KR20020093251A

KR20020093251A - 십장생(十長生) 관련 천연물(솔싹, 영지버섯, 알부틴,녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및레몬)의 혼합추출물을 함유한 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20020093251A
Application number: KR1020010031715A
Authority: KR
Inventors: 박한일; 설장호; 윤기훈; 임채일; 채희남; 김병기
Original assignee: 로제화장품 주식회사
Priority date: 2001-06-07
Filing date: 2001-06-07
Publication date: 2002-12-16

Abstract

본 발명은 십장생(十長生)과 관련된 10가지 천연물, 즉, 솔싹(Pinus sylvestris), 영지버섯(Ganoderma lucidum Karst.), 알부틴(Arbutin), 녹용(Cervus elaphus L.), 자라(Amyda sinensis), 게르마늄(Germanum), 로얄제리(Apis mellifera L.), 홍삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 연어알 및 레몬(Citrus Medica Limonum)의 혼합 추출물을 함유함으로써 주름 완화, 탄력 증강 및 보습능 회복에 복합적으로 작용하여 노화 방지 효능 등을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

십장생(十長生) 관련 천연물(솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬)의 혼합추출물을 함유한 화장료 조성물{A cosmetic composition containing mixing extract of shipjangsaeng-related natural substance(Pinus sylvestris, Ganoderma lucidum Karst., Arbutin, Cervus elaphus L., Amyda sinensis, Germanum, Apis mellifera L., Panax ginseng C. A. Meyer, salmon egg, Citrus Medica Limonum)}

본 발명은 십장생(十長生)과 관련된 10가지 천연물, 즉, 솔싹(Pinus sylvestris), 영지버섯(Ganoderma lucidum Karst.), 알부틴(Arbutin), 녹용(Cervus elaphus L.), 자라(Amyda sinensis), 게르마늄(Germanum), 로얄제리(Apis mellifera L.), 홍삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 연어알 및 레몬(Citrus MedicaLimonum)의 혼합 추출물을 함유함으로써 주름 완화, 탄력 증강 및 보습능 회복에 복합적으로 작용하여 피부 노화 방지 등의 효능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

우리 몸의 가장 큰 기관으로서 전체 우리 몸 부피의 약 16%를 차지하고 있는 피부는 외부환경과 직접 접해 있으면서, 몸 안으로 침입하려는 치명적인 많은 다양한 유해인자들로부터 우리몸을 보호하는 중요한 보호막의 역할을 담당하고 있다.

그러나 우리의 피부는 나이가 들어감에 따라, 각종 오염물질과 스트레스 등으로 인해 손상을 입게 되는데, 이로 인해 세포들이 손상을 입고 세포 증식이 제대로 이루어지지 않게 되어 피부는 탄력을 잃고 주름이 생기게 된다. 원래, 정상의 건강한 피부에는 이러한 외부 손상 요인들로부터 피부를 보호하는 방어계가 구축되어 있으나, 지속적인 외부자극에 의해 이러한 방어계는 무너지게 되고, 이에 따라 피부가 보호능을 잃게 되며 세포 보호 및 증식 능력이 떨어져, 피부 탄력성의 감소와 주름 생성 등의 피부 노화 현상이 나타난다.

또한, 피부의 보습력 감소 및 재생(turn over) 기능의 상실도 피부 노화로 인해 나타나는 현상의 일종으로 주름 생성 및 피부 탄력 감소와 연관되어 있다. 나이가 들어감에 따라, 피부의 탄력에 중요한 역할을 하고 있는 매트릭스(Matrix) 안의 콜라겐(collagen), 뮤코다당류(mucopolysaccharide), 히아루론산(hyaluronic acid)의 양이 줄어들고 불용성 콜라겐의 양은 증가되므로, 진피는 피부의 수분을 유지하기 어렵게 되고, 피부가 거칠어지게 된다. 또한, 피지샘과 땀샘의 기능도 감소하여 피지와 땀의 양이 점차로 줄어들게 되고, 피지막(sebaceous membrane)이 적당히 생성되지 못하여 피부 보습을 위한 보호능이 상실되어, 결국에는 피부가 건조해지고 투명성(translucence)을 잃게 되며, 피부 단백질의 탄력이 감소하고 주름이 생성된다. 즉, 피부의 보습력 상실은 피부 탄력 감소 및 주름 생성과 함께 노화의 주된 증상이며, 밀접하게 연관되어 있다.

이와 함께, 사람 피부 세포가 자외선(UV-B 및 UV-A)에 노출시 피부 손상의 주원인인 활성 산소종의 생성으로 인하여 주름 생성이 유발되는 것으로 알려져 있다.

따라서, 피부 세포들을 자외선 등의 외부 환경으로부터 보호하고, 세포 증식능을 활성화시키며, 원활한 보습력을 부여할 수 있는 화장료의 개발을 위한 연구가 활발히 진행되고 있으나, 종래의 결과로는 얻고자 하는 효과가 미진하였으며, 주름 발생, 탄력 감소 및 보습능 상실 등 다양하게 나타나는 노화의 요인들 모두를 복합적으로 해소한 화장료에 대해서는 알려진 바가 없었다.

이에 본 발명자들은, 피부 세포들을 자외선 등의 외부 환경으로부터 보호하고, 세포 증식능을 활성화시키며, 동시에 원활한 보습력을 갖도록 하는 것이 노화의 근본적인 원인들 모두를 해소할 수 있다는 점에 착안하여, 이들 모두를 만족시킬 수 있는 화장료의 개발을 위해 연구하였다. 그 결과, 영원히 죽지 않거나 오래 사는 것으로 여겨지는 십장생을 노화와 관련지어 연구하게 되었고, 십장생과 관련된 천연물 혼합 추출물이 세포 보호 및 증식 효과와 함께 보습 효과까지도 지니게 됨을 확인하였으며, 이를 화장료에 도입시 주름 방지, 탄력 증강 및 보습능 회복을통한 토탈 노화 방지에 효과적으로 기여할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서 본 발명의 목적은, 십장생(十長生)과 관련된 10가지 천연물, 즉 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬을 추출하여 이를 화장료에 도입시킴으로써, 상기 추출물의 자외선으로부터의 세포 보호능, 세포 증식능 및 우수한 보습능을 통해 피부 주름 완화, 탄력 증강 및 보습능 회복에 효과적으로 기여하며, 안전성 및 안정성에도 문제가 없는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

도 1은 본 발명의 십장생 혼합 추출물을 함유한 영양크림의 피부 탄력성 시험 결과를 나타낸 것이다.

도 2는 본 발명의 십장생 혼합 추출물을 함유한 영양로숀의 보습 효과 시험 결과를 나타낸 것이다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 의한 화장료 조성물은 십장생과 관련된 10가지 천연물, 즉 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬의 혼합 추출물을 건조 중량으로써 0.01~7중량%의 양으로 함유함을 특징으로 한다.

또한, 상기 혼합추출물에 대한 10가지 추출물 각각의 바람직한 건조중량비는 솔싹 5∼15%, 영지버섯 10∼15%, 알부틴 1∼5%, 녹용 15∼25%, 자라 15∼20%, 게르마늄 0.0001∼0.0003%, 로얄제리 10∼15%, 홍삼 5∼15%, 연어알 3∼10% 및 레몬 10∼15%가 되게 하는 것이 좋다.

본 발명자들은 사람의 피부가 나이가 들면서 노화되고, 주름이 생기며, 탄력 및 보습 성분이 상실되어 가는 것을 극복하기 위하여, 장수와 영생을 의미하는 십장생(十長生)과 관련하여 연구하게 되었다. 즉, 소나무, 불로초, 학, 사슴, 거북,바위, 물, 산, 해 및 구름으로 이루어진 10가지 물상의 십장생이 예로부터 영원히 죽지 않거나, 오래 사는 것으로 여겼던 장생불사(長生不死)를 표방하는 것이므로, 이를 노화와 연관지어 생각하게 된 것이다.

이에, 본 발명에서는 십장생과 연관된 천연물로 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬을 사용하였다. 상기 십장생 중 직접 구할 수 있는 소나무, 사슴, 거북에 대해서는 그 자체로써 솔싹, 녹용, 자라를 사용하였고, 십장생 중 실존하지 않거나 이미지로만 전해지는 것은 그 효능이 대응될 수 있는 자연물을 선택한 것이다. 즉, 불로초는 늙지 않는다는 의미에서 주름방지와 면역 성분 강화 효능을 지닌 영지를 선정하여 사용하였고, 학은 고귀함과 깨끗함을 상징하는 바, 미백제로 쓰이는 알부틴에서 대응되는 효능을 찾을 수 있었다. 또한, 바위가 갖는 튼튼함과 견고함의 의미로써 피부 저항력을 증진시킨다는 게르마늄을 선정하였으며, 물의 보습 효과는 보습과 탄력의 효능을 지닌 로얄제리를 사용함으로써 나타낼 수 있었고, 산이 주는 휴식과 활력의 기능을 제공할 수 있는 것으로 복용에 의해 항산화와 노화방지 효능을 갖는다고 알려진 홍삼을, 해가 지니는 생명력을 강렬한 에너지 또는 세포 재생과 결부시켜, 이에 부합하는 효능을 가진 연어알을, 구름의 순환적 기능을 세포의 각질화와 관련시켜 레몬을 선정하게 되었다. 이상의 열 가지 천연물들은 각기 다른 효능을 지니고 있는 천연물로서, 십장생과 관련되어 있으며, 본 발명자들은 상기한 천연물들로부터 얻은 혼합 추출물을 피부에 도입시킴으로써, 이들이 자외선으로부터 세포 보호 작용, 세포 증식 작용과 함께 보습 작용까지도 효과적으로 나타냄을 확인하였다.

이에 따라, 상기 십장생 혼합 추출물을 일정농도 이상 배합시킨 화장료를 제조하였고, 이를 사람 피부에 직접 사용한 결과, 종래의 주름 방지나 보습 화장료에 비해, 피부 탄력 증강, 주름 개선 및 보습능 회복 등 기능성 측면에 있어서 뚜렷하게 우수한 효과를 나타내며, 상기 효과들이 복합적으로 작용하므로 노화 방지 효과를 제공할 뿐만 아니라, 피부 안정성 및 안전성에 있어서도 우수함을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명에 따른 상기 천연물, 즉, 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬의 혼합추출물의 제조방법은 다음과 같다. 솔싹 5∼15%, 영지버섯 10∼15%, 알부틴 1∼5%, 녹용 15∼25%, 자라 15∼20%, 게르마늄 0.0001∼0.0003%, 로얄제리 10∼15%, 홍삼 5∼15%, 연어알 3∼10% 및 레몬 10∼15%의 건조중량비로 혼합한 전체에 추출용매로서 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린으로 구성된 그룹으로부터 선택된 한가지 이상의 용매를 상기 혼합 추출물의 5∼15배 부피량 만큼 가한다. 추출방법으로는 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50∼95℃로 3∼20시간 가열하여 추출하거나, 또는 5∼37℃에서 1∼15일간 침적시켜 유효성분을 추출하는 방법이 사용가능하다. 또한, 상기 천연물 추출물 각각을 추출한 다음 이를 혼합한 경우에도 같은 효과를 나타내므로 이 방법도 동일하게 적용이 가능하다. 냉각 콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 용매를 회수하면서 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬으로부터의 천연물 혼합 추출물을 완전히 감압 농축한 후, 그 건조중량으로서 0.01∼7%, 바람직하게는 0.3∼5%의 양을 취하여 이를 화장료에 첨가한다. 첨가량이 0.01% 미만인 경우, 유효성을 나타내는데 바람직하지 못하고, 7% 이상인 경우 제형화 하는데 문제가 생기며, 효능과 안정성을 고려한 최적농도는 0.3~5%이다.

이하, 참고예, 실시예 및 시험예를 통해 본 발명의 구성 및 효과를 보다 상세히 설명하였으나, 본 발명의 내용이 여기에 한정되지는 않는다.

[참고예 1] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

솔싹 15%, 영지버섯 10%, 알부틴 2.9999%, 녹용 15%, 자라 17%, 게르마늄 0.0001%, 로얄제리 10%, 홍삼 13%, 연어알 5% 및 레몬 12%의 건조중량비로 구성된, 완전 건조시킨 열 가지 혼합 원료 1kg을 물 10kg에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 3시간 끓여서 추출한 후, 400메쉬 여과포로 여과하고 상온으로 냉각하였다. 5~15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후, 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 상기 여과액을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 70℃로 감압 농축하여 천연물 추출물 28g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 2] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 부틸렌글리콜 수용액(30%) 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 43g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 3] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 부틸렌글리콜 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 37g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 4] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 에탄올 수용액(30%) 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 33g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 5] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 에탄올 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 25g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 6] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 부탄올 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 29g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 7] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 에틸아세테이트 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 30g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 8] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 메탄올 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 32g(건조중량)을얻었다.

[참고예 9] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 프로필렌글리콜 수용액(30%) 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 36g(건조중량)을 얻었다.

[참고예 10] 십장생 천연 혼합 추출물 제조

상기 참고예 1에서 용매로 사용한 물 10kg 대신 글리세린 수용액(30%) 10kg을 사용하는 것을 제외하고 참고예 1과 동일한 방법을 사용하여, 천연물 추출물 31g(건조중량)을 얻었다.

[시험예 1] 자외선으로부터의 세포 보호 효과 시험

1)시험 방법

사람 섬유아세포를 2×10⁵세포/웰로 하여 웰 플레이트에 놓고 10% FBS를 함유하는 DMEM배지를 0.2㎖ 공급한 후, 24시간 동안 CO₂배양기에서 배양하였다. 여기에 DMSO에 녹인 참고예 1~10의 천연물 혼합 추출액 각각을 처리한 다음, 2MED의 자외선을 5분간 조사하고, 이를 24시간 동안 배양하였다. 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖를 가하여 4시간 동안 배양한 다음, 배지를 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포르마잔(formazan)을 ELISA 판독기(reader)를 사용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 각각의 참고예의 고형분을 녹인 용매인 DMSO로 시험을 시행한 것을 대조군으로 하여 흡광도를 측정하였고, 대조군과의 상대적인 흡광도의 차이로부터 세포 보호 효과를 판정하였다. 한편, 비교를 위해 피부 노화방지의 대표 원료인 녹차 추출물에 대하여 상기 효과를 측정하였다.

2)시험결과

상기 방법에 따라, 본 발명의 십장생 혼합 추출물의 자외선으로부터의 세포 보호 효과를 측정하여, 그 결과를 표 1에 나타내었다. 상기 결과로부터 본 발명의 추출물은 피부 노화방지의 대표 원료인 녹차 추출물과 비교시, 세포 보호 효과가 현저히 큼을 알 수 있었다.

	반응액 중에 함유시킨시료의 농도(㎍/㎖)	세포 보호 효과(%)
	반응액 중에 함유시킨시료의 농도(㎍/㎖)	십장생 천연 혼합추출물	녹차 추출물
참고예 1	100	71(0.80847)	68(0.78584)
참고예 2	100	85(0.96806)	79(0.8997)
참고예 3	100	79(0.8996)	70(0.79723)
참고예 4	100	73(0.83139)	62(0.70612)
참고예 5	100	45(0.51251)	42(0.47834)
참고예 6	100	59(0.81951)	46(0.63894)
참고예 7	100	75(0.8542)	64(0.72889)
참고예 8	100	63(0.71750)	50(0.56945)
참고예 9	100	67(0.76306)	47(0.53528)
참고예 10	100	69(0.78584)	59(0.67195)
세포보호효과(%)=시험군의 흡광도/대조군의 흡광도 ×100괄호안의 수치는 흡광도(㎚)임.참고로 대조군의 흡광도는 1.0449㎚

[시험예 2] 수퍼옥사이드 라디칼(Superoxide radical)로부터의 세포 보호 효과 시험

1)시험 방법

사람 섬유아세포를 2×10⁵세포/웰로 하여 웰 플레이트에 놓고 10% FBS를 함유하는 DMEM 배지를 0.2㎖ 공급한 후, 24시간 동안 CO₂배양기에서 배양하였다. 여기에 DMSO에 녹인 참고예 1~10의 천연물 혼합 추출액 각각을 처리하고 30분 동안 배양하였다. 이 배양된 세포에 1.5mM 크산틴(xanthine) 10㎕와 0.25U 크산틴 산화 효소(Xanthin oxidase) 10㎕를 가하여 수퍼옥사이드 라디칼을 발생시킨 후, 24시간 동안 CO₂배양기에서 배양하였다. 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖을 가하여 4시간 동안 배양한 다음, 배지를 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포르마잔을 ELISA 판독기를 사용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 각각의 참고예의 고형분을 녹인 용매인 DMSO로 시험을 시행한 것을 대조군으로 하여 흡광도를 측정하였고, 대조군과의 상대적인 흡광도의 차이로부터 세포 보호 효과를 판정하였다. 한편, 비교를 위해 피부 노화방지의 대표 원료인 녹차 추출물에 대하여 상기 효과를 측정하였다.

2)시험결과

상기 방법에 따라, 본 발명의 십장생 혼합 추출물의 수퍼옥사이드 라디칼로부터의 세포 보호 효과를 측정하여, 그 결과를 표 2에 나타내었다. 상기 결과로부터 본 발명의 추출물은 피부 노화방지의 대표 원료인 녹차 추출물과 비교시, 수퍼 옥사이드 라디칼로부터의 세포 보호 효과도 우수하게 나타남을 알 수 있었다.

	반응액 중에 함유시킨시료의 농도(㎍/㎖)	세포 보호 효과(%)
	반응액 중에 함유시킨시료의 농도(㎍/㎖)	십장생 천연 혼합추출물	녹차 추출물
참고예 1	100	73(0.76278)	69(0.70008)
참고예 2	100	91(0.95086)	82(0.85682)
참고예 3	100	85(0.88816)	77(0.80457)
참고예 4	100	81(0.84637)	76(0.79412)
참고예 5	100	63(0.65829)	60(0.62694)
참고예 6	100	79(0.82547)	66(0.68963)
참고예 7	100	83(0.86727)	78(0.81502)
참고예 8	100	53(0.5580)	46(0.48065)
참고예 9	100	87(0.90906)	69(0.72098)
참고예 10	100	75(0.78367)	71(0.74188)
세포보호효과(%)=시험군의 흡광도/대조군의 흡광도 ×100괄호안의 수치는 흡광도(㎚)임.참고로 대조군의 흡광도는 1.0449㎚

[시험예 3] 세포 증식 효과 시험

1)시험 방법

96μ-웰 플레이트에 5% 우태아혈청(fetal bovine serum, FBS) 용액을 100㎕씩 넣은 다음, 2% FBS가 함유된 DMEM 배지에 참고예 1~10의 천연물 혼합 추출액 각각을 일정농도로 분산시켜 묽히고 100㎕씩 다시 첨가하였다. 헤모사이토메타(Hemocytometer)를 이용하여 신생아의 포피(foreskin)조직에서 얻은 섬유아세포를 웰당 4,000개씩 100㎕ 배지에 분산시켜 가한 후, 7일간 배양하였다. 배양이 끝난 후, 상등액을 제거하고 다시 5% 인산 완충 용액(PBS, phosphate buffered saline)을 200㎕씩 가하여 세척한 다음, DMSO를 웰당 150㎕씩 가하고 10분간 흔들어 녹여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 또한, 각각의 참고예의 고형분을 녹인 용매인 DMSO로 시험을 시행한 것을 대조군으로 하여 흡광도를 측정하였고, 대조군과의 상대적인 흡광도의 차이로부터 세포 증식 효과를 판정하였다. 한편, 비교를 위해 피부 노화방지의 대표 원료인 녹차 추출물에 대하여 상기 효과를 측정하였다.

2)시험결과

상기 방법에 따라, 본 발명의 십장생 혼합 추출물의 세포 증식 효과를 측정하여, 그 결과를 표 3에 나타내었다. 상기 결과로부터 본 발명의 추출물은 피부 노화방지의 대표 원료인 녹차 추출물과 비교시, 세포 증식 효과가 우수하게 나타남을 알 수 있었다.

	반응액 중에 함유시킨시료의 농도(㎍/㎖)	세포 증식 효과(%)
	반응액 중에 함유시킨시료의 농도(㎍/㎖)	십장생 천연 혼합 추출물	녹차 추출물
참고예 1	100	103(1.25804)	101(1.23361)
참고예 2	100	127(1.55119)	109(1.33132)
참고예 3	100	111(1.35575)	110(1.34354)
참고예 4	100	121(1.47789)	115(1.40461)
참고예 5	100	102(1.24583)	102(1.24583)
참고예 6	100	113(1.38018)	104(1.27026)
참고예 7	100	115(1.40460)	103(1.258042)
참고예 8	100	107(1.30689)	105(1.28247)
참고예 9	100	116(1.41682)	108(1.31911)
참고예 10	100	109(1.33132)	102(1.24583)
세포증식효과(%)=시험군의 흡광도/대조군의 흡광도 ×100괄호안의 수치는 흡광도(㎚)임.참고로 대조군의 흡광도는 1.2214㎚

[시험예 4] 보습 효과 시험

1)시험 방법

디쉬(Dish)에 참고예 1~10의 천연물 혼합 추출물 5g을 넣고, 이를 CaCl₂가 들어있는 데시케이터 중의 상대습도 41%, 온도 25℃의 조건하에 방치한 다음, 일정시간 경과 후의 중량 변화를 경시적으로 측정하였다. 비교예로써, 보습 화장료에 일반적으로 사용되는 1,3-부틸렌글리콜을 사용하였다.

2)시험결과

상기 방법에 따라, 본 발명의 십장생 혼합 추출물의 보습 효과를 측정하여, 그 결과를 표 4에 나타내었다. 상기 결과로부터 본 발명의 추출물은 보습으로 인한 수분 함유량이 높게 나타나며, 보습 물질로 알려진 1,3-부틸렌글리콜과 비교시에도 그 효과가 더 우수하게 나타남을 확인하였다.

	측정 시간(hr)	수분 함유량 (%)
참고예 1	120	47.2
참고예 2	120	53.5
참고예 3	120	50.7
참고예 4	120	47.7
참고예 5	120	45.5
참고예 6	120	49.3
참고예 7	120	48.5
참고예 8	120	46.6
참고예 9	120	49.8
참고예 10	120	51.5
비교예(1,3-부틸렌글리콜 30% 함유)	120	43.2
수분 함유량(%) = 잔류 시료량(g)/ 초기 시료의 양(g) ×100

[시험예 5] 십장생 천연 혼합 추출액의 안전성 시험

십장생 천연 혼합 추출액의 안전성을 시험하기 위하여, 실험용 쥐를 대상으로 1차 피부 자극성 시험, 1차 안점막 자극성 시험 및 피부 감작성 시험을 실시하여 그 결과를 하기 표 5~7에 나타내었다(시험 기간: 2001년 1월 4일 ∼ 2001년 4월 20일, 시험 실시 기관: (주)바이오랜드 생명공학연구소). 하기 표 5는 1차 피부 자극성 시험 결과를 나타낸다.

시 간	홍 반	부 종
30-60분	0	0
24시간	0	0
48시간	0	0
72시간	0	0
*실험동물종: 뉴질랜드산 Albino Rabbit,투여개시시 주령 및 체중범위: 10주, 2.5㎏±20g

상기 결과로부터, 본 발명의 십장생 천연 혼합 추출물은 피부 홍반이나 부종 등의 자극성이 없는 안전한 물질임을 확인하였다.

또한, 하기 표 6은 1차 안점막 자극성 시험 결과를 나타낸다.

소 견	1시간	24시간	48시간	72시간
각막혼탁	0	0	0	0
홍채 이상	0	0	0	0
각막 발적 부종	0	0	0	0
*실험동물종: 뉴질랜드산 Albino Rabbit,투여개시시 주령 및 체중범위: 10주, 2.5㎏±20g

상기 결과로부터, 본 발명의 십장생 천연 혼합 추출물은 각막 혼탁, 홍채 이상 또는 각막 발적 부종 등의 안점막 자극성이 없는 안전한 물질임을 확인하였다.

또한, 하기 표 7은 1차 피부 감작성 시험 결과를 나타낸다.

시 간	감작율(%)	등 급	감작성 정도
24시간	6	Ⅰ	아주 약함
48시간	3	Ⅰ	아주 약함
실험동물종: Hartly 계 수컷 Guinea-Pig,투여개시시 주령 및 체중범위: 10주, 300 ∼ 500g

상기 결과에 있어서, 감작율은 상기 시험에 대하여 양성 반응을 나타낸 동물의 수 및 이들의 피부 반응을 점수화한 것으로부터 통상적인 방법으로 환산한 것이며, 감작율이 0~8% 일 때, 등급 Ⅰ로 하고, 감작성 정도를 아주 약함으로 정하는 것임이 통상적임을 밝혀둔다. 따라서, 본 발명의 십장생 천연 혼합 추출물은 피부 감작성에 있어서 안전한 물질임을 확인하였다.

또한, 사람 피부 패취 테스트에서도 시료제거 후 30분, 24시간까지의 반응에 있어서 모두 음성으로 나타났으며, 시료제거 후 7일째에도 이상은 확인되지 않았다.

즉, 이상의 안전성 시험 결과로부터 십장생 천연 혼합추출물은 매우 안전한 물질임이 증명되었다.

[시험예 6] 십장생 천연 혼합 추출액의 물성 안정도 측정시험

십장생 천연 혼합 추출물을 화장료에 도입시, 그 물성이 어느 정도의 안정성을 갖고 사용될 수 있는지를 평가하기 위하여, 상온, 40℃ 및 일광에 대해 화장료 성분의 물성 측정에 일반적으로 사용되는 변색 측정을 시행하였고, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.

날짜조건	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15
상온	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
40℃	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
일광	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
날짜조건	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28	29	30
상온	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
40℃	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
일광	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+	+
-; 색상 변화 없음, +; 변색 시작, ++; 많이 변함, +++; 완전 변색

상기 결과로부터 본 발명의 십장생 혼합 추출액은 상온과 40℃에서 매우 안정하며, 일광에서는 거의 무시될 정도의 변색이 관찰되기는 하나, 더 이상의 변색 진행은 없는 매우 안정한 물질임이 판명되었다.

[시험예 7] 사람 피부에 대한 탄력성 증가 시험

참고예 2의 십장생 천연 혼합 추출물을 함유하여 제형화한 하기 실시예 1의 영양크림 및 종래에 탄력성 증가 물질로 화장료에 이용되었던 해조 추출물을 함유한 비교예 1의 영양크림을 제조하여, 피부 도포시 피부의 탄력성에 미치는 효과를측정하였다. 시험은 20세∼55세의 여성 중, 정상, 지성, 건성, 복합성 피부를 지닌 20명에 대해 안면 왼쪽 부위에는 실시예 1의 영양크림을, 안면 오른쪽 부위에는 비교예 1의 영양크림을 아침, 저녁으로 1일 2회 도포하여 사용하게 한 후, 1주, 2주, 3주 및 4주 후에 피부 탄력 측정기기(Ballisto meter)를 이용하여 피부의 탄력성을 측정하는 방법으로 행하였다. 결과는 하기 표 9 및 도 1에 나타내었다.

[실시예 1 및 비교예 1] 영양크림

원 료	실시예 1	비교예 1
십장생 천연 혼합 추출물(참고예2)	7.0	-
해조 추출물	-	7.0
시토 스테롤	4.0	4.0
폴리글리세릴 2-올레이트	3.0	3.0
세라마이드	0.7	0.7
세테아레스-4	2.0	2.0
콜레스테롤	3.0	3.0
디세틸포스페이트	0.4	0.4
농글리세린	5.0	5.0
선플라우어오일	22.0	22.0
카르복시비닐폴리머	0.5	0.5
트리에탄올아민	0.5	0.5
방부제	미량	미량
향료	미량	미량
정제수	잔량	잔량

이상의 결과에서 알 수 있는 바와 같이 본 발명에 따른 천연 혼합 추출물을 함유한 실시예 1의 영양크림은 기존에 피부 탄력성 증가 물질로 사용되었던 해조추출물을 함유한 비교예 1의 영양크림에 비해 피부상태 개선에 의한 피부 탄력 효과가 우수한 것으로 나타났다.

[시험예 8] 주름 개선 효과 시험

참고예 2의 십장생 천연 혼합 추출물을 함유하여 제형화한 하기 실시예 2의 영양에센스 및 종래에 주름 개선 화장료에 이용되었던 히아루론산을 함유한 비교예 2의 영양에센스에 대하여, 피부 탄력성 증진에 따른 주름 개선 효과를 측정하기 위해 20명의 왼쪽눈 가장자리에 하루에 두번 실시예 2를 적용하고, 오른쪽 눈 가장자리에는 비교예 2를 적용하였다. 각각의 처리 후 45일이 경과한 다음, 피부 표면의 탄력성을 Cutometer SEM 474에 의해 측정하였다. Cutometer SEM 474에 의한 피부 탄력도 측정은 주름의 깊이를 측정하는 것으로서, 값이 적을수록 탄력성이 좋고 주름이 완화된 것이다. 탄력도 값은 처리전의 측정값에 비해 감소한 값을 %로 나타내었으며, 피검자 20명의 평균값을 구하여 표 10에 나타내었다.

[실시예 2 및 비교예 2] 영양 에센스

원 료	실시예 2	비교예 2
십장생 천연 혼합 추출물(참고예2)	7.0	-
히아루론산	-	7.0
시토 스테롤	1.70	1.70
폴리글리세릴 2-올레이트	1.50	1.50
세라마이드	0.7	0.7
세테아레스-4	1.2	1.2
콜레스테롤	1.5	1.5
디세틸포스페이트	0.4	0.4
농글리세린	5.0	5.0
선플라우어오일	15.0	15.0
카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
산탄검	0.2	0.2
방부제	미량	미량
향료	미량	미량
정제수	잔량	잔량

시 료	피부 탄력도(주름깊이 감소) 효과(%)
시 료	30일	45일
실시예 2	17.7	29.3
비교예 2	10.4	21.5

[시험예 9] 보습 효과 시험

참고예 2의 십장생 천연 혼합 추출물을 함유하여 제형화한 하기 실시예 3의 영양로숀 및 종래에 보습 화장료에 일반적으로 사용되었던 1,3-부틸렌글리콜을 함유한 비교예 3의 영양로숀에 대하여, 피부 보습 효과를 시험하기 위해 20명의 왼쪽 팔 안쪽에 실시예 3과 비교예 3을 적용하였다. 각각을 적용한 후, Corneometer CM 825에 의해 시간에 따른 피부 표면의 보습력을 측정하였다. Corneometer CM 825에 의한 피부 보습 측정은 피부의 수분함유량를 측정하는 것으로서, 값이 높을수록 보습력이 좋은 것이다. 피검자 20명의 평균값을 구하여 하기 표 11 및 도 2에 나타내었다. 시험은 온도 20℃, 상대습도 20% 하에서 이루어졌다.

[실시예 3 및 비교예 3] 영양로숀

원 료	실시예 3	비교예 3
십장생 천연 혼합 추출물(참고예2)	7.0	-
1,3-부틸렌글리콜	-	7.0
시토 스테롤	1.70	1.70
폴리글리세릴 2-올레이트	1.50	1.50
세라마이드	0.7	0.7
세테아레스-4	1.2	1.2
콜레스테롤	1.5	1.5
디세틸포스페이트	0.4	0.4
농글리세린	5.0	5.0
선플라우어오일	10.0	10.0
카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
산탄검	0.3	0.3
방부제	미량	미량
향료	미량	미량
정제수	잔량	잔량

시간(min)	5	10	15	20	25	30
실시예 3	19.4	7.98	5.88	5.16	4.18	4.46
비교예 3	20.4	7.62	4.12	3.74	3.62	3.02

이하, 본 발명의 십장생 천연 추출물을 함유한 화장료를 제형예로써 나타내었으나 본 발명이 이들 제형으로만 한정되는 것은 아니다.

[제형예 1] 화장수(스킨로션)

원료	제형예 1
십장생 천연 혼합 추출물	7.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	2.0
프로필렌글리콜	2.0
폴리옥시에틸렌(60)경화피마자유	1.0
에탄올	10.0
트리에탄올아민	0.1
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔량

[제형예 2] 맛사지 크림

원료	제형예 2
십장생 천연 혼합 추출물	7.0
밀납	10.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올리에이트	0.8
유동파라핀	40.0
스쿠알란	5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
카르복시비닐폴리머	0.2
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔량

십장생(十長生) 관련 10가지 천연물, 즉, 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬을 추출하여 이를 화장료에 도입시킴으로써, 상기 추출물의 자외선으로부터의 세포 보호능, 세포 증식능 및 우수한 보습능을 통해, 피부 주름 완화, 탄력 증강 및 보습능 회복에 복합적으로 작용하는피부 노화 방지 등의 효능을 제공할 수 있다.

Claims

십장생(十長生)과 관련된 10가지 천연물인 솔싹, 영지버섯, 알부틴, 녹용, 자라, 게르마늄, 로얄제리, 홍삼, 연어알 및 레몬을 혼합 추출하여 얻은 혼합추출물을, 건조 중량으로써 0.01~7중량%의 비율로 함유함을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 천연물들의 함량비가 각각의 건조중량비로 솔싹 5∼15%, 영지버섯 10∼15%, 알부틴 1∼5%, 녹용 15∼25%, 자라 15∼20%, 게르마늄 0.0001∼0.0003%, 로얄제리 10∼15%, 홍삼 5∼15%, 연어알 3∼10% 및 레몬 10∼15%임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 천연물 혼합 추출물은 5~37℃에서 용매에 1~15일간 침적시켜 추출한 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 천연물 혼합 추출물은 용매를 가해 50~95℃에서 3~20시간 가열하여 추출한 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 3항 내지 4항에 있어서, 추출에 사용된 용매는 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜 , 프로필렌글리콜 및 글리세린으로 구성된 그룹으로부터 선택된 1종 이상임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 추출물이 자외선으로부터 세포 보호용, 세포 증식용 또는 보습용으로 사용됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 화장료가 화장수(스킨로션), 영양로션, 영양크림, 맛사지 크림 또는 영양에센스로 제형화됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.
솔싹 추출물 5∼15%, 영지버섯 추출물 10∼15%, 알부틴 추출물 1∼5%, 녹용 추출물 15∼25%, 자라 추출물 15∼20%, 게르마늄 추출물 0.0001∼0.0003%, 로얄제리 추출물 10∼15%, 홍삼 추출물 5∼15%, 연어알 추출물 3∼10% 및 레몬 추출물 10∼15%로 이루어진 천연 추출물의 혼합물을 건조 중량으로써 0.01~7중량%의 비율로 함유함을 특징으로 하는 화장료 조성물.