KR20040106616A

KR20040106616A - 산삼 추출물 및 생약 추출물을 함유하는 피부 노화 방지용화장료 조성물

Info

Publication number: KR20040106616A
Application number: KR1020030037391A
Authority: KR
Inventors: 이선영; 이강태; 이근수; 정지헌; 조병기
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2003-06-11
Filing date: 2003-06-11
Publication date: 2004-12-18
Also published as: KR100538078B1

Abstract

본 발명은 생약 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 산삼, 맥문동, 복령, 산약, 산수유, 지황, 감초 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 세포 증식용 조성물, 콜라겐 합성 증진용 조성물, 피부 과민반응 억제용 조성물 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부에 대한 자극 없이, 피부 세포 증식, 콜라겐 합성 증진, 피부 과민반응 억제 및 보습 개선 효과를 나타내므로 주름 발생, 탄력 감소 및 보습력 감소 등의 복합적인 피부 노화 현상의 방지에 유용하다.

Description

산삼 추출물 및 생약 추출물을 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물{Cosmetic Compositions Comprising Panax ginseng (C.A. MEY) Extract and Plant Extracts as Oriental Medicine for Preventing Skin Aging}

본 발명은 생약 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 산삼, 맥문동, 복령, 산약, 산수유, 지황 및 감초 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 세포 증식용 조성물, 콜라겐 합성 증진용 조성물, 피부 과민반응 억제용 조성물 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

인체의 가장 큰 기관으로서 전체 인체 부피의 약 16%를 차지하고 있는 피부는 외부환경과 직접 접해 있으면서, 인체 안으로 침입하려는 치명적인 많은 유해인자 예를 들면, 온도, 습도 및 자외선 등으로부터 인체를 보호하는 중요한 보호막 역할을 담당한다. 그러나, 나이가 들어감에 따라, 각종 오염물질, 강한 자외선, 스트레스 및 영양결핍 등으로 인해 피부 세포들이 손상을 입게 되고, 세포 증식이 제대로 이루어지지 않게 되어 피부에 주름, 탄력 손실 및 각질화 등이 발생한다.

원래, 정상의 건강한 피부에는 이러한 외부 손상 요인들로부터 피부를 보호하는 방어계가 구축되어 있으나, 지속적인 외부 자극에 의해 외부 손상 요인들로부터 피부를 보호하는 방어효능을 잃게 되며 세포 보호 및 증식 능력이 떨어져, 피부 탄력성의 감소 및 주름 생성 등의 피부 노화 현상이 나타난다.

또한, 피부의 보습력 감소 및 재생 (turn over) 기능의 상실도 피부 노화로 인해 나타나는 현상의 일종으로 주름 생성 및 피부 탄력 감소와 연관되어 있다. 나이가 들어감에 따라, 피부의 탄력에 중요한 역할을 하고 있는 매트릭스 (matrix) 내의 콜라겐 (collagen), 뮤코다당류 (mucopolysaccharide) 및 히아루론산(hyaluronic acid)의 양은 줄어드는 반면, 불용성 콜라겐의 양은 증가하므로, 진피는 피부의 수분을 유지하기 어렵게 되고, 피부가 거칠어진다. 이와 더불어, 나이가 들면, 피지샘 및 땀샘의 기능도 감소하여 피지 및 땀의 양이 점차로 줄어들며, 피지막 (sebaceous membrane)이 적당히 생성되지 못하여 피부 보습을 위한 보호능이 상실되고, 결국에는 피부가 건조해지고 투명성 (translucence)을 잃게 되며, 피부 단백질의 탄력이 감소하고 주름이 생성된다. 즉, 피부의 보습력 상실은 피부 탄력 감소 및 주름 생성과 함께 노화의 주된 증상이며, 밀접하게 연관되어 있다.

이와 함께, 사람 피부 세포가 자외선(UV-B, UV-A)에 노출되었을 때, 피부 손상의 주원인인 활성 산소종이 생성되어 주름 생성이 유발되는 것으로 알려져 있다.

피부의 구조 중에서 진피층에 존재하는 교원섬유 (collagen)및 탄력섬유(elastin)는 주요 단백질로서 피부의 탄력을 주관한다. 교원섬유의 생합성은 피부의 내·외적인 요인에 영향을 받는데, 내적으로는 자연노화 (에스트로겐의 감소)로 인해 세포 활성이 감소하여 교원질 섬유의 감소가 일어난다. 외적인 요인으로는 자외선의 과량 조사 및 스트레스 등으로 인해 생성되는 활성 산소 (자유 라디칼형)가 단백질의 -SH 기와 반응하여 효소의 활성을 저해하거나, 콜라겐 및 엘라스틴 등을 분해하는 효소 (Matrix Metalloproteinases: MMPS)인 콜라게나아제의 발현을 증가시켜며, 이로 인해 피부의 주름 생성 및 탄력 감소의 노화 현상이 유발된다.

이러한 피부노화를 억제시키거나 진행 속도를 완화시키기 위하여, 레티놀, 레티노이드, 비타민 C, 플라보노이드 및 토코페롤 등의 여러 가지 피부 보호 성분이 함유된 화장료 또는 피부 보호제가 개발되고 있다. 그러나 이와 같은 화장료 또는 피부 보호제는 최종적인 제형에 있어서 역가가 떨어져 그 효능이 경미하고, 피부 자극이 심한 문제점을 지니고 있다.

대한민국 특허출원 제 1997-60849 호는 레티놀, 알파하이드록시산 및 비타민류 특히 베타 하이드록시산의 세린을 함유한 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 개시하고 있고, 대한민국 특허출원 제 1998-18636 호는 폴리아미노 중합체를 유효 성분으로 포함하는 노화 방지용 화장료 조성물을 개시하고 있다. 또한, 대한민국 특허출원 제 1994-7002880 호는 은행추출물 및 최소한 하나의 폴리페놀 유도체를 함유하는 항산화제로서의 상승작용을 하는 화장료 조성물을 개시하고 있으며, 대한민국 특허출원 제 1996-69236 호는 L-2-옥소티아졸리딘-4-카르복실산 유도체를 포함하는 피부 노화 방지용 조성물을 개시하고 있다.

현재, 피부 세포들을 자외선 등의 외부 환경으로부터 보호하고, 세포 증식능을 활성화시키며, 세포의 기능을 활성화시키고, 원활한 보습력을 부여할 수 있는 화장료의 개발을 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 그러나, 종래의 결과는 그 효과가 미진하였으며, 주름 발생, 탄력 감소 및 보습능 상실 등 다양하게 나타나는 노화 현상 모두를 복합적으로 해소하는 화장료에 대해서는 알려진 바가 없다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 특허 문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허 문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

본 발명자들은 민간 및 한방 생약제를 이용한 피부 노화 방지, 즉 피부보호용 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 산삼 추출물과 맥문동, 복령, 산약, 산수유 및 지황 추출물은 피부 세포 증식, 콜라겐 합성 증진, 피부 과민반응 억제 및 피부 보습력 개선 효과가 있으며, 상기 생약 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료는 피부 자극 없이 주름 발생, 탄력 감소 및 보습능 상실 등 복합적인 피부 노화 현상을 해소함으로써 뛰어난 피부 노화 방지 효과가 있으며 피부 과민성반응을 억제함으로써 피부를 효과적으로 보호할 수 있는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 피부 세포 증식용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 콜라겐 합성 증진용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 피부 과민반응 억제용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 피부자극 및 부작용 없는 복합적인 피부 노화 현상 방지용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 산삼 (Panax ginseng(C.A.MEY)), 맥문동 (Liriope platyphyllaWang et Tang), 복령 (Poria cocosWolf), 산약 (Dioscorea oppositaThunb.), 산수유 (Cornus officinalis Sieb. et Zucc), 지황 (Rehmannia glutinosa Liboschtzvar.) 및 감초 (Glycyrrhiza glabraL.) 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 세포 증식용 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 함유되는 산삼은 예로부터 신비한 영약으로 취급되어 전설 속에나 등장할 만큼 희귀식물로, 희귀성 및 약효의 신비성으로 전설적인 약용식물로 알려져 있다. 산이 거칠고 골짜기가 깊은 곳에서 자생하는 산삼은 가장 귀하고 가치가 있는 약초로 특히, 천연 산삼은 발견율이 더욱 더 희박해지고 있으며, 소수의 심마니들에 의해서 발견되는 신비의 영약으로 알려져 있다.

산삼의 형태적 특징은 첫째, 뇌두의 길이가 재배된 삼에 비하여 현저히 길어보통 6~9㎝ 이상 되는 것도 있다. 둘째, 뿌리는 재배삼과 같이 미황색이 아닌 약간 거무스레한 흰색에 가깝고 동체의 상단 부분 또는 지근까지 가락지 테의 모양이 굴국지어 있고 세근 곳곳에는 좁쌀알과 같은 것이 부착되어 있는데 이를 옥주라 한다. 셋째, 산삼은 오래 묵은 삼 일수록 뇌두가 길며 긴 뇌두의 곳곳에서 새로이 형성된 뿌리가 비대 생장하여 다알리아처럼 집합 근을 형성하기도 하지만 재배삼에 비하여 중량이 적다. 또한, 산삼은 뿌리의 길이가 길어 재배삼이 30㎝ 내외이지만 산삼은 1m 이상씩 긴 것도 있다. 산삼의 지상부 형태 중 특이한 점은 자연 풍토나 환경에 순응하면서 생장하기 때문에 10년 이상 되어도 장엽이 3개 정도로 적은 것도 있다. 그리고 잎의 이면은 은색을 띄며, 소엽병과 엽병이 굵고 화경이 짧은 것이 특징이다.

일반적으로 인삼의 효능을 보면, 혈행 개선, 조혈작용, 심장 강하, 노화 방지, 혈압 정상화, 저하된 간기능 정상화, 위장병 치료, 당뇨병 치료, 암의 예방 및 치유 증진, 항피로, 스트레스 해소, 알레르기성 체질 개선, 냉증 치료, 갱년기 장애 해소, 류머티즘 치료, 정력 강화, 두뇌 활동 촉진, 시력 개선, 피부미용 및 모발 개선, 알콜 중독 해독 및 면역 기능 강화 등의 약효가 알려져 있다.

산삼은 인삼에 비해 유효성분의 함량이 많으며, 약효가 높은 것으로 알려져 있다. 배당체 (glycosides) 성분인 사포닌(saponin)을 비롯하여, 질소함유 화합물로서 단백질, 아미노산, 핵산 및 알칼로이드, 지용성분으로 지방산, 정유, 폴리아세치렌, 페놀화합물, 파이토스테롤 및 테르페노이드, 당류로서 단당류, 올리고당, 다당류 및 펙틴질 그리고 비타민류와 무기질 등 매우 다양한 성분들이 함유되어 있다.

일반적으로 사포닌 성분은 식물계에 광범위하게 분포되어 있는 성분이다 (약 750여종 식물). 사포닌이란 수용액에서 비누처럼 미세한 거품을 내는데서 붙여진 이름이다. 일반적으로 사포닌 성분은 물의 표면장력을 낮추므로 쉽게 거품을 내고 용혈작용을 나타낸다. 그런데, 산삼의 사포닌은 약성이 온화하고 독성이 없을 뿐만 아니라 용혈작용이 거의 없다는 것이 밝혀졌다. 또한, 산삼의 사포닌 성분은 다른 식물에서 발견되는 사포닌과는 화학구조가 전혀 다르며, 산삼의 사포닌을 타 식물계 사포닌과 구별하기 위해 산삼(Ginseng) 배당체(Glycoside)란 의미로 진세노사이드(Ginsenoside)라고 부른다.

산삼 이외의 원료인 맥문동(Liriope platyphyllaWang et Tang), 복령(Poria cocosWolf), 산약(Dioscorea oppositaThunb.), 산수유(Cornus officinalis Sieb. et Zucc), 지황(Rehmannia glutinosa Liboschtzvar.), 감초(Glycyrrhiza glabraL.)들 역시 피부 각질 연화 작용, 항균, 항염 작용, 상처 치유 증진 및 우수한 수분 보유력, 혈행 촉진 등의 효능을 가지고 있다.

본 발명의 생약 추출물은 당업계에 공지된 다양한 추출 방법을 이용하여 수득할 수 있으며, 바람직하게는, (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름 또는 (g) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 수득할 수 있다.

한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 생약 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 생약 출물에 포함되는 것이다.

본 발명의 생약 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 제조예를 참조하여 산삼 및 생약 추출물의 제조방법을 설명하면 다음과 같다: 산삼 및 생약 추출물은 산삼 10 g, 산수유 20 g, 산약 20 g, 감초 20 g, 복령 10 g, 맥문동 10 g 및 지황 10 g에 물을 첨가해서 1 ℓ로 만든 다음, 70℃에서 1시간 가량 달이고 여과한 후 상온에서 식힌 다음 4℃에서 7일간 저온 숙성시키고 다시 여과하여 제조한다.

본 발명의 바람직한 구현예에서 산삼 및 생약 추출물의 함량은 전체 조성물에 대하여 0.0001 내지 10.0 중량%이고, 보다 바람직하게는 0.0005 내지 10.0 중량%이며, 가장 바람직하게는 0.005 내지 5.0 중량%이다.

본 명세서에서, 용어 "피부 세포"는 피부를 형성시키는 세포를 의미하며, 섬유아세포 및 각질형성세포를 포함한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 증진용 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 상술한 산삼 및 생약 추출물을 유효성분으로 포함하기 때문에, 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 중복된 내용은 그 기재를 생략한다.

본 발명의 또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 과민반응 억제용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 피부의 과도한 면역 반응 (hypersensitivity)을 효과적으로 억제함으로써, 피부가 주위의 자극에 대하여 과민반응을 나타내는 것을 방지한다. 특히, 자외선 조사에 의해 피부에 나타나는 접촉성 과민반응을 효과적으로 억제한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발병은 산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

바람직하게는, 본 발명의 조성물은 주름 개선, 피부 탄력 강화 및 피부 보습 개선을 동시에 달성함으로써 피부 노화를 방지한다. 현재까지, 상술한 효능을 모두 발휘함으로써, 피부 노화를 방지하는 화장료 조성물은 알려져 있지 않다.

본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 산삼 추출물 및 생약 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드,지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 노화 방지의 용도를 갖는다. 본 명세서에서 용어 "피부 노화 방지"는 피부 노화 예방 및 치료를 포괄적으로 포함하는 의미를 갖는다.

본 발명의 화장료 조성물은 섬유아세포 및 각질형성세포의 증식, 콜라겐 합성의 증진에 의한 피부 주름 개선 및 피부 탄력 개선 그리고 보습력 향상을 통하여 피부 노화를 방지하며, 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다. 따라서, 본 발명의 용도인 피부 노화 방지 (즉, 피부 보호)는 주름 개선, 피부 탄력 개선, 및 보습력 개선 용도를 포함하는 것으로 해석된다.

또한, 본 발명은 피부 과민반응 억제용 화장료 조성물을 제공한다.

이와 같이, 본 발명의 조성물은 피부 노화 방지 및 피부 과민반응 억제를 통하여 완벽하게 피부 보호를 할 수 있게 된다.

한편, 본 발명의 화장료 조성물은 피부 자극 및 부작용이 거의 없는 장점이 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

제조예 1: 산삼 및 생약 추출물의 제조

산삼 및 생약 추출물은 산삼 10g, 산수유 20g, 산약 20g, 감초 20g, 복령 10g, 맥문동 10g, 지황 10g에 물을 첨가해서 1ℓ로 만든 다음 70℃에서 1시간 가량 달였다. 이것을 여과한 후 상온에서 식힌 다음 4℃에서 7일간 저온 숙성시키고 다시 여과하여 사용하였다.

본 발명의 바람직한 구현예 따르면, 산삼 및 생약 추출물의 함량은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001 내지 10.0 중량%이고, 보다 바람직하게는 0.0005 내지 10.0 중량%이며, 가장 바람직하게는 0.005 내지 5.0 중량%이다. 산삼 및 생약 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만일 경우에는 뚜렷한 피부 노화 방지 효과, 특히 주름 개선 효과를 기대할 수 없다. 또한, 산삼 및 생약 추출물의 함량이 10.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않는다.

실험예 1: 섬유아세포 증식 효과

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트(96-well microplate)의 각 웰에 1 ×10⁴세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지 (sigma사)에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 이어, 상기 산삼 및 생약 추출물을 최종 농도 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1%, 1%로 포함한 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한실험군과 산삼 및 생약 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 그런 다음, MTT 용액 (3-(4,5-디메틸티아졸-2-일) 2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드: 5 mg/㎖)을 각각에 10 ㎕씩 첨가하고, 4시간 동안 배양한 후, 배지를 제거하고, 각 웰 당 100 ㎕의 디메틸 설폭시드 용액을 가하고 20분 동안 진탕시켰다. 마이크로 플레이트 판독기 (microplate reader, Molecular Devices, 미합중국)를 이용하여 570 nm에서 상층액의 흡광도를 측정하였다. 측정값을 하기의 수학식 1에 대입하여 세포 증식 효과를 산출하였으며, 그 결과는 하기 표 1에 나타나 있다.

세포증식효과(%) = [(추출물 처리시의 흡광도 - 대조군의 흡광도) / 대조군의 흡광도] ×100

추출물(%)	흡광도	세포증식효과(%)
대조군	0.330	-
0.005	0.353	7.2
0.001	0.391	18.5
0.05	0.459	39.0
0.1	0.531	60.8
1	0.604	83.1

상기 표 1에서 알 수 있듯이, 산삼 및 생약 추출물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여, 산삼 및 생약 추출물은 섬유아세포 증식 효과를 나타낸다.

실험예 2 : 각질형성세포 증식 효과

각질형성세포를 이용하여 실험예 1과 동일한 방법으로 각질형성세포의 증식효과를 측정하였으며, 그 결과는 표 2에 나타나 있다.

추출물(%)	흡광도	세포증식효과(%)
대조군	0.324	-
0.005	0.337	4.1
0.001	0.361	11.5
0.05	0.387	19.3
0.1	0.425	31.3
1	0.527	62.8

실험예 3 : 콜라겐 합성 증진 효과

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 2 x 10⁴세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 상기 제조한 산삼 및 생약 추출물이 최종 농도 0.005, 0.01, 0.05%로 포함된 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 산삼 및 생약 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하고, 아스코르브산 (50 g/㎖)을 첨가하여 콜라겐 합성을 촉진시킨 다음, 다시 24시간 동안 추가로 배양하였다. 그런 다음, 각 웰을 세척하고 혈청이 함유되지 않은 DMEM 배지로 교체한 후 24시간 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 키트 (Takara, 일본국)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. PICP 양은 ng/2x10⁴세포로 환산하였으며, 그 결과는 하기 표 3에 나타나 있다.

농도 %(v/v)	콜라겐 합성량 (ng/2 x 10⁴)
대조군	153
0.005	189
0.01	204
0.05	250

상기 표 3에서 볼 수 있듯이, 산삼 및 생약 추출물의 농도가 증가함에 따라 콜라겐의 합성이 증가함을 알 수 있고, 이에 산삼 및 생약 추출물은 탁월한 콜라겐 합성 촉진 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 4 : 피부 과민반응 억제 시험

8-10주령의 C57BL/6 생쥐를 대상으로 복부를 면도한 다음 FS-20 선 램프 sun lamp로 자외선 B 파장을 (UVB) 2.4 kJ/㎡로 조사하면 접촉성 과민반응 (contact hypersensitivity)이 나타나게 된다. UV를 조사한 후 그 부위에 면역 억제 효과가 있는 물질을 도포하고 상기 물질이 도포되지 않은 대조군과 비교하여 면역 억제 현상을 측정하게 된다. 따라서, 본 발명의 산삼 및 생약 추출물을 UV 조사 후 도포하고 3일이 경과한 다음 UV조사 영역에 3% 삼질소염화벤젠(trinitrochlorobenzene)으로 감작시켰다. 6일 후 1%의 삼질소염화벤젠을 생쥐의 귀에 도포하고 부종 상태를 측정하였다. 피부 과민반응 억제 효과는 하기 수학식 2에 의해 계산하였으며 그 결과는 하기 표 4에 나타나 있다.

[(제조예 도포 및 UVB 조사군의 귀 부종 두께 - UVB 조사군의 귀 부종 두께)/(대조군의 귀 부종 두께 - UVB 조사군의 귀 부종 두께)] ×100

농도 %(v/v)	피부 과민반응 억제효과 (%)
대조군	-
0.005	7.6
0.01	15.4
0.05	33.9

상기 표 4에서 확인 할 수 있듯이, 본 발명의 생약 추출물은 농도-의존적으로 피부 과민반응 억제효과를 증가시키고 있음을 알 수 있다.

실시예 및 비교 실시예

하기 표 5의 조성비를 가지는 유연 화장수 화장료 조성물에 상기의 산삼 및 생약 추출물 5%(v/v)가 포함된 실시예 및 산삼 및 생약 추출물이 포함되지 않은 비교 실시예를 제조하고 하기 실험예 5에 이용하였다.

성분	실시예(중량%)	비교 실시예
산삼 및 생약 추출물	0.5	0
글리세린	5.1	5.1
프로필렌글리콜	4.2	4.2
토코페릴아세테이트	3.0	3.0
유동파라핀	4.6	4.6
트리에탄올아민	1.0	1.0
스쿠알란	3.1	3.1
마카다미아너트오일	2.5	2.5
폴리솔베이트60	1.6	1.6
솔비탄세스퀴롤레이트	1.6	1.6
프로필파라벤	0.6	0.6
카르복실비닐폴리머	1.5	1.5
향	미량	미량
방부제	미량	미량
정제수	잔량	잔량
계	100	100

실험예 5: 보습 효과

상기 실시예 및 비교 실시예의 보습력을 평가하기 위하여, 각 화장료가 도포된 피부의 수분 보유능 및 수분 증발량을 다음과 같이 측정하였다.

실험예 5-1: 수분 보유능의 측정

22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 상기 실시예 및 비교 실시예를 30명의 피시험자 하박 안쪽에 일정량 (0.03 g/16 ㎠)을 도포하고 도포전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 정상 피부를 대조군으로 사용하였다. 측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기 (corneometer CM820, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타나 있다.

구 분	실시예	비교 실시예	대조군
도포전 피부 전기전도도	50	50	50
도포 1시간후 피부 전기전도도	87	75	50
도포 2시간후 피부 전기전도도	75	59	50

실험예 5-2: 수분 증발량의 측정

팔의 상박 부위에 테입 스트리핑 (tape stripping)을 실시하여 피부의 방어막을 약화시킨 후, 실험예 5-1과 동일한 방법으로 피실험자에게 각 화장료를 도포한 후, 수분증발량기 (TEWA meter, koln, 독일연방국)를 이용하여 12시간 마다 1분 간격으로 5회씩 수분 증발량을 측정하여 평균값을 구하였다. 그 결과는 하기 표 7과 같다.

구 분	실시예	비교 실시예	대조군
0시간 후 수분증발량	4.0%	4.0%	0.0%
12시간 후 수분증발량	-9.1%	-5.5%	-0.1%
24시간 후 수분증발량	-7.2%	-1.0%	0.1%
36시간 후 수분증발량	-5.0%	2.5%	0.1%
48시간 후 수분증발량	-2.3%	3.0%	0.0%

상기 실험예 5-1 및 5-2의 결과에서 보듯이, 본 발명의 실시예가 비교 실시예에 비하여 피부의 전기 전도도가 높고, 적은 수분 증발량을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 추출물을 포함하는 화장료가 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 6: 피부 자극성 시험

상기 제조예에 따라 제조된 산삼 및 생약추출물의 피부 자극성을 알아보기 위하여, 건강한 성인 남·여 30명을 대상으로 양팔 하박부에 5 ×20 ㎝ 부위에 각 시료의 일정량 (약 0.1 g)을 24시간 동안 첩포한 후, 제거하고 1시간 및 24시간이 경과한 다음, 하기의 판정 기준에 의하여 육안으로 피부 상태 변화를 판독하였고, 자극율은 하기 수학식 3에 따라 계산하였다. 실험 결과는 하기의 표 8에 나타나 있다.

판정기준

- : 홍반이나 특이한 현상 없음

+- : 주위보다 약간 붉어짐

+ : 주위보다 현저히 붉어짐

++ : 주위보다 심하게 붉어지고 부풀음

자극율 (%) = [((+-)수 ×1 + (+)수 × 2 + (++)수 × 3) / (전체수 ×3)] ×100

제조예	판정결과	자극율(%)
제조예	++	자극율(%)	+	+-	-
1	-	-	1	29	1.1

상기 표 8의 피부 자극성 실험 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 산삼 및 생약 추출물은 피부 자극이 없음을 알 수 있다.

제형예 1

상기에서 수득한 산삼 및 생약 추출물을 포함하는 화장료 중 유연 화장수 (스킨)의 제형예는 다음과 같다.

성분	함량(중량%)
산삼 및 생약 추출물	0.5
1,3-부틸렌글리콜	5.2
올레일알코올	1.5
에탄올	3.2
폴리솔베이트 20	3.2
벤조페논-9	2.0
카르복실비닐폴리머	1.0
글리세린	3.5
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 2

상기에서 수득한 산삼 및 생약 추출물을 포함하는 화장료 중 밀크로션의 제형예는 다음과 같다.

성분	함량(중량%)
산삼 및 생약 추출물	0.6
글리세린	5.1
프로필렌글리콜	4.2
토코페릴아세테이트	3.0
유동파라핀	4.6
트리에탄올아민	1.0
스쿠알란	3.1
마카다미아너트오일	2.5
폴리솔베이트60	1.6
솔비탄세스퀴롤레이트	1.6
프로필파라벤	0.6
카르복실비닐폴리머	1.5
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 3

상기에서 수득한 산삼 및 생약 추출물을 포함하는 화장료 중 영양크림의 제형예는 다음과 같다.

성분	함량(중량%)
산삼 및 생약 추출물	1.0
글리세린	4.0
바셀린	3.5
트리에탄올아민	2.1
유동파라핀	5.3
스쿠알란	3.0
밀납	2.6
토코페릴아세테이트	5.4
폴리솔베이트 60	3.2
카르복실비닐폴리머	1.0
솔비탄세스퀴올레이트	3.1
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 4

본 발명의 산삼 및 생약 추출물을 함유한 화장료 중 맛사지 크림의 제형예는 다음과 같다.

성분	함량(중량%)
산삼 및 생약 추출물	0.5
글리세린	4.0
바셀린	3.5
트리에탄올아민	0.5
유동파라핀	24.0
스쿠알란	3.0
밀납	2.1
토코페릴아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	2.4
카르복실비닐폴리머	1.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.3
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

제형예 5

상기에서 수득한 산삼 및 생약 추출물을 포함하는 화장료 중 팩의 제형예는다음과 같다.

성 분	함량(중량%)
산삼 및 생약 추출물	1.0
에틸알코올	3.0
EDTA-2Na	0.02
프로필렌 글리콜	5.1
글리셀린	4.5
카보폴	1.0
폴리옥사이드	0.1
방부제	미량
향	미량
정제수	잔량
계	100

상술한 바와 같이, 본 발명은 산삼 추출물 외 맥문동, 복령, 산약, 산수유, 지황, 감초 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 세포 증식용 조성물, 콜라겐 합성 증진용 조성물, 피부 과민반응 억제용 조성물 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 피부세포 증식, 콜라겐 합성 증진, 및 보습 개선 효과를 나타내므로 주름 생성, 탄력 감소 및 보습력 감소 등의 복합적인 피부 노화 현상의 방지에 뛰어난 효과가 있으며, 피부에 대한 자극이 거의 없다.

Claims

산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 세포 증식용 조성물.
산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 합성 증진용 조성물.
산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
산삼, 산수유, 산약, 감초, 맥문동, 복령 및 지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 과민반응 억제용 화장료 조성물.
제 3 항에 있어서, 상기 조성물은 주름 개선, 피부 탄력 강화 및 피부 보습 개선을 동시에 달성함으로써 피부 노화를 방지하는 것을 특징으로 하는 피부 노화방지용 화장료 조성물.
제 3 항 또는 제 4 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.