KR20050078693A - Composition comprising lindera obstiloba extract - Google Patents
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Abstract
본 발명은 생강나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition containing a ginger tree extract as an active ingredient.
본 발명의 생강나무 추출물은 간기능 지표인 GOT, GPT, ALP, BUN 수치가 낮게 나타나므로, 간기능 개선 효과가 우수하다. 또한, ALP, BUN 수치는 간기능 뿐 아니라 신기능 진단지표로 이용되므로 본 발명의 생강나무 추출물은 신기능 개선 효과도 우수함을 알 수 있다.Ginger tree extract of the present invention, GOT, GPT, ALP, BUN levels of liver function indicators appear low, it is excellent in liver function improving effect. In addition, since ALP and BUN levels are used as diagnostic indicators of renal function as well as liver function, the ginger extract of the present invention can be seen that the renal function is also improved.
또한, 본 발명의 생강나무 추출물은 하이드록시프롤린의 양이 간 조직에서는 낮게 나타나고 신장 조직에서는 높게 나타나므로, 항섬유화 효과 및 신장 보호 효과가 우수하다.In addition, the ginger extract of the present invention, the amount of hydroxyproline is low in the liver tissue and high in the kidney tissue, it is excellent in the antifibrotic effect and kidney protection effect.
또한, 본 발명의 생강나무 추출물은 간 조직 및 신장 조직에서 지질과산화 지표인 말론디알데하이드의 양이 낮게 나타나므로, 항산화 효과가 우수하다.In addition, the ginger extract of the present invention is low in the amount of malondialdehyde which is an indicator of lipid peroxidation in liver tissue and kidney tissue, it is excellent in antioxidant effect.
따라서, 본 발명의 조성물은 항산화, 항섬유화, 간 기능 개선 뿐만 아니라 신장 보호 및 신장 기능 개선에도 유용하게 사용될 수 있다.Therefore, the composition of the present invention can be usefully used not only for antioxidant, antifibrotic, improving liver function but also for protecting kidney and improving kidney function.
Description
본 발명은 생강나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition containing a ginger tree extract as an active ingredient.
대표적인 성인병의 하나인 간질환은 스트레스성 만성 피로 및 대부분의 외인성 물질에 의해 간이 손상됨으로써 발병되는 질환이다. 현재 우리나라에서 간질환의 발생률은 외국에 비해 상당히 높은 편으로, 최근 간암에 의한 사망률은 세계 1위이고 만성 간질환의 경우도 그 사망률이 3번째로 조사되었다. 최근 통계청 보고에 따르면, 우리나라 40대의 경우 간질환이 가장 높은 사망원인으로 발표되었다. 국내의 간질환 중에서 가장 높은 사망률을 나타내는 것은 바이러스성 간염이지만, 서구에서는 바이러스성 간염보다는 간경화에 의한 사망이 5~10배 정도로 높게 보고되어 있다.Liver disease, one of the representative adult diseases, is a disease caused by damage to the liver by stress chronic fatigue and most exogenous substances. At present, the incidence of liver disease in Korea is considerably higher than that of foreign countries. Recently, the mortality rate of liver cancer is the world's number one, and the third case of chronic liver disease is also the third. According to a recent report by the National Statistical Office, liver disease is the leading cause of death among people in their 40s. The highest mortality rate among liver disease in Korea is viral hepatitis, but death from cirrhosis is reported to be 5 to 10 times higher in the West than viral hepatitis.
간은 인간의 신체장기 중 생체내 대사가 가장 활발하게 일어나는 장기로서, 지방 성분이 포함된 음식 또는 알콜의 과다 섭취, 바이러스의 감염, 각종 약품과 같은 유해물질, 영양부족 등 다양한 원인에 의해 급성 또는 만성의 장애가 일어나며, 지방간, 간염, 황달, 간경화, 간암 등이 야기될 수 있다. 특히 음식을 통한 과다한 지방 섭취 또는 과도한 알콜 섭취는 간 조직에 지질이 쌓이는 지방간을 유발하며, 이때 혈청 속의 GOT(glutamate-oxaloacetate transaminase), GPT (glutamate-pyruvate transaminase), γ-GTP(γ-glutamyl transpeptidase) 등이 증가하게 된다. 간은 완충능력이 큰 기관으로 질환의 초기단계에서는 잘 나타나지 않다가 상당히 악화된 후에야 질환의 증상을 보이게 된다.Liver is the most active organ of human body organs in vivo. It is caused by various causes such as excessive intake of food or alcohol containing fat ingredients, infection of virus, harmful substances such as various medicines, and malnutrition. Chronic disorders occur, and fatty liver, hepatitis, jaundice, cirrhosis, liver cancer, and the like can be caused. In particular, excessive fat intake or excessive alcohol intake leads to fatty liver in which lipids accumulate in liver tissue. ) And so on. The liver is a large buffering organ that does not show up well in the early stages of the disease, but only after it has worsened.
또한, 간은 인체에서 혈액의 저장 및 순환, 혈류량 조절과 방어 해독작용을 하며 정신적 활동과 밀접하게 관련되어 있다고 알려져 있다. 산업화에 따른 공해 물질, 유독 물질에 우리의 몸은 항상 노출되어 있어 우리의 간은 끊임없는 해독작용에 시달리고 있다. 더욱이, 심각한 것은 정신적인 스트레스로 인한 간손상이다. 정신적 휴식을 가질 경우 손상된 간세포는 복구되지만 급박한 현대사회에서는 정신적 휴식의 여유를 찾을 수 없기 때문에 정신적 스트레스, 과음, 흡연으로 간손상을 가중시켜 인체가 방어 해독작용을 하지 못해 면역체계에 이상을 가져와 다른 질병의 원인이 되기도 한다.In addition, the liver is known to be closely related to mental activity and to the blood storage and circulation, blood flow control and defense detoxification in the human body. Our bodies are always exposed to the pollutants and toxic substances of industrialization, and our liver is suffering from constant detoxification. Moreover, what is serious is liver damage from mental stress. If you have a mental rest, damaged hepatocytes will be repaired, but in a modern day, you cannot find a room for mental rest. Therefore, mental stress, heavy drinking, and smoking will cause liver damage, which will cause your body to fail to detoxify your body. It can also cause other diseases.
간경화(liver cirrhosis)는 간조직이 섬유화되어 일어나는데, 결합조직의 생성과 분해과정의 항상성이 상실된 상태로, 간 조직 내에 결합조직이 과도하게 축적, 괴사나 염증이 동반된다. 특히 근섬유아세포 형태로 전이된 간 방사상 세포 (hepatic stellate cells : HSCs)가 증식, 이동하여 과도한 결합조직을 생성함으로써 이러한 간의 섬유화 과정을 진행시키는 것으로 알려져 있다(Gressner et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 151~222, 1988). 간경화는 각종 간질환이 만성적으로 진행할 경우 공통적으로 이르는 마지막 단계로, 간혈류량 저하, 간내혈류의 단축, 대사효소의 기능저하, 혈중 단백질의 질적·양적 변화 및 담즙유량의 변화 등 전반적인 간기능이 저하된다.Liver cirrhosis is a result of fibrosis of liver tissue, a condition in which homeostasis of connective tissue production and degradation is lost. Excessive accumulation of connective tissue in the liver tissue is accompanied by necrosis or inflammation. In particular, hepatic stellate cells (HSCs) that have been metastasized to myofibroblasts are known to advance the process of fibrosis of liver by proliferating and moving to produce excess connective tissue (Gressner et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 151-222, 1988). Liver cirrhosis is the last step that is common when chronic liver disease progresses, and overall liver function decreases such as hepatic blood flow decrease, hepatic blood flow decrease, metabolic enzyme function decrease, blood protein qualitative and quantitative change and bile flow change. do.
간독성을 일으키는 유발물질에는 사염화탄소(carbon tetrachloride; CCl4), D-갈락토스아민, 지질다당류(lipopolysaccharide; LPS), 브로모벤젠 등이 있는데, 사염화탄소는 간세포의 과산화 지질반응을 일으켜 간독성을 나타내는 것으로 알려져 있다(Recknagel et al., Pharmacol. Rev. 19:145-208, 1967; Alpers et al., Mol. Pharmacol. 4:566-573, 1968; Slater T. F., Biochem. J. 222 : 1~15, 1994). 간독성을 일으키는 사염화탄소는 간독성 보호작용을 검정하기 위해서 간세포 배양, 간 조직 배양 및 마우스나 랫트에 직접 투여하여 인위적으로 간독성을 일으키는 물질이다. 사염화탄소는 복합적인 기능을 하는 시토크롬(cytochrome) P450과 같은 대사효소에 의해 소포체 내에서 매우 반응성이 강한 자유 라디칼인 CCl3·의 분자구조로 전환되면서 강한 간독성 효과를 나타낸다. 자유 라디칼인 CCl3·은 알콜에 의해 축적된 간 중성지방이나 막 인지질에 있는 지방산의 산화를 유발시켜 지질의 산패가 시작되고 산소와 결합한 후 과산화 지질반응을 통해 유기 과산화물을 형성한다. 과산화 지질반응을 통하여 간장에 지방이 축적되고 단백질 합성능력이 감소되며, 글리코겐이 분해되고 혈관내의 세포질 효소들이 파괴되어 간조직의 괴사가 일어나게 된다(Chang I. M., et al., Drug and chemical toxicology 6, 443-453, 1983). 이러한 자유 라디칼은 골지체(Golgi apparatus)에 손상을 주어 세포로부터 단백질 방출에 악영향을 끼침으로서 간 뿐만 아니라 신장에도 손상을 주는 것으로 알려져 있다.Hepatotoxic agents include carbon tetrachloride (CCl 4 ), D-galactosamine, lipopolysaccharide (LPS), and bromobenzene. (Recknagel et al., Pharmacol. Rev. 19: 145-208, 1967; Alpers et al., Mol. Pharmacol. 4: 566-573, 1968; Slater TF, Biochem. J. 222: 1-15, 1994) . Carbon tetrachloride, which causes hepatotoxicity, is an agent that artificially causes hepatotoxicity by directly administering to hepatocyte culture, liver tissue culture, and mouse or rat to test for hepatotoxicity protection. Carbon tetrachloride has a strong hepatotoxic effect by converting into a molecular structure of CCl 3 ·, a highly reactive free radical in the endoplasmic reticulum by metabolic enzymes such as cytochrome P450, which has a complex function. CCl 3 ·, a free radical, causes oxidation of fatty acids in hepatic triglycerides or membrane phospholipids accumulated by alcohols, leading to rancidity of lipids, binding to oxygen, and forming organic peroxides through lipid peroxide reactions. Lipid peroxidation leads to the accumulation of fat in the liver, reduced protein synthesis, glycogen breakdown and the destruction of cytoplasmic enzymes in blood vessels, resulting in necrosis of liver tissue (Chang IM, et al., Drug and chemical toxicology 6, 443-453, 1983). These free radicals are known to damage the Golgi apparatus and thus damage the kidneys as well as the liver by adversely affecting protein release from cells.
또한, 지질과산화를 억제 또는 방지할 수 있는 기능인 항산화 효과는 간보호 효과 및 항염증 작용이 있다고 보고되어 있어, 항산화 물질(antioxidant compound)은 반응성 산소중간생성물(reactive oxygen intermediate)에 의한 공격에 대항해서 간과 간세포 보호의 목적으로 사용되고 있다.In addition, the antioxidant effect, which is a function that inhibits or prevents lipid peroxidation, has been reported to have a hepatoprotective effect and an anti-inflammatory action, and therefore, an antioxidant compound is overlooked in response to an attack by a reactive oxygen intermediate. It is used for the purpose of protecting hepatocytes.
천연물에서 추출된 플라보노이드, 퀘르세틴(quercetin), 실리마린 (silymarin) 또는 비타민 E와 같은 항산화제는 지질과산화와 간섬유화에 효과가 있는 물질로 보고되고 있으며, N-아세틸시스테인(N-acetylcysteine; NAC)은 항산화 활성을 통해 간섬유화의 초기단계에서 간섬유화와 산화적 스트레스(oxidative stress)를 저해한다고 알려져 있다. 또한 Picrorhiza Kurroa(kutkin)은 지질과산화와 자유라디칼에 의한 손상을 감소시켜 간보호, 항섬유화 효과 뿐만 아니라 간보호 효과를 도와주는 항산화 효과가 있는 천연물로 보고되어 있다.Antioxidants such as flavonoids, quercetin, silymarin or vitamin E extracted from natural products have been reported to be effective in lipid peroxidation and liver fibrosis. N-acetylcysteine (NAC) Antioxidant activity is known to inhibit hepatic fibrosis and oxidative stress in the early stages of hepatic fibrosis. Picrorhiza Kurroa (kutkin) is also reported to be a natural product with antioxidant effects that help to protect liver and anti-fibrotic as well as hepatoprotective effect by reducing damage caused by lipid peroxidation and free radicals.
현재 일반적으로 이용되고 있는 간질환의 치료방법은 크게 식이요법과 약제요법으로 구분되고 있으며, 대부분의 경우에 이 두가지 방법을 병용하고 있다. 간질환에 대한 약제요법에서는 간질환의 발병원인 및 종류에 따라 다양한 작용기전을 갖는 약제들이 이용될 수 있는데, 예를 들어 우루소데옥시콜린산(ursodeoxycholic acid), 실리마린(silymarin; Biotech. Therapeutics, 4, 263-270, 1993), DDB (biphenyl dimethyl dicarboxylate; Biochem. Biophy. Res. Comm., 103, 1131-1137, 1981), 글루타치온(glutathione), 글리시리진(glycyrrhizin) 등과 같은 간세포 재생촉진제 및 간기능 보조제, 아시클로바(acyclovir)와 같은 항바이러스제, 코르티코스테로이드(corticosteroid), 6-메르캅토퓨린(6-mercaptopurine, 6-MP), 아자치오프린(azathioprine) 등과 같은 면역억제제 등의 약제가 일반적으로 사용되고 있다. 그러나 간질환은 한가지 원인에 의해서만 발생되는 것이 아니고 여러 요인의 복합적인 작용에 의해 발병하기 때문에, 한가지 작용기전을 갖는 약제에 의한 것만으로는 모든 간질환에 대해 충분하게 만족스러운 높은 치료효과를 기대할 수는 없다. 또한 현재 사용되고 있는 공지의 간질환 치료약은 급격한 작용이 발생한다거나 대량 또는 장기간 투여 시에는 부작용이 나타나는 단점이 있다.Currently, the commonly used treatment methods for liver disease are largely divided into diet and pharmaceutical therapy, and in most cases, these two methods are used in combination. In the therapy for liver disease, drugs with various mechanisms of action may be used depending on the cause and type of liver disease, for example, ursodeoxycholic acid, silymarin (Silymarin; Biotech. Therapeutics , 4, 263-270, 1993), DDB (biphenyl dimethyl dicarboxylate; Biochem. Biophy.Res. Comm. , 103, 1131-1137, 1981), hepatocellular rejuvenating agents such as glutathione, glycyrrhizin and liver function Pharmaceutical agents such as adjuvants, antiviral agents such as acyclovir, immunosuppressants such as corticosteroids, 6-mercaptopurine (6-MP), azathioprine and the like are commonly used. have. However, since liver disease is not caused by only one cause but is caused by the complex action of several factors, it is possible to expect a high enough therapeutic effect for all liver diseases by using drugs with only one mechanism of action. There is no. In addition, the known currently used liver disease treatment drug has a disadvantage in that a sudden action occurs or when a large amount or long-term administration occurs.
한편, 신장은 몸 속의 물(체액)의 양과 이온 농도를 적절하게 조절하여, 노폐물(요소, 요산, 크레아티닌 등)을 소변으로 내보내고, 독성 물질이나 약물, 그리고 대사산물은 독을 없앤 뒤 배설시키는 작용을 한다. 조직에서 지질과산화의 분해산물인 말론디알데하이드(malonedialdehyde; MDA)와 4-하이드록시논에날(4-hydroxynonenal; HNE)은 세포손상의 지표로 알려져 있으며, 지질과산화물을 촉매하는 슈퍼옥사이드 디스무타제(superoxide dismutase)는 세포손상을 회복시키는데 관여한다고 보고되어 있다(Slater TF. Biochem. J., 222, 1-15, 1994; Esterbauer H, Schauer RJ, Zollner H., 1994; Free Radical Biology & Medicine 11, 81-128, 1992). 알칼린 포스파타제(Alkaline phosphatase; ALP)와 혈요소질소(blood urea nitrogen; BUN)는 신기능 대사의 진단 지표로 임상에서 사용되고 있다. 특히 BUN 수치의 증가는 고질소혈증 (azotemia)에 의한 사구체여과율(glomerular filtration rate ; GFR)의 감소로 나타난다. 참고로 신전성(prerenal) 고질소혈증은 울혈성 심부전(congestive heart failure), 쇼크, 과소혈증(hypovolemia) 및 출혈 등 신장에 저관류상태로 인해 신장의 손상없이 기능저하가 초래되는 것이며, 신후성(postrenal) 고질소혈증은 신장하부에서 소변의 흐름이 막히는 경우 생기나 그 원인이 교정되면 회복이 가능하다. 고질소혈증이 여러 가지 임상증상, 증후 및 생화학적 이상을 동반하면 요독증 (uremia)이라고 한다. 따라서 요독증은 단순한 생화학적 이상이 아닌 임상증후군이며 신장의 배설기능의 이상 뿐 아니라 대사성, 내분비기능장애, 위장관계, 신경근육계 및 심맥관계에도 장애가 초래된다. 신장 기능의 이상으로 발병되는 질병은 급성 신우신염(Acute pyelonephritis), 만성 신우신염(chronic pyelonephritis), 신장 결핵(Renal tuberculosis), 요로감염증(UTI), 요로결석(Urinary stone), 신장암 (Renal cell cancer) 등이 있다.On the other hand, the kidney regulates the amount of water (body fluid) and ions in the body properly to release waste products (urea, uric acid, creatinine, etc.) into urine, and toxins, drugs, and metabolites detoxify after excretion. Do it. Malondialdehyde (MDA) and 4-hydroxynonenal (HNE), the breakdown products of lipid peroxidation in tissues, are known as indicators of cell damage and are superoxide dismutases that catalyze lipid peroxides. (superoxide dismutase) has been reported to be involved in repairing cell damage (Slater TF. Biochem. J., 222, 1-15, 1994; Esterbauer H, Schauer RJ, Zollner H., 1994; Free Radical Biology & Medicine 11 , 81-128, 1992). Alkaline phosphatase (ALP) and blood urea nitrogen (BUN) are used in clinical practice as diagnostic indicators of renal metabolism. In particular, an increase in BUN levels is indicated by a decrease in glomerular filtration rate (GFR) due to azotemia. For reference, prerenal hypertension is a result of hypoperfusion in the kidney, such as congestive heart failure, shock, hypovolemia, and bleeding. Postrenal hypertension occurs when the flow of urine is blocked in the lower kidney, but can be recovered if the cause is corrected. Hypertension is called uremia if it is accompanied by various clinical symptoms, symptoms and biochemical abnormalities. Thus, uremia is not just a biochemical abnormality, but a clinical syndrome, which causes not only abnormal renal excretion but also metabolic, endocrine dysfunction, gastrointestinal, neuromuscular, and cardiovascular events. Diseases caused by abnormal kidney function include acute pyelonephritis, chronic pyelonephritis, renal tuberculosis, urinary tract infections (UTI), urinary stones, and kidney cancer (Renal cell). cancer).
한편, 생강나무(Lindera obstiloba)는 녹나무과(Lauraceae)에 속하는 낙엽활엽수 교목으로 우리 나라를 포함하여 일본, 중국, 만주 등지에 분포한다. 생강나무의 꽃, 잎 줄기가 독특한 향기를 발하는 특징이 있으므로, 그 줄기는 약용으로 사용되며 항균 효과가 알려져 있다. 또한 새순은 차의 원료로 사용되고 있다.Meanwhile, the ginger tree (Lindera obstiloba) is a deciduous broad-leaved tree belonging to the family Lauraceae, and is distributed in Japan, China, and Manchuria including Korea. Ginger tree flower and leaf stem has a characteristic scent, so the stem is used for medicinal and antibacterial effect is known. In addition, sprout is used as raw material of tea.
이에 본 발명자들은 여러 가지 작용기전을 가지고 있으며, 독성이 적은 약물을 천연물에서 찾던 중, 생강나무 추출물에서 항산화, 항섬유화, 간 기능 개선 뿐만 아니라 신장 보호 및 신장 기능 개선작용이 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.The present inventors have a variety of mechanisms of action, and while looking for drugs with low toxicity in natural products, it was confirmed that the ginger extract has antioxidant activity, anti-fibrosis, liver function as well as kidney protection and kidney function improvement effect and the present invention Was completed.
본 발명은 생강나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 제공하고자 한다. The present invention is to provide a composition containing a ginger tree extract as an active ingredient.
본 발명은 생강나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 제공한다.The present invention provides a composition containing a ginger tree extract as an active ingredient.
본 발명의 조성물은 간 기능 개선용 조성물과 신장 기능 개선용 조성물을 포함한다.The composition of the present invention includes a composition for improving liver function and a composition for improving kidney function.
이하, 본 발명에 대해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명의 조성물에 포함되는 생강나무의 추출방법은 다음과 같다.Extracting method of ginger tree included in the composition of the present invention is as follows.
생강나무를 물로 깨끗이 세척한 후, 그늘에서 건조시킨다. 건조한 생강나무를 환류추출기에 넣고, 여기에 생수를 넣고 100℃에서 90분간 가열하여 열수 추출한다. 상기 열수 추출액을 뜨거울때 여과지로 감압 여과한 후, 상기 여과액을 진공증발기를 이용하여 농축한다. 장기간 사용시에는 동결건조기를 이용하여 건조한다. 본 발명에서는 생강나무의 줄기, 꽃, 잎, 종자 등을 모두 사용할 수 있다.Wash the ginger tree with water and dry it in the shade. The dried ginger tree is put in a reflux extractor, and the bottled water is added thereto and heated at 100 ° C. for 90 minutes to extract hot water. The hot water extract was filtered under reduced pressure with a filter paper when hot, and the filtrate was concentrated using a vacuum evaporator. When using for a long time, use a freeze dryer to dry. In the present invention, all stems, flowers, leaves, seeds and the like of the ginger tree can be used.
본 발명의 생강나무 추출물은 간기능 지표인 GOT, GPT, ALP, BUN 수치가 낮게 나타나므로, 간기능 개선 효과가 우수하다. 또한, ALP, BUN 수치는 간기능 뿐 아니라 신기능 진단지표로 이용되므로 본 발명의 생강나무 추출물은 신기능 개선 효과도 우수함을 알 수 있다.Ginger tree extract of the present invention, GOT, GPT, ALP, BUN levels of liver function indicators appear low, it is excellent in liver function improving effect. In addition, since ALP and BUN levels are used as diagnostic indicators of renal function as well as liver function, the ginger extract of the present invention can be seen that the renal function is also improved.
또한, 본 발명의 생강나무 추출물은 하이드록시프롤린의 양이 간 조직에서는 낮게 나타나고 신장 조직에서는 높게 나타나므로, 항섬유화 효과 및 신장 보호 효과가 우수하다.In addition, the ginger extract of the present invention, the amount of hydroxyproline is low in the liver tissue and high in the kidney tissue, it is excellent in the antifibrotic effect and kidney protection effect.
또한, 본 발명의 생강나무 추출물은 간 조직 및 신장 조직에서 지질과산화 지표인 말론디알데하이드의 양이 낮게 나타나므로, 항산화 효과가 우수하다.In addition, the ginger extract of the present invention is low in the amount of malondialdehyde which is an indicator of lipid peroxidation in liver tissue and kidney tissue, it is excellent in antioxidant effect.
따라서, 본 발명의 조성물은 항산화, 항섬유화, 간 기능 개선 뿐만 아니라 신장 보호 및 신장 기능 개선에도 유용하게 사용될 수 있다.Therefore, the composition of the present invention can be usefully used not only for antioxidant, antifibrotic, improving liver function but also for protecting kidney and improving kidney function.
본 발명의 조성물은 상기 생강나무 추출물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.The composition of the present invention may contain one or more active ingredients exhibiting the same or similar functions in addition to the ginger tree extract.
상기 생강나무 추출물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 생강나무 추출물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 생강나무 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.The ginger tree extract can be administered orally or parenterally during clinical administration and can be used in the form of a general pharmaceutical formulation. That is, the ginger extract of the present invention may be administered in various oral and parenteral formulations during actual clinical administration, and when formulated, diluents such as fillers, extenders, binders, humectants, disintegrating agents, and surfactants are commonly used. Or using excipients. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, and capsules, and the like, which include at least one excipient in ginger extract, such as starch, calcium carbonate, sucrose, lactose and gelatin, etc. Are mixed to prepare. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium styrate talc are also used. Liquid preparations for oral administration include suspensions, solutions, emulsions and syrups, and may include various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin. have. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and suppositories. As the non-aqueous solvent and the suspension solvent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerol and gelatin may be used.
투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 생강나무 추출물의 유효용량은 150 내지 300 ㎎/㎏이고, 바람직하기로는 160 내지 200 mg/kg이며, 하루 1~6 회 투여될 수 있다.Dosage units may contain, for example, one, two, three or four times the individual dosage, or they may contain 1/2, 1/3 or 1/4 times. The individual dosage preferably contains an amount in which the effective drug is administered at one time, which usually corresponds to all, 1/2, 1/3 or 1/4 times the daily dose. The effective dose of ginger tree extract is 150 to 300 mg / kg, preferably 160 to 200 mg / kg, and may be administered 1 to 6 times a day.
본 발명의 조성물은 간 기능 개선 및 신장 기능 개선을 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The composition of the present invention can be used alone or in combination with methods using surgery, radiation therapy, hormonal therapy, chemotherapy and biological response modifiers for improving liver function and renal function.
본 발명의 조성물은 간 기능 및 신장 기능 개선을 목적으로 건강식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 생강나무 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 생강나무 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에는 본 발명의 생강나무 추출물이 원료에 대하여 15 중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The composition of the present invention can be added to health food for the purpose of improving liver function and kidney function. When the ginger tree extract of the present invention is used as a food additive, the ginger tree extract may be added as it is or may be used together with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixed amount of the active ingredient may be suitably determined depending on the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment). In general, the ginger extract of the present invention is added in an amount of 15% by weight or less, preferably 10% by weight or less based on the raw material in the production of food or beverage. However, in the case of long-term intake for health and hygiene or health control, the amount may be below the above range, and the active ingredient may be used in an amount above the above range because there is no problem in terms of safety. .
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of food. Examples of the food to which the substance can be added include dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, various soups, drinks, tea, drinks, Alcoholic beverages and vitamin complexes, and the like and include all of the health foods in the conventional sense.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 0.01~0.04g, 바람직하게는 약 0.02~0.03g 이다.The health beverage composition of the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates, etc. as additional components, as in the general beverage. The above-mentioned natural carbohydrates are glucose, monosaccharides such as fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. As the sweetening agent, natural sweetening agents such as tautin and stevia extract, synthetic sweetening agents such as saccharin and aspartame, and the like can be used. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.04 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 ml of the composition of the present invention.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the composition of the present invention includes various nutrients, vitamins, electrolytes, flavoring agents, coloring agents, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonic acid. Carbonating agents and the like used in beverages. In addition, the composition of the present invention may contain a flesh for preparing natural fruit juice, fruit juice beverage and vegetable beverage. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not critical but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, preferred examples are provided to aid in understanding the present invention. However, the following examples are merely provided to more easily understand the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the examples.
실시예Example : 생강나무 추출물의 제조 : Preparation of Ginger Tree Extract
생강나무를 물로 깨끗이 세척한 후, 그늘에서 건조시켰다. 건조한 생강나무 줄기 10g을 환류추출기에 넣고, 1.5ℓ의 생수를 넣고 100℃에서 90분간 가열하여 열수 추출하였다.The ginger tree was washed with water and dried in the shade. 10 g of dried ginger stems were put in a reflux extractor, 1.5 liters of mineral water was added, and heated at 100 ° C. for 90 minutes to extract hot water.
상기 열수 추출액을 뜨거울때 여과지로 감압 여과하였다. 상기 여과액을 진공증발기를 이용하여 농축한 후, 동결건조기를 이용하여 건조하였다.The hot water extract was filtered under reduced pressure with a filter paper when hot. The filtrate was concentrated using a vacuum evaporator and then dried using a lyophilizer.
상기 농축액은 동물실험(2㎖/rat/day)에 사용하였다.The concentrate was used for animal experiments (2 mL / rat / day).
실험예 1Experimental Example 1 : 랫트에서 사염화탄소의 장기투여로 유발된 간 손상 및 신장 손상에 대한 항산화, 항섬유화, 간 기능 개선 및 신장 보호, 신장 기능 개선 효과 : Antioxidant, Antifibrotic, Liver Function and Kidney Protection, and Kidney Function Effects on Liver and Kidney Damage Induced by Long-term Administration of Carbon Tetrachloride in Rats
본 발명의 생강나무 추출물의 간 손상 및 신장 손상에 대한 항산화, 항섬유화, 간기능 개선 및 신장 보호, 신장 기능 개선 효과를 알아보기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.In order to examine the effects of antioxidant, antifibrotic, liver function and kidney protection, and kidney function improvement against liver damage and kidney damage of the ginger tree extract of the present invention, the following experiments were performed.
1. 실험동물1. Experimental Animal
실험동물은 체중이 약 180~210g인 12주령 Sprague-Dawley 랫트(다물사이언스, 오산, 한국)를 사용하였고, 사육환경은 온도 23±2℃, 상대습도 60±10%를 유지하였다. 사료(퓨리나 사료)와 식수는 자유로이 공급하였고, 밤과 낮을 구분하여 공급하였다.The experimental animals used 12-week-old Sprague-Dawley rats (multi-body science, Osan, Korea) with a weight of about 180 ~ 210g, and kept a breeding environment of 23 ± 2 ℃ and 60 ± 10% relative humidity. Feed (purina feed) and drinking water were supplied freely, and night and day.
2주간 실험실 환경에 적응시킨 실험동물을 ① 정상군, ② CCl4 투여군, ③ CCl4 + 생강나무 추출물 투여군의 3개군으로 나누었으며, 각 군당 10마리씩 배정하였다.The experimental animals adapted to the laboratory environment for 2 weeks were divided into three groups: ① normal group, ② CCl 4 administration group, ③ CCl 4 + ginger tree extract administration group, and 10 animals were assigned to each group.
2. 간섬유화(경화) 및 신장 손상 유도2. Induced liver fibrosis (hardening) and kidney damage
정상군을 제외한 나머지 실험군의 랫트에 올리브 오일과 CCl4의 혼합액 1㎖/rat/day을 일주일에 3회씩 4주간 투여하여 간섬유화(경화) 및 신장 손상을 유도하였다.Liver fibrosis (curing) and kidney damage were induced in rats of the experimental group except the normal group by administering a mixture of olive oil and CCl 4 1 ml / rat / day three times a week for 4 weeks.
CCl4 투여군에는 증류수를, CCl4 + 생강나무 추출물 투여군에는 상기 실시예에서 제조한 생강나무 추출물을 각각 2㎖/rat/day을 경구투여하였다.CCl 4 administration group was administered distilled water, CCl 4 + ginger tree extract administration group was orally administered 2ml / rat / day of the ginger tree extract prepared in the above example.
정상군을 포함하여 각 군의 랫트의 체중을 측정한 뒤에 에테르로 마취시키고, 심장천자(heart puncture)에 의해 심장에서 채혈하여 2시간 이상 실온에 방치한 후 3000rpm에서 10분간 원심분리하여 혈청을 얻고 -20℃에 보관하였다. 보관된 혈청은 혈청생화학적 검사인 트랜스아미나제(GOT 및 GPT), 알칼리 포스파타제 및 BUN 값을 측정하는데 사용하였다.The rats of each group, including the normal group, were weighed and anesthetized with ether, collected from the heart by heart puncture, left at room temperature for at least 2 hours, and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes to obtain serum. Store at -20 ° C. The stored serum was used to measure transaminase (GOT and GPT), alkaline phosphatase and BUN values, serobiochemical tests.
또한, 간섬유화(경화) 및 신장 손상이 유도된 랫트의 간과 신장을 적출하여 인산염 완충액(pH 7.0)으로 세척한 후 무게를 측정하였다. 간과 신장 조직의 일부는 -75℃에 보관하여 하이드록시프롤린(hydroxyproline), 말론디알데하이드 (malondialdehyde; MDA) 측정에 사용하였다.In addition, livers and kidneys of rats induced liver fibrosis (curing) and kidney damage were extracted, washed with phosphate buffer (pH 7.0), and weighed. Some of the liver and kidney tissues were stored at -75 ° C and used for the measurement of hydroxyproline and malondialdehyde (MDA).
체중변화는 매주마다 측정하였고, 귀, 꼬리, 발에서 황달의 유무를 확인하고 도살시 간 및 신장의 무게변화를 관찰하였다.Changes in body weight were measured every week, and the presence of jaundice in the ears, tail, and feet and the weight changes in slaughter time and height were observed.
실험성적은 평균치±표준편차로 나타내었으며, 대조군과 실험군과의 평균의 차이를 검정할 때에는 Student's t-test로 검정하여 P값이 0.005 미만일 때 통계적으로 유의한 차이가 있는 것으로 판정하였다.The experimental results were expressed as mean ± standard deviation, and when testing the difference between the control group and the experimental group, the student's t- test was used to determine statistically significant difference when the P value was less than 0.005.
결과는 표 1에 나타내었다.The results are shown in Table 1.
표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 생강나무 추출물 투여군의 체중과 간 무게 변화는 대조군에 비하여 8.5% 낮게 나타났다. 또한, 체중과 신장 무게 변화도 대조군에 비하여 낮게 나타났다.As shown in Table 1, the weight and liver weight of the ginger tree extract-administered group of the present invention was 8.5% lower than the control group. In addition, the weight and height changes were also lower than those of the control group.
3. 혈청생화학적 검사3. Serum Biochemical Test
1) GOT(AST) 측정(EMBIEL kit 사용)1) GOT (AST) measurement (using EMBIEL kit)
2개의 펠콘 시험관(falcon tube)에 AST 기질액 500㎕를 넣고 37℃에서 3~5분간 가온하였다. 한쪽 시험관에는 표준액을 가하여 희석시키고, 다른쪽 시험관에는 혈청시료 100㎕를 가한 후에 37℃에서 60분간 반응시켰다. 각 시험관에 정제수 100㎕와 발색액(2,3-디니트로페닐하이드라진) 500㎕를 가하고, 실온에서 20분동안 방치하였다. 각 시험관에 0.4 N NaOH 5㎖를 가하고 실온에서 10분간 다시 반응시킨 후, 505㎚에서 흡광도를 측정하였다.500 μl of AST substrate solution was added to two falcon tubes and warmed at 37 ° C. for 3-5 minutes. One test tube was diluted with a standard solution, and the other test tube was added with 100 µl of serum sample and reacted at 37 ° C. for 60 minutes. 100 µl of purified water and 500 µl of a color developing solution (2,3-dinitrophenylhydrazine) were added to each test tube, and allowed to stand at room temperature for 20 minutes. 5 ml of 0.4 N NaOH was added to each test tube and reacted again at room temperature for 10 minutes, and then the absorbance was measured at 505 nm.
2) GPT(ALT) 측정(EMBIEL kit 사용)2) GPT (ALT) measurement (using EMBIEL kit)
2개의 펠콘 시험관에 ALT 기질액 150㎕을 넣고 37℃에서 4분간 가온하였다. 한쪽 시험관에는 표준액을 가하여 희석시키고, 다른쪽 시험관에는 혈청시료 100㎕를 가하고 37℃에서 30분간 반응시켰다. 각 시험관에 정제수 100㎕와 발색액(2,3-디이트로페닐하이드라진) 500㎕를 가하고, 실온에서 20분동안 방치하였다. 각 시험관에 0.4 N NaOH 1.5㎖를 가하고 실온에서 10분간 다시 반응시킨 후, 505㎚에서 흡광도를 측정하였다.150 μl of ALT substrate solution was added to two Pelcon test tubes and warmed at 37 ° C. for 4 minutes. One test tube was diluted with a standard solution, and 100 μl of serum sample was added to the other test tube and allowed to react at 37 ° C. for 30 minutes. 100 µl of purified water and 500 µl of a color developing solution (2,3-ditrophenylhydrazine) were added to each test tube, and the mixture was left at room temperature for 20 minutes. 1.5 mL of 0.4 N NaOH was added to each test tube and reacted again at room temperature for 10 minutes, and then the absorbance was measured at 505 nm.
3) ALP(Alkakine phosphatase) 측정3) Alkakine phosphatase (ALP) measurement
3개의 시험관에 ALP 기질완충액(페닐인산-2-나트륨) 2.0㎖를 넣고 37℃에서 3~5분간 가온하였다. 각 시험관에 혈청시료 50㎕, 정제수 50㎕, 표준액 50㎕를 각각 가하여 혼합하고 37℃에서 15분간 가온하였다. 각 시험관에 정색시약 2.0㎖를 넣고 실온에서 10분간 방치한 후, 60분 이내에 570㎚에서 흡광도를 측정하였다.2.0 ml of ALP substrate buffer (-2-sodium phenyl phosphate) was added to three test tubes and warmed at 37 ° C. for 3-5 minutes. 50 μl of serum sample, 50 μl of purified water, and 50 μl of standard solution were added to each test tube, and the mixture was warmed at 37 ° C. for 15 minutes. 2.0 ml of color reagent was added to each test tube and allowed to stand at room temperature for 10 minutes, and then absorbance was measured at 570 nm within 60 minutes.
4) BUN(Blood urea nitrogen) 측정4) Measurement of Blood urea nitrogen (BUN)
3개의 시험관에 혈청시료 20㎕, 정제수 20㎕, 표준액 20㎕를 각각 가하고, 효소용액 2.0㎖를 각각 넣은 후 혼합하여 37℃에서 5분간 반응시켰다. 각 시험관에 정색시약 2.0㎖를 가하고 혼합하여 37℃에서 10분간 가온 후, 60분 이내에 580㎚에서 흡광도를 측정하였다.20 μl of serum sample, 20 μl of purified water, and 20 μl of standard solution were added to three test tubes, 2.0 ml of enzyme solution was added to each of the tubes, and the mixture was reacted at 37 ° C. for 5 minutes. 2.0 ml of color reagents were added to each test tube, mixed and warmed at 37 ° C. for 10 minutes, and then absorbance was measured at 580 nm within 60 minutes.
결과는 표 2에 나타내었다.The results are shown in Table 2.
* : p<0.05*: p <0.05
표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 생강나무 추출물은 GOT, GPT, ALP, BUN 수치가 대조군보다 낮게 나타났으며, 특히 ALP 수치는 대조군보다 13.3% 유의성 있게 낮게 나타났다.As shown in Table 2, the Ginger extract of the present invention showed lower GOT, GPT, ALP, BUN levels than the control group, in particular ALP levels were significantly lower than the control group by 13.3%.
따라서, 본 발명의 생강나무 추출물은 간 보호 효과가 우수함을 알 수 있다.Therefore, the ginger tree extract of the present invention can be seen that the liver protection effect is excellent.
또한, ALP, BUN 수치는 간기능 뿐 아니라 신기능 진단지표로 이용되므로 본 발명의 생강나무 추출물은 신기능 개선 효과도 우수함을 알 수 있다.In addition, since ALP and BUN levels are used as diagnostic indicators of renal function as well as liver function, the ginger extract of the present invention can be seen that the renal function is also improved.
4. 하이드록시프롤린(Hydroxyproline: hyp) 양 측정4. Determination of the amount of hydroxyproline (hyp)
1) 시약의 조제1) Preparation of Reagent
① 아세테이트 시트레이트 완충액(Acetate citrate buffer)Acetate citrate buffer
소디움 아세테이트 트리하이드레이트(sodium acetate trihydrate) 50g, 트리소디움 시트레이트(trisodium citrate) 37.5g, 시트르산 모노하이드레이트(citric acid monohydrate) 5.5g, 이소프로판올 395㎖에 증류수를 가하여 전체 1ℓ가 되게 만든 후, pH를 6.0으로 만들어서 4℃에 보관하여 사용하였다.50 g of sodium acetate trihydrate, 37.5 g of trisodium citrate, 5.5 g of citric acid monohydrate, and 395 ml of isopropanol were added to distilled water to make 1 L of total, followed by pH 6.0 Made and stored at 4 ℃ was used.
② 클로라민-T(Chloramine-T) 용액② Chloramine-T Solution
클로라민-T 84㎎을 아세테이트 시트레이트 완충액 10㎖에 용해시켜서 사용하였다.84 mg of chloramine-T was used dissolved in 10 ml of acetate citrate buffer.
③ 에리리치 시약(Ehrilich's reagents)③ Ehrilich's reagents
p-디메틸아미노벤즈알데하이드(p-Dimethylaminobenzaldehyde) 10g과 60% 퍼클로릭산(perchloric acid) 11㎖를 혼합하여 저장용액을 만들었다. 저장용액 3㎖을 취한 다음 이소프로판올 8.0㎖와 혼합하여 사용하였다. 에리리치 시약은 사용 직전에 조제하여 사용하였으며, 저장용액은 차광하여 4℃에 보관하였다.10 g of p-dimethylaminobenzaldehyde and 11 ml of 60% perchloric acid were mixed to make a stock solution. 3 ml of stock solution was taken and mixed with 8.0 ml of isopropanol. The eririch reagent was prepared and used immediately before use, and the stock solution was shielded and stored at 4 ° C.
2) 하이드록시프롤린 양 측정2) Determination of the amount of hydroxyproline
냉동시킨 간 조직(또는 신장 조직) 0.2g을 10㎖ 유리병에 평량한 후, 6N HCl 4㎖를 넣고 균질기(homogenizer)로 균질화시켜서 110℃에서 10~24시간 건조 오븐에서 가수분해시킨 후, 와트만 여과지를 사용하여 여과시켰다. 이때 0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0㎍/50㎕의 트랜스-하이드록시프롤린(trans-hydroxyproline) 6N HCl로 희석시킨 표준용액을 시료와 같이 110℃에서 12~14시간 가수분해시켰다. 각 시료와 표준 용액을 50㎕ 유리병에 취하여 완전히 건조시켜서 염산을 제거하였다. 그 후에 50% 이소프로판올 1.2㎖를 넣어 침전물을 용해시키고, 클로라민-T 용액 200㎕를 가하여 10분간 실온에서 반응시킨 후, 1.2㎖의 에리리치 반응시약을 넣었다. 50℃에서 90분간 발색시키고 상온에서 냉각시킨 후, 558㎚에서 분광광도계를 사용하여 흡광도를 측정하였다.After weighing 0.2 g of frozen liver tissue (or kidney tissue) in a 10 ml glass bottle, 4 ml of 6N HCl was added, homogenized with a homogenizer and hydrolyzed in a drying oven at 110 ° C. for 10 to 24 hours. It was filtered using Whatman filter paper. At this time, the standard solution diluted with 0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 μg / 50 μl of trans-hydroxyproline 6N HCl was hydrolyzed at 110 ° C. for 12 to 14 hours as in the sample. Each sample and standard solution were taken in a 50 μl glass bottle and completely dried to remove hydrochloric acid. Thereafter, 1.2 ml of 50% isopropanol was added to dissolve the precipitate, 200 µl of chloramine-T solution was added thereto, and the mixture was reacted at room temperature for 10 minutes. After 90 minutes of development at 50 ° C. and cooling at room temperature, the absorbance was measured at 558 nm using a spectrophotometer.
간 조직(또는 신장 조직) 중 하이드록시프롤린의 농도는 하기식에 의하여 계산하였다.The concentration of hydroxyproline in liver tissue (or kidney tissue) was calculated by the following formula.
C[간 조직(또는 신장 조직) 0.2g의 하이드록시프롤린의 농도] = C [concentration of hydroxyproline of 0.2 g of liver tissue (or kidney tissue)] =
[HA(시료의 흡광도) / SA(1.0㎍/50㎕의 트랜스-하이드록시프롤린(trans-hydroxyproline) 6N HCl로 희석시킨 표준용액의 흡광도)] × 80[HA (absorbance of sample) / SA (absorbance of standard solution diluted with 1.0 μg / 50 μl of trans-hydroxyproline 6N HCl)] × 80
C ×5 = 하이드록시프롤린 양 / g 간 조직(또는 신장 조직) C × 5 = amount of hydroxyproline / g liver tissue (or kidney tissue)
결과는 표 3에 나타내었다.The results are shown in Table 3.
* : p<0.05, ** : p<0.005*: p <0.05, **: p <0.005
표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 생강나무 추출물 투여군의 하이드록시프롤린의 양은, 간 조직에서는 대조군보다 18% 유의성 있게 낮게 나타났으며, 신장 조직에서는 대조군보다 10% 유의성 있게 높게 나타났다.As shown in Table 3, the amount of hydroxyproline of the ginger tree extract-administered group of the present invention was significantly lower in liver tissue than 18% and significantly higher in kidney tissue than 10%.
따라서, 본 발명의 생강나무 추출물은 항섬유화 효과 및 신장 보호 효과가 우수함을 알 수 있다.Therefore, the ginger tree extract of the present invention can be seen that the antifibrotic effect and kidney protection effect is excellent.
5. MDA(Malondialdehyde) 측정5. Measurement of MDA (Malondialdehyde)
균질화 시킨 조직 시료[1.15% KCl 1.8㎖에 있는 0.2g 간조직(또는 신장 조직)]와 희석한 표준물질(0, 4, 8, 16, 32 n㏖/200㎕ 테트라메톡시프로판) 200㎕를 펠콘 시험관에 가하였다. 시료와 희석시킨 표준 용액 200㎕에 0.2% SDS 100㎕를 넣고 혼합하여 실온에서 10분간 반응시켰다. 그리고 20% 아세트산 750㎕와 0.8% 티오바비츄레이트(thiobarbiturate) 750㎕를 가하고 혼합하였다. 그 후에 95℃에서 30분간 반응시키고 얼음에 넣어 냉각시겼다. 완전히 냉각된 것을 확인한 후에 n-부탄올 2㎖를 가하고 원심분리하여 상층액의 흡광도를 532㎚에서 분광광도계를 사용하여 측정하였다.Homogenized tissue sample (0.2 g liver tissue (or kidney tissue) in 1.8 ml of 1.15% KCl) and 200 µl of diluted standard (0, 4, 8, 16, 32 nmol / 200 µl tetramethoxypropane) It was added to a Pelcon test tube. 100 µl of 0.2% SDS was added to 200 µl of the diluted standard solution and the mixture was reacted at room temperature for 10 minutes. 750 µl of 20% acetic acid and 750 µl of 0.8% thiobarbiturate were added and mixed. Thereafter, the mixture was reacted at 95 ° C. for 30 minutes and cooled in ice. After confirming complete cooling, 2 ml of n-butanol was added and centrifuged to measure the absorbance of the supernatant using a spectrophotometer at 532 nm.
혈청과 조직중 MDA 농도는 다음과 같이 계산하였다.Serum and tissue MDA concentrations were calculated as follows.
C[간 조직(또는 신장 조직) 0.2g(또는 혈청 200㎕)의 말론디알데하이드의 농도] = [HA(시료의 흡광도) / SA(표준용액의 흡광도(8μ㏖/1.15% KCl 200㎕)] × 80C [concentration of malondialdehyde in 0.2 g of liver tissue (or kidney tissue) (or 200 μl serum)] = [HA (absorbance of sample) / SA (absorbance of standard solution (8 μmol / 1.15% KCl 200 μl)] × 80
C ×5 = 말론디알데하이드 양(μ㏖/㎖)C × 5 = malondialdehyde amount (μmol / ml)
결과는 표 4에 나타내었다.The results are shown in Table 4.
* : p<0.05*: p <0.05
표 4에 나타난 바와 같이, 본 발명의 생강나무 추출물 투여군의 말론디알데하이드의 양은, 간 조직에서는 대조군보다 21.2% 유의성 있게 낮게 나타났으며, 신장 조직에서는 대조군보다 42.3% 낮게 나타났다. 말론디알데하이드는 지질과산화의 지표이다.As shown in Table 4, the amount of malondialdehyde of the ginger tree extract-administered group of the present invention was significantly lower in liver tissue than in the control group by 21.2% and 42.3% in the kidney tissue. Malondialdehyde is an indicator of lipid peroxidation.
따라서, 본 발명의 생강나무 추출물은 항산화 및 신장 보호 효과가 우수함을 알 수 있다.Therefore, the ginger tree extract of the present invention can be seen that the antioxidant and kidney protective effect is excellent.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.Examples of preparations for the compositions of the present invention are illustrated below.
제제예 1Formulation Example 1 : 약학적 제제의 제조 : Preparation of Pharmaceutical Formulations
1. 산제의 제조1. Preparation of powder
생강나무 추출물 2gGinger Extract 2g
유당 1g1g lactose
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.The above ingredients were mixed and filled in airtight cloth to prepare a powder.
2. 정제의 제조2. Preparation of Tablets
생강나무 추출물 100㎎Ginger Tree Extract 100mg
옥수수전분 100㎎Corn Starch 100mg
유 당 100㎎Lactose 100mg
스테아린산 마그네슘 2㎎2 mg magnesium stearate
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.After mixing the above components, tablets were prepared by tableting according to a conventional method for producing tablets.
3. 캡슐제의 제조3. Preparation of Capsule
생강나무 추출물 100㎎Ginger Tree Extract 100mg
옥수수전분 100㎎Corn Starch 100mg
유 당 100㎎Lactose 100mg
스테아린산 마그네슘 2㎎2 mg magnesium stearate
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.After mixing the above components, the capsule was prepared by filling in gelatin capsules according to the conventional method for producing a capsule.
제제예 2Formulation Example 2 : 식품의 제조 : Manufacture of food
본 발명의 생강나무 추출물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다.Foods containing the ginger tree extract of the present invention were prepared as follows.
1. 조리용 양념의 제조1. Preparation of Cooking Seasonings
본 발명의 생강나무 추출물 20~95 중량%로 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.Ginger extract 20-95% by weight of the present invention was prepared for cooking spices for health promotion.
2. 토마토 케찹 및 소스의 제조2. Preparation of Tomato Ketchup and Sauce
본 발명의 생강나무 추출물 0.2~1.0 중량%를 토마토 케찹 또는 소스에 첨가하여 건강 증진용 토마토 케찹 또는 소스를 제조하였다.0.2 ~ 1.0% by weight of ginger extract of the present invention was added to tomato ketchup or sauce to prepare a tomato ketchup or sauce for health promotion.
3. 밀가루 식품의 제조3. Manufacturing of Flour Foods
본 발명의 생강나무 추출물 0.5~5.0 중량%를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.0.5 ~ 5.0% by weight of ginger tree extract of the present invention was added to the flour, using the mixture to prepare bread, cakes, cookies, crackers and noodles to prepare a food for health promotion.
4. 스프 및 육즙(gravies)의 제조4. Preparation of soups and gravy
본 발명의 생강나무 추출물 0.1~5.0 중량%를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.Ginger tree extract of the present invention was added 0.1 ~ 5.0% by weight to soup and gravy to prepare a health-promoting meat products, soup of noodles and gravy.
5. 그라운드 비프(ground beef)의 제조5. Preparation of Ground Beef
본 발명의 생강나무 추출물 10 중량%를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.10% by weight of the ginger tree extract of the present invention was added to the ground beef to prepare a ground beef for health promotion.
6. 유제품(dairy products)의 제조6. Manufacture of Dairy Products
본 발명의 생강나무 추출물 5~10 중량%를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.5-10% by weight of ginger tree extract of the present invention was added to milk, and the milk was used to prepare various dairy products such as butter and ice cream.
7. 선식의 제조7. Manufacture of wire
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60메쉬의 분말로 제조하였다.Brown rice, barley, glutinous rice, and yulmu were alphad by a known method, and then dried and roasted to prepare a powder having a particle size of 60 mesh using a grinder.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60메쉬의 분말로 제조하였다.Black beans, black sesame seeds, and perilla were also steamed and dried by a known method, and then ground to a powder having a particle size of 60 mesh.
본 발명의 생강나무 추출물을 진공 농축기에서 감압·농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.The ginger tree extract of the present invention was decompressed and concentrated in a vacuum concentrator, and the dried product obtained by drying with a spray and a hot air dryer was pulverized with a particle size of 60 mesh to obtain a dry powder.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 생강나무 추출물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.It was prepared by combining the dry powder of the grains, seeds and ginger tree extract prepared in the following ratio.
곡물류(현미 30중량%, 율무 15중량%, 보리 20중량%),Cereals (30% by weight brown rice, 15% by weight radish, 20% by weight barley),
종실류(들깨 7중량%, 검정콩 8중량%, 검정깨 7중량%),Seeds (7% by weight perilla, 8% by weight black beans, 7% by weight black sesame),
생강나무 추출물의 건조분말(3 중량%),Dry powder of ginger tree extract (3% by weight),
영지(0.5중량%),Ganoderma lucidum (0.5% by weight),
지황(0.5중량%)Foxglove (0.5 wt%)
제제예 3Formulation Example 3 : 음료의 제조 : Preparation of Beverages
1. 탄산음료의 제조1. Preparation of Carbonated Drinks
설탕 5~10%, 구연산 0.05~0.3%, 카라멜 0.005~0.02%, 비타민 C 0.1~1%의 첨가물을 혼합하고, 여기에 79~94%의 정제수를 섞어서 시럽을 만들고, 상기 시럽을 85~98℃에서 20~180초간 살균하여 냉각수와 1:4의 비율로 혼합한 다음 탄산가스를 0.5~0.82%를 주입하여 본 발명의 생강나무 추출물을 함유하는 탄산음료를 제조하였다.5-10% of sugar, 0.05-0.3% citric acid, 0.005-0.02% caramel, 0.1-1% of vitamin C are mixed, and 79-94% purified water is mixed to make syrup, and the syrup is 85-98 Sterilizing at 20 ℃ for 180 seconds, and then mixed with cooling water in a ratio of 1: 4 and then injected with 0.5 ~ 0.82% of carbon dioxide gas to prepare a carbonated beverage containing the ginger tree extract of the present invention.
2. 건강음료의 제조2. Manufacture of health drinks
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 생강나무 추출물을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.Instant sterilization by homogeneously mixing subsidiary materials such as liquid fructose (0.5%), oligosaccharide (2%), sugar (2%), salt (0.5%), water (75%) and ginger tree extract , Packed in a small packaging container such as plastic bottles to prepare a healthy beverage.
3. 야채쥬스의 제조3. Preparation of Vegetable Juice
본 발명의 생강나무 추출물 5g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.5 g of ginger extract of the present invention was added to 1,000 ml of tomato or carrot juice to prepare vegetable juice for health promotion.
4. 과일쥬스의 제조4. Preparation of Fruit Juice
본 발명의 생강나무 추출물 1g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.1 g ginger extract of the present invention was added to 1,000 ml of apple or grape juice to prepare fruit juice for health promotion.
본 발명의 생강나무 추출물은 간기능 지표인 GOT, GPT, ALP, BUN 수치가 낮게 나타나므로, 간기능 개선 효과가 우수하다. 또한, ALP, BUN 수치는 간기능 뿐 아니라 신기능 진단지표로 이용되므로 본 발명의 생강나무 추출물은 신기능 개선 효과도 우수함을 알 수 있다.Ginger tree extract of the present invention, GOT, GPT, ALP, BUN levels of liver function indicators appear low, it is excellent in liver function improving effect. In addition, since ALP and BUN levels are used as diagnostic indicators of renal function as well as liver function, the ginger extract of the present invention can be seen that the renal function is also improved.
또한, 본 발명의 생강나무 추출물은 하이드록시프롤린의 양이 간 조직에서는 낮게 나타나고 신장 조직에서는 높게 나타나므로, 항섬유화 효과 및 신장 보호 효과가 우수하다.In addition, the ginger extract of the present invention, the amount of hydroxyproline is low in the liver tissue and high in the kidney tissue, it is excellent in the antifibrotic effect and kidney protection effect.
또한, 본 발명의 생강나무 추출물은 간 조직 및 신장 조직에서 지질과산화 지표인 말론디알데하이드의 양이 낮게 나타나므로, 항산화 효과가 우수하다. In addition, the ginger extract of the present invention is low in the amount of malondialdehyde which is an indicator of lipid peroxidation in liver tissue and kidney tissue, it is excellent in antioxidant effect.
따라서, 본 발명의 조성물은 항산화, 항섬유화, 간 기능 개선 뿐만 아니라 신장 보호 및 신장 기능 개선에도 유용하게 사용될 수 있다.Therefore, the composition of the present invention can be usefully used not only for antioxidant, antifibrotic, improving liver function but also for protecting kidney and improving kidney function.
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