또는 술폰아미드기이다.

본 발명은 다른 넓은 면에서 포유류에서 HSP90 활성의 저해에 반응하는 질병을 치료하는 방법을 제공하며, 이 방법은 상기 HSP90 활성을 저해시키는데 효과적인 특허청구범위 제1항에 정의된 일정량의 화합물을 포유류에 투여하여서 한다.

본 발명의 생체 내 용도와 방법은 면역 억제 또는 류마티스성 관절염, 천식, 다발성 경화증, 타입1 당뇨병, 낭창, 건선과 염증과 장질병과 같은 염증성 질병, 바이러스성 질병; 당뇨병성 망막병증, 혈관종과 자궁내막증과 같은 방광섬유증-관련 질병 치료; 또는 화학요법-유도 독성에 대한 정상 세포의 보호; 또는 고사를 받는 부전이 근본 요인인 질병 치료; 심장과 뇌에서 HSP70의 상승으로 인한 저산소증-허혈성 상해로부터의 보호를 위하여 사용하는 용도를 포함한 HSP90 활성이 관련되는 질병; 스크래피/CJD, 헌팅돈 또는 알츠하이머 질병을 치료하는데 적합하다. 특히 암을 치료하는 용도를 나타낸다.

공보 WO 01/62233, 전이금속화학 19권, 1994, 페이지 335-339, 헤테로고리화학지 30권, 1993, 페이지 1065-1072와 합성 NO 5, 1983, 페이지 402-404에는 상기식(I)에 들어가는 특정 화합물이 기술되어 있고, 또한 식(I)의 몇몇 화합물을 포함하는 화합물류에 관한 것이다. 그러나, 본 발명의 상기 넓은 면에 관련되는 대부분의 식(I)의 화합물은 그들 자신 신규성을 갖는 것이다. 본 발명은 이와 같은 신규한 화합물, 특히 다음식(I)의 화합물과 이들의 염, N-산화물, 수화물 또는 용매화물을 포함한다:

상기식에서

R₂는 다음식(IA)의 기이고:

-(Ar¹)_m-(Alk¹)_p-(Z)_r-(Alk²)_s-Q (IA)

이 식에서

Ar¹은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기이고,

m, p, r과 s는 각각 0 또는 1이고,

Q는 수소 또는 임으로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리기이고;

R₄는 카르복실에스테르, 카르복스아미드 또는 술폰아미드기이며,

이때, (i)R₃는 -NH₂ 아니거나 또는 (ii)R₄가 -COOCH₃이고, R₃가 수소이면 R₂는 에틸아미노, 디에틸아미노, 페닐아미노 또는 -N(Ph)(C₂H₅)(여기서 Ph는 페닐이다)가 아니다.

여기서 사용된 바와 같이:

용어 "카르복실기"는 식 -COOH의 기를 뜻하고;

용어 "카르복실에스테르기"는 식 -COOR의 기를 뜻하고, 여기서 R은 히드록실 화합물 ROH에서 실제적으로 또는 이론적으로 유도된 기이고;

용어 "카르복스아미드기"는 식 -CONR_aR_b의 기를 뜻하며, 여기서 -NR_aR_b는 암모니아 또는 아민 HNR_aR_b에서 실제적으로 또는 이론적으로 유도된 아미노(고리형 아미노 포함)기이고;

용어 "술폰아미드기"는 식 -SO₂NR_aR_b의 기를 뜻하며, 여기서 -NR_aR_b는 암모니아 또는 아민 HNR_aR_b에서 실제적으로 또는 이론적으로 유도된 아미노(고리형 아미노 포함)기이다.

여기서 사용된 a와 b가 정수인 "(C_a-C_b)알킬"이란 용어는 a-b개의 탄소원자를 갖는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기를 뜻한다. 따라서, a가 1이고, b가 6일 때, 예를들면, 용어에는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, sec-부틸, t-부틸, n-펜틸과 n-헥실이 포함된다.

여기서 사용된 a와 b가 정수인 "2가 (C_a-C_b)알킬렌기"이란 용어는 a-b개의 탄소원자와 두개의 불포화 원자가를 갖는 포화탄화수소쇄를 뜻한다.

여기서 사용된 a와 b가 정수인 "(C_a-C_b)알켄일"이란 용어는 적당한 최소한 하나의 이중 결합의 E 아니면 Z 입체 화학을 갖는 a-b개의 탄소원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 알켄일 부분을 뜻한다. 이 용어에는 예를들어, 비닐, 알릴, 1- 및 2-부텐일과 2-메틸-2-프로펜일이 포함된다.

여기서 사용된 용어 "2가 (C_a-C_b)알켄일렌기"는 a-b개의 탄소원자, 최소한 하나의 이중 결합과 두개의 불포화 원자가를 갖는 탄화수소쇄를 뜻한다.

여기서 사용된 용어 "시클로알킬"은 3-8개의 탄소원자를 갖는 포화탄소고리기를 뜻하고, 예를들면, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸과 시클로옥틸이 있다.

여기서 사용된 용어 "시클로알켄일"은 3-8개의 탄소원자를 갖고, 최소한 하나의 이중결합을 함유하는 탄소고리기를 뜻하고, 예를들면, 시클로펜텐일, 시클로헥센일, 시클로헵텐일과 시클로옥텐일이 있다.

여기서 사용된 용어 "아릴"은 모노-, 비- 또는 트리-시클릭 탄소고리 방향족기를 뜻한다. 이와 같은 기를 예시하면 페닐, 비페닐과 나프틸이 있다.

여기서 사용된 술어 "탄소고리"는 환원자가 모두 탄소인 고리기를 뜻하고, 이는 단일고리아릴, 시클로알킬과 시클로알켄일기가 있다.

여기서 사용된 용어 "헤테로아릴"은 S, N과 O에서 선택한 하나 또는 그 이상의 헤테로원자를 포함하는 모노-, 비- 또는 트리-시클릭 방향족기를 뜻한다. 이와 같은 기를 예시하면 티에닐, 벤즈티에닐, 푸릴, 벤즈푸릴, 피롤일, 이미다졸일, 벤즈이미다졸일, 티아졸일, 벤즈티아졸일, 이소티아졸일, 벤즈이소티아졸일, 피라졸일, 옥사졸일, 벤즈옥사졸일, 이소옥사졸일, 벤즈이소옥사졸일, 이소티아졸일, 트리아졸일, 벤즈트리아졸일, 티아디아졸일, 옥사디아졸일, 피리딘일, 피리다진일, 피리미딘일, 피라진일, 트리아진일, 인돌일과 인다졸일이 있다.

여기에 사용된 비제한 용어 "헤테로시클일" 또는 "헤테로고리"는 상술한 "헤테로아릴"이 있고, 특히 S, N과 O에서 선택한 하나 또는 그 이상의 헤테로원자를 함유하는 모노-, 비- 또는 트리-시클릭 비-방향족기와 다른 이러한 기에 또는 단일고리 탄소고리기에 공유결합된 하나 또는 그 이상의 이러한 헤테로원자를 함유하는 단일고리 비-방향족기를 이루는 기를 뜻한다. 이와같은 기를 예시하면 피롤일, 푸란일, 티에닐, 피페리딘일, 이미다졸일, 옥사졸일, 이소옥사졸일, 티아졸일, 티아디아졸일, 피라졸일, 피리딘일, 피롤리딘일, 피리미딘일, 몰포린일, 피페라진일, 인돌일, 몰포린일, 벤즈푸란일, 피란일, 이소옥사졸일, 벤즈이미다졸일, 메틸렌디옥시페닐, 에틸렌디옥시페닐, 말리이미도와 석신이미도기가 있다.

문맥에서 다른 언급이 없는 한 여기서 어느 부분에 사용된 용어 "치환된"은 예를들어, (C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)알콕시, 히드록시, 히드록시(C₁-C₆)알킬, 머캅토, 머캅토(C₁-C₆)알킬, (C₁-C₆)알킬티오, 할로(플루오로와 클로로 포함), 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 니트로, 티르릴(-CN), 옥소, 페닐, -COOH-, -COOR^A-, -COR^A-, -SO₂R^A, -CONH₂-, SO₂NH₂, -CONHR^A, -SO₂NHR^A, -CONR^AR^B, -SO₂NR^AR^B, -NH₂, -NHR^A, -NR^AR^B, -OCONH₂, -OCONHR^A, -OCONR^AR^B, -NHCOR^A, -NHCOOR^A, -NR^BCOOR^A, - NHSO₂OR^A, -NR^BSO₂OR^A, -NHCONH₂, -NR^ACONH₂, -NHCONHR^B, -NR^ACONHR^B, -NHCONR^AR^B 또는 -NR^ACONR^AR^B(여기서 R^A와 R^B는 각각 (C₁-C₆)알킬기이다)에서 선택한 최소한 하나의 치환기로 치환되는 것을 뜻한다. "임의의 치환기"는 전술한 치환기의 하나이다.

여기서 사용된 용어 "염"에는 염기부가, 산부가와 사차염이 있다. 산성인 본 발명의 화합물은 알카리금속 수산화물, 예를들어, 나트륨과 수산화물; 알카리 토류 금속 수산화물, 예를들어, 칼슘, 바륨과 마그네슘 수산화물과 같은 염기와; 유기 염기, 예를들어, N-에틸 피페리딘, 디벤질아민 등과 약학적으로 또는 수의학적으로 허용할 수 있는 염을 포함한 염을 형성할 수 있다. 염기성인 이들 화합물(I)은 무기산과 예를들어, 염산 또는 브롬화수소산, 황산, 질산 또는 인산 등과 같은 할로겐화수소산과 유기산과 예를들어, 초산, 타르타르산, 석신산, 푸마르산, 말레산, 말산, 살리실산, 시트르산, 메탄술폰산과 P-톨루엔 술폰산 등과 약학적으로 또는 수의학적으로 허용할 수 있는 염을 포함한 염을 형성할 수 있다.

적당한 염에 관한 재조사에 있어, Handbook of Pharmaceutical Salts: Stahl과 Wermuth에 의한 성질, 선택과 용도(Wiley-VCH, Weinheim, 독일, 2002) 참조.

여기서 사용된 용어 "용매화물"은 본 발명의 화합물과 화학량론적 양의 하나 또는 그 이상의 약학적으로 허용할 수 있는 용매분자, 예를들어, 에탄올로 이루어지는 분자 복합체를 기술한 것이다. 용어 "수화물"은 상기 용매가 물일 때 사용된다.

하나 또는 그 이상의 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있는 본 발명에 관한 화합물은 비대칭 원자 또는 회전 제한이 존재하기 때문에 각 비대칭 중심에서 R 또는 S 입체 화학과의 여러가지 입체 이성질체 또는 각 비대칭 축에서 R 또는 S 입체 화학과의 회전장애 이성질체로서 존재할 수 있다. 본 발명에는 이와같은 거울상 이성질체 및 부분입체 이성질체와 이들의 혼합물 모두가 포함된다.

또한, 소위 식(I)의 화합물의 '프로-드러그'도 본 발명의 범위 내에 속한다. 따라서, 그들 자신 약리학적 활성이 거의 또는 전혀 없는 식(I)의 화합물의 유도체는 몸체에 투여했을 때, 예를들어, 가수분해성 분할에 의하여 원하는 활성을 갖는 식(I)의 화합물로 변환된다. 이와같은 유도체는 '프로드러그'를 뜻한다. 프로드러그의 사용에 관한 다른 정보는 Pro-drugs as Novel Delivery Systems, 14권, ACS Symposium Series(T. Higuchi와 W. Stella)와 Bioreversible Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987(아메리칸 제약협회, E.B. Roche)에서 볼 수 있다.

본 발명에 따른 프로드러그는 예를들어, 식(I)의 화합물에 존재하는 적당한 기능을 예를들어, H. Bundgaard(Elsevier, 1985)에 의한 Design of Prodrugs에 기술된 바와 같은 '프로-부분'으로 본 분야의 전분가에게 알려져 있는 부분으로 대체하여 제조할 수 있다.

또한, 본 발명의 범위에 식(I)의 화합물의 대사물질, 즉, 약제투여시에 생체 내에 형성되는 화합물도 포함된다. 대사물질의 몇가지 예를들어 보면

(i) 식(I)의 화합물이 메틸기를 함유할 때, 이들의 히드록시메틸유도체(-CH₃->-CH₂OH):

(ii) 식(I)의 화합물이 알콕시기를 함유할 때, 이들의 히드록시 유도체(-OR->-OH);

(iii) 식(I)의 화합물이 삼차 아미노기를 함유할 때, 이들의 이차 아미노유도체(-NR¹R²->-NHR¹ 또는 -NHR²);

(iv) 식(I)의 화합물이 이차 아미노기를 함유할 때, 이들의 일차 유도체(-NHR¹->-NH₂);

(v) 식(I)의 화합물이 페닐부분을 함유할 때, 이들의 페닐유도체(-Ph->-PhOH);와

(vi) 식(I)의 화합물이 아미드기를 함유할 때, 이들의 카르복실산유도체(-CONH₂->COOH).

R ₂

설명한 바와 같이, R₂는 다음식(IA)의 기이다:

-(Ar¹)_m-(Alk¹)_p-(Z)_r-(Alk²)_s-Q (IA)

상기 식에서 어떠한 화합성 조합에 있어, Ar¹은 임의로 치환되는 아릴 또는 헤테로아릴기이고, Alk¹과 Alk²는 임의로 치환되는 2가 C₁-C₃ 알킬렌 또는 C₂-C₃ 알켄일렌기이고, m, p, r과 s는 각각 0 또는 1이고, Z는 -O-, -S-, -(C=O)-, -(C=S)-, -SO₂-, -C(=O)O-, -C(=O)NR^A-, -C(=S)NR^A-, -SO₂NR^A-, -NR^AC(=O)-, -NR^ASO₂- 또는 -NR^A-(여기서 R^A는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬이다)이고, Q는 수소 또는 임으로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리기이다.

R₂기에 존재할 때,

Ar¹은 예를들어, 페닐, 시클로헥실, 피리딜, 몰포리노, 피페리딘일 또는 피페라진일환이다. Ar¹은 존재할 때, 페닐환인 것이 바람직하다;

Alk¹과 Alk²는 예를들어, -CH₂, CH₂CH₂- 또는 -CH=CH-에서 선택한 임의로 선택된 2가기이다. Alk¹과 Alk²에서 임의의 치환기에는 예를들어, 모노- 또는 디(C₁-C₃ 알킬)아미노와 C₁-C₃ 알콕시가 있다;

Z는 예를들어, -O- 또는 -NH-이고; Q는 수소이다.

본 발명에 관한 화합물의 간단한 하위 종류에 있어, m는 1이고, 각 p, r와 s는 0이고, Q는 수소이고, 그러므로 R₂는 임의로 치환되는 아릴 또는 헤테로아릴이다. 이와 같은 경우에 R₂는 예를들어, 임의로 치환된 페닐, 2- 또는 3-푸란일, 2-, 3- 또는 4-피리딘일, 몰포린일 또는 피페리딘일이다. 바람직하기로는 R₂가 예를들어, 임의의 치환기를 메틸, 에틸, n- 또는 이소프로필, 비닐, 알릴, 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, 벤질옥시, 알릴옥시, 시아노메톡시, 클로로, 브로모, 시아노, 포르밀, 메틸-, 에틸- 또는 n-프로필-카르보닐옥시, 메틸- 또는 에틸아미노카르보닐에서 선택한 화합물일 때이다. R₂환에 존재하는 그 이상의 복합치환기에는 (i)식 -O(CH₂)_nZ¹(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹는 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 기; (ii)식 -(Alk³)_mZ¹(여기서 Alk³는 2가 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬렌이고, m는 0 또는 1이고, Z¹는 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 기가 있다. 페닐환에서 바람직한 치환 위치는 위치 2, 4와 5이다.

다른 간단한 구조에 있어서, m는 1이고, p, r과 s는 각각 0이고, Q는 임의로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리환, 예를들어, 페닐, 시클로헥실, 피리딜, 몰포리노, 피페리딘일 또는 피페라진일환이다. 이와 같은 경우에 Q는 임의로 치환되는 Ar¹환의 직접 치환기이다.

본 발명에 관한 그 이상의 복합 구조에 있어, 하나 또는 그 이상의 m, p, r과 s는 1이고, Q는 수소 또는 임의로 치환되는 탄소고리 또는 헤테로고리환이다. 예를들면, p 와/또는 s는 1이고, r은 0이며, 그러므로 Q는 알킬렌 또는 알켄일렌기, 예를들어, 임의로 치환되는 C₁-C₃ 알킬렌기에 의하여 Ar¹에 결합된다. 다른 경우에 각 p, r과 s는 1이고, 이 경우에 Q는 헤테로원자-함유 Z기에 의하여 중단되는 알킬렌 또는 알켄일렌에 의하여 Ar¹에 결합된다. 또 다른 경우에 있어 p와 s는 0이고, r는 1이고, 이 경우에 Q는 헤테로원자-함유 Z기를 경유하여 Ar¹에 결합된다.

본 발명의 화합물에 사용할 수 있는 R₂기의 특수한 예를들면, 본 실시예의 화합물에 존재하는 것이 있다.

임의의 치환기 R ₃

R₃는 상술한 바와 같이 수소 또는 임의의 치환기이다. R₃가 수소일 때가 바람직하다.

R ₄ 기

R₄가 카르복스아미드 또는 술폰아미드기일 때, 예를들어, 식 -CONR^B(Alk)_nR^A 또는 -SO₂NR^B(Alk)_nR^A의 것이 있고, 이들 식에서

Alk는 2가 알킬렌, 알켄일렌 또는 알킨일렌기, 예를들어, -CH₂-, CH₂CH₂-, CH₂CH₂CH₂-, CH₂CH=CH- 또는 -CH₂CCCH₂-기이고, Alk기는 임의로 치환되며,

n는 0 또는 1이고,

R^B는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬 또는 C₂-C₆ 알켄일기, 예를들어, 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필 또는 알릴이다. R^B는 수소일때가 바람직하며,

R^A는 히드록실, 아미노(모노- 및 디-(C₁-C₃)알킬아미노 포함), 카르바모일(-C(=O)NH₂), -SO₂OH, 트리플루오로메틸과 같은 임의의 치환기; 임의로 치환되는 탄소고리, 예를들어, 시클로프로필, 시클로펜틸, 시클로헥실, 히드록시, 아미노, 플루오로, 클로로, 브로모, 3,4-메틸렌디옥시, 술파모일(-SO₂NH₂), -SO₂OH, 메톡시, 메틸술폰일, 트리플루오로메틸에 의하여 임의로 치환된 페닐; 또는 헤테로시클일, 예를들어, 피리딜, 푸릴, 티엔일, 디아졸일, N-피페라진일, 피롤일, 테트라하이드로푸란일, 티아졸일, 1-아자-비시클로[2,2,2]옥탄일 또는 N-몰포린일(이 중 어느 것은 헤테로고리환이 예를들어, (C₁-C₃)알킬에 의하여 환질소에서 치환된다)이다.

또는 R^A와 R^B는 이들이 결합되는 질소와 함께 O, S와 N에서 선택한 하나 또는 그 이상의 부가적 헤테로 원자를 임의로 함유하고 하나 또는 그 이상의 환 C 또는 N 원자에서 임의로 치환되는 N-헤테로고리환을 형성하며, 이와 같은 N-헤테로고리환의 예를들면, 몰포리노, 피페리딘일, 피페라진일과 N-페닐피페라진일이 있다.

R₄가 카르복스아미드기일 때가 바람직하다.

R₄가 카르복실산 에스테르기일 때, 이의 예를들면, 식 -COOR^C의 기가 있고, 여기서, R^C는 C₁-C₆ 알킬 또는 C₂-C₆ 알켄일기, 예를들어, 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필 또는 알릴; 또는 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기, 예를들어, 임의로 치환되는 페닐, 피리딜 또는 티아졸일; 벤질 또는 피리딜메틸과 같은 임의로 치환되는 아릴(C₁-C₆ 알킬)- 또는 헤테로아릴(C₁-C₆ 알킬)-기; 또는 시클로펜틸 또는 시클로헥실과 같은 임의로 치환되는 시클로알킬기이다.

본 발명의 화합물에 사용할 수 있는 R₄기의 특수한 예를들면, 본 실시예의 화합물에 존재하는 것이 있다.

본 발명에 관한 화합물의 바람직한 하위 종류는 다음식(II)을 갖는다.

상기식에서

A는 이차 아미노기이다.

R₁₀는 H, Cl, Br 또는 CH₃이고;

R₁₁은 수소, Cl, Br, CN, 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필, 비닐 또는 알릴이고;

R₁₂는 (i)식 -O(CH₂)_nZ¹(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹은 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 기; (ii)식 -(Alk³)_mZ¹(여기서 Alk³는 2가 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬렌이고, m는 0 또는 1이고, Z¹은 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 기이다. 화합물(II)의 이러한 하위 종류에 있어 A가 예를들어, C₁-C₆ 알킬 치환기를 메틸, 에틸과 n- 및 이소-프로필에서 선택한 이차 C₁-C₆ 알킬아미노이고, R₁₂는 (i) 식 -O(CH₂)_nZ¹의 기이고, 여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹은 C₁-C₃ 알킬 성분을 메틸, 에틸과 n- 및 이소-프로필에서 선택한 것이 바람직하다.

본 발명에 관련되는 특수한 화합물은 실시예에 있는 것이고, 특히 상기 구조식(II)을 갖는 이러한 예시된 화합물이다.

본 발명에 관한 화합물(I)의 합성에는 다수의 합성 전략이 있지만, 모두 합성 유기 화학자에게 알려져 있는 공지된 화학에 의한다. 따라서, 식(I)에 따른 화합물은 표준 문헌에 기술되어 있고, 본 분야의 전문가에게 잘 알려져 있는 공정에 따라 합성할 수 있다. 대표적인 문헌자료에는 "Advanced organic chemistry", 4판 (Wiley), J March, "Comprehensive Organic Transformation", 2판(Wiley), R.C.Larock, "Handbook of Heterocyclic Chemistry", 2판(Pergamon), A.R. Katritzky), "Synthesis", "Acc. Chem. Res.", "Chem. Rev" 또는 표준문헌 온라인 검색에 의하여 확인된 일차 문헌자료에서 또는 "Chemical Abstracts" 또는 "Beilstein"과 같은 이차 자료로부터 볼 수 있는 바와 같은 검사 항목이 있다. 이와 같은 문헌 방법에는 본 제조예의 방법과 이와 유사한 방법이 있다.

예를들어, 다음 일반 반응식을 사용할 수 있다:

출발물질은 판매되는 것이나 문헌방법에 따라 제조할 수 있다. 다음 반응을 R², R³ 또는 R⁴에서 행하여 식(I)의 부가적 화합물을 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물은 HSP90의 저해제이고, 암과 같은 HSP90 활성의 저해에 반응하는 질병; 간염 C와 같은 바이러스성 질병(Waxman, 2002); 이식에서와 같은 면역 억제(Bijimakers, 2000와 Yorgin, 2000); 류마티스성 관절염, 천식, MS, 타입1 당뇨병, 낭창, 건선과 염증성 장질병과 같은 항-염증성 질병(Bucci, 2000); 방광섬유증(Fuller, 2000); 맥관형성-관련질병(Hur, 2002와 Kurebayashi, 2001); 당뇨병성 망막병증, 혈관종, 건선, 자궁내막증과 종양맥관형성을 치료하는데 유용하다. 또한, 본 발명의 HSP90 저해제는 화학요법-유도된 독성에 대한 정상 세포를 보호하고 고사를 받는 기능 부전이 근본 요인인 질병이 유용하다. 또한, 이와같은 HSP90 저해제는 세포 스트레스 또는 열충격 단백질 반응의 유도가 유익한, 예를들어, 심장(Hutter, 1996과 Trost, 1998)과 뇌(Plumier, 1997과 Rajder, 2000)에서 HSP70의 상승으로 인한 저산소증-허혈성 상해로부터 보호할 수 있는 질병에 유용하다. 또한, HSP90 저해제-HSP70 수준의 증가 유도는 단백질의 부적합한 중첩 또는 응집이 주요 요인, 예를들어 스크래피/CJD, 헌팅돈과 알츠하이머(Sittler, 2001; Trazelt, 1995와 Winklhofer, 2001)와 같은 신경발생 장애인 질병에 유용하다.

따라서, 본 발명은:

(i) 약학적으로 또는 수의학적으로 허용할 수 있는 담체와 함께 상기식(I)의 화합물로 이루어지는 약학적 또는 수의학적 조성물.

(ii) 생체 외 또는 생체 내에서 HSP90 활성을 저해하는 조성물의 제조방법에 상기식(I)의 화합물을 사용하는 화합물의 용도.

(iii) HSP90 활성을 저해하는데 효과적인 상기식(I)의 화합물의 일정량을 포유류에 투여하여서하는 포유류의 HSP90 활성의 저해에 반응하는 질병 또는 증상의 치료방법

을 포함한다.

특정 환자에 대한 명확한 투약량 수준은 사용되는 특정 화합물의 활성, 나이, 체중, 일반건강, 성별, 식이요법, 투약시간, 투약경로, 배설율, 약제조합과 치료를 받는 특정 질병의 정도와 원인 메카니즘을 포함한 여러가지 인자에 따른다. 일반적으로 경구 투여 제제에 적합한 투약량은 통상 매일 일회, 이회 또는 삼회, 0.1-3000㎎의 범위로 또는 주입 또는 다른 경로에 의하여 투여되는 매일 동일한 양으로 할 수 있다. 그러나, 최적의 투약량 수준과 투약 횟수는 본 분야에서 일반화되어 있는 임상 시험에 의하여 결정된다.

본 발명에 관한 화합물은 그들의 약동학적 성질과 일치하는 어떠한 경로에 의하여 투여하기 위하여 제조할 수 있다. 경구 투여 조성물은 정제, 캡슐, 분제, 입제, 구중정, 경구, 국부 또는 무균 비경구 용액 또는 현탁액과 같은 액제 또는 겔제의 형태로 할 수 있다. 경구투여용 정제와 캡슐은 단위 투약량 표시 형태로 할 수 있고, 결합제, 예를들어, 시럽, 아라비아고무, 젤라틴, 솔비톨, 트라가칸트 또는 폴리비닐-피롤리돈; 충전제, 예를들어, 락토오스, 당분, 옥수수-전분, 인산칼슘, 솔비톨 또는 글리신; 정제윤활제, 예를들어, 스테아르산 마그네슘, 탈크, 폴리에틸렌 글리콜 또는 실리카; 붕해제, 예를들어, 감자전분 또는 황산 라우릴 나트륨과 같은 허용가능한 습윤제와 같은 일반적 부형제를 함유할 수 있다. 정제는 통상의 제약공정에 잘 알려져 있는 방법에 따라 피복할 수 있다. 경구액제는 예를들어, 수성 또는 유성 현탁액, 용액, 유액, 시럽 또는 엘릭서 형태로 할 수 있고, 또는 사용전에 물 또는 다른 적당한 매체와 재구성하는 건조물로서 존재할 수 있다. 이와 같은 액제는 현탁제, 예를들어, 솔비톨, 시럽, 메틸 셀루로오스, 글루코오스 시럽, 젤라틴 수소화 식용 지방; 유화제, 예를들어, 렉시틴, 모노올레산 솔비탄 또는 아라비아고무; 비-수성매체(식용유 포함), 예를들어, 아몬드유, 분별된 코코넛유, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 에틸알코올과 같은 오일에스테르; 방부제, 예를들어, 메틸 또는 프로필 p-히드록시벤조에이트 또는 솔브산과 같은 일반적 첨가제를 함유할 수 있고, 필요하면 통상의 향미료 또는 착색제를 함유할 수 있다.

피부의 국부에 사용하기 위하여 약제는 크림, 로션 또는 연고로 만들 수 있다. 약제에 사용되는 크림 또는 연고 제형은 예를들어, 영국 약전과 같은 표준제약서적에 기술되어 있는 바와 같이 본 분야에 잘 알려져 있는 일반적 제형이다. 또한 유효성분을 무균매체에서 비경구적으로 투여할 수 있다. 사용되는 매체와 농도에 따라서 약제를 매체에 현탁시키거나 용해시킬 수 있다. 유익하기로는 국부마취제, 방부제와 완충제와 같은 보조제를 매체에 용해시킬 수 있다.

다음 실시예들은 본 발명의 특정 화합물의 제조와 활성을 예시한 것이다.

실시예 1

2-아미노-4- 페닐 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

단계 1

2-아미노-4- 클로로 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

주위온도하에 아세토니트릴에서 2-아미노-4,6-디클로로-5-포르밀-피리미딘(1eq)과 탄산칼륨(1eq)의 교반된 혼합물에 에틸-2-머캅토아세테이트(0.95eq)를 가 하고 혼합물을 3시간 동안 주위온도에서 교반한 다음 1시간 동안 80℃에서 가열한다. 냉각 후, 혼합물을 진공하에 농축건조시킨다. 초산에틸과 헥산으로 용리하면서 실리카에서 컬럼크로마토그래피하면 황색분말로 실시예 1의 화합물을 얻는다.

LC-MS 체류시간: 2.371분, [M+H]⁺ 258.0

단계 2(수주키 반응):

1,4-디옥산과 물(3.5:1)에 용해한 실시예 1 단계 1의 화합물(1eq), 페닐 분소산(1.2eq)과 탄산나트륨(1.2eq)의 용액을 5분 동안 질소가스를 통과시켜 기포가 일게하여 탈기한다. Pd(PPh₃)₄(0.05eq)을 가하고 혼합물을 10분 동안 150℃에서 개인용 화학 합성기 마이크로파로 가열한다. 진공하에 농축하고 냉각한 후, 정제 HPLC하면 백색분말로서 실시예 2의 화합물을 얻는다.

LC-MS 체류시간: 2.545분, [M+H]⁺ 300.10

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 '활성 A'를 갖는다.

실시예 2:

2-아미노-4-(4- 트리플루오로메틸 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

실시예 1에서와 같이 제조한다.

LC-MS 체류시간: 2.768분, [M+H]⁺ 368.1

¹H NMR(400MHz, d6-DMSO):δ=1.07(3H, t, J=7.1Hz), 4.09(2H, q, J=7.1/hz), 7.25(2H, br s), 7.68(1H, s), 7.76(2H, d, J=8.0Hz), 7.85(2H, d, J=8.0Hz).

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 '활성 B'를 갖는다.

표 1에서 다음 화합물을 합성하고 하기 형광편광검정으로 시험한다. 수주키 반응을 실시예 1 단계 2에서와 같이 행하고, 환원 아민화 반응은 다음과 같이 실시예 33에서와 같이 행한다.

2-아미노-4-(4-피페리딘-1- 일메틸 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실 산 에틸 에스테르(표 1에서 실시예 33)

피롤리딘(5eq)을 메탄올에 현탁시킨 2-아미노-4-(4-포르밀-페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(1eq)에 가한다. 반응혼합물을 3.5시간 동안 환류하에 가열한 다음 실온으로 냉각시킨다. 붕수소화나트륨(3eq)을 가하고 10분 동안 교반한다. 혼합물을 진공하에 농축한 다음 초산 에틸과 물 사이에 분배한다. 상을 분리하고 유기층을 염수로 세척하고, 건조하고 증발시키면 황색오일을 얻는다. 조생성물을 정제 HPLC하여 정제한다.

LC-MS 체류시간: 1.803분, [M+H]⁺ 383

염화물 전위반응은 다음과 같은 실시예 22에서와 같이 행한다:

2-아미노-4- 벤질아미노 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 메틸 에스테르(표 1에서 실시예 22)

4㎖의 THF에서 2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 메틸 에스테르(100㎎, 0.39mmol), 벤질아민(100㎕)을 35분 동안 110℃에서 MW조사를 행한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 (산성)으로 하고 중성 화합물의 표준 조건을 사용하여 정제한다.

LC-MS: RT = 2.391분; MS m/z = 329 (M+1)

주: 강도와 반응시간은 아민의 반응성에 따른다. 예를들면, 반응성이 적은 아민(N-메틸아닐린과 같은 것)에 있어서 적당한 반응조건은 30분 동안 MW160℃와 0.5㎖의 아민이다.

표1의 제4컬럼에서는 하기 형광편광검정에서 화합물의 활성을 나타낸다.

표 1

실시예 42:

2-아미노-4- 페닐 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 아미드

실시예 1의 화합물을 농축된 수산화 암모늄에 현탁시키고 20분 동안 140℃에서 개인용 화학 합성기 마이크로파로 가열한다. 진공하에 농축하면 백색고체로서 실시예 42의 화합물을 얻는다.

LC-MS 체류시간: 1.824분, [M+H]⁺ 271.10

실시예 43:

2-아미노-4- 페닐 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 아미드

단계 1

2-아미노-4- 페닐 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산

수산화나트륨(0.55g, 16.5mmol)을 에탄올(20㎖)과 물(2㎖)에 현탁시킨 2-아미노-4-페닐-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(실시예 1)(1.00g; 3.34mmol)의 현탁액에 가한다. 혼합물을 1시간 동안 환류하에 가열하고(균질의 담황색 용액을 나타낸다) 주위온도로 냉각시킨다. 용매를 진공하에 제거하고 고체 잔재를 물(30㎖)에 용해시키고 빙수욕조에서 냉각시킨다. 혼합물을 교반하고 농염산을 적가하여 pH1-2로 조정한다. 생성한 침전물을 여과하고 수세한 다음 에탄올과 끝으로 디에틸에테르로 세척한다. 회색 생성물을 진공에서 건조하면 무색고체로서 2-아미노-4-페닐-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산(0.784g, 87%)를 얻는다.

LC/MS RT = 1.845분; m/z = 272(M+H)⁺

단계 2

O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트(0.380g, 1.0mmol)을 2-아미노-4-페닐-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산(0.187g, 0.69mmol)에 가한다. 이 혼합물을 디메틸포름아미드(DMF)(5.0㎖)에 현탁시키고 디이소프로필에틸아민(0.696㎖; 4.0mmol)을 가하면 황색오일을 얻는다. 염화수소산 디에틸아민(0.122g; 5.0mmol)을 가하고 반응혼합물을 밀봉된 병에서 100℃ 하에 10분 동안 마이크로파 합성기에서 가열한다. DMF를 진공하에서 제거하고 잔재를 초산 에틸(30㎖)과 물(30㎖) 사이에 분배한다. 상을 분리하고 유기상을 염화나트륨포화용액으로 세척하고 황산나트륨상에서 건조한다. 혼합물을 여과하고 여액용매를 진공하에 제거하면 황색고체가 남고 이를 실리카겔에 흡수시키고 헥산에서 15-50% 초산 에틸의 용매 기울기로 용리하면서 실리카겔(20g)에서 플래시크로마토그래피하여 정제한다. 여기서 담황색 고체로서 2-아미노-4-페닐-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드(0.051g; 25%)를 얻는다.

LC/MS RT = 2.08분; m/z - 299(M+H)⁺ 1H NMR(400MHz, d6 DMSO)δ 1.1(t, 3H), 3.26(m, 2H), 7.12(s, 2H), 7.61(m, 3H), 7.86(m, 2H), 8.03(s, 1H), 8.71(t, 1H).

실시예 43의 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'A'를 갖는다. 다음 화합물(표 2)는 대응하는 에스테르(표 1)과 적당한 아민으로 실시예 43의 방법으로 제조한다.

표 2의 최종 컬럼은 하기 형광편광검정에서 화합물의 활성을 나타낸다.

표 2

실시예 74:

2,5- 디아미노 -4- 페닐 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

단계 1

2-아미노-6-옥소-4- 페닐 -1,6- 디하이드로 -피리미딘-5- 카르보니트릴

벤즈알데히드(15g, 141.3mmol, 1eq), 탄산구아니딘(25.47g, 141.3mmol, 1eq), 시아노초산에틸(15.99g, 141.3mmol, 1eq)과 무수초산나트륨(11.5g, 141.3mmol, 1eq)을 300㎖의 무수피리딘에 가하고 4시간 동안 환류시킨다. 반응물을 실온으로 냉각시킨 다음 용매를 감압하에 제거한다. 갈색 잔재를 400㎖의 무수초산(30%)으로 분쇄하고 여별한다. 황색 고체를 300㎖의 디에틸에테르로 분쇄한 다음 여별하면 회색 고체로서 2-아미노-6-옥소-4-페닐-1,6-디하이드로-피리미딘-5-카르보니트릴을 얻는다.

수율: 14.46g (48%)

LCMS 체류시간: 1.34분, m/z calcd for C₁₁H₉N₄O 213.22 (M+H), 실측치 213.1

단계 2

2-아미노-4- 페닐 -6- 티옥소 -1,6- 디하이드로 -피리미딘-5- 카르보니트릴

2-아미노-4-페닐-6-티옥소-1,6-디하이드로-피리미딘-5-카르보니트릴(0.200g, 0.942mmol, 1eq)와 오황화인(0.838g, 3.770mmol, 4eq)을 5㎖ 피리딘에 용해시킨다. 반응물을 2시간 동안 환류하에 가열하고, 실온으로 냉각시키고 100㎖의 물에 붓는다. 혼합물을 1시간 동안 끓이고, 실온으로 냉각시키고 디클로로메탄으로 추출한다. 조합된 유기추출물을 포화염수로 세척하고 무수황산나트륨상에서 건조한다. 용매를 진공에서 제거하고 오렌지색 잔재를 디에틸에테르로 분쇄하면 황색고체로서 2-아미노-4-페닐-6-티옥소-1,6-디하이드로-피리미딘-5-카르보니트릴을 얻는다.

수율: 0.118g (55%)

LCMS 체류시간: 1.94분, m/z calcd for C₁₁H₉N₄S 229.29 (M+H), 실측치 229.1

단계 3

나트륨(0.010g, 0.438mmol, 1eq)을 질소하에 4㎖의 무수에탄올에 용해시킨다. 2-아미노-4-페닐-6-티옥소-1,6-디하이드로-피리미딘-5-카르보니트릴(0.100g, 0.438mmol)을 가하고 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반한다. 2-브로모에틸아세테이트(0.073g, 0.438mmol, 1eq)를 가한다. 반응물을 실온에서 30분 더 교반한 다음, 나트륨(0.010g, 0.438mmol, 1eq)을 1㎖의 무수 에탄올에 용해시킨다. 반응물을 5시간 동안 환류시킨 다음 반응물을 실온으로 냉각시키고 물로 냉각시킨다. 침전물을 여별하고 디에틸에테르로 분쇄하면 황색고체로서 2,5-디아미노-4-페닐-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르를 얻는다.

수율: 0.059g (43%)

LCMS 체류시간: 2.42분, m/z calcd for C₁₁H₉N₄O₂S 315.38 (M+H), 실측치 315.1

¹H NMR(DMSO-d₆, 2.50)δ 1.19(t, 3H, J=7.1), 4.13(q, 2H, J=7.1), 5.79(bs, 2H), 7.29(bs, 2H), 7.50-7.56(m, 5H)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 B를 갖는다.

실시예 75:

2-아미노-5- 메틸 -4- 페닐 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 아미드

단계 1

5-아미노-4- 벤조일 -3- 메틸 -티오펜-2- 카르복실산 에틸 에스테르

문헌 방법으로 제조

Bryan P. McKibben, Craig H. Cartwright, Arlindo L. Castelhano Tetrahedron Lett. 1999, 44, 5471

단계 2

탄산구아니딘을 5-아미노-4-벤조일-3-메틸티오펜-2-카르복실산 에틸 에스테르의 용액에 가하고, 현탁액을 질소기체하에 -3시간 동안 175℃로 가열한다. 현탁액을 냉각시키고 물을 가한다. 혼합물을 초산에틸로 추출하고, 추출물을 세척하고 건조한다. 용액을 농축하고 잔재를 초산에틸과 헥산의 혼합물로 용리하면서 크로마토그래피하여 정제한다.

LC 체류시간 2.17분 [M+H]⁺ 285.1 (운영시간 3.75분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 B를 갖는다.

상술한 것과 유사한 방법에 의하여 제조된 부가적 실시예들은 다음 표 3에 열거했다. 표 3의 네번째 컬럼은 하기 형광편광검정에서 화합물의 활성을 설명한 것이다.

실시예 184:

2-아미노-4-(4-히드록시-2- 메틸 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

단계 1

2-아미노-4-(4- 벤질옥시 -2- 메틸 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

2-메틸-4-벤질옥시페닐붕소산(225㎎; 0.93mmol)을 DMF(10㎖)에서 2-아미노- 4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(실시예 1; 단계 1)(200㎎; 0.776mmol)에 가한다. NaHCO₃(1.0M 수용액; 2.33mmol)를 가하고 혼합물은 N₂로 탈기한다. Pd(PPh₃)₂Cl₂를 가하고 반응혼합물을 5시간 동안 80도C로 가열한다. 반응혼합물을 실온으로 냉각시키고 DMF를 진공하에 제거한다. 잔재를 초산에틸(50㎖)과 포화 NaCl(aq)(50㎖) 사이에 분배한다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액 용매를 진공에서 제거하여 황색오일을 얻고 이를 이온-교환 크로마토그래피(IST SCX-2 컬럼)하여 정제하면 갈-황색고체인 생성물(230㎎; 71%)을 얻는다.

LC-MS 체류시간: 2.852분, [M+H]⁺ 420 (운영시간 3.75분)

단계 2

디클로로메탄(8㎖)에 용해한 4-아미노-4-(4-벤질옥시-2-메틸-페닐-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(211㎎; 0.5mmol)의 얼음욕조에서 냉각된 용액에 BCl₃(DCM에서의 1.0M 용액; 1.51㎖; 1.5mmol)를 가한다. 반응혼합물을 30분 동안 교반한 다음 암모니아수를 가하고(20㎖) 반응혼합물을 초산에틸(2×30㎖)로 추출한다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액 용매를 진공에서 제거하여 황색고체를 얻고 이를 실리카겔에서 플래시 크로마토그래피(10g IST 플래시; 헥산에서 10-40% 초산에틸로 용리)하여 정제하면 무색고체인 생성물(102㎎; 62%)을 얻는다.

LC-MS 체류시간: 2.852분, [M+H]⁺ 420 (운영시간 3.75분)

실시예 185:

2-아미노-4-(2- 메틸 -4- 프로폭시 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

1-브로모프로판(15㎕; 0.17mmol)을 DMF(15㎖)에 용해한 2-아미노-4-(4-히드록시-2-메틸-페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(50㎎; 0.152mmol)와 탄산칼륨(25㎎; 0.18mmol)의 용액에 가한다. 반응혼합물을 18시간 동안 50℃로 가열한다. 반응혼합물을 냉각시키고 용매를 진공에서 제거한다. 잔재를 포화중탄산나트륨수용액(10㎖)과 초산에틸(20㎖) 사이에 분배한다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하여 여과하고, 여액 용매를 진공하에 제거하여 황색오일을 얻고 실리 카겔에서 플래시 크로마토그래피(헥산에서 초산에틸로 용리)하여 정제하면 황색고체인 생성물(45㎎; 80%)을 얻는다.

LC-MS 체류시간: 2.821분, [M+H]⁺ 372 (운영시간 3.75분)

다음 화합물들(표 4)은 브로모프로판 대신에 적당한 알킬화제를 사용하여 실시예 185의 방법으로 제조한다. 표 4의 네번째 컬럼에서는 하기 형광편광검정에서의 화합물의 활성을 설명한다.

표 4

실시예 196

2-아미노-4-(5- 포르밀 -2- 메틸 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

단계 1

3- 브로모 -4- 메틸 - 벤즈알데히드

p-톨루알데히드(12.00g)로부터 Eizenber와 Ammons, Org Prep and Reactions Int., 6(5), 251-253(1974)에 기재되어 있는 바와 같이 제조한다.

수율: 10397g (55%)

LCMS 체류시간 = 2.57분; 이온화없음.

¹H NMR(400MHZ; CDCl₃)δ 2.50(s, 3H0, 7.43(d, 1H, J=7.8Hz), 7.75(dd, 1H, J=7.8과 1.6Hz), 8.05(d, 1H, J=1.6Hz), 9.94(s, 1H)

단계 2

4- 메틸 -3-(4,4,5,5- 테트라메틸 -[1,3,2]- 디옥사보로란 -2-일)- 벤즈알데히드

디메틸포름아미드(60㎖)에서 3-브로모-4-메틸-벤즈알데히드(3.105g; 15.6mmol), 비스(피나콜나토)이붕소(4.29g; 16.86mmol)와 초산칼륨(4.59g; 46.8mmol)의 혼합물을 배기-질소정화(3주기)에 의하여 탈기한 다음, 5분 동안 교반된 반응혼합물에 질소가스를 통과시켜 기포를 일게한다. 초산팔라듐(0.120g; 0.536mmol)을 가하고 반응혼합물을 2.5시간 동안 85℃(오일-바스 온도)로 가열한다. 반응혼합물을 실온으로 냉각시키고 DMF를 진공하에 제거한다. 잔재를 초산에틸(150㎖)과 물(150㎖) 사이에 분배하고 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하여 흑색 Pd 고체를 제거한다. 필터케이스를 초산에틸(2×50㎖)로 세척하고 조합된 여액층을 분리하고 유기상을 물(2×150㎖)로 세척한 다음 포화염화나트륨용액(150㎖)으로 세척한다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액용매를 진공하에 제거하여 황색오일을 얻고 이를 실리카겔에서 플래시 크로마토그래피(50g IST 플래시; 헥산에서 0-10% 초산에틸로 용리)하여 정제하면 무색고체인 생성물을 얻는다.

수율: 4.58g; 85%

LC-MS 체류시간 = 2.799분; [M+H]⁺ 247

¹H NMR(400MHZ; CDCl₃)δ 1.36(s, 12H), 2.62(s, 3H), 7.31(d, 1H, J=7.88Hz), 7.83(dd, 1H, J=7.88과 1.9Hz), 8.25(d, 1H, J=1.9Hz), 9.98(s, 1H)

단계 3

2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(7.62g, 29.57mmol)를 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤즈알데히드(7.28g, 29.57mmol)에 가한 다음 탄산수소나트륨(7.45g, 88.71mmol)을 가한다. DMF(110㎖)을 가한 다음 물(22㎖)을 가하고 현탁액을 배기-질소정화(3주기)에 의하여 탈기한 다음 질소가스를 5분 동안 교반된 반응혼합물에 통과시켜 기포가 일게한다. 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)염화물(500㎎, 0.739mmol)을 가하고 반응혼합물을 18시간 동안 85℃(오일-배스 온도)로 가열한다. 반응혼합물을 실온으로 냉각시키고 DMF를 진공에서 제거한다. 잔재를 초산에틸(500㎖)과 물(400㎖) 사이에 분배하고 혼합물을 15분 동안 강하게 교반한 후 셀라이트 패드로 여과하여 Pd 고체를 제거한다. 필터케이스를 초산에틸(2×50㎖)로 세척하고 조합된 여액상을 분리하고 유기상을 물(1×300㎖)로 세척한 다음 포화염화나트륨용액(250㎖)으로 세척한다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액용매를 진공하에 제거하여 갈색오일상 고체를 얻고 이를 초산에틸로 분쇄하면 갈색고체인 생성물(5.42g, 56%)을 얻는다.

LC-MS 체류시간 = 2.436분; [M+H]⁺ 342

¹H NMR(400MHZ; CDCl₃)δ 1.30(t, 3H), 2.38(s, 3H), 4.32(q, 2H), 7.48(s, 2H), 7.71(d, 2H), 7.91(s, 1H), 7.97(d, 1H), 10.11(s, 1H)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

실시예 197

2-아미노-4-(2- 메틸 -5- 프로필아미노메틸 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카 르복실산 에틸 에스테르

메탄올(5㎖)을 2-아미노-4-(5-포르밀-2-메틸-페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(100㎎, 0.29mmol)에 가한 다음 포르밀아민(0.583mmol)을 생성된 현탁액에 가한다. 반응혼합물을 4시간 동안 환류하에 가열한 당음(균질 의 갈색용액이 나온다) 주위 온도로 냉각시킨다. 붕수소화나트륨(23㎎; 0.58mmol)을 가하고 반응혼합물을 30분 동안 교반한다. 메탄올을 진공하에 제거하고 잔재를 물(20㎖)과 초산에틸(20㎖) 사이에 분배한다. 상을 분리하고 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조하고 여과하고, 여액용매를 진공에서 제거하여 갈색고체를 얻고 이를 메탄올(5.0㎖, 10mmol)에서 2.0M 에틸아민에 현탁시키고 하룻밤 85℃하에 밀봉된 튜브에서 가열한다. 반응혼합물을 냉각시키고 용매를 진공에서 제거하여 갈색고체를 얻고 이를 뜨거운 초산에틸에서 분쇄하고, 여과하고 건조하면 엷은 갈색고체(50㎎, 45%)인 제목의 생성물을 얻는다.

LC-MS 체류시간 = 2.436분; [M+H]⁺ 342

¹H NMR(400MHZ; CDCl₃)δ 0.79(t, 3H, J=7.4Hz), 1.01(t, 3H, J=7.2Hz), 1.35(m, 2H), 2.12(s, 3H), 2.39(m, 2H), 3.13(m, 2H), 3.25(s, 2H), 3.65(s, 2H), 7.02(s, 2H), 7.2-7.38(m, 3H), 7.48(s, 1H), 8.52(t, 3H, J=5.4Hz)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

다음 화합물(표 5)은 프로필아민 대신에 적당한 아민을 사용하여 실시예 197의 방법으로 제조한다.

표 5

실시예 235

2-아미노-4-[2,4- 디클로로 -5-(2- 디에틸아미노 - 에톡시 )- 페닐 ]- 티에노[2,3-d] 피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드

단계 1

1- 벤질옥시 -2,4- 디클로로 -5-니트로-벤젠

탄산칼륨(12g, 87mmol)을 아세톤에 용해한 2,4-디클로로-5-니트로페놀(15.6g, 75mmol)의 용액에 가한다. 브롬화벤질(9㎖, 76mmol)을 가하고 현탁액을 -3시간 동안 오일배스 온도 75℃로 가열한다. 생성한 현탁액을 냉각시키고 물(500㎖)을 가하고, 혼합물을 디클로로메탄(2×200㎖)으로 추출한다. 조합된 추출물을 수성수산화나트륨(150㎖, 2M), 물(2×200㎖)과 포화염화나트륨수용액(150㎖)으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 농축하면 담황색 고체(21.5g, 96%)를 얻는다.

R_f 0.73 CH₂Cl₂ (SiO₂)

단계 2

5- 벤질옥시 -2,4- 디클로로 - 페닐아민

철분말(21g, 376mmol)을 초산(300㎖)/물(150㎖)에 현탁시킨 니트로벤젠(21.5g, 72mmol)의 현탁액에 가하고 혼합물을 -90분 동안 오일배스 온도 85℃로 가열한다. 생성된 현탁액을 가열한다. 여액을 냉각시키고 물(750㎖)을 가하고, 혼합물을 디클로로메탄(3×150㎖)으로 추출한다. 조합된 추출물을 수성수산화나트륨(300㎖, 2M), 물(2×500㎖)과 포화염화나트륨수용액(200㎖)으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 농축하면 담갈색 고체(18.6g, 96%)를 얻는다.

R_f 0.57 CH₂Cl₂ (SiO₂)

단계 3

1- 벤질옥시 -2,4- 디클로로 -5- 요오도 -벤젠

염산(60㎖, 6M)을 초산(240㎖)에 용해한 아닐린(16.2g, 60mmol)의 용액에 가하고 생성된 현탁액을 냉각시킨다(얼음/물/염). 수성아질산나트륨(4.8g, 40㎖에서 69.5mmol)을 서서히 가한다(<5℃ 온도 유지). 첨가가 완료되면 생성 용액을 -30분 동안 교반한다.

생성용액을 물(200㎖)에 용해한 요오드화칼륨(20g, 120mmol)과 요오드(4g, 16mmol)의 용액에 붓고, 혼합물을 -90분 동안 교반한다. 물(900㎖)을 가하고 혼합물을 디클로로메탄(3×250㎖)으로 추출한다. 조합된 추출물을 티오황산나트륨수용액(2×150㎖, 10%), 수성수산화나트륨(250㎖, 2M), 물(2×500㎖)과 포화염화나트륨수용액(200㎖)으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 농축하면 방치시 고화되는 담갈색 오일(20.6g, 90%)를 얻는다.

R_f 0.82 CH₂Cl₂ (SiO₂)

단계 4

2-아미노-4-(5- 벤질옥시 -2,4- 디클로로 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르 복실산 에틸 에스테르

초산칼륨(16g, 163mmol)을 질소 기체하에 DMF(50㎖)에 용해한 요오도벤젠(20.6g, 54mmol)과 비스(피나콜라토)이붕소(14.5g, 57mmol)의 용액에 가한다. 초산팔라듐(450㎎, cat.)을 가하고 혼합물을 -18시간 동안 오일배스 온도 90℃로 가열한다. 생성용액을 농축하고, 잔재를 초산에틸(200㎖)에 용해시키고, 용액을 물(3×200㎖)과 포화염화나트륨수용액(150㎖)으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 농축하여 담갈색 검을 얻는다. 잔재를 1,4-디옥산(160㎖)에 용해시키 고 2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(12.85g, 50mmol)와 수성인산칼륨(40㎖, 2M)을 질소 기체하에 가한다. 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)(cat.)을 가하고 혼합물을 -3시간 동안 오일배스 온도 100℃로 가열한다. 혼합물을 냉각시키고 초산에틸(400㎖)을 가한다. 혼합물을 포화염화나트륨수용액(100㎖)으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 농축하여 담황색 오일을 얻는다. 고체를 디에틸에테르/헥산(1:1)로 세척하면 회색고체를 얻는다. 진공에서 건조(40℃). 10.7g (45%).

R_f 0.13 EtOAc/Hex (1:3) (SiO₂)

LC 체류시간 2.891분 [M+H]⁺ 474.1/476.1 (운영시간 3.75분)

단계 5

2-아미노-4-(2,4- 디클로로 -5-히드록시- 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

메탄올에틸아민(-2M)에 현탁시킨 2-아미노-4-(5-벤질옥시-2,4-디클로로페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르의 현탁액을 -18시간 동안 -75℃로 가열한다. 생성용액을 농축하고 잔재를 디에틸에트르/헥산으로 분쇄하면 담갈색 분말을 얻는다.

LC 체류시간 2.654분 [M+H]⁺ 475.1/473.1 (운영시간 3.75분)

삼염화붕소용액(디클로로메탄에서 1M)을 질소기체하에 78℃에서 디클로로메탄에 현탁시킨 2-아미노-4-(5-벤질옥시-2,4-디클로로페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드의 현탁액에 가한다. 현탁액을 실온에서 -3시간 동안 교반한다. 현탁액을 얼음에서 냉각시키고 메탄올을 가하고, 생성된 혼합물을 -1시간 동안 교반하고 농축하여 황녹색고체를 얻는다. 고체를 수성초산나트륨(70%)에 현탁시키고 초산에틸로 추출한다. 추출물을 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 담갈색고체로 농축하고, 헥산으로 세척하고 진공에서 건조한다.

LC 체류시간 2.180분 [M+H]⁺ 385/383 (운영시간 3.75분)

단계 6

탄산세슘을 DMF에 용해한 2-아미노-4-(2,4-디클로로-5-히드록시페닐)-티에노 [2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드의 용액에 가하고, 2-브로모-N,N-디에틸에틸아민하이드로브로마이드를 가하고 현탁액을 -2시간 동안 -140℃로 가열한다. 생성된 현탁액을 냉각시키고 디클로로메탄을 가한다. 혼합물을 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 짙은 갈색 검으로 농축한다. 조생성물을 디클로로메탄과 메탄올의 혼합물로 용리하면서 실리카에서 크로마토그래피하여 정제한다.

¹H NMR(400MHz, d₆-DMSO)δ 0.96(t, 6H, J=7.1Hz), 1.07(t, 3H, J=7.2Hz), 2.55(q, 4H, J=7.1Hz), 2.81(t, 2H, J=5.8Hz), 3.22(m, 2H), 4.12(t, 2H, J=5.8Hz), 7.23(s, 2H), 7.38(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.80(s, 1H), 8.54(t, 1H, J=5.5Hz)

LC 체류시간 1.774분 [M+H]⁺ 484/482 (운영시간 3.75분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

실시예 236

2-아미노-4-[2,4- 디클로로 -5-(2- 몰포린 -4-일- 에톡시 )- 페닐 ]- 티에노[2,3-d]피 리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드

단계 1

2-아미노-4-[2,4- 디클로로 -5-(2,2- 디에톡시 - 에톡시 )- 페닐 ]- 티에노[2,3-d]피 리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드

칼륨 tert-부톡시드를 아세토니트릴에 현탁시킨 2-아미노-4-(2,4-디클로로-5-히드록시페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드의 현탁액에 가하고, 브로모아세트알데히드디에틸아세탈을 가하고 현탁액을 -8시간 동안 환류하에 가열한다. 생성된 현탁액을 냉각시키고 물을 가하고, 혼합물을 초산에틸로 추출하고 추출물을 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 적색/갈색검으로 농축한다. 조생성물을 초산에틸과 헥산의 혼합물로 용리하면서 실리카에서 크로마토그래피하여 정제한다.

LC 체류시간 2.614분 [M+H]⁺ 501/499 (운영시간 3.75분)

단계 2

염산을 THF에 용해한 2-아미노-4-[2,4-디클로로-5-(2,2-디에톡시에톡시)-페닐]-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드의 용액에 가하고, 용액을 -18시간 동안 교반한다. 몰포린을 가하고 용액을 교반하고 나트륨 트리아세톡시보로히드리드를 가하고 생성된 현탁액을 -18시간 동안 교반한다. 디클로로메탄을 가하고 혼합물을 암모니아수(0.880), 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 담황색고체로 농축한다. 조생성물을 초산에틸과 헥산의 혼합물로 용리하면서 실리카에서 크로마토그래피하여 정제한다.

LC 체류시간 1.795분 [M+H]⁺ 498/496 (운영시간 3.75분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

실시예 237

2-아미노-4-[2,4- 디클로로 -5-(2- 디에틸아미노 - 에톡시 )- 페닐 ]- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6-카르복실산 에틸 아미드

단계 1

2-아미노-4-(5- 벤질옥시 -2,4- 디클로로 - 페닐) - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산

수산화나트륨(0.190g; 4.75mmol)을 2-아미노-4-(5-벤질옥시-2,4-디클로로-페닐]-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(단계 4 실시예 235)에 가한다. 에탄올(25㎖)을 가한 다음 물(2.5㎖)을 가하고 반응혼합물을 1시간 동안 환류하에 가열한다. 반응혼합물을 냉각시키고 용매를 진공에서 제거한다. 생성된 잔재를 물에 용해시키고 빙수배스에서 교반하고 37% 염산수용액을 적가하여 중화시킨다. 반응혼합물을 동결건조하면 황색분말인 생성물(NaCl 2 당량을 함유) 1.33g; 100%을 얻는다.

LC 체류시간 2.579분 [M+H]⁺ 448/446 (운영시간 3.75분)

단계 2

2-아미노-4-(5- 벤질옥시 -2,4- 디클로로 - 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르 복실산 이소프로필 아미드

O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트(1.176g; 3.07mmol)를 2-아미노-4-(5-벤질옥시-2,4-디클로로-페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산에 가한다. 2NaCl(1.33g, 2.38mmol) 다음 DMF(25㎖)을 가하여 탁한 갈색용액을 얻는다. 이소프로필아민(1.01㎖; 11.9mmol)을 가하고 반응혼합물을 18시간 동안 60℃(오일배스 온도)로 가열한다. 반응혼합물을 실온으로 냉각시키고 DMF를 진공에서 제거한다. 잔재를 초산에틸(200㎖)과 물(200㎖) 사이에 분배한다. 상을 분리하고 유기상을 포화염화나트륨수용액(200㎖)으로 세척하고 무수황산나트륨상에서 건조하고, 여과하고 여액용매를 진공에서 제거하면 황색고체를 얻는다. 조생성물을 헥산에서 20-50% 초산에틸의 용매기울기로 용리하면서 실리카겔에서 플래시 크로마토그래피(50 IST 플래시 Si 카트리지)하여 정제한다. 이로서 무색고체인 생성물(0.612g; 53%)을 얻는다.

LC 체류시간 2.756분 [M+H]⁺ 489/487 (운영시간 3.75분)

단계 3

2-아미노-4-(2,4- 디클로로 -5-히드록시- 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르 복실산 이소프로필 아미드

이는 2-아미노-4-(5-벤질옥시-2,4-디클로로-페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 이소프로필 아미드(0.594g)로 실시예 235 단계 5에서와 같이 제조한다. 생성물을 헥산에서 20-100% 초산에틸의 용매기울기로 용리하면서 실리카겔에서 플래시 크로마토그래피(20g IST 플래시 Si 카트리지)하여 정제한다. 이로서 무색고체인 생성물(0.350g; 72%)을 얻는다.

LC 체류시간 2.353분 [M+H]⁺ 399/397 (운영시간 3.75분)

2-아미노-4-[2,4- 디클로로 -5-(2- 디에틸아미노 - 에톡시 )- 페닐 ]- 티에노[2,3-d] 피리미딘-6-카르복실산 이소프로필 아미드

이는 2-아미노-4-(2,4-디클로로-5-히드록시-페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 이소프로필 아미드(0.100g)로 실시예 235의 단계 6에서와 같이 제조한다. 생성물을 정제 HPLC하여 정제한다.

LC 체류시간 1.965분 [M+H]⁺ 498/496 (운영시간 3.75분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

다음 화합물(표 6)은 실시예 235, 236과 237의 방법을 사용하여 제조한다.

표 6의 네번째 컬럼에서는 하기 형광편광검정에서의 화합물의 활성을 설명한다.

표 6

실시예 272

염산을 THF에 용해한 2-아미노-4-(2,4-디클로로-5-(2,2-디에톡시에톡시)-페닐]-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드의 용액에 가하고 용액을 -18시간 동안 교반한다. 디클로로메탄을 가하고 혼합물을 교반하고, 붕수소화 나트륨을 가하고 생성한 현탁액을 -5시간 동안 교반한다. 디클로로메탄을 가하고 혼합물을 포화염화암모늄용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 담황색고체로 농축한다. 조생성물을 정제 HPLC하여 정제하면 회색고체인 생성물을 얻는다.

LC 체류시간 2.124분 [M+H]⁺ 428.9/426 (운영시간 3.75분)

실시예 273

2-아미노-4-[2,4- 디클로로 -5-(1- 메틸 -피페리딘-2- 일메톡시 )- 페닐 ]- 티에노[2, 3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드

건조 테트라하이드로푸란(10㎖)에서 2-아미노-4-(2,4-디클로로-5-히드록시--페닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 아미드(30㎎, 0.08mmol)와 (1-메틸-피페리딘-2-일)-메탄올(12㎎, 0.09mmol)의 혼합물에 트리페닐포스핀(33㎎, 0.13mmol)을 가한다. 건조 테트라하이드로푸란(1㎖)에서 디에틸아조디카르복실레이트(0.021㎖, 0.13mmol)를 실온에서 30초 이상의 간격으로 적가한다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반한 다음 초산에틸(30㎖)을 가하고 반응생성 용액을 1M 중탄산나트륨용액(30㎖)으로 세척한 다음, 포화염수(30㎖)로 세척한다. 반응생성유기물을 황산나트륨으로 건조하고 농축하여 황색오일을 얻고 이를 정제 LCMS하여 정제하면 백색(20.4㎎, 53%)을 얻는다.

LC 체류시간 1.84분 [M+H]⁺ 494.

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

실시예 274

2-아미노-4-(2,4-디메틸- 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6-술폰산 시클로프로 필 아미드

단계 1

2-아미노-4- 클로로 -6-(2,4-디메틸- 페닐 )-피리미딘-5- 카르브알데히드

수성인산칼륨을 질소기체하에 1,4-디옥산에 현탁시킨 2,4-디메틸벤젠붕소산과 2-아미노-4,6-디클로로-5-피리미딘카르브알데히드(3eq)의 현탁액에 가한다. 디클로로비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)(cat.)을 가하고 혼합물을 -90분 동안 -100℃로 가열한다. 생성된 혼합물을 냉각시키고 디클로로메탄을 가하고, 혼합물을 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 담황색고체로 농축한다. 조고체를 디에틸에테르와 헥산의 혼합물로 용리하면서 실리카에서 컬럼크로마토그래피하여 정제한다.

LC 체류시간 2.354분 [M+H]⁺ 262.0 (운영시간 3.75분)

단계 2

2-아미노-4-(2,4-디메틸- 페닐 )-6- 머캅토 -피리미딘-5- 카르브알데히드

2-아미노-4-클로로-6-(2,4-디메틸페닐)-피리미딘-5-카르브알데히드를 DMF에서의 황화나트륨(5eq) 현탁액에 가하고 혼합물을 -60분 동안 교반하여 황색 현탁액을 얻는다. 현탁액을 물에 붓고 용액을 여과한다. 여액을 초산을 산성화하여 황색침전물을 얻는다. 고체를 여과하여 제거하고 물과 헥산으로 세척하고, 진공에서 건조하면 황색분말을 얻는다.

LC 체류시간 2.08분 [M+H]⁺ 260.0 (운영시간 3.75분)

단계 3

C-[2-아미노-6-(2,4-디메틸- 페닐 )-5- 포르밀 -피리미딘-4- 일술판일 ]-N- 시클로프로필 - 메탄술폰아미드

탄산수소나트륨을 DMF에 용해한 2-아미노-4-(2,4-디메틸페닐)-6-머캅토-피리미딘-5-카르브알데히드의 용액에 가하고 현탁액을 교반한다. C-브로모-N-시클로프로필-메탄술폰아미드를 가하고, 혼합물을 -3시간 동안 -85℃로 가열한다. 생성된 현탁액을 냉각시키고, 초산에틸을 가하고, 혼합물을 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 담황색고체로 농축한다. 조고체를 초산에틸과 헥산의 혼합물로 용리하면서 실리카에서 컬럼크로마토그래피하여 정제한다.

LC 체류시간 2.413분 [M+H]⁺ 393.0 (운영시간 3.75분)

단계 4

2-아미노-4-(2,4-디메틸- 페닐 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6-술폰산 시클로 프로필 아미드

피리딘을 디클로로메탄에 현탁시킨 C-[2-아미노-6-(2,4-디메틸페닐)-5-포르밀-피리미딘-4-일술판일]-N-시클로프로필-메탄술폰아미드의 현탁액에 가하고 혼합물을 얼음/물로 냉각한다. 트리플루오로초산무수물을 가하고 혼합물을 -2시간 동안 교반하고 -24시간 동안 환류하에 가열한다. 생성된 짙은 적색용액을 냉각시키고 암모니아수(0.880)를 가하고, 혼합물을 -30분 동안 교반한다. 디클로로메탄을 가하고 혼합물을 묽은 염산, 물과 포화염화나트륨수용액으로 세척한다. 용액을 무수황산나트륨상에서 건조하고 적색/오렌지색 고체로 농축한다. 조고체를 정제 HPLC하여 정제한다.

¹H NMR(400MHz; d₆-DMSO)δ 0.40-0.45(m, 2H), 0.50-0.55(m, 2H), 2.22(s, 3H), 2.27(m, 1H), 2.36(s, 3H), 7.17(bd, 1H, J=7.6Hz), 7.18(s, 1H), 7.21(bs, 1H), 7.28(d, 1H, J=7.6Hz), 7.34(s, 2H), 8.16(bs, 1H)

LC 체류시간 2.478분 [M+H]⁺ 375.0 (운영시간 3.75분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 A를 갖는다.

실시예 275

2-아미노-4- 펜에틸 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

단계 1

2-아미노-4- 스티릴 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

실온에서 DMF에 용해한 2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(0.193g, 0.75mmol)와 알파-페닐붕소산(0.17g, 1.5eq.)의 용액에 1M 탄산수소나트륨용액(1.88㎖, 2.5eq.)을 가한 다음 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II)염화물(26㎎, 0.05eq.)을 가한다. 질소를 5분 동안 혼합물에 통과시켜 기포를 일게한 후 85℃로 가열하고 10시간 동안 교반한다. 냉각된 용액을 초산에틸과 물 사이에 분배하고, 조합된 유기물을 물과 염수로 세척한 후 Isolute SCX II 이온 교환 컬럼에 직접 넣는다. 메탄올에서 1M 암모니아로 용리하고 진공에서 증발시키면 순수한 생성물이 황색분말(0.169g, 70%)로 회수된다.

¹H NMR(CDCl₃)δ = 8.03(1H, s); 8.03(1H, d, J=15Hz); 7.59(2H, m); 7.41-7.30(4H, m); 5.19(2H, broad s); 4.31(2H, q, J=7.1Hz)와 1.35(3H, t, J=7.1Hz).

LCMS 체류시간 7.47분, [M+H]⁺ = 326.12 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 '활성 A'를 갖는다.

단계 2

에탄올에 용해한 2-아미노-4-스티릴-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(78㎎, 0.18mmol)의 용액에 활성탄(51㎎) 상에서 5% 팔라듐을 가하고, 이를 수소기체하에 하룻밤 교반한다. 현탁액을 셀라이트로 여과하고, 휘발물을 진공하에 제거하고 반-정제 HPLC를 사용하여 잔재를 정제하면 오렌지 분말인 순수한 화합물을 얻는다.

¹H NMR(CDCl₃)δ = 7.82(1H, s); 7.35-7.11(5H, m); 5.33(2H, broad s); 4.40(2H, q, J=7.1Hz); 3.26(2H, m); 3.22(2H, m)와 1.43(3H, t, J=7.1Hz).

LCMS 체류시간 7.11분, [M+H]⁺ = 327.92 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 '활성 A'을 갖는다.

다음 화합물(표 7)은 적당한 붕소산 또는 붕소산염을 사용하여 실시예 275의 방법으로 제조한다. 해당 아미드는 에스테르로부터 직접 합성하거나(실시예 235, 단계 5) 또는 가수분해(실시예 43, 단계 1)한 다음 아민 카플링(실시예 43, 단계 2)으로 합성하고 반-정제 HPLC하여 정제한다. 표 7의 네번째 컬럼에서는 하기 형광편광검정에서의 화합물의 활성을 설명한다.

표 7

실시예 294

2-아미노-4-(1H-인돌-3-일)- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스 테르

단계 1

2-아미노-4-(1- 벤젠술폰일 -1H-인돌-3-일)- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실 산 에틸 에스테르

1-(페닐술폰일)-3-인돌 붕소산과 실시예 275, 단계 1의 방법을 사용하여 원하는 생성물을 오렌지색 고체(105g, 29%)로 합성한다.

LCMS 체류시간 7.72분, [M+H]⁺ = 478 (운영시간 15분)

단계 2

2-아미노-4-(1H-인돌-3-일)- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산

에탄올(6㎖)에 용해한 2-아미노-4-(1-벤젠술폰일-1H-인돌-3-일)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(80㎎, 0.17mmol)의 용액을 65℃로 가열하고, 2M 수산화칼륨(0.25㎖, 3eq.)을 가하고 하룻밤 교반한다. 물을 가하고 휘발물을 진공에서 제거한다. 용액을 중화시킨 다음 동결건조한다.

LCMS 체류시간 5.72분, [M+H]⁺ = 311.07 (운영시간 15분)

단계 3

조 2-아미노-4-(1H-인돌-3-일)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산을 에탄올(2㎖)에 용해시키고 농황산을 가한다(5방울). 용액을 하룻밤 환류시킨 후 물을 가하고 휘발물을 진공에서 제거한다. 수용액을 1M 탄산수소나트륨용액과 초산에틸 사이에 분배한다. 유기물을 조합하고, 황산나트륨상에서 건조하고 증발건조시킨다. 정제 TLC한 후 회색 분말로서 순수한 화합물을 얻는다.

¹H NMR(d₆-DMSO)δ = 11.93(1H, broad s); 8.62(1H, d, J=7.5Hz); 8.43(1H, s); 8.27(1H, s); 7.53(1H, d, J=7.5Hz); 7.27-7.15(1H + 1H + 2H, m); 4.34(2H, q, J=7.1Hz)와 1.34(3H, t, J=7.1Hz).

LCMS 체류시간 6.70분, [M+H]⁺ = 339.08 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'B'를 갖는다.

실시예 294

2-아미노-4- 벤질옥시 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 아미드

단계 1

2-아미노-4- 벤질옥시 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산

무수 THF(5㎖)에서 수소화나트륨(0.5mmol, 광물성 오일에서 60%)을 함유하는 질소충전플라스크에 벤질알코올(0.5mmol)을 가한다. 더이상 가스가 방출되지 않을 때까지 현탁액을 10분 동안 강하게 교반한 후 2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(0.129g, 0.5mmol)를 함유하는 마이크로파 반응관으로 옮긴다. 밀봉된 관을 CEM 마이크로파장치(CAREI)에서 300W을 사용하여 5분 동안 90℃로 가열한다. 반응혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하고, 물층을 중화하고 진공에서 증발건조시키면 순수한 생성물을 얻는다.

LCMS 체류시간 6.35분, [M+H]⁺ = 301.93 (운영시간 15분)

단계 2

실시예 43, 단계 2에 기재된 HATU 카플링 조건을 사용하여 아미드를 합성하고 컬럼크로마토그래피하여 정제한다.

¹H NMR(CDCl₃)δ = 7.49(1H, s); 7.39-7.25(5H, m); 6.03(1H, broad t, J=5Hz); 5.39(2H, s); 5.15(2H, broad s); 3.38(2H, dq, J=5.7Hz와 J=7.2Hz); 1.14(3H, t, J=7.2Hz).

LCMS 체류시간 6.34분, [M+H]⁺ = 329.05 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'B'를 갖는다.

실시예 295

2-아미노-4-(4- 클로로 - 벤조일 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

실온에서 DMF에 용해한 2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(1mole eq.), p-클로로벤즈알데히드(1mole eq.)와 3-에틸-1-메틸-3H-이미다졸-1-이움브로마이드(0.3mole, eq.)의 용액에 수소화나트륨(1.1mole eq. 광물성오일에서 60%)을 가한다. 용액은 즉시 검게 변하고 이를 오렌지색용액으로 변하는 3시간 동안 교반한다. 이를 신터 유리 퍼넬로 여과하고, 염수를 가하고 생성된 침전물을 여과하고 건조시킨다. 생성된 황색고체를 정제 TLC 아니면 정제 HPLC 하여 정제한다.

¹H NMR(d₆-아세톤)δ = 8.11(2H, d, J=8.8Hz); 8.03(1H, s); 7.57(2H, d, J=8.8Hz); 6.86(2H, s); 4.33(2H, q, J=7.0Hz)와 1.34(3H, t, J=7.0Hz).

LCMS 체류시간 7.49분, [M+H]⁺ = 362.06 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'A'을 갖는다.

다음 화합물(표 8)은 적당한 벤즈알데히드를 사용하여 실시예 295의 방법으로 제조한다. 표 8의 네번째 컬럼에서는 하기 형광편광검정에서의 화합물 활성을 설명한다.

표 8

실시예 315

2-아미노-4-(1- 벤조[1,3]디옥솔 -5-일-1-히드록시-에틸)- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6-카르복실산 에틸 에스테르

2-아미노-4-(벤조[1,3]디옥솔-5-카르보닐)-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복 실산 에틸 에스테르(실시예 312)(100㎎)를 질소기체하에 무수 THF에 용해시킨 후 브롬화 마그네슘 메틸(디에틸 에테르에서 3.0M 용액, 5eq.)을 가한다. 용액을 하룻밤 40℃에서 교반한 후 10% 염화암모늄수용액과 초산에틸 사이에 분배한다. 유기층을 염수로 세척하고, 황산마그네슘상에서 건조하고 증발시켜 조생성물을 얻고 이를 정제 TLC하여 정제하면 황색분말로서 원하는 화합물을 얻는다.

¹H NMR(d₆-아세톤)δ = 8.04(1H, s); 6.94(1H, d, J=7.7Hz); 6.91(1H, s); 6.64(1H, d, J=7.7Hz); 6.50(2H, broad s); 5.81(2H, s); 5.46(1H, s); 4.17(2H, q, J=7.1Hz); 1.81(3H, s)와 1.19(3H, t, J=7.1Hz).

LCMS 체류시간 6.37분, (LCMS에서 H₂O의 제거) [M+H]⁺ = 370.07 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'A'를 갖는다.

실시예 316

2-아미노-4-( 벤조[1,3]디옥솔 -5-일- 시아노 - 메틸 )- 티에노[2,3-d]피리미딘 -6-카르복실산 에틸 에스테르

실온에서 DMF에 용해한 2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(1eq.)와 벤조[1,3]디옥솔-5-일-아세토니트릴(1mole eq.)의 용액에 수소화나트륨(1.1mole eq. 광물성오일에서 60%)을 가한다. 혼합물을 알곤하에서 하룻밤 이 온도에서 교반한다. 다음 이를 염수로 희석하고 초산에틸로 추출한다. 조합된 유기 부분을 염수와 물로 세척하고 황산나트륨으로 건조한다. 여과 후 용매를 증발시키면 갈색고체를 얻는데 이를 정제 TLC 또는 정제 HPLC하여 정제한다.

¹H NMR(d₆-아세톤)δ = 7.76(1H, s); 6.84(1H, d, J=8.0Hz); 6.56(1H+1H+1H, m); 6.10(1H, d, J=1.0Hz); 6.05(1H, d, J=1.0Hz); 4.30(2H, q, J=7.0Hz)와 1.30(3H, t, J=7.0Hz).

LCMS 체류시간 7.04분, [M+H]⁺ = 383.06 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'A'를 갖는다.

다음 화합물(표 9)는 적당한 아세토니트릴을 사용하여 실시예 316의 방법으로 제조한다. 표 9의 네번째 컬럼에서는 하기 형광편광검정에서의 화합물 활성을 설명한다.

표 9

실시예 319

2-아미노-4- 시아노 - 티에노[2,3-d]피리미딘 -6- 카르복실산 에틸 에스테르

2-아미노-4-클로로-티에노[2,3-d]피리미딘-6-카르복실산 에틸 에스테르(1eq.), Zn(CN)₂(0.6eq.), Zn 분진(0.12eq.), Pd₂(dba)₃(0.02mole eq.)와 1,1'-비스(디페닐포스핀)페로센(0.04eq.)을 DMA에서 혼합하고 혼합물을 24시간 동안 120℃에서 알곤하에 교반한다. 생성된 현탁액을 짧은 셀라이트 컬럼으로 여과하고, 여액을 염수로 희석하고 초산에틸로 추출한다. 유기층을 염수와 물로 세척한 다음 황산나트륨상에서 건조한다. 용매를 증발시킨 후 조오일을 정제 TLC하여 정제한다.

¹H NMR(d₆-아세톤)δ = 7.92(1H, s); 7.08(1H, s); 4.42(2H, q, J=7.0Hz)와 1.40(3H, t, J=7.0Hz).

LCMS 체류시간 6.10분, [M+H]⁺ = 249.04 (운영시간 15분)

이 화합물은 하기 형광편광검정에서 활성 'A'를 갖는다.

형광편광검정

형광편광(형광비등방성으로 알려져 있다)은 용액에서 형광종의 회전을 측정하고, 여기서 분자가 더 크면 형광방출이 더 많이 편광된다. 형광단이 편광을 일으킬 때 방출광 또한 편광된다. 분자 크기는 형광 방출의 편광에 비례한다.

형광-표지 프로브-RBT0045864-FAM-

은 HSP90{전신 인체, 전신 효모 또는 N-말단영역 HSP90}에 결합하고 비등방성{프로브의 회전:단백질 복합체}을 측정한다.

시험화합물을 검정판에 첨가하고, 평형이 되게 하고 다시 비등방성을 측정한다. 비등방성에서 어떠한 변화는 HSP90에 화합물이 경쟁적으로 결합하므로서 프로브를 방출하기 때문이다.

재료

화학품은 최고 순도의 시판하고 있는 것이고, 모든 수용액 AR수로 제조한다.

1) 코스타르 96-웰 흑색 검정판 #3915

2) (a)100mM Tris pH7.4; (b)20mM KCl; (c)6mM MGCl₂의 검정완충제. 실온에서 저장.

3) BSA(소혈청알부민) 10㎎/㎖(New England Biolabs #B9001S)

4) 100% DMSO 저장농도의 20mM. 실온으로 암실에서 저장. 작업농도는 AR수로 희석된 200mM이고 4℃에서 저장한다. 검정에서 최종농도는 80nM.

5) E. coli 발현 인체 전신 HSP90 단백질, 정제>95%(예를들어, Panaretou 등, 1998 참조).

프로토콜

1) 웰 12A와 12A(=FP BLNK)에 100㎕ 1x 완충제 첨가

2) 검정혼합물 제조-프로브가 감광성이므로 모든 시약을 버킷에 뚜껑이 있는 얼음에 보존한다.

i. 최종농도

ㆍ1x Hsp90 FP 완충제 10㎖ 1x

ㆍBSA 10㎎/㎖(NEB) 5.0㎕ 5㎍/㎖

ㆍ프로브 200㎛ 4.0㎕ 80nM

ㆍ인체 전신 Hsp90 6.25㎕ 200nM

3) 모든 다른 웰에 100㎕ 검정혼합물 분할

4) 밀봉판과 20분 동안 실온으로 암실에서 평형으로 유지

화합물 희석판-1×3 희석 시리즈

1) 투명한 96-웰 v-바닥판 - {#VWR 007/008/257}에서 웰 B1 내지 H1에 100% DMSO 첨가

2) 웰 A1 내지 H11에 17.5㎕ 100% DMSO 첨가

3) A1에 2.5㎕ 화합물 첨가. 이것은 2.5mM{50×3}저장 화합물 - 화합물 20mM 가정.

4) 웰 A2 내지 A10으로 반복. 컬럼 11과 12에서 대조.

5) 줄 A에서 줄 B로 5㎕ 이동 - 컬럼 12 없음. 웰 혼합.

6) 줄 B에서 줄 C로 5㎕ 이동. 웰 혼합.

7) 줄 G로 반복.

8) 줄 H에 어떠한 화합물을 첨가하지 않는다 - 이것은 O줄이다.

9) 이것은 50㎛ 내지 0.07의 1×3 희석 시리즈 생성.

10) 웰 B12에서 20㎕의 100㎛ 표준 화합물 제조.

11) 첫번째 배양 후 검정판을 Fusion^TM α-FP판 판독기(Packard Bioscience, 영국 버크셔어 팽부른)에서 판독.

12) 첫번째 판독 후 2㎕의 희석된 화합물을 컬럼 1 내지 10에 있어 각 웰에 첨가. 컬럼 11{표준곡선공급}에서만 화합물 B11-H11 첨가. 웰 B12-H12에 2㎕의 100mM 표준 화합물 첨가{양성대조이다}

13) Z' 인자는 영 대조물과 양성 웰로 계산한다. 이는 대표적으로 0.7-0.9의 값을 나타낸다.

상기 검정에서 시험한 화합물은 두 활성 범위, 즉, A=<10㎛; B=>10㎛ 중 하나로 선정되고 이들 선정은 상기에 기록했다.

또한 성장 저해 검정을 후보 HSP90 저해제의 평가에 사용한다:

술포로다민 B( SRB ) 검정에 의한 세포독성의 평가: 50 저해 농도( IC ₅₀ )의 계산.

1일

1) 혈구 측정기에 의한 세포수 계산

2) 8채널 멀티피페터를 사용하여 90-웰 마이크로타이터판의 각 웰에 160㎕의 세포 현탁액(3600 세포/웰 또는 2×10⁴ 세포/㎖)을 첨가.

3) CO₂ 배양기에서 37℃로 하룻밤 배양.

2일

4) 약제의 모액을 제조하고, 각 약제의 연속 희석을 매체에서 행하여 웰에 최종 농도가 나타나게 한다.

5) 멀티피페터를 사용하여 40㎕의 약제(5×최종농도)를 네겹의 웰에 첨가.

6) 대조 웰은 96웰 판의 어느 한 쪽에 있고, 40㎕의 매체를 첨가한다.

7) 4일(48시간) 동안 CO₂ 배양기에서 판을 배양.

6일

8) 싱크에서 매체를 비우고 10% 빙냉 트리클로로초산(TCA)에 판을 서서히 침지시킨다. 약 30분 동안 얼음에 방치.

9) 수돗물 욕조에 판을 침지시켜서 수돗물로 판을 3회 세척하고 이를 제거한다.

10) 배양기에서 건조.

11) 각 웰에 1% 초산에서의 100㎕의 0.4% SRB 첨가(96웰 판 중 마지막 줄(우측)을 제외하고, 이것은 0% 대조물, 즉 약제도 없고 얼룩도 없는 것이다. 첫번째 줄은 약제는 없으나 얼룩이 있는 100% 대조물이다). 15분 동안 방치.

12) 1% 초산으로 4회 세척하여 비결합된 SRB 얼룩을 세척 제거.

13) 배양기에서 판 건조.

14) 100㎕의 10mM 트리스 염기를 사용하여 SRB를 용해시키고 5분 동안 판 세이커에 판을 놓는다.

15) 판 판독기를 사용하여 540㎚에서 흡수도를 측정. 네겹의 웰의 평균 흡수도를 계산하고, 비처리된 웰을 대조값의 퍼센트로 표시.

16) 흡수도 값 % 대 약제 농도 로그를 정하고 IC₅₀ 측정.

예시한 바와 같이 실시예 2의 화합물은 SRB 성장 저지 검정에 있어 'A' 범위(<50㎛)에서 IC50을 나타냈다.

참고문헌

본 발명과 본 발명에 속하는 분야의 설명을 더 완전하게 기술하고 기재하기 위하여 여러가지 출판물을 상기에서 인용했다. 이들 참고문헌의 완전한 인용물을 하기에 제공했다. 이들 각 참고문헌은 본 발명의 설명에 참고 문헌 전체를 이에 혼입했다.

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Claims

생체 외 또는 생체 내에서 HSP90 활성의 저해용 조성물의 제조에 다음식(I)의 화합물 또는 이들의 염, N-산화물, 수화물 또는 용매화물을 사용하는 화합물의 용도:

상기식에서

R₂는 다음식(IA)의 기이다:

-(Ar¹)_m-(Alk¹)_p-(Z)_r-(Alk²)_s-Q (IA)

이 식에서

Ar¹은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기이고,

Alk¹과 Alk²는 임의로 치환된 2가 C₁-C₃ 알킬렌 또는 C₂-C₃ 알켄일렌기이고,

m, p, r과 s는 각각 0 또는 1이고,

Z는 -O-, -S-, -(C=O)-, -(C=S)-, -SO₂-, -C(=O)O-, -C(=O)NR^A-, -C(=S)NR^A-, -SO₂NR^A-, -NR^AC(=O)-, -NR^ASO₂- 또는 -NR^A-(여기서 R^A는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬이다)이고,

Q는 수소 또는 임으로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리기이다;

R₃는 수소, 임의의 치환기 또는 임의로 치환된 (C₁-C₆)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고;

R₄는 카르복실에스테르, 카르복스아미드 또는 술폰아미드기이다.
HSP90 활성을 저해하는데 유효한 제1항에 정의된 일정량의 화합물을 포유류에 투여하여서 하는 포유류의 HSP90 활성의 저해에 반응하는 질병의 치료방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 면역 억제 또는 류마티스성 관절염, 천식, 다발성 경화증, 타입 1 당뇨병, 낭창, 건선과 염증성 장질병과 같은 염증성 질병, 바이러스질병; 당뇨병성 망막병증, 혈관종과 자궁내막증과 같은 방광섬유증-관련 질병의 치료 또는; 화학요법-유도 독성에 대한 정상 세포의 보호; 또는 고사를 받는 부전이 근본 요인인 질병 치료; 심장과 뇌에서 Hsp70의 상승으로 인한 저산소증-허혈성 상해로부터의 보호; 스크래피/CJD, 헌팅돈 또는 알츠하이머 질병을 치료하기 위한 용도 또는 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 암치료를 위한 용도 또는 방법.
전술한 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 m는 1이고, 각 p, r, s는 0이고, Q는 수소인 용도 또는 방법.
전술한 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 R₂가 임의로 치환된 페닐, 2- 또는 3-티에닐, 2- 또는 3-푸란일, 2-, 3- 또는 4-피리딘일, 몰포린일 또는 피페리딘일인 용도 또는 방법.
제6항에 있어서, 화합물(I)에서 R₂가 메틸, 에틸, n- 또는 이소프로필, 비닐, 알릴, 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, 벤질옥시, 알릴옥시, 시아노메톡시 클로로, 보로모, 시아노, 포르밀, 메틸-, 에틸- 또는 n-프로필-크로보닐옥시, 메틸- 또는 에틸아미노카르보닐에서 선택한 하나 또는 그 이상의 치환기와; 식 -O(CH₂)_nZ¹(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹는 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다) 또는 식 -(Alk³)_mZ¹(여기서 Alk³는 2가 직쇄 또는 분지쇄(C₁-C₃)알킬렌이고, m는 0 또는 1이고, Z¹는 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 치환기에 의하여 임의로 치환된 페닐인 용도 또는 방법.
제7항에 있어서, 임의의 치환기가 페닐환의 2- 와/또는 4- 와/또는 5-위치에 있는 용도 또는 방법.
전술한 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 m이 1이고, p, r, s가 0이고, Q가 임의로 치환 탄소고리 또는 헤테로고리환인 용도 또는 방법.
전술한 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 Ar¹이 페닐, 시클로헥실, 피리딜, 몰포리노, 피페리딘일 또는 피페라진일환인 용도 또는 방법.
전술한 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 R₃가 수소인 용도 또는 방법.
전술한 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 R₄가 식 -CONR^B(Alk)_nR^A의 카르복스아미드기 또는 식 -SO₂NR^B(Alk)_nR^A의 술폰아미드기인 용도 또는 방법.

상기 식에서 Alk는 임의로 치환된 2가 알킬렌, 알켄일렌 또는 알킨일렌기이고,

n는 0 또는 1이고,

R^B는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬 또는 C₂-C₆ 알켄일기이고,

R^A는 히드록시 또는 임의로 치환된 탄소고리 또는 헤테로시클일이고,

또는 R^A와 R^B는 이들이 결합되는 질소와 함께 O, S와 N에서 선택한 하나 또는 그 이상의 부가적 헤테로 원자를 임의로 함유하고 하나 또는 그 이상의 환 C 또는 N 원자에서 임의로 치환되는 N-헤테로고리환을 형성한다.
제12항에 있어서,

Alk가 임의로 치환되는 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂CH=CH- 또는 -CH₂CCCH₂-이고,

R^B가 수소 또는 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필 또는 알릴이고,

R^A가 히드록시 또는 임의로 치환된 페닐, 3,4-메틸렌디옥시페닐, 피리딜, 푸릴, 티에닐, N-피페라진일 또는 N-몰포린일이고,

또는 R^A와 R^B는 이들이 결합되는 질소와 함께 O, S와 N에서 선택한 하나 또는 그 이상의 부가적 헤테로 원자를 임의로 함유하고 하나 또는 그 이상의 환 C 또는 N 원자에서 임의로 치환되는 N-헤테로고리환을 형성하는 용도 또는 방법.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서, R₄가 식 -COOR^C(여기서 R^C는 C₁-C₆ 알킬 또는 C₂-C₆ 알켄일기이다)의 카르복실산 에스테르기 또는 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기 또는 임의로 치환된 아릴(C₁-C₆ 알킬)- 또는 헤테로아릴(C₁-C₆ 알킬)-기 또는 임의로 치환된 시클로알킬기인 용도 또는 방법.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)에서 -COOR^C(여기서 R^C는 임의로 치환되는 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필, 알릴, 페닐, 피리딜, 티아졸일, 벤질, 피리딜메틸, 시클로펜틸 또는 시클로헥실이다)의 카르복실산 에스테르기인 용도 또는 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물(I)이 다음식(II)을 갖는 용도 또는 방법.

상기식에서

A는 이차아미노기이고;

R₁₀은 H, Cl, Br 또는 CH₃이고;

R₁₁은 수소, Cl, Br, CN, 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필, 비닐 또는 알릴이고;

R₁₂는 (i)식 -O(CH₂)_nZ¹의 기(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹은 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다) 또는 (ii) 식 -(Alk³)_mZ¹의 기(여기서 Alk³는 2가 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬렌이고, m는 0 또는 1이고, Z¹은 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)이다.
제16항에 있어서, 화합물(II)에서 A가 이차 C₁-C₆ 알킬아미노기인 용도 또는 방법.
제16항 또는 제17항에 있어서, 화합물(II)에서 R₁₂가 (i) -O(CH₂)_nZ¹의 기(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹은 디(C₁-C₃ 알킬)아미노 또는 C₁-C₃ 알콕시이다)인 용도 또는 방법.
다음식(I)의 화합물 또는 이들의 염, N-산화물, 수화물 또는 용매화물:

상기식에서

R₂는 다음식(IA)의 기이고:

-(Ar¹)_m-(Alk¹)_p-(Z)_r-(Alk²)_s-Q (IA)

이 식에서

Ar¹은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기이고,

Alk¹과 Alk²는 임의로 치환된 2가 C₁-C₃ 알킬렌 또는 C₂-C₃ 알켄일렌기이고,

m, p, r과 s는 각각 0 또는 1이고,

Z는 -O-, -S-, -(C=O)-, -(C=S)-, -SO₂-, -C(=O)O-, -C(=O)NR^A-, -C(=S)NR^A-, -SO₂NR^A-, -NR^AC(=O)-, -NR^ASO₂- 또는 -NR^A-(여기서 R^A는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬이다)이고,

Q는 수소 또는 임으로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리기이다;

R₃는 수소, 임의의 치환기 또는 임의로 치환된 (C₁-C₆)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기이고;

R₄는 카르복실에스테르, 카르복스아미드 또는 술폰아미드기이며,

이때 (i) R₃는 -NH₂ 아니거나 또는 (ii) R₄가 -COOCH₃이고 R₃가 수소이면 R₂는 에틸아미노, 디에틸아미노, 페닐아미노 또는 -N(Ph)(C₂H₅)(여기서 Ph는 페닐이다)가 아니다.
제19항에 있어서, R₃가 수소인 화합물.
제19항 또는 제20항에 있어서, m가 1이고, 각 p, r과 s가 0이고, Q가 수소인 화합물.
제21항에 있어서, R₂가 임의로 치환되는 페닐, 2- 또는 3-티에닐, 2- 또는 3-푸란일, 2-, 3- 또는 4-피리딘일, 몰포린일 또는 피페리딘일인 화합물.
제21항에 있어서, R₂가 메틸, 에틸, n- 또는 이소프로필, 비닐, 알릴, 메톡시, 에톡시, n-프로필옥시, 벤질옥시, 알릴옥시, 시아노메톡시 클로로, 브로모, 시아노, 포르밀, 메틸-, 에틸- 또는 n-프로필-카르보닐옥시, 메틸- 또는 에틸아미노카르보닐인 화합물.
제23항에 있어서, 임의의 치환기가 페닐환의 2- 와/또는 4- 와/또는 5-위치에 있는 화합물.
제19항 또는 제20항에 있어서, m이 1이고, p, r과 s가 0이고, Q가 임의로 치환된 탄소고리 또는 헤테로고리환인 화합물.
제19항 또는 제20항에 있어서, m가 1이고, p, r과 s 중 최소한 하나가 1인 화합물.
제19항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, Ar¹이 임의로 치환되는 페닐환인 화합물.
제19항 또는 제20항에 있어서, m이 0인 화합물.
제26항 또는 제27항에 있어서, Alk¹이 존재할 때 이는 임의로 치환되는 -CH₂, CH₂CH₂- 또는 -CH=CH-이고; Alk²가 존재할 때 이는 임의로 치환되는 -CH₂, CH₂CH₂- 또는 -CH=CH-이고; Z가 존재할 때 이는 -O- 또는 -NH-이고; Q가 수소인 화합물.
제29항에 있어서, Z와 Alk²가 존재하고, Alk²가 디(C₁-C₃ 알킬)아미노 또는 C₁-C₃ 알콕시에 의하여 치환되는 화합물.
제19항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, R₄가 식 -CONR^B(Alk)_nR^A의 카르복스아미드기 또는 식 -SO₂NR^B(Alk)_nR^A의 술폰아미드기인 화합물:

상기식들에서 Alk는 임의로 치환되는 2가 알킬렌, 알켄일렌 또는 알킨일렌기이고,

n는 0 또는 1이고,

R^B는 수소 또는 C₁-C₆ 알킬 또는 C₂-C₆ 알켄일기이고,

R^A는 히드록시 또는 임의로 치환되는 탄소고리, 예를들어, 히드록시 와/또는 클로로-치환페닐과 3,4-메틸렌디옥시페닐; 또는 헤테로시클일, 예를들어, 피리딜, 푸릴, 티에닐, N-피페라진일 또는 N-몰포릴일(이들 중 어느 것은 헤테로고리가 치환될 수 있다)이고,

또는 R^A와 R^B는 이들이 결합되는 질소와 함께 O, S와 N에서 선택한 하나 또는 그 이상의 부가적 헤테로원자를 임의로 함유하고 하나 또는 그 이상의 환 C 또는 N원자에서 임의로 치환되는 N-헤테로고리환을 형성한다.
제31항에 있어서,

Alk가 임의로 치환되는 -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂CH=CH- 또는 -CH₂CCCH₂-이고,

R^B가 수소 또는 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필 또는 알릴이고,

R^A가 히드록시 또는 임의로 치환되는 페닐, 3,4-메틸렌디옥시페닐, 피리딜, 푸릴, 티에닐, N-피페라진일 또는 N-몰포린일이고,

또는 R^A와 R^B가 이들이 결합되는 질소와 함께 O, S와 N에서 선택한 하나 또는 그 이상의 헤테로원자를 임의로 함유하고, 하나 또는 그 이상의 환 C 또는 N원 자에서 임의로 치환되는 N-헤테로고리환을 형성하는 화합물.
제31항 또는 제32항에 있어서, R₄가 카르복스아미드기인 화합물.
제19항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 식 -COOR^C(여기서 R^C는 C₁-C₆ 알킬 또는 C₂-C₆ 알켄일기이다)의 카르복실산 에스테르기 또는 임의로 치환되는 아릴 또는 헤테로아릴기 또는 임의로 치환되는 아릴(C₁-C₆ 알킬)- 또는 헤테로아릴(C₁-C₆ 알킬)-기 또는 임의로 치환되는 시클로알킬기인 화합물.
제19항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, R₄가 식 -COOR^C(여기서 R^C는 임의로 치환되는 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필, 알릴, 페닐, 피리딜, 티아졸일, 벤질, 피리딜메틸, 시클로펜틸 또는 시클로헥실이다)의 카르복실산 에스테르기인 화합물.
제19항에 있어서, 다음식(II)을 갖는 화합물:

상기식에서

A는 이차 아미노기이고,

R₁₀는 H, Cl, Br 또는 CH₃이고;

R₁₁은 수소, Cl, Br, CN, 메틸, 에틸, n- 또는 이소-프로필, 비닐 또는 알릴이고;

R₁₂는 (i)식 -O(CH₂)_nZ¹(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹은 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 기; 또는 (ii)식 -(Alk³)_mZ¹(여기서 Alk³는 2가 직쇄 또는 분지쇄 (C₁-C₃)알킬렌이고, m는 0 또는 1이고, Z¹은 일차, 이차, 삼차 또는 고리형 아미노기 또는 C₁-C₆ 알콕시기이다)의 기이다.
제36항에 있어서, A가 이차 C₁-C₆ 알킬아미노기인 화합물.
제36항 또는 제37항에 있어서, R₁₂가 (i) 식 -O(CH₂)_nZ¹(여기서 n는 1, 2 또는 3이고, Z¹은 디(C₁-C₃ 알킬)아미노 또는 C₁-C₃ 알콕시이다)의 기인 화합물.
제38항에 있어서, 실시예 74를 제외한 본 실시예들 중 어느 것에 속하는 화합물.
하나 또는 그 이상의 약학적으로 또는 수의학적으로 허용할 수 있는 담체 와/또는 부형제와 함께 제19항 내지 제39항 중 어느 한 항에 따른 화합물로 이루어지는 약학적 또는 수의학적 조성물.