KR20050012053A - Mushroom culture method - Google Patents
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Abstract
Description
[발명이 속하는 기술분야][TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION]
본 발명은 버섯 배양방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 기존의 방법에 비하여 버섯 재배기간을 단축시키고, 버섯 재배수율을 향상시킬 수 있는 배양방법 및 조건에 관한 것이다.The present invention relates to a mushroom culturing method, and more particularly, to a cultivation method and conditions that can shorten the mushroom cultivation period and improve the mushroom cultivation yield as compared to the conventional method.
[종래기술][Private Technology]
담자균류에 속하는 버섯(mushroom)은 각종 유기물을 분해하여 성장하는 중요한 식품 자원이면서 약용식물이다. 버섯은 그 종류에 따라 맛과 향이 독특하며 단백질, 비타민, 및 기타 무기영양소를 많이 함유하고, 특히 최근 연구에 의하면 버섯류에 함유되어 있는 다당류인 글루칸(glucan)유도체들에 의한 항암 및 항바이러스 효과 등이 보고되어 건강식품으로 전세계적인 각광을 받고 있다.Mushrooms (mushrooms) belonging to basidiomycetes are important food resources and medicinal plants that decompose and grow various organic matters. Mushrooms have unique tastes and aromas, and contain a lot of proteins, vitamins, and other inorganic nutrients. In particular, recent studies have shown that anticancer and antiviral effects caused by the glucan derivatives, the polysaccharides in mushrooms, It has been reported and attracted worldwide attention as a health food.
상황버섯은 민주름버섯목(Aphylloporales), 소나무비늘버섯과(Hymenochaetaceae), 진흙버섯속(Phellinus)에 속하며, 학술명은 목질진흙버섯(Phellinus linteus)이다. 상황버섯은 동북아시아에 주로 분포하고 있으며, 한국에서도 야생은 그리 흔하지 않아 강원도 일부 지역에서 야생하고 있고, 주로 뽕나무와 활엽수의 줄기에 자생한다. 상황버섯의 표면은 초기 가는 털로 덮혀 암갈색을 띄나 곧 탈모하여 흑갈색으로 되며, 외부 표면은 단단한 목질 조직으로 동심상의 또렷한 환구와 종횡으로 갈라진 직사각형의 균열상태를 이루고 있다. 상황버섯은 소화기계통의 질환인 위암, 식도암, 십이지장암, 결장암 및 직장암에 탁월한 효능을 가지며, 면역기능을 항진시키는 것으로 알려져 있다. 상황버섯 재배방법은 원목재배방법이 일반적이나, 균사체를 액체배양하는 방법 및 배지들이 개발되고 있다. 그 중 대한민국 공개특허 제2001-113057호에서는 상황버섯 균사체의 유가식 배양방법인, 배양중에 간헐적 또는 지속적으로 글루코스 또는 글루코스와 효모추출물을 공급하는 방법을 개시하고 있다.Situation mushrooms belong to Aphylloporales, Hymnenochaetaceae and Phellinus. The scientific name is Phellinus linteus . Situation mushrooms are mainly distributed in Northeast Asia, and wild in Korea is not so common, and it is wild in some parts of Gangwon-do, and grows on stems of mulberry and hardwoods. The surface of the situation mushroom is dark brown, covered with the initial thin hairs, but it is soon browned to blackish brown, and the outer surface is solid wood tissue, forming a clear concentric round hole and a vertically cracked rectangular crack. Situation mushroom is known to have an excellent effect on gastrointestinal cancer, esophageal cancer, duodenal cancer, colon cancer and rectal cancer, which are diseases of the digestive system, and promote immune function. Situation mushroom cultivation method is a common method of cultivating wood, but methods and media for liquid culture of mycelium have been developed. Among them, Korean Patent Laid-Open Publication No. 2001-113057 discloses a method for feeding glucose or glucose and yeast extracts intermittently or continuously during cultivation, which is a fed-batch culture method of the situation mushroom mycelium.
또한 기존에 사용되는 버섯 균사체 배양방법은 버섯의 종류에 따라 사용배지가 상이하나, 하기 표 1로 표시한 대표적인 버섯 배지에 배양하는 것이다. 그러나, 상기한 버섯 배지는 고가인 문제점이 있으며, 균사체의 배양기간이 최소 40일 이상으로 장기간 소요되는 단점이 있다.In addition, the mushroom mycelium cultivation method used in the prior art is different depending on the type of mushroom used, but is cultured in a representative mushroom medium shown in Table 1 below. However, the mushroom medium has an expensive problem, there is a disadvantage that the culture period of the mycelium takes a long time at least 40 days or more.
본 발명은 배양시간을 단축시킬 수 있는 버섯 균사체 배양방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.It is an object of the present invention to provide a method for culturing mushroom mycelium which can shorten the incubation time.
또한 본 발명은 상황버섯의 균사체를 대량 배양할 수 있는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.Another object of the present invention is to provide a method for mass culturing mycelium of situation mushrooms.
또한 본 발명은 상기의 방법으로 배양한 버섯 균사체 또는 자실체를 제공하는 것을 목적으로 한다.It is another object of the present invention to provide a mushroom mycelium or fruiting body cultured by the above method.
도 1은 상황버섯균 종균 배양시 온도의 영향에 따른 수율을 나타낸 것이다.Figure 1 shows the yield according to the effect of the temperature at the time of spawning mushroom spawn culture.
도 2는 상황버섯균의 종균배양시 pH에 따른 수율을 나타낸 것이다.Figure 2 shows the yield according to the pH of the spawn mushroom culture.
도 3은 상황버섯균의 종균배양시 교반속도에 따른 수율을 나타낸 것이다.Figure 3 shows the yield according to the stirring speed during the spawn culture of the situation mushroom.
도 4는 상황버섯균의 종균배양시 배양시간(일)에 따른 수율을 나타낸 것이다.Figure 4 shows the yield according to the culture time (days) when the spawn culture of the mushrooms.
도 5는 상황버섯을 천마 고체배지에서 배양하는 경우 배양시간(일)에 따른 균사생육정도를 나타낸 것이다.Figure 5 shows the degree of mycelial growth according to the incubation time (day) when cultivating the situation mushroom in cheonma solid medium.
도 6은 천마 고체배지에 상황버섯을 접종하여 배양한 균사체 상부(a) 및 하부(b) 사진이다.6 is a photograph of the upper (a) and lower (b) of the mycelium cultured by inoculating situation mushrooms on cheonma solid medium.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 (a) 인진쑥, 인삼, 신선초, 케일, 상엽, 두충, 솔잎, 녹차잎, 천마, 칡 및 현미로 이루어진 군으로부터 선택된 식물의 건조물에 수분함량 57 내지 67 %로 물을 가하고, 이를 멸균하여 고체배지를 제조하는 단계, (b) 상기 고체배지를 pH 4.5 내지 6.5로 적정한 다음 버섯 종균을 고체배지 중량 기준으로 5 내지 15 중량% 접종하는 단계 및 (c) 상기 접종한 고체배지를 23 내지 33 ℃에 30 내지 35일간 두어 버섯 균사체를 배양하는 단계를 포함하는 버섯 배양방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a moisture content of 57 to 67% in the dried material of a plant selected from the group consisting of (a) ginseng, ginseng, sinchocho, kale, upper leaf, tofu, pine needle, green tea leaf, cheonma, 칡 and brown rice Adding water and sterilizing the same to prepare a solid medium, (b) titrating the solid medium to pH 4.5 to 6.5, and then inoculating 5 to 15% by weight of the mushroom spawn based on the weight of the solid medium, and (c) the inoculation. It provides a mushroom culture method comprising the step of culturing mushroom mycelia by placing one solid medium at 23 to 33 ℃ 30 to 35 days.
또한 본 발명은 상기의 버섯 배양방법으로 배양한 버섯 균사체를 제공한다.In another aspect, the present invention provides a mushroom mycelium cultured by the mushroom culture method.
또한 본 발명은 상기 버섯 배양방법 이후에, 상기 균사체를 15 내지 20 ℃에서 10 내지 15일간 2차 배양하여 자실체를 형성시키는 단계를 더욱 포함한 방법으로 배양한 버섯 자실체를 제공한다.In another aspect, the present invention provides a mushroom fruiting body cultured by the method further comprising the step of forming the fruiting body by secondary culture of the mycelium for 10 to 15 days at 15 to 20 ℃ after the mushroom culture method.
또한 본 발명은 상기의 방법으로 제조한 버섯 균사체 또는 자실체에 증류수, 알콜, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 용매를 가하여 열 또는 상온 추출한 버섯 추출물을 제공한다.In another aspect, the present invention provides a mushroom extract obtained by adding one or more solvents selected from the group consisting of distilled water, alcohol, hexane, chloroform, ethyl acetate and chloroform to the mushroom mycelium or fruiting body prepared by the above method.
이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명자들은 약용식물을 고체배지로 이용하여 버섯의 재배효율을 향상시킬 수 있는 방안을 연구하던 중, 배지내 수분함량, 배지의 pH, 배양온도 및 시간을 최적화하므로써 버섯을 다수확할 수 있는 방법을 확립하였다.The inventors of the present invention are studying a method of improving the cultivation efficiency of mushrooms by using medicinal plants as a solid medium, and a method for maximizing mushrooms by optimizing the water content in the medium, the pH of the medium, the culture temperature and time. Established.
본 발명의 버섯 배양방법은 고체배지에 버섯종균을 접종하고, 이를 배양하는 것이다. 상기 버섯은 통상의 버섯일 수 있으며, 바람직하기로는 상황버섯이다.Mushroom culture method of the present invention is to inoculate the mushroom spawn in a solid medium, and to culture it. The mushroom may be a conventional mushroom, preferably a situation mushroom.
본 발명의 고체배지는 약용식물을 유효성분으로 포함하는 것으로, 약용식물의 예로는 인진쑥, 인삼, 신선초, 케일, 상엽, 두충, 솔잎, 녹차잎, 천마, 칡 및현미가 있다. 상기 약용식물은 단일종으로 사용하거나, 2종이상 혼합하여 사용할 수 있다.The solid medium of the present invention includes a medicinal plant as an active ingredient, examples of medicinal plants include ginseng mugwort, ginseng, sinchocho, kale, upper leaf, tofu, pine needles, green tea leaves, cheonma, 칡 and brown rice. The medicinal plants may be used as a single species, or may be used by mixing two or more kinds.
고체배지내 수분함량은 57 내지 67 (v/w)%이며, 수분함량이 상기한 범위를 벗어날 경우 버섯 균사체 수율이 감소될 수 있다. 고체배지는 약용식물 건조물에 물을 가하여 57 내지 67 (v/w)%의 수분함량을 가지도록 할 수 있으며, 이를 고온에서 멸균하여 제조할 수 있다. 바람직한 수분 함량은 65 (v/w)%이다.Water content in the solid medium is 57 to 67 (v / w)%, the mushroom mycelium yield may be reduced if the water content is out of the above range. Solid medium may be added to the medicinal plant dried water to have a water content of 57 to 67 (v / w)%, it can be prepared by sterilization at high temperature. Preferred moisture content is 65 (v / w)%.
또한 고체배지의 pH는 4.5 내지 6.5이다. 고체배지의 pH가 상기한 범위를 벗어날 경우 배양시간 대비 균사체 수율이 현저히 감소될 수 있다. 바람직한 pH는 pH5이다.In addition, the pH of the solid medium is 4.5 to 6.5. If the pH of the solid medium is out of the above range, mycelial yield can be significantly reduced compared to the incubation time. Preferred pH is pH5.
상기한 고체배지에 접종되는 종균은 버섯의 종류에 따라 바람직한 방법으로 준비한다. 즉, 통상적으로 사용되는 액체배지인 YMPG, MCM, PDA 또는 대두박을 사용할 수 있다. 본 발명에서는 일실시예로 상황버섯의 종균배양방법을 기재한다.The spawn seed inoculated into the solid medium is prepared according to the type of mushroom in a preferred manner. That is, a commonly used liquid medium, YMPG, MCM, PDA or soybean meal can be used. In one embodiment of the present invention, the spawn culture method of the situation mushroom is described.
상황버섯 종균배양방법은 상황버섯균을 종균용 액체배양배지에 접종하고, 이를 23 내지 33 ℃, pH 4 내지 10, 교반속도 100 내지 250 rpm으로 5 내지 10일간 진탕배양하는 것이다. 상기한 범위 역시 상황버섯에 맞게 최적으로 확립된 범위이나, 바람직하기로는 배양온도 25 내지 30 ℃, 배지 pH 6.0 내지 8.0, 교반속도 120 내지 200 rpm 및 배양기간 6 내지 10일이다.Situation mushroom spawn culture method is to inoculate the situation mushroom spawn in the liquid culture medium for spawn, it is cultured shaking for 5 to 10 days at 23 to 33 ℃, pH 4 to 10, agitation speed 100 to 250 rpm. The above range is also an optimally established range for the situation mushroom, but preferably incubation temperature of 25 to 30 ℃, medium pH 6.0 to 8.0, stirring speed 120 to 200 rpm and incubation period 6 to 10 days.
버섯 종균배양방법으로 준비된 종균은 고체배지 중량기준으로 5 내지 15 중량%로 접종하고, 23 내지 33 ℃에 30 내지 35일간 두어 버섯 균사체를 생육시킨다. 바람직하기로는 상황버섯은 30 ℃에서 30일간 배양하는 것이 좋다.The spawn prepared by the mushroom spawn culture method is inoculated at 5 to 15% by weight based on the weight of the solid medium, and placed at 23 to 33 ° C. for 30 to 35 days to grow the mushroom mycelium. Preferably, the situation mushroom is incubated for 30 days at 30 ℃.
상기에서 언급한 본 발명의 버섯 균사체 배양방법을 보다 명확하게 설명하면 하기와 같다.Referring to the mushroom mycelium culture method of the present invention mentioned above is as follows.
(a) 인진쑥, 인삼, 신선초, 케일, 상엽, 두충, 솔잎, 녹차잎, 천마, 칡 및 현미로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된 식물의 건조물에 수분함량 57 내지 67 %로 물을 가하고, 이를 멸균하여 고체배지를 제조한다.(a) Add water to the dry matter of at least one plant selected from the group consisting of ginseng, ginseng, fresh vinegar, kale, upper leaf, tofu, pine needles, green tea leaf, cheonma, 칡 and brown rice with water content of 57 to 67%, and sterilize it. To prepare a solid medium.
(b) 상기 고체배지를 pH 4.5 내지 6.5로 적정한 다음 버섯 종균을 고체배지 중량 기준으로 5 내지 15 중량% 접종한다.(b) The solid medium is titrated to pH 4.5 to 6.5 and then the mushroom seed is inoculated 5 to 15% by weight based on the weight of the solid medium.
(c) 상기 접종한 고체배지를 23 내지 33 ℃에 30 내지 35일간 두어 버섯 균사체를 배양한다.(c) The inoculated solid medium is placed at 23 to 33 ° C. for 30 to 35 days to culture mushroom mycelium.
또한 상기 버섯 균사체는 15 내지 20 ℃에서 10 내지 15일간 2차 배양하여 자실체를 형성시킬 수 있다.In addition, the mushroom mycelium may form a fruiting body by secondary culture for 10 to 15 days at 15 to 20 ℃.
본 발명의 버섯 균사체 배양방법은 기존의 방법에 비하여 배양기간을 현저히 단축시키면서도 다량의 버섯 균사체 및 자실체를 수확할 수 있는 효과적인 방법이다.The mushroom mycelium culturing method of the present invention is an effective method that can harvest a large amount of mushroom mycelium and fruiting body while significantly shortening the culture period compared to the conventional method.
본 발명의 방법으로 재배한 버섯 균사체 또는 자실체는 식품으로 사용가능할 뿐만 아니라 통상의 방법으로 버섯 추출물을 제조하여 이를 식품 또는 식품 첨가제로 사용할 수 있다.Mushroom mycelium or fruiting body grown by the method of the present invention can be used as a food as well as to prepare a mushroom extract by a conventional method and can be used as food or food additives.
버섯 추출물의 제조방법은 버섯 배양물, 버섯 균사체 또는 자실체에 물, 알콜, 헥산, 클로로포름, 에틸아세페이트 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 용매를 가하여 열 또는 상온 추출하는 방법일 수 있다. 그러나 버섯 추출물 제조방법은 추출하고자 하는 유효성분에 따라 적절한 방법을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알콜은 바람직하기로는 에탄올, 메탄올, 부탄올 또는 이소프로판올이다.The preparation method of the mushroom extract may be a method of extracting heat or room temperature by adding one or more solvents selected from the group consisting of water, alcohol, hexane, chloroform, ethyl acetate and chloroform to the mushroom culture, mushroom mycelium or fruiting body. However, the mushroom extract manufacturing method is preferably used according to the effective method to be extracted. The alcohol is preferably ethanol, methanol, butanol or isopropanol.
바람직한 버섯 추출물 제조방법은 버섯 배양물 100 중량부 기준으로 200 내지 600 중량부의 물을 가하여 열수추출하고, 열수추출물은 여과후, F/D 진공동결 건조법, V/D 진공감압 건조법, 열풍건조법 또는 분무건조법으로 실시하여 분말화하는 것이다. 상기 F/D 진공동결 건조법은 추출액을 급냉시킨 다음 이를 -20 내지 -80 ℃의 진공상태에서 건조시키는 방법이고, 상기 V/D 진공감압 건조법은 추출액을 농축시킨 다음 60 내지 65 ℃의 진공상태에서 건조시키는 방법이고, 열풍건조법은 추출액을 농축시킨 다음 60℃ 이상의 가열된 바람을 불어넣어 건조시키는 방법이며, 상기 분무건조법은 추출액을 농축시킨 후 분무하여 100℃ 이상의 열풍으로 건조시키는 방법이다.Preferred mushroom extract preparation method is hot water extract by adding 200 to 600 parts by weight of water based on 100 parts by weight of the mushroom culture, hot water extract after filtration, F / D vacuum freeze drying method, V / D vacuum pressure drying method, hot air drying method or spraying It is powdered by carrying out by the drying method. The F / D vacuum freeze drying method is a method of quenching the extract and then drying it in a vacuum state of -20 to -80 ° C. The V / D vacuum reduction drying method concentrates the extract solution and then vacuums the extract to 60 to 65 ° C. The drying method is a method of drying the extract by concentrating the extract, and then blowing by heating a heated wind of 60 ° C. or more. The spray drying method is a method of concentrating and spraying the extract solution and drying it by hot air of 100 ° C. or more.
이하 본 발명의 실시예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, examples of the present invention will be described. The following examples are only for illustrating the present invention and the present invention is not limited to the following examples.
실시예 1: 천마 고체배지를 이용한 상황버섯 균사 배양Example 1 Situation Mushroom Hyphae Culture Using Chunma Solid Medium
1-1. 종균배양1-1. Spawn culture
가. 온도의 영향end. Influence of temperature
상황버섯균을 pH6의 YMPG, MCM, PDA 및 대두박 배지에 각각 접종하여 15, 20, 25, 30, 35 및 40 ℃에서 각각 8일간 회전진탕배양한 다음 균사체 수율(g/L)을 측정하였다. 균사체 수율은 하기 표 2 및 도 1에 나타낸다.S. mushrooms were inoculated in YMPG, MCM, PDA and soybean meal medium at pH 6, respectively, and cultured at 15, 20, 25, 30, 35, and 40 ° C for 8 days, respectively, and the mycelia yield (g / L) was measured. Mycelial yields are shown in Table 2 below and FIG. 1.
표 2에서, 상황버섯균은 배양 온도에 따라 성장에 큰 차이를 나타내었으며, 배양온도는 25 내지 30 ℃가 적절하였으며, 30 ℃에서 배양하는 것이 가장 효과적이었다.In Table 2, the situation mushroom showed a big difference in growth according to the culture temperature, the culture temperature of 25 to 30 ℃ was appropriate, it was most effective to incubate at 30 ℃.
나. 배지내 pH의 영향I. Effect of pH in Medium
상황버섯균을 pH 4, 6, 8, 10 및 12로 각각 적정한 배지에 접종하고, 30 ℃에서 8일간 회전진탕배양하였다. 이후 균사체 수율(g/L)을 측정하였으며, 그 결과는 하기 표 3 및 도 2에 나타내었다.Situation mushrooms were inoculated into appropriate media at pH 4, 6, 8, 10, and 12, respectively, and cultured with rotation shaking at 30 ° C for 8 days. Since mycelial yield (g / L) was measured, the results are shown in Table 3 and FIG.
표 3 및 도 2에서, 상황버섯균은 pH 4 내지 10에서 비교적 양호한 성장률을 나타내었으며, pH 10이 상황버섯균 배양에 가장 적절한 pH이었다.In Table 3 and Figure 2, the situation mushroom showed a relatively good growth rate at pH 4 to 10, pH 10 was the most suitable pH for the situation mushroom culture.
다. 교반속도의 영향All. Influence of the stirring speed
상황버섯균을 pH 6으로 적정한 배지에 접종하고, 30 ℃에서 8일간 회전진탕배양하였다. 이때 교반속도를 0, 100, 120, 150, 200 및 250 rpm 각각으로 배양하고, 교반속도에 따른 균사체 수율(g/L)을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 4 및 도 3에 나타내었다.Situation mushrooms were inoculated into a suitable medium at pH 6, and cultured with agitation at 30 ° C. for 8 days. At this time, the stirring speed was incubated at 0, 100, 120, 150, 200 and 250 rpm, respectively, and the mycelia yield (g / L) was measured according to the stirring speed. The results are shown in Table 4 and FIG. 3.
표 4 및 도 3에서, 상황버섯균은 교반속도 120 내지 250 rpm에서 우수한 성장률을 나타내었다.In Table 4 and Figure 3, the situation mushroom showed an excellent growth rate at agitation speed 120 to 250 rpm.
라. 배양일 수의 영향la. Influence of days of culture
상황버섯균을 pH 6으로 적정한 배지에 접종하고, 30 ℃에서 0 내지 10일간 150 rpm으로 회전진탕배양하였다. 이후 배양일수에 따른 균사체 수율(g/L)을 측정하였으며, 그 결과는 하기 표 5 및 도 4에 나타내었다.Situation mushrooms were inoculated into a suitable medium at pH 6, and cultured by rotating shaking at 150 rpm for 30 days at 30 ° C. Since mycelial yield (g / L) was measured according to the culture days, the results are shown in Table 5 and FIG.
표 5 및 도 4에서, 상황버섯균은 배양시간에 따라 증식이 증가하다가 배양 8일에 최고조에 달한 후 점차 감소되는 추세를 나타내었다. 따라서, 상황버섯균은 6일 내지 10일 배양하는 것이 적절하다.In Table 5 and Figure 4, the situation mushroom showed a tendency to increase gradually with the incubation time and then gradually decrease after reaching the peak at 8 days of culture. Therefore, it is appropriate to culture the situation fungi 6 to 10 days.
상기한 결과를 토대로,Based on the above results,
상황버섯균을 pH 6의 YMPG, MCM, PDA 및 대두박에 각각 접종하고, 30 ℃에서 150 rpm으로 교반하면서 8일간 배양하여 상황버섯 종균을 수득하였다.Situation mushrooms were inoculated in YMPG, MCM, PDA and soybean meal at pH 6, and cultured for 8 days with stirring at 150 rpm at 30 ° C. to obtain a situation mushroom spawn.
1-2. 상황버섯 균사체 생육1-2. Situation Mushroom Mycelial Growth
천마 고체배지를 이용한 상황버섯 균사체 배양시 배지수분함량, 배양온도, 배지산도 및 배양일수에 따른 균사생육정도를 측정하였다.Situation of mycelial growth according to medium moisture content, culture temperature, medium acidity, and culture days in cultivation of mycelium mushroom mycelium using cheonma solid medium.
가. 배지의 수분함량end. Water content of the medium
천마 건조물 각각에 수분함량 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 및 75 %이 되도록 물을 가하고, 121 ℃에서 3시간 멸균하여 고체배지를 제조하였다.Water was added to each of the dried Cheonma dry matter to 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 and 75%, and sterilized at 121 ° C. for 3 hours to prepare a solid medium.
상기 고체배지는 pH 5.5로 적정하고, 여기에 10 중량%의 상황버섯 종균을 접종한 다음 30 ℃에서 70일간 배양하면서 균사생육을 관찰하였다. 하기 표 6은 배지 수분함량에 따른 균사생육을 나타낸 것이다. 배양일수는 접종일로부터 바닥까지 완전히 자라는데 걸린 소요일수이다.The solid medium was titrated to pH 5.5, inoculated with 10% by weight of the situation mushroom seedlings and observed mycelial growth while incubated at 30 ° C. for 70 days. Table 6 shows the mycelial growth according to the media moisture content. Incubation days is the number of days it takes to grow completely from the inoculation day to the bottom.
상기 표 6에서, 배지 수분함량에 따른 균사밀도 및 배양일수를 관찰한 결과, 배지 수분함량이 65 %인 경우 단시간 배양으로도 현저한 균사생육 효과를 나타내었다.In Table 6, as a result of observing the mycelial density and the number of culture days according to the media moisture content, when the media moisture content was 65%, it showed a significant mycelial growth effect even in a short time of culture.
나. 배양온도의 영향I. Effect of incubation temperature
천마 건조물에 수분함량 65 %로 물을 가하고, 121 ℃에서 3시간 멸균하여 고체배지를 제조하였다.Water was added to the dried Cheonma water content of 65%, sterilized for 3 hours at 121 ℃ to prepare a solid medium.
상기 고체배지는 pH 5.5로 적정하고, 여기에 10 중량%의 상황버섯 종균을 접종한 다음 15 내지 40 ℃에서 70일간 배양하면서 균사생육을 관찰하였다. 하기 표 7은 배양 온도에 따른 균사생육을 나타낸 것이다.The solid medium was titrated to pH 5.5, inoculated with 10% by weight of the situation mushroom seedlings and then observed mycelial growth while incubated at 15 to 40 ℃ for 70 days. Table 7 shows mycelial growth according to the culture temperature.
상기 표 7에서, 배양 온도에 따른 균사밀도 및 배양일수를 관찰한 결과, 배양 온도가 30 ℃인 경우 단시간 배양으로도 현저한 균사생육 효과를 나타내었다.In Table 7, the results of observing the mycelial density and the number of days of culture according to the culture temperature, when the culture temperature is 30 ℃ showed a significant mycelial growth effect even for short time culture.
다. 배지산도의 영향All. Effect of pH
천마 건조물에 수분함량 65 %로 물을 가하고, 121 ℃에서 3시간 멸균하여 고체배지를 제조하였다.Water was added to the dried Cheonma water content of 65%, sterilized for 3 hours at 121 ℃ to prepare a solid medium.
상기 고체배지는 pH 4 내지 9로 각각 적정하고, 각각에 10 중량%의 상황버섯 종균을 접종한 다음 30 ℃에서 70일간 배양하면서 균사생육을 관찰하였다. 하기 표 8은 배양 온도에 따른 균사생육을 나타낸 것이다.The solid medium was titrated to pH 4 to 9, respectively, and inoculated with 10% by weight of situation mushroom seedlings, followed by incubation at 30 ° C. for 70 days, and observed mycelial growth. Table 8 shows mycelial growth according to the culture temperature.
상기 표 8에서, 배지 산도에 따른 균사밀도 및 배양일수를 관찰한 결과, 배지 pH가 5인 경우 단시간 배양으로도 현저한 균사생육 효과를 나타내었다.In Table 8, as a result of observing the mycelial density and the number of culture days according to the acidity of the medium, when the pH of the medium is 5, the mycelial growth was remarkable even in a short time of culture.
라. 배양일수의 영향la. Effect of culture days
천마 건조물에 수분함량 65 %로 물을 가하고, 121 ℃에서 3시간 멸균하여 고체배지를 제조하였다.Water was added to the dried Cheonma water content of 65%, sterilized for 3 hours at 121 ℃ to prepare a solid medium.
상기 고체배지는 pH 5로 적정하고, 10 중량%의 상황버섯 종균을 접종한 다음 30 ℃에서 70일간 배양하면서 배앙일수에 따른 균사생육을 관찰하였다. 하기 표 9 및 도 5는 배양일수에 따른 균사생육을 나타낸 것이다.The solid medium was titrated to pH 5, inoculated with 10% by weight of situation mushroom seedlings, and then cultured at 30 ° C. for 70 days to observe mycelial growth according to the number of days of embryos. Table 9 and Figure 5 shows the mycelial growth according to the culture days.
상기 표 9 및 도 5에서, 균사 생육은 배양 일수에 따라 점차 증가하여 배양 30일에 100 % 생육정도를 나타내었다.In Table 9 and Figure 5, the mycelial growth gradually increased with the number of days of culture, indicating the growth of 100% at 30 days of culture.
상기한 결과로, 상황버섯의 균사 배양을 위한 가장 최적의 배양조건은 하기와 같다.As a result of the above, the most optimal culture conditions for mycelial culture of situation mushrooms are as follows.
고체배지의 수분함량: 65 %Moisture content of solid medium: 65%
고체배지의 pH: pH 5PH of solid medium: pH 5
배양온도: 30 ℃Incubation temperature: 30 ℃
배양일: 30일Cultivation date: 30 days
실시예 2: 약용식물 고체배지를 이용한 상황버섯 균사, 자실체 배양 및 버섯 추출물 제조Example 2: Situation mushroom hyphae, fruiting body culture and mushroom extract preparation using medicinal plant solid medium
2-1. 상황버섯의 종균배양2-1. Culture of spawn mushrooms
상황버섯균을 pH 6의 YMPG, MCM, PDA 및 대두박에 각각 접종하고, 30 ℃에서 150 rpm으로 교반하면서 8일간 배양하여 영지버섯 종균을 수득하였다.Situation mushrooms were inoculated in YMPG, MCM, PDA and soybean meal at pH 6, and cultured for 8 days with stirring at 150 rpm at 30 ° C. to obtain Ganoderma lucidum spawn.
2-2. 상황버섯 균사체의 배양2-2. Culture of Situation Mushroom Mycelia
인진쑥, 인삼, 신선초, 케일, 상엽, 두충, 솔잎, 녹차잎, 칡 및 현미 각각의 건조물을 구입하고, 각각에 수분함량 65 %로 물을 가하고, 121 ℃에서 3시간 멸균하여 각 종류별 고체배지를 제조하였다.Purchase dried each of Injin mugwort, Ginseng, Sinchocho, kale, upper leaf, Tofu, pine needle, green tea leaf, green tea and brown rice, add water with 65% water content and sterilize at 121 ℃ for 3 hours Prepared.
상기 각각의 고체배지는 pH 5로 각각 적정하고, 각각에 10 중량%의 상황버섯 종균을 접종한 다음 30 ℃에서 30일간 배양하여 상황버섯 균사를 수득하였다.Each of the solid medium was titrated to pH 5, respectively, inoculated with 10% by weight of mushroom mushroom spawn and incubated at 30 ° C. for 30 days to obtain mushroom mushroom mycelia.
도 6은 천마 고체배지에 상황버섯을 접종하여 배양한 균사체 상부(a) 및 하부(b) 사진이다.6 is a photograph of the upper (a) and lower (b) of the mycelium cultured by inoculating situation mushrooms on cheonma solid medium.
2-3. 자실체 배양2-3. Fruiting body culture
상기에서 배양한 상황버섯 균사체는 배양온도 17 ℃에서 10 내지 15일간 2차 배양하여 자실체를 수득하였다.The situation mushroom mycelium cultured in the above was second cultured at a culture temperature of 17 ° C. for 10 to 15 days to obtain fruiting bodies.
2-4. 버섯 추출물 제조2-4. Mushroom extract manufacturer
상황버섯 균사체 또는 자실체에 대해 중량의 4배의 물을 가하여 추출기로 100-120 ℃에서 10시간 이상 추출하였다. 추출물은 여과하고, 여과액은 액상화한 다음 농축 및 여과 공정을 거쳐 분무건조하여 분말화하였다.4 times the weight of water was added to the mycelium mushroom mycelium or fruiting body and extracted with the extractor at 100-120 ° C. for 10 hours or more. The extract was filtered, the filtrate was liquefied and then powdered by spray drying through a concentration and filtration process.
또는 분무건조 대신 -20 내지 -80 ℃에서 진공동결 건조하여 분말화하였다.Or it was powdered by vacuum freeze drying at -20 to -80 ℃ instead of spray drying.
비교예: 노루궁뎅이 버섯의 배양Comparative Example: Culture of Roebuck Mushroom
가. 종균 배양end. Spawn culture
노루궁뎅이 버섯균을 pH 5.5로 조절된 YMPG 또는 MCM 배지에 접종하고, 배양온도 25 ℃, 교반속도 120 rpm으로 7일간 진탕 배양하여 종균을 배양하였다.The seedling fungus was inoculated in YMPG or MCM medium adjusted to pH 5.5, and shaken for 7 days at a culture temperature of 25 ° C. and a stirring speed of 120 rpm to incubate the seed.
나. 균사체 및 자실체 배양I. Mycelium and Fruiting Body Culture
신선초의 총 중량의 2배에 해당하는 물을 신선초에 첨가하고, 이를 120 ℃에서 2-4시간 멸균하여 고체배지를 제조하였다.Water corresponding to twice the total weight of fresh vinegar was added to fresh vinegar, which was sterilized at 120 ° C. for 2-4 hours to prepare a solid medium.
상기 고체 배지의 중량에 대하여 상기 종균을 10 중량%로 투입하고, 25 ℃에서 40 내지 50일 동안 균사체를 1차 생육시킨 다음, 배양온도 15 내지 20 ℃에서 10 내지 15일간 2차 생육을 수행하여 자실체를 생육시켰다.The seed was added at 10% by weight based on the weight of the solid medium, the mycelia were first grown at 25 ° C. for 40 to 50 days, and then secondary growth was performed at a culture temperature of 15 to 20 ° C. for 10 to 15 days. Fruiting bodies were grown.
본 발명의 일실시예인 실시예 2 및 실시예 4의 균사체 및 자실체의 배양방법과 비교하였을 때, 본 발명의 방법이 비교예에 비하여 버섯 재배기간을 10일 내지 15일 단축시켰다.Compared to the method for culturing mycelium and fruiting bodies of Examples 2 and 4, which are examples of the present invention, the method of the present invention shortens the mushroom growing period from 10 to 15 days as compared to the comparative example.
실시예 3-17: 버섯 추출물 제조Example 3-17 Mushroom Preparation
실시예 2와 동일한 방법으로 실시하여 버섯 균사체 배양물을 수득하였고, 다만 상엽, 녹차잎, 두충잎, 솔잎 및 천마와, 노루궁뎅이버섯 및 상황버섯을 사용하였다.The mushroom mycelium cultures were obtained in the same manner as in Example 2, except that the upper leaves, green tea leaves, larvae leaves, pine needles, and cheonma, locust mushrooms, and mushrooms were used.
상기 버섯 균사체 배양물 500 g에 물 1500 g을 첨가하여, 121 ℃에서 3시간 30분간 열을 가한 다음 325 메쉬로 여과하여 여과물을 수득하였다. 각각의 여과물은 ATAGO refactometer PR-32 (0~32%)로 브릭스 및 동결건조하여 수율을 측정하였다(표 10).1500 g of water was added to 500 g of the mushroom mycelium culture, heated at 121 ° C. for 3 hours and 30 minutes, and filtered through 325 mesh to obtain a filtrate. Each filtrate was brixified with ATAGO refactometer PR-32 (0-32%) and lyophilized to determine the yield (Table 10).
이상 살펴본 바와 같이, 본 발명은 약용식물을 고체배지로 이용한 버섯 재배방법을 제공하여 기존의 버섯 재배기간을 단축시킬 수 있으며, 버섯 재배수율을 향상시킬 수 있다. 또한 본 발명의 재배한 버섯 균사체 및 자실체는 식품으로 제공할 수 있으며, 이를 이용하여 생리활성물질을 추출할 수 있다.As described above, the present invention can provide a mushroom cultivation method using a medicinal plant as a solid medium to shorten the existing mushroom cultivation period, it is possible to improve the mushroom cultivation yield. In addition, the cultured mushroom mycelium and fruiting body of the present invention can be provided as a food, it can be used to extract the bioactive material.
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2003
- 2003-07-24 KR KR1020030051145A patent/KR20050012053A/en not_active Application Discontinuation
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