KR102605841B1 - 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주 및 이의 용도 - Google Patents
코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주 및 이의 용도 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명의 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주는 아밀라아제 및 프로테아제 효소 분비능이 있고, 아플라톡신을 생성하지 않으며, 이를 이용하여 제조한 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시킬 수 있으므로, 인체에 유용한 기능성 성분과 풍미가 증대된 코지 및 발효식품 제조에 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
Description
본 발명은 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주 및 이의 용도에 관한 것이다.
전통 발효식품은 장류, 김치류, 젓갈류, 주류, 식혜 등 종류가 매우 다양하며, 발효에 사용하는 미생물과 주원료에 따라 각각 독특한 맛과 풍미를 지닌다. 최근, 대표적인 슬로우 푸드로 알려지고 있는 전통 발효식품은 발효 과정을 통한 유해 세균 억제, 유용 미생물로 인한 소화 촉진 뿐만 아니라, 단백질의 흡수율 증가, 심혈관 질환 및 암 치료에도 도움이 된다는 연구가 보고됨에 따라 더욱 각광받고 있다.
국내 전통 발효식품 산업은 2010년 기준으로 약 4조원 규모로, 식품 산업 전체의 4%에 해당하며, 발효식품 산업의 53%를 차지하고 있다. 전통 발효식품 중에서 된장, 간장, 고추장, 청국장 등과 같은 장류 시장은 지속적인 성장을 보이고 있으며 수출액도 매년 증가하고 있다. 그러나, 국내 전통 장류의 생산은 외국에서 개발된 종균을 수입해 이를 개량하여 사용하고 있어, 종균에 대한 의존도가 높다. 또한, 건강기능식품에 대한 소비자의 욕구가 증가함에 따라, 기능성이 강화된 전통 장류 개발을 위한 새로운 균주에 대한 연구가 필요한 실정이다.
한편, 코지(koji)는 쌀, 보리, 콩 등의 곡류를 증자한 후, 아스퍼질러스(Aspergillus) 속 또는 리조푸스(Rhizopus) 속 곰팡이를 접종하고 배양하여 제조한 것으로, 주원료인 곡류의 종류에 따라 쌀 코지, 보리 코지, 콩 코지, 밀 코지 등으로 나눌 수 있으며, 주로, 전통 발효식품 제조를 위한 발효제로 쓰인다. 코지는 전분의 당화 과정을 유도하여 제조한 것으로, 곰팡이 뿐만 아니라 효모를 추가로 첨가하여 알코올 발효까지 유도하여 제조한 누룩과는 차이가 있다.
한편, 한국등록특허 제0850182호에는 '항산화 활성이 우수한 양조용 코지 및 이를 이용한 주류의 제조방법'이 개시되어 있고, 한국등록특허 제0617582호에는 '고농도의 루틴과 쿼세틴 함유 메밀 코지의 제조방법 및 메밀 고추장'이 개시되어 있으나, 본 발명의 '코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주 및 이의 용도'에 대해서는 기재된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 전통 발효식품인 장류로부터 다양한 아스퍼질러스 오리재 균주를 분리하였으며, 상기 분리된 아스퍼질러스 오리재 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 분석한 결과, 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주(기탁번호: KCCM13012P)를 이용하여 제조한 쌀 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 가장 높은 것을 확인하였다. 또한, 본 발명의 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주는 아밀라아제 및 프로테아제 효소 분비능이 있고, 아플라톡신을 생성하지 않는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 코지(koji)의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102021 균주를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 이의 배양액, 상기 배양액의 농축액 또는 그의 건조물을 유효성분으로 포함하는 코지 제조용 스타터(starter) 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 곡류에 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주를 접종하여 배양하는 단계를 포함하는, 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증진된 코지의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증진된 코지를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 코지를 사용하여 제조된 발효식품을 제공한다.
본 발명의 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주는 아밀라아제 및 프로테아제 효소 분비능이 있고, 아플라톡신을 생성하지 않으며, 이를 이용하여 제조한 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시킬 수 있으므로, 인체에 유용한 기능성 성분과 풍미가 증대된 코지 및 발효식품 제조에 유용하게 활용될 수 있을 것이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 코지(koji)의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102021 균주를 제공한다.
본 발명에서는 전통 발효식품인 메주, 된장 및 고추장으로부터 아밀라아제 및 프로테아제 효소 분비능이 있고, 아플라톡신을 생성하지 않으며, 이를 이용하여 제조한 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 다른 균주들에 비해 높은 곰팡이 균주를 최종 선별하여 18S rRNA 유전자의 염기서열(서열번호 1)을 통해 동정한 결과, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 균주임을 확인하였다. 본 발명자는 상기 최종 선별된 균주를 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주로 명명하고, 한국미생물보존센터(KCCM)에 2021년 6월 17일자로 기탁하였다(수탁번호: KCCM13012P).
본 발명의 용어 "혈전 용해"는 혈소판과 세포성분을 둘러싼 섬유소로 구성된 혈액성분의 응집을 용해시키는 것으로, 바람직하게는 피브린(fibrin)의 용해를 말한다.
본 발명의 용어 "항당뇨"는 당뇨병의 예방, 개선 또는 치료 효과를 말하는 것으로, 바람직하게는 알파 글루코시다아제 저해(α-glucosidase inhibitor, AGI) 활성을 말한다.
본 발명은 또한, 상기 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주, 이의 배양액, 상기 배양액의 농축액 또는 그의 건조물을 유효성분으로 포함하는 코지 제조용 스타터(starter) 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 코지 제조용 스타터(starter)란 코지 제조를 위해 코지 제조에 관여하는 미생물을 포함하는 제제 또는 조성물을 의미한다. 코지 제조 시에 첨가함으로써 코지에서 생장할 수 있는 미생물 또는 우점종으로 생장할 수 있는 미생물을 제공하기 위하여 사용된다. 상기 코지 제조용 스타터를 사용하여 코지를 제조하는 경우, 상기 코지 제조용 스타터에 포함된 미생물에 의하여, 코지의 품질을 일정하게 조절하거나, 특정한 목적을 달성할 수 있다. 본 발명에서는 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주 또는 이의 배양액을 스타터 균주로 이용함으로써, 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증가된 코지를 제조할 수 있다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 코지 제조용 스타터 조성물에서, 상기 코지는 쌀 코지, 콩 코지, 현미 코지, 보리 코지 및 밀 코지일 수 있고, 바람직하게는 쌀 코지일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 균주를 배양하는 방법은 당업계에 통상적으로 이용되는 방법에 따라 배양할 수 있으며, 특별한 방법에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 균주를 배양하는 단계에서 얻어지는 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 첨가제로 사용할 경우, 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 그대로 첨가하거나 다른 첨가제를 함께 사용할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 성분의 혼합양은 그의 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명은 또한, 곡류에 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주를 접종하여 배양하는 단계를 포함하는, 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증진된 코지의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에 있어서, 상기 곡류는 쌀, 콩, 현미, 보리 및 밀 중에서 선택된 어느 하나일 수 있고, 바람직하게는 쌀일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에 있어서, 상기 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주는 코지 제조 시 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시킬 수 있고, 아밀라아제 및 프로테아제 효소 분비능이 있고 아플라톡신을 생성하지 않는 특징이 있다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에 있어서, 상기 코지는 곡류를 100~130℃로 증자한 후, 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주를 103~105 CFU/㎖로 접종하고 20~40℃에서 1~8일 동안 배양하는 것일 수 있고, 바람직하게는 곡류를 110℃ 또는 121℃로 증자한 후, 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주를 104 CFU/㎖로 접종하고 30℃에서 2일 또는 7일 동안 배양하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명은 또한, 상기 방법에 의해 제조된 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증진된 코지를 제공한다.
본 발명의 코지에 있어서, 상기 코지는 쌀 코지, 콩 코지, 현미 코지, 보리 코지 및 밀 코지일 수 있고, 바람직하게는 쌀 코지일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명은 또한, 상기 코지를 사용하여 제조된 발효식품을 제공한다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 발효식품에 있어서, 상기 발효식품은 메주, 고추장, 된장 또는 간장일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 이에 한정되는 것은 아니다.
재료 및 방법
1. 아밀라아제(amylase) 활성 측정
균주를 PDB(potato dextrose broth) 배지에서 30℃로 1~3일간 배양한 후, 13,000 rpm으로 10분간 원심분리하였다. 이후, 상등액 50 ㎕를 1.5%(w/v) 수용성 전분(starch)이 포함된 PDA(potato dextrose agar) 배지에 접종하고 30℃에서 24시간 동안 배양한 후, 투명환의 크기를 측정하였다.
2. 프로테아제(protease) 활성 측정
균주를 PDB 배지에서 30℃로 1~3일간 배양한 후, 13,000 rpm으로 10분간 원심분리하였다. 이후, 상등액 50 ㎕를 2%(w/v) 탈지유(skim milk)가 포함된 PDA 배지에 접종하고 30℃에서 24시간 동안 배양하고 루골 용액(Lugol's solution)으로 염색한 후, 투명환의 크기를 측정하였다.
3. 셀룰라아제(cellulase) 활성 측정
균주를 PDB 배지에서 30℃로 1~3일간 배양한 후, 13,000 rpm으로 10분간 원심분리하였다. 이후, 상등액 50 ㎕를 1.5%(w/v) 카복시메틸 셀룰로스(carboxymethyl cellulose)가 포함된 PDA 배지에 접종하고 30℃에서 24시간 동안 배양한 후, 투명환의 크기를 측정하였다.
4. 리파아제(lipase) 활성 측정
균주를 PDB 배지에서 30℃로 1~3일간 배양한 후, 13,000 rpm으로 10분간 원심분리하였다. 이후, 상등액 50 ㎕를 1%(w/v) 트리부티린(tributyrin)이 포함된 PDA 배지에 접종하고 30℃에서 24시간 동안 배양하고 콩고 레드(Congo red) 용액으로 염색하고 1M NaCl 용액으로 탈색한 후, 투명환의 크기를 측정하였다.
5. 아플라톡신(aflatoxin) 함량 측정
'식품의 기준 및 규격'에 따른 아플라톡신 시험법으로 시료에 포함된 총 아플라톡신 함량을 측정하였다. 시료 내 아플라톡신(B1, B2, G1 및 G2)을 메탄올로 추출하고 면역친화성칼럼으로 정제하여 트리플루오로초산으로 유도체화시킨 것을 형광검출기가 부착된 액체 크로마토그래프로 분석하였다. 아플라톡신 혼합표준용액(1, 2, 5, 10, 25 및 50 ng/㎖의 아세토니트릴로)으로 작성한 검량선을 이용하여 각 아플라톡신의 농도를 정량하고 하기식에 대입하여 총 아플라톡신 함량을 계산하였다.
총 아플라톡신의 함량(㎍/㎏)=[아플라톡신 B1의 농도(㎍/㎖)+아플라톡신 B2의 농도(㎍/㎖)+아플라톡신 G1의 농도(㎍/㎖)+아플라톡신 G2의 농도(㎍/㎖)]×시료의 최종부피(㎖)/시료 채취량(g)×시료 희석배수
6. 혈전 용해 활성 측정
인간 피브리노겐(fibrinogen) 60 ㎎을 10 mM 인산 완충액(pH 7.8) 10 ㎖에 첨가하여 용해시키고, 아가로스 200 ㎎을 10 mM 인산 완충액(pH 7.8) 10 ㎖에 첨가하여 용해시켜 준비하였다. 상기 두 개의 용액을 혼합하고 100 units/㎖ 트롬빈(thrombin) 100 ㎕를 첨가하여 0.3% 피브린 플레이트(fibrin plate)를 제조하였다. 상기 피브린 플레이트에 코르크 보러(cork borer)를 이용하여 일정한 간격으로 구멍을 뚫고, 시료 50 ㎕을 넣고 30℃에서 24시간 반응한 후 용해된 환의 면적을 측정하였다. 대조구로는 혈전 용해제 플라스민(plasmin)을 이용하였으며, 하기식에 대입하여 혈전 용해 활성(%)을 계산하였다.
혈전 용해 활성(%)=[(시료에 의한 환의 면적)/(플라스민에 의한 환의 면적)]×100
7. 항당뇨 활성(α-glucosidase inhibition, AGI) 측정
시료 25 ㎕, 0.1 M 인산 완충액(pH 6.8) 50 ㎕ 및 효모 유래 α-글루코시다아제(α-glucosidase) 25 ㎕를 혼합하여 37℃에서 5분간 반응시킨 후, 3 mM pNPG(p-nitrophenol-α-D-glucopyranoside) 50 ㎕를 첨가하고 37℃에서 5분간 반응시켜 흡광도 변화값을 측정하였다. 대조구로는 시료 대신 증류수를 이용하였으며, 하기식에 대입하여 항당뇨 활성(%)을 계산하였다.
항당뇨 활성(%) =[1-(시료의 흡광도 변화값/대조구의 흡광도 변화값)]×100
8. α-아밀라아제(α-amylase) 함량 측정
'식품의 기준 및 규격'에 따른 α-아밀라아제 시험법으로 시료에 포함된 총 α-아밀라아제 함량을 측정하였다. 시험관에 1%(w/v) 가용성 전분 용액 5 ㎖, 맥바인 완충액 13 ㎖, 0.1%(w/v) 염화칼슘 용액 1 ㎖을 넣고 37℃로 가온한 후, 시료 1 ㎖을 넣고 37℃에서 20분간 방치하고 10분간 가열하고 냉각하였다. 이후, 4℃, 10,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 얻은 상층액 0.4 ㎖에 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid) 용액 1.2 ㎖을 첨가하고 100℃에서 5분간 가열한 후, 실온에서 냉각하였다. 포도당 용액을 증류수로 10~1,000 ㎍/㎖로 희석하여 DNS 용액 1.2 ㎖를 가한 후 100℃에서 5분간 가열하여 실온에서 냉각한 것을 파장 540 nm에서 흡광도를 측정하여 작성한 검량선을 이용하여 시료 내 포도당의 양을 정량하고 하기식에 대입하여 α-아밀라아제 함량을 계산하였다. 시료 내 α-아밀라아제 함량은 역가(unit)로 나타냈으며, 1 역가는 1분간 전분으로부터 포도당 1 ㎍을 분해하는데 필요한 α-아밀라아제의 양으로 정의하여 환산하였다.
α-아밀라아제의 함량(unit/g)=[시험용액 중 포도당 양(㎍)×100×50×시료의 희석배수]/20×5
실시예 1. 균주의 분리 및 동정
시중에서 판매되고 있는 전통 장류(메주, 된장, 고추장) 제품 각 10 g을 멸균한 식염수(0.85% NaCl) 90 ㎖에 희석하고 균질화한 후, 저속으로 원심분리하였다. 이후, 상등액을 연속 희석하여 PDA 배지에서 30℃, 5일 동안 배양한 후 얻은 단일 콜로니를 새 PDA 배지에서 30℃, 5일 동안 추가 배양하여 곰팡이 균주 7종을 분리하였다.
상기 분리된 균주를 PDB 배지에서 30℃, 1일 동안 배양한 후, 균체를 수거하고 동결 건조하였다. 건조된 균체에서 DNA를 추출하여, β-tubulin 유전자에 대한 정방향(5'-GGTAACCAAATCGGTGCTGCTTTC-3', Bt2a, 서열번호 2) 및 역방향(5'-ACCCTCAGTGTAGTGACCCTTGGC-3', Bt2b, 서열번호 3) 프라이머, ITS 유전자에 대한 정방향(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3', ITS1, 서열번호 4) 및 역방향(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3', ITS4, 서열번호 5) 프라이머를 사용하여 하기 표 1과 같은 조성 및 조건으로 PCR 분석을 수행하였다. 이후, SolGent Co., Ltd.(Daejeon, Korea)에 의뢰하여 18S rRNA 유전자 염기서열을 분석한 결과, 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae)로 판명되었다.
| 조성 | 조건 | |||
| Taq DNA 중합효소 | 0.3 ㎕ | Pre-Denaturation | 95℃ | 4분 |
| 프라이머(100 pmol) F, R | 0.8 ㎕ | Denaturation | 95℃ | 1분 |
| dNTPs mix(2.5 mM) | 3 ㎕ | Annealing | 60℃(β-tubulin) 또는 54℃(ITS) |
1분 |
| 10x buffer | 5 ㎕ | |||
| 주형 DNA | 1 ㎕ | Extension | 72 ℃ | 1분 |
| DW | 39.9 ㎕ | 35 cycles 반복 | ||
| 총 | 50 ㎕ | Final Extension | 72℃ | 7분 |
실시예 2. 균주의 효소 활성 및 독소 생성 여부 측정
전통 장류에서 분리한 7종의 아스퍼질러스 오리재 균주의 아밀라아제, 프로테아제, 셀룰라아제, 리파아제 활성 및 아플라톡신 생성 여부를 측정한 결과, 모든 균주는 아플라톡신을 생성하지 않았으며, 효소 활성은 각각 다르게 나타나는 것을 확인하였다(표 2).
| 균주 | 아밀라아제 | 프로테아제 | 셀룰라아제 | 리파아제 | 아플라톡신 |
| SRCM102448 | - | - | - | - | N.D |
| SRCM101978 | +++ | ++ | - | + | N.D |
| SRCM101990 | ++ | ++ | - | + | N.D |
| SRCM102021 | ++ | ++ | - | - | N.D |
| SRCM102016 | + | ++ | - | - | N.D |
| SRCM101989 | + | ++ | - | - | N.D |
| SRCM101975 | + | ++ | - | - | N.D |
+: 0.5 cm이하, ++: 0.5~1.5 cm, +++: 1.5 cm 이상, N. D: Not detected
실시예 3. 쌀 코지의 제조
전통 장류에서 분리한 7종의 아스퍼질러스 오리재 균주를 PDA 배지에서 30℃로 5일 동안 각각 배양한 후, 0.05%(v/v) tween 80을 이용하여 104 CFU/㎖ 농도로 준비하여 쌀 코지 제조용 균주로 사용하였다.
3-1. 쌀 코지Ⅰ 제조
백미를 수세하고 2배 이상의 물로 6시간 침지하고 2시간 동안 물기를 제거한 후, 121℃에서 30분 동안 증자하고 실온에서 냉각하였다. 이후, 상기 7종의 균주를 백미 무게의 1%(v/w) 비율로 각각 접종하고, 30℃, 80% 상대습도 조건으로 7일 동안 배양하여 쌀 코지Ⅰ을 제조하였다.
3-2. 쌀 코지Ⅱ 제조
백미를 수세하고 2배 이상의 물로 15시간 침지하고 1시간 동안 물기를 제거한 후, 110℃에서 30분 동안 증자하고 실온에서 냉각하였다. 이후, 상기 7종의 균주를 백미 무게의 1%(v/w) 비율로 각각 접종하고, 30℃, 80% 상대습도 조건으로 2일 동안 배양하여 쌀 코지Ⅱ를 제조하였다.
실시예 4. 쌀 코지의 혈전 용해 활성 분석
전통 장류에서 분리한 7종의 아스퍼질러스 오리재 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지Ⅰ의 혈전 용해 활성을 분석한 결과, SRCM102021 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지Ⅰ의 혈전 용해 활성이 가장 높은 것을 확인하였다(표 3).
| 코지 제조에 사용한 균주 | 혈전 용해 활성(%) |
| SRCM102448 | 17.2 |
| SRCM101978 | - |
| SRCM101990 | 2.2 |
| SRCM102021 | 75.6 |
| SRCM102016 | - |
| SRCM101989 | 50.0 |
| SRCM101975 | 36.5 |
실시예 5. 쌀 코지의 항당뇨 활성 분석
전통 장류에서 분리한 7종의 아스퍼질러스 오리재 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지Ⅰ의 항당뇨 활성을 분석한 결과, SRCM102021 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지Ⅰ의 항당뇨 활성이 가장 높은 것을 확인하였다(표 4).
| 코지 제조에 사용한 균주 | 항당뇨 활성(%) |
| SRCM102448 | - |
| SRCM101978 | 10.2 |
| SRCM101990 | 11.6 |
| SRCM102021 | 90.8 |
| SRCM102016 | 7.2 |
| SRCM101989 | 6.0 |
| SRCM101975 | 5.4 |
실시예 6. 쌀 코지의 α-아밀라아제 함량 분석
전통 장류에서 분리한 7종의 아스퍼질러스 오리재 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지Ⅱ의 α-아밀라아제 함량을 분석한 결과, SRCM102021 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지Ⅱ의 α-아밀라아제 함량이 가장 높은 것을 확인하였다(표 5).
| 코지 제조에 사용한 균주 | α-아밀라아제 함량(unit/g) |
| SRCM102448 | 1540.61 |
| SRCM101978 | 1476.38 |
| SRCM101990 | 1661.95 |
| SRCM102021 | 5123.10 |
| SRCM102016 | 1554.63 |
| SRCM101989 | 1680.16 |
| SRCM101975 | 1659.63 |
상기 결과를 바탕으로, 전통 장류에서 분리한 7종의 아스퍼질러스 오리재 균주 중에서 SRCM102021 균주를 이용하여 제조한 쌀 코지의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 가장 높은 것을 확인하였으므로, SRCM102021 균주를 최종 선별하여, Aspergillus oryzae SRCM102021으로 명명하고, 한국미생물보존센터(KCCM)에 2021년 6월 17일자로 기탁하였다(수탁번호: KCCM13012P).
<110> Microbial Institute for Fermentation Industry
<120> Aspergillus oryzae SRCM102021 strain for increasing fibrinolytic
activity, antidiabetic activity and a-amylase content of koji and
uses thereof
<130> PN21190
<160> 5
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 612
<212> DNA
<213> Aspergillus oryzae
<400> 1
tgaaaaaaaa aaaaagtgta acaaggtttc cgtaggtgaa cctgcggaag gatcattacc 60
gagtgtaggg ttcctagcga gcccaacctc cccacccgtg tttactgtac cttagttgct 120
tcggcgggcc cgccattcat ggccgccggg ggctctcagc cccgggcccg cgcccgccgg 180
agacaccacg aactctgtct gatctagtga agtctgagtt gattgtatcg caatcagtta 240
aaactttcaa caatggatct cttggttccg gcatcgatga agaacgcagc gaaatgcgat 300
aactagtgtg aattgcagaa ttccgtgaat catcgagtct ttgaacgcac attgcgcccc 360
ctggtattcc ggggggcatg cctgtccgag cgtcattgct gcccatcaag cacggcttgt 420
gtgttgggtc gtcgtcccct ctccgggggg gacgggcccc aaaggcagcg gcggcaccgc 480
gtccgatcct cgagcgtatg gggctttgtc acccgctctg taggcccggc cggcgcttgc 540
cgaacgcaaa tcaatctttt tccaggttga cctcggatca ggtagggata cccgctgaac 600
ttaagcatat ct 612
<210> 2
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> primer
<400> 2
ggtaaccaaa tcggtgctgc tttc 24
<210> 3
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> primer
<400> 3
accctcagtg tagtgaccct tggc 24
<210> 4
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> primer
<400> 4
tccgtaggtg aacctgcgg 19
<210> 5
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> primer
<400> 5
ggtaaccaaa tcggtgctgc tttc 24
Claims (9)
- 코지(koji)의 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) SRCM102021 균주.
- 제1항에 있어서, 상기 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주는 아밀라아제 및 프로테아제 효소 분비능이 있고, 아플라톡신을 생성하지 않는 것을 특징으로 하는 균주.
- 제1항 또는 제2항의 균주, 이의 배양액, 상기 배양액의 농축액 또는 그의 건조물을 유효성분으로 포함하는 코지 제조용 스타터(starter) 조성물.
- 곡류에 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주를 접종하여 배양하는 단계를 포함하는, 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증진된 코지의 제조방법.
- 제4항에 있어서, 상기 코지는 곡류를 증자한 후, 기탁번호가 KCCM13012P인 아스퍼질러스 오리재 SRCM102021 균주를 103~105 CFU/㎖로 접종하고 20~40℃에서 1~8일 동안 배양하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제5항에 있어서, 상기 곡류는 쌀, 콩, 현미, 보리 및 밀 중에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제4항 내지 제6항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 혈전 용해 활성, 항당뇨 활성 및 α-아밀라아제 함량이 증진된 코지.
- 제7항의 코지를 사용하여 제조된 발효식품.
- 제8항에 있어서, 상기 발효식품은 메주, 고추장, 된장 또는 간장인 것을 특징으로 하는 발효식품.
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| KR101416220B1 (ko) * | 2012-10-31 | 2014-07-08 | 계명대학교 산학협력단 | 비지 코지를 이용한 간장 및 된장 제조방법 |
-
2021
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Non-Patent Citations (2)
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|---|
| 새만금일보, 발효메카 순창 제1호 황국곰팡이…(2020.10.8.) 1부.* |
| 여성종합뉴스 신문기사 2021년05월14일, HTTPS://WOMANNEWS.NET/DETAIL.PHP?NUMBER=264527] |
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