KR102683428B1 - 피지, 피부 모공, 피부 각질 및 피부 여드름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
피지, 피부 모공, 피부 각질 및 피부 여드름 개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 및 이의 발효물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 및 이의 발효물은 항염, 항균, 피지 분비 및 생성 억제 및 피부 모공 면적 및 피부 각질 감소 효과가 우수하므로, 피부 여드름, 피지, 피부 모공 또는 피부 각질 개선용 화장료 조성물로 용이하게 이용가능하다.
Description
본 발명은 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 유효성분으로 포함하는 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 또는 피부 각질 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부의 기능 중 가장 중요한 기능은 인체를 외부의 물리적, 화학적 요인으로부터 보호하는 것이다. 이러한 피부에는 피지선이라는 기름샘이 있으며, 여기에서 피지가 분비되어 모공을 통하여 피부표면으로 배출된다. 이렇게 배출된 피지는 피부 표면에서 수분의 증발을 막고, 세균으로부터 인체를 보호하는 역할을 한다.
피부는 제일 바깥층부터 표피, 진피, 피하 지방층으로 나뉘며 표피의 가장 밑부분에는 기저층(keratinocyte)이있고, 이곳에서 계속해서 세포분화가 일어나며 분화된 세포는 유극층, 과립층 그리고 죽은 세포인 각질층을 거쳐 탈락되며, 이 과정은 일반적으로 28일을 주기로 반복된다. 이러한 주기가 순조롭게 진행되지 못하면 각질층이 두꺼워지고, 피부가 거칠어지는 원인이 된다. 또한 모공주위에서는 이러한 각질이 모공의 입구를 막아 분비된 피지가 밖으로 나가지 못하고 모공 안에서 굳어 화이트 헤드와 블랙 헤드를 거쳐 여드름으로 발전하기도 한다. 또는 화농성 균에 감염되어 염증을 일으키기도 한다. 이러한 반복적인 모공 트러블은 모공 주위의 진피층에 영향을 주어 모공이 넓어지는 원인이 되는 것이다.
모공이 넓어지면 그 속으로 세균들이 침입하기 쉬우므로 여드름과 같은 피부 트러블을 일으키기 쉬워진다. 또한, 화장이 잘 되지 않을 뿐만 아니라 칙칙하고 지저분하게 보인다. 미세한 먼지나 화장 찌꺼기 등 노폐물이 모공 내에 축적되어 큰 모공이 더욱 두드러져 보이므로, 깨끗한 피부를 가지지 못하고 얼굴이 지저분해지는 결과가 발생한다.
최근 화장품 업계에서 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 제품이 다수 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다.
따라서, 부작용이 적고, 소비자의 호응도가 높은 천연 재료를 이용한 화장품의 수요가 점차 증가하고 있으며, 생체 안전성 및 피부 개선 효과가 우수한 다기능성(multi-funtional) 화장품 개발에 대한 다양한 연구가 활발하게 이루어지고 있다.
이에, 본 발명자들은 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 및 피부 각질 개선 효과가 있는 천연 소재를 발굴하기 위한 연구를 진행한 결과, 꿀풀, 개다래 및 비파를 특정 비율로 혼합 및 발효시킨 소재를 개발하여, 피지 분비 개선, 모공 면적 개선 및 각질 개선 등에 대한 우수한 효과를 나타냄을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 또는 피부 각질 개선을 위한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 이의 발효물을 유효성분으로 포함하는, 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 또는 피부 각질 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 꿀풀(Prunella asiatica Nakai)은 꿀풀과(Labiatae)의 여러해살이풀(Prunella vulgaris L. subsp. asiatica Nakai)이다. 밀원 식물이며 한약재로 쓰고 어린잎과 어린순은 식용한다. 꿀풀은 간을 맑게 해주며 이뇨, 소염, 소종 등의 효능이 있어 전염성간염, 폐결핵, 임파선염, 수종, 고혈압 등을 치료하기 위한 약재로도 쓰인다. 본 발명에서 상기 꿀풀은 꿀풀의 전초를 사용하는 것일 수 있다.
본 발명의 상기 개다래(Actinidia polygama)는 한국, 중국 동북부, 러시아 동북부, 일본이 원산지로서, 열매를 먹을 수 있으나 혓바닥을 쏘는 듯한 맛이 나고 달지 않다. 한방약 목천료자는 열매에 벌레가 기생하여 생긴 벌레혹을 열매와 함께 따서 말린 것인데, 거풍, 통기의 효능이 있어 중풍, 안면신경마비, 산통, 요통 등에 처방한다. 가지와 잎을 목천료, 뿌리를 목천료근이라 하여 모두 약으로 쓰고 목재는 공예재료로 사용한다. 본 발명에서 상기 개다래는 개다래나무의 열매를 사용하는 것일 수 있다.
상기 비파(Eriobotrya japonica)는 장미과(Rosaceae)에 속하는 상록교목으로서 한방에서는 그것의 열매, 뿌리, 줄기 껍질 및 잎을 약용으로 사용한다. 특히, 비파엽은 폐를 맑게 하고 위를 조화시키며 기를 강하시키고 담을 삭이는 효능이 있다고 알려져 있다(중약대사전). 또한, 염증과 관련된 피부질환, 기침, 가래 등에도 효과가 있으며, 혈당강하, 간기능 개선 및 여러 가지 항염증활성 등의 약리활성도 보고되어 있다. 본 발명에서 상기 비파는 비파나무의 잎(비파엽)을 사용하는 것일 수 있다.
본 발명에서 "꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물"이란, 꿀풀, 개다래 및 비파나무잎을 혼합한 혼합물을 추출용매로 추출하여 얻어지는 추출물을 의미하는 것일 수 있고, 꿀풀 추출물, 개다래 추출물 및 비파나무잎 추출물을 혼합한 혼합물을 의미하는 것일 수 있다. 바람직하게는, 꿀풀, 개다래 및 비파나무잎을 혼합한 혼합물을 추출용매로 추출하여 얻어지는 추출물일 수 있다.
본 발명의 상기 꿀풀, 개다래 및 비파는 0.5~5.5:0.5~3.5:1의 중량비로 혼합되는 것일 수 있고, 바람직하게는, 4.5~5.5:2.5~3.5:1의 중량비로 혼합되는 것일 수 있다.
상기 "추출물"은 어떤 물질을 추출 처리하여 얻어지는 물질을 의미하는 것으로, 구체적으로 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나, 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 상기 추출 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명의 상기 혼합추출물은 꿀풀, 개다래 및 비파를 혼합한 혼합물을 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 것일 수 있다. 바람직하게는 물(정제수)를 추출용매로 이용하여 추출하는 것일 수 있다.
구체적으로, 꿀풀, 개다래 및 비파를 혼합한 혼합물 1 중량부를 기준으로 8 내지 12 중량부의 물을 투입하여 80~110℃의 온도에서 1 내지 5시간 열수 추출하는 것일 수 있고, 바람직하게는 상기 혼합물 1 중량부를 기준으로 9 내지 11 중량부의 물을 투입하여 85~105℃의 온도에서 2 내지 4시간 열수 추출하는 것일 수 있다. 또한 추출된 추출물은 냉각, 여과, 멸균 등의 과정이 추가로 수행될 수 있다.
본 발명의 상기 발효물은 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물을 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 균주를 이용하여 발효시켜 제조되는 것일 수 있다.
상기 균주는 벚꽃으로부터 분리된 것일 수 있고, 상기 벚꽃은 제주도에서 채취한 벚꽃일 수 있다. 바람직하게는, 수탁번호 KCTC 15726BP로 기탁된 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) TW-S001 균주를 사용하는 것일 수 있다.
발효 과정은 박테리아 및 효모와 같은 미생물이 성분을 소화하고 분해하거나 변경하고 화학 구조를 새로운 형태 또는 화합물로 변형시키는 과정이다. 본 발명의 상기 발효물은 상기 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물을 상기 류코노스톡 메센테로이데스 TW-S001(KCTC 15726BP) 균주로 100 내지 150 rpm, 28 내지 32℃, pH 7.5 내지 8.5 및 NaCl 0.5 내지 1.5 w/v%의 염도 조건에서 배양하여 발효시킨 것일 수 있다. 이때, 상기 혼합추출물 100중량부를 기준으로 상기 TW-S001(KCTC 15726BP) 균주를 1×106~1×109의 균수로 접종하는 것일 수 있고, 바람직하게는 1×107~1×108의 균수로 접종하여 상기 조건에서 배양하여 발효시킨 것일 수 있다.
본 발명의 상기 조성물은 피지 분비 및 생성을 억제 또는 감소시키는 효과, 피부 모공 면적 및 피부 각질을 감소시키는 효과, 여드름균 및 황색포도상구균에 대한 항균 효과 및 일산화질소(NO) 생성을 억제하는 항염 효과를 나타내는 것일 수 있다. 특히, 본 발명의 일 실시예에서는 본 발명에 따른 상기 조성물을 이용하여 인체시험을 진행한 결과, 피지 분비량 감소, 피부 모공 면적 감소, 피부 각질 감소 효과가 우수하게 나타남을 확인하였다(실험예 4 내지 6 참조).
상기 "피지"는 피지선으로부터 털의 표면, 표피의 표면에 분비되는 유성 분비물을 말한다. 피지가 과잉 분비되면 여드름이 악화되며 여드름에 의한 모공 확대가 촉진되고, 피부염이 발생하는 등 질환이 유발될 수 있다.
상기 "모공"은 털 구멍으로 털이 자라는 공간을 말하며 또한 피지선과도 연결되어 있어 피지선에서 만들어내는 피지가 모공을 통해 피부 표면으로 나오는 통로로 이용되기도 한다. 상기 모공의 지름은 대략 0.02 내지 0.05mm이지만, 계절, 나이 등에 의해서 늘어나기도 한다. 모공의 면적이 확장되는 경우 이로 인한 피지 분비가 증가하거나 모공에 피지가 축적되어 여드름 또는 피부 질환이 야기될 수 있다.
상기 "각질 개선"은 피부 표피층에 하얗게 일어난 세포 이물덩어리인 각질의 양이 감소하는 것을 말한다.
상기 "여드름 개선"은 여드름 원인균의 생장 또는 생육을 억제하는 항균 활성을 통해 여드름의 발생을 예방 또는 감소시키는 것을 말한다. 상기 여드름 원인균은 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 스트렙토코커스 피오게네스(Streptococcus pyogenes), 코리네박테리움 스트리아텀(Corynebacterium striatum) 및 표피포도구균(Staphylococcus epidermidis)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 여드름균(P. acnes) 및 황색포도상구균(S. aureus)일 수 있다.
본 발명의 상기 "유효성분으로 포함하는"은 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 또는 피부 각질 개선 효과를 나타낼 수 있는, 예컨대, 피지 분비 및 생성을 억제 또는 감소시키는 효과, 피부 모공 면적 및 피부 각질을 감소시키는 효과, 여드름 원인균에 대한 항균 효과, 피부 염증을 감소시키는 효과 등을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미할 수 있다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 수분크림, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
구체적으로, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형으로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등의 화장수; 훼이셜 로션, 바디로션 등의 유액; 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등의 크림; 에센스; 화장연고; 스프레이; 젤; 팩; 선 스크린; 메이크업 베이스; 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션; 파우더; 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일 등의 메이크업 제거제; 또는 클렌징폼, 비누, 바디워시 등의 세정제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 피부 외용제는, 연고, 패치, 겔, 크림 또는 분무제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 필수성분 외에 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 통상적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있으며, 예컨대 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 허용 가능한 담체는 제형에 따라 달리할 수 있다. 예컨대, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤로 제형화될 때 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 추출물이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 파우더 또는 스프레이로 제형화될 때, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 추출물이 사용될 수 있고, 스프레이의 경우 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 용액 또는 유탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 용매, 용해화제, 또는 유탁화제가 사용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-브틸글리콜 오일이 사용될 수 있고, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 현탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물이 비누로 제형화될 때, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 업계에서 통상적으로 사용되는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 함유할 수 있다.
다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택할 수 있다.
나아가, 본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 이의 발효물은, 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 또는 피부 각질 개선을 위한 식품 또는 의약외품의 유효성분으로도 제공될 수 있다.
본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 및 이의 발효물은 항염, 항균 및 피지 생성 억제 효과가 우수하며, 특히, 본 발명에 따른 꿀풀, 개다래 및 비파나무잎을 특정 중량비로 혼합한 혼합물을 류코노스톡 균주로 발효시켜 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물은 피지 분비 억제, 피부 모공 면적 감소 및 피부 각질 감소 효과가 우수하므로, 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 또는 피부 각질 개선을 위한 화장료 조성물로 용이하게 이용가능하다.
도 1은 본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 처리에 따른 LPS로 유도된 NO 생성에 대한 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 처리에 따른 피지 생성 억제효과를 확인하기 위하여, 피지 세포 분화 정도를 촬영한 결과를 나타낸 이미지이다.
도 3은 본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 처리에 따른 피지 생성 억제효과를 확인하기 위하여, 지방 생성 정도를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 처리에 따른 피지 생성 억제효과를 확인하기 위하여, 피지 세포 분화 정도를 촬영한 결과를 나타낸 이미지이다.
도 3은 본 발명의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 처리에 따른 피지 생성 억제효과를 확인하기 위하여, 지방 생성 정도를 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1-6. 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 및 추출발효물의 제조
먼저, 꿀풀, 개다래 및 비파나무잎의 건조된 분쇄물을 준비한 다음, 꿀풀, 개다래 및 비파나무잎을 하기 표 1의 중량비로 각각 혼합하여 혼합물을 제조하였다. 상기 혼합물 100g을 90~100℃의 정제수 1000g에 투입하여 3시간 동안 열수 추출하고 냉각 및 여과한 다음, 120℃에서 10분 동안 멸균을 실시하여 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물을 제조하였다.
이 중 실시예 1에 해당하는 중량비로 혼합하여 추출된 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물(실시예 1)을 제외하고, 실시예 2 내지 6에 해당하는 중량비로 혼합하여 추출된 혼합추출물의 경우, 혼합추출물 100g을 기준으로 각각 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) TW-S001 균주(수탁번호: KCTC 15726BP)를 1×107~1×108의 균수로 접종하고, 120rpm, 30℃, pH 8, NaCl 1%의 조건으로 배양하여 발효시켜, 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물(실시예 2 내지 6)을 제조하였다.
| (중량비) | 꿀풀 | 개다래 | 비파나무잎 | 발효여부 |
| 실시예 1 | 5 | 3 | 1 | X |
| 실시예 2 | 1 | 1 | 1 | O |
| 실시예 3 | 2 | 1 | 1 | O |
| 실시예 4 | 3 | 1 | 1 | O |
| 실시예 5 | 5 | 1 | 1 | O |
| 실시예 6 | 5 | 3 | 1 | O |
실험예 1. 항염 효과
상기 실시예 1 내지 6에서 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 및 추출발효물의 항염 효과를 확인하기 위하여, 산화질소(Nitric oxide, NO) 생성 억제 활성을 평가하였다.
24 well plate에 RAW 264.7 cell을 1.5×105 cells/well로 분주하고 37℃, 5% CO2 조건에서 18 hr 배양하였다. 1 μg/mL의 lipopolysaccharide(LPS)를 포함하는 배지로 교환하고 상기 실시예 1 내지 6의 시료들을 각각 처리하여 24시간 배양하였다. 이후 96 well plate에 세포배양 상등액 100 μL와 Griess 시약(1% sulfanilamide, 0.1% naphthylethylenediamine in 2.5% phosphoric acid) 100 μL를 혼합하여 10 min 반응 시킨 후 540 nm에서 microplate reader를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 이때 생성된 NO의 양은 세포 배양액 중에 존재하는 NO2 -의 형태로 측정하며, 표준물질은 sodium nitrite(NaNO2)를 사용하여 표준검정곡선을 통해 정량하고, 대조군으로는 2-amino-4-picoline(2-A)을 사용하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다.
분석 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 실시예 2 내지 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 처리한 경우, 전반적으로 LPS처리에 의해 유도된 NO 생성이 억제되는 것으로 나타났다. 특히, 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물은 양성 대조군인 2-A와 유사한 수준으로 NO 생성을 억제하여, 우수한 항염 효과를 가짐을 확인하였다.
실험예 2. 피지 생성 억제 효과
상기 실시예 1 내지 6에서 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 및 추출발효물이 피지 세포 분화 및 지방 생성에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 피지세포(human sebocyte, Cellprogen, USA) Oil red O staining을 이용하여 측정하였다.
세포독성 없는 농도로 3일에 한 번씩 배지를 교환하여 처리하였다. 10일 후 세포배양액 제거하여 D-PBS로 세척하고 10% formalin으로 1시간 동안 세포를 고정하였다. 60% Isopropyl alcohol로 세척한 후 Oil red O solution(sigma)을 넣고 실온에서 10분간 염색하여 현미경으로 관찰하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
염색된 지방세포의 지방함량 측정을 위해 Oil red O solution을 제거하고 증류수로 4회 세척하여 완전히 건조시킨 후, 100% isopropyl alcohol로 염색된 지방을 추출하였다. microplate reader를 이용하여 490 nm의 흡광도에서 지방함량을 분석하여, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
분석 결과, 도 2 및 도 3에 나타난 바와 같이, 실시예 1의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 처리시 대조군보다 피지 세포 분화 및 지방 생성량이 증가된 반면, 실시예 2 내지 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 처리한 경우, 대조군 및 실시예 1보다 피지 세포 분화 정도와 지방 생성 정도가 감소되는 것으로 나타났다. 특히, 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물은 다른 실시예들에 비하여 피지 세포 분화 및 지방 생성을 현저하게 억제하는 것으로 나타나, 피지 생성 억제 효과가 우수함을 확인하였다.
실험예 3. 항균 효과
항균활성 실험을 위하여 균주는 황색포도상구균(S.aureus), 여드름균(P.acnes)을 사용하였다. 항균활성은 디스크 확산법(disc diffusion method)으로 확인하였다.
먼저, 5% 농도(in 70% ethanol)의 실시예 1 내지 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 추출발효물 시료를 각각 50 μl 씩 8 mm paper disc에 침적하여 2-3일간 건조시켰다.
황색포도상구균(S.aureus)은 10 mL TSB(tryptic soy broth) 배지에 1 백금이를 취해 접종한 후 36℃에서 24시간 배양한다. 이후 배양액 1 mL을 petri dish에 분주한 후 TSA 배지를 부어 일정 시간 배지를 굳혀주었다. 배지가 굳으면 상기 실시예 1 내지 6의 각 시료를 침적하여 건조시킨 paper disc를 배지 위에 놓고, 36℃에서 24시간 배양 후 disc 주위의 clear zone의 직경(mm)을 측정하였다.
여드름균(P.acnes)은 10 mL RCM(reinforced clostridial broth medium) 배지에 1 백금이를 취해 접종한 후 Gaspak™ EZ Anaerobe Pouch System에 담아 혐기성 조건으로 36℃에서 72-96시간 동안 배양하였다. 이후 배양액 1 mL을 petri dish에 분주한 후 RCM 배지를 부어 일정 시간 배지를 굳혀주었다. 배지가 굳으면 상기 실시예 1 내지 6의 각 시료를 침적하여 건조시킨 paper disc를 배지 위에 놓고, Gaspak™ EZ Anaerobe Pouch System에 담아 혐기성 조건으로 36에서 72시간 배양 후 disc 주위의 clear zone의 직경(mm)을 측정하였다.
측정 결과, 하기 표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물 또는 추출발효물 모두 여드름균(P.acnes) 성장을 저해하였고, 실시예 3, 5 및 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물은 황색포도상구균(S.aureus)에 대해서도 저해활성을 나타내었다. 특히, 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물은 여드름균(P.acnes) 및 황색포도상구균(S.aureus)에 대한 저해활성이 가장 높은 것으로 나타나, 항균 효과가 우수함을 확인하였다.
| 저해활성크기(Size of clear zone) | ||
| P.acnes | S.aureus | |
| 실시예 1 | + (8) | - |
| 실시예 2 | + (10) | - |
| 실시예 3 | ++ (15) | ++ (12) |
| 실시예 4 | + (9) | - |
| 실시예 5 | ++ (11) | ++ (12) |
| 실시예 6 | ++ (15) | +++ (16) |
실험예 4. 피지 분비율 시험
상기 실시예 6에서 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 피지 분비 억제 효과를 알아보기 위하여, 피지 분비율 시험을 진행하였다.
피지 분비율 시험을 위하여, 상기 실시예 6에서 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 정제수, 다이프로필렌글라이콜, 글리세린, 1,2-헥산다이올, 비스-피이지-15메틸에터다이메티콘, 소듐하이알루로네이트, 카보머, 잔탄검, 알란토인, 트로메타민, 에틸헥실글리세린과 혼합하여, 화장품법에 따라 통상의 방법으로 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하였다.
피지 분비가 많다고 느끼는 피험자 남녀 21명(20대~50대)을 선정하여, 미간 정중앙으로부터 상부 2cm 지점 부위에 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 화장료 조성물을 4주간 매일 바르게 하였다. 피지 감소의 효과에 대한 판정은 화장료 조성물 사용 전 및 4주 사용후에 각각 피지량 측정기(Sebumeter® 815, Germany)를 사용하여 피지량을 측정하여 평가하였다.
구체적으로, 시험자가 제공하는 기준 세정제를 이용하여 세안 후 페이퍼 타올로 가볍게 두드려 물기를 제거한 후 30분간 항온·항습 조건(20~24℃, 40~60%RH)에서 안정을 취하고, 측정 부위를 70% 에탄올을 이용하여 닦아낸 후 각 화장료 조성물 사용 부위에 대하여 기기 평가를 시행한 다음, 60분간 항온·항습 조건(20~24℃, 40~60%RH)에서 안정을 취한 뒤, 동일 부위에서 기기 평가를 재시행하였다. 피지 분비율 및 피지 분비 개선율을 하기 계산식 1 및 계산식 2를 사용하여 계산하였고, 피험자들의 피지 분비율 및 피지 분비 개선율의 평균값을 산출한 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
[계산식 1]
피지 분비율(μg/cm2·h )= (에탄올 적용 60분 후 피지량 - 에탄올 적용 직후 피지량)/1시간
[계산식 2]
피지 분비 개선율(%) = [(화장료 조성물 사용 전 피지 분비율 - 화장료 조성물 4주 사용 후 피지 분비율) / 화장료 조성물 사용 전 피지 분비율] × 100
| 사용 전 | 4주 사용 후 | 피지 분비 개선율(%) | |
| 4주 경과 후 평균 피지 분비율 변화 | 0.56 ± 0.44 | 0.31 ± 0.38 | 26.69 |
시험 결과, 상기 표 3에 나타난 바와 같이, 화장료 조성물 사용 4주 후 시험 전에 비해 통계적으로 유의한 수준(p-value=0.018 ,p<0.05)으로 피부 피지 분비율이 감소된 것으로 나타났으며, 25% 이상의 피지 분비 개선율을 보임에 따라, 본 발명의 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 화장료 조성물이 과잉으로 분비되는 피지를 효과적으로 억제할 수 있음을 확인하였다.
실험예 5. 모공 면적 개선 시험
상기 실시예 6에서 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 모공 개선 효과를 알아보기 위하여, 상기 실험예 4와 동일한 방법으로 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하여 모공 면적 개선 효능평가 시험을 진행하였다.
피실험자는 남녀 21명(20대~50대)을 대상으로 하였으며, 비익(alare)에서의 수평선과 동측 동공중심선(mid-pupillary line)의 교차 지점을 포함한 6×6 cm 영역에 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 화장료 조성물을 아침, 저녁 1회씩 4주간 매일 바르게 하였다. 화장료 조성물 사용 전 및 4주 사용후에 각각 ANTERA 3D (Miravex, Ireland)를 사용하여 모공 면적을 측정하여 일시적 모공 면적 개선 효능을 평가하였다.
구체적으로, 시험자가 제공하는 기준 세정제를 이용하여 세안 후 페이퍼 타올로 가볍게 두드려 물기를 제거한 후 30분간 항온·항습 조건(20~24℃, 40~60%RH)에서 안정을 취하고, 화장료 조성물 사용 부위에 대하여 기기 평가를 시행하였다. 모공 면적을 나타내는 Antera 3D 측정 값인 Affected area (mm2)은 시험 전과 비교하여, 하기 계산식 3을 통해 모공 면적 개선율을 계산하였으며, 피험자들의 모공 면적 및 모공 면적 개선율의 평균값을 산출한 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
[계산식 3]
모공 면적 개선율(%) = [(화장료 조성물 사용 전 Affected area - 화장료 조성물 4주 사용 후 Affected area) / 화장료 조성물 사용 전 Affected area] × 100
| 사용 전 | 4주 사용 후 | 모공 면적 개선율(%) | |
| 4주 경과 후 평균 모공 면적 변화 | 82.27 ± 45.27 | 71.30 ± 40.22 | 9.20 |
시험 결과, 상기 표 4에 나타난 바와 같이, 화장료 조성물 사용 4주 후 시험 전에 비해 통계적으로 유의한 수준(p-value=0.022 ,p<0.05)으로 피부 모공 면적이 감소하는 것으로 나타나, 본 발명에 따른 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 화장료 조성물은 모공 면적 개선에 우수한 효과를 보이는 것을 확인하였다.
실험예 6. 피부 각질 개선 시험
상기 실시예 6에서 제조된 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물의 피부 각질 개선 효과를 확인하기 위하여, 상기 실험예 4와 동일한 방법으로 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 에센스 제형의 화장료 조성물을 제조하여 피부 각질 개선 효능 평가 시험을 진행하였다.
피실험자는 남녀 21명(20대~50대)을 대상으로 하였으며, 비익(alare)에서의 수평선과 동측 동공중심선(mid-pupillary line)의 교차 지점에 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 화장료 조성물을 아침, 저녁 1회씩 4주간 매일 바르게 하였다. 화장료 조성물 사용 전 및 4주 사용후에 각각 Corneofix F20 (Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany) 및 Visioscan VC98 (Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)를 사용하여 피부 표면의 각질 지수(Desquamation Index)를 분석하여 피부 각질 개선 효능을 평가하였다.
구체적으로, 시험자가 제공하는 기준 세정제를 이용하여 세안 후 페이퍼 타올로 가볍게 두드려 물기를 제거한 후 30분간 항온·항습 조건(20~24℃, 40~60%RH)에서 안정을 취하고, 화장료 조성물 사용 부위에 대하여 기기 평가를 시행하였다. 화장료 조성물 사용 전 및 사용 4주 후에 각각 Corneofix를 이용하여 시험 부위의 각질을 채집 후, Visioscan을 이용하여 각질 지수(Desquamation Index)를 분석하였고, 하기 계산식 4를 통해 각질 개선율을 계산하였으며, 피험자들의 각질 지수 및 각질 개선율의 평균값을 산출한 결과를 하기 표 5에 나타내었다.
[계산식 4]
각질 개선율(%) = [(화장료 조성물 사용 전 각질 지수 - 화장료 조성물 4주 사용 후 각질 지수) / 화장료 조성물 사용 전 각질 지수] × 100
| 사용 전 | 4주 사용 후 | 각질 개선율(%) | |
| 4주 경과 후 평균 피부 각질 변화 | 14.50 ± 1.31 | 13.19 ± 1.52 | 9.06 |
시험 결과, 상기 표 5에 나타난 바와 같이, 화장료 조성물 사용 4주 후 시험 전에 비해 통계적으로 유의한 수준(p-value=0.001 ,p<0.05)으로 각질 지수가 감소한 것으로 나타나, 본 발명에 따른 실시예 6의 꿀풀, 개다래 및 비파 추출발효물을 포함하는 화장료 조성물이 피부 각질 개선에 우수한 효과를 갖는 것을 확인하였다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (8)
- 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물의 발효물을 유효성분으로 포함하는, 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 및 피부 각질 개선용 화장료 조성물에 있어서,
상기 혼합추출물은 꿀풀, 개다래 및 비파를 혼합한 혼합물을 물로 추출한 것이고,
상기 꿀풀, 개다래 및 비파는 5:3:1의 중량비로 혼합되는 것이고,
상기 발효물은 꿀풀, 개다래 및 비파 혼합추출물을 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) TW-S001 균주(수탁번호: KCTC 15726BP)를 이용하여 발효시켜 제조되는 것인, 피부 여드름 개선, 피지 개선, 피부 모공 개선 및 피부 각질 개선용 화장료 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 피지 분비 및 생성을 억제 또는 감소시키는 효과를 나타내는 것인, 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 모공 면적 및 피부 각질을 감소시키는 효과를 나타내는 것인, 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 여드름 원인균에 대한 항균 효과를 나타내는 것인, 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 일산화질소(NO) 생성을 억제하는 항염 효과를 나타내는 것인, 화장료 조성물.
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020240042733A KR102683428B1 (ko) | 2024-03-28 | 2024-03-28 | 피지, 피부 모공, 피부 각질 및 피부 여드름 개선용 화장료 조성물 |
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| KR102683428B1 true KR102683428B1 (ko) | 2024-07-10 |
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101969684B1 (ko) * | 2018-11-15 | 2019-04-16 | 주식회사 엠디글로벌 | 천연 미세침 분말과 천연 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름개선 및 모공축소 기능의 화장료 조성물 |
| KR102162917B1 (ko) * | 2020-03-04 | 2020-10-07 | (주)바이오코스텍 | 쓴쑥, 범부채, 돌나물, 미역취 및 개다래 복합추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
-
2024
- 2024-03-28 KR KR1020240042733A patent/KR102683428B1/ko active IP Right Grant
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| KR102162917B1 (ko) * | 2020-03-04 | 2020-10-07 | (주)바이오코스텍 | 쓴쑥, 범부채, 돌나물, 미역취 및 개다래 복합추출물을 함유하는 화장료 조성물 |
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