KR19990028614A - Treatment of Rheumatoid Arthritis with Low Dose Type II Collagen - Google Patents

Abstract

본 발명은 적은 투여량의 타입 II 콜라겐으로의 자기 면역성 관절염 및/또는 류마티스성 관절염의 치료 방법에 속하는 것이다.The present invention belongs to a method of treating autoimmune arthritis and / or rheumatoid arthritis with low dose Type II collagen.

Description

저투여량의 타입 Ⅱ 콜라겐에 의한 류마티스성 관절염의 치료 방법Treatment of Rheumatoid Arthritis with Low Dose Type II Collagen

콜라겐은 인체 또는 포유동물의 몸의 구조적 지지체로 가장 일반적인 단백질이다. 콜라겐의 기본 성분 단위는 트로포콜라겐 단백질이다. 트로포콜라겐은 동일한 크기의 세 가지 폴리펩티드 사슬로 구성되어 있다. 이같은 사슬들은 각각 서로 주위로 감겨서 초나선형(superhelical) 케이블이나 삼중-꼬임 나선형 로드를 형성한다. 트로포콜라겐에서 세 가지 사슬 각각이 약 1,000 개의 아미노산 잔기로 이루어진다.Collagen is the most common protein as a structural support for the human or mammal's body. The basic component unit of collagen is the tropocollagen protein. Tropocollagen is composed of three polypeptide chains of equal size. Each of these chains is wound around each other to form a superhelical cable or triple-twist helical rod. In tropocollagen, each of the three chains consists of about 1,000 amino acid residues.

일부 다양한 유형의 콜라겐 단백질은 통상적으로 독특하고 다양한 아미노산 조성물과 길이로서 인지된다. 타입 I 콜라겐 알파-1(I) 폴리펩티드 사슬 두 가지와 알파-2 폴리펩티드 사슬 한 가지로 구성되었다. 타입 I 콜라겐은 대부분 피부 조직, 건, 뼈의 지지 구조에서 및 안구의 각막에서 발견된다. 타입 II 콜라겐은 알파-1(II) 유형의 폴리펩티드 사슬 세 가지로 이루어지며, 주로 관절의 연골에서, 추간판(椎間板)내에서 및 눈에서의 초자체에서 발견된다. 타입 III 콜라겐은 세 가지의 알파-1(III) 폴리펩티드 사슬로 이루어지며, 태아 피부, 심장 혈관게 및 눈의 세망 섬유에서 발견된다. 타입 IV 콜라겐은 두 가지의 알파-1(IV) 폴리펩티드 사슬과 한 가지의 알파-2(IV) 폴리펩티드 사슬의 혼합물을 갖으며, 주로 기초막에서 발견된다. 타입 V 콜라겐은 두 가지의 알파-1(V) 폴리펩티드 사슬과 한 가지의 알파-2(V) 폴리펩티드 사슬을 갖으며, 예컨대 태반과 피부에서 발견된다. 그 외 유형의 콜라겔들은 서로 유사한 구조적 차이를 갖는다.Some various types of collagen proteins are commonly recognized as unique and varying amino acid compositions and lengths. It consists of two type I collagen alpha-1 (I) polypeptide chains and one alpha-2 polypeptide chain. Type I collagen is found mostly in the supporting structures of skin tissues, tendons, bones, and in the cornea of the eye. Type II collagen consists of three polypeptide chains of the alpha-1 (II) type and is found mainly in cartilage of the joints, in the intervertebral discs and in the vitreous body in the eye. Type III collagen consists of three alpha-1 (III) polypeptide chains and is found in fetal skin, cardiovascular crabs, and reticulum fibers of the eye. Type IV collagen has a mixture of two alpha-1 (IV) polypeptide chains and one alpha-2 (IV) polypeptide chain and is found primarily in the basal membrane. Type V collagen has two alpha-1 (V) polypeptide chains and one alpha-2 (V) polypeptide chain, such as found in the placenta and skin. The other types of collagen have similar structural differences with each other.

류마티스성 관절염은 세포 매개성 자기 면역 질환, 즉 면역계가 신체 자체 조직을 외부 조직으로 오인하여 이에 대한 이상 면역 반응을 개시하는 증상이다. 류마티스성 관절염은 연골의 파고와 골질의 부식을 야기시켜, 말초 관절의 구조적 변형을 초래하는 영구적인 염증성 활막염으로 특징지워진다. 타입 II 콜라겐이 주요 성분인 관절의 연골을 함유하는 관절들이 특히 잘 걸린다.Rheumatoid arthritis is a cell mediated autoimmune disease, a condition in which the immune system misdiagnoses the body's own tissues as external tissues and initiates an abnormal immune response to them. Rheumatoid arthritis is characterized by permanent inflammatory synovitis that causes cartilage crest and erosion of the bone, resulting in structural deformation of the peripheral joint. Joints that contain cartilage of the joints, in which type II collagen is a major component, are particularly well known.

류마티스성 관절염은 관절의 팽창, 염증, 경직 및 특히 구부릴 때의 고통을 수반한다. 관절염의 오래된 단계에서는, 단지 약간의 관절 움직임으로부터도 끔직한 고통이 야기되기도 한다. 상당 부분의 환자들은 특히 콜라겐과의 반응 및/또는 콜라겐에 대한 이상 체액 반응을 갖는 CD4+ 유형의 T-세포를 갖는다.Rheumatoid arthritis involves swelling, inflammation, stiffness of the joints and especially pain when bending. In the old stages of arthritis, terrible pain can be caused by only a slight joint movement. A significant proportion of patients have CD4 + type T-cells, in particular, which have a response to collagen and / or an abnormal humoral response to collagen.

관절염에 대한 현재의 치료 방법은 비특정성 세포독성의 면역억제제를 사용하는 것을 포함한다. 이 약물들은 전체 면역게를 억제시키며, 이상 자기 면역 반응을 선택적으로 억젠시키는 것이 불가능하다. 장기간에 걸친 이같은 면역계의 전체적인 억제는 감염에 대한 위험서을 증가시킨다. 이러한 면역 억제제의 예로는 메토트렉세이트, 사이클로포스프아미드, 이무란(아자티오프린) 및 사이클로스포린 A를 들 수 있는데, 이에 국한되는 것은 아니다.Current treatment methods for arthritis include the use of nonspecific cytotoxic immunosuppressants. These drugs suppress the overall immune crab and it is impossible to selectively suppress the abnormal autoimmune response. The overall suppression of this immune system over long periods of time increases the risk of infection. Examples of such immunosuppressants include, but are not limited to, methotrexate, cyclophosphamide, Imuran (azathioprine) and cyclosporin A.

추가적으로, 이같은 비특정성의 세포독성 면역억제제에 의한 장기 치료는 그 어떤 악성 종양의 발달, 신장 손상, 골수 억제, 당뇨병 및 간기능 이상으로의 경향성이 증가되는 것을 포함하는, 유독성의 부작용을 수반한다. 더욱이, 세포독성의 면역 억제제 치료법은 단지 질병의 전개 속도를 억제시킬 뿐이고, 이 치료를 중지한 후에는 가속화된 속도로 재발한다. 예를 들면, 이러한 약물 투여를 중지한 후에 약 6 주 정도가 경과하면, 환자들의 병세는 치료 시작 이전과 같은 단계로 악화된다. 추가로, 이같은 약물들의 효과는 자기-한정성이 있어서, 약 2∼3 년이 경과한 후에는 그 유효성이 서서히 감소된다.In addition, long-term treatment with such nonspecific cytotoxic immunosuppressants involves side effects of toxicity, including increased development of any malignant tumor, kidney damage, bone marrow suppression, diabetes and liver dysfunction. Moreover, cytotoxic immunosuppressive therapy only inhibits the rate of development of the disease and relapses at an accelerated rate after stopping the treatment. For example, about six weeks after stopping such drug administration, the patients' condition worsens to the same stage as before the start of treatment. In addition, the effects of these drugs are self-limiting, so that after about two to three years, their effectiveness slowly decreases.

프레드니손과 메틸프레드니솔론과 같은 스테로이드 화합물(역시, 비특정성 면역억제제이며, 항염성 약물임)도 증상 완화용으로 사용된다. 하지만, 스테로이드류도 역시 장기 사용과 관련하여 명백한 유독성 부작용을 수반한다.Steroid compounds such as prednisone and methylprednisolone (also non-specific immunosuppressive and anti-inflammatory drugs) are also used to relieve symptoms. However, steroids also have obvious toxic side effects associated with long-term use.

따라서, 관절염에 대한 종래의 치료법은 한정적인 유효성을 갖고, 명백한 유독성 부작용을 수반하며, 장기간 동안을 지속적으로 사용할 수 없어, 이들의 유효성이 추가로 제한된다. 류마티스성 관절염은 미국내에서 매년 2 백만 인구 정도가 앓고 있다. 따라서, 상기한 바와 같은 단점 중의 한 가지 이상을 겪지 않을 수 있도록 하는, 인체 류마티스성 관절염용 신규 치료법과 신규한 치료 조성물이 절실히 요구되고 있다.Thus, conventional therapies for arthritis have limited effectiveness, are accompanied by obvious toxic side effects, and cannot be used continuously for long periods of time, further limiting their effectiveness. Rheumatoid arthritis affects about 2 million people annually in the United States. Therefore, there is an urgent need for new therapies and novel therapeutic compositions for human rheumatoid arthritis, which can avoid one or more of the above disadvantages.

관절염에 대한 또다른 치료법은 본 발명자들에 의한 경구 항원 내성 치료법이 있다. 이는 특히 자기 면역 질환으로부터 초래되는 자기 면역 반응을 선택적으로 억제시켜서 다른 면역 기능을 본질적으로 손상시키지 않을 수 있는 한 가지 이상의 조직 특정 항원(즉, 자기 면역 공격 하의 조직에서만 발생하는 항원)을 경구 투여하는 것이다.Another treatment for arthritis is the oral antigen resistance treatment by the inventors. It is particularly effective for oral administration of one or more tissue specific antigens (ie, antigens that occur only in tissues under autoimmune attack) that may selectively inhibit the autoimmune response resulting from autoimmune diseases and thereby not essentially impair other immune functions. will be.

이같은 접근법에 유용한 항원들에는 자기 항원, 즉 자체가 자기 면역 공격의 대상이 되는 조직 특정 항원들이 포함된다. 역시 조직 특정적인(하지만, 자기면역 공격의 표적은 아닌), 순수한 방관자(bystander) 항원들도 형질 전환 생장 인자-베타(TGF-β), 인터로이킨-4 또는 인터로이킨-10과 같은 면역 조절 물질의 방출을 통해 면역 억제 활성이 발휘되는 감염 조직에 대해 표적이 된 억제자 T-세포를 도출시킬 수 있는 능력을 갖는다. 이같은 면역 조절 물질들은 차례로 감염 조직 부근에 농축된 모든 면역 세포들을 하향 조절함으로써, 그 부위에서의 면역 반응을 억제시킨다. 방관자 항원들에는 (i) 자기 면역 공격의 표적이 그 자체가 아니며, (ii) 억제자 T-세포의 도출을 통해 필요한 억제 활성도를 갖는, 즉 숙주의 T-세포에 의해 인식되는 자기 항원들이 한정되는 부분없이 포함된다.Antigens useful in this approach include self antigens, that is, tissue specific antigens that are themselves subject to an autoimmune attack. Pure bystander antigens, which are also tissue-specific (but not the target of autoimmune attack), are also immunomodulators such as transforming growth factor-beta (TGF-β), interleukin-4, or interleukin-10. It has the ability to elicit targeted suppressor T-cells against infected tissues that exert immunosuppressive activity through release of. These immunomodulatory substances in turn down regulate all immune cells concentrated near the infected tissue, thereby suppressing the immune response at that site. Bystander antigens include (i) not the target of autoimmune attack by itself, and (ii) self antigens that have the necessary inhibitory activity through derivation of suppressor T-cells, ie recognized by T-cells of the host. It is included without being part.

본 발명자들의 연구 전까지는, 관절염에 대한 경구 항원 내성 치료법이 동물의 인위적으로 유도된 관절염 유사 질환에 대해서만 시도되어왔다(에주번트성 관절염과 콜라주 유도성 관절염: adjuvant arthritis and collage-induced arthritis).Until our study, oral antigen resistance therapies for arthritis have been attempted only for artificially induced arthritis-like diseases in animals (adjuvant arthritis and collage-induced arthritis).

설치 동물의 경우에는, 콜라겐은 다만 질병 유도를 방지할 뿐이며, 이미 유도된 질병에 대해서는 효과가 최소한이거나 전혀 없다. 관절염에 걸린 인체에 대해서는 경구 항원 내성화가 시도되지 않았다.In rodents, collagen only prevents disease induction and has minimal or no effect on already induced disease. No oral antigen tolerance has been attempted for humans with arthritis.

Weiner 등의 미국 특허 공보 제 5,399,347 호에는 인체의 관절염을 치료하기 위해 타입 II 콜라겐을 1 일당 50 μg에서 10 mg, 바람직하게는 100 μg에서 500 μg 투여하는 것이 개시되어 있다. 상기 '347 특허의 발명이 이루어졌을 당시에는, 1 일당 50 μg의 투여량이 류마티스성 관절염을 유효하게 치료하기 위해 인체에 투여되는 활성 성분의 극소량이라고 여겨졌다. 하지만, 이제는 류마티스성 관절염을 앓는 인체를 치료하는 데 보다 유효하고 개선된 방법이 타입 II 콜라겐을 1 일당 5 μg, 전형적으로는 10∼25 μg, 바람직하게는 20 μg 정도로 적게 경구 투여함으로써 얻어진다는 것이 발견되었다.US Patent Publication No. 5,399,347 to Weiner et al. Discloses administration of type II collagen from 50 μg to 10 mg, preferably from 100 μg to 500 μg per day to treat arthritis in the human body. At the time of the invention of the '347 patent, a dose of 50 μg per day was considered to be the smallest amount of active ingredient administered to the human body to effectively treat rheumatoid arthritis. However, now more effective and improved methods for treating humans with rheumatoid arthritis are obtained by oral administration of type II collagen as low as 5 μg per day, typically 10-25 μg, preferably 20 μg. Found.

1 일당 타입 II 콜라겐 20 μg이 좀더 많은 투여량보다 류마티스성 관절염에 더욱 효과적인 치료법이라는 발견은 매우 경이적인 것이며 예기치 못한 것이다. 고전적인 약물학에서는 투여량-반응의 상관 관계가 좀더 많은 투여량의 약학적인 작용제가 반응이 정체 상태에 다다를 때까지 좀더 큰 반응을 제공한다고 단정하였다. 적은 투여량일수록 적은, 크지 않은 반응을 제공하는 것이 당연안 것이었다. 이는 특히, 단백질의 경구 투여가 포함되는 본 발명의 경우에 예측되어졌었다. 단백질인 약학적인 작용제들 대부분은 인체의 소화계의 강산 환경을 경유하는 경로로부터 야기되는, 공지된 단백질 파괴 효과 때문에, 주사를 통해 투여되어야만 하였다(예컨대, 인슐린). 따라서, 경구 투여되는 타입 II 콜라겐이 소량일수록 류마티스성 관절염 치료에 유용하다는 것은 매우 경이적이며 예기치 못한 것이다.The discovery that 20 μg of type II collagen per day is a more effective treatment for rheumatoid arthritis than a higher dose is surprising and unexpected. Classical pharmacology concluded that the dose-response correlation correlates with higher doses of pharmaceutical agents that provide a larger response until the response reaches a plateau. It was no wonder that the lower the dose, the smaller the response. This was especially expected in the case of the present invention involving the oral administration of proteins. Most of the pharmaceutical agents that are proteins had to be administered by injection (eg insulin) because of the known protein disrupting effects resulting from the pathway via the strong acid environment of the human digestive system. Therefore, it is very surprising and unexpected that small amounts of type II collagen administered orally are useful for the treatment of rheumatoid arthritis.

발명의 목적Purpose of the Invention

본 발명의 목적은 류마티스성 관절염을 포함하지만, 이에 국한되지는 않는 인체의 자기 면역성 관절염의 치료법을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a method for the treatment of autoimmune arthritis in the human body, including but not limited to rheumatoid arthritis.

본 발명의 다른 목적은 인체내에서 연골을 공격하여 연골하의 골질 손상을 야기시키는 이상 면역 반응을 특정적으로 억제시키는 것이다.Another object of the present invention is to specifically inhibit the aberrant immune response that attacks cartilage in the human body causing subchondral bone damage.

본 발명의 추가 목적은 종래의 치료 방법과 관련된 것 중의 한 가지 이상과 같은 인체내에서 바람직하지 못한 부작용이 없는 류마티스성 관절염의 임상 치료법을 제공하는 것이다.It is a further object of the present invention to provide a clinical treatment for rheumatoid arthritis which is free of undesirable side effects in the human body, such as one or more of those associated with conventional methods of treatment.

본 발명의 다른 추가 목적은 인체내에서 관절의 고통, 팽창 및 경직성 중의 한 가지 이상과 같은 관절염 관련 증상을 현저히 감소시키는 것이다.Another further object of the present invention is to significantly reduce arthritis related symptoms such as one or more of joint pain, swelling and stiffness in the human body.

본 발명의 또다른 목적은 인체의 류마티스성 관절염의 치료에 유용한 의약학적 배합물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical combination useful for the treatment of rheumatoid arthritis in the human body.

본 발명의 또다른 추가 목적은 타입 II 콜라겐을 1 일당 5∼25 μg, 바람직하게는 10∼25 μg으로 치료가 필요한 인체에 경구 투여함으로써 인체의 류마티스성 관절염을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.A still further object of the present invention is to provide a method for treating rheumatoid arthritis in a human body by orally administering type II collagen to a human body in need of treatment at 5-25 μg, preferably 10-25 μg per day.

발명의 요약Summary of the Invention

상기한 바와 같은 목적 중의 한 가지 이상이 협력근과 함께 또는 없이 콜라겐 단백질 유효량으로 이루어진 경구 투여용 의약학적 배합물과 투여 형태을 제공하고, 상기 배합물의 유효량을 감염된 인체에 경구 투여하는 것으로 이루어진 자기 면역성 관절염 치료용 방법을 제공함으로써, 인체내에서 자기 면역성 관절염을 치료 방법이 달성되었다.One or more of the above objectives provides an oral pharmaceutical combination and dosage form comprising an effective amount of collagen protein, with or without cooperating muscle, and treating an autoimmune arthritis comprising orally administering an effective amount of the combination to an infected human body. By providing a method for treating autoimmune arthritis in a human body, a method has been achieved.

본 발명은 인체의 자기면역성 관절염의 치료 방법에 관한 것이다. 구체적으로는, 본 발명은 저투여량은 타입 II 콜라겐(type II collagen)을 인체에 경구 투여하여 류마티스성 관절염에 수반되는 자기 면역 반응의 특정 억제 작용을 유도하는 것이다. 본 발명은 또한 타입 II 콜라겐으로 이루어진 인체에서의 관절염 치료에 유용한 경투 투여형에 관한 것이기도 하다.The present invention relates to a method for treating autoimmune arthritis in the human body. Specifically, the low dose of the present invention is to orally administer type II collagen to the human body to induce a specific inhibitory action of the autoimmune response accompanying rheumatoid arthritis. The invention also relates to transdermal dosage forms useful for the treatment of arthritis in the human body consisting of type II collagen.

도 1은 24 주의 기간 동안에 걸쳐 치료하고자 하는 인원 중에서 타입 II 콜라겐의 투여량의 범위의 치료에 대한 반응하는 환자의 백분율을 도시한 그래프이다.1 is a graph depicting the percentage of patients responding to treatment with a range of dosages of type II collagen among subjects to be treated over a period of 24 weeks.

도 2는 24 주의 기간 동안에 걸쳐 치료하고자 하는 인원 중에서 타입 II 콜라겐의 투여량 범위로의 치료에 대한 반응이 나타나지 않은 환자의 백분율을 도시한 그래프이다.FIG. 2 is a graph depicting the percentage of patients who are not treated for treatment in the dosage range of type II collagen among the subjects to be treated over a 24 week period.

도 3은 24 주의 기간 동안에 걸쳐 치료하고자 하는 인원 중에서 타입 II 콜라겐의 투여량 범위에 대한 반응에서 민감성 관절의 수에서의 기준선으로부터의 평균 변화를 도시한 그래프이다.FIG. 3 is a graph depicting the average change from baseline in the number of sensitive joints in response to a dosage range of type II collagen among subjects to be treated over a period of 24 weeks.

도 4는 24 주의 기간 동안에 걸쳐 치료하고자 하는 인원 중에서 타입 II 콜라겐의 투여량의 범위로 치료된 환자에서의 의사의 전신 스코어에서의 개선 정도를 백분율로 도시한 그래프이다.FIG. 4 is a graph depicting the percentage of improvement in the physician's systemic score in patients treated with a range of dosages of type II collagen among the subjects to be treated over a 24 week period.

도 5는 24 주의 기간 동안에 걸쳐 치료하고자 하는 인원 중에서 타입 II 콜라겐의 투여량의 범위로 치료된 환자에서의 환자의 전신 스코어에서의 개선 정도를 백분율로 도시한 그래프이다.FIG. 5 is a graph depicting the percentage of improvement in the patient's systemic score in patients treated with a range of doses of type II collagen among the subjects to be treated over a 24 week period.

본문에 인용된 모든 특허 공보, 특허 공개 공보, 및 간행물은 참고문헌으로서 전문을 여기에 첨부하였다. 불일치하는 경우에는, 여기에 포함된 정의와 해석을 포함하는 본문의 기재 내용이 유효할 것이다.All patent publications, patent publications, and publications cited herein are hereby incorporated by reference in their entirety. In case of inconsistency, the content of the text including the definitions and interpretations contained herein will be valid.

정의Justice

본문에 사용되는 다음의 용어들 각각은 그 의미를 다음에 속하는 것으로 해석되어야만 한다.Each of the following terms used in the text should be interpreted as meaning belonging to the following.

"치료법"은 관절염의 발병과 발현을 방지 및 관절염에서 수반되는 신체 자체의 연골에 대한 이상 면역 반응의 발병 및 발현을 방지하는 예방적 방법 모두를 포함한다. 이 용어는 또한 신체 자체의 콜라겐 또는 일반적으로 연골에 대한 이상(세포의 및/또는 체액의) 면역 반응의 억제 또는 경감, 및 자기면역성 관절염의 발병(즉, 임상 징후) 이후의 임상 증상의 경감, 저지 또는 제거를 포함하는 것이다."Treatment" includes both preventive methods of preventing the onset and expression of arthritis and preventing the onset and expression of an adverse immune response to cartilage of the body itself accompanying arthritis. The term also refers to the suppression or alleviation of abnormal (responsive and cellular) immune responses to collagen or cartilage of the body itself, and to the reduction of clinical symptoms following the onset of autoimmune arthritis (ie, clinical signs), To impede or eliminate.

"포유류"는 면역계를 갖고 자기 면역 질환에 감염되기 쉬운 그 어떤 유기체가 된다. 이같은 용어는 인체를 포함하는 것이다.A "mammal" is any organism that has an immune system and is susceptible to autoimmune diseases. This term includes the human body.

"자기 면역 질환"은 면역계가 포유류내의 외부 물질들 및/또는 포유류내의 자가 이식 조직이나 물질 및/또는 자가 이식 조직이나 물질을 구별하여, 그 결과로서, 자가 이식 조직과 물질들이 외부 물질이라면 이들을 치료하고 이에 대한 면역 반응을 개시하는 데 실패하는, 포유류의 면역계의 기능 부전으로서 정의된다."Autoimmune disease" refers to the immune system distinguishing foreign substances in mammals and / or autologous tissues or substances and / or autologous tissues or substances in mammals and, as a result, treating autologous tissues and substances if they are foreign substances. And failure of the immune system in mammals to fail to initiate an immune response to it.

T-세포 매개, 또는 T-세포 종속 자기 면역 질환은 T-세포에 의한 면역 공격에 의해 매개되거나, T-세포 성분을 갖는 질환이다. 두 가지 경우 모두에서, 이 질환은 감염된 기관이나 조직의 염증으로 특징지워진다.T-cell mediated, or T-cell dependent autoimmune disease is a disease mediated by an immune attack by T-cells or having a T-cell component. In both cases, the disease is characterized by inflammation of the infected organ or tissue.

"협력근"은 콜라겐 단백질과 함께 경구 투여될 경우에 관절염의 임상적 및/또는 역사상 징후의 억제 작용을 증대시키거나 증진시키는 물질로서 정의된다. 전술한 문장, 및 본문의 그 외의 내용에서 사용된 바와 같이, "…과 함께(in conjunction with)"(또한, 여기서 "…과 공동으로(in association with)")는 타입 II 콜라겐 단백질의 경구 투여 이전이나 동시에, 또는 이후를 의미하는 것이다. 물론, 연합 물질의 투여는 먼저 투여되는 물질의 상관 효과가 사라질 정도의 긴 시간 간격으로 콜라겐의 투여보다 앞서 투여되거나 후속으로 투여되어서는 안된다. 따라서, 협력근은 대개 콜라겐 단백질의 이전이나 이후의 약 24 시간, 바람직하게는 약 1 시간 이내로 투여되어야만 한다."Cooperative muscle" is defined as a substance that, when orally administered with collagen protein, enhances or enhances the inhibitory action of clinical and / or historical signs of arthritis. As used in the foregoing sentences, and elsewhere in the text, oral administration of type II collagen protein is "in conjunction with" (also "in association with" here). It means before, at the same time, or after. Of course, the administration of the associated agent should not be administered prior to or subsequent to the administration of collagen at long time intervals such that the correlation effect of the first administered substance disappears. Thus, the cooperator should usually be administered within about 24 hours, preferably about 1 hour, before or after the collagen protein.

"경구" 투여에는 경구, 장내 또는 위내 투여가 포함된다. 위를 우회하지 않는 경구 투여가 바람직하다."Oral" administration includes oral, enteric or intragastric administration. Oral administration without bypassing the stomach is preferred.

본 발명은 타입 II 콜라겐을 극소량의 투여량으로 경구 투여하는 것이 인체의 류마티스성 관절염을 치료 및 억제하기에 특히 유효한 방법이라는 발견과 확증을 기초로 하는 것이다. 따라서, 다음에 입증되는 바와 같이, 타입 II 콜라겐 5∼25 μg을 매일 경구 투여하는 것이 인체의 류마티스성 관절염의 치료에 유효하다. 본 발명의 조성물과 방법은 종래의 치료용이나 완화용 작용제 및 기법과 관련된, 상기한 바와 같은 단점을 갖지 않는다.The present invention is based on the findings and confirmation that oral administration of type II collagen in very small doses is a particularly effective method for treating and inhibiting rheumatoid arthritis in the human body. Thus, as demonstrated below, daily oral administration of 5-25 μg of type II collagen is effective for the treatment of rheumatoid arthritis in humans. The compositions and methods of the present invention do not have the disadvantages described above with respect to conventional therapeutic or palliative agents and techniques.

이제, 류마티스성 관절염에서의 인체의 콜라겐에 대한 면역 반응의 억제 작용을 달성하기 위한 바람직한 방법이 정제된 또는 고도로 정제된 용해된 타입 II 콜라겐 단백질을 약 5∼25 μg, 바람직하게는 10∼25 μg 정도로 매일 경구 투여하는 것이라는 것이 밝혀졌다. 본 발명에 유용한 콜라겐은 타입 II 콜라겐이다. 바람직하게는, 공지된 방법을 사용하여 용해된 타입 II 콜라겐이 본 발명의 실시에 사용된다. 용해된 콜라겐은 결과 생성물이 생리학적으로 허용되는 산성 pH로 용해될 수 있도록 제조된다. 이러한 물질 중의 한 가지가 Sigma Chemical Co.(St. Louis, MO)에서 "닭 흉골 연골로부터의 시그마 세포 배양 콜라겐 제 2 유형(Sigma Cell Culture Collagen Type II from Chicken Sternal Cartilage)"라는 상표명으로 시판되고 있다. 콜라겐의 투여는 단일 투여 형태나 다중 투여 형태로 수행될 수도 있다. 바람직하게는, 타입 II 콜라겐 단백질 20 μg의 일일 투여량으로 매일 경구 투여된다.Now, a preferred method for achieving the inhibitory action of the body's immune response to collagen in rheumatoid arthritis is about 5-25 μg, preferably 10-25 μg of purified or highly purified dissolved type II collagen protein. It was found to be oral administration daily. Collagen useful in the present invention is type II collagen. Preferably, type II collagen dissolved using known methods is used in the practice of the present invention. Dissolved collagen is prepared so that the resulting product can be dissolved at a physiologically acceptable acidic pH. One such material is available from Sigma Chemical Co. (St. Louis, Mo.) under the trade name "Sigma Cell Culture Collagen Type II from Chicken Sternal Cartilage." . Administration of collagen may be carried out in a single dosage form or in multiple dosage forms. Preferably, it is administered orally daily at a daily dose of 20 μg of type II collagen protein.

추가로, 협력근은 타입 II 콜라겐의 유효성을 증진시키기 위해 치료에 병용할 수 있다. 협력근은 면역 반응을 Th-2 유형으로 편향시키는, T-세포를 Th-2-유형 T-세포로 선택적으로 분화시키는 물질이다. 본 발명에 사용되는 협력근의 예에는E. coli및Salmonella의 다양한 아유형(LPS, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, Difco, Detroit, MI; BIOMOL Res. Labs., Plymouth, PA)과 같은 광범위한 그램 음성 박테리아 박테리아성 지방다당류, 리피드 A(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO; ICN Biochemicals, Cleveland, OH; Polysciences, Inc., Warrington, PA) 및 Braun, V.,Biochim, Biophys, Acta 435:-337, 1976에 개시된 바와 같이 얻을 수 있는 트리팔미토일-S-글리카릴시스테인일-세릴-세린(P₃C55)에 공유 결합된 펩티드와 같은 면역 조절성 지방 단백질이 포함되는데, 이에 국한되지 않는다. LPS가 바람직하며, 리피드 A가 특히 바람직하다. 리피드 A는 완전한 LPS 분자보다 독성이 적기 때문에, 본 발명에 사용하는 데 특히 바람직하다. 본 발명에 사용되는 LPS는 그램음성 박테리아로부터 추출되어 Glanes 등의 방법을 이용하여 정제될 수 있다(Eur. J. Biochem. 9:245, 1969). 본 발명을 수행하는 데 사용될 수 있는 추가적인 협력근은 인터페론 타입 I, 인터로이킨-4 및 인터로이킨-10(PCT/US95/04120 및 PCT/US95/04512, 참고문헌으로 첨부된 여기에 첨부된 기재물과 그에 해당되는 미국 출원 공개 공보 제 08/420,980 호와 제 08/420,979 호에 개시된 바와 같이)이다.In addition, the cooperator may be combined with treatment to enhance the effectiveness of type II collagen. Cooperative muscles are substances that selectively differentiate T-cells into Th-2-type T-cells, which bias the immune response to the Th-2 type. Examples of cooperative muscles used in the present invention include various subtypes of E. coli and Salmonella (LPS, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, Difco, Detroit, MI; BIOMOL Res. Labs., Plymouth, PA) A wide range of Gram-negative bacteria, bacterial lipopolysaccharides, lipid A (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO; ICN Biochemicals, Cleveland, OH; Polysciences, Inc., Warrington, PA) and Braun, V., Biochim, Biophys, Immunomodulatory fatty proteins such as peptides covalently bound to tripalmitoyl-S-glycarylcysteinylyl-seryl-serine (P ₃ C55), obtainable as disclosed in Acta 435 : -337, 1976, It is not limited. LPS is preferred, and lipid A is particularly preferred. Lipid A is particularly preferred for use in the present invention because it is less toxic than complete LPS molecules. LPS used in the present invention can be extracted from Gram-negative bacteria and purified using the method of Glanes et al. ( Eur. J. Biochem. 9 : 245, 1969). Additional cooperative muscles that may be used to carry out the invention include interferon type I, interleukin-4 and interleukin-10 (PCT / US95 / 04120 and PCT / US95 / 04512, the disclosures attached hereby incorporated by reference). And their corresponding U.S. Patent Application Publications 08 / 420,980 and 08 / 420,979.

배합물Formulation

본 발명은 또한 타입 II 콜라겐이나 산성-용해된 타입 II 콜라겐 약 5∼25 μg, 바람직하게는 10∼25 μg이 캡슐, 정제, 분말 또는 액상 유형으로 이루어진 경구용 의약학적 배합물과 투여 형태를 포함한다. 산성 pH에서 수용성인, 닭의 타입 II 콜라겐 단백질은 판매원으로부터 구입하거나(Sigma Chemical Company, St. Louis, MO), Trentham, D. 등의J. Exp. Med.146:857, 1977에 개시된 바와 같은 방법에 의해 정제될 수 있다. 이 배합물에는 임의로 상기 공동-출원된 미국 특허 출원에 개시된 바와 같은 협력근을 관절염의 임상 증상을 치료하는 데 유효한 양으로 추가 함유할 수도 있다. 협력근은, 타입 II 콜라겐과 함께 투여될 경우에, 면역 공격 하에서 콜라겐 조직 부근에서 PGE(프로스타글란딘-E), TGF-β, 인터로이킨-4 및 인터로이킨-10과 같은 억제성 시토킨류를 추가로 증가시킬 수 있다. 산성 pH로 가용된 타입 II 콜라겐(예컨대, 0.1 M의 아세트산에 용해된 타입 II 콜라겐)을 함유하는 액상 수용액 배합물이 바람직하다. pH 조절제는 그 어떤 의약적으로 허용되는 산성 작용제가 될 수 있으며 완충제가 포함될 수도 있다. 바람직한 pH 범위는 2.5∼5.0이다. 또한, 고체 조성물도 투여될 수 있는데, 바람직하게는 0.1 M 아세트산과 같은 의약적으로 허용되는 산성 수용액 배지에 용해된 후에 투여될 수 있다.The invention also encompasses oral pharmaceutical combinations and dosage forms in which about 5-25 μg, preferably 10-25 μg, of type II collagen or acid-dissolved type II collagen is of capsule, tablet, powder or liquid type. . Type II collagen proteins in chickens, which are water soluble at acidic pH, can be purchased from a vendor (Sigma Chemical Company, St. Louis, Mo.) or by J. Exp. Med. 146: 857, 1977, by the method as disclosed. This formulation may optionally further contain a cooperating muscle as disclosed in the co- filed US patent application in an amount effective to treat clinical symptoms of arthritis. The cooperative muscles, when administered with type II collagen, additionally inhibit inhibitory cytokines such as PGE (prostaglandin-E), TGF-β, interleukin-4 and interleukin-10 in the vicinity of collagen tissues under immune challenge. Can be increased. Preferred are aqueous liquid formulations containing type II collagen (eg, type II collagen dissolved in 0.1 M acetic acid), soluble in acidic pH. The pH adjusting agent may be any pharmaceutically acceptable acidic agent and may include a buffer. Preferable pH range is 2.5-5.0. Solid compositions may also be administered, preferably after being dissolved in a pharmaceutically acceptable acidic aqueous medium such as 0.1 M acetic acid.

본문 전반에 걸쳐서, 본 발명의 치료법에 따른 관절염 증상 한 가지에서라도 나타나는, 임상적이나 통계학적으로 명백한 그 어떤 감쇠 현상이 본 발명의 범주에 속하는 것이라고 해석되어질 것이다. 이러한 증상들에는 관절 민감(고통스러운 관절), 관절 팽창, AM 경직성, 파악 강도 감소, 도보의 부진성이 포함된다. 정상인에서는, 첫 번째 세 가지 상기 증상들이 없고, 50-보폭 도보가 9 초보다 적게 걸리며, 어른 강도는 200 mmHg보다 커야만 된다(비록 강도가 연령, 성별 및 신체적 조건에 따라 다르긴 하지만). 임상적으로 명백한 감쇠 현상은 환자(민감성이나 일반적인 안녕의 경우에서와 같이) 및/또는 의사(관절 팽창의 경우에서와 같이)에게 인지될 만한 것을 의미한다. 예를 들면, 관절염성 관절 한 가지에서라도 팽창이나 민감성에서의 인지할 만한 차이가 명백하다. 이전에 앓았던 관절에서 행창이나 경직성이 없는 것은 가장 명백한 것이다. 측정이 가능한 인자들에 대해, 50-보폭 도보의 경우에서 1 초의 차이, 또는 강도에 있어서의 5 mmHg 또는 AM 경직성에서의 15 분의 차이가 명백한 것이다.Throughout the text, it will be interpreted that any clinically or statistically obvious attenuation phenomenon that occurs in any one arthritis symptom according to the therapy of the present invention falls within the scope of the present invention. These symptoms include joint sensitivity (painful joints), joint swelling, AM stiffness, decreased grasp strength, and poor walking. In normal people, there are no first three said symptoms, a 50-step walk takes less than 9 seconds, and the adult intensity should be greater than 200 mmHg (although the intensity depends on age, gender and physical condition). Clinically evident attenuation refers to what is noticeable to the patient (as in the case of sensitivity or general well-being) and / or to the physician (as in the case of joint swelling). For example, a noticeable difference in swelling or sensitivity is evident in one arthritic joint. The lack of swelling or stiffness in previously joints is most obvious. For measurable factors, a difference of 1 second in the case of a 50-step walk, or a difference of 15 minutes in 5 mmHg or AM stiffness in intensity is evident.

추가로, 세포 독성 약물이나 그 외의 항염증성 작용제의 투여가 자제될 수 있는 능력도 역시 명백한 것이다. 따라서, 환자가 개선되지 않았다 할 지라도, 그/그녀세포 독성 약물의 명백한 이점을 여전히 받았다고 여겨지거나, 및/또는 항염증성 작용제 투여가 재시작되지 않아도 되며, 환자가 이같은 종래 약물에 의해서와 같은 증상이나 질환의 진행 상태에 놓인다.In addition, the ability to refrain from administering cytotoxic drugs or other anti-inflammatory agents is also apparent. Thus, even if the patient has not improved, it is still believed that he / she has received the clear benefit of the cytotoxic drug, and / or the administration of the anti-inflammatory agent does not have to be restarted, and the patient has no symptoms or disease as with this conventional drug. Is in progress.

본 발명에 의한 타입 II 콜라겐은 경구 투여 형태로 경구 경로를 통해 투여된다. 적절한 경구 투여 형태에는 정제, 캡슐 및 분말이 포함된다. 타입 II 콜라겐 5∼25 μg, 바람직하게는 10∼25 μg의 용액 또는 현탁액(생리학적으로 허용된느 산성 pH로)으로 이루어진 액상 투여형도 역시 사용될 수 있다. 따라서, 바람직한 일례는 내용물이 환자에게 섭취될 수 있는 오렌지 쥬스나 유사한 쥬스에 분산되도록 개방될 수 있는 0.1 M 아세트산에 용해된 타입 II 콜라겐 20 μg을 담고 있는 의약적으로 허용되는 용기로 이루어진다.Type II collagen according to the invention is administered via the oral route in an oral dosage form. Suitable oral dosage forms include tablets, capsules and powders. Liquid dosage forms consisting of a solution or suspension (at physiologically acceptable acidic pH) of 5-25 μg, preferably 10-25 μg, of type II collagen may also be used. Thus, a preferred example consists of a pharmaceutically acceptable container containing 20 μg of type II collagen dissolved in 0.1 M acetic acid which can be opened to disperse in orange juice or similar juice that can be consumed by the patient.

타입 II 콜라겐 5∼25 μg, 바람직하게는 10∼25 μg에 더하여, 본 발명에 의한 각각의 경구 배합물은 이 기술 분야에 기지된 바와 같은 의약적으로 허용되는 담체, 희석제, 충진제, 가용제 또는 유화제과 같은 불활성 성분들, 및 염들을 함유할 수도 있다. 예를 들면, 정제들은 이 기술 분야에서 공지된 고체 담체들을 사용하는 종래 기술 방법들에 의해서 배합될 수도 있다. 본 발명에서 사용되는 캡슐은 젤라틴과 같은 그 어떤 의약적으로 허용되는 물질이나 셀룰로오스 유도체로부터 제조될 수도 있다. 또한, 1985 년 12 월 3 일에 허여된 미국 특허 제 4,55,552 호; 1982 년 1 월 5 일에 허여된 미국 특허 제 4,309,404 호; 및 1982 년 1 월 5 일에 허여된 미국 특허 제 4,309,406 호에 개시된 바와 같이, 경구적으로 투여되는 투여형용으로 지속되는 방출 경구 전달 시스템 및/또는 장 코팅물도 시도되었다In addition to 5-25 μg, preferably 10-25 μg, of type II collagen, each oral combination according to the present invention may be formulated with a pharmaceutically acceptable carrier, diluent, filler, soluble or emulsifying agent as known in the art. Same inert ingredients, and salts. For example, tablets may be formulated by conventional methods using solid carriers known in the art. Capsules used in the present invention may be prepared from any pharmaceutically acceptable substance or cellulose derivative such as gelatin. In addition, US Pat. No. 4,55,552, issued December 3, 1985; US Patent No. 4,309,404, issued January 5, 1982; And sustained release oral delivery systems and / or enteric coatings have also been attempted for orally administered dosage forms, as disclosed in US Pat. No. 4,309,406, issued January 5, 1982.

고체 담체의 예에는 전부, 슈가, 벤토나이트, 실리카 및 그외의 통상적으로 사용되는 담체들이 포함된다. 본 발명의 배합물에 사용될 수도 있는 담체와 희석제의 추가 예에는 식염수, 시럽 덱스트로오스 및 물이 포함되는데, 이에 국한되는 것은 아니다.Examples of solid carriers include all sugars, bentonite, silica and other commonly used carriers. Further examples of carriers and diluents that may be used in the formulations of the present invention include, but are not limited to, saline, syrup dextrose and water.

각각의 투여 형태의 개별 투여량으로 한정되는 활성 성분, 타입 II 콜라겐의 단위 함량은 필수 유효량이 다수의 투여 단위(캡슐이나 정제 또는 그의 배합물과 같은)를 투여함으로써 도달할 수 있기 때문에 그 자체에 유효량을 함유할 필요는 없다. 유효한 투여형의 투여는 단일 투여 형태나 다중 투여 형태가 될 수 있으며, 분해가 가능한 세포간질이나 저장기와 같은 장 코팅물 및/또는 지속되는 방출 메카니즘으로 제공될 수도 있다.The effective amount of the active ingredient, type II collagen, which is limited to the individual dosage of each dosage form, is itself effective because the required effective amount can be reached by administering multiple dosage units (such as capsules or tablets or combinations thereof). It does not need to contain Administration of an effective dosage form may be in a single dosage form or in multiple dosage forms and may be provided by enteric coatings such as degradable interstitial cells or reservoirs and / or sustained release mechanisms.

타입 II 콜라겐이 경구적으로나 장내로 도입될 경우에, 그 외의 섭취 가능한 형태로 혼합되어 고체, 세미-고체 용액, 현탁액 또는 유상액 형태로 섭취될 수도 있다. 또한, 의약적으로 허용 가능한 담체, 향료 증진제, 물, 현탁액제 및 유화제와 혼합하거나 병용할 수도 있다.When type II collagen is introduced orally or enterally, it may be mixed in other ingestible forms and ingested in the form of a solid, semi-solid solution, suspension or emulsion. It may also be mixed or used in combination with a pharmaceutically acceptable carrier, perfume enhancer, water, suspension and emulsifier.

유효량의 협력근, 예컨대 LPS 또는 리피드 A는 타입 II 콜라겐과 배합하여 투여될 수도 있으며, 협력근의 양은 1 일당 약 0.01∼100 mg, 바람직하게는 0.1∼10 mg이 된다.An effective amount of cooperator muscle, such as LPS or Lipid A, may be administered in combination with type II collagen, with the amount of cooperator muscle being about 0.01-100 mg, preferably 0.1-10 mg per day.

류마티스성 관절염을 앓는 환자의 T-세포는 예컨데, 말초 혈액으로부터 채집될 수 있으며, CD8+ 유형의 T-세포들은 정제되어 클론으로 만들어질 수 있다. 그 후에, 타입 II 콜라겐에 대한 반응으로 TGF-β, 인터로이킨-4 또는 인터로이킨-10을 분비하는 이같은 T-세포들을 시험관 내에서 정제하고 클론으로 만들어서 콜라겐 펩티드 분획에 의해(그 존재 하에서) 자극될 경우에 TGF-β(및/또는 다른 억제성 시토킨류)를 분비할 수 있는 그 능력에 대한 테스트를 평가하는 데 사용될 수 있다. 이같은 세포들의 TGF-β, 인터로이킨-4 또는 인터로이킨-10을 분비하는 능력은 예컨대, 시판되는 모노클로날 항체를 이용하는 ELISA에 의해 평가될 수 있다. TGF-β, 인터로이킨-4 또는 인터로이킨-10을 분비하도록 T-세포를 자극하는 콜라겐 펩티드 분획들은 경구 내성일 것이다. 이러한 실험들은 Use of Oral Tolerance to Suppress both the Th-1 and Th-2 Immune Responses and to Suppress Antibody Production이라는 제목의 Chen, Friedman 및 Weiner의 1995 년 6 월 5 일에 출원된 미국 특허 출원 및 1992 년 2 월 28 일에 출원된 미국 특허 공개 공보 제 843,752 호에 개시되어 있다. 인체 T-세포를 정제하고 클론화하는 방법은 1990 년 3 월 30 일에 출원된 미국 특허 출원 제 502,559 호(PCT/US91/02218에 해당됨), 미국 특허 출원 제 08/046,354 호(PCT/US93/03365에 해당됨), 1995 년 4 월 20 일에 출원된 미국 특허 출원 제 08/426,784 호, 및 Allegretta, M. 등의Science247:718∼721, 1990에 개시되어 있다.T-cells of patients with rheumatoid arthritis can be collected from peripheral blood, for example, and CD8 + type T-cells can be purified and cloned. Subsequently, these T-cells secreting TGF-β, interleukin-4, or interleukin-10 in response to type II collagen are purified in vitro and cloned and stimulated (in the presence) by the collagen peptide fraction. Can be used to evaluate a test for its ability to secrete TGF-β (and / or other inhibitory cytokines), if available. The ability of these cells to secrete TGF-β, interleukin-4 or interleukin-10 can be assessed, for example, by ELISA using commercially available monoclonal antibodies. Collagen peptide fractions that stimulate T-cells to secrete TGF-β, interleukin-4 or interleukin-10 will be orally resistant. These experiments are described in US Patent Application, filed June 5, 1995 by Chen, Friedman, and Weiner, entitled Use of Oral Tolerance to Suppress both the Th-1 and Th-2 Immune Responses and to Suppress Antibody Production, and 2, 1992 US Patent Publication No. 843,752, filed May 28. Methods for purifying and cloning human T-cells are described in US Patent Application No. 502,559, filed March 30, 1990 (corresponding to PCT / US91 / 02218), US Patent Application No. 08 / 046,354 (PCT / US93 / 03365), US Patent Application 08 / 426,784, filed April 20, 1995, and Science 247: 718-721, 1990 to Allegretta, M. et al.

다음 실시예는 그 범위를 한정시키지 않고 본 발명을 예시하고자 하는 것이다.The following examples are intended to illustrate the invention without limiting its scope.

실시예 1Example 1

수행된 다음과 같은 연구의 목적을 위해, 환자의 관절염 상태는 주관적인 통증, 전반적인 해부학적 관찰, 신체적 활동의 시간 및 환자에 의해 기재되는 바와 같은 주관적인 안녕도 와 같은 몇가지 다양한 특징을 조합하여 이용함으로써 측정되었다. 전반적인 관찰에는 AM 경직성, 파악 강도 및 팽창된 관절의 수가 포함되고, 치료 이전과 동일한 관절과 비교할 수 있도록, 타입 II 콜라겐 치료 이전과 치료 동안의 관절염성 관절을 의사에 의해 매달 검사하였다.For the purposes of the following studies conducted, the patient's arthritis status is measured by using a combination of several different features, such as subjective pain, general anatomical observation, time of physical activity, and subjective well-being as described by the patient. It became. The overall observations included AM stiffness, grasp strength, and the number of swollen joints, and the arthritic joints were examined monthly by the doctor before and during type II collagen treatment so that they could be compared with the same joints prior to treatment.

주관적인 통증의 측정 결과는 의사에 의해 각각의 관절염성 관절을 차례로 부드럽게 눌러서 환자에게 느껴지는 통증이 있는지에 대한 답변을 듣는다.Subjective pain measurement results are answered by the doctor in response to pain in the patient by gently pressing each arthritic joint in turn.

오전의 경직성에 대한 데이타는 환자의 경험을 바탕으로 하여 그들의 관절염성 관절이 물리적으로 유연하게 되는 데 얼마나 오랜 시간이 걸렸는지를 기록 보고하였다. 추가로, 각각의 손에 대한 파악 강도는 20 mmHg까지 찰싹 때림 팽착된(cuff inflated) 것으로의 표준 수은 혈압계로 매달 측정하였다. 최종적으로, 환자들은 50-보폭 도보를 완수하는 데 몇 초 정도가 걸리는지에 대한 시간을 측정하였다.Morning stiffness data reported how long it took for their arthritic joints to be physically flexible based on patient experience. In addition, grasping strength for each hand was measured monthly with a standard mercury sphygmomanometer as being cuff inflated to 20 mmHg. Finally, patients measured how long it took them to complete a 50-step walk.

류마티스성 관절염에 걸린 환자에게 타입 II 콜라겐을 경구 투여하는 것의 유효성은 세 가지의 다양한 기준을 이용하여 평가하였다: 파울러스 반응 기준(the Paulus Response Criteria), 미국 대학의 류마티즘학 기준(the American College of Rheumatology Criteria), 및 프로토콜 반응 기준(the Protocol Response Criteria). 프로토콜 반응 기준에 의하면, 민감성과 팽창된 관절의 수에서의 ≥30% 정도의 개선이 환자에게서 달성될 경우에, 양성 반응이 스코어된다.The effectiveness of oral administration of type II collagen in patients with rheumatoid arthritis was evaluated using three different criteria: the Paulus Response Criteria, the American College of Rheumatology Criteria, and the Protocol Response Criteria. According to the protocol response criteria, a positive response is scored when an improvement of ≧ 30% in sensitivity and number of dilated joints is achieved in the patient.

미국 대학의 류마티즘학 반응 기준에서, 양성 반응은 다음과 같은 경우에 스코어된다:In the American College of Rheumatology Response Criteria, a positive response is scored when:

a) 민감성과 팽창된 관절의 수에서 ≥20% 개선이 달성될 경우와,a) when ≥20% improvement in sensitivity and number of dilated joints is achieved,

b) 다음 중 그 어떤 3 가지에서 >20% 개선이 있을 경우:b)> 20% improvement in any of the following three ways:

(1) 환자의 총괄 스코어(1) the overall score of the patient

(2) 의사의 총괄 스코어(2) Overall score of doctor

(3) CLINHAQ(임상 건장 평가 질문 사항)(3) CLINHAQ (clinical health assessment question matter)

(4) ESR(적혈구 침강 비율).(4) ESR (erythrocyte sedimentation rate).

파울러스 반응 기준에서는 다음의 6 가지 기준 중에서 4 가지를 만족할 경우에 양성 결과가 스코어된다:The Paulus response criterion scores positive if four of the following six criteria are met:

a) 다음에 있어서의 ≥20% 개선:a) ≥20% improvement in

(1) 민감성 관절 스코어(1) sensitive joint score

(2) 팽창된 관절 스코어(2) swollen joint score

(3) 오전 경직성 지속도(3) AM stiffness persistence

(4) ESR(4) ESR

b) 다음에 있어서의 ≥40% 개선:b) ≧ 40% improvement in:

(5) 의사의 총괄 스코어(5) Overall score of doctor

(6) 환자의 총괄 스코어.(6) the overall score of the patient.

"치료하고자 하는(Intent to Treat)" 인원은 그 어떤 기준선 이후의 효과가 얻어진 무작위적인 환자들을 포함하였다. 이같은 군의 환자가 치료가 불연속적이라면, 이같은 환자에 대한 반응 결과는 이 연구의 후속 시간 산측으로 이월하였으며, 환자들의 주어진 군에 대해 평균 반응 지수를 산측하는데 사용되었다."Intent to Treat" personnel included randomized patients whose effects were after any baseline. If the patients in this group were discontinuous in treatment, the response results for these patients were carried forward to the follow-up time estimates of this study and were used to calculate the average response index for a given group of patients.

"퍼-프로토콜(Per-Protocol)" 인원은 프로토콜이 종결되고, 어떠한 명백한 프로토콜 위배를 야기시키지 않으며, 75% 이상의 전체 프로토콜 순응을 나타내고, 프로토콜 기간 동안에 그 어떤 배척되는 약물 치료를 갖지 않으며, 그 어떤 데이타가 이월될 필요가 없는 인원이다."Per-Protocol" personnel have a protocol terminated, do not cause any apparent protocol violations, exhibit at least 75% overall protocol compliance, have no rejected drug treatment during the protocol period, The number of people whose data does not need to be carried over.

"유반응성(ever-response)" 환자란, 장기간의 반응을 나타내었는지 또는 이들이 연구를 완결했는지와는 무관하게, 경구로 투여된 타입 II 콜라겐에 대한 반응을 나타낸 적이 있는, 경구로 투여되는 타입 II 콜라겐의 임상 연구에서의 참가자이다.An “ever-response” patient is an orally administered type II who has shown a response to orally administered type II collagen, regardless of whether they have long-term responses or have completed the study. Participant in the clinical study of collagen.

총괄 평가는 주치의나 환자에 의해 주관적으로 작성된다.Overall assessment is made subjectively by the attending physician or patient.

NSAID는 "비스테로이성 항염증성 약물"; RF는 "류마티즘 인자"; ESR은 "적혈구 침강 비율"; HCT는 "헤마토크리트"; bid는 "1 일 2 회"; gid와 gd는 "1 일당"; IA는 "관절내"를 나타낸 것이다.NSAIDs are "non-sterile anti-inflammatory drugs"; RF is a "rheumatic factor"; ESR is the "erythrocyte sedimentation rate"; HCT is "hematocrit"; bid is "twice a day"; gid and gd are "per day"; IA stands for "in the joint".

이같은 연구는 심각한 활성 류마티스성 관절염 환자 274 명으로 이루어졌다. 이 환자들의 평균 병력 기간은 11.2 년이였다. 시작하면서, 환자들은 평균 팽창 관절 24 개와 민감성 관절 27 개를 가졌다. 환자 124 명(45%)이 질환-변형 항류마티스성 약물(DMARDS)로 치료되었으며, 8∼12 주 동안(DMARD가 사용된 것에 따라)에 DMARD의 약물 치료가 중지되었다. 메토트렉세이트, 면역억제제 및 관절내 스테로이드에 대해서는, 유실 기간이 8 주이였다. 모든 그 외의 DMARDS 및/또는 그 외의 연구 항류마티성 치료에 대해서는, 유실 기간이 12 주이였다. 비스테로이드성 항염증성 약물(NSAIDS)과 경구 코르티코스테로이드의 안정한 투여량(1 일당 <10 mg)이 허용되었다. 위약이나 매일 20 μg, 100 μg, 500, μg 또는 2,500 μg의 타입 II 콜라겐을 투여하는 것에 대한 결정은, 환자들 중에서 무작위적으로 지정되었다. 이 5 가지의 군 각각에서는 53∼57 명 정도의 환자들이 있었다. 치료군들 사이에는 통계학적이나 임상적인 상관되는 차이점은 없었다. 총 228 명의 환자들(83%)이 전체 6 개월의 치료 기간을 완결지었다. 탈락자 빈도수는 전체 치료군에 걸쳐 비슷하였다.The study consisted of 274 seriously active rheumatoid arthritis patients. The average length of time for these patients was 11.2 years. Beginning, patients had an average of 24 dilated joints and 27 sensitive joints. 124 patients (45%) were treated with disease-modified antirheumatic drugs (DMARDS) and drug treatment with DMARD was stopped for 8-12 weeks (as DMARD was used). For methotrexate, immunosuppressive agents and intraarticular steroids, the loss period was 8 weeks. For all other DMARDS and / or other study antirheumatic treatments, the loss period was 12 weeks. Stable doses of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDS) and oral corticosteroids (<10 mg per day) were allowed. The decision to placebo or 20 μg, 100 μg, 500, μg or 2,500 μg of type II collagen daily was randomized among patients. Each of these five groups had between 53 and 57 patients. There was no statistically or clinically correlated difference between treatment groups. A total of 228 patients (83%) completed the entire 6 month treatment period. Dropout frequency was similar across the treatment groups.

닭의 흉골로부터 유도된, 타입 II 콜라겐을 Sigma Chemical Company, St. Louis, MO.로부터 구입하였다. 환자들에게는 한 달 동안 기준선 검진으로 내용을 밝히지 않으며 연구 약물을 공급을 제공하고, 그 이후에는 매 4 주마다 제공하였다. 액체 연구 약물은 개별적인 폴리스티렌 튜브에 각각의 일일 투여량을 함유하는 허용되는 키트형으로 제공되었다. 냉장 보관에 필요한 연구 약물이기 때문에, 약물을 집까지 이송할 수 있도록 환자들에게 냉각기를 배급하고, 냉장고에 이 키트를 보관하도록 지시하였다. 임상학적 시험 물질을 1 일 1 회 경구 투여하였다. 매일의 투여형은 0.1 M 아세트산(위약)이나 0.1 M 아세트산에 용해된 타입 II 콜라겐을 함유하는 단일 액상 충진 튜브로 이루어져서, 환자가 오렌지 쥬스(또는 그 외의 산성 쥬스)에 첨가하여 아침 식사 적어도 20 분 전에 섭취하였다.Type II collagen, derived from the sternum of chickens, was obtained from Sigma Chemical Company, St. It was purchased from Louis, MO. Patients were given a supply of study medication for one month without baseline screening, followed by every four weeks thereafter. Liquid study drugs were provided in an acceptable kit form containing each daily dose in separate polystyrene tubes. Because it was a study drug for refrigeration, patients were instructed to distribute coolers and store the kit in the refrigerator so that the drug could be transported home. The clinical test substance was administered orally once a day. The daily dosage form consists of a single liquid filling tube containing type II collagen dissolved in 0.1 M acetic acid (placebo) or 0.1 M acetic acid so that the patient is added to orange juice (or other acidic juice) for at least 20 minutes for breakfast. Taken before.

이 프로토콜에서는 의사가 연구에 참가한 각 환자를 기준일(연구 개시일)로부터 2, 4, 8, 12, 16, 20 및 24 주에 검진할 것을 요구한다. 각 실험 동안에, 주치의들은 파울러스 반응, 미국 대학이 류마티즘 반응 및 프로토콜 반응 평가를 포함하는 기준에 대한 항목을 평가하였다. 주치의들은 결과를 기록한 후에, 대조하고 통계학적으로 분석하였다. 연구에서 모아진 결과들은 다음 표 1과 도 1∼3에 나타내었다.This protocol requires the physician to examine each patient who participated in the study at 2, 4, 8, 12, 16, 20 and 24 weeks from the base date (study start date). During each experiment, the attending physicians evaluated items for criteria including the Paulus response, the American University's assessment of rheumatism response, and protocol response. After the physicians recorded the results, they were compared and statistically analyzed. The results gathered from the study are shown in the following Table 1 and FIGS.

도 1은 24 주의 치료 기간에 걸친 다양한 투여량의 타입 II 콜라겐의 상대적인 유효성을 예시하는 것이다. 24 주째에는, 치료에 대해 반응을 나타내는 환자의 수가 매일 20 μg의 투여량이 투여된 환자의 백분율이 반응에서 위약을 투여받은 환자들의 수보다 크기는 하지만, 24 주의 점수에서의 차이는 그리 현저한 것은 아니다.1 illustrates the relative effectiveness of various doses of type II collagen over a 24 week treatment period. At week 24, although the number of patients responding to treatment is greater than the number of patients receiving a placebo dose of 20 μg per day than the number of patients receiving placebo in the response, the difference in scores at 24 weeks is not so significant. .

하지만, 다음 표 1 에서는 매일 20 μg의 타입 II 콜라겐 치료에 반응을 나타낸, 유반응성 환자 39% 대 위약 투여 환자 19%가 대조적으로 나타나 있다. 따라서, 위약 치료법으로부터의 반응들보다 명백하게 큰 반응들이 파울러스 기준을 이용하여 매일 20 μg의 투여량을 나타났다. 구조 무통법, NSAIDS 및 환자에 의한 코르티코스테로이드 사용에 대해 조정하는, 유반응성 환자의 선형 로지스틱 감쇠 분석을 통해, 위약과 1 일당 20 μg의 투여에 대해 반응하는 환자들의 수 사이에서 발견되는 현저한 차이를 입증하는, 1 일당 타입 II 콜라겐 20 μg의 투여에 의해 도출되는 반응을 위약과 비교하는 0.02의 P-지수를 얻었다.However, in Table 1, in contrast, 39% of responsive patients versus 19% of placebo patients responding to 20 μg of Type II collagen treatment daily. Thus, responses that were apparently larger than responses from placebo treatment resulted in a dose of 20 μg daily using the Paulus criteria. Through linear logistic attenuation analysis of responsive patients, adjusting for rescue painlessness, NSAIDS and corticosteroid use by patients, significant differences were found between placebo and the number of patients responding to 20 μg of dosing per day. Proving, a P-index of 0.02 was obtained comparing the response elicited by administration of 20 μg of type II collagen per day to placebo.

류마티스성 관절염에서 경구 CCII의 투여량 변화 위약 조정 연구치료군에 의한 반응율치료하고자 하는 인원Dose Changes in Oral CCII in Rheumatoid Arthritis 유반응성(everresponse )Everresponse 치료군Treatment group 위약(N=57)Placebo (N = 57) 0.02 mg/day(N=54)0.02 mg / day (N = 54) 0.10 mg/day(N=55)0.10 mg / day (N = 55) 0.50 mg/day(N=53)0.50 mg / day (N = 53) 2.50 mg/day(N=54)2.50 mg / day (N = 54) NN %% NN %% NN %% NN %% NN %% 파울러스Paulus 반응율Reaction rate 1616 19.319.3 2525 38.938.9 1919 32.732.7 1717 28.328.3 1313 24.124.1 P-지수^* P-index ^* -- 0.03530.0353 0.13230.1323 0.36930.3693 0.64620.6462 ACRACR 반응율Reaction rate 1111 17.517.5 1414 25.925.9 1111 20.020.0 1313 24.524.5 1212 22.222.2 P-지수^* P-index ^* -- 0.35790.3579 0.81120.8112 0.48240.4824 0.63600.6360 프로토콜protocol 반응율Reaction rate 1818 31.631.6 2525 46.346.3 2222 40.040.0 2323 43.443.4 2222 40.740.7 P-지수^* P-index ^* -- 0.12340.1234 0.43110.4311 0.23860.2386 0.33060.3306 ^*활성 치료군과 위약을 비교하는 피셔(Fisher)의 정밀 테스트 ^* Precision test of Fisher (Fisher) to compare the active treatment groups and placebo

또한, 타입 II 콜라겐의 1 일당 20 μg은 반응 시간에 있어서도 위약에 비해 명백한 이점이 있는 것으로 나타났다(P=0.03). 다양한 투여량에 의해 도출되는 반응 시간을 그래프적 표현으로 다음 도 2에 나타내었는데, 매일 20 μg의 투여가 위약의 투여보다 신속한 반응 시간을 도출시키는 것을 알 수 있다.In addition, 20 μg per day of type II collagen was shown to have a clear advantage over placebo in response time (P = 0.03). The response time elicited by the various doses is shown graphically in FIG. 2, which shows that 20 μg daily results in faster response times than placebo.

도 3은 타입 II 콜라겐 투여량의 범위에 따른 환자 군에서의 기본선으로부터의 평균 변화를 나타내고 있다. 매일의 20 μg 투여량이 민감성 관절 수에서의 최대 절대 감소를 도출시켰지만, 위약과 현저하게 차이가 나는 것은 아니였다. 하지만, 기준 민감성 관절 수로부터 현저히 차이가 나는 것이었다. 마찬가지로, 20 μg을 매일 투여함으로써, 질환 활성도의 의사 총괄 평가(도 4)와 환자 총괄 평가(도 5)에서 기준일로부터 현저한 차이를 나타내는 개선을 이룰 수 있었는데, 이같은 결과가 위약과 현저한 차이를 나타내지는 않았다.3 shows the mean change from baseline in the patient group over a range of type II collagen dosages. A daily 20 μg dose led to a maximum absolute decrease in the number of sensitive joints, but not significantly different from placebo. However, there was a significant difference in the number of reference sensitive joints. Similarly, daily administration of 20 μg resulted in a significant difference from baseline in physician overall assessment (FIG. 4) and patient overall assessment (FIG. 5) of disease activity, which is not significantly different from placebo. Did.

따라서, 이같은 연구를 통해, 류마티스성 관절염의 치료에서 매일 20 μg의 타입 II 콜라겐을 투여하는 것이 좀더 과량을 투여하는 것보다 현저한 이점을 갖는다는 것을 알 수 있었다. 파울러스 기준 유반응성 비율을 이용하여, 이같은 투여량이 위약보다 명백한 이점을 갖는 것을 나타냈고, 이 연구의 4 가지 투여량 범위 중에 최대 유반응성 비율을 도출시켰다. 사용된 모든 투여 유형 중에서, 매일 20 μg을 투여하는 것이 다음의 유효성 측정 수단에 대해 기준선으로부터 최상의 개선을 도출시켰다: 민감성 관절의 수, 팽창 관절의 수, 의사 총괄 스코어, 환자 총괄 스코어, 환자 통증 스코어 및 ERS. 또한, 매일 20 μg을 투여하는 것은 파울러스 기준을 사용하였을 때 반응에 대한 가장 신속한 결과를 나타내었다.Thus, such studies have shown that administration of 20 μg of type II collagen daily in the treatment of rheumatoid arthritis has a significant advantage over more overdose. Using the Paulus baseline reactivity ratio, it was shown that such doses had a clear advantage over placebo, and the maximum reactivity ratio was derived among the four dose ranges of this study. Of all the dosing types used, 20 μg daily resulted in the best improvement from baseline for the following measures of effectiveness: number of sensitive joints, number of dilated joints, physician overall score, patient overall score, patient pain score And ERS. In addition, administration of 20 μg daily showed the fastest results for the response when using the Paulus criteria.

안정성에 있어서, 임상 시험 물질에 관련되어 판단되는 심각한 부작용 증상이 나타나지 않았다. 기록된 부작용 증상에 있어서는, 위약이나 타입 II 콜라겐의 그 어떤 투여량 중에서 차이가 나타나지 않았다. 기록된 환자들의 높은 완결 비율(83%)이 타입 II 콜라겐의 내용 가능성을 입증하는 것이다.In terms of safety, there were no significant adverse side effects associated with clinical trial materials. With regard to the reported adverse event symptoms, there was no difference between either placebo or any of the doses of type II collagen. The high percentage of completeness (83%) of patients recorded demonstrates the potential for content of type II collagen.

실시예 2: 타입 II 콜라겐으로의 류마티스성 관절염 환자의 연장 치료Example 2: Prolonged Treatment of Rheumatoid Arthritis Patients with Type II Collagen

상기 실시예 1의 연구에 참여한 원래 274 명 중 대략 140 명의 심각한 관절염 환자들(즉, 팽창된 또는 민감성 관절이 24 개보다 많음)에게는 타입 II 콜라겐의 경구 투여를 18 개월에서 2 년 동안을 계속하였다. 이같은 환자들 중에서, 126 명은 매일 단일 투여로 20 μg을 투여하였다. 이같은 환자들의 관절염 증상은 매일 20 μg을 투여함으로써 억제되었다. 타입 II 콜라겐 치료를 계속하는 환자들 중 14 명은 좀더 과량의 투여량이 요구되었으며, 1 일당 100 μg의 투여량으로 적정되었다. 이 연구를 지속한 환자 모두는, 메토트렉세이트, 면역억제제 및 관절내 스테로이드 주사와 같은, 그 어떤 질병 변형 항류마티스성 약물(DMARDS)을 투여하지 않고, 18 개월에서 2 년동안 진행하였다. 따라서, 1 일당 20 μg으로의 타입 II 콜라겐의 경구 치료법은 18 개월 이상 동안 이같이 심각한 환자에 있어서, 류마티스성 관절염의 만족스러운 치료법을 제공하였다.Approximately 140 serious arthritis patients (ie, more than 24 dilated or sensitive joints) out of the original 274 participants in the study of Example 1 continued oral administration of type II collagen for 18 months to 2 years. . Of these patients, 126 received 20 μg in a single dose daily. Arthritis symptoms in these patients were suppressed by administering 20 μg daily. Of the patients continuing with type II collagen treatment, 14 more doses were required and titrated at a dose of 100 μg per day. All patients who continued this study progressed from 18 months to 2 years without any disease-modifying antirheumatic drugs (DMARDS), such as methotrexate, immunosuppressants and intra-articular steroid injections. Thus, oral treatment of type II collagen at 20 μg per day provided a satisfactory treatment of rheumatoid arthritis in such severe patients for more than 18 months.

Claims (12)

인체의 류마티스성 관절염을 치료하는 방법에 있어서, 이러한 치료가 필요한 인체에 타입 II 콜라겐 5∼25 μg을 관절 민감성, 관절 팽창, 오전 경직성, 파악 강도 및 50-보폭 도보 시간으로 이루어진 군 중에서 선택된 임상 증상 한 가지 이상을 경감시키기에 충분한 기간 동안 매일 투여하는 것으로 이루어진, 인체의 류마티스성 관절염 치료 방법.In a method for treating human rheumatoid arthritis, 5-25 μg of type II collagen in a human body in need of such treatment is selected from the group consisting of joint sensitivity, joint swelling, morning stiffness, grasp intensity, and 50-step walking time. A method for treating rheumatoid arthritis in a human body, consisting of daily administration for a period sufficient to alleviate one or more of the symptoms. 제 1 항에 있어서, 상기 인체에 타입 II 콜라겐 20 μg을 매일 투여하는 것으로 이루어진 방법.The method of claim 1, wherein the human body is administered 20 μg of type II collagen daily. 제 1 항에 있어서, 상기 타입 II 콜라겐이 생리학적으로 허용되는 수용성 산성 배지에 용해된 것인 방법.The method of claim 1, wherein said type II collagen is dissolved in a physiologically acceptable aqueous acidic medium. 인체의 관절염 증상을 치료하는 방법에 있어서, 이러한 치료가 필요한 인체에 타입 II 콜라겐 5∼25 μg을 매일 경구 투여하는 것으로 이루어진, 상기 인체에서 관절염 증상 한 가지 이상의 치료 방법.A method of treating arthritis symptoms in a human body, comprising daily oral administration of 5-25 μg of type II collagen to a human body in need of such treatment. 인체의 관절염 증상을 치료하는 방법에 있어서, 이러한 치료가 필요한 인체에 타입 II 콜라겐 20 μg을 매일 경구 투여하는 것으로 이루어진, 상기 인체에서 관절염 증상 한 가지 이상의 치료 방법.A method of treating arthritis symptoms in a human body, comprising daily oral administration of 20 μg of type II collagen to a human body in need of such treatment. 인체의 감염된 관절 한 가지 이상에서 자기 면역 반응을 억제시키는 방법에 있어서, 이러한 치료가 필요한 인체에 타입 II 콜라겐 5∼25 μg을 매일 경구 투여하는 것으로 이루어진, 상기 인체의 감염된 관절 한 가지 이상에서의 자기 면역 반응 억제 방법.A method of suppressing an autoimmune response in one or more infected joints of a human body, comprising: daily oral administration of 5-25 μg of type II collagen to a human body in need of such treatment, How to suppress an immune response. 인체의 감염된 관절 한 가지 이상에서 자기 면역 반응을 억제시키는 방법에 있어서, 이러한 치료가 필요한 인체에 타입 II 콜라겐 20 μg을 매일 경구 투여하는 것으로 이루어진, 상기 인체의 감염된 관절 한 가지 이상에서의 자기 면역 반응 억제 방법.A method of inhibiting an autoimmune response in one or more infected joints of a human body, the method comprising the daily oral administration of 20 μg of type II collagen to a human body in need of such treatment, an autoimmune response in one or more infected joints of the human body Inhibition method. 의약적으로 허용되는 산에 용해된 타입 II 콜라겐 5∼25 μg을 담은 의약적으로 허용되는 용기로 이루어진 인체의 류마티스성 관절염을 치료하는 데 사용하는 투여 유형.Dosage type used to treat human rheumatoid arthritis in a pharmaceutically acceptable container containing 5-25 μg of type II collagen dissolved in a pharmaceutically acceptable acid. 제 1 항에 있어서, 상기 콜라겐의 투여량이 1 일당 10∼25 μg인 방법.The method of claim 1, wherein the dose of collagen is 10-25 μg per day. 제 4 항에 있어서, 상기 콜라겐의 투여량이 1 일당 10∼25 μg인 방법.The method of claim 4, wherein the dose of collagen is 10-25 μg per day. 제 6 항에 있어서, 상기 콜라겐의 투여량이 1 일당 10∼25 μg인 방법.The method of claim 6, wherein the dose of collagen is 10-25 μg per day. 제 8 항에 있어서, 상기 콜라겐의 투여량이 1 일당 10∼25 μg인 방법.The method of claim 8, wherein the dose of collagen is 10-25 μg per day.